J Neurochem. 2014 yanvar; 128 (1): 173-85. doi: 10.1111 / jnc.12381. Epub 2013 avgust 21.
Liu QR1, Rubio FJ, Bossert JM, Martant NJ, Fanous S, Hou X, Shaham Y, Hope BT.
mavhum
Metamfetamin va boshqa preparatlar miyada barcha neyronlarning kichik bir qismini faollashtiradi. Biz ilgari neytral faollik belgilari Fos ni ifodalovchi faollashtirilgan neyronlarda selektiv ravishda molekulyar o'zgarishlarni xarakterlash uchun bir flüoresans bilan faollashtirilgan hujayra ajratishni (FACS) ga asoslangan usulni ishlab chiqdik. Biroq, bu usul ko'plab kalamushlardan namunalarni to'plashni talab qiladi. Biz multipleksli oldingi-kuchaytirish strategiyasidan foydalangan holda, bitta ratdan olingan dorsal striatal neyronlarni Fos-ekspressingda molekulyar o'zgarishlarni tavsiflash uchun o'zgartirilgan FACS-ga asoslangan usulni ta'riflaymiz.
Fos va NeuN (neyronal marker) immunohistokimyosi 5-6% dorsal striatum neyronlarning 90 minut faol metamfetamin inyeksionlaridan (5 mg / kg, ip) faollashtirilganligini ko'rsatadi, shunda NNXX% neyronlarning sho'rlanish inyeksiyalari faollashadi.
Biz FACSni NeoN-etiketli neyronlarni Fos-musbat va Fos-salbiy neyronlarga ajratish uchun ishlatganmiz va RT-qPCR yordamida 5 meshchoq mozaikasining kamida besh Fos-pozitron neyronidan baholandi. Xet-3, c-fos, fosB va uning izoformlari (xromosomalari)DfosB va yangi isoform DfosB-2) Fos-pozitiv, ammo Fos-salbiy neyronlar emas. Erta boshlangan gen mRNA induksiyasi bitta dorsal striatum homogenatsasidan ajratib olinmagan namunalarda baholanishda kamida 10-marta past yoki yo'qolgan. Bizning o'zgartirilgan usuli murakkab giyohvandlik modellarida giyohvand moddalar yoki giyohvand moddalar bilan bog'langan neyronlarning noyob molekulyar o'zgarishlarini o'rganishga imkon beradi.
Metamfetamin va boshqa preparatlar miyada barcha neyronlarning kichik bir qismini faollashtiradi. Biz bu erda neytral faollik belgilari Fosni ifodalovchi faollashtirilgan neyronlarda selektiv ravishda molekulyar o'zgarishlarni xarakterlash uchun ishlab chiqilgan uskuna haqida xabar beradi. O'tkir metamfetamin bilan yaratilgan gen ekspressionini yagona rat dorsal striatumdan 5 Fos-expressing neyronlari sifatida baholash uchun maqsadli PCR pre-amplifikatsiya bilan birga FACSdan foydalanganmiz. Methamphetamin Fos-musbat, ammo Fos-salbiy neyronlarda tezkor erta genlarni (IEGs) 3-20-marta ko'paytirdi. Nishonlangan PCR pre-amplifikatsiyasi murakkab giyohvandlik modellarida giyohvand moddalar yoki giyohvand moddalar bilan bog'langan neyronlarda noyob molekulyar o'zgarishlar o'rganishga imkon beradi.
2013 nashr. Ushbu maqola AQSh Hukumati ishi va AQShda jamoatchilikka taalluqlidir.
;