Izohlar: Delta FosB - bu giyohvandlikning asosiy molekulalaridan biri. U giyohvandlik jarayonida ko'tariladi yoki to'planib, o'ziga qaramlik xatti-harakatlarini kuchaytiradi va miyani qayta tiklaydi. Giyohvandlik kimyoviy yoki xatti-harakatga bog'liq bo'ladimi, ko'tariladi. Ushbu tadqiqot shuni ko'rsatadiki, u jinsiy faoliyat va shakarni iste'mol qilish paytida to'planadi. Tadqiqotchilar, shuningdek, jinsiy faollik shakar iste'molini ko'paytirganligini aniqladilar. Delta FosB boshqa giyohvandlikni kuchaytiradigan bitta giyohvandlikka aloqador bo'lishi mumkin. Savol tug'iladi - pornografiyani "ortiqcha iste'mol qilish" Delta FosB-ga qanday ta'sir qiladi? DeltaFosB-da ishlaydigan dofamin bo'lgani uchun hammasi sizning miyangizga bog'liq.
To'liq o'rganish: NFS ning tabiiy foyda bilan bog'liq xatti-harakatlarida DFF ning ta'siri
J Neurosci. 2008 oktyabr 8; 28 (41): 10272-10277.
doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1531-08.2008.
Deanna L Wallace1,2, Vincent Vialou1,2, Loretta Rios1,2, Tiffany L. Karle-Florence1,2, Sumana Chakravarty1,2, Arvind Kumar1,2, Danielle L. Graham1,2, Tomas A. Green1,2, Anne Kirk1,2, Serxio D. Iñiguez3, Linda I. Perrotti1,2,4, Mishel Barrot1,2,5, Ralph J. DiLeone1,2,6, Erik J. Nestler1,2 va Karlos A. Bolaños-Guzmán1,2,3 +
Muallif yozuvlari
DL Wallace-ning hozirgi manzili: Helen Willis Neuroscience Institute, California University, California, Berkeley, Berkeley, CA 94720.
TL Carle-Florence ning hozirgi manzili: Mary Kay Research Laboratories, Dallas, TX 75379.
DL Gremning hozirgi manzili: Merck Laboratories, Boston, MA 02115.
TA Grinning hozirgi manzili: Virjiniya Hamdo'stlik universiteti, Richmond, VA 23284.
EJ Nestlerning hozirgi manzili: Nyu-York, Nyu-York, Nyu-York, tog'-Sinay tibbiyot maktabi nevrologiya bo'limi.
mavhum
Dori-darmonlar tarqalishining surunkali ta'siriga duchor bo'lgan yadroli akumbenslarda (NAc) hosil bo'lgan transkriptsion faktor deltaFosB (DFosB) bu dori-darmonlarga sezgirlangan javoblarni keltirib chiqaradi. Biroq, tabiiy foyda olishga javob berishni tartibga solishda DFBning rolini bilish ancha kam. Bu erda biz ikkita kuchli tabiiy mukofot tavsifini, sukrozni ichish va jinsiy xulq-atvorda NAcdagi DFB darajasini oshiramiz. Keyinchalik, bu kabi DFOSB indüksiyonu, bu tabiiy kazanımlara qiziqishlariga javob berishni qanday ta'sir qilishini o'rganish uchun virus orqali vositachilik qilgan gen uzatilishini foydalanamiz. NAFdagi DFBning ortiqcha tushuntirish sakkroz qabul qilinishini oshiradi va jinsiy xulq-atvorni rivojlantirishga yordam beradi. Bundan tashqari, biz oldingi jinsiy tajribaga ega bo'lgan hayvonlarning DFB darajasini oshirganligini ko'rsatamiz, shuningdek sukroz iste'moli o'sishini ko'rsatadi. Ushbu ishda DFOSB nafaqat giyohvand moddalarni iste'mol qilish vositasida NAcda emas, balki tabiiy nafas olish stimuli ham keltirib chiqaradi. Bundan tashqari, bizning topilmalarimiz shuni ko'rsatadiki, NAcdagi DFSB ni stimulyatsiya qiluvchi surunkali ta'sirlar boshqa tabiiy iste'mollarni iste'mol qilish darajasini oshirishi mumkin.
Kirish
Fosb, Fos oilasining transkriptsiya faktoridir, fosb genining keskin hosil bo'lishi (Nakabeppu va Nathans, 1991). O'tkir ogohlantirishlarga javoban Fosning boshqa oqsillari bilan taqqoslaganda nisbatan past darajada namoyon bo'ladi, ammo uning noyob barqarorligi (Nestler, 2008) tufayli surunkali stimuldan keyin miyaga yuqori miqdorda to'planadi. Ushbu to'planish ko'plab surunkali stimullarga, shu jumladan, giyohvand moddalarni suiiste'mol qilish, zo'rlash, antidepressant dori-darmonlar, antipsikotiklar, neyronal lezyonlar va stressning bir nechta turlari kabi surunkali dori-darmonlarni davolash uchun mintaqada o'ziga xos tarzda yuzaga keladi [qarang: Cenci (2002 ) va Nestler (2008)].
DFOSB induksiyasining funktsional oqibatlari suiiste'mol qilingan dorilar uchun eng yaxshi tushuniladi, bu proteinni yadro akumbensida (NAc) eng ko'p namoyon qiladi, bu deyarli barcha turdagi giyohvand moddalar uchun javob (Muller va Unterwald, 2005; McDaid va boshq. , 2006; Nestler, 2008; Perrotti va boshq., 2008). NAc ventral striatumning bir qismidir va suiiste'mol qilingan giyohvand moddalarning foydali harakatlari uchun muhim asab substratidir. Shunga ko'ra, tobora ko'payib borayotgan dalillar shuni ko'rsatadiki, ushbu mintaqada DFB induksiyasi hayvonning giyohvand moddalarni iste'mol qilishning foydali ta'siriga sezgirligini oshiradi va ularni olish motivatsiyasini oshirishi mumkin. Shunday qilib, DFOSB ning NAcdagi haddan tashqari ekspressioni hayvonlarga kokain yoki morfinga nisbatan afzalliklarni ishlab chiqarishga yoki giyohni o'z-o'zini boshqarish uchun preparatning past dozalarida rivojlanishiga olib keladi va kokain uchun bosimni kuchaytiruvchi nisbati paradigmasida kuchaytiradi (Kelz va boshq., 1999) ; Kolbi va boshq., 2003; Zachariou va boshq., 2006).
Dori-darmon vositalarini mukofotlashda uning rolidan tashqari, NAc tabiiy foyda keltiradigan javoblarni tartibga solish bilan shug'ullanadi va so'nggi ish tabiiy foyda va DFB bilan ham bog'liqlikni taklif qiladi. Ko'ngilli g'ildirak harakatining NAcdagi DFB darajasini oshirishi ko'rsatildi va bu miya hududida DFBning ortiqcha namoyishi 2 haftasi mobaynida ishlaydigan plastinalar bilan taqqoslangan nazorat hayvonlari bilan solishtirganda, bir necha hafta davom etadigan mash'um o'sishni keltirib chiqardi (Werme va boshq. , 2002). Xuddi shunday, yuqori yog'li xun NAc (Teegarden va Bale, 2007) da DFosB ni keltirib chiqaradi, bu erda esa DFBning ortiqcha ekspressioni oziq-ovqat mukofotini olish uchun instrumental javobni oshiradi (Olausson va boshq., 2006). Bundan tashqari, fosb geni maternal xatti-harakatlariga bog'liq (Brown va boshq., 1996). Shu bilan birga, DFOS va jinsiy xatti-harakatlarning eng kuchli tabiiy mukofotidan kam ma'lumot mavjud. Bundan tashqari, kamroq aniq DFFning mavjudligi, tabiiy ravishda mukofotlashning yanada samarali, hatto "o'ziga qaram qiladigan" modellari bilan ham bog'liqdir. Misol uchun, bir necha ma'ruza sukroz qabul qilish paradigmalarida (Avena va boshq., 2008) o'ziga xoslikning o'xshash tomonlarini ko'rsatdi.
Tabiiy mukofot xulq-atvoridagi DFB ta'siridan bilimimizni kengaytirish uchun biz sukroz ichish va jinsiy xulq-modellardagi NAF ning DFOSB indüksiyasini tekshirdik. Shuningdek, NAFdagi DFSB ning ortiqcha tushuntirishlari ushbu tabiiy natijalarga nisbatan qiziqish bilan bog'liq javoblarni qanday o'zgartirganligi va undan oldin tabiiy mukofotga ta'sir qilish boshqa tabiatni qutqaradigan xatti-harakatlarni kuchaytirishi mumkinmi yoki yo'qligini aniqladik.
Materiallar va usullari
Barcha chorvachilik usullari Texas Janubi-G'arbiy Tibbiyot Markazining Institutsional Hayvon Qo'llash va Foydalanish Qo'mitasi tomonidan tasdiqlangan.
Jinsiy xatti.
Jinsiy hayotdagi tajribali erkak Sprague Dawley kalamushlari (Charlz daryosi) 1-2 haftalari uchun haftada ~ 8-10 haftada xajmlashgungacha xushbo'y ayol bilan turmush qurishga imkon berish orqali yaratildi. Jinsiy xatti-harakatlar ilgari ta'riflanganidek baholandi (Barrot va boshq., 14). Erkaklarni nazorat qilish tajribali erkaklar kabi bir xil vaqt davomida bir xil maydon va to'shakka ta'sir qilish natijasida hosil bo'lgan. Ayollarga bu nazorat erkaklar bilan hech qachon maydonga tushmagan. Alohida eksperimentda qo'shimcha eksperimental guruh ishlab chiqarildi: erkaklar gormon bilan davolash qilingan ayolga estrusni kiritmagan. Bu erkaklar ulovlar va intruziyalarga urinishdi; Biroq, ayollar urush qilmasliklari sababli, ushbu guruhda jinsiy xatti-harakatga erishilmadi. So'nggi sessiyadan sakkiz soat o'tgach, hayvonlar perfüze yoki dekapitasyona uchradi va miyalarni to'qimalarni qayta ishlash uchun qabul qilindi. 2005-sessiyadan so'ng boshqa hayvon guruhlari uchun 5 d, sukrozning afzalligi quyida aytib o'tilganidek, sinovdan o'tkazildi. Qo'shimcha ma'lumot uchun Qo'shimcha uslublar (www.jneurosci.org saytida qo'shimcha material sifatida mavjud) bo'limiga qarang.
Sukroz iste'moli.
Birinchi tajribada (1a) ratga suyuqlik konsentratsiyasini oshirishda (2-2%) 0.125 d uchun ikki dona shisha suvga cheksiz kirish va undan keyin har birida suv va sukrozning har birida 50 d uchun cheksiz ruxsat berilgan. Ikki shisha suvdan iborat bo'lgan 6 d davrida faqat bitta shisha suvdan 2 d va bir shisha 0.125% sukroz kuzatildi. Ikkinchi tajribada (1b, c, 2) so'rg'ichlarga bir shisha suv va 10 d uchun 10% sukroz uchun cheksiz ruxsat berilgan. Tekshirish hayvonlari faqat ikki shisha suvdan olindi. Hayvonlar perfüze qilindi yoki tezda dekapitasyona uchradi va to'qimalarni qayta ishlash uchun miya yig'ildi.
Ikki shisha tanlovi testi.
Yuqorida aytib o'tilganidek, ikkita shishani tanlab olish paradigmasi (Barrot va boshq., 2002) o'tkazildi. Jarrohlikdan oldin, mumkin bo'lgan individual farqlarni nazorat qilish uchun, hayvonlar suv va 30% sukroz o'rtasida ikki shisha tanlovi uchun qorong'u bosqichning birinchi 1 min davomida pretest qilingan. Virus orqali yuborilgan genotransferatsiyadan uch hafta o'tgach va boshqa har qanday xatti-harakatlarni boshlashdan oldin, faqat suv berilgan hayvonlarga suv va 30% sukroz eritmasi o'rtasida 1 minli ikkita shishani tanlash jarayoni sinov qilindi.
Jinsiy tajribali va nazorat ostida bo'lgan hayvonlar jinsiy xatti-harakatdan oldin pretest amaliyotiga ega emas edi. 14 seksual (yoki nazorat qilish) xatti-harakatlaridan besh kun o'tgach, hayvonlarga suv va 1% sukroz eritmasi o'rtasida qorong'u-yengil siklining birinchi 30 min davomida ikki shisha tanlovi testi berildi. Jinsiy xatti-harakatlardan keyin jinsiy va tajribali hayvonlarning alohida guruhlari DFF darajasini o'lchash va jinsiy xatti-harakatlarning sukroz holatiga ta'sirini o'rganish uchun ishlatilgan.
Western blotting.
Zig'irni ajratib olish yo'li bilan olingan NAc dissektsiyalari ilgari ta'rif etilganidek (Perrotti va boshqalar, 2004) quyon poliklonal anti-FosB antikoridan foydalanib, Western blotting tomonidan tahlil qilingan [antitelani aniqlash uchun, Perrotti va boshq. (2004)] va glyceraldehyde-3-fosfat dehidrogenaza (GAPDH) ga monoklonal antikor (RDI-TRK5G4-6C5; DFSB protein darajalari GAPDH uchun normallashtirildi va eksperimental va nazorat namunalari solishtirildi. Qo'shimcha ma'lumot uchun Qo'shimcha uslublar (www.jneurosci.org saytida qo'shimcha material sifatida mavjud) bo'limiga qarang.
Immunohistokimyo.
Hayvonlar perfüze qilindi va miya to'qimalari e'lon qilingan immünohistokimyasal usullar yordamida davolash qilindi (Perrotti va boshqalar, 2005). 18-24 soatdan oldin tahlil qilish uchun stimulyatorlarning so'nggi ta'sir qilishlari yuzaga kelgani sababli, biz FF (FOTB) ni aks ettirish uchun Pan-FosB antikor (SC-48; Santa Cruz Biotexnology) bilan aniqlangan barcha Fosb-o'xshash immunoreaktivlikni ko'rib chiqdik (Perrotti va boshqalar, 2004 , 2005). Qo'shimcha ma'lumot uchun Qo'shimcha uslublar (www.jneurosci.org saytida qo'shimcha material sifatida mavjud) bo'limiga qarang.
Virus orqali yuboriladigan genlar.
Jarrohlik erkak Sprague Dawley sichqonchasida bajarilgan. Adeno bilan assotsiatsiyalangan virus (AAV) vektorlari ikki tomonlama ravishda, bir tomondan 1.5 mk NAc ga oldin kiritildi (Barrot va boshq., 2005). To'g'ri joylashtirish 40 mm kresil-binafsha rangli bo'laklarda tajribalar natijasida tekshirildi. Vektorlar faqat yashil lyuminestsent protein (GFP) (AAV-GFP) yoki yovvoyi turi DFosB va GFP (AAV-AFosB) (Zachariou va boshq., 2006) ifodalaydigan AAVni ifodalovchi nazoratni o'z ichiga olgan. NAc ichidagi transgensiya ifodasi vaqtiga asoslanib, hayvonlarning transgen ekspresyoni maksimal bo'lganida (Zachariou va boshq., 3) AAV vektorlarini yuborishdan keyin 4-2006 haftada xulq-atvor sinovlari o'tkazildi. Qo'shimcha ma'lumot uchun Qo'shimcha uslublar (www.jneurosci.org saytida qo'shimcha material sifatida mavjud) bo'limiga qarang.
Statistik tahlil.
Ikki faktorli takroriy o'lchovli ANOVA va talabalar t testlari yordamida ahamiyat o'lchandi, ular bir nechta taqqoslash uchun qayd etilgan joylarda tuzatildi. Ma'lumotlar ± SEM degan ma'noni anglatadi. Statistik ahamiyat p <0.05 sifatida aniqlandi.
natijalar
Sukrozga surunkali ta'sir qilish sukrozni qabul qilish va sezuvchanlikka o'xshash xatti-harakatlarni oshiradi
Ikkita shishani tanlagan paradigma qo'llanildi, unda sukroz konsentratsiyasi 2 d dan ikki dona shisha suvdan keyin taxminan ikki barobar ko'paydi. Sukrozning kontsentratsiyasi 2% da boshlanib, 0.125% ga ko'tarildi. Hayvonlar 50% sukrozgacha sukrozni afzal ko'rmaydilar va undan yuqori konsentratsiyalarda suvdan ko'ra sukrozni ichdilar. 0.25% konsentratsiyasidan boshlab, hayvonlar 0.25 va 5% darajasida maksimal sukroz miqdori erishilgunga qadar sakkaroz miqdorini ko'paytirdilar. 10% va undan yuqori bo'lganida, ular sukroz iste'molining barqaror darajasini saqlab qolish uchun sukroz miqdorini kamaytirishga kirishdilar (Ho'roz 20a, inet). Ushbu paradigmadan so'ng hayvonlarni faqat ikki shisha suv bilan 1 d o'tkazdi va undan keyin 6 d uchun 0.125% sukroz shisha yoki suv tanlovi taqdim etildi. Hayvonlar ushbu konsentratsiyada suvdan ko'ra sukrozni ko'proq ichdilar va 2 kunida ushbu sukroz konsentrasiyasiga dastlabki ta'sir qilishdan keyin kuzatilgan holatning etishmasligi bilan solishtirganda sezilarli sukrozni afzal ko'rdilar.
Shakl 1.
Ikki butilka saxaroza tanlovi paradigmalari saxaroza iste'molining tobora ortib borayotganligini ko'rsatadi. a, Saxaroza kontsentratsiyasining ortishi "teskari U shaklidagi" qabul qilish xatti-harakatiga olib keladi, shuningdek, chekinish davridan keyin relapsga o'xshash va sensitizatsiyaga o'xshash xatti-harakatlar [2% har bir konsentratsiyasida 0.25 d ga suv va sukrozni iste'mol qilish o'rtasidagi sezilarli farq keyingi saxaroza ta'sir qilish (t (30) = 4.81; p <0.001; n = 8, ko'p taqqoslash uchun tuzatilgan)]. Qabul qilish miqdori 2 d dan yuqori bo'lgan har bir kontsentratsiyada yutilgan saxarozaning umumiy grammlari sifatida ifodalanadi, bu esa yuqori konsentratsiyalarda stabillashgan iste'molni ko'rsatadi. b, Ikki shishani tanlash paradigmasining 10 d-dagi hayvonlari 1-kun davomida saxaroza iste'mol qilish miqdori ortib borayotganligini ko'rsatadi (qabul qilish faqat bir kun uchun ko'rsatilgan). Ikki faktorli takroriy choralar ANOVA kunning asosiy ta'sirini aniqladi (F (3,27) = 42.3; p <0.001), saxaroza (F (1,9) = 927.2; p <0.001) va saxaroza × kun (F (3,27) = 44.8; p <0.001; n = 10 / guruh). c, Saxaroza ta'sirida bo'lgan hayvonlar nazorati bilan solishtirganda (faqat suvda) vaznning ko'payishi. Ikki faktorli takroriy o'lchov ANOVA kunning muhim ta'sirini ko'rsatadi (F (5,70) = 600; p <0.001), bu bilan har ikkala guruh vaqt o'tishi bilan og'irlik oladi va saxaroza va kunning o'zaro ta'siri (F (5,70) ) = 17.1; p <0.001; n = 10 / guruh), bu sukroz guruhi vaqt o'tishi bilan ko'proq vaznga ega bo'lishini anglatadi.
10% kontsentratsiyasida maksimal miqdordagi suyuqlikka erishilganligi sababli naif hayvonlarga bir shisha suv va 10 d uchun bitta shisha 10% sukroz tanlovi berildi va faqat ikkita shisha suv berilgan nazorat guruhi bilan taqqoslandi. Sakroz hayvonlari 10 (S-1b) kuniga nisbatan yuqori darajadagi sukrozni qabul qilish uchun qurilgan. Ular, shuningdek, nazorat hayvonlariga nisbatan sukroz ta'sirini davom ettirishdan keyin sezilarli darajada ko'proq og'irliklarga erishdi, vaqt o'tishi bilan vaznning o'zgarishi farq qilar edi (rasm 1c).
Sucrose ichish NAc ichida DFSB darajasini oshiradi
Biz ushbu hayvonlarni Western blotting (Fig. 10a) va immunohistokimyodan foydalanib, NAc ichida DFOSB darajalari uchun 2% sukroz paradigmasiga tahlil qildik (shakl 2b). Har ikkala usul ham bu hayvon mintaqasida DFOSB proteininin nazorat hayvonlari bilan solishtirganda sukrozda paydo bo'lishini aniqladi. Barcha DFOSB protein sekanslari to'liq uzunlikda FosB ichida joylashganligi uchun FosB shunga o'xshash immunoreaktivlikni aniqlash uchun ishlatiladigan antikorlar ham oqsillarni (Perrotti va boshqalar, 2004, 2005) taniydi. Biroq, Western blotting faqat sukroz ichish orqali DFB ning sezilarli darajada indüklendiğini ko'rsatdi. Bu immunohistokimyo tomonidan kuzatilgan uzatish farqining DFB ni bildiradi. Shakl 2bda kuzatilgan o'sish NAc yadrosida va qobig'ida topilgan, ammo dorsal striatum (ma'lumotlar ko'rsatilmagan).
Shakl 2.
Saxaroza iste'moli va jinsiy xatti-harakatlar NAc da DFOSB ekspressionini oshiradi. a, Ikki shishani tanlash paradigmasida surunkali 10% sukrozni iste'mol qilish, shuningdek jinsiy xatti-harakatlar, G'arbiy blot (saxaroza, t (11) = 2.685; * p = 0.021; n = 5– 8; jinsiy xatti-harakatlar, t (12) = 2.351; * p = 0.037; n = 6-8). Olfaktsiyani boshqaruvchi erkaklar jinsiy aloqada bo'lgan erkaklardan sezilarli darajada farq qilmaydi (t (10) = 0.69; p> 0.50; n = 4-8). NS, ahamiyatsiz. b, saxaroza bilan tajribali hayvonlardan olingan miya bo'limlari immunohistokimyo bo'yicha NAc tarkibidagi hayvonlar bilan taqqoslaganda DFosB immunoreaktivligini oshiradi. Rasmlar (10 ×) har bir davolash guruhidagi oltita kalamushdan ko'plab miya qismlarining vakili. AC, oldingi komissura. c, Jinsiy aloqada bo'lgan hayvonlardan olingan miya bo'limlari immunohistokimyo bo'yicha NAcdagi nazorat o'xshashlariga nisbatan DFosB immunoreaktivligini oshirganligini ko'rsatadi. Suratlar (10 ×) har bir davolash guruhidagi oltidan sakkizta kalamushga qadar bo'lgan bir nechta miya bo'limlarining vakili.
Jinsiy xatti-harakati NAcdagi DFB darajasini oshiradi
Keyinchalik surunkali jinsiy xulq-atvorda NAFda DFBning indüksiyasiga ta'sirini tekshirdik. 14-8 haftalik davrida 10 seanslari uchun zajigalab bo'lmaguncha, jinsiy tajribali erkak sichqonlarga retseptiv ayol bilan cheksiz kirishga ruxsat berildi. Muhimi, nazorat hayvonlari uy-kafes tekshiruvi emas edi, lekin buning o'rniga sinov kunlari va ochiq maydonlar maydoniga ta'sir qilish va shu vaqt davomida bir xil miqdordagi koplamaning sodir bo'lganligi, ammo qabul qiluvchi ayolga ta'sir qilmaslik mo'rtlik va ishlov berish ta'siri. Western blotting-dan foydalanib, jinsiy tajriba FF ning balandligi FosB darajasini sezilarli darajada oshirganini aniqladik. Ushbu ma'lumotlarga muvofiq immunohistokimyoda NAc ning ikkala yadrosi va qobig'ida DFOB lektsiyalarining oshishi aniqlandi (shakl 2c), ammo dorsal striatum (ma'lumotlar ko'rsatilmaydi).
Jinsiy hayotga jalb qilingan hayvonlarda kuzatilgan DFBning o'sishini ijtimoiy o'zaro ta'sirga yoki boshqa juftlik bilan bog'liq bo'lmagan ogohlantirishlarga aloqador emasligi uchun, biz gormon bilan davolash qilingan ayollarga ta'sir qiladigan, ammo emlanmaslik uchun ruxsat etilmagan erkaklar hosil qildik. Ushbu erkaklar DFOSB darajasida farqli o'laroq arenani nazorat qiluvchi hayvonlarning to'plamiga nisbatan (2a shakl) nisbatan farq qilmadi, bu DFOSB indüksiyoni ijtimoiy va noimyoviy noaniqliklarga emas, balki jinsiy xatti-harakatlarga javoban sodir bo'lishini ko'rsatmoqda.
NAc'dagi DFF ning yuqori darajada ifodalanganligi sükroz qabul qilinishini oshiradi
DFOSB ni bir necha hafta davomida barqaror ifodalashga imkon beradigan virusli vositachilik bilan haddan tashqari ekspression tizimidan foydalangan holda (Zachariou va boshq., 2006) (3-rasm), biz yuqori darajadagi DFOSB ning, xususan NAc ni maqsad qilib, sukroz ichishga ta'sirini tekshirdik. xulq-atvor (3b-rasm). Avvaliga sukrozni iste'mol qilishning dastlabki sinovi (AAV-GFP, 6.49 ± 0.879 ml; AAV-DFosB, 6.22 ± 0.621 ml; n = 15 / guruh; p> 0.80) bilan operatsiyadan oldin sukrozning xatti-harakatlarida farqlar yo'qligini sug'urta qildik. Operatsiyadan uch hafta o'tgach, ΔFosB ekspression -10 d davomida barqaror bo'lganida, hayvonlarga operatsiyadan keyingi saxaroza testi berildi. AAV-DFosB guruhi AAV-GFP nazorat guruhiga qaraganda ancha ko'proq sukroz ichdi (3b-rasm). Ikkala guruh (AAV-GFP, 0.92 ± 0.019 ml; AAV-DFosB, 0.95 ± 0.007 ml; n = 15 / guruh; p> 0.15) o'rtasida suv olish miqdori bo'yicha farq yo'q edi, bu esa DFosB ning ta'sirini anglatadi. saxaroza uchun xosdir.
Shakl 3.
NAc'dagi DFF ning ortiqcha namoyishi tabiiy mukofot ishlarini boshqaradi. a, NAV maqsadli saytni ikki tomonlama virusga asoslangan genetik uzatish yo'li bilan tasvirlash va immunohistokimyo tomonidan aniqlangan DFOSB ifodasi misolida, AAV-DFSB in'ektsiyasidan keyin. NA, NAA'da AAV-FFS ning infektsiyasi AARG-GFP-AOK qilingan nazorat guruhlari bilan taqqoslaganda (t (28) = 2.208; * p = 0.036; n = 15 / guruhga nisbatan) sukroz miqdorini oshirishga olib keladi. Shunga o'xshab, 10 hafta jinsiy axloqsizlik bilan jinsiy aloqa bilan solishtirganda, sukrozni qabul qilishni oshiradi (T (14) = 2.240; * p = 0.042; n = 7-9). c, FFB ortiqcha ekspressioni GFP nazorati bilan taqqoslaganda (T (30) = 2.145; * p = 0.04; n = 15-17) jinsiy o'spirin hayvonlarda zaryadga erishish uchun zarur bo'lgan introtsedriyalar sonini kamaytiradi va postejakulatsiyani kamaytirish tendentsiyasiga olib keladi ( t (30) = 1.916; # p = 0.065; n = 15-17).
NAcdagi DFBning yuqori darajada namoyon bo'lishi jinsiy munosabatga ta'sir qiladi
Keyinchalik, NAFdagi DFB eksperksizligi naif va tajribali hayvonlarning jinsiy xatti-harakatini tartibga soladi. AAV-AF-FF va GFP bilan tajribali hayvonlar orasida jinsiy xatti-harakatlarda har qanday farqni topa olmasak-da (qo'shimcha ma'lumot sifatida www.jneurosci.org saytida mavjud bo'lgan qo'shimcha jadval S1-ga qarang) jonivor hayvonlarda DFBning haddan tashqari ekspressioni birinchi jinsiy xatti-harakat uchun zaryadga erishish uchun zarur bo'lgan introtsedriyalar sonini sezilarli darajada kamaytirdi (Shakl 3c). Dastlabki jinsiy tajribadan so'ng, DFOSB guruhining postejacorativ oralig'ida pasayish tendentsiyasi kuzatildi (rasm 3c). Aksincha, naif yoki tajribali hayvonlarda naushniklar, intromitsiyalar yoki bo'shliqlar uchun latentlarda hech qanday farq yo'q edi (qo'shimcha ma'lumot sifatida www.jneurosci.org saytida mavjud bo'lgan qo'shimcha jadvalning S1-ga qarang). Xuddi shunday, intromission nisbati [intromissions / (intermisyon soni + ulash soni)] uchun har qanday farq gözlenmemiştir, lekin bu har bir guruhda ulangan soni yuqori değişkenlik tufayli bo'lishi mumkin.
Jinsiy tajriba sukrozni ko'paytiradi
Ikkala sukrozni ichish va jinsiy tajribadan keyin NAFda DFOSB darajasida DFF darajasini oshirganimiz sababli va DFB ortiqcha ekspresslik ikkala mukofotga nisbatan qiziqish bilan bog'liq javoblarni ham ta'sir qiladiganligi tufayli, mukofotlardan biri oldingi maruziyetning boshqalarga nisbatan qiziqish bilan bog'liq javoblarni sezilarli darajada ta'sir qilganligini tekshirish qiziqish uyg'otdi . Jinsiy tajribadan oldin hayvonlarni tasodifiy nazorat qilish yoki jinsiy sharoitga tayinlashdi. Hayvonlar keyinchalik 8-10 hafta davomida tasvirlangan jinsiy tajribalar yoki nazorat qilish shartlariga duchor bo'lgan. Oxirgi jinsiy mashg'ulotdan besh kun o'tgach, hayvonlar bitta shisha suv va bir sukrozdan biri o'rtasida 30 minlik ikki shisha tanlov paradigmasına duch kelgan. Biz jinsiy jihatdan tajribali hayvonlarning nazoratdan ko'ra sezilarli darajada ko'proq sukrozni ichganligini aniqladik (shakl 3b). Jinsiy tajriba va nazorat hayvonlari orasida suyuqlikning o'ziga xos xususiyati bo'lgan suvni iste'mol qilish (nazorat qilish, 1.21 ± 0.142 ml, jinsiy tajribali, 1.16 ± 0.159 ml; n = 7-9; p = 0.79) bilan farq yo'q.
muhokama
Ushbu tadqiqot adabiyotda jinsiy va sukroz bilan bog'liq tabiiy mukofot harakatlarida DFBning rolini aniqlashda oldingi bo'shliqni ko'paytiradi. Dastlab DFOSB ning tabiiy sovg'alarga surunkali ta'siriga duchor bo'lganidan so'ng, miya sharaf mukofoti mintaqasida NAc ichida to'planganligini aniqlashga kirishdik. Ushbu ishning muhim xususiyati hayvonlarga o'zlarining xatti-harakatlarida, giyohvand o'zini o'zi boshqarish paradigmalariga o'xshash tarzda tanlash imkonini berdi. Bu DFF darajalariga ta'sirning mukofotning ixtiyoriy iste'mol qilinishi bilan bog'liqligini ta'minlash edi. Sakroz modeli (shakl 1) boshqa sukroz iste'mol modellari bilan solishtirganda giyohvandlikka o'xshash xatti-harakatlarni aks ettiradi: mukofot va nazorat o'rtasidagi tanlov, teskari shaklda qabul qilingan U-shaklidagi doz-javob eğrisi, chiqarilganidan keyin sezgirlangan javob va ortiqcha iste'mol. Ushbu model shuningdek, kundalik intervalgacha shakar modeli (Avena va boshq., 2008) kabi boshqa modellarda ham ko'rinmayapti.
Bizning ma'lumotlarimiz birinchi marta tabiiy foyda, sukroz va jinsning ikkita asosiy turini NAc da DFB darajasini oshiradi. Ushbu o'sish Western blotting va immunohistokimya tomonidan kuzatilgan; har ikkala usuldan foydalangan holda, kuzatilgan oqsil mahsuloti haqiqatan FosB ekanligini va to'liq-uzunlikdagi FosB emas, fosB genining yana bir mahsulotini kafolatlaydi. DFSning sukroz va jinsiy a'zolar bilan selektiv indüksiyoni DFF ning selektiv indulatsiyasiga NAc'ga o'xshash deyarli barcha turdagi giyohvand moddalarni surunkali iste'mol qilishdan so'ng (Kirishga qarang) o'xshaydi. Shunga qaramasdan, tabiiy foyda olishga javoban, bu erda kuzatilgan NAFdagi DFSB indüksiyonun darajasi dori-darmonlar uchun ko'rilganidan kichik: kuzatilgan sakkaroz ichish va jinsiy xulq-kontrastda DFSB darajasida 40-60% ko'payishiga olib keldi (Perrotti va boshq., 2008) ko'plab giyohvand moddalarni iste'mol qilish bilan ko'rilgan bir nechta indüksiyona qadar.
Ushbu tadqiqotning ikkinchi maqsadi tabiiy foyda bilan bog'liq xatti-harakatlarda NAFda DFOSB indüksiyonining funktsional oqibatlarini tadqiq qilishdan iborat edi. DF-DB dori-darmonlaridagi ta'sir ko'rsatish bo'yicha avvalgi ishimiz ko'pchilik indentitsion bitransgen sichqonlardan foydalangan. Bu erda DFB ekspresyoni NAc va dorsal striatumga qaratilgan. Ushbu DFB-ovratsiz sichqonlarga kokainga va opiyatlarga nisbatan ta'sirchan xatti-harakatlar, shuningdek, oziq-ovqat mahsulotlarini ishlab chiqarish va asbob-uskunalar bilan ishlashning ortishi kuzatiladi (Kirishga qarang). Biz ushbu tadqiqotda erkak ratlarning maqsadli miya hududlarida DFOSBni uzoq muddat sur'atda bosib yuborish uchun yaqinda ishlab chiqilgan virusli vositalardan foydalanganmiz (Zachariou va boshq., 2006). Biz bu erda FF ekspresyoni nazorat hayvonlari bilan taqqoslaganda sukrozni qabul qilishni kuchaytirdi, bu ikkala guruh o'rtasida suv olishda farq yo'qligini aniqladik.
Shuningdek, DFF jinsiy axloqqa qanday ta'sir qilishini o'rganib chiqdik. NAc'dagi DFB ekspresyonunun jinsiy o'spirin hayvonlarda bo'shatilish uchun zarur bo'lgan introtsedriyalar sonini kamaytirishini ko'rsatdik. Bu, sodda jinsiy xatti-harakatlardagi boshqa farqlarga, shu jumladan tog'da, ichki bosimdagi o'zgarishlar yoki bo'shatilish kechikishlaridagi o'zgarishlarga mos kelmadi. Bundan tashqari, DFS eksperimenti jinsiy hayotga duchor bo'lgan hayvonlarda jinsiy xatti-harakatning biron bir jihatini ta'sir qilmadi. NAc-da jinsiy xulq-atvorga ta'sir qilish uchun manipulyatsiya qilish qobiliyati bu miya mukofotining mintaqada jinsiy xatti-harakatni tartibga solib borayotganligi haqidagi dalillar (Balfour va boshq., 2004; Hull va Dominguez, 2007) berilsa, ajablanarli emas. Intruziya sonidagi DFBning pasayishi jinsiy xatti-harakatni kuchayishini aks ettirishi mumkin, NAcdagi DFB eksperksepsiyasi bilan yashovchan hayvonlarda tajribali hayvonlarga o'xshash bo'ladi. Misol uchun, takroriy jinsiy tajribani testdan o'tkazishda hayvonlarga bo'shatishga erishish uchun kamroq intilishlar kerak (Lumley va Xull, 1999). Bundan tashšari, DFOS ḱo'rsatilishi bilan postejacorativ intervalda pasayish tendentsiyasi, shuningdek, jinsiy asosga ega, tajribali erkaklarda kuzatilgan xatti-ḱarakatlarni aks ettiradi (Kippin va Van der Kooy, 2003). Birgalikda, bu topilmalar, afsonaviy hayvonlarda DFF ortiqcha ifodasini naif hayvonlarni ko'proq tajribali yoki jinsiy motivlarga asoslangan hayvonlarga o'xshatib jinsiy axloqni engillashtirishi mumkinligini ko'rsatadi. Boshqa tomondan, biz DF eksperimentining tajribali jinsiy xulq-atvorga ta'sirini sezmadik. Jinsiy xatti-harakatlarning yanada murakkab xatti-harakatlari (masalan, shartli joyni tanlash) DFBning mumkin bo'lgan ta'sirlarini yanada yaxshiroq ajratishi mumkin.
Va nihoyat, biz avvalgi tabiiy mukofotga ta'sir qilish boshqasiga qiziqishlariga qanday ta'sir qilishini o'rganib chiqdik. Xususan, biz avvalgi jinsiy tajribaning saxaroza iste'mol qilishiga ta'sirini aniqladik. Garchi nazorat qiluvchi va jinsiy tajribali hayvonlar saxaroza uchun kuchli afzallik ko'rsatgan bo'lsalar ham, jinsiy aloqada bo'lgan hayvonlar sukrozdan ancha ko'proq ichishgan, suv iste'molida o'zgarish bo'lmaydi. Bu qiziq bir topilma, chunki ilgari bitta mukofotga duchor bo'lish, boshqa mukofotlantiruvchi stimulning foydali qiymatini oshirishi mumkin, chunki agar mukofot sezgirligining qisman birgalikda molekulyar asosi (masalan, DFosB) bo'lsa. Ushbu tadqiqotga o'xshab, ilgari jinsiy xatti-harakatlarga duch kelgan ayol hamsterlar kokainning xatti-harakatlariga ta'sirchanligini namoyish qildilar (Bredli va Meisel, 2001). Ushbu topilmalar miyaning mukofot tizimidagi plastika tushunchasini qo'llab-quvvatlaydi, chunki hozirgi mukofotlarning qabul qilingan qiymati o'tgan mukofot ta'siriga asoslangan.
Xulosa qilib aytganda, bu erda keltirilgan ish, giyohvand moddalarni iste'mol qilishdan tashqari, tabiiy mukofotlar NAc da DFOSB darajasini keltirib chiqaradigan dalillarni keltiradi. Xuddi shu tarzda, DFOSB ning ushbu miya mintaqasida haddan tashqari namoyon bo'lishi, ilgari dori-darmonlarni mukofotlashda kuzatilganidek, hayvonning tabiiy mukofotlarga bo'lgan munosabatini tartibga soladi. Ushbu topilmalar DFOSB mukofot mexanizmlarini tartibga solishda ko'proq umumiy rol o'ynaydi va ko'plab giyohvand moddalar va tabiiy mukofotlar bo'yicha kuzatilgan o'zaro sezgirlikni vositachilik qilishga yordam beradi. Shuningdek, bizning natijalarimiz NAcdagi DFB induksiyasi nafaqat giyohvandlikning asosiy jihatlari, balki tabiiy mukofotlarni majburiy iste'mol qilishni o'z ichiga olgan tabiiy giyohvandlik jihatlari ham vositachilik qilishi mumkin.
Izohlar
• Bu ish Milliy ruhshunoslik instituti va Narkotik moddalarni suiiste'mol qilish milliy instituti va Shizofreniya va Depressiya bo'yicha Milliy Ittifoqdan ajratilgan grantlar bilan qo'llab-quvvatlandi.
• Yuqorida keltirilgan manzilda Karlos A Bolanosga xat yozish kerak. [elektron pochta bilan himoyalangan]
• Mualliflik huquqi © 2008 Nevrologiya jamiyati 0270-6474 / 08 / 2810272-06 $ 15.00 / 0
Oldingi bo'lim
Manbalar
1. ↵
1. Avena NM,
2. Rada P,
3. Hoebel B.G.
(2008) Shakar giyohvandligi uchun dalillar: intervalgacha, ortiqcha shakarning iste'mol qilishning qiziqish va neyrokimyoviy ta'siri. Neurosci Biobehav Rev 32: 20-39.
CrossRefMedline
2. ↵
1. Balfour ME,
2. Yu L,
3. Coolen LM
(2004) Jinsiy xulq-atvor va jinsga bog'liq ekologlar erkakning kalamushlarida mezolimbik tizimini faollashtiradi. Nöropsikofarmakologiya 29: 718-730.
CrossRefMedline
3. ↵
1. Barrot M,
2. Olivier JD,
3. Perrotti LI,
4. DiLeone RJ,
5. Berton O,
6. Eisch AJ,
7. Impey S,
8. Storm doktor,
9. Neve RL,
10. Yin QK,
11. Zachariou V,
12. Nestler EJ
(2002) Nucleus accumbens qobig'idagi CREB faoliyati emotsional stimullarga nisbatan xatti-harakatlarni nazorat qiladi. Proc Natl Acad Sci AQSh 99: 11435-11440.
Xulosa / to'liq matn
4. ↵
1. Barrot M,
2. Wallace DL,
3. Bolaños CA,
4. Graham DL,
5. Perrotti LI,
6. Neve RL,
7. Chambliss H,
8. Yin QK,
9. Nestler EJ
(2005) Nucleus accumbens-da CREB tomonidan tashvishlanish va jinsiy xatti-harakatni boshlash. Proc Natl Acad Sci AQSh 102: 8357-8362.
Xulosa / to'liq matn
5. ↵
1. Bradley KC,
2. Meisel RL
(2001) Jinsiy harakatlarda v-Fosning jinsiy xatti-harakatlari va amfetamin-stimulyatsiya qilingan lokomotorlik faolligi ayolning ayol hamsterlarida oldingi jinsiy tajribalar bilan sezgirlanadi. J Neurosci 21: 2123-2130.
Xulosa / to'liq matn
6. ↵
1. Jigarrang JR,
2. Ha, H,
3. Bronson RT,
4. Dikkes R,
5. Greenberg ME
(1996) Sichqonlarda yetishtirishda nuqson bo'lgan, darhol erta gen fosB yo'q. Hujayra 86: 297-309.
CrossRefMedline
7. ↵
1. Cenci MA
(2002) Parkinson kasalligining kalamush modelida L-DOPA ta'sirida diskineziya patogenezida ishtirok etgan transkripsiya omillari. Aminokislotalar 23: 105-109.
CrossRefMedline
8. ↵
1. Colby CR,
2. Whisler K,
3. Steffen S,
4. Nestler EJ,
5. Self DW
(2003) DeltaFosB ning striatal hujayra tipidagi maxsus ekspressionasi kokain uchun rag'batni oshiradi. J Neurosci 23: 2488-2493.
Xulosa / to'liq matn
9. ↵
1. Hull EM,
2. Dominguez JM
(2007) Ayol kemiruvchilarida jinsiy axloq. Horm Behav 52: 45-55.
CrossRefMedline
10. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon Vt Jr.,
4. Whisler K,
5. Gilden L,
6. Beckmann AM,
7. Steffen S,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L,
10. O'z DW,
11. Tkatch T,
12. Baranauskas G,
13. Surmeier DJ,
14. Neve RL,
15. Duman RS,
16. Picciotto MR,
17. Nestler EJ
(1999) DeltaFosB ning transkripsiyon faktorining miyada namoyon etilishi kokainga sezgirlikni nazorat qiladi. Tabiat 401: 272-276.
CrossRefMedline
11. ↵
1. Kippin TE,
2. Van der Kooy D
(2003) Tegmental pedunculopontin yadrosi eksitotoksik lezyonlari naif erkak ratlarda koplamani buzadi va tajribali erkak sichqonlarga biriktiruvchi ta'sirini oldini oladi. Eur J Neurosci 18: 2581-2591.
CrossRefMedline
12. ↵
1. Lumley LA,
2. Hull EM
(1999) D1 antagonistining va jinsiy tajribaning medial preoptik yadroda kopyalanma bilan bog'liq Fos kabi immunoreaktivlik ta'siri. Brain Res 829: 55-68.
CrossRefMedline
13. ↵
1. McDaid J,
2. Graham MP,
3. Napier TC
(2006) Metamfetamin bilan indikatsiyalangan sensitizatsiya sutemizuvchilar miya boshi atrofida pCREB va DeltaFosB ni o'zgartiradi. Mol Pharmacol 70: 2064-2074.
Xulosa / to'liq matn
14. ↵
1. Myuller,
2. Unterwald EM
(2005) D1 dopamin retseptorlari intervalgacha morfinni administratsiyadan so'ng sichqonchani striatumda deltaFosB indüksiyasini modulyatsiya qiladi. J Pharmacol Exp Ther 314: 148-154.
Xulosa / to'liq matn
15. ↵
1. Nakabeppu Y,
2. Nathans D
(1991) Fos / Jun transkripsiyoniy faoliyatni inhibe qiluvchi tabiiy ravishda uchraydigan FosB shakli. Hujayra 64: 751-759.
CrossRefMedline
16. ↵
1. Nestler EJ
(2008) Narkomaniyaning transkripsiya mexanizmlari: DFBning ahamiyati. Filos Trans R Soc London B Biol Sci 363: 3245-3255.
Xulosa / to'liq matn
17. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Tronson N,
4. Neve RL,
5. Nestler EJ,
6. Teylor JR
(2006) DeltaFosB yadroli akumbenslarda oziq-ovqatni kuchaytirish instrumental xatti-harakatini va motivatsiyasini boshqaradi. J Neurosci 26: 9196-9204.
Xulosa / to'liq matn
18. ↵
1. Perrotti LI,
2. Hadeishi Y,
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Monteggia L,
6. Duman RS,
7. Nestler EJ
(2004) surunkali stressdan keyin mukofotga bog'liq miya strukturasida deltaFosB ning indüksiyasi. J Neurosci 24: 10594-10602.
Xulosa / to'liq matn
19. ↵
1. Perrotti LI,
2. Bolaños CA,
3. Choi KH,
4. Russo SJ,
5. Edwards S,
6. Ulery PG,
7. Wallace DL,
8. O'z DW,
9. Nestler EJ,
10. Barrot M
(2005) DeltaFosB psikostimulant davolashdan keyin ventral tegmental hududning orqa quyruqidagi GABAerjik hujayra populyatsiyasida to'planadi. Eur J Neurosci 21: 2817-2824.
CrossRefMedline
20. ↵
1. Perrotti LI,
2. Weaver RR,
3. Robison B,
4. Renthal Vt,
5. Maze I,
6. Yazdani S,
7. Elmore RG,
8. Knapp DJ,
9. Selley, ShU,
10. Martin BR,
11. Sim-Selley L,
12. Bachtell RK,
13. O'z DW,
14. Nestler EJ
(2008) DeltaFosB ning turli xil nayranglari miyadagi suiiste'mollik bilan bog'liq. Synapse 62: 358-369.
CrossRefMedline
21. ↵
1. Teegarden SL,
2. Balet sh.b.
(2007) Stressning xun tanloviga va iste'molga ta'siri kirish va stressga sezuvchanlikka bog'liq. Biol psychiatry 61: 1021-1029.
CrossRefMedline
22. ↵
1. Werme M,
2. Messer C,
3. Olson L,
4. Gilden L,
5. Thoren P,
6. Nestler EJ,
7. Brena S
(2002) DeltaFosB g'ildirakni boshqaradi. J Neurosci 22: 8133-8138.
Xulosa / to'liq matn
23. ↵
1. Zachariou V,
2. Bolanos CA,
3. Selley, ShU,
4. Theobald D,
5. Cassidy MP,
6. Kelz MB,
7. Shaw-Lutchman T,
8. Berton O,
9. Sim-Selley LJ,
10. Dileone RJ,
11. Kumar A,
12. Nestler EJ
(2006) DeltaFosB uchun morfin ta'siridagi yadrodagi akumbenslar uchun muhim rol. Nat Neurosci 9: 205-211.
CrossRefMedline
;