Chiqish, o'rganish natijasida paydo bo'lgan lokomotor sezuvchanlikka (2014) nisbatan sezgir va chidamli deb tasniflangan ajratilgan Shveytsariyadagi sichqonlarda FosB /

Farmakol Biochem Behav. 2014 fevral; 117: 70-8. doi: 10.1016 / j.pbb.2013.12.007. Epub 2013 Dec 16.

De Pauli RF1, Coelhoso CC2, Tesone-Coelho C2, Linardi A3, Mello LE2, Silveira DX1, Santos-Junior JG4.

mavhum

Giyohvand moddalarni surunkali ta'sir qilish va olib tashlash funktsional va patologik javob sifatida qabul qilinishi mumkin bo'lgan ekspressiv neyronal plastisiyani keltirib chiqaradi. Limbik tizimdagi neyronal plastiklik retsidivda, shuningdek, giyohvandlikning majburiy xususiyatlarida muhim rol o'ynashi yaxshi aniqlangan. FosB / DeltaFosB ifoda etishining ko'payishi giyohvandlikning neyronal plastisiyasining muhim shakllaridan biri bo'lsa-da, ularning funktsional yoki patologik plastika ekanligi noma'lum. Shunisi e'tiborga loyiqki, dam olishdan foydalanishdan giyohvandlikka o'tishda individual farqlar. Ushbu farqlar etanol tomonidan qo'zg'atilgan lokomotor sensibilizatsiya paradigmasining ishtirokida o'tkazilgan tadqiqotlarda qayd etildi. Ushbu ishda biz sezgirlangan va sezgir bo'lmagan sichqonlar FosB / DeltaFosB ifoda jihatidan farq qiladimi-yo'qligini o'rganib chiqdik. Shveytsariya sichqonlaridan kattalar erkaklari har kuni 21 kun davomida etanol yoki sho'r suv bilan davolanadilar. Olish bosqichidagi lokomotor faolligiga ko'ra, ular sezgir (EtOH_High) yoki sezgir bo'lmagan (EtOH_Low) deb tasniflangan. 18h yoki 5 kunlari-dan keyin ularning miyalari FosB / DeltaFosB immunohistokimyosi uchun ishlov berildi. Pulni olishning 5-kunida biz EtOH_High guruhida (motor korteksida), EtOH_Low guruhida (ventral teimental sohada) va ikkala guruhda (striatumda) FosB / DeltaFosB ifodasini ko'payishini ko'rishimiz mumkin. Farqlar EtOH_Low guruhida yanada izchil edi. Shuning uchun, etanol tomonidan qo'zg'atilgan lokomotor sensibilizatsiya bosqichida kuzatilgan xatti-harakatlarning o'zgaruvchanligi, tortib olish davrida differentsial neyronal plastiklik bilan birga kelgan. Bundan tashqari, sezgir va sezgir bo'lmagan sichqonlarda aniqlangan FosB / DeltaFosB ifoda etishning aniq shakllari surunkali giyohvand moddalarga ta'sir qilish bilan emas, balki tortib olish davri bilan ko'proq bog'liqdir. Va nihoyat, olib tashlash davrida FosB / DeltaFosB ifoda etishining ko'payishi, ham funktsional, ham patologik egiluvchanlik tufayli ko'rib chiqilishi mumkin.

 


Highlights

  • DeltaFosB ifodasi giyohvandlikda neyron plastisiyasining muhim shakli

  • Biroq, u funktsional yoki patologik plastisitani anglatadimi-yo'qmi aniq emas.

  • Bu erda biz sezgir va sezgir bo'lmagan sichqonlar orasida DeltaFosB-ning farqlarini topdik.

  • Ushbu farqlar ko'proq giyohvand moddalarni iste'mol qilish bilan emas, balki olib qo'yish davriga bog'liq.

  • Biz ushbu o'zgarishlar ham funktsional, ham patologik egiluvchanlikni namoyish etishini taklif qilamiz.


Kalit so'zlar,

  • FosB;
  • DeltaFosB;
  • Lokomotivni sezgirlash;
  • Pul olish;
  • Xulq-atvor o'zgaruvchanligi;
  • Sichqonchalar

1. kirish

Giyohvandlik sohasidagi hozirgi neyrobiologik tadqiqotlarning vazifasi, giyohvand moddalarni iste'mol qilish va giyohvand moddalarni iste'mol qilish ustidan xatti-harakatni boshqarishni yo'qotishga o'tish o'rtasida vositachilik qiluvchi neyron plastiklik mexanizmlarini tushunishdir. "Giyohvandlikning qorong'u tomoni" deb nomlangan giyohvandlikning eng muhim nazariyalaridan biri impulsivlikdan (ijobiy kuchaytirish bilan) kompulsivlikka (salbiy kuchayish bilan bog'liq) o'tish mavjudligini ta'kidlaydi. Ushbu siljish, inqirozga uchragan tsiklda quyidagi hollarni o'z ichiga oladi: diqqatni jalb qilish / oldindan sezish, ichkilikbozlik va ichkilikbozlik / salbiy ta'sir (Koob va Le Moal, 2005, Koob va Le Moal, 2008 va Koob va Volkow, 2010). Ushbu stsenariydan boshlab, giyohvandlik bo'yicha tadqiqotlar o'tkir va uzoq davom etgan abstensiyadan kelib chiqadigan salbiy hissiy holatlar bilan bog'liq neyrobiologik mexanizmlarga qaratildi. "Giyohvandlikning qorong'u tomoni" nazariyasiga ko'ra mukofotni cheklashga qaratilgan neyron aylanish tizimida uzoq muddatli va doimiy plastisitik o'zgarishlar yuz beradi. Shu bilan birga, ushbu plastmassa o'zgarishlari preparatga kirishning oldini olishda paydo bo'ladigan salbiy hissiy holatga olib keladi. Ushbu mexanizm giyohvandlikning paydo bo'lishiga, shuningdek uni saqlashga kuchli turtki beradi (Koob va Le Moal, 2005 va Koob va Le Moal, 2008).

Lokomotor sensibilizatsiya bu hayvonlarning foydali modelidir, chunki ularning takroriy ta'sir qilishlari davomida dorilarning subyektiv ta'siri kuchayishi, dorilarni qo'zg'atuvchi lokomotor ta'sirining ko'payishiga o'xshashdir (Vanderschuren va Kalivas, 2000 va Vanderschuren va Pirs, 2010). Lokomotor sensibilizatsiya giyohvandlik bilan bog'liq bo'lgan bir nechta xatti-harakatlarni taqlid qilmasa ham, uning vaqtincha morfologik va neyrokimyoviy xususiyatlari rekreatsion foydalanishdan giyohvandlikka o'tishga olib keladigan xususiyatlar bilan bir qatorda (Robinson va Kolb, 1999, Vanderschuren va Kalivas, 2000 va Vanderschuren va Pirs, 2010). An'anaga ko'ra, lokomotor sensibilizatsiya protokoli uchta bosqichni o'z ichiga oladi: giyohvand moddalarni olish (takroriy giyohvand moddalarga ta'sir qilish), olib qo'yish davri va qiyinchilik (olib tashlash davridan keyin preparat bilan yangi aloqa). Afsuski, lokomotor sensibilizatsiyasidan foydalangan holda olib borilgan ko'pgina tadqiqotlar, faqat tortib olish davri bilan bog'liq bo'lgan, sotib olish va sinov bosqichiga qaratilgan.

Giyohvand moddalarga bir necha marta ta'sir qilish, aniq belgilangan (Perrotti va boshq., 2008) va surunkali stress (Perrotti va boshq., 2004) kortikolimbik tizimda fosB / deltafosB transkripsiya omilining ifodasini oshiradi. Ushbu hududlarda FosB / DeltaFosB to'planishi gipotezaga olib keladi (stressga qarshi turishda asosiy rol o'ynaydi (Berton va boshq., 2007 va Vialou va boshq., 2010) va kokainning foydali ta'sirida (Xarris va boshq., 2007 va Muschamp va boshq., 2012), etanol (Kaste va boshqalar, 2009 va Li va boshq., 2010) va opioidlar (Zachariou va boshq., 2006 va Solecki va boshqalar, 2008). Shu sababli, FosB / DeltaFosB etanol tomonidan qo'zg'atilgan lokomotor sensibilizatsiya bilan bog'liq bo'lgan ba'zi neyronik plastisitiv hodisalarni, shuningdek, lokomotor sezgirligini olish bosqichini ta'minlaydigan tortib olinishni modulyatsiya qilishi mumkin.

Shunisi e'tiborga loyiqki, dam olishdan foydalanishdan giyohvandlikka o'tish davrida individual farqlar kuzatilmoqda (Flagel va boshq., 2009, Jorj va Koob, 2010 va Swendsen va Le Moal, 2011). Masalan, DBA / 2 J sichqonlari C57BL / 6 J ga qaraganda etanol tomonidan qo'zg'atilgan lokomotor sensitizatsiyaga ko'proq moyil (Phillips va boshq., 1997 va Melon va Boem, 2011a). Eskirgan Shveytsariya sichqonlarida etanolni qo'zg'atuvchi lokomotor sensibilizatsiyasiga nisbatan xatti-harakatlarning o'zgaruvchanligi birinchi bo'lib tavsiflangan Masur va dos Santos (1988). O'sha paytdan boshlab, boshqa tadqiqotlar etanol ta'siridagi lokomotor sezgirligini olishda xulq-atvor o'zgaruvchanligi bilan bog'liq muhim neyrokimyoviy xususiyatlarni ko'rsatdi (Souza-Formigoni va boshqalar, 1999, Abrahamão va boshqalar, 2011, Abrahamão va boshqalar, 2012, Quadros va boshqalar, 2002a va Quadros va boshqalar, 2002b). Biroq, ushbu tadqiqotlar lokomotor sensibilizatsiya bosqichidan keyin tortib olish davri davomida xulq-atvor o'zgaruvchanligining ta'sirini ko'rib chiqmadi. Yaqinda o'tkazilgan tadqiqotda bizning laboratoriyamiz sezgir va sezgir bo'lmagan shveytsariya sichqonlarining 1 (CB1R) kannabinoid retseptorlari turini ifoda etishga nisbatan sezilarli farqini tasvirlab berdi. Ushbu tadqiqotda sezgirlangan (ammo sezgir bo'lmagan sichqonlar emas) prefrontal korteksda, ventral tegramal sohada, amigdala, striatum va hipokampusda CB1R ifodasini oshirdi (Coelhoso va boshqalar, 2013).

Shveytsariyalik sichqonlarda etanol bilan bog'liq bo'lgan lokomotor sezgirlikka nisbatan yaxshi tashkil etilgan xatti-harakatlarning o'zgaruvchanligini va ushbu o'zgaruvchanlik keyinchalik olib tashlash paytida aniq neyrokimyoviy xususiyatlar bilan birga kelishini hisobga olib, ushbu tadqiqot boshida sezgirlangan va sezgir bo'lmagan sichqonlarda FosB / DeltaFosB ifodasini o'rganib chiqdi. (18 soat) va 5 kunlik mablag'ni olib qo'ygandan keyin.

2. Materiallar va usullar

2.1. Mavzular

San-Paulu Universidadasi Federal universiteti biologiya va tibbiyotda hayvonot modellarini ishlab chiqish markazining Albino Swiss Webster liniyasidan kelib chiqqan erkak shveytsariyalik Vebster sichqonlari (EPM-1 Colony, San-Paulu, SP, Braziliya) ishlatilgan. . Sinov boshlanganda sichqonlar 12 haftalik (30-40 g) yoshda edi. 10 ta sichqonchadan iborat guruhlar qafaslarda (40 × 34 × 17 sm) yog'ochdan yasalgan choyshablar bilan joylashtirilgan. Harorat (20-22 ° C) va namlik (50%) nazorat ostida bo'lgan hayvonlar koloniyasi yorug'lik / qorong'i tsiklda (12/12 soat) saqlanib turdi, soat 07: 00da chiroqlar yondi, sichqoncha choyi granulalari va musluk suvi e'lonlari bilan libitum, sinovdan tashqari. Sichqonlar ushbu uy sharoitida giyohvand moddalarni davolash va xulq-atvor sinovlari boshlanishidan kamida 7 kun oldin saqlangan. Hayvonlarni parvarish qilish va eksperimental protseduralar hayvonot eksperimentlari uchun Evropa Ittifoqining 2043/09 / EU yo'riqnomasiga binoan, Universitetning Hayvonlarni parvarish qilish va ulardan foydalanish axloqiy qo'mitasi tomonidan tasdiqlangan protokollar (protokol raqami: 2010/63) asosida o'tkazildi.http://ec.europa.eu/environmental/chemicals/lab_animals/legislation_en.htm).

2.2. Lokomotor sezgirligi

Lokomotor sensibilizatsiya protokoli bizning laboratoriyamizda o'tkazilgan avvalgi tadqiqotga asoslanib (Coelhoso va boshqalar, 2013). Protokol boshida barcha hayvonlar intraperitoneal yo'l bilan (ip) fiziologik eritma bilan AOK qilindi va darhol bazal harakatlanishni o'rnatish uchun 15 minut davomida avtomatlashtirilgan harakat qutisida (Insight, Braziliya) sinovdan o'tkazildi. Ikki kundan keyin hayvonlarga har kuni etanol (2 g / kg, 15% NaCl, 0.9% og'irlik / kg, ip - EtOH guruhi, N = 40) yoki fiziologik eritma (shunga o'xshash hajm, ip, - Boshqarish guruhi, N = 12), 21 kun davomida. 1-chi, 7-chi, 14-chi va 21-chi in'ektsiyalardan so'ng, hayvonlar 15 daqiqa davomida faoliyat katakchasiga joylashtirildi. Har bir vaziyatda gorizontal harakatlanish xulq-atvorini tahlil qilish tizimi bilan o'lchandi (Pan Lab, Ispaniya). Kutilganidek ( Masur va dos Santos, 1988 va Coelhoso va boshqalar, 2013), 21st sotib olish kunida lokomotor faoliyatidagi xatti-harakatlarning o'zgaruvchanligi bizga EtOH guruhining hayvonlarini 2 kichik guruhlarida tarqatishimizga imkon beradi: EtOH_High (tarqalishning yuqori 30 foizidan olingan) va EtOH_Low (pastki 30% dan olingan) tarqatish). Shunday qilib, tahlilga faqat hayvonlarning 60% qismi kiritilgan. Ushbu strategiya etanolning sezuvchanligi paradigmasidagi individual o'zgaruvchanlikni o'rganishda qo'llaniladigan usullar bilan bir xil ( Masur va dos Santos, 1988, Souza-Formigoni va boshqalar, 1999, Quadros va boshqalar, 2002a, Quadros va boshqalar, 2002b, Abrahamão va boshqalar, 2011, Abrahamão va boshqalar, 2012 va Coelhoso va boshqalar, 2013).

Eksperimental guruhlarni aniqlagan tasnifdan so'ng, biz olib chiqish davrining vaqtinchalik mezonlariga muvofiq ikkita mustaqil tajriba o'tkazdik: (i) sotib olish bosqichiga topshirilgan va 2 soatdan keyin qurbon qilingan hayvonlar va (ii) sotib olish bosqichiga topshirilgan va qurbon qilingan hayvonlar chekinishdan 18 kun o'tgach. Shunday qilib, ushbu tadqiqot 5 ta eksperimental guruhni (Control, EtOH_High va EtOH_Low) o'z ichiga olgan bo'lib, ular 3 kichik guruhga bo'lingan (2 soat va 18 kunlik chiqish) (N = 6 kichik guruhga). Chiqib ketish davrida ushbu ikkita vaqtinchalik belgini tanlash FosB va DeltaFosB ekspressionining kinetik jihatlari bilan bog'liq edi 18 soatdan keyin (munozara bo'limida aytib o'tilganidek) va 5 kunlik chekinishdan so'ng, bizning Laboratoriyamizdan oldingi tadqiqotlar asosida. lokomotor sensitizatsiya paradigmasidagi chekinish davri bilan bog'liq ba'zi neyrokimyoviy xususiyatlarni o'rgangan ( Fallopa va boshqalar, 2012 va Escosteguy-Neto va boshqalar, 2012). Va nihoyat, lokomotor sensibilizatsiya va FosB / DeltaFosB ekspressioni o'rtasidagi o'zaro bog'liqlikni amalga oshirish uchun har bir hayvon uchun lokomotor sensibilizatsiya balini quyidagi formula bo'yicha hisobladik: ball = (21-kundagi harakat - 1-kundagi harakat) * 100 / lokomotiv 1-kun.

2.3. Immunohistokimyo

Tegishli olib tashlash davridan keyin hayvonlar ketamin (75 mg / kg, ip) va ksilazin (25 mg / kg, ip) o'z ichiga olgan kokteyl bilan chuqur behushlik qilindi. Kornea refleksi yo'qolganidan so'ng, ular transkardial ravishda 100 ml fosfat tampon eritmasi 0.1 M [fosfat tamponli sho'r suv (PBS)] bilan, so'ngra 100 ml 4% paraformaldehid (PFA) bilan eritilgan. Miyalar perfuziyadan so'ng darhol olib tashlandi, PFA da 24 soat davomida saqlandi va keyin 30% davomida 48% saxaroza / PBS eritmasida saqlandi. Serial koronal qismlar (30 mm) muzlatadigan mikrotom yordamida kesilib, erkin suzuvchi binoni orqali immunohistokimyo protseduralarida foydalanish uchun muzlashga qarshi eritma ichida saqlanadi.

Immunohistokimyo uchun an'anaviy avidin-biotin-immunoperoksidaza texnikasi bajarildi. Barcha eksperimental guruhlarning miya bo'limlari bir xil ishlarga kiritilib, vodorod peroksidaza (3%) bilan 15 daqiqa davomida oldindan muomala qilindi va keyin 30 daqiqa davomida PBS bilan yuvildi. Keyinchalik, barcha bo'limlar 30 minut davomida PBS-BSA .5% da o'ziga xos bo'lmagan reaktsiyalarni oldini olish uchun ta'sir o'tkazdilar. Shundan so'ng, bo'limlar birlamchi antitel quyoniga qarshi FosB / DeltaFosB (1: 3,000; Sigma Aldrich, St Louis, MO, AQSh. Kat. AV32519) bilan PBS-T eritmasida (30 ml PBS, 300 ml Triton) inkubatsiya qilindi. X-100). Keyinchalik, bo'limlar xona haroratida biotinli echki quyonlarga qarshi IgG ikkilamchi antikorida (2: 1; Vektor, Burlingam, Kaliforniya, AQSh) 600 soat davomida inkübe qilingan. Keyin bo'limlar avidin-biotin kompleksi bilan (Vectastain ABC Standard kit; Vector, Burlingame, CA, USA) 90 daqiqa davomida muomala qilindi va nikel bilan kuchaytirilgan diaminobenzidin reaktsiyasiga topshirildi. Bosqichlar oralig'ida bo'limlar PBS da yuvilib, rotatorda aralashtirildi. Bo'limlar jelatin bilan qoplangan slaydlarga o'rnatildi, quritildi, quritildi va qoplandi.

Quyidagi ensefalik mintaqalar tahlil qilindi: prefrontal korteks [old kingul korteks (Cg1), prelimbik korteks (PrL) va infralimbik korteks (IL)], motor korteksi [birlamchi (M1) va ikkilamchi (M2)], dorsal striatial [dorsum (dorsum) DmS) va dorsolateral striatum (DlS)], ventral striatum [yadrolarning biriktiruvchi yadrosi (Acbco) va qobiq (Acbsh), ventral pallidum (VP)], hipokampus [Cornus Ammong 1 va 3 (CANNUMX va CAX), tegishli ravishda Dentate girusining granüler qatlami (DG)], amigdala [bazolateral yadro (BlA) va markaziy yadro (CeA)], gipotalamusning ventromedial yadrosi (VMH) va ventral teimental maydon [old (VTAA) va orqa (VTAP) qismlari] ( Qarang Shakl). Kompyuterga ulangan Nikon Eclipse E200 mikroskopi har bir qismdan × 20 kattalashtirishda rasm olish uchun ishlatilgan. Rasmlar FosB / DeltaFosB immunoreaktivligini orqa tahlil qilish uchun .tiff arxivi sifatida saqlandi. Immunoreaktiv hujayralar ImageJ dasturi yordamida hisoblangan (NIH Image, Bethesda, MD, AQSh). Miya mintaqalari har bir fotosuratda "Stereotaksik sichqoncha miya atlasiga" (Franklin va Paxinos, 1997). Mikroskopda olingan fotomikrografiyalar 2.5 × 10 ni tashkil etganligi sababli3 mkm2 20 × kattalashtirishda FosB / DeltaFosB etiketli hujayralar miqdori 2.5 × 10 ga immunostaining hujayralarining o'rtacha qiymati sifatida ifodalanadi3 mkm2. EtOH guruhlarida olingan qiymatlar Boshqarish qiymatlariga normalizatsiya qilingan va% sifatida ifodalangan. (Nazorat = 100%).

  •  
  • Shakl.  

    Tanlangan miya mintaqalarini sxematik tasvirlash. Belgilangan (moslashtirilgan) joylarni ko'rsatib sichqonlar miyasining koronal qismlarini sxematik chizish Franklin va Paxinos, 1997). M1 = asosiy vosita korteksi; M2 = ikkilamchi motor korteksi, CG1 = oldingi singulat korteksi, PrL = prelimbik korteks, IL = infralimbik korteks, Acbco = akumbens yadrosi, Acbsh = yadro akumbens qobig'i, VP = ventral pallidum DmS = dorsomedial striatum, DlS = dorsolateral striatum, Cornus Ammonis 1, CA1 = Cornus Ammonis 3; DG = dentat girusning donador qatlami, BlA = amigdalaning bazolateral yadrosi, CeA = amigdalaning markaziy yadrosi, VmH = ventromedial gipotalamus yadrosi, VTAA = ventral tegmental maydonning old qismi, VTAP = ventral tegmental maydonning orqa qismi.

2.4. Statistik tahlil

Dastlab, Shapiro-Uilk barcha o'zgaruvchilarning taqsimlanishining normalligini tekshirish uchun ishlatilgan. Xulq-atvor natijalari bir martalik ANOVA tomonidan lokomotor sensibilizatsiyaning 5 davri: bazal, 1-kun, 7-kun, 14-kun va 21-kunni omil sifatida hisobga olgan holda tahlil qilindi. Gistologik natijalar ANOVA tomonidan ikki tomonlama tahlil qilindi. omillar sifatida: chiqish muddati (18 soat va 5 kun) va eksperimental guruh (Control, EtOH_High va EtOH_Low). Parametrik bo'lmagan o'zgaruvchilar ma'lumotlarning tarqalishini kamaytirish uchun Z skorlari bo'yicha standartlashtirildi va keyinchalik ikki tomonli ANOVA-da ilgari ta'riflanganidek qo'llanildi. Nyuman Keuls post-hoc kerak bo'lganda ishlatilgan. Va nihoyat, biz FosB / DeltaFosB musbat hujayralari va lokomotor sensitizatsiya ballari o'rtasidagi mumkin bo'lgan korrelyatsiyani tekshirdik. Ushbu o'zaro bog'liqlik faqat eksperimental guruhlar o'rtasidagi statistik farqlar topilgan yadrolar uchun hisoblab chiqilgan. Ushbu farqlar 5 kunlik chekinish bilan cheklanganligi sababli (natijalar bo'limiga qarang), ushbu korrelyatsiyalarda ko'rib chiqilgan FosB / DeltaFosB qiymatlari pul olishning ushbu aniq vaqtiga ishora qiladi. Ushbu farqlar 5 kunlik chekinish bilan cheklanganligi sababli (natijalar bo'limiga qarang), ushbu korrelyatsiyada ko'rib chiqilgan FosB / DeltaFosB qiymatlari ushbu pul olishning aniq vaqtiga ishora qiladi. Ahamiyat darajasi 5% etib belgilandi (p <0.05).

3. Natijalar

3.1. Lokomotor sezgirligi

Qayta o'lchovlar uchun ANOVA guruh omilidagi sezilarli farqlarni aniqladi [F(2,32) = 68.33, p <0.001], protokol davrida [F(4,128) = 9.13, p <0.001] va ularning o'zaro ta'siri [F(8,128) = 13.34, p <0.001]. Bazal harakatlanishda farqlar bo'lmagan va har ikkala EtOH guruhi ham, sotib olishning birinchi kunida, Boshqaruv guruhi bilan taqqoslaganda, harakatlanishning o'xshash o'sishiga ega edi (p <0.01). Shu bilan birga, EtOH_High (lekin EtOH_Low emas) sotib olish bosqichida lokomotor faollikning o'sib borishini ko'rsatdi (p <0.01, sotib olishning oxirgi kunida Control va EtOH_Low guruhlariga nisbatan; p <0.01 sotib olishning birinchi kunidagi lokomotor faolligiga nisbatan) ( Shakl). Ushbu ma'lumotlar dastlabki tadqiqot natijalarini tasdiqladi ( Masur va dos Santos, 1988) va oldingi hisobotimizdan ( Coelhoso va boshqalar, 2013) etanol ta'siridagi lokomotor sensibilatsiyasiga berilgan shveytsariya sichqonlarining xatti-harakatlarining o'zgaruvchanligi to'g'risida.

  • Etanol surunkali davrda lokomotivning asta-sekin va mustahkam o'sishiga yordam beradi ...
  • Shakl.  

    Etanol surunkali davolash davomida lokomotivning bosqichma-bosqich va mustahkam o'sishiga yordam beradi, ammo EtOH_Low guruhida emas. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM sifatida ifodalangan N = 12, Control, EtOH_High va EtOH_Low guruhlari uchun. ⁎⁎P <0.01, xuddi shu davrda Boshqaruv guruhiga nisbatan. ##P <0.01 EtOH_Low guruhiga nisbatan, xuddi shu davrda. ‡ ‡P <0.01 bir xil guruh tarkibidagi bazal harakatga nisbatan. ¥¥P <0.01 1-ning harakatlantiruvchi faolligiga nisbatanst sotib olingan kun, xuddi shu guruh ichida.

3.2. FosB / DeltaFosB ifodasi

FosB / DeltaFosB immunoreaktivligining illyustrativ fotomikografikasi tasvirlangan Shakl va normalizatsiya qilingan qiymatlar ko'rsatilgan Shakl, Shakl, Shakl va Shakl. Ikki tomonlama ANOVA M1, M2, DmS, DlS, Acbco, Acbsh, VP va VTA (FosB / DeltaFosB immuniteti yo'qligi va barcha tuzilmalarning statistik tahlillari uchun muhim farqlarni topdi) Jadval Suppl1 va 1-jadvalnavbati bilan). Statistik farqlarni kuzatish mumkin bo'lgan tuzilmalarda FosB / DeltaFosB ekspresiyasining to'rt xil naqshlari mavjud edi. Birinchisida, M1 va M2 da kuzatilgan, etanolni tortib olishning beshinchi kunida FosB / DeltaFosB ekspressionida faqat EtOH_High guruhida o'sish kuzatilgan (18 soatlik tortib olishda EtOH_High qiymatlari bilan solishtirganda, shuningdek, Control va EtOH_Low guruhlari 5 kunlik chekinishda) (qarang Shakl). VTAAda kuzatilgan ikkinchi namunada FosB / DeltaFosB ekspressioni etanolni 5 kunida faqat EtOH_Low guruhida ko'paygan (chekish 18 soat davomida EtOH_Low qiymatlari bilan solishtirganda, shuningdek, 5 kun davomida nazorat guruhiga ) (qarang Shakl). Uchinchi namunada DmS, Acbco va Acbsh da kuzatilgan FosB / DeltaFosB ekspluatatsiyasi 5 kun davomida EtOH_High va EtOH_Low guruhlarida etanolni chiqarib tashlashda ortdi (18 soatlik tortib olinadigan qiymatiga nisbatan), ammo faqat EtOH_Low guruhi Boshqarish guruhidan farq qilgan (qarang Shakl). Va nihoyat, DlS va VP da kuzatilgan to'rtinchi tartibda, FosB / DeltaFosB ekspluatatsiyasi 5 kun davomida etOH_High va EtOH_Low guruhlarida etanolni chiqarib tashlashda ortdi (ularning 18 soatlik tortib olinadigan qiymatlari bilan taqqoslaganda), ammo bu o'sish statistik jihatdan yanada aniqroq edi EtOH_How guruhida EtOH_High guruhiga qaraganda va faqat EtOH_Low guruhi Boshqaruv guruhidan farq qiladi (qarang Shakl).

  • FosB / DeltaFosB immunoreaktivligini rasmli fotomikografiya × 20-da ...
  • Shakl.  

    × 20 kattalashtirishda FosB / DeltaFosB immunoreaktivligini tasviriy fotomikrografiyasi. DmS = dorsomedial striatum; DlS = dorsolateral striatum; Acbco = accumbens yadrosi; Acbsh = akumbens qobig'i; VP = ventral pallidum; VTAa = ventral tegmental maydonning oldingi qismi.

  •  
  • Shakl.  

    FosB / DeltaFosB ning 18 soat va M5 va M1 guruhlaridagi EtOH_High va EtOH_Low guruhlarida 2 kunlik chiqish davri. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM sifatida ifodalangan va Boshqaruv guruhlari qiymatlari bo'yicha normallashtirilgan ma'lumotlarni ifodalaydi (nuqta chiziq - 100% deb hisoblanadi). Kulrang baralar = 18 soat etanolni chiqarib tashlash; Qora chiziqlar = 5 kunlik etanolni olib tashlash. ** P <0.01 tegishli nazorat guruhiga nisbatan; ## P <0.01, pulni olib qo'yishning 18 soatlik qiymatiga nisbatan. ‡‡ P <0.01, shu davrdagi EtOH_Low guruhiga nisbatan. M1 = asosiy vosita korteksi, M2 = ikkilamchi vosita korteksi.

  • FOZ / DeltaFosB-ni 18h va 5 kunlarda EtOH_High-da chiqarish davri ...
  • Shakl.  

    VTA tarkibidagi EtOH_High va EtOH_Low guruhlarida FosB / DeltaFosB ning 18 soat va 5 kunlik chiqish davri ifodasi. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM sifatida ifodalangan va Boshqaruv guruhlari qiymatlari bo'yicha normallashtirilgan ma'lumotlarni ifodalaydi (nuqta chiziq - 100% deb hisoblanadi). Kulrang baralar = 18 soat etanolni chiqarib tashlash; Qora chiziqlar = 5 kunlik etanolni olib tashlash. ** P <0.01 tegishli nazorat guruhiga nisbatan; ## P <0.01, 18 soat ichida olib qo'yilishning tegishli qiymatiga nisbatan. VTA = ventral tegmental maydon.

  • FOZ / DeltaFosB-ni 18h va 5 kunlarda EtOH_High-da chiqarish davri ...
  • Shakl.  

    Acbco, Acbsh va DmS guruhlaridagi EtOH_High va EtOH_Low guruhlarida FosB / DeltaFosB ning 18 soat va 5 kunlik chiqish davri ifodasi. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM sifatida ifodalangan va Boshqaruv guruhlari qiymatlari bo'yicha normallashtirilgan ma'lumotlarni ifodalaydi (nuqta chiziq - 100% deb hisoblanadi). Kulrang baralar = 18 soat etanolni chiqarib tashlash; Qora chiziqlar = 5 kunlik etanolni olib tashlash. * P <0.05 ** P <0.01, tegishli Boshqaruv guruhiga nisbatan; ## P <0.01, 18 soat ichida olib qo'yilishning tegishli qiymatiga nisbatan. Acbco = accumbens yadrosi, Acbsh = accumbens shell, DmS = dorsomedial striatum.

  • FOZ / DeltaFosB-ni 18h va 5 kunlarda EtOH_High-da chiqarish davri ...
  • Shakl.  

    FosB / DeltaFosB ning 18 soat va VP va DlSdagi EtOH_High va EtOH_Low guruhlarida 5 kunlik chiqish davri. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM sifatida ifodalangan va Boshqaruv guruhlari qiymatlari bo'yicha normallashtirilgan ma'lumotlarni ifodalaydi (nuqta chiziq - 100% deb hisoblanadi). Kulrang baralar = 18 soat etanolni chiqarib tashlash; Qora chiziqlar = 5 kunlik etanolni olib tashlash. ** P <0.01 tegishli Boshqaruv guruhiga nisbatan; # P <0.05 ## P <0.01, 18 soat ichida olib qo'yilishning tegishli qiymatiga nisbatan. ‡‡ P <0.01, shu davrdagi EtOH_Low guruhiga nisbatan. VP = ventral pallidum, DlS = dorsolateral striatum.

  • 1-jadval. 

    FosB / DeltaFosB ifodasini tahlil qilish bo'yicha ANOVA-da olingan statistik parametrlar.

  • NucleusDavr faktoriDavolash omiliDavr * Davolash
    M1F(1,30) = 5.61, P = 0.025F(2,30) = 3.21, P = 0.055F(2,30) = 2.61, P = 0.089
    M2F(1,30) = 4.72, P = 0.038F(2,30) = 1.53, P = 0.233F(2,30) = 3.45, P = 0.045
    CG1F(1,30) = 11.08 P = 0.002F(2,30) = 0.95, P = 0.398F(2,30) = 3.31, P = 0.050
    PrLF(1,30) = 8.53, P = 0.007F(2,30) = 1.72, P = 0.197F(2,30) = 2.74, P = 0.081
    ILF(1,30) = 3.77, P = 0.062F(2,30) = 1.91, P = 0.167F(2,30) = 0.98, P = 0.389
    AcbcoF(1,30) = 22.23 P <0.001F(2,30) = 2.63, P = 0.089F(2,30) = 5.68, P = 0.008
    AcbshF(1,30) = 50.44 P <0.001F(2,30) = 4.27, P = 0.023F(2,30) = 13.18, P <0.000
    VPF(1,30) = 38.01 P <0.001F(2,30) = 5.07, P = 0.013F(2,30) = 10.93, P <0.000
    DmSF(1,30) = 28.89 P <0.001F(2,30) = 3.75, P = 0.035F(2,30) = 7.71, P = 0.002
    DlSF(1,30) = 13.58 P = 0.001F(2,30) = 5.41, P = 0.011F(2,30) = 4.72, P = 0.017
    CA1F(1,30) = 4.81, P = 0.036F(2,30) = 7.37, P = 0.002F(2,30) = 1.62, P = 0.215
    CA3F(1,30) = 14.92 P = 0.001F(2,30) = 2.46, P = 0.102F(2,30) = 3.81, P = 0.034
    DGF(1,30) = 0.59, P = 0.447F(2,30) = 1.49, P = 0.241F(2,30) = 0.24, P = 0.785
    BlAF(1,30) = 6.47, P = 0.016F(2,30) = 0.12, P = 0.884F(2,30) = 1.71, P = 0.199
    CeAF(1,30) = 2.55, P = 0.121F(2,30) = 0.22, P = 0.801F(2,30) = 0.71, P = 0.501
    VmHF(1,30) = 6.51, P = 0.016F(2,30) = 0.71, P = 0.503F(2,30) = 1.75, P = 0.192
    VTAAF(1,30) = 9.64, P = 0.004F(2,30) = 3.76, P = 0.035F(2,30) = 2.65, P = 0.087
    VTAPF(1,30) = 6.05, P = 0.021F(2,30) = 1.79, P = 0.184F(2,30) = 1.64, P = 0.211
  • M1 = asosiy vosita korteksi; M2 = ikkilamchi motor korteksi, CG1 = oldingi singulat korteksi, PrL = prelimbik korteks, IL = infralimbik korteks, Acbco = akumbens yadrosi, Acbsh = yadro akumbens qobig'i, VP = ventral pallidum DmS = dorsomedial striatum, DlS = dorsolateral striatum, Cornus Ammonis 1, CA1 = Cornus Ammonis 3; DG = dentat girusning donador qatlami, BlA = amigdalaning bazolateral yadrosi, CeA = amigdalaning markaziy yadrosi, VmH = ventromedial gipotalamus yadrosi, VTAA = ventral tegmental maydonning old qismi; VTAP = markaziy tegmental maydonning orqa qismi.

FosB / DeltaFosB ifodasidagi o'zgarishlar etanol ta'siriga bog'liq emas, balki olib qo'yilishi bilan bog'liqligini tasdiqlash uchun biz yuqorida aytib o'tilgan yadrolarni olishning 5-kunida (M1, M2, Acbco, Acbsh, DmS, DlS, VP, VTAA). Kutilganidek, ushbu yadrolarning har biri uchun muhim bog'liqlik mavjud emas edi (M1 - r2 = 0.027862, p = 0.987156; M2 - r2 = 0.048538, p = 0.196646; Acbco - r2 = 0.001920, p = 0.799669; Acbsh - r2 = 0.006743, p = 0.633991; DmS - r2 = 0.015880, p = 0.463960; DlS - r2 = 0.023991, p = 0.914182; VP - r2 = 0.002210, p = 0.785443; VTAA - r2 = 0.001482, p = 0.823630).

4. Munozara

Ushbu tadqiqotda kuzatilgan natijalar shuni ko'rsatmoqdaki, FosB / DeltaFosB etanol ta'siridagi lokomotor sensibilizatsiya paradigmasida kuzatilgan surunkali giyohvand moddalarni qabul qilish bilan emas, balki qaytarib olish bilan bog'liq. Shu bilan birga, rivojlanish lokomotor sensibiliyasining xulq-atvori o'zgaruvchanligi, tortib olish paytida FosB / DeltaFosB ifoda etishning o'ziga xos xususiyatlari bilan birga kelgan. Lokomotor sensibilizatsiya paradigmasini olish va ifodalashda vosita korteksining, ventral tegramma mintaqa va striatumning roli yaxshi belgilangan (Vanderschuren va Pirs, 2010). Bundan tashqari, mezolimbik yo'lni nagruzka qilish tortib olish davrining markaziy neyrobiologik xususiyatlaridan biri bo'lib, kengaygan amigdalaning paydo bo'lishi bilan birga keladi (Koob va Le Moal, 2005 va Koob va Le Moal, 2008). Biroq, faqat bir nechta tadqiqotlar lokomotor sensibilizatsiya paradigmasining tortib olish davrini o'rgandi. Bizning natijalarimiz ushbu davrda vosita korteksida, ventral tegramal sohada va striatumda FosB / DeltaFosB ifodasida qiziqarli o'zgarishlarga duch keldik.

FosB cDNA 33, 35 va 37 kDa oqsillarining ekspressionini kodlaydi. O'tkir stimulga ta'sir qilish kuchli 33- va diskret 35- va 37- kDa Fos oqsillarini induksiyasini keltirib chiqaradi. Natijada, o'tkir faollashuvda, ustun bo'lgan FosB ifodasi 33 kDa (McClung va uning hamkorlari, 2004 va Nestler, 2008). Ushbu oqsillar orasida yana bir ajoyib farq bor: faqat 35-37 kDa oqsillari juda barqaror izoformlardir. Ushbu yuqori barqarorlik tufayli DeltaFosB deb ham ataladigan ushbu qisqartirilgan FosB shakllari miyada to'planib, surunkali stimullarga, masalan, psixotrop dorilarni davolash, surunkali elektrokonvulsiv tutilishlar va stresslarga javoban yuqori darajada ifodalangan (Kelz va Nestler, 2000, Nestler va boshq., 2001 va McClung va uning hamkorlari, 2004). Natijada, DeltaFosB uzoq vaqt davom etadigan asabiy va xulq-atvor plastisiyasining mediatsiya shakllariga barqaror molekulyar o'tish sifatida qaraldi. Qizig'i shundaki, FosB va DeltaFosB-ni farqlovchi sichqonchaning chiziqlaridan foydalangan holda o'tkazilgan tadqiqot FosB stressga chidamliligini oshirish uchun zarur ekanligini ko'rsatdi, shuningdek psixostimulyator tomonidan qo'zg'atilgan lokomotor sezgirligi va DeltaFosB ning striatumda to'planishi o'rtasidagi bog'liqlikni neytrallashtirdi (Ohnishi va boshq., 2011). Shuning uchun ikkala oqsil ham ushbu tadqiqotda ishlatiladigan eksperimental protokolda muhim rol o'ynashi mumkin. Shunisi e'tiborga loyiqki, ishlatiladigan FosB antikorlari ham FosB, ham DeltaFosB ni taniydi. FosB o'tkir stimuldan keyin 6 soat ichida boshlang'ich darajaga pasayganligi sababli (Nestler va boshq., 2001) va DeltaFosB takroriy ta'sirlanish ta'siridan keyin to'planadi, biz FosB ekspresyoni bilan etanol bilan davolashning mumkin bo'lgan xiraliklarini oldini olish uchun sotib olish bosqichidan 18 soat o'tgach hayvonlarni qurbon qilishga qaror qildik. Shunga qaramay, texnik jihatdan aniqroq bo'lsa, biz ushbu tadqiqotda FosB / DeltaFosB ifodasi sifatida murojaat qilamiz. Shuni ta'kidlash kerakki, ushbu strategiya boshqa tadqiqotlarda, shu jumladan bu erda tavsiflangan bir xil asosiy antiteldan foydalanilgan ()Conversi va boshqalar, 2008, Li va boshq., 2010, Flak va boshqalar, 2012 va Garsiya-Peres va boshqalar, 2012). Natijada, ushbu eksperimental cheklashlardan tashqari, biz DeltaFosB ning neyron plastisiyadagi rolini hisobga olgan holda natijalarimizni muhokama qilamiz.

Surunkali giyohvand moddalarga ta'sir qilish miyaning bir necha mintaqalarida FosB / DeltaFosB ifodasini oshiradi (Nestler va boshq., 2001 va Perrotti va boshq., 2008). Qizig'i shundaki, ushbu tadqiqotda etanol sezgirlanmagan va etanol sezgir bo'lmagan sichqonlar sotib olish bosqichidan 18 soat o'tgach, FosB / DeltaFosB ekspresiyasi bo'yicha surunkali sho'rlangan sichqonlardan farq qilmadi. Bundan tashqari, FosB / DeltaFosB ekspressioni va lokomotor sensibilizatsiya ballari o'rtasida sezilarli bog'liqlik yo'q edi. Ushbu kelishmovchilikni, hech bo'lmaganda qisman, eksperimental protokoldagi farqlar bilan izohlash mumkin edi. Masalan, etanol ta'sirini hisobga olgan holda, ikkita ishda ikkita shishani bepul tanlash paradigmasi 15 ta vaqti-vaqti bilan ichish seanslarida ishlatilgan (Li va boshq., 2010) yoki 17 kun davomida avtomatik ravishda qo'llaniladigan ozuqaviy to'liq suyuqlik dietasi (bu erda hayvonlar kuniga 8 dan 12 g / kg gacha bo'lgan dozalarda etanol iste'mol qiladilar) (Perrotti va boshq., 2008). Boshqa bir tadqiqotda, mualliflar surunkali davolanishni nazarda tutsalar ham, protokol faqat 4 etanol ta'sirida bo'lgan (Ryabinin va Wang, 1998). Shunday qilib, boshqa joylarda qo'llanilgan protokollar bu erda qo'llanilganidan mutlaqo farq qiladi, bu kunlik etanol in'ektsiyasini eksperimentator tomonidan amalga oshiriladigan 21 kunlik davolashdan iborat. Ushbu farqlarga qaramasdan, psixostimulyatorlar tomonidan qo'zg'atilgan lokomotor sensibilizatsiya protokollaridan so'ng FosB / DeltaFosB ekspresyonining ko'payishi haqida intraperitoneal in'ektsiyalarni o'z ichiga olgan bir nechta tadqiqotlar mavjud (Brenhof va Stellar, 2006, Conversi va boshqalar, 2008 va Vialou va boshq., 2012) va opioidlar (Kaplan va boshq., 2011). Ammo, ushbu tadqiqotlardagi lokomotor sensibilizatsiya protokollari 21 dori ta'siridan kamroq narsani o'z ichiga oladi va ularning ba'zilarida preparat intervalgacha boshqariladi. Bundan farqli o'laroq, bizning protokolimiz 21 kundalik etanol in'ektsiyalarini o'z ichiga olgan oldingi ishlarda tasvirlangan muolajadan foydalangan (Masur va dos Santos, 1988, Souza-Formigoni va boshqalar, 1999, Quadros va boshqalar, 2002a, Quadros va boshqalar, 2002b, Abrahamão va boshqalar, 2011 va Abrahamão va boshqalar, 2012). Surunkali kokain ma'muriyati DeltaFosB ifloslanishini yadro birikmalarida to'planishiga yordam beradigan bo'lsa-da, ventral va dorsal striatumda DeltaFosB mRNK induktsiyasiga bardoshli bo'lishiga yordam beradi (Larson va boshq., 2010). Shunday qilib, biz sotib olish bosqichida tajriba guruhlarimizda farqlar yo'qligi FosB / DeltaFosB induktsiyasiga nisbatan bag'rikenglik bilan bog'liq bo'lishi mumkin deb taxmin qildik, chunki ushbu protokolda psixostimulyator va opioidlar uchun ishlatiladigan davrlarga nisbatan ko'proq sotib olish davri bor edi. boshqa tadqiqotlarda.

Nokaut va transgenik sichqonlar yordamida olib borilgan tadqiqotlar FosB mutant sichqonlarini qo'zg'atuvchi lokomotor effektlari va shartli joyni afzal ko'rish kabi kokainga nisbatan munosabatni yaxshilaganligini ko'rsatdi. Bundan tashqari, ushbu mutant sichqonlarda ham bazal, ham kokain bilan ishlaydigan DeltaFosB ning ifodasi mavjud emas (Xiroy va boshqalar, 1997). Bunga javoban, DeltaFosB ning haddan tashqari ekspressiyasi bo'lgan transgenik sichqonlar kokain va morfinning rag'batlantiruvchi ta'siriga sezgirlikni oshirdi (Muschamp va boshq., 2012). Ushbu natijalar DeltaFosB va mukofotlash jarayoni o'rtasidagi yaqin bog'liqlikning to'g'ridan-to'g'ri dalillarini taqdim etdi. Dori vositalarini takroriy ta'sir qilishdan tashqari, surunkali stress kortikolimbik zanjirlarda DeltaFosB ifodasini oshiradi (Perrotti va boshq., 2004). Qizig'i shundaki, DeltaFosB haddan tashqari bosadigan transgenik sichqonlar kepa-opioid agonistining pro-depresif ta'siriga nisbatan kam sezgir bo'lib, bu kemiruvchilarda disforiya va stressga o'xshash ta'sirlarni keltirib chiqaradi (Muschamp va boshq., 2012). Shunday qilib, mukofotlash jarayonidan tashqari, DeltaFosB ham hodisalarning hissiy jihatlarida hal qiluvchi rol o'ynaydi. Ushbu stsenariyda, pulni qaytarib olish FosB / DeltaFosB ekspressionini ham keltirib chiqarishi mumkin, chunki stress giyohvand moddalarni iste'mol qilishning asosiy tarkibiy qismidir. Ushbu nuqtai nazar bizning natijalarimizga mos keladi, chunki FosB / DeltaFosB ekspressioni va sensitizatsiya ko'rsatkichlari o'rtasida o'zaro bog'liqlik yo'q edi, shuningdek, FosB / DeltaFosB ekspressionining ko'payishi faqat chiqishning beshinchi kunida kuzatildi.

Qizig'i shundaki, ba'zi tuzilmalarda, FosB / DeltaFosB guruhining o'sishi EtOH_High va EtOH_Low guruhlarida kuzatilgan bo'lsa-da, oldingi guruhda ko'proq ifodalangan bo'lsa-da, bu o'sish ularning intensivligiga ko'ra turli xil funktsional oqibatlarga olib kelishi mumkinligini ko'rsatmoqda. Ushbu gipoteza FosB / DeltaFosBning bir nechta funktsional rollari bilan izohlanishi mumkin. Masalan, surunkali sur'atda kokain ta'sirida bo'lgan kalamushlar tortib olinadigan davrda yadroda DeltaFosB ifloslanishini kuchaytirdi, bu ta'sir kokain afzal ko'rilganligi bilan ijobiy, ammo yangilik afzal ko'rganligi bilan salbiy bog'liq. Bundan tashqari, tortib olish paytida stress kortikolimbik neyronlarda DeltaFosB ifloslanishini ko'paytirish orqali psixostimulyatorlarga nisbatan munosabatni kuchaytiradi (Nikulina va boshq., 2012). Shunday qilib, DeltaFosB cho'zilgan chekinish paytida yuzaga keladigan hedonik ishlov berish disregulyatsiyasini bashorat qilishi mumkin edi (Marttila va boshqalar, 2007). Boshqa tomondan, stressga qarshi turg'unlik va antidepressant reaktsiyalari ham striatumdagi DeltaFosB yuqori ifodasi bilan bog'liq (Vialou va boshq., 2010). Shunday qilib, EtOH_Highdagi striatumda FosB / DeltaFosB miqdorining ko'payishi etanolning ta'sirchan ta'sirini kuchaytirishi va keyingi dorilar ta'siriga yuqori sezuvchanlik berishi mumkin deb taxmin qilamiz. Boshqa tomondan, EtOH_Low guruhida ko'rilgan FosB / DeltaFosB-ning yanada kuchayishi, ikkala disforiya va stress ta'siriga sezgirlikni kamaytirishi mumkin, bu keyingi dorilar ta'sirining kuchaytiruvchi ta'sirini minimallashtirishi mumkin va natijada bunda yuqori qarshilikni tushuntirishi mumkin. guruh. Qizig'i shundaki, bu paradoks neyrokimyoviy asosga ega edi. Masalan, o'rta umurtqa pog'onasida FosBni haddan tashqari siqib chiqaruvchi transgen sichqonlarda GABA yadro qo'zg'atuvchilarining neyronlarida muu va kapaopioid retseptorlari darajasi oshgan (Sim-Selley va boshqalar, 2011) va bu retseptorlari mos ravishda ortadi va mezolimbik ohangni susaytiradi (Manzanares va boshqalar, 1991 va Devine va boshq., 1993). Bundan tashqari, hujayra tipidagi ifoda FosB / DeltaFosB kuchayganining funktsional oqibatlarini ham tubdan o'zgartirishi mumkin. D1- yoki D2-dagi neyronlarni aks ettiruvchi DeltaFosB-ni sichqonlar yordamida oqlangan tadqiqotda DeltaFosB-ning D1- (lekin D2- da emas) neyronlarida kokainga bo'lgan munosabatni yaxshilaydi (Grueter va boshq., 2013).

Qizig'i shundaki, motor korteksiga nisbatan faqat EtOH_High guruhida FosB / DeltaFosB ekspressioni ko'paygan va bu 5-kunga cheklangan. Kechikishning 18 soatida o'sishning etishmasligi, ushbu mintaqada surunkali etanol ta'siridan keyin FosB / DeltaFosB ekspresiyasida mumkin bo'lgan bag'rikenglik mexanizmi bilan izohlanishi mumkin. Bundan tashqari, bizning natijalarimiz shuni ko'rsatadiki, bu davrda hayvonlar manipulyatsiya qilinmaganiga qaramay, tortishish davrida motor korteksida faol neyrokimyoviy o'zgarishlar mavjud. Bu juda qiziq, chunki bu plastika, hech bo'lmaganda qisman, lokomotor sezgirlikni ta'minlashda rol o'ynashi mumkin. Bir necha kunlik olib tashlanganidan keyin davom etadigan hiperlokomotion bu erda o'rganilmagan bo'lsa-da, bir nechta tadqiqotlar mavjud, shu jumladan bizning laboratoriyamizning oldingi tadqiqotlari, bu sezgir sichqonlarning (ammo sezgir bo'lmagan) ma'lum bir tortishish davridan keyin etanol bilan kurashda harakatni kuchaytirganligini ko'rsatmoqda (Masur va dos Santos, 1988, Souza-Formigoni va boshqalar, 1999, Quadros va boshqalar, 2002a, Quadros va boshqalar, 2002b, Abrahamão va boshqalar, 2011, Abrahamão va boshqalar, 2012, Fallopa va boshqalar, 2012 va Coelhoso va boshqalar, 2013).

Va nihoyat shuni ta'kidlash kerakki, faqatgina EtOH_Low guruhi ventral teimental sohaning oldingi qismida (ammo orqasida emas) FosB / DeltaFosB ifodasini oshirdi. Ushbu bo'limlarning aniq proektsiyalari va neyrokimyoviy profillari mavjud va ularning mukofot olish jarayonida ishtirok etishi bir qancha omillarga bog'liq (Ikemoto, 2007). Masalan, kalamushlarning etanolni o'z-o'zini boshqarishi ventral tegmental maydonning ventral qismi bilan emas, balki orqa bilan bog'liq (Rodd-Henrikks va boshq., 2000 va Rodd va boshqalar, 2004). Bundan tashqari, endokannabinoid tizimi, shuningdek GABA-A, dopaminergik D1-D3 va serotoninergik 5HT3 retseptorlari etanolni izlab topishda muhim rol o'ynaydi (Linsenbardt va Boehm, 2009, Rodd va boshqalar, 2010, Melon va Boehm, 2011b va Hauser va boshq., 2011). Ammo ventral tegramal sohaning old qismida joylashgan GABA-B mukofot olish nuqtai nazaridan muhimdir (Mur va Boem, 2009) va qo'zg'atuvchi lokomotor effektlar (Boehm va boshq., 2002) etanol. Bundan tashqari, oldingi qismidagi xolinergik nikotinik retseptorlari etanol tomonidan qo'zg'atilgan dopamin miqdorini ko'payishiga olib keladi (Ericson va boshqalar, 2008). Shuning uchun, ushbu bo'limlarning aniq profilidan qat'iy nazar, oldingi qismlarda EtOH_Low guruhida ko'rilgan o'zgarishlar mukofotlash jarayoni bilan bog'liq bo'lishi mumkin. Surunkali morfin yoki surunkali stressga duchor bo'lmagan surunkali kokain DeltaFosB ni ventral tegramal sohada, xususan, gamma-aminobutirik kislota (GABA) hujayralarida ko'paytiradi (Perrotti va boshq., 2005). Ushbu fakt EtOH_High sichqonlarining ventral tejamal sohalarida uchraydigan FosB / DeltaFosB normal miqdorini tushuntirishga imkon beradi. Bundan tashqari, ushbu ma'lumotlar, hech bo'lmaganda qisman, EtOH_Low-da chiqarilish paytida FosB / DeltaFosB ifoda etishining ko'payishi moslashuvchan javob sifatida tavsiflanishi mumkinligi haqidagi farazni tasdiqlaydi.

Rekreatsion foydalanishdan giyohvandlikka o'tish davrida kuzatilgan individual farqlar diqqatga sazovordir (Flagel va boshq., 2009, Jorj va Koob, 2010 va Swendsen va Le Moal, 2011). Natijada individual o'zgaruvchanlik bilan bog'liq neyrobiologik xususiyatlarni o'rganish juda muhimdir. Xulq-atvor sensitizatsiyasi - bu giyohvandlikning neyrobiologik xususiyatlarini o'rganish uchun keng tarqalgan hayvon modeli. Ushbu modelning asosi shundaki, dorilarning subyektiv ta'siri ularning takroriy ta'sir qilishlari davomida ortadi. Qabul qilinganidan so'ng, lokomotor sensitizatsiyasi uzoq vaqt davom etadi va mezolimbik yo'lidagi morfologik va neyrokimyoviy o'zgarishlar va hissiyot va motor harakati bilan bog'liq bo'lgan bir nechta ensefalik yadrolar bilan bevosita bog'liqdir (Robinson va Kolb, 1999 va Vanderschuren va Pirs, 2010). Kashshoflar tomonidan olib borilgan tadqiqotlar Masur va dos Santos (1988) Shveytsariya sichqonlarida etanol ta'siridagi lokomotor sensibilizatsiyasiga nisbatan katta xatti-harakatlar o'zgaruvchanligi mavjudligini namoyish etdi. O'sha paytdan boshlab, boshqa tadqiqotlar, asosan, dopaminergik bilan bog'liq bo'lgan neyrokimyoviy xususiyatlar va xatti-harakatlarning o'zgaruvchanligi o'rtasidagi muhim bog'liqlikni ko'rsatdi (Abrahamão va boshqalar, 2011, Abrahamão va boshqalar, 2012 va Souza-Formigoni va boshqalar, 1999) va glutamaterjik tizimlar (Quadros va boshqalar, 2002a va Quadros va boshqalar, 2002b). Bundan tashqari, bizning laboratoriyamizda etanol tomonidan qo'zg'atilgan lokomotor sensibilizatsiya paradigmasidan foydalangan holda, sezgirlangan (lekin sezgir bo'lmagan) sichqonlar, kNNNXX (CB1R) kannabinoid retseptorlari turida sezilarli o'sishni ko'rsatdi (Coelhoso va boshqalar, 2013). Bu erda biz EtOH_High va EtOH_Low guruhlari o'rtasida pulni olish paytida FosB / DeltaFosB ifodalarining turli xil shakllarini aniqladik.

Xulosa qilib aytganda, etanolni qo'zg'atuvchi lokomotor sezuvchanligini olish bosqichida kuzatiladigan xatti-harakatlarning o'zgaruvchanligi, tortib olish davrida aniq neyronal plastiklik bilan birga keladi. Qizig'i shundaki, bizning natijalarimiz sezgir va sezgir bo'lmagan sichqonlarda aniqlangan FosB / DeltaFosB namoyon bo'lishining turli xil shakllari surunkali giyohvand moddalarga ta'sir qilish bilan emas, balki ularni olib tashlash davri bilan bog'liq, ehtimol bu FosB / DeltaFosB giyohvand moddalarni transkripsiyasini bardoshliligi bilan bog'liq.

Quyida ushbu maqola bilan bog'liq qo'shimcha ma'lumotlar keltirilgan.

rahmat

RFP va CCC mos ravishda CAPES va FAPESP magistrlik dasturlarini olishdi. CTC, LEM, DXS va JGSJ tomonidan berilgan FAPESP va CNPq.

Manbalar

  •  
  • Korrespondent muallif: Rua Cesário Mota Jr, 61, 12 andar, San-Paulu, SP 01221-020, Braziliya. Tel. / Faks: + 55 11 33312008.
  • 1
  • Ushbu mualliflar ushbu tadqiqotda teng ravishda ishtirok etdilar.

Mualliflik huquqi © 2013 Elsevier Inc.