Dopamin Cuega qaram Qo'rqinchli Konditsioner uchun kerak (2009)

Jonathan P. Fadok, 1,2 Tavis MK Dikerson, 2 va Richard D. Palmiter2 *
J Neurosci. Muallifning qo'lyozmasi; PMC 2010 mart 9 da mavjud.
Nihoyasida tahrirlangan shaklda nashr etilgan:
J Neurosci. 2009 sentyabr 9; 29 (36): 11089-11097.
doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1616-09.2009.

1 Neyrobiologiya va xulq-atvorda magistr dasturi, Vashington universiteti, Sietl, WA 98195
2 Biokimyo bo'limi va Xovard Xyuz tibbiyot instituti, Vashington universiteti, Sietl, WA, 98195
Xat yozishni Richard D. Palmiter, HHMI va Biokimyo bo'limi, Box 357370, Vashingt universiteti, Sietl, WA 98195 deb nomlang. E-pochta: [elektron pochta bilan himoyalangan]
Ushbu maqolaning noshirining so'nggi tahrirlangan versiyasi J Neurosci-da bepul mavjud
Chiqarilgan maqoladan keltirilgan PMCdagi boshqa maqolalarga qarang.

mavhum

Dopamin (Dv) motor harakati, idrok va mukofotni qayta ishlashni o'z ichiga olgan ko'plab xatti-harakatlarga taalluqlidir; Ammo, DTning qo'rquvni qayta ishlashdagi roli bir xildir. Dopamin etishmaydigan (DD) sichqonlarda qo'rquv bilan bog'liq bo'lgan ta'limda DAning rolini o'rganish uchun xavf-xatarli potentsial paradigmada sinovdan o'tkazildi. DA sintezi DN sichqonlarida 3, 4-dihidroksi-L-fenilalanin (L-Dopa) ni qo'llash orqali qayta tiklanishi mumkin, shuning uchun ham DA-tükenmiş yoki qattiq holatda qo'rquvni qayta ishlashga baho berishi mumkin. DD sichqonlarida qo'rquvni kuchaytirib yubordi, ammo L-Dopaning administratsiyasi qorong'ilashuv sharoitidan keyin tiklanishi mumkin edi. Ventral tegmental sohada DA sintezining selektiv virusli qayta tiklanishi DD sichqonlaridagi qo'rquvni o'rganishni to'liq tikladi va bazalateral amigdala qayta tiklangan qisqa muddatli xotiraga proportsional bo'lgan DA neyronlarni qayta tiklashni tikladi, ammo uzoq muddatli xotira yoki zarbani sezgirlash emas. Shuningdek, biz D1 retseptorlari (D1R) va D2 kabi retseptorlari imgaga bog'liq qo'rquvni o'rganish uchun zarur ekanligini namoyish etamiz.
Ushbu topilmalar bir nechta maqsadli hududlarda bir nechta retseptorlari subtipalarida harakatlanadigan QQ qo'rqinchli xotirani barqarorlashtirishga yordam beradi.

Kalit So'z bilan izlash: Dopamin, qo'rquv, xavf-xatarli potentatsiyani boshlash, amigdala, dopamin D1 retseptorlari, dopamin D2 retseptorlari

Kirish

Neyromodulator DA, mukofot bilan bog'liq ta'lim va giyohvandlik bilan shug'ullanish uchun muhimdir (Shultz, 2002, Wise, 2004) va to'plangan dalillar, DT qo'rquv bilan bog'liq bo'lgan ta'lim uchun ham muhim bo'lishi mumkinligini ko'rsatadi (Lamont va Kokkinidis, 1998, Guarraci va boshq. , 1999; Greba va Kokkinidis, 2000, Guarraci va boshqalar, 2000; Greba va boshqalar, 2001; Pezze va Feldon, 2004, Oliveira va boshqalar, 2006). Ventral midbrain loyihasining DA neyronlari qo'rquvni o'rganish uchun muhim ahamiyatga ega va bu miya joylarida ALAR darajalari ko'payish voqealarida (Abercrombie va boshqalar, 1989; Kalivas and Duffy, 1995; Doherty and Gratton, 1997; Inglis va Moghaddam , 1999). Bundan tashqari, ba'zi o'rta midiya DA neuronlari o'zlarining otashinlanishini sterillashtiruvchi ogohlantiruvchi va prognostik belgilarga (Guarraci va Kapp, 1999; Horvitz, 2000, Joshua va boshqalar, 2008) kuchaytiradi. Bundan tashqari, DA ning hipokampus va amigdala kabi xavfli o'rganish uchun muhim bo'lgan joylarda uzoq muddatli potensiatsiyani, xotira bilan bog'liq asosiy neyron korrelyatsiyasini engillashtirgani ko'rsatilgan (Bissiere va boshqalar, 2003; Limon and Manahan-Vaughan, 2006; Swant va Wagner, 2006).

DA neyron fiziologiyasining qo'rquvga duchor bo'lishiga qaramay, DA va uning kontsentratsion retseptorlari qo'rquv bilan bog'liq ta'limda aniq rol o'ynashda davom etmoqda. D1R-shunga o'xshash antagonistlarni tizimli ravishda yoki amigdala ichiga yuborish qo'rqitish bilan bog'liq bo'lgan ta'limni olish yoki ifodalashni taqiqlash; ammo boshqalari ushbu dorilarning ta'siri yo'qligini ko'rsatdi (Guarraci va boshq., 1999; Greba va Kokkinidis, 2000; de Oliveira va boshq., 2006). Bundan tashqari, D1R-shunga o'xshash agonistlar qo'rquvni kuchaytirishi yoki uni kuchaytirishi uchun ko'rsatma berilgan (Guarraci va boshqalar, 1999; Greba va boshq., 2000; Inoue va boshqalar, 2000; de Oliveira va boshqalar, 2006). D2R-shunga o'xshash retseptorlari uchun agonistlar yoki antagonistlardan foydalanganliklari (Guarraci va boshq., 2000; Greba va boshq., 2001; Ponnusamy va boshqalar, 2005; Oliveira va boshqalar, 2006) dan foydalangan tadqiqotlarda bunday o'xshashliklar aniqlandi. Ushbu kelishmovchiliklar xatti-harakatlarning metodologiyasi, kiritilgan dori-dozaga bog'liq ta'sirlari yoki farmakologik vositalarni tanlashda farq bo'lishi mumkin. Misol uchun, DA retseptorlari antagonistlari o'zlarining selektivligida keng farq qiladi, shuning uchun ayrim tadkikotlar D2 retseptorlarini ko'proq selektiv ravishda antagonizatsiya qilish mumkin, boshqalari D2, D3 va D4 retseptorlari (Missale va boshq., 1998) kengroq antagonizatsiyalashgan bo'lishi mumkin.

Qo'rquv bilan bog'liq bo'lgan ta'limda DAning rolini aniqlash uchun biz DA (DD sichqonlari) yo'q sichqonchani, yoki D1R yoki DA D2 retseptorlari (D2R) yo'q sichqonlardan foydalandik va ularni qo'rqitadigan potentsial paradigmada test qildik. Qo'rquv kuchayib borayotgan g'alayon, Pavlusov-qo'rqinchli paradigma bo'lib, unda neytral stimulyator oyoq bosish bilan (Koch, 1999) juftlashtirilgan akustik qo'zg'alish javobida kuchayadi. Qo'rquv kuchayib borayotgan g'alayon ushbu tadqiqotlar uchun ideal paradigma hisoblanadi, chunki u hipoaktiv DD sichqonlarida (Zhou va Palmiter, 1995) o'lchash qiyin bo'lgan muzlash xatti-harakatiga bog'liq emas. DD sichqonlari DA-tanqisligi yoki DA-to'ldiruvchi holatida o'rganilishi mumkinligi sababli, ular o'rganish va xotirani shakllantirishda DA ning rolini o'rganish uchun ideal imkoniyat yaratadi. Bundan tashqari, Cre rekombinatsiyasini virus orqali etkazib berish orqali DD sichqonlarining Th alleli (Hnasko va boshq., 2006) qayta faollashuvi orqali DA signalizatsiyasi aniq maqsadli hududlarga qay tarzda tiklanishi mumkin. Ma'lum maqsadli hududlarga DA ni tanlangan restavratsiya qilish konditsionerlik davrida DA signalizatsiyasi bilan boshqariladigan miya mintaqalarini baholash imkonini beradi.

Materiallar va usullari

Hayvonlar va davolanish
DD sichqonlari ta'rif etilganidek, yaratilgan (Hnasko va boshq., 2006). Qisqacha aytganda, DD (Thfs / fs; DbhTh / +) sichqonlari lox P hududlari bilan o'rab olingan neomitsinga qarshi gen (NeoR) geni Th genasining birinchi introniga kiritilishi orqali inaktivatsiyalangan ikkita funksiya bo'lmagan tirozin gidroksilaz (Th) . Ushbu sichqonlarga bir dopaminli b-gidroksilaz (Dbh) allelini va Th geni maqsadli kiritish bilan bir Dbh allelini ham ega bo'lishadi. Tekshirish hayvonlari eng kamida bitta buzilmaydigan Th aleli va bitta buzilmagan Dbh allelini olib yuradilar. Dopaminerjik katekolaminlarning DD hayvonlarida normalligi va barcha katekolaminlarning darajalari nazorat hayvonlarida normaldir (Zhou va Palmiter, 1995, Szcypka va boshq., 1999). Sichqoncha aralash C57BL / 6 X 129 / Sv genetik fonida saqlandi. Shiddatli gipofagiya tufayli DN sichqonlari kuniga taxminan 50 kunidan boshlab 33 mg / g hajmida (Zhou va Palmiter, 1995) L-Dopa bilan 10 mg / kg dozasida kuniga (ipga) AOK qilindi. Ushbu in'ektsiya 8 uchun 10 soatiga (Szczypka va boshq., 1999) DA funktsiyasini tiklaydi. D1R knockout (KO) va D2R KO sichqonlari (Drago va boshqalar, 1994, Kelly va boshq., 1997) tasvirlangan. Har ikki shtammdan ham C57BL / 6 fonida saqlangan. D1R KO sichqonlaridagi o'sishning kechikishi tufayli ular to'rt hafta davomida sutdan ajratilgan va keyinchalik o'sishni rag'batlantirish uchun chaynashni nemlendirdi. Barcha hayvonlar PCR tahlillari bilan genotiplanadi. Erkak va ayol sichqonlar 2-5 oylik davrda qiziqishlariga qarab tekshirildi. Barcha sichqonchalar oziq-ovqat bilan birga (12LJ12; PMI Feeds, Sent-Luis, MO) va suv bilan ta'minlangan suv bilan harorat nazorati ostida bo'lgan muhitda 5: 5 (yengil: qorong'u) tsikli ostida joylashtirildi. Barcha yurish-turish tajribalari yorug'lik davrida o'tkazildi. Barcha sichqonlarga Milliy Sog'liqni saqlash institutlari va Vashington Institutional hayvonlarni parvarish qilish va ulardan foydalanish qo'mitasi

D2-shunga o'xshash boshqa retseptorlarni qo'rquvni o'rganish uchun muhimligini aniqlash uchun D2R KO sichqonlari 2 mg / kg (ip) da D0.5-shunga o'xshash antagonist etiklopridi (Sigma, Sent-Luis, Mo) qo'llanilgan. Eticlopride 0.9% eruvchanligi bilan eritilib, 10 mL / g ning yakuniy hajmida berildi. D2R yovvoyi turiga (WT) sichqonchani transport vositasiga AOK qilindi.

apparat
Prepulse inhibitsiyasini, boshlang'ich javoblarni va xavf-xatarni kuchaytirgichni boshdan kechirishni o'lchash uchun ovoz chiqaruvchi boshlovchi kameralar (SR-Lab, San Diego Instruments, San-Diego, KA) ishlatilgan. Boshlang'ich javoblar uchun 65 1-msec o'qishlar pulse boshlanishidan boshlab olingan. Shamolga qarshi javobni o'lchash uchun, zarba boshlanishidan boshlab, 500 1-msec o'qishlar o'tkazildi. Javobning tepadagi amplitudasi prepulse inhibisyonini, boshlang'ich javoblarni, qo'rquvni kuchaytirib yubordi va zarba reaktivligini hisoblash uchun ishlatildi. Oq shovqin ovozi kameraning tomida joylashgan yuqori chastotali dinamik tomonidan ishlab chiqarilgan. Fon ovozi doimiy 65 gb darajasida saqlandi. Ovoz darajalari ovoz balandligi o'quvchi (RadioShack, Fort-Uert, TX) dan foydalanib desibellarda (A shkala) o'lchandi. Kalitratsiya bloki (S-Diego Instruments, San-Diego, CA). Nishon sifatida foydalanish uchun boshlang'ich qutining orqa devoriga 8 vattli yorug'lik o'rnatilgan.

Ishga tushirish javob eğrileri
5-daqiqada ishlab chiqilgan davrdan so'ng hayvonlarga ovoz balandliklari ko'tarilgan ettita sinovlar taqdim etildi: 80dan 120 dBgacha, 30 soniyali ITI bilan. Ushbu ketma-ketlik jami 10 sinov uchun 70 marta taqdim etildi. Hech qanday ovoz bo'lmagan bo'sh ishlardan tashqari, barcha sinovlarda ovoz nabotasi 40 msec edi.

Oldindan impuls inhibatsiyasi
Hayvonlarga 10-min habitiyatsiya davri berildi, undan keyin 5 40-msec, 120-dB, pulse-yolli sinovlar taqdim etildi. Keyinchalik sichqonchani 50 sinovlari bilan yoki uchta prepulslik (5, 10 va 15-dB fondan yuqori) sinovlaridan biri bo'lgan boshlang'ich nafas olish jarayonining sinovlari yoki akustik stimulyator bo'lmagan null sinovda taqdim etildi. Ichki intervalli (ITI) o'rtacha 15 soniya (masofa 5-25 soniya). Boshlang'ich sinov 40-msec, 120-dB pulsining oq shovqinidan iborat edi. Prepulse sinovlari 20-msec 70-dB pulsining 75 msec bilan bajarilgan 80, 40 yoki 120-dB intensivligidagi 100-msec davomiyligi bilan jihozlangan. Prepulse inhibisyoni quyidagi formula yordamida har bir prepulse darajasi uchun hisoblandi:% inhibisyon = [(prepulse sinovida o'rtacha boshlang'ich javob / pulse-alohida sinovda o'rtacha boshlang'ich javob) × 100]. DD sichqonlari L-Dopa in'ektsiyasidan keyin 18-24 soatdan keyin DA-tükenmiş holda sinov qilingan.

Qo'rqish kuchayib borayotgan g'alayon (7-kunlik paradigma)
1 kunida (bazaviy), 5-min habitiyatsiyadan so'ng, sichqonlarga test-tasodifiy tartibda buyurtma qilingan 20 seriyali sinovlar berildi, bu esa nishon va nishon shartlari o'rtasida teng taqsimlandi. Yong'oqsiz tekshiruvlar uchun hayvonlarga 40-msec, 105-dB akustik zarba berildi. Tajribali sinovlar uchun hayvonlarga 10-soniyali yoritqichi taqdim etildi, bu 40-msec, 105-dB zarba bilan birga yakunlandi. ITI o'rtacha 120 son (60 oralig'i - 180 soniya).

Trening 2, 4 va 6 kunlari sodir bo'ldi. 10-daqiqada ishlab chiqilgan vaqtdan keyin sichqonlarga 10-MA, 0.2-sonli ayak bilan birgalikda to'xtatilgan yengil nurning 0.5 taqdimoti berildi. ITI o'rtacha 120 son (60 oralig'i - 180 soniya). Sinov seanslari 3, 5 va 7 kunlari sodir bo'ldi va yuqorida tavsiflangan bazaviy sessiya bilan bir xil edi. DD sichqonchalari DA-depleted holatda bo'lgan, 18dan so'nggi L-Dopaning in'ektsiyasidan so'ng, dastlabki tayyorgarlik, trening va test sinovlarida. L-Dopa rasm afsonalarida aytib o'tilganidek, mashg'ulotlardan so'ng AOK qilingan. Quyidagi formuladan qo'rqqan potentsial qo'zg'aluvchanlikni hisoblash uchun foydalanildi:% potentiation = [(sinovlar bo'yicha javoblarning o'rtacha soni / no nuktada ishlamasdan javoblar soni - 24) × 1].

Qo'rqish kuchayib borayotgan g'alayon (3-kunlik paradigma)
1 va 3 kunlari (bazaviy va sinov) 7-kunlik qo'rquv bilan potentsial paradigma uchun tavsiflanganlar bilan bir xil edi. Kun 2 (treningda) sichqonchani 30-mA, 10-sek bo'yinli 0.2-soniya nishonchasi bilan 0.5 juftligini oldi. ITI so'zi 120 soniya (60 oralig'i - 180 soniya) bo'ldi. DD sichqonlari dastlabki tayyorgarlik, treninglar va sinovlar vaqtida DA-ni tugatgan.

Qisqa muddatli xotira
Boshlang'ich va test sessiyalari 7 kunlik paradigma uchun tavsiflanganlarga o'xshardi. 2 kunida, 5-min habituation davridan keyin, 30-soniya 10-soniya juftligi bilan 0.5-soniya, 0.2-mA oyoq bilan birgalikda yakunlandi. ITI o'rtacha 120 son (60 oralig'i - 180). Treningdan so'ng sichqonchani sinashdan oldin 10 daqiqa davomida uy qafasiga joylashtirildi. Qisqa muddatli xotira qo'rqinchli kuchlanish uchun ishlatiladigan formuladan foydalanib baholandi.

Shok sezgirlash
Har bir hayvon uchun qisqa muddatli xotira taymeri va sinov sessiyalari davomida no-ko'rsatgich holatiga javoblar shock sezuvchanligini hisoblash uchun quyidagi formula ishlatilgan:% sensitizatsiya = [(test paytida o'rtacha boshlang'ich javob / boshlang'ich- 1) × 100].

Th gen funksiyasining rekombinatsiyali vositalarini qayta tiklash
Isofluran (1.5-5%) anesteziyalangan sichqonchani stereotaksik vositaga (David Kopf Instruments, Tujunga, KA) joylashtirildi. Ventral tegmental sohada Th zon funktsiyasini tiklash uchun ventral midbrenga ikki tomonlama ravishda AHK1-Cre-GFP virusi (1.2 × 1012 zarrachalari / ml titrlangan) yuborildi (mm: 3.5 orqa tomondan Bregma, 0.5 lateraldan midline , 4.5 ventraldan Bregma, 0.5 mi / yarimisfer). BLA DA ning o'ziga xos restavratsiyasi uchun ikki tomonlama (2, Bregma, 2.1, lateral, midline, 1012 ventraldan Bregma, 1.5 ml / yarim sharni) koinotga kiritilgan rekombinat CAV3.25-Cre virusi (5 × 0.5 zarralar / ml) . Virusli vektorlarning batafsil tavsifi nashr etilgan (Hnasko va boshq., 2006; Zweifel va boshq., 2008). Viruslar bir mikro infuzion nasosga (WPI, Sarasota, FL) biriktirilgan 10-gauge shprits ignasi (Hamilton, Reno, NV) yordamida 32-min davrida AOK qilingan.

Immunohistokimyo
50 mg / ml natriy pentobarbital (0.2-0.3 ml / hayvon) bilan anesteziyadan so'ng sichqonlar fosfat tamponli eritma bilan transkardial perfuziyalangan, keyin fosfat-bufferlangan sho'r suvda 4% paraformaldehid. Dissected miyalar bir kecha-kunduzda 4% paraformaldehidda saqlanib, fosfat-bufferlangan sho'r suvda 30% sukrozda saqlanib, keyin izopentanda tez muzlatilgan edi. Erkin yuruvchi koronal sektsiyalar (30mm) sichqon anti-TH (1: 1000, Chemicon) yoki quyon anti-TH (1: 2000, Chemicon) antikorlari bilan immunostained qilindi. Immunoflurans Cy2 yoki Cy3-konjuge IgG ikkilamchi antikorlari (1: 200, Jekson ImmunoResearch) yordamida erishildi. Vitraylar slaydlarga o'rnatilgan, lamellantirildi va vertikal nurli mikroskop (Nikon) bilan suratga tushirildi.

Statistik tahlil
Qabul qilingan tahlillar takroriy chora-tadbirlar va bir tomonlama ANOVA, Fisher post-hoc va natijalar bo'yicha ta'kidlanganidek, talabalarning t-testlari. Statistik tahlil statistika dasturlari (Statsoft, Tulsa, Oklahoma) yordamida amalga oshirildi.

natijalar

DD sichqonlarining akustik qo'zg'aluvchanligi va oddiy prepulse inhibisyonu bor
Qo'rquv kuchayib borayotgan g'alayon buzilmaydigan akustik chalg'itadigan javoblar va sensorimotor eshiklarni talab qiladi. Akustik qo'zg'aluvchan javob DA ning yo'qligida o'zgarib borishini aniqlash uchun DD sichqonlarining DA-tugatilgan (18dan L-Dopadan keyin 24 soatgacha bo'lgan) javoblari bir nechta desibel tovush darajalariga javob berildi va o'lchovlar bilan solishtirildi (Fig. 1A). Yinelenmiş choralar ANOVA, genotipin asosiy ta'siri yo'qligini va genotip va tovush darajasi o'rtasida muhim ta'sir o'tkazish yo'qligini ko'rsatdi.

Shakl 1
DA qo'rquvdan kuchli hayratlanishni o'rganish uchun juda muhimdir. A, Boshqaruvning (n=10, qora kvadratchalar) va DD sichqonlarining (n=10, ochiq kvadratchalar) turli tovush intensivliklariga akustik hayratga javobi. Javoblar ixtiyoriy birliklarda xabar qilinadi. B, Prepulse inhibisyonu nazorat (n = 3, qora bar) va DD sichqoncha (n = 10, ochiq bar) 10 turli prepulse intensivligida sinovdan o'tkazildi. Yulduzlar p<0.05, takroriy o'lchovlar ANOVA ni bildiradi. C, 7 kunlik qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanarli paradigmani tasvirlaydigan sxema. Boshlang'ich va sinov kunlarida sichqonlar psevdor tasodifiy holatda 10 ta taqdimotni (40 ms sekundlik 105 dB qo'zg'atuvchi zarba) va 10 ta prezentatsiyani (qo'rqinchli zarba bilan birga tugaydigan 10 soniyali yorug'lik signali) oldilar. buyurtma. Mashg'ulot kunlarida sichqonlar 10 soniya davom etgan, 10 mA oyoq zarbasi bilan birga tugaydigan 0.5 soniyali yorug'lik signalining 0.2 juftligini oldi. Sinov kunlarida o'rganish hech qanday sinovlar bilan solishtirganda potentsiallik ulushi sifatida baholandi. Treningdan 10 soat o'tgach (3 va 2-kun) L-Dopa berilgan D, DD sichqonlari (n = 4, ochiq barlar) o'rgana olmadi (1 va 2-test). Biroq, DD sichqonlari mashg'ulotdan so'ng darhol AOK qilinganida (6-kun) ular qo'rquvni kuchaytiruvchi qo'rquvni ko'rsatdilar (Test 3). Yulduzlar p<0.05, takroriy o'lchovlar ANOVA ni bildiradi. E, o'quv mashg'ulotlari paytida zarba reaktivligini o'lchash (Boshqaruv n = 10, qora chiziqlar; DD n = 10, ochiq barlar). Javoblar ixtiyoriy birliklarda xabar qilinadi. F, DA muhim bo'lgan kritik vaqt davrini aniqlash uchun ishlatiladigan 3 kunlik qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanarli paradigmani tasvirlaydigan sxema. Barcha 30 ta zarba-shok juftligi bir mashg'ulot kunida berildi va DD sichqonlari mashg'ulotdan so'ng darhol, 1 soat yoki 3 soatdan keyin L-Dopa bilan davolandi. G, Faqat nazorat (n = 8, qattiq qora chiziqlar, C) va mashg'ulotdan so'ng darhol AOK qilingan DD sichqonlari (n = 7, vertikal chiziqlar, 0 soat) sinov kunida qo'rquvni kuchaytirgan hayratlanarliligini ko'rsatdi. Qo'rquvni kuchaytiruvchi qo'rquv darajasi L-Dopa 1 soat (n = 6, diagonal chiziqlar) yoki 3 soat (n = 6, ochiq bar) mashg'ulotidan so'ng berilgan DD sichqonlarida kuzatilganidan sezilarli darajada yuqori edi. Yulduzchalar boshlang'ich, Fisher post-hoc bilan solishtirganda p<0.05 ni bildiradi. Xabar qilingan barcha qiymatlar o'rtacha ± SEMDA-ni yo'qotgan DD va nazorat sichqonlari ham sensorimotor eshiklardagi kamchiliklarni aniqlash uchun ishlatiladigan impulsdan oldingi inhibisyon paradigmasida sinovdan o'tkazildi. DD sichqonlarida impulsdan oldingi inhibisyon kuchaytirildi (1B-rasm; takroriy o'lchovlar ANOVA, genotip: F1, 18 = 5.37; p<0.05; prepuls darajasidagi o'zaro ta'sirga ko'ra muhim genotip aniqlanmadi). Ushbu ma'lumotlar shuni ko'rsatadiki, DD sichqonlarida qo'zg'alish reaktsiyalarida nuqsonlar yo'q yoki DA yo'qolgan holatda sensorimotor kirish mexanizmlarida pasayish yo'q va ulardan qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanarli tajribalarda foydalanishni tasdiqlaydi.

Dopamin qo'rquvni kuchaytirib yuboradigan hayratni o'rganish uchun juda muhim vaqtga to'g'ri keladi

DA qo'rquvni tartibga solish vazifasini o'rganish uchun zarur yoki yo'qligini aniqlash uchun DD va nazorat sichqonlari 7 kunlik qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanarli paradigmaga duchor qilindi (1C-rasm). DD sichqonlari o'qitildi va DA dan kamaygan holatda sinovdan o'tkazildi. Treningdan 24 soat o'tgach sinovdan o'tkazilganda, nazorat sichqonlari DD sichqonlarida kuzatilmagan bir martalik mashg'ulotdan so'ng qo'rquvdan kuchli hayratlanishni ko'rsatdi (1D-rasm; takroriy o'lchovlar ANOVA, genotip, F1, 18 = 7.4590, p<0.05). Qo'shimcha mashg'ulotdan so'ng ham, DD sichqonlari qo'rquvni kuchaytiradigan hayratni ifoda eta olmadilar, nazorat sichqonlari esa kuchli o'rganishni davom ettirdilar. Qizig'i shundaki, 6-kuni mashg'ulotdan so'ng darhol L-Dopa berilganda, DD sichqonlari qo'rquvni kuchaytirgan qo'rquvni ko'rsatdi, bu boshlang'ichdan sezilarli darajada yuqori (bir tomonlama ANOVA F1, 18 = 9.1999, p<0.01) va nazorat darajasidan farq qilmadi ( 1D-rasm). DD va nazorat sichqonlari uchun mashg'ulot kunlaridagi zarba reaktivligi har qanday mashg'ulot kunida genotiplar o'rtasida sezilarli darajada farq qilmadi, bu DD sichqonlarida o'rganish tanqisligi oyoq zarbasini seza olmaslik bilan bog'liq emasligini ko'rsatadi (1E-rasm). Kritik vaqt oynasini tavsiflash uchun. DA harakati uchun qo'shimcha tadqiqot L-Dopani qabul qilish vaqtini o'zgartirdi. DD va nazorat sichqonlariga 30 yorug'lik zarbasi juftligidan iborat mashg'ulot o'tkazildi (1F-rasm) va keyin L-Dopa bilan mashg'ulotdan keyin darhol, 1 soat yoki 3 soatdan keyin AOK qilindi va ular 24 soatdan keyin sinovdan o'tkazildi. Treningdan so'ng darhol AOK qilingan DD sichqonlari sinov kunida xuddi nazoratdagi kabi kuchli qo'rquvni kuchaytirgan hayratni ifodaladi, holbuki L-Dopa bilan AOK qilingan DD sichqonlari mashg'ulotlardan 1 soat yoki 3 soat o'tgach o'rganmagan (1G-rasm; takroriy o'lchovlar ANOVA; davolash × sessiya F3, 23 = 5.1032, p<0.01). Ushbu ma'lumotlar shuni ko'rsatadiki, DA qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanarli paradigmada o'rganish uchun cheklangan vaqt oralig'ida zarur. Biroq, DA qo'rquv xotirasini ifodalash uchun zarur emas, chunki DD hayvonlari doimo DA yo'qligida sinovdan o'tgan. Bundan tashqari, DA ning yo'qligi zarba reaktivligini buzmaydi.

D1R qo'rquvni kuchaytirgandagi boshmoq uchun kerak

Qo'rquvni kuchaytiruvchi qo'rquv uchun qaysi DA retseptorlari kerakligini o'rganish uchun biz birinchi navbatda D1R KO sichqonlarini tahlil qildik. D1R KO va nazorat, yovvoyi tipdagi (WT) sichqonlar DD sichqonlari uchun ta'riflanganidek, qo'zg'alish zarbasi intensivligining bir necha darajalarida sinovdan o'tkazildi (2A-rasm). Sinovdan o'tkazilgan har qanday tovush darajasida D1R KO va WT sichqonlari o'rtasida sezilarli farq yo'q edi, bu D1R KO sichqonlari buzilmagan akustik hayratga javob berishini ko'rsatadi. Oldingi tadqiqotlar bilan kelishilgan holda, biz D1R KO sichqonlarida buzilmagan prepulse inhibisyonunu kuzatdik (Ralph-Williams va boshq., 2002). 7 kunlik qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanarli paradigmada sinovdan o'tkazilganda, D1R KO sichqonlari sinov kunlarining birortasida o'rganishni ifoda eta olmadi (2B-rasm; takroriy o'lchovlar ANOVA genotipi × F3 sinov kuni, 48 = 6.28; p<0.01), WT esa sichqonlar 2 va 3 sinov kunlarida sezilarli qo'rquvni kuchaytirgan qo'rquvga ega edi (p<0.05 va p<0.01, nazoratning boshlang'ich darajasi mos ravishda 2 va 3-testga nisbatan, Fisher post-hoc). D1R KO sichqonlari barcha uch mashg'ulot kunida WT ga qaraganda ko'proq zarba reaktivligiga ega edi (2C-rasm; takroriy o'lchovlar ANOVA, genotip F1, 16 = 10.18; p<0.01; muhim genotip × mashg'ulot kuni kuzatilmadi). Shunday qilib, D1R KO sichqonlari WT sichqonlari bilan solishtirganda oyoq zarbasiga yuqori darajada javob bergan bo'lsa-da, ular 3 kunlik mashg'ulotdan keyin ham qo'rquvni kuchaytiruvchi qo'rquvni sezilarli darajada buzgan. Ushbu ma'lumotlar D1R KO hayvonlarida o'rganishning buzilishini ko'rsatadi va D1R ning qo'rquvga bog'liq bo'lgan sharoitda DA ta'sirini vositachilik qilishda ishtirok etadi. 2-rasm D1R KO sichqonlari o'rganishni sezilarli darajada buzgan. A, D1R WT (n=9, qora kvadratlar) va KO (n=9, ochiq kvadratlar) sichqonlarining akustik hayratga javobi. B, D7R sichqonlari bilan 1 kunlik qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanarli paradigma natijalari. D1R WT sichqonlari (n=9, qattiq qora chiziqlar), lekin D1R KO sichqonlari (n=9, ochiq barlar) emas, 3-sinov kunida qo'rquv kuchli qo'rquvni ko'rsatdi. Yulduzlar KO ni WT bilan solishtirganda p<0.01 ni bildiradi, Fisher post- hoc. C, zarba reaktivligini o'lchash. D1R KO sichqonlari (n = 9, ochiq bar) WT (n = 9, qattiq barlar) dan ko'ra oyoq zarbasiga ko'proq javob beradi. Yulduzlar p<0.05, takroriy o'lchovlar ANOVA ni bildiradi. Xabar qilingan barcha qiymatlar o'rtacha ± SEMdir. Qo'rqinchli javoblar va zarba reaktivligi uchun raqamlar ixtiyoriy birliklarda keltirilgan.

Qo'rqinchli kuchlanish D2R KO sichqonlarida saqlanib qoladi, ammo boshqa D2-o'xshash retseptorlari

D2-shunga o'xshash retseptorlari qo'rquv bilan kuchayib borgan boshlash uchun kerak bo'ladimi-yo'qligini tekshirish uchun, D2R KO va WT sichqonchalari boshlang'ich javob va qo'rquv bilan kuchaygan boshlang'ich sinovlariga duch kelgan. WT va D2R KO sichqonchalari D2R KO sichqonlarining buzilmas akustik qo'zg'alish javobiga (Shot 3A) ega ekanligini ko'rsatib, barcha JB darajalarida sinovdan mos keladigan boshlang'ich javoblarga ega. D1R KO sichqonlariga o'xshagan D2R KO sichqonlarining prepulse inhibisyoni buzilganligini kuzatdik (Ralph-Williams va boshq., 2002). 7-kunlik qo'rquv potentsialli boshlang'ich paradigmentida sinovdan o'tkazilganida, WT va D2R KO sichqonlari ham 3 sinov kunlari (3B) bo'yicha qo'rquv ostida kuchlanishni boshdan kechirib, guruhlar o'rtasida zararli reaktivlik farq qilmadi (shakl 3C). Bu ma'lumotlar D2R ning qo'rquvni kuchaytirgandagi mish-mishlarni o'rganish uchun kerak emasligini ko'rsatadi.

Shakl 3
D2R KO sichqonlari qo'rquvni kuchaytiruvchi qo'rquvga ega. A, D2R WT (n=8, qora kvadrat) va KO sichqonlarining (n=8, ochiq kvadratchalar) akustik hayratga javobi. B, D7R sichqonlari bilan 2 kunlik qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanarli paradigma natijalari. Ikkala WT (n = 8, qattiq novda) va KO (n = 8, ochiq bar) sichqonlari sezilarli darajada qo'rquvni kuchaytirgan qo'rquvni namoyish etdilar. C, Mashq paytida zarba reaktivligini o'lchash (WT, n = 8, qattiq barlar; KO, n = 8, ochiq barlar). D, WT va D2R KO sichqonlari (har biri n = 11) 3 kunlik qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanarli paradigmaga duchor bo'lishdi. D2R KO sichqonlariga mashg'ulotdan oldin etikloprid (0.5 mg / kg) yuborilgan va sinov paytida qo'rquvni kuchaytirgan hayratni ifoda eta olmadi. Yulduzlar p<0.01, KO ga nisbatan WT, Fisher post-hocni bildiradi. Xabar qilingan barcha qiymatlar o'rtacha ± SEM. Qo'rqinchli javoblar va zarba reaktivligi uchun javoblar ixtiyoriy birliklarda xabar qilinadi. Oldingi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, D2-ga o'xshash antagonistlarni tizimli ravishda yoki to'g'ridan-to'g'ri amigdalaga kiritish shartli qo'rquvni buzadi (Guarraci va boshq., 2000; Greba va boshqalar, 2001; Ponnusamy va boshqalar, 2005). Ularning natijalari va bizniki o'rtasidagi tafovutni o'rganish uchun D2R KO sichqonlariga 2 kunlik qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanarli paradigmada mashq qilishdan oldin D0.5R-ga o'xshash antagonist etikloprid (3 mg / kg; yuborilgan ip) berildi. Mashg'ulotdan keyin 24 soat davomida sinovdan o'tkazilganda, avtomobilga kiritilgan WT sichqonlari kuchli qo'rquvni kuchaytiruvchi qo'rquvni ko'rsatdi, holbuki etikloprid kiritilgan D2R KO sichqonlari o'rganishni ko'rsatmadi (3D-rasm; takroriy o'lchovlar ANOVA genotipi × F1 kun, 20 = 7.5698, p<0.05) . Bu natijalar shuni ko'rsatadiki, D1R bilan bir qatorda, D2-ga o'xshash DA retseptorlari oilasining a'zosi, lekin D2R emas, qo'rquvni kuchaytiruvchi qo'rquv uchun zarurdir.

DD va D1R KO sichqonlarida qisqa muddatli xotira buzilgan

DA qo'rquvni kuchaytiradigan vahimani o'rganish uchun mashg'ulotdan so'ng bir soat ichida talab qilinadi. Ushbu tajribalarda, qo'rquvni kuchaytirgan hayratga tushish uchun uzoq muddatli xotira mashg'ulotdan 24 soat o'tgach tahlil qilindi. Qisqa muddatli xotira uchun DA kerakmi yoki yo'qligini sinab ko'rishga kirishdik. DD hayvonlar va boshqaruvlari 2 kunlik paradigmaga duchor bo'ldilar, bu mashg'ulotdan 10 minut o'tgach qisqa muddatli xotirani sinovdan o'tkazdi (4A rasm). Sinov kuni zarba sezgirligi va qisqa muddatli xotira baholandi. Qisqa muddatli xotira ajablantiradigan javoblarning signalga bog'liq o'sishi sifatida aniqlandi, ammo shokni sezgirlash - bu oyoq tovushidan keyin akustik hayratga soladigan javobning kontekstga bog'liq kuchi (McNish va boshq., 1997; Richardson, 2000; Risbro va boshqalar). al., 2008). DD sichqonlari boshqaruvga qaraganda sezilarli darajada kam zarba sezgirligiga ega edi (Shakl 4B, p <0.05; Student's t-test). Xuddi shu tarzda, nazorat sichqonlari DD sichqonlarida bo'lmagan qisqa muddatli xotirani namoyish etdi (4B-rasm, p <0.05, DD versus control, Student's t-test). Ushbu ma'lumotlar DA ning qo'rquvni kuchaytiradigan hayratlanishni qisqa va uzoq muddatli xotirasi uchun talab qilinishini ko'rsatadi. Bundan tashqari, DA zarba sezgirligi bilan tahlil qilinganidek, kontekstga bog'liq bo'lgan qo'rquvni o'rganish uchun zarurdir. Ushbu ma'lumotlar, shuningdek, qo'rquvni konditsioner xotira izini barqarorlashtirish uchun DA muhim davrda zarur bo'lgan oldingi xulosani mustahkamlaydi. 4-rasm Qisqa muddatli xotira va zarba sezgirligi DA ga bog'liq. A, xulq-atvor paradigmasining dizayni. 1-kuni dastlabki hayratlanarli javoblar olindi. 2-kuni sichqonlar 30 ta shok-shok juftligini oldilar va keyin sinovdan oldin 10 daqiqa davomida o'z uylariga qaytarib berildilar. B, Boshqaruv sichqonlari (n = 10, qora chiziqlar) DD (n = 10, ochiq chiziqlar) bilan taqqoslaganda sezilarli darajada zarba sezgirligi va qo'rquvni kuchaytiradi. Yulduzcha p <0.05; Talabaning t-testi. C, WT (n = 7, qora chiziqlar) va D1R KO (n = 7, ochiq chiziqlar) sichqonlar butun zarba sezgirligiga ega. Qisqa muddatli xotira sinovi paytida faqat WT qo'rquvni kuchaytiradi. Yulduzcha p <0.05, KO ga nisbatan WT; Talabaning t-testi. D, WT (n = 8, qora panjara) sichqonlar D2R KO (n = 8, ochiq chiziqlar) ga qaraganda sezilarli darajada katta zarba sezgirligiga ega. WT va D2R KO sichqonlari o'rtasida qo'rquvni kuchaytiradigan darajalar o'xshash. Yulduzcha p <0.05, KO ga nisbatan WT; Talabaning t-testi. Xabar qilingan barcha qiymatlar ± SEM degan ma'noni anglatadi, qaysi retseptor subtiplari DA ning qisqa muddatli xotira va zarba sezgirligidagi rolini o'rganish uchun D1R va D2R KO sichqonlari DD sichqonlari bilan bir xil paradigmada sinovdan o'tkazildi. D1R KO sichqonlarida WT sichqonlariga qaraganda qisqa muddatli xotira darajasi ancha past bo'lgan (4C-rasm, p <0.05; Studentning t-testi); ammo, D1R KO va nazorat sichqonlarida zarba sezgirligi darajalari o'rtasida kontekstga bog'liq ta'lim buzilmaganligini ko'rsatadigan sezilarli farq yo'q edi. D2R KO sichqonlarining zarba sezgirligi darajasi WT ga nisbatan ancha past bo'lgan (4-rasm, p <0.05; Student t-test), ammo qisqa muddatli xotiraning WT va KO sichqonlari darajalari o'rtasida sezilarli farq yo'q edi.

Ko'pincha bazolateral amigdalga DAni qayta tiklash qisqa muddatli xotiraga imkon beradi

Bazolateral amigdala (Marken, 2003, Maren va Quirk, 2004, Sigurdsson va boshqalar, 2007), marka-ga bog'liq qo'rquv xotirasini olish uchun juda muhimdir. Bundan tashqari, bazolateral amigdala funktsiyasini osonlashtirishda DA (Rozenkranz va Greys, 2002; Bissiere va boshq., 2003; Marowsky va boshq., 2005) uchun muhim rol o'ynaydigan dalillar mavjud. Ko'pgina amigdala dorilarida xavf-xatarni kuchaytirishi uchun zarur bo'lgan DD ni tekshirish uchun DD va nazorat sichqonlari CAV2-Cre vektori bilan bazolyar amigdalga (shakl 5A) ikki tomonlama AOK qilingan. Ushbu vektor retrograd orqali AOK maydonidan DA neyronlariga ko'chiriladi, u erda Th gen faolligini tiklaydi (Hnasko va boshq., 2006). Immunohistokimyoviy preparatning TH ning CAV2-Cre-pushti DD sichqonlarining bazolateral amigdalida mavjudligi aniqlandi (Rasm 5J), ammo dorsal striatum va yadro akumbenslarida (Fig. 5G) yo'q. TH birinchi navbatda ventral tegmental hududining kaudal qismlarida kichik sonli neyronlarga qayta tiklandi (shakl 5D). Aniqlangan DD sichqonlarining 10-mkm qismiga nisbatan odatda 30 TH-musbat hujayralar kam edi, bu adabiyotda xabar berilgan oz sonli amigdala prognozli DA neyronlari bilan mos keladi (Ford va boshq., 2006; Lammel va boshq. , 2008; Margolis va boshq., 2008).

Shakl 5
DD sichqonlaridagi endogen TH ekspresyonining hududga xos yangilanishi. A, bazolyar amigdala (BLA) qutqaruv tajribalari uchun qarshi koordinatalarini tasvirlovchi sxematik. DD (n = 7) va nazorat (n = 7) sichqonlari CAV2-Cre vektorlari (0.5 uL / ​​yarim shar) bilan BLA ichiga ikki tomonlama kiritildi. B, ventral tegmental maydon (VTA) qutqaruv tajribalari uchun qarshi koordinatalarini ko'rsatuvchi sxematik. AAV1-Cre-GFP DD ning VTA (n = 0.5) va nazorat sichqonlariga (n = 7) ikki tomonlama (10 uL / ​​yarim sharni) AOK qilingan. Raqamlar Paxinos va Franklin, 2001 dan moslangan. C-E, virus bilan AOK qilingan WT nazoratining ventral midbrainini, BLA-AOK qilingan DD va VTA-AOK DD ko'rsatgan koronal dilimdagi (4 × kattalashtirish) TH boyitishning taqqoslash. V midbrening nazoratida S immunohistokimyosi VTA va substantia nigra pars kompaktasida (SNpc; o'q bilan belgilangan) DA neyronlarning mavjudligini ko'rsatadi. D, BLA-qutqargan DD sichqonlari VTA-da ozgina TH-musbat neyronga ega edi. Inset soxa va jarayonlardagi TH ekspresasini ko'rsatuvchi quti mintaqaning 40 × kengaytmasi. E, VTA-qutqargan DD sichqonlari VTTda asosan TH ekspluatatsiyasiga ega edi. SNpc da TH bilan bo'yashning yo'qligi (o'q bilan ko'rsatilgan). WT virusi nazorati ostida nazoratdan o'tkaziladigan F-H, Coronal bo'limi (4 × kattalashtirish), BLA-qutqaruv va VTA-qutqargan DD sichqonlari, bu dorsal striatum va yadro akumbenslarida TH ekspressini ko'rsatmoqda. F, WT virusi bilan in'ektsiyalangan tekshiruvlar butun ekssuska (o'q bilan ko'rsatilgan) va ventral striatumda TH ekspluatatsiyasiga ega. GA, BLA-qutqargan DD sichqonlar striatumida aniqlangan TH iborasi yo'q. H, VTA-qutqargan DD sichqonlari yadrodagi akumbenslardagi TH ekspirizatsiyasiga ega bo'lib, faqat dorsal striatumda (o'q bilan ko'rsatilgan) bo'yashning kamligi bilan bog'liq. I-K, Coronal bo'limi (10 × kattalashtirish) BLA-da virusni AOK qilingan WT nazoratida, BLA-qutqargan va VTA-qutqargan DD sichqonlarida TH ekspresyonini ko'rsatgan.

Bazolateral amigdala-in'ektsiya qilingan sichqonlar 3 kunlik qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanarli paradigmaga duchor bo'lishdi. Qisqa muddatli xotira va zarba sezgirligi mashg'ulotdan 10 minut o'tgach baholandi va qo'rquvni kuchaytiruvchi qo'rquv uchun uzoq muddatli xotira mashg'ulotdan 24 soat o'tgach baholandi (6A-rasm). Qizig'i shundaki, bazolateral amigdala kiritilgan DD sichqonlarida faqat qisqa muddatli xotira tiklandi. Qisqa muddatli xotira darajasi nazoratchilar bilan bir xil edi, ammo uzoq muddatli xotira (p<0.05; Student's t-test) va zarba sezgirligi (p<0.05; Student's t-test) nazoratdan sezilarli darajada past edi. Trening davomida zarba reaktivligi darajalari guruhlar o'rtasida bir xil edi (Nazorat: 1613 ± 333, BLA tomonidan qutqarilgan DD: 1758 ± 260). Ushbu ma'lumotlar shuni ko'rsatadiki, asosan ventral tegmental sohaning kaudal tomonidan kelib chiqadigan bazolateral amigdalaga DA proektsiyalari qisqa muddatli qo'rquv xotirasini olish uchun etarli, ammo miyaning boshqa kortikal yoki limbik sohalariga DA proektsiyalari, ehtimol, zarurdir. kontekstli o'rganish va qo'rquv xotirasini uzoq muddatli barqarorlashtirish. 6-rasm Bazolateral amigdala (BLA) bilan qutqarilgan DD sichqonlari qisqa muddatli xotirani tikladi, ventral tegmental hudud (VTA) bilan qutqarilgan DD sichqonlari esa o'rganishni to'liq tikladi. A, Virus bilan yuborilgan WT nazorati (n = 7) va BLA tomonidan qutqarilgan DD sichqonlari (n = 7) 3 kunlik qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanarli paradigmaga duchor bo'ldi. Chapda, BLA tomonidan qutqarilgan sichqonlarda zarba sezgirligi sezilarli darajada past. O'rta, Qisqa muddatli xotira (STM) BLA tomonidan qutqarilgan sichqonlarda nazorat darajasini nazorat qilish uchun tiklandi. To'g'ri, uzoq muddatli xotira (LTM), mashg'ulotdan keyin 24 soat o'tgach baholanadi, BLA tomonidan qutqarilgan sichqonlarda yo'q. B, 10 kunlik qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanarli paradigmada WT nazorati (n = 7) va VTA tomonidan qutqarilgan DD sichqonlari (n = 3) natijalari. Chapda, VTA tomonidan qutqarilgan DD sichqonlarida zarba sezgirligi nazoratdan sezilarli darajada farq qilmadi. O'rta va o'ng, STM va LTM xotira darajalari VTA-qutqaruvchi sichqonlardagi nazorat bilan bir xil edi. Yulduzchalar p<0.05, qutqarishga qarshi nazorat, Student t-testini bildiradi. Xabar qilingan barcha qiymatlar o'rtacha ± SEM hisoblanadi

TSh ventral tegmental hududga qayta tiklash DA neyronlari o'rganish uchun etarli

Ventral midbrendan kelib chiqqan ikkita asosiy DA simlari mavjud; asosan, asosiy nigra pars kompaktalaridan kelib chiqqan mezostriatal o'choq va asosan ventral tegmental hududdan kelib chiqqan mezokortikolimbik o'ch. Mezokortikolimbik o'chirish kontsentratsiyasi (Bjorklund va Dunnet, 2007, Lammel va boshq., 2008), shu jumladan bazaga asoslangan amigdala uchun ogohlantiruvchi qo'rg'oshin uchun muhim bo'lgan miya yadrolari uchun keng miqyosli loyihalar. Uzoq muddatli xotira va zarba sezuvchanligi uchun mezokortikolimbik DA ni to'liq tiklash zarurmi; DD va nazorat sichqonlari endojen Th genini (1B) faollashtirish uchun ventral tegmental hududga AAV5-Cre-GFP vektori bilan ikki tomonlama AOK qilingan.

Immunohistokimyo qaysi DA neyronlari aniqlandi va maqsadlari TH ekspluatatsiyasini tikladi. Qoplanmagan DD sichqonchalarida TH boyitilishi yo'q (Hnasko va boshq., 2006). Immunohistokimyoviy tekshiruv natijasida ventral tegmental sohada AOK qilingan DD sichqonlarining tiklanishi ventral tegmental maydoniga va uning maqsadlariga (Figure 5E, H, K) juda xos edi. Dorsal striatumda THning bo'yashining kamligi aniqlandi. Neyronlarning asosiy nigralaridan hosil bo'lgan DA neyronlari (Fig. 5H), yadro akumbenslari va bazolateral amigdalaning mustahkam TH ekspirtsiyasi mavjud edi (Fig 5H, K).

Ventral tegmental hududga kiritilgan sichqonlarning boshlang'ich amigdala-AOK qilingan sichqonlari (Rasm 3B) kabi bir xil 6-kunlik xavf-potentsial paradigma ta'siriga uchradi. Shok sezgirligi, qisqa muddatli xotira va uzoq muddatli xotira ventral tegmental hududdagi DD sichqonlarining nazorat darajalariga qayta tiklandi. O'quv davomida zarba berishning reaktivligi guruhlar o'rtasida bir xil edi (Nazorat: 1653 ± 268 qarshi VTA-qutqargan DD: 1602 ± 198). Ushbu ma'lumotlarga ko'ra, ventral tegmental hududidan DA prognozlari qisqa va uzoq muddatli kuyida qo'rquv xotirasini shakllantirish uchun hamda kontekstga bog'liq bo'lgan zarba sezuvchanligi uchun etarli.

muhokama

Ushbu natijalar qo'rqinchli tarzda chayqaladigan hayratlanish bilan o'lchanadigan cued-qo'rqinchli shamollash uchun DA talab qilinadi. DD sichqonlari mashqdan keyin DA zudlik bilan tiklanmaguncha qo'rquvni kuchaytirib yubordi. DD sichqonlari ham qisqa muddatli xotirani va zarba sezuvchanligini buzgan. Muhimki, DA-dezinfektsiyalangan DD sichqonlarida prepulse inhibisyoni past emas, bu DA ning yo'qligida sensorimotor gatingizning kamaymasligini ko'rsatmoqda. Avvalgi izlanishlar shuni ko'rsatdiki, DAning uzatilishini kuchaytiradigan psixostimulyatorlar prepulse inhibisyonini kamaytirishi mumkin (Schwarzkopf va boshqalar, 1992; Bubser va Koch, 1994; Ralf va boshq., 1999; Swerdlow va boshqalar, 2006; Doherty et al., 2007) boshqalar dopamin retseptorlarining farmakologik inhibisyonu prepulse inhibisyonunu kuchaytirganini ko'rsatdi (Schwarzkopf va boshqalar, 1993; Depoortere va boshqalar, 1997). Bu topilmalarga muvofiq DD sichqonlari nazorat sichqonlarining prepulse inhibisyonunun kichik, ammo mazmunli o'sishiga ega edi. Bundan oldingi tadkikotlar DA retseptorlarining farmakologik inhibisyonu akustik qo'zg'alish javobini kamaytirishi mumkinligini ko'rsatdi (Davis va Agajanyan, 1976, Schwarzkopf va boshq., 1993). Dopaminning yo'qolib ketgan DD sichqonlari sezilarli o'zgarishlarga duch kelgan emas; Biroq, avvalgi hisobotlarga muvofiq (Schwarzkopf va boshq., 1993), ayniqsa, yuqori stimul intensivligida tekshiruvlarga nisbatan javoblarning kamayishi tendentsiyasi kuzatildi.

Bu erda keltirilgan ma'lumotlar DQ ning ogohlantirishga bog'liq bo'lgan qo'rquv xotirasini olish yoki ifoda etish uchun muhim emasligini aniq ko'rsatib turibdi, chunki DD sichqonlari, oldin L-Dopa in'ektsiyasini kiritganidan keyin darhol qo'rqqan potentsial shov-shuvni ifodalash uchun test sessiyasida DA ni talab qilmaydi ta'lim. Bundan tashqari, tajribalarimiz DA davomida dastlabki stimulyatorni qayta ishlash uchun talab qilinadigan da'volarga qarshi turishadi, chunki DD sichqonlari barcha mashg'ulotlarda dopaminni yo'qotishgan. Buning o'rniga bizning ma'lumotlarimiz, DD sichqonlarining qisqa muddatli xotirani aks ettirmaganligi sababli, XTni xotira izining dastlabki barqarorligi uchun zarur ekanligini ko'rsatib turibdi, va uzoq muddatli xotira faqat L-Dopa darhol beriladi, ammo 1 soat keyin emas ta'lim. Taxminan, DD sichqonlarini L-Dopa bilan mashg'ulotdan so'ng darhol xotira izini barqarorlashtirib, uni uzoq muddatli shaklga kiritish imkonini beradi. Aversive stimullar qo'rqinchli xotirani bunday barqarorlashtirish uchun muhim bo'lgan miya hududlarida ALARA darajasida uzoq vaqt davomida ko'tarilishga olib keladi (Abercrombie va boshqalar, 1989; Kalivas and Duffy, 1995, Doherty and Gratton, 1997, Inglis va Moghaddam, 1999). Ma'lumotlarimizga muvofiq, boshqalar DARning post-training manipulyatsiyasi qo'rquv bilan bog'liq xotirani o'zgartirganligini ko'rsatdi (Bernarerts va Tirelli, 2003; Lalumiere va boshq., 2004; LaLumiere va boshq., 2005).

Bizning topilmalarimiz shuni ko'rsatadiki, ko'p dv retseptorlari subtipalari qo'rquv bilan kuchayib borayotgan hayratlanish uchun zarur. D1R KO sichqonlari qo'rqinchli chayqalishning qisqa muddatli va uzoq muddatli xotiralaridan mahrum bo'lib, bu retseptorlari pastki turiga Dori ta'siriga qo'rquvni o'rganishda ta'sirini kuchaytirishda muhim rolni taklif qiladi. Qiziqarli tomoni shundaki, kontekstga bog'liq bo'lgan qo'rquvni o'rganish D1R KO sichqonlarida mustahkam edi. Ushbu ma'lumotlar D1R shunga o'xshash antagonistlar zarba sezuvchanligiga ta'sir qilmasdan ogohlantirishni qo'rquvni o'rganishni kamaytirishini ko'rsatadigan boshqa ishlarni tasdiqlaydi va bu tajribalarda DMNUMXR (Lamont va Kokkinidis, 1; Guarraci va boshq., 1998) . Bu ma'lumotlar D1999R uchun boshqa omillarga bog'liq ta'lim paradigmalarida muhim rolni ko'rsatadigan ishlar bilan ham mos keladi (Smit va boshq., 1; Eyny va Horvitz, 1998).

D2R KO dahshatli qo'rqinchli mudhish shovqinga ega edi, ammo shok sezgirligi yo'q edi. Greba va boshq. (2001) D2R ichidagi amygdalar antagonizmi shok sezgirlash va qo'rquv bilan kuchaygan boshlang'ichning boshlang'ich chalg'itishga yoki oyoq tovushiga ta'sir ko'rsatmasdan yomonlashishiga olib keldi. D2R ning faollashuvi BLA-da uzoq muddatli potensiatsiyani induktsiyalashga olib keladi, bu ehtimol qo'rqinchli potentsialli boshlang'ich xotirasi uchun juda muhimdir (Bissiere va boshq., 2003). Ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatadiki, D2R marka-qaram qo'rquvni o'rganish uchun zarur emas, balki ushbu DA retseptorlari pastki turi kontekstga bog'liq shok sezgirligi uchun muhimdir. D2R KO sichqonlarining tizimli ravishda D2ga o'xshash antagonistli etikloprid bilan mashg'ulotlarni yuborishdan oldin qo'rquvni kuchaytirib yubordi; shuning uchun ham etikloprid tomonidan inhibe qilingan boshqa D2R o'xshash retseptorlari qo'rquv bilan kuchayib ketgan hayratda juda muhim (Sigala va boshqalar, 1997; Bernarerts va Tirelli, 2003; Laviolette va boshqalar, 2005; Swant and Wagner , 2006). Shunday qilib, D2 shunga o'xshash antagonistlar tomonidan ilgari o'tkazilgan tadkikotlarda dumaloq o'rganishdagi nuqsonlar ushbu dorilarga D2R oilasining boshqa a'zolarini inhibe qilishi mumkin.

Ayniqsa ventral tegmental hududga endogen THni qay tarzda tiklash DD sichqonlaridagi o'rganishni tiklashga olib keldi. Immunohistokimyoviy preparatning TH dagi burchakli striataga emas, balki yadro gilamlari va bazolateral amigdala kabi muhim limbik yadrolarga qayta tiklanganligini ko'rsatdi. Bundan tashqari, asosan nigra pars kompaktasida TH uchun juda oz sonli neyronlar mavjud edi. Ushbu ma'lumotlarga ko'ra, ventral tegmental hudud neyronlaridan AES Cued va kontinental-qo'rqinchli shamollash uchun muhimdir.

OTA-ni bazolateral amigdalga qay tarzda tiklash bilan qisqa muddatli xotirani ifodalovchi sichqon, ammo uzoq muddatli xotira yoki zarbani sezgirlash emas. Avvalgi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, DA GABAergik inhibitori ohangidagi o'zgarishlar orqali amygdala funktsiyasini osonlashtiradi va bu ta'sir D1R yoki D2R (Bissiere va boshq., 2003; Kroner va boshqalar, 2005, Marowsky va boshqalar, 2005) tomonidan mediatsiya qilinadi. Bu erda keltirilgan ma'lumotlardan ko'rinib turibdiki, bazolateral amigdala DA da qo'rquv bilan kuchayib borayotgan hayratlanish uchun qisqa muddatli xotirani olish uchun juda muhim, ammo xotiraning uzoq muddatli barqarorligi uchun etarli emas. Qisqa muddatli xotirani qayta tiklash, ventral tegmental maydondan kelib chiqqan, oddiygina amigdala-prognozli DA neyronlarning kam sonli qismi orqali amalga oshiriladi. Ventral tegmental hududdagi DD sichqonlarida endogen THni qayta tiklash yanada qisqa muddatli va uzoq muddatli xotiraga olib keldi; shuning uchun THning boshqa mezocorticolimbic davrlarini tiklash ehtimol qo'rqinchli tarzda chaqqonlik uchun uzoq muddatli xotira yaratish talab etiladi. Oldingi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, yadro akumbenslari va prefrontal korteks qo'rqinchli sharoitda DAning muhim maqsadlari bo'lishi mumkin (Kalivas va Duffy, 1995; Murphy va boshqalar, 2000; Pezze va boshqalar, 2003; LaLumiere va boshqalar, 2005; Laviolette et X. 2005, Floresco va Tse, 2007). Shuning uchun uzoq muddatli xotirani shakllantirish uchun yadrodagi akumbens yoki prefrontal korteksdagi DA signalizatsiyasi talab qilinishi mumkin.

Xulosa qilib aytganda, bizning ishimizda genetik sichqon modellari, farmakologiya va mintaqaga xos funktsiyani qutqarish uchun foydalanish kerak. Bu topilmalar mukofotni qayta ishlashdan tashqari ushbu neyrotransmitter uchun muhim rolni ta'kidlaydi. Bundan tashZari, bizning tadҮ liyotimiz, kuyish bœyicha xavfli konditsiyalarni ḱo'llash uchun bir nechta miya joylarida bir vaqtning o'zida bir nechta DA retseptorlari ustida ḱarakat ḱilish kerakligini ko'rsatadi. Yaqinda o'tkazilgan tadkikotlar, ventral tegmental maydoni DA neyronlari maqsadli joylashuvi bo'yicha molekulyar va fiziologik xossalarida sezilarli darajada o'zgarganligini ko'rsatdi (Ford va boshqalar, 2006; Margolis va boshqalar, 2006; Bjorklund va Dunnett, 2007; Lammel va boshqalar, 2008; Margolis va boshq., 2008). Bizning gen zonasida bazalateral amigdalga proportsional bo'lgan DA neyronlarida selektiv ravishda qayta faollashtirilgan tajribalar ular boshqa miya hududlariga proportsional bo'lgan DA neyronlarning kafolatlari emas, balki kichik, tanlangan ventral tegmental hudud neyronlari populyatsiyasi ekanligini ko'rsatdi. Bizning ma'lumotlarimiz, DA neyron populyatsiyalarining heterojenitesini ko'rsatadigan ishlar bilan birlashib, bu alohida A DA davrlarining har birining rolini tushunish kerakligini ta'kidlaydi. Qo'rquv bilan bog'liq o'rganishni o'z ichiga oladigan DA ning ko'plab qiziqish va fiziologik funktsiyalari haqidagi bilimlarni kengaytirish travmadan keyingi stress buzilishi, obsesif-kompulsiv buzuqlik va umumiy xavotirlik buzilishi kabi qo'rquv bilan bog'liq bo'lgan keng tarqalgan tartibsizliklarni yaxshiroq tushunishga olib kelishi mumkin.

rahmat

Ushbu tergovni qisman tibbiyot fanlari Milliy instituti va NIH Umumiy Tibbiyot Institutlari Milliy Institutlari Grant 32 R07270 GM 4-25dan TXTNUMX GM058501, Milliy Sog'liqni Saqlash Xizmati, Milliy Tadqiqot Xizmati Mukofotlari tomonidan qo'llab-quvvatlandi. Albert Kintananing gistologiya bo'yicha yordami va Valerie Wall-ga sichqoncha kolonlarini parvarish qilish uchun foydali maqolalar uchun Ilene Bernstein, Lisa Beutler, Charlz Chavkin va Larri Zweifelga minnatdorchilik bildiramiz. Shuningdek, CAV05 va Metyu AAV2 virusi uchun doktor Migel Chillon (Barselona Universitat Autonoma da CBATEG vektor ishlab chiqarish birligi) ga rahmat.

Manbalar

1. Abercrombie ED, Keefe KA, DiFrischia DS, Zigmond MJ. Striatumda in vivo dopaminning tarqalishi, stressning differensial ta'siri, nukleus akumbenslari va medial frontal korteks. J Neurochem. 1989; 52: 1655-1658. [PubMed]
2. Bernaerts P, Tirelli E. Dopamin D4 retseptorlari agonisti PD168,077 ning C57BL / 6J sichqonlarida inhibitiv qochishdan o'rganilgan javobning xotira konsolidatsiyasiga yordam beruvchi ta'siri. Behav Brain Res. 2003;142:41–52. [PubMed]
3. Bissiere S, Humeau Y, Luthi A. Dopamin bachadon inhibatsiyasini bostirish yo'li bilan lateral amigdalada LTP induksiyasini boshlaydi. Nat Neurosci. 2003; 6: 587-592. [PubMed]
4. Bjorklund A, Dunnett SB. Miyada dopamin neyron tizimi: yangilanish. Trends Neurosci. 2007; 30: 194-202. [PubMed]
5. Bubser M, Koch M. Sichqonlarning akustik qo'zg'alish reaktsiyasining prepulse inhibisyonu medial prefrontal korteksning 6-gidroksidopaminli lezyonlari bilan kamayadi. Psixofarmakologiya (Berl) 1994; 113: 487-492. [PubMed]
6. Davis M, Aghajanian GK. Apomorfin va haloperidolning kalamushlarda akustik qo'rqitish reaktsiyasiga ta'siri. Psixofarmakologiya (Berl) 1976;47:217-223. [PubMed]
7. de Oliveira AR, Reimer AE, Brandao ml. Dopamin D2 retseptorlari mexanizmlari shartli qo'rquv ifodalangan. Farmakol Biochem Behav. 2006; 84: 102-111. [PubMed]
8. Depoortere R, Perrault G, Sanger DJ. Sichqonlarda qo'zg'alish refleksining impulsdan oldingi inhibisyonining kuchayishi: antipsikotik faollikni aniqlash modeli sifatida protsedurani farmakologik baholash. Psixofarmakologiya (Berl) 1997; 132: 366-374. [PubMed]
9. Doherty JM, Masten VL, Pauell SB, Ralf RJ, Klamer D, Low MJ, Geyer MA. Dopamin D1, D2 va D3 retseptorlari subtiplarining kokainning sichqonlarda prepuls inhibisyoniga buzuvchi ta'siriga qo'shgan hissasi. Neyropsixofarmakologiya. 2007;12:12.
10. Doherty MD, Gratton A. Yadro akumbenslaridagi NMDA retseptorlari yadro akumbenslari va ventral tegmental sohada stressdan kelib chiqqan dopaminning chiqarilishini modulyatsiya qiladi. Sinaps. 1997;26:225–234. [PubMed]
11. Drago J, Gerfen CR, Lachowicz JE, Steiner H, Hollon TR, Love PE, Ooi GT, Grinberg A, Li EJ, Huang SP va boshqalar. D1A dopamin retseptorlari mavjud bo'lmagan mutant sichqonchaning o'zgartirilgan striatal funktsiyasi. Proc Natl Acad Sci US A. 1994;91:12564–12568. [PMC bepul maqola] [PubMed]
12. Eyny YS, Horvitz JC. Ishtahani sozlashda D1 va D2 retseptorlarining qarama-qarshi rollari. J Neurosci. 2003;23:1584–1587. [PubMed]
13. Floresco SB, Tse MT. Bazolateral amigdala-prefrontal kortikal yo'lda inhibitiv va qo'zg'atuvchi uzatishning dopaminergik regulyatsiyasi. J Neurosci. 2007;27:2045–2057. [PubMed]
14. Ford CP, Mark GP, Uilyams JT. Mesolimbik dopamin neyronlarining xususiyatlari va opiyol inhibatsiyasi maqsadli joylashuvga qarab o'zgaradi. J Neurosci. 2006; 26: 2788-2797. [PubMed]
15. Greba Q, Kokkinidis L. Dopamin D1 retseptorlari antagonisti SCH 23390 ning periferik va intraamigdalar administratsiyasi qo'rquvni kuchaytiradi, ammo zarba reaktivligini yoki akustik qo'rquvning zarba sezgirligini bloklaydi. Xulq-atvor nevrologiyasi. 2000;114:262–272. [PubMed]
16. Greba Q, Munro LJ, Kokkinidis L. Qo'rquvni kuchaytiruvchi qo'rquv bilan o'lchanadigan klassik shartli qo'rquv ifodasida ventral tegmental hududning xolinergik muskarinik retseptorlarining ishtiroki. Miya Res. 2000;870:135–141. [PubMed]
17. Greba Q, Gifkins A, Kokkinidis L. Amigdaloid dopamin D2 retseptorlarini inhibe qilish qo'rquvni kuchaytiruvchi qo'rquv bilan o'lchanadigan hissiy o'rganishni buzadi. Miya Res. 2001;899:218–226. [PubMed]
18. Guarraci FA, Kapp BS. Uyqudali quyonda differentsial pavlitsion qo'rqinchli sharoitda ventral tegmental soha dopaminerjik neyronlarning elektrofizyologik xarakteristikasi. Behav Brain Res. 1999; 99: 169-179. [PubMed]
19. Guarraci FA, Frohardt RJ, Kapp BS. Amigdaloid D1 dopamin retseptorlari Pavloviya qo'rquvini tartibga solishda ishtirok etishi. Miya Res. 1999;827:28–40. [PubMed]
20. Guarraci FA, Frohardt RJ, Falls WA, Kapp BS. D2 dopamin retseptorlari antagonistining intra-amigdaloid infuziyalarining Pavlovian qo'rquv sharoitlariga ta'siri. Xulq-atvor nevrologiyasi. 2000;114:647–651. [PubMed]
21. Hnasko TS, Perez FA, Scouras AD, Stoll EA, Gale SD, Luquet S, Phillips PE, Kremer EJ, Palmiter RD. Dopamin etishmovchiligi bo'lgan sichqonlarda nigrostriatal dopaminni Cre rekombinaz vositachiligida tiklash gipofagiya va bradikineziyani qaytaradi. Proc Natl Acad Sci US A. 2006;103:8858–8863. [PMC bepul maqola] [PubMed]
22. Horvits JC. Mesolimbokortikal va nigrostriatal dopaminning mukofotsiz hodisalarga javoblari. Neyrologiya. 2000;96:651–656. [PubMed]
23. Inglis FM, Mogaddam B. Amigdala dopaminerjik innervatsiyasi stressga katta ta'sir ko'rsatadi. J Neurochem. 1999; 72: 1088-1094. [PubMed]
24. Inoue T, Izumi T, Maki Y, Muraki I, Koyama T. Dopamin D (1/5) antagonisti SCH 23390 ning shartli qo'rquvni olishga ta'siri. Pharmacol Biochem Behav. 2000;66:573–578. [PubMed]
25. Joshua M, Adler A, Mitelman R, Vaadia E, Bergman H. Midbrain dopaminergik neyronlar va striatal kolinergik internoronlar turli xil mumtoz konditsionerlik sinovlari turli davrlarida mukofot va hodisalar o'rtasidagi farqni aniqlaydi. J Neurosci. 2008; 28: 11673-11684. [PubMed]
26. Kalivas PW, Duffy P. Dopamin transmissiyasini stress bilan yadro aksumbensining qobig'ida selektiv faollashuvi. Brain Res. 1995; 675: 325-328. [PubMed]
27. Kelly MA, Rubinshteyn M, Asa SL, Chjan G, Saez C, Bunzow JR, Allen RG, Hnasko R, Ben-Jonatan N, Grandy DK, Low MJ. Dopamin D2 retseptorlari yetishmaydigan sichqonlarda gipofiz laktotrof giperplaziyasi va surunkali giperprolaktinemiya. Neyron. 1997;19:103–113. [PubMed]
28. Ko`ch M. Qiziqishning neyrobiologiyasi. Prog Neurobiol. 1999; 59: 107-128. [PubMed]
29. Kroner S, Rosenkranz JA, Greys A.A., Barrionuevo G. Dopamin in vitro bazolateral amigdala neyronlarning eksitabilitesini modulyatsiya qiladi. J Neurophysiol. 2005; 93: 1598-1610. [PubMed]
30. Lalumiere RT, Nguyen LT, McGaugh JL. Dopaminning mashg'ulotdan keyingi intrabazolateral amigdala infuziyalari inhibitiv qochish xotirasining konsolidatsiyasini modulyatsiya qiladi: noradrenerjik va xolinergik tizimlarning ishtiroki. Eur J Neurosci. 2004;20:2804–2810. [PubMed]
31. LaLumiere RT, Nawar EM, McGaugh JL. Bazolyar amigdala yoki yadro akumbens qobig'i tomonidan xotira konsolidatsiyasining modulatsiyasi miya hududlarida bir vaqtda dopamin retseptorlari faolligini talab qiladi. Mem. 2005; 12: 296-301. [PMC bepul maqola] [PubMed]
32. Lammel S, Hetzel A, Hackel O, Jones I, Liss B, Roeper J. Ikki mezokortikolimbik dopamin tizimidagi mezoprefrontal neyronlarning o'ziga xos xususiyatlari. Neyron. 2008;57:760–773. [PubMed]
33. Lamont EW, Kokkinidis L. Dopamin D1 retseptorlari antagonisti SCH 23390 ning amigdala ichiga infuzioni qo'rquvni kuchli hayratlanarli paradigmada bloklaydi. Miya Res. 1998;795:128–136. [PubMed]
34. Laviolette SR, Lipski WJ, Greys AA. Medial prefrontal korteksdagi neyronlarning subpopulyatsiyasi dopamin D4 retseptoriga bog'liq bo'lgan bazolateral amigdala kirishi orqali portlash va chastota kodlari bilan hissiy o'rganishni kodlaydi. J Neurosci. 2005;25:6066–6075. [PubMed]
35. Limon N, Manahan-Vaughan D. Dopamin D1/D5 retseptorlari hipokampal uzoq muddatli potentsiallashuv va uzoq muddatli depressiya orqali yangi ma'lumotlarni olish imkonini beradi. J Neurosci. 2006;26:7723–7729. [PubMed]
36. Maren S. Amigdala, sinaptik plastisiya va qo'rquv xotirasi. Ann NY akad Sci. 2003;985:106–113. [PubMed]
37. Maren S, Quirk GJ. Qo'rquv xotirasining neyron signalizatsiyasi. Nat Rev Neurosci. 2004;5:844–852. [PubMed]
38. Margolis EB, Mitchell JM, Ishikava J, Hjelmstad GO, Fields HL. Midbrain dopamin neyronlari: prognozli maqsad potentsial potentsialining davomiyligini va dopamin D (2) retseptorlari inhibishini aniqlaydi. J Neurosci. 2008; 28: 8908-8913. [PubMed]
39. Margolis EB, Lock H, Chefer VI, Shippenberg TS, Hjelmstad GO, Fields HL. Kappa opioidlari prefrontal korteksga chiqadigan dopaminerjik neyronlarni tanlab boshqaradi. Proc Natl Acad Sci US A. 2006;103:2938–2942. [PMC bepul maqola] [PubMed]
40. Marowsky A, Yanagava Y, Obata K, Vogt KE. Interneuronlarning ixtisoslashtirilgan sindromi amigdala funktsiyasining dopaminerjik yordamini yaxshilaydi. Neyron. 2005; 48: 1025-1037. [PubMed]
41. McNish KA, Gewirtz JC, Davis M. Hippokampusning lezyonlaridan keyin kontekstli qo'rquvning dalili: muzlashning buzilishi, ammo qo'rquvni kuchaytiruvchi hayratlanish. J Neurosci. 1997;17:9353–9360. [PubMed]
42. Missale C, Nash SR, Robinson SW, Jaber M, Caron MG. Dopamin retseptorlari: tuzilishdan funktsiyaga. Physiol Rev. 1998;78:189–225. [PubMed]
43. Murphy CA, Pezze M, Feldon J, Heidbreder C. Qobiq shartli stimulga latent inhibisyonni ifodalashda akumbens yadrosining qobig'i va yadrosida dopaminning differentsial ishtiroki. Neyrologiya. 2000;97:469–477. [PubMed]
44. Pezze MA, Feldon J. Mesolimbikning qo'rquv sharoitida dopaminerjik yo'llar. Prog Neurobiol. 2004; 74: 301-320. [PubMed]
45. Pezze MA, Bast T, Feldon J. Shartli qo'rquv uchun kalamush medial prefrontal korteksida dopamin uzatishning ahamiyati. Sereb korteks. 2003;13:371–380. [PubMed]
46. Ponnusamy R, Nissim HA, Barad M. D2-kabi dopamin retseptorlarining tizimli himoyasi sichqonlarda konditsioner qo'rquvni yo'qqa chiqarishga yordam beradi. Mem. 2005; 12: 399-406. [PMC bepul maqola] [PubMed]
47. Ralf RJ, Varti GB, Kelli MA, Vang YM, Caron MG, Rubinshteyn M, Grandy DK, Low MJ, Geyer MA. Dopamin D2, lekin D3 yoki D4 emas, retseptorlarning pastki turi sichqonlarda amfetamin tomonidan ishlab chiqarilgan prepuls inhibisyonining buzilishi uchun juda muhimdir. J Neurosci. 1999;19:4627–4633. [PubMed]
48. Ralf-Williams RJ, Lehmann-Masten V, Otero-Corchon V, Low MJ, Geyer MA. To'g'ridan-to'g'ri va bilvosita dopamin agonistlarining impulsning oldingi inhibisyoniga differentsial ta'siri: D1 va D2 retseptorlarini nokaut sichqonlarida o'rganish. J Neurosci. 2002;22:9604–9611. [PubMed]
49. Richardson R. Qo'rquvning zarba sezgirligi: o'rganilgan yoki o'rganilmagan qo'rquv? Behav Brain Res. 2000;110:109–117. [PubMed]
50. Risbrough VB, Geyer MA, Hauger RL, Coste S, Stenzel-Poore M, Wurst W, Holsboer F. CRF(1) va CRF(2) retseptorlari potentsial qo'zg'alishdan kontekstga kerak, lekin diskret emas. Neyropsixofarmakologiya. 2008; 19:19.
51. Rosenkranz JA, Greys AA. Povlion sharoitida odatda uyg'otuvchi amigdala potentsialining dopamin vositachiligini modulyatsiyasi. Tabiat. 2002; 417: 282-287. [PubMed]
52. Shults V. Dopamin va mukofot bilan rasmiylashish. Neyron. 2002;36:241–263. [PubMed]
53. Shvartskopf SB, Mitra T, Bruno JP. Yangi tug'ilgan chaqaloqlarda dopaminni yo'qotgan kalamushlarda sensorli eshiklar: shizofreniya bilan og'rigan bemorlarda topilmalarning potentsial ahamiyati. Biol Psixiatriya. 1992;31:759–773. [PubMed]
54. Schwarzkopf SB, Bruno JP, Mitra T. Haloperidol va SCH 23390 ning bazal va rag'batlantirilgan sharoitlarda akustik qo'zg'alish va prepulse inhibisyoniga ta'siri. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psixiatriya. 1993;17:1023–1036. [PubMed]
55. Sigala S, Missale C, Spano P. Dopamin D2 va D3 retseptorlarining kalamushdagi o'rganish va xotiraga qarama-qarshi ta'siri. Eur J Pharmacol. 1997;336:107–112. [PubMed]
56. Sigurdsson T, Doyere V, Keyn CK, LeDoux JE. Amigdaladagi uzoq muddatli potentsial: qo'rquvni o'rganish va xotiraning uyali mexanizmi. Neyrofarmakologiya. 2007;52:215–227. [PubMed]
57. Smit DR, Striplin CD, Geller AM, Mailman RB, Drago J, Lawler CP, Gallagher M. D1A dopamin retseptorlari mavjud bo'lmagan sichqonlarning xatti-harakatlarini baholash. Neyrologiya. 1998;86:135–146. [PubMed]
58. Swant J, Vagner JJ. Dopamin tashuvchi blokadasi D1 dopamin retseptorini faollashtirish orqali kalamush hipokampusining CA3 hududida LTP ni oshiradi. Memni o'rganing. 2006;13:161–167. [PMC bepul maqola] [PubMed]
59. Swerdlow NR, Shoemaker JM, Kuczenski R, Bongiovanni MJ, Neary AC, Tochen LS, Saint Marie RL. Old miya D1 funktsiyasi va kalamushlarda sensorimotor eshiklar: D1 blokadasi, frontal lezyonlar va dopamin denervatsiyasining ta'siri. Neurosci Lett. 2006;402:40–45. [PubMed]
60. Szczypka MS, Rainey MA, Kim DS, Alaynick WA, Mark BT, Matsumoto AM, Palmiter RD. Dopamin etishmovchiligi bo'lgan sichqonlarda ovqatlanish harakati. Proc Natl Acad Sci US A. 1999;96:12138–12143. [PMC bepul maqola] [PubMed]
61. Dono RA. Dopamin, o'rganish va motivatsiya. Nat Rev Neurosci. 2004;5:483– 494. [PubMed]
62. Zhou QY, Palmiter RD. Dopaminning etishmaydigan sichqonlari gipoaktiv, adiptik va aphagicdir. Hujayra. 1995; 83: 1197-1209. [PubMed]
63. Zweifel LS, Argilli E, Bonci A, Palmiter RD. NMDA retseptorlarining dopamin neyronlarida plastika va o'ziga qaramlik xatti-harakatlari uchun roli. Neyron. 2008;59:486–496. [PMC bepul maqola] [PubMed]