O'rtacha yuqori yog'li diet yosh sichqonchani sukrozning o'z-o'zini boshqarishini oshiradi (2013)

Tuyadi. Muallifning qo'lyozmasi; PMC 2014 fevral 1 da mavjud.

Nihoyasida tahrirlangan shaklda nashr etilgan:

Tuyadi. 2013 fevral; 61 (1): 19-29.

Onlayn 2012 Sentyabr 27 nashr qilindi. doi: 10.1016 / j.appet.2012.09.021

PMCID: PMC3538965

NIHMSID: NIHMS411020

Dianne P. Figlewicz,^1,² Jennifer L. Jey,² Molli A. Acheson, Irwin J. Magrisso,⁴ Constance H. West,¹ Aryan Zavosh,² Stiven C. Benoît,³ va Jon F. Davis³

mavhum

Yuqorida aytib o'tganimizdek, kattalar kalamushlarida sukroz uchun o'rtacha darajada yuqori yog'li ratsion motivatsiyani oshiradi. Ushbu xamma 5-8 xafta davomida jinsiy balog'atga o'tayotgan erkak sichqonlardagi yuqori yog 'dietasining motivatsion, neyrokimyoviy va metabolik ta'sirini sinovdan o'tkazdik. Biz yuqori yog 'dietasi sukroz uchun javob berishni kuchaytirganini kuzatdik, bu metabolik o'zgarishlar yoki yadrodagi akumbenslarda katekolamin neyrotransmitter metabolitlarida o'zgarishlardan mustaqil edi. Biroq, gipotalamusdagi AGRP mRNA darajalari sezilarli darajada oshdi. AGRP neyronlarining faollashuvi rag'batlantiruvchi harakatlar bilan bog'liqligini va ekzogen (uchinchi kerebroventrikulyar) AGRP administratsiyasining sukroz uchun motivatsiyani sezilarli darajada oshirishiga olib keldi. Ushbu kuzatishlar mediativ gipotalamustagi AGRP ning oshishi va faollashuvining yuqori yog'li parhezlar aralashuvi oqibatida sukroz uchun javob berishning ortishi mumkinligiga ishora qilmoqda. Va nihoyat, pubertal va kattalar kalamushlarida sukroz uchun motivatsiya bilan solishtirdik va pubertal kalamushlarda sukroz uchun ortib borayotgan motivatsiyasi kuzatdik. Bu avvalgi xabarlarga muvofiq, yosh hayvonlar va odamlar kattalar bilan solishtirganda shirin ta'mga nisbatan ko'proq afzaldir. Bizning tadqiqotlarimiz shuni ko'rsatadiki, fon dietasi barkamol hayvonlarning shirin ta'mi uchun rag'batlantirishda kuchli modulyatsion rol o'ynaydi.

Kalit so'zlar: Motivatsiya, oziq-ovqat mukofoti, yuqori yog 'xun, yoshlik

Kirish

Yuqorida aytib o'tganimizdek, o'rta darajada yuqori yog '(31.8%) dietaning qisqa muddatli ta'siri katta yoshli kalamushlarda sukroz uchun motivatsiya o'sishining oshishiga olib keladi (Figlewicz va boshq., 2006). O'tgan o'n yil mobaynida atrof-muhitga va biologik ta'sirlarga yoki ularning sinergiyasiga oziq-ovqat tanqisligi va energetik oziq-ovqat mahsulotlariga bo'lgan g'ayratlarga e'tibor qaratildi. Bu o'tgan yillarda pediatrik semirib ketishning keskin oshgani singari, yoshlar bilan bog'liqlikni kuchaytirdi (Ogden va Kerrol, 2010 yil). Shirin ta'mga ega bo'lish afzalligi, yosh hayvonlarda ham, inson pediatrik populyatsiyasidaKolduell, Osvald va Rid, 2009 yil; Desor va Beauchamp, 1987 yil; Desor, Grin va Maller, 1975 yil; Mennella, Pepino va Reed, 2005 yil; Meyers & Sclafani, 2006 yil)) va oziq-ovqat sanoati uchun bolalar uchun yuqori shakar miqdori bilan paketlangan oziq-ovqat va ichimliklarni loyihalash va sotish uchun asos bo'lib xizmat qiladi. Shu bilan birga, o'simliklar sutida sukrozni rag'batlantirishga qaratilgan ekologik ta'sirlar, masalan, fon ratsioni ta'siri muntazam ravishda baholanmagan.

Joriy hisob-kitoblarga ko'ra, AQShda bolalar va o'smirlarning 10-20% obezOgden va Kerrol, 2010 yil). O'rtacha AQSh aholisi kundalik 336 kkal qo'shilgan shakarni iste'mol qiladi (Milliy rakor instituti amaliy tadqiqoti dasturi). Aholisi kattalarga (19 + yoshi) va pediatrik populyatsiyaga (2-18 yil) ajratilganida bu raqam bolalar va o'smirlar uchun biroz yuqoriroqdir va kattalar uchun biroz past bo'ladi. Ergenler uchun, qo'shilgan shakarlarning aksariyati soda, energetik ichimliklar va sport ichimliklar (National Cancer Institute Applied Research Program) dan keladi. Keng ko'lamli muntazam tahlil va meta-tahlillar shuni ko'rsatdiki, alkogolsiz ichimliklar iste'moli energiya iste'mol qilish va tana vaznini oshirish bilan bog'liqVartanian, Shvarts va Braunell, 2007 yil). O'smirlar aholisi (14-18 yosh) har kuni 444 kkal qo'shilgan shakarni iste'mol qiladilar va 9 yoshdan 13 yoshgacha bo'lgan bolalar har kuni 381 kkal qo'shilgan shakarni iste'mol qiladilar (Milliy Saraton Instituti amaliy tadqiqotlar dasturi). Ushbu qo'shimcha iste'mol qisman yosh odamlarda kattalarga nisbatan shirinlik afzalligi oshishi bilan bog'liq bo'lishi mumkin (Kolduell, Osvald va Rid, 2009 yil; Desor va Beauchamp, 1987 yil; Desor, Grin va Maller, 1975 yil; Mennella, Pepino va Reed, 2005 yil). Tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, 9 va 15 yoshdagi bolalar katta yoshdagi konsentratsiyalarda shakar eritmalarini kattalar namunasining afzal konsantratsiyasidanDesor, Grin va Maller, 1975 yil). Uzunlamasına tekshiruvlar ushbu bolalarning o'n yil keyin hayotidagi shirin imtiyozini sinovdan o'tkazdi, bu erda ularning afzalligi kamaydi va kattalar ustunligiga nisbatan sezilarli darajada farq qilmadi (Desor va Beauchamp, 1987 yil). Tadqiqotlar shuningdek, bolalarda onalar bilan taqqoslaganda yuqori sukroz konsentrasiyalarini afzal ko'rdiMennella, Pepino va Reed, 2005 yil). Bu shuni ko'rsatadiki, bolalik davridagi shakarning afzalligi genetika bilan bog'liq emas, balki rivojlanish hodisasini aks ettirishi mumkin. Tadqiqotlar, kalamushlarda bu sukrozning yuqori darajasini (Meyers & Sclafani, 2006 yil).

Ko'pgina CNS tizimlari va bog'lanishlari odamlarda va kemiruvchilarda o'simliklar davrida plastika hisoblanadi, jumladan, mezokortikolimbik tizim va yadroviy akumbensdagi dopaminergik faollik, mukofot va motivatsiya vositasi uchun muhim sayt (Ikemoto va Panksepp, 1996 yil; Kelley va Berrij, 2002 yil) (Qarang Andersen va Teicher [2008] yaqinda ko'rib chiqilgan). Ushbu anatomik va neyrokimyoviy o'zgarishlarning funktsional ahamiyati hozirda oshkor bo'ladi. Bolaños va uning hamkasblaridan o'tkazilgan so'nggi tadqiqotlar va boshqalar dopaminni qayta ishlovchi transporter antagonisti metilphendat (Ritalin) sutidan keyin sutdan ajratish, juvenil kemiruvchilarda davolashdan keyingi ta'sirini o'rganib chiqdi. Kattalar hayotida o'zgaruvchan neyroximiya va xatti-harakatlar to'g'risida metilfenidat bilanBolaños va boshq., 2003; Bolanos, Glatt va Jekson, 1998 yil; Brandon, Marinelli, Beyker va Oq, 2001 yil; Brendon, Marinelli va Oq, 2003 yil). Tadqiqotlar turli hayvon modellari bo'yicha o'rganilganligi sababli butunlay izchil bo'lmasa-da, bu ishlar birgalikda o'smirlik davrining dopamin funktsiyasini o'zgartirish uchun rivojlanish oynasi kabi ko'rinadi. Oziq-ovqat - bu ventral tegmental hududdan (VTA) proektoriyalardan yadro gabaritlari uchun dopamin chiqishi uchun tabiiy stimuldir va kalamush tomonidan sukrozni operativ qabul qilish dopaminning juda keskin tarzda tarqalishiga olib keladiRoitman va boshq., 2004). Sukroz uchun motivatsiya nukleus akumbens dopaminning kuchayishi bilan bog'liqligini va ekologiyani ta'siridan modulyatsiya qilish bu o'smirlik davrida, issiqda peri-pubertal bosqichda noyob sezgir bo'lishi mumkinligini taxmin qilamiz.

Bolalar va yosh kemiruvchilarda shirin ta'mga bo'lgan yuksak imtiyozni hisobga olib, biz o'smir kemiruvchilarda sukroz uchun motivatsiya parametrlarini aniqlash muhimligini his qildik. Ushbu ketma-ketlikdagi tadqiqotlar natijasida sutdan keyin sutdan yoshga o'tish davridan boshlab o'sadigan jinslardagi sukroz uchun yuqori yog 'dietasi aralashuvining motivatsiyaga ta'siri baholandi. Keyinchalik metabolik va CNS baholari metabolik, endokrin yoki dietaning aralashuvi bilan bog'liq neyron o'zgarishlar aniqlangan. Katta kalamushlarda berilgan ma'lumotlarga qaraganda, sukrozning o'z-o'zini boshqarishini kuchaytirishda mo''tadil yuqori yog '(31.8%) diet samarali bo'ldi. Biz, shuningdek, boshqa yoshlardagi xatti-harakatlarga nisbatan keyingi hayot ta'sirlari bilan taqqoslanadigan yosh kattalardek sichqonlarda sukrozni rag'batlantirishga ta'siri bor-yo'qligini tekshirganmiz. Tadqiqotlarimiz shuni ko'rsatadiki, yosh yallig'lanishga nisbatan sutemizuvchi suyukroz uchun motivatsiya kuchayib bormoqda, bu oreksigenik, hipotalamik peptid AGRP vositasida vositachilik qilishi mumkin bo'lgan o'rtacha darajada yuqori yog'li oziqlanish bilan ta'minlanadi; erta dietaning aralashuvidan so'ng, pubertaldan keyingi erkaklar paydo bo'lishiga ta'sir ko'rsata olmaydi; va kalamushlar metabolik holatga ega va pre-obez bo'lsa-da, xulq-ochiq ko'rinadi. Nihoyat, peripubertal kalamushlar, yosh kattalar kalamushlariga nisbatan sukroz uchun motivatsiyani oshiradi.

Materiallar va usullari

Mavzular

Mavzular Simonsen (Gilroy, KA) dan erkak Albino sichqonlari edi. Sichqoncha chow (Laboratory Rodent Diet 5001, LabDiet) yoki o'rtacha yuqori yog 'dietasi (31.8%; Tadqiqot Diets Inc) ad libitum. Dietalar umumiy karbonhidrat miqdori uchun mos keladi (navbati bilan xNUMX% kkalga nisbatan kam yog'li va yuqori yog'lar uchun 58% kkal). Past yog 'choyi 51 gm% bepul shakarga ega va yuqori yog' xomasi 6.23 gm% sukrozga ega. Ular 29: 12 soatlik nurli qorong'i kechada, 12 AMda chiroqlar bilan ishlangan. Aks belgilanmagan bo'lsa, kalamush 6 haftalikda olib tashlandi, darhol sutdan ajratish va 3 haftasiga qadar joylarda joylashtirildi. Ushbu asrda xun va / yoki xulq-atvorli ta'lim va sinovlar boshlandi. Ma'lum protokollar quyida batafsil va batafsil bayon etilgan 1 stol. Erkak kalamushlar 6da balog'atga etishganidan so'ng^th-7^th Tadqiqotlar vaqti, bu rivojlanish bosqichini o'tayotganda kalamushlarni o'rganish uchun mo'ljallangan. Sichqonlardagi barcha usullar hayvonlarni parvarish qilish bo'yicha NIH yo'riqnomalariga amal qilgan va VA Puget Sound Health Care tizimidagi Tadqiqot va Loyihalash Qo'mitasining Hayvonlarni Qo'llab-quvvatlash va Foydalanish bo'yicha Quyi Qo'mitasi tomonidan tasdiqlangan.

Tajriba protokollari

Sukrozning o'zini o'zi boshqarish

Umumiy protokol. Protseduralar bizning chop etilgan metodikamizga asoslangan (Figlewicz va boshq., 2008; Figlewicz va boshq., 2006). Barcha treninglar va sinovlar 0700 va 1200 soat orasida o'tkazildi. Eksperimentda 2-3 fazalari kiritilgan: autoshaping va sobit raqam (FR); jarrohlik va maxsus kohortalarda tiklanish (qarang 1 stol); Richardson va Roberts (PR) algoritmidan foydalanib, progressiv stavkalar (PR)Richardson va Roberts, 1996 yil). PR algoritmi 1, 2, 4, 6, 9, 12, 16, 20, 28, 36, 48, 63, 83, 110, 145, 191, 251, 331, 437, 575 ( va hokazo) bir seans ichida mukofotni etkazib berish uchun qo'lni bosadi va motivatsiya va mukofotni (759) uchun qattiq sinovdir. Sichqoncha suyuqlik tomchilatib tushadigan rezervuarga kiritilgan 999% sukrozni (999 ml mukofot) o'z-o'zini boshqarish uchun o'qitildi. Med Associates (Gruziya, VT) tizimi tomonidan boshqariladigan operativ qutilar ikki qo'li bor edi, lekin faqat bitta qo'l (infraqizil pompa) faollashdi. Boshqa qo'li ustidagi matbuot (harakatsiz, statsionar tayoq) ham qayd etildi. Sükroz eritmasi og'iz iste'mol qilish uchun suyuqlik tomchi idishiga (Med Associates) yetkazib berildi. Dastlabki mashg'ulotlar 27 kun davomida bir soatlik sessiyalar davomida doimiy takomillashtirish dasturi asosida o'tkazildi (FR5: har bir qo'lda matbuot takomillashtirildi) va sessiya uchun maksimal 0.5 sukroz savobi ta'minlandi. Har bir sessiya faol qo'lni qo'shish va butun majlisda qolgan oq rangli yorug'likning yoritilishi bilan boshlandi. 10-ning ovozi (1 Hz, fondan 50 dB) + yorug'lik (faol qo'lning ustidagi 5 Vt oq yorug'lik) har bir mukofotni yetkazib berish bilan birga diskret aralash navbati bilan birga keladi, keyinchalik har sukrozni etkazib berishdan so'ng 2900 sekund vaqt beriladi. O'n kun mobaynida maksimal mumkin bo'lgan 20 sutka kunlik PR-trening o'tkazildi. Kundalik mashg'ulotlar 7.5 minutdan so'ng faollik tugmachasini bosib o'tmadi, shu paytning o'zida uy nuri o'chirildi va faol ushlab turildi.

AGRP ning sukrozani o'z-o'zini boshqarishiga ta'siri

Bizning natijalarimiz AGRP mRNA ekssudatining yuqori yog'li oziqlanish bilan oziqlanayotganida, biz AGRP sükrozning o'z-o'zini boshqarishini kuchaytirishi mumkinligini tasdiqlashni istaymiz. 5-wk oldingi chow-fed irillaganlar FR treninglari orqali olingan, so'ngra uchinchi miya qorincha (ICV) ga kanüllar qabul qilindi. Bir haftalik tiklanishdan so'ng, angiotensin II ichish javob testi bilan joylashishni tasdiqlash (qarang Figlewicz va boshqalar, [2006]) va FRni qayta o'qitishning bir sessiyasi bo'lib o'tdi, ularda PRning o'zini o'zi boshqarish paradigmasi boshlangan. PR Day 1dan so'ng, kalamushlar ikki guruhdan biriga tayinlandilar, shuning uchun PR kuni 1 ishlashi ikki guruh o'rtasida (sun'iy CSF vositasi, aSFS yoki AGRP, 2 ml 0.01 nmol) farq qilmadi. 8, 7 va 2 kunlari PRS (n = 5) yoki AGRP (n = 8) in'ektsiyalari qabul qilindi. PR ta o'quv vaqtida kunlik ovqatlanishning umumiy miqdori aniqlandi.

Sukrozning o'z-o'zini boshqarishiga yoshning ta'siri

Biz pubertal kalamushlar va yosh kattalar orasida o'zini o'zi boshqarish harakati bilan taqqosladik, chow yoki 31.8% yog 'xun. Sichqonlarning VAPSHCS vivariumiga (3-5wk yoki 8-10 wk) ikki haftalik uyg'unlashganligi kuzatildi. Keyinchalik barcha sinov / mashq davrida (4 wk) diet qabul qilindi. Shunday qilib, boshlang'ich tajribada bo'lgani kabi, pubertal kalamushlari 5-8 yoshida o'rganilgan. Yosh kattalar 10-13 yoshida o'rganilgan.

Tana tarkibini aniqlash

Tana tarkibi miqdoriy magnit-rezonans spektroskopiyasi yordamida aniqlandi (QMR [Nixon va boshq., 2010]), suyuqlikning nisbiy tanasi yog'i hisoblangan alohida sichqonlarning tananing suvdagi tarkibini aniqlash. Hayvonlar silindrsimon ushlagichlarga joylashtirilmagan holda joylashtirildi va keyin ushlagichlar QMR mashinasiga 2 daqiqali skanerlash uchun kiritildi, bu uch o'lchovli o'lchovlarni amalga oshiradi. Ma'lumotlar to'liq tana suvi, yog 'va yog'siz massani darhol hisoblash uchun kompleks kompyuterga (EchoMRI, Echo Medical Systems, Houston, TX) saqlanadi.

Vena ichiga glyukoza bardoshlik sinovlari (IVGTT)

Ongli IVGTTlar surunkali implantatsiyalangan IV kanüllü, o'rganishdan oldin bir kechada ro'za tutgan farelerde, Frangioudakis, Gyte, Loxham va Poucher (2008). Ikki tomonlama venoz yallig'lanishni o'rganishdan ikki hafta oldin, bizning belgilangan metodikamiz bo'yichaFiglewicz va boshq., 2009). Dastlabki namunalar t-10 daqiqada (barcha vaqt nuqtalarida insulin va glyukoza aniqlanishi uchun 0.5 ml) va t0 daqiqada olingan. Sichqoncha 1-2 soniyadan so'ng 15 ml chuchuk suvli tuz bilan 20 glyukoza / 0.5ml / kg glyukoza infuziyasini oldi. Qon namunalari 5, 15, 30, 60, 90 va 120 daqiqalarda olingan. Amaliyot davomida kateterni joylashtirilishi (shu sababli, qon namunalarini olishning iloji bo'lmasligi) natijasida taqdim etilgan dastlabki / IVGTT ma'lumotlarining yakuniy nusxalari chNATX-7 va xNUMX% 8% yog 'dieti bilan ta'minlangan kalamushlar uchun 83 stol). Plastinka insulin Linco rat insulin RIA to'plamlari (RI-13K va SRI-13K, Linco) yordamida aniqlandi va plazma glyukoza YSI glyukoza analizatorida aniqlandi). Asosiy chiziqdan javob uchun egri ostidagi maydon (AUC) 5 daqiqada va 120 minda aniqlandi. HOMA indekslari ochlik (glyukoza [mM] × insulinm [U / L]) / 22.5 sifatida aniqlandi va insulin va glyukoza uchun o'lchangan terminalda ochish namunalari yordamida aniqlandi.

Metabolik parametrlar¹

Metabolik parametrlarni ochish

1 eksperimentidan olingan kalamushlarni IVGTT tugagandan bir necha kun o'tgach, ötanaziyaga qadar kechqurun ochdi. Sichqoncha izofluran inhalatsiyasi bilan chuqur xiralashgan va exsanguinated edi. Miya chuqurlashtirilgan va hipotalamik peptid mRNA va yadro akumbens katekolaminlarini o'lchash uchun suyuq azotda muzlatilgan. Fastingi plazmasini yoki sarumni ochlik insulinini, glyukoza, leptin va triglitseridlarni o'lchash uchun ishlatilgan. Triglitseridlar uchun Point TXT-7531-400 (Fisher # 23-666-418) va standart KIT # 7531-STD (Fisher # 23-666-422) qo'llanilgan Scientific Triglyceride GPO Kit va ikki nusxada 3 mL sarum assassin qilindi. Plazma leptini Millipore Linco RIA Kit bilan o'lchanadi. # RL 83K.

Katexolamin HPLC usuli [Davis va boshq., 2008]

Sichqoncha izofluran anesteziyasi bilan euthanize qilindi va miyalar tezda chiqarildi, muzlatildi va -80 ° C da saqlandi. Har bir hayvondan ikki yadroli akumbensning (NAcc) ikki tomonlama mikro zarbalari ajratildi. Qo'shni miya hududlari kontaminatsiyasini minimallashtirish uchun katta ahamiyatga ega bo'lishiga qaramasdan, biz har qanday mikro-zangning xarakteri va o'lchamlari tufayli uskuna NAcc ichidagi pastki mintaqalarni (ya'ni, NAcc yadrosi va qobig'i) farqlashimizga imkon bermadi. Yuqori darajada ishlaydigan suyuq kromatografi (HPLC) tahlillari uchun namunalarga antioksidant eritma (0.4 N perklorat, 1.343 mM etilendiaminetetraasetik kislota (EDTA) va 0.526 mM natriy metabisulfit qo'shildi, keyin ultratovushli to'qima homogenizatori yordamida homogenlash (Biologics; Gainesville, VA To'qimalarning homojenat qismini kichik qismi 2 uchun xNUMX gacha natriy dodesil sulfat (SDS) (v / v) da proteinni aniqlash uchun (Pierce BCA protein reagent vositasi, Rockford, IL) eritildi daqiqada, sovutilgan santrifüjda, supernatant, HPLC uchun saqlab qo'yilgan.

Namunalar bir vaqtda Microsorb MV C-18 ustunidan (5 Am, 4.6_250 mm, Varian; Walnut Creek, CA) ajratilgan va bir vaqtning o'zida har ikkala marker bo'lgan DA, 3,4-dihidroksifenilasetik kislota (DOPAC) va homovanil kislotasi (HVA) uchun tekshiriladi dopaminning degradatsiyasi, 5-HT va 5-XIAA. Quyidagi holatlarda Waters 12 Solvent Delivery System (Waters 5200 Solvent Delivery System) ga ulangan 2695-kanali kulometrik qator detektori (CoulArray 1, ESA, Chelmsford, MA) yordamida aniqlandi: 50 ml / min oqim tezligi; 175, 350, 400, 525 va 650 mV ning aniqlash potentsiallari; 10 mV tozalagich potentsiali. Ko'chma faza distillangan H da XNUMX% metanol eritmasidan tashkil topgan₂21 pH qiymatida 0.1 g / l (10.65 M) limon kislotasi, 0.075g / l (2 M) Na4XPO176, 0.8 mg / l (36 M) heptanesulfonic kislotasi va 0.097 mg / l (4.1 mM) EDTA o'z ichiga olgan O. Noma'lum namunalar 6 nuqtasi standarti egri uchun minimal R ga teng² 0.97. Sifat nazoratining namunalari HPLCni kalibrlashni ta'minlash uchun har bir ish bilan tortib olingan.

Oreksigenik peptidlar mRNA qPCR

Biz oziqlanishni rag'batlantiruvchi va motivatsiya va mukofotlash xatti-harakatlari bilan bog'liq bo'lgan hipotalamik peptidlar miqdorini aniqladik (Figlevich va Sipols, 2010 yil): Neyopeptid Y (NPY [ Hahn, Breininger, Baskin va Shvarts, 1998 yil; Jewett va boshq., 1995; Kelley, Nannini, Bratt va Xodj, 2001 yil]); agouti bilan bog'liq peptid (AGRP [Aponte, Atasoy va Sternson, 2011 yil; Barns, Argyropoulos va Bray, 2010 yil; Broberger va boshq., 1998; Hagan va boshq., 2000; Hahn, Breininger, Baskin va Shvarts, 1998 yil; Kaushik va boshq., 2011; Krashes va boshq., 2011; Rossi va boshq., 1998; Tracy va boshq., 2008]); va orexin (Cason va uning hamkorlari, 2010; Choi, Devis, Fitsjerald va Benua, 2010 yil). Sichqonlar izofluran behushlik bilan evtanizatsiya qilindi va miyalar tezda olib tashlandi, muzlatildi va ishlov berilguncha -80 ° C da saqlandi. Medial va lateral gipotalamus AHP-1200CPV muzlash tekisligi (Termoelektrik sovutish Amerika, Chikago, Il) yordamida bitta blok sifatida mikro dissektsiya qilindi, bu dissektsiya jarayonida doimiy ravishda 12 ° S haroratni saqlab turdi. Mikrodissektsiya qilingan to'qimalardan umumiy RNK Trizol reaktivi (Invitrogen, Carlsbad, CA) tomonidan ajratilgan va RNeasy Mini Kit (Qiagen, Valensiya, CA) yordamida ishlab chiqaruvchining ko'rsatmalariga muvofiq tozalangan. Umumiy RNK RNazsiz DNaz (Promega, Madison, WI) yordamida potentsial genomik DNKning ifloslanishini yo'qotish uchun davolandi va NanoVue spektrofotometri (GE Healthcare, Kembrij, Buyuk Britaniya) yordamida miqdorini aniqladi. RNK sifati standart agaroza gel elektroforezi bilan tasdiqlangan. Keyin qo'shimcha DNK (cDNA) iScript cDNA sintez to'plami (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA) yordamida tasodifiy hexamerlar va oligo DT astar aralashmasi bilan jami RNKning 1-2 mkgidan qayta transkripsiya qilindi (RT). Potentsial genomik DNK bilan ifloslanishini nazorat qilish uchun retrotranskripsiyalanmagan (RT yo'q) reaktsiyalar har bir namunadan tayyorlandi. CDNA va no-RT elementlari suyultirildi va MyIQ Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad, Hercules) yordamida tanlangan genlarning mRNA ekspresiyasini real vaqtda miqdoriy PCR yordamida o'lchash uchun har bir namunadan 5-10 ng shablon cDNA ishlatildi. Har bir namuna uchun uch o'lchovli o'lchovlar standart iCycler 96 quduq plitalarida, potentsial o'zaro ifloslanishni aniqlash uchun shablon nazorati (NTC) mavjud bo'lmagan holda, 20 ml reaksiya hajmida 10 ml 2 × iQ Sybr Green Supermix (Bio-) dan iborat. Rad, Gerkules, CA), har bir astar 2-0.2 mM dan 0.5 ml, 3 ml DEPC suvi va 5 ml shablon. Barcha qPCR reaktsiyalari signalning o'ziga xosligini ta'minlash uchun eritilgan egri chiziq tahlilini o'z ichiga olgan. Har bir qiziqqan gen uchun nisbiy ekspresiya har bir plastinkada alohida ishlaydigan standart egri chiziqqa ekstrapolyatsiya qilish yo'li bilan hisoblab chiqilgan va havola qilingan cDNA namunasining ketma-ket suyultirilishidan kelib chiqqan va mos yozuvlar genlarining nisbiy ekspressioni bilan normallashtirilgan (kislotali ribosomal fosfoprotein 36B4 genlarni ekspluatatsiya qilish uchun) gipotalamus to'qima va mitoxondriyal ribosoma oqsili L32). Sichqoncha prepro-oreksin, NPY va AGRP ni kuchaytirish uchun quyidagi primer ketma-ketliklar (IDT, San-Diego, CA) ishlatilgan: Prepro-orexin, Oldinga: 5′-TTCCTTCTACAAAGGTTCCCT-3 ′, 5′-GCAACAGTTCGTAGAGACGGCAG-3 ′; NPY: Oldinga, 5- TACTCCGCTCTGCGACACTACATC-3 ′; Orqaga: 5′-CACATGGAAGGGTCTTCAAGCC-3 ′; AGRP, Oldinga: 5′-GCAGAAGGCAGAAGCTTTGGC-3 ′; Orqaga: 5′-CCCAAGCAGGACTCGTGCAG-3 ′.

cFos Immunitetokimyo (ICC) va kantitatsiya

Flüoresan ICC, medial hipotalamustaki Fos-musbat va AGRP-musbat nöronal hujayralar jismlarini aniqlash uchun ishlatilgan.Figlewicz va boshq., 2011). Oxirgi kuni (PR kuni 10), kalamushlar odatdagidek o'zlarini boshqarish xonalariga 90 minut davomida joylashtirildi. So'nggi 90 daqiqalik mashg'ulotdan so'ng, kalamushlar izofluran inhalatsiyasi bilan chuqur behushlik qilindi va 0.9% NaCl bilan parchalanib, so'ngra sovuq 4% paraformaldegid eritmasi qo'shildi. Anestezik va evtanaziya uchun vaqt 90-120 daqiqadan so'ng sodir bo'lgan voqeada cFos oqsilining eng yuqori ekspresyoni ma'lum bo'lgan vaqtga asoslangan edi. Shunday qilib, cFos ekspressioni, bu vazifani boshdan kechirayotgan hayvonlarning natijasi emas, balki xatti-harakat vazifasi boshlanganda CNS faolligini aks ettiradi. Miyalar olib tashlandi va bir necha kun paraformaldegidda biriktirildi, so'ngra 20% sukroz-PBS, so'ngra 30% sukroz-PBS eritmasiga joylashtirildi. Miyalar immunohistokimyo uchun kriyostatda (Leica CM 3050S kryostat) kesilgan. Biz miya bo'limlarida immunoreaktiv cFos oqsilini miqdorini aniqlash uchun belgilangan metodologiyamizdan foydalandik (Figlewicz va boshq., 2011). Slaydga o'rnatilgan 12 mm butun miya koronali bo'linmalari fosfat tamponli sho'r suv bilan uch marta yuvilgan (PBS, OXOID, Xempshir, Angliya). Bo'limlar 20% etanol / DI suv (100%, v / v) bilan PBS yuvishdan so'ng 50 min uchun yıkandıktan so'ng 1% oddiy echki yoki eshak sarum o'z ichiga olgan PBS ichida xona haroratida 5 soat uchun blokirovka qilindi. Keyinchalik bo'limlar PBS ichida bir necha marta yuvilgan va PBS ichida yaratilgan asosiy antikor eritmalarida 4 ° C da kecha davomida inkübe qilingan. Bo'limlar PBS ichida uch marta yuvilgan va 1 soat davomida PBSda hosil qilingan sekonder antikor eritmasida xona haroratida qorong'uda inkübe qilingan. Keyinchalik bo'limlar yana PBS-da yuvindi va Vectashild-da qattiq o'rnatilgan o'rnatish muhiti (Vector; Burlingame, CA) o'rnatilgan muhitga o'rnatildi va yopildi. Bo'limlarning raqamli tasvirlari NIS Elements (Nikon) dasturidan foydalangan holda Qimaging Retiga raqamli suratga olish kamerasiga ulangan Nikon Eclipse E-800 floresans mikroskopi yordamida olingan.

AGRP mRNA darajasini oshirib borgan PCR tadqiqotlaridan kelib chiqib, medial hipotalamik mintaqalarga, xususan ventromedial yadro va kavisli yadro (ARC) ga e'tibor qaratdik. Atlasga mos keluvchi 12 mm bo'limi cFos ifodasi va mos keladigan qismlar va mintaqalarda miqdori uchun baholandi. Paxinos va Watson [2005]. Kvantifikatsiya qilish uchun (40 × kattalashtirishda) atlas bilan bog'langan hududlar tanlangan. NIS Elements dasturi (Sayyohlik) istalgan maydonning rasmini olish uchun ishlatilgan. Hisoblash uchun maydon aniqlandi va ijobiy hujayra hisoblari uchun chegara o'rnatildi. O'xshash maydon va fon (chegara) tegishli eksperimental guruhlarning bo'linmalari uchun ishlatilgan va musbat hujayralarni dasturiy hisoblash (kvantlama) barcha seanslar uchun bir xil seansda, fon rejimida sessiya o'zgarishlarini oldini olish uchun amalga oshirildi. Statistik tahlil uchun, agar har bir uchastka bo'yicha tegishli yoki to'liq bo'limlar mavjud bo'lsa, alohida ratdan hisoblar olingan; ma'lum bir mintaqa uchun ma'lumot bu hudud uchun to'liq bo'lmagan ikki tomonlama vakolatli bo'lsa, ratdan olinmagan.

CFos miqdoriga qo'shimcha ravishda, cFos va AGRP uchun miqdoriy ikkita yorliqli immunohistokimyo o'tkazildi. Biz hayvonlarning xatti-harakatlarini bezovta qilishni xohlamaganimiz sababli, ular AGRP vizualizatsiyasini optimallashtirish uchun ularni kolxitsin bilan oldindan davolashmagan. Shuning uchun AGRP-pozitiv neyronlarning vizualizatsiyasi kam baholanishi mumkin. AGRP uchun ikki tomonlama binoni protsedurasi o'z-o'zidan cFos-immunoreaktivlikni tahlil qilish bilan taqqoslanadi, faqat bo'limlar xona haroratida bir soat davomida PBS-5% eshak sarumida bloklangan. Keyin fos-Ab va AGRP birlamchi antikorlari aralashmasi bir kecha davomida 4 ° C darajasida inkubatsiya qilish uchun ishlatilgan; xuddi shu tarzda ikkala ikkilamchi antikorlar ham bir xil eritmada bo'lgan va xona haroratida qorong'ida bir soat davomida inkübe qilingan. Birlamchi antikorlarning tegishli suyultirilishini aniqlash uchun dastlabki optimallashtirish tahlillari o'tkazildi. Birlamchi antitellar quyonlarga qarshi cFos (1: 500) (sc-52) va echkilarga qarshi AGRP (1: 100) (18634) (Santa Cruz Biotechnology, Inc., Santa Cruz, CA) ishlatilgan. Ikkilamchi antikorlar Cy3-konjuge eshakka qarshi quyon (Jackson Immunoresearch; West Grove, PA) va Alexa fluor 488 eshakka qarshi echki IgG (Molecular Probes, Eugene, OR); barcha ikkilamchi antikorlar 1: 500 da suyultirildi.

Statistik tahlil

Guruh ma'lumotlari matndagi, jadvallar va rasmlardagi o'rtacha ± o'rtacha xato (SEM) sifatida taqdim etiladi. Ahamiyat p-0.05 sifatida belgilanadi. Statistik taqqoslash eksperimental guruhlar o'rtasida, natijalar bo'yicha "Talabalar" da keltirilgan, talabalarning tenglashtirilmagan testi (masalan, ovqatlanish tartibi, yoshi yoki davolanishni taqqoslash) yordamida amalga oshiriladi. Ma'lumotlarning "normalizatsiyasi" qanday ishlatilganligi bilan belgilanadi.

natijalar

Sukroz uchun peri-pubertal motivatsiya bo'yicha o'rta darajada yuqori yog'li parhezning ta'siri

Sichqoncha 31.8-5 davomida 8% yog 'dietini oziqlantirdi, o'zini o'zi boshqarish seanslarida esa chow-fed ratlar bilan solishtirganda sukroz uchun sezilarli darajada yuqori motivatsiya bor edi. Ko'rsatilganidek Shakl 1a, boshlang'ich FR tayyorgarliklarida ishlashning farqli jihati yo'q edi (o'rtacha kunlik 1-10 faol qo'l tugmachalari, 38 ± 5 va boshqalar. 39 ± 2. Biroq, kalamushlar qat'iy PR vazifasiga o'tgandan so'ng, faol qo'lda chop etish soni sezilarli darajada ko'paygan va sukroz mukofotlari miqdori sezilarli darajada ko'paygan, ammo umumiy sessiya davomiyligiShakl 1b). Surunkali parhezni davolash samarasiz qoladigan bosma matbuotlar soni bo'yicha ta'siri yo'q edi. Sichqoncha 5-8 davomida yuqori yog'li oziqlantirish bilan oziqlantirilganda, keyinchalik 9-12 haftalari davomida FR va PR treninglari orqali olingan choy dietasiga qaytganida, faol tirishqoq bosimlarda sezilarli farq yo'q edi. Shunday qilib, peri-pubertal vaqt oralig'ida iste'mol qilingan o'rta darajada yuqori yog'li parhezning xatti-harakatlarning ta'sirchanligi yo'q. Ushbu kogortalar uchun PR parametrlari ma'lumotlari umumlashtiriladi 2 stol. Sakrozni rag'batlantirishda dietani keltirib chiqaradigan vositaga o'z hissasini qo'shish mexanizmini ochish uchun biz metabolik va MSS o'lchovlarini bir qator o'tkazdik.

Shakl 1

Xekbenlik yog 'dietasi (n = 31.8) bilan ta'minlangan peripubertalli kalamushlarda sukroz miqdorini oshirish uchun omillarni rag'batlantirish omili. 8a. FR mashg'ulotlari davomida dietaning ta'siri bo'lmadi, ammo kalamushlarni PR paradigmasına almashtirganda, parhez ta'siri namoyon bo'ladi. 1b. Ma'lumotlar ...

Suyukroz uchun Peri-Pubertal yuqori yog 'dietasining progressiv nisbat ko'rsatkichlariga ta'siri

O'rtacha yuqori yog'li parhezning metabolik parametrlarga ta'siri

Xulq-atvor tekshiruvi yakunlangach, tana yog 'tarkibi 5-8 davomida diet aralashuvi va xulq-atvorli paradigmga ega bo'lgan kalamushlarda aniqlandi. So'ngra kalamushlarni (ongli) IV glyukoza bardoshlik sinovlari (IVGTTs) uchun surunkali intravenöz kanüller oldi. Keyinchalik, qo'shimcha metabolik choralar uchun terminalda ochlik plazmasi va sarum olingan. Ko'rsatilganidek 3 stol, organizmning tarkibi, tana vaznini, ochlik insulinini yoki glyukoza o'lchovlarini, insulin hassosiyatini (HOMA hisoblash) yoki IVGTTga javoblarni, chow fed va yuqori yog 'bilan oziqlangan ratlar o'rtasida farq yo'q edi. Terminalning ochilishi leptin va triglitseridlarni o'lchash ikki guruh o'rtasida farq qilmadi. Shunday qilib, sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada sutkada uch marta sintez qilinadi

O'rtacha yuqori yog'li parhezni CNS homeostatikasi va mukofot neurokimyasiga ta'siri

Terminal metabolik o'lchovlari bilan bir qatorda, 5-8 haftalarida xun aralashuvi va xulq-atvorli mashg'ulotlarga ega bo'lgan kohortadan miyalar yadro akumbens omin rejimlari (n = 4 per diet guruhi) yoki gipotalamik orexigenik peptidlarning mRNA darajalari uchun o'lchandi. Ko'rsatilganidek 4 stolyuqori yog 'dietasining dopamin, norepinefrin yoki serotonin metabolitlari yadrosidagi akumbenslarda, mukofot va motivatsion faoliyatning markaziy maydonida muhim ta'siri yo'q edi (Ikemoto va Panksepp, 1996 yil; Kelley va Berrij, 2002 yil) ushbu neyrotransmitter tizimlarining har biri asosiy tartibga soluvchi rol o'ynaydi. Gipotalamus ekstraktlari tarkibida oreksigenik peptidlar, NPY, AGRP va oreksinning mRNA darajasi o'lchandi. Yog 'bilan oziqlangan kalamushlarda AGRP o'sishining kuchli, ammo ahamiyatsiz tendentsiyasi ushbu kohortda kuzatilgan (har ikkala dieta uchun n = 8); shuning uchun biz dietada / xulq-atvorda paradigmani qo'shimcha kohortada takrorladik va gipotalamusda NPY, AGRP va orexin mRNA ni o'lchadik. Birlashtirilgan kogortalarda biz yuqori yog'li dietaga va chow nazorati bilan oziqlangan kalamushlarda AGRP mRNA ning sezilarli darajada (p <0.05) o'sishini kuzatdik (Shakl 2), ammo NPY yoki orexin ifodasida sezilarli o'zgarish yo'q. AGRP ifodasi va o'zini o'zi boshqarish xatti-harakati o'rtasidagi mumkin bo'lgan aloqalarni baholash uchun mediobazal gipotalamusda cFos va AGRP immunopozitiv neyronlarni o'lchagan edik. Sichqon guruhlari chow yoki 31.8% yog 'dietasi bilan oziqlangan; ba'zilari o'zini o'zi boshqarish protokoli (hafta 5-8) va boshqalar esa xatti-harakatlarni boshqarish vositasi sifatida ko'rib chiqildi. Shakl 3a cFos va AGRP ning kavisli yadro neuronida birgalikda lokalizatsiya qilish misolini ko'rsatadi. Xulosa sifatida 5 stol, AGRP neuronlarini faollashtirish (bir xil hujayralar ichida cFos-ICC va AGRP-ICC ning birgalikda ifodasi) o'zini o'zi boshqarish faoliyati bilan bog'liq edi. Buni yaqqol ko'rish mumkin Shakl 3b, faollashtirilgan (cFos-musbat) nöronlarning soni neyronal hujayra hisoblagichi yoki umumiy AGRP-pozitiv neyronlarning nisbati sifatida ko'rsatiladi: Sichqonlarda AGRP neuronlarning sezilarli faollashishi, sukrozni o'z ichiga olgan, , qo'shma diet guruhlarida. O'z-o'zini boshqarish guruhidagi faollashtirilgan AGRP neyronlari sonini ichak-qo'riqlash nazorati bilan taqqoslashda statistik ahamiyatga ega bo'lmagan tendentsiya (chow, p = .078; 31.8% yog 'dieti, p = .073) . Eng muhimi, AGRPning o'z-o'zini boshqarish xatti-harakatlariga ega bo'lgan bu ma'lumotlar linkini emas, balki cFos o'lchami uchun vaqtni (90 daqiqadan keyin o'z-o'zini boshqarish xonalariga joylashtirilgan), cFos ifodasi AGRP neyronlarning faolligini aks ettiradi. o'z-o'zini boshqaruv faoliyatining oldindan rejalashtirilishi yoki boshlanishi. O'z-o'zini boshqarish guruhida AGRP-pozitiv neyronlarning umumiy soni oshganligi kuzatildi (p = 0.16). Ratsionda paxta bosimi bilan solishtiriladigan bu kalamushlarda AGRP-musbat neyronlarning soni mos tushadi. Diyetani faqatgina AGRP-pozitiv neyronlarga nisbatan ta'sir o'tkazish ta'siri yo'q edi.

Shakl 2

31.8% yog 'dietasining medial gipotalamus peptid mRNA ekspresiyasiga ta'siri. Ma'lumotlar yuqori yog'li kalamushlar uchun normallashtirilgan (n = 17) va chow nazorati (n = 16). AGRP mRNA sezilarli darajada ko'tarilgan (p <0.05).

Shakl 3

Sukrozni o'z-o'zini boshqarish jarayonida AGRP neuronlarini faollashtirish. 3a. CFOS va AGRP ning kavisli yadro neyronlari bilan birgalikda joylashishi, 60x kattalashishi. 3b. Mediobasal hipotalamusda aktiv (cFos-immunopositive) AGRP-immunopozitiv neyronlarning soni ...

Nukleus akumbens amin metabolitlari

Agrp Neyron Aktivasyonu: Diet va Behavioral davolash

AGRP administratsiyasining sukroz motivatsiyasiga ta'siri

Ushbu topilmamizning sharhlanishi, pubertal kalamushlarda AGRP ifodasi, yuqori yog 'dietasi bilan oziqlangan sichqonlarning o'z-o'zini sukrozni o'zlashtirishini ta'minlashda asosiy mexanizm hisoblanadi. AGRP samaradorligini sukroz uchun motivatsiyani kuchaytirish uchun tasdiqlash uchun AGRP uchinchi qorincha orqali parrandalarning PR qismida chiviktiruvchi peri-pubertal kalamushlarga qo'llanildi. AGRP ning ushbu doz rejasi PR-paradigmining ikki haftasi davomida chov iste'molini rag'batlantirish uchun pastki chegaraga ega bo'lgan, ammo sakkorzani o'z-o'zini boshqarishning sezilarli darajada ko'payishiga olib keldi. Shakl 4. (Har bir sukroz mukofotining 0.1 kkal kaloriya miqdori borligiga diqqat qiling, shuning uchun sukroz o'z-o'zini boshqarish faoliyati kunlik iste'mol qilish uchun kam miqdorda kaloriya beradi.) 6 stol 9-kunlik PR-paradigma bo'yicha o'z-o'zini boshqarish parametrlari ma'lumotlarini ko'rsatadi, AGRP yoki aCSF-ning kunlari 2, 5 va 8da ICV-ni kiritadi. AGRP bilan ishlov berilgan kalamushlarda faol kalava bosimlarining umumiy soni PR Days 2-10 (p = 0.03) va INV ning bo'lmagan kunlarida (p = 0.048) umuman ortdi (ortdi) qarshi kunlari. Bundan tashqari, Stop-Time (o'z-o'zini boshqarish vazifasi bilan shug'ullanadigan jami vaqtni aks ettiruvchi) vaqtni inyeksiya qilinmagan kunlarda (p = 0.02) ko'paytirildi. Sakkorz mukofotlari soni PR kunlari 2-10 (p = 0.03) bo'yicha oshdi. AGRPni davolashda faol bo'lmagan qo'lni bosib olishda AXRning davolash usullari bilan solishtirganda, yoki CFS bilan davolash qilingan tekshiruvlar bilan yoki in'ektsiya va inyeksiya bo'lmagan kunlar o'rtasida ta'siri yo'q edi. Natijalar sukrozning o'z-o'zini boshqarishini kuchaytirish uchun AGRPning uzoq muddatli ta'sirining ta'birini qo'llab-quvvatlaydi: kalamushlar foydali quti ustiga ko'proq bosdi, ko'proq sukroz mukofotlari oldi va vazifaga ko'proq vaqt sarfladi.

Uchinchi qorincha (ICV) AGRP (0.01 nmol) PR paradigmasida sukrozni o'z-o'zini boshqarishni rag'batlantiradi, ammo ish vaqtida (PR Days 2-10, kunlar 2, 5 va 8 bo'yicha inyeksiyalar bilan) kunlik oziq-ovqat mahsulotlariga ta'sir qilmaydi. . AGRP (n = 9) ma'lumotlar ifodalanadi ...

ICC AGRP ning aCSF ga nisbatan sukroz uchun progressiv stavkalarning ishlashiga ta'siri

Suyukrozning afzalligi va turtki bo'lishiga turg'unlikning ta'siri

Oxirgi tajribada sukroz uchun motivatsiya yoshi kattalar va jinsiy a'zolar o'rtasidagi farqni baholadi. Dastlab, 5 va 10-wk eski sichqonlarga 0 dan 20% sukrozgacha o'z-o'zini boshqarish sinovlari va mashg'ulotlarni boshlashdan oldin echimlarni tanlash bilan sukrozni tanlash imtihoni topshirildi. Ko'rsatilganidek Shakl 5aadabiyotda e'lon qilingan topilmalar bilan mos kelishiga qaramay, erta yoshdagi jinsiy a'zolarning kalamushlari yosh kattalar kalamushidan ko'ra yoqimsiz eritmaning afzalligini ko'rsatdi: erta boshlang'ich sichqonlarning eng ko'pi 20% sukroz eritmasi yig'ilishiga ega edi, kattalar kalamushlari esa eng yuqori dozani ko'rsatdi % 15% sukroz. Keyinchalik, har ikki yosh guruhida ham o'z-o'zini boshqarish mashg'ulotlari va sinovlari davomida sichqonchani choyi va yuqori yog'li parhezlar o'rtasida bo'linish bo'lgan. FR sessiyalarida o'rtacha hisoblangan peri-pubertal va kattalar kalamushlari (45 ± 3 va boshqalar. 37 ± 2, p = 0.05) bo'yicha faol qo'llarni bosimlarining kichik, ammo statistik jihatdan sezilarli darajada ko'payishi kuzatildi. sukroz mukofotlari yoki faol bo'lmagan qo'lda bosim soni. Ko'rsatilganidek Shakl 5b(n = 15) va yosh kattalar (n = 14) sichqonchalari (2-ANOVA, PRDay × age) bilan faol ravishda qo'lda bosishning faollashuvi bilan ommaviylashuv seanslari davomida juda katta ta'sir ko'rsatdi. yoshning ta'siri, p = 0.017, PRDayning mustaqil ta'siri yo'q, muhim ta'sir o'tkazish yo'q). Titer yuqori yog'li ovqatlanish sharoitida yoshni ko'proq ta'sir qilish tendentsiyasiga ega edi, ammo bu statistik ahamiyatga ega emas edi (p = .13). 7 stol PR-xatti-harakatlarning parametrlarini keltirib chiqaradi: aktiv paxta bosimiga qo'shimcha ravishda, peri-pubertal kalamushlar sezilarli darajada sukrozga ega bo'lib, ortib boruvchi Stop-Time vaqtiga to'g'ri keladi. Bundan tashqari, peri-pubertal kalamushlar, peri-pubertal va kattalar kalamushlari uchun faol bo'lmagan (ya'ni, mukofotlanmagan) qo'lda kichik, lekin sezilarli darajada ko'paytirildi. faol qo'llarni bosib chiqarish. Bu natijalar peri-pubertal kalamushlarni shirin ta'mli ovqatlarni afzal ko'rib chiqishni afzal ko'radi va natijada yuqori yog'li parhez fonida ta'sir kuchayishi mumkin.

Shakl 5

Balog'atga etmagan kalamushlar sakkiz yoshli sichqonlarga nisbatan sukroz miqdorini oshirish uchun motivatsiya kuchaygan. 5a. Bolalar uchun sukrozni sinash testlari (peri-pubertal, n = 15) va yosh kattalar (n = 14). Sichqoncha konsentratsiyalari oralig'ida ichish uchun 30 min edi (0-20% sukroz). ...

Yoshni progressiv nisbat ko'rsatkichlariga ta'siri^a sukroz uchun

muhokama

Tadqiqotning asosiy natijasi shundaki, peri-pubertal davrda iste'mol qilingan o'rta darajada yuqori yog 'dietasi (erta tug'ilish davridan oldin, vaqtida va keyingi davrda) sukroz eritmalari uchun motivatsiyani sezilarli darajada oshirdi. Ushbu topilma, oldingi, shunga o'xshash, kattalar kalamushlarida kuzatuvimizga mos keladi (Figlewicz va boshq., 2006). Ushbu hayvonlarda, shuningdek, yoshi va davolanishga mos keladigan kohortalarda biz metabolik xarakteristikaning keng tarqalishi orqali sichqonlarning semiz yoki ob-havo bo'lmagan va periferik insulinga chidamli emasligini aniqladik. Sichqoncha insulin yoki leptin harakatlariga nisbatan CNS-lokalizatsiya qarshiligiga ega bo'lishi mumkinligini inkor eta olmaymiz, ammo bu gormonlar ikkalasi ham CNS-saytga xos oziq-ovqat mahsulotlarini modullashiga yordam beradi (Devis, Choi va Benoit, 2010 yil; Davis va boshqalar, 2011a; Figlevich va Sipols, 2010 yil).

Sichqonlarning pastki qismida biz midbrendan dopaminergik proektsiyalarni katta miqdorda sarmoya kiritadigan yadroli akumbenslarda amin nörotransmitterlari va tegishli metabolitlarini o'lchayapmiz va mukofot va motivasion harakatlar vositachiligi uchun asosiy va markaziy CNS sayti hisoblanadi (Ikemoto va Panksepp, 1996 yil; Kelley va Berrij, 2002 yil). Ushbu transmitter metabolitlarining mutlaq darajasida yoki nisbatlarida hech qanday o'zgarish kuzatilmadi. Bu o'zgaruvchan katekolaminerjik yoki serotonerjik faollikni yadro akumbenslaridagi o'sish asosiy sarkaroz motivatsiyasi ostida bo'lgan asosiy yoki katta MSS mexanizmi emasligini ko'rsatdi. Bu yaqinda e'lon qilingan hisobotga mos keladi Davis va boshq. [2011 b], kattalar kalamushlarida ICV AGRP ning medial prefrontal korteksdagi dopamin aylanishini kuchaytirganini ko'rsatadigan, ammo yadro mushaklari emas. Bundan tashqari, yosh kattalar kabi, darhol jinsiy a'zolaridan keyin test qilinganida, parhezning "harakatchan o'tkazuvchanligi" ta'sirini ko'rmadik. Bu esa Bolaños va boshqalarning, xatti-harakatlar va katekolaminerjik parametrlar bo'yicha, metilfenidat bilan davolash qilingan kattalar kemiruvchilaridagiBolaños va boshq., 2003; Bolanos, Glatt va Jekson, 1998 yil; Brandon, Marinelli, Beyker va Oq, 2001 yil; Brendon, Marinelli va Oq, 2003 yil). Bu, ehtimol, dopaminerjik neyronlarning metilfenidat bilan bevosita aniqlanishiga bog'liq bo'lishi va shuningdek, hayvonlarning aralashuvining vaqti va hayvonlarni sinash vaqtining funksiyasi bo'lishi mumkin. Nihoyat, o'tkazuvchanlik ta'sirini kuzatib bo'lmasligimiz mumkin, chunki bu ishda diet ta'sirining asosiy maydoni medial gipotalamusga o'xshaydi.

Ushbu tadqiqotda uchta xujjat, yuqori yog 'dietasi bilan oziqlangan sichqonlarda sukrozning o'z-o'zini boshqarishini kuchaytirishda medial gipotalamik nöropeptid AGRP uchun asosiy rolni qo'llab-quvvatlaydi. Birinchidan, 31.8% yog 'dietini chow nazorati bilan solishtiradigan sichqonlarda butun hipotalamus ekstraktida AGRP ekspresyonunun (mRNA) ko'payishini kuzatdik. Biroq, orexin mRNA va NPY mRNA darajasi o'zgargan emas. Shunday qilib, yuqori yog 'parhezining / harakatchan paradigmanın ta'siri ORRZEGENİK nöropeptidlere umumiy emas, balki AGRP'ye xosdir. Bu AGRP uchun oziq-ovqatni rag'batlantirish yoki qidirishda muhim rol o'ynaydi va adabiyotda (quyida muhokama qilingan) bir qancha yangi hisobotlarga muvofiq keladi. So'nggi paytlarda olib borilgan ishlarimiz medial hipotalamik yadrolarda (ko'pincha medial hipotalamik yadrolarda (CFOS) ifoda ko'payganligi sababli motivatsiya paradigmida PR ko'rsatkichi bilanFiglewicz va boshq., 2011). Biz, shuningdek, sukrozning o'z-o'zini boshqarishini kamaytirish uchun (ekzogen) insulinning ta'siri uchun ARKni asosiy mintaqa deb topdik (Figlewicz va boshq., 2008). ARKda AGRP / NPY nöronlari (Broberger va boshq., 1998; Hahn, Breininger, Baskin va Shvarts, 1998 yil) medial gipotalamus ichida bir nechta mexanizmlar orqali oziqlantirishni rag'batlantirish uchun harakat qiladi. Ushbu tadqiqotda faollashtirilgan AGRP nöronlarının immunokytokimyasal kantitasyonu, kalpte o'z-o'zini boshqarish uchun tayyorlangan kalamushlarda cFos / AGRP nöronlarının o'sishini ko'rsatdi. Bu AGRPning nöronal faollashuvi sukrozning o'z-o'zini boshqarishiga (boshlanishiga) hissa qo'shadigan izohga olib keladigan ikkinchi usuldir. Bundan oldingi va keyingi tadqiqotlar, AGRP ekspresyonu va eyishni, yog 'iste'mol qilish bilan bog'liq bo'lgan, yoki dietHagan va boshq., 2000) yoki motivasion paradigma (Tracy va boshq., 2008); va kattalar kalamushlarida ICV AGRP yog '(Davis va boshq., 2011b). Sichqonlarga AGRP nöronlarının aniq aktivasyonuna imkon beruvchi maqsadli molekulyar metodlarni qo'llagan so'nggi tadqiqotlar (Aponte, Atasoy va Sternson, 2011 yil; Krashes va boshq., 2011) AGRP ovqatlanishni mustahkamlashni rag'batlantirayotganini, oziq-ovqat izlashini oshirishni va energiya sarfini kamaytirishni tasdiqladi. Shuni aytib o'tish joizki, yuqori yog 'dietasi bilan ta'minlangan eksperimental guruhlarda umumiy kaloriyani iste'mol qilish nazorat chow fed diatsiyalari bilan solishtirganda ancha past edi (8 stol), energiya sarfini kamaytirish uchun endogen AGRP ta'siri bilan mos keladi. Ushbu ta'sirlar avvalgi topilmalar bilan mos keladi Hagan va boshq. [2000], bu ekzogen AGRP energiya muvozanatining ayrim jihatlariga ta'sirini ancha uzaytirishi mumkin. Shunday qilib, uchinchi yondashuv sifatida, natijalar ICV AGRP ga ko'ra, sukrozning o'z-o'zini boshqarishini (chow-fed) pubertal kalamushlarni oshirganligini ko'rsatmoqda. Yuqori yog'li oziq-ovqatni to'rt hafta davomida oziqlanadigan kalamushlarda AGRP mRNA ekspresyonunun o'ziga xos oshishi yaqinda o'tkazilgan tadqiqotlar bilan mos keladi. Kushik va hamkasblar [2011] hipotalamik neyronlarda ekzogen yog' kislotalarini, hujayra ichidagi hosil bo'lgan yog'li kislotalarni va AGRP ifodasini oshiradi. Shunday qilib, madaniyatli gipotalam hujayralarga oleyk yoki palmitik kislota qo'shilishi AGRP ifodasini oshirdi. Biz foydalanadigan parhez stearik, palmitik va oleyk kislotasini oshirgan bo'lsa-da, bu yog 'kislotalari ning Vivo jonli hipotalamik muhit, ularning lokalize konsentrasiyalari xun yog 'kislotasi profiliga mos keladimi va ulardan biri yoki undan ko'pi, ayniqsa AGRP ifodasini oshirishi mumkinmi. Shunga qaramay, bu parhez subkomponentlari medial gipotalamustagi asosiy harakat orqali shirinliklar uchun motivatsiyani kuchaytirishga hissa qo'shishi mumkinligini taxmin qilish qiyin.

Eksperimental protokol: Kkal iste'mol qildi

Bizning ishda yosh sichqonchani kattalar kalamushlari bilan taqqoslaganda sukroz uchun motivatsiya kuchayganligini ko'rsatadi. Bu PRning o'zini o'zi boshqarish davrida aniq bo'ldi va yosh ta'sirini kuchaytirish uchun yuqori yog 'ratsioniga qarshi kurash bor edi. Ehtimol, bu kichik guruhning kattaligi tufayli statistik ahamiyatga ega emas; shuning uchun ma'lumotlar shuni ko'rsatadiki, pubertal hayvonlarda (va, ehtimol, odamlarda) ratsiondagi o'rtacha darajada yog' miqdori shirin tatli ichimliklar yoki oziq-ovqatlarni olish uchun xatti-harakatlarni izlashga yordam beradi. Jamiyat nuqtai nazari bilan, u nafaqat yog 'yog'ining to'g'ridan-to'g'ri, salbiy metabolik oqibatlari tufayli emas, balki natijaga olib keladigan xatti-harakatlarga yordam berishi mumkinligi bilan emas, balki "juft" shakarni kengaytirishda. Yaqinda ko'rib chiqilgan Stanhope [2012], yog 'bilan shakarlarni birgalikda qo'llash salbiy metabolik oqibatlarga olib kelishi mumkin. Odamlarda yuqori yog '/ shakar birikmalari nisbatan kam ovqatlanish dietasi (Drewnowski, 1998). Qandli diabet kasalligining ko'payishi (Cizza, Brown, & Rother, 2012 yil) va yog'li jigar (Kohli va boshq., 2010) pediatrik populyatsiyada yuzaga kelgan, yoshlarda sog'lom va mutanosib ovqatlanishning ahamiyati aniq. Bizning qo'lda qoladigan matbuot soni hali ham juda past bo'lishiga qaramasdan, pubertal kalamushlarda (kattalar sichqonlari) faol bo'lmagan qo'lda preslarni sezilarli darajada ko'payishini kuzatdik. Ko'rinib turibdiki, faollikni faollashtiruvchi qo'lni bosish umumiy faollikning "o'ziga xos bo'lmagan" ta'siri sifatida hisobga olinishi mumkin, chunki ko'pchilik faoliyat faol qo'lni yo'naltirishga qaratilgan. Faol bo'lmagan qo'zg'atuvchilarning haqiqiy soni ko'paygan bo'lsa-da, faol qo'lni bosadigan bosimlarga nisbatan nisbati peri-pubertal va kattalar kalamushlari bilan taqqoslanadigan edi va kuchaytirgichning bosimlari o'z-o'zini boshqarish kameralarida uzoqroq faol vaqtni aks ettirishi mumkin. Turli xil paradigma (ba'zi oziq-ovqat taqiqlash, shirin mukofot o'rniga oziq-ovqat pelletlarini ishlatish va FR1 jadvali) Sturman, Mandell va Mogaddam [2010] Yaqinda adolesan va kattalar kalamushlarida o'zgargan instrumental ko'rsatkichlar haqida xabar berishgan. Ular oziq-ovqat pelletlarini, balog'atga etmagan bolalarni va kattalar kalamushlarini yuborgan nosepoklarda farq qilmadi. Biroq, balog'atga etmagan kalamushlarda yo'q bo'lib ketish vaqtida ko'plab qat'iy harakatlar kuzatilgan. Birgalikda olib borilgan tadqiqotlar yosh va rivojlanish bosqichining oziq-ovqat uchun g'ayratlarga ta'siri va pubertal kalamushlarning tez o'sishi bilan mos keladi. Ushbu ishda, erkak, lekin ayol emas, balki sichqonchani muhokama qilindi. Hozirgi kunda erkaklar va ayollar sichqonlarini oziq-ovqatni rag'batlantirish paradigmasida to'g'ridan-to'g'ri taqqoslash bo'yicha cheklangan tadqiqotlar mavjud, va pubertal davrda tizimli baholash kafolatlanadi. Shuni ta'kidlash kerakki, (inson) yoshlar, Coldwell va hamkasblari (2009) gonadal steroidlar emas, balki o'sish belgisi o'rtasidagi munosabatni kuzatdi boshiga tushgan. Shunga qaramay, ushbu yosh guruhidagi jinsiy ta'sirlar keyingi tergovga loyiqdir.

Shunday qilib, ishda, pubertal sıçanlarda erişkinlere nisbatan sukroz uchun ortib borayotgan turtki ko'rsatib turibdi va bu o'rta darajada yuqori yog 'ratsioniga kirish yo'li bilan arttırılmaktadır. Oliy sutkalik parhezni sukroz motivatsiyasiga ta'siri medial gipotalamusda ortib borgan AGRP faolligi bilan bog'liq bo'lishi mumkin. Bu energiya homeostazini tartibga soluvchi devordagi kuchli ichki CNS funktsional ulanishining dalil va rag'batlantirishni tartibga soluvchi devredeyle dalolat beradi. Sukrozni o'rtacha darajada yuqori yog 'dietasi bilan rag'batlantirish metabolik buzilishlardan va oshqozon obezitatsiyasidan oldin paydo bo'ladi va xatti-harakatlar, aksincha, metabolik o'zgarishlarni boshlashi mumkinligini ko'rsatadi. Yuqori yog 'va fruktoza o'z ichiga olgan shirin ovqatlarning yutilishi, metabolik profilga birgalikda hissa qo'shadi, bu ham tip2 diabet va yurak-qon tomir kasalliklari uchun yuqori xavf hisoblanadi. Ushbu topilmalar faqatgina ijtimoiy-ekologik ta'sirlardan emas, balki uyushish uchun ko'plab etuk o'zgarishlarning davri mobaynida CNS neyrokimyoviy va xulq-atvorli o'zgarishlar bilan ta'sirlangani kabi balog'atga etmaganlik davrida ovqatlanish tartiblari va ovqatlanishiga e'tibor berish muhimligini ta'kidlaydi reproduktiv salohiyatni oshirish.

مور

O'rtacha yuqori yog'li parhez kattalar kalamushlarida sukroz uchun motivatsiyani oshiradi.
Ushbu laboratoriyada yuqori yog 'dietasi peri-pubertal kalamushlarda sukroz motivatsiyasini oshiradi.
Peri-pubertal kalamushlari kattaroqlarga qaraganda sukrozning motivatsiyasini oshirgan.
Sukrozning o'sishining oshishi gipotalamik AGRP tomonidan vositachilik qilishi mumkin.
Xulosa: Yuqori semizli parhez semizlikdan mustaqil ravishda shirinliklar uchun motivatsiya qiladi.

rahmat

Ushbu tadqiqot NIH granti DK40963 tomonidan qo'llab-quvvatlandi. Dianne Figlewicz Lattemann Katta ilmiy tadqiqot ishi, Biomedikal laboratoriya tadqiqot dasturi, Veteran ishlari bo'limi Puget Sound Sog'liqni saqlash tizimi, Sietl, Vashington. Stiven Beno`t NIH DK066223 va Ethicon Endosurgery Inc. tomonidan qo'llab-quvvatlandi. Yozuvchilar Tami Wolden-Hansonga tana tarkibini o'lchash yordami uchun minnatdorchilik bildiradilar; Doktor Uilyam Banklar va Lucy Dillman triglitseridlar o'lchovlari bilan yordam berish uchun; va Amalie Alver va Samanta Tomas-Nadlerlar qiziqishlariga oid tadqiqotlar uchun yordam berishdi.

Manbalar

Andersen SL, Teicher MH. Adolesan depressiyasida stress, sezgir davrlar va etuk voqealar. Neurologiyadagi tendentsiyalar. 2008; 31: 183-191. [PubMed]
Aponte Y, Atasoy D, Sternson SM. AGRP neyronlari boqish xulq-atvorini tezda va mashq qilmasdan o'tkazish uchun etarli. Tabiiy neuroscience. 2011; 14: 351-355. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Barnes MJ, Argyropoulos G, Bray GA. AgRP knockout sichqonlarida mu opioid retseptorlari faollashtirilgandan so'ng yuqori yog 'dietasi uchun afzallik beriladi, ammo giperfagiya emas. Miya tadqiqotlari. 2010; 1317: 100-107. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Bolaños CA, Barrot M, Berton U, Wallace-Black D, Nestler EJ. Oldindan va periadolitik davrda metilfenidatli davolanish ergenlik davrida hissiyotlarga ta'sir etuvchi ta'sirlarni o'zgartiradi. Biologik psixiatriya. 2003; 54: 1317-1329. [PubMed]
Bolaños CA, Glat SJ, Jekson D. Periadolzent kalamushlarda dopaminerjik dorilargacha bo'lgan ta'sirchanlik: qiziqish va neyrokimyoviy tahlil. Miya tadqiqotlarini rivojlantirish miya tadqiqotlari. 1998; 111: 25-33. [PubMed]
Brandon CL, Marinelli M, Beyker LK, Oq FJ. Barkamol kalamushlarda metilfenidatni davolashdan keyin kuchaytirilgan reaktivlik va giyohga zaiflik. Neyropopsikofarmakologiya. 2001; 25: 651-61. [PubMed]
Brandon CL, Marinelli M, Oq FJ. Adolesan metilfenidat ta'sir kalamush o'rta midiya dopamin nöronlarının faoliyatini o'zgartiradi. Biologik psixiatriya. 2003; 54: 1338-1344. [PubMed]
Broberger C, Johansen J, Johansson C, Schalling M, Hokfelt T. Normal, anorektik va monosodyum glutamat bilan davolash qilingan sichqonlarda nervopeptid Y / agouti geni bilan bog'liq protein (AGRP) miya davri. Milliy Fanlar akademiyasining ilmiy ishlari. 1998; 95: 15043-15048. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Cason AM, Smit RJ, Tahsili-Fahadan P, Moorman DE, Sartor GC, Aston-Jones G. Oreksin / gipokretinning mukofot izlash va giyohvandlikdagi o'rni: semirishning oqibatlari. Fiziologiya va o'zini tutish. 2010; 100: 419-428. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Choi DL, Davis JF, Fitzgerald ME, Benoit SC. Oziq-ovqatni rag'batlantirish, mukofotga asoslangan oziqlantirish xatti-harakatlarida va sichqonlarda oziq-ovqat bilan bog'liq bo'lgan nöronal faollashishda orexin-A ning ahamiyati. Neuroscience. 2010; 167: 11-20. [PubMed]
Cizza G, Brown RJ, Rother KI. Bolalikdagi diabet kasalliklarining kuchayishi va kuchayishi. Mini tadqiqotlar. Endokrinologik tekshirish jurnali. 2012 epub May 8, 2012. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Coldwell SE, Oswald TK, Reed DR. O'sishning belgisi yuqori va past shakarni afzal ko'rgan o'spirinlar o'rtasida farq qiladi. Fiziologiya va o'zini tutish. 2009; 96: 574-580. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Davis JF, Choi DL, Benoit SC. Insulin, leptin va mukofot. Endokrinologiya va metabolizmdagi tendentsiyalar. 2010; 21: 68-74. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Davis JF, Choi DL, Schurdak JD, Fitzgerald MF, Clegg DJ, Lipton JW, Figlewicz DP, Benoit SC. Leptin energiya muvozanatini va turli neyron davrlarida harakat orqali turtki beradi. Biologik psixiatriya. 2011a; 69: 668-674. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Devis JF, Choi DL, Schurdak JD, Krause EG, Fitzgerald MF, Lipton JW, Sakai RR, Benoit SC. Markaziy melanokortinlar mezokortikolimbik faollikni va kalamushda oziq-ovqat izlash harakatlarini modulyatsiya qiladi. Fiziologiya va o'zini tutish. 2011b; 102: 491-495. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Davis JF, Tracy AL, Schurdak JD, Tschop MH, Clegg DJ, Benoit SC, Lipton JW. Yuqori darajali parhez yog'iga ta'sir qilish sichqonda psixostimulyar darajada mukofot va mesolimbik dopamin aylanishini kamaytiradi. Behavioral Nevrologiya. 2008; 122: 1257-1263. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Desor JA, Beauchamp GK. Odamlarda shirin imtiyozlarning uzunlamasına o'zgarishi. Fiziologiya va o'zini tutish. 1987; 39: 639-641. [PubMed]
Desor JA, Greene LS, Maller O. 9-15-yoshli va kattalardagi odamlarga shirin va sho'rlikdagi afzalliklar. Ilmiy. 1975; 190: 686-687. [PubMed]
Drewnowski A. Energiya zichligi, mazasi va to'yligi: vaznni nazorat qilish uchun ta'sir. Oziqlantirish sharhlari. 1998; 56: 347-353. [PubMed]
Figlewicz D.P., Bennet JL, Aliakbari S, Zavosh A, Sipols AJ. Sichqonlarga aktiv sukrozni oziqlantirishni va sukrozni o'z-o'zini boshqarishini kamaytirish uchun insulin turli xil MSS uchastkalarida harakat qiladi. Amerika fiziologiya jurnali. 2008; 295: R388-R394. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Figlewicz DP, Bennett JL, Naleid AM, Devis C, Grimm JW. Intraventrikulyar insulin va leptin kalamushlarda sukrozning o'z-o'zini boshqarishini pasaytiradi. Fiziologiya va o'zini tutish. 2006; 89: 611-616. [PubMed]
Figlewicz D.P., Bennet-Jay JL, Kittleson S, Sipols A.J., Zavosh A. Sukrozning o'zini o'zi boshqarish va kalamushlarda CNS faollashuvi. Am J Physiol. 2011; 300: R876-R884. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Figlewicz DP, Ioannou G, Bennett Jey J, Kittleson S, Savard C, Roth CL. Sichqonchada metabolizm sog'lig'iga tatlandırıcılarni o'rtacha iste'mol qilish ta'siri. Fiziologiya va o'zini tutish. 2009; 98: 618-624. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Figlewicz D.P., Sipols AJ. Energiya tartibga solish signallari va oziq-ovqat mukofotlari. Farmakologiya, biokimyo va xulq-atvor. 2010; 97: 15-24. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Frangioudakis G, Gyte AC, Loxham SJ, Poucher SM. Kannulated Wistar kalamushlarida venoz glyukoza bardoshlik sinovi: Glyukoza kiritilgan insulin sekretsiyasini in vivo jonli baholash uchun mustahkam usul. Iqtisodiyot va toksikologik usullar jurnali. 2008; 57: 106-113. [PubMed]
Xagan MM, Rushing PA, Pritchard LM, Schwartz MW, Strack AM, Van Der Ploeg LHT, Woods SC, Seeley RJ. AgRP- (83-132) ning uzoq muddatli yokieksigenik ta'siri melanokortin retseptorlari blokadasidan boshqa mexanizmlarni o'z ichiga oladi. Amerika fiziologiya jurnali. 2000; 279: R47-R52. [PubMed]
Hahn TM, Breininger JF, Baskin DG, Schwartz MW. Fasting-faol hipotalamusli neyronlarda Agrp va NPY ning o'zaro ta'siri. Tabiiy neuroscience. 1998; 1: 271-272. [PubMed]
Hodos V. Progressive nisbati mukofot qobiliyati o'lchovi sifatida. Ilmiy. 1961; 134: 943-944. [PubMed]
Ikemoto S, Panksepp J. Ödüllü miya mintaqalarining farmakolojik manipülasyonları bilan appetit va tüketici javob o'rtasidagi dissociasyonlar. Behavioral Nevrologiya. 1996; 110: 331-345. [PubMed]
Jewett DC, Cleary J, Levine AS, Schaal DW, Tompson T. Nervopeptid Y, insulin, 2-deoksiglikozning va oziq-ovqat mahsuldorligining oziq-ovqatga asoslangan harakatlariga ta'siri. Psixofarmakologiya. 1995; 120: 267-271. [PubMed]
Kushik S, Rodriguez-Navarro JA, Arias E, Kiffin R, Sahu S, Schwartz GJ, Cuervo AM, Singh R. Hipotalamik AgRP nöronlardaki otoofaji oziq-ovqat iste'moli va energiya balansini boshqaradi. Hujayra metabolizmi. 2011; 14: 173-183. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Kelley AE, Berrij K. Tabiiy mukofotlar neuroscience: giyohvandlik moddalariga tegishli. Neuroscience jurnali. 2002; 22: 3306-3311. [PubMed]
Kelley SP, Nannini MA, Bratt AM, Hodge CW. Paraventrikulyar yadrodagi neyropeptit-Y etanolni o'z-o'zini boshqarishini oshiradi. Peptidlar. 2001; 22: 515-522. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Kohli R, Boyd T, Leyk K, Ditrix K, Nicholas L, Balistreri WF, Ebach D, Shashidkar X, Xanthakos SA. Bolalikda NASHning tezkor rivojlanishi. Pediatriya gastroenterologiyasi va ovqatlanish jurnali. 2010; 50: 453-456. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Krashes MJ, Koda S, Ye Cp, Rogan SC, Adams AC, Cusher DS, Maratos-Flier E, Roth BL, Lowell BB. AgRP neuronlarining tez qayta tiklanadigan faollashuvi sichqonchada oziqlantirish harakatlarini boshqaradi. Klinik tekshiruv jurnali. 2011; 121: 1424-1428. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Mennella JA, Pepino MY, Reed DR. Achchiq his-tuyg'ularning genetik va ekologik determinantlari va shirin afzalliklar. Pediatriya. 2005; 115: 216-222. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Myers KP, Sklafani A. Bilimli lazzat afzalliklarini ishlab chiqish. Rivojlanish psixobiologiyasi. 2006; 48: 380-388. [PubMed]
Milliy rak instituti amaliy tadqiqotlar dasturi. AQSH aholisi, 2005-06 orasida qo'shilgan shakarlardan olingan kaloriya manbalari. 21 Dekabr 2010 yangilandi. [21 Sentyabr 2011ga kirdi]; 2010 Qabul qilinadi: http://riskfactor.cancer.gov/diet/foodsources/added_sugars/
Nixon JP, Chjan M, Vang CF, Kuskowski Ma, Novak CM, Levine JA, Billington CJ, Kots CM. Kemiruvchilarda butun tana tarkibini tahlil qilish uchun miqdoriy magnit-rezonans tomografiya tizimini baholash. Semirib ketish. 2010; 18: 1652-1659. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Ogden CL, Kerol MD. Sog'liqni saqlash va ozuqani sinash tadqiqotlari bo'limi. Bolalar va o'smirlar orasida semirishning tarqalishi: AQSh, 1963-1965 orqali 2007-2008 yo'nalishlari. [21 Sentyabr 2011ga kirdi]; Sog'liqni saqlash e-Stat. 2010 2010 mavjud: http://www.cdc.gov/nchs/fastats/overwt.htm.
Paxinos G, Sterotaxik koordinatlardagi rat miyasining Watson S atlası. 5th. San-Diyegodagi CA: Elsevier Academic Press; 2005.
Richardson NR, Roberts DC. Sichqoncha ichidagi dori-darmonlarni o'zlashtirish ishlarida progressiv nisbatlar jadvali: takomillashtirish samaradorligini baholash usuli. Neyrologiya usullari jurnali. 1996; 66: 1-11. [PubMed]
Roitman MF, Stuber GD, Phillips PE, Wightman RM, Carelli RM. Dopamin oziq-ovqat mahsulotlarini izlashning pastki-sonli modulyatori sifatida ishlaydi. Neuroscience jurnali. 2004; 24: 1265-1271. [PubMed]
Rossiy M, Kim M, Morgan D, Kichik C, Edwards S, Sunter D, Abusnana S, Goldstone A, Russell S, Stanley S, Smit D, Yagaloff K, Ghatei M, Bloom S. Agouti- bog'liq protein ozuqani oshiradi va in Vivo jonli alfa-melanotsitni ogohlantiruvchi gormon ta'sirini antagonize qiladi. Endokrinologiya. 1998; 139: 4428-4431. [PubMed]
Stanhope KL. Fruktoza tarkibidagi shakarlarning semizlik va metabolik sindrom epidemiyalaridagi o'rni. Tibbiyotning yillik izohlari. 2012; 63: 329-343. [PubMed]
Sturman ULARNING, Mandell DR, Mogadad B. B. O'smirlar instu-metmetal o'rganish va yo'q bo'lib ketish vaqtida kattalarnikidan xatti-harakatlarning farqlari mavjud. Behavioral Nevrologiya. 2010; 124: 16-25. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Tracy AL, Clegg DJ, Jonson JD, Davidson TL, Woods SC. Melanokortin antagonisti AgRP (83-132) yog 'uchun ishtahani oshiradi, lekin u karbongidrat emas, mustahkamlovchi bo'ladi. Farmakologiya biokimyo va o'zini tutish. 2008; 89: 263-271. [PMC bepul maqola] [PubMed]
Vartanian LR, Schwartz MB, Brownell KD. Salqin ichimliklar iste'molining oziqlanish va sog'liqqa ta'siri: sistematik tahlil va meta-tahlil. Amerika sog'liqni saqlash jurnali. 2007; 97: 667-75. [PMC bepul maqola] [PubMed]