Perinatal G'arbiy Diet iste'moli gipotalamus va gepatoreal favqulodda o'zgarishlarga olib keladi va tug'ilishdan jinsiy olamga qadar jinsiy rivojlanish (2017)

. 2017; 8: 216.

Onlaynda nashr etilgan 2017 avgust 29. doi:  10.3389 / fendo.2017.00216

PMCID: PMC5581815

mavhum

Perinatal energiya iste'moli zich oziq-ovqat mahsulotlari bolalarda semirish xavfini oshiradi. Bu geyonik mulk uchun iste'mol qilinadigan mazali taomlarni ortiqcha iste'mol qilish bilan bog'liq. Perinatal maternal dietani va naslning nasl-nasab afzalligini bog'laydigan asosiy mexanizm hali ham yomon tushuniladi. Biz ushbu tadqiqotda tug'ilishdan tug'ilishdan jinsiy etuklikka qadar emizishni nazorat qiluvchi mukofotlash yo'llari bo'yicha homiladorlik va laktatsiya davrida onaning yuqori yog'li / yuqori shakarli dietani oziqlantirish [g'arbiy dietani (WD)) ta'sirini o'rganishni maqsad qilmoqdamiz. Biz uchta tanqidiy davrda (bolalik, o'smirlik va o'smirlik) WD va Control naslining uzunlamasına ta'qibini o'tkazdik va (i) yog' imtiyozlari bo'yicha perinatal ta'sirlanishning ta'sirlanishini tekshirishga e'tibor berdik, (ii) gen ekspression profil , va (iii) mezolimbik dopaminerjik tarmoqlarning neyroanatomik / me'moriy o'zgarishlar. Biz perinatal davrda cheklangan WD ovqatlanishini homeostatik va hedonik miya davrlarini tashkil qilishda uzoq vaqt davom etadigan ta'sirga ega ekanligini ko'rsatdik, ammo yog 'holatiga emas. Biz muayyan miya molekulyar imzolari bilan bog'liq bo'lgan yog'ning afzalligini aniq bir davrda namoyon etdik. WD oziqlantiruvchi to'g'onlardan olingan nasllarda biz bolalik davrida dopamin (DA) tizimlarida ishtirok etadigan asosiy genani ifodalovchi yog 'holatining borligini kuzatdik; o'smirlik davrida WD guruhi uchun 3 kunlik sinovda asta-sekin kamaytirildi va WD guruhi uchun DA tizimlarida ishtirok etuvchi kalit geni ifodalangan kam sonli eksperiment bilan bog'liq bo'lib, ularni himoya qilish uchun kompensatsiya mexanizmini taklif qiladi undan yuqori yog'li ta'sir qilishdan; va nihoyat, katta yoshli ayollarda kalamushlarni nazorat qilish bilan bir xil bo'lgan, ammo gamma-aminobutirik kislota tarmog'ida, serotonin retseptorlari va polisial kislota-NCAMga bog'liq bo'lgan gipotalamusni qayta shakllantirishda muhim genlarda chuqur o'zgarishlar bilan bog'liq. Umuman olganda, ushbu ma'lumotlar, perinatal davr bilan cheklangan maternal WD, hipotalamik homeostatik va oziq-ovqat bilan shug'ullanadigan ovqatlanish yo'llarini kuchli tarzda takomillashtirishga qaramasdan, hayotning keyingi davrida energiya gomeostaziga va yog' imtiyozlariga barqaror ta'sir ko'rsatmasligini ko'rsatmoqda. Ushbu simlarni qayta tuzishning ahamiyatini tushunish uchun boshqa funktsional tajribalar talab etiladi.

Kalit so'zlar: mukofot, DOHaD, oziq-ovqat afzalliklari, oziq-ovqat, g-aminobutirik kislota, TaqMan past zichlikli massiv

Kirish

Erta hayot muhiti va hodisalar keyinchalik hayotda sog'liq va kasallikka moyil bo'lishga hissa qo'shadi (-). Metabolik bosim tushunchasi perinatal davrda ozuqaviy va gormonal muhitdagi o'zgarishlar naslni semizlikka va uning bog'liq patologiyalariga qanday ta'sir qilishi mumkinligini tasvirlash uchun taklif qilingan. Oddiy hayot tarzimiz muhim bir masala energiya zich oziq-ovqat iste'moli natijasida ortiqcha ovqatlanishdir. Haqiqatan ham, bu turdagi oziq-ovqatni onalikka uchragan shaxslar semizlik va metabolik sindromni (masalan,, ). Ko'pgina tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, homiladorlik va emizish orqali tug'ilishning yuqori yog'li dietasi (HFD) nasl metabolizmiga uzoq muddatli ta'sir ko'rsatadi (-). Metabolik tartibga solinadigan yo'llarga qo'shimcha ravishda, miya mukofot tizimlarida ham oziqlantirish xatti-harakatida muhim rol o'ynaydi (, ). Mezolimbik dopamin (DA) nörotransmisyonu, intensiv ravishda mukofot va qo'shilish nuqtai nazaridan o'rganilib, inson organizmida dietaga bog'liq semirib ketishga (-) va hayvonlar (-). DA prognozlari, ko'pincha, postnatal (), shuning uchun ularning rivojlanishi erta dietadan ta'sirlanishi mumkin. O'tgan bir necha yil davomida kemiruvchilar bo'yicha tajribalar shuni ko'rsatadiki, onalik parhezzi iste'mol qilish nasllarda gepatik oziqlantirishni kuchaytiradi (, ). Ushbu kuzatishlarga DA tizimining funktsiyasida ba'zi o'zgarishlar kiritilgan bo'lsa ham (-), erta hayotda mukofot mexanizmlarini ontogeniya va qayta tuzish bo'yicha cheklangan ma'lumotlar mavjud (). Bundan tashqari, GABA (g-aminobutirik kislota) tizimi kabi mukofot tizimining noaniqlik signalizatsiya bo'limi perinatal oziqlanish stressidan ta'sirlanishiga qanday ta'sir ko'rsatishi va qanday tekshirilmaganligi hujjatlashtirilmagan. Darhaqiqat, GABA neyronlari mukofot va nafratda asosiy rol o'ynaydi. Ventral tegmental hududi (VTA) GABA neuronlari turli miya joylaridan o'xshash usulni oladi (), va so'nggi paytlarda optogenetik asosli xulq-atvorda VTA GABA ning shartli joydan voz kechishida) va sarf-xarajat sarf-xarajatlarida (). Nucleus accumbens (NAc) asosan GABAergic o'rta zarralar neyronlari proektsiyasidan iborat bo'lib, limbik tizimdan kelib chiqadigan signallarni birlashtiruvchi limbik-vosita interfeys vazifasini bajaradi va ularni harakatga aylantiradi orqali Ventral pallid (VP) va boshqa vosita efektorlariga). Va nihoyat, LHdagi ko'p sonli GABA birikmalaridan tashkil topgan gipotalamus) va kavis yadrosi ochlik va to'yish signallarini birlashtiradi ().

Ushbu tadqiqot, tug'ruqdan tug'ilishdan jinsiy etuklikka (i) yog 'holatiga (ii) DA tizimining gen ekspresyon profiliga, GABAergik tizimga va gipotalamusning plastisitesiga ta'sir qilishini aniqlashga qaratilgan. , va (iii) xuddi shu davrda mezolimbik dopaminerjik tarmoqlarning neyroanatomik / me'moriy o'zgarishlar yuzasidan. Shuning uchun uzun bo'yli bir ishda (sutdan ajratish, P25dan, jinsiy etuklikka, P45 va kattalarga, P95), onaning tana vaznining o'sishiga ta'siri va naslning semiz to'qimalarining rivojlanishi muntazam ravishda sutdan ajratilgan holda saqlanib turdi. Birgalikda biz oziq-ovqat iste'mol qilish, tanlov va motivatsiya tartibga soluvchi tizimlar uchun markerlarni tanlashning o'ziga xos transkriptomik tahlilini va keyinchalik asosiy komponent tahlilini (PCA) so'ng yog 'imtiyozi testini o'tkazdik. Bizning natijalarimiz DA tizimining ozuqaviy dasturlashiga qaratilgan so'nggi natijalarni sezilarli darajada boyitdi.

Materiallar va usullari

Axloqiy bayonot

Barcha eksperimentlar mahalliy hayvonlarni himoya qilish qo'mitasi, Evropa Ittifoqi (2010 / 63 / EI direktivasi), Institut National de la Recherche Agronomique (Parij, Frantsiya) va Frantsiya veterinariya bo'limi (A44276). Eksperimental protokol institutional axloqiy kengash tomonidan tasdiqlangan va APAFIS 8666 referansida ro'yxatdan o'tkazildi. Stressni kamaytirish va har bir eksperimentda ishlatiladigan hayvonlarning sonini kamaytirish uchun har qanday chora ko'rildi.

Hayvonlar va dietalar

Hayvon 12 ± 12 ° S da oziq-ovqat va suv bilan birga 22-h / 2-soati / qorong'i aylanish jarayonida saqlangan ad libitum. Gebelik kunida 240 (G290) homiladorlik davrida o'ttiz ikki dona Sprague-Dawley kalamush (vazn og'irligi: 1-1 g) Janvier (Le Genest Saint-Isle, Frantsiya) dan sotib olindi. Ular 5 uchun yoki xomiladorlik davrida va laktatsiya davrlarida 0 uchun WD (16% mol go'shti va 21% sukroz) uchun nazorat dietasi (CD) (30% mol go'shti va 16% sukroz) (jadvalga qarang) Table1: 1: diet tarkibini ABdiet Woerden, Gollandiya) dan foiz kkal. Tug'ilganda, xaltadagi o'lcham 1: 1 dan erkak va urg'ochi nisbati bo'lgan har bir litrga sakkiz gepardga o'rnatildi. Biz 12ni har bir guruh uchun 16 erkak va 4 urg'ochidan tashkil topgan 4 to'g'onlaridan ushlab qoldik. Sutdan ajratishda (P21), CD va WD to'g'onlaridan tug'ilgan avlodlar tajriba tugagunigacha standart chov ustida saqlangan (shakllar (Figures1A, B) .1A, B). Pupning tana vazni tug'ilgandan keyin va kundan keyin har kuni 10da qayd etildi: 00 - P21 (sutdan ajratish) ga qadar. Sutdan ajratilgandan so'ng va tajriba tugaguniga qadar kalamushlar har 3 kunda og'irlikda edi. Biz faqat erkak o'g'illari haqida ma'lumotlarni taqdim etamiz. Ayol irillagan boshqa bir ishda ishlatilgan (rasm (Rasm 11).

1 stol 

Homiladorlik va laktatsiya davrida qo'llaniladigan maternal xunning har bir komponentidan foizi kkal tarkibida xolning tarkibi va avlod uchun standart parhez.
Shakl 1 

Eksperimental dizayn. (A) Tadqiqot dizayni chizma diagrammasi. 1 (G1) homiladorlik kunida o'ttiz ikkita SPD kalamushlari 16 uchun nazorat dietini yoki homiladorlik va laktatsiya davrida boshqalar uchun g'arbiy diet berildi. Sutdan ajratishda, avlod ...

Xatti-harakatlar (Ikki shisha tanlov imtihoni)

Uchta muhim rivojlanish davri o'rganildi (P21 to P25: balog'atga etmaganlar, P41 to P45: o'smirlik va P91 to P95: yosh kattalar). 24 erkak erkaklar (n = Har bir guruh uchun 12 ta) tasodifiy tanlangan va ikkita shishani tanlash uchun bepul sinovni o'tkazish uchun individual katakka joylashtirilgan (Raqamlar) (Figures1A, B) 1A, B) (-). Ushbu test shirin ta'midan va imkon qadar kaloriya iste'molining metabolik ta'siridan ajralib, yog 'ta'mi uchun o'ziga xosliklarni o'rganish uchun ishlatilgan. Haqiqatan ham, 1% Misr yog'i eritmasini iste'mol qilish faqat 0.09 kkal / ml iste'mol qilish bilan bog'liq. Ikki shishaning mavjudligiga bir kunlik tajribadan so'ng, test 2 kun davomida P25 va 4 kun davomida P41 va P91 (Surat (Rasm 1A) .1A). Tafsilotlarda sutdan ajratishda (P21) 24 chaqaloqlar 2 kun davomida alohida-alohida joylashtirildi (shakl (Rasm 1A): 1A): kunlik 1, odatiy bosqich, kun 2, kalamushlarga 1% xanthan sakızı (Sigma Aldrich, Aziz Quentin Fallavier, Fransiya) va Xanthan sakızı eritmasida (0.3% Misr yog'i) emulsiyasi o'rtasida ikkita shishani erkin tanlash berildi 0.3%). P41 va P91 da 24 pups ishlatilgan va ikki dona shishadan uch kun ketma-ketlikda erkin tanlov taklif qilingan. Xanthan sakızı eritmasi va ta'm solüsyonu (Misr yog'i 1%) iste'moli kuniga 11: 00 amda 3 kun (P45 va P95) uchun qayd etildi. Ikki shishaning pozitsiyasi har kuni pozitsion holatni oldini olish uchun teskari tarjima qilingan. Yog 'imtiyozi ballari iste'mol qilinadigan "yog' eritmasi" hajmining 24-soatda iste'mol qilingan umumiy hajmga nisbati sifatida hisoblanadi. Barcha kalamushlar xatti-harakatlarda standart chod dietasi ostida saqlangan.

To'qimalarning to'planishi va qon namunalari

Ikkita shishani erkin tanlash imtihonining so'nggi kunidan so'ng, kalamushlarning yarmi (n = Har bir guruh uchun 6) CO tomonidan ertalab soat 09:00 dan 12:00 gacha evtanizatsiya qilingan2 nafas olish. Qon EDTA (Laboratoires Léo SA, St Quentin en Yvelines, Frantsiya) bilan naychalarda to'plangan va 2,500 da santrifüj qilingan g 15 ° S da 4 daqiqa. Plazma -20 ° C da muzlatilgan. Organlar va alohida retroperitoneal yog' deposi diseksiyalangan va vazni olingan. Miya tezlik bilan olib tashlandi va miya matritsasiga (WPI, Sarasota, FL, AQSh rat 300-600 g) joylashtirildi. Avval gipotalamus (Paxinosning atlas koordinatalari bo'yicha: -1.0 dan -4.5 mmgacha Bregma ()), keyin har bir rat uchun, 2 mm kalinliktaki ikki koronal tilim NAc darajasida, ikkinchisi esa VTA darajasida olingan. O'ng va chapdagi NAc va o'ng va chap VTA namunalari (har bir hayvonning umumiy sonida to'rtta namunadir) ikki xil biopsiya punkti (Stefel Laboratories, Nanterre, Frantsiya) yordamida tezda olingan (NAc va 4 mm uchun 3 mm diametri ventral midbran uchun). Namunalar suyuq azotda muzlatilgan bo'lib, keyinchalik TaqMan past zichlikli massiv (TLDA) tomonidan gen ekspiratsiyasini aniqlash uchun -80 ° C da saqlanadi.

Boshqa kalamushlar (n = 6 ta guruhga) pentobarbital (150 mg / kg ip) bilan chuqur behushlik qilindi va transkardial fiziologik fiziologik fiziologik eritma bilan perfuziya qilindi, so'ngra fosfat tampon (PB) tarkibidagi muzli 4% paraformaldehid, pH 7.4. Miyalar tezda olib tashlandi, 1 soat davomida 4 soat davomida bir xil fiksatifga botirildi va nihoyat 25% PB saxarozada 24-48 soat davomida saqlandi. Keyin miyalar izopentan ichida -60 ° C da muzlatilgan va nihoyat -80 ° C da ishlatilguncha saqlangan. NAc, gipotalamus va VTA kriyostat (Mikrom, Mikrotek, Franchevill, Frantsiya) bilan 20 um seriyali koronal qismlarga bo'lindi. Har bir miya maydoni uchun 10-4 qismni o'z ichiga olgan ikki yoki uchta 6 ta shisha slaydlar bajarildi. Har bir shisha slayd uchun ketma-ket qismlar 200 µm masofada joylashgan (rasm) (Rasm 66).

Shakl 6 

G'arbiy dietadan (WD) yoki nazorat dietidan (CD) olingan bolalarni sutdan ajralib chiqishdan tortib, yadrodagi akumbenslarda (NAc) ventral tegmental sohada (VTA) TH va NeuN musbat neyronlari va TH zichlikli tolalar miqdori. (A) Paxinos va Watsonning sxemasi ...

Biyokimyasal plazma tahlillari

Plazma glyukoza, NEFA (esterifikatsiyalanmagan yog'li kislotalar), insulin va leptinni o'lchash uchun P25, P45 va P95 kalamushlarida to'plangan EDTA plazmasi ishlatilgan. Glyukoza va NEFA kolorimetrik enzimatik reaksiyalar yordamida aniq to'plamlar bilan (glyukoza va NEFA PAP 150 to'plamlari, BioMérieux, Marcy-l'Etoile, Frantsiya) o'lchandi. Gormonlar ishlab chiqaruvchining insulin va leptin (rat / sichqonchani insulin ELISA to'plami, sichqonchani leptin Elishay to'plami, Linco Research, St. Charlz, MO, AQSh) bo'yicha ko'rsatmalariga muvofiq aniq Elishay to'plamlari bilan tahlil qilindi.

Immunohistokimyo

Seriya VTA va NAc bo'limlarini o'z ichiga olgan shisha slaydlar birinchi marta 3-4 soati uchun bloklandi va so'ngra quyidagi antikorlarning aralashmasi bilan 4 ° C darajasida inkübe qilindi: Sichqoncha anti-NeuN (1: 500; IgM, Millipore Bioscience Research Reagents, Merk, USA) va quyonlarga qarshi (1: 1,000; Millipore Bioscience Research Reagents, Merk, AQSH). Primer antikorlar bilan inkubatsiyadan so'ng va keyinchalik PB bilan yuvishdan keyin sektsiyalar sekonder antikorlarning aralashmasida inkübe qilindi: Alexa 488 konjugatlangan eshak piyodalarga qarshi sichqonchani IgM va Alexa 568-konjugatsiyalangan eshakni quyonlarga qarshi IgG (1: 500; Invitrogen, ThermoFisher Scientific, Waltham , MA, AQSh) 2 soat uchun. Bo'limlar supero'tkazuvchi va oltin slaydlarda (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, AQSh) o'rnatilgan va havo bilan quritilgan va ProLong ™ Gold antifayt reaktivi bilan qoplangan (Invitrogen, ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, AQSh).

TH neyronlari VTA-da hisoblanadi

Har bir rat uchun TH-musbat hujayralari ilgari ta'riflangan () VTA ning uch xil rostrocaudal darajasida: uchinchi nerv chiqishi darajasida (Bregma: -5.3 mm ga nisbatan masofa), ushbu darajaga 200 mkm rostral va 200 mm kaudal darajasida (shakllar (Figures6A) .6A). Chap va o'ng tomon uchun, vosita sifatida mezensefalonning lateral chegara tomonidagi aksessuar terminalidagi barcha VTA ni o'z ichiga olgan raqamli rasm NanoZoomer-XR Digital slide scanner C12000 (Hamamatsu, Yaponiya). Har bir bo'lim uchun VTA perimetri atrofida chiziq chizilgan. Hujayralar hujayralarning shakli va Paxinos va Watson atlasiga murojaat qilish yo'li bilan tanlangan. Dopaminergik neuron aniq ko'rinadigan yadroli, NeuN (+) / TH (+) immunoreaktiv hujayrali tanasi sifatida tavsiflangan. NIH Image J dasturidan (hujayra hisoblagich plaginini) foydalanib, NeuN (+) / TH (+) xujayralari hayvon guruhlari haqida hech qanday ma'lumotga ega bo'lmagan ikki xil shaxs tomonidan sanab chiqildi. Split-hujayralarni hisoblash xatolar Abercrombie formulasi yordamida tuzatilgan (), bu erda N = n[t/(t + d)] (N = kataklarning umumiy soni; n = hisoblangan kataklar soni; t = bo'lim qalinligi; va d = hujayra diametri), va bu tuzatish koeffitsienti 0.65 edi. Ma'lumotlar o'rtacha [NeuN (+) / TH (+) chap va o'ng VTAda] ± SEM sifatida ifodalanadi.

NAc ichida TH tolalar zichligi

NAc ning dopaminerjik nerv terminalidagi TH protein tarkibi TH immuno-etiketlangan qismlarining anatomik densitometrik tahlillari bilan baholandi. TH liflerinin zichligi, NAc'nin (Bregma 2.20, 1.70 va 1.20 mm) rostrocaudal eksa davomida uch o'zboshimchalik darajasida aniqlandi (shakl (Rasm 6B) .6B). Qisqacha aytganda, butun striatum va NAc ni o'z ichiga olgan raqamli tasvir NanoZoomer-XR Digital slide scanner C12000 (Hamamatsu, Yaponiya) olingan. Muayyan NAc uchun butun yadro atrofida optik zichlik (OD) o'lchamlarini aniqlash uchun chiziq chizilgan. (Rasm 6B) .6B). Olingan qiymat NIH Image J dasturidan foydalangan holda bir xil bo'limdagi korpus kallosumida (IV immunokimyosi uchun bo'yalmagan mintaqa) chizilgan dairesel zonadan o'lchangan OD qiymati bilan normallashtirildi. Ma'lumotlar OD nisbati (uch bo'limning korpus kallosumida NAc / OD qiymatidagi AH qiymati) ± SEM oralig'ida ifodalanadi.

TLDA va TaqMan tomonidan gen ifodasi

RNK NucleoSpin RNA / protein to'plamini (Macherey-Nagel, Hoerdt, Fransiya) foydalanib, muzlatilgan NAc, VTA-boyitilgan namunalar va gipotalamusdan ajratilgan. Jami RNK ishlab chiqaruvchining ko'rsatmalariga binoan DNase hazm qilish uchun yuborildi, miqdori 260 / 280 nm UV absorbansi bilan baholandi va sifat Agilent 2100 Bioanalyzer System yordamida baholandi, keyin RNT yaxlitligi raqamini (RIN) hisoblashdi. 8 ostidagi RIN-li namunalar bekor qilindi. Jami RNKning bir mikrogrami umumiy hajmda 10 ml bo'lgan yuqori quvvatli RT to'plamini (Applied Biosystems, Foster City, CA, AQSh) qo'llash orqali cDNAga teskari transkriptsiya qilindi.

Yuqorida aytib o'tilganidek (), TLDA 384 bir vaqtning o'zida real vaqtda PCRlar bajarilishi mumkin bo'lgan 384-quduqli mikro-akışkan karttır (Applied Biosystems, Foster City, CA, AQSh). Oziq-ovqat mahsulotlarini plastika va tartibga solish bilan bog'liq turli gen oilalarini qamrab olish uchun maxsus ishlab chiqilgan TLDA ishlatilgan. Har bir maxsus karta 2 × 4-reaktsiya xonalarini o'z ichiga olgan 2 × 48-namuna yuklash liniyalari sifatida tuzilgan (havola: 96a). 92-gen seti (jadval S1 Qo'shimcha materiallarda) va to'rtta uy xo'jaligi genlari (18S, Gapdh, Polr2a va Ppia) o'rganildi. Haqiqiy vaqtda PCR Life Technologies TaqMan reagentlari yordamida amalga oshirildi va ABI Prism 7900HT ketma-ketligini aniqlash tizimida ishladi (Applied Biosystems, Foster City, CA, AQSh). Xom flüoresans ma'lumotlari PCR orqali SDS 2.3 dasturi yordamida (Applied Biosystems, Foster City, CA, AQSh) to'plandi. ThermoFisher bulutli ilovasi (ThermoFisher, AQSh) yordamida buzilgan PCR ishlarini ajratishdan so'ng filtrdan keyin namunaga n = 6 (n P5 da WD guruhi uchun = 25). Keyinchalik ma'lumotlar ThermoFisher Cloud App (ThermoFisher, AQSh) yordamida nisbiy miqdorini aniqlash uchun tahlil qilindi. Gen ekspressionining nisbiy kantitatsiyasi (RQ) RQ = 2 tenglamasidan foydalangan holda qiyosiy Ct usuliga asoslangan edi-DDCt, Bu erda bir gen maqsad uchun DKt kalibratör misolidan chiqarilgan va endojen nazorat qilish bilan normalize qilingan o'z Ct varyasyonudur. Darhaqiqat, biz geNorm algoritmini (ThermoFisher Cloud App RQ, ThermoFisher, AQSh) ishlatib, eng barqaror tozalovchi genni aniqladik. To'rt uy xo'jaligidagi genlar orasida Gapdh NAc va hipotalamus uchun endogen nazorat va VPA uchun Ppia deb ta'riflangan va bu uch vaqt oralig'idagi barcha namunalar uchun to'g'ri bo'lgan. Genlarni ifodalashning grafik tasviri CD guruhiga nisbatan gen ekspresyonunun 10% ga oshishi uchun bitta rangni belgilash uchun qo'lda yaratilgan. Parametrik bo'lmagan Wilcoxon imzolangan darajadagi testdan foydalanib, sezilarli o'zgarish yulduzcha bilan qayd etildi.

Statistik tahlil

Natijalar jadval va shakllarda o'rtacha ± SEM sifatida ifodalanadi. Mann-Whitney parametrik bo'lmagan test turli vazndagi tana vaznini tahlil qilish, yog 'imtiyozlari va immunohistokimyodan olingan OD nisbati uchun ishlatilgan.

3 kunlik yog 'imtiyozlarining ahamiyatini baholash uchun har bir kun uchun ustun statistikasi tahlilini o'tkazdik. Har bir guruh uchun yog 'eritmasi va nazorat eritmasining iste'moli parametrik bo'lmagan Wilcoxon imzolangan testdan foydalanib testdan o'tkazildi. Biz imtiyozli o'rtacha qiymatni 50% (nuqtali qizil chiziq) gipotetik qiymati bilan taqqosladik. Qizil yulduz bilan sezilarli o'zgarish qayd etildi. QPCR RQ qiymatini tahlil qilish uchun bir xil testdan foydalanganmiz; o'rtacha RQ qiymatini 1ning faraziy qiymati bilan taqqosladik. Asterisk bilan sezilarli o'zgarish qayd etildi (rasm (Rasm 44).

Shakl 4 

Nekroz akumbens (NAc), ventral tegmental hudud (VTA) va perinatal-g'arbiy dietadan olingan gipotalamalar uch vaqt oralig'ida sichqoncha bilan oziqlangan parrandalar va perinatal-nazorat dietida nisbiy gen ekspression. Bunda genlarni ifodalashning bir vaqtda miqdori ...

Plazma namunasini tahlil qilish uchun parametrik bo'lmagan Mann va Whitney testini o'tkazdik. TH-musbat hujayralar soni ikki tomonlama ANOVA va p qiymati hisoblanadi. Amalga oshirilgan testlarning ko'pligi tufayli Bonferroni post hoc tuzatish faqat ushbu testdan so'ng qo'llanildi. Statistik tahlil Prizma 6.0 dasturi yordamida amalga oshirildi (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA, AQSh).

Tekshirilmagan PCA birinchi navbatda 130 parametrlari (TLDA, xatti-harakatlar va plazma ma'lumotlari) bo'yicha har bir miya biyopsi punkti (VTA, NAc va gipotalamus) uchun turli xil vaqt nuqtasida bajarildi (ma'lumotlar to'plamining umumiy tuzilishini (ya'ni, uchta global PCA vaqt bo'yicha). PCA ma'lumotlarning ortogonal proektsiyasi pastki o'lchovli chiziqli fazaga, ya'ni prognozlangan ma'lumotlar o'zgaruvchanligi pastki maydonda maksimal darajada bo'lishi mumkin. Avvalo ifoda etilmagan yoki ozgina ifoda etilmagan genlarni filtrladik (Rasm (Rasm 5) .5). CD-beriladigan suv omborlari va WD-dan ajratilgan to'g'onlardan olingan naslga oid qiymatlar ushbu ikki tajriba guruhining tekshirilmagan PCA komponentlari bilan yaxshi ajralib turadimi-yo'qligini tasavvur qilish uchun individual PCA uchastkalarida turli xil ranglarda paydo bo'ldi. Ushbu tahlil genlar guruhlarini alohida-alohida ikkita urug' guruhlari o'rtasida ifodalaydi. Keyinchalik, yo'naltirilgan PCAlar mRNA markerlarining turli klasterlarida: plastisite (hujayra yapışması, sitoskeleton, nörotrofik omil, sinaptogenez va transkripsiyonel tartibga solish), DA yo'l, GABAerjik yo'l, epigenetik modulatorlar (histon deasetilaz va histon asetil transferaz) ustida olib borildi. Ushbu yo'naltirilgan PCAlar bir vaqtda ona dietasi va ba'zi markerlar va muayyan oila genlari o'rtasidagi korrelyatsiya o'rtasidagi munosabatni bir vaqtning o'zida tasavvur qilish imkonini beradi. PCA va PCA tahlillari uchun sifatli o'lchovlar qo'llanildi: +++: juda yaxshi ajratish; ++: PCA ajratish noto'g'ri tomonida bir rat bilan yaxshi ajratish; +: Ikki kalamush (har bir guruhdan biri) noto'g'ri tomondan juda yaxshi ajratish -: aniq ajratish yo'q.

Shakl 5 

Asosiy komponentli tahlil (PCA). PCA skanerlash uchastkasini baholash (A, B). (A) P95 rat erkaklarning yadro akumbenslaridan (NAc) olingan umumiy PCA. Qora uchburchaklar nazorat dietasidan (CD) beriladigan to'g'onlardan va qizil uchburchaklardan avlodlarga mos keladi ...

natijalar

Tana vazni va o'sishi

Gebelikteki homilador WD iste'moli (G1 dan G21gacha) tug'ilgandagi tana vazniga ta'sir qilmadi (shakl (Rasm 2) 2) (CD: 6.55 ± 0.07 g va boshqalar. WD: 6.54 ± 0.05 g p = 0.9232) (Shakllar (Figures2A, B) .2A, B). Tug'ilgandan sutdan sutdan foydalanishgacha bo'lgan vaznning vazniga WD damlamalaridan tug'ilgan o'simliklardagi 21% balandlikda CD-tomlardan tug'ilganlarga qaraganda WD to'g'onlaridan tug'ilgan bolalarda sutdan ajratishda sezilarli darajada yuqoriroq bo'lgan (36.19 ± 0.90 g va 47.32 ± 1.48 g p <0.001) (shakl (Rasm 2C) .2C). Sutdan sinovdan (P95) oxirigacha, kalamushlar standart chov dietasi bilan oziqlangan va tana vazni WD damlamalaridan bolalar uchun CD barajlari naslidan ko'ra yuqori bo'lgan. Tafsilotlar: o'smirlik davrida (P39) (Fig (Figures2A, D), 2A, D), CD: 176.8 ± 3.3 g va boshqalar WD: 192.2 ± 3.3 g p = 0.0016 va P93 da (yosh kattalar) (Shakllar (Figures2A, E) 2A, E) CD: 478 ± 9.9 g va boshqalar WD: 508.6 ± 10.3 g p = 0.0452.

Shakl 2 

Tug'ilganidan to kattalargacha bo'lgan tana vaznining evolyutsiyasi. (A) 0 kuniga tana vaznining kuni. Qizil va postvortal davrlarda emlash davri (s) bolalik, (d) o'smirlik va (e) kulrang yosh kattalar. O'sish eğrisi ustida, nazorat dietasidan erkak o'g'illari ...

Turli vaqt oralig'ida gormonlar va metabolik belgilar

Plazma leptin, insulin, glyukoza va NEFA kontsentratsiyasi P25, P45 va P95da o'lchandi. Barcha yoshdagilarda plazma glyukoza, NEFA va leptin darajalari WD naslidan CD-lardan statistik jihatdan farq qilmadi (Jadval (Table2,2, n = Har bir guruh uchun 6). Biz faqat P25 da WD oziqlanadigan to'g'onlardan naslga yog 'birikmasining (retroperitoneal yog' massasi nisbati) sezilarli darajada o'sishini kuzatdik (p = 0.0327, Mann va Uitni testi).

2 stol 

Retroperitoneal yog 'massasining nisbati va plazma dozalari: glyukoza; insulin, NEFA va leptin.

Perinatal WDning sutdan ajralishdan oldingi yog 'tanloviga ta'siri

WD ni yog 'holatiga ta'sirini o'rganish uchun biz o'sishda uch xil vaqt nuqtasida ikkita shishani tanlash paradigmasini qo'lladik. Ushbu tajriba, yog 'ta'mi uchun afzalroq o'rganish uchun ishlatilgan. Uning qabul qilishdagi metabolik ta'siri imkon qadar cheklab qo'yishimiz mumkin. Biz "shovqindan" qo'shimcha (P25, P45 va P95) "qo'shimcha" kaloriya iste'molidagi farqlar statistik jihatdan ahamiyatli emasligini ko'rsatdik guruhlar orasida (shakl S1Qo'shimcha materiallarda A-C). Bundan tashqari, 1% Misr yog'i eritmasini iste'mol qilish P1 (WD: 25% va boshqalar CD: 4.9% kaloriya iste'mol qilingan) va 3.9% da P0.5 da WD kalamushlari uchun 45% kaloriya ko'payishiga olib keladi (WD: 2% va boshqalar CD: 2.5% kaloriya iste'mol qilingan) (Fig S1D-F qo'shimcha materialda). P25 da, CD barajidagi puplar yog 'uchun afzalliklarga ega emas (44.87 ± 9.8% p = 0.339); qarama-qarshi WD kalamushlari yog'ni afzal ko'radi (75.12 ± 8.04%, p = 0.039, Wilcoxon imzolangan darajadagi testdan so'ng, qizil yulduzcha). Bundan tashqari ikkala guruh o'rtasida statistik farq bor p = 0.0347 (Mann va Uitni testi, qora xash yorlig'i) (rasm) (Rasm 33A).

Shakl 3 

Sutdan ajratib olinishdan tortib to kattaligiga yog 'tanlovining rivojlanish evolyutsiyasi. (A) P25, P45 va P95 da birinchi kunlik yog 'tanlovi. Har bir nuqtada har xil hayvonlar guruhlari ishlatilgan (n = 6 / guruh / vaqt nuqtasi). (B) Uch ketma-ket kun yog' ...

P45 va P95 da ikkita guruh yog 'uchun muhim imtiyozga ega, ya'ni 50% (P45, CD: 80.68 ± 2.2% p = 0.0005 va WD: 78.07 ± 3.25% p = 0.0005; P95 da, CD: 74.84 ± 8.4% p = 0.0425 va WD: 69.42 ± 8.9% p = 0.109 Uilkokson imzolangan darajadagi testdan so'ng, qizil yulduzcha) (rasm) (Rasm 3A) .3A). Ikki guruh uchun qadriyatlar ta'mga taqdimotining bir kunidan keyin farqlanmaydi (P45 da p = 0.7857 va P95 da p = 0.9171 Mann - Uitni testi) (rasm) (Rasm 33A).

Sichqoncha vaqt o'tishi bilan yog 'sarfini qanday tartibga solishni bilish uchun P45 va P95 da uch kun ketma-ket yog' taqdimotini takrorladik (shakllar (Figures3B, C) .3B, C). Qizig'i shundaki, P45 da faqatgina WD barajidagi erkaklar yog 'eritmasi uchun imtiyozni asta-sekin yo'qotdilar (Rasm (Rasm 3B) 3B) (uchinchi kun: 53.12 ± 8.36% p = Wilcoxon tomonidan imzolangan darajadagi testdan so'ng 0.851). Biroq, P95 da (kattalar yoshida) barcha hayvonlar 3 kunlik sinov davomida evolyutsiyasiz yog'ni afzal ko'rishdi (rasm) (Rasm 33C)

Xulosa qilib aytganda, ushbu modelda, erta davrda (bolalik), erta davrda ilg'or, bepushtlik bilan WD barajlari bilan oziqlangan sichqonchani yog 'holatini kuzatdik. Eritrotsitdagi ikkita kalamush guruh o'rtasida hech qanday farq yo'q edi.

Miya plyusligi va GABA sxemalarining molekulyar imzolari Hipotalamus va qayta tiklash yo'llarida qayta tuzilishi

Homiladorlik va laktatsiya davrida homiladorlikning WD iste'moli gipotalamus va naslning mukofot yo'llariga ta'sir ko'rsatadimi yoki yo'qligini aniqlash uchun biz miya plastinkasining bir necha asosiy omillari, miya modellari va oziq-ovqat sotib olish va epigenetik ta'sir ko'rsatadigan neyronal davrlarning markerlarini regulyatorlar. Biz turli miya sohalarida (masalan, gipotalamus, VTA va NAc) ularning farovonligini tahlil qilish uchun TLDA dan foydalanganmiz (jadval S1 qo'shimcha materialda). Displey P25, P45 va P95 (ikkita shishani tanlab olish testlaridan so'ng) (Rasm 1) 1), WD tomonidan etkazilgan suv omborlari va 6 ta erkaklar tug'ilgan.

P25 ning gipotalamusida o'n uch xil toifadagi beshta gen, asosan, plastika belgilarida mRNA ekspresyon darajasini sezilarli darajada past darajada ko'rsatdi va WD bilan ta'minlangan sichqonlardan farqli o'laroq, -20% (Gfap) va -40% (Gabra5) oralig'idagi GABA markerlari CD oziqlangan suv omborlari. Mukofotning yo'llari biopsiyalarida (VTA va NAc) NAc ning ikkita genida statik yuqori mRNA ekspresyon darajalari (D2R va Gabra1), ya'ni DA signalizatsiyasi va GABA retseptorlari va bir gen pastki ifodasi (Hcrtr2) (ya'ni, orexin 2 retseptorlari) , VTAda esa to'rtta gen mRNA ekspresyon darajasi (Map2, Gabara1, Hcrtr1 va Hcrtr2) (ya'ni plastinka belgilarini, GABA retseptorlari va serotoninerjik retseptorlari) (Rasm 44).

P45 ning gipotalamusida o'n uch xil toifadagi beshta gen genofondni suv bilan ta'minlangan suv omborlari bilan taqqoslaganda, WD tomonidan yuborilgan to'g'onlardan 20% (Fos) va -50% (FosB) o'rtasida pastroq mRNA ifodasi darajasini ko'rsatdi. P45 ning mukofoti yo'lidagi biopsiyalarda to'rtta gen mcrn ning yuqori darajasi (Gfap, Dat, Cck2r va Kat5) va ikkala genning NAc ning pastki ifodasi (Fos va FosB), uchta gen esa past mRNA ekspresyon darajasini (Arc, FosB, va Th) va bir geni VTA ichida yuqori darajali (Gabrg2).

P95 ning gipotalamusida 13 xil toifadagi 20 genlari + 20 va + 40% (Syt4 dan Gjd2gacha) va 3 genlari orasida o'zgaruvchan mRNA ifodasi darajasini ko'rsatdi va 1 genlari WD dan olingan puptsda pastroq mRNA ifodasi (FosB, D1r va Gabarb95) beshtalarni suv bilan ta'minlaydigan suv omborlari bilan taqqoslaganda to'g'onlarni to'ldiradi. 12 genida 20 va + 40% (Syn1 to Hcrt1) va 1 geni NAc, 6 genida pastki ifoda (Th) o'rtasida o'zgaruvchan yuqori mRNA ifoda darajasini P1-da mukofotlash yo'lidagi biopsiyalarda yuqori mRNA ifoda darajasini ko'rsatdi (Ncam1 , GX2, Gjd5, Gabra1, Htr1a va Htr6b) va 1 genalari VTA ichida past mRNA ifoda darajasini (Cntf, Igf3, Fos, Socs2, Gabrb3 va HdacXNUMX) ko'rsatdi.

Keyin barcha natija parametrlari (ya'ni plazma dozalari, xulq-atvor va mRNA ekspresyon varyasyonlari) yordamida uch miya biyopsisiga mos keladigan uchta tekshirilmagan PCA amalga oshirildi. Ikki guruhni aniq ajratish faqat NAX va VTA uchun P95da (Table (Table33).

3 stol 

Asosiy komponentli tahlil (PCA) sintezi: global PCA va PCA uchun PCA guruhining ajratilishini sifatli tahlil qilish.

PCA korrelyatsiyasi doirasiga va TLDA ma'lumotlariga (ushbu PCAga kiritilgan o'zgaruvchining ko'pchilik qismini ifodalovchi) ko'ra, ajratish uchun mas'ul bo'lishi mumkin bo'lgan gen guruhlari aniqlandi va birlashtirilgan PCA (Shakllar5A, B, 5A, B, masalan). Fokuslangan PCA hkvotalamusdagi NAX va plastisit belgilarida P25 DA belgilarida ikkita urug' guruhini ajratishi mumkinligini aniqladi (Jadval (Table33 sarlavha). Keyinchalik P45da bunday kamsitish yo'q. Biroq, P95 da xuddi shu tahlil, NAc va gipotalamusdagi GABA tizimining turli xil belgilarini, shuningdek plastisit belgilarini (gipotalamus, NAc va VTA) va epigenetik regulyatorlarda (faqat NAc) ikkita guruhni ajratish imkonini berdi Shakl (Rasm 5; 5; Jadval Table33).

Ushbu tahlillar GABAerjik markerlarga perinatal dietaning uzoq muddatli ta'sirini, shuningdek, gomeostatikada va oziqlantirish xatti-harakati bilan bog'liq bo'lgan mukofot yo'lida plastisit va epigenetik belgilarni ko'rsatadi.

TH hujayralarining immunohistokimyosi Transkriptni tasdiqladi

Turli rivojlanish davrlarida NAc va VTA'lardaki TH mRNA'da ba'zi bir o'zgarishlarni kuzatganimiz uchun, bu natijalarni TH immunostinga bilan bog'lashni maqsad qildik. TH / NeuN musbat hujayralari soni VPKda tekshirildi va bu erda dopaminerjik hujayra jismlari joylashdi va TH immunolabelingning OD qiymati NAc ichida joylashgan nerv soniyalarida aniqlandi. TH (+) xujayralari WD ning VTA'sida faqat P45dagi CD-kalamushlarga nisbatan ancha kam bo'lgan (Fig. (Figures6A, C, E; 6A, C, E; Shakl S2A Qo'shimcha materiallarda). Uch davrda (P25.) Uchinchi darajali TH / NeuN miqdori o'rtasida sezilarli shovqin yo'q edi p = 0.9991, P45 p = 0.9026 va P95 p = 0.9170). Faqat P45 da, ikki nasl guruhlari o'rtasida statistik farq olingan (p = 0.0002) (Shakl (Rasm 6E) .6E). Bundan tashqari, biz P25 va P45 da NAc ning NA ning ikkita guruhida P25: 1.314 ± 0.022 da WD va 1.351 ± 0.026 da WD nisbati qiymatlari, p = 0.2681; P45 da OD nisbati qiymatlari: CD-da 1.589 ± 0.033 va 1.651 ± 0.027, WDda, p = 0.1542). Shu bilan birga, PD da WD guruhidan NAc da TH nerv sonlarining OD ning sezilarli darajada pasayishi aniqlandi (OD nisbati p95: 95 ± 1.752 CD da VD da 0.041 ± 1.550, p = 0.0037) (Shakllar (Shakllar6B, D, F; 6B, D, F; Shakl S2Qo'shimcha materialda B).

muhokama

Ushbu tadqiqotda, maternal perinatal ortiqcha ovqatlanish energiya homeostazına, oziq-ovqat tanlashga va naslga oziq-ovqat iste'mol qilishga qaratilgan mukofot yo'llari rivojlantirish dasturiga ta'sir qiladi varsayımını qildik. Biz tug'ilishdan tortib to tug'ilishdan GABA, serotonin va aniq miya joylari (VTA, NAc va gipotalamus) yo'llariga bolalagandan to kattalargacha bo'lgan ta'siridan kengroq tadqiq qildik. Bizning natijalar shuni ko'rsatadiki, perinatal davrda qat'iy cheklangan semiz va shirin ta'mli xun, naslda erta yog'li holatga (bolalik), gen ekspression profilidagi o'zgarish va mezolimbikning neyroanatomik / me'moriy o'zgarishlari bilan bog'liq bo'lgan ta'sir ko'rsatadi dopaminergik tarmoqlar. Ammo, urug 'chov dietasi ostida ushlab turilganimizda, o'smirlardagi WD oziqlantiruvchi kalamushlarda yog' uchun jozibadorlikning yaqqol ko'zga tashlanishi kuzatildi va u DA tizimining genlar ekspresivligini kamaytirdi va VTA-da TH-musbat neyronlarning biroz kamayishi bilan bog'liq . Keyinchalik, GABAerjik tarmoqlar va gipotalamusning energiya homeostazlari tarmog'ining muhim plastiği WD tomonidan yuborilgan suv omborlari (Shakl (Rasm 77).

Shakl 7 

Grafika sarlavhasi. NAc, yadro akumbens; VTA, ventral tegmental hudud.

Biz ushbu tadqiqotda kuzatgan perinatal-WD iste'molining birinchi ta'siri sutdan ajratishda bolaning tana vaznining ortishi, ammo tug'ilishda farq yo'qligi. Haqiqatan ham, WD guruhi hayvonlari assimilyatsiya davrining oxirida CD ga nisbatan 21% ko'proq vazn olishadi. Ilgari olib borilgan tadkikotlar WD tomonidan yuborilgan suv omborlari uchun tug'ilgan vaznining o'zgarishi bilan bog'liq qarama-qarshi natijalarni berdi: yuqori tana og'irligi (, ), past tana og'irligi (, , ) yoki farq yo'q (, ). Bizning ma'lumotlarimiz so'nggi meta-regression tahlillari bilan mos keladi () 171 eksperimental nashrlarida o'tkazilgan maternal HFD ta'siri nasl tug'ilishining og'irligiga ta'sir qilmagan, ammo laktatsiya davri oxirida tana vaznining o'sishiga sabab bo'lgan degan xulosaga keldi. WD naslining tana vaznining yuqoriligi ehtimol sut tarkibining va / yoki sut ishlab chiqarishdagi o'zgarishni aks ettiradi, bu avvalgi nashrlarda, ). Yuqori tana vazniga ko'ra, WD naslining retroperitoneal yog 'nisbati emlash davrining oxirigacha bo'lgan CD-larga qaraganda ancha yuqori (P25, Jadval Table2), 2), bu avvalgi tadqiqotlar bilan ham mos keladi (, ). Shu bilan birga, yuqori semizlik P45 va P95 da davom etmadi va insulin, NEFA va glyukoza plazmasi kabi boshqa metabolik parametrlarni guruhlar o'rtasida farq bo'lmagan. Bizning natijalarimiz shuni ko'rsatadiki, homiladorlik va laktatsiya davrida ochiq homiladorlikning obezligi bo'lmaganda, parhez o'z-o'zidan bolaning uzoq muddatli metabolik ta'sirini keltirib chiqarishi uchun etarli emas (, , ).

Perinatal HFD iste'mol qilish, mazali taomlar uchun urug 'afzalligi bilan ijobiy bog'liqligi (). Bizning tadqiqotimizda muntazam ravishda chanqovdan yasalgan naslga yog 'imtiyozini sinashni maqsad qilib olgan bo'yinbozlik tekshiruvini o'tkazdik.

Perinatal BHning bolalikda ta'siri (sutdan keyin)

Kemiron erkaklar tug'ilgandan so'ng 19-20 kun davomida qattiq ovqat iste'mol qiladilar (), ularning miya mukofot yo'llari hali etuk bo'lmaganida (). Shu sababli, ularning erta navini oldingi holatini o'rganish va bu erta imtiyozni miya transkriptlari tahlillari bilan bog'lash juda qiziq bo'ldi. Sutdan ajratilgandan so'ng, biz CD-kalamushlarida tasdiqlanmagan WD naslida yog 'ni afzal ko'rdik. Bu perinatal oziq-ovqat tanqisligi va mazali ovqat tanlovi o'rtasidagi munosabatni ko'rsatadigan va boshlang'ich sichqonchani erta yoshda yog 'bilan past darajada afzal ko'rgan boshqa ma'ruzalar bilan mos keladi ().

Butunjahon sog'liqni saqlash tashkiloti ana shu yoshdagi onalar dietasiga nisbatan chaqaloqlar guruhini ajratishga ruxsat bermadi. Biroq, DAR markerlari bilan chegaralangan maqsadli bir PCA amalga oshirilganda, biz guruhlarning yaxshi ajratilishini qo'lga oldik. Darhaqiqat, D2 retseptorlari mRNAsining WD pupsidagi NAc ning sezilarli darajada oshishi kuzatiladi. NAcdagi postsinaptik D2 ortiqcha tushuntirish qisman yog '(). WD pupsida NAc va VTA alfa 1 GABAA pastki qismini ko'payishi va gipotalamusda alfa 5 GABAA kichik birligining kamayishi kabi CD-kalamushlarga nisbatan WD pupslarida bir necha boshqa transkriptlar o'zgartirildi, bu esa bu yadrolarda GABAA retseptorlarini qayta tashkil etishni nazarda tutadi.

Perinatal WDning O'smirlarga ta'siri

P45 da, biz birinchi guruhda birinchi kunida ikkala guruh uchun shunga o'xshash yuqori yog'li holatlarni kuzatdik, lekin qiziqarli tarzda WD farovonligi bir necha marta takrorlangandan keyin yog'larga qiziqishni yo'qotdi. O'smirlik yoshi uzoq davom etgan bilimlarni qayta ishlash uchun zarur bo'lgan,) va turli xil ishlanmalar yog 'dietasining zararli kognitiv ta'siriga aniq zaiflik ko'rsatdi (-). Ushbu natija Muhlhauslar guruhining avvalgi ishlariga zid, ), bu erda balog'atga etmagan kalamushlar (6 haftalar) arzimas ovqat uchun aniq imtiyozni ko'rsatdi. Biroq, ularning nashrlaridagi eksperimental paradigma turli xil edi, chunki kalamushlar sutdan ajratishdan (6 haftadan) sutdan ajratilgan oddiy chow va arzimas ovqatga erkin kirishgan.

Shu bilan birga, NAc'teki Dat mRNA'sının o'sishini va VDA'da VTA'da Th (+) hujayralar soni kamayganini ko'rsatgan immunohistokimya tomonidan tasdiqlangan VTA'da Th mRNA'nın bir kamayishini o'lchagan edik. ULARNING sutdan ajratish davridagi DA tizimining yuqori transkriptomik samaradorligidan so'ng, P45 da pasayish darajasi bizning WD sıçanlarımızda kuzatilgan mazali taom uchun kam qiziqish bildiradi. Shuni ta'kidlash kerakki, tahlil qilingan turli yadrolardagi Fos va FosB mRNA ifodalarini muntazam ravishda pasaytirish onalikni WD ta'siridan keyin kamaygan miya samaradorligining belgisi bo'lishi mumkin.

Ergen WD sıçanları, yog 'uchun tezroq ilgisizdir, bu ularning oldingi harakatlariga ziddir. Bolalik davrida "normal" ovqatlanishni ishlatish, o'smirlik davrida ularni yog'li holatga keltirib, "himoya qilish" kabi ko'rinadi. Aksincha, kalamushlar sutdan ajratilgandan so'ng arzimas ovqatga erkin kirish imkoniyatiga ega bo'lganda, Ref. (, ), o'smirlik davrida yog 'uchun kuchli imtiyozni namoyish qiladilar. Bu natija shuni ko'rsatadiki, sutdan ajratilgandan so'ng 3 haftasidagi choy dieti davrlarni qayta dasturlashi va o'smirlarning naslini o'tkir yog 'masalasiga nisbatan sezgirroq bo'lishiga olib kelishi mumkin.

Perinatal WD ning kattalarga ta'siri

Katta kalamushlar endi yog 'uchun afzalliklarni ko'rsatmadi, hatto yuqorida aytib o'tilgan, ). Shu bilan birga biz NAcdagi Th mRNA va proteinning kamayishi va VTAdagi Dat mRNA ning kamroq ifodasini topdik. Naif va hamkor (), HFD bilan perinatal davrda oziqlantirilgan kattalar kalamushlarida DA tizimining past faoliyati to'g'risida, mikrodializ bilan o'lchanadigan amfetaminga javob beradigan, shuningdek, yog 'mukofotini oshirish uchun motivatsiya oshirgan (bu model bo'yicha oxirgi qPCR ma'lumotlarini jamlagan jadvalga qarang) Jadval S2 Qo'shimcha materiallarda). NAcdagi THning miqdori cheklanganligi (mRNA va immunohistokimyo) NAc xujayralarining Th mRNA va oqsillarini ifodalashi va keyinchalik ULARNING elyaflar miqdorini (, ). Biroq, NAc ichidagi TH immünostaining foydalanish asosan midbrain DA neyronlardan (VTA va SNc) kelgan zich oqson terminallarini aniqladi. Odatda, striatum va NAc'deki nöronlarını ifoda etgan TH, faqat yuqori DZ lezyonlu hayvonlarda), shuning uchun bizning immunitetlarimiz juda qiyin. Ushbu ishda, NAc'de muopioid reseptörünün kuchli o'sishini ham kuzatdik. Boshqa guruhlar, turli xil modellar bilan, HFD'ye (erta laktasyon va homiladorlik paytida) erta ta'sir qolgan sıçanların ventral striatumunda pasayishiga ko'rsatdi, ) yoki o'zgarishsiz (). Faqatgina mRNA darajasida o'lchangan bu o'zgarishlar, yuqori opioid sezgirligi bilan bog'liq DA davrlarining engil gipo faolligini aks ettirishi mumkin (), biz amalga oshiradigan xatti-harakatlarimizga ta'sir ko'rsatish uchun etarli emas. Ushbu taxminlar funktsional yondashuvlar yordamida tasdiqlanishi kerak. Yaqin o'tmishda shu kabi modelga ega bo'lgan Romani-Perez va boshqalar, HFD avlodlari uchun operativ shkafdagi qutilarda sezilarli o'sishni kuzata olmadilar, ammo uchish-qo'nish testi paradigmida (). Eksperimental sharoitlarda uzoq muddatli yog' imtiyozlarining yo'qligiga qaramasdan, biz perinatal onaning WD iste'moli NAc va Hypotalamusda GABAni qayta shakllantirish orqali boshqa miya yarim davrlarida uzoq muddatli ta'sirga ega ekanligini aniqladik. NAc, iste'molchi xatti-harakati uchun "hissiy sintez" deb hisoblanadi (). So'nggi yillarda olib borilgan tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, oziq-ovqat iste'mol qilish GABA-relef LH nöronlarının inhibisyonu). O'Connor va boshq. NAc D1R nöronlarının (GABAergic projekteki nöronlar) LH VGAT nöronlarını oziq-ovqat qabul qilishni to'xtatish). Ushbu tajribalar xatti-harakatlarni nazorat qilish uchun javobgar bo'lishi mumkin bo'lgan GABA davri (NAc / Hypotalamus) ni ochib beradi. Ushbu ventral striatum-gipotalamik tizim yotqizilgan yadroli stria terminali GABA-chiqaruvchi VGAT prognozli neyronni glutamatni Vglut LH nöronlariga chiqaruvchi va LH vglut2 ning bevosita inhibisyonini oziqlantirishni). NAc qobig'ini o'z ichiga olgan ishtahani regulyator devorining yana bir muhim tarkibiy qismi VP (GABA-releasing inhibitory proektsiyasi)). Ushbu ma'lumotlar GABA signalizatsiyasi uchun gipotalamus va NAc o'rtasida oziqlantirishni rag'batlantirishning muhim rolini ta'kidlaydi. Bizning tadqiqotimizda GABAni qayta qurish bilan shug'ullanadigan neuronlar aholisini va ushbu o'zgarishlar tarmoqlarni qanday o'zgartirishi mumkinligini aniqlay olmadik. Biroq, GABA davrlarining markaziy roli ko'proq qiziqish uyg'otadi. Xususan, ushbu GABA davrlarini elektrofizyolojik yondashuvlardan foydalanib, keyingi funktsional tajribalarni amalga oshirish juda qiziqarli bo'lardi (). Shuningdek, uchta yadroda 5HT1a va 5HT1b retseptorlari uchun mRNA transkriptining global regulyatsiyasi kuzatildi. Ko'zda tutilgan serotonin tolalari ko'pchiligi dorsal raphe yadrosi (DRN) va median raphe nucleus (MRN) dan keladi. Yaqinda olingan ma'lumotlar ning Vivo jonli yozuvlar va tasvirlash ishlari 5HT mukofotiga ijobiy ta'sir ko'rsatdi (). DRN dan olingan 5HT tolalari impulsivlikni nazorat qilishda (). VTA va NAc ichida 5HT1a qiymatini oshirish dürtüselliği nazorat qila oladigan kompensatsiya mexanizmi bo'lishi mumkin. Gipotalamusda farmakologik tadqiqotlar shuni ko'rsatadiki, 5X1a retseptorlari subtiplari serotoninni stimulyatsiya qilish natijasida kelib chiqqan oziqlantirish ishlarini bostirishi mumkin (, ). Gipotalamusda ko'tarilgan 5HT1a va B retseptorlari serotoninning oziqlantirishni to'xtatuvchi ta'sirini kuchaytirishi mumkin va shuning uchun kompensatsiya mexanizmi bo'lishi mumkin. Ushbu taxminlarni to'g'ri funktsional tajribalar bilan tasdiqlash kerak.

Ushbu tarmoqlardagi o'zgarishlar Ncam mRNA kabi plastiklik markerlarini o'zgartirish bilan bog'liq. Katta kalamushlarning gipotalamusida biz NKX1 va St8sia4 transkriptlarida polisial kislotasi (PSA) signalizatsiyasini kuchaytiruvchi va ko'payishini kuzatdik. PSA hujayra-hujayra ta'sirini modulyatsiya qiluvchi hujayra-sirt glikan. Hujayra adezyon proteinlarini polysialylation markaziy asab tizimida turli sinaptik plastisite qaram jarayonlarda ishtirok etadi va o'tkir musbat energiya muvozanati davrida oziqlantirish sxemalarini moslashuvchan sinaptik plastisite uchun talab qilinadi (, ). Bundan tashqari, ushbu hipotalamik plastisitada hujayra shovqinlari va sinaptogenezning boshqa regulyatorlari ishtirok etishi mumkin.

Natijada (shakl (Rasm 7), 7), homilaning WD iste'moli urug'lardagi ovqatlanishni tartibga soluvchi gomeostatik va hedonik davrlarni tashkil qilishda uzoq vaqt davom etadigan ta'sirga ega. Uchta muhim vaqt oralig'idagi tahlillar natijasida ma'lum miya molekulyar imzo bilan o'zaro bog'liq yog 'imtiyozi uchun aniq bir evolyutsiya ko'rsatdik. Bolalik davrida yog'ning afzalligi DA tizimining yuqori samaradorligi bilan bog'liq bo'lishi mumkin. Yog 'imtiyozlarining almashinuvi bilan xarakterlanadigan o'smirlik, kompensatsiya mexanizmini nazarda tutgan DA tizimi belgilarining pastki ifodasi bilan bog'liq edi. Qizig'i shundaki, bu modelda sutdan ajratilganidan so'ng muvozanatli parhez barkamol sichqonni yog 'iste'molini kamaytirish orqali zararli ovqatlanish odatlaridan himoya qilishi mumkin. Katta yoshda bo'lsa-da, ikkala guruh ham yog'ga o'xshash yuqori darajadagi afzalliklarga ega bo'lsa-da, WD tomonidan yuborilgan suv omborlari GABA davrlarini chuqur qayta qurish ko'rsatdi. Ushbu doimiy plastisitikaning natijalari qanday? O'smirlik davrida ko'plab obezogenik parhezlar iste'mol qilish ushbu naychali mukofot tizimini qayta tiklaydi? Bunday savollar g'arbiy mamlakatlarda tug'ilgan va tug'ilishning yangi tug'ilgan chaqaloqlarning ovqatlanishini kuzatishda dolzarb bo'lishi mumkin.

Axloqiy bayonot

Barcha eksperimentlar mahalliy hayvonlarni himoya qilish qo'mitasi, Evropa Ittifoqi (2010 / 63 / EI direktivasi), Institut National de la Recherche Agronomique (Parij, Frantsiya) va Frantsiya veterinariya bo'limi (A44276). Eksperimental protokol institutional axloqiy kengash tomonidan tasdiqlangan va APAFIS 8666 referansida ro'yxatdan o'tkazildi. Stressni kamaytirish va har bir eksperimentda ishlatiladigan hayvonlarning sonini kamaytirish uchun har qanday chora ko'rildi.

Mualliflar hissasi

JP va PB tajriba o'tkazdi va muhokama qilish va yozishda ishtirok etdi. TM MMni amalga oshirdi va muhokama qilish va yozishda ishtirok etdi. SN eksperimentni ishlab chiqishga hissa qo'shdi va muhokamada ishtirok etdi. XT eksperimentni ishlab chiqilishiga hissa qo'shdi, muhokamalarda ishtirok etdi va qo'lyozma-ni yozdi. VP eksperimentlarni ishlab chiqdi va amalga oshirdi, ma'lumotlarni tahlil qildi va qo'lyozmasini yozdi.

Qiziqishlik to'qnashuvi bayonoti

Mualliflar tadqiqot natijalari potentsial manfaatlar to'qnashuvi deb talqin etilishi mumkin bo'lgan biron-bir tijoriy yoki moliyaviy aloqalar mavjud bo'lmagani holda amalga oshirilganligini e'lon qiladi.

rahmat

Mualliflar Guillaume Poupeau va Blandine Castellano'ni tadqiq qilish davomida hayvonlarga g'amxo'rlik qilish uchun Anna Pagniezni mRNA ekstrakti va TLDA, Isabelle Gritning plazma namunalarini tahlil qilishda yordami uchun qabul qilganini va Aleksandr Benani va Marie-Chantal Canivenc foydali maslahat va TLDA dizayni uchun.

Izohlar

 

Moliyalashtirish. Tadqiqotni mintaqa des pays de la Loire granti PARIMAD (VP), LCL grant granti (VP va PP), SanteDige fondi (VP) va INRA metaprogram DIDIT (SN, VP, PP) tomonidan qo'llab-quvvatlandi.

 

 

Qo'shimcha materiallar

Ushbu maqola uchun qo'shimcha materialni onlaynda topishingiz mumkin http://journal.frontiersin.org/article/10.3389/fendo.2017.00216/full#supplementary-material.

Shakl S1

Misr yog'ini o'z ichiga olgan shishadan umumiy energiya iste'moli. (A) G'arbiy dietadan (WD) oziqlanadigan to'g'onlar va pishiriqlar nazorat dietasidan (CD) oziqlantirilgan to'g'onlardan P24 da 25 h uchun moyli neft shishasidan olingan kaloriyalarni iste'mol qilish. (B) P24da (shishaning uchinchi kuni) 45 h uchun murch yog'i shishasidan olingan kaloriyalar. (C) P24da (shishaning uchinchi kuni) 95 h uchun murch yog'i shishasidan olingan kaloriyalar. Panellar uchun (A-C)ma'lumotlar o'rtacha ± SEM sifatida ifodalanadi, statistik farq yo'q (p > 0.05) Mann va Uitni parametrik bo'lmagan testidan so'ng har qanday yoshda kuzatilgan. (D) Misr yog'i shishasidan olingan kaloriya miqdori P24 da WD pups va CD pupslarda 25-ga umumiy kaloriya iste'moliga (Misr yog'i shishasi + standart chow xun) nisbatan. (E) Misr yog'i shishasidan olingan kaloriya miqdori WD pups va CD pupslarda P24 (uchinchi kuni shisha testida) uchun 45 soat uchun umumiy kaloriya iste'moliga (Misr yog'i shishasi + standart chow xun) solishtiriladi. (F) Misr yog'i shishasidan olingan kaloriya miqdori WD pups va CD pupslarda P24 (uchinchi shisha sinovida) da 95 h uchun umumiy kaloriya iste'moliga (Misr yog'i shishasi + standart chow xun) to'g'ri keladi. Panellar uchun (D, E), ma'lumotlar kaloriya iste'molining umumiy sonida ifodalanadi.p > 0.05), Yeytsning tuzatishi bilan xi-kvadratdan so'ng, har qanday yoshda kuzatilgan.

Shakl S2

Nukleus akumbens (NAc) va ventral tegmental sohada (VTA) uch xil vaqt nuqtasida THning immunostaningi vakili fotomikrograflari. (A) TH / NeuN immunostaning VEG darajasidagi fotomikrograf, Bregma-5.30 mm. Qizil yorliqlar NeuN uchun, yashil esa TH uchun. Oq strelka uchinchi nervning chiqishini ko'rsatadi. (B) TH immunostingining fotokorografiyasi NAc darajasida, + 1.70 mmdan Bregma. Yashil etiketlash TH uchun. Oq nordon oldingi kommissuri ko'rsatadi.

Jadval S1

TaqMan past zichlikli qatorli genlar ro'yxati tegishli hayot texnologiyalari bilan ixtiro qilingan.

Jadval S2

Dopamin yo'llari transkriptlarini ifodalashga oid nashr etilgan ma'lumotlarning qisqacha mazmuni. Qizil belgilar bolalik davriga, ko'klar o'smirlik davriga, qora tanli kishilar esa kattalarga to'g'ri keladi. =: guruhlar orasida shunga o'xshash transkript ko'rsatmalariga mos keladi, +: yuqori kaloriyali parhezdan [noaniq oziq-ovqat, g'arbiy xun (WD) yoki yuqori yog'li xun (HFD)] to'ldirilgan to'g'onlardan yuqilganda yuqori transkript ifodasiga to'g'ri keladi va -: yuqori kaloriyali parhezdan (arzimas oziq-ovqat, WD yoki HFD) to'pponcha yuboradigan pastki transkript ko'rsatmasiga mos keladi.

Manbalar

1. Barker DJ. Keksalik kasalliklarining xomilalik kelib chiqishi. Eur J Clin Nutr (1992) 46 (Suppl 3): S3-9. [PubMed]
2. Desay M, Gayle D, Xan G, Ross MG. Intrauterin o'sishni cheklaydigan avlodlarda anoreksigenik mexanizmlarning kamayishi tufayli dasturlangan giperfaopiya. Reprod Sci Thousand Oaks Calif (2007) 14: 329-37.10.1177 / 1933719107303983 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
3. Goran MI, Dumke K, Bouret SG, Qaysar B, Walker RW, Blumberg B. Erta rivojlanish davrida yuqori fruktoza ta'sirining obezogen ta'siri. Nat Rev Endokrinol (2013) 9: 494-500.10.1038 / nrendo.2013.108 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
4. Levin BE. Metabolik bosim: Perinatal muhitning energiya gomeostazasini boshqarishga ta'sir qilishi. Philos Trans R Soc London B Biol Sci (2006) 361: 1107-21.10.1098 / rstb.2006.1851 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
5. Olson CM, Strawderman MS, Dennison BA. 3 yoshida homiladorlik va bolada og'irlikdagi onaning og'irligi. Matern Bolalar salomatligi J (2009) 13: 839.10.1007 / s10995-008-0413-6 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
6. Chen X, Simar D, Morris MJ. Hipotalamik neyroendokrin devor maternal semirib ketish orqali dasturlashtiriladi: postnatal oziqlanish muhitiga ta'sir qilish. PLoS One (2009) 4: e6259.10.1371 / jurnal.pone.0006259 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
7. Muhlhausler BS, Odam CL, Findlay zbekiston, Duffield JA, McMillen IC. Onalar ovqatlanishining oshishi miyada tuyadi-tartibga solish tarmog'ining rivojlanishini o'zgartiradi. FASEB J (2006) 20: 1257-9.10.1096 / fj.05-5241fje [PubMed] [O'zaro faoliyat]
8. Samuelsson AM, Matthews PA, Argenton M, Christie MR, McConnell JM, Jansen EHJM va boshq. Ayollar sichqonlaridagi dietaga bog'liq semizlik naslli giperfagiya, semizlik, gipertoniya va insulin qarshiligiga olib keladi. Gipertenziya (2008) 51: 383-92.10.1161 / HYPERTENSIONAHA.107.101477 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
9. Kenny PJ. Obezlik va giyohvandlikda umumiy hujayrali va molekulyar mexanizmlar. Nat Rev Neurosci (2011) 12: 638-51.10.1038 / nrn3105 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
10. Denis RGP, Joly-Amado A, Webber E, Langlet F, Schaeffer M, Padilla SL va boshq. Palatabilligi AgRP neyronlaridan mustaqil oziqlantirishga imkon beradi. Hujayra metabi (2015) 22: 646-57.10.1016 / j.cmet.2015.07.011 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
11. Stice E, Spoor S, Bohon C, kichik yassi. Obezitatsiya va oziq-ovqat mahsulotlariga ta'sir etilmagan striatal javob o'rtasidagi munosabatlar TaqIA A1 aleli tomonidan boshqariladi. Fan (2008) 322: 449-52.10.1126 / science.1161550 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
12. Frank GK, Reynolds JR, Shott ME, Jappe L, Yang TT, Tregellas JR va boshq. Anoreksiya nervoza va semizlik bevosita miya reaktsiyasi bilan bog'liq. Nöropsikofarmakologiya (2012) 37: 2031-46.10.1038 / npp.2012.51 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
13. Yashil E, Jacobson A, Haase L, Murphy S. Qiziqarli ta'mga ega bo'lgan yadroli akumbenslar va kaudat yadrosi faollashuvi kattalardagi semizlik bilan bog'liq. Brain qobig'i (2011) 1386: 109-17.10.1016 / j.brainres.2011.02.071 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
14. Davis JF, Tracy AL, Schurdak JD, Tschop MH, Lipton JW, Clegg DJ va boshq. Yuqori darajali parhez yog'iga ta'sir qilish sichqonda psixostimulyar darajada mukofot va mesolimbik dopamin aylanishini kamaytiradi. Behav Neurosci (2008) 122: 1257-63.10.1037 / a0013111 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
15. Geiger BM, Haburcak M, Avena NM, Moyer MC, Hoebel B.G., Pothos ENG. Sichqoncha parhezidagi semizlikda mezolimbik dopamin nörotransmission etishmovchiligi. Neuroscience (2009) 159: 1193-9.10.1016 / j.neuroscience.2009.02.007 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
16. Rivera HM, Kievit P, Kirigiti Ma, Bauman LA, Baquero K, Blundell P va boshq. Yuqori yog'li parhez va semizlik insonparvarlik qilmagan primatlardagi jinsiy oziq-ovqat mahsulotlarini va dopamin signallarini ta'sir qiladi. Obezlik (2015) 23: 2157-64.10.1002 / oby.21306 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
17. Gugusheff JR, Ong ZY, Muhlhauslar BS. Oziq-ovqat imtiyozlarining dastlabki kelib chiqishi: rivojlanishning muhim oynalarini belgilash. FASEB J (2015) 29: 365-73.10.1096 / fj.14-255976 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
18. Bayol SA, Farrington SJ, Stickland bosimining ko'tarilishi. Xomiladorlik va laktatsiya davrida ona oziq-ovqat mahsuloti "arzimas oziq-ovqat" parhezlari "mayin oziq-ovqat" va shov-shuvli jinsiy a'zolarda semirish uchun ko'proq moyillikka olib keladi. Br J Nutr (2007) 98: 843-51.10.1017 / S0007114507812037 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
19. Vukset Z, Kimmel J, Totoki K, Hollenbeck E, Reyes TM. Onaning yuqori yog'li dieti metilatsiyani va dopamin va opioidga bog'liq genlarni gen ekspresifikatsiyasini o'zgartiradi. Endokrinologiya (2010) 151: 4756-64.10.1210 / en.2010-0505 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
20. Naef L, Moquin L, Dal Bo G, Giros B, Gratton A, Walker CD. Onaning yuqori yog 'iste'moli yadrodagi akumbenslarda dopaminning presinaptik tarzda boshqarilishini o'zgartiradi va avlodlardagi yog' mukofotlarini oshirishga yordam beradi. Neuroscience (2011) 176: 225-36.10.1016 / j.neuroscience.2010.12.037 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
21. Ong ZY, Muhlhauslar BS. Onaning "arzimas-oziq-ovqat" ovqatlanishini oziq-ovqat tanlovlarini va naslida merolimbik mukofot yo'lini rivojlanishini o'zgartiradi. FASEB J (2011) 25: 2167-79.10.1096 / fj.10-178392 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
22. Romaní-Peres M, Lepinay AL, Alonso L, Rincel M, Xia L, Fanet H va boshq. Perinatal ta'sirning yuqori yog'li dietaga ta'siri va ovqatlanish muammolariga, oziq-ovqatni rag'batlantiradigan harakatlarga va mezolimbik dopamin funktsiyasiga javob berishda stress. Int J Obes (Lond) (2017) 41 (4): 502-9.10.1038 / ijo.2016.236 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
23. Beier KT, Steinberg EE, DeLoach KE, Xie S, Miyamichi K, Schwarz L va boshq. VTA dopamin neyronlarining davriy arxitekturasi muntazam kirish-chiqish xaritalash orqali aniqlanadi. Hujayra (2015) 162: 622-34.10.1016 / j.cell.2015.07.015 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
24. Tan KR, Yvon S, Turiault M, Mirzabekov JJ, Doehner J, Labouie G va boshq. VTA diskining GABA neyronlari shartli joylashib olgan. Neyron (2012) 73: 1173-83.10.1016 / j.neuron.2012.02.015 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
25. Van Zessen R, Phillips JL, Budygin EA, Stuber GD. VTA GABA neuronlarini faollashtirish mukofotni sarflashni pasaytiradi. Neyron (2012) 73: 1184-94.10.1016 / j.neuron.2012.02.016 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
26. Xu H. mukofoti va nafrat. Annu Rev Neurosci (2016) 39: 297-324.10.1146 / annurev-neuro-070815-014106 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
27. Stanley BG, Urstadt KR, Charlz JR, Kee T. Glutamat va GABA oziq-ovqat mahsulotlarini boshqaruvchi lateral hipotalamik mexanizmlarda. Physiol Behav (2011) 104: 40-6.10.1016 / j.physbeh.2011.04.046 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
28. Ancel D, Bernard A, Subramaniam S, Hirasawa A, Tsujimoto G, Hashimoto T va boshq. Og'zaki lipid sensori GPR120 sichqonlarda dietal lipidlarni orozensor aniqlash uchun ajralmas hisoblanadi. J lipid qobig'i (2015) 56: 369-78.10.1194 / jlr.M055202 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
29. Ackroff K, Lukas F, Sclafani A. Yog 'manbai funktsiyasi sifatida lazzat imtiyozli konditsioner. Physiol Behav (2005) 85: 448-60.10.1016 / j.physbeh.2005.05.006 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
30. Camandola S, Mattson MR. Toll-retseptorlari 4 yog ', shakar va umami ta'mi afzalligi, oziq-ovqat mahsuloti va tana vaznini tartibga soladi. Obezlik (2017) 25: 1237-45.10.1002 / oby.21871 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
31. Coupé B, Amarger V, Grit I, Benani A, Parnet P. Nutriy dasturiy ta'minot gipotalamik tashkilotni va leptinga erta javobni ta'sir qiladi. Endokrinologiya (2010) 151: 702-13.10.1210 / en.2009-0893 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
32. Paillé V, Brachet P, Damier P. Parkinson kasalligining rat modelida diskineziyaning paydo bo'lishida nigral lezyonning roli. Neuroreport (2004) 15: 561-4.10.1097 / 00001756-200403010-00035 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
33. Benani A, Grihorczuk C, Gouazé A, Fioramont X, Brenachot X, Guissard C va boshq. Oziq-ovqat iste'molining parhez yog'iga moslashishi sichqonlarda kavakli melanokortin tizimining PSAga bog'liqligini qayta tiklashni o'z ichiga oladi. J Neurosci (2012) 32: 11970-9.10.1523 / JNEUROSCI.0624-12.2012 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
34. Kirk SL, Samuelsson AM, Argenton M, Dhonye H, Kalamatianos T, Poston L va boshq. Sichqoncha ichidagi dietadan kelib chiqqan onaning semirib ketishi, naslda oziq-ovqat iste'molini tartibga soluvchi markaziy jarayonlarga doimiy ta'sir ko'rsatadi. PLoS One (2009) 4: e5870.10.1371 / jurnal.pone.0005870 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
35. Ong ZY, Muhlhauslar BS. Sutdan ajralib chiqishgacha kam yog'li ovqatni iste'mol qilish erkaklardagi oziq-ovqat imtiyozlarini dasturlashni o'zgartiradi, lekin ayollarda emas, "mayin oziq-ovqat" ning urug'i - suyak barajlari. Acta Physiol Oxf Engl (2014) 210: 127-41.10.1111 / apha.12132 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
36. Ribaroff GA, Wastnedge E, Drake AJ, Sharpe RM, Chambers TJG. Homilaning yuqori yog 'dietasi ta'sirida hayvonlarning modeli va avlodlarda metabolizmga ta'siri: meta-regressiya tahlili. Obes Rev (2017) 18 (6): 673-86.10.1111 / obr.12524 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
37. Bautista CJ, Montaño S, Ramirez V, Morales A, Nathanielsz PW, Bobadilla NA va boshq. Yuqori yog'li parhezni iste'mol qiladigan semiz sutlarda sut tarkibidagi o'zgarishlar. Br J Nutr (2015) 115: 538-46.10.1017 / S0007114515004547 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
38. Rolls BA, Gurr MI, Van Duijvenvoorde PM, Rolls BJ, Rowe EA. Yalang'och va obrazli kalamushlarda laktatsiya qilish: kafeteryani boqish va parhezli semizlikning sut tarkibiga ta'siri. Physiol Behav (1986) 38: 185-90.10.1016 / 0031-9384 (86) 90153-8 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
39. Oq CL, Purpera MN, Morrison CD. Homiladorlikning semirib ketishi ko'p yog'li parhezning naslga ta'sirini dasturlash uchun kerak. Am J Physiol Regul Integr kompi Fiziol (2009) 296: R1464.10.1152 / ajpregu.91015.2008 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
40. Sun B, Purcell RH, Terrilion Idoralar, Yan J, Moran TH, Tamashiro KLK. Homiladorlik yoki emizish davrida yuqori yog'li mato parvarishi leptinning sezgirligi va semirib ketishiga ta'sir qiladi. Diabet (2012) 61: 2833-41.10.2337 / db11-0957 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
41. Berthoud HR. Neytral ishtahani nazorat qilishda metabolik va hedonik drayvlar: xo'jayin kim? Curr Opin Neurobiol (2011) 21: 888-96.10.1016 / j.conb.2011.09.004 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
42. Henning SJ, Chang SS, Gisel EG. Emizikli va emizikli kalamushlarda emizishni nazorat qilishning Ontogeniyasi. Am J Physiol Regul Integr kompi Fiziol (1979) 237: R187-91. [PubMed]
43. Leibowitz SF, Lukas DJ, Leibovitz KL, Jhanwar YS. Erkak va erkak kalamushlarda sutdan sutdan ajralib chiqishga qadar makaronutrient iste'molining rivojlanish naqshlari. Physiol Behav (1991) 50: 1167-74.10.1016 / 0031-9384 (91) 90578-C [PubMed] [O'zaro faoliyat]
44. Trifilieff R, Feng B, Urizar E, Winiger V, Ward RD, Teylor KM va boshq. Katta yadroli akumbensdagi dopamin D2 retseptorlari ifodasini oshirish motivatsiyani kuchaytiradi. Mol-psixiatriya (2013) 18: 1025-33.10.1038 / mp.2013.57 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
45. Spear LP. Barkamol miya va yoshga bog'liq xatti-harakatlar. Neurosci Biobehav Rev (2000) 24: 417-63.10.1016 / S0149-7634 (00) 00014-2 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
46. Vendruscolo LF, Gueye AB, Darnaudéry M, Ahmed SH, Cador M. Shomil o'smirlik davrida ortiqcha iste'mol qilish kattalar kalamushlarida g'ayrat va mukofot funktsiyasini qay tarzda o'zgartiradi. PLoS One (2010) 5: e9296.10.1371 / jurnal.pone.0009296 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
47. Boitard C, Parkes SL, Cavaroc A, Tantot F, Kastanon N, Laye S va boshq. Adolesan yuqori yog 'dietasini kattalar nazoratidagi dietaga almashtirish neyrokognitiv o'zgarishlarni tiklaydi. Front Behav Neurosci (2016) 10: 225.10.3389 / fnbeh.2016.00225 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
48. Naneix F, Darlot F, Coutureau E, Cador M. Gedonik va nukleus akumbenslardagi uzoq davom etgan kamchiliklar o'smirlik davrida shakarni ortiqcha iste'mol qilish orqali shirin baxtlilarga reaktivlik. Eur J Neurosci (2016) 43: 671-80.10.1111 / ejn.13149 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
49. Baker X, Kobayashi K, Okano X, Saino-Saito S. Neonatal va kattalar sichqonlarida tirozin gidroksilaz mRNA ning kortikal va striatal ekspresiyasi. Cell Mol Neurobiol (2003) 23: 507-18.10.1023 / A: 1025015928129 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
50. Jaber M, Dumartin B, Sagné S, Haycock JW, Roubert S, Giros B va boshq. Dopamin transporteriga ega bo'lmagan sichqonlarning bazal ganglionida tirozin gidroksilazning differentsial regulyatsiyasi. Eur J Neurosci (1999) 11: 3499-511.10.1046 / j.1460-9568.1999.00764.x [PubMed] [O'zaro faoliyat]
51. Klietz M, Keber U, Carlsson T, Chiu WH, Höglinger GU, Weihe E va boshq. L-DOPA bilan indikatsiyalangan diskineziya striatal tirozin gidroksilaza mRNA-ifodalangan neyronlarning nuqsonli pastga regulyatsiyasi bilan bog'liq. Neuroscience (2016) 331: 120-33.10.1016 / j.neuroscience.2016.06.017 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
52. Kelley AE, Baldo BA, Pratt WE, Villi MJ. Kortikostriatal-hipotalamali elektronlar va oziq-ovqatni rag'batlantirish: energiya, harakat va mukofotning integratsiyasi. Physiol Behav (2005) 86: 773-95.10.1016 / j.physbeh.2005.08.066 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
53. Jennings JH, Ung RL, Resendez SL, Stamatakis AM, Teylor JG, Huang J va boshq. Hissiyotchilik va iste'mol xulq-atvorlari uchun gipotalamik tarmoq dinamikasini tasavvur qilish. Hujayra (2015) 160: 516-27.10.1016 / j.cell.2014.12.026 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
54. O'Connor EC, Kremer Y, Lefort S, Harada M, Pascoli V, Rohner C va boshq. Yanal gipotalamusga prognoz qilayotgan akumbal D1R neyronlari ovqatlantirishga ruxsat beradi. Neyron (2015) 88: 553-64.10.1016 / j.neuron.2015.09.038 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
55. Jennings JH, Rizzi G, Stamatakis AM, Ung RL, Stuber GD. Yanal gipotalamus orkestralarini oziqlantirishda inhibitiv elektronlar arxitekturasi. Fan (2013) 341: 1517-21.10.1126 / science.1241812 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
56. Stratford TR, Wirtshafter D. Ventral pallidumdan olingan oziqlantirishda yanal gipotalamus aralashuvi. Eur J Neurosci (2013) 37: 648-53.10.1111 / ejn.12077 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
57. Paille V, Fino E, Du K, Morera-Herreras T, Perez S, Kotaleski JH va boshq. GABAergi davrlari shoshilinch-vaqtga bog'liq plastisitni nazorat qiladi. J Neurosci (2013) 33: 9353-63.10.1523 / JNEUROSCI.5796-12.2013 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
58. Fonseca MS, Murakami M, Mayen ZF. Dorsal rapte serotonerjik neyronlarning faollashishi kutishni ta'minlaydi, lekin kuchaytirmaydi. Curr Biol (2015) 25: 306-15.10.1016 / j.cub.2014.12.002 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
59. Doya K. Metallurgiya va neyromodulyatsiya. Nerv tarmoqlari (2002) 15: 495-506.10.1016 / S0893-6080 (02) 00044-8 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
60. Leibovitz SF, Aleksandr JT. Ovqatlanish xatti-harakatini, ovqat hajmini va tana vaznini nazorat qilishda gipotalamal serotonin. Biol psychiatry (1998) 44: 851-64.10.1016 / S0006-3223 (98) 00186-3 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
61. Voigt JP, Fink H. Serotonin oziqlantirish va to'yishni nazorat qiladi. Behav Brain Res (2015) 277: 14-31.10.1016 / j.bbr.2014.08.065 [PubMed] [O'zaro faoliyat]
62. Brenachot X, Rigault C, Nédélec E, Laderrière A, Xanam T, Gouazé A va boshq. Histon asetiltransferaza MOF sichqonlarda dietaga bog'liq semirib ketishni oldini olish uchun hipotalamik polisializatsiyani faollashtiradi. Mol-Metab (2014) 3: 619-29.10.1016 / j.molmet.2014.05.006 [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]