Sukrozning yutilishida tezkor AMPA retseptorlari savdosi (2013)

J Neurosci. Muallifning qo'lyozmasi; PMC-da joylashgan Oct 3, 2013.
Nihoyasida tahrirlangan shaklda nashr etilgan:
Nashriyotchining ushbu maqolaning so'nggi tahrirlangan versiyasi bepul mavjud J Neurosci
PMCdagi boshqa maqolalarga qarang keltirilgan nashr qilingan maqola.

mavhum

Shakarni sinaptik usulda etkazish va xatti-harakatlarga ta'sir qiladigan tabiiy sovg'alar mexanizmlari sezilarli darajada aniqlanmagan. Bu erda biz sukrozni qabul qilish orqali yadroviy akkumtslar sinapsini boshqarishni o'rganamiz. Avvalgi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, AMPA retseptorlari odam savdosi sinaptik kuchni tartibga solishning asosiy mexanizmi va bu in vitro, GLIA1 subunitini o'z ichiga olgan AMPA retseptorlari savdosi ekstasinaptik va keyin sinaptik retseptorlarni tashishni o'z ichiga olgan ikki bosqichli mexanizm yordamida amalga oshiriladi. Biz xabarlarga ko'ra, 25% sukroz eritmasi tez-tez o'z-o'zidan lokomulyatsiya va kuchaygan akumbenslar yadrosida ko'p miqdorda kunlik yutilishi Ca2+- GluA1 o'z ichiga olgan, GluA2 etishmaydigan AMPA retseptorlari bo'lgan o'tkazuvchan AMPA retseptorlari (CPAR). Elektrofizyolojik, biokimyoviy va miqdoriy elektron mikroskopi tadqiqotlari shuni ko'rsatdiki, sukrozni tayyorlash (7 kun) barqaror (> 24 soat) intraspinoz GluA1 populyatsiyasini keltirib chiqaradi va bu kalamushlarda bitta saxaroza stimuli tez (5 min), lekin vaqtincha (<24 soat) ko'tariladi. Ekstrasinaptik joylarda GluA1. CPAR va dopamin D1 retseptorlari talab qilingan in sukrozni iste'mol qilishdan keyin yuqori lokomulyatsiya qilish uchun vivo. Shuni ta'kidlash kerakki, 7 kunlik 3% saksarin eritmasi, kaloritsiz shirinlovchi, 1% sukrozni iste'mol qilish bilan bir xil bo'lgan synaptic GluA25 indikatori. TBularning barchasi ilgari tasvirlangan ko'p bosqichli GluA1 odam savdosini aniqlaydi in vitro, sinaptik uzatishni o'tkir tartibga solish mexanizmi sifatida ning Vivo jonli tabiiy yoki orzansor mukofoti bilan. Odam savdosi sukrozning kaloriya qiymatiga bog'liq bo'lmagan kemosensor yo'l bilan rag'batlantiriladi.

Kirish

Sukrozni haddan tashqari iste'mol qilish muhim sog'liqni saqlash muammosi hisoblanadi (Hu va Malik, 2010), lekin sukroz kabi tabiiy, orozension retseptlar sinaptik ta'sir o'tkazishga ta'sir etuvchi mexanizmlar ma'lum emas. Yadro akumbensidagi sinaptik plastika, miya mukofot tizimining ajralmas qismi (Sesack va Greys, 2010), g'ayrioddiy xatti-harakatlarning ko'plab shakllariga, jumladan, mukofotni o'rganishga (Kun va Karelli, 2007), ijtimoiy stressga javob (LaPlant va boshq., 2010) va narkologik patologiyalar (Luscher va Malenka, 2011). Takrorlangan kokainga ta'sir qilish akumbens va ventral tegmental hududning (VTA) neyronlarida sinaptik plastisitiyaga olib keladi (Brebner va boshq., 2005; Grueter va boshq., 2010; Mameli va boshq., 2009; Pascoli va boshq., 2012; Tomas va boshq., 2001; Ungless va boshq., 2001). Uzoq muddatli kirish kokainning o'z-o'zidan tatbiq etilishi va keyinchalik uzoqlashib ketishi natijasida sinapslar Ca2+GipA2-AMPA-tipli glutamat retseptorlari (CPAR) yo'qligi, ularning signalizatsiyasi kokainning istagi (Conrad va boshq., 2008; McCutcheon va boshq., 2011a). Kokainga o'xshash sucroz kabi orossensor mukofotlar mustahkamlash uchun accumbens dopamin (Smit, 2004), ammo orotsensor mukofotining amaliyotga joriy etilishi o'rganilmagan.

AMPA retseptorlari (AMPARs) markaziy asab tizimining ogohlantiruvchi vositalarining asosiy mediatorlari bo'lib, ularning savdosi turli neyron jarayonlarga, jumladan, o'quv va xotira (Nedelescu va boshq., 2010; Rumpel va boshq., 2005; Whitlock va boshq., 2006). AMPARs to'rt xil bo'linmadan iborat: GluA1-4. GluA2 o'z ichiga olgan AMPARlar Ca dir2+GluA2-yo'qotadigan retseptorlari (CPARlar) asosan GluA1 homomerlari bo'lgan bo'lsa, Ca2+ ichkariga qarab tuzatish. GluA1 faollashtirilgan sinaptik savdoga ikki bosqichli yo'l orqali o'tadi, unda CAMP ga qaramli protein kinaz (PKA) va cGMP ga qaram protein kinaz II (cGKII) tomonidan Ser 845 fosforillanish plazma membranasidagi extrasinaptik joylarda retseptorlarni to'plashga yordam beradi (Esteban va boshq., 2003; Serulle va boshq., 2007; Sun va boshqalar, 2008; Sun va boshqalar, 2005). Sinapsga lateral diffuziya qilinganidan so'ng, PKX tomonidan Ser 818 ning fosforilashlanishi AMPARlarni sinaps tarkibida barqarorlashtiradi (Boehm va boshq., 2006), postsinaptik zichlikka (Ehlers va boshq., 2007; Oh va boshqalar, 2006; Serulle va boshq., 2007). Ca2+Ser-567 va Ser 831 ning kalmodulinga bog'liq protein kinaz II (CaMKII) fosforillanishlari sinaptik usulda kiritilishi va ekstrasinaptik maqsadgaLu va boshq., 2010; Roche va boshq., 1996). Biroq, ma'lum emasmi? ning Vivo jonli CPARlarni joriy qilish ushbu tezkor, ko'p bosqichli mexanizmlarni ishlatadi in vitro.

Sucrose kabi orotsensor mukofotlari osmonni uyg'otuvchi sinapslarni tartibga soladigan mexanizmlarni o'rganish uchun biz qisqa sukrozni iste'mol qilishning paradigmasini qo'lladik va akumbens neuronlarida sinaptik uzatishda o'lchangan o'zgarishlarni qo'lladik. Shuni takrorlaymizki, takroriy sükrozni iste'mol qilish CPARslarni qo'shib olib boruvchi accumbens sinapsini kuchaytiradi va sukrozga o'rgatilgan hayvonlarda, tezkor GluA1ni ekstrasinaptik joylarga chiqarish uchun bitta sukroz stimulyatori etarli bo'ladi. Sakarin, kaloritsiz shirinlantiruvchi, sakkrozga o'xshash tarzda sinaptik odam savdosini keltirib chiqargani uchun, odam savdosi kaloriya yo'llaridan ko'ra orossensorga javobdir. Bundan tashqari, CPAR blokirovkasi sukrozga bog'liq spontan lokomotor harakatlarning ko'tarilishini oldini oldi ning Vivo jonliShuningdek, CPARsni tabiiy mukofotlarga berilgan javoblarning muhim regulyatori sifatida aniqlash.

Materiallar va usullari

Mavzular va jarrohlik muolajalar

Mavzular 150-300 gramm og'irlikdagi Sprague-Dawley sichqonlari (Taconic, behavioral experiments) va E18 homilador Sprague-Dawley ratlari (Taconic, hujayra madaniyati eksperimentlari) bo'lgan. Sichqoncha 2h / 12h nur-qorong'i aylanish jarayonida (12: 18da yonib turadi) xatti-harakatlar tajribasi uchun har bir qafas uchun 00-ga joylashtirildi va oziq-ovqat va suv ad libitum har doim ham. Barcha eksperimental protsesslar Nyu-Yorkdagi Tibbiyot Instituti Institutiv hayvonlarni parvarish qilish va ulardan foydalanish bo'yicha qo'mitasi tomonidan tasdiqlangan va "Laboratoriya chorvadorlik tamoyillari" (NIH85-23) nashrlari asosida amalga oshirilgan.

Sukroz tayyorlash va lokomotivni o'lchash

Sichqonlar o'z uylarida hujayralarida 3 sutkalik kun davomida 2 sinov xonasiga o'tkazildi. To'rtinchi kunda suv yoki 25% sukroz o'z ichiga olgan shishalar 5 daqiqa uchun qafas qopqog'i orqali kiritildi. Keyin shishalar tortildi. Barcha tajribalar uchun, kalamushlardan 1 kun davomida 5 kunlik o'quv boshlanishidan boshlab kamida 3 g sukroz ichish talab qilindi; Darhaqiqat, barcha kalamushlar bu mezonga javob berdilar. Shishani olib tashlashdan so'ng, kalamushlar hayvon vositasiga olib ketishdan oldin 30 daqiqa sinov xonasida qoldi. Qurbonlik kunida kalamushlar SOS tomonidan behush holga keltirildi2, gilotin tomonidan dekapitatsiya qilingan va muzda namunalar to'plangan. Lokomotor tajribalar uchun sichqonchani jami 35-min uchun lokomotor o'lchash kameralariga (Accuscan, Columbus, OH) joylashtirildi. Xonada 15-mindan so'ng, kameraning yuqori qismidan boncukli tishli shisha kiritildi va stabillashdi. Shisha 5-daqiqadan so'ng kameraning yuqori qismidan chiqarildi va shishani olib tashlashdan so'ng sichqon xonada qo'shimcha 15-min uchun qoldi. Ushbu protsedura 7 kun ketma-ketligi uchun bir xil takrorlandi. O'tkazilgan masofa hayvon hujayralarini (16 × 16 × 42 sm) oldingi va chapdan o'ngga harakat qiladigan 42 × 30 infraqizil nur chiroqlari panjarasi orqali hayvonlarning faolligini kuzatadigan VersaMax sistemasi (Accuscan, Columbus, OH) yordamida o'lchandi . Nurning holati haqida ma'lumot, soniyada 100 marta skaner qilingan, diskka saqlangan. Faoliyat 12 min soniyada 3 turli xil 35-min konteynerlar davomida o'lchagan ambulator masofa sifatida ifodalangan (oxirgi bin 2-min edi).

Sakkarin ta'limi

Sukroz bilan GluA1ning odam savdosini sakarinni iste'mol qilish oqibatlarini solishtirish uchun 12 kattalar erkak kalamush (250 g) hayvonotxonada 12 soat davomida engil / qorong'i davrda joylashtirilgan. Keyin barcha kalamushlarni sinash xonasiga olib borib, 2 soatlab qoldirib, hayvonot dunyosiga ko'chirildi. 4 kundan bir kun (3 kundan keyin odatlanganidan keyin), kalamushlarga suv, sukroz yoki sakarin bo'lgan erkin foydalanish shisha berildi. 4 kalamushiga qafasning yuqorisida joylashgan suvni o'z ichiga olgan shishaga, qopqoq orqali katakchaga chiqadigan chiviq bilan kirish imkoni berildi. Kirish vaqti 5 daqiqa bo'lib, keyin shishani olib tashlashdi va 15 daqiqa qo'shimcha daqiqalar kalamush hayvonlarni ko'chirib o'tkazishdi. 4 kalamushlariga 25% sukroz eritmasiga ruxsat berildi va 4 kalamushlariga 3% sakarin eritmasiga (Sweet'n Low) ruxsat berildi. Iste'mol qilingan suyuqlik miqdori o'lchanardi. Ushbu amaliyot 7 kun davomida takrorlandi. Ichimlikning 7-kuni, shishani olib tashlashdan so'ng, kalamushlar qurbonlikka keltirildi va akumbenslar yadrosi hosil qilindi va GluA1 darajalari Western blot tomonidan tekshirildi.

elektrofizyolojisi

Yuqorida ta'riflanganidek, kaltsiy silkrozlar aniq plastik qafaslarda tayyorlangan va 7 kunidagi shishani olib tashlashdan so'ng ketamin (100 mg / kg ip) va ksilazin (10 mg / kg ip) bilan behushlik qilingan va sovuq sho'r (mEPSC tajribalari bilan) yoki darhol dekapitasyon (rektifikasyon tajribalari). Brainlar tezda (mMda) sun'iy serebrospinal suyuqlikka (ACSF) kiritildi: MEPSC tajribalari uchun: NaCl (118), KCl (2.5), CaCl2 (3), MgCl2 (1), NaHCO3 (26), NaH2PO4 (1), D-glyukoza (10), 325 mOsm ga sozlangan osmolarlik va 95% O2/ 5% CO2 (pH 7.4); rektifikatsiya tajribalari uchun: 75 sukroz, 87 NaCl, 2.5 KCl, 1.25 NaH2PO4, 0.5 CaCl2, 7 MgCl2 6 H2O, 25 NaHCO3, 10 dekstrozasi, 95% O bilan qovurilgan2 / 5% CO2 (pH 7.4). Nucleus accumbenslarini o'z ichiga olgan koronal chiziqlar (vibratom) (Leica, VT300S) yordamida muzlatilgan ACSFda kesilib, ACSFda (ACSF, mM: 1200 NaCl, 124 KCl, 2.5 NaH2PO4, 2.5 CaCl2, 1.5 MgSO4 7X2O, 26 NaHCO3va 10 dekstroz) <30 min; keyin tiklanishiga imkon berish uchun tilim prekubatorida xona haroratida kamida 1 soat saqlang. MEPSC tajribalari uchun: keyinchalik bitta bo'lak TC32B in-layn eritma isitgichi va boshqaruvchisi (Warner Instruments, CT) bilan 324 ° C da neylon to'r bilan suv ostida saqlanadigan yozuv kamerasiga o'tkazildi. Kamera doimiy ravishda 2 ml / min tezlikda ACSF tomonidan doimiy ravishda takomillashtirildi. Yadro akumbens yadrosi mintaqasidan o'rta tikanli neyronlar ingl. Infraqizil-differentsial aralashuv kontrastli video mikroskopi (Hamamatsu C5405) yordamida 50 marotaba uzoq masofada ishlaydigan suvga cho'mish ob'ekti o'rnatilgan Olympus BX40WI vertikal mikroskopi yordamida aniqlandi. (MM da): CsCl (4), HEPES (6), EGTA (145) va MgATP (10) dan tashkil topgan hujayra ichidagi pipetka eritmasi bilan to'ldirilgan elektrodlar (0.5-5 MΩ). Osmolarlik sakkaroza bilan 290 mOsm ga, pH esa CsOH bilan 7.4 ga o'rnatildi. Sinoptikdan keyingi miniatyurali qo'zg'atuvchi oqimlar (mEPSC) Axopatch 10B kuchaytirgichi (Molecular Devices, CA) yordamida bikukullin (1 mM) va tetrodotoksin (200 mM) ishtirokida qayd etildi va Digidata 1322A (Molecular Devices, CA) tomonidan raqamlashtirildi. Rektifikatsiya qilish bo'yicha tajribalar uchun: tilimlar ro'yxatga olish kamerasiga o'tkazildi va perfüze qilindi (2.0-2.5 ml min.)-1) 33-35 ° da 50m pikrotoksinni o'z ichiga olgan kislorodli ACSF bilan EPSClarni ajratish. Somatik to'liq hujayrali yozuvlar IR-DIC video mikroskopi yordamida Multiklampli 700B kuchaytirgichi (Molecular Devices) bilan kuchlanish-qisqichning asosiy mintaqaviy o'rta zarralar neyronlaridan qilingan. Patch pipetalar (4-6 MΩ) hujayra ichidagi eritma bilan to'ldirilgan (mN: 125 Cs-glyukonat, 2 CsCl, 5 TEA-CL, 4 Mg-ATP, 0.3 GTP, 10 fosfokreatin, 10 HEPES, 0.5 EGTA va 3.5 QX -314). Ma'lumotlar 2 kHzda filtrlangan, 10 kHz da raqamlangan va Clampfit 10 (Molecular Devices) bilan tahlil qilingan. Ekstrakellulyar stimulyatsiya (0.01-1 milodiy, 5-150 mA, 0.2 Hz) ro'yxatga olish elektrodidan kichik shisha bipolyar elektrod 0.05-0.5 mm bilan qo'llanildi. Naspm (10 μM) ni o'z ichiga oluvchi eritma ~ 200 mindan keyin 10 min uchun hammaga perfuz qilindi. EPX amplitudasining o'zgarishi 70, -50, -30, 0, + 20, + 40 va + 60 mV potensiallarini saqlashda dori preparatidan oldin va keyin o'lchandi. Tuzatish indekslari (ir) teskari potensialdagi har qanday mumkin bo'lgan o'zgarishlarni tuzatish va quyidagi tenglama yordamida hisoblab chiqilgan: ir = (I-70 / 70) / (I+ 40 / 40), bu erda I-70 va I+ 40 -70 mV va + 40 mVda qayd etilgan EPSC amplitudalari.

Subcellular fraksiyona va Western blotting

Yuqorida aytib o'tilganidek, akumbens muz ustida yig'ilgan. Yadro va qobiq alohida ajratilganida ajralish dopamin b-gidroksilaz uchun dopamin b-gidroksilaz uchun sinaptosom fraktsiyalarini tekshirish orqali tasdiqlangan, akson terminallarida qobiqqa joylashgan, ammo yadroSesack va Greys, 2010). Barcha hujayra, sinaptosom va PSD fraktsiyalari ilgari ta'riflanganidek tayyorlangan (Jordan va boshq., 2004). Synaptosomal granulalar 200% 25-T X x 1 bilan 100% 4-MIN-30-minutida xNUMX-Cda yotgan 13,800 mn 15 mM Trisda xNUMX-min uchun qayta suspenzatsiya qilindi va PSNlarni to'plash uchun mikrosantrifugada 25-min uchun 2x gda santrifüj qilindi. Xom PSDlarni o'z ichiga olgan pelet XNUMX% SDS bilan XNUMX mM Tris ichida qayta ishlab chiqilgan. Qatlamlar SDS-PAGE jelida Western blot tomonidan ilgari aytib o'tilganidek tahlil qilingan (Jordan va boshq., 2004). Quyidagi antikorlar ishlatildi: dopamin b-gidroksilaz (1: 1,000, Abcam), GluA1 (1: 1,000, Millipore), fosfor-Ser 845 GluA1 (1: 1,000, Millipore), GluA2 (1: 1,000, Millipore) va tubulin (1: 10,000, Sigma).

Elektron mikroskopi

To'qimalarni yig'ish kuni (7 sakkaroz tayyorlash kuni) 3 sinov guruhlaridan (Suv, Sukroz / Suv, Sukroz, 3 kalamush / sinov guruhi) 15-min uchun lokomotor o'lchash kameralariga joylashtirilgan; 15-min da shisha idishni xona bo'ylab kiritildi. Suv guruhidagi kalamushlar suv oldi, ugleroz guruhidagi kalamush 25% sukroz, 25 kunlik 6% sukrozni iste'mol qilgan Sucrose / Suv guruhidagi kalamushlarni oldi, suv oldi. Sichqoncha Nembutal (50 mg / kg ip) bilan chuqur xiralashgan va 0.1% paraformaldehid va 7.4% glutaraldehid o'z ichiga olgan 4 M fosfat tampon (pH 0.1) bilan birinchi 50-min davomida 3 ml / daqiqada transkardial perfuz qilingan, so'ngra keyingi 20-min uchun 7 ml / min tezligi. Postembed immunogold (PEG) belgisi uchun to'qima tayyorlangan va tasvirlar ilgari ta'riflangan tarzda olingan (Nedelescu va boshq., 2010). Immunolabels assimetrik sinaptik birikmalarda PSDga nisbatan "PSD" (PSD dan 1 PSD kengligida), "PSD", "intraspinous" yoki "extrasynaptic membran" sifatida joylashtirilgan. Har bir hayvon, 93 sinapslari akumbenlarning yadrosi namunalari bo'lgan. Tasodifiy misollardan foydalanib, dastlabki 93 tasodifiy duch kelgan barcha sinapslarni tahlil qildik, so'ngra biz sistemada muntazam ravishda to'kib tashladik, keyin bir xil antenna o'limini davolashni olgan uch hayvonning har biridan bir xil sonli sinapslarni to'plashdi. Ikkita turdagi o'lchovlar o'tkazildi. Birinchisi, GluR1-immunoreaktivlik darajasini baholadi, bu omurilikning alohida funktsional sohalarida yuzaga kelgan PEG zarrachalarining sonini kamaytiradi. Ikkinchisida, PEG zarrachalari har qanday miqdordagi PEG zarrachalari bilan sinapslarning nisbatlarini baholash edi. Faqat 1 PEG zarrachalari tomonidan etiketilgan sinapslar GluR1-PEG protsedurasining o'ziga xosligini ko'rsatadigan avvalgi ishlarga asoslangan holda etiketlangan deb hisoblanadi (Nedelescu va boshq., 2010). GluR1-immunolabeling darajasi va darajasi bo'yicha davolash effektlari rejalashtirilgan post-hoc taqqoslashlar bilan bir tomonlama ANOVA (Fisher's LSD) bilan tahlil qilindi. Eksperimental xarakteristikani bartaraf etish uchun ma'lumotlar uch karrali ko'rindi: bitta eksperiment sakkaroz tayyorlashni bajargan va uchta test guruhidagi hayvonlarning yozuvlarini saqlagan, ikkinchi tajribali elektron mikrograflar yaratilgan va har bir mikrografaga yangi alfanumerik kod tayinlangan va kodni muhrlangan va uchta qo'shimcha eksperimentchilar mikrograflarni skanerlashdi va PEG zarralarini aniqladilar. PEG miqdori aniqlanganidan so'ng, tajriba qiluvchilar har bir mikrografning identifikatsiyasini aniqlash uchun to'plandilar.

Kanül implantatsiyasi va intrakraniyal inyeksiya

İntrakraniyal in'ektsiya Naspm va APVni akumbenslar yadrosiga etkazib berish uchun ishlatilgan. Kanül implantatsiyadan oldin, ilgari aytib o'tilganidek (Carr va boshq., 2010), kalamushlar ketamin (100 mg / kg ip) va xylazine (10 mg / kg ip) bilan chuqur tashvishga tushib, operatsiyadan keyingi analjezik benamin (1 mg / kg teri osti) bilan AOK qilingan. Sichqoncha ikkita 26-gauge hidoyat kanülleriyle (PlasticsOne, Roanoke, VA) ikki tomonlama ravishda accumbens yadrosida koordinatalari bilan stereotaksik ravishda implantatsiya qilindi: 1.6 mm oldidan bregma; 2.9 mm lateraldan sagittal tikuv, 8 ° o'rta yo'lga burchaklar, 5.6 mm ventralning bosh suyagi yuzasi. Kanüller akustik akril tomonidan amalga oshirildi va patologiya, oklüzyon uslubi bilan himoya qilindi. İntrakranial inyeksiyalar uchun Naspm va APV eritmalari ikkita 30 sm uzunlikdagi PE-50 trubkasiga bir nechta xom naychalarga joylashtirilgan xomasimon xammunli shpritslarga, ikkinchi tomondan esa 25 o'lchamli 31 o'lchamli in'ektsion kanüllarga implantatsiyadan o'tgan rahbarlardan tashqari. Shpritslar 2.0 mL enjeksiyon hajmini 2272 soniya davomida etkazib bergan Garvard 0.5 mikrolitrli shpritsli nasos egasiga o'rnatildi. In'ektsiyalarni bajarishdan bir daqiqadan so'ng instruktor kanüllari qo'llanmalardan olib tashlandi, stillar almashtirildi va hayvonlar sükroz tayyorlash uchun lokomotor sinov xonalariga joylashtirildi. Hayvonlarni qurbon qilishdan so'ng, kanüllerin lokalizasyonu uchun kriyojenik miya qismlari tahlil qilindi; 100 hayvonlardan 2 tekshiruvi noto'g'ri kanül joylashuvi tufayli o'rganishdan chiqarildi.

Statistik tahlil

Elektron-mikroskopiya, immunitetotoksimiya va biotinlanish tajribalari uchun Fisher post-hoc testlaridan keyin bir tomonlama ANOVA ishlatildi. Elektrofizyologiyada ikkitomonlama talabalar t-testlari ishlatilgan. Sukroz hiperaktivligi tajribalari uchun ikki tomonlama ANOVA ishlatildi, undan so'ng Fisher post-hoc testlari qo'llanildi.

Natijalar

Sukrozni iste'mol qilish paradigmining tavsifi

Tabiiy, orozension mukofotning sinaptik transmigratsiyaga ta'sirini o'rganish uchun sukrozni iste'mol qilish paradigmasini qo'lladik (Shakl 1A). Katta yoshdagi erkak kalamushlar uch kun ketma-ket sinash xonasiga ko'chirildi. To'rtinchi kuni (mashg'ulotning birinchi kuni), kalamushlar lokomotor o'lchash kamerasiga joylashtirildi. Kamerada 15 daqiqada lokomotorlar o'lchovini o'lchaganlaridan so'ng, suvning (suv hayvonlari uchun) yoki 25% sukroz eritmasi (sukroz hayvonlari uchun) bo'lgan idishlarni kameraning qopqog'idagi teshiklardan o'lchash xonalariga kiritildi. Idishlarni 5 daqiqadan so'ng chiqarib tashlashdi va lokomotor harakatlar hayvonlarning uy hujayralariga qaytib kelishidan oldin qo'shimcha 15 daqiqa davomida o'lchandi. Ushbu amaliyotni 7 kun ketma-ketlikda takrorladik. Ba'zi tajribalarda sukrozni o'rgatish 8-ga uzatildith kun. Yuqori qoniqarli eritma uchun qisqa, shartsiz kirish bizni sukrozni qabul qilishning o'tkir va kümülatif ta'sirini tekshirishga imkon berdi, chunki hayvonlar uch kunlik mashg'ulot vaqtida kirish oynasi davomida sukrozni ishonchli tarzda imbibe qildi (Shakl 1B). Ushbu eksperimental sharoitlar ingichka ichimliklarni iste'mol qilish to'xtatilgandan so'ng test guruhlarini taqqoslash imkonini berdi. Tadqiqotga qo'shilish uchun bizning kriterimiz, kalamushlardan uch kunlik o'quv mashg'ulotining boshlanish davrida kamida bitta gramm sukroz iste'mol qilishni boshlashi; ushbu mezon asosida tadqiqotda hech qanday hayvon yo'q qilindi.

Shakl 1  

Takroriy sükrozni iste'mol qilish spontan lokomotivning vaqtinchalik ko'tarilishiga olib keladi.

Uch kunlik trening davomida sukroz hayvonlari suvni iste'mol qilgan suvdan ko'ra ko'proq sukroz eritmasini iste'mol qilganliginiShakl 1B). Bundan tashqari, 1-6 (ma'lumotlar ko'rsatilmagan) o'quv mashg'ulotlarida spontan lokomotivlarda sezilarli farqlar kuzatilmagan bo'lsa-da, sukroz hayvonlarida uchragan 7 (shishani olib tashlashdan keyin uch daqiqa ichida)Shakl 1D), va bu farq kun 8 (Shakl 1E). Suv va Sucrose hayvonlari orasida sinov oralig'ida hech bir sinov kuni (shishani kiritishdan oldin) uch minutdan so'ng, umumiy masofa bo'ylab hech qanday farq yo'q edi (Shakl 1C), lokomozitning yuqori darajasi sukrozni qabul qilish uchun sukrozni iste'mol qilishga nisbatan kuchli ta'sir ko'rsatdi. Ushbu imkoniyatga muvofiq iste'mol qilinadigan sukroz miqdori va umumiy masofaShakl 1F). 7 kundan oldin yoki undan keyin Sucrose va Suv guruhlari o'rtasida hayvonlarning og'irliklarida farq yo'q edi (ma'lumotlar ko'rsatilmagan).

Sukrozni iste'mol qilish CPARni birlashtiradi

Sukrozni tayyorlash oxirgi tayyorgarlik mashg'ulotlarida o'tish harakatining o'tish davriga olib keldi. Sukrozni iste'mol qilish oqibatining yadrodagi akumbenslardagi elektrofizyologik o'zgarishlarni kuzatib boradimi yoki yo'qligini aniqlash uchun, mukofotni xatti-harakatni tartibga soluvchi mintaqa, biz 7 kunidagi shishani olib tashlashdan so'ng, akumbens yadrosining neyronlaridan qayd qilingan yadrolar akumbens dilimlarini tayyorladik (Shakl 2A). Yadro pastki hududi stimulyatorlarning stimulyatsiyasi uchun lokomotor javoblardaSesack va Greys, 2010). Sukroz hayvonlarining akumbenslar yadrosida suvli hayvonlar bilan solishtirganda (o'z-o'zidan paydo bo'ladigan) miniatyura eksitatori postinaptik oqimlarning amplitudasi va chastotasi sezilarli darajada ko'proq ekanligi aniqlandi (Shakl 2B). Bu shuni ko'rsatdiki, takroriy sukroz iste'moli nukleus akumbens yadrosida sinaptik uzatishni ijobiy tartibga keltirishi mumkin. Sakkarozdan keyin CPARning ishtirok etishi potensiatsiyada rol o'ynashini aniqlash uchun biz turli membran potentsiallarida EPSClarni o'lchash orqali akumbens yadrolari neyronlari uchun rektifikatsiya ko'rsatkichlarini aniqladik (Raqamlar 2C, 2D va 2E). Endogen poliamin blokadasi tufayli CPARlar depolarizatsiya qilingan potentsiallarda ichak orqali tuzatiladi. I / V munosabatlarida noaniqlik ko'rsatadigan Sukroz hayvonlarining neyronlaridan olingan qaydlarda sezilarli tuzatish kuzatildi, bu suv hayvonlari bilan solishtirganda (Shakl 2E), rektifikatsiya indeksining sezilarli o'sishiga qo'shimcha ravishdaShakl 2F).

Shakl 2  

Akumbensning yadro sinapslari takroran sukrozni iste'mol qilishdan keyin kuchsizlanadi.

CPAR darajasini ko'tarishning yana bir usuli bilan tasdiqlash uchun, xromosomada o'ziga xos CPAR blokerini, 1-Naphthylacetyl spermini (Naspm) kiritilgandan so'ng, accumbens yadro neuronlaridan qayd etildi. Naspm sukrozdan olingan neyronlardan olingan qaydlarda EPSC amplitusini sezilarli darajada kamaytirganligini,3A-C shakllari). Bundan tashqari, Naspm davolanishidan keyin Sukroz hayvonlarining neyronlaridagi I / V munosabatlari SACROS hayvonlari sinapslarida CPARlarning inhibisyonunu aks ettiruvchi xarakterga ega bo'lib, I / V munosabatlarida Naspmning suv hayvonlari (Raqamlar 3D). Ushbu natijalar takroriy sukrozni iste'mol qilish ACCumbenslar yadrosi sinapsida CPARlarni kiritishni keltirib chiqaradi.

Shakl 3  

Sukrozni iste'mol qilish Ca2 + ni o'tkazuvchi AMPA retseptorlarini kiritishga sabab bo'ladi.

Sukrozni iste'mol qilish GluA1ning odam savdosiga sabab bo'ladi

CPARlar AMPA retseptorlari bo'lib, ular GluA2 AMPA retseptorlari bo'linmasidir. Shunday qilib, CPARlarning sinaptik kiritilishi ko'pincha GluA1 subunitining sinaptik faollikka bog'liq traffikatsiyasini o'z ichiga oladi (U va boshqalar, 2009; Ishoq va boshq., 2007; Liu va Zukin, 2007; Plant va boshq., 2006). Sükrozni o'rganishdan keyin CPAR sinaptik birikmasini tasdiqlash uchun biz sukrozni iste'mol qilish GluA1 ning sinaptik ifodasini oshirganligini tekshirdik. Sichqonlarga yuqorida 7 ketma-ket kun uchun ta'rif etilganidek, sukrozga ruxsat berildi. 1, 3, 5 va 7 kunlari biz uchta miya mintaqasidagi barcha hujayralarni, sinaptosom va postsinaptik zichlikdagi (PSD) fraktsiyalarni ajratdik: akumbens yadrosi, yadroli qobiq va somatosensor korteks (korteks). Biz GluA1 va GluA2 ekspluatatsiyasi uchun Western blot tomonidan barcha hujayra va PSD fraktsiyalarini tahlil qildik.

Biz GluA1 yoki GluA2-da hech qanday o'zgarish topmadik, ammo tekshirilayotgan kunlarda akumbenslarning barcha hujayrali fraktsiyalarida hech qanday o'zgarish topilmadi, takroriy sukroz iste'moli bu oqsillarni umumiy darajasini4A-C shakllari). Biroq, GluA1 ning akumbens PSD fraksiyonlarında yadrosundaki 7 kunida sezilarli darajada ortdi, lekin qobig'ida emas, balki GluA2 har ikki qismdaRaqamlar 4D-4F va ma'lumotlar ko'rsatilmagan). O'tkazilgan test kunida akumbens yadro PSD fraktsiyasida GluA1da sezilarli o'sish kuzatilmadi (Raqamlar 4D-F) va GluA1 yoki GluA2 har qanday test kunida korteks PSD fraktsiyasida o'zgarmas (ma'lumotlar ko'rsatilmagan). Ayniqsa, GluA1 ga nisbatan GluA2 ning ko'payishi, akkumens yadro PSDlarida takroriy sukrozni iste'mol qilishdan keyin, yuqorida aytib o'tilganidek, akumbens yadro neuronlarida kuzatilgan ortishning rektifikatsiyasiga to'g'ri keladi.

Shakl 4  

Sukrozni iste'mol qilishdan so'ng postsinaptik zichligi GluA1, ammo GluA2 emas, balki yadroda akumbens yadrosida oshiriladi.

Faollarga qaram bo'lgan GluA1 odam savdosining sinaptik plastisitivaga hissa qo'shishi ko'rsatilgan in vitro va shuningdek ning Vivo jonli (Lu va Roche, 2011). GluA1 odam savdosi uchun tezkor, ko'p bosqichli mexanizm ko'rsatildi in vitro (Serulle va boshq., 2007; Sun va boshqalar, 2008; Sun va boshqalar, 2005). Shunga qaramay, bu ko'p bosqichli mexanizmning GluA1 sinaptik birikmasiga qo'shilishi ning Vivo jonli sinovdan o'tmagan. Sukroz ta'limining GluA1ni ko'p bosqichli mexanizm bilan keskin ravishda pasaytirishi mumkinligini aniqlash uchun biz mikroskopik elektron mikroskopi yordamida sukroz va suvda o'qitilgan hayvonlarning yadroidagi accumbens sinapsida GluA1ni joylashtirdik. Akumbensning yadroli to'qimasi 3 sinov guruhlaridan sakkroz mashg'ulotining yettinchi kuni to'plandi. 1 (suv), 7) suvi sindromi 2 kun (Sucrose) uchun ishlatilgan va 7) 3 (Sucrose / Water) kunida 6 kun va suv uchun sukroz iste'mol qilgan. Sichqoncha 7da qurbonlik qilindith kun, 5 daqiqadan so'ng sukroz yoki suv iste'mol qilinganda. Shunday qilib, sukroz / suv va sukroz hayvonlarining ikkita sinov guruhini bir-biriga va suv hayvonlariga taqqoslash sukroz o'qimishli kalamushlarda sukroz iste'molidan kelib chiqqan postsinaptik o'zgarishlar vaqtini ko'rsatdi. PSN, PSD, PSD yaqinida va sinaptik yoriqda dendritik o'murtqa sitosol (intraspinal), PSD, PSD (PEG) plaginli GluA1ni o'lchadi. '(Shakl 5A). Tajribachilarning tanqisligini bartaraf etish uchun elektron mikrografi sinov guruhi identifikatorlari uch marta ko'r bo'lgan.

Shakl 5  

Elektron mikroskopi ko'p bosqichli GluA1 odam savdosini sukrozni iste'mol qilish yo'li bilan indüksiyasini ko'rsatadi.

Sucrose va Sucrose / Water hayvonlari suv hayvonlariga nisbatan sezilarli darajada oshib ketgan GluA1 ni ko'rsatdiShakl 5B va 5C). Bu shuni ko'rsatmoqdaki, surunkali sukroz iste'moli sinabtik joylarga yaqin bo'lgan GluA1 o'z ichiga olgan AMPA retseptorlari va hujayra ichidagi hovuz sukrozning yakuniy iste'molidan keyin 24 soat davom etishi mumkin. . Keyinchalik, aktiv sükroz stimulyatori GluA1 tezkor odam savdosiga sabab bo'lishi mumkinmi degan muhim savolni ko'rib chiqdik. Sucrose hayvonlarida sukroz / suv va suv hayvonlari bilan solishtirganda, ekstrasinaptik plazma membranasi GluA1ning sezilarli darajada ko'payganliginiShakllar 5B va 5D). Ushbu kuzatuv shuni ko'rsatadiki, bitta sukroz stimuli tomonidan ta'minlanadigan tabiiy, orosensor mukofot tezda (<5 min), lekin vaqtincha (parchalanish vaqti <24 soat) GluA1 o'z ichiga olgan AMPA retseptorlari ekstrasinaptik populyatsiyasini oshirib, retseptorlari olingan labil hovuzni yaratadi. sinapsga trafik olib kelishi mumkin.

Muhimi, in vitro AMPA retseptorlarining sinaptik qo'shilishi 2 bosqichida amalga oshirilishini taklif qildi. Birinchi bo'lib, glutamat yoki dopaminga bog'liq bo'lgan Ser 845 fosforillanish plazma membranasidagi ekstrasinaptik joylarda retseptorlari darajasini oshiradi (Esteban va boshq., 2003; Serulle va boshq., 2007; Sun va boshqalar, 2008; Sun va boshqalar, 2005), ikkinchidan, Ser 818 fosforillashuvi sinaptik qo'shilishni (Boehm va boshq., 2006). Sucrose hayvonlarini Sakroz / Suv va Suv hayvonlari bilan elektron mikroskopik taqqoslashimiz GluA1ning odam savdosining birinchi qadamidir in vitro (Makino va Malinow, 2009), ekstrasinaptik membrana tezkor ravishda aylanishi ham ro'y beradi ning Vivo jonli orosensor mukofotini taqdim etilgandan so'ng.

Yuqorida tavsiflangan elektrofizyologiya va biokimyoviy natijalarga qarab, PEG EM, GluA1 odam savdosida GluA1 retseptorlari kiritilishida ikkinchi bosqichni ham sinapsga keltirib chiqarganligini ko'rsatdi, chunki PSDdagi GluA1-immunoreaktivlik darajasi Sukrose uchun Suv sichqonlari bilan solishtirganda ancha yuqori edi, Sukroz / Suvdagi GluA1 ning suvli kalamushlarga nisbatan o'sish tendentsiyasi kuzatildiRaqamlar 5B va 5E). Sucrose / Suv hayvonlari o'sishining tezligi GluA1 ning tezkor birlashuviga mos keladi, bu esa ~ 24 soatining sinaptik yarim umri bilan parchalanadi yoki shunga o'xshash vaqt davomida GluA1ni sinapsisli GluA1 / 2 bilan almashish imkonini beradi. PSDdagi GluA1 ni ifodalovchi sinapslarning nisbati sukrozning kalamushlarida Suv sichqonlariga nisbatan ancha yuqori bo'lgan (Shakl 5F), GluA1 ilgari GluA1 etishmayotgan sinapslarga o'tishni taklif qildi. Bu, shuningdek, saxaroza kalamushlarida kuzatilgan mEPSC amplitudasining o'sishi sinaptik GluA1 ning ko'payishidan kelib chiqadi va mEPSC chastotasining oshishi GluA1 ni ilgari jim bo'lgan akumbens sinapslariga jalb qilishdan kelib chiqishi mumkin, ammo glutamat ajralib chiqishini kuchaytirish bekor qilinmaydi. Biz, shuningdek, sukrozni yutib yuboradigan sinaptogenezni aniqlash uchun uchta test guruhining har birida sinapslar sonini o'lchadik; uchta test guruhi o'rtasida farqlar bo'lmagan (ma'lumotlar ko'rsatilmagan). Sukrozni takroriy iste'mol qilish GluA24 ning barqaror (> 1 soat) intraspinoz hovuzini ko'taradi va saxaroza o'qitilgan (6 kun) kalamushga bitta sukroz stimuli etarli (5 min) ekstrasinaptik plazma membranasida GluA1 ni ko'tarish uchun etarli bo'ladi, degan xulosaga keldik. intraspinous hovuzdan retseptorlarni chizish. Ushbu ekstrasinaptik retseptorlarning bir qismi PSD tarkibiga barqaror qo'shilib, kuzatilgan rektifikatsiya indeksiga va PSD GluA1 o'zgarishiga olib keladi, bu esa stimulyatsiyadan keyin 24 soat ichida ekstrasinaptik hovuz boshlang'ich darajasiga qaytishidan oldin. Ushbu natijalar shuni ko'rsatadiki, tabiiy mukofot o'qitilgan hayvonning GluA1 tezkor savdosini keskin ravishda qo'zg'atishi mumkin.

Sakarozni iste'mol qilishdan keyin yuqori lokomoziyaga ega bo'lish uchun CPAR faoliyati talab qilinadi

Markaziy o'murtqa neuronlar ham dopaminerjik, ham glutamaterjik kirishlarni (Calabresi va boshq., 1992). Sukroz o'qitilgan kalamushlarda sukrozni iste'mol qilishdan keyin kuzatilgan yuksak spontan lokomulyatsiyada glutamat signalizatsiya ishtirokini baholash uchun, biz yuqorida ta'riflanganidek, kalamushlarning akumbenslar yadrosiga kanüllarni joylashtirdik va hayvonlarimizni lokomotor o'lchov kameralarida o'rgandik. Saksin tayyorlash bo'yicha 8 kunida biz Naspmni lokomotor sinov xonasida joylashtirishdan avval yadroga kiritdik. Injektsiya Sucrose hayvonlari bo'ylab tarqalgan umumiy masofani pasaytirdi va shishani olib tashlangandan so'ng darhol ko'rilgan sukroz va suv hayvonlari orasidagi farqni yo'qotdi (Shakl 6A). Hayvonlarni davolash bilan bog'liq stressning sukroz ta'siriga ta'sir etmasligini tekshirish uchun keyingi kuni (kun 9 sukroz mashqlari) yadroga sho'r kiritildi; sukroz hayvonlarida shishani olib tashlangandan so'ng darhol sezilarli darajada giperfaollik kuzatildi (Shakl 6B). Bu Naspmning sukroz bilan indikatsiyalangan lokomulyatsiya darajasini inhibe qilganligini ko'rsatadi. NMDAR antagonisti, APV ning keyingi kunlarda yadroga tushirilishi shuningdek sukroz va suv hayvonlari o'rtasidagi farqni yo'qotdi (Shakl 6C), shuningdek, sukrozni iste'mol qilishdan keyin spontan lokomulyatsiya ko'tarilishi uchun NMDARlarning ham talab qilinayotganligini namoyish etadi. Sinov xonasiga shartli javob berish hiperaktivlik indüksiyasida rol o'ynadimi yoki yo'qligini aniqlash uchun hayvonlarni 35 min uchun xonaga idish qo'yishsiz joylashtirildi; Sucrose va Suv hayvonlari o'rtasida masofa oralig'ida hech qanday farq yo'q edi (Shakl 6D). Naspm va APV sukroz iste'moliga ta'sir qilmadi (Shakl 6E), Sakkarozni kuchli qabul qilish uchun yadro CPAR va NMDARlarning talab etilmasligini ko'rsatib beradi. Xayvonlarni xushbo'y moddalar (2 hayvonlardan 15) ichiga joylashtirmagan hayvonlarni, keyinchalik qurbonlik (Shakl 6F), tadqiqotga kiritilmagan. Natijada, bu ma'lumotlar birgalikda sukroz o'qitilgan sichqon tomonidan sukroz iste'moli 1 daqiqada GluA5ning sinaptik savdosini keltirib chiqarmoqda va bu odam savdosini nazorat qiluvchi signalizatsiya mexanizmlarining blokadasi sukrozdan so'ng o'z-o'zidan lokomotor faoliyatni oshiradi.

Shakl 6  

Sukrozni iste'mol qilishdan keyin ko'tarilgan spontan lokomulyatsiya CPAR va NMDARsni talab qiladi.

Sukroz signalizatsiyasi uchun ikkita yo'lni nazarda tutish mumkin. Biri, qattiq chemosensor yoki orotsensor yo'l, sukroz bilan shirin ta'mi retseptorlari bilan bog'lanadi, bu heteromerik G protein bilan bog'langan retseptorlari kompleksiga mos keladi, T1R2 / T2R3 (Kitagawa va boshq., 2001; Max va boshq., 2001; Nelson va boshq., 2001; Sainz va boshq., 2001). Kaloriya jihatidan boy ozuqa moddalari miya funktsiyalarini ta'midan qat'iy nazar metabolik usullar bilan tartibga keltirishi mumkin, ammo mexanizmlar yaxshi tushunilmaydi (de Araujo va boshq., 2008). Sukroz tomonidan GluA1ning odam savdosi yo'lidagi bu ikki alternativni ajratib olish uchun 4 daqiqaga suyuqlik, suv, 5% sukroz eritmasi bo'lgan suyuqlikning uch guruhiga (25 kalamush / guruh) kirish protokoli takrorlandi , yoki 3% saxarin (shirin va past). Shishalar olib tashlandi va kalamushlar 15 daqiqadan ko'proq vaqt davomida ta'lim kafesida qoldi. Trening 7 kun davomida takrorlandi. Sakroz va saxarin sinov guruhlari tomonidan iste'mol qilingan suyuqlik miqdori bir-biridan sezilarli darajada farq qilmagan va ikkala suv guruhi tomonidan iste'mol qilinganidan ko'ra ko'proq bo'lgan, shirin moddalarShakl 7A). Ichimlikning 7-kunida, shishani olib tashlashdan so'ng, kalamushlar qurbonlik qilindi, akumbensning yadro to'qimasi yig'ildi va har bir sinov guruhi uchun to'plandi, PSD fraksiyonu xavfsiz holatga qilindi va Western blot tomonidan probatsiya qilingan GluA1 darajalari (Shakl 7B). Sukrozni iste'mol qilgan hayvonlarning oldingi kabi, suv guruhiga nisbatan PSD fraktsiyasida yuqori GluA1ni ko'rsatdi (Shakl 7C). Shunisi e'tiborlikcha, GluA1 shuningdek, sakarin iste'mol qiladigan hayvonlarning PSD qismida ham yuqori bo'ldi. GluA1 darajasining o'sishiga sezilarli farq bo'lmaganligi sababli GluA1 ning suv, sukroz va sakarinli hayvonlarning akumbens yadrosidan butun hujayra fraktsiyalarida sezilarli farq yo'q edi (Shakl 7D). Saxarin bir xil heteromerik G oqsili bilan ta'mga bo'lgan retseptorlari majmuasini sukroz (Masuda va boshq., 2012; Nelson va boshq., 2001), ammo kaloriyani yo'qotadi, shirin ta'mga oid retseptorlarning rag'batlantirilishi, GluA1 darajasini yadro akumbens yadro sinapsida ko'taradigan signalni boshlash uchun etarli.

Shakl 7  

Sakkarin ta'limi sinogtik GluA1da sukroz mashqlariga o'xshash o'sishni keltirib chiqaradi.

muhokama

Biz orosiliy mukofot, takroran sukroz iste'moli GluA1 sinaptik qo'shilishni ilgari tasvirlangan ko'p bosqichli odam savdosi mexanizmi orqali keskin ravishda indamasligini ko'rsatdik. in vitro. 6-7 kun davomida takrorlangan sükroz iste'moli potensiatsiyalangan accumbenslar yadrosi CPARlarni kiritish orqali elektrofizyologik tarzda sinapslanadi. Ushbu ta'sir yadro PSD da GluA1 emas, balki GluA2ning to'planishi bilan birga o'tkazildi va mintaqada va vaqtinchalik o'ziga xos edi, chunki yadroda 7 o'quv kuni oldin hech qanday o'zgarish kuzatilmadi va akumbens qobig'ida yoki somatosensor korteks. Elektron mikroskopik tahlillari takrorlangan sukrozni iste'mol qilish nisbatan barqaror (t.1/2 > 24 soat) tarkibida intrauspinli GluA1 bo'lgan retseptorlari populyatsiyasi. Saxaroza ham tez (5 min) va vaqtincha (t1/2 <24 soat) saxaroza bilan o'rgatilgan hayvonlarda ekstrasinaptik joylarda GluA1 o'z ichiga olgan retseptorlari darajasining ko'tarilib, sinapsga yonma-yon tarqalishiga qodir AMPAR populyatsiyasini ko'paytiradi. PSD fraktsiyasi bilan ifodalangan va PEG-EM tomonidan aniqlangan Sinaptik GluA1 suvli hayvonlarga nisbatan saxarozada sezilarli darajada ko'paygan. Ushbu natijalardan biz ekstrasinaptik ekzotsitozning ikki bosqichli mexanizmi va undan oldin AMPAR sinaptik qo'shilishi uchun sinaptik trafikni taklif qilamiz. in vitro (Boehm va boshq., 2006; Makino va Malinow, 2009; Oh va boshqalar, 2006; Serulle va boshq., 2007; Sun va boshqalar, 2005) tezda boshlanishi mumkin ning Vivo jonli Tabiiy, orozansiy mukofot bilan.

Sinaptik GluA1 darajasidagi o'zgarishlar faqatgina 7 o'quv mashg'ulotlaridan so'ng kuzatildi va potensiyalash uchun bir necha kun davom etadigan jarayonni talab qiladi. Biyokimyasal tajribalarda ning Vivo jonliBiz 1, 1 va 3 kunlari sukroz tayyorlash bo'yicha accumbens PSD GluA5 darajasida sezilarli o'sish kuzatilmadi; 7 kunlik sukroz mashg'ulotidan so'ng PSDda GluA1 sezilarli darajada ko'tarildi. Elektron mikroskopik tajribalarida 6 kun davomida sukroz o'qitilgan, ammo 24 soatda sakkroz stimulini olmagan Sucrose / Suv hayvonlari, PSD GluA1 ning ortishi tendentsiyasini namoyish etdi. Ushbu hayvonlarga suv hayvonlari bilan solishtirganda yuqori intraksion GluA1ni namoyish etishgan, ammo GluA1 ning ekstrasinaptik membranasida hech qanday o'zgarish kuzatilmadi. Ushbu natijalardan uchta xulosa chiqaramiz. Birinchidan, GluA1 o'z ichiga olgan AMPA retseptorlari ketma-ket sükroz stimullari bilan intraspinously birikadi. Oldingi tadqiqotlarda sukrozni iste'mol qilish, akumbenslarda dopamin salınımınıCacciapaglia va boshq., 2012; McCutcheon va uning hamkorlari, 2012; Rada va boshq., 2005) va D1Rs dendritlarda mahalliy GluA1 tarjimasiniSmit va boshq., 2005), sukrozni iste'mol qilishdan keyin dopaminning chiqarilishi mahalliy GluA1 sintezini keltirib chiqarishi mumkin, bu esa intraporik GluA1 to'planishiga olib keladi. Shu bilan bir qatorda intraspinous o'sish GluA1ni distal joylardan olib kelishi mumkin. Ehtimol, bu yuqori darajadagi ichki havzadan ekzotsitotik odam savdosi plazma membranasidagi extrasinaptik havuzga yordam beradi. Ikkinchidan, sukrozdagi sukrozdagi GluA1 ning sukroz / suv yoki suv hayvonlarida emas, balki ekstrasinaptik membranada o'sishining kuzatilishi, ekstrasinaptik retseptorlarning ikkinchi bosqichda sinapsga o'tishi yoki sukroz iste'molidan keyingi 24 soat ichida endositoz qilinganligini ko'rsatadi. extrasynaptic hovuz vaqtinchalik. Uchinchidan, sukroz hayvonlarining PSD GluA1 ning suv hayvonlariga nisbatan balandligi, ammo Sucrose / Water hayvonlari ham har bir sukroz stimulyatoridan so'ng, retseptorlar tezkor ravishda sotiladigan retseptorlari havosidan sinapsga o'tib, ekstrasinaptik plazma membranasiga borishini ko'rsatadi. GluA1 travmalarini to'g'ridan-to'g'ri ichak hovuzidan sinapsga chiqarishni istisno qilmaymiz. Ammo bunday yo'l, GluA1 ni ekstrasinaptikaga (Boehm va boshq., 2006; Makino va Malinow, 2009; Oh va boshqalar, 2006; Serulle va boshq., 2007; Sun va boshqalar, 2005). Ushbu topilmalar GluA1 savdosi uchun vaqt kursi (<5 min) va kuzatilgan yo'lning birinchi namoyishidir. in vitro shuningdek, kuzatiladi ning Vivo jonli. Bundan tashqari, natijalarimiz qayta takrorlanadigan stimulyatorlar odam savdosi bilan shug'ullanadigan intraspinöz retseptorlari havzasini ko'tarish orqali sinapsni kuchaytirish uchun imkoniyatlarni o'zgartirishi mumkinligini ko'rsatadi.

Saxarin GluA1ni odam savdosiga o'xshash tarzda sukrozni keltirib chiqarganligi uchun sukrozning kaloriya tarkibi talab qilinmaydi. Sakkarin bir xil shirin ta'mi retseptorlarini, T1R2 / T2R3ni sukroz sifatida ogohlantirmoqda (Masuda va boshq., 2012; Nelson va boshq., 2001), pushbu retseptorlarning faollashuvi, ehtimol GluA1ni MSN sinapslariga kiritishni boshlaydi. Sukroz VTA neuronlaridagi akumbenslarda dopaminning tarqalishini oshiradi (Cacciapaglia va boshq., 2012; McCutcheon va uning hamkorlari, 2012; Rada va boshq., 2005) lGluA1 sirt trafigiga aylangan. Shunday qilib, shirin ta'mga bo'lgan retseptorni VTA ga bog'lovchi yo'l bu erda o'rganilgan plastisiyadan markaziy bo'lishi mumkin.

Sukrozni iste'mol qilishdan keyin tez GluA1ning odam savdosi spontan lokomotivni tartibga solishida muhim rol o'ynashi mumkin. Darhaqiqat, sukrozga o'rgatilgan hayvonlarda CPAR ning inhibisyonu sukrozni iste'mol qilishdan so'ng o'z-o'zidan paydo bo'ladigan lokomotor faollikni oshirdi. Sukroz iste'molidan keyingi kunlarda o'lchanilgandan so'ng, kalamush tomonidan o'tkazilgan umumiy masofa faqatgina ettinchi mashg'ulotda sukroz iste'molidan darhol faqat 3 min davrida sezilarli darajada ko'tarildi. 3 kunida boshlangan mashg'ulotdan boshlab sukrozdan so'ng faollik ko'paygan, ammo 7 kunigacha sezilarli darajada farqlanmagan. Ushbu vaqtning davomiyligi GumA1 ning akumbensdagi asosiy dendritlarda to'planishi vaqtiga bog'liq.. Naspm inyeksiyasini inyeksiyada faollashuvni inhibe qilganligi sababli, ko'tarilgan lokomoziya accumbenslar yadrosida MSN sinapslariga CPARning traffiktsiyaning funktsional natijasidir. NMDA retseptorlari inhibitori tomonidan ko'tarilgan lokomoziyaning oldini olish NMDA retseptorlari bilan glutamat signalizatsiyasi va CPARlarning lokomotor faolligini oshirish uchun zarur ekanligini ko'rsatdi. Biroq sukrozni iste'mol qilish, avvalgi tadkikotlarga binoan, akumbens yadrosi orosseniy mukofotga bog'liq vosita javoblarining orkestratsiyasi bilan bog'liqligini ko'rsatib turibdi, ammo iste'molning o'zi emas, balki,Smit, 2004). Kundalik ovqatlanishni o'ziga xos muhitda oziqlanadigan hayvonlarning shartli hiperaktivligini ishlab chiqish uchun hiperrolokomiyaning rivojlanishi uchun shunga o'xshash vaqt jadvallariMatthews va boshq., 1996). Agar hozirgi javob kontekstni va sukrozni juftlashdan kelib chiqadigan shartli hiperaktivlik bo'lsa, u sachrozni etkazib berishdan oldin sodir bo'lishi kerak edi. Mavjud narsalar kashfiyotchi rohat ko'rsatishi mumkin. Sukrozni iste'mol qilishdan keyin yuqori lokomozlar motorni sezgirlash yoki boshqa xatti-harakatlardan farqli o'laroq, kashfiyotga sabab bo'ladimi-yo'qmi, ajralib turishi kerak. Har holda, spontan lokomotivning ko'tarilishi glutamat signalizatsiya qilishni talab qildi va hech bo'lmaganda qisman CPAR'larning accumbenslar yadrosiga qo'shilishidan kelib chiqdi.

Sakrozni yutishdan keyingi ko'tarilgan lokomotor harakatlar bevosita bazal ganglion yo'lidan ortib borayotgan chiqindilar vosita talalamining disinhibasiyasi orqali lokomozani rivojlanishiga yordam beradi, chunki to'g'ridan-to'g'ri akumbensning yadro sinapslarining kuzatiladigan kuchlanishidan kelib chiqishi mumkin (Sesack va Greys, 2010). Tu D1Rsni ifodalovchi to'g'ridan-to'g'ri yo'ldagi accumbens yadro neuronlari ichida yashab, ko'pincha sinapslarni kuchaytirdi. Agar D1R faoliyati GluA1 o'z ichiga olgan AMPARsni ushbu neyronlarda sinapslarga yuboradigan bo'lsa, to'g'ridan-to'g'ri yo'ldosh neyronlar sinapslarining potentsiyalanishi kuchli dopamin chiqarilishidan keyin paydo bo'ladi. Natijada yuzaga keladigan potentsializatsiya to'g'ridan-to'g'ri yo'ldosh neyronlarning bazal ganglion chiqindilariga inhibitsion proektsiyalarda faollikni kuchaytiradi, shuning uchun vosita talamusini yo'qotadi va vosita korteksining faolligini oshiradi (Gerfen va Surmeier, 2011; Kravitz va boshq., 2010; Sesack va Greys, 2010). D1 retseptorlari orqali ishlovchi dopamin GluA1 S845 fosforillanishini keltirib chiqarishi mumkin, chunki u sirtlarni sotishga olib keladi, chunki uni takroriy sükrozni iste'mol qilishdan keyin kuzatilgan sinaptik potentsiya, to'g'ridan-to'g'ri yo'ldosh neyronlarida sodir bo'ladi.

Bir qator tadqiqotlar kokain bilan takrorlanishni takomillashtirish, keyinchalik pul olish tizimi vazifasiga chuqur ta'sir ko'rsatadigan va natijada kokain, giyohvand va o'zboshimchalikga ta'sirini kuchaytirgan vosita ta'siriga ega bo'lgan kokainga sezuvchanlikka olib keladigan davolanishni o'rganib chiqdi. (Kalivas va boshq., 1998). 5-10 kun davomida kokain bilan takrorlangan IP-usuli va undan keyin olib tashlash natijasida 14 kunida GluA2 o'z ichiga olgan AMPA retseptorlari bosqichma-bosqich oshirildi (Boudreau va boshq., 2007; Kourrich va uning hamkorlari, 2007). Shunga qaramay, 45 d o'z-o'zidan administratsiyadan keyingi 10 kun ichida, rat MSN-larda tuzatish indeksida katta o'sish kuzatildi (McCutcheon va boshq., 2011b) CPAR'lardagi o'sishini ko'rsatmoqda. Shunday qilib, CPAR savdosi, sukrozni iste'mol qilishdan, mavjud ishda va juda ko'p turli xil davolash sharoitlarida bo'lsa-da, o'z-o'zidan amalga oshirilishida kuzatilgan. Kokaindan o'z-o'zini boshqarish yoki in'ektsiya qilishning (masalan, 5 daqiqalik postda) bevosita natijalari ma'lum emasligi sababli, kokainni to'g'ridan to'g'ri joriy sukroz ishiga solishtirish mumkin emas. Xuddi shuningdek, sakkaroz tayyorlashni tugatgandan so'ng sakkarozga o'rgatilgan hayvonlarning MSN sinapslarida CPARlar saqlanib qolmaydimi yoki bunday hayvonlarning uzun siqib chiqarilishidan keyin sukrozni sezgirlashni namoyish etishi ma'lum emas.

Nafasni kuchaytiruvchi vositalarni tartibga soluvchi plastika va xulq-atvorni qanday tartibga solganligini aniqlash giyohvandlik, giperfaogiya, patologik qimor va boshqa yurish-turish bozukluklarınıBasar va boshq., 2010; Berridge, 2009; Luscher va Malenka, 2011). Shakarni ortiqcha iste'mol qilish semizlik epidemiyasiga (Hu va Malik, 2010) va giyohvand moddalarni suiiste'mol qilishgaAvena va boshq., 2008), mexanizmi keng qamrovli o'rganilmagan. Mavjud topilmalar mukofotni keltirib chiqaradigan plastisiyani asosiy unsurlarini yaratadi, undan kelajakda olib boriladigan tadqiqotlar murakkab xulq-atvorni tartibga solishi mumkin, bu esa mukofot bilan bog'liq patologiyaga qarshi kurashish uchun yangi imkoniyatlarni taqdim etadi.

rahmat

Biz o'tmishda va hozirda Ziff laboratoriyasining a'zolariga texnik yordam va foydali munozaralar uchun minnatdorchilik bildiramiz, shu jumladan H. Girma, L. Li va doktorlar. B. Fernxolz, B. Jordan, V. Lu, G. Rameu, S. Restituito va Y. Serul. Ushbu ish Nyu-York Universitetining Nevrologiya (DST), R31NS76617 milliy asab kasalliklari va qon tomir instituti (EBZ) dan 01R5MH32- F000063MH01-061920 va NIH Training Grant 1T21DC091445 tomonidan qo'llab-quvvatlandi. 01 Milliy ruhiy salomatlik instituti va Xotin-qizlar salomatligi bo'yicha tadqiqotlar idorasi, Klarman oilaviy jamg'armasi ovqatlanish buzilishlarini tadqiq qilish bo'yicha grant dasturidan, Nyu-Yorkning "Challenge Fund" va P30EY13079 (CA), giyohvand moddalarni iste'mol qilish bo'yicha Milliy institutdan DA003956 granti va NARSAD tomonidan mustaqil tergovchi mukofoti. (KDC), Milliy karlik va boshqa aloqa kasalliklari instituti RCFga DC009635 va Nyu-York universiteti Langone tibbiyot markazining giyohvandlik bo'yicha mukammal markazida urug'lik granti bilan.

Izohlar

Qiziqishlik to'qnashuvi: Mualliflar hech qanday raqobatbardosh moliyaviy manfaatlarni e'lon qilmaydi.

Manbalar

  1. Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Shakar giyohvandlik uchun dalillar: intervalgacha, ortiqcha shakarni iste'mol qilishning qiziqish va neyrokimyoviy ta'siri. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32: 20-39. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  2. Basar K, Sesia T, Groenewegen H, Steinbusch HW, Visser-Vandewalle V, Temel Y. Nucleus akkumtsiyasi va impulsivligi. Prog Neurobiol. 2010; 92: 533-557. [PubMed]
  3. Berridge KC. Oziq-ovqat mukofotlarini "yoqtirish" va "xohlash": miya substratlari va ovqatlanish buzilishidagi rollar. Fiziologiya va o'zini tutish. 2009; 97: 537-550. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  4. LTE davomida AMPA retseptorlarining sinapsisli qo'shilishi GluR1 da PKC fosforillanish maydoni tomonidan nazorat qilinadi. Neyron. 2006; 51: 213-225. [PubMed]
  5. Boudreau AC, Reimers JM, Milovanovich M, Wolf ME. Sichqoncha hujayra sirtida AMPA retseptorlari kokain chiqarish vaqtida kuchayib boradi, ammo kokainning chaqiruvidan so'ng mitojen bilan faollashtirilgan protein kinazlarining faollashtirilishi bilan ichki holatga tushadi. J Neurosci. 2007; 27: 10621-10635. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  6. Brebner K, Vong TP, Liu L, Liu Y, Campsall P, Grey S, Phelps L, Phillips AG, Vang YT. Nukleus uzoq muddatli depressiyani va xulq-atvorni ifodalashni aks ettiradi. Ilmiy. 2005; 310: 1340-1343. [PubMed]
  7. Cacciapaglia F, Saddoris MP, Wightman RM, Carelli RM. Nukleus akumbens yadroidagi differentsial dopamin salınım dinamiği sukroz uchun maqsadga qaratilgan xatti-harakatlarning turli tomonlarini kuzatib boradi. Neyrofarmakologiya 2012 [PMC bepul maqola] [PubMed]
  8. Calabresi P, Maj R, Pisani A, Mercuri NB, Bernardi G. Striatumda uzoq muddatli sinaptik depressiya: fiziologik va farmakologik xarakteristika. J Neurosci. 1992; 12: 4224-4233. [PubMed]
  9. Carr KD, Chau LS, Cabeza de Vaca S, Gustafson K, Stouffer M, Tukey DS, Restituito S, Ziff EB. AMPA retseptorlari GluR1 pastki qismida D-1 dopamin retseptorlari stimulyatsiyasining yadrosidagi akumbens qobig'ida oziq-ovqat taqiqlangan kalamushlarda preparatning yuqori darajasini oshiradi. Neuroscience. 2010; 165: 1074-1086. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  10. Conrad KL, Tseng KY, Uejima JL, Reimers JM, Heng LJ, Shaham Y, Marinelli M, Wolf ME. GluR2-AMPA retseptorlari etishmovchiligini shakllantiruvchi vositalar kokainning istaklarini inkubatsiya qilishga yordam beradi. Tabiat. 2008; 454: 118-121. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  11. Kun JJ, Carelli RM. Nucleus accumbens va Pavlovian mukofotni o'rganish. Neuroscientist. 2007; 13: 148-159. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  12. de Araujo IE, Oliveira-Maia AJ, Sotnikova TD, Gainetdinov RR, Caron MG, Nicolelis MA, Simon SA. Taomni qabul qiluvchi signalizatsiya bo'lmaganda ovqatni mukofotlash. Neyron. 2008; 57: 930-941. [PubMed]
  13. Ehlers MD, Xayn M, Baqqollik L, Li MC, Choquet D. GluR1 AMPA retseptorlari uchun differensional birikma. Neyron. 2007; 54: 447-460. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  14. Esteban JA, Shi SH, Wilson C, Nuriya M, Huganir RL, Malinow R. PKA AMPA retseptorlari bo'linmalari fosforillanishlari sinaptik savdo-sotiqning asosini nazorat qiladi. Nat Neurosci. 2003; 6: 136-143. [PubMed]
  15. Gerfen CR, Surmeier DJ. Dopamin yordamida striatal proektsion tizimlarning modulyatsiyasi. Yuqumli kasalliklar bo'yicha yillik tadqiqotlar. 2011; 34: 441-466. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  16. Grueter BA, Brasnjo G, Malenka RC. Postsinaptik TRPV1 yadro aksumbenslarida hujayra turiga xos uzoq muddatli tushkunlikni tetiklaydi. Tabiiy nevrologiya. 2010; 13: 1519-1525. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  17. U K, Song L, Cummings LW, Goldman J, Huganir RL, Lee HK. Ca2 + ning perimetallashgan joylarida CaPNNXX-S1 fosforillanishi orqali qabul qilinadi AMPA retseptorlarini barqarorlashtirish. Proc Natl Acad Sci AQSh A. 845; 2009: 106-20033. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  18. Xu FB, Malik va boshqalar. Shakar bilan shirin ichimliklar va semirish xavfi va ikkinchi turdagi diabet: epidemiologik dalillar. Fiziologiya va o'zini tutish. 2; 2010: 100-47. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  19. Isaak JT, Ashby MC, McBain CJ. AMPA retseptorlari funktsiyasi va sinaptik plastika bo'yicha GluR2 subunitining roli. Neyron. 2007; 54: 859-871. [PubMed]
  20. Iordaniya B, Fernholz BD, Boussac M, Xu S, Grigory G, Ziff EB, Neubert TA. Yangi kemiruvchilar postsinaptik zichlik oqsillarini aniqlash va tekshirish. Mol hujayra oqimi proteomikasi. 2004; 3: 857-871. [PubMed]
  21. Kalivas PW, Pirs RC, Cornish J, So'rov Bog'i. Kokainga bog'liq giyohvandlik va natseptsiyada sezuvchanlikning ahamiyati. J Pharmacol. 1998; 12: 49-53. [PubMed]
  22. Kitagava M, Kusakabe Y, Miura H, Ninomiya Y, Xino A. Shirin ta'mi uchun nomzod retseptorlari genining molekulyar genetik identifikatsiyasi. Biokimyoviy va biofizik tadqiqot aloqalari. 2001; 283: 236-242. [PubMed]
  23. Kourrich S, Rothwell PE, Klug JR, Thomas MJ. Qo'qon tajribasi yadro gilamlarda ikki tomonlama sinaptik plastisitni nazorat qiladi. J Neurosci. 2007; 27: 7921-7928. [PubMed]
  24. Kravitz AV, Freeze BS, Parker PR, Kay K, Thwin MT, Deisseroth K, Kreitzer AC. Bazal ganglion davrlarini optogenetik nazorat qilish yo'li bilan parkinson vosita harakatlarini tartibga solish. Tabiat. 2010; 466: 622-626. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  25. LaPlant Q, Vialou V, Covington HE, 3rd, Dumitriu D, Feng J, Warren BL, Maze I, Dietz DM, Watts EL, Iniguez SD, et al. Dnmt3a yadro gilamlarda emotsional harakatlar va umurtqa platsitani boshqaradi. Nat Neurosci. 2010; 13: 1137-1143. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  26. Liu SJ, Zukin RS. CaNNMX + - sinaptik plastika va neyronlarning o'limida passiv AMPA retseptorlari. Neyroxnologiyalarning tendentsiyalari. 2; 2007: 30-126. [PubMed]
  27. Lu V, Isozaki K, Roche KW, Nicoll RA. AMPA retseptorlarining sinaptik maqsadini aniqlash GluA1 ning birinchi hujayra ichidagi loopida CaMKII saytida belgilanadi. Proc Natl Acad Sci AQSh A. 2010; 107: 22266-22271. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  28. Lu Vt, Roche KW. AMPA retseptorlari savdosi va funktsiyasini posttranslatsion tartibga solish. 2011 nevrologiya bo'yicha hozirgi xulosa [PMC bepul maqola] [PubMed]
  29. Luscher C, Malenka RC. Narkomaniyaning giyohvand moddalari bilan uyg'unlashgan sinaptik plastisitivasi: molekulyar o'zgarishlardan elektronni qayta qurishdan. Neyron. 2011; 69: 650-663. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  30. Makino H, Malinow R. LTP davomida AMPA retseptorlari sinapslarga qo'shilishi: lateral harakat va eksotsitozning roli. Neyron. 2009; 64: 381-390. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  31. Mameli M, Halbout B, Creton C, Engblom D, Parkitna JR, Spanagel R, Luscher C. Kokainga uyg'unlashgan sinaptik plastika: VTAdagi qat'iylik NAcdagi moslashuvlarni keltirib chiqaradi. Nat Neurosci. 2009; 12: 1036-1041. [PubMed]
  32. Masuda K, Koizumi A, Nakajima K, Tanaka T, Abe K, Misaka T, Ishiguro M. Shirin ta'mli retseptorlari va past molekulyar vaznli shirin moddalar orasidagi bog'lanish usullarining xarakteristikasi. PloS biri. 2012; 7: e35380. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  33. Matthews K, Wilkinson LS, Robbins TW. Oldindan to'ldiriladigan kalamushlarni qayta ajratish onaning ajralishi, katta yoshdagi boshlang'ich va shartli rag'batlantirishlarga ta'sir o'tkazadi. Fiziol Behav. 1996; 59: 99-107. [PubMed]
  34. Maks M, Shanker YG, Huang L, Rong M, Liu Z, Campagne F, Weinstein H, Damak S, Margolskee RF. Tas1r3, yangi nomzodning ta'mi retseptorini kodlovchi, shirin javoblilik lokasi Slak uchun alleliktir. Tabiiy genetika. 2001; 28: 58-63. [PubMed]
  35. McCutcheon JE, Beeler JA, Roitman MF. Sukroz-prognozli belgilar sakkarin-prognozlash belgilaridan ko'ra ko'proq fosik dopamin ishlab chiqarishni keltirib chiqaradi. Sinaps. 2012; 66: 346-351. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  36. McCutcheon JE, Vang X, Tseng KY, Wolf ME, Marinelli M. Kalsiyning o'tkazuvchan AMPA retseptorlari kokainning o'z-o'zini boshqarishidan uzoq vaqtdan keyin chiqarilgandan keyin, tajriba-kontsentratsiya qiluvchi kokainga emas, balki yadrodagi akumbens sinapsida mavjud. Nörobilim jurnali: Neuroscience Jamiyatining rasmiy jurnali. 2011a; 31: 5737-5743. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  37. McCutcheon JE, Loweth JA, Ford KA, Marinelli M, Wolf ME, Tseng KY. I guruh mo'g'ulasi faollashuvi kokain bilan bog'liq bo'lgan kaltsiy o'tkazuvchan AMPA retseptorlarini yadrodagi akumbensssinaplarda protein kinaz Cga bog'liq mexanizm orqali to'planadi. J Neurosci. 2011b; 31: 14536-14541. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  38. Nedelesku H, Kelso CM, Lazaro-Munoz G, Purpura M, Cain CK, Ledoux JE, Aoki S. Endogen GluR1 o'z ichiga olgan AMPA retseptorlari qo'rg'oshin xotirasi shakllanishining dastlabki bosqichi davomida lateral amigdalada assimetrik sinapslarga aylantiriladi: elektron mikroskopik immunitsitokimyoviy o'rganish. Qiyosiy nevrologiya jurnali. 2010; 518: 4723-4739. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  39. Nelson G, Hoon Ma, Chandrashekar J, Zhang Y, Ryba NJ, Zuker CS. Darvoqe sut emizuvchi shirin ta'mi retseptorlari. Hujayra. 2001; 106: 381-390. [PubMed]
  40. Oh MC, Derkach VA, Guire ES, Soderling UZ. GluR1 serinli 845 fosforillanish tomonidan regulyatsiya qilingan ekstrasinaptik membranani sotish uzoq muddatli potentsiyalash uchun AMPA retseptorlarini qabul qiladi. J Biol Chem. 2006; 281: 752-758. [PubMed]
  41. Pascoli V, Turiault M, Luscher C. Qo'qon uyg'otadigan sinaptik potentsiyalashning teskari ta'sirini uyg'unlashtiruvchi odatiy xatti-harakatlarini tiklaydi. Tabiat. 2012; 481: 71-75. [PubMed]
  42. Plant K, Pelkey ​​KA, Bortolotto ZA, Morita D, Terashima A, McBain CJ, Collingridge GL, Isaak JT. Hippocampal uzoq muddatli potentiatsiyalash vaqtida mahalliy GluR2-yo'q AMPA retseptorlarini vaqtincha birlashtirilishi. Nat Neurosci. 2006; 9: 602-604. [PubMed]
  43. Rada P, Avena NM, Hoebel B.G. Kundalik shakarni shilimshiq qoshiqda takroriy ravishda dopamin chiqaradi. Neuroscience. 2005; 134: 737-744. [PubMed]
  44. Roche KW, O'Brien RJ, Mammen AL, Bernhardt J, Huganir RL. AMPA retseptorlari GluR1 alt birimida bir nechta fosforlanish joylarining tavsifi. Neyron. 1996; 16: 1179-1188. [PubMed]
  45. Rumpel S, LeDoux J, Zador A, Malinow R. Assotsiativ ta'limning bir shaklini tashkil etuvchi postsinaptik retseptorlari savdosi. Ilmiy. 2005; 308: 83-88. [PubMed]
  46. Sainz E, Korley JN, Battey JF, Sullivan SL. Ta'sirchan ta'mli retseptorlari T1R oilasining yangi a'zolarini aniqlash. Neyroximiya jurnali. 2001; 77: 896-903. [PubMed]
  47. Serulle Y, Zhang S, Ninan I, Puzzo D, McCarthy M, Xatri L, Arancio O, Ziff EB. GluR1-cGKII ta'sir o'tkazish AMPA retseptorlari savdosini tartibga soladi. Neyron. 2007; 56: 670-688. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  48. Sesack SR, Greys AA. Cortico-Bazal Ganglia mukofoti tarmog'i: mikrosxemalar. Nöropsikofarmakologiya: Neyropopsikofarmakologiya Amerika kollejining rasmiy nashri. 2010; 35: 27-47. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  49. Smit GP. Akumbens dopamin sukroz bilan orossensor stimulyatsiya samarasini keltirib chiqaradi. Tuyadi. 2004; 43: 11-13. [PubMed]
  50. Smit WB, Starck SR, Roberts RW, Schuman Em. Mahalliy oqsil sintezining dopaminerjik stimulyatsiyasi GluR1 sintezini va hipokampal neyronlarning sinaptik o'tkazilishini oshiradi. Neyron. 2005; 45: 765-779. [PubMed]
  51. Sun X, Milovanovich M, Zhao Y, Wolf ME. O'tkir va surunkali dopamin retseptorlari stimulyatsiyasi prefrontal korteks neyronlari bilan bo'yalgan nukleus akumbens neyronlaridagi AMPA retseptorlari aylanishini modullaydi. Nörobilim jurnali: Neuroscience Jamiyatining rasmiy jurnali. 2008; 28: 4216-4230. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  52. Sun X, Zhao Y, Wolf ME. Dopamin retseptorlari stimulyatsiyasi prefrontal korteks neyronlarida AMPA retseptorlari sinaptik kiritilishini modul qiladi. J Neurosci. 2005; 25: 7342-7351. [PubMed]
  53. Tomas MJ, Beurrier C, Bonci A, Malenka RC. Nucleus accumbens-da uzoq muddatli depressiya: giyohga nisbatan xatti-harakatlarni sezgirlashning neytral korrelyatsiyasi. Nat Neurosci. 2001; 4: 1217-1223. [PubMed]
  54. Ungsiz MA, Whistler JL, Malenka RC, Bonci A. Vivo jonli bir kokain ta'siriga dopamin neyronlarida uzoq muddatli kuchlanish keltirib chiqaradi. Tabiat. 2001; 411: 583-587. [PubMed]
  55. Whitlock JR, Heynen AJ, Shuler MG, Bear MF. Ta'lim hipokampusta uzoq muddatli kuchlanishni keltirib chiqaradi. Ilmiy. 2006; 313: 1093-1097. [PubMed]