Biol psixiatriyasi. Muallifning qo'lyozmasi; PMC 2014 da Jan 8da mavjud.
Biol psixiatriyasi. 2013 may 1; 73 (9): 10.1016 / j.biopsych.2012.11.027.
2013-da jonli nashr etilgan Jan 8. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.11.027
PMCID: PMC3885159
NIHMSID: NIHMS537768
Nashriyotning ushbu maqolaning so'nggi tahrirlangan versiyasi bilan bu erda tanishishingiz mumkin Biol psixiatriyasi
Izohga qarang “Hayvon modellari Oziq-ovqat va giyohvandlikni tushunish yo'llarini boshqaradi, shuningdek, giyohvand moddalarni iste'mol qilishda muvaffaqiyatli ishlatiladigan dori-darmonlarni ovlash" Biol psixiatriyasi, e10-betdagi 11-jild.
mavhum
fon
Mukofotga asoslangan oziqlantirish miya ichidagi giyohvandlik xususiyatini ishlab chiqarmikan. Hipotalamoqli oziqlantirish tizimlarini modulyatsiya qilgan yadro akumbens (Acb) qobig'idagi gamma-aminobutirik kislota (GABA) tizimi oziqlanishni boshdan kechirishni nazorat qilish uchun yaxshi joylashtiriladi. Shunga qaramay, ushbu tizimda oziqlantirish bilan bog'liq neyrokimyoviy moddalarning paydo bo'lishi yoki yo'qligi noma'lum.
usullari
Har xil reklama libitum sichqon guruhlari har kuni D-amfetamin (2 yoki 10 ig) yoki m-opioid agonist D- [Ala2, yoki D-amfetaminning intra-Acb qobig'i infuziyalari, shirinsiy yog 'qabul qilish, N-MePhe4, Gly-ol] -enkephalin (DAMGO, 2.5 mg), keyin GABA ning ichki qorin bo'shlig'ini infuziyasi bilan shikastlanganA agonist, muscimol (10 ng).
natijalar
Shakarlangan yog 'ta'siriga sezgirlangan muscimol tomonidan boqilgan oziqlantirish. Xushbo'ylash jarayoni 1 haftasi davomida mazali oziqlantirish rejimini to'xtatgandan so'ng kuzatilgan, ammo 2 haftada kamaydi. Shakarlangan yog'ga ta'sir qiladigan kalamushlar oziq-ovqat mahrumligining o'zgarishiga ta'sir ko'rsatmadi. DAMGO (2.5 mkg) ning intra-Acb qobig'ining infuziyalari shuningdek sezgirli ichak qobig'i muscimol-asosidagi oziqlantirishni ham o'z ichiga oladi. Shu bilan birga, takroriy intra-Acb qobig'i d-amfetamin infuziyalari (2 yoki 10 μg) yoki noaniq stimulga (yirtqich stress) ta'sir qilish muscimolga sezuvchanligini o'zgartirdi.
Xulosa
Palato'lovli oziqlantirish ACB qobig'i GABA javoblarining yuqori sezuvchanligini ta'minlaydi; bu ta'sir opioid peptidlarni oziqlantirish bilan bog'liq salbiy ta'sirga ega bo'lishi mumkin. Faqat kuchayib borayotgan hissiyotlarni keltirib chiqarmaydigan tajribalar yoki katekolaminning ko'payishi ta'sirini kuchaytirish uchun etarli emas va ochlik bilan bog'liq oziqlantirish haydovchiligi ta'sirini aniqlash uchun etarli emas.. Ushbu topilmalar Acb ichidagi oziq-ovqat bilan bog'liq bo'lgan yangi neyroxodizatsiyani aniqladi; oziq-ovqat mukofoti va giyohvand mukofoti o'rtasidagi o'zaro faoliyat ta'sirini tushunish mumkin bo'lgan oqibatlari muhokama qilinadi.
Hozirgi semizlikda "epidemiya" ga katta hissa qo'shadigan omil - bu juda qimmatga ega, arzon, juda yoqimli, energiya bilan band bo'lgan oziq-ovqatlar.1-3). Chunki, bu ovqatlar giyohvandlikka bog'liq bo'lgan bir xil markaziy yo'llarni qamrab oladi (4-6), neyroplastik o'zgarishlar ularning ichimliklarni suiiste'mol qilish natijasida ishlab chiqarilganlarga o'xshab ketishini aniqlashda katta qiziqish uyg'otdi. Bu borada eng ko'p e'tibor beradigan tizimlar dopamin va opioid tizimlardir yadro akumbensi (Acb). Ko'pgina guruhlar, ayniqsa, shakar yoki yog 'bilan boyitilgan ovqatlarga chanqoq ovqatlanishni takroriy ta'sir qilish bu tizimlar ichida neyrotransmiter dinamikasini, retseptorlari sezgirligini va gen ekspozitsiyasini o'zgartiradi va giyohvandlikka o'xshash jarayonlarni eslatuvchi bemalol ovqatlanish naqshlari va boshqa xatti-harakatlarni o'zgartiradi (7-13).
Nafas olish hissiyotidagi neyronlarning boshqa muhim o'yinchi - Acb-lokalize gamma-aminobutirik kislota (GABA) tizimi. GABA agonistlari bilan Acb qobig'i neyronlarining o'tkir inhibatsiyasi to'yintirilgan kalamushlarda katta oziqlantirish bilan bog'liq javobni keltirib chiqaradi; bu ta'sir brauzerning har qanday joyidan kelib chiqqan dori-darmonli giperfagiyaning eng dramatik sindromi orasidan (14-19). Ushbu giperfajiya qisman energiya muvozanatini tartibga solish bilan shug'ullanadigan peptid kodli hipotalamik tizimlarni20-22). Bundan tashqari, anterior qorin bo'shlig'i qobig'i GABA tomonidan geyonik ta'mga reaktivligini kuchaytirishga yordam beradigan yagona teleskopik joydir (23). Shuning uchun, Acb qobig'i quyi oqimdagi energiya balans tizimlarini ta'sirchan / rag'batlantiruvchi ehtimolliklar bilan uyg'unlashtirishda modulli oldingi tarmoqlarda muhim bir tugun sifatida taklif qilingan (24-26). Shuning uchun ushbu xususiyatlarga ega bo'lgan tarmoq tugunlari ovqatlantiruvchi oziq-ovqat bilan bog'liq neyroplastiklik uchun juda muhim ahamiyatga ega. Shu bilan birga, ajablanarli tomoni, Acb shell GABA tizimi bu borada o'rganilmagan.
Bizning maqsadimiz, mukofotga asoslangan, no-meostostatik oziqlantirish bilan takrorlanadigan tajribalarning Acb shell GABA tizimlarida neuroadaptatsiyasini boshlashini baholashdir. Biz intervalgacha shakarli yog 'qabul qilishning oddiy tartibini GABA ning to'g'ridan-to'g'ri stimulyatsiyasi bilan hosil qilingan javoblarni oziqlantirishga sezgir sezgirligini aniqladikA Acb qobig'idagi retseptorlari. Biz ushbu ta'sirga asoslangan yurak-tomir va farmakologik mexanizmlarni tadqiq qildik va mahalliy ichki qorin bo'shlig'ining opiatergik va dopaminerjik mexanizmlarini jalb etishga urg'u berdik.
Uslublar va materiallar
Mavzular
300ni 325 g gacha bo'lgan og'irlikdagi erkak Sprague-Dawley kalamushlari (Harlan Laboratories, Madison, Viskonsin) yorug'likda va haroratda (oziq-ovqat va suvga (keyingi tajribada ma'lum bo'lgan tajribalar bundan mustasno) ad libitumga ega bo'lgan aniq kafeslarda juft bo'lib joylashtirildi) - nazorat ostida vivarium. Ular 12-h yorug'lik / quyuq aylanish ostida saqlangan (7: 00 AMda chiroqlar). Barcha imkoniyatlar va tartiblar AQSh Milliy Sog'liqni Saqlash Institutidan hayvonlarni iste'mol qilish va parvarish qilish bo'yicha ko'rsatmalarga muvofiq bo'lib, Viskonsin shtatining Institutsional Hayvonlarni Qo'llab-quvvatlash va Foydalanish Qo'mitasi tomonidan nazorat qilindi va tasdiqlandi.
Jarrohlik va joylashtirishni tekshirish
Ikkita zanglamas po'latdan yasalgan yo'riqnomalar akb qobig'ini (23-gauge) standart stereotaksik usullarga muvofiq joylashtirildi [batafsil ma'lumot uchun Baldo va Kelley (27)]. Infuzion uchastkaning koordinatalari (bregma milimetrida) + 3.2 (oldingi orqa); + 1.0 (lateromedial); - Boshsuyagi yuzasidan (dorsoventral) 5.2. Tel-jihozlar blokirovkaning oldini olish uchun kanüllarga joylashtirildi va sinovdan oldin 7 kungacha kalamushlarni qaytarib olishdi. Har bir eksperiment oxirida nurli mikroskop ostida Nissl-lekelenmiş miya qismlarini ko'rish orqali kanül joylashtirish aniqlandi (batafsil ma'lumot uchun 1 ilovasi). Noto'g'ri kanula joylashtiradigan sichqon statistika tahlilidan tushirilgan; noto'g'ri joylashtiriladigan sub'ektlar chiqarilgandan so'ng, ushbu bo'limda berilgan guruhning o'lchami so'nggi guruhning kattaligini ifodalaydi.
Giyohvandlik va mikroinfusiyalar
Zanglamas po'latdan yasalgan instruktorlar (30-gauge) hidoyat kanüllerin uchidan 2.5 mm kengaytirish uchun tushirildi. Ikki tomonlama bosim inyeksiyalari mikrodevir nasos yordamida amalga oshirildi. Giyohvand moddalar daqiqada .32 mkl miqdorida infüze qilindi. Infuzionning umumiy davomiyligi 93 santimetr bo'ldi, natijada har bir tomon uchun .5 mL umumiy infuziya hajmi oshdi. Infuziyalardan so'ng, instruktorlar 1 min uchun joylashtirildi, shuning uchun stillarni almashtirishdan oldin AOK o'tkazuvchanligini tarqatish imkonini berdi. Muscimol, D- [Ala2, N-MePhe4, Gly-ol] -enkephalin (DAMGO) va d-amfetamin (AMPH) ning hammasi 9% steril sho'rda eritildi.
Ovqatlanadigan oziqlantirish tartibi
Sichqoncha kuniga ikki marta 30-min sessiyalarga (ertalab va kunduzi) sessiya qilingan. Ushbu mashg'ulotlar Plexiglas test qafaslarida uy qafaslari bilan bir xil bo'lib, oziq-ovqat tarqoqligining oson to'planishiga ruxsat berish uchun simli panjaralardan tashqari. Ertalabki sessiyada (5: 11-00: 11 AM), kalamushlarga tatlandırılmış yog' (tajriba guruhi; n = 14) yoki standart chow (nazorat guruhi; n = 14) va erkin ovqatlanishiga ruxsat berilgan. Shakarlangan yog '99200% sukroz bilan qisqartirishdan iborat bo'lgan, 10 kkal / g energiya zichligi bilan tashkil topgan Teklad eksperimental dietasi (TD 6.2) (batafsil ma'lumot uchun 1 ilovasi). Har ikki guruh uchun ham suv mavjud edi. Keyinchalik ular uy-joy qafasiga, oziq-ovqat va suv bilan erkin ta'minlanganlar. Kunduzgi mashg'ulotlarda (3: 00-3: 30 PM), sinovlar yana sinov qafasida joylashtirildi, biroq har ikki guruhga standart chow (va suv) berildi. Shunday qilib, tajriba guruhidagi kalamushlar sinov muhitida ham mazali taomlar va standart chovlarni boshdan kechirdilar. Buning uchun tajriba guruhini test qovoqlarida chov qabul qilishni taqsimlash uchun qilingan, chunki chov tajribaning ikkinchi bosqichida ishlatilgan (quyida "Test muhitida past dozada Muscimol Challenge"). Sinov hujayralarida qabul qilish har kuni qayd etilgan. Standart chow (Teklad kemiruvchi laboratoriya dietasi) va suv uy qafaslarida har doim mavjud edi.
Stressor ta'sir qilish tartibi
Ushbu manipulyatsiya 5-kunlik ovqatlanish dasturini taqqosladi, tajriba guruhidagi kalamushlardan tashqarin = 11) ertalabki mashg'ulotlarda mazali taomlar o'rniga haddan tashqari ogohlantiruvchi (yirtqich zo'riqish) oldi. Har bir sichqonchani har kuni kunduzgi himoya paneli qafasiga joylashtirildi (7 × 8 ning × 9 ning ichida), bu ferritning uy qafasida (sichqonlarning tabiiy yirtqich hayvonlari) 5 min uchun joylashtirilgan. Himoya hujayralari hayvonlarga bir-birlarini ko'rish, eshitish va hidlash imkonini berdi, lekin ular bilan aloqa qilish taqiqlandi. Ushbu ta'sir qilish darajasi plazma kortikosteron darajasini sezilarli darajada oshiradi va ferrote ta'sirini tugatishdan kamida 30 min uzoq davom etadigan yuqori darajadagi ogohlik va ogohlikni oshiradi (28,29). Tekshirish kalamushlari (n = 10) bir xil kichik himoya hujayralariga joylashtirilgan va yangi, lekin neytral (ya'ni, ferrets) xonaga ko'chirilgan. 5-daqiqaytli yoki neytral ta'sir qilishdan so'ng eksperimental va nazorat sichqonlari kichik hujayralardan chiqarildi va darhol oddiy plexiglas test qafaslariga joylashtirildi (batafsilroq ma'lumot uchun "Ovqatlantiruvchi oziqlantirish tartibi" ga qarang) yoki bo'sh yoki neytral xonadan farqli bo'lgan test xonasida , 30-min sessiyasi uchun (11: 00-11: 30 AM). Oziq-ovqat (standart rat chow) va suv erkin ta'minlangan. Bu seansdan so'ng barcha kalamushlar o'z uylariga qaytgan. Oshqozon oziqlantirish dasturini taqqoslash uchun, barcha kalamushlarni 30-min soniyasidagi ikkinchi sessiyaga (3: 00-3: 30 PM) xuddi shu sinov kameralarida ertalabki hujayralaridek ta'sir qildi, ammo hech qanday (yoki neytral) ta'sir qilishsiz . Shunga qaramay, bu kunduzgi sessiya uchun oziq-ovqat va suv erkin edi. Sinovlar testdan o'tkazilgandan so'ng uy qafasiga qaytarildi.
Qayta AMPH Rejimi
Ushbu manipulyatsiya 5-kunlik ovqatlanish dasturini taqqosladi, faqat eksperimental guruhdagi kalamush kundalik ertalabki seanslari uchun kunlik ovqatlanish o'rniga AMP ning ichki qorin bo'shlig'i infuziyalarini qabul qildi. AMPH ning ichki oqi qobig'ining infuziyalari (2 yoki 10 ig, n = Har bir doz uchun 11) yoki sho'r (n = 20) sichqonchani sinchkovlikdagi seanslari uchun test kassalariga joylashtirilishidan oldin berildi (11: 00-11: 30 AM). Bu davrda standart ratga va suvga erkin foydalanish mumkin edi va qabul qilish qayd etildi. AMPH bilan bog'liq bo'lgan hiperaktivlik eksperimentator tomonidan ko'r-ko'rona davolashda kuzatildi, bu vaqt oralig'ida xatti-harakatlarning kuzatish protsedurasidan foydalanildi, unda to'rt xatti-harakatlarning soni (cage-crossing, rearing, directed sniffing, and guarding) 20-sekda qayd etildi har bir ertak uchun har bir 5 daqiqada vaqt kutib turadi. Xiroskor stress eksperimentidan olingan sichqon 2-mg AMPH guruhi uchun qayta ishlatildi.
Barcha kalamushlar standart chov va suv bilan ta'minlangan, ammo preparatning infüzyoni bo'lmagan test xujayralariga (3: 00-3: 30 PM) ikkinchi marta ta'sir qilishdi. Sinovlar testdan o'tkazilgandan so'ng uy qafasiga qaytarildi.
Test muhitida kam dozli muscimol muammolari
5 kunida shaftoli yog ', yirtqich zo'riqish yoki takroriy AMPH manipulyatsiyasiga ta'sir qilishdan so'ng, sinovlar muhitida sho'r va muscimol (har bir tomon uchun 10 ng / .5 mkL) bilan ikki tomonlama ichki qorin bo'shlig'idagi qiyinchiliklar qabul qilindi. Oltinchi kuni barcha salmonlarga salin (masalan, 1 kunlik davolanishni to'xtatishdan so'ng 5 kun) va ettinchi kuni intra-akb qobig'i muscimol berildi. Ushbu kunlarning har birida kaltakesaklarning kunlik sessiyasida (3: 00-3: 30 PM) test qovoqlariga joylashtirilgunga qadar darhol ichki qorin bo'shlig'i infuziyalarini oldi. Shu kunlarda ertalabki sessiyalar o'tkazilmadi. Oziq-ovqat (standart chow) va suv erkin mavjud edi. Qabul qilish o'lchovi o'tkazildi va sinovlar tugaganidan so'ng, kalamushlar o'z uylariga qaytdi. Chuning tajribasi bu bosqichda ishlatilgan, chunki barcha guruhlar avval sinov muhitida choy olgan va shu bilan oziq-ovqat yangiliklarini aralashtirib yuborgan. Bundan tashqari, chov iste'molining boshlang'ich darajalari past bo'lgani uchun muskokin bilan bog'liq bo'lgan giperfajiya uchun tavsif ta'siriga duch keladigan kam imkoniyat bor edi.
Oshqozon oziqlantirish rejimiga ta'sir qiladigan kalamushlarningn = 10 shirin, n = 10 chow tekshiruvlari) shirin yog'li ta'sir qilish protokoli tugaganidan keyin 7 kun ichida qo'shimcha sho'r va muscimol infuziyalar qabul qilib, ular orasida shirinlik yog'i bo'lmagan. Uchinchi sho'r / muscimol infuzion sekansi protokol tugaganidan keyin 14 kun ichida bu kalamushlarga berilgan.
Shuni ta'kidlash kerakki, sho'r va muscimol infuziyalarining tartibi muvozanat emas edi (ya'ni, sho'rlanish doimo birinchi bo'lib kelgan), shuning uchun avvalgi muscimolning sharhlovchisiz hech qanday kontekst yoki nishonga asoslangan shartli ovqatlantiruvchi javoblar sho'r-qarshi kurash kunida aniqlanishi mumkin edi muammo. Shuningdek, 10-mg AMPH guruhi uchun 50 da qo'shimcha muscimol muammosi (8 ng) berildi.
Tajriba muhiti sharoitida Oziq-ovqatdan mahrum qilish muammosi
Sichqoncha 5 kun davomida ta'rif etilganidek, mazali ovqatlanish rejimiga duch kelgan (n = 10 - shirin yog'li guruh uchun, n = ChNowX nazorat guruhi uchun). Oltinchi kuni barcha hayvonlar sho'r suvli infüzyonlar qabul qilishdi va odatiy chow va suv mavjud bo'lgan odatiy peshindan keyin (11: 3-00: 3 PM) sinovdan o'tkazildi. Ertalabki majlis o'tkazilmadi. Keyinchalik, barcha kalamushlar oziq-ovqatdan mahrum qilish muammosiga ega bo'lib, unda oziq-ovqat mahsuloti sinovdan o'tgan 30 soatdan keyin (ya'ni, sho'rlanish kunining kechqurungi kunida) uy qafasidan chiqarildi. Ertasi kuni bu oziq-ovqatsiz kalamushlarni ichki qorin bo'shlig'i shilimshiq infuziyalari bilan ta'minlandi va ertalabki mashg'ulotlarsiz, sinash vaqtida (standart chow va suv bilan ta'minlangan) test-hujayralarga joylashtirildi. Qabul qilish o'lchovi o'tkazildi va sinovlar tugaganidan so'ng, kalamushlar o'z uylariga qaytdi.
DAMGO / Muscimol cross-sensitization
Biz ushbu tajriba uchun biroz boshqacha dizayndan foydalanganmiz, chunki 2.5-mg DAMGO sichqonlarning birinchi dori ta'sirida sedasyonga olib keladi; bu sedasyon taxminan 30-daqiqada 45-daqiqaga kamayib ketadi (shundan so'ng sichqonchani ~ ~ 90 daqiqa davomida ovqat boshlaydi). Shu sababli kunduzgi sessiya bo'lmagan holda bir kunlik 2 soatlik kundalik sessiyadan foydalanganmiz. Ad libitum bilan ishlaydigan sichqonlarga to'rtta qorin bo'shlig'i infüzyoni (har kuni bir kunlik infuziya, har kuni) yoki steril berildi .9% salin (n = 7) yoki DAMGO (har bir tomon uchun 2.5 μg / .5 mL; n = 6). İnfüzyondan so'ng, kalamushlar, standart chow va suvga ega bo'lgan 2 (11: 00 AM-1: 00 PM) uchun sinov hujayralariga zudlik bilan joylashtirildi. Takroriy davolanishdan so'nggi 45 soatdan so'ng, sub'ektlar steril sho'r suv ichidagi ichki qorin bo'shlig'ining infuziyasini oldi va standart chow va suv bilan 2 soat davomida sinov kameralariga joylashtirildi. Ikki kundan so'ng ular muscimol (10 ng / .5 mL) bilan sinovga tushdilar, yana standart namlar va suv bilan 2 soat davomida test kallalariga quyiladi. Har bir test kunida qabul qilish qayd etildi va kalamushlar test sinovi tugaganidan so'ng darhol o'z uylariga qaytarildi.
Statistik tahlil
Tajriba manipulyatsiyasi (diet, dori-darmonlar, stress) va tegishli nazorat vositalari o'rtasidagi farqlarni baholash uchun differentsial tahlillar (davolash x kun yoki davolash tarixi × giyohvandlik muammosi, agar kerak bo'lsa) va rejalashtirilgan taqqoslashlar bilan ishlatilgan. Alpha o'rnatildi p <.05. Tahlillar StatView dasturi (SAS Institute, Cary, Shimoliy Karolina) yordamida o'tkazildi.
natijalar
Shakarlangan yog'li ichimlikning intervalgacha payvandlashlari Intra-Acb Shell Muscimol tomonidan parvarish qilingan oziqlantirishni sezadi.
5 kunlik intervalgacha kirish protokoli davomida ertalabki ovqatlanish seanslarida shirin yog'ning iste'moli ko'tarildi [F(4,52) = 13.3; p <.0001; Shakl 1A]. Beshinchi kuni shamollashtirilgan yog 'miqdori 4.9 g edi, bu esa 30.4 kkalsga teng bo'lib, nazorat guruhidagi o'rtacha 1.8 kkal chovi bilan solishtirilgandi. Eng muhimi, 5 kunlik protokol davomida shizoldagi yog 'va chov guruhlari o'rtasida tana vaznidagi umumiy farqlar yo'q edi [F(1,26) = .3; muhim emas (ns)] va diet × kunlik tana vazniga ta'sir etmasligi [F(4,104) = 1.2; ns]. Shuning uchun eksperimental guruhdagi kalamushlar, kaltsiylarning yuqori miqdorini qoplash uchun paydo bo'ldi, ehtimol, ularning uy sharoitida reklama libitum chov sotib olishini qisqartirish yo'li bilan (ya'ni, shirin yog'li ta'sir qilishning qisqacha epizodi semizaga o'xshash effektlarni keltirib chiqarmaydi). Kunduzgi yig'ilishlarda, har ikkala guruhga ham chow taklif qilingan, qabul qilishda hech qanday guruh orasidagi farqlar yo'q edi va diet × kun ta'sir o'tkazishFs = .2-1.3; ns). Shu sababli, ertalab shirinlikni yog'li ta'sir qilish kunduzgi chov-ichish seanslarida ko'rilgan ozuqaviy oziqlanish darajasiga ta'sir ko'rsatmadi.
Ushbu intervalgacha kirish protokoli bajarilgandan so'ng barcha so'rg'ichlar qorin bo'shlig'i shilimshiqlari va muscimol (10 ng) infuziyalari bilan shikoyat qilishdi. Shakarlangan yog'ga ta'sir qiladigan kalamushlar chaynaga ta'sir etuvchi vositalar bilan solishtirganda sho'rlanganlik darajasining o'zgarmas ta'sirini ko'rsatmadi. Shu bilan birga, ular muscimol tomonidan oziq-ovqat iste'mol qilish uchun kuchli, juda sezgir sezgirlikni namoyon etishdi (diet × dori ta'sirida [F(1,26) = 13.6, p = .001; Shakl 2 maxsus taqqoslashlar uchun]. Suvni iste'mol qilish ta'sir qilmadi. Ko'rsatilganidek Shakl 2, muscimol sezuvchanligi shirinlangan yog'li rejimdan boshlab 7 kungacha davom etdi [F(1,18) = 9.3; p = .007]; EHMdan keyin 14 kun o'tgach, sezgirlangan javob pasayib ketdi [F(1,14) = 1.6; ns]. Nihoyat, tatlandırılmış yog 'rejimiga ta'sir qolgan kalamushlar, 18-soatlik oziq-ovqatdan mahrum etishga qarshi kurashga o'zlarining chov ta'siriga uchragan sheriklari bilan taqqoslaganda,F(1,19) = .004, ns; Shakl 2].
Ac-Shellda m-Opioid Retseptorlari va GABA Retseptorlari Stimulyatsiyasi o'rtasida o'zaro faoliyat sezuvchanlik.
Ko'rsatilganidek Shakl 3, intra-Acb shell DAMGO "takroran DAMGO" fazasining 4 qarshi kunlarining har birida mustahkam giperfaogiya keltirib chiqargan [F(1,11) = 62.3; p <.0001]. Ushbu takroriy davolanishdan so'ng biz kalamushlarga fiziologik eritma va muskimol bilan qarshi chiqdik; ushbu muammolar uchun dispersiyani tahlil qilish surunkali davolash tarixining kuchli ta'sirini keltirib chiqardi [F(1,11) = 7.8; p = .018] va giyohvand moddalar bilan kurashish [F(1,11) = 12.1; p = .005], lekin hech qanday shovqin [F(1,11) = 1.4; ns]. Shunga qaramasdan, DAMGO va sho'rlangan guruhlarning har bir qarshi in'ektsiya uchun rejalashtirilgan taqqoslashlar natijasida, qorin bo'shlig'i qobig'i muscimol muammosiga nisbatan oziq-ovqat iste'mol qilish DAMGO bilan ishlov berilgan so'rg'ichlarda sho'rlangan-oldindan tayyorlangan kalamushlarga nisbatan sezilarli darajada yuqori bo'lgan (p <.05), ammo sho'rlangan muammoga javob guruhlar o'rtasida farq qilmadi.
Muskimolning yuqori sezuvchanligini yo'qotish, takroriy, stressli ta'sir qilish yoki ichakning qorin bo'shlig'i shoxlari AMF infuziyalari
Yirtqich ta'sirining ta'sirini tekshirish uchun ikkita tajriba o'tkazildi va takroriy AMFni davolash muscimolga keyingi javob berishga qaratildi. Birinchidan, kalamushlar 5 kunlik intervalgacha yirtqich ta'sir qilish rejimi ostida o'tkazildi, keyin ichki qorin bo'shlig'i shilinlari va muscimol (10 ng) muammolari. Ko'rsatilganidek Shakl 4stressor ta'sir qilish tarixi bu keyingi muskul muammosiga oziqlantirish javobini o'zgartirmadi [F(1,19) = 1.1, ns]. Keyinchalik, xuddi shu kalamushlar 5 kunlik intra-Acb qobig'ining AMPH infuziyalariga (2 ig) ta'sir o'tkazdi. Kutilganidek, AMPH kuchli dvigatel faollashuvini salitsimon ishlangan ratlardan farqli o'laroq, qafas kesish, tarbiyalash, yo'naltirilgan hidlash va parvarish qilish (qarang, uslublar va materiallar) ning "kompozitlik faollik skorlari"F(1,22) = 53.9; p <.0001; Shakl 5A], bu dori aniq harakatga ega ekanligini ko'rsatdi. O'tkir AMPH davolashlari esa ingichka xulq-atvorni o'zgartirmagan [davolash × kunlik ta'sir o'tkazish: F(4,76) = .5, ns; ma'lumotlar ko'rsatilmagan]. Eksperimentning takroriy AMPH yoki tuzsizlanish bosqichi tugagandan so'ng, barcha kalamushlarni qorin bo'shlig'i qoldig'i sho'rligi va muscimol bilan shikastlangan. AMPH muskokin bilan bog'liq oziqlantirishga nisbatan sezgirlikni sezilarli darajada o'zgartirdi (Shakl 5B). Kerakli darajada oldingi davolash x davolash effekti bor edi [F(1,19) = 3.6; p = .02]; ammo rejalashtirilgan taqqoslashlar shuni ko'rsatdiki, bu o'zaro ta'sir asosan AMPH guruhidagi muscimol muammolariga nisbatan salin va shikastlangan javoblardagi katta farqlar bilan bog'liqp = .0009). Shu bilan birga, muscimol muammosiga javob sifatida sho'r va AMPH guruhlari orasida mazmunli farq yo'q edi (p = .11).
Ko'p AMPH infuziyalarining muscimol hassaslığına ta'sirini o'rganish uchun (strokratik sıçanların AMPH tajribasi uchun qayta ishlatilganligini va bu oldingi stress tajribasi AMPH javoblarini o'zgartirgan bo'lishi mumkinligini hisobga olgan holda), ikkinchi bir tajriba, naif sıçanların alohida guruhida amalga oshirildi. (5 μg) yuqori qorin bo'shlig'i infektsiyasining 10 kunlik infuziyalaridan so'ng, fiziologik va ikki doz muscimol (10 va 50 ng) bilan birga qorin bo'shlig'i qobig'idagi qiyinchiliklar kuzatildi. Shunga qaramay, AMPH infüzyonlarına javob sifatida qattiq aktiv vosita aktivasyonunu kuzatdik [F(1,22) = 83.7; p <.0001; Shakl 6], lekin ovqatlantirishda hech qanday ta'siri yo'q [F(4,76) = 1.7, ns]. Ushbu kalamushlarni 10-ng yoki 50-ning ichki qorin bo'shlig'i qobig'i muscimol bilan shikastlanganda ular sezgir oziqlantirish javoblarini ko'rsatolmadi [F(2,38) = 1.4; ns]. Ijobiy nazorat sifatida AMPH guruhidagi kalamushlar 5 kunlik tatlandırılmış yog 'rejimiga (va sho'rlangan guruhdagi kalamushlar chow rejimiga) ta'sir o'tkazdi; barcha kalamushlar 10-ng muscimol ning ichki qorin ichki qavati infuziyasi bilan shikastlangan. Shakarlangan yog'li ta'siridan keyin ushbu kalamushlarda sezuvchan muscimol ovqatlantiruvchi javobni kuzatishdi [F(1,19) = 5.8; p = .027; ichki, Shakl 6takrorlangan AMPH infuzionlaridan keyin sezuvchanlik ko'rsatmagan xuddi shu kalamushlarning shirin yog'ga ta'siriga javoban muscimol-sezuvchanlikni rivojlantira oladigan va ifoda etishga qodir ekanligini namoyish etgan.
Kanüllü joylashtirish
Shakl 7 bu ishda barcha tajribalar bo'yicha kanula joylashtirishning sxematik xaritasi ko'rsatilgan. Ushbu rasmda ko'rinib turganidek, plakatlarning aksariyati (95%) uzoq rostral sektori, shu jumladan medial Acb qobig'ining old qismida tushib ketgan. Plakatlarning besh foizi qobiqning oldingi darajasiga o'rta nuqtaga tushib ketdi, bu sohada achinariy javoblarni keltirib chiqaradi, ammo bu hududga mudofaa qiluvchi xatti-harakatlarni18). Ushbu zonalardagi joylashuvlar barcha tajribalarda teng ravishda namoyon bo'ldi va anteroposterior oqi joylashish o'zgaruvchanligi sababli xatti-harakat yoki farmakologik ta'sirlarda tizimli farqlar mavjud emas edi.
muhokama
Ushbu tadqiqotda miyada yangi ovqatlantiruvchi adaptatsiya usuli mavjud. Shakarlangan yog 'iste'molining intervalgacha teshiklari Acb qobig'idagi past dozali muscimol muammosiga sabab bo'lgan oziqlantirish ta'sirini sezilarli darajada sezdirdi; sezgirlangan ta'sir soddalashtirilgan kalamushlarda besh marta yuqori muscimol doza bilan ishlab chiqarilganiga teng edi. Ushbu yuqori sezuvchanlik intervalgacha tatib ko'rilgan yog'li ta'sir bilan bog'liq umumiy tarqalishi yoki atrof-muhitni diversifikatsiya qilishning nonspesifik bo'lmagan natijasi emas edi. Shunga ko'ra, kuchli stimulyatsiyaga ega bo'lganlar ham (qorin bo'shlig'i ichi qobig'i AMPH) bo'lganlar (hatto intervalgacha stress ta'sir qilishlari)30-33), muscimol indüktli beslenmeyi sezgir qilish uchun etarli emas edi. Aksincha, eksperimentning sensitizatsiya-induktsiya bosqichida ovqatlanishni bartaraf etgan intra-axb shell DAMGO infuziyalari muscimol uchun kuchli kesishish sezgirligi yaratdi. Shunday qilib, GABA sensitizatsiyasini induktsiya qilish uchun shirinlangan yog'ni va m-opioidga asoslangan chov iste'molining umumiy xossasi, umumiy xushbo'ylikni kuchaytirishdan tashqari, talab etiladi. Shubhasiz, bu shakar yoki yog'ga xos oraliq yoki posterestiv xususiyatlar muscimol sensitizatsiyasini rivojlantirish uchun majburiy emasligini ko'rsatadi. Buning o'rniga umumiy tashabbus mexanizmi ekzogen DAMGO administratsiyasi yoki shirinsiylashtirilgan yog 'o'tishi bilan qo'zg'atilgan endogen m-opioid peptid reaktsiyasi natijasida chiqarilgan Acb qobig'ida m-opioid signalini takrorlashi mumkin.
Shu munosabat bilan, Acb darajasidagi intra-Acb m-opioid retseptorlarini rag'batlantirish opioid-sensitizatsiyani va keyinchalik sho'rlanishni oldini olish uchun shartli oziqlantirish javobini34). Ushbu ta'sirlar dopamin-mustaqil (35) kabi, boshqa akb-lokalizatsiya qilingan, m-opioid vositachiligidagi jarayonlar, masalan, hedonik ta'mga reaktivligi (30,36,37). Umuman olganda, takroriy takrorlanadigan AMPH infuziyalarining muscimol-indüktilgan oziqlantirishni sezgirlashi bu topilmalar bilan mos keladi; shuning uchun opioid-GABA o'zaro faoliyat sezgirlash jarayoni boshlang'ich davrda dopamin-mustaqil neyroxodaptatsiya turini ifodalaydi. Qizig'i shundaki, biz DAMGO bilan ishlov berilgan kalamushlarda sho'rlanish muammosiga shartli ovqatlantirishni kuzata olmadik. Shunga qaramasdan, opioidlarning oziqlantirish samaradorligini indeksatsiyasi o'zgaruvchan bo'lishi mumkin va to'rtta takroriy davolashni talab qiladi (V. Bakshi, shaxsiy muloqot, iyun 2012). Nima bo'lishidan qat'iy nazar, bu natijalar opioid-GABA o'zaro xurujini ifodalash uchun shartli oziqlantirish ta'siri (hech bo'lmaganda, sho'rlanish muammosi bilan aniqlana oladigan) uchun zarur emasligini ko'rsatadi. Bundan tashqari, kunduzgi choy seanslarida, yoki sho'r yoki ochlik muammosiga javoban, shirinsimon yog'li ta'sirga uchragan so'rg'ichlarda ovqatlantiruvchi javoblarni ko'paytirmadik, chunki bu sezgir oziqlantirish uchun javob beradigan mexanizmning ba'zi bir o'ziga xosligini ko'rsatdi.
Muscimol tomonidan keltirib chiqarilgan oziqlantirish xatti-harakatining asosiy sababi va Acb qobig'idagi boshqa amino kislotalar manipulyatsiyasi AMPA vositasida ishlaydigan eksitatori va GABA vositasida inhibitoryal signalning o'rta tirnoqli neyronlarga tushishi kabi ko'rinadi. Neytral ta'sir ushbu neyronlarning faolligini kamaytirganda yoki GABA orqali vositachilik yoki AMPA turi glutamat retseptorlari tomonidan bloklangan bo'lsa, kuchli giperfaogiya (14,23,38,39). Natijalarimiz uchun mo''jizaviy tushuntirishlar m-opioid retseptorlarining takror faollashuvi (ekzogen ta'sir ostida DAMGO yoki shirinsimon yog'li so'rg'ich bilan hosil qilingan endogen opioid peptid retseptorlari bilan) GABAA retseptorlari sezgirligi yoki GABA vositasida inhibitatsiya qilish uchun eshikni osonlashtirish uchun eksitatori / inhibitoryal uzatish balansidagi umumiy o'zgarish bo'ladi. Takroriy opioid agonist (morfin) davolash ushbu yo'nalishdagi GABA regulyatsiyasiA va sinaptozomlarda muscimol-ogohlantiruvchi xloridning40), GABAni kuchaytirishA Acb qobig'idagi d-subunit ifodasi (41) va Acb qobig'idagi AMPA retseptorlarining GluR1 alt birimini ichkiizatsiya qilish (42). Ushbu mexanizmlarning har biri (yoki ularning kombinatsiyasi) Acb qobig'ining darajasida muscimol tomonidan neyronlarning inhibisyoniga yuqori sezuvchanlik keltirib chiqarishi mumkin. Shunga qaramay, boshqa tushuntirishlar mumkin; Masalan, Acb-shell vositasida oziqlantirish xatti-harakatlari (masalan, lateral gipotalamus) ifodalangan tarmoqning «chiqish» tugunlarida neyroxodispatiyalar ham bo'lishi mumkin. Ushbu imkoniyatni sinab ko'rish uchun qo'shimcha ishlarga ehtiyoj bor.
Ushbu topilmalarning klinik ahamiyatga molikligi bilan bog'liq holda, GABA ning yuqori sezuvchanligi Acb qobig'ida m-opioid signalizatsiyasidagi intervalgacha, fazaviy yuksalishlarni keltirib chiqaruvchi atrof-muhitga zarar etkazadigan vaziyatlarga javoban rivojlanadi, masalan, ovqatlanishning takrorlangan "uchlari". menUshbu kontekstda GABA o'zgarishi keyinchalik nosog'lom appetitik xulq-atvorni yaxshilash uchun besleme mexanizmini aks ettirishi mumkin. Bizning natijalarimiz shuningdek, oziq-ovqat mukofoti va ayrim giyohvand moddalarni iste'mol qilish o'rtasidagi "krossover" ta'sirlarni anglash uchun ham ta'sir qilishi mumkin. Aniq bir nomzod alkogol (EtOH) bo'lib, uning ta'sirlari Acb (m-opioid va GABA tizimlari tomonidan modulyatsiya qilingan)43-45). Qizig'i shundaki, ayrim tadkikotlar odamlarda oziq-ovqat iste'mollari, tish-tirnog'i va patologik spirtli ichimliklarni iste'mol qilish46,47). Hayvonlarni o'rganishda, GABA yoki Acb qobig'idagi opiyoid retseptorlari blokirovkasi EtOH qabulini kamaytiradi ([48,49), lekin qarang Stratford va Wirtshafter (50)], va ajoyib tarzda, EtOH to'g'ridan-to'g'ri Acb qobig'iga51). Bundan tashqari, so'nggi paytlarda pozitron emissiya tomografiyasi bo'yicha ishda, Acbdagi m-opioid signalizatsiyasi shirin tatli spirtli ichimliklar52). Uyali darajasida, Acb qobig'i joylashgan mahalliy GABA ko'rsatildiA d) pastki dozani o'z ichiga olgan retseptorlari past dozdagi EtOH iste'molining53); Yuqorida aytib o'tilganidek, ushbu subunit uchun genning ifodasi, reaktsiyali m-opioid retseptorlari tomonidan stimulyatsiya qilingan (41). Shunday qilib, EtOH ichish yoki iste'mol qilingan EtOH ichimliklar iste'mol qilish sharoitida (masalan, yoshlar ichkilikka moyil bo'lganlar kabi) m-opioid peptidlarni ovqatlanishli oziq-ovqat bilan "snacking" bilan ozod qilish, tez rivojlanayotgan, opioidlarga bog'liq bo'lgan neuroadaptations Acb qobig'idagi amino kislotalar kodli davrlarida. Bu gipoteza, spekulyativ bo'lsa-da, GABA sezgirligini kuchaytirayotgan shaxslarning miya mukofotlari davrlarini GABA sezgirlashiga ta'sir etadigan bashoratlarga olib keladi, bu esa mazali ovqatlarning oziq-ovqat mahsulotlarini va EtOH iste'molini kuchaytirishi uchun "shifrlangan dori" sifatida xizmat qilishi mumkin.
Qo'shimcha materiallar
Qo'shimcha fayl
rahmat
Ushbu ish Milliy Sog'liqni saqlash instituti Grant Nos, DA 009311 va MH 074723 tomonidan qo'llab-quvvatlandi. Ushbu ma'lumotlarning bir to'plami mavhum shaklda Oregon shtatining Portlend shahrida Ingestive Behavior konferensiyasi jamiyatining 2009 yig'ilishida taqdim etildi.
Izohlar
Yozuvchilar, biomedikal moliyaviy manfaatlari yoki mumkin bo'lgan nizolarni bildirmaydi.
Qo'shimcha material ushbu maqolada keltirilgan.
Manbalar