Grifin retseptorlari (GHS-R1A) antagonisti morfinning foydali xususiyatlarini susaytiradi va sichqonlardagi (2015) mukofot sohalarida opioid peptid darajasini oshiradi,

Eur Nöropsikoformakol. 2015 Okt 21. pii: S0924-977X (15) 00329-6. doi: 10.1016 / j.euroneuro.2015.10.004.

Engel JA1, Nylander I2, Jerlhag E3.

mavhum

Yaqin vaqtlarda grifin kabi gut-miya gormonlari mukofotni tartibga solishda muhim rol o'ynashi taklif qilingan. Griil an'anaviy tarzda oziq-ovqat mahsulotlarini qabul qilish va tana vaznining homoeostasisini tartibga solgan. Bundan tashqari, yaqinda o'tkazilgan ishda bu peptidin kalamushlarda dorilargacha bo'lgan dopaminning hujayra tashqari darajasida morfin keltirib chiqaradigan o'sishini o'z ichiga olgan dori vositasida paydo bo'lgan mukofotda yangi rolga ega ekanligini ta'kidladi. Bu erda gyrlin retseptorlari (GHS-R1A) antagonisti, JMV2959, mezolimbik dopamin tizimining morfin bilan indikatsiyalangan ta'siriga sichqonlarda ta'siri o'rganildi. Bundan tashqari, JMV2959 administratsiyasining opioid peptid darajasiga mukofotni bog'liq sohalarda ta'siri o'rganildi. Ushbu eksperimentning seriyasida biz periferik JMV2959 administratsiyasining hech qanday ta'sir qilmaydigan dozada morfinni lokomotor stimulatsiyaga olib kelishi, tashqi dopaminning hujayra tashqari darajalarini ko'paytirish va sichqonlarda joyni tanlashini kuchaytirishi mumkinligini ko'rsatdik. JMV2959 administratsiyasi Met-enkefalin-Argning to'qimalar darajasini sezilarli darajada oshirdi6Phe7 ventral tegmental sohada, hipokampusda dinorfin B va Leu-enkefalin-Arg6 striatumda. Demak, JMV2959ning striatum va ventral tegmental joylarda delta retseptorlari faol peptidlarini stimulyatsiya qilish orqali morfinni keltirib chiqaradigan mukofotni taqiqlashini faraz qilamiz. Bundan tashqari, kappa reseptörünü faol hippokampal peptidler, JMV2959'un mukofotning xotira shakllanishiga tartibga solish qobiliyatiga ham qo'shilishlari mumkin. Giyohvandlikning rivojlanishi hech bo'lmaganda qisman dori vositalarining meolimbik dopamin tizimiga ta'siri bilan bog'liq bo'lib, hozirgi ma'lumotlarga ko'ra, GHS-R1A antagonistlari opioid giyohvandlikning yangi davolash uslublari sifatida tushunishga loyiqdir.

 

 

 

 
   

mavhum

Yaqin vaqtlarda grifin kabi gut-miya gormonlari mukofotni tartibga solishda muhim rol o'ynashi taklif qilingan. Griil an'anaviy tarzda oziq-ovqat mahsulotlarini qabul qilish va tana vaznining homoeostasisini tartibga solgan. Bundan tashqari, yaqinda o'tkazilgan ishda bu peptidin kalamushlarda dorilargacha bo'lgan dopaminning hujayra tashqari darajasida morfin keltirib chiqaradigan o'sishini o'z ichiga olgan dori vositasida paydo bo'lgan mukofotda yangi rolga ega ekanligini ta'kidladi. Bu erda gyrlin retseptorlari (GHS-R1A) antagonisti, JMV2959, mezolimbik dopamin tizimining morfin bilan indikatsiyalangan ta'siriga sichqonlarda ta'siri o'rganildi. Bundan tashqari, JMV2959 administratsiyasining opioid peptid darajasiga mukofotni bog'liq sohalarda ta'siri o'rganildi. Ushbu eksperimentning seriyasida biz periferik JMV2959ni administratsiyaga ta'sir qilmaydigan dozada ko'rsatdik. boshiga tushgan, morfinning lokomotor stimulatsiyaga olib kelishi, tashqi dopaminning hujayra tashqari darajasini ko'paytirish va sichqonlarda joyni tanlashini kuchaytiradi. JMV2959 administratsiyasi Met-enkefalin-Argning to'qimalar darajasini sezilarli darajada oshirdi6Phe7 ventral tegmental sohada, hipokampusda dinorfin B va Leu-enkefalin-Arg6 striatumda. Shuning uchun JMV2959ning morfinga bog'liq bo'lgan mukofotni taqiqlashini taxmin qilamiz orqali striatum va ventral tegmental joylarda delta retseptorlari faol peptidlarini rag'batlantirish. Bundan tashqari, kappa reseptörünü faol hippokampal peptidler, JMV2959'un mukofotning xotira shakllanishiga tartibga solish qobiliyatiga ham qo'shilishlari mumkin. Giyohvandlikning rivojlanishi hech bo'lmaganda qisman dori vositalarining meolimbik dopamin tizimiga ta'siri bilan bog'liq bo'lib, hozirgi ma'lumotlarga ko'ra, GHS-R1A antagonistlari opioid giyohvandlikning yangi davolash uslublari sifatida tushunishga loyiqdir.

 

 

 

 

1. kirish

Qo'shishqoq dori vositalarining o'tkir va surunkali ta'siri, miyani mukofotlash tizimlarining (Nestler, 2005) muhim kalit davri bo'lgan mezolimbik dopamin tizimiga chuqur ta'sir ko'rsatadi. Bu ta'sirlar hech bo'lmaganda qisman giyohvandlikning rivojlanishi (Wise, 2004) asosida yotqizilgan edi. Giyohvandlikka chalinish insonga, jamiyatga va zararli ta'sirga qarshi keng miqyosli zararli ta'sirlarni keltirib chiqaradi va jamiyatning ushbu muhim sog'lig'ini davolashga qaratilgan yangi davolash usullari (Koob va Le Moal, 2001) kafolatlanadi. Qo'shishqoq dori vositalarini mezolimbik dopamin tizimini faollashtiradigan qobiliyatiga vositachilik qiladigan signalizatsiya tizimlarini aniqlab, modda foydalanish buzilishi uchun noyob davolash strategiyasi aniqlanishi mumkin.

Tadqiqot shuni ko'rsatdiki, oziq-ovqat va giyohvandlik vositalari (Morganstern va boshq., 2011) tomonidan grafinya kabi oziq-ovqat tartibga soluvchi miya peptidlarining roli mukofot vositachilik qilishni taklif qiladigan keng tarqalgan neyrobiologik mexanizmlar oziq-ovqat va giyohvandlik vositalarining iste'mol qilishini va mukofotlashini belgilaydi. Dastlab, gurlin o'sish gormoni (Kojima va boshqalar, 1999) chiqarilishini va kalamushlarda semizlikni keltirib chiqarmoqligini ko'rsatdi (Tschop va boshq., 2000). Bugungi kunda griflin oziq-ovqat iste'mol qilishni, ochlikni oshirib, ishtahani kuchaytirishi yaxshi ma'lum orqali gipotalamus davrlari (ko'rib chiqish uchun Egecioglu va boshq. (2011) ga qarang). Gipotalamusga qo'shimcha ravishda, grelin retseptorlari (GHS-R1A) amigdala, striatum, prefrontal korteks, ventral tegmental maydon (VTA) va gipokampus (ko'rib chiqish uchun qarang: Engel va Jerlhag (2014)) kabi mukofot bilan bog'liq sohalarda. grelinning fiziologik roli energetik homoeostaz regulyatsiyasidan tashqariga chiqadi. Darhaqiqat, orexigenik peptid grelin mezolimbik dopamin tizimining faollashtiruvchisi, shuningdek sichqonlarda mukofot, motivatsiya va spirtli ichimliklar, nikotin, amfetamin va kokainni qabul qilish regulyatori sifatida ko'rsatilgan (ko'rib chiqish uchun Engel va Jerlhag (2014).

Opioidlar, boshqa qo'shadi dorilar kabi, mesolimbik dopamin tizimini faollashtiradi orqali (Hirose va boshq., 2005, Murakawa va boshqalar, 2004, Yoshida va boshqalar, 1999) va VTA-da m- va / yoki d-opioid retseptorlarining aktivlashtirilishi, ehtimol GABA - dopamin neyronlarini taqiqlash (Jonson va Shimoliy, 1992). Bundan tashqari, kometal kopioid retseptorlari mesolimbik dopamin tizimining faoliyatini nazorat qiladi (Chefer va boshq., 2005, Spanagel va boshq., 1992). Opioidlarga takroran ta'sir qilish, giyohvandlik rivojiga hissa qo'shadigan (De Vries va Shippenberg, 2002) rivojlanish sohalarida, opioid peptidlar, jumladan bir nechta neyrotransmitterlarning moslashuvchan o'zgarishlarini keltirib chiqaradi. Sichqonchalarda GHS-R1A ning farmakologik bosimiga morfinning ta'siriga chidamli dopamin relefi va stereotipik harakatlar (Sustkova-Fiserova va boshq., 2014) ta'sirini kuchaytiradi. Ushbu eksperimentlarning birinchi qismining maqsadi GHS-R1A antagonisti JMV2959ning morfinni lokomotor stimullashga, adumbal dopaminning chiqarilishiga va sichqonchalarda konditsioner joy tanlashiga ta'sirini o'rganishdan iborat edi. Tadqiqotning ikkinchi qismining maqsadi, qayta JMV2959 yoki ghrelin davolashining opioid peptid darajalariga ta'siri (Met-enkefalin-Arg6Phe7 (MEAP), dynorphin B (DynB) va Leu-enkefalin-Arg6 (LeuArg)), amigdala, striatum, prefrontal korteks, VTA va hipokampusni o'z ichiga oladi.

 

 

2. Tajriba jarayonlari

 

 

2.1. Hayvonlar

Erta tug'ilgan yoshdagi erkak NMRI sichqonchalari (8-12 haftalik va 25-40 g vaznli og'irligi, Charles River, Sulzfeld, Germaniya) ishlatilgan. Qisqacha aytganda, barcha sichqon guruhga joylashtirilgan va 12 / 12-h nurida / qorong'u davrda saqlanib qolgan (yong'in soat 7 da). Suv va oziq-ovqat (Norman Chow, Harlan Teklad, Norfolk, Angliya) ga tegishlidir ad libitum, eksperimental sozlashlar bundan mustasno. Yangi sichqonchalar har bir yurish-turish testi uchun hamda opioid peptid tahlillari uchun ishlatilgan. Eksperimentlar Gothenburgdagi Shvetsiyadagi Etika qo'mitasi tomonidan tasdiqlangan. Barcha choralar hayvonlarning azoblanishini kamaytirish va ishlatilgan hayvonlarning sonini kamaytirishga qaratildi. Barcha hayvonlarga eksperimentlarning boshlanishidan kamida bir hafta oldin moslashishga ruxsat berildi.

 

 

2.2. Giyohvand moddalar

Morphine hydrochloride (Apoteksbolaget Sahlgrenska Hospital, Gothenburg, Shvetsiya) transport vositasida (0.9% natriy xlorid eritmasi) eritildi va eksperiment boshlanishidan oldin 20 mg / kg 10 min dozada ip bilan o'tdi. Ushbu doz past dozada (10 mg / kg, ip) sichqonchamizda lokomotor stimullashga olib kelmagani uchun tanlangan (ma'lumotlar ko'rsatilmagan). GHS-R6A antagonisti tanlangan doz (2959 mg / kg, ip) JMV5247 (Institut des Biomolécules Max Mousseron (IBMM), UMR1, CNRS, Montpellier-2 va 1 Universitetlari, Fransiyada sentez qilingan) lokomotor faoliyatga ta'siri, sichqonchada akumbal dopaminning chiqarilishi va shartli joy afzalligi (Jerlhag va boshq., 2009). JMV2959 avtomobilda (0.9% natriy xlorid eritmasi) eritilib, morfin ta'siridan yigirma daqiqa oldin yoki opioid peptid darajasini tahlil qilish uchun dekapitatsiya qilingan. JMV2959ning tanlangan dozasi har qanday eksperimentda sichqonchani yalpi harakatlariga ta'sir qilmadi. JMV2959ning yurak-tomir tekshiruvlari uchun bizning davriy izlanishlarimiz JMV2959ning bitta dozasini dori bilan ta'minlaydigan mukofotni sarflashini ko'rsatdi (ko'rib chiqish uchun "Engel" va "Jerlhag" (2014)). JMV2959 opioid peptid analizining kuchli ta'sirini aniqlash imkoniyatini oshirish uchun keyingi besh kun davomida subkronik usulda qo'llanildi. Bundan tashqari, takroriy in'ektsiyalar bilan siz peptidlar bo'yicha o'tkir qarshi stresten yuzaga kelishi mumkin bo'lgan aralashuv ta'siridan qochishingiz mumkin. Assylated glyphine (Bionuclear, Bromma, Shvetsiya) 0.9% natriy xloridda suyultirildi va tanlangan grafin dozu (0.33 mg / kg, ip) sichqonlarda (Jerlhag, 2008) mukofotni ilgari ko'rsatdi. Barcha giyohvand muammolar uchun muvozanatli dizayn ishlatilgan.

 

 

2.3. Locomotor faoliyat tajribalari

Avvalgi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, morfin kemiruvchilarda lokomotor stimullashga olib keladi (Wise and Bozarth, 1987). Lokomotorlar faoliyati sakkiz ovozli chayqalgan, ventilyatsiya qilingan va yoritilgan lokomotiv qutilarga (420 × 420 × 200 mm, Kungsbacka mät- reg reglerteknik AB, Fjärås, Shvetsiya) ro'yxatga olingan. Besh-beshta fotosel chiroqlari, qutining zamin darajasida, fotoselni aniqlash kompyuterga asoslangan tizimga sichqonlarning faoliyatini qayd etish imkonini berdi. Lokomotor harakatlar 60-min davr mobaynida to'xtab qolgan yangi fotosel chiroqlarining to'plangan soni sifatida aniqlandi. Barcha tajribalarda sichqonchani dori-darmonlarni qabul qilishdan bir soat oldin lokomotor faoliyat qutisiga joylashtirildi. Davolash guruhlari orasida hech qanday farq yo'q edi (ma'lumotlar ko'rsatilmagan).

Birinchi qator eksperimentda JMV2959 (6 mg / kg, ip) ning morfin bilan indikatsiyalangan (20 mg / kg, ip) lokomotor stimulyatsiyasi ta'siri tekshirildi. JMV2959 morfindan 20 min oldin o'tdi va faoliyatni ro'yxatga olish oxirgi in'ektsiyadan o'n daqiqadan so'ng boshlandi. Har bir sichqon bir davolash kombinatsiyasini oldi (avtomobil / transport vositasi, JMV2959 / transport vositasi, morfin / avtomobil yoki JMV2959 / morfin; n= 8 har bir davolanish kombinatsiyasi) va faqat bitta eksperimental sinovdan o'tdi.

 

 

2.4. Konditsioner joy tanlovi

JMV2959 ning yangi sichqonchadagi morfinning ta'siriga ta'sirini baholash uchun sichqonlarda ilgari tasvirlangan (Jerlhag, 2008) shartli joy imtiyozli testlari o'tkazildi. Qisqacha aytganda, 45 lx yoritish va turli xil ingl. Va doktrinalar bilan ikki kamerali CPP apparati ishlatilgan. Bir xonada qora va oq chiziqli devorlar va qorong'i qatlamli qavat, boshqasi oq taxta yog'ochli taxta va yog'och to'qimalar devorlari bilan aniqlangan. Amaliyot pre-konditsioner (kun 1), shamollatish (kunlar 2-5) va post-conditioning (kun 6) dan tashkil topgan. Old shartlarni bajarishda sichqonchani vosita bilan ipga AOK qilindi va 20 min davomida ikkala bo'limga erkin kirish imkoniyati bilan xonaga joylashtirildi, boshlang'ich (yoki yon) holatni aniqlash uchun. Konditsionerlik (20 min / sessiya), morfini (20 mg / kg) kamida afzal qilingan bo'linmaga va afzal qismga ega bo'lgan avtomobil bilan bog'langan biosintez usuli yordamida amalga oshirildi. Barcha sichqon har kuni vosita bilan bir qatorda morfinni bir marta qabul qilib oldi va in'ektsiya ertalab va tushdan keyin muvozanat tarkibida o'zgartirildi. Keyinchalik sichqonlarnin= 16) JMV2959 (6 mg / kg, ip) yoki teng miqdordagi transport vositasi eritmasi va 20 min oralig'ida joylashtirildi. Keyin ikkala bo'linma 20 min uchun ikkala bo'limga erkin kirish imkonini berdi (quyidagi davolash guruhlarini yaratish; Morph-Veh va Morph-JMV2959).

Dori-darmonlar bilan bog'langan (umumiy) vaqtning% da farq sifatidaya'ni. eng kamida afzal qilingan) bo'limi.

2.5. In Vivo jonli mikrodializ va dopamin salimlarini o'lchash

JMV2959 ning sichqonlardagi morfinning indikator-harakatlanishi stimulyatsiyasi va kondensatsiyalanadigan joyni afzalligini hisobga olgan holda, JMV2959 (6 mg / kg, ip) ning morfin bilan indikatsiyalangan (20 mg / kg, ip) akkumbal dopamin salgısı ta'siri o'rganildi. ning Vivo jonli erkin harakatlanadigan sichqonchalarda mikrodializ. Ekstraselluler dopamin darajasini o'lchash uchun sichqon yadroli akumbenslarda joylashgan mikrodializ prob bilan bir tomonlama joylashtirildi. Shuning uchun sichqon seysmik stereotaksik (David Kopf Instruments, Tujunga, KA, AQSh) ramkaga joylashtirilgan izofluran (Isofluran Baxter, Univentor 400 Anesthesia Unit, Univentor Ldt., Zejtun, Malta) bilan behushlik ko'rsatdi va oldini olish uchun isitish pedi gipotermiya. Lokal anestezik va karkoprofen (Rimadyl, 5 mg / kg ip) (Astra Zeneca, Gothenburg, Shvetsiya) sifatida qo'llanilgan ksilokain adrenalin (5 ig / ml; Pfizer Inic; Nyu-York, AQSh) har qanday og'riqni engillashtirdi. Bosh suyagining shikastlanishi va prob uchun bitta teshik, biriga esa vagonni joylashtirish uchun burama-burama qilingan. Probing tasodifiy ravishda miya chap yoki o'ng tomoniga o'zgartirildi. 1.5 mm oldindan bregma, 0.7 lateral va o'rta xanjarga 4.7 mm koordinatalari, miya sirtining tagida joylashgan (Franklin va Paxinos, 1997) uchun ishlatilgan. Probning o'lchamdagi uchi 20,000 mm bo'lgan 310 / 220 ìm, HOSPAL, Gambro, Lund, Shvetsiyadan olingan / 1 kDa bilan kesilgan XNUMX kDa edi. Barcha problar eksperimentdan ikki kun oldin jarrohlik yo'li bilan joylashtirildi. Jarrohlikdan so'ng sichqonchalar sinov kunigacha (Macrolon III) alohida hujayralarda saqlangan.

Sinov kuni prob probirkaga mikroperfüzyon pompasiga (U-864 ukol pompasi, AgnThos AB) ulangan va Ringer eritmasi bilan 1.5 mi / min tezlikda perfuz qilingan. Microdialysis tashkil qilish uchun bir soatlik odatiylikdan so'ng, har bir 20 daqiqada perfuziya namunalari to'plandi. Dastlabki dopamin darajasi dastlabki dori / vosita chaqiruvidan oldin ketma-ket uchta namunaning o'rtacha qiymati sifatida aniqlandi va akkumlabal dopaminning ortishi, dastlabki darajadan foiz ko'payishi hisoblab chiqilgan. Dastlabki namunalardan (-40 min 0 mingacha) keyin sichqonchani JMV2959 yoki vosita (0 min) bilan quyishdi, undan keyin morfin yoki vosita inyeksiyasi (20 daqiqada). Ushbu dori-darmonlarni keyinchalik qo'shimcha sakkiz 20 min namunalar to'plangan. Quyidagi davolash guruhlari (nHar bir guruhda 8): avtomobil-vosita (Vih-Veh), avtomobil-morfin (Veh-Morf), JMV2959-transport vositasi (JMV2959-Veh) va JMV2959-morfin (JMV2959-Morph) yaratildi.

Dializatlardagi dopamin darajalari elektrokimyoviy aniqlanish bilan HPLC tomonidan aniqlandi. Nasos (Gyncotec P580A; Kovalent AB; V. Frölunda, Shvetsiya), ion almashinuvi ustuni (2.0 × 100 mm, Prodigy 3mm SA, Skandinaviska GeneTec AB, Kungsbacka, Shvetsiya) va detektor (Antec Decade, Antec Leyden; Zoeterwoude , Gollandiya) VT-03 oqim kamerasi (Antec Leyden) ishlatilgan. Sülfonik kislota 5.6 mM, sitrik kislota 10 mM, natriy sitrat 200 mM, 200% EDTA, 10% MeOHdan tashkil topgan ko'chma faz (pH 30) 0.2 mm membranali filtr yordamida (GH Polipro, PALL Gelman Laboratoriyasi; Lund, Shvetsiya). Mobil faza degasser (Kovalent AB) o'tadigan 0.2 ml / min oqim tezligida chiqarildi va analit + 0.4 Vda oksidlandi.

Mikrodializning tajribalari bajarilgandan so'ng, sichqon dekapitatsiya qilindi va problar lokalizatsiya jarayonini engillashtirish uchun pontamin osmonli ko'k 6BX bilan perfuz qilindi. Miyalari titrash uskunasi (752 M Vibroslice, Campden Instruments Ltd., Loughborough, Buyuk Britaniya) ustiga o'rnatilgan va 50 mm qismida kesilgan. Probning joylashishi yorug'lik mikroskopi yordamida yalpi kuzatuv bilan aniqlandi. Probning aniq holati tekshirildi (Franklin va Paxinos, 1997) va statistik tahlilda faqat to'g'ri joylashtiradigan sichqonlardan foydalanildi.

 

 

2.6. Davolash va disektsiya

JAMVNNMXning MEAP, DynB va LeuArg darajalarida mukofotlash sohasidagi ta'siri tekshirildi. Sichqonlarga JMV2959 (2959 mg / kg, ip, n= 8) yoki teng miqdordagi transport vositasi (ip, n= 8) keyingi besh kun uchun. Oxirgi enjeksiyadan so'ng 20 min sichqonchani qurbon qilishdi va bu sichqonlardan miyalar yig'ildi. Alohida sichqonlarga grelin (0.33 mg / kg, ip, n= 8) yoki teng miqdordagi transport vositasi (ip, n= 8) keyingi besh kun uchun. Eng so'nggi in'ektsiyadan besh daqiqa o'tgach, sichqonchani qurbon qilishdi va bu sichqonchalardan miyalar yig'ildi. Amigdala, striatum, prefrontal korteks, VTA va hipokampus tezlik bilan ajratildi va darhol quruq muzga tushirildi va keyinchalik qayta ishlashga qadar -80 ° C da saqlandi.

 

 

2.7. Opioid peptid darajasini tahlil qilish

Homogenlashuv va peptid ekstraksiya usuli ilgari batafsil yoritilgan (Nylander va boshq., 1997) standart amaliyotga amal qilgan. Qisqacha aytganda, muzlatilgan namuna issiq (95 ° C) asatik kislota (1 M) qo'shilgan edi. Namuna 95 min uchun suvli hammom (5 ° C) ichida isitiladi, muzda sovutiladi va keyin Branson Sonifier (Danbury, CT, AQSh) bilan homogenizatsiyalanadi. Homogenat 95 ° C da 5 min uchun qayta isitiladi va 15 ° C da 4 min uchun santrifüjdan oldin muzda sovutiladi va 12,074 ×g Beckman GS-15R santrifüjida (Fullerton, KA, AQSh). Ekstraktlar bundan oldin tasvirlangan protsedura ko'ra (Nylander va boshqalar, 1997) ko'ra, yana saflaştırılmıştır. Ikkita fraktsiya yig'ildi: fraktsiya III (Leu-Arg va MEAP) va V (DynB) fraksiyonu. Namunalar vakuum santrifüjinde (Savant SpeedVac Plus SC210A, Thermo Scientific Inc., Waltham, MA USA) quritilgan va peptid tahlil qilinguniga qadar muzlatgichda (-20 ° C) saqlangan.

DynB, LeuArg va MEAP ning immunoreaktiv (ir) darajalari yaxshi ma'lum radioimmunoassaylar bilan tahlil qilindi va protokollar boshqa joylarda batafsil yoritilgan (Nylander va boshq., 1997). DynB assotida erkin va antikor bilan bog'langan peptitni ajratish uchun echki-quyonga qarshi IgG (GARGG; Bachem, Bubendorf, Shveytsariya) ishlatilgan. Dyn antiserum (113 +) 1: 600000 ning yakuniy seyreltisida ishlatilgan. Buyuk Dyn bilan o'zaro reaktivlik 100% va DynB (1-29) 1% bilan. Boshqa opioid peptidlar bilan o'zaro reaktivlik kuzatilmadi. LeuArg va MEAP tahlillarida bepul va antikor bilan bog'langan peptidi ajratish uchun ko'mir suspenziyasi ishlatilgan. LeuArg antiserum uchun (91: 6D +, yakuniy seyreltme 1: 60000), o'zaro faoliyat reaktivlik Leu-enkephalin va MEAP uchun 0.01%, DynB uchun 0.02%, DynA uchun 0.04% va alfa-neoendorfin uchun 0.08%. MEAP antiserum 90: 3D (II) 1: 160 000 ning yakuniy seyreltisida ishlatilgan. Met-enkephalin, Met-enkefalin-Arg bilan o'zaro reaktivlik6, Met-enkephalin-Arg6kiy7Leu8Leu-enkefalin va Leu-enkefalin-Arg6 <0.1% bo'lgan

 

 

 

2.8. Statistik tahlil

Lokomotorlardagi faoliyat ma'lumotlari bir tomonlama ANOVA va keyin Bonferroni post-hoc testlari bilan baholandi. Vaziyatni joylashtirish haqidagi imtiyoz ma'lumotlari to'lanmagan holda baholandi t-test. Microdialysis tajribalari ikki tomonlama ANOVA tomonidan baholandi, keyinchalik turli xil muolajalar va ayniqsa aniqlangan vaqt nuqtalari o'rtasidagi taqqoslash uchun Bonferroni post-hoc testi o'tkazildi. Peptid darajalari uncha ko'p bo'lmagan holda tahlil qilindi t-test. Ma'lumot o'rtacha ± SEM sifatida taqdim etiladi. Ehtimollik qiymati P<0.05 statistik jihatdan ahamiyatli hisoblanadi.

 

 

 

3. Natijalar

 

 

3.1. JMV2959 ning morfin ta'siridagi lokomotor stimulyatsiyasi, sichqonchada akumbal dopamin va suspenziya holatiga ta'siri

Davolashning asosiy ta'siri sichqonlarda morinani (20 mg / kg) va JMV2959 (6 mg / kg) (F (3,27) = 7.409, P= 0.0009; nVeh-Veh uchun 8, JMV2959-Veh, JMV2959-Morph va n= Veh-Morf uchun 7). Ko'rsatilganidek Shakl 1A, posthoc tahlillari JMV2959 (bitta JMVXNUMX)P<0.001) morfindan kelib chiqqan lokomotor stimulyatsiyani sezilarli darajada susaytirdi (P<0.01 Veh – Veh vs Veh-Morf). JMV2959ning tanlangan dozasi vosita bilan solishtirganda lokomotor ta'sirga ta'sir ko'rsatmadi (P> 0.05). Avtotransport vositasi bilan ishlangan sichqonlarda va JMV2959-morhpin bilan ishlangan sichqonlarda lokomotor faollik reaktsiyasida farq yo'q edi (P> 0.05).

Shakl 1. Katta rasmni ochadi  

Shakl 1

GHS-R1A antagonisti JMV2959 sichqonchani morfinga taalluqli lokomotor stimulyatsiya, akumbal dopaminning chiqarilishi va konditsioner joy afzalligini kamaytiradi. (A) Morfinning (20 mg / kg ip) lokomotor stimulyatsiyasi JMV2959 (6 mg / kg ip) ning bitta usuli bilan zayıflatıldınHar bir guruhda = 7-8; **P<0.01, ***P<0.001 bir tomonlama ANOVA, undan keyin Bonferroni post-hoc testi). (B) Morfin tomonidan induktsiya qilingan (20 mg / kg ip) holati afzalligi (CPP) sichqonlarga JMV2959 (6 mg / kg ip) ning bir martalik in'ektsiyasi bilan susaytirildi (nHar bir guruhda = 8, *P<0.05, juftlashtirilmagan t-test). (C) Avval biz morfinning (20 mg / kg ip) vosita ta'siriga nisbatan dopaminning chiqarilishini ko'paytirishga ta'sirini namoyish etdik (vaqt oralig'i 40-180 min (P<0.001), Veh-Veh vs Veh-Morf). JMV2959 (6 mg / kg ip) bilan oldingi davolanish (D) da ko'rsatilgandek, dopamin eritmasining morfin bilan bog'liq o'sishini 40-100 va 140-180 min oralig'ida vosita oldindan davolash bilan taqqoslaganda##P<0.01, ###P <0.001, JMV2959-Morph Veh-Morph davolash bilan taqqoslaganda). JMV2959 tanlangan dozasi har qanday vaqt oralig'ida vositalarni davolash bilan taqqoslaganda akkumbal dopaminning chiqarilishiga sezilarli ta'sir ko'rsatmadi (P> 0.05, Veh-Veh vs JMV2959-Vx). JMV2959 kamaydi, ammo butunlay to'sqinlik qilmadi, 60-140 (*) vaqt oralig'ida morfin keltirib chiqaradigan accumbal dopaminning chiqarilishiP<0.05, **P<0.01, ***P <0.001, JMV2959-Morph Veh-Morph davolash bilan taqqoslaganda). Oklar JMV2959, transport vositasi va morfinning in'ektsiya vaqtini bildiradi. Ma'lumotlar ikki tomonlama ANOVA bilan tahlil qilingan, keyin Bonferroni post-hoc testi (n= Har bir guruhda 8). Voh-voh, Vev-Morf (romb), JMV2959-VV (uchburchak), JMV2959-Morph (doira). Barcha qiymatlar o'rtacha ± SEM ni ifodalaydi.

Morfin bilan indikatsiyalangan (20 mg / kg) (morf-vx) shartli joyning afzalligi postmodernatsiya kunida JMV2959 (6 mg / kg) (Morph-JMV2959) ning o'tkir singdiruvchanligi bilan sezilarli darajada kamaydiP= 0.025, nHar bir guruhda = 8; Shakl 1B).

Sichqonlardagi dopaminning akumbal mikrodializ o'lchovlari davolashning umumiy asosiy ta'sirini aniqladi (F(3,33) = 24.15, P<0.0001), vaqt F(11,308) = 7.05, P<0.0001) va davolanish × vaqtning o'zaro ta'siri (F(11,308) = 8.63, P<0.0001) (Shakl 1C; n= Har bir guruhda 8). Morfin 40-180 min oralig'idagi vaqt oralig'ida avtomobillarni davolashda nisbatan odatiy dopaminni oshirdiP<0.001). Ko'rsatilgandek Shakl 1Bu ta'sir JMV2959 bilan oldingi davolanish vaqtida 40-80 (P<0.01), 100 (P<0.001), 140 (P<0.01) va 160-180 min (P<0.001). JMV2959 vositasi bilan davolash va JMV2959-morfinni davolashda 60-80 vaqt oralig'ida farq bo'lgani uchun morfindan kelib chiqadigan akkumbal dopaminning chiqarilishini kamaytirdi, ammo to'liq to'sib qo'ymadi (P<0.01), 100 (P<0.001), 140 (P<0.01) va 160 min (P<0.05). JMV2959 tanlangan dozasi har qanday vaqt oralig'ida vositalarni davolash bilan taqqoslaganda akkumbal dopaminning chiqarilishiga sezilarli ta'sir ko'rsatmadi (P> 0.05).

 

 

 

3.2. Pastki surunkali JMV2959 yoki ghrelin davosi opioid peptid darajalariga ta'siri

Miqdori o'lchagan joylarda uchta peptidning immunoreaktiv (ir) darajasi quyidagicha bo'lishi mumkin 1 stol, 2 stol. Sub-surunkali JMV2959 davolash VTA'ning MEAP darajasini sezilarli darajada oshirdi, Hippocampusda DynB va LeuArgda striatumda (1 stol). Amigdala va prefrontal korteks bilan bog'liq bo'lgan boshqa hududlarda hech qanday farq yo'q edi. Surunkali surunkali grelin davolash MEAP, DynB yoki LeuArg (2 stol).

JNXSub-surunkali JMV1 davolash Jadval 2959 davolash metodini sezilarli darajada oshirdi5-enkephalin-Arg6Phe7 (VTA), Hippokampus (HC) da Dynorphin B (DynB) va Eu-Enkefalin-Arg6 (LeuArg) striatumda (STR) avtomobilni davolash bilan solishtirganda. Tergov qilinayotgan boshqa sohalarda farqlar yo'q edi. Barcha qiymatlar o'rtacha ± SEM ni ifodalaydi. (amygdala (AMY) va prefrontal korteks (PFC)).
 JMV2959transport vositasip-Value
 ME MEAP darajalari
AMY14.52 ± 3.9115.61 ± 4.370.838
STR43.47 ± 5.5447.60 ± 7.940.754
PFC3.61 ± 0.902.94 ± 0.410.450
VTA8.69 ± 0.754.63 ± 0.420.003
HC4.52 ± 0.802.56 ± 0.230.170
 Ir DynB darajalari
AMY2.56 ± 0.411.90 ± 0.250.759
STR8.69 ± 0.8910.17 ± 0.910.547
PFC2.24 ± 0.361.60 ± 0.200.169
VTA8.89 ± 0.555.98 ± 0.210.079
HC3.70 ± 0.412.36 ± 0.190.042
 Ir LeuArg darajalari
AMY13.46 ± 1.6911.07 ± 1.450.270
STR14.50 ± 0.8912.12 ± 0.930.046
PFC11.21 ± 1.3210.80 ± 1.440.776
VTA12.96 ± 1.6310.96 ± 1.390.245
HC5.29 ± 0.755.67 ± 0.720.663
 
Jadval 2Sub-surunkali grelin davosi met metilini o'zgartirmadi5-enkephalin-Arg6Phe7 (MEAP), dynorphin B (DynB) yoki Leu-enkefalin-Arg6 (LeuArg) mukofoti bilan bog'liq sohalarning har qandayida, ya'ni. ventral tegmental hududi (VTA), amigdala (AMY), striatum (STR), prefrontal korteks (PFC) va hipokamp (HC). Barcha qiymatlar o'rtacha ± SEM ni ifodalaydi.
 Ghrelintransport vositasip-Value
 ME MEAP darajalari
AMY12.00 ± 3.9115.46 ± 3.020.517
STR43.59 ± 7.2461.15 ± 12.460.176
PFC3.75 ± 0.463.17 ± 0.640.550
VTA11.96 ± 1.0310.60 ± 0.910.249
HC6.75 ± 1.885.20 ± 1.010.314
 Ir DynB darajalari
AMY3.97 ± 1.095.42 ± 2.270.488
STR11.15 ± 0.8913.03 ± 2.410.434
PFC3.23 ± 0.502.38 ± 0.180.072
VTA5.11 ± 0.158.25 ± 1.590.070
HC4.32 ± 0.873.19 ± 0.290.095
 Ir LeuArg darajalari
AMY9.67 ± 1.539.47 ± 1.290.928
STR8.69 ± 0.878.87 ± 0.440.875
PFC4.61 ± 0.474.47 ± 0.390.921
VTA8.35 ± 1.046.99 ± 0.420.407
HC4.97 ± 0.503.47 ± 0.410.086
 

 

 

 

4. Munozara

Ushbu izlanish, orexigenic peptidin fiziologik o'rni mukofot tartibga solish o'z ichiga olgan farazini qo'llab-quvvatlaydi. Haqiqatan ham, biz GHS-R1A antagonistining periferik ma'muriyati morfinning lokomotor stimulatsiyaga olib kelishi, NAc dopamin darajasini oshirishi va sichqonlarda konditsioner joy tanlashini kuchaytirishi mumkinligini ko'rsatdik. Bundan tashqari, biz pastki surunkali JMV2959, ammo grelin emas davolanishni davolash VTAda MEAPning, to'qimada hipokampusta DynB va LeuArg ning striatum darajasini oshirganini aniqladik va grifin signalizatsiya kuchini nazorat qilish qobiliyatini opioid peptidlar .

Bu erda keltirilgan ma'lumotlar shuni ko'rsatadiki, GHS-R1A antagonizmi sichqonlarda morfinning mezolimbik dopamin tizimini faollashtirish qobiliyatiga ta'sir qiladi. JMV2959 morfinning akkumbal dopaminning hujayradan tashqari darajasini oshirish va kalamushlarda stereotipli xatti-harakatlarni keltirib chiqarish qobiliyatini blokirovka qilishini ko'rsatadigan xulosalarga muvofiq (Sustkova-Fiserova va boshq., 2014). Qo'llab-quvvatlaydigan bo'lsak, markaziy grelin ma'muriyati sichqonchani o'z-o'zini boshqaradigan geroin tarkibidagi progressiv nisbatlarni kuchaytirish jadvalida faol qo'lni bosish sonini emas, balki to'xtash nuqtasini ko'paytiradi, (Maric va boshq., 2012). Grelin signalining giyohvandlikka asoslanganligi haqidagi tortishuv, JMV2959 ning iste'molni kamaytirishi va kalamushlarda spirtli ichimliklarni iste'mol qilish motivatsiyasini kamaytirishi va amfetamin, kokain va nikotin bilan bog'liq mukofot kemiruvchilardagi GHS-R1A antagonizmi tomonidan bloklanganligini ko'rsatadigan topilmalar bilan tasdiqlanadi ( ko'rib chiqish uchun qarang: Engel va Jerlhag (2014)) va grelin bilan bog'liq genlardagi polimorfizmlar spirtli ichimliklar, chekish va amfetamin iste'mol qilish bilan bog'liq (ko'rib chiqish uchun qarang: Engel va Jerlhag (2014)).

Pastki surunkali JMV2959 davolashdan so'ng striatum, VTA va hipokampusta opioid peptidlarning yuqori darajalariga ega bo'lgan topilmalar opioid peptidlar va grafin signalizatsiyasi o'rtasidagi birinchi marta o'zaro bog'liqlikni ko'rsatadi. Endogen opioidlar nafaqat opioidlar tomonidan emas, balki boshqa suiiste'mollik va tabiiy foyda bilan bog'liq dori-darmonlar va takrorlanadigan dori ta'siridan keyin ko'rilgan adaptiv jarayonlarda (Trigo va boshqalar, 2010, Van Ree va boshqalar, 2000) ta'sirli oqibatlarga olib keladi. Haqiqatan ham, mesolimbik dopamin tizimining faoliyati VTA va NAc (Hirose va boshqalar, 2005, Spanagel va boshqalar, 1992) darajasida ichki endogen opioidlar tomonidan tartibga solinadi va amallar to'g'ridan-to'g'ri yoki bilvosita boshqa transmitterlarni modulyatsiya qilish orqali (Charbogne va boshq., 2014).

Bu erda biz pastki surunkali JMV2959 davolash VTAdagi MEAP darajasini oshirganini aniqladik. MEAP nafaqat proenkepalindan olingan va asosan prostepens peptidlarining markerasi sifatida ishlatilgan, bu asosan d-opioid retseptorlarini faollashtiradi. Biz JMV2959ni davolashdan keyin VTA ichidagi endogen MYAPning ko'payishi darajasining oshishi, morfinning mezoaktsumbal dopamin neyronlari (Jonson va Shimoliy, 1992) ning GABA-inhibisyonunu kamaytirilishiga yo'l qo'ymasligi mumkin, bu keyinchalik quyidagi morfinga bog'liq ta'sirlarni kamaytirishi mumkin JMV2959. Qo'llab-quvvatlovchi, GHS-R1A VTA (Abizaid va boshq., 2006) GABAergic interneuronsda joylashgan. Bundan tashqari, avvalgi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, JMV2959 ning ichki VTA infuziyalari, orqali noma'lum mexanizmlar, grelin keltirib chiqargan mukofotni (Jerlhag va boshq., 2011) hamda kemiruvchilarda grifin vositasida sukroz iste'molini susaytiradi (Skibike va boshq., 2011), mukofotni tartibga solish uchun ventral tegmental GHS-R1A ahamiyatga ega ekanligini bildiradi. Ushbu turdagi kurashni qo'llab-quvvatlash uchun galanin va orexin kabi peptidlarni tartibga soluvchi boshqa ochlikning morfin orqali VTA doirasida mahalliy mexanizmlar (Narita va boshq., 2006, Richardson and Aston-Jones, 2012).

Striatumda biz pastki surunkali JMV2959ning LeuArg darajasini ko'targanini aniqladik, shuning uchun JMV2959ning morfin bilan indulangan konditsioner joyni afzalligini, dopamin salınmasını va lokomotor stimülasyonunu kamaytirish qobiliyatini, hech bo'lmaganda qisman, rivojlangan accumbal d- opioid retseptorlari faolligi. LeuArg darajasining ortishi dynorphin peptidlarning enkepalinlarga yoki Energiyadan chiqarilgan dindan chiqarilishdan yuqori dopaminga javob sifatida ortib borishi va keyinchalik LeuArgga tushishi natijasida enzimatik kontsentratsiyadan kelib chiqishi mumkin. Ilgari o'tkazilgan izlanishlar, mezolimbik dopamin tizimining faoliyati tartibga solinganligini ko'rsatdi orqali NAc'dagi k-opioid retseptorlari (Spanagel va boshq., 1992) va endogen k-opioid retseptorlari mesoakkumal dopamin nörotransmisyonunun tonik inhibisyonunu beradi va NAc'de dopaminin (Chefer va boshqalar, 2005) kokainle indüklenen salınımını kamaytiradi, biz JMV2959 ning striatumda DNB darajasini o'zgartirganligini ko'rsatadi. Shu sababli GHS-R1A antagonizmi va dinorfinlar o'rtasidagi o'zaro ta'sirlarni aniqlash uchun prodynorphin peptidlar bo'yicha keyingi tadqiqotlar kafolatlanadi.

Ushbu ishda JMV2959 davolashda hipokampal DynB darajasini sezilarli darajada oshirganligini ko'rsatdik. Grilin xotira konsolidatsiyasini, shuningdek, dendritik orqa miya shakllanishini oshiradi, uzoq muddatli kuchlanishni keltirib chiqaradi va xotirani osonlashtiradi orqali kemiruvchilarda gipokampal GHS-R1A (Carlini va boshq., 2010, Diano va boshq., 2006). Bundan tashqari, GHS-R1A knockout sichqonchalari Morris suv lageri testida va yovvoyi turdagi sichqonlarga (Albarran-Zeckler va boshqalar, 2012) nisbatan qo'rqinchli paradigmada buzilgan kontekstual xotirada yaxshilangan bo'shliqli xotirani namoyish etadi. Dynfor peptidlar, shu jumladan DynB, hipokampustada ko'pdir va ular uzoq muddatli potensiyalashni kuchaytiradi (Chavkin va boshq., 1985, Wagner va boshq., 1993) va kalamushlarda bo'shliqqa oid ta'limni kamaytiradi (Sandin va boshq., 1998). Shuning uchun GHR-R1A antagonisti hipokampal uzoq muddatli kuchlanishni inhibe qilib mukofotni xotirani kamaytirishi mumkinligini taxmin qilamiz orqali DynB ni faollashtirish. Bu ma'lumotlar JMV2959ning yangi usulini beradi orqali opioid peptidlar mustahkamlashni o'zgartirishi mumkin. Shu bilan birga, opioid retseptorlari miyada keng tarqalgan bo'lib, ushbu tadqiqotga kiritilmagan boshqa sohalar GHS-R1A tomonidan morfinga bog'liq mukofotni tartibga solishi mumkinligini ko'rsatmoqda. Misol uchun, grelin keltirib chiqaradigan oziq-ovqat mahsuloti, shuningdek, sukroz uchun qo'lni bosib olish k-opioid retseptorlari antagonisti (Romero-Pico va boshq., 2013) markaziy yoki ichki hipotalamik usulda kamaytiriladi. Biroq, boshqa sohalarda opioid peptidlarning roli kelgusida olib borilgan tadqiqotlar bilan izohlanishi kerak.

Endogen m-retseptorlari ligandlari, endomorfinlar va beta-endorfin bu erda tahlil qilinmagan, shuning uchun biz ushbu peptidlarga JMV2959ning mumkin bo'lgan ta'sirini istisno qila olmaymiz. Darhaqiqat, morfinning foydali xususiyatlari VTA-da m-opioid retseptorlari va NAc (Hirose va boshqalar, 2005, Johnson and North, 1992, Murakawa va boshqalar, 2004, Yoshida va boshqalar, 1999) ni o'z ichiga oladi. Shu bilan birga, m-retseptorlari antagonisti gri- lin bilan oziqlanadigan oziq-ovqat mahsulotlarini (Naleid va boshq., 2005), gri- lin bilan indikatsiyalangan lokomotor stimulyatsiyani va adumbal dopaminning yo'qolishini (Jerlhag va boshqalar, 2011) kamaytirmaydi, bu GXSR- Yordamni tartibga solish uchun 1A antagonisti m-retseptorlari ichiga kirmaydi. Boshqa tomondan, JMV2959 prokenfalin va prodinorfindan olingan opiyoid peptidlarni GHSR-1A antagonistlari ta'siriga tushib qolishlari mumkinligini ko'rsatdi.

Ilgari o'tkazilgan izlanishlar shuni ko'rsatdiki, sistemali gyrlinni boshqarish uchun mukofot (Jerlhag, 2008) va shuningdek, giyohvand moddalarning foydali xususiyatlarini oshiradi (ko'rib chiqish uchun Engel va Jerlhag (2014) ga qarang), biz bu erda pastki surunkali gurlinli davolanishni o'zgartirmaganligini ko'rsatamiz o'rganilayotgan mukofotlar bilan bog'liq sohalarning har qandayida opioid peptidlarning ir to'qimalarining sathi. Sistemik grafin boshqaruvi gemotoksik va hipokampal joylarda (Pirnik va boshq., 2011) emas, balki glyutenli floresan bilan bog'langan griflinning hipotalamal joylarida c-fos ifodasini faollashtiradi (Schaeffer va boshq., 2013 ). Grifin gipertalamustan kuzatilgan miqdordagi grifinni periferik grafinning administratsiyasidan so'ng chuqur miya joylarida aniqlash mumkin emasligini ko'rsatadigan topilmalar bilan birga olingan (Furness va boshq., 2011, Grouselle va boshqalar, 2008, Sakata va boshqalar, 2009 ), tizimli ghrelin mukofot tizimini faollashtirishi mumkinligini oshiradi orqali endogen opioidlardan mustaqil bevosita mexanizmlar. Grifinning ta'siriga chidamli glamin dopaminini chiqarish yuqori oqim oroxigenik hipotalamusli signallarni talab qiladi (Cone va boshqalar, 2014), periferik grafinning administratsiyasi sichqonlarda spirtli ichimliklarni iste'mol qilishni o'zgartirmaydi (Lyons va boshqalar, 2008) va periferik glyutinni zararsizlantirish spirtli ichimliklarni kamaytirmaydi sichqonchani sichqonchani yoki spirtli ichimliklarni sotib olish bilan mukofotlangan (Jerlhag va boshq., press). Grifinning surunkali surunkali administratsiyasini opioid peptidlarining ir to'qimalarining darajasini oshirishi ehtimoli nazarda tutilishi kerak, ammo bu kelgusi tadqiyotlarda batafsil tekshirilishi kerak.

Qo'shishqoq dori vositalarini rag'batlantirishga, dopaminning chiqarilishiga va konditsioner o'rinlarni afzal ko'rishiga sabab bo'lish qobiliyatli giyohvandlik dorilarining mustahkamlovchi xususiyatlariga bog'liq bo'lib, bu parametrlar giyohvandlik jarayonining bir qismini tashkil qiladi (Wise, 2004). Biz bu yerda JMV2959ning sichqonlardagi ushbu mukofot parametrlarini susayganligini hisobga olib, biz GHS-R1A-ning giyohvandlik jarayonlarida muhim rol o'ynashi mumkinligini va ushbu jarayonlarda endogen opioidlarning mavjudligini taxmin qilamiz. Ushbu ma'lumotlarga ko'ra, GHS-R1A antagonistlari giyohvandlik bilan bog'liqlikni davolashda tushuntirilishi kerak.

Moliyalashtirish manbasining roli

JE va EJ Shvetsiya Tadqiqot Kengashi (Grant No. 2011-4646, 2009-2782 va 2011-4819), Shvetsiya miya fondlari, Sahlgrenska universiteti kasalxonasining LUA / ALF (Grant no. 148251) tomonidan taqdim etilgan grantlar, Alkogol Shved alkogolining chakana monopoliyasi bo'yicha tadqiqot kengashi va Adlerbertska, Fredrik va Ingrid Thuring, Tore Nilsson, Längmanska, Torsten va Ragnar Soderberg, Wilhelm va Martina Lundgren, NovoNordisk, Knut va Elis Vallenberg, Magnus Bergvall, Aner, Jeansons, Åke Wiberg Shvetsiya Tibbiyot Jamiyati, Shvetsiya Tibbiy Tadqiqotlar Jamiyati va Gothenburg Psixiatriya Tadqiqot Fondi. Shvetsiya Spirtli ichimliklar sotish monopoliyasi va Shvetsiyaning Tadqiqot Kengashi (K2012-61X-22090-01-3) spirtli ichimliklar tadqiqotlari kengashi tomonidan IN. Moliyalashtirish manbalari tadqiqotni loyihalashda, ma'lumotlarni to'plashda, tahlil qilishda va sharhlashda, hisobotni yozishda va ma'lumotlar nashr etishda qaror qabul qilishda roli yo'q edi

 

 

 

Yozuvchilar

JAE tadqiqotni yaratdi va qo'lyozma-ni yozdi. Ishda qo'llarni bajargan qismini tahlil qilib, qo'lyozma yozdi. EJ tadqiqotni ishlab chiqdi, protokolni yozdi, adabiyotlarni qidirishni boshladi, tahlil qildi va statistik tahlilni o'tkazdi va qo'lyozmaning birinchi loyihasini yozdi. Barcha mualliflar yakuniy qo'lyozmani tasdiqlashdi va tasdiqladilar.

 

 

 

 

Qiziqishlik to'qnashuvi

EJ, Novo Nordisk fondi tomonidan moliyaviy yordam oldi. Bu ma'lumotlar mualliflik materiallari va materiallarini almashish uchun jurnal siyosatining har qanday turiga rioya qilinishini o'zgartirmaydi. Qolgan mualliflar hech qanday manfaatlar to'qnashuvini e'lon qilmaydi.

 

 

Rahmatlar

Britt-Mari Larsson, Kenn Johannessen, Qin Zhou va Lova Segerström minnatdorchilik bilan ekspert va qimmatli texnik yordam uchun tan olingan. GHS-R1A antagonisti JMV2959ni "Æterna Zentaris" kompaniyasi etkazib berdi. Jean Martinez va doktor Jan-Alain Fehrentz JMV2959 sintezi uchun tan olingan

 

Manbalar

  1. , Abduxid, A., Liu, ZW, Andrews, ZB, Shanabrough, M., Borok, E., Elsworth, JD, Roth, RH, Sleeman, MW, Picciotto, MR, Tschop, MH, Gao, XB va Horvath, Sh.b. Grelin midbrain dopamin neyronlarining faoliyatini va sinaptik kiritishni tashkil qiladi, bu ishtahani oshiradi. J. Klin. Tadqiq. 2006; 116: 3229-3239
  2. Albarran-Zekkler, RG, Brantley, AF va Smit, RG Growth gormon secretagogue receptor (GHS-R1a) knockout sichqonlari rivojlangan bo'shliq xotirasi va kontekstli xotirada defitsitlarni namoyish etadi. Behav. Brain Res. 2012; 232: 13-19
  3. Maqolada ko'rish 
  4. Maqolada ko'rish 
  5. Maqolada ko'rish 
  6. Maqolada ko'rish 
  7. Maqolada ko'rish 
  8. Maqolada ko'rish 
  9. Maqolada ko'rish 
  10. Maqolada ko'rish 
  11. Maqolada ko'rish 
  12. Maqolada ko'rish 
  13. Maqolada ko'rish 
  14. Maqolada ko'rish 
  15. Maqolada ko'rish 
  16. Maqolada ko'rish 
  17. Maqolada ko'rish 
  18. Maqolada ko'rish 
  19. Maqolada ko'rish 
  20. Maqolada ko'rish 
  21. Maqolada ko'rish 
  22. Maqolada ko'rish 
  23. Maqolada ko'rish 
  24. Maqolada ko'rish 
  25. Maqolada ko'rish 
  26. Maqolada ko'rish 
  27. Maqolada ko'rish 
  28. Maqolada ko'rish 
  29. Maqolada ko'rish 
  30. Maqolada ko'rish 
  31. Maqolada ko'rish 
  32. Maqolada ko'rish 
  33. Maqolada ko'rish 
  34. Maqolada ko'rish 
  35. Maqolada ko'rish 
  36. Maqolada ko'rish 
  37. Maqolada ko'rish 
  38. Maqolada ko'rish 
  39. Maqolada ko'rish 
  40. Maqolada ko'rish 
  41. Maqolada ko'rish 
  42. Maqolada ko'rish 
  43. Maqolada ko'rish 
  44. Maqolada ko'rish 
  45. Maqolada ko'rish 
  46. Maqolada ko'rish 
  47. Maqolada ko'rish 
  48. Carlini, VP, Perez, MF, Salde, E., Schioth, HB, Ramirez, OA va ham Baroglio, SR Grilinning xotira yordamini kamaytirishi nitrat oksidli sintaz aktivatsiyasini aks ettiradi va hipokampal dentat girusda LTPni qo'llab-quvvatlash uchun pol qiymatini kamaytiradi. Physiol. Behav. 2010; 101: 117-123
  49. Charbogne, P., Kieffer, BL va Befort, K. 15 yil davomida giyohvandlik tekshiruvi uchun in vivo genetik yondashuvlar: giyohvand moddalarni suiiste'mol qilish modelidagi opioid retseptorlari va peptid gen protokoli. Neyrofarmakologiya. 2014; 76: 204-217
  50. Chavkin, S, Shoemaker, WJ, McGinty, JF, Bayon, A. va Bloom, FE Sichqoncha hippokampusida prodynorphin va proenkephinal neuropeptide tizimlarining xarakteristikasi .. J. Neurosci. 1985; 5: 808-816
  51. Chefer, VI, Czyyk, T., Bolan, EA, Moron, J., Pintar, JE va Shippenberg, TS Endogen kappa-opioid retseptorlari tizimlari mezoakmumbal dopamin dinamikasini va giyohga zaiflikni nazorat qiladi. J. Neurosci. 2005; 25: 5029-5037
  52. Cone, JJ, McCutcheon, JE va Roitman, MF Grilin fiziologik holat va fosik dopamin signalizatsiyasi orasidagi interfeys vazifasini bajaradi. J. Neurosci. 2014; 34: 4905-4913
  53. De Vries, TJ va Shippenberg, TS Oshqozon giyohvandlikning asoratlari. J. Neurosci. 2002; 22: 3321-3325
  54. Diano, S., Farr, SA, Benoît, SC, McNay, EC, da Silva, I., Horvath, B., Gaskin, FS, Nonaka, N., Jaeger, LB, Banks, WA, Morley, JE, Pinto , S., Sherwin, RS, Xu, L., Yamada, KA, Sleeman, MW, Tschop, MH va Horvath, sh.b. Grilin hipokampal o'pka sinapsining zichligi va xotira ko'rsatkichlarini nazorat qiladi. Nat. Neurosci. 2006; 9: 381-388
  55. Egjioglu, E., Skibikka, KP, Hansson, C., Alvarez-Crespo, M., Friberg, PA, Jerlhag, E., Engel, JA va Dickson, SL Tana vaznini nazorat qilish uchun Hedonik va rag'batlantiruvchi signallar. Rev. Endocr. Metab. Buzilib qolish. 2011; 12: 141-151
  56. Engel, JA va Jerlhag, E. Alkogolizmning patofizyologiyasida ichak-miya gormonlarining ahamiyati: farmakoterapiya uchun oqibatlar. CNS preparatlari. 2014; 28: 875-886
  57. Franklin, KBJ va Paxinos, G. Stereotaksik koordinatlardagi sichqoncha miyasi. Academic Press, San-Diego; 1997
  58. Furness, JB, Hunne, B., Matsuda, N., Yin, L., Russo, D., Kato, I, Fujimiya, M., Patterson, M., McLeod, J., Andrews, ZB va Bron , R. Sichqoncha va sichqon markaziy asab tizimida grielle borligini tekshirish. Neuroscience. 2011; 193: 1-9
  59. Grouselle, D., Chaillou, E., Carati, A., Bluet-Pajot, MT, Zizzari, P., Tillet, Y. va Epelbaum, J. Pulsatil serebrospinal suyuqlik va plazma glyutinasi o'sish gormoni sekretsiyasi va qo'ylarda oziq-ovqat iste'mol qilish bilan bog'liq. J. Neuroendokrinol. 2008; 20: 1138-1146
  60. Hirose, N., Murakawa, K., Takada, K., Oi, Y., Suzuki, T., Nagase, H., Cools, AR va Koshikawa, N. Mu-va delta-opioid retseptorlari, ayniqsa delta1- va delta2-opioid retseptorlari o'rtasidagi o'zaro bog'liqlik, yadrodagi akumbenslarda dopaminning tarqalishini ta'minlaydi. Neuroscience. 2005; 135: 213-225
  61. Jerlhag, E. Grifinani tizimli ravishda yuborish konditsioner o'rinlarni afzal ko'radi va aqlli dopaminni rag'batlantiradi. Addict. Biol. 2008; 13: 358-363
  62. Jerlhag, E., Egecioglu, E., Dickson, SL va Engel, JA Mezolimbik dopamin tizimining grielle-inaktivlashtirilgan faollashuvi glutamaterjik regulyatsiyasi. Addict. Biol. 2011; 16: 82-91
  63. Jerlhag, E., Egecioglu, E., Landgren, S., Salome, N., Heilig, M., Moechars, D., Datta, R., Perrissoud, D., Dickson, SL va Engel, JA Spirtli mukofot uchun markaziy grelin signalizatsiyasi talabi. Proc. Natl. Akad. Sci. AQSH. 2009; 106: 11318-11323
  64. Jerlhag, E., Ivanoff, L., Vater, A. va Engel, JA Periferik aylanib yuruvchi gurlin kemiruvchilarda spirtli ichimliklarni to'ldirish va spirtli ichimliklarni sotib olishga vositachilik qilmaydi. Spirtli ichimliklar. Klinik. Exp. Res. 2014; 38: 959-968
  65. Johnson, SW va Shimoliy, RA Opioidlar mahalliy internöronlarning hiperpolarizatsiyasi bilan dopamin neyronlarini chaqiradilar. J. Neurosci. 1992; 12: 483-488
  66. Kojima, M., Hosoda, H., DATE, Y., Nakazato, M., Matsuo, H. va Kangawa, K. Grifin - oshqozondan o'sadigan gormonni chiqaruvchi ochiltirilgan peptid. Tabiat. 1999; 402: 656-660
  67. Koob, GF va Le Moal, M. Giyohvandlik, mukofotni bekor qilish va allostaz. Nöropsikofarmakol. Yopiq. Publ. Bilaman. Kol. Nöropsikofarmakol. 2001; 24: 97-129
  68. Lyons, AM, Lowery, EG, Sparta, doktor va Thiele, TE Oziq-ovqatning mavjudligi va orejen va anorektsiyali vositalarning qorong'u jarayonlarda ichish bilan bog'liq bo'lgan etanolli ichimliklarni suyuqlikga ta'siri. Spirtli ichimliklar. Klinik. Exp. Res. 2008; 32: 1962-1968
  69. Marik, T., Sedki, F., Ronfard, B., Chafetz, D. va Shalev, U. Grapin o'z-o'zini boshqarish va oziq-ovqatdan mahrum qilishda grifin uchun cheklangan rolik - kalamushlarda izlab topilgan geroinni qayta tiklash. Addict. Biol. 2012; 17: 613-622
  70. Morganstern, I., Barson, JR va Leibovits, SF Shu kabi peptidli tizimlar orqali dori-darmonlarni va mazali ovqatni ortiqcha iste'mol qilishni tartibga solish. Curr. Giyohvandlik. Rev. 2011; 4: 163-173
  71. Murakava, K., Xirose, N., Takada, K., Suzuki, T., Nagase, H., Cools, AR va Koshikava, N. Deltorfin II opioid retseptorlari bilan mustaqil mexanizmlar orqali yadrodagi akumbensdagi dopaminning hujayra tashqari darajasini oshiradi. Yevro. J. Pharmacol. 2004; 491: 31-36
  72. Naleid, AM, Grace, MK, Cummings, Dey va Levine, AS G'relin ventral tegmental hududi va yadro gumbazlari o'rtasidagi mesolimbik mukofot yo'lida ovqatlanishga sabab bo'ladi. Peptidlar. 2005; 26: 2274-2279
  73. Narita, M., Nagumo, Y., Hashimoto, S., Narita, M., Xotib, J., Miyatake, M., Sakurai, T., Yanagisawa, M., Nakamachi, T., Shioda, va Suzuki, T. Mezolimbik dopamin yo'lini faollashtirishda orexinergik tizimlarning bevosita ishtiroki va morfin bilan bog'liq bo'lgan xatti-harakatlar. J. Neurosci. 2006; 26: 398-405
  74. Nestler, EJ Narkomaniya uchun umumiy molekulyar yo'l bormi? Nat. Neurosci. 2005; 8: 1445-1449
  75. Nylander, I., Stenfors, C., Tan-No, K., Mathe, AA va Terenius, L. Mikroto'lqinli nurlanish va dekapitatsiya o'rtasidagi taqqoslash: dynorphin va enkefalinning bazal darajasi va surunkali morfinni davolashning dynorphin peptidlariga ta'siri. Neyropeptidlar. 1997; 31: 357-365
  76. Pirnik, Z., Bundzikova, J., Holubova, M., Pychova, M., Fehrents, JA, Martinez, J., Zelezna, B., Maletinska, L., Kiss. Grilin agonistlari erkak C57BL / 6 sichqonlarida ovqatni iste'mol qilishni tartibga solish bilan bog'liq miya joylarida Fos protein ekspresyoniga ta'sir qiladi. Neurochem. Int. 2011; 59: 889-895
  77. Richardson, KA va Aston-Jones, G. Ventral tegmental hududni loyihalash uchun qo'llanadigan yanal hipotalamik oreksin / gipokretin neyronlar morfin afzalligi bilan ajralib turadi. J. Neurosci. 2012; 32: 3809-3817
  78. VVazquez, MJ, Gonsalez-Touceda, D., Folgueira, C., Skibike, KP, Alvarez-Crespo, M., Van Gestel, MA, Velasquez, DA, Schwarzer, C. Herzog, H., Lopez, M., Adan, RA, Dickson, SL, Dieges, S va Nogueiras, R. Gipotalamusli kappa-opioid retseptorlari grifin oreksigenik ta'sirini modulyatsiya qiladi. Nöropsikopxarmakol. Yopiq. Publ. Bilaman. Kol. Nöropsikofarmakol. 2013; 38: 1296-1307
  79. Sakata, I., Nakano, Y., Osborne-Lawrence, S., Rovinski, SA, Lee, CE, Perello, M., Anderson, JG, Copparari, R., Xiao, G., Louell, BB, Elmquist, JK va Zigman, JM Yangi grafin hujayra muxbiri sichqonlarining xarakteristikasi. Regul. Pept. 2009; 155: 91-98
  80. Sandin, J., Nylander, I., Georgieva, J., Schott, PA, Ogren, SO va Terenius, L. Gipokampal dynorphin B in'ektsiyasi kaltsiylarda opeoid retseptorlari vositasida ta'sir ko'rsatadi. Neuroscience. 1998; 85: 375-382
  81. Schaeffer, M., Langlet, F., Lafont, C., Molino, F., Hodson, DJ, Roux, T., Lamarque, L., Verdie, P., Bourrier, E., Dehouck, B., Baneres , JL, Martinez, J., Meri, PF, Marie, J., Trinquet, E., Fehrents, JA, Prevot, V va Mollard, P. Hipotalamik ishtahani o'zgartirish neyronlari orqali grafinni tez aylanish. Proc. Natl. Akad. Sci. AQSH. 2013; 110: 1512-1517
  82. Skibike, KP, Hansson, C., Alvarez-Crespo, M., Friberg, PA va Dickson, SL Grelin oziq-ovqatni rag'batlantirish uchun to'g'ridan-to'g'ri ventral tegmental maydonini aniqlaydi. Neuroscience. 2011; 180: 129-137
  83. Spanagel, R., Herz, A., va Shippenberg, TS Tonik faol endogen opioid tizimlarga qarshi turish mezolimbik dopaminerjik yo'lni modulyatsiya qiladi. Proc. Natl. Akad. Sci. AQSH. 1992; 89: 2046-2050
  84. Sustkova-Fiserova, M., Jerabek, P., Havlickova, T., Kajer, P. va Kritsak, M. Grilin retseptorlari antibiotiklaridan morfin bilan uyg'unlashtirilgan akumbenslarda dopaminning tarqalishi va kalamushlarda qiziqish uyg'otishi. Psixofarmakologiya. 2014; 231: 2899-2908
  85. Trigo, JM, Martin-Garcia, E., Berrendero, F., Robledo, P. va Maldonado, R. Endogen opioid tizimi: giyohvandlikda umumiy substrat. Giyohvand moddalarga qaramlik. 2010; 108: 183-194
  86. Tschop, M., Smiley, DL va Heiman, ML G'relin kemiruvchilarda semizlikni keltirib chiqaradi. Tabiat. 2000; 407: 908-913
  87. Van Ree, JM, Niesink, RJ, Van Wolfswinkel, L., Ramsey, NF, Kornet, MM, Van Furth, WR, Vanderschuren, LJ, Gerrits, Ma va Van dan Berg, CL Endogen opioidlar va mukofot. Yevro. J. Pharmacol. 2000; 405: 89-101
  88. Wagner, JJ, Terman, GW va Chavkin, C. Endogen dynorphins hippokampusda eksitatori nörotransmission va LTP induksiyasini inhibe qiladi. Tabiat. 1993; 363: 451-454
  89. Hikmatli, RA Dopamin, o'rganish va turtki. Nat. Rev. Neurosci. 2004; 5: 483-494
  90. Wise, RA va Bozarth, Ma Narkomaniyaning psixomotor stimulyatori nazariyasi. Psychol. Rev. 1987; 94: 469-492
  91. Yoshida, Y., Koide, S., Xirose, N., Takada, K., Tomiyama, K., Koshikava, N. va Cools, AR Fentanil sichqonchani yadrosidagi akumbenslarda dopaminning tarqalishini oshiradi: mesolimbik mu va delta-2-opioid retseptorlari ishtiroki. Neuroscience. 1999; 92: 1357-1365