Grelinning oziq-ovqat mukofoti va qabul qilish ta'siri asosidagi divergent elektronlar: dopaminerjik VTA-akumbens proektsiyasi Grelinning oziq-ovqat mukofotiga ta'sirini anglatadi, ammo oziq-ovqat iste'mol qilinmaydi (2013)

Kalit so'zlar,

• Ghrelin;
• Oziq-ovqat motivatsiyasi;
• Oziq-ovqat iste'mol qilish;
• Overeating;
• Operatsion shamollatish;
• Dopamin;
• D1;
• D2

1. kirish

Grafinli grafin va uning faoliyat yuritadigan neyron sxemalari semirish va ishtahani nazorat qilish nuqtai nazaridan yaxshi o'rganiladi (Skibik va Dikson, 2011), ushbu kasallik sohasidagi terapevtik imkoniyatlarning sababi (Kardona Kano va boshq., 2012). Grifin oziqlantiruvchi peptidlar orasida noyobdir, chunki u oziq-ovqat mahsulotini ko'paytiradi (Wren va boshq., 2000, Inui, 2001, Shintani va boshq., 2001 va Kojima va Kangawa, 2002) maxsus retseptorlari vositasida CNS ta'siri, GHS-R1A (Salome va boshq., 2009 va Skibicka va boshq., 2011 yil), xususan, "homeostatik oziqlantirish" (masalan, energiya tanqisligi bilan bog'liq oziqlantirish), gipotalamus va miya sindromiMelis va boshq., 2002, Faulconbridge va boshq., 2003 y va Olszewski va boshq., 2003 y). Biroq, so'nggi paytlarda, bu gomeostatik hududlardan tashqarida grellin roli paydo bo'ldi. GHS-R1A shuningdek, mezolimbik mukofot tizimining asosiy tugunlarida, masalan, ventral tegmental hududi (VTA) va yadro akumbenslari (NAc) (Zigman va boshq., 2006 y va Skibicka va boshq., 2011 yil), shuningdek, "hedonik oziqlantirish" (ya'ni, oziq-ovqat iste'mol qilish uning foydali xususiyatlari bilan birlashtirilgan) bilan bog'langan rag'batlantiruvchi harakatlarga aloqador joylardir. Grelin bu ikki saytdan oziq-ovqat mahsulotlarini iste'mol qila oladi va bu ta'sir, ehtimol, oziq-ovqat mahsulotlarining rag'batlantiruvchi va rag'batlantiruvchi darajasini oshirishga qaratilgan harakatlar bilan bog'liq bo'lishi mumkin (Naleid va boshq., 2005 yil, Abizaid va boshq., 2006 y va Skibicka va boshq., 2011 yil). Shunday qilib, to'liq to'yimli kalamushlarda yoki sichqonchalarda grafin periferal yoki markaziy usulda qo'llaniladi (jumladan, bevosita VTA ga) oziq-ovqat mahsulotlarini ko'paytirish va oziq-ovqat mukofotini olishNaleid va boshq., 2005 yil, Perello va boshq., 2010, Skibicka va boshq., 2011 yil va Skibicka va boshq., 2012b), masalan, ishchi jadvali progressiv nisbatlarda shakarni mukofotlash uchun qo'lni bosishni kuchaytirish orqali aks ettirilgan. Bu ish nafaqat oziq-ovqat uchun, balki spirtli ichimliklar va giyohvand moddalarni iste'mol qilish uchun mukofotni oshirish uchun mezolimbik mukofot tizimidagi grelin uchun paydo bo'lgan rolni aks ettiradi (Dikson va boshq., 2011 y). Eng muhimi, grifinning oziq-ovqatni rag'batlantirishga ta'siri doyimiy belgilarga to'sqinlik qiladi, chunki grifin go'shtli hayvonlarda oziq-ovqat mukofotini xatti-harakatni oziq-ovqat mahsulidan farq qiladigan darajaga teng darajaga keltiradi. Bundan tashqari, grafin signallarining bloklanganligi, faqat VTA ichida tizimli ravishda emas, balki tanlanganSkibicka va boshq., 2011 yil), oziq-ovqat mukofoti harakati kuchli bostirilishiga olib keladigan natijalar oziq-ovqat mukofotida grifin signalining ahamiyati va zarurligini ko'rsatmoqda.

VTA darajasidagi Grelin harakati oziq-ovqat mahsulotlarini iste'mol qilish va rag'batlantiruvchi xatti-harakatlarni amalga oshirish uchun kifoya qiladi, GHS-R1A (Abizaid va boshq., 2006 y va Skibicka va boshq., 2011 yil). Ajablanarlisi shundaki, VTA-da Grelinning mukofotni targ'ib qiluvchi harakatlarining quyi oqimlari hal qilinmagan. VTA ichida grelin opioid, NPY va GABAergik signalizatsiya bilan shug'ullanadi (Abizaid va boshq., 2006 y va Skibicka va boshq., 2012a). Shunga qaramasdan, glyca reseptorlarini ifodalash uchun ilgari ko'rsatilgan VTA dopamin neuronlariAbizaid va boshq., 2006 y), grelinning oziq-ovqat mukofotiga ta'siri uchun so'nggi VTA maqsadi bo'lishi mumkin. Yoqimli / foydali oziq-ovqatlar VTA dopamin neyronlari va dopamin signalini NAc kabi tanlangan CNS sohalarida jalb qiladi va shu bilan oziq-ovqat mukofotlash harakatlarini rag'batlantiradi (Hernandez va Hoebel, 1988 va Yusuf va Hodges, 1990). Shunga qaramasdan, dopaminning ajralib chiqishi oziq-ovqat uchun rag'batlantiruvchi xatti-harakatlar bilan kuchli bog'liqligi bilan birga, dopaminning ochlikdan o'limini sintez qila olmaydigan sichqonlar kabi asosiy oziqlantirish uchun ham zarurCannon va boshq., 2004). Grelin va dofamin o'rtasidagi funktsional bog'liqlik, grelinning VTA dopamin neyronlarining faolligiga ta'siri va shuningdek, buzilmagan VTA dopaminerjik neyronlarning grelinning oziq-ovqat mukofotiga ta'siri uchun zarurligi (Abizaid va boshq., 2006 y va Vaynberg va boshq., 2011 y). Biroq, VTA dopamin neyronlari bir qator saytlarni loyihalashtiradi va grafinning VTA tomonidan boshqariladigan ta'siri oziq-ovqatga asoslangan xulq-atvorda NAcdagi dopamin signalizatsiyasi zarurmi yoki yo'qligi aniqlanmagan. Bundan tashqari, grifin oziq-ovqat iste'mol qilish yoki g'ayratlardan tashqari xatti-harakatlarning nazorati bilan shug'ullanadi, ya'ni yangilikni izlash, NAc da dopamin salınmasınaBardo va boshq., 1996 va Hansson va boshq., 2012).

Ushbu ishda, ghrelin'in VTA darajasida qo'llaniladigan oziq-ovqat maqsadi va / yoki oziq-ovqat iste'moliga ta'siri, NAc'de dopamin reseptörü sinyalinin kerakligini varsayımını sinov qildik. Shu maqsadda VTA ghrelin tomonidan oziq-ovqat iste'mol qilish va oziq-ovqatni rag'batlantirish harakati bir vaqtning o'zida NAc dopamin signalizatsiyasi blokirovkasi bilan birga sukroz paradigmasi uchun progressiv nisbatlarda baholandi. Alohida izlanishlarda dopamin 1 (D1) ning retseptorlari va dopamin 2 retseptorlari (D2) singari shaxsiy hissasini sinab ko'rdik. Bundan tashqari, endogen glyutin NAc dopamin signaliga hissa qo'shish uchun ushbu dopamin retseptorlari ochlik asosida oziq-ovqat mukofotini yaxshilashda rol o'ynaydimi yoki yo'qligini aniqladik. Va nihoyat, NAc dopamin signallarida endogen ghrelinning molekulyar natijalarini baholash uchun ochlik / oziq-ovqat mahrumligining NAc dopaminli retseptorlari va fermentlarining mRNA ekspansiyasiga ta'sirini aniqladik.

2. Materiallar va uslublar

Hayvonlar: Sprague-Dawley kattalar erkak kalamushlari (200-250 g, Charlz daryosi, Germaniya) 12 soatlik yorug '/ qorong'i tsiklda (soat 6 da yonadi) doimiy chov va suv bilan ta'minlangan ad libitum ularning uy qafalarida. Barcha chorvachilik usullari axloqiy jihatdan ruxsat berilgan va Gothenburg Institutional Animal Care va Foydalanish qo'mitasi ko'rsatmalariga asosan amalga oshirildi.

jarrohlik: Xulq-atvorni o'rganishdagi barcha kalamushlarga hidoyat kanülü (26 o'lchov; Plastics One, Roanoke, VA) joylashtirildi, VTA va NAc qobig'ini keyingi bir tomonlama, ipsilateral in'ektsiyalar uchun yo'naltirdi. Ketamin anesteziyasi ishlatilgan. Kanulalar nishon joyidan 1.5 mm balandlikda joylashtirildi va mikro enjeksiyonlar uchun hidoyat kanüllerinden 1.5 mm uzaygan injektor ishlatildi. VTA-ni nishonga olish uchun quyidagi koordinatalar tanlangan Skibicka va boshq. (2011): O'rta chiziqdan ± 0.75, orqa tomondan 5.7 mm va bosh suyagi yuzasidan 6.5 mm ventral, enjektor bilan bosh suyagiga 8.0 mm. NAc qobig'i uchun quyidagi koordinatalar ishlatilgan (dan o'zgartirilgan Quarta va boshq. (2009): O'rta chiziqdan ± 0.75, bregmadan 1.7 mm old va bosh suyagiga 6.0 mm ventral, enjektor 7.5 mm ventralga yo'naltirilgan). Kanulalar bosh suyagiga tish akril tsement va zargar vintlari bilan biriktirilgan va ilgari aytilganidek obturator bilan yopilgan (Skibicka va boshq., 2009 yil). Barcha kalamushlarda, VTA va NAc uchun mikroinjektsiya joyi o'limdan so'ng, tadqiqot davomida ishlatilgan bir xil mikroinjeksiyon hajmida (0.5 mkl) hindiston siyohini mikroinjektsiya qilish yo'li bilan tekshirildi. Faqat to'g'ri joylashtirilgan mavzular (Shakl) ma'lumotlar tahliliga kiritildi.

2.1. Operatsion shartnoma jarayoni

Operantni konditsionerlash tajribalari kalamush operantli konditsioner kameralarida bo'lib o'tdi (30.5 × 24.1 × 21.0 sm; Med-Associates, Jorjiya, VT, AQSh). Operantni konditsionerlashtirish uchun ishlatiladigan mashg'ulotlar tartibi avvalgi tadqiqotlarga moslashtirildi (la Fler va boshq., 2007 va Hansson va boshq., 2012). Sukroz uchun operativ mashg'ulotlarni engillashtirish uchun barcha kalamushlar oziq-ovqat mahsulotlarining engil cheklanishiga duch kelishdi, bu davrda ularning tana og'irligi bir hafta davomida asta-sekin 90% gacha kamaytirildi. Operant qutilariga joylashtirishdan oldin, kalamushlar kamida ikki marta uy qafasi muhitida saxaroza pelletlari (45 mg sukroz pelletlari; test Diet, Richmond, IN, AQSh) bilan ta'sirlangan. Keyinchalik, kalamushlar kuniga 1 seans bilan belgilangan FR2 jadvali bo'yicha sukroz pelletlari uchun pressni ishlatishni o'rgandilar. FR1da faol qo'lni bir marta bosish natijasida bitta saxaroza pelleti etkazib berildi. Barcha FR mashg'ulotlari 30 minut davom etdi yoki kalamushlar 50 ta granulani topguncha, qaysi biri birinchi bo'lib sodir bo'lgan bo'lsa. Ko'pgina kalamushlar 50-5 kundan so'ng har bir seans mezoniga ko'ra 7 ta granulaga erishdilar. Faol bo'lmagan ushlagichdagi bosmalar yozib olingan, ammo dasturlashtirilgan natijasi bo'lmagan. FR1 jadvali sessiyalaridan keyin FR3 va FR5 (ya'ni har bir dona uchun 3 va 5 marta bosish) kuzatildi. Sichqoncha mukofot olishga tayyor bo'lgan ish hajmini aniqlash uchun FR5 jadvalidan so'ng har bir keyingi mukofot uchun mukofot narxi asta-sekin oshirilib boriladigan progressiv koeffitsient (PR) jadvali kuzatildi. Javobga bo'lgan talab quyidagi tenglamaga muvofiq oshdi: javob nisbati = (5e (0.2 × infuziya raqami)) - 5 quyidagi qatorlar orqali: 1, 2, 4, 9, 12, 15, 20, 25, 32, 40, 50 , 62, 77, 95, 118, 145, 178, 219, 268, 328. PR sessiyasi sichqon 60 minut ichida mukofot ololmagach tugadi. Bir seansda olingan oziq-ovqat pelletlari soni ketma-ket uchta seans davomida 15% dan farq qilmasa, javob berish barqaror deb hisoblanadi. Ko'pgina hollarda, javob 5 sessiya davomida barqarorlashdi. Ushbu vaqt ichida talab qilingan mezonlarga etib bormagan kalamushlar qo'shimcha mashg'ulotlarda o'qitildi. PR-test kuniga 1 seansda o'tkazildi. Keyin kalamushlar uy xujayralariga 1 soatlik xov iste'mol qilishni o'lchash uchun o'tkazildi. Trening oxirida va operatsiya va sinovdan oldin kalamushlar bor edi ad libitum Oddiy choyga kirish.

2.2. Giyohvand moddalar

Asilatlangan kalamush grelin (Tocris, Bristol, Buyuk Britaniya) VTA ga 1.0 mkg dozada sun'iy miya omurilik suyuqligi (aCSF) bilan vosita (va boshqaruv) sifatida yuborildi. 1.0 mggrelin dozasi ilgari shakarga operativ ta'sirini kuchaytirishi va VTA ga etkazib berilganda oreksigenik ta'sirni keltirib chiqarishi ko'rsatilgan (Naleid va boshq., 2005 yil va Skibicka va boshq., 2011 yil). D1-shunga o'xshash retseptorlari antagonisti, SCH-23390, NAc ga 0.3 mkg (Tokris) dozasida kiritildi, aCSF vosita sifatida (boshqaruv). Oziq-ovqat mahsulotlarini mahrum qilishni o'rganish uchun dastlabki 0.5 mg dozada ta'sir etishmasligi sababli doz 0.3 mg ga ko'tarildi. SCH-23390 D1 ga o'xshash dopamin retseptorlari uchun D1000 o'xshash dopamin retseptorlari uchun D1 o'xshashligi uchun 2 barobar yaqinligi bo'lgan kuchli va selektiv antagonistdir (Barnett va boshq., 1986 y). D1 va D5 retseptorlari uchun o'xshashligi bor (Barnett va boshq., 1992 y) shuning uchun o'rganish davomida biz D1 ga o'xshash retseptorlarni blokirovka qilish qobiliyatiga murojaat qilamiz, bu atama D1 va D5 retseptorlarini qamrab oladi. SCH-0.3 ning boshlang'ich 23390 mkg dozasi (asosida) tanlanganGrimm va boshq., 2011 y). NAc qobig'iga yuborilgan ushbu doz faol bo'lmagan qo'lda ishlashga ta'sir qilmasdan, sukroz eritmasi etkazib berilgunga qadar bog'langan tayoqcha uchun qo'lni bosishni kamaytirishda samarali ekanligi ko'rsatilgan. Dopamin D2 retseptorlari antagonisti, etikloprid gidroxloridi (Tokris), transport vositasi (boshqaruv) sifatida aCSF bilan NAc ga kiritildi. Tanlangan etiklopridning boshlang'ich dozasi (1.0 mkg) (Laviolette va boshq., 2008), ammo oziq-ovqatdan mahrum qilish tadqiqotida 1.5 mkg ga oshirildi. Barcha dorilar 0.5 ml aCSF hajmida etkazib berildi.

2.3. Eksperimental dizayn

Barcha kalamushlarga yorug'lik tsiklining boshida NAc va VTA yo'naltirilgan in'ektsiyalar kiritildi, ikkinchi in'ektsiya operant sinovlari boshlanishidan 10 minut oldin. Barcha sharoitlar kamida 48 soat bilan ajratilgan va muvozanatli usulda ishlagan, shunda har bir kalamush to'rt shartni qabul qilgan: birinchi vosita yoki dopamin retseptorlari antagonisti NAc ga, so'ngra 10 daqiqadan so'ng VTA ga transport vositasi yoki grelin. Har bir kalamush uchun ipsilateral VTA va NAc yo'naltirildi. Har bir tajribaning tafsilotlari ham tasvirlangan Shakl.

2.3.1. D1-shunga o'xshash retseptor blokadasining grifin asosida oziq-ovqat mukofotiga ta'siri va chov sotib olish

Javoblar maqsadli VTA va NAc (n = 12-14) quyidagi to'rtta shartdan keyin dori-darmonlarni etkazib berish: 1) nazorat holati (transport vositalarining NAc va VTA ga bo'lgan eritmalari), 2) NAc avtotransport vositasi + VTA 1.0 mg grelin, 3) NAc 0.3 mkg SCH-23390 + VTA vositasi, 4 ) NAc 0.3 mkg SCH-23390 + VTA 1.0 mg grelin. Sinovlar to'yingan holatda o'tkazildi (qorong'u tsikl davridan keyin). Eksperimental kunlarda kalamushlar 120 daqiqalik operant sinovidan so'ng uy qafaslariga qaytarildi va 1 soat davomida uy qafasi muhitida chov iste'mol qilish o'lchandi (1 jadvalda bo'lgani kabi, Shakl). Vaqtli nuqta VTA grelina qarshi o'tkazilgandan keyin uchinchi soatga to'g'ri keladi va bu jarayon davomida glyutinning vaqt oralig'ini o'rganib chiqadigan, markazda yoki periferal (yoki grafin) Wren va boshq., 2000 va Faulconbridge va boshq., 2003 y) va shunga o'xshash eksperimental tizimni ishlatgan avvalgi tadqiqotlarimiz.

2.3.2. D2 retseptorlari blokadasining grelin keltirib chiqaradigan oziq-ovqat mukofotiga ta'siri va chov sotib olish

Javoblar maqsadli VTA va NAc (n = 7) dori-darmonlarni quyidagi to'rt sharoitda etkazib berish: 1) nazorat holati (transport vositalarining NAc va VTA-ga eritmalari), 2) NAc transport vositasi + VTA 1.0 mgg grelin, 3) NAc 1 mg etikloprid gidroxloridi + VTA vositasi, 4) NAc 1 mg etikloprid gidroxloridi + VTA 1.0 mg grelin. Sinovlar to'yingan holatda o'tkazildi (qorong'u tsikl davridan keyin). Sichqonlar 120 minlik operant sinovidan so'ng uy kataklariga qaytarildi va chov iste'mol qilish uy qafasi muhitida 1 soat davomida o'lchandi (jadval 1da bo'lgani kabi, Shakl) chunki grelin vositachiligida orexigenik ta'sir chow pelletlari (2 soatdan keyin) joylashtirilganidan keyin ham mavjud.

2.3.3. D1-shunga o'xshash va D2 retseptorlari blokadasining (alohida yoki kombinatsiyalangan) ta'siri faqatgina grafinni chaqirgan chov sotib olishga ta'sir qiladi

Oldingi eksperimentlarda chov iste'mol qilish natijasida olingan natijalar operant paradigmasidagi sukrozga oldindan ta'sir qilish yoki 2 soat kechikish bilan aralashmaganligini tasdiqlash uchun, alohida ishda biz NAc etkazib berish ta'sirini o'rganib chiqdik dopaamin retseptorlari antagonistlarining ikkalasi yoki VTA-da qo'shilgan holda, to'yingan kalamushlarda 2 va 3 soat oziq-ovqat iste'mol qilishn = 10-11; 2-jadvaldagi kabi, Shakl). Bunday holda, kalamushlar xov o'lchovidan oldin operant konditsionerlik paradigmasiga duch kelmagan. Shunday qilib, oziq-ovqat iste'mol qilish to'rtta shartdan so'ng maqsadli VTA va NAc dori yuborilgandan so'ng quyidagicha o'lchandi: 1) nazorat holati (transport vositalarining NAc va VTA ga bo'lgan eritmalari), 2) NAc vositasi + VTA 1.0 mg ggrelin, 3) NAc dopamin retseptorlari antagonisti + VTA vositasi, 4) NAc dopamin retseptorlari antagonisti + VTA 1.0 mg grelin. Dastlab biz ikkita dopamin retseptorlari antagonistlarini alohida o'rganib chiqdik, shunda 3 va 4-sharoitlarda kalamushlarning bir guruhi 0.3 mkg SCH-23390, ikkinchisi 1 mkg etikloprid gidroxloridi oldi. 3 kun davomida tiklanishdan so'ng, har bir guruhdagi kalamushlarning taxminan yarmi, bu safar 3 va 4-sharoitlarda ikkita antagonistning kombinatsiyasi bilan qayta sinovdan o'tkazildi. Ushbu 3 ta tajribaning har birida, avvalgidek, davolash usullari o'rtasida muvozanatli dizayn ishlatilgan (barchasi kalamushlar har bir eksperimentda barcha sharoitlarni ta'sirning predmeti taqqoslash uchun olgan). Kanulalarning holati avvalgi kabi o'limdan keyin tasdiqlangan. Ko'rsatilgan ma'lumotlarga faqat VTA va NAc ga etib borishi tasdiqlangan in'ektsiya joylashtirilgan kalamushlar kiradi.

2.3.4. D1 shunga o'xshash va D2 retseptorlari blokadasining oziq-ovqat yo'qotishidan kelib chiqqan oziq-ovqat mukofotiga va chov sotib olishga ta'siri

Dopamin retseptorlari antagonistlari 2 turli tajribalarida sinovdan o'tkazildi. Birinchi tajribada, javoblar NAc (maqsadli)n = 20) transport vositasini yoki D1 o'xshash retseptorlari antagonistini etkazib berish (0.5 mkg SCH-23390). Sinov ro'za tutilgan holatda o'tkazildi (qorong'u tsikl davrida oziq-ovqat cheklanganidan keyin). Ikkinchi tajribada javoblar maqsadli NAc dan so'ng tekshirildi (n = 7) transport vositasini yoki 1.5 mkg NAc etikloprid gidroxloridni etkazib berish. Sinov ro'za tutilgan holatda o'tkazildi (qorong'u tsikl davrida oziq-ovqat cheklanganidan keyin; 3-jadvalda ko'rsatilganidek, Shakl).

2.3.5. NAcdagi dopamin bilan bog'liq gen ekspressionasida ovqatdan mahrum qilish oqibatida o'zgarishlar

NAc ichida o'lchangan dopamin bilan bog'liq genlarni [D1A, D2, D3, D5, katekol-O-metiltransferaza (COMT) va monoamin oksidaz A (MAO) dopamin retseptorlari) gen ekspozitsiyasida oziq-ovqatdan mahrum qilish asosidagi o'zgarishlar aniqlandi.

2.3.6. RNK izolyatsiyasi va mRNA ifodasi

Miyalar tezda chiqarildi va NAc miyaning matritsasi yordamida parchalanib, suyuq azotda muzlatildi va mRNA ekspresiyasini keyinchalik aniqlash uchun -80 ° C da saqlandi. Shaxsiy miya namunalari Qiazolda (Qiagen, Hilden, Germaniya) Tissue Lyser (Qiagen) yordamida bir hil holga keltirildi. Umumiy RNK RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (Qiagen) yordamida qo'shimcha DNK bilan davolash (Qiagen) yordamida chiqarildi. RNK sifati va miqdori spektrofotometrik o'lchovlar bilan baholandi (Nanodrop 1000, NanoDrop Technologies, AQSh). CDNA sintezi uchun iScript cDNA sintez to'plami (BioRad) ishlatilgan. Haqiqiy vaqtda RT PCR TaqMan yordamida amalga oshirildi^® on-layn katalogidan tanlangan maqsadli genlar uchun prob va primer to'plamlari (Amaliy Biosistemalar). Genlarning ekspression qiymatlari C_t usul ( Livak va Shmittgen, 2001), bu erda ad libitum oziqlantiruvchi guruxga kalibratchi tayinlangan. Glyceraldehyde-3-fosfat dehidrogenaza (GAPDH) mos yozuvlar gensi sifatida ishlatilgan.

2.3.7. Statistik tahlil

Barcha xulq-atvor parametrlari takroriy chora-tadbirlar bo'yicha tahlil qilindi (ANOVA) post hoc Tukey HSD testi mos ravishda yoki talabaning testi t bu erda faqat ikkita shart taqqoslangan. Barcha statistik tahlillar GraphPad dasturidan foydalangan holda o'tkazildi. Turli xil holatlar sezilarli hisoblanadi p <0.05.

3. Natijalar

3.1. D1 shunga o'xshash retseptorlari blokadasi (NAc) ning VTA grelin keltirgan oziq-ovqat mukofotiga ta'siri va chov iste'mol qilish

D1 shunga o'xshash retseptorlari ichidagi faoliyat VTA gurlinning oziq-ovqat mukofotini oshirishdagi o'sishiga zarur yoki kerak emasligini aniqlash uchun greatin bilan ishlaydigan sukroz uchun javob beradigan D1-shunga o'xshash antagonist (SCH-23390) bilan oldingi davolanishning ta'siri sinovdan o'tkazildi. Bir-biridan farqli bo'lgan ANOVA (keyingi)F_(3,33) = 11.1, p <0.0005; F_(3,33) = 3.7, p <0.01; F_(3,39) = 3.6, p <0.05 mukofotlar uchun, faol qo'l va chow navbati bilan) grelinning olingan mukofotlar sonini ko'paytirishga sezilarli ta'sirini aniqladi (p <0.0005; ShaklA), faol qo'llarni chop etish (p <0.05; ShaklB) va chov iste'mol qilish (p <0.05; ShaklC). Muvaffaqiyatli xatti-harakatlar bilan bog'liq parametrlarni, pul mukofotlari va faol qo'llarni bosib chiqarish uchun SCH-23390 pre -treatment ShaklA, B). Faol bo'lmagan qo'zg'aldoqdagi faoliyat kichik bo'lib, turli xil davolash guruhlari o'rtasida sezilarli farq bo'lmadi ( ShaklB) davolanishni faoliyatda nomaqbul maqsadga yo'naltirilgan o'zgarishlarni keltirib chiqarmaydi deb taxmin qilish. Grifinadan keyin kuzatilgan chow giperfigiyasi VTAga mikroignatsiyaga uchragan bo'lsa, SCH-23390 pretreatment ShaklC) Ushbu ma'lumotlar NAc qobig'idagi dopamin va D1 shunga o'xshash retseptorlari grelinning quyi qismida joylashganligini va VTA tomonidan boshqariladigan grelinni oziq-ovqat mukofotlari xatti-harakatlariga ta'sir qilishi uchun zarurligini ko'rsatadi. Biroq, ular grelinning chov iste'molini ko'paytirish qobiliyati uchun muhim emas. SCH-23390 bilan NAc davolash hech qanday ta'sir ko'rsatmadi boshiga tushgan oziq-ovqat yoki chov sotib olish uchun operatsion javob berish Shakl).

3.2. D2 blokadasi (NAc) ning VTA grelin keltirgan oziq-ovqat mukofotiga ta'siri va chov iste'mol qilish

D2-lardagi faollik VTA gurlinning oziq-ovqat mahsulotlarini mukofotlash xatti-harakatini ifodalash uchun zarur yoki kerak emasligini aniqlash uchun preklinik davolanishni ta'sirchan D2 antagonisti (etikloprid gidroxlorid) bilan sukroz operandi xatti-harakatlarida ghrelin-inaktiv o'sishiga ta'siri tekshirildi. Bir tomonlama ANOVA dori davolashda sezilarli ta'sir ko'rsatdi (F_(3,18) = 9.5, p <0.0005; F_(3,18) = 8.1, p <0.001; F_(3,39) = 3.8, p Mukofotlar uchun <0.05, mos ravishda faol qo'l va chow). Post Tukey testi olingan mukofotlarning sezilarli darajada oshganligini ko'rsatdi (p <0.01; ShaklA) va faol qo'lni bosish (p <0.01; ShaklB) grifinni davolashdan keyin, etiklopridni oldindan davolash bilan bloklangan. Faol bo'lmagan qo'zg'aldoqdagi faoliyat kichik bo'lib, turli xil davolash guruhlari o'rtasida sezilarli farq bo'lmadi ( ShaklB). Operatorga javob beruvchi ma'lumotlardan farqli o'laroq, etiklopridni oldingi davolash chow iste'molidagi gri- linning sababli o'sishini o'zgartirmadi (p <0.05; ShaklC) Ushbu kombinatsiyalashgan tadqiqotda o'zaro ta'sir ikki tomonlama ANOVA tomonidan tasdiqlangan mukofotlarda oldindan davolash × grelin o'rtasida tasdiqlandi: F_(1,24) = 4.8, p <0.05; faol qo'lni bosish: F_(1,24) = 4.7, p <0.05, ammo chov iste'mol qilinmaydi. Shunday qilib, D2 retseptorlari grelin tomonidan mukofot bilan bog'liq xatti-harakatlarda o'zgarishlarni keltirib chiqarish uchun ishlatilishi mumkin, ammo chow iste'mol qilinmaydi.

3.3. D1-shunga o'xshash va / yoki D2 retseptorlari blokadasi (NAc) ning VTA grelinning chov iste'mol qilishiga ta'siri

Ikki dofamin antagonistlarining chovni oziqlantirishga ta'sir etishmasligini yanada ko'proq tasdiqlash uchun biz ushbu tadqiqotni hech qachon operatsion konditsionerlik paradigmasiga duch kelmagan kalamushlarda takrorladik. Ushbu tekshirish tadkikoti uchinchi testni o'z ichiga olgan bo'lib, unda D1 o'xshash va D2 retseptorlari antagonistlarini NAc ga birgalikda etkazib berishning VTA grelin bilan boshqariladigan oziq-ovqat mahsulotlariga ta'sirini o'rganib chiqdik. Cho'tni iste'mol qilish VTA grelin tomonidan in'ektsiyadan 2 soat o'tgach sezilarli darajada oshdi (ANOVA usullaridan biri: F_(3,30) = 6.4, p <0.005 va F_(3,27) = 9.0, p D0.0005 va D1 retseptorlarini o'rganish uchun <2 navbati bilan) va bu D1-ga o'xshash ( ShaklA) yoki D2 retseptorlari antagonisti ( ShaklB) Ikki dofamin retseptorlari antagonistlarining birgalikdagi ta'sirini o'rgangan yakuniy testda biz VTA grelinning 3 soatlik vaqtgacha sezilarli ta'sirini aniqlay olmadik, ehtimol bu ishda zarur bo'lgan uch karra parenximali in'ektsiya ta'sirini aks ettiradi. ANOVA davolash usullarining muhim ta'sirini ko'rsatadigan usullardan biri (F_(3,30) = 9.6, p <0.0005). VTA grelinni etkazib berishdan keyin oziq-ovqat iste'moli 3 soatlik vaqtga to'g'ri keldi, ammo bu yana dopamin retseptorlari antagonistlarini NAc-ga qo'shilishi bilan bostirilmadi ( ShaklC). Ikkala dopamin retseptorlari antagonistlarining NAcga biriktirilgan ilovasi hech qanday ta'siri yo'qligini unutmang boshiga tushgan oziq-ovqat mahsulotlarini sotib olish uchun.

3.4. D1 shunga o'xshash va D2 retseptorlari blokadasining oziq-ovqat yo'qotishidan kelib chiqqan oziq-ovqat mukofotiga va chov sotib olishga ta'siri

Oziq-ovqat tanqisligi operativ ta'sir ko'rsatuvchi va 1 soatlik chov iste'molini oshiradi; kalamushlar och qolganda faol qo'lni qariyb ikki baravar ko'p bosdi va 1 soatlik o'lchov nuqtasida uchdan olti baravar ko'proq chow (transport vositasining holatini solishtiring Anjir. 3 va 4). NAc qobiqidagi D1-o'xshash retseptorlarning blokadasi oziq-ovqat mahsulotlarini mukofotlashda oziq-ovqat mahsuldorligi sababli ko'tarilgan oziq-ovqatni yuqori darajada ushlab turish darajasini sezilarli darajada kamaytirdip <0.01; ShaklA) va faol qo'llarni bosimining pasayishi (p <0.01; ShaklB). Ushbu muolaja oziq-ovqatdan mahrum qilish sababli chov iste'mol qilishiga salbiy ta'sir ko'rsatmadi ( ShaklC). D2 antagonistining NAc qobig'iga infuzioni oziq-ovqat mahsulotlarini mukofotlashda oziq-ovqat mahsulotlarini mukofotlashda oziq-ovqatni yo'qotishning oshganligi darajasini sezilarli darajada kamaytirdip <0.01; ShaklA). Har bir kalamush D2 blokadasidan so'ng NAc ichida bosilgan faol qo'lni qisqartirgan bo'lsa-da, bu ta'sir bir tendentsiyaga (p = 0.08; ShaklB) ehtimol, qo'lni bosishda yuqori darajadagi o'zgaruvchanlik (standart xato = 86 transport vositasi va 41 dori sharoitida, vosita faol qo'lni bosish diapazoni 57 dan 707 bosimgacha). Ma'lumotlar to'plamidan eng yuqori javob beradigan sichqonchani olib tashlash natijasi p = 0.001. Olib tashlangan kalamush transport vositasida 707 va dori vositasida faqat 303 ta pressni ko'rsatdi, shu bilan birga umumiy xulosani qo'llab-quvvatladi. Dopamin retseptorlari antagonisti ham faol bo'lmagan qo'lni bosish qo'lini o'zgartirmagan. Choyni iste'mol qilish NAcdagi D2 blokadasi bilan o'zgartirilmagan ( ShaklC)

3.5. NAc ning dopamin bilan bog'liq gen ekspressionida ovqatdan mahrum qilish oqibatida o'zgarishlar

Bir kechada ro'za tutish NAcdagi bir nechta dopamin bilan bog'liq genlarni mRNA ekspresatsiyasiga sezilarli ta'sir ko'rsatdi. Dopamin retseptorlari D2 mRNA ko'tarilib, dopamin retseptorlari D5 ning mRNKsi sezilarli darajada kamaydi. Dopamin retseptorlari D1, D3, COMT va MAO mRNAlari bir kechada ro'za bilan o'zgartirilmadi (Shakl). D1 va D2 retseptorlari MX ning D3 va D5 mavjudligi juda cheklangan bo'lsa, miyada eng ko'p dopaminli retseptorlari hisoblanadi. Shuning uchun D5 retseptorlari akumbenslarida mRNA darajasini D1ga solishtirdik va 2% ga erishdik; D3 va D2 (ma'lumotlar ko'rsatilmagan) uchun o'xshash munosabatlar aniqlandi. Shunday qilib, biz NAc ichida DPNUMX va D1 retseptorlari NAc ichida aniqlangan umumiy dopamin retseptorlari mRNA'sının faqat kichik bir qismini ifodalaydi, dopamin retseptorlari mRNA'nın ko'pchiligi D2 va D3 reseptörlerininden tashkil topganini tasdiq qilamiz.

4. Munozara

Amaldagi tadqiqotning asosiy natijalari shuni ko'rsatadiki, NAc qobig'idagi dofamin signalizatsiyasi grelinning oziq-ovqat mukofotiga ta'sirining pastki oqim vositachisi hisoblanadi. Natijalar shuni ko'rsatadiki, NAc qobig'idagi D1 shunga o'xshash va D2 retseptorlari grelin bilan faollashtirilgan elektronlarning asosiy tarkibiy qismlari bo'lib, VTA qo'llaniladigan grelin uchun oziq-ovqat mukofotlari xatti-harakatlariga ta'sir ko'rsatishi uchun juda muhimdir. NAc (qobiq) da D1 o'xshash va D2 retseptorlari signalizatsiyasi, ammo grelinning chov iste'molini ko'paytirish qobiliyati uchun muhim emas. Ushbu ma'lumotlar grilin uchun oziq-ovqat mahsulotlarini kuchaytiruvchi va oziq-ovqat iste'molini nazorat qiluvchi asabiy maqsadlarda farqlanishni ko'rsatadi. Va nihoyat, bizning topilmalarimiz shuni ko'rsatadiki, aylanma grelin darajasi ko'tarilganda ochlik holatida endogen grilin ham ishtirok etadi, chunki oziq-ovqat mukofotining ko'payishi uchun NAc-da dopamin signalizatsiyasi talab qilinadi.

Ajablanarlisi shuki, grifin dopaminerjik tizimga ta'sir ko'rsatadi (Abizaid va boshq., 2006 y, Jerlhag va boshq., 2007, Kavaxara va boshq., 2009 y va Vaynberg va boshq., 2011 y), bu grelinning oziq-ovqat mukofotiga ta'siri NAc dopamin retseptorlari signalizatsiyasini talab qilishini ko'rsatadigan birinchi ishdir (bu holda, D1 va D2 signallari). Bu muhim savol bo'lib chiqdi, chunki ishtahani nazorat qilish bilan bog'liq bo'lgan boshqa gormonlar yoki neyropeptidlar yaqinda mezolimbik dopamin tizimi bilan juda kutilmagan munosabatda bo'lishgan. Leptin, masalan, grelin kabi, VTA da dopamin neyronlarida retseptorlarga ega; leptinga sezgir bo'lgan dopaminerjik neyronlarning aksariyati striatumga chiqmaydi, aksincha amigdalani innervatsiya qiladi (Hommel va boshq., 2006 va Leshan va boshq., 2010). VTAdagi retseptorlari bilan kuchli anoreksikenik nöropeptid bo'lgan melanokortin, anoreksiya vositasida prognoz qilinadigan narsalardan farqli o'laroq, striatumda dopaminergik faollikni va dopaminning tarqalishini oshiradi, ammo oziq-ovqat sotib olish xatti-harakatlarini kamaytiradiTorre va Celis, 1988, Lindblom va boshq., 2001 va Konus, 2005). Boshqa murakkablik darajasi grelinning dopaminni chiqaradigan ta'sirining oziq-ovqat mavjudligiga bog'liq ekanligini ko'rsatadigan ma'lumotlar qo'shiladi: mikrodializ orqali aniqlangan NAc dopamin darajalari faqatgina grafin kiritilgandan keyin ovqatlanishga ruxsat etilgan kalamushlarda periferik qo'llaniladigan glyutin bilan ortadi (ushbu tadqiqotda ishlatilgan eksperimental sharoitlarda bo'lgani kabi) va hatto oziq-ovqatdan foydalanishga ruxsat berilmaydigan narsalarda grifinKavaxara va boshq., 2009 y), so'nggi paytlarda VTA-da differensial opioid signalizatsiya yo'llariniKavaxara va boshq., 2013 y). Ushbu ikkita misol oziqlantirish peptidlari, oziq-ovqat mavjudligi va dopamin o'rtasidagi munosabatlarning murakkabligini ta'kidlaydi va oziq-ovqat mukofotlash xatti-harakatlarida Grelinning dopamin tizimiga ta'sirini o'rganadigan tadqiqotlarning ahamiyatini ta'kidlaydi.

Natijalarning qiziqarli tomoni NAc dopamin retseptorlari blokadasining oziq-ovqat iste'moliga nisbatan oziq-ovqatni rag'batlantirishga nisbatan zid ta'siridir. Xususan, biz 2 mustaqil tekshiruvida VTA grelinning sababli oziq-ovqat mahsulotlarini iste'mol qilishda duchor bo'lgan NAc dopamin signalizatsiyasi ta'sirining yo'qligini tasdiqladik: bir paradigmada oziq-ovqat mahsulotlarini qabul qilish o'lchovi operatsion javob berish testidan (darhol keyinchalik shakar olishning o'zgarishi mumkin bo'lgan) chow iste'mol qilish) va boshqa tomondan esa, faqat operatsiyadan oldin sinovdan o'tmagan hayvonlarda faqat oziq-ovqat iste'moli o'lchandi. Bundan tashqari, ikkinchi eksperimentda biz dopamin retseptorlari antagonistlarining NAcga birgalikda qo'llanilishi VTA grelinning sababli oziq-ovqat mahsulotlariga ta'sir ko'rsatmasligini va D1-shunga o'xshash va D2 retseptorlari orqali NAc dopamin signalini qo'llab-quvvatlovchi gipotezani qo'llab-quvvatlashni kuchaytirishini ko'rsatdik grafin giperfagiya uchun talab qilinmaydi. Antagonistlar VTA grelinning oziq-ovqatni rag'batlantirgan xatti-harakatlarini to'xtatishi bilan birga, bu kollektiv natijalar VTA griflinning quyi oqimining neyroagina bo'limining bir-biridan ajralib turishini va oziq-ovqat mahsulotlarini nazorat qilishning bir bo'lagi va boshqa oziq-ovqatni rag'batlantirish / mukofotlashni nazarda tutadi. Grafin dopamindan oziq-ovqatni rag'batlantirish uchun emas, balki iste'mol qilishni o'zgartira oladigan ko'rinadi. Avval VTA ghrelin VTA ichidagi nevropeptid Y ni oziq-ovqat mahsuloti va opioidlarni teskari tarzda nazorat qilish uchun tanlab olganligini ko'rsatdik (Skibicka va boshq., 2012a). Shunday qilib, grifin tomonidan oziq-ovqat iste'mol qilish uchun oziq-ovqatni rag'batlantiradigan xatti-harakatlarga qarama-qarshi bo'lgan elektron tizimda kelishmovchiliklar mavjud.

Accumbal D1 shunga o'xshash retseptorlari dori-darmonlar va oziq-ovqatni mustahkamlashda oldingi qator dalillarga ega, chunki NAX D1 kabi antagonist infuziya oziq-ovqatga qaratilgan maqsadga yo'naltirilgan xatti-harakatni kamaytiradi. Tizimli D1 shunga o'xshash retseptorlari antagonistlari kokain, geroin, nikotin va spirtli ichimliklarni o'z-o'zini boshqarishning o'ziga xosligi yoki kontekstli sabablarini kamaytiradi [masalan (Vaysenborn va boshq., 1996 y, Liu va Weiss, 2002, Bossert va boshq., 2007 va Liu va boshq., 2010 yil)], bu mukofotga yo'naltirilgan jarayonlarda ushbu retseptorlarning asosiy rolini ta'kidlaydi. Mavjud ma'lumotlar NAc D1 shunga o'xshash retseptorlari VTA-ta'sir qiluvchi ghrelin tomonidan faollashtirilgan elektron tizimining muhim elementi ekanligini ko'rsatadi. Ushbu D1 antagonistining atrof-muhitga tatbiq etilishi, shuningdek, grifinni kuchaytirgan ob'ektni aniqlashni kamaytirishgaJacoby va Currie, 2011). Biroq, periferik dastur barcha miyada D1-ifodalangan neyronal populyatsiyalarni maqsad qilib olganligi va NAc tashqari (masalan, hipokampusta) populyatsiyalar ta'lim va xotirada muhim rol o'ynashi mumkinligini hisobga olib, NAc populyatsiyasi tekshiriladimi yoki aniqlanmaganligi aniq emas bu erda grifinning xotira samaradorligini oshirishga yordam beradi.

D2 retseptorlari odatda D1 bilan birgalikda harakat qiladi; shuning uchun ko'plab tadqiqotlar mukofotni qayta ishlash va mukofotga yo'naltirilgan xatti-harakatlarda D2 retseptorlarining rolini ko'rsatadi. Shunga qaramasdan, D1 va D2 retseptorlari har doim ham xuddi shu tarzda qat'iy mukofot vazifasini bajarmaydi. Amigdalada, masalan, D1 retseptorlari blokadasi, duxovkali kokainni qidirishga tiklashni kamaytiradi, D2 antagonistlari esa bu xatti-harakatni kuchaytirishi mumkin (masalan,Berglind va boshq., 2006). Bu funktsional disosiatura ham neyroanatomik hissa qo'shishi mumkin, chunki NAXdagi D2 retseptorlari gipotalamusda bo'lganlarga nisbatan zid funktsiyaga xizmat qiladi. D2 retseptorlari NAc stimulyatsiyasida oziq-ovqatni rag'batlantirishni kuchaytirishi mumkin, ammo oziq-ovqat mahsulotlarini olish uchun ko'proq harakat qiladigan hayvonni yaratish D2 retseptorlarining gipotalamus stimulyatsiyasida aniq anoreksik (Leibovitz va Rossakis, 1979 va Nowend va boshq., 2001 y). Shundan kelib chiqqan holda, maqsad retseptorlari populyatsiyalari qarama-qarshi funktsiyaga bog'langan D2-maqsadli dori-darmonlarni periferik qo'llashdan keyin natijalarni talqin qilish qiyin bo'lishi mumkin. Bu, avvalgi tadkikotda, D2 antagonistlarining periferik in'ektsiyasini syrroz eritmasi uchun grifinning ta'siriga ta'sir ko'rsatmasligini tushuntirishning sabablaridan biri bo'lishi mumkin. Boshqa mumkin bo'lgan tushuntirishlar D2 ning asosiy nigra va VTA dopamin ishlab chiqaruvchi neyronlardagi otorizektor bo'lib, uning faollashishi dopaminergik faollikni bostirishga olib kelishi mumkin (Lacey va boshq., 1987). Shunday qilib, periferik AOK qilinganida, D2-maqsadli dorilar ushbu retseptorlari populyatsiyasiga kirish imkoniyatiga ega bo'lishi mumkin edi, bizning tadqiqotlarimizda faqat NAc shell D2 retseptorlari aniqlandi. Ayniqsa, tizimli D1 shunga o'xshash retseptorlari blokadasining aniq ta'siri, xuddi shu paradigmada sukroz ichimligi uchun javob berishni blokladi (Overduin va boshq., 2012). Bundan tashqari, D1 agonistlarining tizimli, teri osti in'ektsioni mazali taomlar uchun afzallikni kuchaytirar ekan, D2 agonistlarining tizimli in'ektsiyasi uni kamaytiradi (Cooper va Al-Naser, 2006). Shunday qilib, D1 antagonistlarining ghrelin sababli oziq-ovqatni rag'batlantirishga qarshi ta'sirini ko'rsatadigan ma'lumotlarimiz, D1 retseptorlarini stimulyatsiya qiluvchi funktsiyalar bo'yicha umumiy aniq (bosim) ta'siriga mos keladi. Aksincha, D2 retseptorlari popülasyonunun aniq ta'siri, NAc uchun taqdim etilgan ma'lumotlarga ko'ra, hipotalamik D2 reseptörleri haqida ma'lum bo'lgan narsalar bilan yanada yaqinroq bo'ladi.

Ushbu tadqiqotda ham D1 kabi, ham D2 antagonistlari VTA grelin administratsiyasidan so'ng sukroz uchun operativ harakatlarning oldini olishga muvaffaq bo'ldi va oziq-ovqatdan mahrum bo'lgandan so'ng, grafinning ta'sirini kuchaytirish uchun NAc ning har ikkala retseptorida ham kooperativ ta'sirga ehtiyoj borligini ko'rsatdi. VTA tomonidan olingan dopaminerjik terminlar NAc qobig'idagi dopaminni bir vaqtning o'zida barcha mavjud bo'lgan dopamin retseptorlarini faollashtiradigan endogen holatni hisobga olgan holda mantiqiy ahamiyatga ega. D1 shunga o'xshash va D2 retseptorlarining bir vaqtning o'zida aktivlashtirilishi uchun zarur bo'lgan boshqa xatti-harakatlari,Ikemoto va boshq., 1997) va lokomotor harakatlar (Plaznik va boshq., 1989 y), shuningdek, neyronal otish (Oq, 1987). Tadqiqot natijalari shuni ko'rsatadiki, bu ikki dopaminarjik retseptorlardan faqat bittasining blokadasi bunday xatti-harakatlarni kamaytirish uchun etarli edi, chunki bu retseptorlardan birini blokirovkalash griffin asosida sukroz operandi xatti-harakatlarini kamaytirish uchun etarli edi. Ushbu hamkorlikning mexanizmi aniq emas. NAc ning ba'zi neyronlari D1 va D2 retseptorlari bilan birga ishlaydi. Bir ehtimollik, heterodimerlarning mukofotni olish uchun zarurligi, D1 va D2 retseptorlari tomonidan heterodimerlarning shakllanishi yaqinda xabar qilinganligi va bu ulanishning depressiyaga o'xshash xatti-Pei va boshq., 2010). Shunga qaramay, natijalar NAc'de D1 va D2 sinyalinin kerak emasligini va har bir retseptorining, grafin ta'sirini oziq-ovqat mukofotiga o'tkazish uchun kerak, chunki alohida blokadalar, mukofot javobini kamaytirishda samarali bo'ldi. Bundan tashqari, individual grafinaning grafin giperfajiyasi uchun samarali bo'lmaganligi sababli, biz D1 va D2 signallarining chov iste'mol qilish uchun keraksiz ekanligini bilishimiz mumkin, ya'ni javobni bartaraf etish uchun ikkala vaqtda bir vaqtning o'zida bloklangan bo'lish kerak bo'ladi. Shu bilan birga, ghrelin giperfaiyasi NAcdagi D1 va D2 retseptorlari bilan bir vaqtning o'zida buzilishdan ta'sir ko'rilmadi. Yakkama-yakka yoki kombinatsiyalashgan holda, NAc qobig'i D1 va D2 retseptorlari signallari chr xaridini oshirish uchun grelin tomonidan ishlatilmaydi.

Bu erda NAX ning qobig'idagi D1-o'xshash va D2 retseptorlarini aniqladik. NAc ning qobig'i va yadrosining funktsiyasi, asosan, alohida-alohida bog'liq bo'lgan dori o'z-o'zini boshqarish tizimidagi o'zgarishlarning asosi bilan bir darajada ajralib turadigan ko'rinadi va bu qobiq tarkibida giyohvandlikka bog'liq bo'lgan o'z-o'zini boshqarishBossert va boshq., 2007). Bu funktsional disosiatura neyroanatomik birikmalar tomonidan quvvatlanadi, bu erda yadro amigdala dan ko'proq kirish oladi va qobiq hipokampus (hipokampus)Groenewegen va boshq., 1999 va Floresko va boshq., 2001). Rats shuningdek, D1 va D2 retseptorlari agonistlarining kombinatsiyasini nafaqat yadroda emas, balki NAc qobig'ida o'zini o'zi boshqaradi (Ikemoto va boshq., 1997), ularning mukofoti bo'yicha hamkorlikdagi harakati asosan bu erda joylashgan qobiq mintaqasi bilan bog'liqligini ko'rsatmoqda.

Biz ushbu tadqiqotda, xususan, NAc dopamin signallarining oziq-ovqat mahsulotlariga ta'sir etilishi va VTA-qo'llaniladigan grelin tomonidan boshqariladigan oziq-ovqatni rag'batlantirish xatti-harakatlariga ta'sirini o'rganib chiqdik. Shunga qaramay, grelin VTA ga afferent yo'llarni faollashtirish orqali oziqlantirish xatti-harakatlari ham mumkin. Masalan, griflin lateral gipotalamusda orexin neyronlarni faollashtirish orqali oziq-ovqat bilan mustahkamlangan xatti-Perello va boshq., 2010), VTA-ni loyihalashtiradigan va dopaminning tarqalishini rag'batlantirgan orexinerjik hujayra guruhi (Narita va boshq., 2006 y). Neyroanatomiya va nörofarmakologiyadan foydalangan holda o'tkazilgan tadqiqotlarimiz VTA-NAc yo'lini aniq ajratib turgan bo'lsa-da, endogen vaziyatda grafinning tarqalishida grafin VTA ni VLAga ta'sirli prognozlar bilan gyrinli retseptorlari ifoda etgan boshqa miya yadrolari kabi ogohlantiradi. Shunday qilib, fiziologik vaziyatda grifinning ta'siri miyaning ko'pgina joylarida tarqatilishi mumkin, bu esa, ehtimol, kontsertda harakat qilishi mumkin. Xuddi shunday natija keltirishi mumkin bo'lgan, masalan, oziq-ovqat iste'mol qilishdagi o'zgarishlarni keltirib chiqaradigan miya ichida tarqalgan ko'plab saytlarga ta'sir qiluvchi gormon yoki nevropeptid tushunchasi roman emas va leptin va melanokortin uchun tavsiya etilgan va baholanadi (Gril, 2006, Leinninger va boshq., 2009 y, Skibicka va Grill, 2009 va Faulconbridge va Hayes, 2011).

Oziq-ovqatdan mahrum qilish grafinning yuqori darajalari bilan bog'liq. Oziq-ovqatdan mahrum etish sharoitida oziq-ovqat mahsulotlarining namoyishi NAc (dopamin)Kavaxara va boshq., 2013 y). Natijada oziqlanish holati NAc ichidagi dopamin signallariga, dopamin retseptorlari (D1-o'xshash retseptorlari (D1, D5) va D2-o'xshash retseptorlari (D2, D3) ning mRNA ekspresyoniga ta'siri va dopaminning tanqisligi fermentlar (MAO, COMT) baholandi. Oziq-ovqatdan mahrum etish o'lchami dopaminning degrading fermentlarining mRNA ifodasini o'zgartirmagan bo'lsa-da, biz D5 va boshqalarga D2 retseptorlari uchun differentsial tartibni ko'rdik. D5 retseptorlari ifodasi taxminan 30% ga oshdi, D2 retseptorlari mRNA esa taxminan 20% ga kamaydi. D1 shunga o'xshash va D2 retseptorlari agonistlarining bir vaqtning o'zida qo'llanilishi D2 retseptorlari past darajadagi tartibga solingan, ammo D1 retseptorlarini asosan nigra (va NAc da shunga o'xshash tendentsiya) bilan tartibga solish uchun berilganSubramaniam va boshq., 1992). Qizig'i shundaki, oziq-ovqat mahrumligining NAc dopamin retseptorlari ekspirigiga ta'siri bizning D1-shunga o'xshash (D5) va D2 retseptorlari uchun ro'zani ochib beradigan ma'lumotlarimiz bilan birlashadi.

Bizning tadqiqotlarimizdan biri - oziq-ovqat mahrumligining grafin grafinini oshirib, VTA tashqari boshqa grafin reseptorlari populyatsiyasini faollashtirishi mumkin. Shunday qilib, oziq-ovqatdan mahrum qilish grafinni oshirish uchun endogen va fiziologik jihatdan mos keladigan usul bo'lsa-da, u qay tarzda VTA stimulyatsiyasiga yo'l qo'ymaydi. Shuning uchun NAcdagi dopamin retseptorlarining o'zgarishi VKA tashqari boshqa joylarda grifin samaradorligi natijasi bo'lib qolmasligi mumkin emas. Va nihoyat, shuni ta'kidlash kerakki, bizning ma'lumotlarimiz NAc dopaminli retseptorlari ifodasida o'zgarishlarga ro'za tutishdir, ammo keyingi tajribalar (ghrelinni stimulyatsiya qilingan) VTA-NAc dopaminergik proektsiyasining bu ta'sirida vositachiligini ko'rsatish va, albatta, roli (masalan, yuqorida muhokama qilinganidek) lateral gipotalamus kabi boshqa yo'llar va transmitterlar tizimlarini o'z ichiga oladi.

Neyrobiologik substratlarning ko'pchiligi giyohvandlik va tartibsiz ovqatlanish uchun keng tarqalganligi sababli, ushbu topilmalar D1-shunga o'xshash va D2 retseptorlari rolini grafinning dori-spirtli ichimliklarni kuchaytirish ta'sirida namoyon qilishi mumkinDikson va boshq., 2011 y). Oziq-ovqat va kokain mukofoti NAc da dopaminning tarqalishiga olib keladi (Hernandez va Hoebel, 1988). D1 yoki D2 retseptorlari blokadasi suiiste'mollik, spirtli ichimlik va nikotin uchun giyohvandlikka qarshi kurashni kamaytiradi. Griflinning ushbu moddalar uchun xulq-atvorni qabul qilish yoki mukofotlashiga salmoqli hissa qo'shganligi sababli, bu erda tasvirlangan grifin-VTA-dopamin-NAc tizimining nafaqat oziq-ovqat uchun emas, balki ko'plab mukofot ishlari uchun ahamiyatli bo'lishi ehtimoldan yiroq emas. Ushbu g'oyani dastlabki qo'llab-quvvatlash, oziq-ovqat mahrumiyetinin D1 shunga o'xshash retseptorlari blokadasi tomonidan to'sib qo'yilgan geroinni qayta tiklashi mumkinligini ko'rsatadigan ma'lumotlardan olinishi mumkin (Tobin va boshq., 2009).

Bizning ma'lumotlarimiz ikkita asosiy oziq-ovqat mukofotlari bilan bog'liq signalizatsiya tizimlarining birlashtirilishi haqida yangi bilimlarni beradi: oreksigen gormoni, grelin va NAc dopaminga javob beradigan davrlarga javob beradigan VTA-qo'zg'aladigan davrlar. Xususan, biz grilinning oziq-ovqatga asoslangan xatti-harakatlariga VTA bilan bog'liq bo'lgan yaxshi hujjatlashtirilgan ta'sirlari NAc da D1 va D2 signallarini talab qilishini ko'rsatamiz. Bizning ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatadiki, VTA-ga asoslangan (D1 / D2-ga bog'liq) grelinning oziq-ovqat mukofotiga ta'siri diagentlik sxemasini o'z ichiga oladi, chunki antagonist NAc-ga etkazib berilganda grelin tomonidan kelib chiqadigan oziq-ovqat mahsulotlariga ta'sir ko'rsatmadi. Va nihoyat, och (bir kecha ro'za tutgan va shu sababli gipergrelinemik) kalamushlarda olib borilgan tadqiqotlar NAc D1 / D2 signalini endogen grelinning oziq-ovqatga asoslangan xatti-harakatlariga ta'sirini keltirib chiqaradi. Shunday qilib, NAcdagi dopamin signalizatsiyasiga xalaqit beradigan mexanizmlar va terapiya mukofot tizimiga, shu jumladan ovqatlanishni boshqarish va shuning uchun semirish va uning davolanishiga bog'liq bo'lgan grelin vositachiligiga ta'sir ko'rsatishi mumkin.

Ochilish bayonnomasi

Mualliflar hech narsani oshkor qilmaydi.

Manbalar

• Vaysenborn va boshq., 1996 y
• R. Weissenborn, V. Deroche, GF Koob, F. Veys
• Dopamin agonistlari va antagonistlarining kokain bilan bog'liq ogohlantiruvchi ta'siriga javob beruvchi kokainga bog'liq operatsiyaga ta'siri
• Psixofarmakologiya (Berl), 126 (1996), pp. 311-322
• Scop'dagi yozuvni ko'rish

   | 

  Maqolalar ko'rsatilmoqda (74)
•  
• Zigman va boshq., 2006 y
• JM Zigman, JE Jones, Idoralar Li, CB Saper, JK Elmquist
• Sichqoncha va sichqon miyasida grifin retseptorlari mRNA ning ifodasi
• J. Komp. Neurol., 494 (2006), 528-548 betlar
• Scop'dagi yozuvni ko'rish

  |

  To'liq matn CrossRef orqali

   | 

  Maqolalar ko'rsatilmoqda (383)
• Wren va boshq., 2000
• AM Wren, CJ Small, HL Ward, Kg Murphy, CL Dakin, S. Taheri, AR Kennedy, GH Roberts, DG Morgan, MA Gatei, SR Bloom
• Yangi hipotalamik peptid griflin oziq-ovqat iste'molini va o'sish gormoni sekresyonunu ogohlantirmoqda
• Endokrinologiya, 141 (2000), pp. 4325-4328
• Scop'dagi yozuvni ko'rish

  |

  To'liq matn CrossRef orqali

   | 

  Maqolalar ko'rsatilmoqda (1108)
• Oq, 1987
• FJ Oq
• D-1 dopaminli retseptorlari stimulyatsiyasi D-2 retseptorlari agonisti tomonidan yadro akbulens neuronlarining inhibitatsiyasini ta'minlaydi
• Yevro. J. Pharmacol., 135 (1987), pp. 101-105
• Maqola

  |

   PDF (342 K)

  |

  Scop'dagi yozuvni ko'rish

   | 

  Maqolalar ko'rsatilmoqda (88)
•  
•  

•  
• Muvofiq muallif. Gyoteborg universiteti, Medicinaregatan 11, SEG-434 405, Goteborg, Shvetsiya universiteti, Sahlgrenska akademiyasi, Nevrologiya va fiziologiya instituti endokrinologiya bo'limi. Tel .: +30 46 31 786 (ofis); faks: +3818 46 31 786.