Grelinning oziq-ovqat mukofotiga ta'siri: grihelning sukrozning o'z-o'zini boshqarishiga va mezolimbik dopamin va asetilkolin retseptorlari gen ekspiratsiyasiga ta'siri (2012)

O'tish:

mavhum

Ovqatlanish qaroriga gomostatik bo'lmagan omillar ta'sir qiladi, masalan, ovqatning mazasi. Darhaqiqat, oziq-ovqatning foydali va motivatsion qiymati gomeostatik signallarni bekor qilishi mumkin, bu esa iste'molning ko'payishiga va shuning uchun semirishga olib keladi. Greostin, ichakdan olingan oreksigenik gormon, gomeostatik oziqlantirishda muhim rol o'ynaydi. Biroq yaqinda u mezolimbik dopaminerjik mukofot yo'lining kuchli modulyatori sifatida paydo bo'ldi va bu oziq-ovqat mukofotida grelinning rolini ko'rsatdi. Bu erda biz grelin va uning retseptorlari, grin retseptorlari (GHS-R1A) stimulyatsiyasi va sukrozning progressiv nisbati operant konditsioneri uchun blokirovkaning rolini o'rganib, tabiiy shakar mukofoti uchun motivatsiyani kuchaytirish uchun muhimmi yoki yo'qligini aniqlashga harakat qildik, motivatsion harakatni o'lchash uchun ishlatiladigan protsedura. mukofot olish. Periferik va markazdan boshqariladigan grelin operativ ta'sirga ega bo'lgan odamni sezilarli darajada oshirdi va shu sababli sukroz uchun rag'batlantiruvchi motivatsiya paydo bo'ldi. GHS-R1A antagonisti JMV2959 dan foydalanib, biz GHS-R1A signalizatsiya blokadasi sukrozga ta'sir etuvchi ta'sirchanlikni sezilarli darajada kamaytirganligini namoyish etdik. Biz surunkali markaziy grelin davolashning asosiy mukofot nörotransmitter retseptorlari, ya'ni dopamin va atsetilxolinni kodlovchi genlarning ekspresiyasiga ta'sirini baholash orqali grelinning mezolimbik mukofot tugunlariga, ventral tegmental maydonga (VTA) va yadro akumbensiga (NAcc) ta'sirini o'rganib chiqdik. Grelinni davolash VTA-da dopamin retseptorlari D5 va atsetilxolin retseptorlari nAChRβ2 genining ko'payishi va NAcc-da D1, D3, D5 va nAChRa3 ning pasayishi bilan bog'liq edi. Bizning ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatadiki, grelin saxaroza uchun motivatsiya va kuchaytirishda muhim rol o'ynaydi va mezolimbik mukofot tizimida dopamin va asetilkolin kodlovchi genlarning ekspresiyasiga ta'sir qiladi. Ushbu topilmalar grelin antagonistlari semirishni davolash va shirin ovqatning haddan tashqari iste'mol qilinishini to'xtatish uchun terapevtik salohiyatga ega ekanligini ko'rsatadi.

Kalit so'zlar: Asetilkolin, dopamin, oziq-ovqatni rag'batlantirish, grifin, GHS-R1A, operant shamollatish

Kirish

Grafinning aylanma gormoni energiya balansini boshqarishda muhim rol o'ynashi aniqKojima va boshq. 1999; Nogueiras, Tschöp & Zigman 2008 yil). Eng avvalo oshqozon orqali chiqariladi (Dornonville de la Cour va boshq. 2001), ghrelin kemiruvchilarda ham, insonda ham kuchli orksiqen ta'sir ko'rsatadi (Wren va boshq. 2000, 2001) markaziy asab tizimi (CNS) retseptorlari (Saloméva boshq. 2009a), o'sish gormoni salgılayıcı reseptörü (GHS-R1A) (Xovard va boshq. 1996). Albatta, grifin oziqlanish va energiya homeostazisiyle bilan bog'liq hipotalamik va miya sopi davrlarini maqsad qiladi (Dikson, Leng va Robinzon 1993 y; Beyli va boshq. 2000; Xevson va Dikson 2000 yil; Faulconbridge va boshq. 2003, 2008). Oziqlanish xulq-atvori faqatgina ozuqa moddalarini to'ldirish zarurati bilan bog'liq emas (ya'ni, gomeostazani tiklash zarurati); xushbo'y yog 'va / yoki shakar ovqatlar, qoniqish holatiga qaramasdan iste'mol qilishni rag'batlantirishlari mumkin (Zheng va boshq. 2009). Hozirgi kunda semirish epidemiyasini boshqaradigan asosiy omil - shakar kabi mazali tabiiy kuchlanishlarni ortiqcha iste'mol qilish. Markaziy ghrelin signalizatsiya tizimi noanostatik shakar iste'moli uchun muhimmi yoki yo'qmi, shuning uchun kaloriya, mazali va baxtiyor shirin taomlarni iste'mol qilishni bartaraf etish uchun potentsial muhim terapevtik maqsadni ko'zda tutish kerak.

So'nggi ma'lumotlarga ko'ra, gurlin gomeostimik bo'lmagan joylarda va gomosostatik bo'lmagan / mukofotlanadigan oziqlantirish bilan shug'ullanadiJerlhag va boshq. 2007), biz grelin va uning retseptorlari uchun oziq-ovqatni rag'batlantirishda va sukroz mukofotiga yo'naltirilgan maqsadga qaratilgan xatti-harakatlardagi rolini baholashga harakat qildik. Ushbu mezolimbik joylar giyohvandlikka qarshi kurash bo'yicha tadqiqotlarni uzoq vaqt davomida boshlashdi, chunki ular ko'plab giyohvandlik vositalari uchunEngel 1977; Koob 1992). Grelinning maqsadli mezolimbik yo'llari ventral tegmental hududidan (VTA) yadroli akumbenslarga (NAcc) dopamin proektsiyasini (Jerlhag va boshq. 2006, 2007), giyohvand moddalar va giyohvand moddalar (jumladan, oziq-ovqat (jumladan,Koob 1992). Qizig'i shundaki, GHS-R1A dopaminergik neuronlar (Abizaid va boshq. 2006), grelinning VTA dopamin tizimiga bevosita ta'sirini keltirib chiqaradi. Ushbu immunohistokimyoviy ma'lumotlar VTA-da grelin ta'sirining to'plangan xatti-harakatlari va elektrofiziologik dalillari bilan to'ldiriladi. Masalan, grelinni VTA ichkarisida yuborish VTA dopamin neyronlarining faolligini oshiradi (Abizaid va boshq. 2006) va NAcc ga dopaminning tarqalishini oshiradi (Jerlhag va boshq. 2007). Grelin, shuningdek, mukofotlashning muhim yo'li bo'lgan xolinergik-dopaminerjik aloqaning faolligini oshiradi. Darhaqiqat, grelinning dofaminga ta'sirining hech bo'lmaganda bir qismi xolinergik tizim vositachiligiga o'xshaydi (Jerlhag va boshq. 2007).

Oziq-ovqat mahsuloti mavjud bo'lganda grifin kuchli oroksigen ta'siriga ega ekanligi aniqlangach, grifin oreksigenik ta'sirining o'zgaruvchanligi va yoqimli shirin taomlar kabi mustahkamlashtiruvchi tomonlarini o'zgartirish uchun kengaytirish mumkinligi hali ma'lum emas. harakat / ish bir shirin taom olishni istaydi). Narkomaniyaning giyohvandlik vositalarini rag'batlantirish va mukofotlash samaradorligi o'z-o'zini boshqarish, operatsiyani ta'minlash modelida baholanishi mumkin. Operatsion shartnoma - mukofotni qo'lga kiritish uchun yo'naltirilgan va ixtiyoriy xatti-harakatlarni baholovchi rag'batlantiruvchi xatti-harakatni tahlil qilishning asosiy tartibi. Bir shaxs mukofot olish uchun sarflashga tayyor bo'lgan ish hajmini o'lchab, unda mukofot qiymatining ob'ektiv o'lchovi (Xodus 1961). Mesolimbik hududlari ovqatlanishni o'z ichiga olgan xulq-atvorning motivatsion jihatlari uchun juda muhimdir va grelinning tegishli mesolimbik mintaqalarda neyronal ta'sirga ta'sir etishi aniq. Gurlinning yuqori shakarli oziq-ovqat mahsulotlariga bo'lgan g'ayratiga to'g'ridan-to'g'ri ta'sir qilish hali ko'rsatilmagan. Bizning asosiy maqsadimiz markaziy ghrelin signalizatsiya tizimining yuqori shakar oziq-ovqat mukofotining hedonik / rag'batlantiruvchi yoki ijobiy mustahkamlash xususiyatlarida va ushbu tizimning bostirilishini, yangi selektiv GHS-R1A antagonisti JMV2959 (Saloméva boshq. 2009a), shirinliklarni olish uchun motivatsiya bostirishi mumkin. GHS-R1A antagonistlari hozirgi vaqtda 2 tipidagi diabet kasalliklarida terapevtik tekshiruvdan o'tkazilmoqda, chunki grifin signalizatsiyasini to'xtatish glyukoz gomeostazigaquyosh va boshq. 2006), shirin taomlarni kamaytirishdan ham foydalidir. Bir nechta dalillar, dopaminerjik va kolinerjik nörotransmisyonun motivasyonlu mükerrer harakatlarda muhim rol o'ynashini ko'rsatadi. Shu sababli, ghrelin markaziy mukofot tizimiga ta'siri haqida ko'proq xarakterli xususiyatni aniqlash uchun, ghrelin davolanishidan so'ng, ghrelin davolanishidan so'ng, asosiy mukofot nodlarda, VTA va NAcc dopamin va asetilkolin retseptorlari gen ekspozitsiyasi o'zgarishiga ta'siri baholandi.

Uslublar

Hayvonlar

Katta yoshdagi erkak Sprague-Dawley kalamushlari (200-250 g, Charlz daryosi, Germaniya) 12-soatlik yorug'lik / qorong'u davrda joylashgan bo'lib, oddiy choy va suv bilan ta'minlangan ad libitum, aks holda ko'rsatilgan hollar bundan mustasno. Barcha chorvachilik usullari axloqiy jihatdan ruxsat berilgan va Gothenburg Institutional Animal Care va Foydalanish qo'mitasi ko'rsatmalariga asosan amalga oshirildi.

jarrohlik

CNS-ga yo'naltirilgan xulq-atvor tajribalari uchun uchinchi qorincha yo'riqnomasi kanulasi (26 o'lchov; Plastics One, Roanoke, VA, AQSh; AQSh; koordinatalar: o'rta chiziqda, bregmadan 2 mm orqada va 5.5 mm ventral dura materga, enjektor 7.5 mm. ventral of the dura) izofluranli behushlik ostida joylashtirilgan. Kanulalar bosh suyagiga tish akril va zargar vintlari bilan bog'langan va ilgari tasvirlanganidek obturator bilan yopilgan (Skibicka, Alhadeff & Grill 2009 yil). Kannulni uchinchi qorin bo'shlig'iga joylashtirish operatsiyadan bir hafta o'tgach, 5-tio-D-glyukoza [210 mili vositasida (sho'r)] ning markaziy inyeksiyasiga yuborilgan sempatoadrenren-mediatsiyaviy glyukemik javobni o'lchash yo'li bilan tasdiqlandi (Ritter, Slusser & Stone 1981 yil). Ushbu joylashtirishni tekshirish protokoli tarkibiga kiritilganligi uchun asosiy plazma glyukoza darajasining kamida 100% dan ortib ketishi kerak edi. Gen ekspression eksperimenti uchun kalamushlarni (60-75 mg / kg Ketalar va 0.5 mg / kg Domitor ip, Pfizer, Shvetsiya, Orion Co, Finlyandiya) va surunkali intraserebroventrikulyar (ICV) kanül (Alzet Brain Infusion Kit II, DURECT Corp., Cupertino, CA, AQSh) quyidagi koordinatalar yordamida lateral qorin bo'shlig'iga kiritilgan: bregmadan 0.6 mm orqada, o'rta xattidan 1.4 mm lateral, boshidan 2.3 ventral. Kanola polietilen kateter orqali osmotik minipumpga (Alzet Mini-Osmotik nasos modeli 2002, Durect, Cupertino, oqim tezligi, 0.5 kun uchun 14 kun uchun) hayvonlarning teri ostiga joylashtirilgan.

Operatsion shamollatish modeli

apparat

Operatsion susaytiruvchi tajribalar sichqoncha uchun ishlab chiqilgan sakkiz operativ xonada (30.5 × 24.1 × 21.0 sm, Medical-Associates, Georgia, VT, USA) o'tkazildi. Har bir xonada metall panjarali qavat, ikkitasi orqadagi oq lampalar va ikkita 45 mg sakkaroz pelletlarini (GlaxoSmithKline, Test Diet, Richmond, IN, AQSh) oziq-ovqat tepsiga etkazib beradigan oziq-ovqat pellet dispenseri bor edi. Ma'lumotni yig'ish va qayta ishlash MED-PC dasturi (Medical-Associates, Gruziya, VT, AQSh) tomonidan nazorat qilingan.

Training

Operativ shamollatish uchun ishlatiladigan protsedura (la Fleur va boshq. 2007) va (Tracy va boshq. 2008). Barcha kalamushlarni haftalik oziq-ovqat taqiqlash paradigmasi boshlandi, bu vaqt davomida ularning dastlabki vazni bir hafta ichida xNUMX% ga kamaytirildi. ICV-cannulyatsiya qilingan kalamushlarni davolash uchun operatsiyadan bir hafta o'tgach boshlandi. Operator qutilariga joylashtirilgunga qadar, kalamushlarni uy sharoitida sukroz peletlariga kamida ikki marta ta'sir qilishgan. Keyinchalik, kalamushlar sakkaroz pelletlarni kuniga ikki seans bilan FR90 dasturining sobit bo'lgan nisbati ostida qo'lda matbuotga o'rgandilar. FR1 da faol qo'lda bir marta bosish bitta sukroz peletini yetkazib berishga olib keldi. Barcha FR sessiyalarida 1 daqiqa davom etdi, yoki kalamushlar 30 granulalarini qo'lga kiritgunga qadar, qaysi biri birinchi sodir bo'lishiga qadar. Sichqonchalarning ko'pchiligi 100 dan so'ng 100 sessiyalariga o'tish uchun 10 peletka o'lchamiga erishdi. Faol bo'lmagan qo'zg'atgichga tegishli preslar qayd etilgan, ammo dasturlashtirilgan natijalar yo'q. FR15 dasturining sessiyalari FR1 va FR3 (navbat bilan pelet uchun uch va besh bosim) tomonidan bajarildi. Shunga qaramay, navbatdagi jadvalga o'tish uchun faol kolida sessiya uchun minimal 5 javob kerak edi; kalamushlarning ko'pchiligi ushbu darajaga erishish uchun faqat bir-ikki FR100 va FR3 jadvallarini talab qilgan. FR5 dasturini ta'qib qilgan ilg'or daraja (PR) jadvali ta'qib etilib, unda mukofotning mukofotni olishga tayyor bo'lgan ish hajmini aniqlash uchun mukofotning har bir bahosi har bir keyingi mukofot uchun oshib boradi. Javob talabi quyidagi tenglama bo'yicha oshirildi: javob nisbati = [5e (5 × infuzion raqam)] - 0.2 quyidagi qatorlar orqali: 5, 1, 2, 4, 9, 12, 15, 20, 25, 32, 40 , 50, 62, 77, 95, 118, 145, 178, 219, 268. PR-sessiyasi sichqonchani 328 daqiqada sovg'a olmaganida yakunlandi. Uchrashuv yakunlanishidan oldingi yakunlangan raqam sifatida belgilangan. Yig'ilishda olingan oziq-ovqat pelletlari soni ketma-ket uchta sessiya uchun 60% dan ko'proq bo'lganda, javob berish barqaror hisoblanadi. Ko'p holatlarda javob berish besh dan etti sessiyada barqarorlashdi. PR testi kuniga bir marta o'tkazildi. Sichqoncha barcha 15 daqiqa davom etdi, garchi barcha kalamushlar barcha operatsiyalarni to'xtatish uchun 75 daqiqagacha opera qutilarida qoldi. So'ng kalamushlarni bir soat bepul ovqatlantirish uchun chov sotib olish o'lchovlari uchun uy qafaslariga o'tkazildi. Trening oxirida va sinovdan o'tkazilgach, kalamushlar qaytib keldi ad libitum ovqatlanish jadvali.

Eksperimental dizayn

Barcha kalamushlar intraperitoneal (IP) yoki alohida kalamush guruhida, uchinchi qorincha (uchinchi ICV) inyeksiyalari erta erta (grifin testlari uchun) va kechikish davrida grafillashgan antagonist tajribalari uchun 20 daqiqa oldin boshlandi operatsion test sinovlari. Barcha sharoitlar kamida 48 soat bilan ajratilgan va muvozanatlashtirilgan tarzda ishlangan (har bir sichqon alohida test kunlarida barcha sharoitlarni oldi).

1ni sinash: Periferik yoki markaziy grafin dori vositalarining Sichqoncha bo'ylab sukroz uchun PRga operativ javob berish ta'siri

Barcha kalamushlarni qo'llash uchun ikkita shartdan so'ng tekshiruvlar o'tkazildi: IP yoki fiziologik glyutin bilan davolash (Toxris, Bristol, UK, 0.33 ml / kg vazniga xNUMX mg / kg). Tanlangan IP-gyrlin dozasi oldin kalamushlarda ovqatlantirish javobini berish uchun ko'rsatildiWren va boshq. 2000) va shuningdek, sichqonchani akumbal dopamin salınımını va lokomotor faoliyatiJerlhag 2008). Operantni testdan o'tkazganidan so'ng, kalamushlarni chowga erkin kirish imkoni berildi va chov sotib olish bir soatlik davrdan keyin o'lchandi. So'ngra, alohida kalamushlar guruhida uchta holatdan so'ng maqsadli CNS preparatini etkazib berishdan keyin javoblarni ko'rib chiqdik: 0.5 mL hajmida uchinchi qorincha sho'rlanishi, 1.0 ig yoki 1 migratsillagan sichqonchani ghrelin (Tocris) bilan nazorat qilish. Tanlangan gri'lin dozalari ilgari ovqatlantirish javoblariniNakazato va boshq. 2001). Ikkala ICV va IP-grafin tadqiqotlar uchun, qo'lda bosish tajribalari qoniqarli holatda (ya'ni, oziq-ovqat iste'mol qilish homeostatik drayvlar o'rniga oziq-ovqatning foydali xususiyatlari bilan boshqariladi) amalga oshirildi. Bundan tashqari, har ikkala ishda ham operatsion testdan so'ng, kalamushlarni chowga erkin kirish imkoni berildi va chov sotib olish bir soatlik muddatdan keyin o'lchandi.

2ni sinash: periferik yoki markaziy davolanishni grafin retseptorlari (GHS-R1A) antagonisti (JMV2959) bilan kalamushlarda sukroz mukofotini rag'batlantirish uchun rag'batlantirish motivatsiyasi ta'siri

PR operantli javoblar quyidagi uch holatdan keyin ko'rib chiqildi: IP tuzsizligi, 1 mg / kg yoki 3 mg / kg JMV2959 (AEZS-123, AeternaZentaris GmBH, Frankfurt, Germaniya) bilan nazorat qilish. JMV2959 dozalari asosida tanlangan Jerlhag va boshq. (2009) va Egjioglu va boshq. (2010) va oldindan olingan ma'lumotlarga ko'ra, konditsioner joy afzaliyatini kamaytirishga, lekin lokomotor faoliyatga bevosita ta'sir ko'rsatmaslikka ko'rsatma berilgan. Operantni sinovdan o'tkazganidan so'ng, kalamushlarni chowga bepul kirish imkoni berildi. To'g'ridan-to'g'ri o'tkir markaziy antagonist ta'sirining ta'sirini baholash uchun, alohida kalamushlar guruhida quyidagi uch holatdan keyin operativ xatti-harakatlar ko'rib chiqildi: uchinchi qorincha sho'rlanishi, 5 mk yoki 10 mL hajmida 2959 mkg JMV1 ning nazorat holati. JMV2959 dozasining tanlangan ICV dozalari asoslandi Saloméva boshq. (2009a), bu erda 1 ig ghrelin-administratsiyalangan ICV ning oreksigenik harakati bloklandi. Operantni sinovdan o'tkazganidan so'ng, kalamushlarni chowga erkin kirish imkoni berildi va choy iste'moli bir soatlik muddatdan keyin va shuningdek, boshlang'ich inyeksiyadan keyin 24 soat ichida o'lchandi. Gret-ginli grafin (yuqorida keltirilgan) dan farqli o'laroq, GHS-R1A antagonisti bilan o'tkazilgan tadqiqotlar endogen grafin grafinining yuqori darajasini ta'minlash uchun inyeksiyadan oldin 16-soatlik oziq-ovqat taqiqlashidan keyin amalga oshirildiCummings va boshq. 2001).

3 ning eksperimenti: VTA va NAcc dopamin- va asetilkolin bilan bog'liq genlarni ifodalovchi ghrelinning o'zgarishi.

Bu erda ikki hafta davomida surunkali ICV grelin infuziyasining dopolaminerjik va xolinergik uzatishda ishtirok etgan tanlangan genlarni ekspluatatsiyaga ta'sirini mezolimbik mukofot yo'llarining ikkita asosiy tugunlari - VTA va NAcc da aniqladik. Dopamin bilan bog'liq tanlangan genlar dopamin retseptorlari (D1A, D2, D3, D5), katekol-O-metiltransferaza, tirozin gidroksilaza (faqat VTA da) va monoamin oksidaz A ni kodlovchi genlar edi. Asetilkolin bilan bog'liq genlar: nikotin retseptorlari (a3 a6, -2, -3). Biz baholashni tanlagan genlar ilgari grelin ta'sirida va / yoki mukofotlash / motivatsiya xatti-harakatlarida ishtirok etgan (Kelley va boshq. 2002; Figlewicz va boshq. 2006; Jerlhag va boshq. 2006, 2007; Sibiliya va boshq. 2006; Dalli va boshq. 2007; Kuzmin va boshq. 2009; Li va boshq. 2009; Nimitvilai va Brodi 2010 yil; Perello va boshq. 2010). Gen ekspresyonuna ta'sir ko'rish imkoniyatlarini oshirish uchun o'tkir in'ektsiya holatida surunkali gyrlin / tuzli infüzyon protokoli ishlatilgan; Bundan tashqari, agar grelin uzoq muddatda mukofot tizimining muhim regulyatori bo'lsa, ortiqcha ovlash va semirishni targ'ib qilsa, uning asosiy mukofot mexanizmlarini o'zgartirishning surunkali ta'siri katta ahamiyatga ega bo'ladi.

Preparatni qo'llash va to'qimalarni ajratish

Kateter va osmotik pompa asetilatsiyalangan inson grielle (Rose Pharma, Kopengagen, Daniya) dan eritma (8.3 ig / sant / kun) yoki salin vosita eritmasi (0.9% NaCl) bilan to'ldirilgan; ushbu doz va davolanish muddati ilgari hipotalamusta gen ifodasini ta'sir qilish uchunSaloméva boshq. 2009b). Minipompaniyalarni joylashtirilgandan keyin o'n to'rt kun o'tib, kalamushlar boshi berkitib o'ldirildi. Miyalari tezda bartaraf qilindi va VTA va NAcc miya matritsasi bilan ajratildi (har bir mintaqaning chegaralari Paxinos va Watson 1986 yil), suyuq azotda muzlatilgan va keyinchalik mRNA ifodasini aniqlash uchun -80 ° C da saqlanadi.

RNK izolyatsiyasi va mRNA ifodasi

Shaxsiy miya namunalari Qiazolda (Qiagen, Hilden, Germaniya) TissueLyzer (Qiagen) yordamida bir hil holga keltirildi. Umumiy RNK RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (Qiagen) yoki RNeasy Micro Kit (Qiagen) yordamida ekstraktsiya qilindi, ikkalasi ham qo'shimcha DNAse davolash (Qiagen) bilan. RNK sifati va miqdori spektrofotometrik o'lchovlar bilan baholandi (Nanodrop 1000, NanoDrop Technologies, Wilmington, DE, AQSh). CDNA sintezi uchun umumiy RNK tasodifiy heksamerlar (Applied Biosystems, Sundbyberg, Shvetsiya) va Superscript III teskari transkriptaz (Invitrogen Life Technologies, Paisley, Buyuk Britaniya) yordamida transkripsiya qilingan. RNaz vositachiligidagi degradatsiyani oldini olish uchun rekombinant RNaseout Ribonukleaza inhibitori (Invitrogen) qo'shildi. Barcha cDNA-reaksiyalar uch nusxada bajarilgan. Haqiqiy vaqtda teskari transkripsiya PCR TaqMan Custom Array tahlillari yordamida amalga oshirildi. Ular TaqMan probi va on-layn katalogdan (Amaliy biosistemalar) tanlangan maqsadli genlar uchun primer to'plamlari bilan yaratilgan. TaqMan Array platformalaridagi har bir portga 100 ng umumiy RNKga to'g'ri keladigan cDNA yuklangan va nukleazsiz suv bilan qo'shilib, 50 ul TaqMan Gene Expression Master Mix (Amaldagi Biosistemalar) 100 finall yakuniy hajmiga etkazilgan. TaqMan Arrays 7900HT tizimi yordamida TaqMan Array Upgrade (Amaliy Biosistemalar) yordamida tahlil qilindi. Termal velosiped shartlari quyidagicha edi: ikki daqiqa davomida 50 ° C, 94.5 daqiqada 10 ° C, so'ngra 40 soniya davomida 97 ° C va 30 daqiqa davomida 59.7 ° S.

Gen ekspression qiymatlari DD asosida hisoblab chiqilganCt usul (Livak va Shmittgen 2001 yil), bu erda sho'rlangan guruxlar kalibrator sifatida belgilandi. Qisqasi, DCt pol qiymatini ifodalaydi.Ct) Nishon genining ekspluatatsiya qiluvchi gen va Dt ekssuslariCt D ni ifodalaydiCt grifin guruhini kalibratördan kam. Tenglama nisbati = 2 tenglamasi yordamida nisbiy miqdorlar aniqlandi-DCt. Kalibrator namunasi uchun tenglama nisbiy miqdori = 2-01 bo'lgan; shuning uchun har bir boshqa namuna bu bilan bog'liq. Glyceraldehyde-3-fosfat dehidrogenaza mos yozuvlar gensi sifatida ishlatilgan.

statistika

Barcha xulq-atvor parametrlari keyinchalik farqlanish tahlili bilan tahlil qilingan post hoc Tukey sinovi yoki t- tegishlicha so'raydi. Statistik tahlillar statistikasi (Tulsa, OK, AQSh) yordamida amalga oshirildi. Surunkali markaziy glyutenli davoning gen ekspressioniga ta'sirini tahlil qilish uchun, t-test ishlatildi PD qiymati yordamida hisoblangan qiymatlarCt-qiymatlar. Turli xil holatlar sezilarli hisoblanadi P <0.05. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM sifatida ifodalanadi.

Natijalar

1ni sinash: Periferik yoki markaziy grafin dori vositalarining Sichqoncha bo'ylab sukroz uchun PRga operativ javob berish ta'siri

Bu erda biz glyuginning tabiiy shirin taomlarni iste'mol qilish va shakarni mustahkamlashdagi rolini baholash uchun giyohvandlik tadqiqotida ishlatiladigan paradigma qo'llaniladi. Ayniqsa, periferik grielinni sukroz samarasi samaradorligini aniqlash uchun sukrozning o'z-o'zini boshqarishini sichqonchani 20 daqiqada transport vositasi yoki grafin inyeksiya qilinganidan so'ng progressiv javob rejasida ko'rib chiqdik. O'tkir periferik grafin in'ektsiyasidan so'ng, kalamushlarda barcha operativ xatti-harakatlar sezilarli darajada oshdi: faol qo'lni bosish (P Barcha vaqt punktlari uchun <0.05), olingan shakar donalari soni (P Barcha vaqt punktlari uchun <0.005) va 120 daqiqalik tanaffus (P <0.005, transport vositasi va grelin uchun mos ravishda 32.53 ± 3.4 va 41 ± 4.3; Shakl 1a, b). Adabiyot, birinchi navbatda, grelinning oreksigen ta'siriga ta'sir ko'rsatadigan markaziy ta'sir maydonini qo'llab-quvvatlaydi. Shu bilan birga, GHS-R1A, shuningdek, CNS tashqarisida oziq-ovqat iste'molini nazorat qilish uchun tegishli joylarda, masalan, vagus asabida ham namoyon bo'ladi; shuning uchun IP grelinning kuzatilgan ta'sirining bir qismi ushbu periferik retseptorlari vositasida bo'lishini istisno qilish mumkin emas. Ammo oz miqdordagi va grelin dozasini markaziy in'ektsiyasi, faqat CNS GHS-R1A ni rag'batlantiradi. Shuning uchun, grelinning sukroz mukofoti samaradorligiga to'g'ridan-to'g'ri CNS ta'sirini aniqlash uchun biz operant paradigmasidan 20 daqiqa oldin, shuningdek, vosita yoki grelin uchinchi qorincha in'ektsiyasi bilan qo'llanilgan parallel tadqiqotlar o'tkazdik. Ta'sir gipotezasining markaziy markaziga mos ravishda, kalamushlarga o'tkir ICV grelin in'ektsiyasi (ikkalasi ham 0.5 mg va 1.0 ug dozalari) operativ xatti-harakatlarning yuqorida aytib o'tilgan barcha choralarini sezilarli darajada oshirdi (Shakl 2a, b). ICV grelin tadqiqidagi faol qo'llarni qabul qilish vaqtida 10 va 30 daqiqalar vaqtida sekin-asta paydo bo'lgan bo'lsa-da, 60 daqiqada muhim ahamiyatga ega bo'ldi [faol qo'lda: 10 daqiqa F(2, 24) = 0.94, P = 0.41, 30 daqiqa F(2, 24) = 3.13, P = 0.06, 60 daqiqa F(2, 24) = 5.86, P <0.01, 90 daqiqa F(2, 24) = 6.42, P <0.01, 120 daqiqa F(2, 24) = 6.03, P <0.01; olingan mukofotlar: 10 daqiqa F(2, 24) = 0.26, P = 0.78, 30 daqiqa F(2, 24) = 2.76, P = 0.08, 60 daqiqa F(2, 24) = 8.31, P <0.005, 90 daqiqa F(2, 24) = 10.16, P <0.001, 120 daqiqa F(2, 24) = 11.93, P <0.001; va tanaffus nuqtasi: F(2, 24) = 7.22, P <0.005 (transport vositasi uchun 17.31 ± 1.53, 33.15 ± 5.52, 36 ± 6.95, mos ravishda 0.5 mg va 1.0 ug grlin)], ushbu yo'nalish bo'yicha etkazib berilganda, grelin ta'sirida oziqlanish kechikishi haqidagi boshqa hisobotlarga mos keladigan vaqt kursi (Faulconbridge va boshq. 2003). Ikkala tajribada ham faol bo'lmagan qo'lda faoliyat kichik va turli xil davolash guruhlari o'rtasida (IP 4.1 ± 1.1, 4.1 ± 1.1, avtomobil va ghrelin uchun navbati bilan ICV 3.9 ± 1.1, 2.1 ± 0.7, 3.5 ± 1.6 transport vositasi, navbati bilan 0.5 mg va 1.0 mg ghrelin), bu muolajani faoliyatdagi noma'lum maqsadga yo'naltirilgan o'zgarishlarga olib kelmasligini ko'rsatmoqda. Operat tekshirilgandan so'ng, sichqonchani uy qafasiga qaytarib olib, chovga erkin kirishga ruxsat berildi; grifin bilan og'riydilar va periferikP <0.05) yoki markaziy [F(2, 24) = 12.64, P <0.001], birinchi soat ichida avtoulov bilan muomala qilingan guruhlarga qaraganda chov iste'mol qilishni deyarli ikki baravarga oshirdi (Shakllar 1c va 2c). Oldingi ma'lumotlar bo'yicha (Faulconbridge va boshq. 2003O'tkir markaziy grellin inyeksiyasining ko'p hiperfagik ta'sirining inyektsiya qilinganidan keyin uch soat ichida sodir bo'lishini ko'rsatadigan bo'lsak, bizning ishimizda ICV ni yoki graflin dozu [24 ± 17.4, 1.12 ± 18.42, 1.34 ± 19.12 vositasi, 1.43 μg va 0.5 μg ghrelin, F(2, 24) = 2.27, P = 0.13].

Shakl 1 

Periferik grellin in'ektsiyasi rag'batlantiruvchi oziq-ovqat mahsulotlarini rag'batlantiruvchi rag'batlantiruvchi vositalarni ishlab chiqarish uchun motivatsiyani oshiradi. (A) faol qo'lidagi javoblar soni va (b) ga ega bo'lgan 45 mg sakkaroz miqdorining soni sezilarli darajada ko'paydi. ...
Shakl 2 

CNS (uchinchi ICV) grifinni etkazib berish sukrozning qiymatini PR nisbati operativ kondensatsiya modelida oshiradi. (A) faol qo'lidagi javoblar soni va (b) dan olingan 45 mg sukroz miqdorining soni sezilarli darajada uchinchi ...

2ni sinash: periferik yoki markaziy davolanishni grafin retseptorlari (GHS-R1A) antagonisti (JMV2959) bilan kalamushlarda sukroz mukofotini rag'batlantirish uchun rag'batlantirish motivatsiyasi ta'siri

Keyinchalik, GXS-R1A preparatining sukroz samarasi samaradorligiga ta'sirini tekshirdik. Shunday qilib, sukrozning o'z-o'zini boshqarish dasturi, vosita IP yoki 20 mg / kg yoki 1 mg / kg JMV3, GHS ning IP-infektsiyasidan so'ng yuqori darajadagi endogen grafin 2959 daqiqani ta'minlash uchun kechaning oziq-ovqat bilan cheklangan kalamushlarida tekshirildi. -R1A antagonisti. JMV2959ning periferik in'ektsiyasidan so'ng, kalamushlarda operativ harakatlarning barcha choralari sezilarli darajada kamaydi [faol qo'lda: besh daqiqa F(2, 24) = 11.53 P <0.0005, 120 daqiqa F(2, 24) = 11.27, P <0.001; olingan mukofotlar: besh daqiqa F(2, 24) = 23.39 P <0.0005, 120 daqiqa F(2, 24) = 9.26, P <0.001 va tanaffus nuqtasi 120: F(2, 24) = 5.98, P <0.01 (45.31 ± 6.45, 42.08 ± 5.80, transport vositasi uchun 30.0 ± 5.89, mos ravishda 1 mg / kg va 3 mg / kg JMV2959)]. Post hoc tahlil natijalariga ko'ra, asosiy ta'sir 3 mg / kg dozasidaShakl 3a, b). Sukrozni mukofotlash samaradorligida markaziy grafin retseptorlari rolini aniqlash uchun xuddi shunday tadqiq ishlov berishdan oldin uchinchi qorincha 2959 daqiqagacha qaysi vosita yoki JMV5 (10 ig yoki 20 mkg) qo'llanilgan edi. Yuqorida keltirilgan yuqorida qayd etilgan operativ xatti-harakatlarning har ikkala dozasida JMV2959 (o'tkir uchinchi qorincha infuziyasi)Shakl 4a, b). Kuzatilgan ta'sir darhol xuddi shunday bo'ldi post hoc tahlil guruhlari orasida sezilarli farqlar aniqlandi, faqat 10 daqiqada operatsiya xonasida faoliyat davom ettirildi. Bu sinov vaqtida saqlanib qoldi [faol qo'lda: 10 daqiqa F(2, 24) = 10.16, P <0.0005, 30 daqiqa F(2, 24) = 11.48, P <0.0005, 60 daqiqa F(2, 24) = 9.11, P <0.001, 90 daqiqa F(2, 24) = 8.30, P <0.001, 120 daqiqa F(2, 24) = 4.95, P <0.05; olingan mukofotlar: 10 daqiqa F(2, 24) = 21.23, P <0.0001, 30 daqiqa F(2, 24) = 25.08, P <0.0001, 60 daqiqa F(2, 24) = 19.24, P <0.0001, 90 daqiqa F(2, 24) = 20.04, P <0.0001, 120 daqiqa F(2, 24) = 5.44, P <0.01; va tanaffus nuqtasi: F(2, 24) = 3.78, P <0.05 (51.4 ± 8.58, avtomobil uchun 38.13 ± 5.07, 33.67 ± 5.21, mos ravishda 5 ug va 10 ug JMV2959)].

Shakl 3 

Grifin retseptorlari antagonisti, JMV2959ning periferik etkazib berilishi. rag'batlantiruvchi oziq-ovqat mahsulotlarini rag'batlantiruvchi omillarni ishlab chiqarish modelini ishlab chiqarishda rag'batlantirishni kamaytiradi. Faol qo'lda (a) va 45 mg sukroz miqdoridagi javoblarning soni ...
Shakl 4 

GHS-R1A-ning JMV2959 bilan markaziy blokadasi PR-operativ kondensatsion modelida oziq-ovqat mukofotini olish uchun motivatsiyani kamaytiradi. Faol qo'lda (a) va olingan (b) olingan 45 mg sakkaroz miqdoridagi javoblar soni sezilarli darajada kamayadi ...

Kutilganidek (Xodus 1961; Yahudit va boshq. 1995), barcha davolash guruhlarida, shu jumladan, IP va ICVni boshqarish yo'llari ham, oziq-ovqat mahrumiyetinin sükroz uchun operatsion javobga ta'siri aniq bo'ldi (Shakllar 3a & 4a) va to'yingan holatda kuzatilgan kontrastlarni (Shakllar 1a & 2a). Faol bo'lmagan qo'zg'oturani boshqarish uchun vosita (9.6 ± 3.0, 6.8 ± 2.2, 5.6 ± 1.9 va 1 mg / kg yoki 3 mg / kg JMV2959, ICV 6.4 ± 1.3, 4.6 ± 1.3, 4.4 ± 1.7 uchun 5 mkg va 10 mkg JMV2959) va JMV2959 ning periferik yoki markaziy usulda qo'llanishi ushbu faoliyatga sezilarli ta'sir ko'rsatmadi (bu faoliyat turli xil davolash guruhlari o'rtasida sezilarli darajada farq qilmadi). ICV tekshiruvi uchun operativ testdan so'ng, sichqonchani uy qafasiga qaytarib berdilar va chowga erkin kirishni ta'minladilar; Qizig'i shundaki, chov sotib olishga hech qanday ta'sir bir soatlikShakl 4c) yoki 24-soatlik vaqt nuqtasi (ma'lumotlar ko'rsatilmaydi). Bu griffin signalizatsiyasi, oziq-ovqatdan mahrum qilish sababli oziq-ovqatni rag'batlantirish uchun zarur bo'lganligini ko'rsatishi mumkin, bu esa mahrumlik davrida faollashtirilgan boshqa ortiqcha mexanizmlar tufayli 16 soat oziq -ovqatni yo'qotishdan kelib chiqqan erkin oziqlantirish uchun zarur emas. Barcha bepul oziqlantirish o'lchovlari preparatni 140 daqiqadan so'ng amalga oshirdi va shuning uchun ta'sirning etishmasligi qisman preparatni yuvish sababli chiqarib tashlashni istisno qila olmaymiz.

3 ning eksperimenti: VTA va NAcc dopamin- va asetilkolin bilan bog'liq genlarni ifodalovchi ghrelinning o'zgarishi.

Biz ushbu tadqiqotda surunkali markaziy ghelin davolanishini tanlangan dopaminli retseptorlari va fermentlarni ifodalashga ta'sirini o'rganib, dopamin va asetilkolin bilan bog'liq genlarni asosiy mezolimbik tugunlarda, VTA va NAccda grifin bilan almashtirilishini o'rganib chiqdik. dopamin ishlab chiqarishda va metabolizmda, grifinning gipotalamusda gen ekspresyonidagi o'zgarishlar bilan bog'liq bo'lgan ishlab chiqarish uchun yaratilgan paradigmadaSaloméva boshq. 2009b). VKA dopamin retseptorlari D5 va nikotinik asetilkolin retseptorlari (nAChRb2) gri- lin bilan ishlov berilgan ratlarda sho'r-davolangan guruhga nisbatan (masalan,Shakl 5a). NAcc'ta, ghrelin bilan davolash qilingan dorilarda D1A, D3 va D5 dopamin retseptorlari va nikotinik asetilkolin retseptorlari nAChRa3-ni kodlayan genlarning mRNA ekspresiyasi sho'r-davolangan guruhga nisbatan (Shakl 5b).

Shakl 5 

Surunkali ICV grafinidan yoki vositani davolashdan keyin VTA (a) va NAcc (b) da dopamin va asetilkolin bilan bog'liq gen ekspression. Ma'lumotlar fiziologik holatga nisbatan kat o'zgarishining o'rtacha qiymatini ifodalaydi. D1, dopamin D1 retseptorlari; D2 dopamin D2 retseptorlari; D3, dopamin ...

Munozara

Bu erda biz Markaziy ghrelin signalizatsiya tizimiga sukroz mukofotini rag'batlantirish va mustahkamlash xususiyatlarini modulyatsiya qilishda va surunkali markaziy ghelin davolanishini asosiy mezolimbik mukofot nodlaridagi dopaminerjik va xolinergik retseptorlarning gen ekspresifikatsiyasiga ta'sirini ko'rsatamiz. Natijalar grifinning markaziy va periferik etkazilishi hayvonning sukroz mukofotini olish uchun qilinadigan ish hajmini sezilarli darajada oshirayotganini ko'rsatadi. Bundan tashqari, gyrlin reseptörünün tizimli yoki markaziy blokajı sukroz uchun javob beradigan operandni bastırdı. Shunday qilib, endojen ghrelin signalizatsiyasi, sukroz mukofotiga rag'batlantirish motivatsiyasi uchun muhim ahamiyatga ega. Bizning topilmalarimiz markaziy ghrelin signalizatsiya tizimining muhim rolini oziq-ovqat, shu jumladan, mukofotning rag'batlantiruvchi qiymatini oshirishga qaratilgan gipotezasi bilan mos keladi. Oziq-ovqat taqiqlashi sukrozning foydali qiymatini oshiradi (Xodus 1961; Yahudit va boshq. 1995) va grelin darajalari qisqa muddatli oziq-ovqat taqiqlashda ko'tariladi (Gualillo va boshq. 2002), oziq-ovqat taqiqlash / yo'qotish holatida griflin oziq-ovqat / oziq-ovqatni rag'batlantirishning qiymatini oshiruvchi omillardan biri bo'lishi mumkin. Haqiqatan ham, periferik gurlin ta'sirida oziq-ovqatsiz kalamushlarda kuzatilgan o'xshashlik darajalariga operativ xatti-harakatlar kuchaygan va aksincha, grafin signalizatsiyasining bloklanganligi operatsiyani bajarish xatti-harakatini mahrum bo'lgan kalamushlarda qayd etilgan darajalarga kamaytirdi.

Hozirgi kunda oziq-ovqat mahsulotlarini muammoli tarzda ortib borishi oziq-ovqat mahsulotlarini sotishning asosiy mexanizmlarini tartibga solishni aks ettiradi. Erkin boqish va mukofotni rag'batlantiruvchi oziqlantirish neyroanatomik substratlarni differentsial nazorat qiluvchi ikkita bo'linuvchi hodisa bo'lib ko'rinadi (Salamone va boshq. 1991), ovqatlanish xatti-harakatlarida ishtirok etadigan agentlarning rolini baholashda ikkalasini ham o'rganish muhimdir. Grelinning kuchli oreksigen ta'sirlari asosan bepul oziqlantirishga kirish modellarida o'rganilgan bo'lib, unda mukofotga asoslangan oziqlantirishga nisbatan uning ozuqaviy moddalarni to'ldirishdagi rolini farqlash qiyin bo'ladi. Ushbu tadqiqotda biz GHS-R1A ligandlari giyohvandlik bilan bog'liq giyohvand moddalarni iste'mol qilish istagi va motivatsiyasini ko'rsatish uchun boshqa sharoitlarda ishlatilgan eksperimental modeldan foydalanib, sukroz mukofotiga turtki bo'lganligini aniqladik. Rag'batlantiruvchi xatti-harakatlarning ko'payishi kimyoviy giyohvandlik uchun ham, kaloriya cheklovi uchun ham keng tarqalgan va ehtimol neyrobiologik mexanizmlarni o'zaro bog'lashni o'z ichiga oladi. Ushbu tadqiqotda biz operatsion kamerada oziq-ovqat uchun ko'proq ish sarflagan o'sha hayvonlarda normal chow ovqatining erkin ovqatlanishining grelin tomonidan ko'payishini aniqladik. Shuning uchun bizning ma'lumotlarimiz, avvalgi bepul ovqatlanish modellarida grelin effektlari to'g'risidagi hisobotlar bilan birgalikda (Wren va boshq. 2000), grelinning ham bepul ovqatlanishni modulyatsiya qilish qobiliyatiga, balki oziqlantirishni rag'batlantirishga ega ekanligini ham ko'rsating.

Grifin retseptorlari GHS-R1A ning energiya muvozanati va mukofotiga daxldor bo'lgan asosiy hipotalamik, hind-miya va mezolimbik sohalarda mavjud ekanligini hisobga olibZigman va boshq. 2006) va GHS-R1A ligandlarining markaziy qorincha quyish tizimlari ushbu CNS hududlariga keng tarqalgan bo'lib kirish imkonini beradi, bu erda ko'rsatilgan ghrelinning sukroz mukofotining motivatsion ta'siri uchun bir nechta neyroanatomik substratlar bo'lishi mumkin. Grelin to'g'ridan-to'g'ri asosiy mezolimbik hududlarda harakat qilish ehtimoldan yiroq emas, chunki grelin VTA dopamin neyronlarini faollashtiradi (Abizaid va boshq. 2006) va glyutenni VTA ga to'g'ridan-to'g'ri qo'llash anchagina dopaminning tarqalishini oshiradi (Jerlhag va boshq. 2007). Bunga parallel ravishda, ilgari VTA gyrlinning erkin tanlov oziqlantirish paradigmalarida ovqatlanish / lazzatli oziq-ovqatlarni iste'mol qilishni oshirish uchun VTA glyutinasining ta'sirini, shuningdek, VTA kasalliklariga chidamli grifinni keltirib chiqaruvchi mazali ovqatlanishEgjioglu va boshq. 2010). NAcc, shuningdek, oziq-ovqat mahsulotlarini iste'mol qilishning motivatsion tomonlarini modellashtirishda grifin uchun to'g'ridan-to'g'ri maqsad bo'lishi mumkin; to'g'ridan-to'g'ri ushbu sohaga kiritilganda, glyugin oziqlantirishga javob beradi (Naleid va boshq. 2005), ammo bu sohada GHS-R1A ning kemiruvchilarda mavjudligi boshqa tergovchilar tomonidan ta'riflanmagan (Zigman va boshq. 2006) va shuning uchun qo'shimcha tushuntirishlarni talab qiladi.

Dopamin tizimidagi bir necha genlarni motivatsiya qilingan harakatlarda muhim rol o'ynagan holda, markaziy grafinoterapiya tomonidan o'zgartirildi. Ushbu ma'lumotlar dopamin retseptorlari ekspressionini tartibga solishning uzoq muddatli mexanizm ekanligi, bu bilan grafinning mukofot bilan bog'liq funktsiyaga va signalizatsiya ta'siriga ta'sir etishi ehtimolini oshiradi. Dopamin retseptorlarining baholashi nafaqat NAcc, balki VTA da dendritik dopaminning chiqarilishi (masalan,Cragg & Greenfield 1997 yil), ehtimol, g'ayratli harakatlarga ta'sir ko'rsatish uchun mahalliy darajada faoliyat yuritishi mumkin. Bu erda glyutinni davolashdan keyin VTAda D5ning ko'payishi aniqlandi. Dopamin D5 retseptorlari dopaminerjik VTA neyronlarning hujayra jismlarida mavjud (Ciliax va boshq. 2000) va ularning faoliyati desensitizm davridan keyin VTA dopamin neyron faoliyatini tiklash uchun talab etiladi (Nimitvilai va Brodi 2010 yil). NAcc'da biz D1 ning pasaygan ifodasini qayd etgan edik. Darhaqiqat, ushbu retseptorning ekspluatatsiyasini kamaytirish yuqumli kasallikka chidamli obezlikning NAcc da ko'rsatildi, ammo yuqori semizli parhezda semirishga chidamli kalamushlarni yo'qotish va ortiqcha iste'mol qilishda NaCKning potentsial rolini ko'rsatib berdi (Alsio va boshq. 2010). Bundan tashqari, D3'i kodlayan genlar ghrelin tomonidan kamaytirildi, ayniqsa, issiq va inson giyohvand foydalanuvchilarida D2 / D3 retseptorlari mavjudligini kamayib borayotganligini hisobga olgan holda, ayniqsa, qiziqish topishi, ortdi impulsivlik (Dalli va boshq. 2007; Li va boshq. 2009). Qizig'i shundaki, dopamin sintezi yoki ishlab chiqarishda ishtirok etgan fermentlarda sezilarli o'zgarishlarni ko'rmadik.

Dori-darmonlar va oziq-ovqat mahsulotlarini asetilkolin tizimining muhim roli yaxshi hujjatdir; bu erda grifinni davolash bir necha asetilxolin nikotinik retseptorlari bo'linmasini kodlayan genlarni ifodalashdagi o'zgarishlar bilan bog'liq bo'lib, grafinning mukofot vazifasini potentsial o'zgartirishi mumkin bo'lgan boshqa yo'lni ta'minlaydi. Grelin VTA dopaminerjik neyronlarni VRA dopamin tizimiga cholinergik proektsiyani o'z ichiga olgan spirtli mukofot uchun muhim bo'lgan GHS-R1A-ga boy bo'lgan, laterodular tegmental hududidagi (LDTg) cholinergik neyronlar ta'sirida bilvosita tartibga solishi mumkin. Aslida, ilgari sichqonlarda LDTgga ikki tomonlama grafin in'ektsiyasini kolinergiyaga bog'liq holda dopaminning tarqalishini rag'batlantirishini ko'rsatdik (Jerlhag va boshq. 2007, 2008) va spirtli ichimliklar iste'mol qilishni erkin tanlash (spirtli ichimliklar / suv) ichish paradigmini oshiradi (Jerlhag va boshq. 2009). Haqiqatan ham, yaqinda o'tkazilgan tadqiqotlar oziq-ovqat mukofotida xolinergik-dopaminerik mukofotni bog'lashni keltirib chiqardi (Dickson va boshq. 2010). Yana bir qiziqarli sabab shundaki, gurlin xolinergik retseptorlari upregozatsiyasi orqali VTA ichidagi xolinergik signalizatsiyani kuchaytirishi mumkin. Darhaqiqat, hozirgi gen ekspresyon ma'lumoti grafin bilan davolash qilingan kalamushlarda VTA nAChRb2 mRNA darajalari kuchayganligi kabi mexanizmni qo'llab-quvvatlaydi.

NAccdagi NAcc kolinerjik neyronlari va asetilkolinning funktsiyasi, boshqa tomondan, reward-orientatsiyalashgan xatti-harakatlarda asetilkolinning rolini ko'rsatuvchi ayrim ma'ruzalar bilan ko'proq tortishuvlarga sabab bo'ldiPratt va Kelley 2005 yil; Pratt va Blackstone 2009), ammo boshqalar NAcc ning Ach ning oziqlantirishni to'sqinlik qilish va to'y mexanizmida rol o'ynash uchun harakat qilishi mumkinligini ko'rsatadigan boshqa belgilar (dubulg'a va boshq. 2003; Hoebel va boshq. 2007). Darhaqiqat, bizning natijalarimiz ikkinchisiga mos keladi, chunki grelinni davolash nikotinik retseptorlari bo'linmalaridan biri - nAChRa3 ning pasayishi bilan bog'liq edi. Shuni ta'kidlash kerakki, gen ekspresyoni tadqiqotlari grelinning quyi oqimdagi potentsial maqsadlarini ko'rsatishda juda qimmatli bo'lsa-da, faqat orexigenik / mukofotga asoslangan javobni ifodalash uchun zarur bo'lgan munosabatlar turini (yuqoriga ko'tarish yoki pastga tartibga solish) taklif qiladi, ammo uni aniqlamaydi to'g'ridan-to'g'ri kompensatsion o'zgarishlardan ajratish qiyin bo'lar edi. Shuning uchun bizning gen ekspression tadqiqotlarimiz aloqani ko'rsatadi va kelajakdagi genetik va farmakologik tadqiqotlar uchun ushbu genlarning grelinning bepul va mukofotga asoslangan oziqlantirishga ta'siridagi rolini aniqlaydi.

Hipotalamik va miya sindromi joylari gomeostatik oziqlantirishga yordam berishi mumkin bo'lsa-da, grifinning oziq-ovqat mukofotining motivatsiyasi bo'yicha hipotalamik va / yoki miya sindromi bilan bog'liq bo'lgan afferent tizimlari uchun bilvosita rolni istisno qila olmaymiz. Haqiqatan ham, lateral gipotalamusdan Mesolimbik mukofot tizimiga, masalan, VTA va NAcc (masalan,Toshinay va boshq. 2003; Xarris va boshq. 2005; Perello va boshq. 2010). Kavsik yadrosi nevropeptidi Y (NPY) / AgRP neuronlari, GHS-R1A ligandlari uchun boshqa maqsad (Dikson va Lakman 1997 yil; Kin-Reynxart va Bartness 2007a,b), muhim rol o'ynashi mumkin. NPY chowning samaradorligini oshirish bilan birga sukrozni (Brown, Fletcher & Coscina 1998 yil), AgRP esa faqat yuqori yog'li oziq-ovqat mahsulotlarining samaradorligini oshiradi (Tracy va boshq. 2008). G'relin ham sukroz mukofotiga (hozirgi o'rganishga) va yuqori yog'li mukofotga (masalan,Perello va boshq. 2010); Biroq, glyutinning ushbu ta'siri uchun NPY / AgRP nöronlarının nisbiy ahamiyati oshkor bo'ladi. Xulosa sifatida, ghrelin ozuqaviy tarkibiy qismlarga ajratilgan oziq-ovqat motivatsiyasi xususiyatlariga ega va ovqatlanishni rag'batlantirish uchun muvofiqlashtirilgan xatti-harakatni sinxronlashtirish uchun ko'plab miya joylariga ta'sir qiladi.

Grielinning miyaga tashilishi cheklangan bo'lsa-da (banklar va boshq. 2002), periferik grelina hippokampus (masalan,Diano va boshq. 2006) va VTA (Jerlhag 2008). Vagus asabining grelin markaziy ta'sirining bilvosita yo'li sifatida ahamiyati to'g'risida ba'zi munozaralar mavjud bo'lsa-da (Dornonville de la Cour va boshq. 2005; sana va boshq. 2002; Arnold va boshq. 2006), CNS ichidagi to'g'ridan-to'g'ri ta'sir qilish ehtimoldan yiroq emas, chunki periferik glyutinani oziq-ovqat iste'mol qilishiga ta'siri grafin antagonistlarining ichki VTA administratsiyasi tomonidan bostirilishi mumkin (Abizaid va boshq. 2006). G'relin miya ichida ishlab chiqariladi (Cowley va boshq. 2003), bu qanday tartibga solinganligi va miya-grifin glyutinani oziq-ovqat mahsulotlarini iste'mol qilish va ovqatlantirish uchun muhim bo'lgan markaziy tarzda hosil bo'ladigan signalni taqdim etadimi yoki yo'qligini aniqlashga qaratilgan. Grel-reseptor GHS-R1A ning konstruktiv faolligi (griffin ligand bo'lmasligi uchun faoliyat ko'rsatishi) bilan birga olinganligiHolst va boshq. 2003), oziq-ovqat mukofotini rag'batlantirish uchun gurbeton glyutinning fiziologik jihatdan bog'liq bo'lgan ichak-miya signalini taqdim etishi haqidagi savol tug'iladi. Sucrose mukofot ishiga o'xshash ta'sirlarni ko'rsatadigan ushbu tadqiqot natijalari GHS-R1A ligandlarining markaziy va periferik boshqaruvi orqali olinishi mumkin, bu ham markazda chiqarilgan, ham periferik qo'yib yuborilgan glyutin oziq-ovqatni rag'batlantirishga ta'sir etishi mumkinligini ko'rsatishi mumkin.

Xulosa qilib aytganda, bizning yangi ma'lumotlarimiz grelin signalizatsiyasi sukroz mukofotini olish uchun motivatsiya va mezolimbik mukofot yo'lida dopaminerjik va xolinergik genlarning ekspresiyasiga ta'sir qilish uchun muhim bo'lgan yangi dalillarni taqdim etadi. Bizning topilmalarimiz shakar kabi tabiiy mukofotlar uchun rag'batlantirish qiymatini aniqlashda normal ishtaha tutishida va ovqatlanish buzilishi va semirish patofizyologiyasida endogen grelinning roli bilan bog'liq muhim savollarga ilhom beradi. Dopamin va atsetilxolin tizimidagi molekulyar o'zgarishlarni grelinning mukofotga ta'siriga bog'liqligi bilan bog'liq bo'lgan muhim ishlar bo'lsa-da, bizning ma'lumotlarimiz grelinning mukofot xatti-harakatlariga ta'sir ko'rsatadigan yangi mexanizmini ko'rsatadi. Grelinning mukofotlash jarayonidagi rolini tushunish ovqatlanish buzilishi va kimyoviy giyohvandlikning bir-birining ustiga chiqadigan neyrobiologiyasini tushunish uchun muhimdir va ushbu kasalliklarning etiologiyasini tushunish va yangi davolash usullarini ishlab chiqish uchun potentsial yo'lni yaratadi. Va nihoyat, GHS-R1A antagonistlaridan foydalangan holda mazali shirin taomlarni ortiqcha iste'mol qilishni to'xtatish imkoniyati bunday birikmalarning qonda glyukoza nazorati uchun foydali ta'siri uchun klinik va terapevtik ahamiyatga ega bo'lishi mumkin (quyosh va boshq. 2006) 2 turi diyabetik bemorlarga (Esler va boshq. 2007).

rahmat

Shvetsiya Tibbiyot bo'yicha Tadqiqot Kengashi (VR 2006-5663; 2009-S266), Evropa Ittifoqi 7th Framework (FP7-HEALTH-2009-241592; FP7-KBBE-2009-3-245009), ALF Gothenburg (SU7601) Shvetsiya instituti va "Sahlgrenska" yurak-qon tomir va metabolik tadqiqotlar markazi (A305-188) uchun Shvetsiyaning Strategik tadqiqotlar fondi. GHS-R1A antagonisti JMV2959 va Anders Fribergni taqdim etishga yordam berish uchun Dr. Daniel Perrissoudga (AeternaZentaris, GmBH, Germaniya) ham minnatdorchilik bildiramiz.

Mualliflar hissasi

KPS barcha xulq-atvor tadqiqotlarini ishlab chiqdi, ishlab chiqdi va tahlil qildi. CH barcha gen ekspozitsiyasini o'rganib chiqdi va tahlil qildi. EE tadqiqotni boshlash uchun o'z hissasini qo'shdi. SLD katta obro'li shaxs bo'lib, barcha tadqiqotlar uchun nazorat va moliyaviy yordam ko'rsatdi. Qo'lyozma KPS va SLD tomonidan yaratilgan bo'lib, barcha mualliflar oxirgi matnga o'z hissalarini qo'shishdi.

Manbalar

  • Abizaid A, Liu ZW, Andrews ZB, Shanabrough M, Borok E, Elsworth JD, Roth RH, Sleeman MW, Picciotto MR, Tschop MH, Gao XB, Horvath TL. Grelin midbrain dopamin neyronlarining faoliyatini va sinaptik kiritishni tashkil qiladi, bu ishtahani oshiradi. J Clin Invest. 2006; 116: 3229-3239. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Alsio J, Olszewski PK, Norback AH, Gunnarsson ZE, Levine A.S., Pickering C, Schioth HB. Dopamin D1 retseptorlari gen ekspressioni uzoq vaqt davomida mazali taomlar ta'sirida yadro gulxanlarida kamayadi va kalamushlarda dietga bog'liq semirish fenotipiga qarab farq qiladi. Neuroscience. 2010; 171: 779-787. [PubMed]
  • Arnold M, Mura A., Langhans Vt, Geary N. Gut vagal afferentslari intraperitoneal Alyonkali Grelinning sichqonchada ovqatlanishning ogohlantiruvchi ta'siri uchun zarur emas. J Neurosci. 2006; 26: 11052-11060. [PubMed]
  • Bailey ART, Von Englehardt N, Leng G, Smit RG, Dickson SL. Bachadon yadrosi va miya sindromining o'sish gormoni sekretarlari faollashuvi noradrenerjik bo'lmagan yo'l orqali sodir bo'ladi. J Neuroendokrinol. 2000; 12: 191-197. [PubMed]
  • Banklar WA, Tschop M, Robinson SM, Heiman ml. Qon-miya to'siqlari bo'ylab grafin transportining yo'nalishi va yo'nalishi uning noyob asosiy tuzilishi bilan belgilanadi. J Pharmacol Exp Ther. 2002; 302: 822-827. [PubMed]
  • Brown CM, Fletcher PJ, Cassina DV. Sukroz uchun javob beradigan Neuropeptid Y-operatsiyasini bajaruvchi operator dopamin tomonidan vositachilik qilmaydi. Peptidlar. 1998; 19: 1667-1673. [PubMed]
  • Ciliax BJ, Nash N, Heilman S, Sunahara R, Hartney A, Tiberi M, Rye JB, Caron MG, Niznik HB, Levey A.I. Sichqoncha va maymun miyasida Dopamin D (5) retseptorlari immunolokalizatsiyasi. Sinaps. 2000; 37: 125-145. [PubMed]
  • Cowley Ma, Smit RG, Diano S, Tschop M, Pronchuk N, Grove KL, Strasburger CJ, Bidlingmaier M, Esterman M, Heiman ml, Garcia-Segura LM, Nillni EA, Mendez P, Low MJ, Sotonyi P, Fredman JM, Liu Xy, Pinto S, Colmers WF, Cone RD, Horvath TL. Greninning MSSdagi tarqalishi va ta'sir qilish mexanizmi energiya homeostazini tartibga soluvchi yangi hipotalamusli devorni namoyish etadi. Neyron. 2003; 37: 649-661. [PubMed]
  • Cragg SJ, Greenfield SA. Somatodendritik va akson terminali dopamin salohiyatini asosli nigra, ventral tegmental sohada va striatumning differentsial autoreseptorlari nazorati. J Neurosci. 1997; 17: 5738-5746. [PubMed]
  • Cummings DE, Purnell JQ, Frayo RS, Schmidova K, Wisse BE, Weigle DS. Plazma glyuten darajasida yuqori darajadagi o'sish odamlarda ovqatni boshlashda muhim rol o'ynaydi. Diabet. 2001; 50: 1714-1719. [PubMed]
  • Dalley JW, Fryer TD, Brichard L, Robinson ES, Theobald DE, Laane K, Pena Y, Murphy ER, Shoh Y, Probst K, Abakumova I, Aigbirhio FI, Richards HK, Gongkong Y, Baron JC, Everitt BJ, Robbins TW . Nucleus accumbens D2 / 3 retseptorlari spektr impulsivligini va kokainni kuchaytirishni taxmin qiladi. Ilmiy. 2007; 315: 1267-1270. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Y, Y, Murakami N, Toshinay K, Matsukura S, Niijima A, Matsuo H, Kangawa K, Nakazato M. Sichqoncha grafinida grafinada oziqlantirish va o'sish gormoni sekretsiyasida oshqozon afferent vagal nervining roli. Gastroenterologiya. 2002; 123: 1120-1128. [PubMed]
  • Morgan JE, Pinto S, Sherwin RS, Xu L, Yamada KA, Sleeman MW, Tschop MH, Horvath sh.b.. Grilin hipokampal o'pka sinapsining zichligi va xotira ko'rsatkichlarini nazorat qiladi. Tabiiy neuroscience. 2006; 9: 381-388. [PubMed]
  • Dickson SL, Hrabovskiy E, Hansson S, Jerlhag E, Alvarez-Crespo M, Skibicka KP, Molnar CS, Lipozits Z, Engel JA, Egecioglu E. Markaziy nikotin asetilkolin retseptorlari signalizatsiyasi blokadasi kemiruvchilarda grelin keltirib chiqaradigan oziq-ovqat mahsulotini kuchaytiradi. Neuroscience. 2010; 171: 1180-1186. [PubMed]
  • Dickson SL, Leng G, Robinzon ICAF. O'sish gormoni chiqaradigan peptidni tizimli ravishda qo'llash hipotalamik kavisli neyronlarni faollashtiradi. Neuroscience. 1993; 53: 303-306. [PubMed]
  • Dickson SL, Lakman SM. GH-sekretor GH-releasing peptide-6 tizimi tizimli in'ektsiyasidan so'ng sichqonchani kavis yadrosi ichida nervopeptid Y va o'sish gormoni (GH) -tozib olish gormoni (GH) da c-fos messenger ribonuklein kislotasini indüksiyalash. Endokrinologiya. 1997; 138: 771-777. [PubMed]
  • Dornonville de la Cour CD, Björkqvist M, Sandvik AK, Bakke I, Zhao CM, Chen D, Håkanson R. Sichqoncha oshqozonidagi A-shunga o'xshash hujayralar grifinni o'z ichiga oladi va gastrin nazoratida ishlamaydi. Regul Pept. 2001; 99: 141-150. [PubMed]
  • Dornonville de la Cour CD, Lindqvist A, Egecioglu E, Tung YCL, Surve V, Ohlsson S, Jansson JO, Erlanson-Albertsson C, Dickson SL, Hakanson R. Grelin davolash gastrektomi qilingan sichqonlardagi kilogramm va tana yog'i miqdorini kamaytiradi. Gut. 2005; 54: 907-913. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Egjioglu E, Jerlhag E, Skibicka S, Salomé N, Haage D, Bohlooly YM, Andersson D, Bjursell M, Perrissoud D, Engel JA, Dickson SL. Grelin kemiruvchilarda mazali taomlarni ko'paytirmoqda. Addict Biol. 2010; 15: 304-311. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Engel JA. Spirtli ichimliklarni o'rganish bo'yicha so'nggi avanslar (Excerpta Medica International Congress Series) Amsterdam: Excerta Medica; 1977. O'ziga qaram giyohvand moddalar bilan bog'liq bo'lgan evroxoriya neyrokimyoviy jihatlari; 16-22-sahif.
  • Esler WP, Rudolph J, Claus TH, Tang WF, Barucci N, Brown SE, Bullock V, Daly M, DeCarr L, Li YX, Milardo L, Molstad D, Zhu J, Gardell SJ, Livingston JN, Sweet LJ. Kichik molekula gyrinli retseptorlari antagonistlari glyukozaga chidamlilikni oshiradi, ishtahani bartaraf qiladi va kilogramm yo'qotishlarini targ'ib qiladi. Endokrinologiya. 2007; 148: 5175-5185. [PubMed]
  • Faulconbridge LF, Cummings DE, Kaplan JM, Grill HJ. Gastarin grafinining gipertoniya oqibatlari. Diabet. 2003; 52: 2260-2265. [PubMed]
  • Faulconbridge LF, Grill HJ, Kaplan JM, Daniels D. Caudal grifinning miya shikastlanishi faqatgina tektonikaning yadrosida fos ifodasini keltirib chiqaradi, lekin hipotalamusning kavis va paraventrikul yadrolarida emas. Brain Res. 2008; 1218: 151-157. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Figlewicz D.P., Bennet JL, Naleid AM, Davis C, Grimm JW. Intraventrikulyar insulin va leptin sichqonchani sukrozni o'z-o'zini boshqarish bilan kamaytiradi. Fiziol Behav. 2006; 89: 611-616. [PubMed]
  • Gualillo O, Caminos JE, Nogueiras R, Seoane LM, Arvat E, Ghigo E, Casanueva FF, Dieges S. Glyutenga oziq-ovqat taqiqlashining an'anaviy velosipedda etishgan ayollarda va homiladorlikda ta'siri. Obes quduq sohiblari. 2002; 10: 682-687. [PubMed]
  • Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Xarajatlarni izlashda lateral hipotalamik yokieksin neyronlari uchun rol. Tabiat. 2005; 437: 556-559. [PubMed]
  • Helm KA, Rada P, Hoebel B.G. Hipotalamustagi serotonin bilan birikgan xoletsistokin, asetilkolini oshirib yuborishda dumbaminning kamayib ketishiga yo'l qo'ymaydi. Brain Res. 2003; 963: 290-297. [PubMed]
  • Hewson AK, Dickson SL. Grifinani tizimli ravishda yuborish Fos va Egr-1 oqsillarini ochlik va oziqlantiruvchi kalamushlarning gipotalamali kavisli yadrosi induktsiyasini chaqiradi. J Neuroendokrinol. 2000; 12: 1047-1049. [PubMed]
  • Hodos V. Progressive nisbati mukofot qobiliyati o'lchovi sifatida. Ilmiy. 1961; 134: 943-944. [PubMed]
  • Hoebel BG, Avena NM, Rada P. Akumbens dopamin-asetilkolin muvozanatida yondashish va oldini olish. Curr Opin Pharmacol. 2007; 7: 617-627. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Holst B, Cygankiewicz A, Jensen TH, Ankersen M, Schwartz TW. Grifin reseptorining yuqori konstitutiv signalizatsiyasi - kuchli teskari agonistni identifikatsiyalash. Mol endokrinol. 2003; 17: 2201-2210. [PubMed]
  • Xovard AD, Feigner SD, Cully DF, Arena JP, Liberator PA, Rosenblum CI, Hamelin M, Hreniuk DL, Palyha OC, Anderson J, Paress PS, Diaz C, Chou M, Liu KK, McKee KK, Pong SS, Chaung LY , Elbrayt A, Dashkevich M, Heavens R, Rigby M, Sirinathsingjji DJS, Dekan DC, Melillo DG, Patchett AA, Nargund R, Griffin PR, DeMartino JA, Gupta SK, Schaeffer JM, Smith RG, VanderPloeg LHT. Gipofiz va hipotalamustagi o'simtoz gormonlarini chiqarishda foydalanadigan retseptor. Ilmiy. 1996; 273: 974-977. [PubMed]
  • Jerlhag E. Grifinada tizimli yondashuv konditsioner o'rinlarni afzal ko'radi va akkumal dopaminni rag'batlantiradi. Addict Biol. 2008; 13: 358-363. [PubMed]
  • Jerlhag E, Egecioglu E, Dickson SL, Andersson M, Svensson L, Engel JA. Grilin sichqonlardagi markaziy xolinergik tizimlar orqali lokomotor faoliyatni va akumbal dopaminni to'ldirishni rag'batlantiradi: uning miya mukofotiga daxldorligi. Addict Biol. 2006; 11: 45-54. [PubMed]
  • Jerlhag E, Egecioglu E, Dickson SL, Douhan A, Svensson L, Engel JA. G'relin administratsiyasini tegmental joylarga kiritish lokomotor faollikni rag'batlantiradi va dopamin hujayra tashqari kontsentratsiyasini yadro akumbensida oshiradi. Addict Biol. 2007; 12: 6-16. [PubMed]
  • Jerlhag E, Egecioglu E, Dickson SL, Svensson L, Engel JA. Alpha-konotoksin MII-sezgir nikotinik asetilkolin retseptorlari gri- lin bilan indikatsiyalangan lokomotor stimullash va yadro gulxanlarida dopamin to'kilishini mediatsiya qilishda ishtirok etadi. Eur Neuropsychopharmacol. 2008; 18: 508-518. [PubMed]
  • Jerlhag E, Egecioglu E, Landgren S, Salomé N, Heilig M, Moechars D, Datta R, Perrissoud D, Dickson SL, Engel JA. Spirtli mukofot uchun markaziy ghrelin signalizatsiyasi talabi. Proc Natl Acad Sci AQSh A. 2009; 106: 11318-11323. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Jewett DC, Cleary J, Levine AS, Schaal DW, Tompson T. Nervopeptid Y, insulin, 2-deoksiglikozning va oziq-ovqat mahsuldorligining oziq-ovqatga asoslangan harakatlariga ta'siri. Psixofarmakologiya. 1995; 120: 267-271. [PubMed]
  • Keen-Rhinehart E, Bartness TJ. MTII oziq-ovqat mahsulotlarini yig'ish va oziq-ovqat mahsulotlarini iste'mol qilishda grifin va oziq-ovqatdan mahrum etish oqibatlarini kuchaytiradi. Horm Behav. 2007a; 52: 612-620. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Keen-Rhinehart E, Bartness TJ. NPY Y1 retseptorlari grifin va shamollash jarayonida, oziq-ovqat mahsulotlarini yig'ish va oziq-ovqat mahsulotlarini iste'mol qilishda ishtirok etmoqda. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2007b; 292: R1728-1737. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Kelley AE, Bakshi VP, Xaber SN, Steininger TL, Villi MJ, Chjan M. Opioid ventral striatumda ta'mi gilamchalarini modulyatsiya qilish. Fiziol Behav. 2002; 76: 365-377. [PubMed]
  • Kojima M, Xosoda X, Y Y, Nakazato M, Matsuo H, Kangawa K.Grelin - oshqozondan o'sadigan gormonni chiqaruvchi ochiltirilgan peptid. Tabiat. 1999; 402: 656-660. [PubMed]
  • Koob GF. Favqulodda giyohvandlik - anatomiya, farmakologiya va mukofot yo'llarining vazifasi. Trends Pharmacol Sci. 1992; 13: 177-184. [PubMed]
  • Kuzmin A, Jerlhag E, Liljequist S, Engel J. Subunit selektiv NAAC retseptorlarini operatsion o'rganish uchun o'z-o'zini boshqarish va retsepsga o'xshash etanol-ichish harakatlariga ta'siri. Psixofarmakologiya. 2009; 203: 99-108. [PubMed]
  • la Fleur SE, Vanderschuren LJ, Luijendijk MC, Kloeze BM, Tiesjema B, Adan RA. Oziq-ovqatni rag'batlantiruvchi xatti-harakatlar va dietaga bog'liq semirib ketish o'rtasidagi o'zaro ta'sir. Int J Obes. 2007; 31: 1286-1294. [PubMed]
  • Li B, London ED, Poldrack RA, Farahi J, Nacca A, Monterosso JR, Mumford JA, Bokarius AV, Dahlom M, Mukherjee J, Bilder RM, Brody AL, Mandelkern Ma. Striatal dopamin d2 / d3 retseptorlari mavjudligi metamfetaminga bog'liqlikda kamayadi va impulsivlikka bog'liq. J Neurosci. 2009; 29: 14734-14740. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Livak KJ, Schmittgen TD. Real vaqtda nicel PCR va 2 (-delta delta C (T)) usuli yordamida nisbatan gen ma'lumotlarini tahlil qilish. Usullari. 2001; 25: 402-408. [PubMed]
  • Nakazato M, Murakami N, Sana Y, Kojima M, Matsuo H, Kangawa K, Matsukura S. Oziqlantirishni markaziy tartibga solishda grifin uchun rol. Tabiat. 2001; 409: 194-198. [PubMed]
  • Naleid AM, Greys MK, Cummings DE, Levine AS. G'relin ventral tegmental hududi va yadro gumbazlari o'rtasidagi mesolimbik mukofot yo'lida ovqatlanishga sabab bo'ladi. Peptidlar. 2005; 26: 2274-2279. [PubMed]
  • Nimitvilay S, Brodi MS. Ventral tegmental hududning dopaminerjik neuronlarini uzoq muddatli dopamin inhibisyonunun tiklanishi. J Pharmacol Exp Ther. 2010; 333: 555-563. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Nogueiras R, Tschöp MH, Zigman JM. Energetika metabolizmasi markaziy asab tizimini tartibga solish - grafinga qarshi leptin. Ann NY Acad Sci. 2008; 1126: 14-19. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson S Stereotaksik koordinatlarda Rat Brain. Nyu-York: Academic Press, Nyu-York; 1986.
  • Perello M, Sakata I, Birnbaum S, Chuang JK, Osborne-Lawrence S, Rovinski SA, Woloszyn J, Yanagisava M, Lutter M, Zigman JM. Grelin yuqori yog'li parhezning orexinga bog'liq bo'lgan ko'rinishdagi qiymatini oshiradi. Biol psixiatriyasi. 2010; 67: 880-886. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Pratt WE, Blekston K. Nukleus asetilkolin va oziq-ovqat iste'mol qilishni kuchaytiradi: muskarinik ohangdagi mushak ozuqani pasaytiradi, ammo oziq-ovqat mahsulotlarini iste'mol qilmaydi. Behav Brain Res. 2009; 198: 252-257. [PubMed]
  • Pratt WE, Kelley AE. Striatal muskarinik retseptorlari antagonizmi 24-g oziq-ovqat mahsulotini preprozektsepalin genining ifodalangan pasayishi bilan kamaytiradi. Eur J Neurosci. 2005; 22: 3229-3240. [PubMed]
  • Ritter RC, Slusser PG, Stone S. Besleme va qon glyukoza nazoratidagi glukoreseptorlar - orqa miya ichidagi joy. Ilmiy. 1981; 213: 451-453. [PubMed]
  • Salamone JD, Steinpreis RE, McCullough LD, Smit P, Grebel D, Mahan K. Haloperidol va nukleus akumbenslar dopamin kamayishi oziq-ovqat mahsulotlarini ishlatish uchun qo'lni bosib yuboradi, ammo yangi oziq-ovqat tanlovi jarayonida bepul oziq-ovqat iste'molini oshiradi. Psixofarmakologiya. 1991; 104: 515-521. [PubMed]
  • Salomé N, Haage D, Perrissoud D, Moulin A, Demange L, Egecioglu E, Fehrents JA, Martinez J, Dickson SL. Sichqonlarda yangi grafin retseptorlari (GHS-R1A) antagonistlarining anoreksik va elektrofizyologik harakatlar. Eur J Pharmacol. 2009a; 612: 167-173. [PubMed]
  • Salomé N, Hansson C, Taube M, Gustafsson-Erikson L, Egecioglu E, Karlsson-Lindahl L, Fehrentz JA, Martinez J, Perrissoud D, Dikson SL. Sichqonlardagi grelinning surunkali semirishga ta'sir etuvchi markaziy mexanizmida: kuchli grelin retseptorlari antagonistidan foydalangan holda olib borilgan tadqiqotlar bo'yicha yangi tushunchalar. J neyroendokrinol. 2009b; 21: 777-785. [PubMed]
  • Sibilia V, Lattuada N, Rapetti D, Pagani F, Vincenza D, Bulgarelli I, Locatelli V, Guidobono F, Netti S. Grilin kalamushlarda yallig'lanish og'rig'ini oldini oladi: opioid tizimini jalb qilish. Neyrofarmakologiya. 2006; 51: 497-505. [PubMed]
  • Skibicka KP, Alhadeff AL, Grill HJ. Hindbrananing kokain va amfetamin bilan tartibga solinadigan transkripti GLP-1 retseptorlari vositasida hipotermiya keltirib chiqaradi. J Neurosci. 2009; 29: 6973-6981. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Sun Y, Asnikar M, Saha PK, Chan L, Smit RG. Grifin ablasyonu ob / ob sichqonlarining diabetik, ammo obez bo'lmagan fenotipini yaxshilaydi. Hujayra Metab. 2006; 3: 379-386. [PubMed]
  • Toshinai K, D, Y, Murakami N, Shimada M, Mondal MS, Shimbara T, Guan JL, Vang QP, Funahashi H, Sakurai T, Shioda S, Matsukura S, Kangawa K, Nakazato M.Grelinning oziq-ovqat mahsulotlarini iste'mol qilish vositasi orexin yo'li. Endokrinologiya. 2003; 144: 1506-1512. [PubMed]
  • Tracy AL, Clegg DJ, Jonson JD, Davidson TL, Benoit SC. Melanokortin antagonisti AgRP yog 'uchun emas, balki (83-132) karbonhidratga ta'sir qiluvchi appetitni oshiradi, kuchaytiradi. Farmakol Biochem Behav. 2008; 89: 263-271. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Wren AM, ko'rib chiqilgan LJ, Cohen Ma, Brynes AE, Frost GS, Murphy KG, Dhillo WS, Ghatei MA, Bloom SR. G'relin tuyadi kuchaytiradi va odamlarda oziq-ovqat iste'molini oshiradi. J Klinik Endokrinol Metab. 2001; 86: 5992-5995. [PubMed]
  • Wren AM, kichik CJ, Ward HL, Murphy KG, Dakin CL, Taheri S, Kennedy AR, Roberts GH, Morgan DGA, Ghatei MA, Bloom SR. Yangi hipotalamik peptid griflin oziq-ovqat iste'molini va o'sish gormoni sekresyonunu ogohlantirmoqda. Endokrinologiya. 2000; 141: 4325-4328. [PubMed]
  • Zheng H, Lenard NR, Shin AC, Berthoud HR. Zamonaviy dunyoda tuyadi nazorati va energiya muvozanatini tartibga solish: mukofotga asoslangan miya repletion signallarini bekor qiladi. Int J Obes. 2009; 33 (Qo'shimcha 2): S8-S13. [PMC bepul maqola] [PubMed]
  • Zigman JM, Jons JE, Lee Idoralar, Saper CB, Elmquist JK. Sichqoncha va sichqon miyasida grifin retseptorlari mRNA ning ifodasi. J Comp neurol. 2006; 494: 528-548. [PubMed]