青少年对可卡因成瘾更加脆弱:行为和电生理学证据(2013)

 

  1. 米歇拉马里内利

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+ 作者说明

  • JE McCutcheon的当前地址:伊利诺伊大学芝加哥大学心理学系,伊利诺伊州60607。

  • 作者贡献:WCW,JEM和MM设计研究; WCW,KAF,NEP和MM进行了研究; WCW,KAF,NEP,JEM和MM分析了数据; WCW,JEM和MM写了这篇论文。

  1. 神经科学杂志, 33(11): 4913-4922; doi: 10.1523/JNEUROSCI.1371-12.2013

抽象

在人类中,青春期是发展可卡因成瘾倾向的一个时期。 目前尚不清楚这是否可归因于此年龄段可获取更多的可卡因以及青少年大脑是否特别容易受到可卡因成瘾性的影响。 在这里,我们对男性青少年(P42)和成年(〜PVNUMX)大鼠进行了广泛的可卡因自我管理程序。 此外,为了确定行为差异是否与多巴胺能活性的发育差异相关,我们检查并操纵了多巴胺神经元的活性。 相对于成人,青春期大鼠更容易服用可卡因,对较低剂量更敏感,可卡因摄入量增加更多,并且不太容易增加价格(即更“无弹性”)。 同时,青少年也表现出腹侧被盖区多巴胺神经元活动增强,这一特征已知与自我管理行为增加有关。 多巴胺D的药理学操作2 受体功能与喹吡罗(激动剂)或依替必利(拮抗剂),改变多巴胺神经元活性,消除可卡因自我给药的年龄差异。 这些数据表明可卡因成瘾责任的行为和电生理决定因素之间存在因果关系。 总之,青少年表现出增加成瘾责任的行为和电生理特征。

介绍

青春期是人类开发可卡因成瘾倾向的一个时期(Kandel等,1992; 钱伯斯等人,2003; Johnston等,2011),表现为更快的疾病进展和更严重的症状(Anthony和Petronis,1995; Patton等人,2004; Reboussin和Anthony,2006; 陈等人,2009)。 尚不清楚这种高度易感性是由于更大的药物暴露和实验,还是青少年对可卡因的成瘾性质更敏感。 在人类中确定这一点很困难,因为无法解释不同年龄段吸毒机会的差异。 同样,在没有非生物因素的情况下研究可卡因是不可能的,例如对药物使用的社会经济影响。

使用动物模型,我们可以在平等药物获取条件下研究药物摄入量。 虽然没有单一的行为任务可以模拟成瘾的每个元素,但不同的自我管理程序可以模拟吸毒的具体方面(供审查,见 林奇和卡罗尔,2001)。 目前的文献表明,与成年大鼠相比,青春期大鼠服用更多某些滥用药物(Schramm-Sapyta等人,2009),如酒精(Doremus等,2005; Siegmund等人,2005),尼古丁和安非他明(Levin等人,2007; Shahbazi等,2008)。 然而,对可卡因的研究不一致,不幸的是,仅使用单剂量采集程序。 一些研究表明,青少年摄入量高于成人(Anker和Carroll,2010; Schramm-Sapyta等人,2011),而其他人表明青少年和成年人没有差异(Leslie等人,2004; Belluzzi等,2005; Frantz等,2007; Kantak等,2007; Kerstetter和Kantak,2007; Harvey等人,2009; Li和Frantz,2009)。 为了解决这些差异,我们在这里使用了各种各样的可卡因剂量和自我管理程序来模拟吸毒的多个维度,即摄入和敏感[获取自我管理,使用短(ShA)/长(LgA)获取程序],摄入量升级和可卡因消费作为价格的函数(当获得药物的比例增加时可卡因摄入量)。 使用这些程序,我们发现,相对于成年大鼠,青春期大鼠表现出增强的可卡因自我管理行为。

增加的可卡因自我管理与成年大鼠腹侧被盖区(VTA)多巴胺神经元的活动增加有关(Marinelli和White,2000)。 有趣的是,青春期多巴胺神经元的活动也有所增强(McCutcheon和Marinelli,2009; McCutcheon等人,2012)。 我们试图通过在可卡因自我给药期间施用改变多巴胺神经元活性的药物来建立成瘾责任的行为和生理测量之间的因果关系。 具体来说,我们测试了这样一个假设,即降低青春期大鼠多巴胺神经元活性的增加会使其摄入的可卡因摄入量增加到成年人的水平; 相反,增加成人的多巴胺神经元活动会使他们的可卡因摄入量增加到青少年观察到的水平。

材料和方法

主题

雄性Sprague Dawley大鼠获自Portage菌落(Charles River)。 在12 h光/暗循环下,在22±2℃的恒定温度和66%±25的湿度下,每笼饲养三只,其中 随意 随时获取食物和水。 青春期大鼠在出生后第21天(P21)断奶。 所有大鼠在开始实验前一周到达动物园〜1。 在这个适应期间,大鼠至少处理一次。 使用balano-preputial分离方法从大约P35到P44确定青春期的开始(Kolho等,1988); 它发生在大约P41。 除非另有说明,所有实验均持续7-10 d,并且当青春期前青春期大鼠,青春期后青春期大鼠(以下称为“青春期大鼠”)和成年大鼠分别处于P35,P42和P88时开始。 所有研究均在大鼠活跃的光/暗循环的黑暗阶段进行。 研究在〜2年期间进行。

可卡因自我管理

测试可卡因自我给药或实验者施加的可卡因输注的大鼠在异氟烷气体麻醉下接受右侧颈外静脉的静脉导管插入术(5%诱导,2-3%维持)。 将SILASTIC导管(10-12μl死体积)固定到颈静脉并皮下通过以离开中部肩胛区域。 在~1周的术后恢复期间,每天用无菌盐水(100μl)冲洗导管以防止堵塞。 在自我给药开始前一天,将大鼠置于自我给药室(41×24 cm室面积,21 cm高; MED Associates)中,以便适应1.5 h的室。 这样做是为了防止探索性行为干扰自我管理行为。 在一项试验性实验中,我们注意到青少年大鼠比成人更多地探查腔室,并且这种活动与自我管理行为竞争。 因此,适应期有助于消除这种年龄偏差。

自我管理室配备有两个彼此相对的鼻子戳孔,在腔室的每个短边中位于地板上方2cm处。 这些腔室安装在声音衰减隔间内。 在适应期间,覆盖了鼻子戳孔。 在自我给药期间,其中一个孔中的鼻子戳(“活动”孔)输送一次药物[即固定比例1(FR1); 除非另有说明,否则一次鼻子相当于一次注射]; 它还导致10的活动孔内的光照射。 10-30的超时时间可以防止在所有实验中过量使用,除了在实验中测试摄入量是增加比率(价格)的函数,没有超时。 在另一个洞(“不活跃”)戳鼻子没有任何后果。 通过注射泵以200μl/ kg的体积递送输注(即,对于30 g大鼠,150μl)和~12μl/ s的速度。 MED Associates软件包计划管理器for Windows收集了鼻子的数量和输液次数。 在实验结束时,每只大鼠用Brevital(5 mg / kg,iv)测试一次导管的通畅性; 从研究中消除对麻醉剂没有立即反应的大鼠。 因此,从研究中排除了总共18的455(〜4%)大鼠。

实验1:获得自我管理的年龄差异

邵氏。

对于75-1200,每天1.5 h允许不同群组的大鼠自我给予盐水或可卡因(每次输注7-10μg/ kg)。 这些可卡因剂量定义为非常低(每次输注75μg/ kg),低(每次输注150μg/ kg),中度低(每次输注300μg/ kg),中度(每次输注600μg/ kg)和高(每次输注1200μg/ kg)。 青春期前的青少年仅在中等剂量的低剂量(每次输注300μg/ kg)下进行测试。 为了建立采集标准,还在单独的大鼠群体中测试了以中等剂量(每次输注600μg/ kg)的可卡因获得自我施用行为。

LGA。

为了检查每日获得药物时药物摄取的获取时间,允许单独的一组大鼠每天以中等剂量(6μg/ kg每次输注)自我给予可卡因600 h用于10 d。

实验2:可卡因自我管理升级的年龄差异

首先训练单独的一组大鼠自我施用中等剂量的可卡因(600μg/ kg每次输注)用于4 d(每天两次,对于8次1.5 h期)。 建立升级需要中高剂量(Ahmed和Koob,1998; Mantsch等,2004)。 因为中等剂量的摄入量在青少年和成人之间不同(图。 1)这可能会影响随后的升级,我们在初始培训阶段均衡了可卡因摄入量。 为此,一旦达到15-20输注,或在最大3 h后,将大鼠从自我给药室中取出。 在训练阶段后,对大鼠进行升级研究。 对于升级研究,对于6 d,每天测试大鼠1.5 h(LgA)或每天12 h(ShA)。

实验3:可卡因消费的年龄差异是价格的函数

允许单独的大鼠群体每天自我施用高剂量的可卡因(每次输注1200μg/ kg)1.5 h。 在第一个2 d期间,我们使用了FR1(一个鼻子戳相当于一次注射)。 然后每隔一天(FR3,FR6,FR9,FR12和FR24)增加固定比率(即价格),以便大鼠在每个价格完成两个疗程。 在第二次会议上进行分析,大鼠以每个价格完成。 自我注入(即消费)的数量符合Hursh和Silberberg建立的指数需求曲线(2008; Hursh和Roma,2013):记录 Q =日志 Q0 + k(e-α(Q0×C) - 1)。 该曲线用于估计消耗药物的“动机”水平(Hursh,1993)以及可卡因摄入抵抗增加价格的方式(即“可卡因需求的弹性”)(Bickel等,2000)。 因此,它被认为是评估滥用责任的好方法(Hursh,1993). Q 代表消费(自我注入的数量),和 Q0 是以最低价格消费的水平。 C 代表价格(即比率),和 k 被设置为一个常数,以对数单位计算估计的消费范围(k =这些研究中的0.91)。 α被称为“基本价值”并代表可卡因需求的弹性。 当消费对价格不敏感时(即,尽管价格上涨,消费仍保持不变),行为被认为是“无弹性的”,当消费对价格敏感时(即消费随价格上涨而下降),行为会转为“弹性”。 陡峭的下降等于更具弹性的行为和更大的α(Hursh和Silberberg,2008)相对于非弹性行为。 使用这个等式,我们可以计算P.最大,这是行为从无弹性变为弹性的价格(Bickel等,2000).

实验4:可卡因及其代谢物水平的年龄差异

允许单独的一组大鼠自我施用中等剂量的可卡因(600μg/ kg每次输注),每天1.5 h用于2 d。 包括这些最初的自我管理会议(天1和2),以尽量减少后续非连续可卡因输注引起的任何厌恶效应(Twining等,2009)。 然后,大鼠在21每日会话期间接受1.5计算机递送的可卡因输注,用于下一个5 d。 输注以定时间隔递送,前三次输注每1.5分钟,其余时间每5分钟。 这种设计的目的是模仿自我管理会议,同时确保跨群体平等接触可卡因。 在测试当天(7天),在接受最后一次可卡因输注后,将大鼠断头2分钟。 在含有氟化钠(5 mg)和草酸钾(10 mg)的8 ml管中收集躯干血液; 然后将管储存在-20℃。 在提取和去除小脑后,将脑在干冰上新鲜冷冻并在-80℃下储存。 样品被运送到犹他大学人类毒理学中心,其中使用液相色谱 - 串联质谱法测量可卡因和代谢物(苯甲酰爱康宁,芽子碱乙酯,去甲卡因)(Lin等人,2001, 2003).

体内 细胞外记录VTA多巴胺神经元

用水合氯醛(400 mg / kg,ip)麻醉单独的大鼠队列。 将侧尾静脉插管以静脉内施用另外的麻醉剂或药物。 将大鼠置于立体定位装置(David Kopf Instruments)中。 通过直肠温度计(Medline Industries)监测体温,并用加热垫(Fintronics)维持在37±0.5℃。 我们通过确保没有对后爪夹伤的反应并确保青少年60-80呼吸/分钟的呼吸速率和成人的52-72呼吸/分钟来监测麻醉深度。 在一些实验中,用皮质脑电图收​​集睡眠 - 觉醒状态的测量值以进一步确保稳定的麻醉状态。 使用垂直电极拉拔器(Narishige PE-2)从2-mm-外径玻璃移液管中拉出玻璃电极,并在显微镜下破碎至尖端直径1-2μm。 电极充满1%快速绿色染料(赛默飞世尔科技)在2 m NaCl溶液中。 电极的阻抗是在1.5 Hz(Winston Electronics BL2.1-B)测量的135-1000MΩ。 在VTA上方钻了一个钻孔(见下面的坐标)。 对于青少年和成人,分别将电极5或6 mm降低至皮质表面,然后用液压微驱动器(David Kopf Instruments)缓慢地进入多巴胺神经元体区域。 电极在VTA区域沿着预定的“轨道”(0.2 mm分开)降低; 成人取样区域为λN前3.2-4.0 mm,中线侧0.2-1.4 mm,成人皮质表面7.5-8.5 mm腹侧。 在青少年中取样的区域是λ前面的2.4-3.4 mm,中线侧面的0.3-0.7 mm和皮质表面的7.5-8.5 mm腹侧。 尽管不同年龄的大脑尺寸存在差异,但这些坐标被缩放以产生类似的最终记录位点。

在细胞外记录多巴胺神经元时,电信号被送入高阻抗放大器(Fintronics),以400和500 Hz或50和800 Hz进行带通滤波,显示在示波器(Tektronix R5110)上,并由窗口鉴别器监测和音频放大器(Grass AM8; Grass Instruments)。 数字输出通过接口(Digidata 1200系列; Molecular Devices)馈送到运行AxoScope软件(Molecular Devices)的个人计算机,该计算机在线确定点火活动并存储所有数据以供将来分析。 使用定制的程序分析存储的数据,该程序确定点火特性。

多巴胺神经元通过VTA中的解剖位置并根据标准生理标准进行鉴定(Bunney等,1973)。 简要地讲,这些标准如下:特征性的三次(+/-)波形,从开始到结束使用2.5-3.5 Hz滤波器测量,持续时间为400-500 ms,或者从负峰值的开始到谷值> 1.1 ms使用50–800 Hz滤波器。 点火模式还显示出0.5-10 Hz的低自发点火频率(Grace和Bunney,1984; Marinelli等人,2006)间歇性爆发,是高频尖峰的集群(Grace和Bunney,1983)。 这些标准在检测多巴胺神经元时准确率为~90%(Ungless和Grace,2012)。 为了检查与年龄相关的多巴胺神经元活性差异,我们每只大鼠最多收集三到四个细胞。 每个记录包含至少3分钟的稳定活动(变化小于5%)。 我们分析了点火速率(随时间增加的峰值)和点火方式。 对于后者,爆发活动的数量计算为爆发中发射的峰值占峰值总数的百分比。 我们还计算了突发事件的频率和突发的属性(峰值/突发的数量和突发持续时间(以毫秒为单位))。

在记录结束时,用另外的水合氯醛深度麻醉大鼠。 通过使28μA阴极电流通过电极达~30 min来标记电极尖端的位置。 这沉积了离散的染料斑点。 然后取出脑并储存在10%福尔马林中,直到在冷冻切片机上切割连续冠状切片(40μm)(徕卡)。 安装切片,并通过光学显微镜检查电极放置,使用内部地图集对青少年和成年大鼠的重量等于本研究中的重量。 每只大鼠记录多达四个细胞,每只大鼠的最终细胞用染料标记; 基于它们与最终细胞的记录距离外推其他细胞的位置。 鉴于不同年龄段大脑的大小差异,我们使用校正因子来推断青少年的这些距离。 这是通过比较青少年和成年大脑中脑的长度,宽度和高度来计算的。 矫正因子为1.14用于前后位,1.06用于内侧,1.09用于背腹侧。 然后我们通过将它们映射到显示VTA的多巴胺能区域的另外的内部图谱(酪氨酸羟化酶的免疫组织化学染色)来证实所有细胞都在VTA的多巴胺能区域内。

改变多巴胺神经元活性的药物对可卡因自我给药的影响

允许单独的一组大鼠自我施用中等剂量的可卡因(600μg/ kg每次输注),每天1.5 h用于6 d。 在第一个2 d期间,我们使用了FR1(一个鼻子戳相当于一次输液)。 然后将FR增加到3(三个鼻子戳相当于一次输注)用于下一个4 d。 在最后一次治疗开始前10分钟,通过作用于多巴胺D,大鼠接受注射增加或减少中脑多巴胺神经元活性的药物2- 类自动受体(以下称为“D2 受体”)。 具体而言,给予大鼠D.2 受体激动剂喹吡罗[20μg/ kg,sc,一种降低多巴胺神经元活性的自身受体选择剂量(Marinelli等人,2003),D2 受体拮抗剂依替必利[20μg/ kg,sc,增加多巴胺神经元活性的剂量(Marinelli等人,2003)或盐水(皮下)作为对照。 鉴于青少年和成年人对D的敏感性相似2 受体(McCutcheon等人,2012),这些药理学操作应该对多种年龄的多巴胺神经元放电率产生类似的影响。

毒品

可卡因HCl由国家药物滥用研究所慷慨提供或购自Sigma-Aldrich并溶解在0.9%盐水溶液中; 用6.5N NaOH将溶液的pH保持在7.0-0.1。 Brevital,盐酸喹吡罗和盐酸依用氢氯吡啶购自Henry Schein,并溶于0.9%盐水溶液中。 异氟烷和0.9%盐水溶液购自Butler Schein。 水合氯醛购自Sigma-Aldrich并溶解在去离子水中。

统计分析

在适当时使用ANOVA分析鼻子戳和输注,使用年龄之间的因素(青少年与成人或青春期前青少年,青少年和成人),剂量(盐水与可卡因)和获取条件(ShA与LgA),洞内的主体因素(活动与非活动),训练天数(根据实验的不同持续时间),固定比例(FR1,FR3,FR6,FR9,FR12和FR24)和时间点(预处理与治疗后)。 Newman-Keuls测试用于 事后 分析。 用费舍尔精确检验评估达到习得的大鼠的比例。 用Student's分析多巴胺神经元活性 t 测试(青少年与成人)。 学生的血和脑中可卡因及其代谢物的水平也进行了分析。 t 测试(青少年与成人),除非样品低于检测阈值; 在这种情况下,我们使用了曼·惠特尼 U 测试(青少年与成年人)。 用Statistica(StatSoft)分析上述数据。 使用Prism 6(GraphPad软件)分析需求的弹性。 指数需求曲线值的差异 Q0 用α分析α和α F 测试(Cassidy和Dallery,2012)。 所有测试的显着性水平为0.05。

成果

可卡因自我管理

实验1:获得自我管理的年龄差异

邵氏。

我们比较了盐水和五剂可卡因的自我管理行为。 对于所有剂量,可卡因摄入量通常在可卡因自我施用的2 d后稳定(数据未显示); 因此,收购资料显示在 图1A 仅包括3日起的数据。

图1。 

通过可卡因剂量获取可卡因自我管理行为。 A,摄入非常低的盐水或可卡因(每次输注75μg/ kg),低(每次输注150μg/ kg),中度低(每次输注300μg/ kg),中度(每次输注600μg/ kg),在每日ShA(1200 h)期间剂量或高(每次输注1.5μg/ kg)剂量。 每个点代表每个1.5 h自我给药期中每组的平均值±SEM。 青少年(n = 6,8,8,16,20和12)和成年人(n = 6,8,9,11,18和13)剂量分别为0,75,150,300,600和1200μg/ kg; n = 14用于青春期前青少年,剂量为每次输注300μg/ kg。 B,相对于成年人,在青少年中以不同剂量的可卡因获得可卡因自我管理。 每个点代表最后一次3自我给药天数的平均值±SEM A.

As 图1A 显示,青少年和成人自我管理相似数量的盐水(年龄效应, F(1,10) = 0.01,ns),极低剂量的可卡因(每次输注75μg/ kg,年龄效应, F(1,14) = 0.03,ns)和高剂量的可卡因(每次输注1200μg/ kg,年龄效应, F(1,23) = 0.22,ns)。 青少年在低剂量时自行服用比成人更多的可卡因(150μg/ kg每次输注,年龄效应, F(1,15) = 11.27, p <0.01),中等剂量(每次输注300μg/ kg,年龄效应, F(2,38) = 9.85, p <0.001)和中等剂量(每次输注600μg/ kg,年龄影响, F(1,36) = 19.83, p <0.001)。 还以适度低剂量(每次输注300μg/ kg)测试青春期前大鼠。 摄入量因年龄而异(年龄影响, F(2,38) = 2.85, p <0.001)。 具体来说,青春期前和成年人的可卡因摄入量(ns)相似,而青春期则比青春期前和成年人的摄入量更高(p <0.001)。 图1B 显示每剂量的平均摄入量,超过每剂量自我给药的最后一次3 d。 没有进行直接组比较,因为在几个月内在不同的实验中测试了不同的剂量。 不包括最低剂量(75μg/ kg),因为组平均值被一只青春期大鼠和一只显示非常高量药物摄入量的成年大鼠倾斜,因为它经常发生在非常低​​的剂量下。 该图说明了可卡因自我给药的经典倒U型剂量 - 反应曲线(林奇和卡罗尔,2001)在两个年龄组。

我们接下来通过检查获得可卡因自我管理的大鼠比例和达到收购所需的天数来检查青少年是否比成人更快地获得自我管理。 为了进行这个实验,我们建立了一个采集标准 米切尔等人。 (2005) 使用活动设备上双峰分布响应的低谷,累积在所有自我管理会话中。 低谷表示行为的变化点,其中响应低于谷值的大鼠尚未学习鼻子戳和奖励之间的关系,而响应超过谷值的大鼠已经获得了自我管理行为。 我们使用了一个单独的大型大鼠队列(青少年, n = 55; 大人, n = 58),其中青少年再次表现出比成人更多的摄入量(图。 2A; 年龄效应, F(1,111) = 26.89, p <0.001)。 成年动物显示出鼻子刺戳的双峰分布,在15次鼻子刺戳中有一个低谷。 相比之下,青少年没有双峰分布,因为他们缺乏高比例的低响应率(图。 2C),建议更快速地获得自我管理。 事实上,使用15输注的采集标准,青少年表现出比成人更快更快的获得率(图。 2B; 费舍尔精确的两尾 p = 0.001)。 此外,到最后一天,29%的成年人未能达到收购标准,而青少年只有5%。 因此,青少年比成年人更有可能获得可卡因自我管理并更快地获得可卡因。

图2。 

在ShA期间(600 h),中等剂量(1.5μg/ kg每次输注)的可卡因自我给药的采集模式。 A,用于建立获取标准的队列中的摄入量。 每个点代表每个1.5 h自我给药期中每组的平均值±SEM。 插图,来自青少年和成年大鼠的代表性输注记录超过1.5 h自我管理会话。 B,可卡因自我管理的获得率。 线代表满足获得标准的大鼠的百分比。 C,在获取可卡因自我管理期间在活动孔中分布鼻子戳。 来自所有大鼠和所有会话的鼻尖数量以5的间隔分组。 条形是每个特定箱间隔的活动孔鼻戳的数量。 青少年, n = 55; 大人, n = 58。

LGA。

为了确保可卡因摄入量的差异不是由于采样时间不足,我们还将LgA期间青少年与成年大鼠的采集行为与可卡因自我管理进行了比较。 如 图3 研究显示,与LgA手术成人(6 h疗程)相比,青少年摄入的可卡因摄入量更高(年龄效应, F(1,19) = 25.45, p <0.001; 会话效果 F(9,171) = 9.89, p <0.001; 年龄×会话互动, F(9,171) = 3.41, p <0.001)。

图3。 

在LgA(600 h)期间以中等剂量(每次输注6μg/ kg)获得可卡因自我施用行为。 每个点代表每个6 h自我给药期中每组的平均值±SEM输注。 青少年, n = 9; 大人, n = 12。

实验2:可卡因自我管理升级的年龄差异

为了平衡各组之间的摄入量,在升级测试之前的训练期间,摄入量限于每次15-20输注(图。 4A; 年龄效应, F(1,18) = 2.56,ns; 会话效果, F(7,126) = 3.53, p <0.01; 年龄×会话互动, F(7,126) = 0.39,ns)。 在这些训练期间,青少年在接受15-20输注时比成人更快(图。 4A,插图; t(20) = -2.92, p <0.01)。 然后将大鼠分为ShA组和LgA组,在训练过程中进食量相似(进入状态, F(1,18) = 0.006,ns; 年龄×群体互动, F(1,18) = 0.12,ns)。

图4。 

中等剂量的可卡因自我给药的升级(每次输注600μg/ kg)。 A,受限制的培训课程,其中所有组都限于每次会话自我管理15-20输注,4每天两次,每次会话持续最多3 h。 插图,每次会话达到15-20输液所需的时间(黑条,青少年;白条,成人)。 B,在6 h LgA会话期间进入。 C,在ShA组中的1.5 h期间以及LgA组中的第一个1.5 h期间进入。 每个点代表每个自我给药期中每组的平均值±SEM输注。 青少年LgA, n = 5; 青少年ShA, n = 5; 成年人LgA, n = 6; 和成年人ShA, n = 6。 *p <0.05; **p <0.01; ***p 与第0.001天相比,<1。

我们首先分析了LgA组中6 h的摄入量。 如 图4B 表明,青少年服用的可卡因比成年人多(年龄效应, F(1,9) = 12.27, p <0.01); 摄入量随时间变化(会话效果, F(11,99) = 6.76, p <0.001),并且年龄组之间的关系也随时间而改变(年龄×会话互动, F(11,99) = 8.31, p <0.001)。 实际上,在青少年中观察到可卡因的摄入量不断增加(青少年的会话效应, F(11,44) = 3.4, p <0.002),但不适用于成人(成年人的会话效果, F(11,55) = 1.2,ns)。 具体而言,青少年的可卡因摄入量从会话4开始增加(p 与会话0.05相比<1),并且此后持续增加(所有 p 值<0.01)。 相反,成人的可卡因摄入量从未增加(所有疗程相对于第1疗程的ns)。

然后我们通过分析来自两组大鼠的每个阶段的第一次1.5 h的摄入来比较ShA和LgA条件下的升高(Ahmed和Koob,1998); 这是通过年龄和访问条件作为主体间因素和会话作为主体内因素来完成的。 如 图4C 再次显示,青少年服用的可卡因比成年人多(年龄效应, F(1,18) = 13.04, p <0.001); 摄入量随时间变化(会话效果, F(11,99) = 3.54, p <0.001),并且年龄组和访问条件之间的关系也随时间而改变(年龄×会话互动, F(11,198) = 4.55, p <0.001; 访问条件×会话交互, F(11,198) = 1.84, p <0.05)。 随后各组的分析(按年龄和进入条件分开)显示,仅在LgA条件下(青春期LgA, F(11,44) = 3.38, p <0.01; 成人LgA, F(11,55) = 1.20,ns; 青少年ShA, F(11,44) = 1.78,ns; 成人ShA, F(11,55) = 1.65,ns)。 事后 测试显示,对于患有LgA的青少年,相对于会话8,摄入量从会话1开始增加(p <0.05)。 因此,即使仅考虑前1.5小时的测试,在LgA的青少年中也观察到可卡因摄入量的增加,而在ShA或LgA条件下在ShA的青少年中或成年人中却未观察到可卡因的摄入。

实验3:可卡因消费的年龄差异是价格的函数

As 图5A 表明,青少年鼻子比高剂量的可卡因刺激了更多(每次输注1200μg/ kg)。 对于活动孔,响应随着FR要求(即价格)的增加而增加(比率效应, F(4,68) = 15.55, p <0.001),而青少年发生的情况比成年人多(图。 5; 年龄效应, F(1,17) = 11.38, p <0.01; 年龄×比率互动, F(4,68) = 2.85, p <0.05)。 特别是,青少年对高价商品的反应要比成年人多(FR6, p <0.01; FR12, p <0.05; 和FR24, p <0.05),但价格不低(FR1和FR3,ns)。 无效空穴响应没有随着比率的增加而改变(比率效应, F(4,68) = 1.77,ns)在任一年龄组(年龄效应, F(1,17) = 3.04,ns; 年龄×比例互动, F(4,68) = 0.41,ns)。 随着比例的增加,活动孔和非活动孔之间的区别表现出强烈的歧视,青少年早期的辨别力明显高于成人(孔效应, F(1,17) = 63.09, p <0.001; 比×空穴相互作用, F(4,68) = 21.10, p <0.001; 比×孔×年龄相互作用, F(4,68) = 3.71, p <0.01)。 具体来说,青少年区分FR6,FR12和FR24(p <0.05),而成年人仅在FR12和FR24上有区别(p <0.05)。

图5。 

可卡因的自我管理(每次输注1200μg/ kg)作为价格的函数。 A,当可卡因的价格增加时,通过增加FR来获得药物的鼻子戳数。 B,可卡因的消耗(自我输注的数量)作为价格(即比率)的函数,以对数标度绘制并根据指数需求方程拟合。 Q0,最低价格的消费水平; α,可卡因需求的弹性; P最大,行为从非弹性变为弹性的价格。 R2,曲线拟合的相关系数的平方(即确定系数)。 每个点代表每个比例在第二天的每组的平均值±SEM值。 青少年, n = 7; 大人, n = 12。 *p <0.05; **p 与成人相比<0.01。

我们通过将数据拟合到由下式建立的指数需求曲线,分析了消费(即自我输注的数量)随价格(即比率)变化的方式。 Hursh和Silberberg(2008)。 来自青少年和成年人的数据很好地符合曲线(R2 =青少年的0.94; R2 =成年人的0.96),这些曲线的值显示在 图5B.问0 (最低价格的最大消费量)在不同年龄段相似(F(1,5) = 0.001,ns)。 消费量随价格下降而下降,而青少年与成年人之间的下降幅度较小。 也就是说,青少年的α小于成人(F(1,5) = 10.45, p <0.05),表明青少年的需求比成人的需求更有弹性。

实验4:大脑中可卡因及其代谢物水平的年龄差异

青少年血液中可卡因水平较低的趋势(923.24±67.32 vs 1119.73±66.94 ng / ml, t(9) = -2.05, p = 0.070)但不在大脑中(5135.20±281.25对比6947.00±971.28 ng / g, t(9) = -1.64,ns)。 青少年也有一种趋势,即血液中可卡因代谢物苯甲酰爱康宁水平较低(754.72±81.09 vs 1086.70±133.07 ng / ml, t(9) = -2.02, p = 0.074)和脑中(123.30±13.80 vs 184.38±25.15 ng / g, t(9) = -2.00, p = 0.076)。 血液中可卡因代谢物生长素 - 甲酯的水平没有显着的年龄差异(105.84±5.08 vs 87.27±9.48 ng / ml, t(9) = 1.62,ns)或脑(138.54±9.62 vs 146.44±5.36 ng / g, U(11) = 14.00, Z = -0.09,ns)。 血液中代谢物去甲卡因也没有差异(8.28±0.96 vs 11.77±1.72, t(9) = -1.67,ns)。 大多数样本中大脑中的可卡因水平检测不到(数据未显示)。

体内 VTA神经元的细胞外记录

相对于成年人,青少年表现出更高的VTA多巴胺神经元放电率~1 Hz(〜24%)(图。 6A; t(41) = 2.33; p <0.05)。 不同年龄段的爆发次数相似。 度量为突发中发射的尖峰的百分比(图。 6A; t(41) = 0.30; ns)和突发事件的频率(0.46±0.08 vs 0.51±0.09 Hz, t(41) = -0.40; NS)。 然而,青少年表现出比成年人更大的爆发事件,每次爆发的峰值更多(图。 6A; t(41) = 2.28; p <0.05)并有更长的持续时间趋势(256.76±35.12 vs 157.60±33.40 ms, t(47) = 2.01, p = 0.051)。 如 图6B 显示,采样的VTA面积在不同年龄(年龄效应, F(1,41) = 2.71,ns; 年龄×结构互动, F(2,82) = 0.28,ns)。 青少年与成人的坐标(以毫米为单位)如下:前后位,3.57±0.04对比3.66±0.05; mediolateral,0.84±0.05 vs 0.97±0.07; 背腹,7.79±0.05对比7.84±0.04。 如果仅分析用快速绿色染料标记的最后记录的细胞,则结果相似(数据未显示)。

图6。 

A,多巴胺神经元的活动。 左,射击率; 中间,爆裂尖峰(百分比); 对,每次爆裂尖峰。 每个垂直条代表每组的平均值±SEM。 青少年, n =来自24大鼠的11细胞; 大人, n =来自19大鼠的11细胞。 *p 与成人相比<0.05。 B,在VTA中采样的多巴胺神经元的位置。 位置(以毫米为单位)是来自λ(AP)的前后位,来自中线(ML)的中间位置,以及来自皮质表面(DV)的背腹。 每个圆/方形代表单个多巴胺神经元的位置。 C,来自正方形的细胞的代表性组织学图像 B。 电极放置标有黑色箭头。 黑线是参考标记,是显微镜目镜的一部分。

改变多巴胺神经元活性的药物对可卡因自我给药的影响

我们通过药理学修饰多巴胺神经元活性测试多巴胺神经元活性与自我给药之间的关系,并检测其在中等剂量下对可卡因自我给药的影响(每次输注600μg/ kg)。 喹吡罗,D2 受体激动剂,用于降低神经元活性,和依替洛普,D2 受体拮抗剂,用于增加神经元活动(Marinelli等人,2003)。 首先在FR1训练大鼠2 d(数据未显示); 然后他们在FR3接受4额外的训练。 然后将大鼠分成三组,摄入相似的可卡因(药物作用, F(2,61) = 2.08,ns)计划接受盐水,喹吡罗(0.2μg/ kg,sc)或依替必利(0.2μg/ kg,sc)。 如图所示 图7在预处理过程中,所有组都保持青少年与成人的可卡因摄入量差异(年龄效应, F(1,61) = 31.08, p <0.001; 药物作用 F(2,61) = 2.08,ns; 年龄×药物相互作用, F(2,61) = 1.68,ns)。 然后我们比较了之前的行为(预处理,治疗前3 d的平均值)与治疗后(治疗后)的行为。 这是使用时间点(前与后)作为受试者内因子和年龄(青少年与成人)和药物(盐水,喹吡罗,依替洛普)作为受试者之间的因素。 行为根据所服用的药物而改变(药物×时间点相互作用: F(2,61) = 14,43, p <0.001)和受试者的年龄(年龄×时间点互动, F(1,61) = 11.96, p <0.001; 年龄×药物×时间点相互作用, F(2,61) = 6.84, p <0.01)。 具体而言,盐水治疗对这两个年龄段均没有影响,因此青少年保持比成人更高的可卡因摄入量(对于后治疗,青少年vs成人, p <0.05; 预处理与后处理,ns)。 喹吡罗抑制了青少年的可卡因摄入,使青少年“成年状”(对于后治疗,青少年vs成人,ns;对于青少年而言,预处理与对于青少年而言, p <0.05)。 依替普利特增加了成年人的可卡因摄入量,使其成为“青春期样”(对于后治疗,青少年vs成人,ns;成人预处理与成人后治疗, p <0.001)。 为了确保喹吡洛尔的作用不是青少年高基线(喹吡罗尔)行为的假象,我们在排除三组基线摄入量高的青春期大鼠后重复进行分析。 即使取出这些大鼠,结果也相似(数据未显示)。

图7。 

在施用改变多巴胺神经元活性的药物之前(之前)和之后(之后),以中等剂量(600μg/ kg每次输注)的可卡因自我施用。 每个垂直条代表每组的平均值±SEM输注/ 1.5 h。 在药物施用之前的3 d期间,预值是平均值。 药物施用后立即发布值。 青少年, n =盐水,喹吡罗和依替必利的11,12和11; 大人, n =每组中的11。 *p <0.05; ***p 与成人相比<0.001。 #p <0.05; ###p 与Pre相比<0.001。

讨论

我们的研究结果表明,相对于成年人,青少年摄入更多的可卡因,更快地获得可卡因自我管理,可卡因摄入量增加,药物更加努力,对价格上涨不敏感(即,更无弹性) 。 此外,升高的可卡因自我给药与VTA多巴胺神经元的活性升高相关,并且可以用喹吡罗逆转,喹吡罗是一种抑制这些神经元活性的药物。

与成人相比,青少年在低至中等剂量下摄入更多可卡因(每次输注150-600μg/ kg)。 当大鼠给予可卡因的ShA或LgA时,观察到可卡因摄入量增加,这表明青少年和成人之间的差异并不是采样时间不足的假象。 我们的研究结果与两项研究结果一致,显示青少年在中等剂量时自行服用的可卡因比成人更多[每次输注400μg/ kg(Anker和Carroll,2010)]或中等剂量[每次输注800μg/ kg(Schramm-Sapyta等人,2011)]。 我们通过使用更广泛的剂量来扩展这项工作,这使我们能够确定青少年比成人对可卡因更敏感。 以类似的低中等剂量获取可卡因摄入量可用于检验对可卡因奖赏效果的敏感性差异(Piazza等人,1989).

行为差异对可卡因具有特异性,因为对盐水的反应没有年龄差异。 类似地,在极低剂量的可卡因(每次输注75μg/ kg)时未观察到差异,这可能低于大鼠获得自我给药的阈值。 在高剂量(每次输注1200μg/ kg)时,青少年和成人的可卡因摄入量没有差异。 这是预期的,因为在如此高剂量下未观察到对药物敏感性的差异(Piazza等人,2000)。 这一发现也与使用高可卡因剂量的青少年与成年人摄入量没有显着增加的研究一致(Kantak等,2007; Kerstetter和Kantak,2007).

在人类中,青春期开始被认为与药物滥用的发生同时发生(Patton等人,2004)。 在这里,我们发现可卡因自我管理的升高仅发生在发生青春期的青春期大鼠中,而不是之前。 这突显出青春期后的青春期是可卡因成瘾的脆弱“窗口”。 这可能有助于解释为什么一些使用年轻青少年大鼠的研究未发现青少年和成人之间的摄入量差异(Leslie等人,2004; Belluzzi等,2005; Frantz等,2007; Kantak等,2007; Kerstetter和Kantak,2007; Harvey等人,2009; Li和Frantz,2009)。 实验操作中的不同也可能会导致其他差异。 例如,两项研究发现青少年和成人可卡因摄入量没有差异(Leslie等人,2004; Belluzzi等,2005在光/暗循环的非活动阶段而非活动阶段期间执行。 另外,在上述研究中,单独饲养大鼠而不是饲养组。 我们选择对青春期老鼠进行分组,因为青春期的特点是强烈的社交互动和游戏行为(Spear and Brake,1983; Vanderschuren等,1997; 道格拉斯等人,2004)。 另一个重要因素可能是断奶年龄,这会影响实验结果(Wiley和Evans,2009)。 通过商业供应商购买的大鼠随时从P17到P24(Harlan)或P19到P23(Charles River)断奶。 我们要求断奶发生在P21上,以防止断奶变异的不良影响。

青春期后青少年摄入的可卡因摄入量增加,而成人则不然。 当药物消费从稳定过度转变为过度使用时,升级模拟了成瘾者的现象(艾哈迈德,2011)。 根据“精神疾病诊断和统计手册”第四版(这种行为是药物依赖的标志物)美国精神病学协会2000)。 因此,青少年比男性更大的升级是更大成瘾责任的另一个指标。 与此相一致,最近的一项研究表明,青少年,但不是成年人,他们摄入的可卡因或甲基苯丙胺升级(Anker等,2012; Zlebnik等人,2012)。 我们没有观察到成人升级有几个可能的原因。 最可能的因素是长时间(〜10 d)培训对于后续升级的发展是必要的(艾哈迈德等人,2000; Knackstedt和Kalivas,2007; 艾哈迈德,2011)。 鉴于青春期持续时间有限,我们只能接受短期训练(4 d),这可能会阻止成年人的升级。 此外,升级是紧张和依赖(Freeman等人,2009; Picetti等,2010); 它在Long-Evans中很强大(Quadros和Miczek,2009),Wistar(Ahmed和Koob,1998)和Sprague Dawley大鼠从Harlan购买(Ferrario等,2005; Mantsch等,2008)但从Charles River购买的Sprague Dawley大鼠看起来不那么健壮(Knackstedt和Kalivas,2007; Kelamangalath和Wagner,2010),我们在这项研究中使用。

成瘾的另一个特点是成瘾者花费大量时间和精力来获取药物(美国精神病学协会2000并且他们的消费对价格上涨不敏感(Bickel等,2011)。 我们通过测量老鼠在逐步增加可卡因价格的同时获取可卡因的工作量来模拟这一点(Griffiths等,1978; Risner和Silcox,1981)。 我们还通过将数据拟合到指数需求曲线来评估消费随价格变化的方式(Bickel等,2000; Hursh和Silberberg,2008)。 我们的研究表明,青春期后的青少年比成人更有效地获得可卡因。 此外,他们的可卡因消费对价格上涨不太敏感(即他们的行为更无弹性)。 总之,这些研究结果表明,青少年表现出成瘾的行为特征。

支持增加青少年成瘾责任的机制是什么? 青春期大脑经历了广泛的组织和功能变化,包括中脑边缘多巴胺系统的变化(Andersen等,1997; Spear,2000; Wahlstrom等,2010)。 我们之前已经证明VTA多巴胺神经元的活动在青春期达到峰值(McCutcheon和Marinelli,2009; McCutcheon等人,2012)。 在这里,我们使用不同的大鼠亚群(在本研究中来自Charles River的Crl:Sprague Dawley与先前研究中来自Harlan的Hsd:Sprague Dawley)重复这些发现。 我们发现青少年大鼠多巴胺神经元的活性比成人活动高~24%。 在另一个假定的成瘾易感性模型 - 高反应者与低应答者大鼠 - 多巴胺神经元活动的类似增加被证明与自我管理行为增加有关(Marinelli和White,2000; McCutcheon等人,2009)。 多巴胺系统的这种高活动可能使青少年易患药物滥用(Doremus-Fitzwater等,2010)。 我们试图通过用D操纵多巴胺神经元活动来建立药物摄入和多巴胺神经元活动之间的因果关系2 受体激动剂,降低活性,或拮抗剂,以增加活性。 通过给予这些药物,我们改变了可卡因摄入的年龄差异,表明行为差异取决于多巴胺神经元活动。 这表明我们的神经生理学和行为学发现之间存在因果关系,并揭示了治疗靶点的可能机制。 系统递送药物可能会有陷阱; 然而,我们选择了一种自身受体选择剂量,它在多巴胺神经元体内集中起作用(Pucak和Grace,1991)。 我们选择的剂量与我们和其他人使用的剂量相当,以产生多巴胺神经元放电,多巴胺释放和行为的变化(Robertson等,1993; Marinelli等人,2003; Zeeb等,2009)。 我们使用的喹吡罗剂量不太可能显着激活突触后D2- 类受体,因为这些受体的激活增加而不是减少药物摄入量(Howell等,1997).

一些研究表明,腹腔或静脉输送后,青少年和成人之间的大脑中可卡因水平相似(Caster等,2005; Frantz等,2007; Schramm-Sapyta等人,2011)。 我们的研究结果表明,青少年中可卡因和可卡因代谢物的含量略低于成人。 然而,可卡因水平或代谢的差异不太可能导致青少年摄入更多的可卡因。 相对于成年人,当获得药物的价格增加时,青少年表现出更高剂量的可卡因摄入量,但他们以低价格摄取相似的摄入量(FR1)。 任何与新陈代谢有关的可卡因摄入补偿性增加都会出现在低价和高价两种情况下。

认知和行为测量的成熟变化也可能参与可卡因自我管理中与年龄相关的差异。 青少年被认为是“冒险者”,并且对成人的新环境表现出更高的偏好和探索(道格拉斯等人,2003; Stansfield和Kirstein,2006)。 有人提出,青少年的冒险行为源于新奇和寻求感觉(在青春期增加)和自我调节(在成年期成熟)之间的不匹配(Steinberg,2004)。 同样令人信服的证据表明,随着动物成熟,抑制性控制的完善可以解释降低冒险行为(Ridderinkhof和van der Molen,1997; Geier等,2010)和更大的行为抑制(Sturman等,2010; Andrzejewski等人,2011在成年期而不是在青春期。 虽然我们没有在这里测试这些特征,但这些因素可能导致青少年成瘾风险升高。

总之,我们的研究结果表明,青春期后的青少年比成人更容易感染可卡因的成瘾性。 此外,青春期这种增加的成瘾倾向与VTA多巴胺神经元的活性增加有关,并且可以被抑制这些神经元活动的药物逆转。 因此,我们的研究结果通过强调多巴胺神经元作为成瘾风险的关键因素,提供了对青少年成瘾责任的神经机制的深入了解。 我们的研究结果还表明,对可卡因成瘾的易感性增加是青少年神经生物学的产物,可以在没有外部社会和经济影响的情况下得到证实。 因此,应该优先考虑针对青春期生物风险因素的治疗策略,因为青春期对成瘾行为具有如此强烈的易感性。

脚注

  • 收到了三月8,2012。
  • 修订于12月收到28,2012。
  • 1月26,2013接受。
  • 这项工作得到了美国国立卫生研究院资助R01DA020654的支持。 我们感谢Mitch Beales和Lorissa Lamoureux提供技术帮助,感谢Serge Ahmed博士对升级程序提供了有用的意见,感谢Robert Messing博士对本手稿的有益评论。 我们感谢Dave Moody博士和犹他大学人类毒理学中心的人员在国家药物滥用合同研究所N01DA-9-7767的支持下分析脑可卡因水平。 我们感谢行为资源研究所的Pete Roma博士(www.ibrinc.org)他使用指数需求模型对数据分析提出建议。

  • 作者声明没有竞争性的经济利益。

  • 通讯应发给Michela Marinelli,细胞与分子药理学系,Rosalind Franklin医学与科学大学,芝加哥医学院,3333 Green Bay Road,North Chicago,IL 60064。 [电子邮件保护]

參考資料

    1. 艾哈迈德S

    (2011)在药物成瘾的动物模型,神经方法,药物使用的升级,ed Olmstead M(Humana,New York)中。

    1. 艾哈迈德SH,
    2. Koob GF

    (1998)从中度到过量的药物摄入过渡:享乐设定点的变化。 科学 282:298-300。

    1. 艾哈迈德SH,
    2. Walker JR,
    3. Koob GF

    (2000)持续增加服用海洛因的动机在有药物升级史的大鼠中。 神经精神药理学 22:413-421。

    1. 美国精神病学协会

    (2000)精神障碍的诊断和统计手册(American Psychiatric Association,Washington,DC)Text Revision Edition,Ed 4。

    1. 安徒生SL,
    2. Rutstein M,
    3. Benzo JM,
    4. Hostetter JC,
    5. Teicher MH

    (1997)多巴胺受体过量产生和消除的性别差异。 Neuroreport 8:1495-1498。

    1. Andrzejewski ME,
    2. Schochet TL,
    3. Feit EC,
    4. 哈里斯R,
    5. 麦基BL,
    6. 凯利AE

    (2011)在操作性学习,消退和行为抑制范例中成人和青少年大鼠行为的比较。 Behav Neurosci 125:93-105。

    1. Anker JJ,
    2. 卡罗尔我

    (2010)在青少年和成年大鼠中恢复由药物,线索和压力引起的可卡因寻求。 精神药理学(Berl) 208:211-222。

    1. Anker JJ,
    2. Baron TR,
    3. Zlebnik NE,
    4. 卡罗尔我

    (2012)青少年和成年大鼠中甲基苯丙胺自我给药的升级。 药物酒精依赖 124:149-153。

    1. 安东尼JC,
    2. Petronis KR

    (1995)早期使用药物和后期药物问题的风险。 药物酒精依赖 40:9-15。

    1. Belluzzi JD,
    2. 王瑞,
    3. 莱斯利FM

    (2005)乙醛增强青春期大鼠尼古丁自我给药的获得。 神经精神药理学 30:705-712。

    1. Bickel WK,
    2. Marsch LA,
    3. 卡罗尔我

    (2000)解构相对强化效应并将药理强化措施与行为经济学结合起来:理论建议。 精神药理学(Berl) 153:44-56。

    1. Bickel WK,
    2. Jarmolowicz DP,
    3. Mueller ET,
    4. Gatchalian KM

    (2011)强化症病理学的行为经济学和神经经济学:对病因学和成瘾治疗的影响。 Curr Psychiatry Rep 13:406-415。

    1. Bunney BS,
    2. Walters JR,
    3. 罗斯RH,
    4. Aghajanian GK

    (1973)多巴胺能神经元:抗精神病药物和苯丙胺对单细胞活性的影响。 J Pharmacol Exp Ther 185:560-571。

    1. Cassidy RN,
    2. Dallery J

    (2012)经济类型和尼古丁对大鼠食物基本价值的影响。 J Exp Anal Behav 97:183-202。

    1. Caster JM,
    2. 沃克QD,
    3. 库恩CM

    (2005)增强对青春期大鼠重复剂量可卡因的行为反应。 精神药理学(Berl) 183:218-225。

    1. 钱伯斯RA,
    2. 泰勒JR,
    3. Potenza MN

    (2003)青春期动机的发育神经回路:成瘾脆弱性的关键时期。 AM J精神病 160:1041-1052。

    1. 陈CY,
    2. Storr CL,
    3. 安东尼JC

    (2009)早期使用药物和药物依赖问题的风险。 Addict Behav 34:319-322。

    1. Doremus TL,
    2. Brunell SC,
    3. Rajendran P,
    4. Spear LP

    (2005)影响青少年相对于成年大鼠乙醇消耗量升高的因素。 Alco Clin Exp Res 29:1796-1808。

    1. Doremus-Fitzwater TL,
    2. Varlinskaya EI,
    3. Spear LP

    (2010)青春期的激励系统:对药物滥用和其他冒险行为的年龄差异可能产生的影响。 脑认知 72:114-123。

    1. 道格拉斯洛杉矶,
    2. Varlinskaya EI,
    3. Spear LP

    (2003)青少年和成年雄性和雌性大鼠的新物体位置调节:社会隔离的影响。 生理行为 80:317-325。

    1. 道格拉斯洛杉矶,
    2. Varlinskaya EI,
    3. Spear LP

    (2004)青少年和成年雄性和雌性大鼠社会互动的奖励特征:受试者和伴侣的社会与孤立住房的影响。 Dev Psychobiol 45:153-162。

    1. Ferrario CR,
    2. Gorny G,
    3. Crombag HS,
    4. 李,,
    5. Kolb B,
    6. 罗宾逊TE

    (2005)神经和行为的可塑性与从控制到升级的可卡因使用的过渡相关。 生物学精神病学 58:751-759。

    1. Frantz KJ,
    2. O'Dell LE,
    3. 帕森斯LH

    (2007)在青春期和成年大鼠中对可卡因的行为和神经化学反应。 神经精神药理学 32:625-637。

    1. 弗里曼KB,
    2. Kearns DN,
    3. Kohut SJ,
    4. 莱利AL

    (2009)长期接触可卡因自我给药期间药物摄入模式的菌株差异。 Behav Neurosci 123:156-164。

    1. 盖尔CF,
    2. Terwilliger R,
    3. 特斯洛维奇T,
    4. Velanova K,
    5. 月神B

    (2010)奖励处理中的不确定性及其对青春期抑制控制的影响。 Cereb的Cortex 20:1613-1629。

    1. Grace AA,
    2. 邦尼BS

    (1983)黑质多巴胺能神经元的细胞内和细胞外电生理学。 1。 鉴定和表征。 神经 10:301-315。

    1. Grace AA,
    2. 邦尼BS

    (1984)对黑质多巴胺神经元的射击模式的控制:单尖刺射击。 神经科学杂志 4:2866-2876。

    1. 格里菲斯RR,
    2. 布拉迪JV,
    3. JD

    (1978)药物输注维持的进展比率表现:可卡因,二乙基丙酸,氯苯丁胺和芬氟拉明的比较。 精神药理学(Berl) 56:5-13。

    1. 哈维RC,
    2. Dembro KA,
    3. Rajagopalan K,
    4. Mutebi MM,
    5. Kantak KM

    (2009)青春期和成年雄性大鼠自我施用可卡因对眶额皮质相关神经认知功能的影响。 精神药理学(Berl) 206:61-71。

    1. Howell LL,
    2. Czoty PW,
    3. 伯德LD

    (1997)血清素和多巴胺之间在松鼠猴行为上的药理学相互作用。 精神药理学(Berl) 131:40-48。

    1. Hursh SR

    (1993)药物自我管理的行为经济学:介绍。 药物酒精依赖 33:165-172。

    1. Hursh SR,
    2. 罗马PG

    (2013)行为经济学和经济公共政策。 J Exp Anal Behav 99:98-124。

    1. Hursh SR,
    2. 西尔伯贝格

    (2008)经济需求和基本价值。 心理学牧师 115:186-198。

    1. 约翰斯顿LD,
    2. 奥马利总理
    3. 巴克曼JG,
    4. Schulenberg JE

    (2011)监测未来青少年吸毒的国家结果:主要研究结果概述,2010(密歇根大学社会研究所,密歇根州安阿伯市)。

    1. Kandel DB,
    2. 山口K,
    3. 陈克

    (1992)药物参与从青春期到成年期的进展阶段:门户理论的进一步证据。 J Stud酒精 53:447-457。

    1. Kantak KM,
    2. 古德里奇CM,
    3. 乌里韦五世

    (2007)性别,动情周期和药物发病年龄对大鼠可卡因自我给药的影响(褐家鼠) Exp Clin Psychopharmacol 15:37-47。

    1. Kelamangalath L,
    2. 瓦格纳JJ

    (2010)D-丝氨酸治疗在长期接受可卡因自我给药后减少可卡因引发的大鼠恢复。 神经 169:1127-1135。

    1. Kerstetter KA,
    2. Kantak KM

    (2007)青春期和成年大鼠自我施用可卡因对刺激 - 奖励学习的不同影响。 精神药理学(Berl) 194:403-411。

    1. Knackstedt LA,
    2. Kalivas PW

    (2007)可卡因自我管理的长期使用增强了药物引发的复原,但没有增强行为敏感性。 J Pharmacol Exp Ther 322:1103-1109。

    1. Kolho KL,
    2. Nikula H,
    3. Huhtaniemi我

    (1988)出生后用促性腺激素释放激素拮抗剂治疗的雄性大鼠的性成熟。 J Endocrinol 116:241-246。

    1. Leslie FM,
    2. Loughlin SE,
    3. 王瑞,
    4. 佩雷斯L,
    5. Lotfipour S,
    6. Belluzzia JD

    (2004)前脑兴奋剂反应性的青少年发展:来自动物研究的见解。 Ann NY Acad Sci 1021:148-159。

    1. Levin ED,
    2. 劳伦斯SS,
    3. Petro A,
    4. 霍顿K,
    5. Rezvani AH,
    6. Seidler FJ,
    7. Slotkin TA

    (2007)雄性大鼠的青少年与成人发作的尼古丁自我给药:作用持续时间和差异烟碱受体相关。 神经毒素Teratol 29:458-465。

    1. 李C,
    2. Frantz KJ

    (2009)在男性大鼠中寻找可卡因的减毒孵化,在周围过程中训练自我施用可卡因。 精神药理学(Berl) 204:725-733。

    1. 林SN,
    2. Moody DE,
    3. Bigelow GE,
    4. 福尔兹RL

    (2001)用于定量人血浆中可卡因和苯甲酰爱康宁的经验证的液相色谱 - 大气压化学电离 - 串联质谱法。 J Anal Toxicol 25:497-503。

    1. 林SN,
    2. Walsh SL,
    3. Moody DE,
    4. 福尔兹RL

    (2003)通过液相色谱/串联质谱法检测人血浆中可卡因N-氧化物和其他可卡因代谢物的时间过程。 肛门化学 75:4335-4340。

    1. 林奇WJ,
    2. 卡罗尔我

    (2001)药物摄入量的调节。 Exp Clin Psychopharmacol 9:131-143。

    1. Mantsch JR,
    2. Yuferov V,
    3. Mathieu-Kia AM,
    4. 何A,
    5. Kreek MJ

    (2004)长期接受高可卡因和低可卡因剂量对大鼠自我给药,可卡因诱导的恢复和脑mRNA水平的影响。 精神药理学(Berl) 175:26-36。

    1. Mantsch JR,
    2. Baker DA,
    3. Francis DM,
    4. Katz ES,
    5. Hoks MA,
    6. Serge JP

    (2008)大鼠长期接受可卡因自我给药后,应激源和促肾上腺皮质素释放因子诱导的恢复和活跃的应激相关行为反应得到增强。 精神药理学(Berl) 195:591-603。

    1. Marinelli M,
    2. 白FJ

    (2000)增强的可卡因自我管理易感性与中脑多巴胺神经元的脉冲活动升高有关。 神经科学杂志 20:8876-8885。

    1. Marinelli M,
    2. Cooper DC,
    3. 贝克LK,
    4. 白FJ

    (2003)中脑多巴胺神经元的冲动活动调节寻求药物的行为。 精神药理学(Berl) 168:84-98。

    1. Marinelli M,
    2. Rudick CN,
    3. 胡XT,
    4. 白FJ

    (2006)多巴胺神经元的兴奋性:调节和生理后果。 CNS Neurol Disord药物靶标 5:79-97。

    1. McCutcheon JE,
    2. 马里内利M

    (2009)年龄很重要。 EUR神经科学杂志 29:997-1014。

    1. McCutcheon JE,
    2. 白FJ,
    3. 马里内利M

    (2009)可卡因自我给药后多巴胺细胞神经适应的个体差异。 生物学精神病学 66:801-803。

    1. McCutcheon JE,
    2. 康拉德KL,
    3. Carr SB,
    4. 福特KA,
    5. McGehee DS,
    6. 马里内利M

    (2012)腹侧被盖区的多巴胺神经元在青少年大鼠中的发射速度比成人大。 J神经生理学 108:1620-1630。

    1. Mitchell JM,
    2. Cunningham CL,
    3. 马克GP

    (2005)运动活动预测获得自我管理行为但不摄取可卡因。 Behav Neurosci 119:464-472。

    1. Patton GC,
    2. 麦克莫里斯BJ,
    3. Toumbourou JW,
    4. Hemphill SA,
    5. Donath S,
    6. Catalano RF

    (2004)青春期和物质使用和滥用的开始。 儿科 114:e300-e306。

    1. 广场PV,
    2. DeminièreJM,
    3. Le Moal M,
    4. 西蒙赫

    (1989)预测个体对安非他明自我管理的脆弱性的因素。 科学 245:1511-1513。

    1. 广场PV,
    2. Deroche-Gamonent V,
    3. Rouge-Pont F,
    4. Le Moal M

    (2000)自我给药剂量反应函数的垂直变化预测了易患成瘾的药物易感表型。 神经科学杂志 20:4226-4232。

    1. 皮切蒂R,
    2. 何A,
    3. Butelman ER,
    4. Kreek MJ

    (2010)Fischer和Lewis大鼠中延长可及性可卡因自我给药的剂量偏好和剂量递增。 精神药理学(Berl) 211:313-323。

    1. Pucak ML,
    2. 格雷斯AA

    (1991)部分多巴胺消耗导致残余多巴胺神经元对阿扑吗啡的敏感性增强。 突触 9:144-155。

    1. Quadros IM,
    2. Miczek KA

    (2009)强烈可卡因暴食的两种模式:社交失败压力后持续性增加和大鼠延长进入条件导致摄入量增加。 精神药理学(Berl) 206:109-120。

    1. Reboussin BA,
    2. 安东尼JC

    (2006)是否有流行病学证据支持可卡因使用后不久出现可卡因依赖综合症的观点? 神经精神药理学 31:2055-2064。

    1. Ridderinkhof KR,
    2. van der Molen MW

    (1997)心理资源,处理速度和抑制控制:从发展的角度来看。 Biol Psychol 45:241-261。

    1. Risner ME,
    2. Silcox DL

    (1981)比格犬在渐进比例范例中的精神兴奋剂自我管理。 精神药理学(Berl) 75:25-30。

    1. 罗伯逊GS,
    2. Tham CS,
    3. 威尔逊C,
    4. 雅库博维奇A,
    5. Fibiger HC

    (1993)体内比较喹吡罗和推定的突触前多巴胺能激动剂B-HT 920和SND 919对纹状体多巴胺和乙酰胆碱释放的影响。 J Pharmacol Exp Ther 264:1344-1351。

    1. Schramm-Sapyta NL,
    2. 沃克QD,
    3. Caster JM,
    4. Levin ED,
    5. 库恩CM

    (2009)青少年是否比成年人更容易吸毒成瘾? 来自动物模型的证据。 精神药理学(Berl) 206:1-21。

    1. Schramm-Sapyta NL,
    2. Cauley MC,
    3. Stangl DK,
    4. Glowacz S,
    5. Stepp KA,
    6. Levin ED,
    7. 库恩CM

    (2011)个体和发育差异在大鼠自愿摄入可卡因中的作用。 精神药理学(Berl) 215:493-504。

    1. Shahbazi M,
    2. Moffett AM,
    3. 威廉姆斯BF
    4. Frantz KJ

    (2008)大鼠的年龄和性别依赖性苯丙胺自我给药。 精神药理学(Berl) 196:71-81。

    1. Siegmund S,
    2. Vengeliene V,
    3. 歌手MV,
    4. Spanagel R.

    (2005)饮酒开始时的年龄对长期乙醇自我给药与剥夺和应激阶段的影响。 Alco Clin Exp Res 29:1139-1145。

    1. Spear LP

    (2000)青春期大脑和年龄相关的行为表现。 Neurosci Biobehav Rev 24:417-463。

    1. Spear LP,
    2. 刹车SC

    (1983)Periadolescence:大鼠的年龄依赖性行为和精神药理学反应。 Dev Psychobiol 16:83-109。

    1. Stansfield KH,
    2. Kirstein CL

    (2006)新颖性对青少年和成年大鼠行为的影响。 Dev Psychobiol 48:10-15。

    1. 斯坦伯格L.

    (2004)青春期冒险:改变了什么,为什么? Ann NY Acad Sci 1021:51-58。

    1. Sturman DA,
    2. 曼德尔DR,
    3. 莫哈达姆B

    (2010)青少年在器乐学习和消退期间表现出与成人的行为差异。 Behav Neurosci 124:16-25。

    1. 缠绕RC,
    2. 博兰M,
    3. 格里格森PS

    (2009)可卡因的交配是厌恶的,可以防止大鼠吸毒。 Behav Neurosci 123:913-925。

    1. Ungless MA,
    2. 格雷斯AA

    (2012)你是不是? 与生理识别多巴胺神经元有关的挑战。 趋势神经科学 35:422-430。

    1. Vanderschuren LJ,
    2. Niesink RJ,
    3. Van Ree JM

    (1997)大鼠社交游戏行为的神经生物学。 Neurosci Biobehav Rev 21:309-326。

    1. Wahlstrom D,
    2. 柯林斯P,
    3. 白T,
    4. 露西安娜

    (2010)青春期多巴胺神经传递的发育变化:行为影响和评估中的问题。 脑认知 72:146-159。

    1. Wiley JL,
    2. 埃文斯RL

    (2009)繁殖与否繁殖? 青少年大鼠药物作用的实证评价。 Int J Dev Neurosci 27:9-20。

    1. Zeeb FD,
    2. 罗宾斯TW,
    3. Winstanley CA.

    (2009)使用新型大鼠赌博任务评估的赌博行为的5-羟色胺能和多巴胺能调节。 神经精神药理学 34:2329-2343。

    1. Zlebnik NE,
    2. Anker JJ,
    3. 卡罗尔我

    (2012)运动以减少青少年和成年大鼠可卡因自我管理的升级。 精神药理学(Berl) 224:387-400。