胆囊收缩素介导的抑郁和焦虑相关行为的前额皮质回路：ΔFosB（2014）的作用

抽象

内侧前额叶皮层（mPFC）神经元活动减少与小鼠社交失败引起的抑郁和焦虑样行为有关。 然而，降低mPFC活性及其抑制作用的分子机制仍然未知。 我们在此显示，mPFC中转录因子ΔFosB的诱导，特别是在前肢（PrL）区域，介导对应激的易感性。 在慢性社交失败应激后，在易感小鼠中选择性地发生PrL中的ΔFosB诱导，并且在该区域中过度表达ΔFosB，但在附近的下边缘（IL）区域中不过度，增强了应激易感性。 ΔFosB部分通过诱导缩胆囊素（CCK）-B受体产生这些作用：mPFC中的CCKB阻断诱导弹性表型，而CCK施用于mPFC模拟社会应激的致焦虑和抑制样作用。 我们以前发现，易感小鼠中mPFC神经元的光遗传学刺激逆转了慢性社交失败压力后出现的几种行为异常。 因此，我们假设皮质投射的光遗传学刺激将拯救CCK在mPFC中的病理学作用。 在mPFC中输注CCK后，我们光学刺激mPFC投射到基底外侧杏仁核或伏隔核，两个皮质下结构参与情绪调节。 Corticoamygdala预测的刺激阻止了CCK的致焦虑作用，尽管没有观察到社交失败的其他症状。 相反，刺激皮质激素预测可逆转CCK诱导的社会回避和蔗糖偏好缺陷，但不会产生类似焦虑的效应。 总之，这些结果表明社会压力引起的行为缺陷部分是由mPFC中的分子适应介导的，涉及ΔFosB和CCK通过皮质投射到不同的皮质下靶标s.

关键词： 伏隔核，杏仁核，焦虑症，CCK，抑郁症，mPFC

介绍

几个解剖学和功能上相互关联的边缘大脑区域，包括内侧前额叶皮层（mPFC），海马，杏仁核和伏隔核（NAc），涉及调解抑郁和焦虑的关键症状（; ; ; ; , ; ; ）。 例如，对杏仁核缺乏皮质反馈与烦躁情绪相关，并且在成功治疗后恢复到正常水平。 深部脑刺激子宫颈扣带皮层（mPFC区域）的抗抑郁作用与皮层和皮质下大脑活动恢复正常水平有关（; ）。 类似地，NAc的深部脑刺激是抗抑郁和抗焦虑的，并且与NAc，杏仁核和mPFC中的代谢改变相关（; ; ）。 这些数据支持心境障碍的神经网络假设，其中抗抑郁治疗，无论机制如何，均在皮下和过度活跃的皮质下电路中使活动正常化（; ; ; ; ; ).

涉及长期暴露于身体或心理压力的动物模型会损害mPFC中神经元的结构和功能（），杏仁核（），hippocampus（）和NAc（; ）。 慢性社交失败压力，一种伦理学上有效的抑郁症模型（），从Zif268和c-Fos的表达减少推断，降低mPFC神经元活性（; ). 此外，mPFC的光遗传学刺激可逆转这些缺陷并发挥抗抑郁样作用（），确认mPFC在情绪相关现象中的重要性。 Ť与灵长类动物一样，啮齿动物mPFC通过对基底外侧杏仁核（BLA）和NAc的预测来控制情绪行为（; ; ）。 然而，介导mPFC这种作用的分子机制仍然未知。

本研究首先关注ΔFosB，这是一种稳定的转录因子，通过慢性社会失败应激在NAc中诱导，其中它反对应激易感性 (）。 我们在失败压力后进行了ΔFosB诱导的全脑映射，并发现，类似于早期的研究（; ; ），mPFC中的鲁棒诱导。 令人惊讶的是，我们发现mPFC中的这种ΔFosB诱导促进了应激易感性。 我们确定胆囊收缩素（CCK）-B受体是mPFC中ΔFosB的分子靶点，其中CCKergic神经传递与社会压力的致焦虑和抑制作用有关（, ). 我们发现mPFC中的CCK活性对于社交压力的焦虑和抑郁样作用是必要和充分的。 此外，通过使用光遗传学方法，我们证明了CCK在mPFC亚电路中的特定作用：mPFC-BLA预测中的CCK介导焦虑症状，而mPFC-NAc预测中的CCK介导抑郁症状。

材料和方法

实验1：通过慢性社交失败压力引起的ΔFosB诱导的全脑映射。

如前所述，8周龄的C57BL / 6J雄性小鼠连续10天受到慢性社交失败压力（; ; ）（见 表1; 图。 1A）。 简言之，将每只小鼠暴露于不熟悉的侵袭性雄性CD1退役种鸡，每天5 min。 在与CD1攻击者（5 min）直接相互作用后，将动物置于相同笼子的相邻隔室中用于下一个24 h，其具有感觉但非物理接触。 对照动物饲养在等同的笼子中，但是具有相同菌株的成员。 在失败的最后一天之后，在24 h进行社交互动测试。 根据公布的方案评估对不熟悉的CD1雄性小鼠的社交回避。 测量在“相互作用区”（围绕笼子的8-cm宽的走廊）中花费的时间。 如前所述，将失败的小鼠分离成易感和有弹性的亚群体（; ）。 因为大多数对照小鼠与社交目标互动所花的时间要多于与空目标围栏互动所花费的时间，所以互动比为100（存在社交目标与没有社交目标时在互动区域所花费的时间相等）：得分<100的小鼠被标记为“易感”，得分≥100的小鼠被标记为“有弹性”。 广泛的行为，生化和电生理分析支持了这些不同的易感和有弹性的亚群的有效性（; ; ).

表1。  

每毫米FosB免疫反应性细胞核的平均数（±SEM）2 在慢性（24 d）社交失败压力后控制，易感和有弹性的小鼠10 h的大脑区域
图1。  

mPFC中的ΔFosB诱导促进对应激的易感性。 A，在24社交失败事件的最后一次之后，mPFC 10中的ΔFosB免疫组织化学的代表性显微照片。 B，GABA能不会发生ΔFosB的诱导 ...

在社交相互作用测试之后，将小鼠麻醉并用4％多聚甲醛/ PBS心脏内灌注。 细胞计数为ΔFosB+ NAc中的神经元如前所述进行（）。 用30％蔗糖对脑进行冷冻保护，并在冷冻切片机上切割冠状切片（30μm）并进行免疫组织化学处理。 将自由漂浮的切片在含有0.3％Triton和3％正常山羊血清的封闭缓冲液中预温育。 使用在相同缓冲液中针对蛋白质的N-末端部分（1 / 1000 Santa Cruz Biotechnology，目录号＃sc-48）产生的兔多克隆抗体检测ΔFosB，然后用生物素化的山羊抗兔IgG抗体和抗生物素蛋白 - 生物素处理以DAB为底物的过氧化物酶复合物方法（Vector Laboratories）。 对于所有条件（100 s），二氨基联苯胺孵育时间保持恒定。 将切片安装，脱水并盖上盖玻片。 ΔFosB-免疫阳性细胞在细胞核中显示特异性褐色染色，并且通过使用显微镜（20×放大倍数）对治疗条件无视的观察者定量。 每只小鼠选择跨越每个脑区域的三个选择的脑切片用于定量。 通过将该部分与Paxinos小鼠脑图谱进行比较来进行每个脑区域的解剖学分离。 优化免疫组织化学的条件以将背景水平降低至最小值，从而允许正确鉴定ΔFosB阳性细胞。 计算每只动物的平均值，并将其视为用于统计分析的个体观察。 尽管使用的抗体同时识别ΔFosB和全长FosB，但我们通过Western印迹知道在所研究的条件下只能检测到ΔFosB（; ).

实验2：mPFC中社会应激诱导的ΔFosB神经元表型的鉴定。

为了检测皮质GABA能神经元中ΔFosB的表达，我们使用来自暴露于慢性社交失败压力的GAD2-tdTomato小鼠的组织，并如上所述对ΔFosB染色（参见 图。 1B）。 通过培养敲入GAD2-Cre小鼠（Gad2tm2（cre）Zjh / J; JAX库存号010802）产生小鼠（）（B6.Cg-Gt（ROSA）26Sortm9（CAG-tdTomato）Hze / J; JAX库存号007908）携带floxed-stop控制的tdTomato（RFP变体）。

实验3：ΔFosB过度表达在前肢（PrL）和下边缘（IL）皮质中的行为效应。

对成年雄性小鼠（8周）进行立体定向手术以将HSV-ΔFosB-GFP或HSV-GFP注射到mPFC的PrL或IL区域。 简言之，使用氯胺酮（10 mg / kg）和甲苯噻嗪（1 mg / kg）的混合物麻醉小鼠，并使用以下立体定位坐标用于PrL的病毒递送：1.8 mm（前/后），0.65 mm（侧向） ）， - 2.2 mm（背/腹）; 对于IL：1.9 mm（前/后），0.75 mm（侧面）， - 2.8 mm（背/腹），与中线成XN​​UMX°（相对于前囟）。 在10最小时间段（0.5μl/ min）双侧递送总共5μl的纯化病毒，然后休息0.1分钟。 使用标准组织学方法确认病毒注射部位（参见 图。 1C）。 虽然不可能在完全准确的小鼠中选择性地靶向PrL与IL，但是数据仍然存在 图1C 说明主要针对一个区域或另一个区域是非常可行的。 实际上，通过针对这两个区域获得的独特行为效应（见结果）证实了这种方法。 第一批小鼠专门用于次最大社交失败实验（见 图。 1D）。 手术后3天，小鼠在同一天连续两次失败，然后测试社交互动24 h。 此次最大失败程序已经过验证，可以揭示遗传操作后的易感性表型（; ).

第二批小鼠用于测试基础焦虑和抑郁样行为（见 图。 1Ë-J）。 手术后一天，用1％（w / v）蔗糖溶液使小鼠习惯。 第二天，小鼠可以选择水瓶和1％蔗糖溶液瓶，每天更换。 在手术后第4天和第5天测量24 h的蔗糖溶液摄入量，并表示为摄入的液体总量的百分比。 根据公布的方案，在开放场（第3天），高架加迷宫（第4天），社交互动（第5天早晨）和强迫游泳（第5天下午）测试中测试小鼠（）。 我们发现，通过这种测试顺序，后续测试的结果不会受到以前测试的影响（）。 在红光条件下使用视频跟踪系统（Ethovision）记录5 min中开放视野中小鼠的活动。 高架十字迷宫由两条直线相交的跑道组成，跑道位于地板上方60厘米处，分为两个开口和两个封闭的臂。 将小鼠单独放置在迷宫的中心，并允许自由探索每个臂一段5分钟。 在开放场和高架加迷宫测试中，分别在中心和开放臂中花费的时间被用作焦虑相关反应的反向指数。 进行为期一天的强迫游泳测试，持续5分钟。 在强迫游泳测试期间增加的不动时间被解释为类似抑郁症的行为。 这种1日测试已在小鼠中广泛使用，并被验证为预测有效性的量度，因为抗抑郁药物可减少不动时间。

最后，一组单独的小鼠在mOFC内注射HSV-ΔFosB，并在次最大失败后测试社交相互作用（见 图。 1K).

HSV载体获自Rachael Neve（麻省理工学院）。 感兴趣的基因（ΔFosB和GFP）在CMV启动子下。 这些载体已在先前的出版物中得到广泛验证（例如， ).

实验4：慢性社会压力对mPFC中CCKB受体水平的影响。

在社交互动测试后的24 h，快速取出大脑并连续切片，并将mPFC快速解剖并在干冰上冷冻（见 图。 2A,B）。 如前所述进行RNA分离，qPCR和数据分析（; ）。 用TriZol试剂（Invitrogen）分离RNA，并用来自QIAGEN的RNAeasy微量试剂盒进一步纯化。 确定所有RNA样品具有260 / 280和260 / 230值≥1.8。 使用iScript（Bio-Rad）进行逆转录。 使用SYBR Green（Quanta）的qPCR用Applied Biosystems 7900HT RT PCR系统进行，其具有以下循环参数：2 min，95℃; 40的95°C，15的59°C和30的72°C的33周期; 并分级加热至95°C以产生解离曲线以确认单个PCR产物。 通过比较C分析数据t 治疗条件的值（易感或有弹性的对照小鼠，或HSV-ΔFosB对HSV-GFP）与ΔΔCt 方法 （）。 qPCR引物如下：ΔFosB，正向，AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT和反向，GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG; CCKB，转发，ACCCTTTATGCGGTGATCTTTC和反向，ATGAGCACGTTTCCGCCAA; CCK，转发，AGCGCGATACATCCAGCAG和反向，ACGATGGGTATTCGTAGTCCTC; GAPDH，转发，AGGTCGGTGTGAACGGATTTG和反向，TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA。

图2。  

阻断CCKB受体具有抗衰老，抗抑郁样作用。 A，社交失败仅在弹性小鼠中降低mPFC中的CCKB受体水平（n = 8-10）。 *p <0.05，与对照（单向方差分析）相比。 **p <0.05 ...
实验5：ΔFosB对CCKB受体和cFos水平的影响。

在小鼠体内注射HSV-ΔFosB。 在手术后的72 h，在病毒过度表达的高峰期，在荧光显微镜下解剖注射部位（参见 图。 2C）。 如上所述进行RNA分离，qPCR和数据分析。 qPCR引物如下：c-fos，正向，AATCCGAAGGGAACGGAATAAGA和反向，TGCAACGCAGACTTCTCATCT。

实验6：ΔFosB阻断对应激诱导的CCKB受体水平和弹性的影响。

将成年小鼠双侧注射HSV-GFP或HSV-ΔJunD到PrL中（参见 图。 2d-F）。 ΔJunD是JunD的N-末端截短突变体，其充当ΔFosB的显性失活拮抗剂。 对于5，小鼠每天进行两次社交失败。 这种加速的社会失败协议，缩短到与最大HSV转基因表达的时期一致，之前已被使用并显示出诱导最大程度的社会回避（）。 在最后一次应激发作后24小时，将小鼠断头而没有麻醉，以避免麻醉剂对神经元蛋白质水平的影响。 使用15号冲头在含PBS的蛋白酶（Roche）和磷酸酶（Sigma-Aldrich）抑制剂中去除感染的组织，并立即在干冰上冷冻。 在改良的RIPA缓冲液中通过超声处理将样品均质化：10 mm Tris碱，150 mm氯化钠，1 mm EDTA，0.1％SDS，1％Triton X-100、1％脱氧胆酸钠，pH 7.4，蛋白酶和磷酸酶抑制剂以上。 加入Laemmli缓冲液后，将蛋白质在4-15％的聚丙烯酰胺梯度凝胶（Criterion System； Bio-Rad）上分离，并根据制造商的规程使用Odyssey系统（Li-Cor）进行蛋白质印迹。 用CCKB受体抗体（1/1000，Acris，目录号AP01421PU-N）印迹膜。 另一组小鼠在PrL中注射了AAV-ΔJunD或AAV-GFP，然后，在允许最大转基因表达的手术后5周，小鼠接受了次最大失败方案。 他们在最后一次失败后24小时接受了社交互动测试。

实验7：内部mPFC CI-988（CCKB拮抗剂）对社会压力引起的社会回避和快感缺乏的影响。

将针对mPFC的双侧插管（1.0 mm套管至套管距离，1.8 mm前部，注射器-2.2 mm背侧/腹侧）植入易感小鼠（见 图。 2G,H）。 手术后一周，将10 ng CI-988直接注入mPFC，主要针对PrL。 然后测试小鼠的社交互动行为。 测量剩余24 h的蔗糖偏好。 将CI-988（Tocris Bioscience）溶解在盐水中，等分并冷冻。 在实验当天制备最终稀释液。 在社交相互作用测试之前，在腹膜内施用CI-988（2 mg / kg）30 min的易感小鼠中进行另外的实验。

实验8：CCKB激动剂对社会压力易感性的影响以及通过对BLA或NAc的mPFC投射的光遗传学刺激的逆转。

将AAV-CaMKII-ChR2-EYFP或AAV-CaMKII-EYFP注射到右侧mPFC中，再次主要靶向PrL（参见 图。 3A〜G）。 五周后，将光纤植入右NAc（1.4前/后，2.6侧，-4.7背侧/腹侧与中线25°角）或BLA（-1.6前/后，3.1侧，-4.7背侧） /腹侧与中线没有角度）。 在相同的外科手术过程中，将双侧插管植入mPFC（见上文）。 用牙科粘固剂将套管和纤维固定在头骨上。 然后在行为实验开始前让小鼠1周恢复。 对小鼠进行次最大程度的失败，然后测试24 h以进行社交相互作用，然后直接测试升高的加迷宫和对于剩余的24 h的蔗糖偏好。 在社交互动测试之前的30分钟，将一半小鼠用CCK-8（10 ng）输注到mPFC中，而另一半接受载体（盐水）。 对成对的小鼠（载体和CCK-8处理的小鼠，用AAV-GFP或AAV-ChR2）进行测试。 将CCK-8（Sigma）溶解在盐水中，等分并冷冻。 在实验当天制备最终稀释液。

图3。  

CCK-8诱导的应激易感性取决于特定的皮质投射。 A在次最大社交失败后的24 h和CCK-30输注后的8 min，在社交互动测试期间对mPFC投影区域进行激光刺激。 CCK-8输液 ...

根据公布的方案进行光刺激（）。 长期植入光纤（​​Thor Laboratories）并通过FC / PC适配器连接到473 nm蓝色激光二极管（Crystal Lasers，BCL-473-050-M）。 刺激器（Agilent，＃33220A）用于产生蓝光脉冲。 在所有刺激期间，40 ms突发的100 Hz（9.9 ms尖峰宽度）蓝光脉冲在每次3中仅在社交互动测试的持续时间内传递到BLA或NAc中的终端区域，以模拟类似突发的皮层模式活动。 每次使用前，使用光传感器（Thor Laboratories，S130A）验证光纤光的强度，并且光强度为〜15 mW。 这种刺激方案，先前在电生理学上得到验证（），没有基于行为观察诱导癫痫发作和在光遗传刺激区域外缺乏c-Fos表达（).

实验9：通过c-Fos mRNA水平测量的CCKB激动剂对mPFC神经元活性的影响。

将双侧套管植入靶向mPFC的成年小鼠身上（见 图。 3H）。 休息一周后，对小鼠进行次最大程度的失败并在之后输注CCK-8 24。 在药物输注后30 min取mPFC冲头，并如上所述制备用于mRNA分析的样品。

动物房屋。

使用8周龄的C57BL / 6J雄性小鼠（The Jackson Laboratory）。 在实验操作之前，所有小鼠在动物设施中适应至少1周，并且在23 h光/暗循环（在25上点亮：12 AM）保持在7°C-00℃， 随意 获得食物和水。 根据西奈山伊坎医学院神经科学学会和机构动物护理和使用委员会的指导进行实验。

统计分析。

显示的数据表示为平均值±SEM（表示为误差棒）。 单因素方差分析用于比较免疫组化，生化和行为分析中对照，易感和弹性小鼠之间的平均值。 使用单向ANOVA比较GFP-对照和PrL或IL中ΔFosB过表达在开放场，高架加迷宫，强迫游泳和蔗糖偏好测试中的平均值。 双向ANOVA用于比较社交互动测试中GFP-对照，ΔFosB-PrL和ΔFosB-IL之间的平均值。 双向ANOVA用于比较所有行为实验中有或没有光遗传学刺激的CCK-8效应，以及ΔFosB过表达或CI-988输注对社会回避的影响。 在适当的时候， 事后 使用Bonferroni进行分析 事后 测试。 学生们 t 测试用于比较CI-988输注对蔗糖偏好和强迫游泳测试的影响以及CCK-8对的影响 c-fos mRNA水平。 实验条件之间的差异被认为具有统计学意义 p ≤0.05。

成果

通过慢性社交失败压力对ΔFosB诱导的全脑映射

在慢性（10 d）社交失败压力过程中，我们首先通过免疫组织化学在对照，易感和有弹性的小鼠中研究ΔFosB诱导，重点是先前在应激反应中涉及的前脑和中脑区域。 在最后一次失败事件后对动物进行24 h分析。 慢性社会压力在许多脑区诱导ΔFosB，在弹性和易感小鼠之间观察到不同的模式。 如图所示 表1 和 图1AIL，BLA，海马齿状回，背纹状体和NAc核心在弹性小鼠中表现出优先激活; NAc中的这些结果与已发表的结果一致（）。 与之形成鲜明对比的是，易感小鼠在PrL，侧隔和纹状体末端的床核中表现出更强的诱导作用。 几个大脑区域在易感和有弹性的小鼠中表现出相当的ΔFosB诱导; 这些包括眶额皮质（OFC，PFC的另一个区域），NAc壳，背腭和周围灰质（PAG）。

为了鉴定在皮质区域中显示ΔFosB诱导的神经元亚型，对GAD2-tdTomato小鼠进行慢性社交失败应激。 在GABA能神经元中检测不到易感小鼠的ΔFosB免疫反应性（图。 1B），这证实了其他形式的慢性应激后皮质锥体神经元中ΔFosB特异性诱导的早期发现（）。 在非灭绝的对照小鼠中， 大脑区域的基线ΔFosB水平与先前研究中报道的相似（, ）与其他任何区域相比，NAc和背侧纹状体的基础水平高得多，但齿状回除外，其水平与纹状体区域相当。 (表1).

mPFC中的ΔFosB促进对应激的易感性

为了跟进这些发现，我们专注于PrL，因为我们之前已经表明，该区域的光遗传激活在社会失败范式中发挥抗抑郁样作用（). 为了测试ΔFosB诱导在这个大脑区域的功能性后果，我们在对照小鼠的PrL中病毒过度表达ΔFosB (图。 1C并使他们经历社会失败压力的次最大程度，这不会引起正常动物的社会回避。 在PrL中过表达ΔFosB的小鼠比GFP注射的对照小鼠更容易遭受社交失败，因为它们在次最大社交失败后表现出社会回避行为。 （相互作用， F(2,38) = 2.847， p > 0.05，病毒的主要作用， F(2,38) = 6.013， p <0.05； Bonferroni后期测试 t = 2.447， p <0.05）（图。 1D）。 这些小鼠在1日强迫游泳试验中也显示出增加的不动性（F(2,31) = 6.448， p <0.05； Bonferroni后期测试 t = 3.518， p <0.05）（图。 1E），与抗抑郁药产生的效果相反。 相比之下，PrL中的ΔFosB过度表达并未改变焦虑样行为，蔗糖偏好，社交互动或运动活动的几种基线指标（图。 1缩略词）。 总之，这些发现支持这样的假设：易感小鼠的PrL中ΔFosB的选择性诱导导致易受压力及其有害后果。 相比之下，在另一个mPFC，IL区域的ΔFosB过度表达对基线情绪行为或社会失败压力的反应没有影响。 (图。 1d-J), 而内侧OFC的ΔFosB过度表达趋向于促进慢性社交失败的恢复能力，尽管这种效应没有达到统计学意义 （相互作用， F(1,31) = 1.741， p > 0.05，互动时间的主要影响， F(1,31) = 14.170， p <0.05； Bonferroni后期测试 t = 3.860， p GFP组内<0.05； t = 1.960， p ΔFosB组内<0.05; 病毒的作用 t = 2.447， p <0.05）（图。 1K).

ΔFosB促进mPFC中的CCKB诱导

大量证据支持CCK，一种丰富的大脑神经肽，在压力和焦虑的神经生物学机制中发挥重要作用的观点。 (）。 特别是，在大鼠社交压力期间，mPFC中CCK的释放与焦虑相关的行为有关（）。 虽然CCK在人类抑郁症中的作用仍不清楚，但最近有证据表明其在社交失败引起的抑郁症样行为中的作用（）。 因此，我们假设mPFC中CCK或其CCKB（也称为CCK2）受体水平的改变可能导致易感和有弹性小鼠之间的差异。 在最终失败事件后的48 h，仅有弹性小鼠的mPFC中CCKB mRNA水平降低（F(2,18) = 8.084， p <0.01； Bonferroni后期测试， t = 3.104， p <0.05与对照组相比； t = 5.113， p <0.01 vs易感者）（图。 2A）。 在易感或有弹性的小鼠中CCK mRNA水平没有观察到差异（数据未显示）。 我们观察到Δ的增加FOSB 仅在易感小鼠中的mRNA水平与上文报道的蛋白质数据一致（F(2,18) = 5.246， p <0.01； Bonferroni后期测试 t = 3.336， p <0.05与易感性； t test t(12) = 2.138， p <0.05与对照相比）（图。 2B）。 因为ΔFosB调节许多基因的转录（; ），我们考虑了它可能调节CCKB mRNA表达的可能性。 为了解决这个问题，我们首先在PrL中过度表达ΔFosB，发现这种操作上调了该区域的CCKB mRNA水平（t(12) = 2.012， p <GFP，<0.05）（图。 2C）。 有趣的是，我们也发现了减少 c-fos ΔFosB过表达后的mRNA水平（t(11) = 3.382， p <0.01）（图。 2C）。 Ť这些发现进一步表明易感小鼠的PrL中ΔFosB诱导是通过阻止弹性小鼠中观察到的CCKB抑制的易感性的活跃机制。

为了进一步加强这些观察，我们过度表达ΔJunD，一种缺乏其反式激活结构域的ΔFosB结合配偶体，从而起到显性负性拮抗剂的作用，并确定其对应激诱导的CCKB表达的影响。 我们证实慢性社交失败压力会增加易感小鼠PrL中的CCKB蛋白水平（t test t(12) = 2.289， p <0.05与对照相比）（图。 2D,E）。 此外，这种诱导在该区域被ΔJunD过表达完全阻断（F(2,20) = 6.306， p <0.01，Bonferroni后测 t = 3.615, p <0.01）（图。 2D,E），支持ΔFosB介导应激诱导的CCKB表达的假设。 此外，通过局部ΔJunD表达阻断PrL中的ΔFosB活性，也促进了抵抗压力的恢复能力（t test t(16) = 2.114， p = 0.05与对照）（图。 2F）。 弹性小鼠中CCKB下调的机制仍有待阐明。

CCKB在弹性和压力易感性中的作用

为了直接测试CCKB调节在PrL中介导易感性与弹性的作用，我们将选择性CCKB受体拮抗剂CI-988（10 ng）直接注入易感小鼠的脑区。 CI-988有效拮抗CCKB受体 体内 因为它对CCKB受体亚型具有纳摩尔亲和力和高选择性（）。 阻止CCKB活动大大增加了社交互动（图。 2G）（互动， F(1,20) = 7.795， p <0.05； 药品 F(1,20) = 5.38， p <0.05，Bonferroni后测 t = 3.615, p <0.01）。 CI-988输注还可逆转易感小鼠中观察到的蔗糖偏爱缺陷（t(8) = 2.681， p <0.05）（图。 2H）。 两种行为结果均表明阻断PrL中的CCK作用会产生强效的抗抑郁样作用。 有趣的是，当腹膜内给药时，CI-988在逆转社会回避方面无效（数据未显示）。

为了测试相反的情况，PrL中CCKB的激活可以介导社会回避并减少慢性社交失败压力引起的蔗糖偏好，我们检测了局部输注CCK-8（10 ng）的影响，CCK-XNUMX是脑中CCK的主要形式。 ，关于抑郁和焦虑相关的行为。 根据文献中的先前结果选择药物剂量（; ; ）。 在行为测试之前将小鼠暴露于次最大社交失败压力24 h（图。 3A）。 CCK-8在测试前注入30分钟，足以在社交互动测试中引起社交回避，并且在高架十字迷宫中开放臂中花费的时间减少（SI：BLA，相互作用， F(1,22) = 0.79， p > 0.05； 药物的主要作用 F(1,22) = 11.75， p <0.05； Bonferroni后期测试 t = 2.957, p <0.05； NAc：互动， F(1,26) = 6.688， p <0.05，Bonferroni后测 t = 2.816, p <0.05； EPM：BLA，互动， F(1,22) = 8.0， p <0.01； Bonferroni后期测试 t = 2.509, p <0.05药物作用； t = 2.528， p <0.05病毒作用； NAc， t test t(17) = 1.961; p eYFP组内<0.05的药物作用）（图。 3是， 剩下）。 蔗糖偏好没有观察到差异（图。 3F,G， 剩下）。 最后，在这些测定中，CCK-8输注对幼稚非败血小鼠的行为（社交互动和高架十字迷宫）没有影响（数据未显示）。 Ť这些结果表明，与弹性小鼠相比，ΔFosB介导的易感小鼠PrL中CCKB活性的增加导致这些动物表现出的一些应激诱导的行为缺陷。

通过激活BLA与NAc的皮质投射阻断CCK诱导的应激易感性

减少的mPFC神经活动与小鼠的抑郁样行为相关，光敏性小鼠的mPFC神经元的光遗传刺激产生抗抑郁样作用（）。 因此，我们假设CCK可能通过抑制神经元活动从而在PrL中起作用，从而引起类似抑郁症的行为。 与此假设一致，我们观察到了减少 c-fos PrL中的mRNA水平响应于CCK注入该脑区域（t(13) = 2.235， p <0.05）（图。 3H).

我们接下来假设mPFC的光遗传学刺激通过反对CCK对神经元活动的影响来发挥其抗抑郁作用。 在测试这一假设时，我们研究了调节CCK的致焦虑和抑制样作用的皮质下结构。 mPFC的锥体神经元大量投射到NAc和BLA，两个边缘结构涉及对压力的行为反应。 已显示两个大脑区域的活动改变在焦虑和抑郁样行为的表达中起重要作用（; ）。 因此，我们测试了从PrL到NAc或BLA的谷氨酸能突起的刺激是否会抵抗CCK微量输注对PrL的有害影响（图。 3A）。 我们将AAV-CaMKII-ChR2-EYFP或AAV-CaMKII-EYFP作为对照注射到PrL中。 已知CaMKII启动子将病毒表达靶向皮质区域中的谷氨酸能锥体神经元。 然后我们允许足够的时间（6周）将转基因转运到NAc和BLA中这些锥体神经元的神经末梢（图。 3I）。 小鼠接受了次最大的社交失败; 24 h后来，我们将CCK-8注入PrL，之后的30分钟，在NAc或BLA中谷氨酸能终端的光遗传学刺激期间测量了社交相互作用。 在社交互动测试之后，立即在高架十字迷宫中评估小鼠以评估焦虑相关行为，然后评估蔗糖偏好以评估快感缺失。

PrL谷氨酸能突变对NAc的光遗传学刺激完全逆转了PrL CCK-8诱导的社会回避（相互作用， F(1,26) = 6.688， p <0.05，ChR2组无药物作用）（图。 3C）。 相反，这种PrL对NAc刺激对高架十字迷宫测量的焦虑样行为没有影响（图。 3E）; 然而，与未受刺激的小鼠相比，这种刺激增加了蔗糖的喜好（相互作用， F(1,20) = 5.77， p <0.05； Bonferroni后期测试 t = 2.998, p 在CCK-0.05处理的动物中，<8刺激效果）（图。 3G).

通过对BLA的PrL谷氨酸能突起的光遗传学刺激，观察到非常不同的行为模式。 这种刺激并不能阻止PrL CCK-8输注引起的社会回避（相互作用， F(1,22) = 0.79， p > 0.05； 药物的主要作用 F(1,22) = 11.75， p <0.05； 在刺激组中没有作用， t test t(12) = 2.054， p <0.05）（图。 3B）。 然而，BLA传入的刺激产生了抗焦虑样作用，如在高架十字迷宫的开放臂中花费的时间增加所表明的那样（相互作用， F(1,22) = 8.0， p <0.01； Bonferroni后期测试 t = 2.528， p 在CCK-0.05治疗组中，病毒效应<8图。 3D）。 对BLA的谷氨酸能刺激的刺激对蔗糖偏好没有显着影响（相互作用， F(1,22) = 2.08， p > 0.05）（图。 3F).

讨论

本研究的结果提供了在PrL中发生的分子适应性的证据，其成为社会压力易感性的基础。 我们在慢性社交失败应激后显示该mPFC亚区中ΔFosB的诱导，其中ΔFosB过表达促进应激易感性。 我们将CCKB受体鉴定为PrL中由ΔFosB调节的一个靶基因，显然在易感小鼠中诱导CCKB蛋白并且防止在弹性小鼠中选择性地发生CCKB表达的下调。 我们进一步表明，向PrL输注CCK激动剂可促进抑制和焦虑样行为异常，以应对社会压力，而在易感小鼠的这个区域阻断CCKB受体活性可阻止这些效应。 接下来，我们使用光遗传学工具来识别参与PrK中CCK的proanxiety-vs pro -pression-like行为的微电路。 虽然cortico-NAc谷氨酸能预测介导通过社会回避和降低蔗糖偏好证明的奖赏缺陷，但该微电路不影响CCK注入PrL的致焦虑作用。 相反，对BLA的皮质投射介导焦虑相关行为的表现，但对社会压力引起的社会回避或蔗糖偏好缺乏没有影响。 总之，这些数据表明慢性社交失败压力后PrL功能的改变通过特定的皮质下预测介导了许多行为缺陷。

ΔFosB：映射边缘应力网络和mPFC中的作用

ΔFosB免疫组织化学以单细胞分辨率识别受慢性应激影响的神经元，并已用于绘制应激调节的神经元电路（; ; ）。 我们使用这种方法来证明慢性社交失败压力在几个大脑区域诱导ΔFosB，在弹性和易感组之间具有不同的模式，一些区域仅在有弹性的小鼠中表现出诱导，另一些区域仅在易感小鼠中表现，而在另外两种情况下仍有其他区域（表1). 以前的工作表明，NAc或腹侧PAG中的ΔFosB诱导促进了对慢性应激的恢复，并有助于抗抑郁反应 (; ).

在易感小鼠的PrL中诱导ΔFosB，再加上先前的发现，该区域的光遗传学刺激发挥抗抑郁作用 (), 促使我们研究ΔFosB在这个皮层区域的影响。 与NAc和腹侧PAG的发现相反，我们发现PrL中的ΔFosB促进对慢性社交失败压力的易感性，并且在强迫游泳测试中产生类似抑制的效应，而不影响焦虑样行为或蔗糖偏好。 与PrL相反，我们发现在附近的IL中没有ΔFosB过表达的影响。 最近的一项研究发现，弹性小鼠的IL中ΔFosB水平升高，并暗示该亚区域对社会压力具有恢复能力（）。 因此需要进一步研究以解决这两个mPFC子区域的不同作用，这些区域已被证明在其他行为领域产生相反的影响（; ; ）。 我们以前曾报道，抑郁的人在死后检查的NAc中显示较低水平的ΔFosB（），w此外，在抑郁的人的背外侧PFC（Brodmann area 46）中显示出更高水平的ΔFosB (). 在后一研究中未检查其他皮质区域。 无论如何，这些发现共同支持人类抑郁症中ΔFosB表达的区域特异性异常，其中转录因子对应激易感性产生非常不同的影响。 在未来的研究中，检测ΔFosB在其诱导的许多其他大脑区域中的影响将是有趣的（表1关于压力反应。

PrL中ΔFosB诱导可能导致抑郁样行为的一种机制是通过抑制PrL活性。 ΔFosB已被证明可抑制AMPA谷氨酸反应， 和 c-fos 表达，在NAc中型多刺神经元中（; ; ）。 同样，我们发现减少了 c-fos 在PrL中ΔFosB过表达后的表达。 因此，PrL中的ΔFosB诱导可能是慢性社交失败压力后该区域神经元活动减少的原因。 PrL相对于其皮质下目标（例如BLA和NAc）的这种降低的音调预期会增强恐惧表达并且无法消除对压力的情绪反应（, ）。 此外，mPFC病变诱导致敏应激反应和恐惧消退的缺陷（; ; ; ），表明应力诱导的mPFC损伤，部分通过ΔFosB诱导介导，可能导致抑郁症和其他压力相关疾病（).

CCK在压力脆弱性中的作用

我们提供证据表明CCKB受体是ΔFosB的靶标，使得易感小鼠的PrL中ΔFosB诱导仅是ΔFosB在该区域中发挥其类似抑制样作用的一种机制。 尽管CCK在mPFC电路中的具体作用仍不清楚，但在啮齿动物中CCK局限于GABAergic中间神经元（）。 它被认为通过增强局部GABA释放并直接作用于锥体神经元表达的CCKB受体来抑制皮质锥体神经元的活动（; ; ; ）。 因此，CCKergic神经传递可能有助于减少上述PrL活性。

CCK是一种焦虑剂，在健康志愿者中全身给予CCKB激动剂诱导惊恐发作。 接触惊恐发作的患者在接触CCK后变得过敏（; ）。 多项研究已证实CCK对啮齿类动物有致焦虑作用（）。 在大鼠失败压力期间，mKFC中CCK的释放与焦虑相关的行为有关（）; PrL和IL亚区在本研究中未区分。 最近，用CI-988对CCKB进行全身性，慢性阻断，对大鼠产生抗抑郁样作用（）。 CI-988在强迫游泳测试中标准化不动时间。 它还可以预防下丘脑 - 垂体 - 肾上腺轴过度活跃，海马体积减少和细胞增殖减少，以及通常由社交失败引起的蔗糖偏好减少。 在这里，我们通过显示CI-988注入易感小鼠的PrL的抗抑郁样作用来证实这些结果，尽管单次全身注射不能模拟这种效应。

除了CCL在PrL中的急性作用外，我们还发现弹性小鼠中CCKB mRNA的水平降低，这可能是弹性背后的分子适应性。 实际上，CCKergic音调的改变，特别是CCKB水平，构成焦虑表达的重要机制。 在前脑中过表达CCKB的转基因小鼠表现出更高的焦虑和恐惧反应（）。 我们在有弹性和易感小鼠之间CCKB水平改变的发现可能有助于焦虑和抑郁样行为的表型差异。 在这里，我们证明了PrL作为社会压力下CCK的促焦虑和促抑郁作用的关键解剖学基质。 不过，CCK的行为活动还涉及其他几个大脑区域，包括BLA，海马，NAc和PAG（; ; ; ; ）。 此外，我们发现敏感动物的mPFC中CCKB蛋白水平增加，但mRNA水平没有增加。 这些发现强调，尽管mRNA水平通常与蛋白质水平相关，但情况并非如此（).

我们的光遗传学实验表明，增加从PrL到NAc或BLA的谷氨酸能突起的活性可拮抗CCL在PrL中的作用。 需要进一步研究以确定光遗传学刺激的这种作用是由CCK控制的相同PrL神经元介导的。 有趣的是，我们的数据揭示了这两个微电路在调解行为异常的不同领域中的不同作用。 cortico-NAc投影控制了快感和奖励; 它调节社会回避的事实证实，这种症状更多地反映了社会行为的动机和回报减少而不是社交焦虑的增加。 这一结论与苯二氮卓类药物无法纠正这种异常是一致的（），以及最近的证据表明，mPFC刺激NAc会增加滥用药物的奖励和动机（）。 相比之下，cortico-BLA预测可控制与焦虑相关的症状，与啮齿动物和人类的大量文献一致（见上文）。

总之， 本研究的结果确定了涉及敏感和有弹性动物的边缘大脑区域的模式，并证明了促进易感性的PrL的改变。 这些改变包括诱导ΔFosB及其诱导CCKB受体。 相反，阻断PrL中CCK作用可促进抗抑郁和抗焦虑作用。 我们还建立了这些皮质锥体神经元的皮质下靶点，这些神经元介导这些行为，皮质NAc电路对抑郁相关行为至关重要，而cortico-BLA电路对于焦虑相关行为至关重要。 尽管在1990s中抑郁患者中CCKB拮抗剂的临床研究未产生有希望的结果，但本发现表明重新审视这些药物在暴露于高水平应激的患者亚组中的治疗潜力的价值。

脚注

 

这项工作得到了美国国家心理健康研究所（EJN）和脑与行为研究基金会国家精神分裂症和抑郁症研究联盟的支持，该研究获得了VV青年研究奖

 

 

作者声明没有竞争性的经济利益。

 

参考资料

  • Akirav I，Maroun M.内侧前额皮质 - 杏仁核循环在应激影响恐惧消退中的作用。 神经塑料。 2007; 2007：30873。 doi：10.1155 / 2007 / 30873。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Barbas H，Blatt GJ。 地形特定的海马突出物靶向恒河猴的功能上不同的前额叶区域。 海马。 1995; 5：511-533。 doi：10.1002 / hipo.450050604。 [考研[Cross Ref]
  • Becker C，ThièbotMH，Touitou Y，Hamon M，Cesselin F，Benoliel JJ。 在预测大鼠社交失败的模型中增强皮质细胞外水平的胆囊收缩素样物质。 J Neurosci。 2001; 21：262-269。 [考研]
  • Becker C，Zeau B，Rivat C，Blugeot A，Hamon M，Benoliel JJ。 在大鼠中反复的社交失败诱导的抑郁样行为和生物学改变：胆囊收缩素的参与。 Mol精神病学。 2008; 13：1079-1092。 doi：10.1038 / sj.mp.4002097。 [考研[Cross Ref]
  • Belcheva I，Belcheva S，Petkov VV，Petkov VD。 对胆囊收缩素的行为反应的不对称性显微注射到伏隔核和杏仁核中。 神经药理学。 1994; 33：995-1002。 doi：10.1016 / 0028-3908（94）90158-9。 [考研[Cross Ref]
  • Benoliel JJ，Bourgoin S，Mauborgne A，Pohl M，Legrand JC，Hamon M，Cesselin F. GABA，作用于GABAA和GABAB受体，在体外抑制大鼠脊髓中胆囊收缩素样物质的释放。 Brain Res。 1992; 590：255-262。 doi：10.1016 / 0006-8993（92）91103-L。 [考研[Cross Ref]
  • Berton O，McClung CA，Dileone RJ，Krishnan V，Renthal W，Russo SJ，Graham D，Tsankova NM，Bolanos CA，Rios M，Monteggia LM，Self DW，Nestler EJ。 BDNF在社交失败压力下中脑边缘多巴胺通路中的重要作用。 科学。 2006; 311：864-868。 doi：10.1126 / science.1120972。 [考研[Cross Ref]
  • Berton O，Covington HE，3rd，Ebner K，Tsankova NM，Carle TL，Ulery P，Bhonsle A，Barrot M，Krishnan V，Singewald GM，Singewald N，Birnbaum S，Neve RL，Nestler EJ。 通过应激诱导导水管周围灰质中的δFosB促进了活跃的应对反应。 神经元。 2007; 55：289-300。 doi：10.1016 / j.neuron.2007.06.033。 [考研[Cross Ref]
  • Bewernick BH，Hurlemann R，Matusch A，Kayser S，Grubert C，Hadrysiewicz B，Axmacher N，Lemke M，Cooper-Mahkorn D，Cohen MX，Brockmann H，Lenartz D，Sturm V，Schlaepfer TE。 伏隔核深部脑刺激降低了治疗抵抗性抑郁症中抑郁和焦虑的评分。 生物精神病学。 2010; 67：110-116。 doi：10.1016 / j.biopsych.2009.09.013。 [考研[Cross Ref]
  • Bradwejn J，Koszycki D，Shriqui C.在惊恐障碍中对胆囊收缩素四肽的敏感性增强：临床和行为发现。 Arch Gen Psychiatry。 1991; 48：603-610。 doi：10.1001 / archpsyc.1991.01810310021005。 [考研[Cross Ref]
  • Bremner JD。 压力会损害大脑吗？ 生物精神病学。 1999; 45：797-805。 doi：10.1016 / S0006-3223（99）00009-8。 [考研[Cross Ref]
  • Bremner JD。 创伤性压力：对大脑的影响。 对话Clin Neurosci。 2006; 8：445-461。 [PMC免费文章[考研]
  • Bremner JD。 创伤后应激障碍和其他压力相关疾病的神经影像学。 Neuroimaging Clin North Am。 2007; 17：523-538。 doi：10.1016 / j.nic.2007.07.003。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Britt JP，Benaliouad F，McDevitt RA，Stuber GD，Wise RA，Bonci A.突触和伏隔核多种谷氨酸能输入的行为特征。 神经元。 2012; 76：790-803。 doi：10.1016 / j.neuron.2012.09.040。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Burgos-Robles A，Bravo-Rivera H，Quirk GJ。 前肢神经元和下边缘神经元表示食欲乐器行为的不同方面。 PLoS One。 2013; 8：e57575。 doi：10.1371 / journal.pone.0057575。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Chen Q，Nakajima A，Meacham C，Tang YP。 升高的胆囊收缩素张力构成了小鼠焦虑症表达的重要分子/神经元机制。 Proc Natl Acad Sci US A. 2006; 103：3881-3886。 doi：10.1073 / pnas.0505407103。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Choi DC，Gourley SL，Ressler KJ。 前肢BDNF和TrkB信号传导调节食欲和厌恶情绪学习的整合。 Transl Psychiatry。 2012; 2：e205。 doi：10.1038 / tp.2012.128。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Christoffel DJ，Golden SA，Dumitriu D，Robison AJ，Janssen WG，Ahn HF，Krishnan V，Reyes CM，Han MH，Ables JL，Eisch AJ，Dietz DM，Ferguson D，Neve RL，Greengard P，Kim Y，Morrison JH ，Russo SJ。 IκB激酶调节社交失败压力诱导的突触和行为可塑性。 J Neurosci。 2011; 31：314-321。 doi：10.1523 / JNEUROSCI.4763-10.2011。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Covington HE，3rd，Kikusui T，Goodhue J，Nikulina EM，Hammer RP，Jr，Miczek KA。 简短的社交失败压力：在暴食期间对可卡因的持续影响以及杏仁核和前额皮质中的zif268 mRNA表达。 神经精神药理学。 2005; 30：310-321。 doi：10.1038 / sj.npp.1300587。 [考研[Cross Ref]
  • Covington HE，3rd，Lobo MK，Maze I，Vialou V，Hyman JM，Zaman S，LaPlant Q，Mouzon E，Ghose S，Tamminga CA，Neve RL，Deisseroth K，Nestler EJ。 内侧前额叶皮质的光遗传刺激的抗抑郁作用。 J Neurosci。 2010; 30：16082-16090。 doi：10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Covington HE，3rd，Maze I，Sun H，Bomze HM，DeMaio KD，Wu EY，Dietz DM，Lobo MK，Ghose S，Mouzon E，Neve RL，Tamminga CA，Nestler EJ。 压抑组蛋白甲基化在可卡因诱导的压力易感性中的作用。 神经元。 2011; 71：656-670。 doi：10.1016 / j.neuron.2011.06.007。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • de Montigny C. Cholecystokinin tetrapeptide在健康志愿者中诱发惊恐样攻击：初步调查结果。 Arch Gen Psychiatry。 1989; 46：511-517。 doi：10.1001 / archpsyc.1989.01810060031006。 [考研[Cross Ref]
  • De Witte P，Heidbreder C，Roques B，Vanderhaeghen JJ。 八肽胆囊收缩素（CCK-8）和四肽（CCK-4）注射到伏隔核的尾部或其头部和脑室后的相反作用。 Neurochem Int。 1987; 10：473-479。 doi：10.1016 / 0197-0186（87）90074-X。 [考研[Cross Ref]
  • Diorio D，Viau V，Meaney MJ。 内侧前额叶皮层（扣带回）在调节下丘脑 - 垂体 - 肾上腺对应激的反应中的作用。 J Neurosci。 1993; 13：3839-3847。 [考研]
  • Drevets WC。 抑郁症的神经影像学和神经病理学研究：对情绪障碍的认知 - 情绪特征的影响。 Curr Opin Neurobiol。 2001; 11：240-249。 doi：10.1016 / S0959-4388（00）00203-8。 [考研[Cross Ref]
  • Fales CL，Barch DM，Rundle MM，Mintun MA，Snyder AZ，Cohen JD，Mathews J，Sheline YI。 在主要抑郁症的情感和认知控制脑电路中改变情绪干扰处理。 生物精神病学。 2008; 63：377-384。 doi：10.1016 / j.biopsych.2007.06.012。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Fales CL，Barch DM，Rundle MM，Mintun MA，Mathews J，Snyder AZ，Sheline YI。 在抑郁症的情绪干扰处理期间，抗抑郁治疗使背外侧前额叶皮层的活动减退正常化。 J影响紊乱。 2009; 112：206-211。 doi：10.1016 / j.jad.2008.04.027。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Feder A，Nestler EJ，Charney DS。 心理生物学和弹性的分子遗传学。 Nat Rev Neurosci。 2009; 10：446-457。 doi：10.1038 / nrn2649。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Gallopin T，Geoffroy H，Rossier J，Lambolez B. CRF，NKB和CCK的皮层来源及其对新皮层锥体细胞的影响。 Cereb Cortex。 2006; 16：1440-1452。 doi：10.1093 / cercor / bhj081。 [考研[Cross Ref]
  • Grubert C，Hurlemann R，Bewernick BH，Kayser S，Hadrysiewicz B，Axmacher N，Sturm V，Schlaepfer TE。 伏隔核的神经心理安全性对重度抑郁症的深部脑刺激：12月刺激的影响。 世界J Biol精神病学。 2011; 12：516-527。 doi：10.3109 / 15622975.2011.583940。 [考研[Cross Ref]
  • Grueter BA，Robison AJ，Neve RL，Nestler EJ，Malenka RC。 ΔFosB差异调节伏隔核的直接和间接途径功能。 Proc Natl Acad Sci US A. 2013; 110：1923-1928。 doi：10.1073 / pnas.1221742110。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Gygi SP，Rochon Y，Franza BR，Aebersold R.酵母中蛋白质和mRNA丰度之间的相关性。 Mol Cell Biol。 1999; 19：1720-1730。 [PMC免费文章[考研]
  • Heidbreder CA，Groenewegen HJ。 大鼠内侧前额叶皮质：基于功能和解剖学特征的背腹区分的证据。 Neurosci Biobehav Rev. 2003; 27：555-579。 doi：10.1016 / j.neubiorev.2003.09.003。 [考研[Cross Ref]
  • Holson RR。 大鼠的中前额皮质损伤和胆怯：I。对厌恶刺激的反应性。 生理行为。 1986; 37：221-230。 doi：10.1016 / 0031-9384（86）90224-6。 [考研[Cross Ref]
  • Keedwell PA，Andrew C，Williams SC，Brammer MJ，Phillips ML。 重度抑郁症中的快感缺失的神经相关性。 生物精神病学。 2005; 58：843-853。 doi：10.1016 / j.biopsych.2005.05.019。 [考研[Cross Ref]
  • 肯尼迪SH，Giacobbe P.治疗抵抗性抑郁症：躯体疗法的进步。 安克林精神病学。 2007; 19：279-287。 doi：10.1080 / 10401230701675222。 [考研[Cross Ref]
  • Kennedy SH，Evans KR，KrügerS，Mayberg HS，Meyer JH，McCann S，Arifuzzman AI，Houle S，Vaccarino FJ。 帕罗西汀治疗抑郁症后正电子发射断层扫描测量局部脑葡萄糖代谢的变化。 Am J Psychiatry。 2001; 158：899-905。 doi：10.1176 / appi.ajp.158.6.899。 [考研[Cross Ref]
  • Krishnan V，Han MH，Graham DL，Berton O，Renthal W，Russo SJ，Laplant Q，Graham A，Lutter M，Lagace DC，Ghose S，Reister R，Tannous P，Green TA，Neve RL，Chakravarty S，Kumar A ，Eisch AJ，Self DW，Lee FS，et al。 分子适应在大脑奖励区域的敏感性和对社会失败的抵抗。 细胞。 2007; 131：391-404。 doi：10.1016 / j.cell.2007.09.018。 [考研[Cross Ref]
  • Krishnan V，Nestler EJ。 抑郁症的分子神经生物学。 性质。 2008; 455：894-902。 doi：10.1038 / nature07455。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Lehmann ML，Herkenham M.环境富集通过下肢皮质依赖性神经解剖学途径赋予社会失败压力恢复能力。 J Neurosci。 2011; 31：6159-6173。 doi：10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Leistedt SJ，Linkowski P. Brain，网络，抑郁症等等。 Eur Neuropsychopharmacol。 2013; 23：55-62。 doi：10.1016 / j.euroneuro.2012.10.011。 [考研[Cross Ref]
  • Mayberg HS，Lozano AM，Voon V，McNeely HE，Seminowicz D，Hamani C，Schwalb JM，Kennedy SH。 深层脑刺激治疗抵抗性抑郁症。 神经元。 2005; 45：651-660。 doi：10.1016 / j.neuron.2005.02.014。 [考研[Cross Ref]
  • Maze I，Covington HE，3rd，Dietz DM，LaPlant Q，Renthal W，Russo SJ，Mechanic M，Mouzon E，Neve RL，Haggarty SJ，Ren Y，Sampath SC，Hurd YL，Greengard P，Tarakhovsky A，Schaefer A， Nestler EJ。 组蛋白甲基转移酶G9a在可卡因诱导的可塑性中的重要作用。 科学。 2010; 327：213-216。 doi：10.1126 / science.1179438。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • McClung CA，Nestler EJ。 CREB和DeltaFosB对基因表达和可卡因奖励的调节。 Nat Neurosci。 2003; 6：1208-1215。 doi：10.1038 / nn1143。 [考研[Cross Ref]
  • Milad MR，Quirk GJ。 内侧前额叶皮层的神经元信号记忆恐惧消退。 性质。 2002; 420：70-74。 doi：10.1038 / nature01138。 [考研[Cross Ref]
  • Nahas Z，Anderson BS，Borckardt J，Arana AB，George MS，Reeves ST，Takacs I.双侧硬膜外前额皮质刺激治疗抵抗性抑郁症。 生物精神病学。 2010; 67：101-109。 doi：10.1016 / j.biopsych.2009.08.021。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Nikulina EM，Arrillaga-Romany I，Miczek KA，Hammer RP。，Jr大鼠反复社交失败应激后中脑皮质结构的长期改变：μ-阿片受体mRNA和FosB / DeltaFosB免疫反应性的时间过程。 Eur J Neurosci。 2008; 27：2272-2284。 doi：10.1111 / j.1460-9568.2008.06176.x。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Noble F，Roques BP。 CCK-B受体：化学，分子生物学，生物化学和药理学。 Prog Neurobiol。 1999; 58：349-379。 doi：10.1016 / S0301-0082（98）00090-2。 [考研[Cross Ref]
  • Noble F，Wank SA，Crawley JN，Bradwejn J，Seroogy KB，Hamon M，Roques BP。 国际药理学联合会：XXI。 胆囊收缩素受体的结构，分布和功能。 Pharmacol Rev. 1999; 51：745-781。 [考研]
  • Pérezdela Mora M，Hernandez-GómezAM，Méndez-Franco J，Fuxe K. Cholecystokinin-8增加K（+） - 诱发[3H]γ-氨基丁酸在来自不同脑区域的切片中释放。 Eur J Pharmacol。 1993; 250：423-430。 doi：10.1016 / 0014-2999（93）90029-H。 [考研[Cross Ref]
  • Perrotti LI，Hadeishi Y，Ulery PG，Barrot M，Monteggia L，Duman RS，Nestler EJ。 慢性应激后奖赏相关脑结构中δFosB的诱导。 J Neurosci。 2004; 24：10594-10602。 doi：10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004。 [考研[Cross Ref]
  • Perrotti LI，Weaver RR，Robison B，Renthal W，Maze I，Yazdani S，Elmore RG，Knapp DJ，Selley DE，Martin BR，Sim-Selley L，Bachtell RK，Self DW，Nestler EJ。 由滥用药物引起的大脑中DeltaFosB诱导的不同模式。 突触。 2008; 62：358-369。 doi：10.1002 / syn.20500。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Radley JJ，Rocher AB，Miller M，Janssen WG，Liston C，Hof PR，McEwen BS，Morrison JH。 重复应激诱导大鼠内侧前额叶皮质中的树突棘损失。 Cereb Cortex。 2006; 16：313-320。 doi：10.1093 / cercor / bhi104。 [考研[Cross Ref]
  • Renthal W，Carle TL，Maze I，Covington HE，3rd，Truong HT，Alibhai I，Kumar A，Montgomery RL，Olson EN，Nestler EJ。 Delta FosB介导慢性安非他明暴露后c-fos基因的表观遗传脱敏。 J Neurosci。 2008; 28：7344-7349。 doi：10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Rezayat M，Roohbakhsh A，Zarrindast MR，Massoudi R，Djahanguiri B. Cholecystokinin和GABA在大鼠背侧海马中的相互作用，在焦虑的高架十字迷宫测试中。 生理行为。 2005; 84：775-782。 doi：10.1016 / j.physbeh.2005.03.002。 [考研[Cross Ref]
  • Richard JM，Berridge KC。 前额皮质调节由伏隔核谷氨酸破坏产生的欲望和恐惧。 生物精神病学。 2013; 73：360-370。 doi：10.1016 / j.biopsych.2012.08.009。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Rotzinger S，Vaccarino FJ。 胆囊收缩素受体亚型：在动物模型中调节焦虑相关和奖赏相关行为中的作用。 J精​​神病学神经科学。 2003; 28：171-181。 [PMC免费文章[考研]
  • Schlaepfer TE，Cohen MX，Frick C，Kosel M，Brodesser D，Axmacher N，Joe AY，Kreft M，Lenartz D，Sturm V.对奖励回路的深度脑刺激减轻难治性重度抑郁症中的快感缺失。 神经精神药理学。 2008; 33：368-377。 doi：10.1038 / sj.npp.1301408。 [考研[Cross Ref]
  • Sierra-Mercado D，Padilla-Coreano N，Quirk GJ。 前肢和下边缘皮质，腹侧海马和基底侧杏仁核在条件性恐惧的表达和消退中的可分离作用。 神经精神药理学。 2011; 36：529-538。 doi：10.1038 / npp.2010.184。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Silva MG，Boyle MA，Finger S，Numan B，Bouzrara AA，Almli CR。 大鼠内侧额叶皮层大小病变的行为影响。 Exp Brain Res。 1986; 65：176-181。 [考研]
  • Somogyi P，Hodgson AJ，Smith AD，Nunzi MG，Gorio A，Wu JY。 猫的视觉皮层和海马中不同的GABA能神经元群包含生长抑素或胆囊收缩素免疫反应物质。 J Neurosci。 1984; 4：2590-2603。 [考研]
  • Surget A，Tanti A，Leonardo ED，Laugeray A，Rainer Q，Touma C，Palme R，Griebel G，Ibarguen-Vargas Y，Hen R，Belzung C.抗抑郁药招募新神经元以改善压力反应调节。 Mol精神病学。 2011; 16：1177-1188。 doi：10.1038 / mp.2011.48。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Taniguchi H，He M，Wu P，Kim S，Paik R，Sugino K，Kvitsiani D，Fu Y，Lu J，Lin Y，Miyoshi G，Shima Y，Fishell G，Nelson SB，Huang ZJ。 用于大脑皮质中GABA能神经元遗传靶向的Cre驱动系的资源。 神经元。 2011; 71：995-1013。 doi：10.1016 / j.neuron.2011.07.026。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Teyssier JR，Ragot S，Chauvet-GélinierJC，Trojak B，Bonin B.在重度抑郁症患者的背外侧前额叶皮质中激活DeltaFOSB依赖性基因表达模式。 J影响紊乱。 2011; 133：174-178。 doi：10.1016 / j.jad.2011.04.021。 [考研[Cross Ref]
  • Tsankova NM，Berton O，Renthal W，Kumar A，Neve RL，Nestler EJ。 在抑郁和抗抑郁作用的小鼠模型中持续海马染色质调节。 Nat Neurosci。 2006; 9：519-525。 doi：10.1038 / nn1659。 [考研[Cross Ref]
  • Tye KM，Prakash R，Kim SY，Fenno LE，Grosenick L，Zarabi H，Thompson KR，Gradinaru V，Ramakrishnan C，Deisseroth K. Amygdala电路调解焦虑的可逆和双向控制。 性质。 2011; 471：358-362。 doi：10.1038 / nature09820。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Vialou V，Robison AJ，Laplant QC，Covington HE，3rd，Dietz DM，Ohnishi YN，Mouzon E，Rush AJ，3rd，Watts EL，Wallace DL，IñiguezSD，Ohnishi YH，Steiner MA，Warren BL，Krishnan V，Bolaños CA，Neve RL，Ghose S，Berton O，Tamminga CA，et al。 DeltaFosB在大脑奖励回路中介导对压力和抗抑郁反应的恢复力。 Nat Neurosci。 2010; 13：745-752。 doi：10.1038 / nn.2551。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Vogt BA，Finch DM，Olson CR。 扣带皮层的功能异质性：前部执行和后部评估区域。 Cereb Cortex。 1992; 2：435-443。 doi：10.1093 / cercor / 2.6.435-a。 [考研[Cross Ref]
  • Wilkinson MB，Xiao G，Kumar A，LaPlant Q，Renthal W，Sikder D，Kodadek TJ，Nestler EJ。 在抑郁症模型中，丙咪嗪治疗和弹性在小鼠伏隔核中表现出类似的染色质调节。 J Neurosci。 2009; 29：7820-7832。 doi：10.1523 / JNEUROSCI.0932-09.2009。 [PMC免费文章[考研[Cross Ref]
  • Winstanley CA，LaPlant Q，Theobald DE，Green TA，Bachtell RK，Perrotti LI，DiLeone RJ，Russo SJ，Garth WJ，Self DW，Nestler EJ。 眶额皮质中的DeltaFosB诱导介导对可卡因诱导的认知功能障碍的耐受性。 J Neurosci。 2007; 27：10497-10507。 doi：10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007。 [考研[Cross Ref]
  • Yaksh TL，Furui T，Kanawati IS，Go VL。 从体内大鼠大脑皮质中释放胆囊收缩素：GABA和谷氨酸受体系统的作用。 Brain Res。 1987; 406：207-214。 doi：10.1016 / 0006-8993（87）90784-0。 [考研[Cross Ref]
  • Zanoveli JM，Netto CF，GuimarãesFS，Zangrossi H.，Jr全身和背内导管周围灰质注射胆囊收缩素硫酸化八肽（CCK-8s）在接受升高的T-迷宫的大鼠中诱导恐慌样反应。 肽。 2004; 25：1935-1941。 doi：10.1016 / j.peptides.2004.06.016。 [考研[Cross Ref]