当巧克力寻求变得强迫：基因 - 环境相互作用（2015）

  • Enrico Patrono，
  • Matteo Di Segni，
  • Loris Patella，
  • Diego Andolina，
  • 亚历山德罗·瓦尔扎尼亚，
  • Emanuele Claudio Latagliata，
  • 阿曼多·费尔萨尼，
  • Assunta Pompili，
  • Antonella Gasbarri，
  • Stefano Puglisi-Allegra，
  • Rossella Ventur

发布：三月17，2015

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0120191

抽象

背景

饮食失调似乎是由环境因素和遗传因素之间的复杂相互作用引起的，而强烈的饮食是应对不利环境的特征，是许多饮食失调的特征。

材料和方法

我们比较了强化C57BL / 6J和DBA / 2J小鼠（两种充分表征的近交系小鼠）在不利情况下对可口食物寻求的条件抑制形式的强迫性进食，以确定基因 - 环境相互作用对这种行为的影响。表型。 此外，我们测试了这样的假设：低累积D2受体（R）可用性是食物强迫行为的遗传风险因素，并且诱导强迫性进食的环境条件改变了纹状体中的D2R表达。 为此，我们通过蛋白质印迹分别测量纹状体中的D1R和D2R表达以及内侧前额叶皮质中的D1R，D2R和α1R水平。

成果

根据遗传背景，暴露于环境条件会诱发类似强迫的饮食行为。 这种行为模式与累积D2R的可用性降低有关。 此外，暴露于某些环境条件会上调D2R并分别下调强迫性动物的纹状体和内侧前额叶皮质中的α1R。 这些发现证实了基因 - 环境相互作用在强迫性饮食表现中的作用，并支持低累积D2R可用性是强迫性饮食行为的“组成型”遗传风险因素的假设。 最后，分别在纹状体和内侧前额叶皮质中的D2R上调和α1R下调是潜在的神经适应性反应，其平行于从动机到强迫进食的转变。

引文： Patrono E，Di Segni M，Patella L，Andolina D，Valzania A，Latagliata EC，et al。 （2015）当巧克力寻求变得强迫：基因 - 环境相互作用。 PLoS ONE 10（3）：e0120191。 DOI：10.1371 / journal.pone.0120191

学术编辑： Henrik Oster，德国吕贝克大学

收稿日期： 八月7，2014; 公认： 二月4，2015; 出版日期： 2015 年 3 月 17 日

版权： ©2015 Patrono等。 这是一份根据条款分发的开放获取文章 知识共享署名许可，如果原始作者和来源被记入贷方，则允许在任何媒体中不受限制地使用，分发和复制

数据可用性： 所有相关数据均在论文及其支持信息文件中。

资金： 这项工作得到了莱斯里卡大臣大学的支持：Ateneo 2013（C26A13L3PZ）； FIRB 2010（RBFR10RZ0N_001），意大利。

利益争夺： 作者宣称没有竞争利益存在。

介绍

饮食失调是由环境和遗传因素及其复杂的相互作用引起的[1, 2]。 然而，关于人类饮食失调的基因环境研究很少[2和动物研究，检查强迫性食物寻求和摄入的环境和遗传因素[3–6].

压力经历与遗传因素相互作用，并增加成瘾行为的风险，诱导皮质纹状体多巴胺（DA）和去甲肾上腺素（NE）信号的变化，调节动机显着性归因[7–9]。 越来越多的证据表明多巴胺受体具有动机行为[10–14]和D2Rs对强迫驱动行为的倾向，比如成瘾[15–17].

近交系小鼠为研究遗传和环境因素之间的相互作用提供了有价值的模型[18]。 C57Bl6 / J（C57）和DBA2 / J（DBA）小鼠是关于心理生物学的最常研究的近交品系之一，因为它们的特征在于许多行为反应的明显差异。 他们的大脑神经递质系统的功能和解剖学特征，以及对强化和厌恶刺激的行为输出，已在这些菌株中进行了广泛的研究，从而提供了关于不同神经系统对相同环境刺激的反应如何相关的重要信息。遗传背景，导致不同（或相反）的行为输出[19–23]。 特别是，C57和DBA小鼠常用于药物滥用研究，因为它们对酒精，精神运动兴奋剂和阿片类药物等成瘾药物的诱因特性和不同反应的敏感性不同[7, 20, 21, 24–31]。 此外，关于精神病理学内表型[32–34]，D57R相关表型中C2和DBA小鼠之间的差异似乎依赖于基因 - 环境相互作用[35–37].

与C57小鼠相比，DBA小鼠对奖励刺激的反应很差，这是一种由慢性压力经历突显的状态，提高了DBA / 2小鼠的药物反应性[24]。 因此，我们假设慢性应激暴露（热量限制）引起DBA菌株对可口食物的类似动机驱动。 我们研究了在不利条件下对可口食物寻求的条件抑制的强迫性饮食[38]，在C57和DBA小鼠中。 啮齿动物的食物限制通常被认为是一种压力条件，导致大脑奖励系统的敏感性改变和影响归因动机显着性过程[以及其他影响] [8, 24, 39–42]。 此外，据报道，奖励制度的过敏会导致过量摄入高度可口的食物[38, 43, 44通过高度可口的食物反复刺激奖励途径可能导致神经生物学适应，使摄入行为更具强迫性[45]。 在影响某些饮食失调的环境因素中，诱人食物的供应是最明显的[45并且已经证明不同的食物会产生不同程度的强迫行为[45, 46]。 在所有可口的食物中，巧克力已被证明在动物身上具有回报特性[9, 47–49]，这是与人类食物渴望报告最相关的食物。 因此，人类已经提出了巧克力渴望和成瘾[50].

因为热量限制是一种压力的体验[24]，动物被放置在适度的食物限制时间表[38]，因为预先接触可口的食物是饮食失调的重要因素[51]，他们也预先暴露于巧克力。 暴饮暴食与强迫性寻药共享几种神经基质[52, 53]。 基于DA受体在药物和食物相关行为中的作用[17, 51, 54, 55]，我们在mpFC中测量尾状壳核（CP），伏隔核（NAc）和内侧前额叶皮质（mpFC）和α-1肾上腺素能受体（α2Rs）中的D1R和D1R亚型水平，因为强制性食物需要前额叶NE - 寻求[38]和α1Rs介导动机和药物强化作用[56–58].

我们发现，根据遗传背景，暴露于环境条件会诱发类似强迫的饮食行为。 这种行为模式与累积D2R的可用性降低有关。 此外，这种暴露分别在强迫动物的纹状体和内侧前额叶皮质中上调D2R和下调α1R。

这些发现证实了基因 - 环境相互作用在强迫性饮食表达中的作用，并支持低累积D2R可用性是强迫性行为的“组成型”遗传风险因素的假设。 因此，我们建议分别在纹状体和内侧前额叶皮质中的D2R上调和α1R下调是潜在的神经适应性反应，其平行于从动机到强迫进食的转变。

材料和方法

动物

将实验时数周的雄性C57BL / 6JIco和DBA / 2J小鼠（Charles River，Como，Italy），8-9分组饲养并保持在12-h / 12-h光/暗循环（光照如上所述[在7 AM和7 PM之间）9, 38]。 所有实验均按照意大利法（Decreto Legislativo no.116，1992）和11月24的欧洲共同体委员会指令1986（86 / 609 / EEC）进行，以规范动物的研究使用。 本研究的所有实验均经意大利卫生部伦理委员会批准，因此根据意大利有关动物用于研究的法规（立法DL 10 / 2011），根据许可/批准ID＃：116 / 92-B进行）和NIH动物护理指南。 采取了适当措施，以尽量减少动物的疼痛和不适。 对照组仅进行巧克力的“短暂预暴露”（2天）; 在条件抑制程序开始之前，给予应激组对巧克力的“预暴露”，“热量限制”和“短暂预暴露”给巧克力（参见上面的方法学细节）。

所有实验均在光照阶段进行。

条件抑制程序

先前已经描述了用于条件抑制测试的装置[38]。 将有机玻璃杯（直径为3.8 cm）放入每个室中并固定以防止移动：1杯含有1 g牛奶巧克力（Kraft）（巧克力室，CC），另一杯是空的（空安全室） ， 退出）。

简而言之，程序如下：从第1天到第4天（训练阶段），将小鼠（对照，每个菌株的应激组）单独放置在小巷中，打开滑动门以允许它们自由地进入两个室。并探索整个设备的30分钟。 在第5日，将动物暴露于轻足休克配对。 采集条件刺激（CS）（光） - 震动关联是在不同的装置中建立的，包括15×15×20 cm Plexiglas腔室，在2墙壁上具有黑白条纹图案（以区别于10墙壁）条件抑制装置）和不锈钢网格地板，通过它们传递冲击。 光线由栅格底板下的卤素灯（5W，Lexman）产生，该灯在20，100-sec周期每19秒开启; 在每个时期内，在光线开启1秒后，发出0.15-sec 10-mA扰乱的足部电击。 本次轻度休克协会持续10分钟，随后是10-min休息期，之后又进行了另一次相同的10-min轻度休克协会会议; 总体而言，小鼠在30-min期间接受6轻足休克配对。 在8-9天，小鼠不受干扰地放在他们的家笼中。 在第1天，在测试期间（条件抑制测试日）测量巧克力寻求的条件抑制，其中小鼠在2室的10中获得巧克力，其中在训练阶段已经放置了巧克力。 在含有巧克力（CC）的室中，CS（光）根据轻 - 足休克关联的范例呈现（除了20-min休息期，其被消除）。 光线由栅格底板下的卤素灯产生，每隔100秒开启一次20-sec周期。 本次会议持续了10分钟; 总体而言，小鼠在20-min会话中接受20 XNUMX-sec周期。

测试阶段以第一次20-sec爆发光开始。 在整个会议期间记录了在每个2室中花费的时间。 所有实验均在实验性声衰减室中进行，所述实验室通过标准灯（60 W）间接点亮。 对于所有行为测试，使用全自动视频跟踪系统“EthoVision”（Noldus，荷兰）收集和分析数据。 然后由软件处理所获取的数字信号以提取腔室中的“花费的时间”（以秒为单位），其被用作每个对象的设备的每个扇区中的偏好/厌恶分数的原始数据。

在条件抑制实验中使用每组菌株的两组小鼠：对照（对照n = 6）和应激（强调n = 8）。

实验步骤

实验程序如图所示 图。 1.

缩略图

下载地址：

PowerPoint幻灯片

大图（45KB）

原始图像（196KB）

图1。 实验程序时间表。 （看到 方法 详情。）

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0120191.g001

预先暴露于巧克力

将受胁迫组（强调的C57和Stressed DBA）中的动物暴露于巧克力中7天直至18（从第-24天到第-18天， 图。 1在条件抑制程序开始前几天。 每天“随机”分离小鼠4小时; 牛奶巧克力和标准食品交付 随意。 该计划结束后两天（-15， 图。 1），对Stressed组中的小鼠进行热量限制（食物限制，FR）。

热量限制

将小鼠分配到喂养方案：他们要么接受食物 随意 （对照组）或受到食物限制方案（FR，强调组）。 在热量限制条件下，食物每天递送一次（07.00 pm），其量调整为诱导原始体重的15％的损失。 在里面 随意 条件，食物每日一次（07.00 pm），调整量超过每日食用量[38].

将动物置于中度FR时间表[29]对于10天（从-15天到-6天， 图。 1），直到条件抑制程序开始前的6天（1日， 图。 1）。 在训练阶段开始前六天，将动物送回 随意 为了排除饮食不足对条件抑制试验日的任何影响而进食。

简要预先暴露于巧克力

为了防止在未经历上述“暴露前”状态（对照组）的组中对巧克力的任何非特异性新颖反应，对照组和应激组均以相同的时间表暴露于巧克力中2天，2天在条件抑制程序开始之前（“短暂预曝光”）。

巧克力摄入量和动物体重

测量在条件抑制程序（暴露前，训练，试验）的各个阶段期间的巧克力摄入，并记录动物体重。 称重小鼠：实验的第一天（实验程序开始前），训练阶段天和条件抑制试验的当天。

多巴胺能和去甲肾上腺素能受体在对照和应激DBA小鼠中的表达

α1R，D1R和D2R受体在3脑区中的表达[mpFC（α1R，D1R，D2R）; NAc（D1R，D2R）; 通过对照（对照DBA n = 1）和应激动物（应激DBA n = 2）中的蛋白质印迹测量CP和（CPN（D6R，D8R）]，与条件抑制实验中使用的相同组。

幼稚C57和DBA小鼠中的多巴胺能和去甲肾上腺素能受体表达

通过西方测量两种菌株[天真的C1（n = 2）和幼稚的DBA（n = 1）]的幼稚动物，测量mpFC，NAc和CP中的基线D57R和D6R受体以及基线α6R。印迹。 该实验在既不受环境条件（暴露于巧克力，FR）之前的动物中进行，也不进行条件抑制程序（幼稚组），以检验低纹状体D2受体可用性是食物强制的遗传风险因素的假设。类似的行为。

蛋白质印迹

通过断头处死小鼠，并且在条件抑制试验后除去脑，除了幼稚组之外的1 h。 解剖前额叶，累积组织和纹状体组织并保持在液氮中。 据报道，mpFC，NAc和CP的冲击是从冷冻脑切片中获得的[59]（S1图。）并储存在液氮中直至测定当天。 将每种组织样品在4℃下在裂解缓冲液（20 mM Tris（pH 7.4），1 mM EDTA，1 mM EGTA，1％Triton X-100）中用蛋白酶抑制剂混合物（Sigma-Aldrich，St.Louis，MO）匀浆。 ， 美国）。

将组织提取物在12,000 g下以4 g离心30 min。 以与组织提取物相同的方式处理上清液。 最后，除去上清液并在80℃下储存。

通过Bradford测定法（BioRad Laboratories，Hercules，CA，USA）测量蛋白质含量。

在加入样品缓冲液（60 M Tris，30％甘油，30％SDS，0.5 M二硫苏糖醇，30）后，分别使用10 ug，0.6 ug和0.012 ug分析mpFC，NAc和CP。 ％溴酚蓝）并在5℃下沸腾95 min。 通过在10％丙烯酰胺/双丙烯酰胺凝胶上电泳分离蛋白质，并电泳转移至硝酸纤维素膜，然后在1°C-22℃下在Tris缓冲盐水中封闭25 h（在mM：137 NaCl和20 Tris-HCl中） ，pH 7.5），含有0.1％Tween 20（TBS-T）和5％低脂牛奶。

将膜与一抗[兔抗多巴胺D1（免疫学科学）和兔抗多巴胺D2受体（Immunological Sciences），用1％低脂肪稀释的800：5在TBS-T中孵育，或兔抗α1-孵育。肾上腺素能受体（Abcam），在1℃下用400％低脂牛奶稀释1：4过夜。 在TBS-T中充分洗涤后，将膜在室温下孵育1 h（22°C-25℃），其中HRP连接的第二抗体[抗兔IgG 1稀释：8000（免疫学）在TBS-含有5％低脂牛奶的T]并用ECL-R（Amersham）开发。 使用光密度图像软件（imagej 64）对信号进行数字扫描和量化，标准化为微管蛋白。

统计报表

条件抑制实验。

对于条件抑制测试，在训练阶段（包括巧克力（CC）和空安全室（ES-C）中心（CT）和空安全室（ES-C）中花费的时间（秒）进行统计分析（总体）训练的4天数的平均值和条件抑制试验的当天。 使用重复测量ANOVA分析数据，2组间因子（菌株，2水平：C57，DBA;治疗，2水平：对照，应激）和1组内因子（室，3水平：CT，CC） ， 退出）。 使用每组内的重复测量ANOVA比较在CC和ES-C室中花费的平均时间。 在适当时通过单向ANOVA分析组间比较。

巧克力摄入量和重量。

通过双向ANOVA（菌株，4水平：C2，DBA;治疗，57水平：对照，压力）分析训练期间的巧克力摄入（2天的总体平均值）和条件抑制测试日。 通过单向ANOVA（菌株：Stressed C57，Stressed DBA）分析预暴露阶段期间的巧克力摄入。 还在实验的第一天（实验程序之前），训练阶段期间和条件抑制试验当天记录动物体重。 通过双向ANOVA（菌株，2水平：C57，DBA;处理，2水平：对照，压力）分析数据。

多巴胺能和去甲肾上腺素能受体在对照和应激DBA小鼠中的表达。

通过单向ANOVA（治疗，1水平：对照DBA，应激DBA）分析强化DBA与对照DBA中的mpFC，NAc和CP以及D2R，D1R和α2R水平中的D1R和D2R表达。

多巴胺能和去甲肾上腺素能受体在幼稚C57和DBA小鼠中表达。

通过单向ANOVA（菌株，1水平：C2，DBA）分析幼稚C1和DBA动物（幼稚C2，幼稚DBA）中的mpFC，NAc和CP以及D1R，D57R和α57R水平中的D2R和D57R表达。 。

成果

条件抑制实验：强化DBA小鼠的寻食行为

为了评估遗传背景和环境条件暴露对强迫性饮食行为表达之间的相互作用，CC和ES-C花费在强调和对照组显示的条件抑制程序的不同阶段（训练和测试）上的时间评估两种菌株的比较（对照C57，对照DBA，强调的C57，强调的DBA）。

在训练阶段的分析中，我们观察到了显着的应变x处理x腔室相互作用（F（1,72）= 6.52; p <0.001）。 比较每组在CC和ES-C中所花费的时间，表明在训练阶段，只有对照组C57和压力DBA组更喜欢CC与ES-C（对照组C57：F（1,10）= 6.32； p <0.05;压力DBA：F（1,14）= 15.60; p <0.05）（图。 2），在CC上花费的时间比ES-C多。

图2。 C57和DBA小鼠的条件抑制训练。

对照组C57 / DBA组（每组n = 6）（A）和压力C57 /在训练阶段在装有巧克力（CC）的腔室和空安全腔室（ES-C）中花费的时间（sec±SE） DBA小鼠（每组n = 8）（B）。 *与ES-C相比，p ＜0.05。

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0120191.g002

关于测试结果，我们观察到应变，处理和腔室之间的显着相互作用（F（1,72）= 6.0； p <0.001）。 两种菌株在CC和ES-C中的花费时间模式不同。 与装有巧克力（CC）的小室相比，两个对照组（C57，DBA）在ES-C上花费的时间都更多，其中存在有条件刺激（CS）（C57：F（1,10）= 6.04; p <0.05； DBA：F（1,10）= 12.32； p <0.01），表明在CS出现期间有条件地抑制了巧克力搜寻。 相比之下，受压的C57小鼠在任一腔室中均没有显示出明显的倾向或厌恶感（F（1,14）= .381; ns），而与ES-C相比，受压的DBA动物在CC上花费的时间更长（F（ 1,14）= 7.38; p <0.05）（图。 3），因此表明寻求食物的行为尽管可能产生有害后果。

 

图3。 C57和DBA小鼠的条件抑制试验。

在对照组C57 / DBA组（每组n = 6）（A）和压力C57进行条件抑制测试期间，在装有巧克力（CC）的腔室和空安全腔室（ES-C）中花费的时间（sec±SE） / DBA小鼠（每组n = 8）（B）。 * p <0.05； **与CC相比p <0.01。

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0120191.g003

这些结果表明，暴露于我们的环境条件使巧克力寻求不受惩罚信号的影响，将适应性寻求食物的行为转变为仅在DBA小鼠中的强迫性寻求（图。 3).

巧克力摄入量和重量

为了评估两种菌株的对照组和对照组所显示的巧克力摄入量（对照C57，对照DBA，强调的C57，强调的DBA），在条件的不同阶段（暴露前，训练，测试）期间评估巧克力的消耗。抑制程序。

关于暴露前阶段的巧克力摄入量，应激C57和强迫DBA小鼠之间没有显着差异（F（1,14）= 0.83; ns）（图。 4).

 

图4。 C57 / DBA控制和强调组中的巧克力摄入量。

在暴露前（A），训练（B）和测试（C）期间记录的C57 / DBA对照（每组n = 6）和应激（每组n = 8）动物的巧克力摄入量。 数据表示为平均克数（A和B的总天数平均值±SE）。 * p <0.05； ***与相同菌株的对照组相比，p <0.001。 与其他菌株的同一组相比，### p <0.001。

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0120191.g004

关于训练阶段的巧克力摄入量，应变与治疗之间存在显着的相互作用F（1,24）= 20.10； p ＜0.001）。 在各个组之间的比较中，我们注意到对照DBA与压力DBA（（F（1,12）= 46.17; p <0.001），对照C57与压力C57（（F（1,12）= 24.25 ; p <0.001）和应激C57与应激DBA小鼠（（F（1,14）= 27.52; p <0.001）（图。 4）。 与所有其他组相比，强调的DBA动物显示出显着更高的巧克力摄入量。

在测试当天对巧克力摄入量的分析显示出显着的菌株x治疗相互作用（F（1,24）= 21.48； p <0.005）。 各个组之间的比较显示对照和压力DBA（（F（1,12）= 38.49; p <0.001），对照和压力C57（（F（1,12）= 7.90; p <0.05）和应激的C57和应激的DBA小鼠（（F（1,14）= 33.32; p <0.001）（图。 4）。 与所有其他组相比，强调的DBA动物经历了显着更大的巧克力摄入量，表明强制性巧克力消耗，与条件抑制测试中的寻求行为一致。

最后，关于体重结果，统计分析显示，在实验的第一天（实验程序开始前（F（1,24）= 2.22; ns），在训练阶段（F（F），动物体重在各组之间没有显着差异。 1,24）= 2.97; ns）和条件抑制测试当天（F（1,24）= 0.58; ns）（图。 5).

图5。 动物体重。

对照中的重量（每组n = 6）和强调（每组n = 8）在操作开始前（A），第一个训练日（B）和测试日（C）测量的C57 / DBA组。 数据表示为克±SE。

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0120191.g005

总体而言，我们的数据显示了强迫性饮食表达中遗传因素和环境条件之间的强烈相互作用，这与先前的研究一致，这些研究报告了这些因素在某些饮食失调中的关键作用[3–5, 38].

多巴胺能和去甲肾上腺素能受体在强化DBA与对照DBA小鼠的mpFC，NAc和CP中的表达

为了评估多巴胺能和去甲肾上腺素能受体在动物中的表达，表现出类似强迫的进食行为（强调DBA），α1R，D1R和D2R在mpFC中的表达以及在NAc和CP中的D1R和D2R在压力vs.控制DBA小鼠（图。 6).

 

图6。 DBA株DA和NE受体的表达。

压力DBA（n = 1）和对照组（n = 2）的CP和NAc（A）中的D1R和D2R的表达以及mpFC（B）中的D1R，D8R和α6的表达。 * p <0.05； **与对照组相比，p <0.01。 数据显示为相对比率±SE。

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0120191.g006

与对照DBA小鼠相比，应激DBA的NAc（F（2）= 1,12; p <5.58）和CP（F（0.05）= 1,12; p <10.74）中的D0.01Rs上调（图。 6），表明对动物具有强迫性进食行为的纹状体D2受体具有选择性作用。 对于D1受体没有明显的作用。 与对照组DBA小鼠相比，应激DBA组的mpFC中的α1Rs表达较低（F（1,12）= 7.27; p <0.05）（图。 6）。 对于前额叶D1R或D2R受体表达没有观察到显着效果。

初生DBA与幼稚C57小鼠的mpFC，NAc和CP中的多巴胺能和去甲肾上腺素能受体表达

为了评估α1R，D1R和D2R的基线受体可用性，在两种不同的幼稚动物中评估了mpFC中α1R，D1R和D2R以及NAc和CP中D1R和D2R的表达（天真的C57和幼稚的DBA）（图。 7).

 

图7。 在幼稚C57和DBA动物中DA和NE受体的表达。

原始C1 / DBA组的CP和NAc（A）中的D2R和D1R的表达（A），mpFC（B）中的D2R，D1R和α57的表达（每组n = 6）。 **与其他菌株的未处理组相比，p <0.01。 数据显示为相对比率±SE。

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0120191.g007

我们观察到幼稚DBA的NAc相对于幼稚C2小鼠的NAc选择性D57R利用率明显降低（F（1,10）= 11.80； p <0.01）。 在大脑其他区域的D1R，D2R或α1R中没有发现其他显着差异（图。 7）。 这些结果与以前的数据一致[4, 54, 60, 61]，支持这样的假设，即低D2R可用性是一种“组成型”风险遗传因素，可能导致适应不良饮食的脆弱性。

讨论

我们根据在不利条件下对可口食物寻求/摄入的条件抑制来评估强迫性饮食[38]在C57和DBA小鼠中。 根据遗传背景，暴露于环境条件会诱发类似强迫的饮食行为。 此外，这种行为模式似乎与累积的D2受体的低可用性有关。 我们还分别在纹状体和mpFC中观察到D2R上调和α1R下调 - 这是一种潜在的神经适应性反应，与从动机到强迫性饮食行为的转变相似。

我们的实验表明，获取巧克力前暴露与热量限制之间的相互作用使巧克力寻求不受惩罚信号的影响，将适应性寻求食物的行为转化为类似强迫的饮食行为。 值得注意的是，这种行为很大程度上取决于基因型。 条件抑制试验结果表明，只有强调的DBA动物表现出追求食物的行为，尽管可能产生有害后果。

这种效应不能归因于C57和DBA小鼠之间的休克敏感性差异，如支持实验所示（见 S1方法 和 S2图。）和其他团体报告的[62]。 此外，在强化DBA动物中，与摄入行为平行地发展寻求食物的行为，如该组所示的高巧克力摄入量所证明的。 虽然食用大量可口的食物可以表明食物的动机增加，但这样做尽管有害后果，例如容忍惩罚以获得它，反映了食物的病理动机（强迫）[5].

因此，DBA小鼠构成了对滥用药物的抵抗的“理想模型”[24和正常情况下的食物相关疾病（目前的结果），它们对药物最敏感 - [24和受到特定环境压力的食物相关影响。 此外，初步实验表明，仅接触这些变量中的一个（分别暴露于巧克力或热量限制）不能诱导这种表型（S1方法 和 S3图。）。 因此，只有环境条件的成瘾效应（预先暴露于巧克力和热量限制）使得饮食行为难以受到惩罚（强迫性饮食行为）。 这个结果与证据表明可口的可用性一致[46, 51]，压力暴露[1, 63–65]和压力与热量限制之间的协同关系是促进人类和动物模型饮食失调的最重要因素[65–67].

强迫DBA小鼠显示从动机到强迫性进食行为的转变似乎与pFC-NAc-CP回路中改变的多巴胺能和去甲肾上腺素受体表达有关。 事实上，与对照DBA相比，表现出强迫进食行为的强化DBA小鼠（如没有条件抑制所示）显示NAc和CP中D2R的上调和mpFC中α-1AR的下调。 为了排除观察到的效果可能由对照和强化DBA所示的测试期间不同量的巧克力消耗引起，进行了另外的实验。 实验条件和程序如对照和强化DBA所述，但是在没有巧克力消耗的小鼠中取出的脑上进行受体表达（在测试当天）。 该实验的结果（S1方法 和 S4图。），明确排除了强迫DBA显示的NAc和CP中D2R的上调以及mpFC中α-1AR的下调可以诱导巧克力消耗。

在强迫DBA小鼠的NAc和CP中观察到的结果不允许我们确定对DA传递的影响 - 即，这些变化是否增加多巴胺能基调，需要关于D2受体形式的更详细信息 - 例如，2的比例替代mRNA剪接变体，D2R-long（D2L）和D2R-short（D2S） - 在2区域，因为纹状体中同种型的相对比例影响D1R和D2 / 3R共激活的神经和行为结果[68–70]。 我们假设突触后受体的增加和随之而来的多巴胺传递的增加维持了动力并激发了寻求食物的行为[11]。 然而，需要更多细节研究来研究在我们的实验过程中哪种类型的D2R受到影响。

强化的DBA小鼠中纹状体D2R表达的增加似乎与假设纹状体D2R的下调是对可食用食物的过度消耗的神经适应性反应的假设形成对比。 然而，据报道，纹状体D2R的下调是对人类和动物过度消费可食性和药物摄入的神经适应性反应[4, 44, 60, 71–75]也是一个潜在的适应不良饮食易受影响的遗传风险因素[4, 54, 60, 61, 75]。 我们在本研究中观察到的纹状体D2R表达可能是对我们的环境条件（暴露前，卡路里限制）的神经适应性反应的结果，这种反应是由其他更复杂的饮食失调所共有的特定症状（强迫性进食）所致。 关于这个问题的辩论经常考虑肥胖和暴饮暴食，其中复杂的行为模式（如体重增加，间歇性喂养事件，延长高脂肪饮食的获得）发展 - 而非强迫性饮食行为 本身，如本研究所评估。

越来越多的证据表明纹状体D1R和D2R在成本效益计算中决定了在获得优先奖励上花费精力的意愿，从而影响了动机行为[10–14]。 此外，最佳的目标导向行为和动机似乎与纹状体中较高的D2R水平相关[12, 76–79]。 我们的研究表明过度纹状体D2R表达也与病理行为表型有关，促使最佳D2R表达是理想目标导向行为和动机的神经相关性的假设。

另一个重要结果是初始DBA与初始C2小鼠的NAc中D57R的可用性较低。 正如所讨论的，减少的D2R表达被认为是易受适应不良饮食的遗传风险因素[4, 54, 60, 61, 75]。 此外，已经提出降低腹侧纹状体中D2 / D3多巴胺能受体的可用性，以增加药物摄入的倾向并且与高冲动性相关[16, 79, 80]。 此外，据报道DBA / 2小鼠具有高冲动水平[81, 82]。 因此，我们推测在幼稚DBA小鼠中观察到的低累积D2R可用性解释了在特定环境条件下强迫进食的不同倾向，例如热量限制和可食用食物的可用性 - 影响饮食失调的发展和表达的因素[4, 46, 64, 83, 84].

我们观察到Stressed对照DBA小鼠的前额叶α1R表达降低。 虽然有人建议前额叶NE传播需要与食物有关的动机行为[9虽然NE神经元（特别是通过α1Rs）介导滥用药物的增强作用[57, 58, 85没有研究检查过前额的去甲肾上腺素能受体在强迫性饮食行为中的作用。 我们的研究结果扩展了先前关于食前相关动机行为的前额叶NE传递功能的研究结果，表明特定受体可控制与强迫性进食相关的异常动机。 mpFC中α1R的下调可能表明适应过程是由于皮质的褪色作用和纹状体的主要功能所驱动的从动机到强迫行为的转变的基础。 然而，需要进一步研究来研究这一假设。

下丘脑是调节食物摄入的最重要的脑区之一[86–88]。 然而，除了那些控制饥饿和饱腹感的大脑回路之外，有人建议参与食物消费[60, 89]。 此外，一些神经递质和激素，包括DA，NE，乙酰胆碱，谷氨酸，大麻素，阿片类药物和5-羟色胺，以及参与食物摄入的稳态调节的神经肽，如食欲素，瘦素和生长素释放肽，都与食物的有益效果有关。 [60, 90–92]。 因此，下丘脑对食物摄入的调节似乎与处理食物摄入的奖励和动机方面的不同神经回路有关[60]，例如前额叶系统。 值得注意的是，C57和DBA小鼠表现出多种行为差异，并且在这些近交系中已经广泛检查了其大脑神经递质系统的功能和解剖特征[19, 23因此，建议对动机，奖励，学习和控制回路进行不同的，依赖于应变的调节。

处理食物（和药物）奖励和激励方面的最佳机制是大脑的多巴胺能奖励回路[45, 51, 60]。 DA奖励途径的反复刺激被认为在各种神经回路中引发神经生物学适应，从而使寻求行为“强迫”并导致​​失去对一个人摄入食物（或药物）的控制[51, 60].

有人提出，在不同的获取条件下，可口食物的强效奖励诱导能力可以通过与动机，学习，认知和决策相关的大脑区域的神经化学改变来驱动行为改变，这反映了药物滥用引起的变化[83, 93–99]。 特别是，反复接触可口食物后的奖赏，动机，记忆和控制回路的变化与重复接触药物后观察到的变化相似[60, 95]。 在易受这些变化影响的个体中，食用大量可口的食物（或药物）会破坏动机，奖励，学习和控制回路之间的平衡，从而增加可口食物（或药物）的增强价值并削弱控制电路[51, 60].

基于这一观察和本研究的结果，可以提出在DBA小鼠中观察到的从动机行为到强迫性进食行为的转变可能与遗传易感性之间的相互作用有关（本研究中观察到的低累积D2受体可用性以及其他神经递质和激素参与食物相关脑回路的差异和暴露于环境条件，分别导致纹状体和mpFC中的D2R上调和α1R下调，可导致激发行为的电路之间的“不平衡”相互作用。控制和抑制强效反应的电路[60, 95].

结论

关于人类饮食失调中基因 - 环境相互作用的研究很少[2]。 我们在这里提出的动物模型可以用来理解环境因素如何与遗传责任和神经生物学因素相互作用，以促进强迫性饮食行为的表达，也为药物成瘾提供新的见解。

支持信息

S1_Fig.tif

https://s3-eu-west-1.amazonaws.com/ppreviews-plos-725668748/1951833/preview.jpg

 

图分享

 

1 / 5

在内侧前额叶皮质（mpFC）（A），核神经核（NAc）和尾状核 - 壳核（CP）（B）中冲孔的代表性位置。

S1图。 冲压位置。

在内侧前额叶皮质（mpFC）（A），核神经核（NAc）和尾状核 - 壳核（CP）（B）中冲孔的代表性位置。

DOI：10.1371 / journal.pone.0120191.s001

（TIFF）

S2图。 C57和DBA小鼠的休克敏感性阈值。

C57和DBA动物的休克敏感性（方法S1）。 在C57和DBA动物中观察到的平均（μA±SE）休克阈值。

DOI：10.1371 / journal.pone.0120191.s002

（TIFF）

S3图。 DBA小鼠的条件抑制试验。

在DBA预暴露和DBA食品限制组的条件性抑制测试期间，在含有巧克力（CC）空安全室（ES-C）的室中花费的时间（秒±SE）。

DOI：10.1371 / journal.pone.0120191.s003

（TIFF）

S4图。 DAA和NE受体在DBA小鼠中的表达。

应激和对照DBA小鼠的CP和NAc中的D2受体表达以及mpFC中的α1表达（每组n = 6）。 *与对照组相比，p <0.05。 数据显示为相对比率±SE。

DOI：10.1371 / journal.pone.0120191.s004

（TIFF）

S1方法。 支持材料和方法。

DOI：10.1371 / journal.pone.0120191.s005

（DOC）

致谢

我们感谢Sergio Papalia博士的娴熟帮助。

作者贡献

构思并设计了实验：RV EP MDS。 进行实验：EP MDS DA ECL AF LP AV。 分析数据：RV AP AG SPA。 贡献的试剂/材料/分析工具：AF EP MDS。 写了这篇论文：RV SPA EP MDS。

参考资料

  1. 1。 Campbell IC，Mill J，Uher R，Schmidt U（2010）饮食失调，基因 - 环境相互作用和表观遗传学。 Neuroscience Biobehav Rev 35：784-793。 doi：10.1016 / j.neubiorev.2010.09.012
  2. 2。 Bulik CM（2005）探索饮食失调中的基因 - 环境关系。 J Psychiatry Neurosci 30：335-339。 结论：16151538
  3. 查看文章
  4. 考研/ NCBI
  5. Google Scholar
  6. 查看文章
  7. 考研/ NCBI
  8. Google Scholar
  9. 查看文章
  10. 考研/ NCBI
  11. Google Scholar
  12. 查看文章
  13. 考研/ NCBI
  14. Google Scholar
  15. 查看文章
  16. 考研/ NCBI
  17. Google Scholar
  18. 查看文章
  19. 考研/ NCBI
  20. Google Scholar
  21. 查看文章
  22. 考研/ NCBI
  23. Google Scholar
  24. 查看文章
  25. 考研/ NCBI
  26. Google Scholar
  27. 查看文章
  28. 考研/ NCBI
  29. Google Scholar
  30. 查看文章
  31. 考研/ NCBI
  32. Google Scholar
  33. 查看文章
  34. 考研/ NCBI
  35. Google Scholar
  36. 查看文章
  37. 考研/ NCBI
  38. Google Scholar
  39. 查看文章
  40. 考研/ NCBI
  41. Google Scholar
  42. 查看文章
  43. 考研/ NCBI
  44. Google Scholar
  45. 查看文章
  46. 考研/ NCBI
  47. Google Scholar
  48. 查看文章
  49. 考研/ NCBI
  50. Google Scholar
  51. 查看文章
  52. 考研/ NCBI
  53. Google Scholar
  54. 查看文章
  55. 考研/ NCBI
  56. Google Scholar
  57. 查看文章
  58. 考研/ NCBI
  59. Google Scholar
  60. 查看文章
  61. 考研/ NCBI
  62. Google Scholar
  63. 查看文章
  64. 考研/ NCBI
  65. Google Scholar
  66. 3。 Heyne A，Kiesselbach C，SahùnI（2009）一种强迫性食物摄取行为的动物模型。 添加Biol 14：373-383。 doi：10.1111 / j.1369-1600.2009.00175.x
  67. 查看文章
  68. 考研/ NCBI
  69. Google Scholar
  70. 查看文章
  71. 考研/ NCBI
  72. Google Scholar
  73. 查看文章
  74. 考研/ NCBI
  75. Google Scholar
  76. 查看文章
  77. 考研/ NCBI
  78. Google Scholar
  79. 查看文章
  80. 考研/ NCBI
  81. Google Scholar
  82. 查看文章
  83. 考研/ NCBI
  84. Google Scholar
  85. 查看文章
  86. 考研/ NCBI
  87. Google Scholar
  88. 查看文章
  89. 考研/ NCBI
  90. Google Scholar
  91. 查看文章
  92. 考研/ NCBI
  93. Google Scholar
  94. 查看文章
  95. 考研/ NCBI
  96. Google Scholar
  97. 查看文章
  98. 考研/ NCBI
  99. Google Scholar
  100. 查看文章
  101. 考研/ NCBI
  102. Google Scholar
  103. 查看文章
  104. 考研/ NCBI
  105. Google Scholar
  106. 查看文章
  107. 考研/ NCBI
  108. Google Scholar
  109. 查看文章
  110. 考研/ NCBI
  111. Google Scholar
  112. 查看文章
  113. 考研/ NCBI
  114. Google Scholar
  115. 查看文章
  116. 考研/ NCBI
  117. Google Scholar
  118. 查看文章
  119. 考研/ NCBI
  120. Google Scholar
  121. 查看文章
  122. 考研/ NCBI
  123. Google Scholar
  124. 查看文章
  125. 考研/ NCBI
  126. Google Scholar
  127. 查看文章
  128. 考研/ NCBI
  129. Google Scholar
  130. 查看文章
  131. 考研/ NCBI
  132. Google Scholar
  133. 查看文章
  134. 考研/ NCBI
  135. Google Scholar
  136. 查看文章
  137. 考研/ NCBI
  138. Google Scholar
  139. 查看文章
  140. 考研/ NCBI
  141. Google Scholar
  142. 查看文章
  143. 考研/ NCBI
  144. Google Scholar
  145. 查看文章
  146. 考研/ NCBI
  147. Google Scholar
  148. 查看文章
  149. 考研/ NCBI
  150. Google Scholar
  151. 查看文章
  152. 考研/ NCBI
  153. Google Scholar
  154. 查看文章
  155. 考研/ NCBI
  156. Google Scholar
  157. 查看文章
  158. 考研/ NCBI
  159. Google Scholar
  160. 查看文章
  161. 考研/ NCBI
  162. Google Scholar
  163. 查看文章
  164. 考研/ NCBI
  165. Google Scholar
  166. 查看文章
  167. 考研/ NCBI
  168. Google Scholar
  169. 查看文章
  170. 考研/ NCBI
  171. Google Scholar
  172. 查看文章
  173. 考研/ NCBI
  174. Google Scholar
  175. 查看文章
  176. 考研/ NCBI
  177. Google Scholar
  178. 查看文章
  179. 考研/ NCBI
  180. Google Scholar
  181. 查看文章
  182. 考研/ NCBI
  183. Google Scholar
  184. 查看文章
  185. 考研/ NCBI
  186. Google Scholar
  187. 查看文章
  188. 考研/ NCBI
  189. Google Scholar
  190. 查看文章
  191. 考研/ NCBI
  192. Google Scholar
  193. 查看文章
  194. 考研/ NCBI
  195. Google Scholar
  196. 查看文章
  197. 考研/ NCBI
  198. Google Scholar
  199. 查看文章
  200. 考研/ NCBI
  201. Google Scholar
  202. 查看文章
  203. 考研/ NCBI
  204. Google Scholar
  205. 查看文章
  206. 考研/ NCBI
  207. Google Scholar
  208. 查看文章
  209. 考研/ NCBI
  210. Google Scholar
  211. 查看文章
  212. 考研/ NCBI
  213. Google Scholar
  214. 查看文章
  215. 考研/ NCBI
  216. Google Scholar
  217. 查看文章
  218. 考研/ NCBI
  219. Google Scholar
  220. 查看文章
  221. 考研/ NCBI
  222. Google Scholar
  223. 查看文章
  224. 考研/ NCBI
  225. Google Scholar
  226. 查看文章
  227. 考研/ NCBI
  228. Google Scholar
  229. 查看文章
  230. 考研/ NCBI
  231. Google Scholar
  232. 查看文章
  233. 考研/ NCBI
  234. Google Scholar
  235. 查看文章
  236. 考研/ NCBI
  237. Google Scholar
  238. 查看文章
  239. 考研/ NCBI
  240. Google Scholar
  241. 查看文章
  242. 考研/ NCBI
  243. Google Scholar
  244. 查看文章
  245. 考研/ NCBI
  246. Google Scholar
  247. 查看文章
  248. 考研/ NCBI
  249. Google Scholar
  250. 查看文章
  251. 考研/ NCBI
  252. Google Scholar
  253. 查看文章
  254. 考研/ NCBI
  255. Google Scholar
  256. 查看文章
  257. 考研/ NCBI
  258. Google Scholar
  259. 查看文章
  260. 考研/ NCBI
  261. Google Scholar
  262. 查看文章
  263. 考研/ NCBI
  264. Google Scholar
  265. 查看文章
  266. 考研/ NCBI
  267. Google Scholar
  268. 查看文章
  269. 考研/ NCBI
  270. Google Scholar
  271. 查看文章
  272. 考研/ NCBI
  273. Google Scholar
  274. 查看文章
  275. 考研/ NCBI
  276. Google Scholar
  277. 查看文章
  278. 考研/ NCBI
  279. Google Scholar
  280. 查看文章
  281. 考研/ NCBI
  282. Google Scholar
  283. 查看文章
  284. 考研/ NCBI
  285. Google Scholar
  286. 查看文章
  287. 考研/ NCBI
  288. Google Scholar
  289. 查看文章
  290. 考研/ NCBI
  291. Google Scholar
  292. 查看文章
  293. 考研/ NCBI
  294. Google Scholar
  295. 4。 Johnson PM，Kenny PJ（2010）肥胖大鼠的成瘾性奖赏功能障碍和强迫性进食：多巴胺D2受体的作用。 Nat Neuroscience 13：635-641。 doi：10.1038 / nn.2519。 结论：20348917
  296. 5。 Oswald KD，Murdaugh DL，King VL，Boggiano MM（2011）尽管在暴食的动物模型中产生了后果，但对可口食物的动机。 Int J Eatg Disord 44：203-211。 doi：10.1002 / eat.20808。 结论：20186718
  297. 6. Teegarden SL，Bale TL（2008）压力对饮食偏爱和摄入量的影响取决于获取途径和压力敏感性。 生理与行为93：713–723。 doi：10.1016 / j.physbeh.2007.11.030
  298. 7。 Cabib S，Puglisi-Allegra S（2012）mesoaccumbens多巴胺应对压力。 Neurosci Biobehav Rev 36：79-89。 doi：10.1016 / j.neubiorev.2011.04.012。 结论：21565217
  299. 8。 Ventura R，Latagliata EC，Morrone C，La Mela I，Puglisi-Allegra S（2008）Prefrontal去甲肾上腺素决定了“高”动机显着性的归因。 PLoS ONE，3：e3044。 Biol Psychiatry 71：358-365。 doi：10.1371 / journal.pone.0003044。 结论：18725944
  300. 9。 Ventura R，Morrone C，Puglisi-Allegra S（2007）Prefrontal / accumbal儿茶酚胺系统确定奖励和厌恶相关刺激的动机显着性归因。 Proc Natl Acad Sci USA 104：5181-5186。 pmid：17360372 doi：10.1073 / pnas.0610178104
  301. 10。 Salamone JD，Correa M（2012）中脑边缘多巴胺的神秘动机功能。 Neuron 76：470-485。 doi：10.1016 / j.neuron.2012.10.021。 结论：23141060
  302. 11。 Salamone JD，Correa M，Farrar A，Mingote SM（2007）伏隔核多巴胺和相关前脑电路的相关功能。 精神药理学191：461-482。 pmid：17225164 doi：10.1007 / s00213-006-0668-9
  303. 12。 Trifilieff P，Feng B，Urizar E，Winiger V，Ward RD，Taylor KM，et al。（2013）增加多巴胺D2受体在成人伏隔核中的表达增强了动力。 Mol Psychiatry 18：1025-1033。 doi：10.1038 / mp.2013.57。 结论：23711983
  304. 13。 Van den Bos R，van der Harst J，Jonkman S，Schilders M，Sprijt B（2006）大鼠根据内标评估成本和效益。 Behav Brain Res 171：350-354。 pmid：16697474 doi：10.1016 / j.bbr.2006.03.035
  305. 14。 Ward RD，Simpson EH，Richards VL，Deo G，Taylor K，Glendinning JI，et al。（2012）在精神分裂症的阴性症状的动物模型中，享乐反应与奖励和激励动机的分离。 神经精神药理学37：1699-1707。 doi：10.1038 / npp.2012.15。 结论：22414818
  306. 15。 Bertolino A，Fazio L，Caforio G，Blasi G，Rampino A，Romano R，et al。 （2009）多巴胺受体D2基因的功能变体调节精神分裂症中的prefronto-striatal表型。 Brain 132：417-425。 doi：10.1093 / brain / awn248。 结论：18829695
  307. 16。 Everitt BJ，Belin D，Economidou D，Pelloux Y，Dalley J，Robbins TW（2008）神经机制潜在的脆弱性，以发展强迫性寻求毒品的习惯和成瘾。 Phylos Transact RS伦敦系列B：生物科学363：3125-3135。 doi：10.1098 / rstb.2008.0089。 结论：18640910
  308. 17. Volkow ND，Fowler JS，Wang GJ，Baler R，Telang F（2009）成像多巴胺在药物滥用和成瘾中的作用。 神经药理学1：3-8。 doi：10.1016 / j.neuropharm.2008.05.022
  309. 18。 Crawley JN，Belknap JK，Collins A，Crabbe JC，Frankel W，He​​nderson N，et al。 （1997）近交小鼠品系的行为表型：分子研究的意义和建议。 精神药理学（Berl）132：107-124。 pmid：9266608 doi：10.1007 / s002130050327
  310. 19。 Cabib S，Puglisi-Allegra S，Ventura R（2002）小鼠近交品系的比较研究对过度活跃表型的理解的贡献。 Behav Brain Res 130：103-109。 pmid：11864725 doi：10.1016 / s0166-4328（01）00422-3
  311. 20。 Puglisi-Allegra S，Ventura R（2012）Prefrontal / accumbal儿茶酚胺系统处理情绪驱动的动机显着性归因。 Rev Neurosci 23：509-526。 doi：10.1515 / revneuro-2012-0076。 结论：23159865
  312. 21。 Puglisi-Allegra S，Ventura R（2012）Prefrontal / accumbal儿茶酚胺系统具有很高的动机显着性。 Front Behav Neurosci 6：31。 doi：10.3389 / fnbeh.2012.00031。 结论：22754514
  313. 22。 Alcaro A，Huber R，Panksepp J（2007）中脑边缘多巴胺能系统的行为功能：情感神经病学观点。 Brain Res Rev 56：283-321。 pmid：17905440 doi：10.1016 / j.brainresrev.2007.07.014
  314. 23。 Andolina D，Maran D，Viscomi MT，Puglisi-Allegra S（2014压力应对行为的应变依赖性变异由前额皮质边缘系统内的5-HT / GABA相互作用介导。 国际神经精神药理学杂志：10.1093 / ijnp / pyu074。
  315. 24。 Cabib S，Orsini C，Le Moal M，Piazza PV（2000）废除和逆转应对滥用药物后行为反应的应变差异。 科学289：463-465。 pmid：10903209 doi：10.1126 / science.289.5478.463
  316. 25。 Orsini C，Bonito-Oliva A，Conversi D，Cabib S（2005）对C57BL / 6和DBA / 2近交系小鼠的成瘾药物诱导的条件性位置偏爱的敏感性。 精神药理学（Berl）181：327-336。 pmid：15864555 doi：10.1007 / s00213-005-2259-6
  317. 26。 Orsini C，Bonito-Oliva A，Conversi D，Cabib S（2008）遗传责任增加了暴露于低可卡因的小鼠中初次诱导恢复条件性位置偏爱的倾向。 精神药理学（Berl）198：287-296。 doi：10.1007 / s00213-008-1137-4。 结论：18421441
  318. 27。 van der Veen R，Piazza PV，Deroche-Gamonet V（2007）易受可卡因静脉内自我管理影响的基因环境相互作用：简短的社交经历影响DBA / 2J的摄入，但不影响C57BL / 6J小鼠的摄入。 精神药理学（Berl）193：179-186。 pmid：17396246 doi：10.1007 / s00213-007-0777-0
  319. 28。 Young JW，Light GA，Marston HM，Sharp R，Geyer MA（2009）5选择连续性能测试：对小鼠警惕的转化测试的证据。 PLoS ONE 4，e4227。 doi：10.1371 / journal.pone.0004227。 结论：19156216
  320. 29。 Elmer GI，Pieper JO，Hamilton LR，Wise RA（2010）C57BL / 6J和DBA / 2J小鼠在脑刺激奖励和静脉内自我给药的吗啡增强中的定性差异。 精神药理学208：309-321。 doi：10.1007 / s00213-009-1732-z。 结论：20013116
  321. 30。 Fish EW，Riday TT，McGuigan MM，Faccidomo S，Hodge CW，Malanga CJ（2010）C57Bl6 / J和DBA2 / J小鼠中的酒精，可卡因和脑刺激奖励。 Alco Clin Exp Res 34：81-89。 doi：10.1111 / j.1530-0277.2009.01069.x。 结论：19860803
  322. 31。 Solecki W，Turek A，Kubik J，Przewlocki R（2009）阿片类药物在条件性位置偏爱和厌恶范例中的激发作用 - 三种近交系小鼠的研究。 精神药理学207：245-255。 doi：10.1007 / s00213-009-1672-7。 结论：19787337
  323. 32。 Caspi A，Moffitt TE（2006）精神病学中的基因 - 环境相互作用：与神经科学联合起来。 Nat Rev Neurosci 7：583-590。 pmid：16791147 doi：10.1038 / nrn1925
  324. 33。 Rutter M（2008）基因 - 环境相互作用的生物学意义。 J Abnorm Child Psychol 36：969-975。 doi：10.1007 / s10802-008-9256-2。 结论：18642072
  325. 34。 Volkow N，Li TK（2005）成瘾的神经科学。 Nat Neurosci 8：1429-1430。 pmid：16251981 doi：10.1038 / nn1105-1429
  326. 35。 Cabib S，Puglisi-Allegra S，Oliverio A（1985）小鼠刻板症的遗传分析：慢性应激后的多巴胺能可塑性。 Behav Neural Biol 44：239-248。 pmid：4062778 doi：10.1016 / s0163-1047（85）90254-7
  327. 36。 Cabib S，Giardino L，Calza L，Zanni M，Mele A，Puglisi-Allegra S（1998）应激促进mesoaccumbens和黑质纹状体系统内多巴胺受体密度的主要变化。 神经科学84，193-200。 pmid：9522373 doi：10.1016 / s0306-4522（97）00468-5
  328. 37。 Puglisi-Allegra S，Cabib S（1997）多巴胺的精神药理学：比较研究对近交系小鼠的贡献。 Prog Neurobiol 51：637-61。 pmid：9175160 doi：10.1016 / s0301-0082（97）00008-7
  329. 38。 Latagliata EC，Patrono E，Puglisi-Allegra S，Ventura R（2010）寻求有害后果的食物是在前额皮质去甲肾上腺素能控制下。 BMC Neurosci 8：11-15。 pmid：21478683 doi：10.1186 / 1471-2202-11-15
  330. 39。 Carr KD（2002）通过慢性食物限制增加药物奖励：行为证据和潜在机制。 Physiol Behav 76：353-364。 pmid：12117572 doi：10.1016 / s0031-9384（02）00759-x
  331. 40。 Rougé-Pont F，Marinelli M，Le Moal M，Simon H，Piazza PV（1995）应激诱导的致敏和糖皮质激素。 II。 可卡因诱导的细胞外多巴胺增加的敏感性取决于应激诱导的皮质酮分泌。 J Neurosi 15：7189-7195。 结论：7472473
  332. 41。 Deroche V，Marinelli M，Maccari S，Le Moal M，Simon H，Piazza PV（1995）应激诱导的致敏和糖皮质激素。 I.对苯丙胺和吗啡的多巴胺依赖性运动作用的敏感性取决于应激诱导的皮质酮分泌。 J Neurosi 15：7181-7188。 pmid：7472472 doi：10.1016 / 0006-8993（92）90205-n
  333. 42。 Guarnieri DJ，Brayton CE，Richards SM，Maldonado-Aviles J，Trinko JR，Nelson J，et al。 （2012）基因谱分析揭示了压力激素在对食物限制的分子和行为反应中的作用。 Biol Psychiatry 71：358-365。 doi：10.1016 / j.biopsych.2011.06.028。 结论：21855858
  334. 43。 Adam TC，Epel ES（2007）压力，饮食和奖励制度。 Physiol Behav 91：449-458。 pmid：17543357 doi：10.1016 / j.physbeh.2007.04.011
  335. 44。 Corwin RL，Avena NM，Boggiano MM（2011）喂养和奖励：来自三种大鼠食物暴食的观点。 Physiol和Behav 104：87-97。 doi：10.1016 / j.physbeh.2011.04.041。 结论：21549136
  336. 45。 Volkow ND，Wise RA（2005）吸毒成瘾如何帮助我们了解肥胖症？ Nat Neurosci 8，555-556。 pmid：15856062 doi：10.1038 / nn1452
  337. 46。 Ifland JR，Preuss HG，Marcus MT，Rourke KM，Taylor WC，Burau K，et al。 （2009）精制食物成瘾：经典物质使用障碍。 Mel Hypoth 72：518-526。 doi：10.1016 / j.mehy.2008.11.035
  338. 47。 Bray GA，Nielsen SJ，Popkin BM（2004）饮料中高果糖玉米糖浆的消费可能在肥胖流行中起作用。 Am J Clin Nutrition 79：537-543。 结论：15051594
  339. 48。 Rogers PJ，Smit HJ（2000）食物渴望和食物“成瘾”：从生物心理社会的角度对证据进行批判性回顾。 Pharmacol Biochem Behav 66：3-14。 结论：10837838
  340. 49。 Kalra SP，Kalra PS（2004）重叠和交互式通路调节食欲和渴望。 J Addict Dis 23：5-21。 pmid：15256341 doi：10.1300 / j069v23n03_02
  341. 50。 Parker G，Parker I，Brotchie H（2006）Mood状态对巧克力的影响。 J影响Dis 92：149-159。 pmid：16546266 doi：10.1016 / j.jad.2006.02.007
  342. 51。 Volkow ND，Wang GJ，Telang F，Fowler JS，Thanos PK，Logan J，et al。 （2008）低多巴胺纹状体D2受体与肥胖受试者的前额叶代谢相关：可能的促成因素。 Neuroimage 42：1537-1543。 doi：10.1016 / j.neuroimage.2008.06.002。 结论：18598772
  343. 52。 Berridge KC，Ho CY，Richard JM，Difeliceantonio AG（2010）受诱惑的大脑吃：肥胖和饮食失调的快乐和欲望回路。 Brain Res 1350：43-64。 doi：10.1016 / j.brainres.2010.04.003。 结论：20388498
  344. 53。 Volkow ND，Wang GJ，Tomasi D，Baler RD（2013）肥胖和成瘾：神经生物学重叠。 Obese Rev 14：2-18。 doi：10.1111 / j.1467-789x.2012.01031.x
  345. 54。 Bello NT，Hajnal A（2010）多巴胺和暴食行为。 Pharmacol Biochem Behav 97：25-33。 doi：10.1016 / j.pbb.2010.04.016。 结论：20417658
  346. 55。 Wang GJ，Volkow ND，Thanos PK，Fowler JS（2009）脑多巴胺通路成像：对于理解肥胖的意义。 J Addict Med 3：8-18。 doi：10.1097 / ADM.0b013e31819a86f7。 结论：21603099
  347. 56。 Sara SJ，Bouret S（2012）定位和重新定位：Locus Coeruleus通过唤醒来调节认知。 Neuron rev 76：130-141。 doi：10.1016 / j.neuron.2012.09.011。 结论：23040811
  348. 57。 Drouin C，Darracq L，Trovero F，Blanc G，Glowinski J，Cotecchia S，et al。 （2002）Alpha1b-肾上腺素能受体控制精神兴奋剂和阿片类药物的运动和奖赏效果。 J Neurosci 22：2873-2884。 结论：11923452
  349. 58。 Weinshenker D，Schroeder JPS（2007）在那里又回来了：一个去甲肾上腺素和药物成瘾的故事。 神经精神药理学32：1433-1451。 pmid：17164822 doi：10.1038 / sj.npp.1301263
  350. 59。 Puglisi-Allegra S，Cabib S，Pascucci T，Ventura R，Cali F，Romano V（2000）苯丙酮尿症遗传小鼠模型中的戏剧性脑能量缺失。 Neuroreport 11：1361-1364。 pmid：10817622 doi：10.1097 / 00001756-200004270-00042
  351. 60。 Volkow ND，Wang GJ，Baler RD（2011）奖励，多巴胺和控制食物摄入：对肥胖的影响。 Cogn Sci 15的趋势：37-46。 doi：10.1016 / j.tics.2010.11.001。 结论：21109477
  352. 61。 Stice E，Spoor S，Bohon C，Small DM（2008）TaqIA A1等位基因缓解肥胖与纹状体对食物的反应之间的关系。 科学322：449-452。 doi：10.1126 / science.1161550。 结论：18927395
  353. 62。 Szklarczyk K，Korostynski M，Golda S，Solecki W，Przewlocki R（2012）四种近交小鼠品系中创伤应激的基因型依赖性后果。 基因，大脑和行为11：977-985。 doi：10.1111 / j.1601-183x.2012.00850.x
  354. 63。 Cifani C，Polidori C，Melotto S，Ciccocioppo R，Massi M（2009）通过溜溜球节食和压力暴露于食物引起暴食的临床前模型：西布曲明，氟西汀，托吡酯和咪达唑仑的作用。 精神药理学204：113-125。 doi：10.1007 / s00213-008-1442-y。 结论：19125237
  355. 64。 Dallman MF，Pecoraro N，Akana SF，La Fleur SE，Gomez F，Houshyar H，et al。 （2003）慢性压力和肥胖：“舒适食物”的新观点。 Proc Natl Acad Sci USA 100：11696-11701。 pmid：12975524 doi：10.1073 / pnas.1934666100
  356. 65。 Hagan MM，Chandler PC，Wauford PK，Rybak RJ，Oswald KD（2003）可口的食物和饥饿作为诱发暴食的动物模型的触发因素的作用。 Int Journal Eating Disorders 34：183-197。 pmid：12898554 doi：10.1002 / eat.10168
  357. 66。 Casper RC，Sullivan EL，Tecott L（2008）动物模型与人类饮食失调和肥胖的相关性。 精神药理学199：313-329。 doi：10.1007 / s00213-008-1102-2。 结论：18317734
  358. 67。 Parylak SL，Koob GF，Zorrilla EP（2011）食物成瘾的黑暗面。 Physiol和Behav 104：149-156。 doi：10.1016 / j.physbeh.2011.04.063。 结论：21557958
  359. 68。 Colelli V，Fiorenza MT，Conversi D，Orsini C，Cabib S（2010）小鼠纹状体中多巴胺D2受体的两种同种型的菌株特异性比例：相关的神经和行为表型。 Genes Brain Behav 9：703-711。 doi：10.1111 / j.1601-183X.2010.00604.x。 结论：20546314
  360. 69。 Fetsko LA，Xu R，Wang Y（2003）D1 / D2协同作用的改变可能是缺乏多巴胺D2L受体的小鼠中增强的刻板印象和减少攀爬的原因。 Brain Res 967：191-200。 pmid：12650980 doi：10.1016 / s0006-8993（02）04277-4
  361. 70。 Usiello A，Baik JH，Rougé-Pont F，Picetti R，Dierich A，LeMeur M，et al。 （2000）多巴胺D2受体的两种同种型的不同功能。 Nature 408：199-203。 pmid：11089973 doi：10.1038 / 35041572
  362. 71。 Colantuoni C，Schwenker J，McCarthy J，Rada P，Ladenheim B，Cadet JL（2001）过量的糖摄入会改变大脑中多巴胺和μ-阿片受体的结合。 Neuroreport 12：3549-3552。 pmid：11733709 doi：10.1097 / 00001756-200111160-00035
  363. 72。 Halpern CH，Tekriwal A，Santollo J，Keating JG，Wolf JA，Daniels D，et al。 (2013）通过伏隔核壳深部脑刺激在小鼠中改善暴食，涉及D2受体调节。 J Neurosci 33：7122-7129。 doi：10.1523 / JNEUROSCI.3237-12.2013。 结论：23616522
  364. 73。 Olsen CM（2011）自然奖励，神经可塑性和非药物成瘾。 神经药理学61：1109-1122。 doi：10.1016 / j.neuropharm.2011.03.010。 结论：21459101
  365. 74。 Stice E，Yokum S，Blum K，Bohon C（2010）体重增加与纹状体对可口食物的反应减少有关。 J Neurosci 30：13105-13109。 doi：10.1523 / JNEUROSCI.2105-10.2010。 结论：20881128
  366. 75。 Stice E，Yokum S，Zald D，Dagher A（2011）基于多巴胺的奖励回路响应，遗传和暴饮暴食。 Curr Top Behav Neurosci 6：81-93。 doi：10.1007 / 7854_2010_89。 结论：21243471
  367. 76。 Gjedde A，Kumakura Y，Cumming P，Linnet J，Moller A（2010）纹状体中多巴胺受体可用性与感觉寻求之间的倒U型相关性。 Proc Natl Acad Sci USA 107：3870-3875。 doi：10.1073 / pnas.0912319107。 结论：20133675
  368. 77。 Stelzel C，Basten U，Montag C，Reuter M，Fiebach CJ（2010）Frontostriatal参与任务转换取决于d2受体密度的遗传差异。 J Neurosci 30：14205-12。 doi：10.1523 / JNEUROSCI.1062-10.2010。 结论：20962241
  369. 78。 Tomer R，Goldstein RZ，Wang GJ，Wong C，Volkow ND（2008）激励动机与纹状体多巴胺不对称有关。 Biol Psychol 77：98-101。 pmid：17868972 doi：10.1016 / j.biopsycho.2007.08.001
  370. 79。 Trifilieff P，Martinez D（2014）成像成瘾：纹状体中的D2受体和多巴胺信号传导作为冲动的生物标志物。 神经药理学76：498-509。 doi：10.1016 / j.neuropharm.2013.06.031。 结论：23851257
  371. 80。 Dalley JW，Fryer TD，Brichard L，Robinson ES，Theobald DE，LääneK，et al。 （2007）伏隔核D2 / 3受体预测特质冲动和可卡因强化。 科学315：1267-1270。 pmid：17332411 doi：10.1126 / science.1137073
  372. 81。 Gubner NR，Wilhelm CJ，Phillips TJ，Mitchell SH（2010）使用15近交小鼠品系证明Go / No-go任务中行为抑制的菌株差异。 Alco Clin Exp Res 34：1353-1362。 doi：10.1111 / j.1530-0277.2010.01219.x。 结论：20491731
  373. 82。 Patel S，Stolerman IP，Asherson P，Sluyter F（2006）在57选择系列反应时间任务中注意C6BL / 2和DBA / 5小鼠的表现。 Behav Brain Res 170：197-203。 pmid：16616787 doi：10.1016 / j.bbr.2006.02.019
  374. 83。 Avena NM，Rada P，Hoebel B（2008）糖成瘾的证据：间歇性，过量糖摄入的行为和神经化学作用。 Neurosci Biobehav Rev 32：20-39。 pmid：17617461 doi：10.1016 / j.neubiorev.2007.04.019
  375. 84。 Hoebel BG，Avena NM，Bocarsly ME，Rada P（2009）自然成瘾：基于大鼠糖成瘾的行为和电路模型。 J添加Med.3，33-41。 doi：10.1097 / adm.0b013e31819aa621
  376. 85。 张XY，Kosten TA（2005）哌唑嗪，一种α-1肾上腺素能拮抗剂，可减少可卡因诱导的寻求药物的复原。 Biol Psychiatry 57：1202-1204。 pmid：15866561 doi：10.1016 / j.biopsych.2005.02.003
  377. 86。 Blouet C，Schwartz GJ（2010）控制能量稳态的下丘脑营养感受。 Behav。 Brain Res 209：1-12。 doi：10.1016 / j.bbr.2009.12.024。 结论：20035790
  378. 87。 Coll AP，Farooqi IS，O'Rahilly S（2007）对食物摄入的激素控制。 Cell 129：251-262。 pmid：17448988 doi：10.1016 / j.cell.2007.04.001
  379. 88。 Dietrich M，Horvath T（2009）喂食信号和脑电路。 欧元。 J. Neurosci 30：1688-1696。 doi：10.1111 / j.1460-9568.2009.06963.x。 结论：19878280
  380. 89。 Rolls ET（2008）眶额和前体扣带皮层在味觉，嗅觉，食欲和情绪方面的功能。 Acta Physiol。 Hung 95：131-164。 doi：10.1556 / APhysiol.95.2008.2.1。 结论：18642756
  381. 90。 Avena NM，Bocarsly ME（2012）饮食失调中大脑奖励系统的失调：来自暴食，神经性贪食症和神经性厌食症的动物模型的神经化学信息。 神经药理学63：87-96。 doi：10.1016 / j.neuropharm.2011.11.010。 结论：22138162
  382. 91。 AlsiöJ，Olszewski PK，Levine AS，SchiöthHB（2012）前馈机制：暴饮暴食中的成瘾性行为和分子适应性。 前神经内分泌素33（2），127-139。 doi：10.1016 / j.yfrne.2012.01.002。 结论：22305720
  383. 92。 Hadad NA，Knackstedt LA（2014）沉迷于美味食物：将神经生物学神经生物学神经生物学与药物成瘾神经生物学进行比较。 精神药理学231：1897-912。 doi：10.1007 / s00213-014-3461-1。 结论：24500676
  384. 93。 Lenoir M，Serre F，Cantin L，Ahmed SH（2007）强烈的甜味超过可卡因奖励。 PLoS ONE 2：e698。 pmid：17668074 doi：10.1371 / journal.pone.0000698
  385. 94。 Petrovich GD，Ross CA，Holland PC，Gallagher M（2007）内侧前额叶皮层是食欲上下条件刺激所必需的，以促进在大鼠中进食。 J Neurosci 27：6436-6441。 pmid：17567804 doi：10.1523 / jneurosci.5001-06.2007
  386. 95。 Volkow ND，Wang GJ，Fowler JS，Telang F（2008）成瘾和肥胖中重叠的神经回路：系统病理学的证据。 Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci。 363：3191-3200。 doi：10.1098 / rstb.2008.0107。 结论：18640912
  387. 96。 Fallon S，Shearman E，Sershen H，Lajtha A（2007）食物奖励诱导的神经递质在认知大脑区域发生变化。 Neurochem Res 32：1772-1782。 pmid：17721820 doi：10.1007 / s11064-007-9343-8
  388. 97。 Wang GJ，Volkow ND，Thanos PK，Fowler JS（2004）通过神经功能成像评估肥胖和药物成瘾之间的相似性：概念回顾。 J Addict Dis 23：39-53。 pmid：15256343 doi：10.1300 / j069v23n03_04
  389. 98。 Schroeder BE，Binzak JM，Kelley AE（2001）接触尼古丁或巧克力相关情境线索后前额皮质激活的常见情况。 神经科学105：535-545。 pmid：11516821 doi：10.1016 / s0306-4522（01）00221-4
  390. 99。 Volkow ND，Fowler JS，Wang GJ（2003）上瘾的人类大脑：成像研究的见解。 J Clin Invest 111：1444-1451。 pmid：12750391 doi：10.1172 / jci18533