D'Dopamine-Rezeptor-Expression an d'Verdeelung änneren sech dynamesch an de Rassekrümmeren accumbens no der Ofkierzung vun der Kokain-Selbstverwaltung. (2010)

Protein Crosslinking

Dës Method gouf am Detail virdru beschriwwen (Boudreau a Wolf, 2005; Ferrario et al., 2010). D'Ratten goufen entkapéiert, hir Gehirer goufen séier ewechgeholl, an de ganze NAc (oder Kär- a Shell-Ënnerregiounen) gouf op Äis aus enger 2mm Coronal Sektioun dissected mat enger Gehirmatrix. Ganz NAc Tissue gouf direkt an 400μm Scheiwen gehackt mat engem McIllwain Tissuechopper (Vibratome, St. Louis, MO), wärend déi méi kleng Kär- a Shell-Ënnerregioune vun der Hand mat engem Skalpell gehackt goufen. Tissue gouf duerno an Eppendorf Tube bäigefüügt mat äiskale kënschtlechen CSF gespickt mat 2 mM bis(sulfosuccinimidyl)suberat (BS)³; Pierce Biotechnology, Rockford, IL). D'crosslinking Reaktioun war erlaabt fir 30 min bei 4 ° C mat sanft agitation weiderzegoen, a gouf dann duerch Additioun vun 100mM Glycin (10 min bei 4 ° C) ofgeschloss. Tissue gouf duerch kuerz Zentrifugéierung pelletéiert, an äiskale Lysis-Puffer mat Protease a Phosphatase-Inhibitoren nei suspendéiert, fir 5 Sekonnen sonciéiert an erëm centrifugéiert. Aliquots vun der supernatant sech bei -80 ° C gespäichert bis analyséiert vun Western blotting.

Western Blot Analyse vun DARs am vernetzten Tissu

Echantillon (20-30μg Ganzen Protein /lysat) sech op 4-15% Tris-HCl gels electrophoresed (Biorad, Hercules, CA). Proteine ​​sech op polyvinylidene fluoride Membran transferéierte fir immunoblotting benotzt konstante Stroum (1.15mA) fir 1.5 h. Eng Killspiral gouf benotzt fir exzessiv Heizung ze vermeiden. Komplett Transfert vun héich molekulare Gewiicht aggregates war vun staining gels bestätegt nom Transfert mat Coomassie blo. Ausserdeem hu mir verifizéiert datt vernetzt DAR Proteinen net am Stackinggel festgestallt goufen (Donnéeën net gewisen). Nom Transfert goufen Membranen an ddH gewäsch₂O, Loft-gedréchent fir 1 Stonn bei Raumtemperatur (RT), re-hydrated mat 100% MeOH, gewäsch an 1x Tris gebuffert Salins (TBS) an Taucht an 0.1M NaOH, pH 10 fir 15 min um RT. Duerno goufen se an TBS gewäsch, blockéiert mat 3% Bovine Serum Albumin (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) an TBS-Tween-20 (TBS-T), pH 7.4, fir 1 Stonn bei RT, an iwwer Nuecht inkubéiert bei 4 ° C mat Antikörper déi den D1 DAR erkennen (1:1000; Millipore; Cat # AB1765P), D2 DAR (1:1000; Millipore, Billercia, CA; Cat # AB5084P), an D3 DAR (1:1000; Millipore; Cat # AB1786P). D4 an D5 DARs goufen net analyséiert wéinst Mangel un Antikörper déi souwuel vernetzt an intrazellulär Rezeptoren erkennen. Et sollt bemierkt datt d'DAR Antikörper vill an dësen Experimenter benotzt goufen am 2005-06 kaaft; aktuell vill vun dësen Antikörper (2009-10) weisen verschidde Bandemuster déi net am Tissu vun DAR Knockout Mais geännert ginn (net publizéiert Observatiounen). No der primärer Antikörperinkubatioun goufen d'Membrane mat TBS-T Léisung gewäsch, fir 60 min inkubéiert mat HRP-konjugéierten Anti-Kanéngchen IgG oder Anti-Maus IgG (1:10,000; Upstate Biotechnology, Lake Placid, NY), mat TBS- gewascht T, mat ddH gespullt₂O, an Taucht an Chemilumineszenz detektéierende Substrat (Amersham GE, Piscataway, NJ). Nodeems de Blots entwéckelt goufen, goufen d'Biller mat Versa Doc Imaging Software (Bio-Rad) ageholl. Diffusen Dicht vun Uewerfläch an intrazelluläre Bands goufen mat Quantity One Software (Bio-Rad) bestëmmt. Wäerter fir Uewerfläch, intrazellulär an total (Uewerfläch + intrazellulär) Proteinniveauen goufen normaliséiert op Gesamtprotein an der Spuer, déi mat Ponceau S (Sigma-Aldrich) bestëmmt gouf an analyséiert mat TotalLab (Nonlinear Dynamics, Newcastle, UK). D'Uewerfläch / intrazellulär Verhältnis huet keng Normaliséierung erfuerdert, well béid Wäerter an der selwechter Spur bestëmmt ginn. Fir d'Antikörperspezifizitéit z'ënnersichen, goufen Preabsorptiounsstudien fir d'DAR Antikörper duerchgefouert mat dem Peptid dat benotzt gëtt fir all Antikörper ze generéieren. D1, D2 oder D3 DAR Antikörper gouf kombinéiert mat enger 10-fach Iwwerschoss vu Peptid an 500μl TBS, gemëscht fir 4 Stonnen bei 4 ° C, verdünnt op e Finalvolumen vun 20ml, bäigefüügt an d'Membran, an iwwer Nuecht inkubéiert. 4°C.

D1 DAR

Keng signifikant Differenzen tëscht Kokain a Salinsgruppen goufen op WD45 fonnt. Wéi och ëmmer, Effekter vun der Kokain Selbstverwaltung waren evident op WD1. Analyse vum gesamten NAc huet e wesentlech méi héije D1 DAR Uewerfläch / intrazellulär Verhältnis an der WD1-Coc Grupp ugewisen am Verglach mat Gruppen déi selbstverwaltend Salzsalz (Figur 2a). Dëst war zougeschriwwen zu enger bescheidener Erhéijung vun Uewerfläch D1 DARs kombinéiert mat enger bescheidener Ofsenkung vun intrazellulären D1 DARs (keng vun dësen zwee leschten Effekter waren statistesch signifikant), an der Verontreiung vun enger Ännerung am Gesamt D1 DAR Niveauen (Uewerfläch + intrazellulär) (Figur 2a). Am NAc Kär gouf kee signifikanten Effekt fir all D1 DAR Mooss fonnt (Fig. 2b). Wéi och ëmmer, d'NAc Shell huet Ännerungen ugewisen déi ähnlech waren wéi déi am ganze NAc observéiert awer liicht méi robust (Fig. 2c). D'Uewerfläch / intrazellulär D1 DAR Verhältnis gouf an der WD1-Coc Grupp erhéicht wéinst enger wesentlecher Erhéijung vum Uewerfläch D1 DAR Ausdrock. Intrazellulär Niveauen waren onverännert, awer et war en Trend zu verstäerkten D1 DAR Niveauen. Zesummegefaasst gouf e méi groussen Deel vum D1 DAR Protein Uewerfläch ausgedréckt an der NAc Shell vun WD1-Coc Ratten am Verglach mat WD1-Sal Ratten. D1 DAR Verdeelung ass zréck an de Kontrollstaat no 45 Deeg vum Réckzuch vu Kokain Selbstverwaltung.

Figebam. 2

D1 DAR Uewerfläch Ausdrock gouf an der NAc Shell erhéicht no 1 Dag vum Réckzuch vu Kokain Selbstverwaltung

D2 DAR

Am ganzen NAc war de beobachteten groussen Effekt reduzéiert D2 DAR Ausdrock bei Ratten, déi selbstverwalt Kokain am Verglach mat Salins Kontrollen (Figur 3a). Dëst war am meeschten ausgeschwat op WD45, wann Ofsenkungen an der Uewerflächeband observéiert goufen, all dräi intrazellulär Bands (~ 55, 75 an 100kDa), an am Ganzen D2 DAR Niveauen am Verglach mat Salinskontrollen. D'Uewerfläch / intrazellulär D2 DAR Verhältnis war liicht awer wesentlech eropgaang an der WD45-Coc Grupp, wéinst enger méi grousser Ofsenkung vun intrazellulärer wéi Uewerfläch D2 DARs, wat vläicht beweist datt d'Zellen kompenséieren fir de reduzéierten D2 DAR Ausdrock andeems se e méi groussen Deel vun verfügbaren verdeelen. D2 DARs op d'Uewerfläch. Et ass wichteg am Kapp ze halen datt den erhöhte Uewerfläch / intrazelluläre Verhältnis keng erhéicht D2 DAR Iwwerdroung an dësem bestëmmte Fall suggeréiert, well den absoluten Niveau vun Uewerfläch-ausgedréckt D2 DARs ofgeholl gouf. An der WD1-Coc Grupp war deen eenzege bedeitende Effekt eng Ofsenkung vun den intrazelluläre Niveauen vum D2 DAR Monomer (~ 55kDa), am Verglach mat béide WD45-Sal a WD1-Sal Gruppen, obwuel e puer aner Moossnamen och tendéieren ze reduzéieren (Figur 3a).

Figebam. 3

Intrazellulär an Uewerfläch D2 DAR Niveauen am NAc goufen no 45 Deeg vum Réckzuch vu Kokain Selbstverwaltung erofgeholl

Eng allgemeng Ofsenkung vum D2 DAR Ausdrock war och evident a Kär a Shell Ënnerregiounen vum NAc (Abb. 3b an 3c, respektiv), obwuel Effekter éischter méi ausgeschwat an der Schuel waren. Also hunn d'Uewerfläch D2 DAR Niveauen a Kokain Ratten erofgaang nëmmen op WD45 am Kär, awer op WD1 an WD45 an der Schuel. Total D2 DARs sinn erheblech erofgaang nëmmen an der Shell. Ofsenkungen vun intrazellulären D2 DAR Bands sinn op béide Réckzuchsdeeg a béid Kär a Shell opgetrueden, obwuel et Réckzuchs- a Regiounspezifesch Differenzen am Sënn vun deem intrazelluläre Band e statistesch signifikanten Effekt huet. Zesummegefaasst goufen D2 DAR Uewerfläch an intrazellulär Proteinniveauen am NAc no der Kokain Selbstverwaltung ofgeholl. E puer Ofsenkungen ware scho vum WD1 evident.

D1 DAR Uewerflächenausdrock erhéicht transient an der NAc Schuel nodeems d'Kokain Selbstverwaltung gestoppt gouf

No der Kokain Selbstverwaltung gouf den D1 DAR Surface Ausdrock an der NAc Shell op WD1 erhéicht, awer normaliséiert duerch WD45, wärend keng Verännerungen am Kär observéiert goufen, wat eng transient Erhéijung ugeet, déi op d'Schuel beschränkt ass. Ähnlech Resultater goufen a fréiere Studien mat Rezeptor Autoradiographie kritt. Ben-Shahar et al. (2007) fonnt erhéicht D1 DAR Dicht an der NAc Schuel vu Ratten 20 min (awer net 14 oder 60 Deeg) nodeems se verlängert Zougang (6 Stonnen / Dag) Kokain Selbstverwaltung gestoppt hunn, wärend keng Ännerungen am Kär oder no kuerzen Zougang Kokain Selbstbeobachtung goufen. - Administratioun (2 Stonnen / Dag). Nader et al. (2002) beobachtet eng kleng Erhéijung vun der D1 DAR Dicht an der Schuel awer net Kär vu Rhesus Affen ëmbruecht no der leschter vun 100 Kokain Selbstverwaltungssessiounen. Monkeys evaluéiert 30 Deeg no der Stéierung vum selwechte Regime weisen eng erhéicht D1 DAR Dicht am rostral NAc an a béid Kär a Shell op méi caudal Niveauen, awer D1 DAR Dicht war duerch 90 Deeg normaliséiert (Beveridge et al., 2009). All dës Resultater, wéi eis, weisen op eng transient Erhéijung vun den D1 DAR Niveauen, besonnesch an der Schuel, nodeems d'Kokain Selbstverwaltung gestoppt gouf. Wéi och ëmmer, eng fréier Studie vun dëser Grupp huet eng Ofsenkung vun der D1 DAR Dicht an der NAc (stäerkste robust an der Schuel) vun Rhesus Affen uginn, déi sech selwer Kokain fir eng vill méi laang Zäit (18 Méint) verwalt hunn; Moore et al., 1998). Verréngert D1 DAR Bindung an der NAc gouf och 18 Stonnen fonnt nodeems en erweiderten Zougangsregime bei Ratten gestoppt gouf, obwuel d'total Kokainopnahm an dëser Etude méi héich war wéi an de Rattenstudien hei uewen diskutéiert (De Montis et al., 1998). Dës Resultater weisen datt D1 DAR Adaptatiounen ofhängeg vu villen Aspekter vun der Kokainbelaaschtung. Eng aner Considératioun ass datt d'Rezeptor Autoradiographie total cellulär Rezeptoren moosst, wärend eis Protein Crosslinking Experimenter tëscht Uewerfläch an intrazelluläre Rezeptoren z'ënnerscheeden. Interessanterweis huet eng Immunoblotting-Studie en Trend fir erhéicht D1 DAR Niveauen am NAc vu mënschleche Kokain Benotzer fonnt (Worsley et al., 2000).

Ass déi transient Erhéijung vum D1 DAR Uewerflächenausdrock, dee mir an der NAc Shell observéiert hunn, wichteg fir d'Inkubatioun vum cue-induzéierte Kokain Verlaangen? Dëst ass schwéier ze bewäerten, well keng Studien den Effet vun der intra-NAc Injektioun vun D1 DAR Agonisten oder Antagonisten op cue-induzéierte Kokain getest hunn, deen nom Heem-Käfeg-Entzug sicht (oder cue-induzéiert Erhuelung vu Kokain sicht no Ausstierwen Training). Wéi och ëmmer, D1 Rezeptoren am medialen NAc (Shell a medial Kär) sinn an der Kokain-priméierter Erhuelung vu Kokain implizéiert, déi no Ausstierwen sicht, anscheinend duerch e Mechanismus deen eng kooperativ Aktivatioun vun D1 an D2 DARs erfuerdert (Anderson et al., 2003; 2008; Bachtell et al., 2005; Schmidt an Pierce, 2006; Schmidt et al., 2006). Zesumme mat eise Resultater kéint dëst virschloen datt Neuronen an der NAc Shell méi reaktiounsfäeger sinn op D1 DAR-mediéiert Kokain, déi am fréie Réckzuch sichen wéinst transienten D1R Upregulatioun. Wéi och ëmmer, Virsiichteg muss benotzt ginn bei der Extrapolatioun vun der Erhuelung op d'Inkubatiounsstudien, well Ausstierwentraining an d'Hauskäfeg Réckzuch mat verschiddenen Neuroadaptatiounen am NAc assoziéiert sinn (Sutton et al., 2003; Ghasemzadeh et al., 2009; Wolf & Ferrario, 2010). Et ass wichteg ze bemierken datt D1 DARs an der basolateraler Amygdala a prefrontaler Cortex och wichteg sinn fir cue-induzéiert Erhuelung vu Kokain Sich (zB, Ciccocioppo et al., 2001; Alleweireldt et al., 2006; Berglind et al., 2006).

Op engem celluläre Niveau kënne béid presynaptesch a postsynaptesch DARs d'Excitabilitéit vu mëttlere spiny Neuronen moduléieren, de predominant Zelltyp an Ausgangsneuron vum NAc (Nicola et al., 2000; O'Donnell, 2003). Widderholl net-kontingent Kokainverwaltung ass bekannt fir e puer Effekter vun der D1 DAR Aktivatioun am NAc ze verbesseren. Also, een Dag bis ee Mount no der Ofsenkung vun der Kokainbehandlung, gouf verstäerkt Fäegkeet vun D1 DAR Agonisten fir d'Aktivitéit vu mëttleren spiny Neuronen (gedriwwen duerch iontophoretescht Glutamat) am ganzen NAc observéiert (Heinrich a Wäiss, 1991; 1995). Wéi och ëmmer, de verstäerkten D1 DAR Uewerflächenausdrock hei gemellt ass onwahrscheinlech dës fréier Resultater z'erklären, well et ass limitéiert op d'Schuel an ass nëmmen op WD1 bewisen. Een Dag no enger Kokain Erausfuerderung verwalt 10-14 Deeg no der Stopp vun widderholl Kokain Injektiounen, Beurrier & Maleka (2002) beobachtet eng Verbesserung vun DA-mediéierten Inhibitioun vun excitatoreschen synaptesche Reaktiounen an NAc mëttleren spiny Neuronen, déi anscheinend duerch presynaptesch D1-ähnlech DARs op Glutamat Nerve Terminals vermëttelt goufen. Wéi och ëmmer, méiglech Effekter vun der Erausfuerderungsinjektioun (zum Beispill, kuckt Boudreau et al., 2007 an Kourrich et al., 2007), kombinéiert mat Arten Differenzen a Mangel un Opzeechnungen am Kär, maachen et schwéier hir Erkenntnisser mat eisen eegenen ze vergläichen. Et sollt och bemierkt ginn datt d'DAR Agonisten an Antagonisten benotzt vun Henry and White (1991).; 1995) an Beurrier & Malenka (2002) huet net tëscht D1 an D5 DARs ënnerscheet.

D2 DAR Niveauen erofgoen am NAc no der Ofhängegkeet vun der Kokain Selbstverwaltung

Den Haapteffekt, deen an eiser Studie beobachtet gouf, war eng Ofsenkung vum D2 DAR Protein a béid NAc Kär a Shell nodeems d'Kokain Selbstverwaltung gestoppt gouf, relativ zu Salinskontrollen. Dëst war méi ausgeschwat an der Schuel, wou intrazellulär, Uewerfläch an total Bands op béide WD1 an WD45 ofgeholl goufen. Am Kär war D2 DAR Uewerfläch Ausdrock nëmmen op WD45 erofgaang an total D2 DAR Niveauen sinn net wesentlech erofgaang. Verschidde aner Studien hunn ähnlech reduzéiert D2 DAR Ausdrock fonnt nodeems d'Kokain Selbstverwaltung gestoppt gouf. Bei Rhesus-Affen mat extensiv Kokain Selbstverwaltungserfahrung, D2 DAR Dicht, gemooss mat Rezeptor Autoradiographie, gouf a ville striatal Regiounen erofgaang, dorënner NAc Kär a Schuel, wann Tissu direkt no der leschter Sessioun kritt gouf (Moore et al., 1998b; Nader et al., 2002). Mat PET gouf dësen Effekt an de Basalganglien bannent 1 Woch no der Start vun der Kokain Selbstverwaltung festgestallt (Nader et al., 2006). Den Taux mat deem den D2 DAR Niveauen sech während dem Réckzuch erholen kann vun der totaler Kokainkonsum ofhänken. An enger Autoradiographiestudie, D2 DAR Niveauen am NAc erholl fir Wäerter ze kontrolléieren no 30 oder 90 Deeg vum Réckzuch vun 100 Sessiounen vu Kokain Selbstverwaltung (Beveridge et al., 2009). Wéi och ëmmer, an enger PET-Studie vun Affen mat méi laanger Belaaschtung (1 Joer) an domat méi héijer totaler Kokainopnahm, 3 vu 5 Aaffen hunn d'Erhuelung vun D2 DAR Niveauen no 90 Deeg gewisen, während 2 Affen keng Erhuelung gewisen hunn och no 12 Méint (Nader et al., 2006). Am Allgemengen entspriechen dës Resultater gutt mat eise Befunde vu reduzéierten D2 DAR Niveauen am ganze Réckzuch.

PET Studien vu mënschleche Kokain Sucht hunn och reduzéiert D2 DAR Niveauen a ville striatal Regiounen fonnt, dorënner ventral Striatum, déi evident waren am fréie Réckzuch wéi och no 3-4 Méint Entgiftung (Volkow et al., 1990, 1993, 1997). Wéi och ëmmer, d'Bedeitung fir Verhalen ass onkloer, well d'D2 DAR Disponibilitéit net mat positiven subjektiven Effekter vu Kokain korreléiert huet oder d'Entscheedung méi Kokain ze huelen no enger Primerdosis (Martinez et al., 2004). Et ass wichteg ze bemierken datt wärend cue-induzéiert Kokain Verlaangen eng Zäit-ofhängeg Erhéijung wärend dem Réckzuch weist ("Inkubatioun"), dëst geschitt net fir Kokain-priméiert Kokain sichen (Lu et al., 2004a). Dofir, d'Resultater vun Martinez et al. (2004) Loosst d'Méiglechkeet opmaachen datt D2 DAR Verfügbarkeet mat cue-induzéierter Kokain-Sich korreléiere kéint, de Fokus vum Inkubatiounsmodell hei studéiert. Niddereg D2 DAR Disponibilitéit bei mënschleche Kokain Benotzer korreléiert mat verréngert frontal kortikale Metabolismus (Volkow et al., 1993). Zesumme mat anere Verännerungen, kann dëst zum Verloscht vun der Kontroll bäidroen, deen optrieden wann Ofhängegkeeten un Drogen oder Drogen-gepaart Zeechen ausgesat sinn, an zu enger méi grousser Salience vun Drogen am Verglach mat Net-Droge Belounungen (Volkow et al., 2007; Volkow et al., 2009). Et sollt bemierkt datt verréngert D2 DAR Niveauen an enger PET-Studie eng erhöhte DA Verëffentlechung uginn anstatt ofgeholl D2 DAR Niveauen, awer rezent Resultater streiden géint dës Erklärung am Fall vu Kokain-ofhängeg Patienten (Martinez et al., 2009). Ausserdeem huet eng postmortem Studie vu mënschleche Kokain Benotzer e Trend zu reduzéierten D2 DAR Niveauen am NAc mat Hëllef vun Immunoblotting fonnt (Worsley et al., 2000).

Studien a mënschleche Kokain-Süchte kënnen net bestëmmen ob d'verréngert D2 DAR Disponibilitéit e predisponéierende Charakter ass oder e Resultat vun der Kokainbelaaschtung, awer aner Resultater weisen datt béid richteg sinn. Engersäits, Experimenter an net Drogenmëssbrauch Mënschen hunn eng ëmgedréint Korrelatioun tëscht D2 DAR Disponibilitéit a Berichter vun "Drogen gär" fonnt wann Methylphenidat verwalt (Volkow et al., 1999; 2002). Dës Erkenntnisser suggeréieren datt eng niddereg D2 DAR Disponibilitéit d'Schwachheet fir Sucht erhéijen kann. Eng ähnlech Conclusioun gëtt duerch Studien bei Rhesus-Affen ënnerstëtzt. A sozial gehal Aaffen erhéicht d'Erreeche vu sozialer Dominanz D2 DAR Verfügbarkeet am Striatum an dëst ass mat enger niddereger Sensibilitéit fir d'verstäerkend Effekter vu Kokain verbonnen am Verglach mat ënnergeuerdnete Affen (Morgan et al., 2002). De soziale Status ass och korreléiert mat der striataler D2 DAR Disponibilitéit bei Drogenfräie mënschleche Fräiwëlleger (Martinez et al., 2010). Op der anerer Säit, souwuel PET wéi och Rezeptor Autoradiographie Studien weisen datt laangfristeg Kokain Selbstverwaltung d'Striatal D2 DAR Rezeptor Verfügbarkeet an individuell gelagert Aaffen reduzéiert, wéi uewen diskutéiert (Moore et al., 1998b; Nader et al., 2002; Nader et al., 2006). Chronesch Kokain Selbstverwaltung schéngt och D2 DAR Verfügbarkeet an dominante sozial gehal Affen ze reduzéieren (Czoty et al., 2004). Also, no laangfristeg Kokain Selbstverwaltung, waren et keng bedeitend Differenzen méi an der D2 Rezeptor Disponibilitéit oder Verstäerkung Effekter vu Kokain tëscht dominanten an ënnergeuerdnete Affen (Czoty et al., 2004). Wéi och ëmmer, erhéicht D2 DAR Niveauen hu sech an den dominante Aaffen während der Abstinenz erëmfonnt an dëst war korreléiert mat méi laanger Latenz an der Reaktioun op Neiheet, e Charakter, dee viraussoe vu reduzéierter Sensibilitéit fir d'Verstäerkungseffekter vum Kokain (Czoty et al., 2010).

Wéi bei Mënschen an Affen, weisen Rattenstudien datt eng niddreg D2 DAR Disponibilitéit e Risikofaktor fir Kokain Schwachstelle ass. Also, PET Studien bei Ratten mat héijer Impulsivitéit (eng Eegeschaft ass verbonne mat enger verstäerkter Kokain Selbstverwaltung) weisen reduzéierter D2 / D3 DAR Disponibilitéit am ventralen Striatum (Dalley et al., 2007). D2 DAR Niveauen am NAc ginn och bei Ratten reduzéiert, déi eng héich Lokomotorreaktioun op Neiheet weisen, eng aner Trait ass verbonne mat Sucht Schwachstelle (Hooks et al., 1994). Eis Resultater bei Ratten weisen datt verréngert D2 DAR Niveauen am NAc och eng Konsequenz vu widderholl Kokainbelaaschtung kënne sinn, konsequent mat Studien an Affen a Mënschen (uewen). Wéi och ëmmer, zwee Rezeptor Autoradiographie Studien bei Ratten hunn Resultater fonnt, déi vun eis ënnerscheeden. Ben-Shahar et al. (2007) hunn net ofgeholl D2 DAR Niveauen am NAc no Réckzuch (20 min, 14 Deeg vun 60 Deeg) vun engem erweiderten Zougang Kokain Selbstverwaltungsregime ähnlech wéi eis (6 Stonnen / Dag) observéiert, obwuel Ofsenkungen an der NAc Shell observéiert goufen no engem limitéierten Zougangsregime (2 Stonnen / Dag) a 14 Deeg vum Réckzuch (Ben-Shahar et al., 2007). Stefanski et al. (2007) fonnt keng Verännerungen am D2 DAR Niveauen am Kär oder Shell 24 Stonnen no der Ofsenkung vun der limitéierter Zougang Kokain Selbstverwaltung (2 Stonnen / Dag), obwuel D2 DAR Niveauen an de Joch Kokain Kontrollen erofgaange sinn. Wéi uewen ernimmt, moosst d'Rezeptor Autoradiographie total cellulär Rezeptoren, während PET a Protein Crosslinking Studien Zelloberfläche Rezeptoren moossen.

Allgemeng Studien iwwer d'Relatioun tëscht D2 DAR Niveauen a Kokain Selbstverwaltung ënnerstëtzen e Modell, an deem D2 DARs normalerweis d'Kokain Selbstverwaltung limitéieren. Dofir proposéiere mir datt d'verréngert D2 DAR Niveauen, déi an eisen Experimenter beobachtet ginn, zum cue-induzéierte Kokain bäidroe kënnen, deen nom Kokain-Entzug sicht. Besonnesch d'Tatsaach datt D2 DAR Uewerfläch Ausdrock am NAc Kär op WD45 awer net WD1 ofgeholl gouf, kombinéiert mat enger Schlësselroll fir NAc Kär an cue-induzéierter Kokain Sich, suggeréiert datt Zäit-ofhängeg D2 DAR Downregulatioun am NAc Kär kann bäidroe fir d'Zäit-ofhängeg Intensivéierung vun der cue-induzéierter Kokain Sich. Dëst géif virauszesoen datt d'Intra-NAc Infusioun vun engem D2 Agonist wärend dem Réckzuch géif cue-induzéiert Kokain Sich reduzéieren. Leider hu keng Studien Effekter vun intra-NAc D2 DAR Drogen am Inkubatiounsmodell iwwerpréift. Op der anerer Säit, Studien vu Kokain-priméierte Wiederherrschung weisen datt D1 an D2 DARs an der Schuel a medialen Kär kooperativ schaffen fir Kokain Sich ze förderen (Anderson et al., 2003; Bachtell et al., 2005; Schmidt an Pierce, 2006; Schmidt et al., 2006). Baséierend op dës Erkenntnisser kann de reduzéierten D2 DAR Ausdrock, deen an eisen Experimenter observéiert gëtt, virausgesot ginn fir d'Kokain Sich ze reduzéieren, dat heescht en Effekt ze produzéieren am Géigesaz zu der Réckzuchsofhängeger Intensivéierung déi tatsächlech observéiert gëtt. D'Diskrepanz kann d'Problemer reflektéieren, déi agefouert ginn duerch Generaliséierung vu Kokain-priméierte Wiederherrschung nom Ausstierwen Training op cue-induzéiert Kokain, déi nom Réckzuch sichen.

Eng Zäit-ofhängeg Erhéijung vum D3 DAR Uewerflächenausdrock geschitt am NAc Kär nom Ofbau vun der Kokain Selbstverwaltung

Studien vun D3 DAR-virléiften Drogen an der Kokain Selbstverwaltung a Wiederherrschungsparadigmen suggeréieren datt D3 DAR Antagonisten nëtzlech kënne bei der Behandlung vu Kokain Sucht a besonnesch bei der Reduktioun vun der Reaktivitéit op Kokain-assoziéiert Zeechen (Heidbreder et al., 2005;; 2008; Le Foll et al., 2005; Xi an Gardner, 2007). Dës Resultater implizéieren datt d'Aktivatioun vum D3 DAR duerch endogene DA ka bei der Vermëttlung vu cue-induzéierter Kokain-Sich involvéiert sinn. Eis Resultater weisen datt D3 DAR Uewerfläch Ausdrock am NAc Kär onverännert ass op WD1 vun erweiderter Zougang Kokain Selbstverwaltung awer erhéicht op WD45 a Verbindung mat der Inkubatioun vu Kokain Verlaangen. D3 DAR Uewerfläch Ausdrock huet net vill an der Réibau Erhéijung, obwuel et eng kleng awer bedeitendst Erhéijung vun der Uewerfläch / intracellular Verhältnis war. Gitt d'Roll vun der D3 DAR Iwwerdroung bei der Äntwert op Kokain-assoziéiert Zeechen an d'Wichtegkeet vum Kär fir cue-induzéiert Kokain Sich, et ass verlockend ze spekuléieren datt d'Erhéijung vun D3 DAR Uewerflächenausdrock am NAc Kär zu der Inkubatioun vum cue-induzéierten Kokain bäigedroen huet. Verlaangen, déi op WD45 observéiert gëtt. Wéi och ëmmer, den neurale Site op deem D3 DAR Antagonisten handelen fir Kokain Sich ze reduzéieren ass net etabléiert. Speziell hu keng Studien den Effekt vun der intra-NAc Injektioun vun D3 DAR iwwerpréift, déi Drogen op cue-induzéierter Kokain sichen. An engem anere Modell, Schmidt et al. (2006) fonnt datt d'Injektioun vum D3-bevorzugten Agonist PD 128,907 an de Kär oder d'Schuel keng Erhuelung vu Kokain produzéiert huet no Ausstierwen Training.

Eis Resultater sinn allgemeng konsequent mat Rezeptor Autoradiographie Studien déi total D3 DAR Niveauen am NAc no Kokainbelaaschtung gemooss hunn. Staley and Mash (1996) gemellt datt D3 DAR Bindung méi héich war an der NAc vu Kokain Iwwerdosis Affer am Verglach mat Altersmatcher Kontrollen. No der Belaaschtung vu Kokain an engem bedingte Plazpräferenzparadigma an dräi Deeg Réckzuch hunn d'Mais eng verstäerkte D3 DAR Bindung am NAc Kär a Schuel gewisen (Le Foll et al., 2002). Neiswander et al. (2004) gemooss D3 DAR Bindung bei Ratten mat extensiv Kokain Selbstverwaltungserfahrung, déi fir Kokain-priméiert Wiederherrschung no verschiddene Réckzuchsperioden getest goufen an duerno 24 Stonnen méi spéit ëmbruecht goufen. D3 DAR Bindung am NAc war onverännert op WD1 awer erhéicht no enger méi laanger Zäit (WD31-32), konsequent mat eiser Observatioun vun enger Zäit-ofhängeger Erhéijung. Ausserdeem huet eng Drogenbehandlung während dem Réckzuch, déi d'Kokain Sich reduzéiert huet, och d'Erhéijung vun der D3 DAR Bindung ofgeschwächt, wat suggeréiert datt d'D3 DAR Upregulatioun funktionell mat der Kokain Sich ass. Et sollt bemierkt datt D3 DAR eropgeet Neiswander et al. (2004) ware bedeitend am Kär wärend nëmmen Trends an der Shell observéiert goufen, awer d'Ënnerregiounen goufen an engem rostralen Deel vum NAc analyséiert, wou Kär a Schuel manner ënnerscheed sinn. Eis Analyse gouf op Kär a Shell aus rostralen a caudale Portiounen vum NAc gemaach.

Dës Aarbecht gouf ënnerstëtzt vum DA009621, DA00453 an engem NARSAD Distinguished Investigator Award fir MEW, DA020654 zu MM, a predoctoral National Research Service Award DA021488 un KLC