Sucrose Ingestion Induéiert Rapid AMPA Receptor Trafficking (2013)

J Neurosci. Auteur Handschrëft; am PMC Oct 3, 2013.
Verëffentlecht am endgeleformt Form wéi:
D'final verännert Versioun vum Verlag vun dësem Artikel ass gratis verfügbar op J Neurosci
Kuckt aner Artikelen an PMC dat ze verëffentlechen den publizéierten Artikel.

mythologesch

Déi Mechanismen, duerch déi natierlech Belounungen wéi Zocker synaptesch Iwwerdroung a Verhalen beaflossen sinn haaptsächlech net exploréiert. Hei, ënnersichen mir d'Reguléierung vun Nukleus accumbens Synapsen duerch Sackarosintake. Virdrun Studien hu gewisen datt AMPA Rezeptorhandel e grousse Mechanismus ass fir synaptesch Kraaft ze regelen, an dat kënschtlech, den Handel vun AMPA Rezeptoren enthält de GluA1 Ënnerdeelung fënnt vun engem Zwee-Schrëtt Mechanismus mat extrasynapteschen an duerno synapteschen Rezeptortransport statt. Mir berichten dat a Rat, wiederhuelend deeglech Ernärung vun enger 25% sucrose Léisung transiently erhéicht spontaner Lokomotioun a potenzéierter accumbens Kär Synapses duerch Inkorporatioun vu Ca2+-permeabel AMPA Rezeptoren (CPARs), déi GluA1 enthalen, GluA2-fehlend AMPA Rezeptoren. Elektrophysiologesch, biochemesch a quantitativ Elektronenmikroskopie Studien hunn erginn datt Saccharose Training (7 Deeg) e stabilen (> 24 Stonnen) intraspinösen GluA1 Bevëlkerung induzéiert huet, an datt an dëse Ratten een eenzege Saccharose Reiz séier (5 min) awer transient (<24 Stonnen) erhéicht GluA1 op extrasynaptesche Site. CPARs an Dopamin D1 Rezeptoren ware gefuerdert in vivo fir erhéngte Lokomotioun no der Sachrose-Intéierung. Wichteg ass en 7-Deeg Protokoll vun der deeglecher Ernärung vun enger 3% Léisung vu Saccharin, engem net-kaloresche Séisser, induzéiert synaptesch GluA1 ähnlech wéi 25% Sackrose-Intéierung. These Befunde identifizéiere Multi-Schrëtt GluA1 Trafik, virdru beschriwwen kënschtlech, als Mechanismus fir akuter Reguléierung vun synaptescher Iwwerdroung an vivo duerch eng natierlech orosensoresch Belounung. Trafficking gëtt stimuléiert duerch e chemosensoresche Wee, deen net ofhängeg ass vum kaloresche Wäert vun der sucrose.

Aféierung

Sucrose Iwwerverbrauch ass e wesentleche Gesondheetsprobleem (Hu a Malik, 2010), awer d'Mechanismen, duerch déi natierlech, orosensoresch Belounungen wéi d'Sackarose synaptesch Iwwerdroung regelen fir Verhalen ze beaflossen sinn net bekannt. Synaptesch Plastizitéit an den nucleus accumbens, en integralen Komponent vum Gehir Belounungskreeslaf (Sesack a Gnod, 2010), dréit zu ville Forme vu motivéiertem Verhalen bäi, abegraff BelounungsléierenDay an Carelli, 2007), Äntwerten op soziale Stress (LaPlant et al., 2010), an Ofhängegkeet Pathologien (Luscher a Malenka, 2011). Widderholl Kokain Expositioun verursaacht synaptesch Plastizitéit an Neuronen vun den Accumbens an der ventrale tegmental Regioun (VTA) (Brebner et al., 2005; Grueter et al., 2010; Mameli et al., 2009; Pascoli et al., 2012; Thomas et al., 2001; Onglécklech et al., 2001). Op verlängerten Zougang Kokain Selbstverwaltung gefollegt vu längerem Réckzuch, sinn Synapsen potentéiert duerch d'Inkorporatioun vu Ca2+-permeabel, GluA2-fehlend AMPA-Typ Glutamat Rezeptoren (CPAR), deenen hir Signaléierung Inkubatioun vu Kokain-Verlaangen meditéiert (Conrad et al., 2008; McCutcheon et al., 2011a). Ähnlech wéi Kokain, orosensoresch Erléisungen wéi sucrose robustly erhéijen accumbens Dopamin (Smith, 2004), awer orosensoresch Belounungsinduktioun vun accumbens Plastizitéit ass net ënnersicht ginn.

AMPA Receptoren (AMPARs) si primär Mediators vun der excitatorescher Iwwerdroung vum Zentralnervensystem, an hiren Traffik bäidréit zu verschiddenen neuralen Prozesser, dorënner Léieren an Erënnerung (Nedelescu et al., 2010; Rumpel et al., 2005; Whitlock et al., 2006). AMPARs besteet aus véier verschidden Ënnerunitéiten, GluA1-4. GluA2-enthale AMPARs si Ca2+-imperméierbar a Verkéier konstitutiv op Synapses, wärend GluA2-Mangel u Rezeptoren (CPAR), déi haaptsächlech GluA1 Homomere sinn, féieren Ca2+ a weisen Auswäertung no baussen. GluA1 mécht eng Aktivitéit-ofhängeg Synaptesch Traffik duerch eng Zwee-Schrëttweeër, an där Ser 845 Phosphorylatioun duerch cAMP-ofhängeg Proteinkinase (PKA) an cGMP-ofhängeg Proteinkinase II (cGKII) fördert Rezeptorakkumulation op extrasynaptesche Site an der Plasma Membran (Esteban et al., 2003; Serulle et al., 2007; Sonn et al., 2008; Sonn et al., 2005). No der lateraler Diffusioun zu der Synapse stabiliséiert d'Fosforylatioun vum Ser 818 duerch PKC AMPARs bannent der Synapse (Boehm et al., 2006), verankert mat der postsynaptescher Dicht (Ehlers et al., 2007; Oh et al., 2006; Serulle et al., 2007). Ca2+/ calmodulin-ofhängeg Protein Kinase II (CaMKII) Phosphorylatioun vu Ser 567 a Ser 831 dréit och zur synaptescher Inkorporatioun an der extrasynaptescher Zielung (Lu et al., 2010; Roche et al., 1996), respektiv. Et ass awer net bekannt ob an vivo der Integratioun vu CPARs beschäftegt dës séier, Multi-Step Mechanismen beschriwwen kënschtlech.

Fir d'Mechanismen ze ënnersichen, duerch déi orosensoresch Belounungen wéi sucrose regléieren accumbens excitatory Synapses, hu mir e Paradigma vun der kuerzer Sukrose Ernierung agesat a gemoossene Verännerunge vun der synaptescher Iwwerdroung an den accumbens Neuronen. Mir beobachten datt wiederhuelend Sukrose-Ernierung potenzéiert d'Accumbens Synapses duerch Inkorporatioun vu CPARs, an datt an engem sucrose-trainéierte Déier, een eenzegen sucrose Stimulus ass genuch fir séier GluA1 Traffik op extrasynaptesche Site ze induzéieren. Well Saccharin, en net-kaloresche Séisser, induzéiert synapteschem Verkéier ähnlech wéi sucrose, ass den Handel eng Äntwert op orosensoresch anstatt kaloresch Weeër. Ausserdeem huet d'CPAR-Blockade verhënnert datt sukros-induzéiert Héichten vun der spontaner Lokomotorescher Aktivitéit an vivo, weider z'identifizéieren accumbens CPAR als wichteg Reguléierer vun Äntwerte op natierlech Belounungen.

Materialien an Methoden

Sujeten a chirurgesch Prozeduren

D'Sujete ware männlech Sprague-Dawley Ratten (Taconic; Verhalensexperimenter), déi 150 – 300 Gramm bei der Arrivée weien an weiblech E18 schwanger Sprague-Dawley Ratten (Taconic; Zellkultur Experimenter). D'Rotter goufe 2 pro Käfeg fir behuelen Experimenter an engem 12h / 12h Liicht-donkel Zyklus (Luuchten aus bei 18: 00) gehuiselt an haten Zougang zu Iessen a Waasser ad libitum zu allen Zäiten. All experimentell Prozedure goufen vun der New York University School of Medicine Institutional Animal Care and Use Committee guttgeheescht a goufen am Aklang mat de "Prinzipien vun Laboratoire Déierenfleeg" (NIH Verëffentlechungsnummer 85 – 23) ausgefouert.

Sukros Training a Lokomotoresch Moossen

Ratten goufen an den Testraum 3 verfollegen Deeg fir 2 h / Dag an hiren Heembarren. Op de véierten Dag goufen Fläschen mat Waasser oder 25% Succose duerch de Käferdeckel fir 5 min agefouert. Fläsch goufen dann gewäsch. Fir all Experimenter waren Ratten erfuerderlech op d'mannst 1 g Sackarose während dem 5 min Zougank bannent 3 Deeg vum Training unzefänken fir an der Studie abegraff ze ginn; tatsächlech hunn all Ratten dëse Kritär erfëllt. No der Entfernung vu Flasche blouf Ratten am Testraum fir 30 min virum Transport zréck an d'Déiere-Anlag. Op den Opferdag goufe Ratten bewosst vum CO gemaach2, entlooss duerch Guillotin, an Tissueprobe goufen op Äis gesammelt. Fir Lokomotor Experimenter goufe Ratten an Lokomotoresch Miesskamele geluecht (Accuscan, Columbus, OH) fir insgesamt 35-min. Nom 15-min an der Chamber gouf eng Fläsch mat engem Perlenstopp duerch den Uewen vun der Chamber agefouert a stabiliséiert. D'Fläsch gouf no der 5-min aus der Spëtzt vun der Chamber geläscht, an d'Rotter goufe an der Chamber fir eng zousätzlech 15-min no der Entfernung vun der Fläsch. Dës Prozedur gouf fir 7 noeneen identesch widderholl. Reese Streck gouf gemooss mat dem VersaMax System (Accuscan, Columbus, OH), deen d'Déierenaktivitéit iwwer e Gitter vun 16 × 16 Infrarout Liichtstrahlen iwwerwaacht, déi d'Dierkëscht duerchbléien (42 × 42 × 30 cm) viru vir bis zréck a vu lénks op riets An. Informatioun iwwer Beamstatus, gescannt mat engem Taux vun 100 Mol pro Sekonn, gouf op Disk gespäichert. Aktivitéit gouf ausgedréckt wéi ambulant Distanz gemooss a cm wärend 12 verschidden 3-min Dréi an enger 35 min Sessioun (d'Finale Bin war 2-min).

Saccharin Training

Fir sucrose-induzéierter Trafficking vu GluA1 mat den Auswierkunge vun der Saccharin Ernährung ze vergläichen, goufen 12 erwuesse männlech Ratten (250 g) an der Dierfassung op engem 12 Stonnen Liicht / donkel Zyklus gehuisst. All Ratten goufen dunn an den Testraum gewunnt andeems se an den Testraum transportéiert goufen, fir 2 Stonnen fortgaange waren, an zréck an d'Déiere-Ariichtung transportéiert ginn. Ee den 4ten Dag (no 3 Deeg vun der Bewunnung), goufe Ratten Zougangsflaschen mat enthalen, Waasser, sucrose oder saccharin. 4 Ratten kruten Zougang zu enger Flasche mat Waasser mat Uewen an der Käfig mat der Spëtz, déi an de Käfig duerch de Deckel aussteet. D'Zougangszäit war 5 Minutten, duerno ass d'Flasche geläscht ginn, an no 15 min zousätzlech Minutten goufe Ratschten zréck an d'Dierfabréck transportéiert. 4 Ratten kruten Zougang zu 25% sucrose Léisung an 4 Ratten kruten Zougang zu 3% Saccharin Léisung (Sweet'n Low). De Volume vun der verbrauchte Flëssegkeet gouf gemooss. Dës Prozedur gouf fir 7 Deeg widderholl. Op den 7th Dag vum Drénken, direkt no der Entfernung vu Flaschen, goufen Ratten geaffert an den accumbens Kär gouf geernt an d'GluA1 Niveauen goufe vum Western blot gepréift.

Elektrophysiologie

Ratten goufen als sucrose trainéiert wéi hei uewen an kloerem Plastikskäfeg beschriwwen an, no Fläschentfernung am Dag 7, goufe mat Ketamin (100 mg / kg ip) an Xylazin (10 mg / kg ip) an transkardiell mat kale Salz gespaut (mEPSC Experimenter) oder direkt entfouert (Rektificatiounsexperimenter). Gehirer goufen séier a künstlech zerebrospinal Flëssegkeet (ACSF) geläscht, bestanen aus de folgenden (an mM): fir mEPSC Experimenter: NaCl (118), KCl (2.5), CaCl2 (3), MgCl2 (1), NaHCO3 (26), NaH2PO4 (1), D-Glukos (10), Osmolaritéit ugepasst op 325 mOsm a beliicht duerch 95% O2/ 5% CO2 (pH 7.4); fir Rektificatiounsexperimenter: 75 sucrose, 87 NaCl, 2.5 KCl, 1.25 NaH2PO4, 0.5 CaCl2, 7 MgCl2 6 H2O, 25 NaHCO3, 10 Dextrose, borrelt mat 95% O2 / 5% CO2 (pH 7.4). Coronal geschnidden (300μm déck) enthale Käre accumbens goufen an Äiskält ACSF geschnidden mat Hëllef vun engem Vibrotom (Leica, VT1200S) a gehalen ënner ACSF (ACSF, an mM: 124 NaCl, 2.5 KCl, 1.25 NaH2PO4, 2.5 CaCl2, 1.5 MgSO4 7H2O, 26 NaHCO3, an 10 Dextrose) fir <30 min; dann an engem Stéck Pre-Inkubator bei Raumtemperatur fir op d'mannst 1 Stonn gehale fir Erhuelung z'erméiglechen. Fir mEPSC Experimenter: eng eenzeg Scheif gouf dunn an eng Opnamekammer transferéiert, an där se vun engem Nylonnetz ënner 32 ° C mat engem TC324B In-Line-Heizungsheizung a Controller ënner Waasser gehal gouf (Warner Instruments, CT). D'Kammer gouf kontinuéierlech vun ACSF mat engem konstanten Taux vun 2 ml / min perfuséiert. Mëttlere spiny Neuronen aus der Nukleus accumbens Kärregioun goufen ënner visueller Leedung identifizéiert mat Infrarout-Differential Interferenz Kontrast Videomikroskopie (Hamamatsu C5405) mat engem Olympus BX50WI oprecht Mikroskop mat 40x laang Aarbechtsdistanz Waasser-Tauchobjektiv. Patchelektroden (4-6 MΩ) gefëllt mat enger intrazellulärer Pipette-Léisung bestehend aus (am mm): CsCl (145), HEPES (10), EGTA (0.5) a MgATP (5). Osmolaritéit gouf op 290 mOsm mat Saccharose ugepasst, a pH gouf op 7.4 mat CsOH ugepasst. Miniatur excitatoresch post-synaptesch Stréimungen (mEPSCs) goufen an der Präsenz vu bicuculline (10μM) an Tetrodotoxin (1μM) mat Axopatch 200B Verstärker (Molekular Geräter, CA) opgeholl a digitaliséiert vum Digidata 1322A (Molekular Geräter, CA). Fir Rectifikatiounsexperimenter: Scheiwen goufen an d'Opnamekammer transferéiert a perfuséiert (2.0-2.5 ml min-1) mat oxygenéierten ACSF bei 33 – 35 ° C enthale 50 μm Picrotoxin fir EPSCs ze isoléieren. Somatesch ganz Zell Opzeechnunge goufen aus Kärregioun mëttelgrousse neuronen a Spannungsklemm mat engem Multiclamp 700B Verstärker (Molekulär Geräter) mat IR-DIC Video Mikroskopie gemaach. Patchpipetten (4 – 6 MΩ) goufe mat intrazellularer Léisung gefëllt (an mM: 125 Cs-Gluconat, 2 CsCl, 5 TEA-Cl, 4 Mg-ATP, 0.3 GTP, 10 Phosphokreatin, 10 HEPES, 0.5 EGX, 3.5 EGX, -314). D'Date goufen op 2 kHz gefiltert, digitaliséiert op 10 kHz, an analyséiert mat Clampfit 10 (Molecular Devices). Extrazellulär Stimulatioun (0.01 – 1 ms, 5 – 150 μA, 0.2 Hz) gouf mat enger klenger Glas bipolarer Elektrode 0.05 – 0.5 mm vun der Opnamelektrode applizéiert. No ~ 10 min vun der Baseline-Opnam, gouf eng Léisung mat Naspm (200 μM) am Bad fir 10 min perfuséiert. Ännerungen an der EPSC Amplitude goufen virun an no der Drogeapplikatioun gemooss andeems se Potentialer vun −70, −50, −30, 0, + 20, + 40 an + 60 mV haten. D'Rektifizéierungsindex (ir) gouf berechent andeems se eventuell Verréckelungen am Réckgangspotenzial korrigéiere gelooss an aus der folgender Equatioun ausgerechent: ir = (I-70 / 70) / (I40 + / 40), wou I-70 an I40 + sinn d'EPSC Amplituden op −70 mV respektiv + 40 mV opgeholl.

Subcellulär Fraktioun a Westernblotting

Accumbens goufen op Äis gesammelt wéi hei uewen beschriwwen. Wann Kär a Shell getrennt dissektéiert goufen, gouf d'Trennung bestätegt duerch probéierend Synaptosome Fraktiounen fir Dopamin β-Hydroxylase, en Enzym fonnt an den Uschloss vun Axonen zu der Schuel awer net de Kär (Sesack a Gnod, 2010). Ganz Zell, Synaptosome a PSD Fraktiounen goufe virbereet wéi virdru beschriwwen (Jordan et al., 2004). Synaptosomal Pellets goufen am 200 μl 25 mM Tris mat 1% Triton X-100 resuspendéiert, op 4 ° C fir 30-min gestierzt a centrifugéiert op 13,800 × g fir 15-min an enger Mikrozentrifuge fir PSDs ze pelléieren. D'Pell enthaltend rau PSDs goufen am 25 mM Tris mat 2% SDS resuspendéiert. Fraktiounen goufen duerch Western blot op SDS-PAGE Gelen analyséiert wéi virdru beschriwwen (Jordan et al., 2004). Déi folgend Antikörper goufe benotzt: Dopamin β-Hydroxylase (1: 1,000, Abcam), GluA1 (1: 1,000, Millipore), Phosphor-Ser 845 GluA1 (1: 1,000, Millipore), GluA2 (1: 1,000: 1: 10,000: XNUMX: XNUMX: XNUMX, Millipore) (XNUMX: XNUMX, Sigma).

Elektronmikroskopie

Op den Dag vun der Tissu Recolte (Dag 7 vun der sucrose Training) goufe Ratten aus 3 Testgruppen (Waasser, Sucrose / Waasser, Sucrose; 3 Ratten / Testgrupp) a Lokomotoresch Messungskammeren fir 15-min plazéiert; op 15-min ass eng Fläsch duerch d'Kammer Top agefouert ginn. Ratten an der Waassergrupp kruten Waasser, Ratten an der Ukrosegrupp kruten 25% sucrose, Ratten an der Sucrose / Waasser Grupp, déi 25% Sackarose fir 6 Deeg verbraucht hunn, kruten Waasser. Ratten goufen zudéifst mat Nembutal (50 mg / kg ip) anästheséiert an transkardiell mat 0.1 M Phosphatpuffer (pH 7.4) enthale mat 4% paraformaldehyd an 0.1% glutaraldehyd mat enger Rate vun 50 ml / min während der éischter 3-min, duerno bei engem Taux vun 20 ml / min fir den Erfolleg 7-min. Tissue war virbereet fir gepost Immunogold (PEG) Etikettéierung a Biller goufe ageholl wéi virdru beschriwwen (Nedelescu et al., 2010). Immunolabels goufen no hirer Positioun par rapport zum PSD op asymmetresch synaptesch Verbindunge klasséiert wéi „Spalt“, „bei PSD“ (bannent 1 PSD Breet vum PSD), „op PSD“, „intraspinös“ oder „extrasynaptesch Membran.“ Vun all Déier, 93 Synapsen ware Proben aus dem Kär vun den Ziedelen. Random Sampling gouf gesuergt andeems mir all déi éischt 93 analyséiert Synapsen zoufälleg begéinen wéi mer systematesch iwwer d'Gitter ofgeschnidden hunn, an dann d'selwecht Zuel vu Synapsen aus allen vun den dräi Déieren poolen, déi identesch Ante Mortem Behandlungen kritt hunn. Zwou Zorte vu Quantifizéierung goufen duerchgefouert. Dat eent war fir GluR1-Immunoreaktivitéitniveau ze bewäerten, andeems d'Zuel vu PEG Partikelen ofgestëmmt ginn, déi op diskret funktionnele Beräicher vun der Wirbelsäit opgetrueden sinn. Deen aneren war den Undeel vun Synapsen ze beurteelen déi op der PSD vun all Zuel vu PEG Partikelen bezeechent goufen. Och Synapsen, déi vum just 1 PEG Deelchen bezeechent goufen, goufen als Label ugesinn, baséiert op fréier Aarbecht, déi Spezifizitéit vun der GluR1-PEG Prozedur beweist (Nedelescu et al., 2010). Behandlungseffekter op den Undeel an den Niveau vun der GluR1-Immunolabeling goufen duerch eng Manéier ANOVA mat geplangte Post-Hoc Vergläicher analyséiert (Fisher LSD). Fir experimentell Bias z'eliminéieren, goufen d'Donnée Triple-Blind: e Experimenter huet sucrose Training gemaach an huet d'Diere vun den Déieren an den dräi Testgruppen ofgehalen, en zweete Experimenter huet d'Elektronmikrografe erstallt an huet en neien alphanumeresche Code fir all Mikrografik gehalen an de Code gehalen , an dräi zousätzlech Experimenter hunn d'Mikrografe gescannt a quantifizéiert PEG-Partikelen. Nodeem PEG-Quantifizéierung ofgeschloss war, hunn d'Experimenter sech zesummefonnt fir d'Identitéiten vun all Mikrograf ze weisen.

Cannula Implantatioun an intrakranial Injektiounen

Intrakranial Injektioun gouf agestallt fir Naspm an APV an den Accumbens Kär ze liwweren. Fir Implantatioun vu Kanéil, wéi virdru beschriwwen (Carr et al., 2010), goufe Ratten déif verdriwwen mat Ketamin (100 mg / kg ip) an Xylazin (10 mg / kg ip) a postwendend misse mat der analgetescher Benamin (1 mg / kg subkutan) injizéiert ginn. Ratten goufen stereotaxesch mat zwee 26-Jauge Guidekanulae implantéiert (PlasticsOne, Roanoke, VA) bilateral an den accumbens Kär mat Koordinaten: 1.6 mm anterior zu Bregma; 2.9 mm lateral zu der sagittaler Soutur, Spëtze geschnidden 8 ° Richtung d'Mëttlinn, 5.6 mm ventral bis Schädeloberfläch. Cannulae goufen duerch Zänn Acryl op der Plaz gehaalen an d'Patenz gouf mat engem Okklusiouns Stylett behalen. Fir intrakranial Injektiounen, goufen Naspm an APV Léisunge gelueden an zwee 30 cm Längt PE-50 Schlauch befestegt an engem Enn op 25-μl Hamilton Sprëtzen gefüllt mat destilléiert Waasser an um aneren Enn zu 31-Spalt Injektorkanula, déi 2.0 mm verlängert hunn iwwer déi implantéiert Guiden. D'Sprëtzen goufen op den Zwillingshalter vun enger Harvard 2272 Microliter Sprëtzpompel montéiert, déi d'0.5 μl Injektiounsvolumen iwwer eng Period vun 100 sec geliwwert hunn. Eng Minutt no der Injektioun fäerdeg war d'Injektiounskanulae vu Guiden ewechgeholl, Styletter goufen ersat, an Déieren goufen an Lokomotor Tester Chambers fir Erfollegstraining geluecht. Nom Déierenopfer goufen kryogene Gehirnektioune fir Kanallokaliséierung analyséiert; 2 aus 15 Déieren goufen aus der Studie ausgeschloss wéinst enger falscher Kanéilplazéierung.

Statistesch Analyse

Een-Manéier ANOVA gefollegt vu Fisher post hoc Tester gouf fir Elektronmikroskopie, Immunozytochemie a Biotinyléierungsexperimenter benotzt. Zwee-tailed Student d'T-Tester goufen fir Elektrophysiologie benotzt. Fir sucrose Hyperaktivitéit Experimenter, zweesäiteg ANOVA gouf benotzt, gefollegt vu Fisher post hoc Tester.

RESULTATER

Charakteriséierung vun enger sucrose ingion Paradigma

Mir hunn en Erfollegsinzugparadigma beschäftegt fir d'Effekter vun enger natierlecher, orosensorescher Belounung op synaptescher Iwwerdroung z'ënnersichen (Figure 1A). Erwuessene männlech Ratten goufen op dräi konsekutiv Deeg an en Testraum transportéiert. Um véierten Dag (éischten Trainingdag) goufen d'Raten an eng Lokomotoresch Messungskammer geluecht. No 15 Minutte Lokomotoresch Aktivitéitsmessung an der Chamber goufen Flaschen mat entweder Waasser (fir Waasserdéieren) oder 25% Sackarose Léisung (fir Sucrose Déiere) agefouert an d'Miesskammer duerch Lächer am Deckel vun der Chamber. D'Flaschen goufen no 5 Minutte geläscht an d'Lokomotoraktivitéit gouf fir eng zousätzlech 15 Minutte gemooss ier d'Déieren zréck an d'Haushäfe bruecht goufen. Mir hu dës Prozedur fir 7 noeneen Deeg widderholl. A verschiddenen Experimenter gouf d'Sacrose-Training op en 8 verlängertth Dag. Dës kuerz, net kontingenter Zougang zu enger héich palatable Léisung huet et eis erlaabt akuter a kumulativ Effekter vun der Sackaroseinnzuch z'ënnersichen, well Déieren zouverlässeg sukrosesch wärend während der Zougangsfenster bannent dräi Deeg vum Training (Figure 1B). Dës experimentell Konditioune hunn de Verglach vun Testgruppen direkt no der Stéierung vun der Ernierung erméiglecht. Eise Kritär fir Inklusioun an der Studie war datt Ratten op d'mannst ee Gramm vun Sackarose während der Zougangsperiod bannent dräi Deeg nom Start vun der Ausbildung fänken ze konsuméieren; keng Déieren goufen op Basis vun dësem Critère vun der Studie ausgeschloss.

Figure 1  

Widderhuelung vun der Sackarose Ernierung verursaacht transient Héichten vun der spontaner Lokomotioun.

Mir hunn observéiert datt bannent dräi Deeg vum Training Sucrose Déieren wesentlech méi Sackrose-Léisung konsuméiere wéi Waasserdéieren Waasser konsuméiert (Figure 1B). Zousätzlech, wa keng wesentlech Differenzen an der spontaner Lokomotioun op Trainingsdeeg 1 – 6 (Donnéeën net gewisen) observéiert goufen, observéiert mir bedeitend Héicht vun der gesamter Distanz gereest an Sucrose Déieren am Verglach mam Waasserdéieren an den dräi Minutte no der Flaschenentfernung am Dag 7 (Figure 1D), an dësen Ënnerscheed war och präsent op den Dag 8 (Figure 1E). Keng Differenzen an der gesamter Distanz gereest goufen tëscht Waasser a Sucrose Déieren an den dräi Minutte virum Flascheintroduktioun op iergend vun den Testdeeg observéiert (Figure 1C), suggeréiert eng erhéngte Lokomotioun war eng akut Äntwert op d'Sakrose-Intéierung spezifesch fir déi sucrose-trainéiert Rat. Amplaz eng bedingt Äntwert op d'Lokomotor Chamber. Am Aklang mat dëser Méiglechkeet, gouf et eng bedeitend positiv Korrelatioun tëscht dem Betrag vun der Sackarose verbraucht an der gesamter Distanz gereest (Figure 1F). Et war keen Ënnerscheed an Déiergewichte tëscht der Sucrose a Waassergruppen virun oder no den 7 Deeg vum Training (Donnéeën net gewisen).

Sucrose Entzündung induzéiert CPAR Inkorporatioun

Sucrose Training féiert zu enger transienter Héicht vun der Lokomotioun um leschte Trainingsdag. Fir festzestellen, ob dës Konsequenz vun der Sackaros-Ernährung duerch elektrophysiologesch Verännerunge vun der nucleus accumbens begleet war, eng Regioun déi Belounungsverhalen reguléiert, hu mir Nukleus-Accumbens-Scheiwen preparéiert direkt no der Flaschenentfernung am Dag 7 an opgeholl vun Neuronen vum accumbens Kär (Figure 2A). D'Kärsubregioun gouf an Lokomotoresch Äntwerten op Belounungsmoossname implizéiert (Sesack a Gnod, 2010). Mir hu fonnt, datt souwuel d'Amplitude wéi och d'Frequenz vu spontanem Miniature excitatory postsynaptesche Stréimunge (mEPSCs) wesentlech méi grouss waren am accumbens Kär vu Sucrose Déieren am Verglach zu Waasserdéieren (Figure 2B). Dëst huet bewisen, datt e widderhuelen Succès Konsum eng synaptesch Iwwerdroung am nucleus accumbens Kär positiv regléiere konnt. Fir ze bestëmmen ob CPAR-Inkorporatioun eng Roll bei der Potenzéierung nom Sukrose gespillt huet, hu mir Rektificatiounsindekse fir accumbens Kärneuronen festgeluecht andeems EPSCs a verschiddene Membranpotenzialen gemooss goufen (Zuelen 2C, 2D an 2E). D'KPAR sinn innerhalb vun depolariséierte Potenzialer korrigéiere wéinst endogene Polyamin Blockade. Mir observéiert bedeitend Rektifizéierung bei Opzeechnungen aus Neuronen vun Sucrose Déieren, wéi d'Netlinearitéit an der I / V-Bezéiung gezeechent gëtt, am Verglach zum Waasserdéieren (Figure 2E), nieft enger däitlecher Erhéijung vum Korrektiounsindeks (Figure 2F).

Figure 2  

Accumbens Kär Synapses ginn potenziell nom wiederhuelende Succès Entitéit gestäerkt.

Fir d'Héicht vun de CPAR Niveauen mat enger anerer Method ze bestätegen, hu mir vun den Opnamen aus Kernneuronen opgeholl nom Inklusioun vum spezifesche CPAR-Blocker, 1-Naphthylacetyl Spermien (Naspm) am Bad. Mir hu fonnt datt den Naspm däitlech EPSC Amplitude bei Opname vun Neuronen aus der Sucrose awer net Waasserdéieren ofgeholl huet (Zuelen 3A – C). Zousätzlech, no Naspm Behandlung, gouf d'I / V Relatioun an Neuronen aus Sucrose Déieren linear, wat d'Inhibitioun vun CPARs an der Sucrose Déier Synapsen reflektéiert, wärend kee bedeitende Effekt op d'I / V Relatioun no Naspm Behandlung an Neuronen aus Waasserdéieren observéiert gouf (Zuelen 3D). Dës Resultater beweisen datt wiederhuelend Sackaros-Ernährung d'Integratioun vu CPAR induzéiert an Synapsen vum accumbens Kär.

Figure 3  

Sucrose Entzug verursaacht Abezéiung vu Ca2 + -permeablen AMPA Rezeptoren.

Sucrose Entzündung induzéiert GluA1 Traffik

CPARs sinn AMPA Rezeptoren déi de GluA2 AMPA Rezeptor-Ënnerunit feelen. Also, synaptesch Inkorporatioun vu CPAR involvéiert meeschtens synaptesch Aktivitéit-ofhängeg Trafficking vum GluA1 Subunit (Hien et al., 2009; Isaac et al., 2007; Liu an Zukin, 2007; Plant et al., 2006). Fir CPAR synaptesch Inkorporatioun no der Sacharose-Training ze bestätegen, hu mir nogefrot ob d'Sukrose-Intensioun de synapteschen Ausdrock vun GluA1 erhéicht huet. Ratten kruten Zougang zu Succose wéi uewe beschriwwen fir 7 opfolgend Deeg. Op Deeg 1, 3, 5, an 7 hu mir d'ganz Zell, synaptosome a postsynaptic Dicht (PSD) Fraktiounen aus dräi Gehirregiounen isoléiert: accumbens core (core), accumbens shell (shell) a somatosensory cortex (cortex). Mir analyséiert d'ganz Zell an PSD Fraktiounen duerch Western blot fir Ausdrock vu GluA1 a GluA2.

Mir hu keng Verännerunge vun GluA1 oder GluA2 an de ganze Zell Fraktiounen vun den accumbens Lysaten an den iwwerpréiften Testdeeg fonnt, wat suggeréiert datt e widderhuelende Sakkarekonsum net d'Gesamtniveauen vun dësen Proteine ​​regelt (Zuelen 4A – C). An den accumbens PSD Fraktiounen huet d'GluA1 awer wesentlech erhéicht op den Dag 7 am Kär awer net an der Schuel, während GluA2 net bedeitend an entweder Fraktioun geännert huet (Zuelen 4D – 4F an Daten net gewisen). Mir observéiert keng bedeitend Erhéijung vun GluA1 an den accumbens Kär PSD Fraktiounen op de virdru Testdeeg (Zuelen 4D – F) an GluA1 oder GluA2 hunn an de Cortex PSD Fraktiounen net op iergendeng vun den Testdeeg geännert (Daten net gewisen). Vergréissert GluA1, besonnesch relativ zu GluA2, an accumbens Kär PSDs no widderholl Erschéck vun Sokrose ass am Aklang mat der verstäerkter Rektifizéierung beobachtet an den accumbens Kernneuronen, wéi hei uewen beschriwwen.

Figure 4  

Postsynaptesch Dicht GluA1, awer net GluA2, gëtt an der Nukleus accumbens Kär eropgewuess no der Erfolleg vun Erfolleg.

Aktivitéitsofhängeg GluA1 Trafficking gouf gewisen fir synaptesch Plastizitéit bäidroen kënschtlech an och an vivo (Lu a Roche, 2011). E séieren, multi-step Mechanismus fir GluA1 Trafficking gouf demonstréiert kënschtlech (Serulle et al., 2007; Sonn et al., 2008; Sonn et al., 2005). Bis elo ass awer de Bäitrag vun dësem Multi-Step Mechanismus zur GluA1 synaptescher Akkumulation an vivo gouf net getest. Fir ze bestëmmen ob sucrose Training GluA1 Trafic induzéiert akut duerch de Multistep Mechanismus, hu mir lokaliséiert GluA1 bei nucleus accumbens Synapses vun sucrose- a Waasser trainéiert Déieren duerch quantitativ Elektronmikroskopie. Accumbens Kärgewebe gouf um siwenten Dag vun der Saccharose-Training aus 3 Testgruppen vu Ratten gesammelt. Dës ware Ratten déi: 1) Waasser fir 7 Deeg (Waasser), 2) d'Sukrose fir 7 Deeg (Sucrose) verbraucht hunn, an 3) d'Sukrose fir 6 Deeg konsuméiert a Waasser am Dag 7 (Sucrose / Waasser). Ratten goufen op dem 7 geaffertth Dag, 5 Minutten nom Konsum vun Sackarose oder Waasser. Also, de Verglach vun zwou vun den Testgruppen, Sucrose / Waasser a Sucrose Déieren, mateneen a mat Waasserdéieren huet den Zäitraum vu postsynaptesche Verännerunge verroden, déi duerch Sackaroskonsum bei sucrose-trainéierte Ratten induzéiert goufen. Mir hunn postembed Immunogold (PEG) -méisseg GluA1 an 5 ënnerschiddlech postsynaptesch Kompartimenter gemooss: dendritesch Wirbelszytosol (intraspinös), extrasynaptesch Plasma Membran (Membran), PSD, no bei PSD, a synaptesche Spalt, woubäi déi lescht dräi Kompartimenter zesummen als 'PSD gruppéiert goufen. '(Figur 5A). Fir Experimenter Bias ze eliminéieren, goufen Elektronmikrograph Testgrupp Identitéite vun Triple-Blind.

Figure 5  

Elektronmikroskopie verroden Induktioun vu Multi-Schrëtt GluA1 Trafficking duerch Sukrose Ernierung.

Béid Sucrose a Sucrose / Waasserdéieren hunn däitlech erhéicht intraspinöse GluA1 relativ zu Waasserdéieren ausgestallt (Fig. 5B a 5C). Dëst suggeréiert datt chronesch Succès Konsum eng intrazellulär Pool vu GluA1-enthale AMPA Rezeptoren niewent synaptesche Site erhéijen, Rezeptoren déi méiglecherweis verfügbar si fir synaptesch Traffik, an, wichteg, datt dës intrazellulär Pool fir 24 Stonnen no dem finalen Konsum vu Succose ka bestoe bleiwen. An. Mir hunn deemno déi bedeitend Fro exploréiert ob en akuten sucrose Stimulus séier GluA1 Traffik induzéiere kann. Mir observéiert datt extrasynaptesch Plasma Membran GluA1 bedeitend erhéicht gouf bei Sucrose Déieren am Verglach mat souwuel Sucrose / Waasser a Waasser Déieren (Zuelen 5B an 5D). Dës Beobachtung weist datt eng natierlech, orosensoresch Belounung vun engem eenzege Saccharosestimulus séier (<5 min) awer transient (Zerfallzäit <24 h) erhéicht déi extrasynaptesch Bevëlkerung vu GluA1-enthaltend AMPA Rezeptoren, e labille Pool entsteet aus deem d'Rezeptoren ka Verkéier op de Synaps.

A signifikativ, kënschtlech Studien hu virgeschloen datt synaptesch Inkorporatioun vun AMPA Rezeptoren an 2 Schrëtt stattfënnt. An der éischter Héicht glutamat- oder dopamin-ofhängeg Ser 845 Phosphorylatioun erhéicht d'Niveaue vun Rezeptoren op extrasynaptesche Site an der Plasma Membran (Esteban et al., 2003; Serulle et al., 2007; Sonn et al., 2008; Sonn et al., 2005), wärend an der zweeter, Ser 818 Phosphorylatioun fördert synaptesch Inkorporatioun (Boehm et al., 2006). Eis Elektronmikroskopie Verglach vu Sukrose Déieren mat Sucrose / Waasser a Waasserdéieren beweist datt den éischte Schrëtt vum GluA1 Trafic observéiert gouf kënschtlech (Makino a Malinow, 2009), schnell Traffik zu der extrasynaptescher Membran, fënnt och statt an vivo folgend Dispositioun vun enger orosensorescher Belounung.

Am Aklang mat der Elektrophysiologie a biochemesch Resultater hei uewe beschriwwen, huet PEG EM bewisen datt d'Sackrose-Intake och den zweete Schrëtt an der GluA1 Trafficking GluA1 Rezeptor Entrée an d'Synapse induzéiert well de Niveau vun der GluA1-Immunreaktivitéit op der PSD wesentlech méi grouss war fir Sucrose am Verglach mat Waasserrotter, an et gouf en Trend Richtung GluA1 zu Sucrose / Waasser am Verglach zu Waasserrotter (Zuelen 5B an 5E). D'Erhéijung vun der Sucrose / Waasserdéieren ass konsequent mat entweder schnelle Inkorporatioun vu GluA1 déi mat enger synaptescher Hallefdauer vun ~ 24 hr, oder séier raporatioun vu GluA1 an Ersatz duerch synaptesch GluA1 / 2 iwwer eng ähnlech Zäitraum ass. De Prozentsaz vu Synapsen, déi GluA1 ausdrécken an der PSD war och wesentlech méi grouss bei Sucrose Ratten am Verglach zum Waasserrotter (Figure 5F), wat suggeréiert datt GluA1 zu Synapsen handelt déi virdru GluA1 gefeelt hunn. Dëst deit och drop hin, datt d'Erhéijung vun der mEPSC Amplitude, déi bei Sucrose Ratten observéiert gouf, resultéiert aus enger Erhéijung vun der synaptescher GluA1, an datt d'Erhéijung vun der mEPSC Frequenz aus der Recrutéierung vu GluA1 zu fréiere rouegen Accumbens Synapsen entstoe kann, och wann d'Potentialéierung vun der Glutamat Fräisetzung net entlooss ka ginn. Mir hunn och d'Zuel vun de Synapsen an all den dräi Testgruppe gemooss fir festzestellen, ob Saccharosentastung induzéiert Synaptogenese ass; et ware keng Ënnerscheeder tëscht den dräi Testgruppen (Donnéeën net gewisen). Mir schléissen datt widderholl Sucrose Nossallergie e stabillen (> 24 Stonnen) intraspinöse Pool vu GluA1 erhieft, an een eenzege Saccharose Reiz zu enger sucrose trainéiert (6 Deeg) Rat ass genuch fir séier (5 min) GluA1 an der extrasynaptescher Plasma Membran ze erhéijen, potenziell Rezeptoren aus dem intraspinéise Pool zeechnen. Mir proposéieren datt en Deel vun dësen extrasynaptesche Rezeptoren stabil an d'PSD agebaut gëtt, wat zu dem observéierte Rektifikatiounsindex féiert an de PSD GluA1 Ännerungen, ier den extrasynaptesche Pool um 24 h no der Stimulatioun zréck an d'Basis geet. Dës Resultater weisen datt eng natierlech Belounung séier de GluA1 Handel an engem trainéierten Déier induzéiere kann.

CPAR Aktivitéit ass erfuerderlech fir eng erhöht Lokomotioun no der Sachrose-Ernierung

Mëttelméisseg staark Neuronen kréien souwuel dopaminergesch wéi och glutamatergesch Inputen (Calabresi, et al., 1992). Fir d'Bedeelegung vu Glutamatsignalisatiounen an der erhiefter spontaner Lokomotioun ze bewäerten, déi mir no der Sokrose-Ernährung an der sucrose trainéiert Ratten observéiert hunn, implantéiere mir Cannulas an den accumbens Kär vu Ratten, an trainéiert Déieren an der Lokomotoresch Messmammer wéi hei uewen beschriwwen. Op dem Dag 8 vun der Erfollegstraining, hu mir Naspm microinjected an de Kär viru Plaz an der Lokomotor Testkammer. D'Injektioun huet d'total Distanz gereest vun der Sucrose Déieren erofgeholl an den Ënnerscheed tëscht Sucrose a Waasser Déieren eliminéiert direkt direkt no Flaschenentfernung gesi ginn (Figure 6A). Fir z'iwwerpréiwen, wéi de Stress duerch den Ëmgank mat den Déieren d'Succose-Äntwert net beaflosst huet, hu mir den Dag drop (Salle 9 vun der Sockerausbildung) Salz an de Kär injizéiert; erëm ass bedeitend Hyperaktivitéit an de Sucrose Déieren direkt no der Flaschenentfernung observéiert (Figure 6B). Dëst weist datt den Naspm speziell Succès-induzéierter Héicht vun der Lokomotioun hemmt. D'Injektioun vum NMDAR Antagonist, APV, an de Kär an de folgende Deeg eliminéiert och den Ënnerscheed tëscht Sucrose a Waasserdéieren (Figure 6C), wat beweist, datt NMDAR och fir Héicht vu spontaner Lokomotioun noutwendeg sinn no der Sachrose-Ernierung. Fir ze bestëmmen ob eng bedingt Äntwert op der Testkammer eng Roll an der Induktioun vun der Hyperaktivitéit gespillt huet, goufen Déieren an der Chamber fir 35 min plazéiert ouni Flasche-Aféierung; keng Differenzen an der Distanz gereest goufen tëscht Sucrose a Waasserdiere observéiert (Figure 6D). Naspm an APV hunn net de Succès Konsum beaflosst (Figure 6E), ze beweisen, datt Kär CPAR an NMDAR net fir kräfteg Inhalter vun der Socker erfuerderlech sinn. Déieren, an deenen d'Kanulas net an den accumbens Kär plazéiert goufen (2 aus 15 Déieren), wéi evaluéiert nom Opfer (Figure 6F), waren net an der Studie abegraff. Als Schlussfolgerung weisen dës Donnéeën zesumme datt de Verbrauch vun der Sackarose duerch eng sucrose-trainéiert Rott induzéiert synapteschem Trafik vu GluA1 an 5 Minutten, an datt d'Blockéierung vu Signaliséierungsmechanismen déi dës Händler kontrolléieren d'Héicht vun der spontaner Lokomotorescher Aktivitéit no der Socker verhënnert.

Figure 6  

Erhéije spontaner Lokomotioun no der Sachrose-Ernierung erfuerderlech CPARs an NMDARs.

Zwou Weeër fir Succès Signalisatioun kënnen virgesinn. Een, e strikt chemosensorescht oder orosensorescht Wee, gëtt ageleet vun der Sackarosebindung zum séissen Geschmaachs Rezeptor, wat entsprécht dem heteromeresche G Protein gekoppelten Rezeptor Komplex, T1R2 / T2R3 (Kitagawa et al., 2001; Max et al., 2001; Nelson et al., 2001; Sainz et al., 2001). Kalorie räich Nährstoffer kënnen och d'Gehirfunktioun reguléieren duerch metabolesche Weeër onofhängeg vum Goût, och wann d'Mechanismen net gutt verstane sinn (de Araujo et al., 2008). Fir z'ënnerscheeden tëschent dësen zwou Alternativen fir de Wee vum GluA1-Trafik induzéiert vu Sukrose, hu mir den Trainingsprotokoll mat dräi Gruppe vu Ratten (4 Ratten / Grupp) widderholl, déi fir 5 Minutten Zougang zu Flaschen enthalen, Waasser, 25% sucrose Léisung , oder 3% Saccharin (Séiss a Niddereg). D'Flaschen goufen ewechgeholl an d'Raten goufe fir 15 Minutte méi laang an der Trainingsplaz. Training gouf fir 7 Deeg widderholl. D'Volumenmass vu Flëssegkeet, déi vun der Sackarose an dem Saccharin Testgrupp verbraucht goufen, waren net vill anescht wéi all aner a béid ware méi grouss wéi de Konsum vun der Waassergrupp, konsequent mat Belounung vu béide séiss StofferFigure 7A). Op den 7th Dag vum Drénken, direkt no der Entfernung vu Flaschen, goufe Ratten geaffert, den accumbens Kärgewebe gouf gejot a geschloe fir all Testgrupp, d'PSD Fraktioun isoléiert a GluA1 Niveauen gepréift duerch Western blot (Figure 7B). Wéi scho virdrun, Déiere déi Sackos verbrauchen hunn weisen erhéicht GluA1 an der PSD Fraktioun relativ zu der Waassergrupp (Figure 7C). Wichteg war GluA1 och an der PSD Fraktioun vun Déieren erhéicht déi Saccharin konsuméieren. Et war kee wesentlechen Ënnerscheed zu den Niveaue vu GluA1 an de ganze Zell Fraktiounen aus accumbens Kär vum Waasser, sucrose an Saccharin Déieren, suggeréiert datt d'GluA1 Erhéijung fir d'Synaptik Fraktioun spezifesch war (Figure 7D). Well Saccharin stimuléiert datselwecht heteromerescht G Protein gekoppelt Geschmaachs Rezeptor Komplex wéi Sukrose (Masuda et al., 2012; Nelson et al., 2001), awer feelt kaloresche Wäert, mir schléissen datt Stimulatioun vum séissen Geschmaachs Rezeptor genuch ass fir Signal unzefänken, déi GluA1 Niveauen op nucleus accumbens Kär Synapsen erhéijen.

Figure 7  

Saccharin Training bréngt eng Erhéijung vun synaptesche GluA1 Ähnlech wéi Sucrose Training.

Diskussioun

Mir hunn ugewisen datt eng orosensoresch Belounung, wiederhuelende Succès Konsum, akut GluA1 synaptesch Inkorporatioun duerch e Multi-Step Trafficking Mechanismus ka virdru beschriwwen hunn kënschtlech. Widderholl Succès Konsum iwwer 6 – 7 Deeg potenzéiert accumbens Kärsynapses elektrophysiologesch duerch d'Inpositioun vu CPAR. Dësen Effekt gouf begleet vun Akkumulation vu GluA1 awer net GluA2 an der PSD vum Kär, a war regional an zäitlech spezifesch, well keng Ännerunge virum Trainingsdag 7 am Kär observéiert goufen, a keng Ännerung gouf an den Accumbens Shell oder an somatosensory Cortex. Elektronesch mikroskopesch Analyse huet gewisen datt widerhuelend Erfolleg vun Erfolleger mat Erfolleger eng relativ stabil (t1/2 > 24 Stonnen) Populatioun vun intraspinösen GluA1 enthalen Rezeptoren. Sucrose och séier (5 min) an transiently (t1/2 <24 Stonnen) erhéicht Niveaue vu GluA1-enthalen Rezeptoren op extrasynaptesche Site an sucrose-ausgebilten Déieren, wouduerch d'Populatioun vun AMPARs fäeg ass, lateral an d'Synapse ze diffuséieren. Synaptesch GluA1, souwuel wéi vun der PSD Fraktioun duergestallt a wéi vum PEG-EM festgestallt gouf, war wesentlech an der Sucrose erhéicht am Verglach zu Waasserdéieren. Aus dëse Resultater proposéiere mir datt den Zwee-Schrëtt Mechanismus vun der extrasynaptescher Exozytosis gefollegt vu synapteschen Handel fir AMPAR synaptesch Insertion virdru beschriwwen kënschtlech (Boehm et al., 2006; Makino a Malinow, 2009; Oh et al., 2006; Serulle et al., 2007; Sonn et al., 2005) ka séier ageleet ginn an vivo duerch eng natierlech, orosensoresch Belounung.

Ännerungen am synaptesche GluA1 Niveauen goufe just no 7 Trainingssitzungen observéiert, wat suggeréiert datt e puer Daagesprozess fir Potenzéierung noutwendeg ass. A biochemesche Experimenter an vivo, hu mir keng grouss Erhéigunge vun den accumbens core PSD GluA1 Niveauen op Deeg 1, 3, an 5 vun der Sacharose-Training observéiert; nëmmen no 7 Deeg vun Erfollegstraining war GluA1 an der PSD wesentlech erhéicht. An elektronesch mikroskopie Experimenter hu mir observéiert datt Sucrose / Waasserdéieren, déi fir 6 Deeg Succose trainéiert waren, awer keen XnUMX-Stimulus an 24 Stonne kritt haten, en Trend u verstäerkte PSD GluA1 ze weisen. Dës Déieren hunn och erhéicht intraspinöse GluA1 verglach mat Waasserdéieren, awer keng Ännerung vun der extrasynaptescher Membran GluA1 gouf beobachtet. Aus dëse Resultater zéien mir dräi Conclusiounen. Éischtens, GluA1-enthale AMPA Rezeptoren accumuléieren intraspinös mat successive Succès Stimulatiounen. Virausgesat datt virdru Studien bewisen hunn datt d'Sackrose-Ernährung d'Dopamin Verëffentlechung an den Accumbens induzéiert (Cacciapaglia et al., 2012; McCutcheon et al., 2012; Rada et al., 2005), an datt D1Rs lokal GluA1 Iwwersetzung an Dendriten fueren (Smith et al., 2005), Dopamin Verëffentlechung no der Sachrose-Ernierung kann lokal GluA1 Synthese ausléisen, déi zu intraspinöser GluA1 Akkumulation féiert. Alternativ kann déi intraspinöse Erhéijung de GluA1 vum distale Site reflektéieren. Et ass méiglech datt exozytotesch Traffik aus dësem erhéngte intraspinöse Pool zum extrasynaptesche Pool an der Plasmamembran bäidréit. Zweetens, d'Beobachtung vun enger Erhéijung vun extrasynapteschen Membran GluA1 bei Sucrose, awer net an Sucrose / Waasser oder Waasser Déieren suggeréiert datt déi extrasynaptesch Rezeptoren entweder duerch en zweete Schrëtt an d'Synapse réckelen oder an der 24 hr nom Sockerverbrauch endozytéiert sinn, mécht extrasynaptic Pool transient. Drëttens ass d'Erhéigung vum Sucrose Dier PSD GluA1 am Verglach zu Waasserdéieren, awer net Sucrose / Waasserdéieren suggeréiert och datt no all Sukrosstimulus, Rezeptoren lateral an d'Synapse réckelen aus dem Pool vun Rezeptoren, déi séier an d'extrasynaptesch Plasma Membran traffikéiert sinn. Mir kënnen net ausgeschloss datt GluA1 Traffic direkt aus dem intraspinöse Pool an d'Synapse verkeeft. Sou ee Wee schéngt awer onwahrscheinlech no de Studien ze weisen datt GluA1 extrasynaptesch agebonne gëtt (Boehm et al., 2006; Makino a Malinow, 2009; Oh et al., 2006; Serulle et al., 2007; Sonn et al., 2005). Dës Entdeckunge stellen déi éischt Manifestatioun duer datt den Zäitlaf fir GluA1 Handel (<5 min) a Wee observéiert kënschtlech ginn och observéiert an vivoAn. Zousätzlech, eis Resultater proposéiere datt wiederhuelend belountende Reizen d'Kapazitéit fir d'Potenséierung vun enger Synaps z'änneren andeems de Pool vun intraspinöse Rezeptoren, déi fäeg sinn, z'erreechen.

Well Saccharin induzéiert GluA1 trafficking ähnlech wéi sucrose, ass de kaloreschen Inhalt vun sucrose net erfuerderlech. Saccharin stimuléiert de selwechte séissen Geschmaach Rezeptor, T1R2 / T2R3, als sucrose (Masuda et al., 2012; Nelson et al., 2001), suggesting Aktivéierung vun dësem Rezeptor initiéiert méiglecherweis d'Inkorporatioun vu GluA1 a MSN Synapses. Sucrose erhöht d'Dopamin Verëffentlechung an den Ugrëffer vu VTA Neuronen (Cacciapaglia et al., 2012; McCutcheon et al., 2012; Rada et al., 2005) leading zu GluA1 Uewerflächhandel. Also de Wee deen de séiss Geschmaachs Rezeptor mat der VTA verbënnt ass méiglecherweis zentral fir d'Plastizitéit déi hei studéiert gouf.

Et ass méiglech datt de schnelle GluA1 Trafficking no der Sachrose-Ernierung eng Roll bei der Reguléierung vun der spontaner Lokomotioun spillt. Tatsächlech, an sucrose-trainéiert Déieren, huet d'Inhibitioun vu CPARs d'Erhiewung vun der spontaner Lokomotorescher Aktivitéit direkt no der Sachrose-Entéierung verhënnert. Total Distanz vu Ratten nom Erfolleg vun der Sackarosverbrauch gemooss op e puer Deeg war däitlech eropgaang fir d'Period 3 min direkt nom sucrose Konsum um siwenten Dag vum Training. Erwuessene Aktivitéit direkt no der Sackarose gouf observéiert ugefaang am Dag 3 vum Training, awer gouf net wesentlech anescht bis den Dag 7. Dës Zäitkurs vun der Aktivitéit korreléiert mat der Zäitkurs vun der Akkumulation vu GluA1 an accumbens KärendendritenAn. Déi verstäerkte Lokomotiv war eng funktionell Konsequenz vum CPAR Trafficking zu MSN Synapses am accumbens Kär zënter Naspm Injektioun an de Kär huet d'Erhéijung vun der Aktivitéit inhibéiert. Präventioun vu erhiewte Lokomotioun vun engem NMDA Rezeptor Inhibitor huet bewisen datt d'Glutamat Signaliséierung iwwer NMDA Rezeptoren souwéi CPARs noutwendeg war fir d'Lokomotoraktivitéit z'erhéijen. Sucrose Entzündung war awer net beaflosst vu Blockade vu Glutamat Signaliséierung, am Aklang mat fréiere Studien, déi weisen datt den accumbens Kär an der Orchestratioun vun de motoreschen Äntwerte verbonne mat der orosensorescher Belounung involvéiert ass awer net de Konsum selwer (Smith, 2004). En ähnlechen Zäitcours fir d'Entwécklung vun Hyperlocomotion gouf fir d'Entwécklung vu bedingt Hyperaktivitéit bei Déieren gemellt, déi hirt deeglecht Molzecht an engem ënnerscheedlechen Ëmfeld fidderen (Matthews et al., 1996). Wann déi heiteg Äntwert eng bedingt Hyperaktivitéit wär, déi aus dem Kopplung vum Kontext an der sucrose entstinn, hätt et awer d'Soccharose geliwwert, wat net observéiert gouf. Et ass méiglech datt d'Sujeten eng explorativ Arousal weisen. Weider Experimenter wieren noutwendeg fir z'ënnerscheeden ob erhéicht Lokomotioun no der Sachrose-Ernährung Erfuerschung war am Géigesaz zu enger Form vu Motorsensibiliséierung oder anerem Verhalen. Op alle Fall huet d'Héicht vun der spontaner Lokomotioun d'Signalisatioun vun der Glutamat erfuerderlech a koum, op d'mannst zum Deel, aus der Abezéiung vu CPAR an den accumbens Kär.

Déi erhéngte Lokomotoresch Aktivitéit nom Sokrose-Ernierung kann direkt aus der observéierter Potenzéierung vun den accumbens Kär Synapses resultéieren, well de verstäerkten Ausgang vun der direkter Basal Ganglia Wee féiert Lokomotioun duerch Desinhibitioun vum Motor Thalamus (Sesack a Gnod, 2010). Thien potenzéiert Synapsen déi meescht wahrscheinlech wunnen op direktem Wee accumbens Kärneuronen, déi D1Rs ausdrécken. Potenzéierung vun direktem Wee Neuronen Synapses géif resultéieren wann D1R Aktivitéit de GluA1-enthale AMPARs enthale fir Synapsen an dësen Neuronen no robuste Dopamin Fräiloossung ze induzéieren. Déi doraus resultéierend Potenzéierung géif Aktivitéit an hemmende Projektioune vun direkten Wee Neuronen an Basal Ganglia Ausgangskäre erhéijen, doduerch de Motor Thalamus desinhibéieren an d'motoresch Cortex Aktivitéit förderen (Gerfen a Surmeier, 2011; Kravitz et al., 2010; Sesack a Gnod, 2010). Déi synaptesch Potenzéierung beobachtet no wiederhuelter Sachrose-Inwendung fënnt méiglecherweis statt an direkten Wee Neuronen, well Dopamin, déi duerch den D1 Rezeptor handelt, kann GluA1 S845 Phosphorylatioun induzéieren, wat zu Uewerflächenhandel féiert.

Eng Zuel vu Studien hunn d'Effekter vun widderhuelender Stimulatioun mat Kokain ënnersicht duerch Réckzuch, eng Behandlung déi déif Effekter op d'Belounungssystemfunktioun ausübt a schliisslech zu Kokainsensibiliséierung féiert, wat charakteriséiert ass duerch erhéicht motoresch Äntwert op Kokain, Drogenverlaangen a Réckfall (Kalivas et al., 1998). Widderholl IP Injektioun mat Kokain fir 5 – 10 Deeg gefollegt vum Réckzuch resultéiert an eng graduell Erhéijung iwwer 14 Deeg an der Uewerfläch GluA2-enthale AMPA Rezeptoren (Boudreau et al., 2007; Kourrich et al., 2007). Wéi och ëmmer, op 45 Deeg Réckzuch no der 10 d Selbstverwaltung gouf eng grouss Erhéijung vum Rectifizéierungsindustrie bei Rat Rat MS observéiert. (McCutcheon et al., 2011b) wat op eng Erhéijung vun CPAR ugeet. Also, CPAR Trafficking gouf beobachtet souwuel Succès Integéiere, an der aktueller Aarbecht, a Kokain Selbstverwaltung, an zwar ënner ganz verschiddene Behandlungskonditioune. Well d'direkt Konsequenze vu Kokain Selbstverwaltung oder Injektioun (z. B. bei 5 Minutte Post) net bekannt sinn, kann d'Kokainaktioun net direkt mat der aktueller Sackarosaarbecht verglach ginn. Gläichzäiteg ass et net bekannt ob CPARs an MSN Synapsen vun der sucrose-trainéiert Déieren no der Stéierung vun der sucrose Training bestoe bleiwen oder wann esou Déieren eng sucrose Sensibiliséierung weisen no laanger Réckzuch.

Verstoe wéi belountende Stimuli regléieren accumbens Plastizitéit a Verhalen si kritesch fir Sucht ze adresséieren, Hyperphagie, pathologescht Spillowend, an aner Verhalensstéierunge (Basar et al., 2010; Berridge, 2009; Luscher a Malenka, 2011). Iwwerzocker vun der Zocker dréit zur Adipositasepidemie bäi (Hu a Malik, 2010), an och wann potenziell ähnlech wéi Drogenmëssbrauch (Avena et al., 2008), ass säi Mechanismus net extensiv exploréiert. Déi aktuell Befindunge stellen Basiselementer vun der Belounungsinduséierter Plastizitéit fest, aus deenen zukünfteg Studien d'Reguléierung vu komplexe Verhalen adresséiere kënnen, déi potenziell nei Weeër fir belounungsrelatéiert Pathologië konfrontéiere kënnen.

Arbeschterlidder

Mir soen de Membere vum Ziff Laboratoire, fréier a present, fir technesch Assistenz an hëllefsbereet Diskussiounen, dorënner H. Girma, L. Lee an Dr. B. Fernholz, B. Jordan, W. Lu, G. Rameau, S. Restituito & Y. Serulle. Dës Aarbecht gouf vum National Institute of Mental Health Predoctoral Fellowship F31MH76617-01 an NIH Training Grant 5T32DC000063 zum New York University Training Program an den Neurowëssenschaften (DST), R01NS061920 vum Nationalen Institut fir Neurologesch Stéierungen a Schlaganfall (EBZ), 1R21MH091445- ënnerstëtzt. 01 vum Nationalen Institut fir Mental Gesondheet an Office of Research on Women's Health, Klarman Family Foundation Grants Program bei Iessstéierunge Fuerschung, NYU's Research Challenge Fund an P30EY13079 (CA), National Institut fir Drogenmëssbrauch Subventioun DA003956 an en Onofhängegen Enquêteur Award vun NARSAD (KDC), National Institut fir Taubheit an aner Kommunikatiounsstéierunge gewähren DC009635 u RCF, a vun engem Som Subventioun am Centre of Excellence on Addiction vum New York University Langone Medical Center.

Noten

Interessekonflikt: D'Auteuren deklaréieren keng konkurrenz finanziell Interessen.

Referenze

  1. Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Beweiser fir Zocker Sucht: Verhalens- a Neurochemieeffekter vun intermittierend, exzessiver Zockerlaangst. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32: 20-39. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  2. Basar K, Sesia T, Groenewegen H, Steinbusch HW, Visser-Vandewalle V, Temel Y. Nucleus accumbens an Impulsivitéit. Prog Neurobiol. 2010; 92: 533 – 557. [PubMed]
  3. Berridge KC. 'Liken' a 'wëllen' Iessbelounungen: Gehirnsubstrater a Rollen an Iessstéierungen. Physiologie & Verhalen. 2009; 97: 537-550. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  4. Boehm J, Kang MG, Johnson RC, Esteban J, Huganir RL, Malinow R. Synaptesch Inkorporatioun vun AMPA Rezeptoren während LTP gëtt vun engem PKC Phosphorylatiounsplaz op GluR1 kontrolléiert. Neuron. 2006; 51: 213 – 225. [PubMed]
  5. Boudreau AC, Reimers JM, Milovanovic M, Wolf ME. Zell Uewerfläch AMPA Rezeptoren an de Ratten Nukle Accumbens erhéigen sech beim Kokainentzuch, awer internaliséieren no Kokain-Fuerderung a Verbindung mat verännerter Aktivatioun vu mitogen-aktivéierten Proteinkinase. J Neurosci. 2007; 27: 10621 – 10635. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  6. Brebner K, Wong TP, Liu L, Liu Y, Campsall P, Grey S, Phelps L, Phillips AG, Wang YT. Nucleus accumbens laangfristeg Depressioun an den Ausdrock vu Verhalensensibiliséierung. Wëssenschaft. 2005; 310: 1340 – 1343. [PubMed]
  7. Cacciapaglia F, Saddoris MP, Wightman RM, Carelli RM. Differenziell Dopamin Fräiloossung Dynamik am Käre accumbens Kär a Schuel verfollegen ënnerschiddlech Aspekter vum Zilgeriicht Verhalen fir Succès. Neuropharmakologie 2012 [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  8. Calabresi P, Maj R, Pisani A, Mercuri NB, Bernardi G. Laangfristeg synaptesch Depressioun am Striatum: physiologesch an pharmakologesch Charakteriséierung. J Neurosci. 1992; 12: 4224 – 4233. [PubMed]
  9. Carr KD, Chau LS, Cabeza de Vaca S, Gustafson K, Stouffer M, Tukey DS, Restituito S, Ziff EB. AMPA Rezeptor Ënnerdeelung GluR1 downstream vun D-1 Dopamin Rezeptor Stimulatioun an der Nukleus Accumbens Schuel mediéiert eng Erhéijung vum Drogenbelounungsgréisst an der Liewensmëttelbeschränkter Rat. Neurowëssenschaft. 2010; 165: 1074 – 1086. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  10. Conrad KL, Tseng KY, Uejima JL, Reimers JM, Heng LJ, Shaham Y, Marinelli M, Wolf ME. Bildung vun Accumbens GluR2-fehlend AMPA Rezeptoren mediéiert Inkubatioun vu Kokainverlaangen. Natur. 2008; 454: 118 – 121. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  11. Day JJ, Carelli RM. De Kärel accumbens a Pavlovian belount Léierpersonal. Neurologen. 2007; 13: 148-159. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  12. de Araujo IE, Oliveira-Maia AJ, Sotnikova TD, Gainetdinov RR, Caron MG, Nicolelis MA, Simon SA. Iessen belount an der Verontreiung vu Goût Rezeptor Signalisatioun. Neuron. 2008; 57: 930 – 941. [PubMed]
  13. Ehlers MD, Heine M, Groc L, Lee MC, Choquet D. Diffusioun Trapping vu GluR1 AMPA Rezeptoren duerch Input-spezifesch synaptesch Aktivitéit. Neuron. 2007; 54: 447 – 460. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  14. Den Esteban JA, Shi SH, Wilson C, Nuriya M, Huganir RL, Malinow R. PKA Phosphorylatioun vun AMPA Rezeptor-Ënnerunitéiten kontrolléiert synaptesch Traffik ënnerierdesch Plastizitéit. Nat Neurosci. 2003; 6: 136 – 143. [PubMed]
  15. Gerfen CR, Surmeier DJ. Modulatioun vu striatal Projektiounssystemer duerch Dopamin. Jährlech Iwwerpréiwung vun der Neurowëssenschaft. 2011; 34: 441 – 466. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  16. Grueter BA, Brasnjo G, Malenka RC. Postsynaptesch TRPV1 ausléist Zellypspezifesch laangfristeg Depressioun am nucleus accumbens. Natur Neurowëssenschaften. 2010; 13: 1519 – 1525. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  17. Hien K, Song L, Cummings LW, Goldman J, Huganir RL, Lee HK. Stabiliséierung vu Ca2 + -permeable AMPA Rezeptoren op perisynaptesche Site duerch GluR1-S845 Phosphorylatioun. Proc Natl Acad Sci US A. 2009; 106: 20033 – 20038. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  18. Hu FB, Malik VS. Zocker-séiss Getränker a Risiko fir Iwwergewiicht an Typ 2 Diabetis: epidemiologesch Beweiser. Physiologie & Verhalen. 2010; 100: 47-54. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  19. Isaac JT, Ashby MC, McBain CJ. D'Roll vum GluR2 Ënnerdeelung an der AMPA Rezeptor Funktioun an synaptescher Plastizitéit. Neuron. 2007; 54: 859 – 871. [PubMed]
  20. Jordan BA, Fernholz BD, Boussac M, Xu C, Grigorean G, Ziff EB, Neubert TA. Identifikatioun a Verifizéierung vu Roman Nager postsynaptesch Dichtproteine. Mol Zell Proteomik. 2004; 3: 857 – 871. [PubMed]
  21. Kalivas PW, Pierce RC, Cornish J, Sorg BA. Eng Roll fir d'Sensibiliséierung beim Verlaangen an der Réckwee bei Kokain Sucht. J Pharmacol. 1998; 12: 49 – 53. [PubMed]
  22. Kitagawa M, Kusakabe Y, Miura H, Ninomiya Y, Hino A. Molekulär genetesch Identifikatioun vun engem Kandidat Rezeptor Gen fir séissen Goût. Biochemesch a biophysesch Fuerschungskommunikatiounen. 2001; 283: 236 – 242. [PubMed]
  23. Kourrich S, Rothwell PE, Klug JR, Thomas MJ. Kokain Erfarung kontrolléiert Bidirektional synaptesch Plastizitéit an de Käre accumbens. J Neurosci. 2007; 27: 7921 – 7928. [PubMed]
  24. Kravitz AV, Freeze BS, Parker PR, Kay K, Thwin MT, Deisseroth K, Kreitzer AC. Reguléierung vu parkinsonmotoresche Verhalen duerch optogenetesch Kontroll vu Basal Ganglia Circuit. Natur. 2010; 466: 622 – 626. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  25. LaPlant Q, Vialou V, Covington HE, 3rd, Dumitriu D, Feng J, Warren BL, Maze I, Dietz DM, Watts EL, Iniguez SD, et al. Dnmt3a regléiert emotional Verhalen an der Wirbelsäule vu Plastizitéit am Kär Akkumbens. Nat Neurosci. 2010; 13: 1137 – 1143. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  26. Liu SJ, Zukin RS. Ca2 + -permeabel AMPA Rezeptoren an synaptescher Plastizitéit an neuronalen Doud. Trends an Neurowëssenschaften. 2007; 30: 126 – 134. [PubMed]
  27. Lu W, Isozaki K, Roche KW, Nicoll RA. Synaptesch Zilgeriicht vun AMPA Rezeptoren gëtt vun engem CaMKII Site an der éischter intrazellularer Schläif vu GluA1 geregelt. Proc Natl Acad Sci US A. 2010; 107: 22266 – 22271. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  28. Lu W, Roche KW. Posttranslational Reguléierung vum AMPA Rezeptorhandel a Funktioun. Aktuell Meenung an der Neurobiologie 2011 [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  29. Luscher C, Malenka RC. Drogen-provozéiert synaptesch Plastizitéit an der Sucht: vu molekulare Verännerunge bis de Circuit Remodeling. Neuron. 2011; 69: 650 – 663. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  30. Makino H, Malinow R. AMPA Rezeptorinkorporatioun a Synapsen wärend LTP: d'Roll vun der lateraler Bewegung an der Exozytosis. Neuron. 2009; 64: 381 – 390. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  31. Mameli M, Halbout B, Creton C, Engblom D, Parkitna JR, Spanagel R, Luscher C. Kokain-evakuéiert synaptesch Plastizitéit: Persistenz an der VTA ausléist Adaptatiounen am NAc. Nat Neurosci. 2009; 12: 1036 – 1041. [PubMed]
  32. Masuda K, Koizumi A, Nakajima K, Tanaka T, Abe K, Misaka T, Ishiguro M. Charakteriséierung vun de Verknëppungsformen tëscht mënschleche séissen Geschmaachs Rezeptoren an niddrege molekulare Gewiicht séiss Verbindungen. PloS eent. 2012; 7: e35380. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  33. Matthews K, Wilkinson LS, Robbins TW. Widderhuelung vu Muttertrennung vu Viraarbechter Ratten attenuéiert Verhalensreaktiounen op primär a bedingt Ureiz am Erwuessene. Physiol Behav. 1996; 59: 99 – 107. [PubMed]
  34. Max M, Shanker YG, Huang L, Rong M, Liu Z, Campagne F, Weinstein H, Damak S, Margolskee RF. Tas1r3, kodéiert en neie Kandidat Goût Rezeptor, ass allelic fir de séiss Réceptivitéit locus Sac. Naturgenetik. 2001; 28: 58 – 63. [PubMed]
  35. McCutcheon JE, Beeler JA, Roitman MF. Sucrose-prévisistesch Zeechen ervirhiewen méi phasesch Dopamin Verëffentlechung wéi Saccharin-prediktiv Zeechen. Synapse. 2012; 66: 346 – 351. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  36. McCutcheon JE, Wang X, Tseng KY, Wolf ME, Marinelli M. Kalzium-permeablen AMPA Rezeptoren sinn präsent an Nukleus accumbens Synapses no laangem Réckzuch vu Kokain Selbstverwaltung awer net Experimenter-verwalt Kokain. De Journal of Neuroscience: den offizielle Journal vun der Society for Neuroscience. 2011a; 31: 5737 – 5743. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  37. McCutcheon JE, Loweth JA, Ford KA, Marinelli M, Wolf ME, Tseng KY. Grupp I mGluR Aktivatioun reverséiert Kokain-induzéiert Akkumulation vu Kalzium-permeablen AMPA Rezeptoren an Nukleus Accumbenssynapses iwwer e Proteinkinase C-ofhängeg Mechanismus. J Neurosci. 2011b; 31: 14536 – 14541. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  38. Nedelescu H, Kelso CM, Lazaro-Munoz G, Purpura M, Cain CK, Ledoux JE, Aoki C. Endogen GluR1-enthale AMPA Rezeptoren iwwersetze sech op asymmetresch Synapsen an der lateraler Amygdala wärend der fréier Phase vun der Angscht Memory Bildung: en elektron mikroskopesch Immunozytochemesch studéieren. De Journal vun der Comparativ Neurologie. 2010; 518: 4723 – 4739. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  39. Nelson G, Hoon MA, Chandrashekar J, Zhang Y, Ryba NJ, Zuker CS. Mammalian séiss Geschmaach Rezeptoren. Zell. 2001; 106: 381 – 390. [PubMed]
  40. Oh MC, Derkach VA, Guire ES, Soderling TR. Extrasynaptesch Membranhandel reglementéiert vu GluR1 serine 845 Phosphorylatioun freet AMPA Rezeptoren fir laangfristeg Potenzéierung. J Biol Chem. 2006; 281: 752 – 758. [PubMed]
  41. De Pascoli V, Turiault M, Luscher C. Verréckelung vu synaptesche Potokatioun vu Kokain zréckgeworf reset Drogen-induzéiert adaptivt Verhalen. Natur. 2012; 481: 71 – 75. [PubMed]
  42. Planz K, Pelkey ​​KA, Bortolotto ZA, Morita D, Terashima A, McBain CJ, Collingridge GL, Isaac JT. Transient Inkorporatioun vun nativen GluR2-fehlend AMPA Rezeptoren wärend hippocampal laangfristeg Potenzéierung. Nat Neurosci. 2006; 9: 602 – 604. [PubMed]
  43. Rada P, Avena NM, Hoebel BG. D'Daily gifft op Zocker ëmmer erëm Dopamin an der Accumbens Shell. Neurowissenschaft. 2005; 134: 737-744. [PubMed]
  44. Roche KW, O'Brien RJ, Mammen AL, Bernhardt J, Huganir RL. Charakteriséierung vu multiple Phosphorylatiounsplazen am AMPA Rezeptor GluR1 Ënnerunit. Neuron. 1996; 16: 1179 – 1188. [PubMed]
  45. Rumpel S, LeDoux J, Zador A, Malinow R. Postsynaptic Rezeptorhandel ënnergräifend eng Form vu associativem Léieren. Wëssenschaft. 2005; 308: 83 – 88. [PubMed]
  46. Sainz E, Korley JN, Battey JF, Sullivan SL. Identifikatioun vun engem Roman Member vun der T1R Famill vu putative Goût Rezeptoren. Journal vun Neurochemie. 2001; 77: 896 – 903. [PubMed]
  47. Serulle Y, Zhang S, Ninan I, Puzzo D, McCarthy M, Khatri L, Arancio O, Ziff EB. Eng GluR1-cGKII Interaktioun reguléiert AMPA Rezeptorhandel. Neuron. 2007; 56: 670 – 688. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  48. Sesack SR, Grace AA. Cortico-Basal Ganglia Belounungsnetz: Mikrokreeslaf. Neuropsychopharmacology: offiziell Verëffentlechung vum American College of Neuropsychopharmacology. 2010; 35: 27 – 47. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  49. Smith GP. Accumbens Dopamin vermittelt de belountende Effekt vun orosensorescher Stimulatioun duerch Sukrose. Appetit. 2004; 43: 11 – 13. [PubMed]
  50. Smith WB, Starck SR, Roberts RW, Schuman EM. Dopaminerg Stimulatioun vun der Lokaler Proteinsynthese verbessert d'Uewerfläch Ausdrock vun GluR1 a synaptesch Iwwerdroung an hippocampal Neuronen. Neuron. 2005; 45: 765 – 779. [PubMed]
  51. Sonn X, Milovanovic M, Zhao Y, Wolf ME. Akut a chronesch Dopamin Rezeptor Stimulatioun moduléiert AMPA Rezeptorhandel am Kär accumbens Neuronen cocultured mat prefrontale Cortex Neuronen. De Journal of Neuroscience: den offizielle Journal vun der Society for Neuroscience. 2008; 28: 4216 – 4230. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
  52. Sonn X, Zhao Y, Wolf ME. Dopamin Rezeptor Stimulatioun moduléiert AMPA Rezeptor Synaptesch Insertion a prefrontale Cortex Neuronen. J Neurosci. 2005; 25: 7342 – 7351. [PubMed]
  53. Thomas MJ, Beurrier C., Bonci A, Malenka RC. D'laang Depressioun am Nukleus accumbens: e neuralem Korrelat vun der Verhale vu Sensibiliséierung zum Kokain. Nat Neurosci. 2001; 4: 1217-1223. [PubMed]
  54. Ungless MA, Whistler JL, Malenka RC, Bonci A. Eenzeg Kokain Expositioun in vivo induzéiert laangfristeg Potenzéierung bei Dopamin Neuronen. Natur. 2001; 411: 583 – 587. [PubMed]
  55. Whitlock JR, Heynen AJ, Shuler MG, Bear MF. Léieren induzéiert laangfristeg Potenzéierung am Hippocampus. Wëssenschaft. 2006; 313: 1093 – 1097. [PubMed]