ഫ്ലൂറസസെൻസ്-ആക്റ്റിവേറ്റഡ് സെൽ സോർട്ടിംഗ് (FACS) (എക്സ്.എൻ.എക്സ്) ഉപയോഗിച്ച് ഒരു എലറ്റ് ഡോർസൽ സ്ട്രാറ്റാറ്റത്തിൽ നിന്നും മെത്താംഫിറ്റമിൻ-ആക്റ്റീവ് ചെയ്ത ഫോസ്-എക്സ്പ്രസിങ് ന്യൂറോണുകളിലുളള തന്മാത്രകളുടെ രൂപീകരണം

ജെ ന്യൂറോചെം. ചൊവ്വാഴ്ച, 29 ജനുവരി XX (2014) doi: 128 / jnc.1. എഫുബ് ഓഗസ്റ്റ് 29 ആഗസ്റ്റ്.

ലിയു ക്യു1, റൂബിയോ FJ, ബോസേർട്ട് ജെ, മാർച്ചന്റ് NJ, ഫാനസ്സ് എസ്, ഹൌസ് എക്സ്, ഷാഹാം വൈ, BT പ്രതീക്ഷിക്കുന്നു.

വേര്പെട്ടുനില്ക്കുന്ന

മെത്താംഫിറ്റമിനും മറ്റ് മരുന്നുകളും തലച്ചോറിലെ എല്ലാ ന്യൂറോണുകളുടേയും ഒരു ചെറിയ അനുപാതത്തെ സജീവമാക്കുന്നു. നാം മുമ്പ് ഒരു ഫ്ലൂറസൻസ്-ആക്റ്റിവേറ്റഡ് സെൽ സോർട്ടിംഗ് (FACS) വികസിപ്പിച്ചെടുത്തു - ആവിഷ്കരിച്ച മാലിക് മോഡലുകളുടെ സ്വഭാവം നിർണ്ണയിക്കാൻ രീതി അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ന്യൂറോണുകളിൽ തിരഞ്ഞെടുത്തത്. എങ്കിലും, ഈ രീതി പല എലികളിൽ നിന്ന് പൂശുന്നു സാമ്പിളുകൾ ആവശ്യമാണ്. ഒരു മൾട്ടിപ്ലക്സ് പ്രീ-ബീജസ്പ്രക്രിയാ തന്ത്രത്തിലൂടെ ഒരു ഒറ്റ എലിവിൽ നിന്നും ഫോസ്-എക്സ്പ്രസിംഗ് ഡോർസൽ സ്ട്രളാറ്റൽ ന്യൂറോണുകളിൽ മൂലം മാറ്റങ്ങൾ വരുത്താൻ ഒരു പരിഷ്കരിച്ച FACS- അടിസ്ഥാന രീതിയെ ഞങ്ങൾ ഇപ്പോൾ വിവരിക്കുന്നു.

ഫോസ് ആൻഡ് ന്യൂൺ (ഒരു ന്യൂറോണൽ) ഇമ്യൂണോഹിസ്റ്റോഹൈസ്ട്രിയിൽ സൂചിപ്പിക്കുന്നത്, ദഹനേന്ദ്രിമിക് ഇൻകുനേഷൻ (5 mg / kg, ip), XURX-XNUM% പിണ്ഡം സ്ട്രേറ്റും ന്യൂറോണുകൾ എന്നിവ സൂക്ഷ്മപരിശോധനയ്ക്ക് വിധേയമാക്കിയതിന് ശേഷം, XURX% ന്യൂറോണുകളിൽ കുറഞ്ഞത് ഉപ്പുവെള്ളം കുത്തിവയ്ക്കൽ വഴി സജീവമാക്കി.

FOS- പോസിറ്റീവ്, ഫോസ് നെഗറ്റീവ് ന്യൂറോണുകളായി NeuN- ലേബൽ ന്യൂറോണുകൾ വേർതിരിച്ച്, FOSS- പോസിറ്റീവ് ന്യൂറോണുകളേക്കാൾ RT-qPCR ഉപയോഗിച്ച് എംആർഎൻഎ എക്സ്പ്രഷൻ വിലയിരുത്തി. ആദ്യകാല ജീനുകളായ ആർമി, ഹോമർ- 3, സി-ഫോസ്, ഫോസ് ബി, അതിന്റെ ഐസോഫോറുകൾ എന്നിവയിൽ XHTMLX-20 മടങ്ങ് വർദ്ധനവുണ്ടാക്കി മെത്താംഫിറ്റമിൻΔfosB ഉം നോവല് ഐസോഫോം ΔfosB-2 ഉംഫോസ് പോസിറ്റീവ് എന്നാൽ ഫോസ് നെഗറ്റീവ് ന്യൂറോണുകൾ അല്ല. സിംഗിൾ ഡോർസൽ സ്ട്രെയ്റ്റ്ഹൌസ് ഹോണോജെനുകളിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുക്കാത്ത സാമ്പിളുകളിലാണെങ്കിൽ ഉടൻ തന്നെ ആദ്യകാല ജീനസ് എംആർഎൻഎ ഇൻജക്ഷൻ, എൺപത് മടങ്ങ് അല്ലെങ്കിൽ അകലെയാണ്. സങ്കീർണ്ണമായ ആസക്തി മോഡലുകളിൽ മയക്കുമരുന്നുകളോ മയക്കുമരുന്ന് ബന്ധിതമോ ആയ ചിഹ്നങ്ങളിൽ സജീവമായ ന്യൂറോണുകളിലെ അതുല്യമായ തന്മാത്രാ മാറ്റങ്ങൾ പഠിക്കാൻ നമ്മുടെ പരിഷ്കരിച്ച രീതി സാധ്യമാക്കുന്നു.

മെത്താംഫിറ്റമിനും മറ്റ് മരുന്നുകളും തലച്ചോറിലെ എല്ലാ ന്യൂറോണുകളുടേയും ഒരു ചെറിയ അനുപാതത്തെ സജീവമാക്കുന്നു. നാം ഇവിടെ ന്യൂറോൺ ആക്റ്റിവിറ്റി മാർക്ക് ഫോസ് പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന സജീവമായ ന്യൂറോണുകളിൽ തിരഞ്ഞെടുത്ത മോളികുലാർ മാറ്റങ്ങളുടെ സ്വഭാവം മെച്ചപ്പെടുത്താൻ മെച്ചപ്പെട്ട രീതി റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യുന്നു. ഒരു എലറ്റ് ഡോർസൽ സ്ട്രാറ്റാറ്റത്തിൽ നിന്ന് ചുരുങ്ങിയത് മെത്താംഫിറ്റമിൻ ജനിച്ച് ജനിതക എക്സ്പ്രഷനെ കുറച്ചെൻറ XMS ഫോസ്-എക്സ്പ്രസിംഗ് ന്യൂറോണുകളേക്കാളും കുറച്ചുമാത്രമാണ് ഞങ്ങൾ FACS ഉപയോഗിച്ച് പിസിആർ പ്രീ-ബീജസങ്കലനത്തിനുപയോഗിച്ചത്. ഫോസ് പോസിറ്റീവ് ഫോസ് നെഗറ്റോസല്ലെങ്കിലും ഫോസ് പോസിറ്റീവ് ആയ ആദ്യകാല ജീനുകളുടെ (ജെ.ജി. സങ്കീർണ്ണമായ ആസക്തി മരുന്നുകളിൽ മയക്കുമരുന്നുകളോ മയക്കുമരുന്ന് ബന്ധിതമോ ആയ ചിഹ്നങ്ങളിൽ ഉണർത്തുന്ന ന്യൂറോണുകളിലെ അതുല്യമായ തന്മാത്ര മാറ്റങ്ങൾ മനസ്സിലാക്കാൻ ഇത് ലക്ഷ്യം വെക്കുന്നു.

പ്രസിദ്ധീകരിച്ചത് 2013. ഈ ലേഖനം അമേരിക്കൻ ഐക്യനാടുകളിൽ പൊതുസഞ്ചയത്തിൽ ഉള്ളതാണ്, അമേരിക്കൻ ഐക്യനാടുകളിൽ പൊതുസഞ്ചയത്തിൽ വരുന്നു.