പ്ലോസ് വൺ നവംബർ നവംബർ 10 (2013): 13. doi: 25 / journal.pone.8.
നിഷിജിമ ടി, കവാക്കമി എം, കിറ്റ I.
ഉറവിടം
ടോക്യോ മെട്രോപൊളിറ്റൻ യൂണിവേഴ്സിറ്റി, ടോക്കിയോ, ജപ്പാനിലെ ബിഹേവിയറൽ ഫിസിനോളജി ലബോറട്ടറി, ഗ്രാഡ്യൂട്ട് സ്കൂൾ ഓഫ് ഹ്യൂമൻ ഹെൽത്ത് സയൻസസ്.
വേര്പെട്ടുനില്ക്കുന്ന
ഭൗതിക വ്യായാമം ഹിപ്പോകാമ്പൽ ഫംഗ്ഷന്റെ വിവിധ വശങ്ങൾ മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നു. ന്യൂറോണൽ പ്രവർത്തനങ്ങൾ ന്യൂറോണൽ പ്രവർത്തനങ്ങൾ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നതിന് പ്രധാനമാണെന്ന സങ്കല്പത്തിൽ, മുൻകാല സാഹിത്യം ഹിപ്പോകാമ്പസ് നാളിൽ നാരോഗികമായ സജീവമാക്കൽ ഉളവാക്കുന്നതായി സ്ഥിരമായി തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്. ആവർത്തിക്കുന്ന സജീവമായ ഉത്തേജനം, ΔFosB എന്ന ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകം ഒരു കുതിച്ചുചാട്ടത്തിന് ഇടയാക്കുന്നു, ഇത് ദീർഘകാല ന്യൂറൽ പ്ലാസ്റ്റിക്ക്.
ഹിപ്പോകാമ്പസിൽ ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുകളെ നയിക്കുന്ന ദീർഘകാല സ്വമേധയാ കൊണ്ടുണ്ടാക്കിയ ചക്രം ആവിഷ്കരിക്കാനും, ഡോർസോ-വ്രെൽട്രൽ അക്ഷത്തിൽ ഹിപ്പോകാംപൽ ഉപവിഭാഗങ്ങളിലുള്ള എല്ലാ പ്രദേശങ്ങളും പരിശോധിക്കാനും സാധിക്കുമെന്ന് ഈ പഠനത്തിലൂടെ ഞങ്ങൾ മനസ്സിലാക്കി. XXX ആഴ്ചയ്ക്കായി പ്രവർത്തിപ്പിക്കുന്ന ഒരു വീലിലോ അല്ലെങ്കിൽ C57BL / XNUM മില്ലുകൾ ഉണ്ടായിരുന്നില്ല. എല്ലാ ഹിപ്പൊപാംപൽ പ്രദേശങ്ങളിലും FosB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധശേഷി കൂട്ടും. (അതായത് DG, CA1, CA3 ഉപവിഭാഗങ്ങളിൽ ഡോർസൽ ആൻഡ് വെന്റൽ ഹിപ്പോകാമ്പസ്). ഫലകം സ്ഥിരമായി FosB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധ സംവിധാനത്തിൽ കോർട്ടെക്സിനെ ബാധിക്കുന്ന ചലനാത്മക വാദം സ്ഥിരീകരിച്ചു, ഹിപ്പോകാമ്പസിൽ തന്നെ FosB / ΔFosB ലെ യൂണിഫോം വർദ്ധനവ് പ്രവർത്തിക്കാത്ത ഒരു അനന്തരഫലമല്ലെന്ന് ഇത് സൂചിപ്പിക്കുന്നു. വർദ്ധിച്ച ഹിപ്പോകാപ്പൽ FosB / ΔFosB immunoreactivity, ΔFosB വർദ്ധിപ്പിച്ചതിനാൽ പ്രാഥമിക ബ്ളോട്ട് ഡാറ്റ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. ഹിപ്പോകാമ്പസ് മുഴുവൻ സമയവും ΔFosB ഉദ്ധരണിക്കുവേണ്ടി ദീർഘകാല ശാരീരിക വ്യായാമം ഒരു ശക്തമായ ട്രിഗ്ഗർ ആണെന്ന് ഈ ഫലങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. ഇത് വ്യായാമം, മുതിർന്ന ഹിപ്പോകാമ്പസ് ആശ്രിതത്വം എന്നിവ എങ്ങനെ മെച്ചപ്പെടുത്താം എന്ന് വിശദീകരിക്കും. ഡി.ജി.യിൽ FOSB / ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുകൾ ഇരട്ട കോർട്ടെൻ-ഇമ്മ്യൂണോയോക്രാറ്റിക് (അതായത്, പക്വമായ) ന്യൂറോണുകളുടെ എണ്ണവുമായി അനുകൂലമാണ്.
ΔFOSB വ്യായാമം-ഉദ്ദീപിപ്പിക്കപ്പെട്ട ന്യൂറോജനിസത്തിന്റെ മധ്യസ്ഥതയിൽ തുടർന്നുകൊണ്ടിരിക്കുകയാണെങ്കിലും, ഈ ഡാറ്റ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് വ്യായാമത്തെ നയിക്കുന്ന ന്യൂറോജീസിസ് കുറഞ്ഞത് പ്രവർത്തനം ആശ്രിതമാണെന്നതാണ്. ഒരുമിച്ച് കണക്കാക്കിയാൽ, ΔFosB വ്യായാമം-ഉദ്ദീപിപ്പിക്കപ്പെട്ട ഹിപ്പോകാമ്പാമ്പ് പ്ലാസിറ്റി നിയന്ത്രിക്കുന്നതിൽ ഒരു പുതിയ തന്മാത്ര ലക്ഷ്യമാണ്.
അവതാരിക
എലിസബത്ത് എലിസബത്ത് ഹീറ്റോക്കമ്പസിന്റെ ഭൗതിക, ഘടനാപരമായ,1,2] അവയിൽ ചിലത് മാനുഷിക പഠനസഹായിയാണ് [3,4]. എന്നിരുന്നാലും, ഹിപ്പോകാമ്പാമ്പ് പ്ലാസിറ്റിയിൽ ഉണ്ടാകുന്ന വ്യതിയാനങ്ങൾക്കനുയോജ്യമായ മാറ്റങ്ങൾ സൂക്ഷ്മമായി മനസിലാക്കിയില്ല. എലിപ്പനികളിലെ ഹിപ്പോകാമ്പാപ്പിൾ ന്യൂറോണൽ ആക്ടിവേഷൻ വ്യായാമത്തിന് കാരണമാകുമെന്ന് മുൻ സാഹിത്യം സ്ഥിരമായി തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്. സിൻഡ്രോസിൻറെ സി-ഫോസിന്റെ സി-ഫോസ് ഉപയോഗിച്ചുള്ള ഇമ്മ്യൂനോഹിസ്റ്റോക്ക് കെമിക്കൽ പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്. ഡൈജത് ഗ്യൂറ്റസ് (DG), CA1,5-7]. കൂടാതെ, ലേസർ-ഡോപ്ലർ ഫൂമ്മെട്രിറി (എൽഡിഎഫ്) ഉപയോഗിച്ച് നടത്തിയ ഒരു പഠനത്തിൽ വളരെ ലളിതമായ ട്രെഡ്മിൽ റൈറ്റിനിലെ CA1 സബ്ഫീൽഡിലെ ന്യൂറോണൽ ആക്ടിവേഷൻ എന്ന മറ്റൊരു ഇതര സെറിബ്രൽ രക്തപ്രവാഹം (rCBF)8]. വ്യായാമത്തിന് ശേഷം വിശദമായ മേഖലാ-വിശകലനം വിശകലനത്തിനുണ്ടെങ്കിലും ഇ.എം.യുനൊനോഹിസ്റ്റോ കെമിക്കൽ പഠനങ്ങൾ എൽസിഎഫ് വ്യായാമത്തിന്റെ സമയത്ത് പ്രദേശിക മേഖലയിൽ റിയൽ-ടൈം മോണിറ്ററിംഗ് സജ്ജമാക്കുന്നു. ഓരോ പഠനത്തിന്റെയും നേട്ടങ്ങളും പരിമിതികളും ഉണ്ടെങ്കിലും, ഹിപ്പോകാമ്പാലിൻറെ ന്യൂറോണൽ പ്രവർത്തനത്തെ കുറിച്ചുള്ള വ്യായാമത്തിന്റെ ഫലവും ഈ പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചു. ദീർഘകാല സ്ഥിര വ്യായാമം ഹൃസ്വകാലത്തെ പ്ലാസ്റ്റിക്സിറ്റി പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നുണ്ട്.9].
ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഫാക്ടർ ΔFosB, പൂർണ്ണ-ദൈർഘ്യമുള്ള FOSB- യുടെ ട്രങ്കഡ് സ്പ്രിസ് ഐസോഫോം, പ്രത്യേക തലച്ചോറിലെ പ്രദേശങ്ങളിൽ പലതരം ആവർത്തിച്ചുള്ള ഉത്തേജനങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് പ്രചോദിപ്പിക്കും, അവിടെ അതിന്റെ സ്ഥിരത സ്ഥിരത (ആഴ്ചയുടെ അർദ്ധായുസ്) കാരണം ക്രമേണ കുമിഞ്ഞുകൂടുന്നു [10-12]. വളർന്നുകൊണ്ടിരിക്കുന്ന തെളിവുകൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നത്, ΔFOSB- യുടെ ഉയർന്ന നിലവാരത്തിലുള്ള ദീർഘകാല ന്യൂറൽ, പെരുമാറ്റ പ്ലാസ്റ്റിറ്റി, പ്രത്യേക ഉത്തേജനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട11,13]. ഉദാഹരണമായി, കൊക്കൈൻ, മോർഫിൻ തുടങ്ങിയ മയക്കുമരുന്ന് ഉപയോഗിച്ചുള്ള ദീർഘകാല നിയന്ത്രണം സാധാരണയായി കൂടിച്ചേർന്ന് ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുകൾ ന്യൂക്ലിയസ് അംബുംബൻസിൽ വർദ്ധിക്കുന്നു, ഈ മരുന്നുകൾക്ക് വർദ്ധിച്ചുവരുന്ന സംവേദനക്ഷമതയെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള തന്മാത്ര സംവിധാനങ്ങളെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു [11,14,15]. എസ്ഉയർന്ന കൊഴുപ്പും ഭക്ഷണ രീതിയും ലൈംഗികാനുഭൂതിയും ഉൾപ്പെടെയുള്ള മറ്റ് അവശ്യ ഉത്തേജകപദ്ധതികളിൽ ഉൾപ്പെടുന്നു [16,17], lഒൻപത് വാളണ്ടറി വീൽ റൈഡിംഗ് എയ്റ്റ് ന്യൂക്ലിയസ് അംബുംബൻസിൽ FosB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധം വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും, വൊളണ്ടറി റണ്ണിംഗ് [18,19]. എന്നിരുന്നാലും, ഹിപ്പോകാമ്പസിൽ ΔFosB expression ക്ക് വ്യായാമം ചെയ്യുന്നതായി വ്യാഖ്യാനിച്ചതായി ഒരു സാഹിത്യവിജയം പരിശോധിച്ചു. ഹീപ്പോകോപസിൽ വ്യായാമം ശീലമാക്കുന്നത് കാരണം ദീർഘകാല വൊളണ്ടറി വീൽ റണ്ണിംഗ് ഹിപ്പോകാംപസിൽ ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുകളെ പ്രേരിപ്പിക്കുമെന്ന് ഞങ്ങൾ അനുമാനിക്കുന്നു. ΔFosB ഹിപ്പോകാമ്പാലി പ്ലാസ്റ്റിക്ക് നിയന്ത്രിക്കുന്ന കൃത്യമായ സംവിധാനങ്ങൾ അനിവാര്യമാണെങ്കിലും, fosB ജീൻ ഷോക്ക് ഹിപ്പോകാമ്പാലിൻ ന്യൂറോജനിസവും, വിഷാദരോഗം പോലുള്ള സ്വഭാവവും [20,21]. ഞാൻവ്യായാമം, വ്യായാമം ന്യൂറോജനിസത്തിന്റെ വർദ്ധിപ്പിക്കാനും ആൻഡീപ്പ്രഷൻ ഉള്ളതുമാണ് [22-25]. ഞാൻനമ്മുടെ hypothesis is correct, ΔFOSB ഒരു പുതിയ സാധ്യതയുള്ള മോളികുലാർ ലക്ഷ്യം മധ്യത്തിൽ വ്യായാമം-ഉണ്ടാകുന്ന ഹിപ്പോകാമ്പാമ്പ് പ്ലാസിറ്റി ആയിരിക്കും.
ഹിപ്പോകാമ്പസിൽ അതിന്റെ രേഖാംശ (dorso-ventral) അക്ഷത്തിൽ സഹഅഭ്രമവും ഫങ്ഷണൽ ഗ്രേഡിയന്റും ഉണ്ട് [26]. ഔപചാരികമായ പഠനത്തിലും മെമ്മറിയിലും ഡോസോൾ ഹിപ്പോകാമ്പസ് പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നു [27,28], എന്നാൽ വൈറൽ ഹിപ്പോകാമ്പസ് വൈകാരിക സ്വഭാവത്തെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിൽ മുൻഗണന നൽകുന്നു [29,30]. കൂടാതെ, ഹിപ്പോകാമ്പസിന്റെ ഡോർസൽ ആൻഡ് ventral ഭാഗങ്ങളിൽ സി-ഫോസ് എക്സ്പ്രഷനിലെ വ്യത്യസ്ത പാറ്റേണുകളെ ശാരീരിക ഉത്തേജനം പ്രേരിപ്പിക്കുമെന്ന് പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട് [31-33]. വ്യായാമം,34-37] ഹിസ്റ്റോറിക് ഹിപ്പോകാമ്പസ് ആശ്രിത ഫംഗ്ഷനുകൾ [24,25,38] ദീർഘകാല സ്വമേധയായുള്ള പ്രവർത്തനത്തിന് ഹിപ്പോകാമ്പസിൽ ΔFosB- യുടെ പ്രദേശം-നിർദ്ദിഷ്ട പ്രയോഗത്തിന് കാരണമാകുന്നുണ്ടോ എന്ന് പരിശോധിക്കുന്നത് വളരെ പ്രധാനമാണ്.
ഈ പഠനത്തിന്റെ പ്രാഥമിക സിദ്ധാന്തം പറയുന്നത് ദീർഘകാല സ്വമേധയാ ഉള്ള ചക്രം മൗസ് ഹിപ്പോകാംപസിൽ ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുകളെ പ്രേരിപ്പിക്കുമായിരുന്നു എന്നതാണ്. ഈ സിദ്ധാന്തം FosB / ΔFosB ഇമ്യൂണോഹിസ്റ്റോഹൈസ്ട്രിയാണ് ഡോർസൽ ആൻഡ് വെന്റൽ ഹിപ്പോകാമ്പാൾ സബ് ഡീൽസ്, ഡി.ജി., കാക്സൺഎക്സ്എക്സ്, കക്സ്എക്സ്എക്സ്എക്സ് എന്നീ മേഖലകളിൽ അന്വേഷണം നടത്തിയത്, പ്രദേശം നിർദ്ദിഷ്ട ഇൻഡക്ഷൻ തിരിച്ചറിയാൻ കൂടുതൽ ഊന്നൽ നൽകി. ഇതിന്റെ പൂർവ്വവ്യാഖ്യാനങ്ങളെ തിരിച്ചറിയാൻ ഉപയോഗിക്കുന്ന പടിഞ്ഞാറൻ തട്ടിപ്പിനു വഴി ഫലങ്ങൾ സ്ഥിരീകരിച്ചു fosB ജീൻ ഉത്പന്നങ്ങൾ തലച്ചോറിലെ FosB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധം ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിൽ പ്രത്യേകം വർദ്ധിപ്പിച്ചിരിക്കാനുള്ള സാധ്യതയെ കുറിച്ചാണ് പ്രദേശം നിർദിഷ്ട FosB / ΔFosB ഉത്തേജനം എന്നതിനുള്ള കോർട്ടോക്സ് ഞങ്ങൾ പരിശോധിച്ചു. അവസാനമായി, FosB / ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുകളും ന്യൂറോജനിസവും തമ്മിലുള്ള പരസ്പര ബന്ധം, ഹിപ്പോകാമ്പാമ്പൽ പ്ലാസ്റ്റിക്റ്റിനെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിൽ വ്യായാമങ്ങളായ ΔFosB ഉദ്പാദനത്തിന്റെ പ്രവർത്തനപരമായ പ്രത്യാഘാതങ്ങൾ അന്വേഷിക്കുന്നതിനുള്ള ആദ്യപടിയായി അന്വേഷിച്ചു.
വസ്തുക്കളും രീതികളും
83: മൃഗങ്ങളും ധാർമ്മിക പ്രസ്താവനകളും
ഒരു കൊമേഴ്സ്യൽ ബ്രീഡർ (SLC, Shizuoka, Japan) ൽ നിന്നും ഇരുപതാം മനുഷ്യന് C57BL / 6 മൗനം (പ്രായപൂർത്തിയായ XXIX ആഴ്ച). 8 പരീക്ഷണത്തിനായി പത്ത് എലികൾ ഉപയോഗിച്ചു, കൂടാതെ 1 പരീക്ഷിച്ചതിന് പത്ത് പേരെ ഉപയോഗിച്ചു. സുസ്ഥിര താപനില (2-22 ° C), പ്രകാശം (24 / 12- വെളിച്ചം / ഇരുണ്ട ചക്രത്തിന്റെ ലൈറ്റ്, 12- ൽ പ്രകാശം), ഭക്ഷണവും വെള്ളവും പരസ്യം libitum. ടോക്കിയോ മെട്രോപൊളിറ്റൻ യൂണിവേഴ്സിറ്റിയിലെ അനിമൽ എക്സ്പിരിമെന്റൽ എത്തിക്സ് കമ്മിറ്റി അംഗീകരിച്ച എല്ലാ പരീക്ഷണാത്മക നടപടിക്രമങ്ങളും.
ഓരോ പരീക്ഷണത്തിലും എലികളുടെ നിയന്ത്രണം ഒരു കൺട്രോൾ ഗ്രൂപ്പ് (കൺട്രോൾ, n = xNUMX) അല്ലെങ്കിൽ ഒരു റണ്ണിംഗ് ഗ്രൂപ്പ് (റണ്ണർ, n = 5) ആയി ക്രമീകരിക്കപ്പെട്ടിരുന്നു. ആദ്യ ആഴ്ചയിൽ, എലിയെല്ലാം ആദ്യകാല അക്ലീലമൈസേഷനായി ഗ്രൂപ്പുകളിലെ സാധാരണ പ്ലാസ്റ്റിക് കൂടുകളിൽ (എൻഎൻഎസ്എക്സ് മീസ് / കൂട്ടിൽ) സൂക്ഷിച്ചിരുന്നു. തുടർന്ന്, റണ്ണർ മൈസ് ഒരു റണ്ണിംഗ് ചക്രം (ENV-5, മെഡി അസോസിയേറ്റ് ഇൻക്., ജോർജിയ, വി.ടി., യുഎസ്എ) ചേർന്ന ഒരു കൂട്ടിൽ മാറ്റി. ഹിപ്പോകാമ്പസിലെ വ്യായാമത്തിന് പ്രേരണയായ ന്യൂറോജനിസത്തെ ഇല്ലാതാക്കുവാൻ സാമൂഹ്യ ഒറ്റപ്പെടൽ അറിയപ്പെടുന്നു [39], മറ്റൊരു RURAL ആഴ്ചയിൽ ഒരു ഗോളമായി റണ്ണർ എലിയെ (5 മീസ് / കൂട്ടിൽ) ഉൾപ്പെടുത്തിയിരുന്നു. ഓരോ രാവിലെയും ചക്രം റെക്കോർഡ് ചെയ്യപ്പെടുകയും ശരീരഭാരം (ജി) ആഴ്ചതോറും അളക്കുകയും ചെയ്തു.
XXX: പരീക്ഷണം 2. FosB / ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുകളുടേയും ഹിപ്പോകാമ്പാലിന്റെ ന്യൂറോജനിസങ്ങളുടേയും IMMUNHYISTICS അനാലിസിസ് പരിശോധന
83: പെർഫ്യൂഷൻ, ടിഷ്യു പ്രോസസ്സിംഗ്
കാലാവധി കഴിഞ്ഞ ദിവസം കഴിഞ്ഞപ്പോൾ (എൺപത് മുതൽ എട്ടുവരെ) പെൻഡൊബാർബിറ്റൽ സോഡിയം ഉപയോഗിച്ച് സുനാമി അനസ്തേഷ്യപ്പെട്ടു. മൃതദേഹം അതിവേഗം നീക്കം ചെയ്യുകയും, 0900% ഫോസ്ഫേറ്റ് ബഫേർഡ് സലൈൻ (പി.ബി.എസ്, പി.എച്ച്. പി.ബി.എസ്സിലെ മസ്തിഷ്കത്തിൽ സൈക്കോസിന്റെ ക്രോമസോം ഉണ്ടാകുന്നു, തുടർന്ന് കൂടുതൽ പ്രോസസ് വരെ ഫ്രീസ് ചെയ്തു. ഒരു അർദ്ധഗോളത്തിന്റെ കോരനൽ തലച്ചോറ് വിഭാഗങ്ങൾ (1100 μm) ഒരു ഫ്രീസിങ് മൈക്രോടോമം ഉപയോഗിച്ച് ശേഖരിച്ചു, പി.ബി.എസ്സിൽ നിന്നും ശേഖരിച്ചത് 4% സോഡിയം അസീഡ്.
83: ഇമ്യൂണോഹിസ്റ്റോഹമിസ്ട്രി
FOSB / ΔFosB immunostaining എന്നതിന് ഒരു വിഭാഗത്തിൽ ആറു ഭാഗങ്ങൾ ക്രമരഹിതമായി തിരഞ്ഞെടുത്തു. ന്യൂറോജെനിസിസ് മൂല്യനിർണയം നടത്തുന്നതിനുള്ള സാധുവായ ഒരു ന്യൂറോണുകളുടെ ഡബിൾകോസ്റ്റിൻ (DCX) ലേബലിംഗിനായി ഒരു അടുത്ത പരമ്പര ഉപയോഗിച്ചിരുന്നു.40,41]. എക്സോഗേണസ് പെറോക്സൈഡസ് പ്രവർത്തനം ക്യൂഞ്ചുചെയ്ത ശേഷം HNUM% H2O2 PBS ൽ, ഫ്രീ ഫ്ലോട്ടിംഗ് സെക്ഷനുകൾ പി.ബി.എസുകളിൽ 10% നോർമൽ കുതിരക്കൃഷി അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന ബ്ലോക്ക് ചെയ്യൽ പരിഹാരം മുൻകൂട്ടി ചെയ്തു. PBS- ൽ കഴുകിയതിനു ശേഷം, പിബിസിൽ 30% ട്രിട്ടൺ എക്സ് -330, ബി.എസ്.എ.എസ ബി.എസ്.എ. (പി.ബി.എ.എസ്.) ലയിപ്പിച്ച മുയലുകൾ, മുയൽ പോളിക്ക്നാണൽ പാൻ ഫൊസ് ബി ആൻറിബോഡി (2: 1, SC-1000, സാന്ത ക്രൂസ് ബയോടെക്നോളജി, ഡാളസ്, ടിഎക്സ്എ, യുഎസ്എ) -ബിഎസ്എ) 48 മണിക്കൂർ 0.5 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ. PBST-BSA ൽ, എട്ടു സെമുകളിലായി, എൺപത് ഡിഗ്രി സെൽഷ്യലിൽ, കോഴി പോളിക് കോണലായ ആന്റി-ഡിസിഎക്സ് ആൻറിബോഡി (100: 0.5, SC-24, സാന്ത ക്രൂസ്) ഉൾപ്പെടുത്തിയാണ് മറ്റൊരു വിഭാഗത്തിൽ ഉൾപ്പെട്ടിരുന്നത്. PBST-BSA ൽ ഉചിതമായ biotinylated secondary antibody (anti-rabbit IgG, 4: 1, AP500B; anti-goat IgG, 8066: 48, AP4B, EMD മില്ലിപ്പോർ, ബില്ലേരിക, എം.എ, യുഎസ്ഡി എന്നീ രണ്ട് ആന്റിബോഡികൾ) മുറിയുടെ താപനിലയിൽ 1 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ. ഈ നിർദ്ദിഷ്ട യൂണിറ്റുകളുടെ നിർമ്മാണത്തിനായി X min മിനിറ്റ് നിരക്കിന് Avidin-biotin-peroxidase കോംപ്ലക്സ് (വെക്ടസ്റ്റൈൻ എബിസി പെറോക്സൈഡസ് കിറ്റ്, വെക്ടർ ലാബോറട്ടറീസ് ഇൻക്, ബർലിംഗാം, സിഎഎ, യു.എസ്.എ). XNTX% H അടങ്ങിയിട്ടുള്ള 1000% MMX-Diaminobenzidine (DAB) ആന്റിഗണുകൾ അവസാനം ദൃശ്യവത്ക്കരിക്കപ്പെട്ടിരുന്നു, ഇതിൽ 182 M Tris-HCl (പി.എച്ച്.2O2. FosB / ΔFosB immunostaining നൊകിൽ അമോണിയം സൾഫേറ്റ് ഉൽപാദനം വർദ്ധിപ്പിച്ചു. ഡിസിഎക്സ് സ്റ്റെയിനിനായി, സെൽ അണുകേന്ദ്രങ്ങൾ നിസ്സൽ സ്റ്റൈൻ ഉപയോഗിച്ച് എതിർക്കുകയും ചെയ്തു. സെലൻറുകൾ ജെലാറ്റിൻ പൂശിയ സ്ലൈഡുകളിലേക്ക് കയറ്റുകയും കവർസ്പ്റ്റുകൾ സ്ഥാപിക്കുകയും ചെയ്തു.
ചിത്രം: ഇമേജ് ത്രെഷോൾഡിംഗ് ഉപയോഗിച്ച് FosB / ΔFosB immunoreactivity അളവ്
FosB ഉം ΔFosB N-terminal പ്രദേശവും പങ്കിട്ട ആന്തരിക മേഖലയ്ക്കെതിരായ ഈ പഠനത്തിലെ പാൻ ഫോസ്ബീൻ ആന്റിബോഡി, രണ്ട് ഐസോഫോമുകൾക്കിടയിൽ വിവേചനങ്ങൾ ഉണ്ടാക്കാൻ കഴിയാത്തതാണ്. അതുകൊണ്ട് പ്രതിരോധശേഷിയുള്ള ഘടനകൾ FosB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധം (FosB / ΔFosB-ir) ന്യൂക്ലിയസ്സുകൾ എന്ന് വിവരിച്ചിരുന്നു. ഒരു നിഷ്പക്ഷ അർദ്ധ ക്വാണ്ടൈസേഷൻ, സ്ലൈഡുകൾ വിശകലനത്തിന് മുൻപ് കോഡുചെയ്തതാണ്. എലിയുടെ മസ്തിഷ്ക അറ്റ്ലസ് [42] താഴെക്കൊടുത്തിരിക്കുന്ന മേഖലകളിൽ (ROIs): DG (3 വിഭാഗങ്ങൾ), CA1 (3 വിഭാഗങ്ങൾ), CA3 (2- 3 വിഭാഗങ്ങൾ) എന്ന പിരമിഡാകൃതിയിലുള്ള സെൽ പാളി, ഡോർസൽ ഹിപ്പോകാമ്പസിൽ (ബ്രെഗ്മയിൽ നിന്ന്- 2.2 മില്ലീമീറ്റർ അടഞ്ഞിരിക്കുന്നു); Ventral ഹിപ്പോകാമ്പസിൽ DG (2 വിഭാഗങ്ങൾ), CA1 (2 വിഭാഗങ്ങൾ), കൂടാതെ CA3 (2 വിഭാഗങ്ങൾ) (ബ്രെഗ്മയിൽ നിന്ന്- 3.4 മില്ലീമീറ്റർ അടഞ്ഞിരിക്കുന്നു) (ചിത്രം 4, ഇടത്തെ). വുഡ് വിഭജനം ഹിപ്പോകാമ്പസിന്റെ ഡോർസൽ ആൻഡ് വെണ്ടൽ ഭാഗങ്ങൾ അടങ്ങുന്നുണ്ട്, എന്നാൽ ശ്വാസകോശഭാഗം ഭാഗം ലക്ഷ്യം വെച്ചവയാണ്. ഡി.ജി., സപ്പ്രൈമലൈഡൽ (ഡി.ജി.പി), ഇൻഫ്രാസ്ട്രഡൈഡൽ (ഡി.ജി.പി) ബ്ലേഡുകൾ എന്നിവ വ്യത്യസ്തമായി വിശകലനം ചെയ്തു. മോട്ടോർ കോർട്ടക്സിൽ (2- 3 വിഭാഗങ്ങൾ, ബ്രെഗ്മയിൽ നിന്ന് -0.6 മില്ലീമീറ്റർ വരെ അടച്ചിരിക്കുന്നു), സോമറ്റോസെൻസറി ബാരൽ കോർട്ടക്സ് (2- 3 വിഭാഗങ്ങൾ, ബ്രെഗ്മയിൽ നിന്ന് -0.6 മില്ലീമീറ്റർ വരെ അടച്ചിരിക്കുന്നു), ദൃശ്യ കോർട്ടക്സ് (3 വിഭാഗങ്ങൾ, ബ്രെഗ്മയിൽ നിന്ന്), ഓഡിറ്ററി കോർട്ടക്സിൽ (2.9 വിഭാഗങ്ങൾ, ബ്രെഗ്മയിൽ നിന്ന് -3 മില്ലീമീറ്റർ വരെ അടഞ്ഞിരിക്കുന്നു), കൂടാതെ ഒലിഫക്ടറി ബൾബ് (2.9 വിഭാഗങ്ങൾ, + ബ്രെഗ്മയിൽ നിന്ന് അടഞ്ഞത് + XNUM മില്ലീമീറ്റർ) വിശകലനം ചെയ്തു (ചിത്രം 6, ഇടത്തെ).
ഓരോ ROI ഡിജിറ്റൽ ഇമേജുകളും (2070 × 1548 പിക്സൽ) ഒരു ഒപ്റ്റിക്കൽ മൈക്രോസ്കോപ്പുപയോഗിച്ച് (BX-51, ഒളിമ്പസ്, ടോക്കിയോ, ജപ്പാനിൽ) ഒരു CCD ക്യാമറ (ഡിപി -എൻ.എക്സ്.എക്സ്, ഒളിമ്പസ്), ഇമേജിംഗ് സോഫ്റ്റ്വെയർ (സെൽസെൻസ്, ഒളിമ്പസ്) ഉപയോഗിച്ച് എടുത്തതാണ്. ലക്ഷ്യം ലെൻസ് മാഗ്നിഫിക്കേഷൻ ഹിപ്പോപാമ്പൽ ROI കളും XNTX × കോർട്ടിക്കൽ റിയുവും 73 × ആണ്. മിതമായതും ശക്തവുമായ FosB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധം തിരിച്ചറിയാൻചിത്രം 1D-G), ഇമേജ് ഏറ്റെടുക്കൽ ക്രമീകരണങ്ങൾ (നേരിയ തീവ്രത, ഫീൽഡ് സ്റ്റോപ്പ്, എക്സ്പോഷർ സമയം, വൈറ്റ് ബാലൻസ്) ഇരുമേഖലകളും മുൻകൂട്ടിത്തന്നെ ഉപയോഗിച്ചുകൊണ്ട് ഓരോ ആർജിബി ഘടകങ്ങളുടെ പരിധിയുടേയും അളവുകൾ ഹിപ്പോകാമ്പാമ്പൽ, കോർട്ടിക്കൽ റോയികൾക്കായി ഒപ്റ്റിമൈസ് ചെയ്തു. ഇനിപ്പറയുന്ന വിശകലനം അനുരൂപമാക്കിയ സാഹചര്യങ്ങളിൽ (1) പ്രവർത്തിച്ചു. അനിയന്ത്രിതമായി രൂപപ്പെട്ട ബഹുഭുജമാണ് ROI കൾ തിരഞ്ഞെടുത്തു (ചിത്രം 1A, B) (2). ചിത്രം അപ്രാപ്തമാക്കി, FosB / ΔFosB-ir ന്യൂക്ലിയെ ചുവപ്പ് നിറത്തിലേക്ക് മാറ്റുക (ചിത്രം 1C-G) (3). % ROI തുടർന്ന് യാന്ത്രികമായി കണക്കുകൂട്ടിയത്:% ROI = (പരിവർത്തനം ചെയ്ത പ്രദേശം (ചുവപ്പിലാണ്) / മൊത്തം ROI പ്രദേശം) × 100.
ഈ ഇമേജ് ത്രെഷോൾഡിംഗ് വിശകലനം മൂല്യനിർണ്ണയം ചെയ്യുന്നതിന്, വ്യത്യസ്ത മേഖലകളുള്ള വ്യത്യസ്ത തലങ്ങളിൽ നിന്ന് 20 പ്രദേശങ്ങൾ ക്രമരഹിതമായി തിരഞ്ഞെടുത്തു. ചിത്രത്തിന്റെ ഉൽപാദന അളവു പുറമേ, തിരഞ്ഞെടുത്ത പ്രദേശങ്ങളിൽ FosB / ΔFosB-ir ന്യൂക്ലിയുടെ എണ്ണം മാനുവലായി കണക്കാക്കപ്പെടുകയും FosB / ΔFosB-ir ന്യൂക്ലിയുടെ എണ്ണം ഹരിച്ചാണ് FOSB / ΔFosB-ir ന്യൂക്ലിയുകൾ സാന്ദ്രത പ്രാപിക്കുകയും ചെയ്തത്. പ്രദേശം (മില്ലീ2).
83: ദന്ത ഗതിയിൽ ഡിസിഎക്സ്-അപൂർവ ന്യൂറോണുകളുടെ അളവ്
റണ്ണർ എലിയുടെ ഡി.ജി.സിയുടെ അപര്യാപ്തമായ ന്യൂറോണുകൾ സമൃദ്ധവും ഓവർലാപ്പിങ്ങുമാണ്. ഡിസ്കക്സ്-ഡി-സോമയുടെ പ്രത്യേക ഡിസ്പ്ലേ സൂക്ഷ്മകോപം ഉപയോഗിച്ച് കൃത്യമായി കണക്കാക്കാൻ ബുദ്ധിമുട്ടാണ്. എന്നാൽ ഒരു മുൻ പഠനത്തിൽ, മോർഫോളജിക്കൽ വിലയിരുത്തലിനായി ഷോൾ വിശകലനം കാണിക്കുന്നത് ഓരോ ഡിസിഎക്സ്- ഇ ന്യൂറണും ശരാശരി, സോമയുടെ 40 μm ൽ അളക്കുന്ന ഒരു ഡൻഡ്രൈറ്റ് [43]. അതുകൊണ്ടുതന്നെ, DCX-ir ന്യൂറോണുകളുടെ മേഖല-നിർദ്ദിഷ്ട അളവുകൾ പ്രാപ്തമാക്കുന്നതിനായി താഴെക്കാണുന്ന ഒറിജിനൽ വിശകലനം വികസിപ്പിച്ചെടുത്തു.
- (1) ഇമേജിംഗ് സോഫ്റ്റ്വെയറും ഒരു 40 × ലക്ഷ്യം ലെൻസും (2) ഉപയോഗിച്ച് കമ്പ്യൂട്ടർ ഡിസ്പ്ലേയിൽ ജി.സി.എൽ ഒരു ഇമേജ് തയ്യാറാക്കി. ലൈവ് ഇമേജിൽ, ജി.എൽ.സിയുടെ മധ്യഭാഗത്ത് ഒരു ലൈൻ സെഗ്മെന്റ് (150 ± 100 μm)ചിത്രം 2) (3). ഫോക്കൽ ആഴത്തിൽ മാറ്റം വരുത്തിയ, ലൈൻ സെഗ്മെന്റ് ഡിസിഎക്സ്- ir ഡൻഡ്രൈറ്റ് കവിഞ്ഞതിന്റെ എണ്ണം (4). FOSB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധ സംവിധാനത്തെ വിശകലനം ചെയ്ത പ്രദേശങ്ങളുമായി (DNSal DGSP, dDGsp; dorsal DGip, dDGip; ventral DGSP, vDGSP; ventral DGip, vDGip) ഓരോ ROI- ലും, 5-2 ലൈനിൽ സെഗ്മെന്റുകൾ ഓരോ വിഭാഗത്തിലും വരയ്ക്കുകയും ഓരോ ക്രോസിംഗുകളുടെയും എണ്ണം വെറും ഒരു മില്ലി 3-2 ഭാഗങ്ങളിൽ ആയിരിക്കുകയും ചെയ്തു. കാരണം, GCL ന്റെ കനം ഏതാണ്ട് 3-60 μm ആയതിനാൽ, ക്രോസിംഗുകളുടെ എണ്ണം വിശകലനം ചെയ്ത മേഖലയിലെ DCX-ir ന്യൂറോണുകളുടെ എണ്ണത്തെ പ്രതിഫലിപ്പിക്കേണ്ടതുണ്ട്.
DCX-ir dendrites ഉപയോഗിച്ച് ക്രോസിംഗുകളുടെ എണ്ണം കണക്കാക്കാനായി DCX- ir അപഗ്രഥന ന്യൂറോണുകളുടെയും ഒരു ലൈൻ സെഗ്മെന്റിലെയും (150 ± 0.1 μm) ഒരു പ്രതിനിധി ചിത്രം.
3. പരീക്ഷണം 2. ചക്രം പ്രവർത്തിപ്പിക്കുന്ന FosB / ΔFosB ഐസോഫോമുകളുടെ തിരിച്ചറിയൽ
83: പെർഫ്യൂഷൻ, ടിഷ്യു പ്രോസസ്സിംഗ്
എലിയുടെ ഒരു അധിക സംഘർഷം 1 പരീക്ഷണത്തിലാണ് മുകളിൽ പറഞ്ഞിരിക്കുന്നത്. ആഴ്ചയിൽ ഇടപെട്ടതിനെത്തുടർന്ന് ആഴ്ചകൾക്കു ശേഷം, എലികൾ ആഴത്തിൽ അനസ്തേഷ്യയിൽ തണുത്ത ഉപ്പുവെള്ളമായി ട്രാൻസ്ഫോർമലിനായി കഴിച്ചു. ഹിപ്പോകാമ്പസ് പെട്ടെന്ന് ദ്രവീകൃതമാവുകയും ദ്രാവക നൈട്രജനിൽ മരവിപ്പിക്കുകയും, -4 ° C ൽ സംഭരിക്കുകയും ചെയ്തു. ഓരോ മൗസിന്റെയും ഹിപ്പോകോപ്പി, ഒരു RIPA ബഫറിൽ ഏകീകൃതമാക്കപ്പെട്ടവയാണ് (80 mM NaCl, 150 mM Tris-HCl pH, 90% NP-25, X%% സോഡിയം ഡിക്സോമോൾ, XXX% SDS, #7.6, തെർമോ സയന്റിഫിക്, IL, യുഎസ്എ) ഇൻഫിബിറ്ററുകൾ (സിഒപ്ലീറ്റ് മിനി, റോചെ, മൻഹീം, ജർമ്മനി). ലൈസെറ്റുകൾ 1 ° C ൽ 40 ആർപിഎസിൽ 1 മിനുട്ടിൽ സെറ്റിഫൈഗ് ചെയ്തതും സൂപ്പർനേറ്ററുകൾ ശേഖരിച്ചു. പ്രോട്ടീൻ അസ്സൈ കിറ്റ് (#XNUM, തെർമോ സയന്റിഫിക്, ഐ എൽ, യുഎസ്എ) പ്രോട്ടീൻ അളവിൽ അളക്കപ്പെട്ടു.
വെസ്റ്റേൺ ബ്ലോട്ടിങ്
പ്രോട്ടീൻ (30 μg / ലൈനിൽ) തുല്യ അളവുകൾ, ഒരു 10% പോളിഹൈക്രിമലൈൽ ജെലിൽ electrophoresed ചെയ്തു, പിന്നീട് ഒരു PVDF membrane (Immun-Blot, 0.2 μm, Bio-Rad, MD, USA) ലേക്ക് മാറ്റി. TBST ൽ 1 മണിക്കൂർ TBST- ൽ (8 എം.എൻ.എൽ, എം.എൻ.ടി.എം.എൽ, ട്രാൻസ്-എച്ച്.ക്.ൽ പിഎച്ച് X, 0.5% Tween- നും XX) BSA അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന നോൺസ്പെക്റ്റിക് ബൈൻഡിംഗ് തടഞ്ഞു. ഈ പ്രതിരോധം പാൻ ഫൊസ്ബ് ആൻറിബോഡി (20: 7.5) ഉപയോഗിച്ച് പ്രതിരോധം നൽകിയിട്ടുണ്ട്. ടിബിഎസ്ടിയുമായി ചേർന്ന് കഴുകിയ ശേഷം, എച്ച് ആർ പി-കൺജ്യൂജഡ് ആന്റി-മുയൽ ഐ.ജി.ജി ആന്റിബോഡി (0.1: TBST, NA20, GE ഹെൽത്ത്, ബക്കിങ്ഹാംഷയർ, യുകെയിൽ) എന്നിവയിൽ മുട്ടയിടുകയുണ്ടായി. ടിബിഎസ്ടിയുമായുള്ള കഴുകൽ കഴിഞ്ഞപ്പോൾ, പ്രോട്ടീൻ ബാൻഡുകൾ മെച്ചപ്പെടുത്തിയ ചെമ്മിലിമൈൻസ്സെൻസ് (വെസ്റ്റേൺ ലൈറ്റിക് പ്ലസ്-ഇസിഎൽ, പെർക്കിൻ എൽമർ, എം.എ., യുഎസ്എ) ഉപയോഗിച്ച് ഇൻകുബേഷൻ വഴി ദൃശ്യവത്കരിച്ചു. കൂടാതെ ഇമേജ് ക്വാന്റ് LAS 3 മിനി ഉപയോഗിച്ചും (GE Healthcare, Buckinghamshire, UK) ഉപയോഗിച്ചു. പിന്നീട് ഈ ലോഡ് നിയന്ത്രണം എന്ന നിലയിൽ ഗ്ലിസല്ലൽ ഡിഹൈഡ്-എൻഎക്സ്എക്സ്-ഫോസ്ഫേറ്റ് ഡൈഹൈഡ്രജനെസ് (ജിഎച്ച്ഡിഎച്ച്) ആൻറിബോഡി (# 1, 1000: TBS-T, ട്രെവൈഗൻ, എംഡി, യു.എസ്.എ.) ൽ ഈ മെംബ്രൺ തിരുത്തി. പ്രോട്ടോൺ ബാൻഡിന്റെ ഒപ്ടിക്കൽ ഡെൻസിറ്റി ഇമേജ്- ജെ ഉപയോഗിച്ച് ഗണിതമാക്കി, ജിഎച്ച്ഡിഎയുടെ നിലവാരത്തിലേക്ക് നോർമൽസ് ചെയ്തു.
എകദേശം: സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ വിശകലനം
മൗസ് ബോഡി ഭാരംയിലുള്ള മാറ്റങ്ങൾ ANOVA (ഗ്രൂപ്പ് × സമയം) രണ്ടു-രീതിയിലുള്ള ആവർത്തിച്ചുറപ്പിക്കൽ വഴി വിശകലനം ചെയ്തു. ഗ്രൂപ്പുകൾ (കണ്ട്രോൾ Vs റണ്ണർ) തമ്മിലുള്ള സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ വ്യത്യാസങ്ങൾ നിർണ്ണയിക്കാൻ ഒരു കളിക്കാരല്ലാത്ത t- ടെസ്റ്റ് ഉപയോഗിച്ചു. FSB / ΔFosB immunoreactivity വിശകലനം (മാനുവൽ കൗണ്ടിംഗ് vs ഇമേജ് അപ്റൗളിങ്), FOSB / ΔFOSB എക്സ്പ്രഷനുകളുടെയും ഡിസിഎസിൻറെ DCX ക്രോസിംഗുകളുടെയും തമ്മിലുള്ള ബന്ധം പരിശോധിക്കാൻ പിയേഴ്സന്റെ പരസ്പര വിനിമയം ഉപയോഗിച്ചു. ഡാറ്റ ± ± SEM ആയി അവതരിപ്പിച്ചു. സ്ഥിതിവിവരക്കണക്ക് പ്രാധാന്യംക്കുള്ള പരിധി സജ്ജീകരിച്ചു P <0.05.
ഫലം
83: ശരീരഭാരം, വ്യാപ്തിയുണ്ടാക്കുന്ന പരീക്ഷണങ്ങൾ, 1, 1
നിയന്ത്രണങ്ങളും റണ്ണർ എലിയും പരീക്ഷണങ്ങളിൽ 1, 2 പരീക്ഷണങ്ങൾ ചിത്രം 3. രണ്ട്-ആവർത്തന രീതികൾ ANOVA ഗണ്യമായ ആശയവിനിമയത്തെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു (ഗ്രൂപ്പ് × സമയം, F(4, 72) = 13.6, P <0.001) ഗ്രൂപ്പിന്റെ പ്രധാന ഇഫക്റ്റ് F(1, 18) = 6.07, P <0.05), റണ്ണർ എലികളിൽ ശരീരഭാരം ഗണ്യമായി കുറയുന്നു. ഒരു കൂട്ടിൽ പ്രവർത്തിക്കുന്ന ദൂരം ഇതിൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു പട്ടിക 1. ഓരോ മൗസിന്റെയും കൃത്യമായ പ്രവർത്തന ദൂരമുണ്ടായിരുന്നുവെങ്കിലും, എലികൾ ഒന്നിച്ചു ചേർന്നിരുന്നതിനാൽ, എല്ലായ്പ്പോഴും എലികൾ എല്ലായിടത്തും ചക്രം പ്രവർത്തിക്കുന്നുണ്ടെന്ന് സ്ഥിര നിരീക്ഷണം സ്ഥിരീകരിച്ചു. 2 പരീക്ഷണത്തിലെ റണ്ണർ മൗസ് പരീക്ഷണങ്ങളിൽ ഉള്ളതിനേക്കാൾ കൂടുതലാണ്, എന്നാൽ ശരാശരി റൺ ദൂരം (m / day / cage) ഓരോ പരീക്ഷണത്തിലും സ്ഥിരത പുലർത്തുകയും ചെയ്തു.
83: ഇമേജ് ത്രെഷോൾഡിംഗ് ഉപയോഗിച്ച് FosB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധ സംവിധാനത്തിന്റെ സാധൂകരണം
മാനുവൽ കൗണ്ടിംഗ് (r = xNUMX), ഫ്രോസിബി / ΔFosB-ir അണുകേന്ദ്രങ്ങളിൽ നിന്നും ലഭിക്കുന്ന ഇമേജ് അപ്ഗ്രേഡ്, സാന്ദ്രത എന്നിവയിലൂടെ ലഭിച്ച FOSB / ΔFosB-ir മേഖല തമ്മിലുള്ള ഒരു നല്ല ബന്ധം ഉണ്ടായിരുന്നു. P <00001, ചിത്രം 4).
83: ഹിപ്പോകാമ്പസസിലെ FOSB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധം
ഡോർസൽ ആൻഡ് വെന്റൽ ഹിപ്പോകാമ്പാളിന്റെ സബ്ഫീൽഡുകളിൽ FosB / ΔFosB പ്രതിരോധ കുത്തിവയ്പ്പിന്റെ പ്രതികൾ ചിത്രം 5. എല്ലാ ROI കളും വിശകലനം ചെയ്താൽ, Runner Mice ലെ FosB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധംചിത്രം 5, വലത്) കൺട്രോൾ എലിയെക്കാൾ വളരെ ഉയർന്നതാണ്ചിത്രം 5, കേന്ദ്രം). റണ്ണറണിലെ എലികളിൽ, ഫോസ് ബി / ΔFosB-ir മേഖലയിൽ ഗണ്യമായ ഒരു വിശകലനം സൂചിപ്പിക്കുന്നത്, ഡോർസൽ (DGSP: P <0.01; ഡിജിപ്: P <0.01; CA1: P <0.05; CA3: P <0.05) വെൻട്രൽ ഹിപ്പോകാമ്പൽ ഉപഫീൽഡുകളും (DGsp: P <0.01; ഡിജിപ്: P <0.05; CA1: P <0.05; CA3: P <0.05; ചിത്രം 6).
4: കോർടെക്സിൽ FosB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധം
കോർട്ടിക്കൽ റിയുസുകളിൽ FosB / ΔFosB ഇമോനൊസ്റ്റിംഗിന്റെ പ്രതികരണ ഇമേജുകൾ കാണിക്കുന്നു ചിത്രം 7. ദീർഘവീക്ഷണത്തോടെയുള്ള FosB / ΔFosB immunoreactivity ലെ മേഖലയിലെ ആശ്രിത മാറലുകൾ (Quantitative Analysis)ചിത്രം 8). റണ്ണർ എയ്സിൽ, FosB / ΔFosB-ir പ്രദേശം മോട്ടോർ കോർട്ടക്സിൽ വളരെ ഉയർന്നതാണ്P <0.05) സോമാറ്റോസെൻസറി ബാരൽ കോർട്ടെക്സും (P <0.05), പക്ഷേ വിഷ്വൽ കോർട്ടക്സിൽ ഇല്ല (P = 0.662) അല്ലെങ്കിൽ വിലപിടിപ്പുള്ള ബൾബ് (P = 0.523). ഓഡിറ്ററി കോർട്ടക്സിൽ, FosB / ΔFosB-ir പ്രദേശം, റണ്ണർ മൈസിൻറെ വർദ്ധനവിൽP = 0.105).
83: ന്യൂറോജീസ്
ഡിസിഎക്സ് ഇമോനൊസ്റ്റിംഗിൻറെ പ്രതിനിധി ചിത്രങ്ങൾ കാണിക്കുന്നു ചിത്രം 9. ഡോർസൽ ഹിപ്പോകാമ്പസിൽ, റണ്ണർ മൈസസിലെ DCX രോഗപ്രതിരോധംചിത്രം 9, വലത്) കൺട്രോൾ എലിയുമായി താരതമ്യം ചെയ്യുമ്പോൾ ഗുണപരമായി ഉയർന്നതാണ്ചിത്രം 9, ഇടത്തെ). ഡോർസൽ ഹിപ്പോകാമ്പസ് അനുസരിച്ച്, കൺട്രോൾ, റണ്ണർ എയ്സ് എന്നീ രണ്ടിടങ്ങളിൽ ട്രിട്രൽ ഹിപ്പോകാമ്പസിലെ ഡിസിഎക്സ് രോഗപ്രതിരോധം ദുർബലമായിരുന്നു. റണ്ണർ എലികളിൽ, ഡി.ടി.ജിസ്പിൽ ക്രോസിംഗുകളുടെ എണ്ണം വളരെ കൂടുതലാണ്.P <0.01), dDGip (P <0.01; ചിത്രം 10). ശ്വസന ഹിപ്പോകാമ്പസിൽ, റണ്ണർ മൈസിലുള്ള ക്രോസിംഗുകളുടെ എണ്ണം വർദ്ധിക്കുകയാണ് ചെയ്തത്, എന്നാൽ ഗ്രൂപ്പുകൾ (vDGsp, P = 0.101; vDGip, P = 0.257; ചിത്രം 10).
6: FosB / ΔFosB എക്സ്പ്രഷനും ന്യൂറോജനിസവും തമ്മിൽ പരസ്പരബന്ധം
FosB / ΔFosB-ir പ്രദേശത്തിനും DCX ക്രോസ്സിംഗുകളുടെ നമ്പറിനും ഇടയിലാണ് ഒരു പരസ്പര വിനിമയം നടന്നിരുന്നത് (ചിത്രം 11). ഓരോ ഡാറ്റാ സെറ്റും (ഉദാഹരണത്തിന്, ഡോർസൽ DGSP കൺട്രോൾ എസ്സിൽ) 5 ജോഡികളേ ഉള്ളൂ, ആദ്യത്തേത് എല്ലാ 40 ജോഡികളുമായിരുന്നു. Introspectively, FosB / ΔFosB-ir മേഖലയ്ക്കും ഡിസിഎക്സ് ക്രോസിംഗുകൾ (r = 0.885, P <0.0001). കൂടാതെ, ഡോർസൽ ഡിജി (r = 0.762, P <0.05) വെൻട്രൽ ഡിജി (r = 0.816, P <0.01) പ്രത്യേകം വിശകലനം ചെയ്തു.
83: FosB / ΔFosB ഐസോഫോമുകളുടെ തിരിച്ചറിയൽ ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിൽ ഉണ്ടാക്കിയത്
ഒടുവിൽ, ഐസോഫോം തിരിച്ചറിയാൻ fosB ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിലുള്ള പ്രതികരണമായി ഹിപ്പോകാമ്പസിൽ ഉണ്ടാകുന്ന ജീൻ ഉത്പന്നങ്ങൾ, എലികളുടെ ഒരു അധിക സംഘർഷത്തിൽ നിന്നുള്ള ഹിപ്പോകാംപി പടിഞ്ഞാറൻ പാറ്റക്കീറ്റിനെത്തുന്നത് അതേ പാൻ ഫൊസ്ബിയുടെ ആന്റിബോഡിയാണ്. പലതരം ബാൻഡുകൾ 35-37 kDa, ΔFosB- യുടെ പരിഷ്കരിച്ച ഐസോഫോറ്റുകൾ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു [44], റണ്ണറിലും കണ്ട്രോൾ എസ്സിലും ഗണ്യമായ വർദ്ധനവ് ഉണ്ടായിചിത്രം 12, P <0.01). മറുവശത്ത്, 48 kDa FosB ഐസോഫോം രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളിലും കണ്ടെത്താനാകില്ല. 25 kDa ന് മുകളിൽ മങ്ങിയതായി കാണപ്പെടുന്ന മറ്റൊരു ബാൻഡ് Δ2ΔFosB ഐസോഫോമിനെ (27 kDa) പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു. 50 kDa നും 37 kDa നും മുകളിലുള്ള മറ്റ് രണ്ട് ബാൻഡുകൾ ഉണ്ടായിരുന്നു, അവ നിർദ്ദിഷ്ടമല്ലാത്ത ബൈൻഡിംഗ് കാരണമായിരിക്കാം. കണക്കാക്കുമ്പോൾ, ഗ്രൂപ്പുകൾ തമ്മിലുള്ള ഈ ഫോസ് ഇതര ബാൻഡുകളിൽ വ്യത്യാസങ്ങളൊന്നും കണ്ടെത്തിയില്ല (ഡാറ്റ കാണിച്ചിട്ടില്ല).
സംവാദം
ചുരുക്കത്തിൽ, 1 പരിശോധിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു ഇമ്മാനൂഹിസ്റ്റിക്ഹമെഷിക്കൽ വിശകലനം ആദ്യമായി നടത്തിയത്) ദീർഘകാല സ്വമേധയാ ഉള്ള വീൽ പ്രവർത്തിക്കുന്നത് ഹിപ്പോകാംപസിൽ FosB / ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുകളെ പ്രേരിപ്പിക്കുമോ എന്ന്; ഒപ്പം 2) ദോർസോ-ventral axis ഒരു പ്രദേശത്ത്-നിർദ്ദിഷ്ട പ്രതികരണം ഉണ്ടോ എന്ന്.
നാല് ആഴ്ച വൊളണ്ടറി വീൽ റണ്ണിന്റെ പ്രവർത്തനം, ഹിപ്പോകാമ്പാൾ പ്രദേശങ്ങളിൽ FosB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധശേഷി വർദ്ധിക്കുന്നതിൽ ഗണ്യമായ വർദ്ധനവുണ്ടാക്കി (അതായത്, ഹിപ്പോകാമ്പസിന്റെ ഡോർസൽ ആൻഡ് ventral ഭാഗങ്ങളുടെ DG, CA1, CA3 ഉപവിഭാഗങ്ങൾ). 35-37kDa ΔFosB isoform പ്രധാനമാണെന്ന് ഞങ്ങൾ സ്ഥിരീകരിച്ചു fosB ജീൻ ഉത്പാദനം ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിൽ പ്രതികരിക്കുന്നതിനിടയിലാണ്. ഹിപ്പോകാമ്പസ് മുഴുവൻ സമയവും ΔFosB ഉദ്വമനത്തിന് ദീർഘകാല സ്ഥിര വ്യായാമം ഒരു ശക്തമായ ട്രിഗ്ഗർ ആണ് എന്ന് ഈ പഠനങ്ങൾ വ്യക്തമായി മനസ്സിലാക്കുന്നു. വിവിധ തരത്തിലുള്ള ഡോർസൽ കൂടാതെ / അല്ലെങ്കിൽ വെന്റൽ ഹിപ്പോകാമ്പസ് ആശ്രിത ഫംഗ്ഷനുകളെ വ്യായാമം ചെയ്യുന്ന ഒരു പുതിയ മോളിക്യൂളർ സംവിധാനമായിരിക്കും ഇത്.
ചിത്രം: ഇമേജ് അപ്ഗ്രേഡ് ഉപയോഗിച്ച് FosB / ΔFosB immunoreactivity അളക്കുന്നതിനുള്ള സാധൂകരണവും പരിമിതികളും
ലക്ഷ്യം സെല്ലുകളുടെ എണ്ണവും സെൽ മോര്ഫോളജി മൂല്യനിർണ്ണയം നടത്തുന്നതിനായി ഇമ്നുനോഹിസ്റ്റോ കെമിക്കൽ പഠനങ്ങളിൽ വ്യാപകമായി ഉപയോഗിക്കുന്ന ഒരു ഇമേജ് ത്രെഷോൾഡിംഗ് ടെക്നിക്, ഈ പഠനത്തിൽ പ്രദേശിക-പ്രത്യേക അളവുകൾ ഫോസ്ബി / ΔFOSB രോഗപ്രതിരോധ സംവിധാനത്തിൽ സ്വീകരിച്ചു [15,45,46]. FosB / ΔFosB immunoreactivity അളവെടുത്തു് ഇമേജ് ത്രെഷോൾഡ്് വഴി മാനുവൽ കൗണ്ടിങ് മുഖേനയുള്ള ഗണ്യമായ ഒരു ബന്ധം തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ടു് (ചിത്രം 4). എന്നിരുന്നാലും, സാന്ദ്രതയും ഓവർലാപ്പും വളരെ സാന്ദ്രമായ പ്രദേശങ്ങളിലെ ഫോസ്ബി / os ഫോസ്ബി-ഇർ ന്യൂക്ലിയസുകളുടെ എണ്ണം കണക്കാക്കുന്നത് തടഞ്ഞതിനാൽ, പ്രകടിപ്പിച്ച പരസ്പരബന്ധം, ഫോസ്ബി / os ഫോസ്ബി-ഇർ പ്രദേശങ്ങൾ മൊത്തം ROI യുടെ <~ 40% പ്രതിനിധീകരിക്കുമ്പോൾ ഇമേജ് ത്രെഷോൾഡിംഗ് രീതിയുടെ കൃത്യതയെ മാത്രമേ സൂചിപ്പിക്കൂ. വിസ്തീർണ്ണം. അതിനാൽ, മൊത്തം ROI ഏരിയയുടെ 40% FosB / osFosB-ir ഏരിയകൾ‌ക്ക് ശ്രദ്ധാപൂർ‌വ്വമായ വ്യാഖ്യാനം ആവശ്യമാണ്.
പ്രത്യേകിച്ചും, റണ്ണർ എലികളുടെ ഡി.ജി.ചിത്രം 4), FosB / ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുകൾ ചക്രം ഉപയോഗിച്ചും, FOSB / ΔFosB-ir ന്യൂക്ലിയെല്ലാം ഓവർലാപ്പ് ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. ഈ മേഖലകളിൽ, FosB / ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുകളുടെ വർദ്ധനവ് വർദ്ധിപ്പിച്ചത്, ഉപയോഗിച്ച അളവ് രീതി (ചിത്രം അപ്ഗ്രേസിങ് അല്ലെങ്കിൽ മാനുവൽ കൗണ്ടിംഗ്) കണക്കിലെടുക്കാതെ, പദപ്രയോഗത്തിന്റെ അളവിനെ വളരെ കുറച്ചു കാണിക്കുന്നതിലേക്ക് നയിക്കുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, വിലയിരുത്തലുകളുടെ അപായസാധ്യത ഉണ്ടായിരുന്നിട്ടും, റണ്ണർ എലിയുടെ ഡി.ജി.യിൽ FOSB / ΔFosB-ir മേഖലയിലെ ഗണ്യമായ വർദ്ധനവ് ഇന്നത്തെ പഠനം വിജയകരമായി തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്. ഇത് രീതിശാസ്ത്ര പരിമിതികൾ നമ്മുടെ കണ്ടെത്തലുകളിൽ വിട്ടുവീഴ്ച ചെയ്യില്ലെന്ന് ഇത് വ്യക്തമാക്കുന്നു. പകരം, ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിലുള്ള ഹിപ്പോകാമ്പസ് (FosB / ΔFosB immunore) പ്രതിരോധം വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ കഴിയുമെന്ന് വിശ്വസനീയമായ വിശ്വാസ്യതയെ കുറച്ചുകാണും.
2: ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിൽ ഹിപ്പോകാമ്പസിൽ തന്നെ ΔFosB ന്റെ ഏകതലം
ഹിപ്പോകാമ്പസ് അതിന്റെ രേഖാംശ അക്ഷത്തിൽ സഹഅഭാജ്യവും ഫങ്ഷണൽ ഗ്രേഡിയന്റുമാണ് ഉള്ളത് [26], അതിനാൽ തന്നെ ഹിപ്പോകാമ്പസിന്റെ ഡോർസൽ ആൻഡ് ventral ഭാഗങ്ങളിൽ FosB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധം പ്രത്യേകം പ്രത്യേകം വിശകലനം ചെയ്തു. കണക്കുകൾ അളക്കുന്ന എല്ലാ ഹിപ്പോകാമ്പാലിൻ റിയോകളിലും ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിലുള്ള FosB / ΔFosB എക്സ്പ്രഷൻ വർദ്ധിപ്പിക്കും എന്ന് തെളിയിച്ചു. FosB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധശേഷി ഈ ഏകീകൃത ഇൻഡോറക്ഷൻ ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിലുള്ള സിസ്റ്റമാറ്റിക് മെറ്റബോളിക് മാറ്റങ്ങളാൽ പ്രത്യേകിച്ച് ഉണ്ടാകാനിടയില്ല. എന്നിരുന്നാലും, കോർട്ടെക്സിൻറെ FOSB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധ സംവിധാനത്തിന്റെ മേഖലയിൽ പ്രത്യേക വർദ്ധനയുണ്ടെന്ന് ശ്രദ്ധിക്കേണ്ടതുണ്ട്. അടുത്തിടെയുള്ള കണ്ടെത്തലിലൂടെ ഈ ഫലം പിന്തുണയ്ക്കുന്നു. ട്രെഡ്മിൽ ബാധിക്കുന്ന ഒരു ഘടകം ഹിപ്പോകാമ്പസസിലെ റീജണൽ സെറിബ്രൽ രക്തപ്രവാഹം വർദ്ധിപ്പിക്കുമെന്നാണ് സൂചിപ്പിക്കുന്നത്.8]. കൂടാതെ, റോഡുകളും മറ്റുപേരും. (2003) ഹിപ്പോകാമ്പസിലെ DG, CA7 / 2- ൽ സി-ഫോസ് എക്സ്പ്രഷനുകളിലുണ്ടാകുകയും, സെൻസറി കോർട്ടക്സിൽ 3 ദിവസങ്ങൾ സ്വമേധയാ ചക്രം കാണിക്കുകയും ചെയ്തു, പക്ഷേ ദൃശ്യ കോർട്ടക്സിൽ ഇല്ല [47]. ഹിപ്പോകാമ്പസ് ലെ FosB / ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുകളുടെ ഏകീകൃത ഇൻഡോക്ഷൻ ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിലുള്ള ഒരു അനന്തരഫലമല്ല എന്ന് ഈ പഠനങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. രസകരമായത്, ഹ്വലി, et al. ദീർഘകാലത്തെ പ്രവചനാത്മകമായ സമ്മർദ്ദം FosB / ΔFosB എക്സ്പ്രഷൻ വർദ്ധിപ്പിക്കുമെന്ന് അടുത്തിടെ റിപ്പോർട്ടുചെയ്തത്, പക്ഷേ ശ്വാസകോശത്തിൽ,48]. തുടർപരിശോധനയോടെ, വ്യായാമം അല്ലെങ്കിൽ സമ്മർദ്ദം മുതലായവ പോലുള്ള ഫോസ് ബി / ΔFOSB ഉളവാക്കുന്ന വ്യതിയാനങ്ങൾ ഹിപ്പോകാമ്പസ് വഴി ഉത്തേജിതാധിഷ്ഠിതമായ ആഘാതം വർദ്ധിപ്പിക്കും.
ഈ പഠനത്തിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന പ്രാഥമിക പാൻ ഫൊസ് ബി ആൻറിബോഡി ഫോസ് ബി പ്രോട്ടോണുകളുടെ ഐസോഫോം എല്ലാ അംഗങ്ങളെയും തിരിച്ചറിയുന്നു. പാശ്ചാത്യപ്രണയ വിശകലനത്തിൽ, ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിൽ ഹിപ്പോകാംപസ് വർദ്ധിച്ച ഏക ഐസോഫോസ് ΔFosB (35-37 kDa) ആയ മോസിഫൈഡ് ഐസോഫോമുകൾ മാത്രമാണെന്ന് ഞങ്ങൾ കണ്ടെത്തി. ഫോസ് കുടുംബ പ്രോട്ടീനുകളിൽ11]. ഈ കണ്ടെത്തൽ പാൻ ഫോസ് ആൻറിബോഡി ഉപയോഗിച്ച് മുമ്പത്തെ പ്രവർത്തനത്തിന് അനുസൃതമായി പ്രവർത്തിക്കുന്നുണ്ട്. 35-37 kDa ΔFOSB പ്രമേഹം മൂലം,44]. അതിനാൽ, ഹിപ്പോകാമ്പാലിൻ FosB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധ സംവിധാനത്തിലൂടെ ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിൽ ഉണ്ടാകുന്ന വർദ്ധനവ് ΔFOSB യുടെ നിലയെ പ്രതിഫലിപ്പിക്കുന്നു.
ഹിപ്പോകാമ്പസ് മൂലകങ്ങളുടെ ഘടനയെയും ഘടനാപരമായ വശങ്ങളെയും കുറിച്ചുള്ള വ്യായാമത്തെ കുറിച്ചുള്ള പ്രദേശം-നിർദ്ദിഷ്ട പ്രഭാവങ്ങൾ. എന്നിരുന്നാലും, ഡോർസൽ ആൻഡ് വെന്റൽ ഹിപ്പോകാമ്പാളിന്റെ പ്രവർത്തനങ്ങളിൽ വ്യായാമം-വികസിപ്പിച്ച മെച്ചപ്പെടുത്തലുകളുടെ വലിയ സാധ്യതയും ധാരാളം പെരുമാറ്റ പഠനങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. സ്പേഷ്യൽ പഠനവും മെമ്മറിയും മെച്ചപ്പെടുത്താൻ വ്യായാമം തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട് [34-38]] സ്പേഷ്യൽ ആൻഡ് സാന്ദർഭിക പ്രോസസ്സിംഗ് പ്രധാനമായും ഡോർസൽ ഹിപ്പോകാമ്പസ് ആണിനെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു [27,28]. ഇതിനു വിപരീതമായി, വ്യായാമം ആക്സിഡൊലിറ്റിക് ആൻഡ് ആന്റീപ്പ്രഷൻ സ്വഭാവങ്ങൾ പ്രയോഗിക്കുക [24,25,38] ഈ വൈകാരിക പ്രതികരണങ്ങൾ പ്രധാനമായും മേൽവസ്ത്രം ഹിപ്പോകാമ്പസ് നിയന്ത്രിക്കുന്നു [29,30]. ഈ പഠനത്തിൽ ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിൽ ΔFosB ന്റെ യൂണിഫോം ഇൻഡിക്ഷൻ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് ഹിപ്പോകാമ്പസ് മുഴുവനായും നൊറോളജിക് രൂപത്തിലുള്ള ചില മാറ്റങ്ങൾ സംഭവിക്കാറുണ്ട്. വ്യായാമം, മുതിർന്ന ഹിപ്പോകാമ്പസ് ആശ്രിത പ്രവർത്തനം എന്നിവയെ എങ്ങനെ ബാധിക്കും എന്ന് ഇത് വിശദീകരിക്കും.
9: വ്യായാമത്തിന് പ്രേരണയായ ന്യൂറോജനിസത്തിന്റെ പ്രദേശത്തെ വിശകലനം
ഡോർസൽ ആൻഡ് വെന്റൽ ഹിപ്പോകാമ്പസ് തമ്മിലുള്ള ന്യൂറോജനിസത്തിന്റെ പ്രവർത്തനപരമായ വിഭജനം ശ്രദ്ധ ആകർഷിച്ചു [49]. ഈ പഠനത്തിൽ, DCX-ir അപരിചിത ന്യൂറോണുകളുടെ മോർഫോളജിക്കൽ പ്രത്യേകതകൾ പ്രയോജനപ്പെടുത്തി [43], ഞങ്ങൾ ഡിസിഎക്സ്-ആർ ഡൻഡററ്റുകൾക്കും GCL നടുത്ത് വരച്ച ഒരു ലൈൻ സെഗ്മെന്റിനും ഇടയ്ക്കുള്ള കവലകളുടെ എണ്ണം ഞങ്ങൾ കണക്കാക്കി. ഈ അളവ് ഡി.ജി.സിക്കായി ഡിസിഎക്സ്-ഇറി ന്യൂറോണുകൾ ലഭ്യമാക്കിയിരുന്നില്ല, എന്നാൽ FOSB / ΔFosB എക്സ്പ്രഷൻ ഡാറ്റയുമായി ബന്ധം (താഴെ കാണുക) ഉപയോഗിച്ച് ഒരു പരസ്പര വിനിമയം നടത്താൻ അത് പ്രാദേശിക-നിർണ്ണായക പരിധി ആവശ്യമാണ്. ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിൽ, DCX-ir ന്യൂറോണുകളുടെ എണ്ണം ദോർസൽ ഗണ്യമായി വർദ്ധിച്ചു, പക്ഷേ ventral, DG. ഇത് വ്യായാമം ചെയ്യുന്നത് ഡി.ജിയുടെ ventral ഭാഗവുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ന്യൂറോജീസിസ് കൂടുതൽ ശക്തമാക്കും. എന്നിരുന്നാലും, മുൻ പഠനങ്ങൾ വൈരുദ്ധ്യ ഫലങ്ങൾ വെളിപ്പെടുത്തിയിട്ടുണ്ട്, ഇതിൽ ചക്രം,50,51]. നിലവിലുള്ള പഠനത്തിൽ, ventral DG ലെ DCX- ir ക്രോസിംഗുകളുടെ എണ്ണം ഓട്ടം വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ സഹായിച്ചു, ചെറിയ സാമ്പിൾ വലുപ്പം (5 മില്ലുകളിൽ ഒരു ഗ്രൂപ്പിന്) ഗ്രൂപ്പുകൾക്ക് ഇടയിലുള്ള ഒരു ഗണ്യമായ വ്യത്യാസം കണ്ടെത്തുന്നതിനുള്ള കഴിവു പരിമിതപ്പെടുത്തിയിരിക്കാം. അതുകൊണ്ട്, വോളണ്ടറി ചക്രം വിൻട്രൽ ഹിപ്പോകാമ്പാലിൻ ന്യൂറോജനിസം ഉത്തേജിപ്പിക്കുന്നു എന്ന സാധ്യത തള്ളിക്കളയാനാവില്ല. മൾട്ടിസ്റ്റേപ്പ് പ്രക്രിയയിൽ (സെൽ വ്യാപകമാക്കൽ, വൈരുദ്ധ്യവാദം, കുടിയേറ്റം, നിലനിൽപ്പ്) സംബന്ധിച്ച വ്യായാമത്തെ നയിക്കുന്ന ന്യൂറോജനിസത്തിന്റെ മേഖല-പ്രത്യേകത മനസ്സിലാക്കാൻ വിശദമായ പഠനങ്ങൾ ആവശ്യമാണ്.
വ്യായാമം: ഹിപ്പികാംപൽ പ്ലാസ്റ്റിക് നിലനിർത്താനുള്ള വ്യായാമങ്ങൾ ΔFosB ഉത്തേജകത്തിന്റെ പ്രവർത്തനപരമായ പ്രത്യാഘാതങ്ങൾ
അവസാനമായി, ഹിപ്പോകാമ്പസിൽ വ്യായാമങ്ങളായ ΔFosB ഉത്തേജകത്തിന്റെ പ്രവർത്തനപരമായ പ്രത്യാഘാതങ്ങളെ അംഗീകരിക്കുന്നതിനുള്ള ആദ്യപടിയായി, ഞങ്ങൾ ഡോസ്-ആൻഡ് ദ്ട്രൽ ഡി.ജി.യിൽ DCX- ir ക്രോസിംഗുകൾക്ക് FOSB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധം തമ്മിലുള്ള ബന്ധം പരിശോധിച്ചു. രണ്ട് വേരിയബിളുകൾ. ΔFosB വ്യായാമത്തിന് ഇടവിട്ടുള്ള ന്യൂറോജനിസത്തിന്റെ ക്രമനിയമത്തെപ്പറ്റിയുള്ള കൃത്യമായ പ്രവർത്തനങ്ങൾ അനിവാര്യമാണെങ്കിലും, fosBFosB, ΔFosB, Δ2ΔFosB (എല്ലാ fosB ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ), അടിസ്ഥാന ഹിപ്പോകാമ്പാപ്പിൾ ന്യൂറോജനിസത്തിന്റെ കുറവുകൾ പ്രദർശിപ്പിക്കുകയും, ന്യൂറോണൽ പ്രോജനോറ്റർ കോശങ്ങളുടെ അഭിവൃദ്ധി കുറയുകയും, നവജാത ശില്പങ്ങളുടെ ന്യൂട്രോണുകുത്തിയ കുടിയേറ്റം വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും, അസാധാരണമായ ഡി.ജി.ഘടനകൾ [20]. എന്നിരുന്നാലും, ഈ പരിവർത്തനം നടന്നില്ല fosB(തീയതി) എലികൾ, FosB ഇല്ലാത്ത, എന്നാൽ ΔFosB / Δ2ΔFosB അല്ല. രസാവഹമാണ് fosB- മുഞ്ഞ എലിയെ, ചില ന്യൂറോജനിസംബന്ധ സംബന്ധമായ ജീനുകളുടെ ആവിഷ്കാരം Vgf (VGF നാഡികളുടെ വളർച്ചാ ഘടകം ഇൻകറൈഡ്) ഗാൽ (Galanin prepropeptide) നിയമവിരുദ്ധമായി [20]. VGF, GAL എന്നിവ രഹസ്യസംഖ്യയുള്ള തന്മാത്രകളാണെന്നതിനാൽ, വാഗ്ദാനങ്ങളുള്ള ഒരു നിർദ്ദേശം ΔFosB പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന ന്യൂറോണുകൾ ഓട്ടോറൈൻ / പാരാക്രിൻ പ്രവർത്തനത്തിലൂടെ ന്യൂറോജനിസക്രിയയെ നിയന്ത്രിക്കാനിടയുണ്ട് [20].
കൂടാതെ, ΔFosB ഉദ്ഭവിക്കുന്ന മേഖല, ന്യൂറോജെനിക് പ്രവർത്തനം കൂടുതലുള്ള പ്രദേശത്തോടുകൂടിയ സ്പേസ്ലാൽ ഓവർലാപ്സ് ഓണ്ലപ് ചെയ്യുന്നതിലൂടെ ശ്രദ്ധിക്കേണ്ടതാണ്. വ്യായാമത്തിന് പ്രേരണയായ ന്യൂറോജനിസം ഏറ്റവും ചുരുങ്ങിയത് ആക്ടിവിറ്റിയെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു എന്നാണ് ഈ കണ്ടെത്തൽ സൂചിപ്പിക്കുന്നത്. കേന്ദ്ര നാഡീവ്യൂഹത്തിന്റെ പ്രവർത്തനം നിയന്ത്രിക്കാനും നവീകരിക്കാനും നൊറോനാൾ സജീവമാക്കുന്നു [9], ബ്രെയിൻ ഡിറൈവ്ഡ് ന്യൂറോട്രോപിക് ഫാക്റ്റർ (ബിഡിഎൻഎഫ്) എക്സ്പ്രഷൻ, റിലീസ് അടക്കം,52,53], രക്തം-തലച്ചോറിലെ തടസ്സത്തിലൂടെ സെറ് ഇൻസുലിൻ പോലുള്ള വളർച്ചാ ഘടകമായ -1 (IGF-1)54,55], അപ്പോത്തോസിസ് നിരോധിച്ചു [56], മൈറ്റ്ചോണ്ട്രൽ മോട്ടറി നിയന്ത്രണം [57]. അതിനാൽ, ദീർഘകാലാടിസ്ഥാനത്തിലുള്ള വ്യായാമം ആവർത്തിക്കുന്ന ന്യൂറോണലോ ആക്ടിവേഷൻ തുടങ്ങി, വർദ്ധിച്ചുവരുന്ന ΔFosB എക്സ്പ്രഷനിൽ പ്രകടമായത്, ഇത് ഹിപ്പോകാമ്പാലി പ്ലാസ്റ്റിക്ക് വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് സഹായിക്കുന്നു, മുകളിൽ വിവരിച്ച ഈ ഒന്നിലധികം സംവിധാനങ്ങളിലൂടെ സാധിക്കും.
ഇപ്പോഴത്തെ പഠനം വ്യായാമത്തിന് പ്രേരണയായ ന്യൂറോജനിസവും DG ലെ FosB / ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുമായുള്ള ബന്ധവും മാത്രമാണ് നൽകിയിട്ടുള്ളത്. എന്നിരുന്നാലും, FOSB / ΔFosB രോഗപ്രതിരോധശേഷിയും CA1, CA3 സബ്ഫീൽഡുകളിൽ പ്രചോദിതമായിരുന്നു. ഈ ഉപമേഖലയ്ക്കുള്ളിൽ വ്യായാമങ്ങളായ ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുകളുടെ പ്രവർത്തനപരമായ പ്രവർത്തനങ്ങളെക്കുറിച്ച് കൂടുതലായി മനസ്സിലാക്കാൻ കൂടുതൽ പഠനങ്ങൾ ആവശ്യമായി വരുമ്പോൾ, മുമ്പത്തെ സാഹിത്യം ഒരു നല്ല സാധ്യത നൽകുന്നു. ഗ്വാൻ എ. (2011) CA5 അല്ലെങ്കിൽ CA5 പിരമിഡൽ ന്യൂറോണുകളുടെ ദുർബലമായ മെമ്മറി ഏകീകരണം അല്ലെങ്കിൽ വീണ്ടെടുക്കൽ ലെ സൈക്ലിൻ-ആശ്രിത KINAS 1 (Cdk3)58]. രസകരമാന്ന, ΔFOSB യുടെ താഴേത്തട്ടിലുള്ള Cdk5 ആണ് [59] സിനാപ്റ്റിക് പ്ലാസ്റ്റിറ്റി നിയന്ത്രിക്കുന്നതിൽ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു [60]. അതുകൊണ്ടു, വ്യായാമത്തിന് ΔFosB എക്സ്പ്രഷൻ CA5, CA1 സബ്ഫീൽഡുകളിൽ Cdk3 സജീവമാക്കൽ വഴി സിനാപ്റ്റിക് പ്ലാസ്റ്റിക്ക് നിയന്ത്രിക്കുന്നതിൽ ഉൾപ്പെട്ടേക്കാം.
തീരുമാനം
ഹിപ്പോകാമ്പസിലെ ആദ്യകാല ജീനുകളുടെ പ്രോട്ടീനുകളുടെ വ്യാഖ്യാനം പ്രചരിപ്പിക്കുക എന്ന വ്യായാമത്തിൽ, ദീർഘകാല സ്ഥിരം വ്യായാമം ഗണ്യമായി ΔFosB മുഖാന്തരം ഹിപ്പോകാമ്പസ് വഴി ഉണ്ടാകുന്ന ആദ്യ തെളിവുകൾ നൽകുന്നു. ഉത്തരംഒന്നിലധികം ഹിപ്പോകാമ്പാപ്പ് പ്രവർത്തനങ്ങൾ മെച്ചപ്പെടുത്താൻ കഴിയുന്ന ഫലപ്രദമായ ഔഷധ-ഔഷധ സങ്കേതമാണ് വ്യായാമം. FosB / ΔFosB എക്സ്പ്രഷനുകളും ന്യൂറോജനിസവും തമ്മിൽ കാര്യമായ പരസ്പരബന്ധം കാണിക്കുന്നതോടൊപ്പം, ഈ വിവരങ്ങൾ പ്രകോപനപരമായതും, ന്യൂറോജേഷിസവും ഉൾപ്പെടെ ഹിപ്പോകാമ്പാലിന്റെ പ്രവർത്തനത്തെ വ്യായാമത്തിന്റെ ഫലമായി ഇടപെടുത്തുന്നതിൽ ΔFosB ന്റെ പങ്ക് വ്യക്തമാക്കുന്ന കൂടുതൽ പഠനങ്ങളെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു.
ഫണ്ടിംഗ് സ്റ്റേറ്റ്മെന്റ്
അവലംബം
;