അമിതവണ്ണത്തിലെ ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിന് ബാസൽ ഗാംഗ്ലിയ അപര്യാപ്തത സംഭാവന ചെയ്യുന്നു (2016)

ഓൺലൈനിൽ ലഭ്യമാണ് 29 ഡിസംബർ 2016

കൂടുതൽ കാണിക്കുക

http://dx.doi.org/10.1016/j.cmet.2016.12.001

ഹൈലൈറ്റുകൾ

• അമിതവണ്ണം ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു

Ese അമിതവണ്ണമുള്ള എലികൾക്ക് സ്ട്രൈറ്റിക്കൽ ഡി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്ആർ ബൈൻഡിംഗ് കുറവാണ്, ഇത് അവയുടെ നിഷ്‌ക്രിയത്വം വിശദീകരിക്കും

• ജി പുന oring സ്ഥാപിക്കുന്നു_i iMSN- കളിലെ സിഗ്നലിംഗ് അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളുടെ ശാരീരിക പ്രവർത്തന നിലയെ രക്ഷിക്കുന്നു

Weight ശരീരഭാരം വർദ്ധിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു കാരണത്തേക്കാൾ ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വം ഒരു പരിണതഫലമാണ്

ചുരുക്കം

അമിതവണ്ണം ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, ഇത് ശരീരഭാരത്തിന്റെ ആരോഗ്യപരമായ പ്രത്യാഘാതങ്ങളെ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, ഈ അസോസിയേഷന് മധ്യസ്ഥത വഹിക്കുന്ന സംവിധാനങ്ങൾ അജ്ഞാതമാണ്. ഡോപാമൈൻ സിഗ്നലിംഗിലെ അപര്യാപ്തത അമിതവണ്ണത്തിലെ ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിന് കാരണമാകുമെന്ന് ഞങ്ങൾ അനുമാനിച്ചു. ഇത് അന്വേഷിക്കുന്നതിന്, മെലിഞ്ഞതും അമിതവണ്ണമുള്ളതുമായ എലികളിലെ ഡോപാമൈൻ സിഗ്നലിംഗിന്റെ ഒന്നിലധികം വശങ്ങൾ ഞങ്ങൾ കണക്കാക്കി. സ്ട്രൈറ്റത്തിൽ D2- തരം റിസപ്റ്റർ (D2R) ബന്ധിപ്പിക്കുന്നത് കണ്ടെത്തി, പക്ഷേ D1- തരം റിസപ്റ്റർ ബൈൻഡിംഗ് അല്ലെങ്കിൽ ഡോപാമൈൻ അളവ് അല്ല, അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിൽ കുറയുന്നു. മെലിഞ്ഞ എലികളിലെ മോട്ടോർ പ്രവർത്തനം കുറയ്ക്കുന്നതിന് സ്ട്രിയറ്റൽ മീഡിയം സ്പൈനി ന്യൂറോണുകളിൽ നിന്ന് ജനിതകമായി നീക്കംചെയ്യുന്നത് മതിയായിരുന്നു, അതേസമയം ജി പുന oring സ്ഥാപിക്കുന്നു_i ഈ ന്യൂറോണുകളിൽ സിഗ്നലിംഗ് ചെയ്യുന്നത് അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളുടെ പ്രവർത്തനം വർദ്ധിപ്പിച്ചു. അതിശയകരമെന്നു പറയട്ടെ, കുറഞ്ഞ D2R ഉള്ള എലികൾ‌ സജീവമായിരുന്നില്ലെങ്കിലും, നിയന്ത്രണ ശൈലികളേക്കാൾ‌ അവർ‌ ആഹാരക്രമത്തിൽ‌ ഭാരം വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ‌ സാധ്യതയില്ല. സ്‌ട്രാറ്റിയൽ D2R സിഗ്നലിംഗിലെ കുറവുകൾ അമിതവണ്ണത്തിലെ ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിന് കാരണമാകുമെന്ന് ഞങ്ങൾ നിഗമനം ചെയ്യുന്നു, എന്നാൽ നിഷ്‌ക്രിയത്വം അമിതവണ്ണത്തിന്റെ ഒരു കാരണത്തേക്കാൾ ഒരു അനന്തരഫലമാണ്.

ഗ്രാഫിക്കൽ സംഗ്രഹം

ചിത്ര ഓപ്ഷനുകൾ

അടയാളവാക്കുകൾ

അമിതവണ്ണം;
ഡോപ്പമിൻ;
ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങൾ;
വ്യായാമം;
D2;
സ്ട്രിയാറ്റം;
പൊണ്ണത്തടി;
ഭാരനഷ്ടം

അവതാരിക

അമിതവണ്ണം ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു (ബ്ര rown ൺസൺ മറ്റുള്ളവരും, 2005 ഒപ്പം എകെകാക്കിസ് മറ്റുള്ളവരും., 2016), ഇത് ടൈപ്പ് II പ്രമേഹത്തിന്റെയും ഹൃദയ രോഗങ്ങളുടെയും നെഗറ്റീവ് ആരോഗ്യ പ്രത്യാഘാതങ്ങൾ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു (ഡി റെസെൻഡെ മറ്റുള്ളവരും, 2014 ഒപ്പം ശർമ്മ തുടങ്ങിയവർ, 2015). ഈ അസോസിയേഷന് അടിവരയിടുന്ന സംവിധാനങ്ങൾ അറിവായിട്ടില്ല, ഇത് അമിതവണ്ണമുള്ള ജനസംഖ്യയിലെ ശാരീരിക പ്രവർത്തന നിലവാരത്തിൽ മാറ്റം വരുത്തുന്നതിനുള്ള ഫലപ്രദമായ ഇടപെടലുകളുടെ അഭാവത്തിൽ പ്രതിഫലിക്കുന്നു (എകെകാക്കിസ് മറ്റുള്ളവരും., 2016). രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, സ്ട്രൈറ്റൽ ഡോപാമൈൻ (ഡി‌എ) സിഗ്നലിംഗിലെ മാറ്റങ്ങളുമായി അമിതവണ്ണം ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, ഇത് അമിതവണ്ണത്തിലെ പ്രതിഫലത്തിന്റെ അപര്യാപ്തതയെക്കുറിച്ചുള്ള സിദ്ധാന്തങ്ങളിലേക്ക് നയിച്ചു (ബ്ലം മറ്റുള്ളവരും., 2011, കെന്നി, 2011 ഒപ്പം വോൾക്കോയും വൈസും, 2005). സ്‌ട്രൈറ്റൽ ഡി‌എ മോട്ടോർ output ട്ട്‌പുട്ടുമായി ശക്തമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നുവെങ്കിലും, കുറച്ച് പഠനങ്ങൾ ഡയറ്റ്-ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് ഡോപാമിനേർജിക് മാറ്റങ്ങൾ ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിന് എങ്ങനെ കാരണമാകുമെന്ന് അന്വേഷിച്ചു. സ്ട്രൈറ്റൽ ഡി‌എ സിഗ്നലിംഗ് അമിതവണ്ണത്തിൽ തകരാറിലാണെന്നും ഇത് ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിന് കാരണമാകുമെന്നും ഞങ്ങൾ അനുമാനിക്കുന്നു. ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിന്റെ ജൈവശാസ്ത്രപരമായ കാരണങ്ങൾ മനസിലാക്കുന്നത് അമിതവണ്ണമുള്ള വ്യക്തികളിൽ പ്രവർത്തനം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനും അതുവഴി ആരോഗ്യം മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നതിനും ഫലപ്രദമായ ഇടപെടലുകളിലേക്ക് നയിച്ചേക്കാം.

മോട്ടോർ നിയന്ത്രണത്തിൽ സ്‌ട്രിയാറ്റൽ ഡി.എ. പാർക്കിൻസൺസ് രോഗം പോലുള്ള മോട്ടോർ തകരാറുകളിൽ ഇത് പ്രകടമാണ്, ഇത് മിഡ്‌ബ്രെയിനിലെ ഡോപാമിനേർജിക് ന്യൂറോണുകളുടെ മരണവും സ്ട്രൈറ്റൽ ഡിഎ നഷ്ടപ്പെടുന്നതുമാണ് (ഹോർണിക്കിവിച്ച്സ്, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്). ഡി‌എ മോഡുലേറ്റ് ചെയ്ത സ്ട്രൈറ്റൽ പ്രൊജക്ഷൻ ന്യൂറോണുകളുടെ രണ്ട് പോപ്പുലേഷനുകളെ നേരിട്ടുള്ള, പരോക്ഷ പാത്ത്വേ മീഡിയം സ്പൈനി ന്യൂറോണുകൾ (ഡിഎംഎസ്എൻ, ഐഎംഎസ്എൻ) എന്ന് വിളിക്കുന്നു (അലക്സാണ്ടറും ക്രച്ചറും, 1990, DeLong, 1990 ഒപ്പം ഗെർഫെൻ മറ്റുള്ളവരും, 1990). dMSN- കൾ ജി പ്രകടിപ്പിക്കുന്നു_s-കോൾഡ്ഡ് ഡി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് റിസപ്റ്ററും (ഡി‌എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്ആർ) ഗ്ലോബസ് പാലിഡസിന്റെ സബ്സ്റ്റാന്റിയ നിഗ്രയിലേക്കും ആന്തരിക വിഭാഗത്തിലേക്കും പ്രോജക്റ്റ് ചെയ്യുക, അതേസമയം ഐ‌എം‌എസ്‌എൻ‌മാർ‌ ജി പ്രകടിപ്പിക്കുന്നു_iഗ്ലോബസ് പല്ലിഡസിന്റെ (GPe) ബാഹ്യ വിഭാഗത്തിലേക്ക് D2R പ്രോജക്റ്റ് ചെയ്യുക (ഗെർഫെൻ മറ്റുള്ളവരും, 1990, ലെ മൊയ്‌നും ബ്ലോച്ചും, എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് ഒപ്പം ലെവി മറ്റുള്ളവരും., 1993). ചലനം കുറയ്ക്കുന്നതിന് iMSN- കളിൽ നിന്ന് D2R- കളുടെ ജനിതക ഉന്മൂലനം അല്ലെങ്കിൽ iMSN- കളുടെ ഒപ്റ്റോജെനെറ്റിക് ഉത്തേജനം മതിയാകും (ക്രാവിറ്റ്സ് മറ്റുള്ളവരും., 2010 ഒപ്പം ലെമോസ് മറ്റുള്ളവരും., 2016). D2R പ്രവർത്തനരഹിതവും അമിതവണ്ണവും തമ്മിലുള്ള ബന്ധത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, അമിതവണ്ണമുള്ള മൃഗങ്ങൾ iMSN output ട്ട്‌പുട്ടിൽ മാറ്റം വരുത്തിയെന്ന് ഞങ്ങൾ അനുമാനിച്ചു, ഇത് ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിന് കാരണമാകുന്നു.

മെലിഞ്ഞതും ഭക്ഷണത്തിലൂടെയുള്ളതുമായ അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിലെ ഡി‌എ സിഗ്നലിംഗിന്റെ ഒന്നിലധികം വശങ്ങൾ ഞങ്ങൾ ഇവിടെ പരിശോധിച്ചു. അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിൽ D2R ബൈൻഡിംഗ് കുറച്ചിട്ടുണ്ട്, അതേസമയം D1R ബൈൻഡിംഗും എക്സ്ട്രാ സെല്ലുലാർ ഡി‌എ അളവും മാറ്റമില്ലാതെ തുടർന്നു. പൊണ്ണത്തടിയുള്ള എലികളും സ്ട്രൈറ്റൽ ഫയറിംഗിൽ തടസ്സങ്ങൾ പ്രകടിപ്പിക്കുകയും ചലനം കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്തു. ഐ‌എം‌എസ്‌എൻ‌സിൽ‌ നിന്നും ജനിതകമായി ഡി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്ആർ‌ ഒഴിവാക്കുന്നത് മെലിഞ്ഞ എലികളിലെ പ്രവർത്തനം കുറച്ചു, അതേസമയം ജി പുന oring സ്ഥാപിക്കുന്നു_i iMSN- കളിലെ സിഗ്നലിംഗ് അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിൽ പ്രവർത്തനം വർദ്ധിപ്പിച്ചു. IMSN- കളിലെ D2R സിഗ്നലിംഗിന് ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങൾ ദ്വിദിശയിൽ മോഡുലേറ്റ് ചെയ്യാൻ കഴിയുമെന്ന് ഈ ഫലങ്ങൾ സ്ഥിരീകരിക്കുന്നു. കുറഞ്ഞ D2R സിഗ്നലിംഗ് ഉള്ള എലികളുടെ പ്രവർത്തനം കാരണം കൊഴുപ്പ് കൂടിയ ഭക്ഷണത്തിലെ ശരീരഭാരം വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ സാധ്യതയുണ്ടോ എന്ന് ഞങ്ങൾ ചോദിച്ചു. ഇത് ചെയ്യുന്നതിന്, എലികൾക്കിടയിലെ D2R ബൈൻഡിംഗിലെ സ്വാഭാവിക വ്യതിയാനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട് ശരീരഭാരം ഞങ്ങൾ പരിശോധിച്ചു, അതുപോലെ തന്നെ സ്ട്രൈറ്റൽ D2R- കളിലെ ജനിതക ഉന്മൂലനം എലികളിലും. കുറഞ്ഞ അളവിലുള്ള D2R ഉള്ള എലികൾക്ക് ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങൾ കുറവാണെങ്കിലും, അവ കേടുകൂടാതെ D2R ഉള്ള എലികളുടെ അതേ നിരക്കിൽ ഭാരം വർദ്ധിപ്പിച്ചു. ശാരീരിക പ്രവർത്തനവും ശരീരഭാരവും തമ്മിലുള്ള ശക്തമായ കാര്യകാരണ ബന്ധത്തിനെതിരെ ഇത് വാദിക്കുന്നു. D2R സിഗ്നലിംഗിലെ വൈകല്യങ്ങൾ അമിതവണ്ണത്തിലെ ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിന് കാരണമാകുമെന്ന് ഞങ്ങൾ നിഗമനം ചെയ്യുന്നു, എന്നാൽ നിഷ്‌ക്രിയത്വം ശരീരഭാരം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് കാരണമാകില്ല.

ഫലം

ഡയറ്റ്-ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് അമിതവണ്ണം ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു

C57BL6 / J ആൺ എലികൾക്ക് (3–4 മാസം) സാധാരണ ച ow (മെലിഞ്ഞ, n = 8) അല്ലെങ്കിൽ ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഉള്ള ഭക്ഷണം (അമിതവണ്ണം, n = 8) 18 ആഴ്ച നൽകി (ചിത്രം എസ് 1എ). 2-ാം ആഴ്ച മുതൽ 18-ാം ആഴ്ച വരെ തുടരുന്ന, അമിതവണ്ണമുള്ള എലികൾക്ക് ശരീരഭാരവും കൊഴുപ്പ് പിണ്ഡവും മെലിഞ്ഞ എലികളേക്കാൾ കൂടുതലാണ് (p <0.0001; ചിത്രം 1എ ,. S1ബി). മെലിഞ്ഞ പിണ്ഡം കാര്യമായി മാറ്റിയില്ല (ചിത്രം എസ് 1സി). ഓരോ രണ്ടാഴ്ച കൂടുമ്പോഴും 2 ആഴ്ചത്തേക്ക് ഒരു ഓപ്പൺ ഫീൽഡിലെ പ്രവർത്തന നില ഞങ്ങൾ കണക്കാക്കി (എതോവിഷൻ; നോൾഡസ് ഇൻഫർമേഷൻ ടെക്നോളജീസ്). മെലിഞ്ഞ എലികളേക്കാൾ 18-ാം ആഴ്ച ആരംഭിച്ച് 4-ാം ആഴ്ചയിൽ തുടരുന്ന (p <18; ചിത്രം 1ബി, 1 സി). 18-ാം ആഴ്ചയിൽ, പൊണ്ണത്തടിയുള്ള എലികൾ ചലിക്കാൻ കുറച്ച് സമയം ചെലവഴിച്ചു (p = 0.005), കുറച്ച് ചലനങ്ങളുണ്ടായിരുന്നു (p = 0.0003), ഒപ്പം നീങ്ങുമ്പോൾ വേഗത കുറവായിരുന്നു (p = 0.0002; ചിത്രം 1ബി) മെലിഞ്ഞ എലികളുമായി ആപേക്ഷികം. വളർത്തലും ചമയവും കാര്യമായി മാറ്റിയില്ല (ചിത്രം 1ബി). ഹോം കേജ് റണ്ണിംഗ് വീലുകളിലേക്ക് പ്രവേശനം നൽകുമ്പോൾ അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളും മെലിഞ്ഞ എലികളേക്കാൾ കുറവാണ് (p = 0.0005; ചിത്രം 1ഇ). ചലന കുറവുകൾ അമിതവണ്ണമുള്ള ഗ്രൂപ്പിലെ ശരീരഭാരവുമായി ബന്ധമുണ്ടോ എന്ന് ഞങ്ങൾ പരിശോധിച്ചു. ശരീരഭാരം ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഭക്ഷണത്തിന്റെ കലോറി with ർജ്ജവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നുവെങ്കിലും (ചിത്രം 1എഫ്), ഇത് ഒരു തുറന്ന വയലിലെ ചലന നിലവാരവുമായി അല്ലെങ്കിൽ ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഭക്ഷണ കാലയളവിൽ ചെലവഴിച്ച with ർജ്ജവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിട്ടില്ല (ചിത്രം 1G, 1H). രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, പരീക്ഷണത്തിന്റെ ആദ്യ ആഴ്ചയിൽ ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്നത് പരിശോധിച്ചപ്പോൾ സമാനമായ ബന്ധങ്ങൾ (ചിത്രം 1I-1K), ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഉള്ള ഭക്ഷണത്തിന്റെ പ്രാരംഭ അളവ് (എന്നാൽ ചലനമോ energy ർജ്ജ ചെലവോ അല്ല) പിന്നീടുള്ള ശരീരഭാരം പ്രവചിക്കുന്നതായി സൂചിപ്പിക്കുന്നു.

ചിത്രം 1.

ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിലേക്ക് നയിച്ച വിട്ടുമാറാത്ത ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഡയറ്റ്

(എ) എലികൾ‌ ആഹാരം കഴിക്കുന്നതിനേക്കാൾ‌ ഭാരം കൂടിയ കൊഴുപ്പ് കൂടിയ ഭക്ഷണമാണ് എലികൾ‌ക്ക് 2 ആഴ്ച ആരംഭിച്ച് 18 (F_(18,252) = 62.43, പി <0.0001).

(ബി, സി) (ബി) ഉദാഹരണം ഓപ്പൺ ഫീൽഡ് പ്രവർത്തനത്തിന്റെ ട്രാക്ക്-പ്ലോട്ടുകൾ (സി) അമിതവണ്ണമുള്ള എലികൾ 4 ആഴ്ച ആരംഭിച്ച് മെലിഞ്ഞ എലികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങൾ കുറച്ചതായി കാണിക്കുന്നു. 18 (F_(10,140) = 4.83, പി <0.0001).

(ഡി) കൊഴുപ്പ് കൂടിയ ഭക്ഷണത്തിൽ 18 ആഴ്ചകൾക്കുശേഷം, അമിതവണ്ണമുള്ള എലികൾ ചലിക്കുന്ന സമയം കുറച്ചിരുന്നു (ടി₍₁₄₎ = 3.32, പി = 0.005), ചലനത്തിന്റെ ആവൃത്തി കുറഞ്ഞു (ടി₍₁₄₎ = 4.74, പി = 0.0003), നീങ്ങുമ്പോൾ വേഗത കുറയുന്നു (ടി₍₁₄₎ മെലിഞ്ഞ നിയന്ത്രണങ്ങളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ = 4.69, പി = 0.0002). അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളും വളർത്തൽ കുറയാനുള്ള പ്രവണത കാണിച്ചു (p = 0.07).

(ഇ) ഹോം കൂട്ടിൽ ഓടുന്ന ചക്രത്തിലേക്ക് പ്രവേശനം നൽകുമ്പോൾ, മെലിഞ്ഞ എലികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ അമിതവണ്ണമുള്ള എലികൾക്ക് ചക്ര തിരിവുകൾ കുറവായിരിക്കും (ടി₍₁₄₎ = 4.55, പി = 0.0005).

(എഫ്-എച്ച്) മൊത്തം ശരീരഭാരം പരീക്ഷണത്തിനിടെ (എഫ്) energy ർജ്ജ ഉപഭോഗവുമായി (r = 0.74, പി = 0.04) ഒരു പ്രധാന ബന്ധമുണ്ടാക്കി, പക്ഷേ (ജി) energy ർജ്ജ ചെലവ് (r = 0.52, പി = 0.19) (എച്ച്) ഓപ്പൺ-ഫീൽഡ് വേഗത (r = 0.19, p = 0.65).

(I-K) മൊത്തം ശരീരഭാരം ആദ്യ ആഴ്ചയിലെ (I) ശരാശരി energy ർജ്ജ ഉപഭോഗവുമായി (r = 0.88, p = 0.004) ഒരു പ്രധാന ബന്ധമുണ്ടാക്കി, പക്ഷേ (J) energy ർജ്ജ ചെലവ് (r = .0.19, p = 0.66) , (കെ) ഓപ്പൺ-ഫീൽഡ് വേഗത (r = 0.36, p = 0.38).

സ്ഥിതിവിവര വിശകലനം. (എ, സി) ടു-വേ ആവർത്തിച്ചുള്ള നടപടികൾ ANOVA യും അതിനുശേഷം ബെഞ്ചാമിനി-ഹോച്ച്ബെർഗിനൊപ്പം തെറ്റായ കണ്ടെത്തൽ നിരക്കും പോസ്റ്റ് ഹോക് ടി പരിശോധന; (ഡി, ഇ) ജോഡിയാക്കാത്ത വിദ്യാർത്ഥിയുടെ ടി ടെസ്റ്റ്; (F-H) ലീനിയർ റിഗ്രഷൻ; ^*p <0.05, ^**p <0.01, ^***p <0.0001 വേഴ്സസ് മെലിഞ്ഞത്. (I-K) ലീനിയർ റിഗ്രഷൻ; ^***p <0.001 മെലിഞ്ഞ എലികൾക്കെതിരെ.

ചിത്ര ഓപ്ഷനുകൾ

ഡോപാമൈൻ D2R ബൈൻഡിംഗിലെ കുറവുകളുമായി അമിതവണ്ണം ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു

ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിന് അടിസ്ഥാനമായ മെക്കാനിസങ്ങൾ തിരിച്ചറിയുന്നതിന്, മെലിഞ്ഞതും അമിതവണ്ണമുള്ളതുമായ എലികളിൽ ഡിഎ സിഗ്നലിംഗിന്റെ ഒന്നിലധികം വശങ്ങൾ ഞങ്ങൾ കണക്കാക്കി. എലിയിലെ മുൻ‌ റിപ്പോർട്ടുകൾ‌ക്ക് അനുസൃതമായി, D2R പോലുള്ള റിസപ്റ്റർ‌ ബൈൻ‌ഡിംഗ് (ഓട്ടോറാഡിയോഗ്രാഫി വഴി ³മെലിഞ്ഞ എലികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ പൊണ്ണത്തടിയുള്ള എലികളിൽ എച്ച്-സ്പൈറോൺ, ഇനി മുതൽ ഡി 2 ആർ ബൈൻഡിംഗ് എന്ന് വിളിക്കപ്പെടുന്നു) (പി <0.0001; ചിത്രം 2എ, 2 ബി), മൂന്ന് സ്ട്രൈറ്റൽ ഉപവിഭാഗങ്ങളിലും (ഡോർസോമെഡിയൽ: പി = 0.004; ഡോർസോലെറ്ററൽ: പി <0.0001; വെൻട്രൽ: പി <0.001; കണക്കുകൾ S2A, S2B). എന്നിരുന്നാലും, മെലിഞ്ഞ അല്ലെങ്കിൽ അമിതവണ്ണമുള്ള ഗ്രൂപ്പിലെ ശരീരത്തിലെ കൊഴുപ്പുമായി ഡി 2 ആർ ബൈൻഡിംഗ് ബന്ധപ്പെട്ടിട്ടില്ല (p> രണ്ടിനും 0.55; ചിത്രം 2സി), ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഉള്ള ഭക്ഷണത്തിലൂടെ D2R ബൈൻഡിംഗും കൊഴുപ്പ് സംഭരണവും മാറ്റുന്നുണ്ടെങ്കിലും, ഈ വേരിയബിളുകൾ പരസ്പരം ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കില്ലെന്ന് നിർദ്ദേശിക്കുന്നു.

ചിത്രം 2.

ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഡയറ്റ് ദുർബലമായ സ്ട്രിയറ്റൽ ഡോപാമൈൻ D2R ബൈൻഡിംഗ്

(എ) വഴി കണക്കാക്കിയ സ്ട്രൈറ്റൽ D2R ബൈൻഡിംഗിന്റെ ചിത്രങ്ങൾ ³എച്ച്-സ്പൈറോൺ ഓട്ടോറാഡിയോഗ്രഫി.

(ബി) മെലിഞ്ഞ എലികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ പൊണ്ണത്തടിയുള്ള സ്ട്രിയറ്റൽ ഡിഎക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്ആർ ബൈൻഡിംഗ് കുറഞ്ഞു (ടി₍₂₅₎ = 5.02, പി <0.0001).

(സി) സ്ട്രിയറ്റൽ ഡി 2 ആർ ബൈൻഡിംഗ് മെലിഞ്ഞ (പി = 0.95) അല്ലെങ്കിൽ അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിലെ (പി = 0.56) ശരീരത്തിലെ കൊഴുപ്പ് ശതമാനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിട്ടില്ല.

(D-F) (D) സ്ട്രിയറ്റൽ D1R ബൈൻഡിംഗ് (ടി₍₂₄₎ = 1.31, പി = 0.20), (ഇ) മൊത്തം ഡോപാമൈൻ ഉള്ളടക്കം (ഡി‌എ; ടി₍₁₃₎ = 0.85, പി = 0.41), (എഫ്) ടൈറോസിൻ ഹൈഡ്രോക്സിലേസ് (ടിഎച്ച്) സാന്ദ്രത (ടി₍₁₄₎ = 0.48, പി = 0.64) ഡയറ്റ് ഗ്രൂപ്പുകൾ തമ്മിൽ വ്യത്യസ്തമായിരുന്നില്ല.

സ്ഥിതിവിവര വിശകലനം. വ്യക്തിഗത എലികളുമായി ശരാശരി; n = 8–19 എലികൾ / ഗ്രൂപ്പ്; വിദ്യാർത്ഥികളുടെ ടി ടെസ്റ്റ് (ബി, ഡി-എഫ്) അല്ലെങ്കിൽ ലീനിയർ റിഗ്രഷൻ (സി); ^*p <0.01.

ചിത്ര ഓപ്ഷനുകൾ

D2R ബൈൻഡിംഗിൽ അമിതവണ്ണ-മധ്യസ്ഥത കുറയ്ക്കുന്നതിനുള്ള സംവിധാനം തിരിച്ചറിയാൻ ഞങ്ങൾ ശ്രമിച്ചു. ഇത് ചെയ്യുന്നതിന്, ഞങ്ങൾ വ്യത്യാസങ്ങൾ അന്വേഷിച്ചു DrD2 മ്ര്ന (അതാതിടത്തു സസ്യപാരമ്പര്യ വഴി) എല്ലാ മൂന്ന് സ്ത്രിഅതല് സുബ്ദിവിസിഒംസ് (ദൊര്സൊമെദിഅല് അത് മാറ്റമില്ലാതെ കണ്ടെത്തി: P = 0.92; ദൊര്സൊലതെരല്: P = 0.90; ഭാഗമെടുക്കണം: P = 0.34; ചിത്രം എസ് 2സി). മൊത്തം D2R പ്രോട്ടീൻ അളവ് കണക്കാക്കാൻ ഞങ്ങൾ വെസ്റ്റേൺ ബ്ലോട്ടുകൾ നടത്തി, 50- അല്ലെങ്കിൽ 70-kDa ബാൻഡുകളിൽ ഒരു മാറ്റവും വരുത്തിയില്ല, D2R- ന്റെ വ്യത്യസ്ത ഗ്ലൈക്കോസൈലേഷൻ അവസ്ഥകളെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നുവെന്ന് കരുതുന്നു (രണ്ടും p> 0.95, കണക്കുകൾ S2D, S2E) (ജോൺസണും കെന്നിയും, 2010). അവസാനമായി, മെലിഞ്ഞതും അമിതവണ്ണമുള്ളതുമായ എലികളിലെ ഉപാപചയ പ്രവർത്തനങ്ങളുടെ മാർക്കറുകൾ മുമ്പ് റിപ്പോർട്ടുചെയ്തതുപോലെ D2R- കളിലെ കുറവുമായി ബന്ധമുണ്ടോ എന്ന് അറിയാൻ ഞങ്ങൾ വിലയിരുത്തി (ഡൺ മറ്റുള്ളവരും., 2012). അമിതവണ്ണമുള്ള എലികൾക്ക് കൊളസ്ട്രോൾ (പി <0.0001), ലെപ്റ്റിൻ (പി <0.0001), ഗ്ലൂക്കോസ് (പി = 0.0002), ഇൻസുലിൻ (പി = 0.001), പ്രതിരോധം അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ഹോമിയോസ്റ്റാറ്റിക് മോഡൽ അസസ്മെന്റ് (ഹോമ-ഐആർ) (പി <0.001) , പക്ഷേ ട്രൈഗ്ലിസറൈഡുകളോ ഫ്രീ ഫാറ്റി ആസിഡുകളോ അല്ല (കണക്കുകൾ S1D - S1J). എന്നിരുന്നാലും, ഈ ഘടകങ്ങളൊന്നും പൊണ്ണത്തടിയുള്ള എലികളിലെ D2R ബന്ധവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിട്ടില്ല (ഡാറ്റ കാണിച്ചിട്ടില്ല).

D1R പോലുള്ള ബൈൻഡിംഗ് (ഉപയോഗിച്ച് ഓട്ടോറാഡിയോഗ്രാഫി വഴി ³H-SCH23390, ഇനി മുതൽ D1R ബൈൻഡിംഗ് എന്ന് വിളിക്കുന്നു) അമിതവണ്ണവും മെലിഞ്ഞ എലികളും തമ്മിൽ വ്യത്യാസമില്ല (p = 0.20; ചിത്രം 2ബി). സ്ട്രൈറ്റൽ ടിഷ്യു പഞ്ചുകളുടെ ഉയർന്ന-പ്രകടനമുള്ള ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി (എച്ച്പി‌എൽ‌സി) വഴി അളക്കുന്ന സ്ട്രൈറ്റൽ ഡി‌എ ഉള്ളടക്കത്തിലും വ്യത്യാസങ്ങളൊന്നുമില്ല (പി = 0.41; ചിത്രം 2ഇ), അല്ലെങ്കിൽ ടൈറോസിൻ ഹൈഡ്രോക്സിലേസ് ഇമ്മ്യൂണോ-ലേബലിംഗ് (പി = 0.64; ചിത്രം 2എഫ്). അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിലെ ബാസൽ ഡിഎയിലെ വ്യത്യാസങ്ങളുടെ ഒന്നിലധികം റിപ്പോർട്ടുകളുടെ വെളിച്ചത്തിൽ (കാർലിൻ മറ്റുള്ളവരും., 2013, ഡേവിസ് മറ്റുള്ളവരും, 2008, വുസെറ്റിക് മറ്റുള്ളവരും., 2012 ഒപ്പം വാങ് മറ്റുള്ളവരും., 2014), നോ-നെറ്റ് ഫ്ലക്സ് മൈക്രോഡയാലിസിസ് ഉപയോഗിച്ച് ഞങ്ങൾ ഈ പോയിന്റ് കൂടുതൽ പര്യവേക്ഷണം ചെയ്തു (പുതിയ എലികൾ, ഓരോ ഗ്രൂപ്പിനും n = 6). എക്സ്ട്രാ സെല്ലുലാർ ഡിഎ (പി = 0.99) അല്ലെങ്കിൽ അതിന്റെ രണ്ട് മെറ്റബോളിറ്റുകളിലൊന്നായ 3,4-ഡൈഹൈഡ്രോക്സിഫെനൈലാസെറ്റിക് ആസിഡ് (ഡോപക്) (പി = 0.85), ഹോമോവാനിലിക് ആസിഡ് (എച്ച്വി‌എ) (പി = 0.68, ചിത്രം എസ് 3), ഈ രീതി ഉപയോഗിച്ച്, ഈ പരീക്ഷണങ്ങളിൽ അമിതവണ്ണം എക്സ്ട്രാ സെല്ലുലാർ ഡി‌എ ടോൺ കുറയ്ക്കുന്നതുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിട്ടില്ലെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു.

പൊണ്ണത്തടിയുള്ള എലികളിൽ ചലനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട സ്‌ട്രാറ്റിയൽ ഫയറിംഗ് തടസ്സപ്പെട്ടു

സ്ട്രൈറ്റൽ ഡി 2 ആർ ബൈൻഡിംഗ് കുറച്ചത് സ്ട്രൈറ്റൽ ന്യൂറോണൽ ഉൽ‌പാദനത്തെ എങ്ങനെ മാറ്റുന്നുവെന്നും അതുവഴി ചലനം കുറയ്ക്കുന്നതിന് കാരണമാകുമെന്നും പരിശോധിക്കാൻ ഞങ്ങൾ വിവോ ഇലക്ട്രോഫിസിയോളജിയിൽ പ്രകടനം നടത്തി. മെലിഞ്ഞതും അമിതവണ്ണമുള്ളതുമായ എലികളുടെ ഡോർസോമെഡിയൽ സ്ട്രിയാറ്റത്തിൽ നിന്ന് ഞങ്ങൾ റെക്കോർഡുചെയ്‌തു (ഓരോ ഗ്രൂപ്പിനും n = 3 എലികൾ, ഹിസ്റ്റോളജി ചിത്രം 3എഫ്). പൊണ്ണത്തടിയുള്ള എലികൾ മൊത്തത്തിൽ കുറച്ചെങ്കിലും, നടപ്പിലാക്കിയ ചലനങ്ങളുടെ വേഗത ഈ ഗ്രൂപ്പുകൾക്കിടയിൽ വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരുന്നില്ല (p = 0.55; ചിത്രം 3A), മെലിഞ്ഞതും അമിതവണ്ണമുള്ളതുമായ എലികൾ തമ്മിലുള്ള ചലനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ഫയറിംഗ് താരതമ്യം ചെയ്യാൻ ഞങ്ങളെ അനുവദിക്കുന്നു. മെലിഞ്ഞതും അമിതവണ്ണമുള്ളതുമായ എലികൾക്കിടയിൽ മെലിഞ്ഞ മൾട്ടി-യൂണിറ്റ് സ്പൈക്കിംഗ് നിരക്കുകൾ വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരുന്നില്ല (മെലിഞ്ഞ, 2.1 ± 0.4 ഹെർട്സ്; പൊണ്ണത്തടി, 2.0 ± 0.7 ഹെർട്സ്; പി = 0.93). എന്നിരുന്നാലും, ചലനം-സജീവമാക്കിയ യൂണിറ്റുകളുടെ വ്യാപനം (ചിത്രം 3ബി) അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിൽ വളരെ കുറവാണ് (പി <0.0001; ചിത്രം 3സി). ഇത് “ചലനം-സജീവമാക്കിയ” യൂണിറ്റുകളുടെ സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ നിർവചനത്തെ ആശ്രയിച്ചിരുന്നില്ല, കാരണം പൊണ്ണത്തടിയുള്ളതും മെലിഞ്ഞതുമായ എലികളിലെ റെക്കോർഡുചെയ്‌ത എല്ലാ യൂണിറ്റുകളുടെയും ശരാശരി പ്രതികരണത്തിൽ ചലനങ്ങളിൽ കുറവുണ്ടായതായി ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു (ANOVA, p <0.0002; ചിത്രം 3D, 3E). സ്ട്രൈറ്റത്തിലെ മൊത്തം സ്പൈക്കിംഗ് നിരക്ക് വ്യത്യാസപ്പെട്ടിട്ടില്ലെന്ന് ഞങ്ങൾ നിഗമനം ചെയ്യുന്നു, പക്ഷേ അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിൽ ചലനത്തിന് ചുറ്റുമുള്ള സ്പൈക്കുകളുടെ ഓർഗനൈസേഷൻ തടസ്സപ്പെട്ടു.

ചിത്രം 3.

സ്‌ട്രിയാറ്റത്തിലെ ചലനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട വെടിവയ്പ്പ് അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിൽ തടസ്സപ്പെട്ടു

(എ) മെലിഞ്ഞതും അമിതവണ്ണമുള്ളതുമായ എലികളിൽ ചലന സംഭവങ്ങൾക്ക് സമാനമായ വേഗത ഉണ്ടായിരുന്നു.

(ബി) സ്ട്രൈറ്റൽ ന്യൂറോണുകളിൽ ചലനം-സജീവമാക്കിയതും പ്രതികരിക്കാത്തതുമായ ഫയറിംഗിന്റെ ഉദാഹരണങ്ങൾ.

(സി) അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിൽ ചലനം-സജീവമാക്കിയ ന്യൂറോണുകളുടെ വ്യാപനം കുറവായിരുന്നു (p = 0.002).

(ഡി) റെക്കോർഡുചെയ്‌ത എല്ലാ ന്യൂറോണുകളുടെയും ശരാശരി ചലനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ഫയറിംഗ്.

(ഇ) ഡയറ്റ് എക്സ്പോഷറിനെ തുടർന്ന് ചലനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ഫയറിംഗ് വളരെ കുറവായിരുന്നു (ഡയറ്റ് × മൂവ്മെന്റ് ഇന്ററാക്ഷൻ, എഫ്_(1,171) = 14.77, പി <0.0002).

(എഫ്) സ്കീമാറ്റിക് (ഇതിൽ നിന്ന് യുക്തമാക്കിയത്) ഫ്രാങ്ക്ലിനും പക്സസോനോസും, 1997) മെലിഞ്ഞതും അമിതവണ്ണമുള്ളതുമായ റെക്കോർഡിംഗ് എലികളിൽ ഇലക്ട്രോഡ് അറേ പ്ലെയ്‌സ്‌മെന്റ് ചിത്രീകരിക്കുന്നു (n = 3 വീതം).

സ്ഥിതിവിവര വിശകലനം. (സി) ഫിഷറിന്റെ കൃത്യമായ പരിശോധന. (ഡി, ഇ) ടു-വേ ആവർത്തിച്ചുള്ള അളവുകൾ ANOVA.

ചിത്ര ഓപ്ഷനുകൾ

അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിലെ ഐ‌എം‌എസ്എൻ put ട്ട്‌പുട്ട് പുന ored സ്ഥാപിച്ച പ്രവർത്തന നിലകളുടെ തടസ്സം

ഐ‌എം‌എസ്‌എൻ‌സിന്റെ output ട്ട്‌പുട്ട് കുറയ്ക്കുന്നത് അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളുടെ ചലനം വർദ്ധിപ്പിക്കുമോയെന്ന് പരിശോധിക്കുന്നതിന്, ഒരു തടസ്സം സൃഷ്ടിക്കുന്ന ജി പ്രകടിപ്പിക്കാൻ ഞങ്ങൾ ഒരു ക്രെ-റീകോംബിനേസ് (ക്രേ) ആശ്രിത തന്ത്രം ഉപയോഗിച്ചു_iഅമിതവണ്ണമുള്ള എലികളുടെ iMSN- കളിൽ ഡിസൈനർ മരുന്നുകൾ (KOR-DREADD) പ്രത്യേകമായി സജീവമാക്കിയ പരിഷ്കരിച്ച കപ്പ ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്റർ ഡിസൈനർ റിസപ്റ്റർ (ചിത്രം 4എ). ക്രീ എക്‌സ്‌പ്രഷൻ സ്‌ട്രാറ്റിയൽ ഐ‌എം‌എസ്‌എൻ‌മാർ‌ക്ക് മാത്രമാണെന്ന് വ്യക്തമാക്കുന്നതിന് അഡെനോസിൻ എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എ-റിസപ്റ്റർ ക്രീ (ആക്‍നും‌ക്സ-ക്രീ) മ mouse സ് ഇമ്യൂണോസ്റ്റെയിനിംഗ് ഉപയോഗിച്ച് മുമ്പ് സാധൂകരിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ടെങ്കിലും (കുയി മറ്റുള്ളവരും., 2013 ഒപ്പം ലെമോസ് മറ്റുള്ളവരും., 2016), സിറ്റു ഹൈബ്രിഡൈസേഷനിൽ ഇരട്ട ഫ്ലൂറസെന്റ് ഉപയോഗിച്ച് ഞങ്ങൾ ഈ വരിയുടെ അധിക മൂല്യനിർണ്ണയം നടത്തി. മിക്കവാറും എല്ലാ ന്യൂറോണുകളും (98.7 എണ്ണപ്പെട്ട ന്യൂറോണുകളിൽ 0.6% ± 1,301%) രണ്ടും പ്രകടിപ്പിച്ചു Cre ഒപ്പം DrD2 mRNA, എന്നാൽ വളരെ കുറച്ച് (1.3% ± 0.6%) പ്രകടിപ്പിക്കുന്നു Cre or DrD2 mRNA, പക്ഷേ രണ്ടും അല്ല, A2A-Cre ലൈൻ വിശ്വസ്തതയോടെ iMSN- കളെയാണ് ലക്ഷ്യമിടുന്നതെന്ന് സ്ഥിരീകരിക്കുന്നു ( ചിത്രം എസ് 4).

ചിത്രം 4.

അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിൽ ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങൾ പുന ored സ്ഥാപിച്ച ഐ.എം.എസ്.എൻസിന്റെ ഡ്രെഡ്-മെഡിയേറ്റഡ് ഇൻഹിബിഷൻ

(എ) KOR-DREADD എക്‌സ്‌പ്രഷന്റെ ഫോട്ടോ, സ്‌കീമാറ്റിക് (ഇതിൽ നിന്ന് രൂപാന്തരപ്പെടുത്തി) ഫ്രാങ്ക്ലിനും പക്സസോനോസും, 1997) A2A-Cre എലികളിലെ എല്ലാ KOR-DREADD ന്റെയും വൈറൽ ഇഞ്ചക്ഷൻ സൈറ്റുകൾ ചിത്രീകരിക്കുന്നു; ഒരു പ്രത്യേക സ്ഥലത്ത് വൈറസ് പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന എലികളുടെ എണ്ണം അതാര്യത സൂചിപ്പിക്കുന്നു.

(ബി) ഡി‌എം‌എസ്‌ഒയുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ സാൽബിയിൽ കുത്തിവയ്ക്കുമ്പോൾ അമിതവണ്ണമുള്ള എലികൾ കൂടുതൽ നീങ്ങി₍₇₎ = 3.056, പി = 0.02).

(സി-ജി) സാൽബി അഡ്മിനിസ്ട്രേഷനുശേഷം, അമിതവണ്ണമുള്ള എലികൾ (സി) ചലനങ്ങളുടെ ആവൃത്തി, (ഡി) ശരാശരി ചലന ദൈർഘ്യം, (ഇ) ചലന വേഗത എന്നിവയിൽ ഡിഎംഎസ്ഒ നൽകുമ്പോൾ താരതമ്യേന കാര്യമായ മാറ്റങ്ങൾ കാണിച്ചില്ല. (എഫ്) സാൽ-ബി അഡ്മിനിസ്ട്രേഷൻ വളർത്തലിന്റെ ആവൃത്തി വർദ്ധിപ്പിച്ചു (ടി₍₇₎ = 3.116, പി = 0.02), പക്ഷേ (ജി) ചമയത്തിന്റെ ആവൃത്തിയിൽ കാര്യമായ മാറ്റം വരുത്തിയില്ല.

(എച്ച്) ഡി‌എം‌എസ്‌ഒയുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ സാൽബിയുമായി കുത്തിവച്ചപ്പോൾ മെലിഞ്ഞ എലികൾ കൂടുതൽ നീങ്ങി₍₉₎ = 3.3, പി = 0.01).

(I) KOR-DREADD (p = 0.77) പ്രകടിപ്പിക്കാത്ത കാട്ടുതീ-എലികളുടെ ചലനത്തെ സാൽ‌ബി ബാധിച്ചില്ല.

സ്ഥിതിവിവര വിശകലനം. (ബി-ഐ) ജോടിയാക്കിയ വിദ്യാർത്ഥികളുടെ ടി ടെസ്റ്റുകൾ; വ്യക്തിഗത എലികളുമായി അർത്ഥമാക്കുന്നത്; n = 6-10 എലികൾ / ഗ്രൂപ്പ്.

ചിത്ര ഓപ്ഷനുകൾ

KOR-DREADD അഗോണിസ്റ്റ് സാൽ‌വിനോറിൻ-ബി (സാൽ‌ബി) കുത്തിവയ്ക്കുന്നത് KOR-DREADD (p = 0.02) പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന അമിതവണ്ണമുള്ള എലികൾ സഞ്ചരിക്കുന്ന ദൂരം വർദ്ധിപ്പിച്ചു; ചിത്രം 4ബി). സാൽ‌ബിയും വളർത്തുന്നതിന്റെ ആവൃത്തി വർദ്ധിപ്പിച്ചു (p = 0.02; ചിത്രം 4എഫ്) ആവൃത്തിയിലെ വർദ്ധനവിന് കാരണമാകുന്നു (ടി₍₇₎ = 1.64, പി = 0.12), പക്ഷേ ചലനത്തിന്റെ ദൈർഘ്യമോ വേഗതയോ അല്ല (ചിത്രം 4സി –4 ഇ). സാൽബിയുടെ കുത്തിവയ്പ്പുകൾ മെലിഞ്ഞ എലികളിലെ ചലനവും വർദ്ധിപ്പിച്ചു (p = 0.01; ചിത്രം 4H), പക്ഷേ KOR-DREADD പ്രകടിപ്പിക്കാത്ത കാട്ടുതീ-എലികളിലല്ല (p = 0.73; ചിത്രം 4ഞാൻ). മെലിഞ്ഞതും അമിതവണ്ണമുള്ളതുമായ മൃഗങ്ങളുടെ ചലന നിലവാരം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് ഐ‌എം‌എസ്‌എൻ‌സിന്റെ output ട്ട്‌പുട്ട് കുറയ്ക്കുന്നത് മതിയെന്ന് ഞങ്ങൾ നിഗമനം ചെയ്യുന്നു.

കുറഞ്ഞ D2R ലെവലുകൾ ഭാവിയിലെ ശരീരഭാരം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് മൃഗങ്ങളെ മുൻ‌കൂട്ടി കാണരുത്

അവസാനമായി, D2R സിഗ്നലിംഗിൽ മുമ്പുണ്ടായിരുന്ന വ്യത്യാസങ്ങൾ വ്യക്തിഗത എലികളെ ഭക്ഷണ-പ്രേരണയുള്ള അമിതവണ്ണത്തിന് കാരണമാകുമോ എന്ന് ഞങ്ങൾ പരിശോധിച്ചു. ഈ ചോദ്യത്തിന്, ഞങ്ങൾ മൈക്രോ-പോസിട്രോൺ എമിഷൻ ടോമോഗ്രഫി (മൈക്രോ-പിഇടി) ഉപയോഗിച്ചു ¹⁸കൊഴുപ്പ് കൂടിയ ഡയറ്റ് എക്‌സ്‌പോഷറിന് മുമ്പ് ബേസ്‌ലൈൻ D2R ലഭ്യത നിർണ്ണയിക്കാൻ എഫ്-ഫാലിപ്രൈഡ് (ചിത്രം 5എ). മറ്റുള്ളവർ‌ കാണിച്ചതുപോലെ എലികൾ‌ക്കിടയിലുള്ള D2R ബൈൻ‌ഡിംഗ് സാധ്യതയിൽ‌ ഉയർന്ന അളവിലുള്ള വ്യത്യാസങ്ങൾ‌ ഞങ്ങൾ‌ ശ്രദ്ധിച്ചു (കോൺസ്റ്റാന്റിനെസ്കു മറ്റുള്ളവരും, 2011). ഡി 2 ആർ ലഭ്യതയിലെ വ്യക്തിഗത വ്യത്യാസങ്ങൾ ഓപ്പൺ ഫീൽഡിലെ ചലനവുമായി ക്രിയാത്മകമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു (p = 0.045; ചിത്രം 5ബി), ചലനത്തിലെ ഡി 2 ആർ‌മാരുടെ പങ്ക് അനുസരിച്ച്. മൈക്രോ-പിഇടി സ്കാനിംഗിനെത്തുടർന്ന്, കൊഴുപ്പ് കൂടിയ ഭക്ഷണത്തിൽ 18 ആഴ്ച മൃഗങ്ങളെ പരിപാലിച്ചു, കുറഞ്ഞ ഡി 2 ആർ ഉള്ള എലികൾ ഭക്ഷണത്തിലൂടെ ശരീരഭാരം വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ സാധ്യതയുണ്ടോ എന്ന് പരിശോധിക്കുന്നു. അതിശയകരമെന്നു പറയട്ടെ, a എന്നതിലേക്കുള്ള ഒരു പ്രവണത ഞങ്ങൾ കണ്ടെത്തി നല്ല ഈ പരീക്ഷണത്തിലുടനീളം പ്രാരംഭ D2R ലഭ്യതയും ശരീരഭാരവും തമ്മിലുള്ള ബന്ധം (p = 0.10; ചിത്രം 5സി). ഈ പരസ്പരബന്ധം കാര്യമായിരുന്നില്ലെങ്കിലും, കുറഞ്ഞ D2R ലഭ്യത അല്ലെങ്കിൽ കുറഞ്ഞ ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വം മൃഗങ്ങളെ ശരീരഭാരം വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ കൂടുതൽ പ്രേരിപ്പിക്കുന്നു എന്ന അനുമാനത്തിനെതിരെ ഇത് വാദിക്കുന്നു. ബാസൽ ഓപ്പൺ-ഫീൽഡ് പ്രവർത്തനമോ, മുഴുവൻ പരീക്ഷണത്തിലുടനീളമുള്ള ഓപ്പൺ-ഫീൽഡ് പ്രവർത്തനമോ ശരീരഭാരവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിട്ടില്ല എന്ന ഞങ്ങളുടെ കണ്ടെത്തലുകളുമായി ഇത് പൊരുത്തപ്പെടുന്നു (ചിത്രം 1F - 1K).

ചിത്രം 5.

ബേസൽ D2R ബൈൻഡിംഗ് ഭാവിയിലെ ശരീരഭാരം പ്രവചിച്ചിട്ടില്ല

(എ) ഉദാഹരണം സ്ട്രൈറ്റത്തിലും സെറിബെല്ലത്തിലും ഉപയോഗിക്കുന്ന D2R മൈക്രോ-പിഇടി ലഭ്യത വളവുകൾ ¹⁸എഫ്-ഫാലിപ്രൈഡ്.

(ബി, സി) (ബി) ബാസൽ ഓപ്പൺ ഫീൽഡ് ചലനവുമായി (r = 0.56, പി = 0.045), (സി) പരസ്പര ബന്ധമുള്ള ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഭക്ഷണ-പ്രേരണ ഭാരം (r = 0.50, പി) = 0.10, n = 12-14 എലികൾ).

(ഡി) എലികളിലെ പ്രതിനിധി D2R ഓട്ടോറാഡിയോഗ്രഫി കേടുകൂടാതെ D2R- കളും (മുകളിൽ) iMSN- ഉംDrD2-കോ എലികൾ (ചുവടെ).

(ഇ, എഫ്) (ഇ) iMSN-DrD2-കോ എലികൾ ഒരു തുറന്ന വയലിൽ ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങൾ കുറച്ചിരുന്നു (ടി₍₈₎ ഹോം കേജ് റണ്ണിംഗ് വീലുകളിൽ = 2.99, പി = 0.02) (എഫ്) (പി = 0.01, എൻ = 5–19 എലികൾ / ഗ്രൂപ്പ്).

(ജി) iMSN-DrD2-കോ എലികളും DrD2-ഫ്ലോക്സഡ് ലിറ്റർമേറ്റ് നിയന്ത്രണങ്ങൾ ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഭക്ഷണത്തിൽ (എഫ്_(5,70) = 1.417, പി = 0.23; n = 6-10 എലികൾ / ഗ്രൂപ്പ്).

(H-J) (H) iMSN-D0.60R-KO തമ്മിലുള്ള സാധാരണ energy ർജ്ജ ഉപഭോഗം (p = 0.47), (I) energy ർജ്ജ ചെലവ് (p = 0.17), അല്ലെങ്കിൽ (J) RER (p = 2) എന്നിവയിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസമില്ല. എലികളും ലിറ്റർമേറ്റ് നിയന്ത്രണങ്ങളും.

സ്ഥിതിവിവര വിശകലനം. (ബി, സി) ലീനിയർ റിഗ്രഷൻ; (ഇ, എഫ്, എച്ച്-ജെ) ജോഡിയാക്കാത്ത വിദ്യാർത്ഥിയുടെ ടി ടെസ്റ്റ്; (ജി) ടു-വേ ആവർത്തിച്ചുള്ള അളവുകൾ ANOVA, ^*p <0.05.

ചിത്ര ഓപ്ഷനുകൾ

ആക്റ്റിവിറ്റി ലെവലിൽ മുമ്പുണ്ടായിരുന്ന വ്യത്യാസങ്ങളും ശരീരഭാരവും തമ്മിലുള്ള ബന്ധം കൂടുതൽ പര്യവേക്ഷണം ചെയ്യുന്നതിന്, ടാർഗെറ്റുചെയ്‌ത ഇല്ലാതാക്കലിനൊപ്പം ഒരു ജനിതക മൗസ് മോഡൽ ഞങ്ങൾ പ്രയോജനപ്പെടുത്തി. DrD2 iMSN- കളിൽ നിന്നുള്ള ജീൻ (iMSN-DrD2-KO) എന്നാൽ മറ്റ് സെൽ തരങ്ങളിൽ സംരക്ഷിത പദപ്രയോഗം ( ഡോബ്സ് മറ്റുള്ളവരും., 2016 ഒപ്പം ലെമോസ് മറ്റുള്ളവരും., 2016). മുമ്പ് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തതുപോലെ, iMSN-DrD2-KO എലികൾ‌ ഒരു തുറന്ന ഫീൽ‌ഡിലെ ലിറ്റർ‌മേറ്റ് നിയന്ത്രണങ്ങളേക്കാൾ‌ കുറവാണ് (p = 0.02; ചിത്രം 5ഇ) ഹോം കേജ് റണ്ണിംഗ് വീലുകളിലും (പി = 0.01; ചിത്രം 5എഫ്). മുകളിലുള്ള പരീക്ഷണങ്ങൾക്ക് അനുസൃതമായി, iMSN-DrD2കൊഴുപ്പ് കൂടിയ ഭക്ഷണക്രമത്തിൽ ഏർപ്പെടുമ്പോൾ -കോ എലികൾക്ക് അവരുടെ ലിറ്റർമേറ്റ് നിയന്ത്രണങ്ങളേക്കാൾ കൂടുതൽ ഭാരം വർദ്ധിച്ചിട്ടില്ല (p = 0.23; ചിത്രം 5ജി). അവയുടെ energy ർജ്ജ ഉപയോഗം കൂടുതൽ സൂക്ഷ്മമായി പരിശോധിക്കുന്നതിന്, iMSN- നെ താരതമ്യം ചെയ്യാൻ ഞങ്ങൾ പരോക്ഷ കലോറിമെട്രി പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തി.DrD2ലിറ്റർമേറ്റ് നിയന്ത്രണങ്ങളിലേക്ക് എലികൾ. Energy ർജ്ജ ഉപഭോഗം (p = 0.60), energy ർജ്ജ ചെലവ് (p = 0.47), അല്ലെങ്കിൽ ശ്വസന വിനിമയ അനുപാതം (RER) (CO അനുപാതം) എന്നിവയിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസങ്ങൾ ഞങ്ങൾ കണ്ടെത്തിയില്ല₂ ഒ₂ ഉപഭോഗം [VCO₂/ വി.ഒ.₂], p = 0.17) iMSN-Drd2-KO എലികൾക്കും അവയുടെ ലിറ്റർമേറ്റ് നിയന്ത്രണങ്ങൾക്കുമിടയിൽ, IMSN-Drd2-KO എലികളുടെ ചലനം കുറയുന്നത് energy ർജ്ജ ഉപയോഗത്തിലെ മാറ്റങ്ങളിലേക്ക് വിവർത്തനം ചെയ്തിട്ടില്ലെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു (ചിത്രം 5H - 5J). അവസാനമായി, സ്‌ട്രാറ്റിയൽ D2R- ൽ (നമ്മുടെ അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിൽ കാണുന്നവ പോലുള്ളവ) ചെറിയ കുറവുകൾ ചലനത്തെയും ശരീരഭാരത്തെയും നിയന്ത്രിക്കാൻ എത്രത്തോളം കഴിയുമെന്ന് ഞങ്ങൾ അന്വേഷിച്ചു. ഇത് ചെയ്യുന്നതിന്, ഞങ്ങൾ ഒരു മൗസ് ലൈൻ ഉപയോഗിച്ചു, അത് സ്ട്രിയാറ്റലിൽ 30% –40% കുറയുന്നു DrD2 mRNA (iMSN-Drd2-Het) ( ലെമോസ് മറ്റുള്ളവരും., 2016). ഈ എലികൾ കുറച്ച ചലനം പ്രകടിപ്പിച്ചു, മോട്ടോർ കമ്മി ഉണ്ടാക്കാൻ ഡി 2 ആർ ഭാഗികമായി തട്ടിയാൽ മതിയെന്ന് തെളിയിക്കുന്നു (p = 0.04; ചിത്രം എസ് 5എ). IMSN-Drd2-KO എലികൾക്ക് സമാനമായി, iMSN-Drd2-het എലികൾ കൊഴുപ്പ് കൂടിയ ഭക്ഷണത്തിലൂടെ ശരീരഭാരം വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ കൂടുതൽ സാധ്യതയില്ല (p = 0.89; ചിത്രം എസ് 5ബി). ചലനത്തെ മാറ്റാൻ സ്‌ട്രാറ്റിയൽ D2R- കളിലെ മാറ്റങ്ങൾ മതിയെന്ന് ഞങ്ങൾ നിഗമനം ചെയ്യുന്നു, പക്ഷേ കലോറിക് ബാലൻസോ എലികളിലെ ശരീരഭാരമോ അല്ല.

സംവാദം

അമിതവണ്ണം ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, ഇത് ശരീരഭാരം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് കാരണമാകുമെന്ന് പലപ്പോഴും വിശ്വസിക്കപ്പെടുന്നു. കൂടാതെ, അമിതവണ്ണമുള്ള ആളുകളിൽ പ്രവർത്തനക്ഷമത കുറയുന്നതിന് വർദ്ധിച്ച അഡിപോസിറ്റി അനുമാനിക്കപ്പെടുന്നു (എകെകാക്കിസും ലിൻഡും, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് ഒപ്പം വെസ്റ്റർ‌ടെർ‌പ്, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്), ഈ ആശയം നേരിട്ട് പരീക്ഷിക്കാൻ പ്രയാസമാണെങ്കിലും. രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, ഭക്ഷണത്തിലൂടെ ശരീരഭാരം കുറയ്ക്കുന്ന ആളുകൾ (ഡി ബോയർ മറ്റുള്ളവരും, 1986, ഡി ഗ്രൂട്ട് മറ്റുള്ളവരും., 1989, മാർട്ടിൻ മറ്റുള്ളവരും, 2007 ഒപ്പം റെഡ്മാൻ മറ്റുള്ളവരും, 2009) അല്ലെങ്കിൽ ബരിയാട്രിക് ശസ്ത്രക്രിയ (ബെർഗ്ലിൻഡ് മറ്റുള്ളവരും, 2015, ബെർഗ്ലിൻഡ് മറ്റുള്ളവരും, 2016, ബോണ്ട് മറ്റുള്ളവരും., 2010 ഒപ്പം റാമിറെസ്-മാരെറോ മറ്റുള്ളവരും, 2014) അവരുടെ പ്രവർത്തന നില വർദ്ധിപ്പിക്കരുത്, അഡിപ്പോസിറ്റിയുടെ ഭാരം അവരുടെ നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിന് കാരണമാകുന്നു. സ്ട്രൈറ്റ് ഡി‌എ ട്രാൻസ്മിഷനിലെ കുറവുകളിലൂടെ ഭക്ഷണത്തിലൂടെയുള്ള അമിതവണ്ണം ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിന് കാരണമാകുമെന്ന അനുമാനത്തെ ഞങ്ങൾ ഇവിടെ അന്വേഷിച്ചു. മുമ്പത്തെ ജോലിയുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്ന, വിട്ടുമാറാത്ത ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഭക്ഷണത്തിൽ സ്ട്രാറ്ററ്റൽ D2R ബൈൻഡിംഗ് കുറയുന്നതായി ഞങ്ങൾ കണ്ടെത്തി (ഹജ്നാൽ മറ്റുള്ളവരും, 2008, ഹുവാങ് മറ്റുള്ളവരും., 2006, നാരായണസ്വാമി തുടങ്ങിയവർ, 2013, വാൻ ഡി ഗീസെൻ മറ്റുള്ളവരും, 2012 ഒപ്പം വാൻ ഡി ഗീസെൻ മറ്റുള്ളവരും, 2013). അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിലെ സ്ട്രൈറ്റൽ ന്യൂറോണുകളുടെ മോട്ടോർ സംബന്ധമായ വെടിവയ്പ്പിലെ കുറവും ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു. ഒരു ജി ഉപയോഗിച്ച് iMSN- കൾ തടയുന്നു_iബാസൽ ഗാംഗ്ലിയ output ട്ട്പുട്ട് പുന is സ്ഥാപിക്കുമ്പോൾ അമിത അഡിപോസിറ്റി ഉള്ള എലികൾക്ക് സാധാരണഗതിയിൽ നീങ്ങാൻ കഴിയുമെന്ന് കാണിക്കുന്ന അമിതവണ്ണമുള്ള എലികളിലെ പ്രവർത്തനം DREADD രക്ഷപ്പെടുത്തി. എന്നിരുന്നാലും, അതിശയകരമെന്നു പറയട്ടെ, ബേസൽ D2R അളവുകളോ ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങളോ ശരീരഭാരവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിട്ടില്ല, ഒന്നിലധികം പരീക്ഷണങ്ങളിൽ ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ച ഒരു പോയിന്റ്. ഇത് എലികളിലെ പഠനത്തിന് വിരുദ്ധമാണ്, ഇത് സ്പീഷിസുകളെയോ പരീക്ഷണാത്മക വ്യത്യാസങ്ങളെയോ പ്രതിഫലിപ്പിച്ചേക്കാം (മൈക്കിൾ‌ഡെസ് മറ്റുള്ളവരും., 2012). D2R- കളിലെ കുറവും തുടർന്നുള്ള ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വവും അമിതവണ്ണത്തിന്റെ അനന്തരഫലങ്ങളാണെന്ന് ഞങ്ങൾ നിഗമനം ചെയ്യുന്നു, പക്ഷേ എലികളിലെ കൂടുതൽ ശരീരഭാരവുമായി ഇത് ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കണമെന്നില്ല.

മാറ്റം വരുത്തിയ D2R സിഗ്നലിംഗും അമിതവണ്ണവും തമ്മിലുള്ള ഒരു ബന്ധം മനുഷ്യരിൽ ആദ്യമായി തിരിച്ചറിഞ്ഞു, തുടക്കത്തിൽ മറ്റുള്ളവർ ഇത് ആവർത്തിച്ചു (ഡി വീജർ മറ്റുള്ളവരും, 2011, കെസ്സ്ലർ മറ്റുള്ളവരും, 2014, വോൾക്കോവ് മറ്റുള്ളവരും, 2008 ഒപ്പം വാങ് മറ്റുള്ളവരും., 2001). എന്നിരുന്നാലും, ഏറ്റവും പുതിയ സൃഷ്ടികൾ ഈ കണ്ടെത്തലിനെ ചോദ്യം ചെയ്യുന്നു (കാരവാജിയോ മറ്റുള്ളവരും, 2015, കോസ്ഗ്രോവ് മറ്റുള്ളവരും, 2015, ഡൺ മറ്റുള്ളവരും., 2012, ഗുവോ മറ്റുള്ളവരും., 2014, കാൾ‌സൺ മറ്റുള്ളവരും., 2015, കാൾ‌സൺ മറ്റുള്ളവരും., 2016, സ്റ്റീൽ മറ്റുള്ളവരും., 2010 ഒപ്പം ടുവോമെൻ മറ്റുള്ളവരും, 2015). ക്ലിനിക്കൽ പഠനങ്ങളിൽ കാണപ്പെടുന്ന പൊരുത്തക്കേടുകൾ മനസിലാക്കാൻ കൂടുതൽ ഗവേഷണം ആവശ്യമാണെങ്കിലും, ക്ലിനിക്കൽ പഠനത്തിനും പി‌ഇടി ഇമേജിംഗിനും അന്തർലീനമായ സങ്കീർണതകൾ അവ പ്രതിഫലിപ്പിച്ചേക്കാം. ഉദാഹരണത്തിന്, പല പഠനങ്ങളിലും ഉപയോഗിക്കുന്ന റേഡിയോ-ലിഗാണ്ടായ റാക്ലോപ്രൈഡ് എൻ‌ഡോജെനസ് ഡി‌എ വഴി സ്ഥാനഭ്രഷ്ടനാക്കാം, അതിനാൽ ബേസൽ ഡി‌എ ടോണിലെ വ്യത്യാസങ്ങളാൽ ബൈൻഡിംഗിനെ സ്വാധീനിക്കാൻ കഴിയും. (ഹോർസ്‌റ്റ്മാൻ മറ്റുള്ളവരും, 2015). കൂടാതെ, D2R ലെവലും അമിതവണ്ണവും തമ്മിലുള്ള ബന്ധം രേഖീയമല്ലാത്തതാകാം, അതായത് വ്യത്യസ്ത അളവിലുള്ള അമിതവണ്ണമുള്ള രോഗികളിൽ D2R- കളിലെ മാറ്റങ്ങൾ വ്യത്യസ്തമായി സംഭവിക്കാം (ഹോർസ്‌റ്റ്മാൻ മറ്റുള്ളവരും, 2015). അവസാനമായി, ഉറക്കത്തിന്റെ ദൈർഘ്യം പോലുള്ള ഘടകങ്ങൾ (വിയേഴ്സ് മറ്റുള്ളവരും., 2016) കഫീൻ കഴിക്കൽ (വോൾക്കോവ് മറ്റുള്ളവരും, 2015) D2R ബൈൻഡിംഗിനെയും ബാധിച്ചേക്കാം, മാത്രമല്ല മിക്ക ക്ലിനിക്കൽ പഠനങ്ങളിലും റിപ്പോർട്ടുചെയ്യുകയോ നിയന്ത്രിക്കുകയോ ചെയ്യുന്നില്ല. മൃഗങ്ങളുടെ പഠനങ്ങളിൽ ഈ വ്യതിയാന സ്രോതസ്സുകളെ ലഘൂകരിക്കാനാകും, ഇത് D2R mRNA (മാത്തസ് മറ്റുള്ളവരും., 2010 ഒപ്പം ഴാങ് മറ്റുള്ളവരും., 2015), പ്രോട്ടീൻ (ആഡംസ് മറ്റുള്ളവരും, 2015 ഒപ്പം ജോൺസണും കെന്നിയും, 2010), റിസപ്റ്റർ ബൈൻഡിംഗ് (ഹജ്നാൽ മറ്റുള്ളവരും, 2008, ഹുവാങ് മറ്റുള്ളവരും., 2006, നാരായണസ്വാമി തുടങ്ങിയവർ, 2013, വാൻ ഡി ഗീസെൻ മറ്റുള്ളവരും, 2012 ഒപ്പം വാൻ ഡി ഗീസെൻ മറ്റുള്ളവരും, 2013) പൊണ്ണത്തടിയുള്ള എലിയിൽ. ഡി‌എ സിഗ്നലിംഗിന്റെ മറ്റ് വശങ്ങൾ പൊണ്ണത്തടിയുള്ള എലികളിൽ മാറ്റമില്ലാതെ തുടരുന്നുവെന്ന് റിപ്പോർട്ടുചെയ്തുകൊണ്ട് ഞങ്ങളുടെ കൃതി ഈ സാഹിത്യസംഘത്തെ വിപുലീകരിക്കുന്നു, D2R- കളിൽ കുറവുണ്ടെങ്കിൽ പോലും. കൂടാതെ, D2R ബൈൻഡിംഗിൽ ഞങ്ങളുടെ നിരീക്ഷിച്ച കുറവ് കണക്കിലെടുക്കുമ്പോൾ ³എച്ച്-സ്പൈപെറോൺ, പക്ഷേ മൊത്തം D2R പ്രോട്ടീനിൽ മാറ്റമില്ല DrD2 mRNA, D2R- ൽ വരുത്തിയ മാറ്റങ്ങളിൽ റിസപ്റ്റർ ആന്തരികവൽക്കരണം പോലുള്ള വിവർത്തനാനന്തര മാറ്റങ്ങൾ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കാമെന്ന് ഞങ്ങൾ വിശ്വസിക്കുന്നു. അമിതവണ്ണത്തിലെ ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങൾ കുറയ്ക്കുന്നതിന് D2R ബൈൻഡിംഗ് മതിയെന്ന് ഞങ്ങളുടെ ഡാറ്റ സൂചിപ്പിക്കുമെങ്കിലും, ജനിതകവും പരിസ്ഥിതിയും ഉൾപ്പെടെ നിരവധി ഘടകങ്ങളാൽ ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങൾ സ്വാധീനിക്കപ്പെടുന്നു. ( ബ man മാൻ മറ്റുള്ളവരും., 2012). അമിതവണ്ണത്തിലെ ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ന്യൂറോളജിക്കൽ മാറ്റം മാത്രമാണ് D2R- കൾ എന്ന് ഞങ്ങൾ വിശ്വസിക്കുന്നു. ഉദാഹരണത്തിന്, ഗ്രെലിൻ, ലെപ്റ്റിൻ, ഇൻസുലിൻ തുടങ്ങിയ ഹോർമോണുകളുടെ മാറ്റങ്ങൾ ഡോപാമിനേർജിക് ന്യൂറോണുകളിൽ പ്രവർത്തിക്കുകയും പ്രവർത്തനത്തെ സ്വാധീനിക്കുകയും ചെയ്യാം (മുറെ തുടങ്ങിയവർ, 2014). അവസാനമായി, D1R- കളിലെ മാറ്റങ്ങൾ ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചില്ലെങ്കിലും, ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങളെയും സ്വാധീനിച്ചേക്കാവുന്ന നേരിട്ടുള്ള പാത്ത്വേ ന്യൂറോണുകളുടെ ന്യൂറോണൽ ഫയറിംഗിലെ മാറ്റങ്ങൾ ഞങ്ങൾക്ക് തള്ളിക്കളയാൻ കഴിയില്ല.

D2R ലഭ്യതയിലെ വ്യത്യാസം ശരീരഭാരം വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ വ്യക്തികളെ പ്രേരിപ്പിക്കുന്നുണ്ടോ എന്ന് വ്യക്തമല്ല. മനുഷ്യരോടൊപ്പം DrD2 Taq1A അല്ലീൽ‌ D2R ലഭ്യത കുറയ്‌ക്കുകയും അമിതവണ്ണത്തിന്റെ അപകടസാധ്യത വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്‌തു ( ബ്ലം മറ്റുള്ളവരും., 1996, കാർപെന്റർ മറ്റുള്ളവരും, 2013, നോബിൾ മറ്റുള്ളവർ, 1991, സ്റ്റൈസ് മറ്റുള്ളവരും, 2008 ഒപ്പം തോംസൺ മറ്റുള്ളവരും., 1997). കൂടാതെ, ആഗോളതലത്തിൽ D2R- കൾ ഇല്ലാതാക്കുന്ന എലികൾ കൊഴുപ്പ് കൂടിയ ഭക്ഷണത്തിൽ കൂടുതൽ ഭാരം വർദ്ധിപ്പിച്ചു, ഇത് ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിന് കാരണമായി (ബീലർ മറ്റുള്ളവരും., 2015). ഇതിനു വിപരീതമായി, സ്‌ട്രാറ്റിയൽ D2R ലെ വ്യക്തിഗത വ്യതിയാനം (സ്വാഭാവികമോ ജനിതകമോ ആയത്) ഞങ്ങളുടെ പഠനത്തിലെ പ്രവർത്തന നിലകളുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, പക്ഷേ ശരീരഭാരവുമായി ബന്ധമില്ല. ഞങ്ങളുടെ പഠനത്തിലെ ഒരു പ്രധാന വ്യത്യാസം ഞങ്ങളുടെ ജനിതക മാതൃക ഐ‌എം‌എസ്‌എൻ‌മാരിൽ‌ നിന്നും മാത്രം ഡി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്ആർ‌ നീക്കംചെയ്‌തു എന്നതാണ്. കൂടാതെ, ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്നതും energy ർജ്ജച്ചെലവും ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം കണക്കാക്കിയാൽ ഈ ന്യൂറോണുകളിൽ D2R- കൾ കൈകാര്യം ചെയ്യുന്നത് energy ർജ്ജ ബാലൻസിൽ മാറ്റം വരുത്തുന്നില്ലെന്ന് കണ്ടെത്തി. അതുപോലെ, ആഗോള D2R പ്രവർത്തനവും balance ർജ്ജ ബാലൻസും തമ്മിലുള്ള ബന്ധം വ്യക്തമാക്കുന്ന പഠനങ്ങൾ മറ്റ് സെൽ തരങ്ങളിൽ D2R- കളിലെ ഫലങ്ങൾ നിരീക്ഷിക്കുന്നുണ്ടാകാം. ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വം അമിതവണ്ണത്തിന്റെ അനന്തരഫലമാണെന്ന നിഗമനത്തെ ഞങ്ങളുടെ പരീക്ഷണങ്ങൾ പിന്തുണയ്ക്കുന്നു, പക്ഷേ ശരീരഭാരത്തിൽ മാറ്റങ്ങൾ വരുത്താൻ അത് പര്യാപ്തമല്ല.

ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങൾ ഹൃദയാരോഗ്യത്തിലെ മെച്ചപ്പെടുത്തലുകളുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നുവെന്നും മറ്റ് പല വിട്ടുമാറാത്ത രോഗങ്ങൾക്കുള്ള അപകടസാധ്യത കുറയുന്നുവെന്നും വർദ്ധിച്ചുവരുന്ന തെളിവുകൾ ഉണ്ടായിരുന്നിട്ടും, അമിതവണ്ണമുള്ള വ്യക്തികളിൽ ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങൾ കുറവാണ്.എകെകാക്കിസ് മറ്റുള്ളവരും., 2016). ശാരീരിക പ്രവർത്തന നില വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് ഫലപ്രദമായ ഇടപെടലുകളുടെ അഭാവം അമിതവണ്ണമുള്ള വ്യക്തികളിൽ ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തിന് അടിസ്ഥാനമായ സെല്ലുലാർ, മോളിക്യുലർ മെക്കാനിസങ്ങളെക്കുറിച്ചുള്ള ഗ്രാഹ്യത്തിന്റെ അഭാവത്തിൽ പ്രതിഫലിക്കുന്നു. ഇവിടെ, ശാരീരിക നിഷ്‌ക്രിയത്വത്തെ ബാസൽ ഗാംഗ്ലിയ പ്രവർത്തനത്തിലെ മാറ്റങ്ങളുമായി ഞങ്ങൾ ബന്ധിപ്പിക്കുന്നു, അമിതവണ്ണമുള്ള വ്യക്തികളിൽ ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങളുടെ അഭാവത്തിന് ഒരു ജൈവിക വിശദീകരണം നൽകുന്നു.

പരീക്ഷണാത്മക നടപടികൾ

വിഷയങ്ങളും ഭക്ഷണക്രമങ്ങളും

എല്ലാ പഠനങ്ങളിലും, എലികളെ വ്യക്തിഗതമായി സ്റ്റാൻഡേർഡ് സാഹചര്യങ്ങളിൽ (12-മണിക്കൂർ പ്രകാശം / ഇരുണ്ട ചക്രം, 21–22 ° C) പാർപ്പിച്ചിരുന്നു, ഭക്ഷണത്തിലേക്കും വെള്ളത്തിലേക്കും പരസ്യമായി പ്രവേശനം ഉണ്ടായിരുന്നു. എലികൾക്ക് സ്റ്റാൻഡേർഡ് ച ow ഡയറ്റ് (5001 എലിശല്യം ഡയറ്റ്; പ്രോട്ടീനിൽ നിന്ന് ലഭിക്കുന്ന 3.00% with ർജ്ജം, 29 കിലോ കലോറി / ഗ്രാം, കൊഴുപ്പിൽ നിന്ന് 13%, കാർബോഹൈഡ്രേറ്റിൽ നിന്ന് 56%, ലാബ് ഡയറ്റ്) അല്ലെങ്കിൽ ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഉള്ള ഭക്ഷണം (D12492; 5.24 കിലോ കലോറി / ഗ്രാം പ്രോട്ടീനിൽ നിന്ന് ലഭിക്കുന്ന 20% energy ർജ്ജം, കൊഴുപ്പിൽ നിന്ന് 60%, കാർബോഹൈഡ്രേറ്റിൽ നിന്ന് 20%; റിസർച്ച് ഡയറ്റുകൾ). പ്രമേഹം, ദഹനം, വൃക്കരോഗങ്ങൾ എന്നിവ സംബന്ധിച്ച ദേശീയ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ടിന്റെ അനിമൽ കെയർ ആന്റ് യൂസ് കമ്മിറ്റിയുടെ മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുസരിച്ചാണ് എല്ലാ നടപടിക്രമങ്ങളും നടത്തിയത്.

ട്രാൻസ്ജെനിക് സോപാധിക നോക്കൗട്ട് iMSN-Drd2-അഡെനോസിൻ എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എ റിസപ്റ്റർ ജീനിന്റെ റെഗുലേറ്ററി ഘടകങ്ങളാൽ നയിക്കപ്പെടുന്ന ക്രെയെ പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന എലികളെ മറികടന്നാണ് കെ‌ഒ എലികൾ സൃഷ്ടിച്ചത് (Adora2a) (B6.FVB (Cg) -Tg (Adora2a-Cre) KG139Gsat / Mmucd; GENSAT; 036158-UCD) DrD2 നൾ അല്ലീലുകൾ B6.129S4 (FVB) -DrD2^{tm1.1Mrub / J.}, JAX020631 (ബെല്ലോ മറ്റുള്ളവരും., 2011).

ശരീര ഘടനയും Energy ർജ്ജ ചെലവ് കണക്കുകൂട്ടലുകളും

മറ്റെല്ലാ ആഴ്ചയും ഉപയോഗിച്ച് ശരീരഘടന അളക്കുന്നു ¹H-NMR സ്പെക്ട്രോസ്കോപ്പി (EchoMRI-100H; എക്കോ മെഡിക്കൽ സിസ്റ്റംസ്). എനർജി ബാലൻസ് കണക്കുകൂട്ടൽ ഉപയോഗിച്ചാണ് energy ർജ്ജ ചെലവ് നിർണ്ണയിക്കുന്നത് (ഗുവോ മറ്റുള്ളവരും., 2009 ഒപ്പം റാവുസിൻ തുടങ്ങിയവർ, 2013):

എനർജി എക്സ്പെൻ‌ചർ‌ = മെറ്റബോളിസബിൾ‌നെർ‌ജിൻ‌ടേക്ക്‌ (at ഫാറ്റ്മാസ് + at ഫാറ്റ്-ഫ്രീമാസ്).

മാത്ത്ജാക്സ് ഓണാക്കുക

ഓപ്പൺ-ഫീൽഡ് പ്രവർത്തനം

ഫെനോടൈപ്പർ കൂടുകളിൽ (30 × 30 സെ.

ഹോം കേജ് വീൽ റണ്ണിംഗ്

കുറഞ്ഞ പ്രൊഫൈലുള്ള വയർലെസ് റണ്ണിംഗ് വീലുകൾ (മെഡ് അസോസിയേറ്റ്സ്) എലികളുടെ ഹോം കൂടുകളിൽ ഓരോ 72 ആഴ്ചയിലും 3 മണിക്കൂർ വീതം (ഡയറ്റ്-ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് അമിതവണ്ണ പരീക്ഷണങ്ങൾ) അല്ലെങ്കിൽ തുടർച്ചയായി (iMSN-DrD2-കോ പരീക്ഷണങ്ങൾ).

രക്ത നടപടികൾ

ബലിയർപ്പിച്ച മൃഗങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള ഒക്കുലാർ സിര രക്തം ഒരു 4-hr ഉപവാസത്തിനുശേഷം സെറം മെറ്റബോളിറ്റുകളുടെയും ഹോർമോണുകളുടെയും വിശകലനത്തിനായി ഉപയോഗിച്ചു.

ഡോപാമൈൻ റിസപ്റ്റർ ഓട്ടോറാഡിയോഗ്രഫി

സ്ട്രൈറ്റയുടെ തലത്തിൽ വലത് അർദ്ധവിരാമങ്ങൾ ക്രയോസെക്ഷൻ ചെയ്തു (ബ്രെഗ്മയിൽ നിന്ന് −0.22, 0.14, 0.62, 1.18 മില്ലിമീറ്റർ, സ്ട്രൈറ്റത്തിന്റെ മുഴുവൻ വ്യാപ്തിയും ഉൾക്കൊള്ളുന്നു) 12 മില്ലീമീറ്റർ വിഭാഗങ്ങളായി. സ്ലൈഡുകൾ അസൈ ബഫറിൽ (20 എംഎം ഹെപ്സ്, 154 എംഎം NaCl, 0.1% ബോവിൻ സെറം ആൽബുമിൻ [ബിഎസ്എ]; പിഎച്ച് 7.4) 20 മിനിറ്റ് 37 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ലയിപ്പിച്ചു. 1 എൻ‌എം ട്രിറ്റിയം-ലേബൽ‌ ചെയ്‌ത എസ്‌സി‌എച്ച് -1.5 (പെർകിൻ-എൽമർ), 23390 എൻ‌എം കെറ്റാൻ‌സെറിൻ എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന അസ്സേ ബഫറിൽ‌ സ്ലൈഡുകൾ ഇൻ‌ക്യുബേറ്റ് ചെയ്താണ് ഡി 100 ആർ ബൈൻഡിംഗ് വിലയിരുത്തിയത്. 60 പിഎം ട്രിറ്റിയം-ലേബൽ ചെയ്ത സ്പൈറോൺ (പെർകിൻ-എൽമർ), 37 എൻഎം കെറ്റാൻസെറിൻ എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് സ്ലൈഡുകൾ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്ത് 2 മിനുട്ട് 600 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ഡി 100 ആർ ബൈൻഡിംഗ് വിലയിരുത്തി. ഉചിതമായ റേഡിയോലിഗാൻഡുമായുള്ള ഇൻകുബേഷനെത്തുടർന്ന്, സ്ലൈഡുകൾ 100 മിനുട്ട് 37 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ വാഷ് ബഫറിൽ (10 എംഎം ട്രിസ്-എച്ച്സി‌എൽ, 4 എംഎം NaCl) രണ്ടുതവണ കഴുകി, തുടർന്ന് വെള്ളത്തിൽ മുക്കി (10 ° C) ഒറ്റരാത്രികൊണ്ട് വരണ്ടതാക്കാൻ അനുവദിച്ചു. സ്ലൈഡുകൾ 154 (ഡി 0 ആർ ബൈൻഡിംഗ്) അല്ലെങ്കിൽ 7 ദിവസം (ഡി 1 ആർ ബൈൻഡിംഗ്) ഫോസ്ഫർ-ഇമേജിംഗ് പ്ലേറ്റുകളിൽ പ്രദർശിപ്പിക്കുകയും ഒരു ഫോസ്ഫോയിമേജർ (സൈക്ലോൺ; പെർകിൻ-എൽമർ) ഉപയോഗിച്ച് വികസിപ്പിക്കുകയും ചെയ്തു. വിശകലനത്തിനായി, ഒപ്റ്റിക്വന്റ് ഇമേജ് അനാലിസിസ് സോഫ്റ്റ്വെയർ (പെർകിൻ-എൽമർ) ഉപയോഗിച്ച് താൽപ്പര്യമുള്ള മേഖലകളുടെ രൂപരേഖയും വിശകലനവും നടത്തി.

വെസ്റ്റേൺ ബ്ലോട്ടിംഗ്

വെസ്റ്റേൺ ബ്ലോട്ടുകൾ മ mouse സ് ആന്റി D2DR ആന്റിബോഡി (1: 500; സാന്താക്രൂസ്; sc-5303) അല്ലെങ്കിൽ മ mouse സ് ആന്റി GAPDH ആന്റിബോഡി (1: 1,000; സാന്താക്രൂസ്; sc-32233), അതിനുശേഷം ആട്-ആന്റി-മൗസ് IgG- HRP (1: 1,000; സാന്താക്രൂസ്; sc-2005). മെച്ചപ്പെടുത്തിയ കെമിലുമിനെസെൻസ് വെസ്റ്റേൺ ബ്ലോട്ടിംഗ് ഡിറ്റക്ഷൻ റിയാജന്റുകൾ (ബയോ-റാഡ്) ഉപയോഗിച്ചാണ് കെമിലുമിനെസെൻസ് സിഗ്നൽ സൃഷ്ടിച്ചത്, കൂടാതെ കെമിഡോക് ഇമേജിംഗ് സിസ്റ്റം (ബയോ-റാഡ്) ഉപയോഗിച്ച് ദൃശ്യവൽക്കരിച്ചു.

സിറ്റു ഹൈബ്രിഡൈസേഷനിൽ

സിറ്റു ഹൈബ്രിഡൈസേഷനായി (അഡ്വാൻസ്ഡ് സെൽ ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സ്) ഒരു ആർ‌എൻ‌എസ്‌കോപ്പ് മൾട്ടിപ്ലക്‌സ് ഫ്ലൂറസെന്റ് അസ്സേ കിറ്റ് ഉപയോഗിച്ചു. ചുരുക്കത്തിൽ, ഫോർമാലിൻ-ഫിക്സഡ് വിഭാഗങ്ങൾ എഥനോൾ നിർജ്ജലീകരണം ചെയ്തു, തുടർന്ന് പ്രോട്ടീസ് എക്സ്പോഷർ ചെയ്തു. ആർ‌എൻ‌എസ്‌കോപ്പ് ഒലിഗോ ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് പ്രോബുകൾ ഉപയോഗിച്ച് വിഭാഗങ്ങൾ ഹൈബ്രിഡ് ചെയ്തു DrD2. പ്രോബ് ഹൈബ്രിഡൈസേഷനെ തുടർന്ന്, ആർ‌എൻ‌എസ്‌കോപ്പ് പ്രോട്ടോക്കോളുകൾ അനുസരിച്ച് സ്ലൈഡുകൾ സിഗ്നൽ ആംപ്ലിഫയർ ഉപയോഗിച്ച് ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു. സ്ലൈഡുകൾ പിന്നീട് ആർ‌എൻ‌എസ്‌കോപ്പ് വാഷ് ബഫർ ഉപയോഗിച്ച് കഴുകി. അവസാനമായി, സ്ലൈഡുകൾ DAPI ക counter ണ്ടർ‌സ്റ്റെയിൻ ഉപയോഗിച്ച് മ mounted ണ്ട് ചെയ്തു.

ഇലക്ട്രോകെമിക്കൽ ഡിറ്റക്ഷൻ ഉള്ള ഉയർന്ന പ്രകടനമുള്ള ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി

റിവേഴ്സ്-ഫേസ് ഹൈ-പെർഫോമൻസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫി ഉപയോഗിച്ച് ഇലക്ട്രോകെമിക്കൽ ഡിറ്റക്ഷൻ (എച്ച്പി‌എൽ‌സി-ഇസി) ഉപയോഗിച്ച് ഡി‌എ കണ്ടെത്തുന്നതിനായി ഇടത് ഹെമിസെക്ഷനുകൾ പ്രോസസ്സ് ചെയ്തു, മുമ്പ് വിവരിച്ചതുപോലെ (കിൽ‌പാട്രിക് മറ്റുള്ളവരും, 1986).

ടൈറോസിൻ ഹൈഡ്രോക്സിലേസ് ഇമ്മ്യൂണോഹിസ്റ്റോകെമിസ്ട്രി

സ്ലൈഡ് ഘടിപ്പിച്ച വിഭാഗങ്ങൾ 10% ന്യൂട്രൽ ബഫർഡ് ഫോർമാലിനിൽ ഉറപ്പിക്കുകയും 0.1 M TBS (pH 7.5) ൽ കഴുകുകയും 3% സാധാരണ കഴുത സെറം, 0.3% ട്രൈറ്റൺ എക്സ് -100, മുയൽ ആന്റി-ടൈറോസിൻ ഹൈഡ്രോക്സിലേസ് ആന്റിബോഡി എന്നിവ അടങ്ങിയ പ്രാഥമിക ആന്റിബോഡി ലായനിയിൽ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. (1: 1,000; മില്ലിപൂർ; MAB152) രാത്രി 23. C ന്. അടുത്ത ദിവസം, ടിഷ്യു വിഭാഗങ്ങളിൽ ടിഷ്യു വിഭാഗങ്ങൾ കഴുകിക്കളയുകയും 3% സാധാരണ കഴുത സെറം, 0.3% ട്രൈറ്റൺ എക്സ് -100, ആട് ആന്റി റാബിറ്റ് എന്നിവ അടങ്ങിയ ദ്വിതീയ ആന്റിബോഡി ലായനിയിൽ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുകയും അലക്സാ ഫ്ലൂവർ 555 (മില്ലിപൂർ; എക്യു 132 എഫ്) സംയോജിപ്പിക്കുകയും ചെയ്തു. ഓരോ മൗസിനും, രണ്ട് സ്ട്രൈറ്റൽ വിഭാഗങ്ങൾ വിശകലനം ചെയ്തു, നാല് എലികൾ ഒഴികെ (രണ്ട് എച്ച്എഫ്ഡി, രണ്ട് ച ow) ടിഷ്യു അല്ലെങ്കിൽ ചിത്രത്തിന്റെ ഗുണനിലവാരം കാരണം ഒരു വിഭാഗം മാത്രം വിശകലനം ചെയ്തു.

മൈക്രോ-പിഇടി

എലികൾ കുത്തിവച്ചു ¹⁸ഐസോഫ്ലൂറൻ അനസ്തേഷ്യയിൽ ആയിരിക്കുമ്പോൾ ടെയിൽ സിരയിലൂടെ 2.5 μL വോള്യത്തിൽ 0.34 ± 130 mCi / nmol എന്ന നിർദ്ദിഷ്ട പ്രവർത്തനമുള്ള എഫ്-ഫാലിപ്രൈഡ്. മൈക്രോ-പിഇടി സ്കാൻ 2 മണിക്കൂർ നേരത്തേക്ക് നടത്തി, ഈ സമയത്ത് 25 ഫ്രെയിമുകൾ വിശകലനത്തിനായി സ്വന്തമാക്കി. ഇതിനായുള്ള സമയ-പ്രവർത്തന വളവുകൾ ¹⁸താൽ‌പ്പര്യമുള്ള പ്രദേശങ്ങളിലെ എഫ്-ഫാലിപ്രൈഡ് (ആർ‌ഒ) എ‌എഫ്‌എൻ‌ഐ സോഫ്റ്റ്വെയർ (എക്‌സ്‌ട്രാക്റ്റുചെയ്‌തു)https://afni.nimh.nih.gov/afni), D2R ബൈൻഡിംഗ് സാധ്യതകൾ നിർണ്ണയിക്കാൻ ഒരു ഇച്ഛാനുസൃത MATLAB സ്ക്രിപ്റ്റ് (റഫറൻസ് ടിഷ്യുവായി സെറിബെല്ലം ഉപയോഗിച്ച്) ഉപയോഗിച്ച് ചലനാത്മക പാരാമീറ്ററുകൾ നാല് കമ്പാർട്ട്മെന്റ് മോഡലിന് അനുയോജ്യമായിരുന്നു.ലാമെർട്സ്മയും ഹ്യൂമും, 1996).

വിവോ ഇലക്ട്രോഫിസിയോളജിയിൽ

32 ടെഫ്ലോൺ പൂശിയ ടങ്‌സ്റ്റൺ മൈക്രോവയറുകൾ (35-മില്ലീമീറ്റർ വ്യാസമുള്ള) ഡോർസോമീഡിയൽ സ്ട്രിയാറ്റത്തിൽ ഏകപക്ഷീയമായി ഘടിപ്പിച്ചിട്ടുള്ള ഒരു ഇലക്ട്രോഡ് അറേയിൽ നിന്നാണ് റെക്കോർഡിംഗുകൾ നിർമ്മിച്ചത് (ആന്റീരിയർ / പിൻ‌വശം [A / P]: +0.8; മീഡിയൽ / ലാറ്ററൽ [M / L]: +1.5 ; ഡോർസൽ / വെൻട്രൽ [ഡി / വി]: ബ്രെഗ്മയ്ക്ക് .2.6 മില്ലീമീറ്റർ), വാണിജ്യ സോഫ്റ്റ്വെയർ ഉപയോഗിച്ച് പ്രോസസ്സ് ചെയ്യുന്നു (ഓഫ്‌ലൈൻ സോർട്ടറും ന്യൂറോ എക്സ്പ്ലോററും; പ്ലെക്സൺ).

സ്റ്റീരിയോടാക്സിക് വൈറൽ വെക്റ്റർ ഇഞ്ചക്ഷൻ

ഐസോഫ്ലൂറൻ എക്സ്പോഷർ വഴി എലികളെ ഹ്രസ്വമായി അനസ്തേഷ്യ ചെയ്തു. ആഴത്തിൽ അനസ്തേഷ്യ ചെയ്തുകഴിഞ്ഞാൽ, മിഡ്‌ലൈനിനൊപ്പം ഒരൊറ്റ മുറിവുണ്ടാക്കി, തലയോട്ടി തുറന്നുകാട്ടി, ഉഭയകക്ഷി ക്രാനിയോടോമി ഉണ്ടാക്കി (എ / പി: +0.5; എം / എൽ: ബ്രെഗ്മയ്ക്ക് mm 1.5 എംഎം) KOR-DREADD (Syn-DIO-hKORD-IRES-mCit-WPRE; 0.5 μL) അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന വൈറൽ വെക്റ്റർ ഉഭയകക്ഷി ഡോർസോമീഡിയൽ സ്ട്രിയാറ്റത്തിലേക്ക് (D / V, തലയോട്ടിക്ക് മുകളിൽ നിന്ന് .2.8 മില്ലീമീറ്റർ) കുത്തിവയ്ക്കുകയും പ്രകടിപ്പിക്കാൻ അനുവദിക്കുകയും ചെയ്തു. പരീക്ഷണത്തിന് 9 ആഴ്ച മുമ്പ്.

നോ-നെറ്റ് ഫ്ലക്സ് മൈക്രോഡയാലിസിസും ഡോപാമൈൻ വിശകലനവും

എലികളുടെ ഡോർസൽ സ്ട്രൈറ്റത്തിലെ ബേസൽ എക്സ്ട്രാ സെല്ലുലാർ ഡി‌എ, ഡോപാക്, എച്ച്വി‌എ എന്നിവയുടെ അളവുകൾ നോ-നെറ്റ് ഫ്ലക്സ് മൈക്രോഡയാലിസിസ് സമീപനത്തിലൂടെയാണ് നടത്തിയത്. കാൻ‌യുല ഇംപ്ലാന്റേഷൻ കഴിഞ്ഞ് 2 ആഴ്ച കഴിഞ്ഞ് ഏകപക്ഷീയമായ 18-എംഎം പ്രോബുകൾ (1-കെ‌ഡി‌എ മെംബ്രൻ കട്ട്ഓഫ്) സാമ്പിൾ ശേഖരണത്തിന് മുമ്പ് 1 മണിക്കൂർ നേരത്തേക്ക് 4 μL / min എന്ന കൃത്രിമ സെറിബ്രോസ്പൈനൽ ദ്രാവകം (എസി‌എസ്എഫ്) തുടർച്ചയായി പെർഫ്യൂഷൻ ചെയ്ത് കാനുല ഇംപ്ലാന്റ് ചെയ്തു അനുബന്ധ പരീക്ഷണാത്മക നടപടിക്രമങ്ങൾ). ഡയാലിസിസ് പ്രോബിലൂടെ എസി‌എസ്‌എഫിലെ ആറ് വ്യത്യസ്ത സാന്ദ്രതകളുള്ള ഡി‌എ (0, 2.5, 5, 10, 20, 40 എൻ‌എം) ക്രമരഹിതമായി പെർഫ്യൂസ് ചെയ്താണ് എക്സ്ട്രാ സെല്ലുലാർ ഡി‌എ അളവ് അളക്കുന്നതിനുള്ള നോ-നെറ്റ് ഫ്ലക്സ് പരീക്ഷണം നടത്തിയത്. ഓരോ ഡി‌എ ഏകാഗ്രതയും 30 മിനുട്ട് പെർഫ്യൂസ് ചെയ്തു, തുടർന്ന് 2 × 10-മിനിറ്റ് സാമ്പിളുകൾ 2.5 μL 100 എംഎം എച്ച്സി‌എല്ലിലും 1 എംഎം ഇഡി‌ടി‌എയിലും ശേഖരിച്ച് കാറ്റെകോളമൈൻ നശിക്കുന്നത് തടയുകയും −80 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ഫ്രീസുചെയ്യുകയും ചെയ്തു. ന്യൂറോകെമിക്കൽ വിശകലനങ്ങൾക്കായി, ഐസോക്രാറ്റിക് എച്ച്പി‌എൽ‌സി സിസ്റ്റവും ആമ്പറോമെട്രിക് കണ്ടെത്തലും ഉപയോഗിച്ചു (എച്ച്പി‌എൽ‌സി-ഇസി; ബേസി എൽ‌സി -4 സി). ശരിയായ അന്വേഷണ പ്ലെയ്‌സ്‌മെന്റ് ഉള്ള എലികളെ മാത്രമേ വിശകലനത്തിൽ ഉൾപ്പെടുത്തിയിട്ടുള്ളൂ (ചിത്രം എസ് 3ഇ).

സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കുകൾ

ഗ്രാഫ്പാഡ് പ്രിസം (പതിപ്പ് 6.07; ഗ്രാഫ്പാഡ് സോഫ്റ്റ്വെയർ) ഉപയോഗിച്ച് സ്ഥിതിവിവര വിശകലനം നടത്തി. പ്രസ്താവിച്ചിട്ടില്ലെങ്കിൽ, രണ്ട് വാലുള്ള വിദ്യാർത്ഥിയുടെ ടി ടെസ്റ്റുകൾ ഉപയോഗിച്ചു. അല്ലാത്തപക്ഷം, രണ്ട്-വാലുള്ള ജോടിയാക്കിയ ടി ടെസ്റ്റുകൾ, വൺ-വേ ആവർത്തിച്ചുള്ള-അളവുകൾ ANOVA- കൾ അല്ലെങ്കിൽ ടു-വേ ആവർത്തിച്ചുള്ള-അളവുകൾ ANOVA- കൾ ഉചിതമായതും പ്രസ്താവിച്ചതും ഉപയോഗിച്ചു. പോസ്റ്റ് ഹോക് താരതമ്യത്തിനായുള്ള ടി ടെസ്റ്റുകൾക്ക് ശേഷം ANOVA- കൾ. P <0.05 എന്ന ആൽഫയിൽ അല്ലെങ്കിൽ ഉചിതമായ സ്ഥലത്ത് ബെജാമിനി-ഹോച്ച്ബെർഗ് തെറ്റായ കണ്ടെത്തൽ നിരക്ക് (എഫ്ഡിആർ) തിരുത്തൽ നിർണ്ണയിച്ച ആൽഫ ഉപയോഗിച്ച് ഫലങ്ങൾ പ്രാധാന്യമർഹിക്കുന്നു.

രചയിതാവിന്റെ സംഭാവന

ഡി‌എം‌എഫ്, കെ‌ഡി, ടി‌ജെ‌ഒ, എം‌എസ്, എ‌കെ, ഐ‌പി‌എസ്ജി‌ആർ‌വി‌എ, എം‌ആർ, കെ‌ഡി‌എച്ച്, എ‌വി‌കെ എന്നിവയാണ് പരീക്ഷണങ്ങൾ രൂപകൽപ്പന ചെയ്തത്. ബി‌എം‌എഫ്, കെ‌ഡി, ടി‌ജെ‌ഒ, എം‌എസ്, എ‌വി‌കെ എന്നിവ പെരുമാറ്റ പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തി വിശകലനം ചെയ്തു. ഐപി വെസ്റ്റേൺ ബ്ലോട്ടിംഗ് പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തി. വിവോ ഇലക്ട്രോഫിസിയോളജിക്കൽ ഡാറ്റയിൽ ഡിഎംഎഫ്, എവികെ എന്നിവ പ്രകടനം നടത്തി വിശകലനം ചെയ്തു. ഡി‌എം‌എഫ്, ജെ-എസ്‌എൽ, ജെ‌ജി, എ‌വി‌കെ എന്നിവ മൈക്രോ പി‌ഇടി പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തി വിശകലനം ചെയ്തു. ഡി.എം.എഫ്, കെ.ഡി, ടി.ജെ.ഒ, എ.വി.കെ എന്നിവർ കൈയെഴുത്തുപ്രതി എഴുതി. എല്ലാ എഴുത്തുകാരും ഫലങ്ങൾ ചർച്ച ചെയ്യുകയും കൈയെഴുത്തുപ്രതിയിൽ അഭിപ്രായമിടുകയും ചെയ്തു.

അക്നോളജ്മെന്റ്

എൻ‌എ‌എച്ചിന്റെ ഇൻട്രാമുറൽ റിസർച്ച് പ്രോഗ്രാം, നാഷണൽ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓഫ് ഡയബറ്റിസ് ആൻഡ് ഡൈജസ്റ്റീവ് ആൻഡ് കിഡ്നി ഡിസീസസ് (എൻ‌ഐ‌ഡി‌ഡി‌കെ) ഈ ജോലിയെ പിന്തുണച്ചിരുന്നു. സെറം മെറ്റബോളിറ്റുകളും ഹോർമോണുകളും വിലയിരുത്തിയതിന് എൻ‌ഐ‌ഡി‌ഡി‌കെയിലെ മൗസ് മെറ്റബോളിസം കോറിനും ഡോപ്പാമൈൻ മൈക്രോഡയാലിസിസ് പരീക്ഷണങ്ങൾ രൂപകൽപ്പന ചെയ്യുന്നതിനുള്ള സഹായത്തോടെ ആൻഡ്രസ് ബ്യൂണാനോയ്ക്കും എച്ച്പി‌എൽ‌സിയുടെ സഹായത്തിന് ഡോ. ജൂഡിത്ത് വാൾട്ടേഴ്‌സ്, ഡോ. ക്രിസ്റ്റിൻ ഡുപ്രെ, ഡോ. ക്ലെയർ ഡെലവില്ലെ എന്നിവരോടും ഞങ്ങൾ നന്ദി പറയുന്നു. ഡോപാമൈൻ ടിഷ്യു ഉള്ളടക്ക വിശകലനം. ഡോ. സ്കോട്ട് യങ്ങിന്റെ ലബോറട്ടറി ഉപകരണങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ചതിനും ബൈൻഡിംഗ് പഠനത്തിനുള്ള സഹായത്തിനും ഞങ്ങൾ നന്ദി പറയുന്നു. പരീക്ഷണാത്മക രൂപകൽപ്പനയെക്കുറിച്ചുള്ള വിവരങ്ങൾ നൽകിയതിനും കൈയെഴുത്തുപ്രതി ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം വായിച്ചതിനും AVK ലബോറട്ടറിയിലെ അംഗങ്ങളായ മാർക്ക് റീറ്റ്മാൻ, നിക്ക് റൈബ എന്നിവർക്കും നന്ദി.

അനുബന്ധ വിവരങ്ങൾ

പ്രമാണം S1. അനുബന്ധ പരീക്ഷണാത്മക നടപടിക്രമങ്ങളും കണക്കുകളും S1 - S5.

PDF ഫയലുകളെ സഹായിക്കുക

ഓപ്ഷനുകൾ

പ്രമാണം S2. ലേഖനവും അനുബന്ധ വിവരങ്ങളും.

PDF ഫയലുകളെ സഹായിക്കുക

ഓപ്ഷനുകൾ

അവലംബം

ആഡംസ് മറ്റുള്ളവരും, 2015
ഡബ്ല്യു കെ ആഡംസ്, ജെ എൽ സുസ്മാൻ, എസ്. ക ur ർ, എ എം ഡിസൂസ, ടി ജെ കീഫർ, സി എ വിൻസ്റ്റാൻലി
എലികളിലെ കൊഴുപ്പ് കൂടിയ ഭക്ഷണത്തിന്റെ ദീർഘകാല, കലോറി നിയന്ത്രിത ഉപഭോഗം പ്രേരണ നിയന്ത്രണവും വെൻട്രൽ സ്ട്രൈറ്റൽ ഡിഎക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് റിസപ്റ്റർ സിഗ്നലിംഗും കുറയ്ക്കുന്നു add ആസക്തിയുടെ രണ്ട് അടയാളങ്ങൾ
യൂറോ. ജെ. ന്യൂറോസി., എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് (എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്), പേജ്.
ക്രോസ് റഫ്

നേരിട്ടുള്ള ലിങ്കുകൾ