പ്രോക്ക് എൻട് അകാഡ് സയൻസ് യു.എസ്.എ. 2009 നവം 24; 106 (47): 20016 - 20020.
ഓൺലൈൻ പ്രസിദ്ധീകരിക്കപ്പെട്ടത് നവംബർ 10. ദോഇ: 10.1073 / pnas.0908789106
PMCID: PMC2785284
പിയട്രോ കോട്ടൺ,a,b,c,d,1,2 വാലന്റീന സാബിനോ,a,b,c,d,1 മാരിസ റോബർട്ടോ,a,c,d മൈക്കൽ ബജോ,e ലാറ പോക്രോസ്,a ജെന്നിഫർ ബി. ഫ്രിഹോഫ്,a,c,d,f ഇവാ എം. ഫെക്കെറ്റ്,a,c,d ലൂക്ക സ്റ്റിയർഡോ,g കെന്നർ സി. റൈസ്,h ദിമിത്രി ഇ. ഗ്രിഗോറിയാഡിസ്,i ബ്രൂണോ കോണ്ടി,d,e ജോർജ് എഫ്. കൂബ്,a,c ഒപ്പം എറിക് പി. സോറില്ലa,c,d,2
വേര്പെട്ടുനില്ക്കുന്ന
ശരീരഭാരം നിയന്ത്രിക്കാനുള്ള ഭക്ഷണക്രമത്തിൽ നിർബന്ധിത ഭക്ഷണത്തെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്ന രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിൽ നിന്ന് ഒഴിവാക്കുന്ന ചക്രങ്ങൾ ഉൾപ്പെടുന്നു. ഇപ്പോഴത്തെ പഠനം കാണിക്കുന്നത്, ഇടയ്ക്കിടെയുള്ള ആഹാരത്തിൽ നിന്ന് പിൻ‌മാറിയ എലികൾ, പുതിയ ആക്‌സസ്സിന് ശേഷം രുചികരമായ ഭക്ഷണം അമിതമായി ആഹാരം കഴിക്കുന്നതും കോർട്ടികോട്രോപിൻ-റിലീസിംഗ് ഫാക്ടർ-എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് (സിആർഎഫ്1) ഹൈപ്പോഫാഗിയ ഉൾപ്പെടെയുള്ള റിസപ്റ്റർ എതിരാളി-റിവേർസിബിൾ ബിഹേവിയേഴ്സ്, കുറഞ്ഞ രുചികരമായ ഭക്ഷണം ലഭിക്കുന്നതിനുള്ള മോട്ടിവേഷണൽ കമ്മി, ആൻജിയോജനിക് പോലുള്ള സ്വഭാവം. പിൻ‌വലിക്കലിനൊപ്പം വർദ്ധിച്ച സിആർഎഫ് എക്‌സ്‌പ്രഷനും സി‌ആർ‌എഫും ഉണ്ടായിരുന്നു1 അമിഗ്ഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിലെ ഇലക്ട്രോഫിസിയോളജിക്കൽ റെസ്പോൺസിബിലിറ്റി. ആന്റി റിവാർഡ് എക്സ്ട്രാഹിപോത്തലാമിക് സിആർഎഫ്-സിആർഎഫിന്റെ നിയമനം ഞങ്ങൾ നിർദ്ദേശിക്കുന്നു1 രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിൽ നിന്ന് പിന്മാറുന്നതിലെ സംവിധാനങ്ങൾ, ദുരുപയോഗം ചെയ്യുന്ന മരുന്നുകളിൽ നിന്ന് വിട്ടുനിൽക്കുന്നതിന് സമാനമാണ്, രുചികരമായ ഭക്ഷണം നിർബന്ധിതമായി തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നത് പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കാം, ആരോഗ്യകരമായ ബദലുകൾക്ക് ചികിത്സ നൽകാതിരിക്കുക, രുചികരമായ ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്നത് തടയുമ്പോൾ നെഗറ്റീവ് വൈകാരികാവസ്ഥ എന്നിവ.
മയക്കുമരുന്ന് ആസക്തിക്ക് സമാനമായ അമിതവണ്ണത്തിന്റെയും ഭക്ഷണ ക്രമക്കേടുകളുടെയും രൂപങ്ങൾ വിട്ടുമാറാത്ത കാലഘട്ടങ്ങൾ (അതായത്, “വിലക്കപ്പെട്ട” രുചികരമായ ഭക്ഷണങ്ങൾ ഒഴിവാക്കാൻ ഡയറ്റിംഗ്), പുന pse സ്ഥാപനം (അതായത്, നിർബന്ധിത, പലപ്പോഴും അനിയന്ത്രിതമായ, ഉയർന്ന ഭക്ഷണം കഴിക്കൽ) രസകരമായ ഫലങ്ങൾ) നെഗറ്റീവ് പരിണതഫലങ്ങൾക്കിടയിലും തുടരുന്നു (1). രുചികരമായ ഭക്ഷണങ്ങളുടെ ഗുണപരമായ ഗുണങ്ങൾ എല്ലാവർക്കും അറിയാമെങ്കിലും (2, 3), അവയുടെ നെഗറ്റീവ് ശക്തിപ്പെടുത്തൽ സവിശേഷതകളിൽ കുറച്ച് ശ്രദ്ധ നൽകിയിട്ടുണ്ട് (4-6), അതായത്, പ്രതികൂലമായ ഉത്തേജനം നീക്കംചെയ്യുന്നതിലൂടെ ഉണ്ടാകുന്ന പെരുമാറ്റ പ്രതികരണത്തിന്റെ വർദ്ധിച്ച സാധ്യത (ഉദാ. നെഗറ്റീവ് വൈകാരികാവസ്ഥകളെ ലഘൂകരിക്കുന്നതിന് രുചികരമായ ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്നത്). ദുരുപയോഗ മരുന്നുകളുടെ വിപുലമായ ഉപയോഗത്തിന്റെ ഇടയ്ക്കിടെയുള്ള ചക്രങ്ങൾ ക്രമേണ “ബാധകമായ ആശ്രയത്വത്തിലേക്ക്” നയിച്ചേക്കാം, ഒരു നിശ്ചിത വൈകാരിക സെറ്റ് പോയിന്റ് നിലനിർത്തുന്നതിന് മരുന്നിന്റെ ഉയർന്നതും കൂടാതെ / അല്ലെങ്കിൽ കൂടുതൽ അളവിലുള്ളതുമായ ആവശ്യകതയുടെ ആവശ്യകതയും നിർത്തലാക്കുമ്പോൾ നെഗറ്റീവ് വൈകാരികാവസ്ഥയും മയക്കുമരുന്ന് കഴിക്കൽ (7, 8). മയക്കുമരുന്ന് ഉപയോഗം തുടരുന്നതിന്റെയും പുനരാരംഭിക്കുന്നതിന്റെയും നെഗറ്റീവ് ശക്തിപ്പെടുത്തുന്ന സ്വഭാവങ്ങളിലൂടെ അത്തരം ഫലപ്രദമായ പിൻവലിക്കൽ ഉപയോഗം നിലനിർത്തുകയും പുന pse സ്ഥാപനത്തെ പ്രേരിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യാം (7, 8).
എക്സ്ട്രാഹൈപോത്തലാമിക് കോർട്ടികോട്രോപിൻ-റിലീസിംഗ് ഫാക്ടർ (സിആർഎഫ്) മസ്തിഷ്ക സമ്മർദ്ദ സംവിധാനങ്ങൾ മയക്കുമരുന്ന് ഉപയോഗത്തിൽ നിന്ന് ആശ്രിതത്വത്തിലേക്ക് മാറുന്നതിൽ പ്രധാനമായും പങ്കാളികളാകുന്നു, ഈ സമയത്ത് ദുരുപയോഗം ചെയ്യുന്ന മരുന്നുകളുടെ ഉപയോഗം പോസിറ്റീവ്, ബലപ്പെടുത്തൽ സംവിധാനങ്ങളേക്കാൾ ഈ നെഗറ്റീവ് പ്രേരിതമായിത്തീരുന്നു. മദ്യം, നിക്കോട്ടിൻ, കൊക്കെയ്ൻ, ഒപിയേറ്റുകൾ, ആംഫെറ്റാമൈനുകൾ, ടെട്രാഹൈഡ്രോകന്നാബിനോൾ എന്നിവയുൾപ്പെടെയുള്ള എല്ലാ പ്രധാന ദുരുപയോഗ മരുന്നുകളുടെയും പിൻവലിക്കൽ സിൻഡ്രോമുകളിൽ സിആർഎഫ് പ്രചോദനാത്മകമായ പങ്ക് വഹിക്കുന്നു.7, 8). സമാനതകളാൽ, മയക്കുമരുന്ന് ആശ്രിത മോഡലുകളിൽ കാണുന്നതുപോലെയുള്ള സിആർഎഫ് സിസ്റ്റം ന്യൂറോഡാപ്റ്റേഷനുകളെ പ്രേരിപ്പിക്കുന്നതിനായി ഇടയ്ക്കിടെയുള്ളതും ഉയർന്ന രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്കുള്ള വിപുലമായ ആക്സസ് അനുമാനിക്കപ്പെടുന്നതുമാണ്.4, 5, 9).
ഫലം
രുചികരമായ ഭക്ഷണം ലഭ്യമല്ലാത്തപ്പോൾ ഇടയ്ക്കിടെ, രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്കുള്ള ആക്സസ് ക്രമാനുഗതമായി കുറഞ്ഞ ഭക്ഷണക്രമത്തിൽ കുറവു വരുത്തുന്നതിനും പുതുക്കിയ പ്രവേശനത്തിന് ശേഷം രുചികരമായ ഭക്ഷണം അമിതമായി കഴിക്കുന്നതിനും കാരണമാകുന്നു (10-12). CRF എന്ന സിദ്ധാന്തം പരീക്ഷിക്കുന്നതിന്1 സിസ്റ്റങ്ങൾ ഈ തീറ്റക്രമം, പുരുഷ വിസ്താർ എലികൾ (n = 20) ഓരോ ആഴ്ചയും ഒരു ച ow ഡയറ്റ് പരസ്യ ലിബിതം (ച ow / ച ow) നൽകിയിരുന്നു അല്ലെങ്കിൽ 5 ദിവസത്തേക്ക് (സി ഘട്ടം) ച ad പരസ്യ ലിബിറ്റം നൽകി, തുടർന്ന് 2 ദിവസത്തേക്ക് (പി ഘട്ടം) (ച ow / പാലറ്റബിൾ) വളരെ രുചികരമായ, പഞ്ചസാരയുള്ള ഭക്ഷണക്രമം നൽകി. ) (കാണുക ചിത്രം S1 ഭക്ഷണ ഷെഡ്യൂളിനായി ഒപ്പം ചിത്രം S2 ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്നതിലും ശരീരഭാരത്തിലും ഭക്ഷണ ഷെഡ്യൂളിന്റെ ഫലങ്ങൾക്കായി). 7 ആഴ്ച ഡയറ്റ് സൈക്ലിംഗിന് ശേഷം, എലികൾക്ക് പെപ്റ്റൈഡ് അല്ലാത്ത CRF ലഭിച്ചു1 ലാറ്റിൻ-സ്ക്വയർ ഡിസൈനിൽ (റിസപ്റ്റർ എതിരാളി R121919 (0, 5, 10, 20 mg / kg, sc)13). രുചികരമായ ഭക്ഷണക്രമത്തിൽ നിന്ന് ച ow യിലേക്കോ ച ow യിൽ നിന്ന് രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്കോ മാറുന്നതിന് മുമ്പ് ചികിത്സകൾക്ക് 1 h നൽകി. R121919 ഡോസ്-ആശ്രിതമായി പാലറ്റബിൾ ഡയറ്റ് കഴിക്കുന്നതും ച ow / പാലറ്റബിൾ എലികളിൽ ച ow ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്നതും വർദ്ധിച്ചു (ഡയറ്റ് ഫേസ് × ഡയറ്റ് ഷെഡ്യൂൾ × മയക്കുമരുന്ന് ഡോസ്: F3,54 = 7.25, P <0.001), ച ow നിയന്ത്രണങ്ങളുടെ ഉപയോഗം മാറ്റാതെ. R121919 രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്കുള്ള (പി ഘട്ടം) പുതുക്കിയ പ്രവേശനത്തിലൂടെ ഉയർന്ന രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിന്റെ അളവ് കുറഞ്ഞു (പി ഘട്ടം) (ചിത്രം. 1A). സ്വതന്ത്ര പരിശോധനകളിൽ, CRF1 റിസപ്റ്റർ എതിരാളി ച ow / പാലറ്റബിൾ എലികളിലെ രുചികരമായ ച ow യുടെ അളവ് വർദ്ധിപ്പിച്ചത് പാലറ്റബിൾ ഡയറ്റിൽ നിന്ന് പിൻ‌വലിച്ചു (സി ഘട്ടം) (ചിത്രം. 1B). അതിനാൽ, ച ow ഹൈപ്പോഫാഗിയയും രുചികരമായ ഭക്ഷണവും അമിതമായി കഴിക്കുന്നതിലൂടെ, ആർ‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് ഇൻ‌ടേക്ക് സൈക്ലിംഗിന്റെ വ്യാപ്തി മനസ്സിലാക്കി (ആദ്യത്തെ പാലറ്റബിൾ പി ഘട്ടത്തിൽ കഴിക്കുന്നതും ച ow യിലേക്കുള്ള ആദ്യത്തെ പിൻവലിക്കലും തമ്മിലുള്ള വ്യത്യാസം: ഡയറ്റ് ഷെഡ്യൂൾ × മയക്കുമരുന്ന് ഡോസ്: F3,54 = 7.25, P <0.001) (ചിത്രം. 1C). CRF-CRF ന്റെ പുരോഗമന നിയമനത്തെ പിന്തുണയ്ക്കുന്നു1 ഡയറ്റ് ഹിസ്റ്ററിയിലെ സിസ്റ്റങ്ങൾ, ഒരു നിശിത ഡയറ്റ് ഇഫക്റ്റിനുപകരം, ഭക്ഷണത്തിൽ ഒരൊറ്റ എക്സ്പോഷർ ചെയ്തതിന് ശേഷം R121919 രുചികരമായ ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്നത് കുറയ്ക്കുകയോ രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിൽ നിന്ന് ആദ്യമായി പിൻവാങ്ങുമ്പോൾ ച ow കഴിക്കുന്നത് വർദ്ധിപ്പിക്കുകയോ ചെയ്തില്ല (ചിത്രം S3).
ഇടയ്ക്കിടെയുള്ള പിൻവലിക്കൽ, രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്കുള്ള ആക്സസ് എന്നിവ ഉത്കണ്ഠ പോലുള്ള സ്വഭാവം വർദ്ധിപ്പിക്കും (11). CRF എന്ന സിദ്ധാന്തം പരീക്ഷിക്കുന്നതിന്1 രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിൽ നിന്ന് പിന്മാറുന്നതിനെ തുടർന്നുള്ള നെഗറ്റീവ് വൈകാരിക പെരുമാറ്റ ചിഹ്നങ്ങളിൽ റിസപ്റ്ററുകൾ ഉൾപ്പെടുന്നു, എലികൾക്ക് R121919 (0, 20 mg / kg, sc, 1-h പ്രീ ട്രീറ്റ്മെന്റ്) നൽകുകയും ഉയർന്ന പ്ലസ്-മാർജിലെ വിഷയങ്ങൾക്കിടയിൽ രൂപകൽപ്പന ചെയ്യുകയും ചെയ്തു (14), രുചികരമായ ഭക്ഷണക്രമത്തിൽ നിന്ന് ച ow യിലേക്ക് മാറിയതിനുശേഷം 5-9 h. വാഹനം ചികിത്സിക്കുന്ന ച ow / പാലറ്റബിൾ എലികൾ ച ow- ഫെഡ് നിയന്ത്രണങ്ങളേക്കാൾ തുറന്ന സമയം കാണിക്കുന്നു, ഇത് ഒരു ആൻജിയോജനിക് പോലുള്ള പ്രഭാവം പ്രതിഫലിപ്പിക്കുന്നു, 7 ആഴ്ച ഡയറ്റ് സൈക്ലിംഗിൽ നിന്ന് പിന്മാറുന്ന സമയത്ത് (ചിത്രം. 2A), രണ്ട് പിൻവലിക്കൽ സൈക്കിളുകൾക്ക് ശേഷം ഇതുവരെ കാണാത്ത ഒരു ഇഫക്റ്റ് (ചിത്രം S4). R121919 (20 mg / kg, പ്രീ-ട്രീറ്റ്മെന്റ്, രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിന്റെ അമിതഭക്ഷണവും ച ow യുടെ അപര്യാപ്തതയും) മോഡുലേറ്റ് ചെയ്ത ഡോസ്) ച ow / പാലറ്റബിൾ എലികൾ തുറന്ന കൈ പര്യവേക്ഷണം കുറയുന്നത് തടഞ്ഞു ഡയറ്റ് ഷെഡ്യൂൾ ose ഡോസ്: F1,43 = 7.25, P <0.02; ചിത്രം. 2ഒരു ഇടതുപക്ഷം). അടച്ച ഭുജ എൻ‌ട്രികളായി കണക്കാക്കിയ പൊതു പ്രവർത്തനത്തെ R121919 അഡ്മിനിസ്ട്രേഷൻ മാറ്റിയില്ല. അതിനാൽ, നിയന്ത്രണങ്ങളുടെ സ്വഭാവത്തിൽ മാറ്റം വരുത്താതെ, ഇടയ്ക്കിടെ, രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്കുള്ള വിപുലമായ ആക്സസ്, നിയന്ത്രണങ്ങളുടെ സ്വഭാവത്തിൽ മാറ്റം വരുത്താതെ, സിആർഎഫിന്റെ നിയമനം നിർദ്ദേശിക്കുന്നതിലൂടെ വർദ്ധിച്ച ഉത്കണ്ഠ പോലുള്ള സ്വഭാവത്തെ R121919 തടഞ്ഞു.1 സിസ്റ്റങ്ങൾ.
ഇടയ്ക്കിടെയുള്ള പിൻവലിക്കൽ, രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്കുള്ള ആക്സസ് എന്നിവ കുറഞ്ഞ മുൻഗണനയുള്ള ഭക്ഷണരീതികൾ നേടുന്നതിനുള്ള പ്രചോദനാത്മക കുറവുകളിലേക്ക് നയിച്ചേക്കാം, ഇത് ഹൈപ്പോഹെഡോണിക് പോലുള്ള സ്വഭാവത്തിന്റെ സാധ്യതയുള്ള സൂചികയാണ് (10). സമാനമായി, ശക്തിപ്പെടുത്തലിന്റെ പുരോഗമന-അനുപാത ഷെഡ്യൂളുകൾ‌ക്ക് കീഴിലുള്ള കുറഞ്ഞ മുൻഗണനയുള്ള ഗുസ്റ്റേറ്ററി റീഇൻ‌ഫോർ‌സറുകൾ‌ക്ക് പ്രതികരിക്കുന്നത് മുമ്പ് മയക്കുമരുന്ന് പിൻവലിക്കൽ സമയത്ത് കാണപ്പെടുന്ന പ്രചോദനാത്മക കുറവുകളെ സൂചിപ്പിക്കുന്നതിന് ഉപയോഗിച്ചിരുന്നു (15). CRF ന്റെ പങ്കാളിത്തം നിർണ്ണയിക്കാൻ1 റിസപ്റ്ററുകൾ, പുരോഗമന-അനുപാത ഷെഡ്യൂളിൽ അവരുടെ മുൻ‌ഗണന കുറഞ്ഞ ച ow ലഭിക്കുന്നതിന് ഡയറ്റ്-സൈക്കിൾ എലികളുടെ പ്രകടനത്തിൽ R121919 ന്റെ ഫലങ്ങൾ ഞങ്ങൾ പരീക്ഷിച്ചു. മുമ്പത്തെ കണ്ടെത്തലുകൾ സ്ഥിരീകരിക്കുന്നു (10), വാഹനം ചികിത്സിക്കുന്ന ച ow / പാലറ്റബിൾ എലികൾ കുറഞ്ഞ രുചികരമായ ച ow ലഭിക്കാൻ പ്രവർത്തിക്കാനുള്ള പ്രചോദനം കുറച്ചിട്ടുണ്ട്, ഇത് ബ്രേക്ക്‌പോയിന്റ് കുറയുകയും ച / / ച ow എലികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ പുറപ്പെടുവിക്കുന്ന മൊത്തം പ്രതികരണങ്ങളിൽ കുറവുണ്ടാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.10) (ചിത്രം S5). R121919 പ്രീ ട്രീറ്റ്മെന്റ് (20 mg / kg, ച ow ഹൈപ്പോഫാഗിയ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനും, ഭക്ഷ്യയോഗ്യമായ ഭക്ഷണ ഹൈപ്പർഫാഗിയ കുറയ്ക്കുന്നതിനും ആൻജിയോജനിക് പോലുള്ള സ്വഭാവം കുറയ്ക്കുന്നതിനും ഫലപ്രദമായ അളവ്) ച control നിയന്ത്രണങ്ങളിൽ ഫലപ്രദമല്ലാത്ത ഒരു ഡോസിൽ ഡയറ്റ്-സൈക്കിൾ എലികളിലെ പുരോഗമന-അനുപാത പ്രകടനത്തിലെ അപര്യാപ്തതകളെ തിരഞ്ഞെടുത്തു. (ബ്രേക്ക്‌പോയിൻറ്: ഡയറ്റ് ഷെഡ്യൂൾ × മയക്കുമരുന്ന്: F1,15 = 8.17, P <0.02; ആകെ പ്രതികരണങ്ങൾ: ഡയറ്റ് ഷെഡ്യൂൾ × മയക്കുമരുന്ന്: F1,15 = 9.14, P <0.01; ചിത്രം. 2B, ഇടത്തെ). പോസ്റ്റിംഗെസ്റ്റീവ് സംതൃപ്തി കുറച്ചുകൊണ്ട് ആർ‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് ച ow / പാലറ്റബിൾ എലികളിലെ പ്രകടനം സുഗമമാക്കി എന്ന ഇതര വ്യാഖ്യാനത്തിനെതിരെ, സെഷനിലേക്ക് എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് മിനിറ്റ് നേരത്തേ പ്രതികരിക്കുന്നതിലെ അപര്യാപ്തതകളെ R121919 തടഞ്ഞു (ഡയറ്റ് ഷെഡ്യൂൾ × മയക്കുമരുന്ന്: F1,15 = 2.55, P <0.05) (ചിത്രം. 2ബി വലത്). അതിനാൽ, CRF1 പുരോഗമന അനുപാതത്തിലെ പ്രചോദനാത്മക കുറവുകളെ റിസപ്റ്റർ എതിരാളി മൂർച്ഛിപ്പിച്ചു, ഇടയ്ക്കിടെയുള്ളതും ഉയർന്ന രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്കുള്ള ആക്‌സസ്സിൽ നിന്നും പിന്മാറുന്ന മൃഗങ്ങളിൽ കാണപ്പെടുന്ന കുറഞ്ഞ മുൻഗണനയുള്ള ഗസ്റ്റേറ്ററി റീഇൻഫോർസറുകളോട് പ്രതികരിക്കുന്നു.
രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിൽ നിന്ന് പിന്മാറുന്നത് സമ്മർദ്ദവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട എക്സ്ട്രാഹൈപോത്തലാമിക് സിആർഎഫ് സംവിധാനത്തെ സജീവമാക്കുമെന്ന അനുമാനത്തെ പരീക്ഷിക്കുന്നതിന്, അമിഗഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിലെ സിആർഎഫ് എം‌ആർ‌എൻ‌എ, പെപ്റ്റൈഡ് എന്നിവയുടെ അളവ് യഥാക്രമം ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് തത്സമയ പി‌സി‌ആറും ആർ‌ഐ‌എയും അളന്നു. എലികൾ 7 ആഴ്ച ഡയറ്റ്-സൈക്കിൾ ചെയ്യുകയോ അല്ലെങ്കിൽ തുടർച്ചയായി ഭക്ഷണം കൊടുക്കുകയോ ചെയ്തു. അനസ്തേഷ്യയ്ക്കും ശിരഛേദം ചെയ്യലിനും ശേഷം, അമിഗ്ഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിൽ നിന്ന് മസ്തിഷ്ക പഞ്ചുകൾ ശേഖരിക്കപ്പെട്ടു. ച ow / പാലറ്റബിൾ എലികളിലെ രുചികരമായ ഭക്ഷണം പിൻവലിക്കുന്നത് ച ow / ച ow എലികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ അമിഗ്ഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിൽ സിആർഎഫ് എം‌ആർ‌എൻ‌എ പ്രകടനത്തിൽ അഞ്ച് മടങ്ങ് വർദ്ധനവുണ്ടാക്കി (ചിത്രം. 3A). നേരെമറിച്ച്, രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്കുള്ള പുതുക്കിയ പ്രവേശനത്തോടെ സിആർഎഫ് എം‌ആർ‌എൻ‌എ നിയന്ത്രണം പോലുള്ള തലങ്ങളിലേക്ക് മടങ്ങി (F2,19 = 6.97, P <0.01). ച ow / പാലറ്റബിൾ എലികൾ ഒരുതവണ മാത്രം സൈക്കിൾ ചവിട്ടിയപ്പോൾ അമിഗ്ഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിലെ സിആർഎഫ് എം‌ആർ‌എൻ‌എ പ്രകടനത്തിൽ മാറ്റമുണ്ടായില്ല (ച ow / ച vs. വേഴ്സസ് ച ow / പാലറ്റബിൾ: 5.5 ± 2.2 വേഴ്സസ് 6.3 ± 1.7 എൻ‌എസ്), സിആർഎഫിന്റെ പുരോഗമന നിയമനത്തെ പിന്തുണയ്ക്കുന്നു. CRF1 ഭക്ഷണത്തിന്റെ നിശിത ഫലത്തേക്കാൾ, ഡയറ്റ് ഹിസ്റ്ററി അനുസരിച്ച് സിസ്റ്റങ്ങൾ. കൂടാതെ, സിആർഎഫ് എം‌ആർ‌എൻ‌എ എക്സ്പ്രഷൻ ന്യൂക്ലിയസ് അക്കുമ്പെൻസ്, പ്രീഫ്രോണ്ടൽ കോർ‌ടെക്സ് അല്ലെങ്കിൽ ഇൻസുലാർ കോർ‌ടെക്സ് എന്നിവയിൽ മാറ്റമുണ്ടായില്ല, ഇത് കണ്ടെത്തലുകളുടെ പ്രാദേശിക സവിശേഷതയെ പിന്തുണയ്ക്കുന്നു (ചിത്രം S6). രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, ഹൈപ്പോഥലാമസിലെ പാരവെൻട്രിക്കുലാർ ന്യൂക്ലിയസിലോ ച ow / പാലറ്റബിൾ എലികളിലെ അതേ പിൻവലിക്കൽ സമയ പോയിന്റിൽ കോർട്ടികോസ്റ്റെറോൺ രക്തചംക്രമണത്തിലോ CRF mRNA എക്സ്പ്രഷനിൽ കാര്യമായ മാറ്റങ്ങളൊന്നും കണ്ടെത്തിയില്ല.അത്തിപ്പഴം. S6, S7 എന്നിവ), ഹൈപ്പോഥലാമിക് എന്നതിലുപരി അമിഗ്‌ഡലറിൽ മാറ്റം വരുത്തുന്നു എന്ന സിദ്ധാന്തം നിർദ്ദേശിക്കുന്നു, സിആർഎഫ് സ്ട്രെസ് സിസ്റ്റങ്ങൾ ബിഹേവിയറൽ അഡാപ്റ്റേഷനുകളെ ഏകദേശം കീഴടക്കി. മാത്രമല്ല, മൃഗങ്ങളുടെ അമിഗ്ഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിലെ സിആർഎഫ് പെപ്റ്റൈഡ് ഇമ്യൂണോർ ആക്റ്റിവിറ്റി, രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിൽ നിന്ന് പിൻ‌മാറിയത് ച ow- തീറ്റ മൃഗങ്ങളെ അപേക്ഷിച്ച് 70% കൂടുതലാണ്, പക്ഷേ രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്ക് പ്രവേശിച്ച് ച ow- തീറ്റ നിയന്ത്രണ നിലയിലേക്ക് മടങ്ങി (F2,24 = 4.01, P <0.01) (ചിത്രം. 3B). അതിനാൽ, രുചികരമായ ഭക്ഷണം പിൻവലിക്കുന്നത് അമിഗ്ഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിലെ സമ്മർദ്ദവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട സിആർഎഫ് പെപ്റ്റൈഡ് സംവിധാനത്തെ സജീവമാക്കി, ഇത് മയക്കുമരുന്ന്, എഥനോൾ പിൻവലിക്കൽ മോഡലുകളിലെ കണ്ടെത്തലുകൾക്ക് സമാനമാണ് (7, 8). കാരണം, രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്കുള്ള പുതുക്കിയ പ്രവേശനം അമിഗ്ഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിൽ എക്സ്ട്രാഹൈപോത്തലാമിക് സിആർഎഫ് സിസ്റ്റം സജീവമാക്കൽ കുറഞ്ഞു, അതിൽ സിആർഎഫ് സജീവമാക്കൽ ഉത്കണ്ഠയുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു (16), വർത്തമാനത്തിന്റെ വിപരീത ഫലങ്ങളെ ലഘൂകരിക്കുന്നതിലൂടെ രുചികരമായ ഭക്ഷണം നെഗറ്റീവ് ശക്തിപ്പെടുത്തുന്ന സ്വഭാവസവിശേഷതകൾ നേടിയെടുക്കുമെന്ന് നിലവിലെ ഫലങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു (17).
രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിൽ നിന്ന് എലികൾ പിന്മാറുന്നു എന്ന സിദ്ധാന്തം പരിശോധിക്കുന്നതിന് സിആർ‌എഫിനോടുള്ള സംവേദനക്ഷമത വർദ്ധിച്ചേക്കാം1 എമിറ്റോൾ പിൻവലിക്കൽ സമയത്ത് സംഭവിക്കുന്ന അമിഗ്ഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിലെ γ- അമിനോബ്യൂട്ടിക് ആസിഡ് (GABA) സിഗ്നലിംഗിന്റെ എതിരാളി മോഡുലേഷൻ (18), സ്ലൈസ് തയ്യാറാക്കലിൽ അമിഗ്ഡാല ന്യൂറോണുകളുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിന്റെ GABAergic ട്രാൻസ്മിഷനിൽ R121919 ന്റെ സ്വാധീനം ഞങ്ങൾ പരിശോധിച്ചു. പുരുഷ വിസ്താർ എലികൾ (n = 14) 7 ആഴ്ചകളായി ഡയറ്റ്-സൈക്കിൾ ചെയ്യുകയും പാലറ്റബിൾ ച ow യിലേക്ക് മാറിയതിന് ശേഷം ബലിയർപ്പിക്കുകയും ചെയ്തു. അമിഗ്ഡാല സിനാപ്‌സുകളുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിലെ ബേസൽ ജി‌എ‌എ‌ആർ‌ജിക് ട്രാൻസ്മിഷൻ ഭക്ഷണ ചരിത്രവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട് വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരുന്നില്ല (n = 23 സെല്ലുകൾ) GABA- ഇൻ‌ഹിബിറ്ററി പോസ്റ്റ്നാപ്റ്റിക് പൊട്ടൻ‌ഷ്യലുകൾ (ഐ‌പി‌എസ്‌പി) ആവിഷ്കരിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്ന എല്ലാ ഉത്തേജക തീവ്രതകളിലുടനീളം. എന്നിരുന്നാലും, R20 (121919 μM) ഉള്ള 1 മിനിറ്റ് സൂപ്പർഫ്യൂഷൻ, GABA- യിൽ കൂടുതൽ കുറവു വരുത്തിAച ow / പാലറ്റബിൾ എലികളുടെ അമിഗ്ഡാല ന്യൂറോണുകളുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിലെ ഐ‌പി‌എസ്‌പികൾ (M ± SEM: 30 ± 6%, n = 9 സെല്ലുകൾ) ച ow- ഫെഡ് നിയന്ത്രണങ്ങളേക്കാൾ (M ± SEM: 12 ± 6%, P <0.05, n = 11 സെല്ലുകൾ) (ചിത്രം. 4). ഒരു 30 മി. വാഷ out ട്ട് കാലയളവിനെത്തുടർന്ന്, രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളുടെയും ഐ‌പി‌എസ്‌പികൾ സമാനവും അടിസ്ഥാനപരവുമായ തലങ്ങളിലേക്ക് മടങ്ങി. അതിനാൽ, അമിഗ്ഡാല CRF-CRF ന്റെ അമിത പ്രവർത്തനവുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു1 സിസ്റ്റവും എഥനോൾ പിൻവലിക്കൽ സമയത്ത് കാണുന്ന ഫലങ്ങളും (18), ഡയറ്റ്-സൈക്കിൾ എലികൾ ഒരു സിആർഎഫിന്റെ തടസ്സം സൃഷ്ടിക്കുന്ന ഫലങ്ങളോട് വർദ്ധിച്ച സംവേദനക്ഷമത കാണിച്ചു1 അമിഗ്ഡാല GABAergic ട്രാൻസ്മിഷന്റെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിലെ റിസപ്റ്റർ എതിരാളി.
സംവാദം
സമ്മർദവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട എക്സ്ട്രാഹൈപോത്തലാമിക് സിആർഎഫ്-സി‌ആർ‌എഫിലെ ഇടയ്ക്കിടെയുള്ളതും വിപുലമായതുമായ ആക്സസ് ഒരു ചരിത്രം പുരോഗമനപരവും പ്രചോദനാത്മകവുമായ പ്രസക്തമായ ന്യൂറോഡാപ്റ്റേഷനുകളിലേക്ക് നയിക്കുന്നു എന്നതിന് കൂട്ടായ ഫലങ്ങൾ പ്രവർത്തനപരമായ തെളിവുകൾ നൽകുന്നു.1 സിസ്റ്റങ്ങൾ. പ്രത്യേകിച്ചും, സെലക്ടീവ് CRF1 റിസപ്റ്റർ എതിരാളി R121919 ഭക്ഷണ-സൈക്കിൾ എലികളിലെ ഭക്ഷണത്തെ വ്യത്യസ്തമായും തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നതിലും ബാധിക്കുന്നു, പതിവായി ച ow കഴിക്കുന്നത് വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും പുതിയ ആക്സസ് ലഭിക്കുമ്പോൾ ഉയർന്ന രുചികരമായ ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്നത് കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. CRF1 രുചികരമായ ഭക്ഷണക്രമത്തിൽ നിന്ന് പിന്മാറുന്നതിനിടയിൽ കണ്ടുവരുന്ന ഉത്കണ്ഠ പോലുള്ള പെരുമാറ്റത്തെയും പ്രചോദനക്കുറവുകളെയും റിസപ്റ്റർ എതിരാളി തിരഞ്ഞെടുത്തു. രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്കുള്ള പ്രവേശനം പിൻവലിക്കുന്നത് സിആർഎഫ് ജീനും അമിഗ്ഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിലെ പെപ്റ്റൈഡ് പ്രകടനവും വർദ്ധിപ്പിച്ചു, ഇത് പുതിയ ആക്സസ് ഉപയോഗിച്ച് ഇല്ലാതാക്കി. കൂടാതെ, ഡയറ്റ്-സൈക്കിൾഡ് എലികൾ ഒരു സിആർഎഫിന്റെ തടസ്സം സൃഷ്ടിക്കുന്ന ഫലങ്ങളോട് കൂടുതൽ സംവേദനക്ഷമത കാണിക്കുന്നു1 അമിഗ്ഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിലെ GABAergic ട്രാൻസ്മിഷനെക്കുറിച്ചുള്ള റിസപ്റ്റർ എതിരാളി, അമിഗ്ഡാല CRF-CRF ന്റെ അമിത സജീവമാക്കൽ നിർദ്ദേശിക്കുന്നു1 സിസ്റ്റം. പുതുക്കിയ പ്രവേശനത്തിന് ശേഷം രുചികരമായ ഭക്ഷണം അമിതമായി കഴിക്കുന്നത് സിആർഎഫിന്റെ വർദ്ധിച്ച ആവിഷ്കാരവും സി‌ആർ‌എഫിന് ഇലക്ട്രോഫിസിയോളജിക്കൽ സെൻ‌സിറ്റിവിറ്റിയും ആയി കാണപ്പെടുന്ന, ഇപ്പോൾ പൂർത്തിയാക്കിയ പിൻവലിക്കൽ കാലയളവിലെ സിആർഎഫ് സിസ്റ്റം സജീവമാക്കിയതിന്റെ ഫലമായി ഉണ്ടായേക്കാം.1 അമിഗ്ഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിലെ റിസപ്റ്റർ ഉപരോധം. CRF1 രുചികരമായ ഭക്ഷണ പ്രവേശനത്തിന് തൊട്ടുമുമ്പുള്ള എതിരാളി പ്രീ ട്രീറ്റ്മെന്റ് അതുവഴി തുടക്കത്തിൽ നിലവിലുള്ള CRF-CRF നെ എതിർക്കുന്നു.1 പിൻവലിക്കൽ സിസ്റ്റം അമിതമായി സജീവമാക്കുന്നു. ചികിത്സയില്ലാത്ത മൃഗങ്ങളിൽ കാണപ്പെടുന്ന രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിന്റെ ഹ്രസ്വ സമയ ഗതി (10) ഇന്നത്തെ പഠനത്തിൽ കാണുന്നത് പോലെ, രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്കുള്ള പ്രവേശനം വീണ്ടെടുക്കിക്കഴിഞ്ഞാൽ, സിആർഎഫ് പെപ്റ്റൈഡിന്റെ ആവിഷ്കാരം, പ്രകാശനം, ഫലങ്ങൾ എന്നിവ സാധാരണ നിലയിലാക്കുന്ന സമയ ഗതിയെ പ്രതിഫലിപ്പിച്ചേക്കാം. അതിനാൽ, ഇടയ്ക്കിടെ രുചികരമായ ഭക്ഷണരീതികൾ കഴിക്കുന്നത് മസ്തിഷ്ക റിവാർഡ് സിസ്റ്റങ്ങളിൽ ഒരു അലോസ്റ്റാറ്റിക് ഷിഫ്റ്റിനെ പ്രേരിപ്പിച്ചേക്കാം, റിവാർഡ് വിരുദ്ധ CRF-CRF നിയമനം1 അമിഗ്ഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിലെ സിസ്റ്റങ്ങൾ.
ഈ ഫലങ്ങൾ നിർബന്ധിത ഭക്ഷണത്തിന് മാത്രമല്ല, പൊതുവെ പ്രചോദനത്തിനും കാരണമാകുന്നു. ഹെഡോണിക് സിസ്റ്റങ്ങളുടെ ആവർത്തിച്ചുള്ള സജീവമാക്കൽ തലച്ചോറിലെ എതിരാളിയെപ്പോലുള്ള പ്രക്രിയകളെ (അതായത്, സിആർഎഫിന്റെ നിയമനം) ഉയർത്തി1 സർക്യൂട്ട്) റിവാർഡ് ട്രാൻസ്മിറ്റർ സിസ്റ്റങ്ങളിലെ ലളിതമായ പ്രവർത്തന നഷ്ടത്തിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമായിരുന്നു. സിസ്റ്റത്തിനിടയിലുള്ള അത്തരം ന്യൂറോഡാപ്റ്റേഷനുകൾ (19) ദുരുപയോഗത്തിന്റെ എല്ലാ പ്രധാന മരുന്നുകളെയും ആശ്രയിക്കുന്നതിനുള്ള പരിവർത്തന വേളയിലും സംഭവിക്കുന്നു (7, 8). നിലവിലെ പഠനത്തിൽ മയക്കുമരുന്ന് ഇതര ഉത്തേജകങ്ങളുടെ പൊതുവൽക്കരണം സൂചിപ്പിക്കുന്നത് കാലക്രമേണ ഹെഡോണിക് ഉത്തേജനങ്ങളുടെ തീവ്രതയിൽ ആവർത്തിച്ചുള്ള വൈരുദ്ധ്യങ്ങൾ അനുഭവിക്കുന്ന വ്യക്തികളിൽ പ്രചോദനാത്മക പ്രക്രിയകൾ അസ്വസ്ഥമാകുമെന്നാണ് (20). അഡാപ്റ്റീവായി, അത്തരം പ്രക്രിയകൾ energy ർജ്ജ-സാന്ദ്രമായ, ഉയർന്ന പ്രതിഫലമുള്ള ഭക്ഷണങ്ങളിലേക്ക് ഭക്ഷണം തേടുന്നതും ഉപഭോഗ സ്വഭാവവും മാറ്റിയേക്കാം, അതേസമയം energy ർജ്ജം കുറവുള്ളതും കുറഞ്ഞ പ്രതിഫലം നൽകുന്നതുമായ ഭക്ഷണങ്ങൾ (അല്ലെങ്കിൽ നോൺ-ഫുഡുകൾ) നേടാനുള്ള ശ്രമങ്ങളെ വിലകുറച്ച് കാണിക്കുന്നു. (ഉദാ. പ്രെഡേറ്റർ എക്സ്പോഷർ, പരിമിതമായ സമയം, energy ർജ്ജ വിഭവങ്ങൾ) എന്നിരുന്നാലും, ഇന്നത്തെ പരിതസ്ഥിതിയിൽ, അതേ പ്രക്രിയകൾ കുറഞ്ഞ രുചിയുള്ളതും എന്നാൽ കൂടുതൽ പോഷകഗുണമുള്ളതുമായ ചിലവിൽ അമിതവണ്ണത്തെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്ന ഭക്ഷണങ്ങൾ കഴിക്കാൻ ഇടയാക്കും.
അങ്ങനെ, CRF- ലെ ആസക്തി പോലുള്ള മാറ്റങ്ങൾ1 സിസ്റ്റങ്ങൾ ഡ്രൈവ് ചെയ്യാൻ സഹായിച്ചേക്കാം (i) energy ർജ്ജ-സാന്ദ്രമായ രുചികരമായ ഭക്ഷണങ്ങൾ കഴിക്കുന്നത്, (ii) ആരോഗ്യകരമായ ഇതരമാർഗങ്ങളുടെ അപര്യാപ്തത, കൂടാതെ (Iii) രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിലേക്കുള്ള പ്രവേശനം തടയുമ്പോൾ ഉണ്ടാകുന്ന അനുബന്ധ നെഗറ്റീവ് വൈകാരികാവസ്ഥ (4, 5, 10-12, 17). മനുഷ്യാവസ്ഥയിലേക്ക് വിവർത്തനം ചെയ്യപ്പെടുന്ന, സിആർഎഫ് സിസ്റ്റം ആക്റ്റിവേഷൻ അമിതവണ്ണത്തിലും അനുബന്ധ ഭക്ഷണ ക്രമക്കേടുകളിലുമുള്ള പുന rela സ്ഥാപന ഭക്ഷണത്തെയും രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിൽ നിന്ന് ചാക്രികമായി വിട്ടുനിൽക്കുന്നതിന്റെ മറ്റ് നെഗറ്റീവ് മോട്ടിവേഷണൽ സെക്വലേയും പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കാം.
വസ്തുക്കളും രീതികളും
വിഷയങ്ങൾ.
പുരുഷ വിസ്താർ എലികൾ (n = 155, 180-230 g, 45 ദിവസം പഴക്കമുള്ളത്) ചാൾസ് നദിയിൽ നിന്ന് ലഭിക്കുകയും വയർ-ടോപ്പ്, പ്ലാസ്റ്റിക് കൂടുകളിൽ (19 × 10.5 × 8 ഇഞ്ച്) ഒരു 12 h: 12 h റിവേഴ്സ് ലൈറ്റ് സൈക്കിളിൽ (10 : 00 h ലൈറ്റുകൾ ഓഫ്), ഈർപ്പം- (60%), താപനില നിയന്ത്രിത (22 ° C) വിവറിയം. എലികൾക്ക് ധാന്യം അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള എലി ച ow [ഹാർലാൻ ടെക്ലാഡ് എൽ‌എം-എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് ഡയറ്റ് എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്: എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്% (കിലോ കലോറി) കാർബോഹൈഡ്രേറ്റ്, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് കൊഴുപ്പ്, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്% പ്രോട്ടീൻ, മെറ്റബോളിസബിൾ എനർജി എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് കലോ / എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് പരീക്ഷണങ്ങളുടെ ആരംഭം. ലബോറട്ടറി മൃഗങ്ങളുടെ പരിപാലനത്തിനും ഉപയോഗത്തിനുമുള്ള നാഷണൽ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓഫ് ഹെൽത്ത് ഗൈഡുമായി (എൻ‌ഐ‌എച്ച് പ്രസിദ്ധീകരണ നമ്പർ 485 - 7012, പുതുക്കിയ 65) “ലബോറട്ടറി മൃഗസംരക്ഷണത്തിന്റെ തത്വങ്ങൾ” (http://www.nap.edu/readingroom) / ബുക്ക്‌സ്ബ്രാറ്റുകൾ) കൂടാതെ സ്ക്രിപ്സ് റിസർച്ച് ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ടിന്റെ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂഷണൽ ആനിമൽ കെയർ ആന്റ് യൂസ് കമ്മിറ്റി അംഗീകരിച്ചു.
മരുന്നുകൾ.
ചെൻ മറ്റുള്ളവയിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ R121919 സമന്വയിപ്പിച്ചു. (21). R121919 ഒരു ഉയർന്ന ബന്ധമാണ് (Ki = 3.5 nM) തിരഞ്ഞെടുത്ത CRF1 മറ്റ് പല സി‌ആർ‌എഫിനേക്കാളും മികച്ച ഫിസിയോകെമിക്കൽ ഗുണങ്ങളുള്ള എതിരാളി1 എതിരാളികൾ (ഉദാ. ലോഗ്പിയും ലോഗ്ഡിയും കുറയുന്നു, വർദ്ധിച്ച ജലത്തിൽ ലയിക്കുന്നവ) (13). പരിശോധനയ്‌ക്കായി, R121919 ആദ്യം 1 M HCl (അന്തിമ വോളിയത്തിന്റെ 10%) ൽ ലയിപ്പിക്കുകയും പിന്നീട് 20% (wt / vol) 2- ഹൈഡ്രോക്സിപ്രോപ്പിൾ- cy- സൈക്ലോഡെക്സ്റ്റ്രിൻ (സിഗ്മ-ആൽ‌ഡ്രിക്ക്) ന്റെ അവസാന വാഹനത്തിലേക്ക് ലയിപ്പിക്കുകയും ചെയ്തു. NaOH മുതൽ pH 4.5 വരെ. R121919 പരിഹാരം 2 mL / kg എന്ന അളവിൽ sc (sc) നൽകി.
പരസ്യ ലിബിറ്റ് ഡയറ്റ് ഇതരമാറ്റം.
അക്ലിമേഷനുശേഷം, എലികളെ ഭക്ഷണം കഴിക്കൽ, ശരീരഭാരം, തീറ്റയുടെ കാര്യക്ഷമത എന്നിവയുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്ന രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളായി തിരിച്ചിട്ടുണ്ട്. മുമ്പത്തെ 3-4 ദിവസങ്ങളിൽ നിന്ന്. ഒരു ഗ്രൂപ്പിന് ആഴ്ചയിൽ ഒരു ച ow ഡയറ്റ് (“ച ow”) പരസ്യ ലിബിതം 7 ദിവസങ്ങൾ (ച ow / ച ow) നൽകി, രണ്ടാമത്തെ ഗ്രൂപ്പിന് ഓരോ ആഴ്ചയും 5 ദിവസത്തേക്ക് ച ad പരസ്യ ലിബിതം നൽകി, തുടർന്ന് 2 ദിവസത്തെ പരസ്യ ലിബിറ്റം ആക്സസ് വളരെ ആകർഷണീയമായ , ചോക്ലേറ്റ് സുഗന്ധമുള്ള, ഉയർന്ന സുക്രോസ് ഭക്ഷണക്രമം (“പാലറ്റബിൾ”; ച ow / പാലറ്റബിൾ). പോഷകസമൃദ്ധമായ ഭക്ഷണക്രമം പോഷകസമൃദ്ധമായ, ചോക്ലേറ്റ്-സുഗന്ധമുള്ള, ഉയർന്ന സുക്രോസ് (50% കിലോ കലോറി), AIN-76A അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ഭക്ഷണമാണ്, ഇത് മാക്രോ ന്യൂട്രിയന്റ് അനുപാതത്തിലും ച ow ഭക്ഷണവുമായി dens ർജ്ജ സാന്ദ്രതയിലും താരതമ്യപ്പെടുത്താവുന്നതാണ് [ടെസ്റ്റ് ഡയറ്റ്; ചോക്ലേറ്റ്-ഫ്ലേവർഡ് ഫോർമുല 5TUL: 66.8% (kcal) കാർബോഹൈഡ്രേറ്റ്, 12.7% കൊഴുപ്പ്, 20.5% പ്രോട്ടീൻ, മെറ്റബോളിസബിൾ എനർജി 3.48 kcal / g; മുൻ‌ഗണന വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് 45-mg കൃത്യമായ ഭക്ഷണ ഉരുളകളായി രൂപപ്പെടുത്തി (22, 23)]. സംക്ഷിപ്തതയ്ക്കായി, ഓരോ ആഴ്‌ചയിലെയും ആദ്യത്തെ 5 ദിവസങ്ങളും (ച ow മാത്രം) അവസാന 2 ദിവസവും (പരീക്ഷണ ഗ്രൂപ്പിനനുസരിച്ച് ച ow അല്ലെങ്കിൽ രുചികരമായത്) എല്ലാ പരീക്ഷണങ്ങളിലും C, P ഘട്ടങ്ങളായി പരാമർശിക്കുന്നു. ഒരേസമയം ഭക്ഷണരീതികൾ ലഭ്യമല്ല. ച ow ഡയറ്റ് ഒന്നുകിൽ ഹാർലൻ ടെക്ലാഡ് LM-485 ഡയറ്റ് 7012 [65% (കിലോ കലോറി) കാർബോഹൈഡ്രേറ്റ്, 13% കൊഴുപ്പ്, 21% പ്രോട്ടീൻ, മെറ്റബോളിസബിൾ എനർജി 341 cal / 100 g] അല്ലെങ്കിൽ 5T- % (kcal) കാർബോഹൈഡ്രേറ്റ്, 4% കൊഴുപ്പ്, 5% പ്രോട്ടീൻ, മെറ്റബോളിസബിൾ എനർജി 65.5 cal / 10.4 g; ടെസ്റ്റ് ഡയറ്റ്]. മുമ്പത്തെ പഠനങ്ങളെപ്പോലെ, തീറ്റയിലും ഉയർന്ന പ്ലസ്-മാർഗ് പരീക്ഷണങ്ങളിലും ഹാർലൻ ടെക്ലാഡ് എൽ‌എം-എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് ച ow ഉപയോഗിച്ചു (11), ടെസ്റ്റ് ഡയറ്റ് 5TUM ച ow (10) പുരോഗമന അനുപാതം, സിആർഎഫ് എം‌ആർ‌എൻ‌എ, സിആർഎഫ് പെപ്റ്റൈഡ് ഉള്ളടക്കം, കോർട്ടികോസ്റ്റെറോൺ ആർ‌ഐ‌എ, ഇലക്ട്രോഫിസിയോളജിക്കൽ പരീക്ഷണങ്ങൾ എന്നിവയിൽ ഉപയോഗിച്ചു.
മുമ്പ് പ്രസിദ്ധീകരിച്ചതുപോലെ (10), ആപേക്ഷിക ഭക്ഷണ മുൻ‌ഗണനകൾ, രണ്ടാമത്തെ ഭക്ഷണവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട് ആദ്യ ഭക്ഷണത്തിന്റെ ദൈനംദിന ഉപഭോഗത്തിന്റെ (കിലോ കലോറി) ശതമാനമായി കണക്കാക്കുന്നത് ഇനിപ്പറയുന്നവയാണ്: 5TUL ചോക്ലേറ്റ് ഡയറ്റ് (പഞ്ചസാര പാലറ്റബിൾ ഡയറ്റ്) വേഴ്സസ് ഹാർലൻ എൽ‌എം-എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് ച ow (എം ± സെം മുൻ‌ഗണന 485 ± 90.7%), 3.6TUL ചോക്ലേറ്റ് ഡയറ്റ് (പഞ്ചസാര പാലറ്റബിൾ ഡയറ്റ്) വേഴ്സസ് 5TUM ച ow ഡയറ്റ് (M ± SEM മുൻ‌ഗണന 5 ± 91.2%).
എലവേറ്റഡ് പ്ലസ്-മെയ്സ്.
കോട്ടോൺ മറ്റുള്ളവയിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ എലവേറ്റഡ് പ്ലസ്-മാർഗ് ടെസ്റ്റ് നടത്തി. (24). ച ow / പാലറ്റബിൾ എലികൾ കുറഞ്ഞത് 7 ആഴ്ചയെങ്കിലും ഡയറ്റ്-സൈക്കിൾ ചെയ്തിരുന്നു, തുടർന്ന് വാഹനം അല്ലെങ്കിൽ 20 mg / kg R121919 (−1 h, sc) ഉപയോഗിച്ച് പ്രീട്രീറ്റ് ചെയ്യുകയും പാലറ്റബിൾ ഡയറ്റിൽ നിന്ന് ച ow യിലേക്ക് മാറ്റിയതിനുശേഷം 5-9 h പരീക്ഷിക്കുകയും ചെയ്തു Phase C ഘട്ടം). വിഷയങ്ങൾക്കിടയിലുള്ള രൂപകൽപ്പനയിൽ ഒരേസമയം ച ow / ച control നിയന്ത്രണ എലികളെ പരീക്ഷിച്ചു (n = 47). പരിശോധന സമയം വരെ ച ow ഡയറ്റ് പരസ്യമായി ലഭ്യമാണ്. കൂടുതൽ വിവരങ്ങൾക്ക്, കാണുക എസ്‌ഐ വാചകം.
ഭക്ഷണത്തിനായുള്ള ശക്തിപ്പെടുത്തലിന്റെ പുരോഗമന-അനുപാത ഷെഡ്യൂൾ.
കോട്ടോൺ മറ്റുള്ളവയിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ ഭക്ഷണത്തിനായുള്ള ശക്തിപ്പെടുത്തലിന്റെ പുരോഗമന-അനുപാത ഷെഡ്യൂൾ നടപ്പാക്കി. (10). പരീക്ഷണത്തിലുടനീളം മൃഗങ്ങൾക്ക് അവരുടെ വീട്ടിലെ കൂടുകളിൽ പരസ്യ ലിബിറ്റം എ / ഐ ച ow (എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് എക്സ്ട്രൂഡഡ് പെല്ലറ്റുകൾ) ലഭിച്ചു. എക്സ്ട്രൂഡ് ചെയ്ത ഹോം കേജ് ച ow ഡയറ്റിന് സമാനമായ 5-mg ച ow- പ്രിസിഷൻ ഉരുളകളായിരുന്നു ഭക്ഷ്യ ശക്തിപ്പെടുത്തലുകൾ. 45 മിനിറ്റിനുള്ള വിഷയങ്ങൾ ഒരു അനുപാതം പൂർത്തിയാക്കാത്തപ്പോൾ സെഷനുകൾ അവസാനിച്ചു, അവസാനമായി പൂർത്തിയാക്കിയ അനുപാതം ബ്രേക്ക്‌പോയിന്റായി നിർവചിച്ചിരിക്കുന്നു. ച ow / പാലറ്റബിൾ എലികൾ കുറഞ്ഞത് 14 ആഴ്ചയെങ്കിലും ഡയറ്റ്-സൈക്കിൾ ചെയ്യുകയും പിന്നീട് R7 (−121919 h, sc) ഉപയോഗിച്ച് പ്രീട്രീറ്റ് ചെയ്യുകയും പാലറ്റബിൾ ഡയറ്റിൽ നിന്ന് ച ow (P → C ഘട്ടം) ലേക്ക് മാറ്റുകയും ചെയ്തു. വിഷയങ്ങൾക്കിടയിലുള്ള രൂപകൽപ്പനയിൽ ഒരേസമയം ച ow / ച control നിയന്ത്രണ എലികളെ പരീക്ഷിച്ചു (n = 17). R121919 (0, 20 mg / kg ശരീരഭാരം, sc) ഡോസുകൾ ഒരു വിഷയത്തിനുള്ളിൽ നൽകി, രണ്ട് ഡയറ്റ് സൈക്കിളുകളിലുടനീളം സമതുലിതമായ രൂപകൽപ്പന. കൂടുതൽ വിവരങ്ങൾക്ക്, കാണുക എസ്‌ഐ വാചകം.
ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് റിയൽ-ടൈം പി‌സി‌ആർ.
എലികൾ (n = 20) 7 ആഴ്ച ഡയറ്റ് സൈക്കിൾ ചെയ്തു, അനസ്തേഷ്യ നൽകി, രണ്ട് ഡയറ്റ് അവസ്ഥകളിൽ ശിരഛേദം ചെയ്തു (ഓരോ പ്രതിവാര ചക്രത്തിന്റെ 5, 7 ദിവസങ്ങൾ). മസ്തിഷ്ക മാട്രിക്സിൽ തലച്ചോറുകൾ വേഗത്തിൽ നീക്കംചെയ്യുകയും കൊറോണലായി മുറിക്കുകയും ചെയ്തു, അമിഗ്ഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസ്, ന്യൂക്ലിയസ് അക്കുമ്പെൻസ്, ഇൻസുലാർ കോർട്ടെക്സ്, പ്രീഫ്രോണ്ടൽ കോർട്ടെക്സ് പഞ്ചുകൾ എന്നിവ ഐസ് തണുത്ത ഘട്ടത്തിൽ ശേഖരിച്ചു. മൃഗങ്ങളുടെ ടിഷ്യൂകളിൽ നിന്ന് ആർ‌എൻ‌എ വേർതിരിച്ചെടുക്കുന്നതിനുള്ള സ്റ്റാൻ‌ഡേർഡ് പ്രോട്ടോക്കോൾ ഉപയോഗിച്ച് ഓരോ മസ്തിഷ്ക പഞ്ചിൽ നിന്നും ആകെ ആർ‌എൻ‌എ തയ്യാറാക്കി. മൊത്തം ആർ‌എൻ‌എ (1 μg) നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശപ്രകാരം ഒളിഗോ (ഡിടി) 20 ന്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ വിപരീതമായി പകർത്തി. 20 μM പ്രൈമറുകളും 0.5 mM MgCl ഉം ഉപയോഗിച്ച് 4-μL വോള്യത്തിൽ ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് RT-PCR പ്രതികരണങ്ങൾ നടത്തി.2. രണ്ടാമത്തെ ഡെറിവേറ്റീവ് രീതികളാൽ ഫലങ്ങൾ വിശകലനം ചെയ്യുകയും അനിയന്ത്രിതമായ യൂണിറ്റുകളിൽ പ്രകടിപ്പിക്കുകയും ചെയ്തു, റഫറൻസ് ജീനിന്റെ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലുകളിലേക്ക് സാധാരണമാക്കുകയും ചെയ്തു, സൈപ. ഒരു നിശ്ചിത സീക്വൻസിനായുള്ള എല്ലാ ആർ‌ടി-പി‌സി‌ആർ പ്രതികരണങ്ങളും ഒരേ റൺസിനുള്ളിലാണ് നടത്തിയത്. കൂടുതൽ വിവരങ്ങൾക്ക്, കാണുക എസ്‌ഐ വാചകം.
പെപ്റ്റൈഡ് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കലും CRF RIA.
എലികൾ (n = 25) കുറഞ്ഞത് 7 ആഴ്ചയെങ്കിലും ഡയറ്റ്-സൈക്കിൾ ചെയ്തു, രണ്ട് ഡയറ്റ് അവസ്ഥകളിൽ (ഓരോ പ്രതിവാര സൈക്കിളിന്റെ 5, 7 ദിവസങ്ങൾ) അനസ്തേഷ്യ നൽകി ശിരഛേദം ചെയ്തു. മസ്തിഷ്ക മാട്രിക്സിൽ തലച്ചോറുകൾ വേഗത്തിൽ നീക്കംചെയ്യുകയും കൊറോണലായി മുറിക്കുകയും ചെയ്തു, അമിഗ്ഡാല പഞ്ചുകളുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസ് ഒരു ഐസ് തണുത്ത ഘട്ടത്തിൽ ശേഖരിച്ചു. പെപ്റ്റൈഡ് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ ഇതിനകം സ്ഥാപിച്ച ഒരു നടപടിക്രമം പിന്തുടർന്നു (25). ടിഷ്യു സിആർഎഫ് പോലുള്ള രോഗപ്രതിരോധ ശേഷി സോറില്ല മറ്റുള്ളവരിൽ നിന്ന് രൂപകൽപ്പന ചെയ്ത സെൻസിറ്റീവ്, നിർദ്ദിഷ്ട സോളിഡ്-ഫേസ് ആർ‌ഐ‌എ ഉപയോഗിച്ച് കണക്കാക്കി. (26). കൂടുതൽ വിവരങ്ങൾക്ക്, കാണുക എസ്‌ഐ വാചകം.
കോർട്ടികോസ്റ്റെറോൺ RIA.
എലികൾ (n = 12) കുറഞ്ഞത് 7 ആഴ്ചയെങ്കിലും ഡയറ്റ്-സൈക്കിൾ ചെയ്തിരുന്നു, കൂടാതെ രണ്ട് ഭക്ഷണ സാഹചര്യങ്ങളിൽ (ഓരോ പ്രതിവാര ചക്രത്തിന്റെ 5, 7 ദിവസങ്ങൾ) വാൽ രക്തം സാമ്പിൾ ചെയ്തു. നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശപ്രകാരം (എം‌പി ബയോമെഡിക്കൽസ്, Inc.) വാണിജ്യപരമായി ലഭ്യമായ RIA കിറ്റ് ഉപയോഗിച്ചാണ് കോർട്ടികോസ്റ്റെറോൺ പോലുള്ള രോഗപ്രതിരോധ ശേഷിയുടെ പ്ലാസ്മ അളവ് നിർണ്ണയിച്ചത് (എം‌പി ബയോമെഡിക്കൽസ്, Inc.) (26). കൂടുതൽ വിവരങ്ങൾക്ക്, കാണുക എസ്‌ഐ വാചകം.
ഇലക്ട്രോഫിസിയോളജിക്കൽ പഠനങ്ങൾ
സ്ലൈസ് തയ്യാറാക്കൽ.
മുമ്പ് വിവരിച്ചതുപോലെ അമിഗ്ഡാല കഷ്ണങ്ങളുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസ് തയ്യാറാക്കി (27, 28) എലികളിൽ നിന്ന് (n = 7 / ഗ്രൂപ്പ്) കുറഞ്ഞത് 7 ആഴ്ചയെങ്കിലും ഡയറ്റ്-സൈക്കിൾ ചെയ്ത്, അനസ്തേഷ്യ നൽകി, രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിൽ നിന്ന് പിൻ‌വലിച്ചതിന് ശേഷം 2-3 h ശിരഛേദം ചെയ്തു. തലച്ചോറുകൾ അതിവേഗം നീക്കം ചെയ്യുകയും ഐസ്-തണുത്ത കൃത്രിമ സെറിബ്രോസ്പൈനൽ ദ്രാവകത്തിൽ (എസി‌എസ്എഫ്) 95% O ഉപയോഗിച്ച് വാതകം സ്ഥാപിക്കുകയും ചെയ്തു2 ഒപ്പം 5% CO2. കഷ്ണങ്ങൾ മുറിച്ചുമാറ്റി, ഏകദേശം 30 മിനുട്ട് ഇന്റർഫേസ് കോൺഫിഗറേഷനിൽ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു, പൂർണ്ണമായും വെള്ളത്തിൽ മുങ്ങി നിരന്തരം സൂപ്പർഫ്യൂസ് ചെയ്ത് warm ഷ്മളവും വാതകവുമായ എസി‌എസ്എഫ്. സൂപ്പർഫ്യൂസേറ്റിൽ അറിയപ്പെടുന്ന സാന്ദ്രത ലഭിക്കുന്നതിന് സ്റ്റോക്ക് സൊല്യൂഷനുകളിൽ നിന്ന് മരുന്നുകൾ എസി‌എസ്എഫിലേക്ക് ചേർത്തു. ഉപയോഗിച്ച 2-4 mL / min സൂപ്പർഫ്യൂഷൻ നിരക്കിൽ, മയക്കുമരുന്ന് സാന്ദ്രത 90 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ റിസർവോയർ സാന്ദ്രതയുടെ 2% വരെ എത്തുന്നു.
ഇലക്ട്രോഫിസിയോളജി.
നിരന്തരമായ വോൾട്ടേജ്- അല്ലെങ്കിൽ കറന്റ്-ക്ലാമ്പ് മോഡ് ഉപയോഗിച്ച് മൂർച്ചയുള്ള മൈക്രോപിറ്റുകളുള്ള അമിഗ്ഡാല ന്യൂറോണുകളുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസ് ഞങ്ങൾ രേഖപ്പെടുത്തി. മിക്ക ന്യൂറോണുകളും അവയുടെ വിശ്രമ മെംബ്രൻ സാധ്യതയ്ക്ക് സമീപമാണ് ഞങ്ങൾ സൂക്ഷിച്ചിരുന്നത്. ഒരു പ്രീഅംപ്ലിഫയർ ഉപയോഗിച്ച് ഡാറ്റ നേടുകയും പിക്ലാമ്പ് സോഫ്റ്റ്വെയർ ഉപയോഗിച്ച് പിന്നീടുള്ള വിശകലനത്തിനായി സംഭരിക്കുകയും ചെയ്തു. ഫാർമക്കോളജിക്കൽ ഇൻസുലേറ്റഡ് GABAA റിസപ്റ്റർ-മെഡിയേറ്റഡ് ഇൻ‌ഹിബിറ്ററി പോസ്റ്റ്നാപ്റ്റിക് പൊട്ടൻ‌ഷ്യലുകൾ (GABAAഗ്ലൂറ്റമേറ്റ് റിസപ്റ്റർ ബ്ലോക്കറുകളായ സി‌എൻ‌ക്യുഎക്സ്, എ‌പി‌വി, ഗാബ എന്നിവ സൂപ്പർഫ്യൂസ് ചെയ്യുന്നതിനിടയിൽ ഒരു ബൈപോളാർ ഉത്തേജക ഇലക്ട്രോഡ് വഴി അമിഗഡാലയുടെ കേന്ദ്ര ന്യൂക്ലിയസിനുള്ളിൽ പ്രാദേശികമായി ഉത്തേജിപ്പിച്ചാണ് -IPSP കൾ) ആവിഷ്കരിച്ചത്.B റിസപ്റ്റർ ബ്ലോക്കർ CGP 55845A. ഓരോ സെല്ലിനുമുള്ള പ്രതികരണ പാരാമീറ്ററുകൾ നിർണ്ണയിക്കാൻ, ഞങ്ങൾ ഒരു ഇൻപുട്ട്- output ട്ട്‌പുട്ട് പ്രോട്ടോക്കോൾ നടത്തി. പരമാവധി വ്യാപ്തി പുറത്തെടുക്കാൻ ആവശ്യമായ വോൾട്ടേജ് വരെ ഒരു ഐ‌പി‌എസ്‌പി ലഭ്യമാക്കുന്നതിന് ആവശ്യമായ ത്രെഷോൾഡ് കറന്റിൽ നിന്ന് ആരംഭിക്കുന്ന ഒരു പരിധി വരെ വൈദ്യുതധാരകൾ പ്രയോഗിച്ചു. തുല്യ ഘട്ടങ്ങളുടെ (ഉമ്മരപ്പടി, പകുതി-പരമാവധി, പരമാവധി) മൂന്ന് ഉത്തേജക തീവ്രതകളെ ഞങ്ങൾ 1-3 as ആയി സാധാരണമാക്കി. വോൾട്ടേജ്-കറന്റ് (VI) വളവുകൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നതിന് നിലവിലെ ഘട്ടങ്ങൾ (200-pA ഇൻക്രിമെന്റുകൾ, 750-ms ദൈർഘ്യം) ഹൈപ്പർപോളറൈസിംഗ്, ഡിപോലറൈസിംഗ് എന്നിവ പ്രയോഗിച്ചു. ക്ലാമ്പ്‌ഫിറ്റ് സോഫ്റ്റ്വെയർ ഉപയോഗിച്ച് ഞങ്ങൾ ആവിഷ്കരിച്ച ഐ‌പി‌എസ്‌പി ആംപ്ലിറ്റ്യൂഡുകളും ആറാമത്തെ പ്രതികരണങ്ങളും കണക്കാക്കി. സെലക്ടീവ് സി‌ആർ‌എഫുമായി സൂപ്പർ‌ഫ്യൂഷന് മുമ്പായി എല്ലാ നടപടികളും സ്വീകരിച്ചു1 റിസപ്റ്റർ എതിരാളി R121919 (1 μM), അതിന്റെ സൂപ്പർഫ്യൂഷൻ സമയത്ത് (20 മിനിറ്റ്), തുടർന്ന് കഴുകൽ (30 മിനിറ്റ്). കൂടുതൽ വിവരങ്ങൾക്ക്, കാണുക എസ്‌ഐ വാചകം.
സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കുകൾ.
ഗ്രൂപ്പ് താരതമ്യങ്ങൾ വിദ്യാർത്ഥികളുടെ ഉപയോഗിച്ചു t-ടെറ്റുകൾ (രണ്ട്-ഗ്രൂപ്പ് താരതമ്യങ്ങൾ) അല്ലെങ്കിൽ വേരിയൻസിന്റെ വിശകലനം (ANOVA) (കുറഞ്ഞത് മൂന്ന്-ഗ്രൂപ്പ് താരതമ്യങ്ങൾ), രണ്ടാമത്തേത് ലളിതമായ പ്രധാന ഇഫക്റ്റ് വിശകലനം അല്ലെങ്കിൽ ന്യൂമാൻ-ക uls ൾസ് താരതമ്യങ്ങൾ ഓമ്‌നിബസ് ഇഫക്റ്റുകൾക്ക് ശേഷം (P <0.05). തീറ്റ പരീക്ഷണത്തിലെ ഡാറ്റയെ ത്രീ-വേ മിക്സഡ് ANOVA- കൾ ഡയറ്റ് ഷെഡ്യൂളിനൊപ്പം വിഷയങ്ങൾക്കിടയിലുള്ള ഘടകമായും ഡോസ്, ഡയറ്റ് ഘട്ടം എന്നിവ വിഷയങ്ങൾക്കുള്ളിലെ ഘടകങ്ങളായി വിശകലനം ചെയ്തു. എലവേറ്റഡ് പ്ലസ്-മാർജ് പരീക്ഷണത്തിൽ നിന്നുള്ള ഡാറ്റ ഡയറ്റ് ഷെഡ്യൂളും ഡോസും ഉള്ള രണ്ട്-വഴി ANOVA- കൾ വിഷയങ്ങൾക്കിടയിലുള്ള ഘടകങ്ങളായി വിശകലനം ചെയ്തു. ശക്തിപ്പെടുത്തൽ പരീക്ഷണത്തിന്റെ പുരോഗമന-അനുപാത ഷെഡ്യൂളിനായി, ബ്രേക്ക്‌പോയിന്റും മൊത്തത്തിലുള്ള പ്രതികരണങ്ങളും ഡയറ്റ് ഷെഡ്യൂളിനൊപ്പം രണ്ട്-വഴിയുള്ള മിശ്രിത ANOVA- കൾ വിഷയങ്ങൾക്കിടയിലുള്ള ഘടകമായും ഡോസ് വിഷയങ്ങൾക്കുള്ളിലെ ഘടകമായും വിശകലനം ചെയ്തു. ആദ്യ 5 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ പ്രതികരിക്കുന്നതിനുള്ള സമയ-കോഴ്സ് ഡയറ്റ് ഷെഡ്യൂളിനൊപ്പം ത്രീ-വേ മിക്സഡ് ANOVA- കൾ വിഷയങ്ങൾക്കിടയിലുള്ള ഘടകമായും ഡോസും സമയവും വിഷയത്തിനുള്ളിലെ ഘടകമായും വിശകലനം ചെയ്തു. ഇലക്ട്രോഫിസിയോളജിക്കൽ പഠനങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള ഡാറ്റ, വിഷയങ്ങൾക്കിടയിലുള്ള ANOVA അല്ലെങ്കിൽ വിഷയങ്ങൾക്കുള്ളിൽ ANOVA ഉപയോഗിച്ച് ആവർത്തിച്ചുള്ള നടപടികളോടെ വിശകലനം ചെയ്തു. കോർട്ടികോസ്റ്റെറോൺ ആർ‌ഐ‌എയിൽ നിന്നുള്ള ഡാറ്റ, ഡയറ്റ് ഷെഡ്യൂളുമായി രണ്ട്-വഴി മിക്സഡ് ANOVA വിശകലനം ചെയ്ത വിഷയ വിഷയവും ഡയറ്റ് ഘട്ടവും വിഷയത്തിനുള്ളിലെ ഘടകവുമാണ്. ഉപയോഗിച്ച സ്ഥിതിവിവരക്കണക്ക് പാക്കേജുകൾ ഇൻസ്റ്റാറ്റ് 3.0, പ്രിസം 4.0 (ഗ്രാഫ്പാഡ്), സിസ്റ്റാറ്റ് 11.0, എസ്പിഎസ്എസ് 11.5 (എസ്പിഎസ്എസ്) എന്നിവയായിരുന്നു.
അംഗീകാരങ്ങൾ.
എഡിറ്റോറിയൽ സഹായത്തിന് മൈക്ക് അരന്റ്സ്, അഡ്മിനിസ്ട്രേറ്റീവ് സഹായത്തിന് മേരി ഗിചുഹി, സാങ്കേതിക സഹായത്തിന് ബോബ് ലിന്റ്സ്, ഏഷ്യാനെറ്റ് ഹെൽഫേഴ്സ്, സ്റ്റെഫാനി ഡെല ക്രൂസ്, മോളി ബ്രെനൻ എന്നിവരോട് ഞങ്ങൾ നന്ദി പറയുന്നു. നാഷണൽ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓഫ് ഡയബറ്റിസ് ആൻഡ് ഡൈജസ്റ്റീവ് ആൻഡ് കിഡ്നി ഡിസീസസ് ഗ്രാന്റുകൾ DK70118, DK26741, P30DK56336 എന്നിവ ഈ ജോലിയെ പിന്തുണച്ചിട്ടുണ്ട്; നാഷണൽ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓൺ മയക്കുമരുന്ന് ദുരുപയോഗം ഗ്രാന്റ് DA023680; നാഷണൽ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓൺ ലഹരി ദുരുപയോഗവും മദ്യപാനവും AA016731, AA015566 എന്നിവയ്ക്ക് ധനസഹായം നൽകുന്നു; നാഷണൽ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓഫ് ന്യൂറോളജിക്കൽ ഡിസോർഡേഴ്സ് ആൻഡ് സ്ട്രോക്ക് ഗ്രാന്റ് IT32NS061847-01A2; നാഷണൽ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓൺ ഏജിംഗ് ഗ്രാന്റ് AG028040; നാഷണൽ ഹാർട്ട്, ലംഗ് ആൻഡ് ബ്ലഡ് ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഗ്രാന്റ് എച്ച്എൽഎക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്; എലിസൺ മെഡിക്കൽ ഫ Foundation ണ്ടേഷൻ; പിയേഴ്സൺ സെന്റർ ഫോർ ആൽക്കഹോളിസം ആൻഡ് ആഡിക്ഷൻ റിസർച്ച്. ഈ ജോലിയുടെ ഒരു ഭാഗം നാഷണൽ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓഫ് മയക്കുമരുന്ന് ദുരുപയോഗം, നാഷണൽ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓൺ ലഹരി ദുരുപയോഗം, മദ്യപാനം എന്നിവയുടെ ഇൻട്രാമുറൽ റിസർച്ച് പ്രോഗ്രാമുകൾ പിന്തുണച്ചിട്ടുണ്ട്. ദി സ്ക്രിപ്സ് റിസർച്ച് ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ടിൽ നിന്നുള്ള കൈയെഴുത്തുപ്രതി നമ്പർ 088083 ആണ് ഇത്.
അടിക്കുറിപ്പുകൾ
എഴുത്തുകാർ പലിശയുടെ തർക്കമൊന്നും പ്രഖ്യാപിക്കുന്നില്ല.
ഈ ലേഖനം ഒരു പി‌എൻ‌എസ് നേരിട്ടുള്ള സമർപ്പണമാണ്.
ഈ ലേഖനത്തിൽ ഓൺലൈനിൽ പിന്തുണാ വിവരങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു www.pnas.org/cgi/content/full/0908789106/DCSupplemental.
അവലംബം
;