ഫ്രണ്ട് എൻ‌ഡോക്രിനോൾ (ലോസാൻ). 2017; XXX: 8.
ഓൺ‌ലൈൻ പ്രസിദ്ധീകരിച്ചു 2017 ഓഗസ്റ്റ് 29. doi: 10.3389 / fendo.2017.00216
PMCID: PMC5581815
ജൂലി പാരഡിസ്,1 പിയറി ബ്യൂറോ,1 തോമസ് മോയോൺ,1 സോഫി നിക്ക്ലോസ്,2 പട്രീഷ്യ പാർനെറ്റ്,1,*† ഒപ്പം വിൻസെന്റ് പെയ്‌ലെ1,*†
വേര്പെട്ടുനില്ക്കുന്ന
Energy ർജ്ജ സാന്ദ്രമായ ഭക്ഷണത്തിന്റെ പെരിനാറ്റൽ മാതൃ ഉപഭോഗം കുട്ടികളിൽ അമിതവണ്ണത്തിനുള്ള സാധ്യത വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു. ഇത് ഹെഡോണിക് സ്വത്തിനായി ഉപയോഗിക്കുന്ന രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിന്റെ അമിത ഉപഭോഗവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. പെരിനാറ്റൽ മാതൃ ഭക്ഷണത്തെയും കൊഴുപ്പിനുള്ള സന്തതി മുൻഗണനയെയും ബന്ധിപ്പിക്കുന്ന അടിസ്ഥാന സംവിധാനം ഇപ്പോഴും മോശമായി മനസ്സിലാക്കിയിട്ടില്ല. ഈ പഠനത്തിൽ, ഗർഭാവസ്ഥയിലും മുലയൂട്ടുന്ന സമയത്തും മാതൃ ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് / ഉയർന്ന പഞ്ചസാര ഭക്ഷണത്തിന്റെ [വെസ്റ്റേൺ ഡയറ്റ് (ഡബ്ല്യുഡി)] സ്വാധീനം പഠിക്കുക, ജനനകാലം മുതൽ ലൈംഗിക പക്വത വരെയുള്ള എലിയുടെ സന്തതികൾക്ക് ഭക്ഷണം നൽകുന്നത് നിയന്ത്രിക്കുന്ന പ്രതിഫല മാർഗങ്ങളിൽ. മൂന്ന് നിർണായക സമയ കാലയളവിൽ (കുട്ടിക്കാലം, ക o മാരപ്രായം, പ്രായപൂർത്തിയായവർ) ഡബ്ല്യുഡി, കൺട്രോൾ സന്തതികളുടെ ഒരു രേഖാംശ ഫോളോ-അപ്പ് ഞങ്ങൾ നടത്തി, (i) കൊഴുപ്പ് മുൻഗണന, (ii) ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ പ്രൊഫൈലിൽ രസകരമായ ഭക്ഷണക്രമത്തിൽ പെരിനാറ്റൽ എക്സ്പോഷറിന്റെ സ്വാധീനം അന്വേഷിക്കുന്നതിൽ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കുന്നു. , (iii) മെസോലിംബിക് ഡോപാമിനേർജിക് നെറ്റ്‌വർക്കുകളുടെ ന്യൂറോ അനാട്ടമിക്കൽ / വാസ്തുവിദ്യാ മാറ്റങ്ങൾ. പെരിനാറ്റൽ കാലഘട്ടത്തിൽ പരിമിതപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്ന ഡബ്ല്യുഡി തീറ്റ ഹോമിയോസ്റ്റാറ്റിക്, ഹെഡോണിക് ബ്രെയിൻ സർക്യൂട്ടുകളുടെ ഓർഗനൈസേഷനിൽ വ്യക്തമായ ദീർഘകാല സ്വാധീനം ചെലുത്തുന്നുവെന്ന് ഞങ്ങൾ കാണിച്ചു, പക്ഷേ കൊഴുപ്പ് മുൻഗണനയല്ല. നിർദ്ദിഷ്ട മസ്തിഷ്ക തന്മാത്രാ ഒപ്പുകളുമായി ഞങ്ങൾ പരസ്പരബന്ധിതമായ കൊഴുപ്പിനുള്ള മുൻഗണനയുടെ ഒരു പ്രത്യേക പരിണാമം ഞങ്ങൾ പ്രകടമാക്കി. ഡബ്ല്യുഡി ഫെഡ് ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള സന്തതികളിൽ, ഡോപാമൈൻ (ഡിഎ) സിസ്റ്റങ്ങളിൽ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന പ്രധാന ജീനിന്റെ ഉയർന്ന പ്രകടനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട കൊഴുപ്പ് മുൻഗണന നിലനിൽക്കുന്നതായി ഞങ്ങൾ കുട്ടിക്കാലത്ത് നിരീക്ഷിച്ചു; ക o മാരപ്രായത്തിൽ, രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകൾക്കും ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് മുൻഗണന, ഡബ്ല്യുഡി ഗ്രൂപ്പിനായുള്ള എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് ദിവസത്തെ പരിശോധനയിൽ ക്രമേണ കുറയുകയും ഡബ്ല്യുഡി ഗ്രൂപ്പിനായുള്ള ഡിഎ സിസ്റ്റങ്ങളിൽ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന കീ ജീനിന്റെ കുറച്ച പ്രകടനവുമായി ബന്ധപ്പെടുകയും ചെയ്യുന്നു, അവ സംരക്ഷിക്കുന്നതിന് ഒരു നഷ്ടപരിഹാര സംവിധാനം നിർദ്ദേശിക്കാൻ കഴിയും. കൂടുതൽ കൊഴുപ്പ് എക്സ്പോഷർ മുതൽ; ഒടുവിൽ പ്രായപൂർത്തിയാകുമ്പോൾ, എലികളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിന് സമാനമായ കൊഴുപ്പിനുള്ള മുൻഗണന, എന്നാൽ γ- അമിനോബ്യൂട്ടിക് ആസിഡ് ശൃംഖല, സെറോടോണിൻ റിസപ്റ്ററുകൾ, പോളിസിയാലിക് ആസിഡ്-എൻ‌സി‌എമ്മിനെ ആശ്രയിച്ചുള്ള ഹൈപ്പോതലാമസിലെ പ്രധാന ജീനുകളിൽ ആഴത്തിലുള്ള പരിഷ്കരണവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. മൊത്തത്തിൽ, ഈ ഡാറ്റ വെളിപ്പെടുത്തുന്നത്, പെരിനാറ്റൽ കാലഘട്ടത്തിൽ മാത്രമായി പരിമിതപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്ന മാതൃ ഡബ്ല്യുഡി, energy ർജ്ജ ഹോമിയോസ്റ്റാസിസിലും കൊഴുപ്പ് മുൻഗണനയിലും സ്ഥിരമായ സ്വാധീനം ചെലുത്തുന്നില്ലെങ്കിലും, ഭക്ഷണ സ്വഭാവത്തിൽ ഉൾപ്പെടുന്ന ഹൈപ്പോഥലാമിക് ഹോമിയോസ്റ്റാറ്റിക്, റിവാർഡ് പാതയുടെ ശക്തമായ പുനർനിർമ്മാണം നടന്നിട്ടുണ്ടെങ്കിലും. ഈ സർക്യൂട്ടുകളുടെ പുനർനിർമ്മാണത്തിന്റെ പ്രസക്തി മനസ്സിലാക്കുന്നതിന് കൂടുതൽ പ്രവർത്തന പരീക്ഷണങ്ങൾ ആവശ്യമാണ്.
അവതാരിക
ആദ്യകാല ജീവിത അന്തരീക്ഷവും സംഭവങ്ങളും പിന്നീടുള്ള ജീവിതത്തിൽ ആരോഗ്യം, രോഗം എന്നിവയ്ക്ക് കാരണമാകുമെന്ന് നന്നായി തിരിച്ചറിഞ്ഞിട്ടുണ്ട് (1-3). ഉപാപചയ കാലഘട്ടത്തിലെ പോഷക, ഹോർമോൺ പരിതസ്ഥിതിയിലെ മാറ്റങ്ങൾ സന്താനങ്ങളെ അമിതവണ്ണത്തിലേക്കും അതുമായി ബന്ധപ്പെട്ട പാത്തോളജികളിലേക്കും എങ്ങനെ നയിക്കും എന്ന് വിശദീകരിക്കാൻ ഉപാപചയ മുദ്രണം എന്ന ആശയം മുന്നോട്ടുവച്ചിട്ടുണ്ട്. Energy ർജ്ജ സാന്ദ്രമായ ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്നതിന്റെ അനന്തരഫലമായി പോഷകാഹാരക്കുറവാണ് നമ്മുടെ ആകസ്മിക ജീവിത രീതിയുടെ ഒരു പ്രധാന പ്രശ്നം. വാസ്തവത്തിൽ, ഇത്തരത്തിലുള്ള ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്നവർക്ക് അമിതവണ്ണവും മെറ്റബോളിക് സിൻഡ്രോം ഉണ്ടാകാനുള്ള സാധ്യത കൂടുതലാണ് (4, 5). പല പഠനങ്ങളും ഗർഭാവസ്ഥയിലൂടെയും മുലയൂട്ടുന്നതിലൂടെയും ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഉള്ള ഭക്ഷണം (എച്ച്എഫ്ഡി) സന്താനങ്ങളുടെ രാസവിനിമയത്തെ ദീർഘകാലമായി സ്വാധീനിക്കുന്നുവെന്ന് തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട് (6-8). ഉപാപചയ നിയന്ത്രണത്തിൽ ഉൾപ്പെട്ടിട്ടുള്ള പാതകൾക്ക് പുറമേ, പെരുമാറ്റത്തെ പോഷിപ്പിക്കുന്നതിൽ മസ്തിഷ്ക പ്രതിഫല സംവിധാനങ്ങളും ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നു (9, 10). പ്രതിഫലത്തിന്റെയും ആസക്തിയുടെയും പശ്ചാത്തലത്തിൽ ആഴത്തിൽ പഠിച്ച മെസോലിംബിക് ഡോപാമൈൻ (ഡിഎ) ന്യൂറോ ട്രാൻസ്മിഷൻ, മനുഷ്യരിൽ ഭക്ഷണക്രമത്തിൽ അമിതവണ്ണത്തിൽ മാറ്റം വരുത്തുന്നു (11-13) മൃഗങ്ങളും (14-16). ഡിഎ പ്രൊജക്ഷനുകൾ വലിയൊരു ഭാഗം, പ്രസവാനന്തരം വികസിക്കുന്നു (17), അതിനാൽ അവരുടെ വളർച്ചയെ ആദ്യകാല ഭക്ഷണക്രമം ബാധിച്ചേക്കാം. കഴിഞ്ഞ കുറച്ച് വർഷങ്ങളായി, എലിശല്യം സംബന്ധിച്ച പരീക്ഷണങ്ങൾ, മാതൃ എച്ച്എഫ്ഡി കഴിക്കുന്നത് സന്താനങ്ങളിൽ ഹെഡോണിക് ഭക്ഷണം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് തെളിവാണ് (18, 19). ഈ നിരീക്ഷണത്തിൽ ഡിഎ സിസ്റ്റം പ്രവർത്തനത്തിൽ ചില മാറ്റങ്ങൾ ഉൾപ്പെട്ടിട്ടുണ്ടെങ്കിലും (20-22), ആദ്യകാല ജീവിതത്തിലെ ഒന്റോജെനിയെക്കുറിച്ചും റിവാർഡ് പാതകളുടെ പുനർ‌നിർമ്മാണത്തെക്കുറിച്ചും പരിമിതമായ ഡാറ്റ ലഭ്യമാണ് (21). മാത്രമല്ല, റിവാർഡ് സിസ്റ്റത്തിന്റെ GABA (am- അമിനോബ്യൂട്ടിക് ആസിഡ്) സിസ്റ്റം പോലുള്ള നോൺ-ഡിഎ സിഗ്നലിംഗ് ഭാഗം പെരിനാറ്റൽ പോഷക സമ്മർദ്ദത്തെ ബാധിക്കുമോ ഇല്ലയോ എന്ന് രേഖപ്പെടുത്തിയിട്ടില്ല. പ്രതിഫലത്തിലും വെറുപ്പിലും GABA ന്യൂറോണുകൾ ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നുവെന്ന് തോന്നുന്നു. വെൻട്രൽ ടെഗ്‌മെന്റൽ ഏരിയ (വിടിഎ) GABA ന്യൂറോണുകൾക്ക് വ്യത്യസ്ത മസ്തിഷ്ക മേഖലകളിൽ നിന്ന് സമാനമായ ഇൻപുട്ട് ലഭിക്കുന്നു (23), സമീപകാല ഒപ്റ്റോജെനെറ്റിക് അധിഷ്ഠിത പെരുമാറ്റ പഠനങ്ങൾ എന്നിവ കണ്ടീഷൻ ചെയ്ത സ്ഥല വിരോധത്തിൽ വിടിഎ ഗാബയുടെ പ്രധാന പങ്ക് എടുത്തുകാണിക്കുന്നു (24) പ്രതിഫലമായി കൺസ്യൂമേറ്ററി പെരുമാറ്റം (25). ന്യൂക്ലിയസ് അക്കുമ്പെൻസ് (എൻ‌എസി) പ്രധാനമായും രൂപീകരിച്ചിരിക്കുന്നത് GABAergic മീഡിയം സ്പൈനി ന്യൂറോണുകളുടെ പ്രൊജക്ഷൻ ആണ്, കൂടാതെ ലിംബിക്-മോട്ടോർ ഇന്റർഫേസായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു, ലിംബിക് സിസ്റ്റത്തിൽ നിന്ന് ഉണ്ടാകുന്ന സിഗ്നലുകളെ സംയോജിപ്പിച്ച് അവയെ പ്രവർത്തനത്തിലേക്ക് മാറ്റുന്നു വഴി output ട്ട്‌പുട്ട് വെൻട്രൽ പല്ലിഡം (വിപി), മറ്റുള്ളവ മോട്ടോർ ഇഫക്റ്ററുകൾ (26). അവസാനമായി, എൽ‌എച്ചിലെ നിരവധി GABA കണക്ഷനുകളാൽ രൂപപ്പെടുന്ന ഹൈപ്പോതലാമസ് (27) ന്യൂക്ലിയസ് ആർക്യൂട്ട് ചെയ്യുക, വിശപ്പിന്റെയും സംതൃപ്തിയുടെയും സിഗ്നലുകൾ സമന്വയിപ്പിക്കുന്നു (10).
ഈ പഠനം എലിയുടെ സന്തതികളിൽ ജനനം മുതൽ ലൈംഗിക പക്വത വരെ മാതൃ പാശ്ചാത്യ ഭക്ഷണത്തിന്റെ സ്വാധീനം തിരിച്ചറിയുക (i) കൊഴുപ്പ് മുൻഗണന (ii) ഡിഎ സിസ്റ്റത്തിന്റെ ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ പ്രൊഫൈൽ, ജി‌എ‌എ‌ആർ‌ജിക് സിസ്റ്റം, ഹൈപ്പോതലാമസിന്റെ പ്ലാസ്റ്റിറ്റി , (iii) ഒരേ കാലയളവിലെ മെസോലിംബിക് ഡോപാമിനേർജിക് നെറ്റ്‌വർക്കുകളുടെ ന്യൂറോ അനാട്ടമിക്കൽ / വാസ്തുവിദ്യാ വ്യതിയാനങ്ങളെക്കുറിച്ച്. അതിനാൽ, ഒരു രേഖാംശ പഠനത്തിൽ (മുലകുടി നിർത്തൽ, P25, ലൈംഗിക പക്വത, P45, പ്രായപൂർത്തിയായവർ, P95), ശരീരഭാരത്തിന്റെ വളർച്ചയിൽ മാതൃ WD യുടെ സ്വാധീനം, മുലയൂട്ടലിനുശേഷം പതിവ് ച ow വിന് കീഴിൽ സൂക്ഷിക്കുന്ന സന്തതികളുടെ അഡിപ്പോസ് ടിഷ്യു വികസനം എന്നിവ ഞങ്ങൾ വിലയിരുത്തി. ഒരേസമയം, ഞങ്ങൾ ഒരു കൊഴുപ്പ് മുൻഗണന പരിശോധന നടത്തി, തുടർന്ന് ഒരു സമർപ്പിത ട്രാൻ‌സ്‌ക്രിപ്റ്റോമിക് വിശകലനവും തുടർന്നുള്ള പ്രധാന ഘടക വിശകലനവും (പിസിഎ) ഭക്ഷണം കഴിക്കൽ, ചോയ്സ്, മോട്ടിവേഷൻ റെഗുലേറ്ററി സിസ്റ്റങ്ങൾ എന്നിവയ്ക്കായി മാർക്കറുകളുടെ തിരഞ്ഞെടുപ്പ് നടത്തി. ഡിഎ സിസ്റ്റത്തിന്റെ പോഷക പ്രോഗ്രാമിംഗിൽ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കുന്ന സമീപകാല ഫലങ്ങൾ ഞങ്ങളുടെ ഫലങ്ങൾ ഗണ്യമായി സമ്പുഷ്ടമാക്കി.
വസ്തുക്കളും രീതികളും
എത്തിക്സ് സ്റ്റേറ്റ്മെന്റ്
പ്രാദേശിക മൃഗക്ഷേമ സമിതി, യൂറോപ്യൻ യൂണിയൻ (നിർദ്ദേശം 2010 / 63 / EU), ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് നാഷണൽ ഡി ലാ റീചെർച്ച് അഗ്രോണമിക് (പാരീസ്, ഫ്രാൻസ്), ഫ്രഞ്ച് വെറ്ററിനറി വകുപ്പ് (ഫ്രഞ്ച് വെറ്ററിനറി ഡിപ്പാർട്ട്‌മെന്റ്) എന്നിവയുടെ മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുസരിച്ചാണ് എല്ലാ പരീക്ഷണങ്ങളും നടത്തിയത്.A44276). പരീക്ഷണാത്മക പ്രോട്ടോക്കോൾ സ്ഥാപന നൈതിക സമിതി അംഗീകരിച്ച് APAFIS 8666 റഫറൻസിന് കീഴിൽ രജിസ്റ്റർ ചെയ്തു. സമ്മർദ്ദവും ഓരോ പരീക്ഷണ പരമ്പരയിലും ഉപയോഗിക്കുന്ന മൃഗങ്ങളുടെ എണ്ണവും കുറയ്ക്കുന്നതിന് എല്ലാ മുൻകരുതലുകളും സ്വീകരിച്ചു.
മൃഗങ്ങളും ഭക്ഷണക്രമങ്ങളും
ഭക്ഷണവും വെള്ളവും ഉപയോഗിച്ച് ഒരു 12 ± 12 ° C യിൽ ഒരു 22 h / 2 h ലൈറ്റ് / ഡാർക്ക് സൈക്കിളിൽ മൃഗങ്ങളെ പരിപാലിച്ചു പരസ്യം libitum. ഗർഭാവസ്ഥ ദിനത്തിൽ മുപ്പത്തിരണ്ട് പെൺ സ്പ്രാഗ്-ഡാവ്‌ലി എലികൾ (ബോഡി വെയ്റ്റ്: എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്-എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് ഗ്രാം) ജാൻ‌വിയറിൽ നിന്ന് (ഫ്രാൻസിലെ ലെ ജെനെസ്റ്റ് സെൻറ് ഐൽ) നേരിട്ട് വാങ്ങി. അവരെ വ്യക്തിഗതമായി പാർപ്പിക്കുകയും അവയിൽ 240 നായി ഒരു കൺട്രോൾ ഡയറ്റ് (സിഡി) (290% ബീഫ് കൊഴുപ്പും 1% സുക്രോസും) അല്ലെങ്കിൽ ഗർഭാവസ്ഥയിലും മുലയൂട്ടുന്ന കാലഘട്ടത്തിലും 1 നായി ഒരു WD (5% ബീഫ് കൊഴുപ്പും 0% സുക്രോസും) നൽകി. (പട്ടിക കാണുക Table1: 1: നെതർലാൻഡിലെ എബിഡിയറ്റ് വോർഡനിൽ നിന്നുള്ള ശതമാനം കിലോ കലോറിയിൽ ഭക്ഷണ ഘടന). ജനിക്കുമ്പോൾ, ലിറ്റർ വലുപ്പം ഒരു ലിറ്ററിന് എട്ട് നായ്ക്കുട്ടികളായി ഒരു 1: 1 പുരുഷന് സ്ത്രീ അനുപാതത്തിൽ ക്രമീകരിച്ചു. ഓരോ ഗ്രൂപ്പിനും 12 പുരുഷന്മാരും 16 സ്ത്രീകളും അടങ്ങിയ ഒരു ലിറ്റർ ഉപയോഗിച്ച് ഞങ്ങൾ 4 ഡാമുകളിൽ നിന്ന് 4 സൂക്ഷിച്ചു. മുലയൂട്ടുന്ന സമയത്ത് (സി‌എക്സ്, ഡബ്ല്യുഡി ഡാമുകളിൽ ജനിച്ച സന്തതികൾ പരീക്ഷണത്തിന്റെ അവസാനം വരെ സ്റ്റാൻഡേർഡ് ച ow യിൽ സൂക്ഷിച്ചിരുന്നു (കണക്കുകൾ (Figure1A, B) .1എ, ബി). പപ്പ് ശരീരഭാരം ജനനസമയത്തും അതിനുശേഷം എല്ലാ ദിവസവും 10: 00 am P21 (മുലകുടി നിർത്തൽ) വരെ രേഖപ്പെടുത്തി. മുലകുടി മാറിയതിനുശേഷം, പരീക്ഷണത്തിന്റെ അവസാനം വരെ, ഓരോ 3 ദിവസത്തിലും എലികൾക്ക് ഭാരം ഉണ്ടായിരുന്നു. പുരുഷ സന്തതികളെക്കുറിച്ചുള്ള വിവരങ്ങൾ മാത്രമാണ് ഞങ്ങൾ അവതരിപ്പിക്കുന്നത്. മറ്റൊരു പഠനത്തിനായി പെൺ എലികളെ ഉപയോഗിച്ചു (ചിത്രം (Figure11).
ബിഹേവിയർ (ടു-ബോട്ടിൽ ചോയ്സ് ടെസ്റ്റ്)
മൂന്ന് നിർണായക വികസന കാലഘട്ടങ്ങൾ പഠിച്ചു (P21 മുതൽ P25 വരെ: ജുവനൈൽ, P41 മുതൽ P45 വരെ: ക o മാരവും P91 മുതൽ P95: ചെറുപ്പക്കാരനും). 24 പുരുഷ നായ്ക്കുട്ടികൾ (n രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളുള്ള = 12 ക്രമരഹിതമായി തിരഞ്ഞെടുത്ത് രണ്ട് കുപ്പി ചോയ്സ് സ test ജന്യ പരിശോധന നടത്താൻ വ്യക്തിഗത കൂട്ടിൽ സ്ഥാപിച്ചു (കണക്കുകൾ (Figure1A, B) 1എ, ബി) (28-30). കൊഴുപ്പ് രുചിയോടുള്ള ആകർഷണം മധുര രുചിയിൽ നിന്ന് വേർപെടുത്തി കലോറി ഉപഭോഗത്തിന്റെ ഉപാപചയ ഫലത്തിൽ നിന്ന് പരമാവധി പഠിക്കാൻ ഈ പരിശോധന ഉപയോഗിച്ചു. വാസ്തവത്തിൽ, 1% ധാന്യ എണ്ണ ലായനി ഉപഭോഗം 0.09 കിലോ കലോറി / മില്ലി മാത്രം ഉപയോഗിക്കുന്നതുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. രണ്ട് കുപ്പികളുടെ സാന്നിധ്യത്തിലേക്കുള്ള ഒരു ദിവസത്തെ ശീലത്തിന് ശേഷം, P2 ലെ 25 ദിവസങ്ങളിലും P4, P41 എന്നിവിടങ്ങളിൽ 91 ദിവസങ്ങളിലും പരിശോധന നടത്തി (ചിത്രം (Figure1A) .1എ). വിശദമായി, മുലകുടി നിർത്തുമ്പോൾ (P21), 24 നായ്ക്കുട്ടികളെ 2 ദിവസത്തേക്ക് വ്യക്തിഗതമായി പാർപ്പിച്ചിരുന്നു (ചിത്രം (Figure1A): 1A): ദിവസം 1, ആവാസ ഘട്ടം, ദിവസം 2, എലികൾക്ക് 1% xanthan gum (Sigma Aldrich, St. Quentin Fallavier, France), xanthan gum solution ( 0.3%). P0.3, P41 എന്നിവയിൽ, 91 നായ്ക്കുട്ടികളെ ഉപയോഗിക്കുകയും രണ്ട് കുപ്പി രഹിത ചോയ്സ് തുടർച്ചയായി മൂന്ന് ദിവസത്തേക്ക് നിർദ്ദേശിക്കുകയും ചെയ്തു. സാന്താൻ ഗം ലായനി, രുചി പരിഹാരം (കോൺ ഓയിൽ 24%) എന്നിവയുടെ ഉപഭോഗം ദിവസവും 1: 11 am ന് 00 ദിവസങ്ങളിൽ (P3, P45) രേഖപ്പെടുത്തിയിട്ടുണ്ട്. സ്ഥാന മുൻഗണന പക്ഷപാതം തടയുന്നതിന് രണ്ട് കുപ്പികളുടെയും സ്ഥാനം പ്രതിദിനം വിപരീതമാക്കി. 95 h- ൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന മൊത്തം വോളിയത്തിലേക്ക് “കൊഴുപ്പ് പരിഹാരം” വോളിയത്തിന്റെ അനുപാതമായി കൊഴുപ്പ് മുൻഗണന സ്കോർ കണക്കാക്കി. ബിഹേവിയറൽ ടെസ്റ്റിലുടനീളം എല്ലാ എലികളും സ്റ്റാൻഡേർഡ് ച ow ഡയറ്റിനു കീഴിലായിരുന്നു.
ടിഷ്യു ശേഖരണവും രക്തസാമ്പിളും
രണ്ട് കുപ്പി ഫ്രീ ചോയ്സ് ടെസ്റ്റിന്റെ അവസാന ദിവസത്തിന് ശേഷമുള്ള ദിവസം, എലികളുടെ പകുതി (n ഒരു ഗ്രൂപ്പിന് = 6) CO 09:00 നും 12:00 നും ഇടയിൽ വേഗത്തിൽ ദയാവധം ചെയ്തു2 ശ്വസനം. EDTA (Laboratoires Léo SA, St Quentin en Yvelines, France) ഉള്ള ട്യൂബുകളിൽ രക്തം ശേഖരിക്കുകയും 2,500 കേന്ദ്രീകൃതമാക്കുകയും ചെയ്തു g 15 for C ന് 4 മിനുട്ടിനായി. പ്ലാസ്മ −20 at C ൽ മരവിപ്പിച്ചു. അവയവങ്ങളും വ്യക്തിഗത റിട്രോപെറിറ്റോണിയൽ കൊഴുപ്പ് ഡിപ്പോയും വിഘടിച്ച് ഭാരം വഹിച്ചു. മസ്തിഷ്കം അതിവേഗം നീക്കംചെയ്യുകയും ബ്രെയിൻ മാട്രിക്സിൽ സ്ഥാപിക്കുകയും ചെയ്തു (WPI, സരസോട്ട, FL, യുഎസ്എ എലി 300 - 600 g). ആദ്യം ഹൈപ്പോഥലാമസ് വിച്ഛേദിക്കപ്പെട്ടു [പാക്സിനോസിന്റെ അറ്റ്ലസ് കോർഡിനേറ്റുകൾ അനുസരിച്ച്: ബ്രെഗ്മയിൽ നിന്ന് −1.0 മുതൽ −4.5 മില്ലീമീറ്റർ വരെ (31)], തുടർന്ന്, ഓരോ ശൈലിയിലും, എൻ‌എസി തലത്തിൽ എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് മില്ലീമീറ്റർ കട്ടിയുള്ള രണ്ട് കൊറോണൽ കഷ്ണങ്ങളും വിടിഎയുടെ തലത്തിൽ മറ്റൊന്ന് ലഭിച്ചു. വലത്, ഇടത് എൻ‌എസി, വലത്, ഇടത് വിടിഎ എന്നിവയുടെ സാമ്പിളുകൾ (ഓരോ മൃഗത്തിനും ആകെ നാല് സാമ്പിളുകൾ) രണ്ട് വ്യത്യസ്ത ബയോപ്സി പഞ്ചുകൾ ഉപയോഗിച്ച് വേഗത്തിൽ ലഭിച്ചു (സ്റ്റീഫൽ ലബോറട്ടറീസ്, നാന്റെരെ, ഫ്രാൻസ്) (എൻ‌എസി, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് എംഎം വ്യാസം വെൻട്രൽ മിഡ്‌ബ്രെയിനിനായി). തക്മാൻ ലോ-ഡെൻസിറ്റി അറേ (ടി‌എൽ‌ഡി‌എ) ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ നിർണ്ണയിക്കാൻ സാമ്പിളുകൾ ദ്രാവക നൈട്രജനിൽ ഫ്രീസുചെയ്ത് −2 at C ൽ സൂക്ഷിച്ചു.
മറ്റ് എലികൾ (n ഒരു ഗ്രൂപ്പിന് = 6) പെന്റോബാർബിറ്റൽ (150 മില്ലിഗ്രാം / കിലോ ഐപി) ഉപയോഗിച്ച് ആഴത്തിൽ അനസ്തേഷ്യ നൽകി, ട്രാൻസ്കാർഡിയൽ ഫിസിയോളജിക്കൽ സലൈൻ പെർഫ്യൂഷൻ ഉപയോഗിച്ച് പെർഫ്യൂസ് ചെയ്തു, തുടർന്ന് ഐസ്-കോൾഡ് ഫോസ്ഫേറ്റ് ബഫറിൽ (പിബി) 4 ശതമാനം പാരഫോർമൽഡിഹൈഡ്, പിഎച്ച് 7.4. തലച്ചോറുകൾ അതിവേഗം നീക്കം ചെയ്യപ്പെടുകയും 1 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ മുങ്ങുകയും ഒടുവിൽ 25% പിബി സുക്രോസിൽ 24–48 മണിക്കൂർ സൂക്ഷിക്കുകയും ചെയ്തു. തലച്ചോറുകൾ ഐസോപെന്റേനിൽ −60 at C ൽ മരവിപ്പിക്കുകയും അവസാനം −80 at C വരെ ഉപയോഗിക്കുകയും ചെയ്തു. എൻ‌എസി, ഹൈപ്പോഥലാമസ്, വിടിഎ എന്നിവ 20 µm സീരിയൽ കൊറോണൽ വിഭാഗങ്ങളായി ഒരു ക്രയോസ്റ്റാറ്റ് ഉപയോഗിച്ച് മുറിച്ചു (മൈക്രോം, മൈക്രോടെക്, ഫ്രാഞ്ചെവിൽ, ഫ്രാൻസ്). ഓരോ മസ്തിഷ്ക പ്രദേശത്തിനും 10–4 വിഭാഗങ്ങൾ അടങ്ങിയ 6 ഗ്ലാസ് സ്ലൈഡുകളുടെ രണ്ടോ മൂന്നോ സീരീസ് നടത്തി. ഓരോ ഗ്ലാസ് സ്ലൈഡിനും സീരിയൽ വിഭാഗങ്ങൾക്ക് 200 µm അകലമുണ്ട് (ചിത്രം (Figure66).
ബയോകെമിക്കൽ പ്ലാസ്മ വിശകലനം ചെയ്യുന്നു
P25, P45, P95 എലികളിൽ ശേഖരിച്ച EDTA പ്ലാസ്മ പ്ലാസ്മ ഗ്ലൂക്കോസ്, NEFA (എസ്റ്ററിഫൈഡ് അല്ലാത്ത ഫാറ്റി ആസിഡുകൾ), ഇൻസുലിൻ, ലെപ്റ്റിൻ എന്നിവ അളക്കാൻ ഉപയോഗിച്ചു. നിർദ്ദിഷ്ട കിറ്റുകളുള്ള കളർമെട്രിക് എൻസൈമാറ്റിക് പ്രതികരണങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ചാണ് ഗ്ലൂക്കോസും NEFA ഉം അളക്കുന്നത് (ഗ്ലൂക്കോസ്, NEFA PAP 150 കിറ്റുകൾ, ബയോമെറിയക്സ്, മാർസി-എൽ എറ്റോയിൽ, ഫ്രാൻസ്). ഇൻസുലിൻ, ലെപ്റ്റിൻ (എലി / മൗസ് ഇൻസുലിൻ എലിസ കിറ്റ്, എലി ലെപ്റ്റിൻ എലിസ കിറ്റ്, ലിങ്കോ റിസർച്ച്, സെന്റ് ചാൾസ്, എംഒ, യുഎസ്എ) നിർമാതാക്കളുടെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ പാലിച്ച് നിർദ്ദിഷ്ട എലിസ കിറ്റുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ഹോർമോണുകൾ പരിശോധിച്ചു.
ഇമ്മ്യൂണോഹിസ്റ്റോഹമിസ്ട്രി
സീരിയൽ VTA, NAc വിഭാഗങ്ങൾ അടങ്ങിയ ഗ്ലാസ് സ്ലൈഡുകൾ ആദ്യം 3-4 h നായി തടഞ്ഞു, തുടർന്ന് ഇനിപ്പറയുന്ന ആന്റിബോഡികളുടെ മിശ്രിതം ഉപയോഗിച്ച് 4 at C ൽ ഒറ്റരാത്രികൊണ്ട് ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു: മ mouse സ് ആന്റി-ന്യൂൻ (1: 500; IgM; മില്ലിപൂർ ബയോസയൻസ് റിസർച്ച് റീജന്റുകൾ, മെർക്ക്, യുഎസ്എ), മുയൽ ആന്റി ടിഎച്ച് (എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്: എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്; മില്ലിപൂർ ബയോസയൻസ് റിസർച്ച് റീജന്റുകൾ, മെർക്ക്, യുഎസ്എ). പ്രാഥമിക ആന്റിബോഡികളുമായുള്ള ഇൻകുബേഷനും പിബി ഉപയോഗിച്ച് കഴുകിയതിനുശേഷവും ദ്വിതീയ ആന്റിബോഡികളുടെ മിശ്രിതത്തിൽ വിഭാഗങ്ങൾ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യപ്പെട്ടു: അലക്സാ എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് സംയോജിത കഴുത ആന്റി-മൗസ് ഐ‌ജി‌എം, അലക്സാ എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്-കൺജഗേറ്റഡ് കഴുത ആന്റി റാബിറ്റ് ഐ‌ജിജി (എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്: എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്; ഇൻ‌വിട്രോജൻ, തെർമോഫിഷർ സയന്റിഫിക്, വാൾത്താം , MA, USA) 1 h നായി. സൂപ്പർഫ്രോസ്റ്റ് പ്ലസ് ഗോൾഡ് സ്ലൈഡുകളിൽ (തെർമോഫിഷർ സയന്റിഫിക്, വാൾത്താം, എം‌എ, യുഎസ്എ), വായു-ഉണക്കിയ, പ്രോ‌ലോംഗ് ™ ഗോൾഡ് ആന്റിഫേഡ് റീജന്റ് (ഇൻ‌വിട്രോജൻ, തെർമോഫിഷർ സയന്റിഫിക്, വാൾത്താം, എം‌എ, യുഎസ്എ) ഉപയോഗിച്ച് കവർ‌സ്ലിപ്പ് ചെയ്തിട്ടുണ്ട്.
വിടിഎയിലെ ടിഎച്ച് ന്യൂറോണുകളുടെ എണ്ണം
ഓരോ ശൈലിയിലും, TH- പോസിറ്റീവ് സെല്ലുകൾ മുമ്പ് വിവരിച്ചതുപോലെ കണക്കാക്കി (32) വിടിഎയുടെ മൂന്ന് വ്യത്യസ്ത റോസ്ട്രോകാഡൽ തലങ്ങളിൽ: മൂന്നാമത്തെ നാഡിയിൽ നിന്ന് പുറത്തുകടക്കുന്ന തലത്തിൽ (ബ്രെഗ്മയുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ദൂരം: −5.3 മില്ലീമീറ്റർ), 200 rom റോസ്ട്രൽ, 200 caum caudal എന്നിവ ഈ നിലയിലേക്ക് (കണക്കുകൾ (Figure6A) .6എ). ഇടത്തോട്ടും വലത്തോട്ടും, ആക്സസറി ടെർമിനൽ ലഘുലേഖ മുതൽ മെസെൻസെഫാലോണിന്റെ ലാറ്ററൽ ബോർഡർ വരെയുള്ള മുഴുവൻ വിടിഎയും ഉൾക്കൊള്ളുന്ന ഒരു ഡിജിറ്റൈസ് ചെയ്ത ചിത്രം ഒരു നാനോ സൂമർ-എക്സ്ആർ ഡിജിറ്റൽ സ്ലൈഡ് സ്കാനറിന്റെ × 40 മാഗ്‌നിഫിക്കേഷൻ ഉപയോഗിച്ച് ലഭിച്ചു. C12000 (ഹമാമത്സു, ജപ്പാൻ). ഓരോ വിഭാഗത്തിനും വിടിഎയുടെ പരിധിക്കകത്ത് ഒരു രേഖ വരച്ചു. സെല്ലുകളുടെ ആകൃതി പരിശോധിച്ച് പാക്സിനോസ്, വാട്സൺ അറ്റ്ലസ് എന്നിവ പരാമർശിച്ചുകൊണ്ട് അതിർത്തികൾ തിരഞ്ഞെടുത്തു. വ്യക്തമായി കാണാവുന്ന ന്യൂക്ലിയസുള്ള ഒരു ന്യൂഎൻ (+) / ടിഎച്ച് (+) രോഗപ്രതിരോധ സെൽ ബോഡിയായി ഒരു ഡോപാമിനേർജിക് ന്യൂറോൺ നിർവചിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്. എൻ‌ഐ‌എച്ച് ഇമേജ് ജെ സോഫ്റ്റ്വെയർ (സെൽ ക counter ണ്ടർ പ്ലഗിൻ) ഉപയോഗിച്ച്, ന്യൂയാൻ (+) / ടിഎച്ച് (+) സെല്ലുകളെ മൃഗസംഘങ്ങളെക്കുറിച്ച് അറിവില്ലാത്ത രണ്ട് വ്യത്യസ്ത വ്യക്തികൾ കണക്കാക്കി. സ്പ്ലിറ്റ്-സെൽ എണ്ണൽ പിശകുകൾ ആബർ‌ക്രോംബിയുടെ സമവാക്യം ഉപയോഗിച്ച് ശരിയാക്കി (32), എവിടെ N = n[t/(t + d)] (N = സെല്ലുകളുടെ ആകെ എണ്ണം; n = കണക്കാക്കിയ സെല്ലുകളുടെ എണ്ണം; t = വിഭാഗം കനം; ഒപ്പം d = സെൽ വ്യാസം), ഈ തിരുത്തൽ ഘടകം 0.65 ആയിരുന്നു. ഡാറ്റ ഇടത്തോട്ടും വലത്തോട്ടും VTA- യിൽ [NeuN (+) / TH (+)] mean SEM.
NAc ലെ TH ഫൈബർ സാന്ദ്രത
എൻ‌എ‌സിയുടെ ഡോപാമിനേർജിക് നാഡി ടെർമിനലുകളിലെ ടിഎച്ച് പ്രോട്ടീൻ ഉള്ളടക്കം ടിഎച്ച് ഇമ്യൂണോലേബൽ ചെയ്ത വിഭാഗങ്ങളുടെ ശരീരഘടന ഡെൻസിറ്റോമെട്രിക് വിശകലനത്തിലൂടെ കണക്കാക്കി. ടിഎച്ച് നാരുകളുടെ സാന്ദ്രത എൻ‌എ‌സിയുടെ റോസ്ട്രോകാഡൽ അക്ഷത്തിൽ മൂന്ന് ഏകപക്ഷീയമായ തലങ്ങളിൽ കണക്കാക്കി (ബ്രെഗ്മ എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് എംഎം) (ചിത്രം (Figure6B) .6ബി). ചുരുക്കത്തിൽ, ഒരു നാനോ സൂമർ-എക്സ്ആർ ഡിജിറ്റൽ സ്ലൈഡ് സ്കാനറിന്റെ × 40 മാഗ്‌നിഫിക്കേഷൻ ഉപയോഗിച്ച് ലഭിച്ച മുഴുവൻ സ്‌ട്രിയാറ്റവും എൻഎസിയും അടങ്ങിയ ഡിജിറ്റൈസ് ചെയ്ത ചിത്രം C12000 (ഹമാമത്സു, ജപ്പാൻ) ലഭിച്ചു. തന്നിരിക്കുന്ന എൻ‌എ‌സിക്ക്, ഒപ്റ്റിക്കൽ ഡെൻസിറ്റി (ഒഡി) അളവിന്റെ വിസ്തീർണ്ണം നിർവചിക്കുന്നതിന് മുഴുവൻ ന്യൂക്ലിയസിനും ചുറ്റും ഒരു രേഖ വരച്ചു (ചിത്രം (Figure6B) .6ബി). എൻ‌ഐ‌എച്ച് ഇമേജ് ജെ സോഫ്റ്റ്വെയർ ഉപയോഗിച്ച് അതേ വിഭാഗത്തിലെ കോർപ്പസ് കാലോസത്തിൽ (ടിഎച്ച് ഇമ്മ്യൂണോകെമിസ്ട്രിക്ക് കറയില്ലാത്ത ഒരു പ്രദേശം) വരച്ച വൃത്താകൃതിയിലുള്ള മേഖലയിൽ നിന്ന് കണക്കാക്കിയ ഒഡി മൂല്യം ഉപയോഗിച്ച് ലഭിച്ച മൂല്യം സാധാരണമാക്കി. OD അനുപാതത്തിന്റെ (മൂന്ന് വിഭാഗങ്ങളുടെ കോർപ്പസ് കാലോസത്തിലെ NAc / OD മൂല്യത്തിലെ OD മൂല്യം) ± SEM.
ടി‌എൽ‌ഡി‌എയും തക്മാനും ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ
ന്യൂക്ലിയോസ്പിൻ ആർ‌എൻ‌എ / പ്രോട്ടീൻ കിറ്റ് (മച്ചേരി-നാഗൽ, ഹോർ‌ഡ്, ഫ്രാൻസ്) ഉപയോഗിച്ച് ആർ‌എൻ‌എ സ്നാപ്പ്-ഫ്രോസൺ എൻ‌എസി, വിടിഎ-സമ്പുഷ്ടമായ സാമ്പിളുകൾ, ഹൈപ്പോതലാമസ് എന്നിവയിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചു. നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ പാലിച്ച് ആകെ ആർ‌എൻ‌എ DNase ദഹനത്തിന് സമർപ്പിച്ചു, അളവ് 260 / 280 nm UV ആഗിരണം വഴി കണക്കാക്കി, എജിലൻറ് 2100 ബയോഅനലൈസർ സിസ്റ്റം ഉപയോഗിച്ച് ഗുണനിലവാരം വിലയിരുത്തി, ആർ‌എൻ‌എ സമഗ്രത നമ്പർ (RIN) പിന്നീട് കണക്കാക്കി. 8 ന് താഴെയുള്ള RIN ഉള്ള സാമ്പിളുകൾ നിരസിച്ചു. മൊത്തം ആർ‌എൻ‌എയുടെ ഒരു മൈക്രോഗ്രാം ഉയർന്ന ശേഷിയുള്ള ആർ‌ടി കിറ്റ് (അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ്, ഫോസ്റ്റർ സിറ്റി, സിഎ, യുഎസ്എ) ഉപയോഗിച്ച് സി‌ഡി‌എൻ‌എയിലേക്ക് റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റ് ചെയ്തു.
മുമ്പ് വിവരിച്ചത് പോലെ (33), ടി‌എൽ‌ഡി‌എ ഒരു എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്-നന്നായി മൈക്രോ-ഫ്ലൂയിഡിക് കാർഡാണ്, അതിൽ എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് ഒരേസമയം തത്സമയ പി‌സി‌ആറുകൾ നടപ്പിലാക്കാൻ കഴിയും (അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ്, ഫോസ്റ്റർ സിറ്റി, സിഎ, യുഎസ്എ). പ്ലാസ്റ്റിറ്റിക്കും ഭക്ഷണ ഉപഭോഗ നിയന്ത്രണത്തിനും പ്രസക്തമായ വിവിധ ജീൻ കുടുംബങ്ങളെ ഉൾക്കൊള്ളുന്നതിനായി ഞങ്ങൾ പ്രത്യേകം രൂപകൽപ്പന ചെയ്ത ടി‌എൽ‌ഡി‌എ ഉപയോഗിച്ചു. ഓരോ ഇഷ്‌ടാനുസൃത കാർഡും 384 × 384- സാമ്പിൾ ലോഡിംഗ് ലൈനുകളായി 2 × 4 പ്രതികരണ അറകൾ (റഫറൻസ്: 2a) ഉൾക്കൊള്ളുന്നു. ഒരു 48- ജീൻ സെറ്റ് (പട്ടിക S1 സപ്ലിമെന്ററി മെറ്റീരിയലിൽ) കൂടാതെ നാല് വീട്ടുജോലി ജീനുകളും (18S, Gapdh, Polr2a, Ppia) പഠിച്ചു. ലൈഫ് ടെക്നോളജീസ് തക്മാൻ റിയാക്ടറുകൾ ഉപയോഗിച്ചാണ് തത്സമയ പിസിആർ നടപ്പിലാക്കിയത്, കൂടാതെ എബിഐ പ്രിസം എക്സ്എൻഎംഎക്സ്എച്ച്ടി സീക്വൻസ് ഡിറ്റക്ഷൻ സിസ്റ്റത്തിൽ (അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ്, ഫോസ്റ്റർ സിറ്റി, സിഎ, യുഎസ്എ) പ്രവർത്തിക്കുന്നു. എസ്‌ഡി‌എസ് എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് സോഫ്റ്റ്വെയർ (അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ്, ഫോസ്റ്റർ സിറ്റി, സിഎ, യുഎസ്എ) ഉപയോഗിച്ച് പിസിആർ വഴി അസംസ്കൃത ഫ്ലൂറസെൻസ് ഡാറ്റ ശേഖരിച്ചു, ഇത് ത്രെഷോൾഡ് സൈക്കിളുകൾ സൃഷ്ടിച്ചു. തെറ്റായ പിസിആർ റണ്ണുകൾ വിവേചനം കാണിക്കുന്നതിന് തെർമോഫിഷർ ക്ല cloud ഡ് ആപ്പ് (തെർമോഫിഷർ, യുഎസ്എ) ഉപയോഗിച്ച് ഫിൽ‌റ്റർ ചെയ്‌തതിന്‌ ശേഷം, ഓരോ സാമ്പിളിനുമുള്ള പരിശോധനകൾ n = 6 (n പി 5 ലെ ഡബ്ല്യുഡി ഗ്രൂപ്പിന് = 25). ആപേക്ഷിക അളവെടുപ്പിനായി ഡാറ്റ തെർമോഫിഷർ ക്ലൗഡ് ആപ്പ് (തെർമോഫിഷർ, യുഎസ്എ) ഉപയോഗിച്ച് വിശകലനം ചെയ്തു. RQ = 2 എന്ന സമവാക്യം ഉപയോഗിച്ച് താരതമ്യ സിടി രീതിയെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയാണ് ജീൻ എക്സ്പ്രഷന്റെ ആപേക്ഷിക അളവ് (RQ).സി, ഇവിടെ ഒരു ജീൻ ടാർഗെറ്റിനായുള്ള സിടി ഒരു കാലിബ്രേറ്റർ സാമ്പിളിൽ നിന്ന് കുറയ്ക്കുകയും എന്റോജീനസ് നിയന്ത്രണം ഉപയോഗിച്ച് സാധാരണമാക്കുകയും ചെയ്യുന്ന സ്വന്തം സിടി വ്യതിയാനമാണ്. കൃത്യമായി പറഞ്ഞാൽ, GeNorm അൽഗോരിതം (തെർമോഫിഷർ ക്ലൗഡ് ആപ്പ് RQ, തെർമോഫിഷർ, യുഎസ്എ) ഉപയോഗിച്ച് ഏറ്റവും സ്ഥിരതയുള്ള വീട്ടുജോലി ജീൻ ഞങ്ങൾ നിർണ്ണയിച്ചു. നാല് വീട്ടുജോലി ജീനുകളിൽ, ഗാപ്ഡിനെ എൻ‌എസി, ഹൈപ്പോതലാമസ് എന്നിവയുടെ എൻ‌ഡോജെനസ് കൺട്രോൾ എന്നും വി‌ടി‌എയ്ക്കുള്ള പിപിയ എന്നും നിർവചിച്ചു, വിശകലനം ചെയ്ത മൂന്ന് സമയ കാലയളവിലെ എല്ലാ സാമ്പിളുകളിലും ഇത് ശരിയാണ്. സിഡി ഗ്രൂപ്പുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ജീൻ എക്സ്പ്രഷന്റെ 10% വർദ്ധനവിന് ഒരു നിറം നൽകുന്നതിന് ജീനുകൾ എക്സ്പ്രഷന്റെ ഗ്രാഫിക് പ്രാതിനിധ്യം സ്വമേധയാ രൂപകൽപ്പന ചെയ്തിട്ടുണ്ട്. നോൺ-പാരാമെട്രിക് വിൽകോക്സൺ ഒപ്പിട്ട റാങ്ക് ടെസ്റ്റ് ഉപയോഗിച്ച് കാര്യമായ വ്യതിയാനം ഒരു നക്ഷത്രചിഹ്നത്തിലൂടെ രേഖപ്പെടുത്തി.
സ്ഥിതിവിവര വിശകലനം
ഫലങ്ങൾ പട്ടികകളിലും കണക്കുകളിലും ശരാശരി ± SEM ആയി പ്രകടിപ്പിക്കുന്നു. ഇമ്യൂണോഹിസ്റ്റോകെമിസ്ട്രിയിൽ നിന്ന് ലഭിച്ച ശരീരഭാരം വ്യത്യസ്ത സമയ പോയിന്റുകൾ, കൊഴുപ്പ് മുൻഗണനകൾ, ഒഡി അനുപാതം എന്നിവ വിശകലനം ചെയ്യുന്നതിന് മാൻ-വിറ്റ്നി നോൺ-പാരാമെട്രിക് ടെസ്റ്റ് ഉപയോഗിച്ചു.
3 ദിവസത്തെ കൊഴുപ്പ് മുൻഗണനകളുടെ പ്രാധാന്യം വിലയിരുത്തുന്നതിന്, ഓരോ ദിവസവും ഞങ്ങൾ ഒരു നിര സ്ഥിതിവിവര വിശകലനം നടത്തി. ഓരോ ഗ്രൂപ്പിനും, നോൺ-പാരാമെട്രിക് വിൽകോക്സൺ ഒപ്പിട്ട റാങ്ക് ടെസ്റ്റ് ഉപയോഗിച്ച് കൊഴുപ്പ് ലായനി, നിയന്ത്രണ പരിഹാരം എന്നിവയുടെ ഉപയോഗം പരീക്ഷിച്ചു. മുൻ‌ഗണനാ മൂല്യത്തെ 50% (ഡോട്ട്ഡ് റെഡ് ലൈൻ) ന്റെ സാങ്കൽപ്പിക മൂല്യവുമായി ഞങ്ങൾ താരതമ്യം ചെയ്തു. ചുവന്ന നക്ഷത്രചിഹ്നം ഉപയോഗിച്ച് കാര്യമായ വ്യതിയാനം രേഖപ്പെടുത്തി. QPCR RQ മൂല്യ വിശകലനത്തിനായി ഞങ്ങൾ സമാന പരിശോധന ഉപയോഗിച്ചു; ഞങ്ങൾ ശരാശരി RQ മൂല്യത്തെ 1 ന്റെ സാങ്കൽപ്പിക മൂല്യവുമായി താരതമ്യം ചെയ്തു. നക്ഷത്രചിഹ്നം ഉപയോഗിച്ച് കാര്യമായ വ്യതിയാനം രേഖപ്പെടുത്തി (ചിത്രം (Figure44).
പ്ലാസ്മ സാമ്പിൾ വിശകലനത്തിനായി, ഞങ്ങൾ ഒരു പാരാമെട്രിക് അല്ലാത്ത മാൻ, വിറ്റ്നി പരിശോധന നടത്തി. ടിഎച്ച്-പോസിറ്റീവ് സെല്ലുകളുടെ എണ്ണം രണ്ട് വഴികളുള്ള ANOVA യും ഉപയോഗിച്ച് വിശകലനം ചെയ്തു p മൂല്യം കണക്കാക്കി. നടപ്പിലാക്കിയ ടെസ്റ്റുകളുടെ ഗുണിതം കാരണം, ഒരു ബോൺഫെറോണി പോസ്റ്റ് ഡോക്ക് ചെയ്യുക ഈ പരിശോധനയ്ക്ക് ശേഷം മാത്രമാണ് തിരുത്തൽ പ്രയോഗിച്ചത്. പ്രിസം എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് സോഫ്റ്റ്വെയർ (ഗ്രാഫ്പാഡ് സോഫ്റ്റ്വെയർ ഇങ്ക്., ലാ ജൊല്ല, സിഎ, യുഎസ്എ) ഉപയോഗിച്ചാണ് സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ വിശകലനം നടത്തിയത്.
ഡാറ്റാ സെറ്റിന്റെ പൊതുവായ ഘടന (അതായത്, മൂന്ന് ആഗോള പിസിഎ) ദൃശ്യവൽക്കരിക്കുന്നതിന് ഓരോ ബ്രെയിൻ ബയോപ്സി പഞ്ചുകൾക്കും (വിടിഎ, എൻ‌എസി, ഹൈപ്പോഥലാമസ്) വ്യത്യസ്ത സമയ പോയിന്റിൽ ഒരു സൂപ്പർവൈസുചെയ്യാത്ത പിസിഎ ആദ്യമായി എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് പാരാമീറ്ററുകളിൽ (ടി‌എൽ‌ഡി‌എ, പെരുമാറ്റം, പ്ലാസ്മ ഡാറ്റ) നടപ്പാക്കി. ഓരോ സമയ പോയിന്റിലും). പി‌സി‌എയെ താഴ്ന്ന അളവിലുള്ള ലീനിയർ സ്പേസിലേക്ക് ഡാറ്റയുടെ ഓർത്തോഗണൽ പ്രൊജക്ഷൻ എന്ന് നിർവചിക്കാം, അതായത് പ്രൊജക്റ്റ് ചെയ്ത ഡാറ്റയുടെ വ്യതിയാനം ഉപമേഖലയിൽ പരമാവധി വർദ്ധിപ്പിക്കും. പ്രകടിപ്പിക്കാത്തതോ ചെറുതായി പ്രകടിപ്പിക്കാത്തതോ ആയ ജീനുകൾ ഞങ്ങൾ ആദ്യം ഫിൽട്ടർ ചെയ്തു (ചിത്രം (ചിത്രം XX)). സിഡി ഫെഡ് ഡാമുകളിൽ നിന്നും ഡബ്ല്യുഡി ഫെഡ് ഡാമുകളിൽ നിന്നുമുള്ള സന്തതികൾക്കുള്ള മൂല്യങ്ങൾ വ്യക്തിഗത പിസിഎ പ്ലോട്ടുകളിൽ വ്യത്യസ്ത നിറങ്ങളിൽ പ്രത്യക്ഷപ്പെട്ടു, ഈ രണ്ട് പരീക്ഷണ ഗ്രൂപ്പുകളും മേൽനോട്ടമില്ലാത്ത പിസിഎ ഘടകങ്ങളാൽ നന്നായി വേർതിരിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ടോ എന്ന് ദൃശ്യവൽക്കരിക്കുക. ഈ വിശകലനം സന്തതികളുടെ രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകൾക്കിടയിൽ വ്യത്യസ്തമായി പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന ജീനുകളുടെ ഗ്രൂപ്പുകളെ വേർതിരിക്കുന്നു. തുടർന്ന്, എംആർഎൻഎ മാർക്കറുകളുടെ വിവിധ ക്ലസ്റ്ററുകളിൽ ഫോക്കസ് ചെയ്ത പി‌സി‌എകൾ ചെയ്തു: പ്ലാസ്റ്റിറ്റി (സെൽ അഡെഷൻ, സൈറ്റോസ്‌ക്ലെട്ടൺ, ന്യൂറോട്രോഫിക്ക് ഫാക്ടർ, സിനാപ്റ്റോജെനിസിസ്, ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ റെഗുലേറ്ററി), ഡിഎ പാത്ത്വേ, ജി‌എ‌എ‌ആർ‌ജിക് പാത്ത്വേ, എപിജനെറ്റിക് മോഡുലേറ്ററുകൾ (ഹിസ്റ്റോൺ ഡീസെറ്റിലേസ്, ഹിസ്റ്റോൺ അസറ്റൈൽ ട്രാൻസ്ഫേറസ്). ഈ ഫോക്കസ്ഡ് പി‌സി‌എകൾ മാതൃ ഭക്ഷണക്രമവും ചില മാർക്കറുകളും തമ്മിലുള്ള ബന്ധവും നിർദ്ദിഷ്ട കുടുംബ ജീനുകൾ തമ്മിലുള്ള പരസ്പരബന്ധവും ഒരേസമയം ദൃശ്യവൽക്കരിക്കാൻ ഒരാളെ അനുവദിക്കുന്നു. പി‌സി‌എയുടെയും ഫോക്കസ് ചെയ്ത പി‌സി‌എയുടെയും വിശകലനത്തിനായി ഒരു ഗുണപരമായ സ്കെയിൽ ഉപയോഗിച്ചു: +++: വളരെ നല്ല വേർതിരിക്കൽ; ++: പിസിഎ വേർതിരിക്കലിന്റെ തെറ്റായ ഭാഗത്ത് ഒരു എലിയുമായി നല്ല വേർതിരിക്കൽ; +: തെറ്റായ വശത്ത് രണ്ട് എലികളുമായി (ഓരോ ഗ്രൂപ്പിലും ഒന്ന്) നല്ല വേർതിരിവ്, -: വ്യക്തമായ വേർതിരിവ് ഇല്ല.
ഫലം
ശരീരഭാരവും വളർച്ചയും
ഗർഭാവസ്ഥയിൽ മാതൃ WD കഴിക്കുന്നത് (G1 മുതൽ G21 വരെ) ജനിക്കുമ്പോൾ തന്നെ കുട്ടികളുടെ ശരീരഭാരത്തെ ബാധിച്ചില്ല (ചിത്രം (Figure2) 2) (CD: 6.55 ± 0.07 g vs WD: 6.54 ± 0.05 g p = 0.9232) (കണക്കുകൾ (Figure2A, B) .2എ, ബി). സിഡി ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള സന്തതികളേക്കാൾ ഡബ്ല്യുഡി ഡാമുകളിൽ നിന്ന് ജനിച്ച കുട്ടികളേക്കാൾ ജനനം മുതൽ മുലയൂട്ടൽ വരെയുള്ള ശരീരഭാരം 21% കൂടുതലാണ്. ശരീരഭാരം ഡബ്ല്യുഡി ഡാമുകളിൽ നിന്ന് ജനിക്കുന്ന കുട്ടികളിൽ മുലയൂട്ടുന്നതിനേക്കാൾ വളരെ കൂടുതലാണ് (36.19 ± 0.90 g vs 47.32 ± 1.48 g p <0.001) (ചിത്രം (Figure2C) .2സി). മുലകുടി നിർത്തുന്നത് മുതൽ പരീക്ഷണത്തിന്റെ അവസാനം വരെ (പി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്) എലികൾക്ക് സ്റ്റാൻഡേർഡ് ച ow ഡയറ്റ് നൽകി, ശരീരഭാരം ഡബ്ല്യുഡി ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള സന്തതികൾക്ക് സിഡി ഡാമുകളുടെ സന്തതികളേക്കാൾ കൂടുതലാണ്. വിശദാംശങ്ങളിൽ: ക o മാരപ്രായത്തിൽ (P95) (കണക്കുകൾ (Figure2A, D), 2A, D), CD: 176.8 ± 3.3 g vs WD: 192.2 ± 3.3 g p = 0.0016, പി 93 (ചെറുപ്പക്കാർ) (കണക്കുകൾ) (Figure2A, E) 2A, E) സിഡി: 478 ± 9.9 g vs WD: 508.6 ± 10.3 g p = 0.0452.
വ്യത്യസ്ത സമയ കാലയളവിൽ ഹോർമോണുകളും മെറ്റബോളിക് മാർക്കറുകളും
പ്ലാസ്മ ലെപ്റ്റിൻ, ഇൻസുലിൻ, ഗ്ലൂക്കോസ്, നെഫ എന്നിവയുടെ സാന്ദ്രത P25, P45, P95 എന്നിവയിൽ അളന്നു. എല്ലാ പ്രായത്തിലും, പ്ലാസ്മ ഗ്ലൂക്കോസ്, എൻ‌എ‌എഫ്‌എ, ഡബ്ല്യുഡി സന്തതികളുടെ ലെപ്റ്റിൻ അളവ് എന്നിവ സിഡി സന്തതികളിൽ നിന്ന് സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമായിരുന്നില്ല (പട്ടിക (Table2,2, n ഒരു ഗ്രൂപ്പിന് = 6). ഡബ്ല്യുഡി തീറ്റ ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള സന്തതികളിൽ പി 25 മാത്രം കൊഴുപ്പ് അടിഞ്ഞുകൂടുന്നത് (റിട്രോപെറിറ്റോണിയൽ കൊഴുപ്പ് പിണ്ഡ അനുപാതം)p = 0.0327, മാൻ, വിറ്റ്നി ടെസ്റ്റ്).
മുലയൂട്ടൽ മുതൽ പ്രായപൂർത്തിയാകുന്നതുവരെ കൊഴുപ്പ് മുൻ‌ഗണനയിൽ പെരിനാറ്റൽ ഡബ്ല്യുഡിയുടെ സ്വാധീനം
കൊഴുപ്പ് മുൻ‌ഗണനയിൽ ഡബ്ല്യുഡിയുടെ സ്വാധീനം പര്യവേക്ഷണം ചെയ്യുന്നതിന്, വളർച്ചയ്ക്കിടെ മൂന്ന് വ്യത്യസ്ത സമയ പോയിന്റുകളിൽ ഞങ്ങൾ രണ്ട് കുപ്പി ചോയ്സ് മാതൃക ഉപയോഗിച്ചു. കൊഴുപ്പ് രുചിയുടെ മുൻ‌ഗണനയെക്കുറിച്ച് പഠിക്കാൻ ഈ പരിശോധന ഉപയോഗിച്ചു, ഇത് കഴിക്കുന്നതിന്റെ ഉപാപചയ പ്രഭാവം ഒഴിവാക്കുക. കുപ്പിയിൽ നിന്നുള്ള “അധിക” കലോറി ഉപഭോഗത്തിലെ വ്യത്യാസങ്ങൾ (P25, P45, P95 എന്നിവയിൽ) സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കിൽ പ്രാധാന്യമില്ലെന്ന് ഞങ്ങൾ കാണിച്ചു. ഗ്രൂപ്പുകൾക്കിടയിൽ (കണക്കുകൾ S1അനുബന്ധ മെറ്റീരിയലിൽ എ-സി). മാത്രമല്ല, 1% ധാന്യ എണ്ണ ലായനി ഉപഭോഗത്തിലെ വ്യത്യാസം P1 ലെ WD എലികൾക്ക് 25% കലോറി വർദ്ധിക്കുന്നതിന് കാരണമാകുന്നു (WD: 4.9% vs CD: 3.9% കലോറി കഴിച്ചു) P0.5 ലെ സിഡി എലികൾക്ക് 45% (WD: 2% vs CD: 2.5% കലോറി കഴിച്ചു) (കണക്കുകൾ S1അനുബന്ധ മെറ്റീരിയലിൽ ഡി-എഫ്). P25 ൽ, സിഡി ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള കുട്ടികൾക്ക് കൊഴുപ്പിന് മുൻ‌ഗണനയില്ല (44.87 ± 9.8%, p = 0.339); വിപരീത WD എലികൾ കൊഴുപ്പിന് മുൻഗണന നൽകുന്നു (75.12 ± 8.04%, p = 0.039 വിൽകോക്സൺ സൈൻ-റാങ്ക് ടെസ്റ്റിനെ തുടർന്ന്, ചുവന്ന നക്ഷത്രചിഹ്നം). ഇതിനൊപ്പം രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളും തമ്മിൽ സ്ഥിതിവിവരക്കണക്ക് വ്യത്യാസമുണ്ട് p = 0.0347 (മാൻ, വിറ്റ്നി ടെസ്റ്റ്, ബ്ലാക്ക് ഹാഷ് ടാഗ്) (ചിത്രം (Figure33A).
P45, P95 എന്നിവയിൽ, രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകൾക്കും കൊഴുപ്പിന് കാര്യമായ മുൻ‌ഗണനയുണ്ട്, അതായത്, 50% ന്റെ സൈദ്ധാന്തിക മൂല്യത്തിൽ നിന്ന് വളരെ വ്യത്യസ്തമാണ് (P45, CD: 80.68 ± 2.2% p = 0.0005, WD: 78.07 ± 3.25% p = 0.0005; P95, CD: 74.84 ± 8.4% p = 0.0425, WD: 69.42 ± 8.9% p = 0.109 വിൽകോക്സൺ ഒപ്പിട്ട റാങ്ക് പരിശോധന, ചുവന്ന നക്ഷത്രചിഹ്നം) (ചിത്രം (Figure3A) .3എ). രുചി അവതരണത്തിന്റെ ഒരു ദിവസത്തെ (P45 ൽ) രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളുടെയും മൂല്യങ്ങൾ തിരിച്ചറിയാൻ കഴിയില്ല p = 0.7857, പി 95 എന്നിവയിൽ p = 0.9171 മാൻ-വിറ്റ്നി ടെസ്റ്റ്) (ചിത്രം (Figure33A).
കാലക്രമേണ എലികൾ അവയുടെ കൊഴുപ്പ് ഉപഭോഗം എങ്ങനെ നിയന്ത്രിക്കുന്നുവെന്ന് അറിയാൻ, ഞങ്ങൾ തുടർച്ചയായി മൂന്ന് ദിവസം P45, P95 എന്നിവയിൽ കൊഴുപ്പ് അവതരണം ആവർത്തിച്ചു (കണക്കുകൾ (Figure3B, C) .3ബി, സി). P45 ൽ, ഡബ്ല്യുഡി ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള പുരുഷന്മാർക്ക് മാത്രമേ കൊഴുപ്പ് പരിഹാരത്തിനുള്ള മുൻഗണന ക്രമേണ നഷ്ടപ്പെടുകയുള്ളൂ (ചിത്രം (Figure3B) 3ബി) (മൂന്നാം ദിവസം: 53.12 ± 8.36% p = 0.851 വിൽകോക്സൺ ഒപ്പിട്ട റാങ്ക് പരിശോധനയെ തുടർന്ന്) എന്നിരുന്നാലും, പി 95 (മുതിർന്നവരുടെ പ്രായത്തിൽ) എല്ലാ മൃഗങ്ങളും 3 ദിവസത്തെ പരിശോധനയിൽ പരിണാമമില്ലാത്ത കൊഴുപ്പിനെയാണ് തിരഞ്ഞെടുത്തത് (ചിത്രം (Figure33സി).
ചുരുക്കത്തിൽ, ഈ മാതൃകയിൽ, ആദ്യഘട്ടത്തിൽ (കുട്ടിക്കാലത്ത്), ഡബ്ല്യുഡി ഡാമുകൾ നൽകുന്ന എലിയിലെ കൊഴുപ്പിനുള്ള മുൻഗണന ക o മാരപ്രായത്തിൽ കാലക്രമേണ പുരോഗമന താൽപ്പര്യമില്ലാതെ ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു. പ്രായപൂർത്തിയായപ്പോൾ എലികളുടെ രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളും തമ്മിൽ വ്യത്യാസമില്ലെന്ന് ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു.
ഹൈപ്പോഥലാമസ്, റിവാർഡ് പാതകളിൽ ബ്രെയിൻ പ്ലാസ്റ്റിറ്റിയുടെയും GABA സർക്യൂട്ടുകളുടെയും പുനർനിർമ്മാണത്തിന്റെ തന്മാത്രാ സിഗ്നേച്ചർ
ഗർഭാവസ്ഥയിലും മുലയൂട്ടുന്ന സമയത്തും മാതൃ ഡബ്ല്യുഡി കഴിക്കുന്നത് സന്താനങ്ങളുടെ ഹൈപ്പോഥലാമസ്, റിവാർഡ് പാതകളിൽ സ്വാധീനം ചെലുത്തുന്നുണ്ടോ എന്ന് നിർണ്ണയിക്കാൻ, മസ്തിഷ്ക പ്ലാസ്റ്റിറ്റി, ബ്രെയിൻ മോഡലിംഗ്, ന്യൂറോണൽ സർക്യൂട്ടുകളുടെ മാർക്കറുകൾ എന്നിവ ഭക്ഷണത്തിന്റെ അളവിൽ, എപ്പിജനെറ്റിക് റെഗുലേറ്റർമാർ. വ്യത്യസ്ത മസ്തിഷ്ക പ്രദേശങ്ങളിൽ (അതായത്, ഹൈപ്പോതലാമസ്, വിടിഎ, എൻ‌എസി) അവയുടെ സമൃദ്ധി വിശകലനം ചെയ്യാൻ ഞങ്ങൾ ടി‌എൽ‌ഡി‌എ ഉപയോഗിച്ചു (പട്ടിക S1 മൂന്ന് സമയ കാലയളവിൽ). P25, P45, P95 എന്നിവയിലെ രണ്ട് കുപ്പി ചോയ്സ് ടെസ്റ്റുകൾക്ക് ശേഷം സ്ക്രീനിംഗ് നടത്തി (ചിത്രം (Figure1) 1) ഡബ്ല്യുഡി ഫെഡ് ഡാമുകളിൽ നിന്ന് ജനിച്ച ആറ് പുരുഷന്മാരിലും സിഡി ഫെഡ് ഡാമുകളിൽ നിന്ന് ജനിച്ച ആറ് പുരുഷന്മാരിലും.
ഹൈപ്പോഥലാമസിലെ പിഎക്സ്എൻഎംഎക്സിൽ, പതിമൂന്ന് വ്യത്യസ്ത വിഭാഗങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള അഞ്ച് ജീനുകൾ പ്രധാനമായും പ്ലാസ്റ്റിറ്റി മാർക്കറുകളിലും എം‌എ‌ആർ‌എ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലിനേയും കാണിക്കുന്നു. പ്രധാനമായും പ്ലാസ്റ്റിറ്റി മാർക്കറുകളിലും ഗാബ മാർക്കറുകളിലും ഡബ്ല്യുഡി ഫെഡ് ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള കുട്ടികളിൽ −25% (Gfap) നും −20% (Gabra40) നും ഇടയിൽ. സിഡി തീറ്റ ഡാമുകൾ. റിവാർഡ് പാത്ത്വേ ബയോപ്സികളിൽ (വിടിഎ, എൻ‌എസി), രണ്ട് ജീനുകൾ ഒരു സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ ഉയർന്ന എംആർഎൻഎ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലുകൾ (ഡിഎക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്ആർ, ഗാബ്രാക്സ്നൂംക്സ്), അതായത്, ഡിഎ സിഗ്നലിംഗ്, ഗാബ റിസപ്റ്ററുകൾ, ഒരു ജീൻ ലോവർ എക്സ്പ്രഷൻ (എച്ച്സി‌ആർ‌ടി‌എൻ‌എൻ‌എം‌എക്സ്) (അതായത്, ഓറെക്സിൻ എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് റിസപ്റ്റർ) എന്നിവ പ്രദർശിപ്പിച്ചു. അതേസമയം, നാല് ജീനുകൾ വിടിഎയിൽ (ചിത്രം) (Figure44).
ഹൈപ്പോഥലാമസിലെ പിഎക്സ്എൻഎംഎക്സിൽ, പതിമൂന്ന് വ്യത്യസ്ത വിഭാഗങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള അഞ്ച് ജീനുകൾ സിഡി ഫെഡ് ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള എലികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ഡബ്ല്യുഡി ഫെഡ് ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള കുട്ടികളിൽ −45% (ഫോസ്), −20% (ഫോസ്ബി) എന്നിവയ്ക്കിടയിലുള്ള താഴ്ന്ന എംആർഎൻഎ പ്രകടന നില കാണിക്കുന്നു. റിവാർഡ് പാത്ത്വേ ബയോപ്സികളിലെ P50 ൽ, നാല് ജീനുകൾ ഉയർന്ന mRNA എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലും (Gfap, Dat, Cck45r, Kat2), രണ്ട് ജീനുകൾ NAc ൽ ലോവർ എക്സ്പ്രഷനും (Fos and FosB) പ്രദർശിപ്പിക്കുമ്പോൾ മൂന്ന് ജീനുകൾ കുറഞ്ഞ mRNA എക്സ്പ്രഷൻ ലെവൽ (ആർക്ക്, VTA- യിൽ FosB, Th), ഒരു ജീൻ ഉയർന്ന ലെവൽ (Gabrg5).
ഹൈപ്പോഥലാമസിലെ P95 ൽ, പതിമൂന്ന് വ്യത്യസ്ത വിഭാഗങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള 20 ജീനുകൾ + 20 നും + 40% നും ഇടയിലുള്ള ഉയർന്ന mRNA എക്സ്പ്രഷൻ ലെവൽ പ്രദർശിപ്പിച്ചു (Syt4 മുതൽ Gjd2 വരെ), 3 ജീനുകൾ കുറഞ്ഞ mRNA എക്സ്പ്രഷൻ (ഫോസ്ബി, D1r, പബ്സ് മുതൽ ഗബാർബ് എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്) സിഡി തീറ്റ ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള എലികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ തീറ്റ ഡാമുകൾ. റിവാർഡ് പാത്ത്വേ ബയോപ്സികളിലെ P1 ൽ, 95 ജീനുകൾ + 12 നും + 20% നും ഇടയിൽ (Syn40 മുതൽ Hcrt1 വരെ), 1 ജീൻ NAc- ൽ താഴ്ന്ന പദപ്രയോഗം (Th), 1 ജീനുകൾ ഉയർന്ന mRNA എക്സ്പ്രഷൻ ലെവൽ (Ncam6) എന്നിവ കാണിക്കുന്നു. , Gja1, Gjd1, Gabra2, Htr5a, Htr1b), കൂടാതെ 1 ജീനുകൾ കുറഞ്ഞ mRNA എക്സ്പ്രഷൻ ലെവൽ (Cntf, Igf6, Fos, Socs1, Gabrb3, HdacXNUM) എന്നിവ കാണിക്കുന്നു.
ക്വാണ്ടിഫൈഡ് പാരാമീറ്ററുകൾ (അതായത്, പ്ലാസ്മ ഡോസേജ്, ബിഹേവിയറൽ ഡാറ്റ, എംആർഎൻഎ എക്സ്പ്രഷൻ വ്യതിയാനങ്ങൾ) ഉപയോഗിച്ച് മൂന്ന് ബ്രെയിൻ ബയോപ്‌സികൾക്ക് അനുബന്ധമായി ഞങ്ങൾ മേൽനോട്ടമില്ലാത്ത മൂന്ന് പിസിഎ നടത്തി. എൻ‌എസി, വിടിഎ (പട്ടിക) എന്നിവയ്ക്കായി P95 ൽ മാത്രമാണ് രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളുടെയും വ്യക്തമായ വേർതിരിവ് ലഭിച്ചത് (Table33).
പിസിഎ കോറിലേഷൻ സർക്കിളും ടി‌എൽ‌ഡി‌എ ഡാറ്റയും (ഈ പി‌സി‌എയിൽ ഉൾപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്ന ഭൂരിഭാഗം വേരിയബിളുകളെയും പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു) അനുസരിച്ച്, വേർതിരിക്കലിന് കാരണമായേക്കാവുന്ന ജീൻ കുടുംബങ്ങളെ ഞങ്ങൾ നിർവചിക്കുകയും കേന്ദ്രീകൃത പിസിഎ നടത്തുകയും ചെയ്തു (കണക്കുകൾ (Figure5A, B, 5എ, ബി, ഉദാഹരണത്തിന്). എൻഎസിയിലെ പി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് ഡിഎ മാർക്കറുകളിലും ഹൈപ്പോഥലാമസിലെ പ്ലാസ്റ്റിറ്റി മാർക്കറുകളിലും രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളുടെ സന്തതികളെ വേർതിരിക്കാനാകുമെന്ന് കേന്ദ്രീകൃത പിസിഎ വെളിപ്പെടുത്തി (പട്ടിക (Table33 സംഗ്രഹത്തിനായി). P45 ൽ അത്തരം വിവേചനങ്ങളൊന്നും ലഭിച്ചില്ല. എന്നിരുന്നാലും, P95 ലെ അതേ വിശകലനത്തിൽ NAc, ഹൈപ്പോഥലാമസ് എന്നിവയിലെ GABA സിസ്റ്റത്തിന്റെ വ്യത്യസ്ത മാർക്കറുകളും കൂടാതെ പ്ലാസ്റ്റിറ്റി മാർക്കറുകളും (ഹൈപ്പോതലാമസ്, NAc, VTA എന്നിവയിൽ) എപ്പിജനെറ്റിക് റെഗുലേറ്ററുകളും (NAc ൽ മാത്രം) രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകളെയും വേർതിരിക്കാൻ സംഭാവന ചെയ്യുന്നുവെന്ന് വെളിപ്പെടുത്തി. ചിത്രം (ചിത്രം 5; 5; മേശ പട്ടിക 2).
ഈ വിശകലനം GABAergic മാർക്കറുകളിൽ പെരിനാറ്റൽ ഡയറ്റിന്റെ ദീർഘകാല സ്വാധീനം വെളിപ്പെടുത്തുന്നു, അതുപോലെ തന്നെ ഹോമിയോസ്റ്റാറ്റിക്, പ്ലാസ്റ്റിറ്റി, എപിജനെറ്റിക് മാർക്കറുകൾ എന്നിവ ഹോമിയോസ്റ്റാറ്റിക്, ഭക്ഷണ സ്വഭാവത്തിൽ പ്രതിഫലിക്കുന്ന പ്രതിഫല പാത എന്നിവ വെളിപ്പെടുത്തുന്നു.
ടിഎച്ച് സെല്ലുകളുടെ ഇമ്മ്യൂണോഹിസ്റ്റോകെമിസ്ട്രി ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റ് വിശകലനം സ്ഥിരീകരിച്ചു
വിവിധ വികസന കാലഘട്ടങ്ങളിൽ എൻ‌എസി, വിടിഎ എന്നിവയിലെ ടിഎച്ച് എം‌ആർ‌എൻ‌എയിലെ ചില വ്യതിയാനങ്ങൾ ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചതിനാൽ, ഈ ഫലങ്ങൾ ടിഎച്ച് ഇമ്യൂണോസ്റ്റെയിനിംഗുമായി പരസ്പരബന്ധിതമാക്കുകയാണ് ഞങ്ങൾ ലക്ഷ്യമിട്ടത്. ഡോപാമിനേർജിക് സെൽ ബോഡികൾ സ്ഥിതിചെയ്യുന്ന വിടിഎയിൽ ടിഎച്ച് / ന്യൂൻ പോസിറ്റീവ് സെല്ലുകളുടെ എണ്ണം വിശകലനം ചെയ്യുകയും എൻഎസിയിൽ സ്ഥിതിചെയ്യുന്ന നാഡി അറ്റങ്ങളിൽ ടിഎച്ച് ഇമ്യൂണോലബലിംഗിന്റെ ഒഡി കണക്കാക്കുകയും ചെയ്തു. പി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സിലെ സിഡി എലികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ടിഎച്ച് (+) സെല്ലുകൾ ഡബ്ല്യുഡിയുടെ വിടിഎയിൽ കുറവാണ്. (Figure6A, C, E; 6എ, സി, ഇ; ചിത്രം S2എ സപ്ലിമെന്ററി മെറ്റീരിയലിൽ). മൂന്ന് കാലഘട്ടങ്ങളിൽ (P25) സെക്ഷൻ ലെവലും TH / NeuN ക്വാണ്ടിഫിക്കേഷനും തമ്മിൽ കാര്യമായ ഇടപെടൽ ഉണ്ടായിരുന്നില്ല p = 0.9991, പി 45 p = 0.9026, പി 95 p = 0.9170). P45 ൽ മാത്രം, രണ്ട് സന്തതി ഗ്രൂപ്പുകൾക്കിടയിൽ ഒരു സ്ഥിതിവിവരക്കണക്ക് വ്യത്യാസം ലഭിച്ചു (p = 0.0002) (ചിത്രം (Figure6E) .6ഇ). ഇതിനുപുറമെ, രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകൾക്കിടയിലുള്ള പി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്, പി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് എന്നിവയിലെ എൻഎസിയിലെ ടിഎച്ച് ഇമ്യൂണോസ്റ്റെയിനിംഗിന്റെ വ്യത്യാസമില്ലെന്ന് ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു (പി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സിലെ ഒഡി അനുപാത മൂല്യങ്ങൾ: സിഡിയിലെ എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് ± എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്, സിഡിയിലെ എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് p = 0.2681; ഒഡി അനുപാത മൂല്യങ്ങൾ പി 45: സിഡിയിൽ 1.589 ± 0.033, ഡബ്ല്യുഡിയിൽ 1.651 ± 0.027, p = 0.1542). എന്നിരുന്നാലും, ടി 95 നാഡി എൻ‌ഡിംഗുകളുടെ ഒ‌ഡിയുടെ ഗണ്യമായ കുറവ് ഡബ്ല്യുഡി ഗ്രൂപ്പിൽ നിന്ന് പി 95 ൽ (പി 1.752 ലെ ഒഡി അനുപാത മൂല്യങ്ങൾ: സിഡിയിൽ 0.041 ± 1.550, സിഡിയിൽ 0.046 ± XNUMX, ഡബ്ല്യുഡിയിൽ, p = 0.0037) (കണക്കുകൾ (Figure6B, D, F; 6ബി, ഡി, എഫ്; ചിത്രം S2അനുബന്ധ മെറ്റീരിയലിൽ ബി).
സംവാദം
ഈ പഠനത്തിൽ, മാതൃ പെരിനാറ്റൽ പോഷകാഹാരക്കുറവ് energy ർജ്ജ ഹോമിയോസ്റ്റാസിസ്, ഭക്ഷണം തിരഞ്ഞെടുക്കൽ, സന്താനങ്ങളുടെ ഭക്ഷണം കഴിക്കൽ എന്നിവയിൽ ഉൾപ്പെടുന്ന റിവാർഡ് പാതകളുടെ വികസന പദ്ധതിയെ സ്വാധീനിക്കുമെന്ന് ഞങ്ങൾ അനുമാനിച്ചു. കുട്ടിക്കാലം മുതൽ പ്രായപൂർത്തിയാകുന്നതുവരെ, മസ്തിഷ്ക പ്രദേശങ്ങളിലെ (വിടിഎ, എൻ‌എസി, ഹൈപ്പോഥലാമസ്) പ്രത്യേക തലച്ചോറിലെ പ്രദേശങ്ങളിലെ (വിടിഎ, എൻ‌എസി, ഹൈപ്പോതലാമസ്) ഗാബ, സെറോടോണിൻ, ഡിഎ പാതകളിൽ ജനനം മുതൽ മുലകുടി മാറുന്നതുവരെ മാതൃ ഡബ്ല്യുഡി കഴിക്കുന്നതിന്റെ സ്വാധീനം ഞങ്ങൾ വിശദമായി പരിശോധിച്ചു. കൊഴുപ്പും മധുരവും അടങ്ങിയ, പെരിനാറ്റൽ കാലഘട്ടത്തിൽ കർശനമായി പരിമിതപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്ന ഒരു ഭക്ഷണത്തിന്റെ ഉപയോഗം, ജനിതക ആവിഷ്കരണ പ്രൊഫൈലിലെ മാറ്റവും മെസോലിമ്പിക്കിലെ ന്യൂറോ അനാട്ടമിക്കൽ / വാസ്തുവിദ്യാ മാറ്റങ്ങളുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന സന്തതികളിലെ ആദ്യകാല കൊഴുപ്പ് മുൻഗണനയെ (കുട്ടിക്കാലം) സ്വാധീനിക്കുന്നുവെന്ന് ഞങ്ങളുടെ ഫലങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. ഡോപാമിനേർജിക് നെറ്റ്‌വർക്കുകൾ. എന്നിരുന്നാലും, സന്തതികളെ ച ow ഡയറ്റിൽ ഉൾപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, ക ad മാരക്കാരായ ഡബ്ല്യുഡി തീറ്റ എലികളിൽ കൊഴുപ്പിനോടുള്ള ആകര്ഷണം ക്രമാനുഗതമായി നഷ്ടപ്പെടുന്നതായി ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു, ഇത് ഡിഎ സിസ്റ്റത്തിന്റെ ജീനുകളുടെ കുറച്ച പ്രകടനവും വിടിഎയിലെ ടിഎച്ച് പോസിറ്റീവ് ന്യൂറോണുകളുടെ നേരിയ കുറവുമാണ്. . ഡബ്ല്യു.ബി. തീറ്റ ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള എലികളിൽ GABAergic നെറ്റ്‌വർക്കുകളുടെയും ഹൈപ്പോതലാമസിന്റെ എനർജി ഹോമിയോസ്റ്റാസിസ് ശൃംഖലയുടെയും ഒരു പ്രധാന പ്ലാസ്റ്റിസിറ്റി തിരിച്ചറിഞ്ഞിട്ടും ഗ്രൂപ്പുകളിൽ കൊഴുപ്പ് മുൻഗണന വ്യത്യസ്തമായിരുന്നില്ല (ചിത്രം (Figure77).
ഈ പഠനത്തിൽ ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ച പെരിനാറ്റൽ-ഡബ്ല്യുഡി കഴിക്കുന്നതിന്റെ ആദ്യ ആഘാതം മുലയൂട്ടുന്ന സമയത്ത് സന്താനങ്ങളുടെ ശരീരഭാരം വർദ്ധിക്കുന്നു, പക്ഷേ ജനനസമയത്ത് വ്യത്യാസമില്ല. വാസ്തവത്തിൽ, ഡബ്ല്യുഡി ഗ്രൂപ്പിലെ മൃഗങ്ങൾ മുലയൂട്ടുന്ന കാലഘട്ടത്തിന്റെ അവസാനത്തിൽ സിഡിയേക്കാൾ 21% കൂടുതൽ ഭാരം നേടുന്നു. WD തീറ്റ ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള സന്താനങ്ങളുടെ ജനന ഭാരം മാറ്റുന്നതിനെക്കുറിച്ച് മുമ്പത്തെ പഠനങ്ങൾ പരസ്പരവിരുദ്ധമായ ഫലങ്ങൾ നൽകി: ഉയർന്ന ശരീരഭാരം (19, 34), കുറഞ്ഞ ശരീരഭാരം (18, 21, 35) അല്ലെങ്കിൽ വ്യത്യാസമില്ല (6, 22). ഞങ്ങളുടെ ഡാറ്റ സമീപകാല മെറ്റാ റിഗ്രഷൻ വിശകലനത്തിന് അനുസൃതമാണ് (36) 171 പരീക്ഷണ പ്രസിദ്ധീകരണങ്ങളിൽ നടത്തിയത്, മാതൃ എച്ച്എഫ്ഡി എക്സ്പോഷർ സന്തതികളുടെ ജനന ഭാരത്തെ ബാധിക്കുന്നില്ലെന്നും എന്നാൽ മുലയൂട്ടുന്ന കാലയളവിന്റെ അവസാനത്തിൽ ശരീരഭാരം വർദ്ധിപ്പിക്കുമെന്നും നിഗമനം ചെയ്തു. ഡബ്ല്യുഡി സന്തതികളുടെ ഉയർന്ന ശരീരഭാരം ഒരുപക്ഷേ പാൽ ഘടനയിലും / അല്ലെങ്കിൽ പാൽ ഉൽപാദനത്തിലുമുള്ള മാറ്റത്തെ പ്രതിഫലിപ്പിക്കുന്നു, അത് മുമ്പത്തെ പ്രസിദ്ധീകരണങ്ങളിൽ ചിത്രീകരിച്ചിരിക്കുന്നു (37, 38). അവരുടെ ഉയർന്ന ശരീരഭാരം അനുസരിച്ച്, ഡബ്ല്യുഡി സന്തതികളുടെ റിട്രോപെറിറ്റോണിയൽ കൊഴുപ്പ് അനുപാതം മുലയൂട്ടുന്ന കാലഘട്ടത്തിന്റെ അവസാനത്തിൽ സിഡി സന്തതികളേക്കാൾ വളരെ കൂടുതലായിരുന്നു (പി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്, പട്ടിക Table2), 2), ഇത് മുമ്പത്തെ പഠനങ്ങളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു (18, 21). എന്നിരുന്നാലും, ഉയർന്ന അഡിപ്പോസിറ്റി P45, P95 എന്നിവയിൽ നിലനിൽക്കുന്നില്ല, ഇൻസുലിൻ, NEFA, ഗ്ലൂക്കോസ് പ്ലാസ്മ എന്നിവ പോലുള്ള മറ്റ് ഉപാപചയ പാരാമീറ്ററുകൾ ഗ്രൂപ്പുകൾക്കിടയിൽ വ്യത്യസ്തമല്ല. ഗർഭാവസ്ഥയിലും മുലയൂട്ടുന്ന സമയത്തും വ്യക്തമായ മാതൃ അമിതവണ്ണം ഇല്ലാതെ, സന്തതികളിൽ ശാശ്വതമായ ഉപാപചയ ഫലങ്ങൾ ഉണ്ടാക്കാൻ ഭക്ഷണക്രമം മാത്രം പര്യാപ്തമല്ലെന്ന് ഞങ്ങളുടെ ഫലങ്ങൾ തെളിയിച്ചു (22, 39, 40).
പെരിനാറ്റൽ എച്ച്എഫ്ഡി കഴിക്കുന്നത് രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിന് സന്താനങ്ങളുടെ മുൻഗണനയുമായി നല്ല ബന്ധമുണ്ടെന്ന് റിപ്പോർട്ടുചെയ്‌തു (41). ഞങ്ങളുടെ പഠനത്തിൽ, പതിവ് ച .യിൽ മുലകുടിമാറ്റുന്ന സന്താനങ്ങളിൽ കൊഴുപ്പ് മുൻഗണന പരീക്ഷിക്കുകയെന്ന ലക്ഷ്യത്തോടെ ഞങ്ങൾ ഒരു രേഖാംശ പഠനം നടത്തി.
കുട്ടിക്കാലത്ത് പെരിനാറ്റൽ ഡബ്ല്യുഡിയുടെ സ്വാധീനം (മുലയൂട്ടലിനുശേഷം)
എലിശല്യം കുട്ടികൾ ജനിച്ചതിനുശേഷം 19 - 20 ഖര ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്നു (42) അവരുടെ സെറിബ്രൽ റിവാർഡ് പാതകൾ ഇതുവരെ പക്വതയില്ലാത്തപ്പോൾ (17). അതിനാൽ കൊഴുപ്പിനോടുള്ള അവരുടെ മുൻഗണന പഠിക്കുന്നതും മസ്തിഷ്ക ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റ് വിശകലനവുമായി ഈ ആദ്യകാല മുൻഗണനയെ ബന്ധിപ്പിക്കുന്നതും വളരെ രസകരമായിരുന്നു. മുലയൂട്ടലിനു തൊട്ടുപിന്നാലെ, സിഡി എലികളിൽ തെളിവില്ലാത്ത ഡബ്ല്യുഡി സന്തതികളിലെ കൊഴുപ്പിനുള്ള മുൻഗണന ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു. പെരിനാറ്റൽ പോഷകാഹാരക്കുറവും രുചികരമായ ഭക്ഷണ മുൻഗണനയും തമ്മിലുള്ള ബന്ധവും നിയന്ത്രണ ശൈലികൾക്ക് ചെറുപ്രായത്തിൽ തന്നെ കൊഴുപ്പിനുള്ള കുറഞ്ഞ മുൻഗണനയും കാണിക്കുന്ന മറ്റുള്ളവരുടെ റിപ്പോർട്ടുകൾക്ക് അനുസൃതമാണിത്.43).
ആ പ്രായത്തിൽ മാതൃ ഭക്ഷണവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട് കുട്ടികളുടെ പിസിഎ വിവേചനം കാണിക്കാൻ ആഗോള പിസിഎ അനുവദിച്ചില്ല. എന്നിരുന്നാലും, ഡിഎ മാർക്കറുകളിൽ പരിമിതപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്ന ടാർ‌ഗെറ്റുചെയ്‌ത പിസിഎ നടപ്പിലാക്കിയപ്പോൾ, ഞങ്ങൾ ഗ്രൂപ്പുകളുടെ നല്ലൊരു വിഭജനം നേടി. വാസ്തവത്തിൽ, ഡബ്ല്യുഡി കുട്ടികളിലെ എൻഎസിയിലെ ഡി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് റിസപ്റ്റർ എംആർഎൻഎയുടെ പ്രകടനത്തിൽ പ്രകടമായ വർദ്ധനവ് ഉണ്ട്. എൻഎസിയിലെ ഈ പോസ്റ്റ്‌നാപ്റ്റിക് ഡി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് അമിതപ്രയോഗം കൊഴുപ്പിനുള്ള ഉയർന്ന പ്രചോദനത്തിൽ ഭാഗികമായി ഉൾപ്പെടാം (44). സിഡി പപ്പുകളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ മറ്റ് കുറച്ച് ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റുകൾ പരിഷ്ക്കരിച്ചിട്ടുണ്ട്, അതായത് എൻ‌എസി, വിടിഎ എന്നിവയിലെ ആൽഫ എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് ഗബാ ഉപയൂണിറ്റിന്റെ വർദ്ധനവ്, ഹൈപ്പോഥലാമസിലെ ആൽഫ എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് ഗബാ ഉപയൂണിറ്റിന്റെ കുറവ് എന്നിവ ഈ ന്യൂക്ലിയസുകളിൽ ഗബാ റിസപ്റ്ററുകളുടെ പുന organ സംഘടന നിർദ്ദേശിക്കുന്നു.
കൗമാരത്തിൽ പെരിനാറ്റൽ ഡബ്ല്യുഡിയുടെ സ്വാധീനം
P45- ൽ, അവതരണത്തിന്റെ ആദ്യ ദിവസം തന്നെ രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകൾക്കും സമാനമായ ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് മുൻഗണന ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു, എന്നാൽ രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, ആവർത്തിച്ചുള്ള അവതരണത്തിനുശേഷം WD എലികൾക്ക് കൊഴുപ്പിനോടുള്ള താൽപര്യം ക്രമേണ നഷ്ടപ്പെട്ടു. ആജീവനാന്ത കോഗ്നിറ്റീവ് പ്രോസസ്സിംഗിന് ആവശ്യമായ ന്യൂറോ ബിഹേവിയറൽ പുന organ സംഘടനയുടെ നിർണ്ണായക കാലഘട്ടമാണ് ക o മാരപ്രായം (45), കൂടാതെ വിവിധ പഠനങ്ങൾ ഒരു കൊഴുപ്പ് ഭക്ഷണത്തിൻറെ ഹാനികരമായ വൈജ്ഞാനിക ഫലത്തെ ബാധിക്കുന്നതായി കാണിക്കുന്നു (46-48). ഈ ഫലം മുഹ്‌ഹൗസ്‌ലറിന്റെ ഗ്രൂപ്പിന്റെ മുമ്പത്തെ പ്രവർത്തനവുമായി വൈരുദ്ധ്യത്തിലാണ് (21, 35) ഇതിൽ ജുവനൈൽ എലികൾ (6 ആഴ്ച) ജങ്ക് ഫുഡിന് വ്യക്തമായ മുൻഗണന കാണിച്ചു. എന്നിരുന്നാലും, അവരുടെ പ്രസിദ്ധീകരണങ്ങളിൽ പരീക്ഷണാത്മക മാതൃക വ്യത്യസ്തമായിരുന്നു, കാരണം എലികൾക്ക് സ്റ്റാൻഡേർഡ് ച ow, ജങ്ക് ഫുഡ് എന്നിവയ്ക്ക് മുലകുടി മാറുന്നതിൽ നിന്ന് ബലിയർപ്പണത്തിലേക്ക് (6 ആഴ്ചകൾ) സ access ജന്യമായി പ്രവേശനമുണ്ടായിരുന്നു.
ഒരേസമയം, എൻഎസിയിലെ ഡാറ്റ് എംആർഎൻഎയുടെ വർദ്ധനവും വിടിഎയിലെ Th എംആർഎൻഎയുടെ കുറവും ഞങ്ങൾ കണക്കാക്കി, ഇമ്യൂണോഹിസ്റ്റോകെമിസ്ട്രി ഇത് സ്ഥിരീകരിച്ചു, ഇത് ഡബ്ല്യുഡി എലികളുടെ വിടിഎയിൽ ടിഎച്ച് (+) സെല്ലുകളുടെ എണ്ണം കുറച്ചതായി കാണിച്ചു. മുലയൂട്ടുന്ന സമയത്ത് ഡിഎ സിസ്റ്റത്തിനായി ഒരു ഉയർന്ന ട്രാൻ‌സ്‌ക്രിപ്റ്റോമിക് പ്രവർത്തനത്തിന് ശേഷം, പി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സിലെ കുറച്ച പ്രവർത്തനം ഞങ്ങളുടെ ഡബ്ല്യുഡി എലികളിൽ കാണപ്പെടുന്ന രുചികരമായ ഭക്ഷണത്തിനായുള്ള കുറഞ്ഞ പലിശയെ വിശദീകരിക്കും. വിവിധ ന്യൂക്ലിയസുകളിൽ ഫോസ്, ഫോസ് എംആർഎൻഎ എക്സ്പ്രഷൻ എന്നിവ വ്യവസ്ഥാപിതമായി കുറയുന്നത് മാതൃ ഡബ്ല്യുഡി എക്സ്പോഷറിനുശേഷം കുറഞ്ഞ സെറിബ്രൽ പ്രവർത്തനത്തിന്റെ അടയാളമായിരിക്കുമെന്നതും ശ്രദ്ധിക്കേണ്ടതാണ്.
കൗമാരക്കാരായ ഡബ്ല്യുഡി എലികൾ കൊഴുപ്പിനോടുള്ള താൽപര്യം കാണിക്കുന്നു, അത് അവരുടെ മുൻകാല പെരുമാറ്റത്തിന് വിരുദ്ധമാണ്. കുട്ടിക്കാലത്ത് ഒരു “സാധാരണ” ഭക്ഷണക്രമം ഉപയോഗിക്കുന്നത് ക o മാരപ്രായത്തിൽ അതിശയോക്തി കലർന്ന കൊഴുപ്പ് മുൻ‌ഗണനയിലേക്ക് അവരെ “സംരക്ഷിക്കുന്നു” എന്ന് തോന്നുന്നു. മുലകുടി മാറിയതിനുശേഷം എലികൾക്ക് ജങ്ക് ഫുഡിലേക്ക് സ access ജന്യ ആക്സസ് ഉള്ളപ്പോൾ, റഫർ പോലെ. (21, 35), അവർ കൗമാരത്തിൽ തന്നെ കൊഴുപ്പിനുള്ള ശക്തമായ മുൻഗണന പ്രകടമാക്കുന്നു. ഈ ഫലം സൂചിപ്പിക്കുന്നത് മുലകുടി മാറിയതിനുശേഷം 3 ആഴ്ച ച ow ഡയറ്റ് സർക്യൂട്ടുകൾ പുനർനിർമ്മിക്കുകയും ക o മാരക്കാരായ സന്തതികളെ കടുത്ത കൊഴുപ്പ് വെല്ലുവിളിക്ക് സെൻസിറ്റീവ് ആക്കുകയും ചെയ്യും.
മുതിർന്നവരിൽ പെരിനാറ്റൽ ഡബ്ല്യുഡിയുടെ സ്വാധീനം
ഇതിനകം വിവരിച്ചതുപോലെ ആവർത്തിച്ചുള്ള കൊഴുപ്പ് അവതരണത്തിനുശേഷവും മുതിർന്ന എലികൾ കൊഴുപ്പിനുള്ള മുൻഗണനയുടെ വ്യത്യാസം കാണിക്കില്ല (22, 35). ഒരേസമയം, എൻഎസിയിലെ Th mRNA, പ്രോട്ടീൻ എന്നിവയുടെ കുറവും വിടിഎയിലെ ഡാറ്റ് എംആർഎൻഎയുടെ ആവിഷ്കാര പ്രവണതയും ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു. നഫും സഹപ്രവർത്തകനും (20) എച്ച്എഫ്ഡി ഉപയോഗിച്ച് പെരിനാറ്റൽ കാലഘട്ടത്തിൽ ആഹാരം നൽകിയ മുതിർന്ന എലികളിൽ ഡിഎ സിസ്റ്റത്തിന്റെ കുറഞ്ഞ പ്രവർത്തനം ഇതിനകം റിപ്പോർട്ടുചെയ്‌തു, മൈക്രോഡയാലിസിസ് ഉപയോഗിച്ച് അളക്കുന്ന ആംഫെറ്റാമൈനിനോടുള്ള മൂർച്ചയുള്ള ഡിഎ പ്രതികരണവും കൊഴുപ്പ് പ്രതിഫലത്തിനുള്ള വർദ്ധിച്ച പ്രചോദനവും (ഈ മോഡലിലെ സമീപകാല ക്യുപി‌സി‌ആർ ഡാറ്റ സംഗ്രഹിച്ച പട്ടിക കാണുക, മേശ S2 അനുബന്ധ മെറ്റീരിയലിൽ). എൻഎസിയിലെ ടിഎച്ച് ക്വാണ്ടിഫിക്കേഷന്റെ (എംആർഎൻഎ, ഇമ്മ്യൂണോഹിസ്റ്റോകെമിസ്ട്രി) ഒരു പരിമിതി വരുന്നത് എൻ‌എസി സെല്ലുകൾ‌ക്ക് Th എം‌ആർ‌എൻ‌എയും പ്രോട്ടീനും പ്രകടിപ്പിക്കാനും ഡിഎ ഫൈബർ‌സ് ക്വാണ്ടിഫിക്കേഷനെ പക്ഷപാതമാക്കാനും കഴിയും (49, 50). എന്നിരുന്നാലും, എൻഎസിയിൽ ടിഎച്ച് ഇമ്യൂണോസ്റ്റെയിനിംഗ് ഉപയോഗിക്കുന്നത് പ്രധാനമായും മിഡ്‌ബ്രെയിൻ ഡിഎ ന്യൂറോണുകളിൽ (വിടിഎ, എസ്‌എൻ‌സി) വരുന്ന സാന്ദ്രമായ ആക്സൺ ടെർമിനലുകൾ വെളിപ്പെടുത്തി. സാധാരണയായി, സ്ട്രൈറ്റത്തിലും എൻ‌എസിയിലും ന്യൂറോണുകൾ പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന ടിഎച്ച് വളരെ ഡിഎ നിഖേദ് മൃഗങ്ങളിൽ മാത്രമേ തിരിച്ചറിയാൻ കഴിയൂ (51) അതിനാൽ ഞങ്ങളുടെ രോഗപ്രതിരോധ വിഭാഗങ്ങളിൽ കണ്ടെത്താനാകില്ല. ഈ പഠനത്തിൽ, എൻഎസിയിലെ മ്യൂ ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്ററിന്റെ ശക്തമായ വർദ്ധനവ് ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു, മറ്റ് ഗ്രൂപ്പുകൾ, വ്യത്യസ്ത മോഡലുകളുള്ള, എലിയുടെ വെൻട്രൽ സ്ട്രിയാറ്റത്തിൽ എച്ച്‌എഫ്‌ഡിക്ക് നേരത്തെ തുറന്നുകാട്ടിയപ്പോൾ (മുലയൂട്ടുന്നതിലും ഗർഭാവസ്ഥയിലും)19, 21) അല്ലെങ്കിൽ മാറ്റമില്ല (35). എംആർഎൻഎ തലത്തിൽ മാത്രം കണക്കാക്കിയ ഈ പരിഷ്കാരങ്ങൾക്ക് ഉയർന്ന ഒപിയോയിഡ് സംവേദനക്ഷമതയുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ഡിഎ സർക്യൂട്ടുകളുടെ ഒരു ചെറിയ ഹൈപ്പോ പ്രവർത്തനം പ്രതിഫലിപ്പിക്കാൻ കഴിയും (52) ഞങ്ങൾ നടത്തിയ പെരുമാറ്റ പരിശോധനയിൽ സ്വാധീനം ചെലുത്താൻ ഇത് പര്യാപ്തമല്ല. പ്രവർത്തനപരമായ സമീപനങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് ഈ അനുമാനങ്ങൾ സ്ഥിരീകരിക്കേണ്ടതുണ്ട്. അടുത്തിടെയുള്ള ഒരു പ്രബന്ധത്തിൽ, സമാനമായ ഒരു മാതൃകയിൽ, റൊമാനി-പെരസ്, മറ്റുള്ളവർക്ക്, എച്ച്എഫ്ഡി സന്തതികൾക്കുള്ള ഓപ്പറേറ്റിംഗ് കണ്ടീഷനിംഗ് ബോക്സുകളിൽ ഗണ്യമായ വർദ്ധനവ് നിരീക്ഷിക്കാനായില്ല, പക്ഷേ റൺവേ ടെസ്റ്റ് മാതൃകയിൽ ഒരു ഗോൾ ബോക്സിൽ എത്താൻ കുറഞ്ഞ ലേറ്റൻസി നിരീക്ഷിച്ചു (22). ഞങ്ങളുടെ പരീക്ഷണാത്മക സാഹചര്യങ്ങളിൽ ദീർഘനേരം നീണ്ടുനിൽക്കുന്ന കൊഴുപ്പ് മുൻഗണനയുടെ അഭാവം ഉണ്ടായിരുന്നിട്ടും, പെരിനാറ്റൽ മെറ്റേണൽ ഡബ്ല്യുഡി കഴിക്കുന്നത് മറ്റ് സെറിബ്രൽ സർക്യൂട്ടുകളിൽ ദീർഘകാലം നിലനിൽക്കുന്നതായി ഞങ്ങൾ കണ്ടെത്തി, NAAC, ഹൈപ്പോഥലാമസ് എന്നിവയിൽ GABA പുനർ‌നിർമ്മാണത്തിലൂടെ മധ്യസ്ഥത വഹിച്ചു. ഉപഭോഗ സ്വഭാവത്തിനായുള്ള “സെൻസറി സെന്റിനൽ” ആയി NAc കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു (52). GABA- റിലീസ് ചെയ്യുന്ന LH ന്യൂറോണുകളെ തടഞ്ഞാണ് ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്നത് അടിച്ചമർത്തുന്നതെന്ന് സമീപകാല പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട് (53). ഒ'കോണർ തുടങ്ങിയവർ. NAc D1R ന്യൂറോണുകൾ (GABAergic പ്രൊജക്റ്റിംഗ് ന്യൂറോണുകൾ) ഭക്ഷണം കഴിക്കുന്നത് നിർത്താൻ LH VGAT ന്യൂറോണുകളെ തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നുവെന്ന് കാണിച്ചു (54). പെരുമാറ്റ പ്രതികരണത്തെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിന് കാരണമായേക്കാവുന്ന GABA സർക്യൂട്ട് (NAc / Hypothalamus) ഈ പരീക്ഷണങ്ങൾ അനാവരണം ചെയ്യുന്നു. ബെഡ് ന്യൂക്ലിയസ് സ്ട്രിയ ടെർമിനലിസ് ഉൾപ്പെടുന്ന മറ്റൊരു സർക്യൂട്ട് ഈ വെൻട്രൽ സ്ട്രിയാറ്റം-ഹൈപ്പോഥലാമിക് സിസ്റ്റം പൂർ‌ത്തിയാക്കുന്നു, ഗ്ലൂറ്റമേറ്റിലേക്ക് വി‌ഗ്ലട്ട് എൽ‌എച്ച് ന്യൂറോണുകൾ പുറപ്പെടുവിക്കുന്ന ന്യൂറോണിനെ GABA- റിലീസ് ചെയ്യുന്ന VGAT, എൽ‌എച്ച് vglut2 നേരിട്ട് ഭക്ഷണം നൽകുന്നത് (55). NAc ഷെൽ ഉൾപ്പെടുന്ന വിശപ്പ് നിയന്ത്രിക്കുന്ന സർക്യൂട്ടിന്റെ മറ്റൊരു പ്രധാന ഘടകം VP- യിലേക്ക് GABA- റിലീസിംഗ് ഇൻഹിബിറ്ററി പ്രൊജക്ഷൻ ആണ് (56). തീറ്റയെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നതിനായി ഹൈപ്പോഥലാമസും എൻഎസിയും തമ്മിലുള്ള ഇന്റർ‌പ്ലേയിൽ GABA സിഗ്നലിംഗിന്റെ നിർണായക പങ്ക് ഈ ഡാറ്റ എടുത്തുകാണിക്കുന്നു. ഞങ്ങളുടെ പഠനത്തിൽ, GABA പുനർ‌നിർമ്മാണത്തിൽ ഏർപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന ന്യൂറോണുകളുടെ ജനസംഖ്യയെക്കുറിച്ചും ഈ പരിഷ്‌ക്കരണങ്ങൾ നെറ്റ്‌വർ‌ക്കുകളെ എങ്ങനെ മാറ്റുമെന്നും വിശദീകരിക്കാൻ ഞങ്ങൾക്ക് കഴിഞ്ഞില്ല. എന്നിരുന്നാലും, GABA സർക്യൂട്ടുകളുടെ കേന്ദ്ര പങ്ക് കൂടുതൽ താൽപ്പര്യത്തിന് അർഹമാണ്. പ്രത്യേകിച്ചും, ഇലക്ട്രോഫിസിയോളജിക്കൽ സമീപനങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് ഈ GABA സർക്യൂട്ടുകളുടെ കൂടുതൽ പ്രവർത്തനപരമായ പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തുന്നത് വളരെ രസകരമായിരിക്കും (57). പഠിച്ച മൂന്ന് ന്യൂക്ലിയസുകളിൽ 5HT1a, 5HT1b റിസപ്റ്ററുകൾക്കായി mRNA ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റിന്റെ ആഗോള നിയന്ത്രണം ഞങ്ങൾ നിരീക്ഷിച്ചു. സെറോടോണിൻ നാരുകൾ പ്രൊജക്റ്റ് ചെയ്യുന്നതിൽ ഭൂരിഭാഗവും ഡോർസൽ റാഫെ ന്യൂക്ലിയസ് (ഡിആർഎൻ), മീഡിയൻ റാഫെ ന്യൂക്ലിയസ് (എംആർഎൻ) എന്നിവയിൽ നിന്നാണ്. നിന്നുള്ള സമീപകാല ഡാറ്റ ഇൻ വിവോ റെക്കോർഡിംഗുകളും ഇമേജിംഗ് പഠനങ്ങളും പ്രതിഫലത്തിൽ 5HT ന്റെ നല്ല പങ്ക് കാണിച്ചു (58). DRN- ൽ നിന്നുള്ള 5HT നാരുകൾ ക്ഷുദ്ര നിയന്ത്രണത്തിൽ ഉൾപ്പെടുന്നു (59). വിടിഎ, എൻ‌എസി എന്നിവയിൽ 5HT1a വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നത് ക്ഷുദ്രപ്രയോഗത്തെ നിയന്ത്രിക്കാൻ കഴിയുന്ന ഒരു കോമ്പൻസേറ്ററി മെക്കാനിസമായിരിക്കും. ഹൈപ്പോഥലാമസിൽ, ഫാർമക്കോളജിക്കൽ പഠനങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് സെറോടോണിൻ ഉത്തേജനം മൂലമുണ്ടാകുന്ന തീറ്റ സ്വഭാവത്തെ 5HT1a റിസപ്റ്റർ ഉപവിഭാഗങ്ങൾ അടിച്ചമർത്താം (60, 61). ഹൈപ്പോഥലാമസിലെ വർദ്ധിച്ച 5HT1a, b റിസപ്റ്ററുകൾ എന്നിവയ്ക്ക് സെറോടോണിന്റെ തീറ്റ-അടിച്ചമർത്തൽ പ്രവർത്തനത്തിന് സാധ്യതയുണ്ട്, അതിനാൽ ഇത് ഒരു നഷ്ടപരിഹാര സംവിധാനമായി മാറുന്നു. ശരിയായ പ്രവർത്തന പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തി ഈ അനുമാനങ്ങൾ പരിശോധിക്കേണ്ടതുണ്ട്.
ഈ നെറ്റ്‌വർക്ക് മാറ്റങ്ങൾ Ncam mRNA ആയി പ്ലാസ്റ്റിറ്റി മാർക്കറുകളുടെ പരിഷ്‌ക്കരണങ്ങളുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. മുതിർന്ന എലികളുടെ ഹൈപ്പോഥലാമസിൽ, Ncam1, St8sia4 ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റുകളിൽ വർദ്ധനവ് നിർദ്ദേശിക്കുകയും പോളിസിയാലിക് ആസിഡ് (പി‌എസ്‌എ) സിഗ്നലിംഗിൽ വർദ്ധനവ് കാണുകയും ചെയ്തു. സെൽ-ടു-സെൽ ഇടപെടലുകൾ മോഡുലേറ്റ് ചെയ്യുന്ന ഒരു സെൽ-ഉപരിതല ഗ്ലൈക്കാനാണ് പി‌എസ്‌എ. സെൽ അഡീഷൻ പ്രോട്ടീനുകളുടെ പോളിസിയലൈലേഷൻ കേന്ദ്ര നാഡീവ്യവസ്ഥയിലെ വിവിധ സിനാപ്റ്റിക് പ്ലാസ്റ്റിറ്റി-ആശ്രിത പ്രക്രിയകളിൽ ഉൾ‌പ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, മാത്രമല്ല അക്യൂട്ട് പോസിറ്റീവ് എനർജി ബാലൻസ് സമയത്ത് ഫീഡിംഗ് സർക്യൂട്ടുകളുടെ അഡാപ്റ്റീവ് സിനാപ്റ്റിക് പ്ലാസ്റ്റിറ്റിക്ക് ഇത് ആവശ്യമാണെന്ന് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്.33, 62). കൂടാതെ, ഈ ഹൈപ്പോഥലാമിക് പ്ലാസ്റ്റിറ്റിയിൽ സെൽ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിന്റെയും സിനാപ്റ്റോജെനിസിസിന്റെയും മറ്റ് റെഗുലേറ്റർമാർ ഉൾപ്പെട്ടേക്കാം.
സമാപനത്തിൽ (ചിത്രം (ചിത്രം XX), 7), മാതൃ WD കഴിക്കുന്നത് ഹോമിയോസ്റ്റാറ്റിക്, ഹെഡോണിക് സർക്യൂട്ടുകളുടെ ഓർഗനൈസേഷനിൽ ദീർഘകാലം സ്വാധീനം ചെലുത്തുന്നു. മൂന്ന് നിർണായക സമയ കാലയളവുകളുടെ വിശകലനത്തിലൂടെ, നിർദ്ദിഷ്ട മസ്തിഷ്ക തന്മാത്രാ ഒപ്പുകളുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന കൊഴുപ്പ് മുൻഗണനയ്ക്കായി വ്യക്തമായ ഒരു പരിണാമം കാണിക്കാൻ ഞങ്ങൾക്ക് കഴിഞ്ഞു. കുട്ടിക്കാലത്ത്, കൊഴുപ്പിനുള്ള മുൻഗണന ഡിഎ സിസ്റ്റത്തിന്റെ ഉയർന്ന പ്രവർത്തനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കാം. കൊഴുപ്പ് മുൻഗണനയുടെ വിപരീത സ്വഭാവമുള്ള ക o മാരപ്രായം, നഷ്ടപരിഹാര സംവിധാനം നിർദ്ദേശിക്കുന്ന ഡിഎ സിസ്റ്റം മാർക്കറുകളുടെ താഴ്ന്ന പ്രകടനവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. അറിയിക്കേണ്ട വളരെ രസകരമായ ഒരു കാര്യം, ഈ മാതൃകയിൽ, മുലയൂട്ടലിനു ശേഷമുള്ള സമീകൃതാഹാരം കൊഴുപ്പിനുള്ള ആഗ്രഹം കുറയ്ക്കുന്നതിലൂടെ കൗമാര എലിയെ ദോഷകരമായ ഭക്ഷണ ശീലങ്ങളിൽ നിന്ന് സംരക്ഷിക്കും. പ്രായപൂർത്തിയായപ്പോൾ രണ്ട് ഗ്രൂപ്പുകൾക്കും കൊഴുപ്പിന് സമാനമായ ഉയർന്ന മുൻഗണന ഉണ്ടെങ്കിലും, ഡബ്ല്യുഡി തീറ്റ ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള എലികൾ GABA സർക്യൂട്ടുകളുടെ പുനർനിർമ്മാണം കാണിക്കുന്നു. നിലനിൽക്കുന്ന ഈ പ്ലാസ്റ്റിറ്റിയുടെ അനന്തരഫലങ്ങൾ എന്തൊക്കെയാണ്? ക o മാരപ്രായത്തിൽ അതിശയോക്തി കലർന്ന ഒബെസോജെനിക് ഡയറ്റ് കഴിക്കുന്നത് ഈ മൂർച്ചയുള്ള റിവാർഡ് സമ്പ്രദായത്തെ വീണ്ടും സജീവമാക്കുമോ? പാശ്ചാത്യവൽക്കരിക്കപ്പെട്ട രാജ്യങ്ങളിൽ നവജാതശിശുക്കളുടെയും കുട്ടികളുടെയും പോഷകാഹാര ഫോളോഅപ്പിൽ അത്തരം ചോദ്യങ്ങൾ പ്രസക്തമാണ്.
എത്തിക്സ് സ്റ്റേറ്റ്മെന്റ്
പ്രാദേശിക മൃഗക്ഷേമ സമിതി, യൂറോപ്യൻ യൂണിയൻ (നിർദ്ദേശം 2010 / 63 / EU), ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് നാഷണൽ ഡി ലാ റീചെർച്ച് അഗ്രോണമിക് (പാരീസ്, ഫ്രാൻസ്), ഫ്രഞ്ച് വെറ്ററിനറി വകുപ്പ് (ഫ്രഞ്ച് വെറ്ററിനറി ഡിപ്പാർട്ട്‌മെന്റ്) എന്നിവയുടെ മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുസരിച്ചാണ് എല്ലാ പരീക്ഷണങ്ങളും നടത്തിയത്.A44276). പരീക്ഷണാത്മക പ്രോട്ടോക്കോൾ സ്ഥാപന നൈതിക സമിതി അംഗീകരിച്ച് APAFIS 8666 റഫറൻസിന് കീഴിൽ രജിസ്റ്റർ ചെയ്തു. സമ്മർദ്ദവും ഓരോ പരീക്ഷണ പരമ്പരയിലും ഉപയോഗിക്കുന്ന മൃഗങ്ങളുടെ എണ്ണവും കുറയ്ക്കുന്നതിന് എല്ലാ മുൻകരുതലുകളും സ്വീകരിച്ചു.
രചയിതാവിന്റെ സംഭാവന
ജെപിയും പിബിയും പരീക്ഷണം നടത്തി ചർച്ചയിലും എഴുത്തിലും പങ്കെടുക്കുന്നു. ടി.എം പി.സി.എ നിർവഹിക്കുകയും ചർച്ചയിലും എഴുത്തിലും പങ്കെടുക്കുകയും ചെയ്തു. പരീക്ഷണത്തിന്റെ രൂപകൽപ്പനയിൽ എസ്എൻ സംഭാവന നൽകുകയും ചർച്ചയിൽ പങ്കെടുക്കുകയും ചെയ്തു. പരീക്ഷണത്തിന്റെ രൂപകൽപ്പനയിൽ പിപി സംഭാവന നൽകി, ചർച്ചകളിൽ പങ്കെടുത്തു, കൈയെഴുത്തുപ്രതി എഴുതി. വിപി പരീക്ഷണങ്ങൾ രൂപകൽപ്പന ചെയ്യുകയും നിർവ്വഹിക്കുകയും ഡാറ്റ വിശകലനം ചെയ്യുകയും കൈയെഴുത്തുപ്രതി എഴുതുകയും ചെയ്തു.
പലിശയുടെ പ്രസ്താവന വൈരുദ്ധ്യമാണ്
പലിശയുടെ സാധ്യതയുള്ള തർജ്ജമയായി കണക്കാക്കാൻ കഴിയുന്ന വാണിജ്യപരമോ സാമ്പത്തികപരമോ ആയ ബന്ധങ്ങളില്ലാത്ത ഗവേഷണം നടത്തിയതായി രചയിതാക്കൾ വ്യക്തമാക്കുന്നു.
അക്നോളജ്മെന്റ്
പഠനത്തിലുടനീളം മൃഗങ്ങളെ പരിപാലിച്ചതിന് ഗ്വില്ലൂം പ്യൂപോയെയും ബ്ലാൻഡൈൻ കാസ്റ്റെല്ലാനോയെയും എംആർഎൻഎ വേർതിരിച്ചെടുക്കുന്നതിനുള്ള സഹായത്തിന് ആന്റണി പഗ്‌നീസിനെയും ടി‌എൽ‌ഡി‌എയെയും പ്ലാസ്മ സാമ്പിൾ വിശകലനത്തിൽ സഹായിച്ചതിന് ഇസബെൽ ഗ്രിറ്റിനെയും അലക്സാണ്ടർ ബെനാനിയും മാരി-ചാന്റൽ കനിവെൻ‌ക്കും അംഗീകരിക്കാൻ രചയിതാക്കൾ ആഗ്രഹിക്കുന്നു. അവരുടെ സഹായകരമായ ചർച്ചയ്ക്കും ടി‌എൽ‌ഡി‌എ രൂപകൽപ്പനയ്ക്കും.
അടിക്കുറിപ്പുകൾ
ഫണ്ടിംഗ്. ഈ ഗവേഷണത്തിന് റീജിയൺ ഡെസ് പെയ്‌സ് ഡി ലാ ലോയർ ഗ്രാന്റ് പാരിമാഡ് (വിപി), എൽസിഎൽ ഫ foundation ണ്ടേഷൻ ഗ്രാന്റ് (വിപി, പിപി), സാന്റൈഡിജ് ഫ foundation ണ്ടേഷൻ (വിപി), ഐ‌എൻ‌ആർ‌എ മെറ്റാപ്രോഗ്രാം ഡിഡിറ്റ് (എസ്എൻ, വിപി, പിപി) എന്നിവ പിന്തുണ നൽകി.
സപ്ലിമെന്ററി മെറ്റീരിയൽ
ഈ ലേഖനത്തിനുള്ള അനുബന്ധ മെറ്റീരിയൽ ഓൺലൈനിൽ കാണാം http://journal.frontiersin.org/article/10.3389/fendo.2017.00216/full#supplementary-material.
ചിത്രം S1
കുപ്പി അടങ്ങിയ ധാന്യ എണ്ണയിൽ നിന്നുള്ള മൊത്തം energy ർജ്ജ ഉപഭോഗം. (എ) വെസ്റ്റേൺ ഡയറ്റ് (ഡബ്ല്യുഡി) തീറ്റ ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള നായ്ക്കുട്ടികളിലും കൺട്രോൾ ഡയറ്റ് (സിഡി) തീറ്റ ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള കുട്ടികളിലും പിഎക്സ്എൻഎംഎക്സിൽ എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്‌സിനുള്ള കോൺ ഓയിൽ കുപ്പിയിൽ നിന്നുള്ള കലോറി ഉപഭോഗം. (B) P24- ലെ 45 h- നുള്ള കോൺ ഓയിൽ കുപ്പിയിൽ നിന്നുള്ള കലോറി ഉപഭോഗം (കുപ്പി പരിശോധനയുടെ മൂന്നാം ദിവസം). (C) P24- ലെ 95 h- നുള്ള കോൺ ഓയിൽ കുപ്പിയിൽ നിന്നുള്ള കലോറി ഉപഭോഗം (കുപ്പി പരിശോധനയുടെ മൂന്നാം ദിവസം). പാനലുകൾക്കായി (എ-സി), ഡാറ്റയെ ശരാശരിയായി പ്രകടിപ്പിക്കുന്നു ± SEM, സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കുകളൊന്നുമില്ല (p > 0.05) എല്ലാ പ്രായത്തിലും മാൻ, വിറ്റ്നി നോൺ-പാരാമെട്രിക് പരിശോധനയ്ക്ക് ശേഷം നിരീക്ഷിച്ചു. (ഡി) ധാന്യ എണ്ണ കുപ്പിയിൽ നിന്നുള്ള കലോറി ഉപഭോഗത്തിന്റെ ശതമാനം, ഡബ്ല്യുഡി പപ്പുകളിലെയും സിഡി നായ്ക്കുട്ടികളിലെയും പിഎക്സ്എൻഎംഎക്സിൽ എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് എച്ചിനുള്ള മൊത്തം കലോറി ഉപഭോഗവുമായി (കോൺ ഓയിൽ ബോട്ടിൽ + സ്റ്റാൻഡേർഡ് ച ow ഡയറ്റ്) താരതമ്യം ചെയ്യുന്നു. (ഇ) ധാന്യ എണ്ണ കുപ്പിയിൽ നിന്നുള്ള കലോറി ഉപഭോഗത്തിന്റെ ശതമാനം, ഡബ്ല്യുഡി പപ്പുകളിലെയും സിഡി കുട്ടികളിലെയും പിഎക്സ്എൻഎംഎക്സിൽ (കുപ്പി പരിശോധനയുടെ മൂന്നാം ദിവസം) എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് എച്ചിനായുള്ള മൊത്തം കലോറി ഉപഭോഗവുമായി (കോൺ ഓയിൽ ബോട്ടിൽ + സ്റ്റാൻഡേർഡ് ച ow ഡയറ്റ്) താരതമ്യം ചെയ്യുന്നു. (F) കോൺ ഓയിൽ കുപ്പിയിൽ നിന്നുള്ള കലോറി ഉപഭോഗത്തിന്റെ ശതമാനം ഡബ്ല്യുഡി പപ്പുകളിലെയും സിഡി കുട്ടികളിലെയും പിഎക്സ്എൻഎംഎക്സിൽ (കുപ്പി പരിശോധനയുടെ മൂന്നാം ദിവസം) എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് എച്ചിനായുള്ള മൊത്തം കലോറി ഉപഭോഗവുമായി (കോൺ ഓയിൽ ബോട്ടിൽ + സ്റ്റാൻഡേർഡ് ച ow ഡയറ്റ്) താരതമ്യം ചെയ്യുന്നു. പാനലുകൾക്കായി (ഡി, ഇ), മൊത്തം കലോറി ഉപഭോഗത്തിന്റെ ശതമാനത്തിൽ ഡാറ്റ പ്രകടിപ്പിക്കുന്നു സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കില്ല (p > 0.05) എല്ലാ പ്രായത്തിലും യേറ്റ്സിന്റെ തിരുത്തലിനൊപ്പം ചി-സ്ക്വയറിനെ പിന്തുടർന്നു.
ചിത്രം S2
മൂന്ന് വ്യത്യസ്ത സമയ പോയിന്റുകളിൽ ന്യൂക്ലിയസ് അക്കുമ്പെൻസിലും (എൻ‌എസി) വെൻട്രൽ ടെഗ്‌മെന്റൽ ഏരിയയിലും (വിടിഎ) ടിഎച്ച് ഇമ്യൂണോസ്റ്റെയിനിംഗിന്റെ പ്രതിനിധി ഫോട്ടോമിഗ്രാഫുകൾ. (എ) വിടിഎയുടെ തലത്തിലുള്ള ടിഎച്ച് / ന്യൂഎൻ ഇമ്യൂണോസ്റ്റെയിനിംഗിന്റെ ഫോട്ടോമിഗ്രാഫ്, ബ്രെഗ്മയിൽ നിന്നുള്ള −5.30 എംഎം. ചുവന്ന ലേബലിംഗ് ന്യൂനുമാണ്, പച്ച ഒന്ന് ടിഎച്ചിനും. വെളുത്ത അമ്പടയാളം മൂന്നാമത്തെ നാഡിയുടെ എക്സിറ്റ് കാണിക്കുന്നു. (B) എൻ‌എ‌സിയുടെ തലത്തിൽ ടിഎച്ച് ഇമ്യൂണോസ്റ്റെയിനിംഗിന്റെ ഫോട്ടോമിഗ്രാഫ്, ബ്രെഗ്മയിൽ നിന്ന് + എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് എംഎം. പച്ച ലേബലിംഗ് TH നുള്ളതാണ്. വെളുത്ത അമ്പടയാളം ആന്റീരിയർ കമ്മീഷൻ കാണിക്കുന്നു.
പട്ടിക S1
തക്മാൻ ലോ-ഡെൻസിറ്റി അറേ ജീൻ ലിസ്റ്റ് അനുബന്ധ ലൈഫ് ടെക്നോളജികൾ കണ്ടുപിടിച്ച കോഡുകൾ.
പട്ടിക S2
ഡോപാമൈൻ പാത്ത്വേ ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റ് എക്സ്പ്രഷനുമായി ബന്ധപ്പെട്ട പ്രസിദ്ധീകരിച്ച ഡാറ്റയുടെ സംഗ്രഹം. ചുവന്ന പ്രതീകങ്ങൾ കുട്ടിക്കാലം, നീല നിറങ്ങൾ ക o മാരത്തിലേക്ക്, കറുത്തവ മുതിർന്നവർക്ക്. =: ഗ്രൂപ്പുകൾ തമ്മിലുള്ള സമാനമായ ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റ് എക്സ്പ്രഷനുമായി യോജിക്കുന്നു, +: ഉയർന്ന കലോറി ഡയറ്റ് [ജങ്ക് ഫുഡ്, വെസ്റ്റേൺ ഡയറ്റ് (ഡബ്ല്യുഡി), അല്ലെങ്കിൽ ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഡയറ്റ് (എച്ച്എഫ്ഡി)] തീറ്റ ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള കുട്ടികളിലെ ഉയർന്ന ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റ് എക്സ്പ്രഷനുമായി യോജിക്കുന്നു, കൂടാതെ: ഉയർന്ന കലോറി ഡയറ്റ് (ജങ്ക് ഫുഡ്, ഡബ്ല്യുഡി അല്ലെങ്കിൽ എച്ച്എഫ്ഡി) തീറ്റ ഡാമുകളിൽ നിന്നുള്ള കുട്ടികളിലെ കുറഞ്ഞ ട്രാൻസ്ക്രിപ്റ്റ് എക്സ്പ്രഷനുമായി യോജിക്കുന്നു.
അവലംബം
;
