DeltaFosB Дөңгөлөктөрдү иштетүүнү жөнгө салат (2002)

КОММЕНТАРИИ: DeltaFosb көз карандылыкты дары, жогорку майын, жогорку шекер жана дөңгөлөк келаткан өнөкөт башкаруу менен мээнин чогулган молекулярдык которуу болуп саналат. Бул үстүнөн талап болуп саналат, ошону бир маа- алып мээни өзгөртөт. Бул копиялоо себеп жана мээнин сыйлык схемасында структуралар жана байланыш өзгөртө ген өчүрөт болуп саналат. корутундусу: маалыматтар көз карандылыкты дары жана дөңгөлөк эркинен ортосундагы каларлык окшоштуктарды ачып жана жаратылыш жана дары-азгырган сыйлык да жөнгө ΔFosB үчүн маанилүү ролду сунуш.

Нейро журналы, 15 сентябрында 2002, 22 (18): 8133-8138;

Werme M, Messer C, Олсон L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S.

+ Author Тиешеси

1. 1 Нейро башкармалыктары жана

2. 2 Physiology жана Pharmacology, Каролин мед.- хирургия институтуна, Кабул, S-171 77 Киргизия, жана

3. 3 негизги Нейро үчүн психиатрия жана борбордун бөлүмү, Техас түштүк борборуна институтун, Даллас, Техас 75390-9070

жалпылаган

ΔFosB өнөкөт иолитикада кийин мээдеги регион-белгилүү бир жол менен чогулган бир копиялоо болуп саналат. Мисалы, кыянаттык менен дары кайталап башкаруу АТС көлөмүн көбөйтөтFosB striatum менен. ушул изилдөөнүн, биз табигый дөңгөлөк келаткан таасирин талдоого, табигый пайдалуу жүрүм-турум үлгүсү катары, АТС деӊгээлине жөнүндөFosB striatal аймактарда. Мындан тышкары, чычкан ошол inducibly АТС overexpressFosBstriatal нейрон белгилүү ойлош боюнча АТС мүмкүн ролун изилдөө үчүн колдонулганFosB жүрүм-турумун иштеп боюнча. Lewis чычкандар берилген ад либитум 30 үчүн зорго иштеп мүмкүнчүлүгү км / д ~10 ылайык кандай жаап .Хиския жана АТС көлөмүн көбөйдү көрсөттүFosB ядросунда кулпуланган чуркоо күздүн дуушар келемиштер салыштырганда accumbens. overexpress АТС MiceFosB striatal dynorphin-камтыган нейрондордо тандап overexpress АТС чычкандар, ал эми башкаруу ОДНОПОМЕТНИКИ менен салыштырмалуу алардын жалпы ишке күн сайын чуркап көбөйдүFosB striatal enkephalin-камтыган нейрондордо негизинен башкаруу караганда бир кыйла аз, чуркап кетти. ушул изилдөөнүн маалыматтары кыянаттык менен дары-дармектерди, АТС ыктыярдуу иштеп көбөйөт денгээлде окшош экенин көрсөткөнFosB Мээ сыйлык жолунан. Мындан тышкары, АТС жөнүндө overexpressionFosB өзүнчө striatal өндүрүшүнүн нейрондордун саны көбөйөт жүрүм-турумун иштеп. мурунку иш экенин көрсөттү, анткени ΔFosB Ушул эле нейрондордун калктын overexpression кыянаттык менен дары-пайдалуу касиеттерин көбөйтөт, ушул изилдөөнүн натыйжасы деп ойлойм ΔFosB табигый жана дары-азгырган сыйлык да көзөмөлдөөчү да чечүүчү ролду ойношу мүмкүн.

мурунку бөлүм кийинки бөлүм

тааныштыруу

ΔFosB копиялоо себеп FOS үй-бүлөсүнө таандык жана башка генетикалык инженерия аркылуу fosb гендин алынган. кыска жарым-жашоосун, АТС жөнүндө 35 жана 37 KDA isoforms бар бардык башка FOS сыяктуу протеиндерди, айырмаланыпFosB тынышты, анткени бул isoforms абдан жогорку туруктуулуктун, өнөкөт силкюлю ар кийин мээдеги регион-айкын түрдө топтоо (Hope .Удаалаш., 1994a; Chen .Удаалаш., 1997; Nestler .Удаалаш., 1999). АТС жөнгө салууFosB striatal аймактарда кыянаттык менен дары кайталап башкаруу кийин, айрыкча жакшы изилденген (Hope .Удаалаш., 1994b; Moratalla .Удаалаш., 1996; Chen .Удаалаш., 1997; Nestler .Удаалаш., 1999). mesolimbic тинейджер жолду дары сооп борбордук ролду ойнойт (Koob .Удаалаш., 1998). Бул midbrain боюнча ventral tegmental аймагында келип чыккан жана striatum боюнча ventral бөлүгүндө, ядро accumbens деп токтотулат. кыянаттык менен бир нече дары болбосун курч башкаруу ирмемге ядросу accumbens жана көкүрөк striatum бир нече үй-бүлө жашап кетүүсүнүн белокторду негиз түзөт. Булар протеиндер кыска Жарым ажыроонун менен Activator белок-1 (AP-1) копиялоо себеби комплекстерди пайда Jun-бүлө белоктор менен heterodimers түзөт. Ал эми, андан кийин кайра наркологиялык, бул түздөн-түз алгачкы ген азыктары төмөндөйт дарстарында жана ордуна, туруктуу АТС акырындык менен топтолушу барFosB isoforms. ΔFosB Джунд менен JunB менен азыраак даражада негизинен heterodimerizes (Hiroi .Удаалаш., 1998; Перез-Otano ж.б.., 1998) Атайын мээ аймактарда AP-1 комплекстерди узакка созулган түзүлсүн. Бул узакка созулган AP-1 комплекстери көз карандылыктын негизинде мээнин сыйлык жолдор боюнча кыянаттык менен дары-узак мөөнөттүү таасиринин айрым ортомчу деген сунуш болду (Nestler .Удаалаш., 2001).

Жүрүш-туруш изилдөөлөр кемирүүчүлөрдүн ошол дөңгөлөк чуркоо пайдалуу болуп саналат деп эсептейм. Бул гипотеза иштеп күздүн жетүү үчүн чычкандар дүлөй-басма сөз экенин көрсөтүү, ошондой эле дөңгөлөк чуркап кесепеттерин менен байланышкан бир чөйрөгө коюлтулган жер артыкчылык иштеп эксперименттердин негизинде (Рии, 1993; Belke, 1997; Летт .Удаалаш., 2000). Мындан тышкары, мындай жүрүм-турумунда агрессия күч узак аралыктарга сайын көргөзмө алуу белгилери чуркап келемиш, чуркап түп кирүүгө уруксат берилет, (Hoffmann .Удаалаш., 1987). жогорку адам жөө күлүктөр жасаган арасында Surveys иштеп жаткан көптөгөн адамдар үчүн жаман жүрүм-турум болуп саналат деп божомолдогон (Руди жана Estok, 1989; Чэпмен жана Де Castro, 1990; Furst жана Germone, 1993). Чынында эле, иштеп жаткан критерийлерге көп көрсөтүлүшү диагностикалык Статистикалык Колдонмого киргизилген (Америка психиатриялык бирикмеси, 1994) Көз карандылыкты диагностикалоо.

ушул изилдөөнүн максаты АТС болобу көлөмүн иликтеп болдуFosB чуркоо сыяктуу табигый пайдалуу жүрүм-туруму менен өзгөртүлүшү жана АТС жөнүндө inducible overexpression же жокпу,FosBstriatal аймактарда жүрүм-турумун иштеп жөнгө салуу мүмкүн. Биз бул жерде көрсөтүп, кыянаттык менен дары сыяктуу өнөкөт чуркоо АТС алдыруучуFosB ядросу accumbens менен; Мындан тышкары, АТС жөнүндө overexpressionFosB striatal долбоорлоо нейрон эки башка тилдердин ичинде дөңгөлөк чуркоону тескери таасирин тийгизет. маалыматтар көз карандылыкты дары жана дөңгөлөк эркинен ортосундагы каларлык окшоштуктарды ачып жана АТС үчүн маанилүү ролду сунушFosB табигый жана дары-азгырган сыйлык да жөнгө салуу керек.

Мурунку бөлүм Кийинки бөлүм

МАТЕРИАЛДАР ЖАНА ЫКМАЛАР

Жаныбарлар. Эркек Lewis чычкандар (Møllegaard Breeding борбору, Skansved, Дания) эксперименттин оилогон 250 граммдан шекел колдонулду. чычкандар кирүүгө мүмкүнчүлүгү бар болчу ад либитум суу, тамак-аш, чуркап түп үчүн. Алар 12 саат жарык / караңгы айлампасынын эле, 10 AM боюнча жарык менен 10 PM клеткаларын өчүрүп жарык (43 × 22 × 20 см) 34 см, диаметри менен иштеп рулду камтылган; Ошондуктан, бир төңкөрүш 1.07 м келет. ыктыярдуу дөңгөлөк ишин 4 жумадан кийин, чычкандар кесүү менен өлтүрүп, кыртыштар Батыш өчүрөм алынат же fixative менен эле иштеген жана immunohistochemistry үчүн иштелип чыккан жана ордундагибриддештирүү.

inducibly АТС overexpress болот bitransgenic чычкандардын эки сызыктарFosB н гендин жөнгө салуу системасын контролдугу астында striatal аймактарда тандап да колдонулган (Chen .Удаалаш., 1998). бир катарга, 11A, АТС чакырдыFosB inducibly маал четтетилгенден кийин neuropeptide dynorphin билдирип гана striatal долбоорлоо нейрондордо overexpressed жатат (Kelz .Удаалаш., 1999). Башка ылайык, 11B, АТС чакырдыFosB Кээ бир сөздөр, ошондой эле dynorphin нейрондор көрүнүп турат да, inducibly маал четтетилгенден кийин neuropeptide enkephalin билдирип striatal долбоорлоо нейрондордо негизинен overexpressed жатат. Башкаруу жана ΔFosB-overexpressing чычкандар жана ар бир саптан (11A жана 11B) ичинде ОДНОПОМЕТНИКИ жана маал четтетүү менен туташтырууга болот эле bitransgenic куруу, бар. Бардык чычкандар ичүүчү сууга 100 мкг / мл бир доза боюна бүтүп, н туунду маал күнү тирилди. кишилер катары, натыйжада литрди бири-жарым-тримаксозол (башкаруу) менен колдоого алынган; экинчи жарымы маал алынып салынган (ΔFosB overexpressers) эксперимент калган. маал четтетилгенден кийин алты жума турган убакыт ΔFosB сөз айкашы максималдуу болуп белгилүү (Chen .Удаалаш., 1998; Kelz .Удаалаш., 1999), Чуркап диски крандагы суудан боюнча бою да чычкандардын (башкаруу) жана чычкандар үчүн кулпусу жок (ΔFosB overexpressers), жана өз ыктыяры менен иштеп баштаган. тримаксозол өзү жабыр тарткан дөңгөлөк-иштеп жүрүм мүмкүндүгүн айта үчүн, биз C57BL / 6 чычкандардын (Charles дарыясынын Уппсала, Украина) менен чуркап дөңгөлөк талдоо иштеп күздүн мүмкүнчүлүгүн 100 мкг / мл маал 6 жумага чейин менен мамиле берди. чычкандар анда менен решетка ичинде жайгаштырылган ад либитум чуркап күздүн мүмкүнчүлүгү толугу менен эксперимент учурунда бою калган. башкаруу тобу толугу менен эксперимент учурунда табигый ичүүчү суу менен кабыл алды. Mouse клеткаларына (22 × 16 × 14 см) 12.4 см, диаметри менен иштеп рулду камтылган; Ошондуктан, бир төңкөрүш 0.39 м келет. эки Келемиш менен чычкандар качып маалыматтар ылайыкташтырылган ЭЭМ программасын колдонуу менен ар бир 30 мүн тандалып алынган.

Батыш өчүрөм. Brains Айтпа келемиштер тез алынып, муз-суук психологиялык Санитардык-жылы үзүлгөн жок. bregma 2-1 мм 0.7 мм ядро accumbens жана деъгээлинде мээнин 1.7-мм-коюу coronal бүдүрчөлөр менен макулуктардын жана каптал caudate putamen кыртыштарды татып колдонулган диаметри шибегелер (Paxinos жана Уотсон, 1997). Brain үлгүлөрү 1% боюнча гомогендүү болгон SDS, белок жана аныктамалар Лоури ыкмасы менен жасалган. сүрөттөлгөндөй 5 жана белок 50 мкг ортосунда камтыган Homogenates SDS-polyacrylamide ЗАРИ жүктөлөт жана electrophoresis дуушар болушкан. Бир коён каршы FOS антитело (1: 4000; MJ Iadarola, Саламаттыкты сактоо боюнча улуттук институт, Бетезда, MD) же каршы FosB (N-терминал) греч (1: 4000; Санта-Крус-биотехнология, Санта-Крус, CA) үчүн колдонулган Мында аныктооFosB. Белоктор хрен peroxidase-жактагы IgG антителолорду (1: 2000; тараткычтарды лабораторияларга, Burlingame, CA) колдонуу менен аныкталган chemiluminescence (Dupont NEN, Boston, MA) турат. immunoreactivity гээли (IR) бир Macintosh негизинде сүрөт анализ системасында сан көрсөткүчтөрү, ошондой эле тажрыйба үлгүлөрдү белоктун жогорку башкаруу адамдар менен салыштыруулар ишке ашырылган. Доскада бирдей жүктөлүшүн жана ЗАРИ берүүнү ырастоо үчүн амидо кара иштери менен булгап алышкан. Өчүрөм, ошондой эле тажрыйба жана башкаруу топторунун ортосундагы айырмачылыктарды көрсөткөн эмес, 68 KDA neurofilament протеин үчүн immunolabeled (маалыматтар берилген эмес).

Immunohistochemistry. Lewis 4 жума менен бекитилген менен, башкаруу үчүн качып кеткен чычкандар аябай pentobarbital менен Эллисон жана Ca-жылдын 50 мл менен intracardially эле иштеген жок²⁺- акысыз Тироддун эритмеси (бөлмө температурасы), анын ичинде 0.1 мл гепарин. Андан кийин 250 мл фиксатор (4% параформальдегид жана 0.4% пикрин кислотасы 0.16 м PBS, рН 7.4, бөлмө температурасында) менен коштолду. Мээлер бөлүнүп, 1 саат фиксацияланган абалда кармалып, андан кийин 0.1 м PBSде 10% сахароза жана 0.1% натрий азиди менен криопротекциялоо үчүн 24 ° C температурада 4 сааттын ичинде бир нече жолу чайкады. Мээлер тоңуп калган, ал эми 14 мкм короналдык бөлүмдөр 0.70 жана 1.70 мм брегма деңгээлдеринде топтолгон. Түнкү инкубацияга чейин (нымдуулук камерасында 10 ° C) баштапкы поликлоналдык анти-FosB (N-терминал) антителосу (4: 1; Санта-Крус биотехнологиясы) менен 500% Тритон-PBS (0.3 мкл). Андан кийин бөлмө температурасында 150 саат инкубациядан мурун PBS менен үч жолу чайкап, экинчилик биотинилденген коёнго каршы IgG антителосу (10: 1; Вектор лабораториялары) 1% Тритон-ПБСте (секциясына 200 мкл). Авидин-биотин комплекси кошулганга чейин PBSде дагы үч жолу чайкоо жүргүзүлдү (0.3: 150 жана 10: 1, тиешелүүлүгүнө жараша 100 м PBSде; бир секцияга 1 мкл). 100 мүнөт ичинде үч жолу жуугандан кийин, өндүрүшчүнүн протоколуна ылайык (Вектор лабораториялары) субстрат менен 0.1 мин инкубациядан кийин комплекс элестетилди. Андан кийин бөлүмдөр 150 жолу үч жолу жуулду.

Ордунда гибриддештирүү. курама immunohistochemistry жанаордунда immunohistochemistry үчүн иштелип чыккан гибриддештирүү эксперименттер, мээ бөлүктөрү ошол замат дуушар болдуордунда Буга чейин айтылгандай, олуттуу ашырылган гибриддештирүү, (Seroogy .Удаалаш., 1989; Dagerlind .Удаалаш., 1992). Кырк сегиз Мер ДНК олигонуклеотиддер Академия dynorphin боюнча конкреттүү (296-345) (Дуглас .Удаалаш., 1989) Жана enkephalin (235-282) (Zurawski .Удаалаш., 1986) MRNAs radioactively менен белгиленген болчу [α-³⁵S] dATP (Dupont NEN) алардын 3 учундагы терминал deoxynucleotidyl transferase (Invitrogen, Сан-Диего, CA) колдонуу ~1 × 10 белгилүү бир иш-⁹ CPM / мг. Гибриддештирүү коктейлинин курамында 50% формамид, 4 × SSC (1 × SSC 0.15m NaCl жана 0.015 натрий цитраты, рН 7.0), 1 × Денхардт эритмеси, 1% саркозил, 0.02 мНа₃PO₄, РН 7.0, 10% dextran кычкыл, 0.06 м dithiothreitol жана 0.1 семга сперма ДНК кыркып / мл мг. Гибридешүү 18 ° C бир humidified бөлмөсүндө 42 саат үчүн жүргүзүлгөн. гибриддештирүү кийин, бөлүктөрү 20 ° С ААКсын × 1 мин 60 ар бири төрт жолу жууш алынган. Андан кийин, бөлүмдөр 10 секунд autoclaved суу менен жуу да, ичкиликке данып, аба-кургатылган. Акыр-аягы, NTB2 өзөктүк тректи турундогу (аралаштырып 1: 1 суу менен; Kodak, Рочестер, NY) табакка тарабынан колдонулган. катнаш 2-4 жумадан кийин, слайддар D19 (Kodak) менен иштелип чыккан жана Unifix (Kodak) менен бекитилген.

үчүн оң клеткалардын Counts FosB-IR жана чуркоо боюнча 4 жумадан кийин келемиштер менен FosB-Ирди, dynorphin РНК же enkephalin РНКны colocalizing клеткалар (n = 8) жана башкаруу боюнча (n = 8) эксперименталдык долбоор сокур көз карандысыз байкоочу тарабынан малдын бир слайддан жүргүзүлгөн. Талдоо bregma 1.2 мм деъгээлинде аткарылган (Paxinos жана Уотсон, 1997).

Статистикалык жол-жоболору. АТС айырмасын анализдөөFosB Батыш өчүрөм жана immunohistochemistry эксперименттерде башкаруу жана жөө күлүктөр ортосундагы тепкичтери, t сыноо жүргүзүлгөн. АТС жөнүндө overexpression таасириFosB transgenic чычкандардын жүрүм-турумун иштеп боюнча эки жактуу ANOVA кайталап өлчөмдөрдөн, ичинде-топтун ортосундагы-топ талдоо кесепеттерин колдонуу менен талдоо (Statistică версия 99; StatSoft, Детройт, OK).

Мурунку бөлүм Кийинки бөлүм

ЖЫЙЫНТЫКТАРЫ

АТС жөнүндө жобоFosB дөңгөлөк чуркап ядросу accumbens менен

Lewis алар 13 ± 10.210 м / д турукташкан кийин чуркап чу решетка ичинде жайгаштырылган чычкандар сайын 590 күнгө чейин сызыктуу чуркап, алардын көлөмүн көбөйткөн (хабар ± дегенди билдирет). Бул деңгээл болжол менен жаныбарлар биохимиялык талдоо жүргүзүү үчүн пайдаланылган учурда, күн 32 чейин сакталып турган. акыркы 4 д учурунда, чычкандар 8.910 ± 900 м / д чуркап. Lewis келемиштер Бул чуркап жүрүм мурда байкалган окшош (болотWerme .Удаалаш., 1999). Натыйжада, АТС деӊгээлиFosB агын ядросу accumbens жана макулуктардын жана каптал caudate putamen Батыш өчүрөм текшерилген (n = 7) жана башкаруу (n = 7) кылыъыз. Сүрөттө көрүнүп тургандай, 1, Дөңгөлөк чуркоо Δ көбөйдүFosB ядросу accumbens жылы 37 жана 35 KDA isoforms гээли (p <0.05). Ал эми, Δ айырмасы жок болчуFosB досунун же каптал caudate putamen жөө күлүктөрдүн жана башкаруу ортосундагы өлчөмү (маалыматтар көрсөтүлгөн жок).

көп нускасын көрүү:

PowerPoint келерсин катары жүктөп алуу

Сүрөт. 1.

АТС жөнүндө жобоFosB дөңгөлөк чуркап. АТС жөнүндө 35-37 KDA isoforms системасыFosB ядросунда ченөө башкаруу келемиштер Батыш өчүрөм колдонуп accumbens (C) Жана иштеп жаткан ыктыярдуу чарык 4 апталык келемиштер менен (R). Top, өкүлү тилкени өчүрөм келген. Маалыматтар, эки топту (хабар ± катары берилет n = 7). *p <0.05.

Immunohistochemistry Мында бар экени аныкталдыFosBконтролдоо ядросу accumbens менен көлөмдө алдын клеткалар (n = 8) жана иштеп (n = 8) кылыъыз. АТС жөнүндө CountsFosBнегизги жана сөөктөрүндө көлөмдө алдын клеткалар АТС билдирген клеткалардын санынын өскөнүн көрсөттүFosB-IR ядродогу (p <0.05), бирок чуркагандан кийин аккумулятор ядросунун кабыгында эмес (сүрөт).2). АТС үчүн Айкалыштырылган immunohistochemistryFosB-IR жана ордунда ядросу accumbens менен enkephalin же dynorphin РНК үчүн гибриддештирүү кийин мээдеги бул региондо клетканын түрүн аныктоо үчүн пайдаланылган ΔFosB (Илл чуркап менен башчыны да ынандырууга болот.3). dynorphin РНКны жана FosB-IR да билдирген клеткалардын саны жөө күлүктөр жогору болгон, ал эми (n = 8) башкаруу караганда (n = 8) (Мазмуну1), Жөө күлүктөр менен enkephalin РНКны жана FosB-IR да билдирген клеткалардын орточо саны башкаруу караганда төмөн болгон (Мазмуну 1). Бул таасир мээдеги бул аймактагы негизги салымга айкын болгон (Мазмуну 1). Бул жыйынтыктар көрсөтүлүшүн АТС жөнүндө дарстарындаFosB чуркоо ядросунун dynorphin-камтыган топторду негизинен пайда менен нейрондорду accumbens.

көп нускасын көрүү:

PowerPoint келерсин катары жүктөп алуу

Сүрөт. 2.

Колесен чуркоо АТС санын таасирин тийгизетFosBядросу accumbens менен көлөмдө алдын клеткалар.Top, АТС санынын өсүшүн көрсөтүп чычкан мээ бөлүмдөрдүн өкүлү .ХамелеонFosBядросунда көлөмдө алдын клеткалардын негизги күлүктөрдүн accumbens (Run) Башкаруу менен салыштыруу (Ctr). Толук маалымат, Предишен commissure место.Жыйынтык, Бар Мында үчүн оң клеткалардын айгинеледи диаграммасыFosBбашкаруу келемиштер менен ядро accumbens өзөгү жана орбитанын досунун аспектилери жана ыктыярдуу дөңгөлөк ишин 4 апталык келемиштер менен -IR. Маалыматтар, эки топту (хабар ± катары берилет n = 8). *p <0.05.

көп нускасын көрүү:

PowerPoint келерсин катары жүктөп алуу

Сүрөт. 3.

Мында уюлдук өзгөчөлүгүFosBдөңгөлөк чуркап дарстарында. АТС жөнүндө colocalization көрсөтүп сегиз жеке чычкан мээ бөлүмдөрдүн өкүлү .ХамелеонFosB-IR (күрөң түстүү ядролор) Жана dynorphin РНКны (кара бүртүкчөлөрү) (a) Же ΔFosBядросунда -IR жана enkephalin РНК өзөгүн accumbens (b).

Бул стол көрүү:

Мазмуну 1.

ΔFosB ядросу accumbens менен dynorphin жана enkephalin клеткаларында

АТС таасириFosB дөңгөлөк чуркоону

Мында бир мүмкүн ролун изилдөө үчүнFosB дөңгөлөк чуркап жөнгө салууда биз inducibly АТС overexpress bitransgenic чычкандар эки линиясы пайдаланылганFosB бойго жеткен жаныбарлардын striatal аймактардын (Chen .Удаалаш., 1998; Kelz .Удаалаш., 1999). bitransgenic 11A сызык inducibly overexpress АТС болотFosB гана striatum менен dynorphin-камтыган нейрон ичинде (Kelz .Удаалаш., 1999), Ал эми bitransgenic 11B сызык inducibly overexpress АТС болотFosB негизинен нейрондор, ошондой эле (илл dynorphin көргөн кээ бир сөз менен, бул аймакта enkephalin-камтыган нейрондордо. 4). Чычкандар эки саптары боюна бүтүп, АТС үчүн маал боюнча көтөрүлгөнFosBсөз айкашы (илл өчүрүлгөн. 4) (Kelz .Удаалаш., 1999) Жана ОДНОПОМЕТНИКИ бири-жарым кишилер АТС күйгүзүү үчүн эле маал алынып салындыFosB сөздөр.

көп нускасын көрүү:

PowerPoint келерсин катары жүктөп алуу

Сүрөт. 4.

Мында билдирүүFosB 11B чычкандардын. Brain бөлүмдөрү АТС боюнча анализделгенFosB-IR (күрөң-булганган ядро) Кийин ордунда dynorphin РНК үчүн гибриддештирүү (A) Же enkephalin РНК (B) (кара бүртүкчөлөрү). Мында артыкчылыктуу сөздөр ЭскертүүFosBenkephalin-оң, бирок dynorphin-оң клеткаларда -IR. Of 214 АТСFosBкөлөмдө алдын клеткалар үч 11B чычкандардын санап, 73 ± 11% да enkephalin оң болгон, жана 22 6% да оң dynorphin алынган ±. Мында эч кандай эки этикеткалоо ортосунда көрүндүFosB жана interneuron маркерлер.

11A чычкандар overexpress АТСFosB (Эч кандай тримаксозол) (n = 7) littermate салыштырмалуу биринчи 3 аптадан бери алардын күндөлүк созулган аралыкты башкаруу жогорулатуу табылган (берилген тримаксозол) (n = 8) алардын 2 жумадан кийин чуркап курсу (сүрөт менен бөксө тоосунан көрсөттү.5 A). каларлык айырмаланып, 11B чычкандар overexpressed АТС ошолFosB (n = 7) апта 2 учурунда бир топ убакытка созулган иш аз көрсөтүп, 3 алардын littermate башкаруу караганда (n = 6) (сүрөт. 5 B). өзү жүрүм-турумун иштеп өзгөртүүгө мүмкүн маал мүмкүнчүлүгүн иликтөө үчүн, биз C57BL / 6 чычкандар менен жана алардын ичүүчү суу менен маал эле дөңгөлөк чуркап салыштырган. топтордун ортосунда эч кандай айырма (маалыматтар көрсөтүлгөн жок) табылган.

көп нускасын көрүү:

PowerPoint келерсин катары жүктөп алуу

Сүрөт. 5.

АТС таасириFosB bitransgenic чычкандардын дөңгөлөк чуркоо жүрүм-overexpression. AЧоргодон суу ичип Bitransgenic чычкандар АТС жөнүндө inducible overexpression барFosB striatal dynorphin нейрондордо (суу) Жана иштеп күздүн жетүүнүн биринчи 3 жума (күнүнө аралыкты) иштеп көбөйгөн көрсөттү. Ал эми генетикалык жактан окшош littermate АТС overexpress эмес, аларды таза суу менен маал менен көзөмөлдөйтFosB (жылгасына) Гана биринчи 2 жума чуркап көбөйдү көрсөттү. B, Чычкандардын bitransgenic алдырбай, дагы бир сап, 11B, АТС жөнүндө inducible overexpression менен аталганFosB биринчи кезекте striatal enkephalin нейрондордо (суу) Overexpress эмес, алардын жума 2 жана 3 ичинде генетикалык жактан окшош ОДНОПОМЕТНИКИ салыштырмалуу азыраак чуркап көрсөткөн АТСFosB (жылгасына). # Топтун ичинде иштеп жогорулоосуна (жумасына аралыктан) турат. * АТС ортосунда бир нерсени көрсөтүп туратFosBoverexpressers (суу) Жана башкаруу (жылгасына). Vertical сызыктар апта 1 жана 2, ошондой эле жума 2 жана 3 ортосундагы чек араларды көрсөтүп турат. горизонталдуу сызык # Белгиси менен топтун ичинде жумалык эркинен ортосунда статистикалык айырмачылыктарды сүрөттөгөн. катары маалыматтар айтылган (11A жылгасына,n = 8; 11A суу, n = 7; 11B жылгасына, n = 6; 11B суу, n = 7).^# p <0.05;^## p <0.01;^### p <0.001; *p<0.05.

Мурунку бөлүм Кийинки бөлүм

ТАЛКУУЛОО

Бул макалада биз катаал, өнөкөт дөңгөлөк ишин дары сыяктуу кайталап тобокелдигин көрсөтүп, табигый пайдалуу жүрүм-турум, АТС алдыруучуFosB ядросунда accumbens, мээнин сыйлык жолдорунун маанилүү бөлүгү. Ошондой эле, АТС ошол overexpression көрсөтөтFosB бойго жеткен мал striatal dynorphin нейрондордо созулган жүрүм-турумун, ал эми таза көлөмү жогорулайтFosB биринчи кезекте striatal enkephalin нейрондордо сөздөр тескери натыйжа берет. Бул маалымат колдойм ΔFosB сын табигый жана дары-азгырган, белектерин узак мөөнөттүү таасирин катышып жатат жана АТС маанилүү ролун басаFosB striatal милдеттерин жөнгө салуу.

кыянаттык менен ишин дары окшош молекулярдык жооптор

кыянаттык psychostimulants сыяктуу эле ар түрдүү жана дары-дармек, апийим, спирт, никотиндин жана АТС жөнүндө phencyclidine көбөйтүү баскычтарындаFosB ядросу accumbens-жылы (Hope .Удаалаш., 1994b; Nye .Удаалаш., 1995; Nye жана Nestler, 1996; Nestler .Удаалаш., 1999), Жана биз бул жерде да ушундай эле жооп өнөкөт созулган жүрүш натыйжасы экенин көрсөтүп турат. Өнөкөт кокаин менен, мисалы, кошумча жалпы жасоого түрткөнүн чуркап, striatum айрым аймактарында dynorphin РНК менен дарстарында (Werme .Удаалаш., 2000). кокаин Мурда белгиленгендей (Hiroi .Удаалаш., 1997), АТС жөнүндө дарстарындаFosB чуркап ядросу accumbens боюнча номиналдык бөлүмүндө караганда ядродогу күчтүү. Бирок, ΔFosBошондой эле кыянаттык менен дары caudate putamen белокту түзө эми чуркап дарстарында жана ядро accumbens менен чектелген. Мурунку изилдөөлөр көрсөткөндөй ΔFosB striatum долбоорлоо нейрондор гана билдирип, бул өнөкөт кокаин АТС жогорулататFosB dynorphin билдирип чагылтуу нейрон subpopulation менен артыкчылыктуу (Moratalla .Удаалаш., 1996). Бул изилдөөдө, бириккен immunohistochemistry пайдалануу жанаордунда Ошол эле кыртыш участкаларда гибриддештирүү, биз дөңгөлөк чуркоо да АТС-тайымдарга ээ болууга көрсөттүFosB айрыкча dynorphin нейрон ичинде.

дары сыйлык жана табигый сыйлык да бирдей молекулярдык байыр азгыра тыянак (АТС жөнүндө дарстарындаFosB) Ошол эле нейрондордун типтеги клетка эки кээ бир жалпы механизм аркылуу иш-аракет болушу мүмкүн деп божомолдоого болот ичинде. Бир караганда туурадай жалпы механизм ядро accumbens үчүн dopaminergic берүүнү жогорулаган. Running жана көзкаранды дары курч башкаруу мээдеги бул аймакта тинейджер менен клетка сыртындагы көлөмүн көбөйтөт (Самэтайм жана Yamamoto, 1985; Di Chiara жана Imperato, 1988; Уилсон жана Марсден, 1995). D менен кайталап дарылоо₁ тинейджер кабылдагыч agonist (+/-) - 6-chloro-7,8-dihydroxy-1-phenyl-2,3,4,5-tetrahydro-1H-3-benzazepin hydrobromide D менен айкалышкан жалгыз же₂ кабылдагыч agonist quinpirole АТС көлөмүн көбөйтөтFosB ядросу accumbens жана көкүрөк striatum (Nye .Удаалаш., 1995). кыйыр тинейджер агонисттер болуп Psychostimulant Кокаин менен amphetamine көз карандылыкты дары-дармектер, ошондой эле таза көлөмү көбөйөтFosB striatal аймактарда жогорку (Жабер .Удаалаш., 1995; Nye .Удаалаш., 1995). Мындан тышкары, белгилүү бир тинейджер Ташуучу душманын өнөкөт башкаруу 1- [2- (ЭЭБ [4-fluorophenyl] methoxy) этил] -4- (3-Гидрокси 3-phenylpropyl) пиперазин деканоат, бирок serotonin- же norepinephrine- эмес, тандап Ташуучу ингибиторлору, АТС алдыруучуFosB бул мээ аймактарда (Nye .Удаалаш., 1995). Бул жыйынтыктар АТС ошол кошулуу көрсөтөбүзFosB ар кандай дарылоо кийин striatum менен тинейджер көз каранды болуп саналат.

Мында карама-каршы таасирлериFosB дөңгөлөк-иштеп жүрүм enkephalin нейрондор салыштырмалуу striatal менен overexpression dynorphin

bitransgenic чычкандар АТС мененFosB бойго жеткен жаныбардын тримаксозол чыгаруу менен башчыны да ынандырууга болот overexpression эч кандай ачык өнүгүү бузулууларды көрсөткөн. Чычкандар менен болгон ΔFosBбашкаруу ОДНОПОМЕТНИКИ үчүн көрүнүп турган overexpression striatal dynorphin нейрондордун тандап эмес, жүрүм-турумун иштеп келаткан биринчи 3 жума ичинде, ордуна биринчи 2 жума. кескин айырмаланып, чычкан overexpressing АТСFosB биринчи кезекте striatal enkephalin нейрондордо апта 2 жана өнүктүрүүгө 3 өздөрүнүн башкаруу ОДНОПОМЕТНИКИ аз чуркап. Кызыктуусу, bitransgenic чычкандардын эки катар жерден да кыянаттык менен дары ар кандай жүрүш-жоопторду көрсөтүп окуган. АТС жөнүндө overexpression ал эмиFosB dynorphin нейрондордо кокаин жана Morphine акыбеттерин кесепеттерин (көбөйтөтKelz .Удаалаш., 1999; Nestler .Удаалаш., 2001), АТС жөнүндө overexpressionFosB биринчи кезекте enkephalin нейрондор бул дары-пайдалуу таасирин өзгөртпөйт.

чычкандардын эки катарга көргөн созулган жүрүш боюнча карама-каршы таасир striatal нейрон бул эки жагын ойлош айырмачылыктары схемотехникасын менен түшүндүрүүгө болот. striatal нейрон ашуун 90% нейротрансмиттердин катары Гебанын колдонуу орто бадал чагылтуу нейрон бар. Болжол менен бул нейрондордун бири-жарым да dynorphin жана зат P көп санда билдирүүгө (жана белгилүү даражада D₁ тинейджер кабылдагыч) (Gerfen .Удаалаш., 1990; Le Moine .Удаалаш., 1991) Жана долбоордун түздөн-түз midbrain үчүн. экинчи жарымы enkephalin жогорку бийиктиктерге (жана D билдирүү₂тинейджер кабылдагыч) (Gerfen .Удаалаш., 1990; Le Moine .Удаалаш., 1990) Жана кыйыр ГЛОБУС pallidus жана subthalamic ядро аркылуу midbrain долбоор. түздөн-түз жолуна кошуу кыйыр жолуна кошкон Locomotion төмөндөйт, ал эми Locomotion жогорулатат. Алсак, иштеп жаткан жүрүм-ара өзгөрүүлөр АТС эки саптан көрсөткөнFosBМындай эксперименттердин колдонулган чычкандар -overexpressing чагылдыруусу АТСFosBкыйыр жолуна каршы түздөн-түз жана жандануусу менен -induced өзгөрүүлөр. Бул багытта, ал машине азайтуу АТС overexpressing чычкандардын көргөн иштейт деген ой толгоолорун кызыктууFosB биринчи кезекте enkephalin менен нейрондор буту ишин кыскартууга биринчи муундагы сайуулардын дары-дармектер, АТС түзө тургандыгы менен шайкеш болушу мүмкүнFosB тандап, бул нейрондордун subpopulation ичинде (Hiroi жана Graybiel, 1996; Аткинс .Удаалаш., 1999).

Максаттуу гендер АТС тарабынан жөнгө салынатFosB

АТС таасирлериFosB нейрондордун кыймыл-милдеттерин болжолдуу башка ген жөнгө салуу аркылуу салынат. көп ген, алардын колдоочусу аймактарда AP-1 комплекстери үчүн консенсус сайттар бар экенин эске алып, ошол АТС аракеттери мүмкүнFosB Нейрондор боюнча көп сандаган гендер боюнча комплекстүү кесепеттерин камтыйт. Гана бир нече күнгө чейин аныкталган. AMPA протоколу кабылдагыч курамдык 2 (GluR2) АТС тарабынан upregulated жататFosB ядросу accumbens боюнча, таасир көкүрөк striatum көргөн жок (Kelz .Удаалаш., 1999). Cyclin көз каранды Креатинкиназа 5 (Cdk5) ядро accumbens жана көкүрөк striatum да upregulated жатат (Батлер и др., 2001). Бул таасир ушул гендердеги жайылтуучу аймактарында AP-1 сайттарында ушул аркылуу кыйыр мүмкүн (Brene .Удаалаш., 2000; Chen .Удаалаш., 2000). GluR2 жөнгө салуу, алардын AMPA сезгич сезимталдыкты өзгөртүп striatal нейрон электр жандануусу өзгөртүүгө күтүүгө болот. Cdk5 жөнгө салуу, ошондой эле жогорку striatal орто бадал нейрондор менен байытылган бул тинейджер жана бириктирүүчү жолуна аркылуу нейрондун САМР-жөнгө белок-32 менен жандануусу, өзгөртүүгө мүмкүн (Brene .Удаалаш., 1994; Батлер и др., 1999). Бирок, мындан ары иш аркылуу так молекулярдык жол менен аныктоо зарыл ΔFosBБашка ген сөз өзгөртүү аркылуу, striatal dynorphin жана enkephalin нейрон иш абалды өзгөртөт.

Тыянактар

окшош молекулярдык көнүктүрүү табигый жана дары-азгырган сыйлык кырдаалга ядро accumbens пайда табылгалары жалпы neurobiological механизмдери үзүрлүү жүрүм-эки түрлөрүн көзөмөлдөй алат деп ойлойм. Бул жүрүш менен бир негизги окшоштугу алардын наркотиктик мүнөзү болуп саналат. ΔFosB да жүрүм-турум менен башчыны да ынандырууга болот, ошондой эле өз алдынча striatal dynorphin нейрондордо overexpressed кийин да жүрүм-тат. Балким, ΔFosBБул нейрондор айтылган учурда, милдеттүү жүрүм-турумуна байланыштуу бир нейрон район sensitizes. Да алып-сатарлык, АТС жөнүндө жогорулатуу билимFosB ал, же ар түрдүү молекулярдык жолдору, бул оорулар бир катар үчүн дары-дармек менен дарылоо өнүктүрүү үчүн ылайыктуу максаттуу болушу мүмкүн жөнгө салат деп айтууга болот. Бул, мисалы, наркомания ооруулары гана эмес, анын ичинде милдеттүү жүрүм-турум, болушу мүмкүн эмес, ошондой эле тамак оорулары, патологиялык кумар, ашыкча көнүгүү, балким, атүгүл жадатма милдеттүү начарлашы.

Мурунку бөлүм Кийинки бөлүм

Шилтемелер

Алынган January 29, 2002.
Revision June 11 кабыл алды, 2002.
Сунушу June 12, 2002.

Бул иш тагал Research Council (03185, 11642 жана 04762) тарабынан колдоого алынган, Centrum för idrottsforskning (CIF 86 / 01), Наркология улуттук институтунун, ошондой эле Карылык боюнча улуттук институту. Биз мыкты техникалык жардамы үчүн Карин Pernold жана Карин Lundströmer ыраазычылык билдиребиз.
Кат алышуу Stefan Brené, Нейро департаментинин, Каролин мед.- хирургия институтуна, Лондондо, S-171 77 Таиланд чечилиши керек. E-почта: [электрондук почта корголгон].

Мурунку бөлүм

REFERENCES

↵
1. Америка психиатриялык бирикмеси

(1994) жана диагностикасы психикалык статистикалык окуу куралы, Эд 4. (Америка психиатриялык, Washington, DC).

↵
1. Аткинс JB,
2. Chlan-Fourney J,
3. Nye АЛ,
4. Hiroi N,
5. Carlezon WA мл,
6. Nestler EJ

(1999) типтүү сайуулардын ДК салыштырмалуу мүнөздүү кайталап башкаруу боюнча ΔFosB конкреттүү регионунда дарстарында. Synapse 33: 118-128.

Ыкчам Links