Илимий Rep. 2018; 8: 2766.
Жарыяланган онлайн 2018 Feb 9. чтыкта: 10.1038/s41598-018-21046-0
PMCID: PMC5807356
жалпылаган
даамдуу тамак-аш бар белги ачкычтарды тамак-аш издеп, керектөөнү potentiate касиетке ээ болот. Учурдагы изилдөө кал-potentiated тамактандыруу Pavlovian унаасында түрткү ролун иликтөө үчүн жүрүм-турум, дары-дармек жана аналитикалык ыкмалары менен айкалыштырып иштеген. Биз тамактандыруу үстүнөн сахароза чечимге (CS +) менен жупташкан кал көзөмөлдү өткөрүп ала турган жаңы баштыкча менен сахароза колдонууну стимулдаштыруу экенин кантип көрсөткөн жана бул таасир кал-түрткү башка түрлөрүн байытып белгилүү D1 тинейджер кабылдагыч кошулуу, көз каранды экенин жүрүм-туруму, бирок басаĩдатат, даамы жок. сахароза-жалап жүрүм-Microstructural анализдер CS + ошол жалап ахлаксыздыкка узактыгы, ордуна сахароза басаĩдатат, менен байланыштуу болгон белгилүү бир чен-өлчөм боюнча ишенимдүү таасир туруп, жүрүм-турумун жалап жигердүү ахлаксыздыкка алектенген чычкандар менен жыштыгын көбөйтүү калып жаткандыгын көрсөттү. Андан тышкары, биз CS + айрым айырмачылыктар бул жараян жеп жүрүш маанилүү dysregulation менен байланыштуу деген пикирди колдогон сурайбыз тездиги көбөйөт, тесттин жалпы сахароза алууда менен байланышта болгон кашайтып табылган. изилдөө, ошондуктан, (1) бир тинейджер көз каранды Pavlovian унаасында Жүйөлүү жараян кал-potentiated тамактандырууну ортомчу ала тургандыгын көрсөтүп турат, жана (2) жүрүм-бул жагынан сүйлөм боюнча эксперименталдык жана аналитикалык мамиле кылат.
тааныштыруу
тоюмдуу тамак бар экендигин билдирип Экологиялык ачкычтарды кубаттуу тамак-аш сугарып, себеп болот1-3 жана ачкачылык жок жеп жайылтуу, таасир кемирүүчүлөрдүн байкалган4,5 жана адамдар6-9. ашыра тоюу жана семирип кетүү маанилүү ролду ойнойт деп бул жүрүм-турум таасири,10-13, Кабак-potentiated тамактандыруу (CPF) тапшырманы колдонуп окуп болот. типтүү CPF изилдөөдө, ачка жаныбарлар шартталган өбөлгө (CS +, мисалы, бир угуу тону) ортосунда кайталап жупташтырууларын турган Pavlovian шарттаган өтүүгө жана Алар чөйчөктөн жалмап сахароза чечүү, ошондой эле даамдуу тамак-аш, же суюктук аз сандагы, сынамык бөлмөдө туруктуу жайгашкан орду. Андан кийин, алар толук текшерүү чейин курсагы ток жүргөндөр, камсыз кылуу үчүн алардын тейлөө чау кирүүгө чектелбеген мүмкүнчүлүгү берилет. Жаныбарлар анан бөлмөсүнө кайтып келип CS + шоссеси бир noncontingent тартипте көрсөтүлгөн, ал эми эркин чөйчөгүнөн сахарозага керектөөгө уруксат берилген. Мындай шартта, мал түгөйсүз сигнал (CS-) менен жыйналыштарына CS + тууганы менен текшерүү учурунда тамак-аш керектөөнүн бир айткан жогору болот.
Мындай жыйынтыктар тышкы ачкычтарды тамактандырууну камсыз кылуу үчүн өз алдынча психологиялык ачкадан чыгышы мүмкүн экендигин көрсөтүп турат, ал эми бул таасир негизги психологиялык жараяндар бекем эмес. Кыязы, даамдуу тамак-аш керектөө менен байланышкан ачкычтарды (мисалы, негизделген стимул-жооп) тойгузган үстүнө кокус же туруктуу контролду жүзөгө ашырууга болот. Бул CPF ортомчулук негизги механизм болуп саналат, анда CS + Pavlovian Пропаганда учурунда түзүлгөн атайын тамак жүрүш тактоочу керектөөгө түрткү бериши керек. бул жооп окуу Жогоруда айтылган мисал сыяктуу тамак-аш булагы, окутуу жана тестирлөө аркылуу бекитилип жатканда карашта болуу туурадай болуп саналат. Бул жагдайды CPF көбү нааразылык билдирсе да, ошондой эле азык-түлүк менен байланышкан ачкычтарды жаңы жерлерде тамактанышат жаратышы мүмкүн деген кабарлар болгон жок14-16Алар кыйыр тамактандырууну башкара аларын көрсөткөн. Мунун себеби мындай ачкычтарды аларды топтоо жана аспаптык тамак-аш издеп жүрүш-күч берет эле Pavlovian унаасында Жүйөлүү аркылуу азыктанып potentiate деп17,18. бул Жүйөлүү көрүү CS +, ошондой эле тамак-аш даяр болгондо тоют даярдоого алып келет тамак издеп, камырабаган, себеп тургандыгын болжолдоодо. Же болбосо, даамдуу тамак-аш үчүн белги берген далилдер даам сигналдар гедонисттик баа жардам берет19-21, Ал ачкычтарды тамак ичүүгө даярдоо менен жарым-жартылай тамактандырууга potentiate деп божомолдоого болот. Бул гедонисттик мазмунун Жүйөлүү көз mechanistically айырмаланып, ал эми, бул билдирүүлөр бири-бирине айкалышат жана CPF жөнүндө ар тараптуу түшүнүк берүү мүмкүн10,22.
CPF менен кызыктыруу жана гедонисттик каттоо айырмалай бир жолу тамак-аш жупташкан ачкычтарды тойгузуу микроструктуралары кандай таасир аныктоо болуп саналат. Кемирүүчүлөр эркин сахароза чечим же башка даамдуу суюктук керектөөгө уруксат берилген, алар кыймылсыз мезгилдер менен бөлүнүп турган узактыгынан ар кандай башаламандыктарды жалап менен алек. бул жалап ахлаксыздыкка орточо узактыгы суюктук басаĩдатат, ишенимдүү жана ылганган чараларды камсыз кылат, ал эми23,24, Бул ахлаксыздыкка жыштыгы шыктандыруу жол тарабынан көзөмөлдөнөт деп эсептелет25-28. Ошентип, CS + сахароза басаĩдатат, жогорулатуу менен тоюттандыруу түрткү болсо, анда кал жалап-ахлаксыздыкка жана узактыгы, бирок, сөзсүз жыштыгы жогорулатуу керек. Ал эми, шыктандыруучу мазмунун CS + сахароза издеп, керектөөнү жаратышы керек деп божомолдойт жаныбарлар тез-тез алып, башка иш менен алек болсо да, бирок, сөзсүз эле узак, жалап менен ооруган.
Учурдагы изилдөө эки CPF протоколдорду колдонуудан, бир сахароза ар дайым бир жерде (Experiment 1) колдо бар болгон, жана баштапкы даярдоо боюнча өзгөргөн жана (эксперименттер сынап жаткан 2 кайсы бири жана сахароза жалап микроструктуралары боюнча CS + жеткирүү кесепеттерин иликтөө 3), келгиле, CS + кыйыр таасирин баалоого мүмкүндүк берет. Биздин бул жооп-көз карандысыз (жалпылоочу) тамактандыруу боюнча тамак-аш жупташкан таяна таасирин баалоо ыкмасы Pavlovian-а-аспаптык өткөрүп кийин үлгү болгон (PIT) көп боюнча сыйлык-жупташкан таяна шыктандырган Жүйөлүү тийгизген таасирин изилдеп чыгуу үчүн колдонулат милдети, сыйлык-издеп жүрүм-18,29,30. Ошондой эле, биз, адатта, ал адабият менен салыштыруу үчүн шарттарды салыгы изилдөөлөрдө колдонулган Pavlovian аналоги жана сыноо параметрлерин кабыл алынган. тинейджер D1 кабылдагыч иш экенин эске алып кал-түрткү жүрүш КУРГАТУУ көрсөтпөө жана башка иш-чаралар үчүн чечүүчү мааниге ээ31-33 Ал эми тамак жүрүш гедонисттик аспектилери боюнча салыштырмалуу анча25,28,34, Биз да бул күчүндө түрткү ролун андан ары иликтөөгө катары (Experiment 1) жалап кал-potentiated кант боюнча D3 кабылдагыч блокада таасирин баа берди. Акыр-аягы, биз тийиштүү CPF жана шыктандыруу жана гедонисттик көз менен алдын ала турган болуп CPF, тандап жыштыгы же сахароза жалап-жылдын ахлаксыздыкка узактыгын да жогорулашы менен байланыштуу болгон, жокпу, сынап Бул эксперименттердин сахароза Сабаган маалыматтарды микроструктуралары талдоо.
натыйжалары
азык-түлүк булагы сигнал ордуларында менен азыктанып Карточкалар-potentiated
Биринчи экспериментте, биз сахарозага жалмап үчүн керектүү жоопторду даярдоо жана сыноо баскычында боюнча бирдей болгон бир шарттуу жооп-айкалышкан CPF долбоорду колдонулат. Ачка чычкандар бөлмөсүндө бир тарабында бир азык-чыны боюнча сахароза болушу үчүн тезирээк CS + түзүү Pavlovian пропагандалардан 10 д берилген. Пропаганда акыркы күнү, чөйчөк жазмалары (ортосундагы-субъекттеринин SEM ±) CS + (23.72 ± 2.79 күнүнө мүнөт) аралык тергөө аралыгы [18.27 ± 3.25 күнүнө мүнөтүнө каршы ичинде бир кыйла жогору болгон; жупташкан-үлгүлөр t-test, t(15) = 3.13, p = 0.007]. CS− ичиндеги кубок жазуулары (мүнөтүнө 8.60 ± 1.91) сыноолор аралык аралыктан олуттуу айырмаланган жок [мүнөтүнө 10.69 ± 2.00; жупташкан үлгүлөр t-test, t(15) = -1.60, p = 0.130].
Радж анда сахароза жалап боюнча CS + кесепеттерин мүнөздөө үчүн азык-апрелде штатындагы эки CPF сыноолорго берилди. Ар бир тест менен чычкандар бизге CPF боюнча сахароза басаĩдатат, таасирин баалоо жол, 2% же 20% сахароза чечүү үчүн эркин кирүүгө мүмкүнчүлүгү бар болчу. Figure 1a CS мезгилдин CS сыноолорго милдети деп байкалган кандай кайсаса, жалпы санын көрсөтөт, CS түрү жана сахароза топтолушу. Маалыматтарды жалпыланган сызыктуу аралаш натыйжалуу моделдерин жардамы менен талданды (Кошумча токтому S1). Маанилүүсү, олуттуу CS мөөнөтү × CS түрү өз ара бар эле, t(116) = 12.70, p <0.001. Андан аркы анализ (концентрация боюнча кулап) CS + сыноолорунун кыйла жогорулагандыгын көрсөттү, p <0.001, бирок CS− сыноолору эмес, p = 0.118, CS + дан CSга чейинки деңгээлге салыштырмалуу сахарозанын жалалышын көбөйтүүдө CS−ге караганда натыйжалуу болгонун көрсөтөт. Биздин анализ, ошондой эле бул тандоо тандап кыйла сахароза топтолуу (3-тараптуу өз ара, p <0.001). Тактап айтканда, CS + 2% жана 20% шарттарда сахарозанын жалоосун көтөрүүдө эффективдүү болгон, ps <0.001, CS− 2% тестирлөөдө жалган көрсөткүчтөргө олуттуу таасирин тийгизген жок, p = 0.309, бирок 20% тесттин жупуну, бирок олуттуу өсүшүнө түрткү болду, p = 0.039. Ошентип, тамак-аш менен жупташтырылган калька тамактанууну контролдоодо кыйла натыйжалуу болгонуна карабастан, чычкандарга сыноодон өтө даамдуу сахарозанын эритмесин ичүүгө уруксат берилгенде, жупталбаган калька дагы ушундай таасир эткендей болду.
бир азык булагына кал-potentiated тойгузуу берүү
сахароза Experiment 1 окутуу жана тестирлөө учурунда бир эле булактан жеткиликтүү болгондуктан, байкалган CPF таасир үчүн CS + жөндөмдүүлүгүнө көз каранды болгон жокпу, бул белгисиз (1) түрткү келемиш издеп жана сахарозага же (2) жалмап түздөн-түз конкреттүү ашыгышат шартталган чагылууже адат. Эксперимент 2 азык чөйчөгүнө кант өтөө менен байланышкан бир CS + жүрбөгөнүбүздү текшерип менен мурдагы гипотезага көбүрөөк кызга багытталган КУРГАТУУ байкалган жүрүм-кубулуштар менен салыштырууга сыноо боюнча камералык карама-каршы тарапта болуп атылып, тартып жалап сахарозага түрткү болушу мүмкүн.
Радж Pavlovian жаткан акыркы күнү менен кал атайын алдын ала мамиле жүрүм-турум алып келген, Experiment 1 колдонулган эле Pavlovian аналоги тартиби менен окуудан өтүштү. Тамак-аш чөйчөк ыкмалар (± ортосундагы-субъекттеринин SEM) аралык тергөө аралыгы [18.71 ± 1.73 күнүнө мүнөткө CS + (12.49 ± 0.98 күнүнө мүнөт) салыштырмалуу учурунда көбүрөөк болгон; жупташкан-үлгүлөр t-test, t(15) = 3.02, p = 0.009]. CS− (мүнөтүнө 9.41 ± 0.98) менен сот аралык аралыктын ортосунда олуттуу айырмачылыктар болгон жок [мүнөтүнө 8.44 ± 0.88; жупташкан үлгүлөр t-test, t(15) = 0.98, p = 0.341].
чычкандар 1% кант, бир тунук комиссия тарабынан жаап-түлүк чөйчөктү, бир булагы (сүйлөйсүз жеткиликтүү кант менен болгон алгачкы сыноо менен сынап жатканда Experiment 2 менен жалап кант боюнча CS + таасири бир аз көбүрөөк айкын экенин эске алганда - кара ыкмалары) Бул абалда багытталган. Бирок, бул сыноо менен, сахароза Сабаган олуттуу CS + (328.1 ± 84.8 кандай кайсаса,) жана алдын-ала CS + мезгилдери [245.6 ± 45.9 кандай кайсаса, ортосундагы айырмасы жок; жупташкан-үлгүлөр t-test, t(15) = 1.07, p = 0.300]. Жооп реакциясынын атаандаштыгын четке кагуу жана ооздон сахарозаны ичүүнү күчөтүү үчүн, чычкандарга CSs жок болгон учурда, тамак-аштан ажыратылып, 5% сахарозаны оозунан жалап алуу үчүн 20 кошумча сабак берилди. Андан кийин келемиштер үйдүн чоосуна толугу менен тоюп, темирден чыккан сахароза менен эки CPF тестин өткөрүштү. Сыноолордун жүрүшүндө, чычкандар өзүнчө тесттерде 2% же 20% сахарозанын эритмесин үзгүлтүксүз колдонуп турушкан (субъекттер ичинде, тең салмактуу тартипте).
Figure 1b Тесттин бул айлампасынын ичинде, CS + деп кал бул жүрүм-туруму менен байланыштуу эч качан болсо да, жаңы жерде сахароза ичүүгө көмөк натыйжалуу болгонун көрсөтүп турат. Mixed-таасирлери модель талдоо (Кошумча токтому S2), Олуттуу CS түрү × CS мезгили өз ара ашык t(120) = 15.16, p <0.001, CS + сахарозанын жалатылышын баштапкы деңгээлден көтөрүүдө кыйла натыйжалуу болгонун көрсөтүп турат (CS жана CS чейинки мезгил, p <0.001) CS−ге караганда (CS жана CS чейинки мезгил, p = 0.097), Эксперименттегидей 1. Сахарозанын концентрациясы бул эффектин тандалма тандоосуна олуттуу таасир берген жок (3 тараптуу өз ара аракеттенүү, p = 0.319). Эң маанилүүсү, CS + чейинки мезгилдерде жалгандык көрсөткүчтөрү CS + чейинки мезгилдерге салыштырмалуу жогорулап кеткендей сезилген, жупташкан үлгүлөр t-tests, бул айырмачылык 2% абалда статистикалык мааниге ээ болгон жок экенин айткан t(15) = 1.66, p = 0.118, же 20% шартта, t(15) = 1.56, p = 0.139. Окутуу жана тестирлөө учурунда колдонулган псевдо-кокустук сыноо структурасын эске алганда, бул системалуу (сыноо аралык) транспорттук таасирлердин алдын алат жана келечектеги сыноонун түрүн (же убактысын) күтпөйт. Ошондой эле, ушул эле жаныбарлар CS + жана CS + чейинки жалмоо көрсөткүчтөрү салыштырмалуу болгондо, Эксперимент 3те жалапта CS + спецификалык бийиктиктерин көрсөткөндүгүн белгилей кетүү керек (Сүр. Карагыла.) 1c, Унаа).
D1-түрү тинейджер кабылдагыч көз каранды
Эксперимент 2 натыйжалары CS + түздөн-түз салыгы сыяктуу Жүйөлүү таасири менен шайкеш экенин бүркөлө менен байланышкан эч бир тамак жүрүм-башталган менен сахароза керектөөсүн potentiate жөндөмүнө ээ экенин көрсөтүп турат. Pavlovian унаасында менен болгон D1-түрү тинейджер кабылдагыч маанисин эске31-33, Experiment 3 Бул кабылдагычтардын иш тосуп CPF сөздөр бузат, жокпу, карап. Эксперимент 2 колдонулган эле чычкандар SCH-20 менен Pretreatment кийин CPF тесттер (23390% сахароза) акыркы жуп берилди (0.04 мг / кг), тандап D1 окуянын, же транспорт. Тест жыйынтыктары сүрөт көрсөтүлгөн. 1c (Ошондой эле Кошумча токтому S3).
Талдоо, наркологиялык негизги таасир көрсөттү t(120) = -2.15, p = 0.034, анда сахарозаны жалоо жалпысынан SCH-23390 тарабынан чөккөн. Маанилүүсү, биз олуттуу Drug × CS Мезгил × CS Түрү өз ара, t(120) = -20.91, p <0.001, SCH-23390 CPF экспрессиясын өзгөчө бузгандыгын көрсөтөт. Чындыгында, андан аркы анализ CS + унаа сыноосундагы CS + денгээлине караганда сахарозанын жалоосун кыйла көбөйтүп, p <0.001, SCH-23390 тестинде CS + таасири болгон жок, p = 0.982. Эксперимент 1де байкалган жалпыланган жалпылоого окшоп, CS эки дары шартында да сахарозанын жалатылышында олуттуу жогорулоону, pс ≤ 0.049. Ошентип, SCH-1 башкаруу аркылуу D23390-түрү тинейджер сезгич антагонизм кыйла начар CS + CPF бир стимул Жүйөлүү эске алуу менен ырааттуу тоюттандыруу, туудурду.
сахароза-жупташкан таяна жана тоюттандыруу, сахароза топтолуу таасирин Microstructural талдоо
Эксперименттер 2 жана 3 натыйжалары ачкычтарды бүркөлө менен белги азык булагынан өзүнчө жайгашкан жүрүм-турумун азыктандыруу түрткү алдык эле, бул жерде колдонулган романы салыгы сыяктуу протокол, CPF бир стимул Жүйөлүү түрүн колдойт деп ойлойм. мындан ары бул эсеп сынаш үчүн, сахароза Аракты CS + менен excitatory таасирлери Сабаган жүрүш microstructural уюмга белгилүү бир өзгөрүшүнө байланыштуу болсо каралат. Жогоруда айтылгандай, узактыгы өткөндөй жалап эми суюктук басаĩдатат, көз каранды23,24, Чычкандар жалап-жылдын жаңы ахлаксыздыкка жүргүзүү менен жыштыгы өзүнчө Жүйөлүү жараянын чагылдыруу үчүн ойлоп жатат25-28. Биз буга чейинки отчеттордо, анын басаĩдатат, бурмалоого сахароза топтоо ар түрдүү23,35. жогору жана төмөн сахароза шогырлануы да калориялуулугу менен айырмаланат да, изилдөө сурайбыз узактыгы чара orosensory сыйлык таасири менен сезимтал жана ылганган чара болуп саналат жана кийинки consummatory калория иштетүү жайдагы экенин көрсөттү35-38. Ошентип, CS сурайбыз жыштыгын көбөйтүү керек унаасында түрткү алдыруучу +, сахароза даамын мөөнөттөрү өткөндөй ары жайылтуу зарыл жасап алышына бир CS +, ал эми.
жетиштүү статистикалык бийликти камсыз кылуу39Биз бардык дары-дармексиз сыноо жогоруда айтылган шарттарда (2% жана 20% тесттер Experiment 1 жана Experiment 2 жана Experiment 3 үчүн унаа абалы) боюнча маалыматтар жыйналды. курама маалыматтар сүрөт көрсөтүлгөн. 2, Өзүнчө жалпы кайсаса, сүйлөшүп (а), сурайбыз жыштыгы (б), жана сурайбыз узактыгы (с). Figure 2d Алдын-CS + жана CS + мезгилдерде 2% жана 20% сахароза сыноо боюнча жеткиликтүү болгон учурунда эки өкүлү түзүмүнүн "Сабаган жүрүм Растр участокторун көрсөтөт. CPF боюнча жактоочу жүйөлөргө тиешелүү чечмелөөгө ылайык, бул чычкандар CS чейинки CS + мезгилине салыштырмалуу + учурунда сахароза жалап көп машакат менен алек болчу. Ал эми, чычкандар 20% сахарозага, алдын-ала CS + жана CS + мөөнөтү учурунда айкын таасир жалмап жатканда караганда тоюмдуу 2% сахароза чечим жалмап кийин узактыгы мындан ары болушат сурайбыз. Ошентип, сурайбыз узактыгы катуу сахароза-жупташкан тезирээк кабыл алган эмес. Чынында эле, сүрөт көргөн мыйзам ченемдүүлүктөрү. 2d курама маалыматтар топтомунун жалпыланган сызыктуу аралаш-таасирлери моделдердин да ырасташкан жок (илл карагыла. 2a-с жана Кошумча токтому S4). Орто аралаш-таасирлери "Experiment" боюнча категориялык жагдай (1, 2, 3) экени анализ, олуттуу иш жасады жыштыгы же узактыгына CS мөөнөтү × CS түрү өз ара көзөмөл жок, pс ≥ 0.293, кийинки анализдерди жүргүзүү үчүн, бул маалыматтарды айкалыштырууга жол. Кызыктуусу, Сабаган жүрүм-турумун иш-аракет кылууга түрткү CS + жөндөмү да жалап козгоо үчүн бир кыйла тезирээк күтүү таасирин тийгизген40-42 кийин CS + vs. CS- баштоосу [жалпыланган сызыктуу аралаш-таасирлери модель (жооп бөлүштүрүү = гамма, ссылка милдети = журналы); t(306) = -2.71, p = 0.007], кечигүүлөрдүн чийки айырмасы салыштырмалуу жөнөкөй болгон (CS +: 1.16 секунд ± 0.47; CS−: 2.79 секунд ± 0.79).
CS мезгил таасир Mediational талдоо
Мындай жыйынтыктарын эске алып, биз статистикалык ортомчулук талдоо жүргүзүлөт43 бириктирилген маалыматтардын (сүрөт. 2) CS + сахароза ичүү айрыкча сурайбыз жыштыгы же узактыгы өзгөрүүлөргө байланыштуу болгон туудурган аныктоого жардам берет. Figure 3a Бул талдоонун (CS мөөнөтү) үчүн бир нече ортомчулук модель структурасын көрсөтөт. бир кыйла жалпы таасири жок болчу (Бардыгы; cСабаган жүрүм-CS мезгил) t(156) = 4.11, p <0.001, c = 5.22 [2.71, 7.73], анткени CS + мезгилинде CS + чейинки мезгилге караганда көбүрөөк жалаптар болгон. Андан кийин биз CS + ушул сыяктуу эле жалап турган микро түзүмгө таасир этип, сынап көрдүк жана мушташтын жыштыгында олуттуу рельс-бийиктикти таптык (M2), t(156) = 3.27, p = 0.001, a2 = 0.70 [0.28, 1.12], бирок беттештин узактыгы эмес (M1), t(141) = 1.89, p = 0.061, a1 = 0.34 [-0.02, 0.69]. Ошентип, топ деңгээлинде CS + эффектиси мушташтын жыштыгына таасир этет, бирок мушташтын узактыгы эмес, жалпысынан жалапка тийгизген таасирине окшош.
сурайбыз жыштыгы боюнча CS + жалап анын күчүнө ортомчулугу аркасында болгон таасири болсо, анда (1) бул чаралар байланыштуу, жана (2) сурайбыз жыштыгы боюнча CS + таасири жалпы кайсаса, өлчөмү боюнча CS + таасири менен түшүндүрүүгө тийиш. Биринчи алдын ала баа CS мезгилди эске албай, деп таап, сурайбыз жыштыгы жана узактыгы болуш да, бир кыйла жалпы кайсаса менен байланышы жок ps <0.001, бул микроструктуралык чаралар жалпы жалаптар менен ички байланышты түзгөндүгүн эске алганда, таң калыштуу эмес. Экинчи божомолго биздин баа берүүбүз дагы ачык болду. Бул микроструктуралык иш-чаралар CS + менен байланышкан дисперсияны жалпы жалоо чарасында түшүндүргөндүгүн текшерүү үчүн бир нече медиация моделин курганбыз, алардын ичинде мушташуу жыштыгы жана мушташуу узактыгы, КС мезгили менен катар туруктуу эффекттер. Башка сөз менен айтканда, биз ушул жалган мушташ чараларындагы дисперсияны көзөмөлдөө CS + эффектин жогорулаган жөнөкөй (кыскарган) моделдеги күчүнө салыштырмалуу алсыраттыбы деп сурадык. Медитацияга ылайык, биз муну таптык түз кайсаса боюнча CS мезгилдин таасири (c'), Мааниге ээ болгон жок t(139) = 0.90, p = 0.370, c'= 0.41 [-0.49, 1.30], сурайбыз жыштыгы жана узактыгы боюнча контролдук жатканда. Биз, бул мүмкүн болгон медиаторлорго ар аркылуу жалап боюнча CS + таасирин болжолдуу, жана кандай кайсаса боюнча сурайбыз жыштыгын олуттуу кыйыр таасири жок деп тапты a2b2 = 2.90 [1.18, 4.76], бирок беттештин узактыгынан эмес, a1b1 = 1.71 [-0.09, 3.35]. Ошентип, бул маалыматтар жалаптагы CS + туудурган бийиктиктер, биринчи кезекте, CPF боюнча гедоникалык эсепке эмес, мотивацияга ылайык, беттештин узактыгынын жогорулашына карама-каршы келип, мушташ жыштыгынын жогорулашынан улам келип чыккандыгын көрсөтүп турат.
сахароза топтолуу таасирин Mediational талдоо
Биз биргелешкен маалыматтардын экинчи mediational талдоо (илл жасаган. 2) Деп сахароза басаĩдатат, (топтолуу) сурайбыз мөөнөтү тандап жогорулатуу (сүрөт менен байланыштуу болгон. 3b, Топтоо). жөнөкөйлөтүлгөн модели (сурайбыз жыштыгы же узактыгы үчүн эч кандай негизги таасирлери), жалпы кайсаса боюнча топтолуу жалпы таасири олуттуу эмес экенин t(156) = 0.42, p = 0.678, c = 0.57 [−2.13, 3.27], бул сахарозаны жалоонун жалпы деңгээли сахарозанын концентрациясына көз каранды болбогонун көрсөтөт. Бул күтүлүшү керек, анткени жалмактагы сахарозанын даамдуу таасири керектөөнүн алгачкы 2-3 мүнөтүндө байкалат44Биздин тест жыйналыштарына чейинки биринчи CS мезгилде, ошондой эле мурда. Ошентсе да, сахароза топтолуу сурайбыз узактыгына олуттуу натыйжага алып келген (M1), t(141) = 5.20, p <0.001, a1 = 0.88 [0.54, 1.21], 20% сахароза, 2% сахарозага караганда узак ичүүнү кармашат. Кызыгы, сахарозанын концентрациясы беттештин жыштыгына олуттуу басуучу таасир берген (M2), t(156) = -3.84, p <0.001, a2 = −0.83 [.1.26, −0.40], анда чычкандар чыдамкай эритмени ичкенде азыраак мушташууга ыкташкан. Ошентип, беттештин узактыгынын концентрацияга байланыштуу өсүшү мушташтын жыштыгынын төмөндөшү менен жабылды. Ушуга ылайык, беттештин узактыгы жана жыштыгы боюнча туруктуу эффекттерди камтыган биздин толук медиация модели концентрациялануунун жалаптарга түздөн-түз таасири жок экендигин көрсөттү, t(139) = 0.45, p = 0.650, c'= 0.23 [-0.76, 1.22]. Бирок, кыйыр, ал эми карама-каршы, сурайбыз жыштыгын таасири олуттуу болду a2b2 = -3.49 [-5.50, -1.58] жана беттештин узактыгы, a1b1 = 4.46 [2.96, 5.95], жалпы жалап жүрүм-турум боюнча.
жалап микроструктуралары боюнча CS мезгил жана топтолуу күчүндө Жеке айырмачылыктар
ортомчулук моделдери өткөндөй жыштыгы жана узактыгы, топ-тобу менен деъгээлинде жалап боюнча CS + жана сахароза топтолуу кесепеттерин ортомчулардын айырмаланган ролду ойнойт, ал эми акылдуу адам үчүн маанилүү болушу мүмкүн, мисалы, таасирлери жеке келемиштер боюнча айтылган чечүү жок экендигин көрсөттү ашыра кемчиликтер. ортомчулук талдоонун натыйжаларын эске алып, биз айрым келемиш базалык салыштырмалуу CS + мезгил ичинде сурайбыз жыштыгын таза өсүшүн көрсөтөт, деп алдын ала, бирок сурайбыз узактыгы ар кандай ырааттуу жана ишенимдүү өзгөрүүнү көрсөткөн эмес. Мындан тышкары, айрым келемиш ары көрсөтүш үчүн алдын ала берилген, бирок, аз көп, жалап менен башаламандыктарды 20% сыноого салыштырмалуу 2% сахарозага, жалмап жатканда. Сүрөт. 3c жана г CS мезгилинин (CS + - CSге чейинки +) жана сахарозанын концентрациясынын (20% -2%), жекеме-жеке мушташтын жыштыгына жана узактыгына болгон таасиринин жеке айырмачылыктарын көрсөтүү (Сүрөттөгү комплекстүү маалыматтарды талдоо). 2). CS + 67 келемиштер% (сүрөт жыштыгы сурайбыз жогорулаган. 3c), Бул келемиштер да жаман иш жасады мөөнөтү көбөйтүүнү көрсөтүү (34%), же жок (33%) болжол менен бирдей саны бар. төрт бурап боюнча бирдей маалымат ойлорду бөлүштүрүлөт киришип туура сыноонун бир хи-төрт бурчтуу жакшылык олуттуу Бөлүштүрүүчү асимметрия ачып, χ2(3) = 10.91, p = 0.012. Чындыгында, Δ маанисиFrequency бөлүштүрүү, 0 караганда бир кыйла көп болгон t(66) = 4.80, p <0.001, ал эми Δ орточоDuration бөлүштүрүү олуттуу, 0 айырмаланган эмес, t(66) = 1.80, p = 0.076. Концентрация эффектиси жөнүндө 3d), Келемиштер көпчүлүгү (58%) мындан ары көрсөткөн жана 20% кант каршы 2% азыраак тез жосунсуз, ал туура бир сыноо хи-чакмак жакшылык маалыматтар бирдей бурап боюнча бөлүштүрүлгөн эмес, деп ырастады, ч2(3) = 31.85, p <0.001. Чындыгында, биз Δ маанисин таптыкFrequency бөлүштүрүү, 0 караганда кыйла аз t(51) = -4.22, p <0.001, ал эми Δ орточоDuration бөлүштүрүү, 0 караганда бир кыйла көп болгон t(51) = 4.18, p <0.001.
сахароза керектөө Microstructural божомолдоочу
Сүрөт маалымат. 3c сурайбыз жыштыгы боюнча CS + таасири бир кыйла айырмачылыктар бар деп ырасташат, ал эми кээ бир келемиш ушул жүйөлөргө таасирине өзгөчө сезгич болгон. бул келемиш CS +, биргелешкен маалымат пакети андан ары талдоо (сүрөт жок азыраак ичип, алардын жалпы сахароза азыраак көзөмөлдөөгө жөндөмдүү болгон деп божомолдоого болот да. 2) Бул CS + сурайбыз тездиги көбөйөт тоюу менен байланышта болгон себеп экенин тастыктады. Тактап айтканда, биз оң АТС көргөзмөгө чычкандар ашыкFrequency CS + сыноолор учурунда упайларга ээ болду (топчолор тыйын ↑, Дур ↓ жана тыйын ↑, сүрөт Дур ↑. 3C) (Кичи тыйын ↓ эмес, келемиштер кыйла сахарозага жалмап, Дур ↓ жана тыйын ↓, Дур ↑), t(63) = 2.27, p = 0.026 (сүрөт) 4a). качан Δ Бул мамиле сакталып турганFrequency үзгүлтүксүз өзгөрмө аты катары мамиле болгон, t(63) = 2.19, p = 0.032 (сүрөт) 4b), Жана сахароза топтоо боюнча көз каранды эмес, топтоого × АТСFrequency, t(63) = 0.64, p = 0.528.
талкулоо
Биз сахароза бар белги бир шарты, ошондой эле шарты экендигине карабастан, келемиштер жана сахароза-түлүктү potentiate алган сахарозага алуу үчүн зарыл болгон конкреттүү иш-чараларды (Experiment 1) же (эксперименттер 2 жана 3) эмес, ачыкка деп табылган. акыркы маалыматтар мурда бар болгон шартталган тамактандыруу жооп аткарылышына байланыштуу күмөн, анткени өзгөчө кызыгууну (же сигнал-жооп адаттары), анын ордуна ачкычтарды аларды ийкемдүү өткөрүп берүүгө жол таасирлүү жана / же шыктандыруу өзгөчөлүктөргө ээ деп айтууга болот тамактандыруу иш-аракеттери аркылуу башкаруу. белгиленген тамактануу режими дароо жеткиликтүү эмес да, азык-түлүк керектөөсүн камсыз кылуу үчүн курчап турган чөйрөнү коргоо боюнча сигналдар үчүн бул көрүнүш Ошондуктан адамдардын кал-кашайтып кумарлар жана тоюу колдойт Pavlovian жараяндын бир пайдалуу жана ылганган мал үлгү калтырган көрүнөт1-3. азык-түлүк-жупташкан сигналдар жооп-карандысыз абалда тамактандырууну өбөлгө болот деп мурунку болгон жок, ал эми14-16Көпчүлүк CPF эксперименттер окутуу жана тесттен өткөрүү этаптарын боюнча негизги азык-түлүк булагы сактап, ошондуктан бул таасир негизги психологиялык жол жаратылышы жөнүндө чектелүү гана маалымат берүү. Учурдагы изилдөө көп тамак-аш издеп жүрүм-азык-түлүк-жупташкан таяна жалпылаштырылган Жүйөлүү таасирин изилдөө үчүн колдонулат салыгы милдети үлгүсүндөгү тартибин колдонуу менен жүрүм-турумун азыктандыруу боюнча азык-жупташкан таяна жалпылаштырылган excitatory таасир көрсөтүлсүн камсыз кылат. Мисалы, КУРГАТУУ эле, азыркы милдет бир жерге топтоп, шыктандыруу өзгөчөлүктөргө ээ ордуларында үчүн жакын баа берүү үчүн колдонулушу мүмкүн. Биз, ошондой эле окутуу жана тестирлөө параметрлерин карыз (мисалы, кал узактыгы аралык тергөө аралыгы, жана бекемдөө иш тартиби) изилдөө боюнча салыштыруу көмөк көрсөтүү, адатта КУРГАТУУ үчүн колдонулат. Бул ыкма Ошондуктан consummatory жүрүм-vs. себепчи үстүнөн Pavlovian көзөмөлдү негизги психологиялык жана / же биологиялык кър мүмкүн болуучу айырмачылыктары келечекте иликтөө үчүн көбүрөөк сынамык контролдукту камсыз кылат.
Учурдагы изилдөө D1 тинейджер кабылдагыч жандантуу түрткү Жүйөлүү маанисин жалпы белги тинейджер маанилүүлүгүн эске алып, жана D1 кабылдагыч жандануусуна Pavlovian- билдириш үчүн атайын колдоо берет CPF бул жооп-көз карандысыз түрдө билдирүү үчүн маанилүү деп табылган из-аспаптык өткөрүп берүү18,29-32,45,46. Эске далил деп тинейджер азык-түлүк сигналдар гедонисттик өзгөчөлүктөрүн иштеп чыгуу үчүн салыштырмалуу анча25,28,34, Ал D1 окуянын сыноого убакыт келгенде, сахароза басаĩдатат, өзгөртүүгө CS + мүмкүнчүлүктөрүн чектөө менен, анын таасир эткен күмөн көрүнөт. Бул Жүйөлүү чечмелөө да ачкычтарды эмес, ошол ахлаксыздыкка мөөнөтүн узартуу боюнча, жалап көбүрөөк башаламандыктарды тактоочу менен, негизинен, азыктандыруу жогорулагандыгын тапкан биздин microstructural жалоо талдоо тарабынан колдоого алынат. Анын ордуна, сахароза басаĩдатат, менен ар түрдүү мөөнөттөрү копко чейин, ошондой эле түзүлгөн эле23,24,26,27. Кызыктуусу, биздин статистикалык ортомчулук талдоо 20% кант vs. 2% жалап жатканда ары-ахлаксыздыкка алектенген келемиштер да, алар да жаман иш жасады жыштыгын бир акы төмөндөөсүн көрсөткөн. Ошондуктан, басаĩдатат, бул башкаруу чычкандар тамактануу жалпы деъгээлин таасир эткен жок, алардын сахароза-түлүктү үлгү таасир көрүнгөн. Ал эми, ал тезирээк менен соттук териштирүүлөр боюнча байкалган Сабаган жүрүм таза жогорулатуу үчүн жоопко көрүнөт эч кандай акы таасири, CS + менен сыноо учурунда айкын болду. Мындан тышкары, CS + сыноо учурунда сурайбыз тездиги жогорулайт көрсөтүү чычкандар, ошондой эле жалпы сахароза башатынын ого бетер көлөмүн көрсөткөн. Мындай жыйынтыктар жүрүм азыктандыруу азык-жупташкан ачкычтарды (1) dysregulate болот деп ойлойм, жана (2), жок эле дегенде, бул жерде сыналган шарттарда дагы сахароза басаĩдатат, курал караганда ашыра тоюу, айдоо боюнча натыйжалуу болуп саналат.
Учурдагы натыйжалары ошондой эле тамак-аш, жупташкан таяна жок тамактандыруу жүрүм-жөнгө салуу тинейджер ролу жарык чачат. Мурунку изилдөөлөр D1 тинейджер душманын бул системалык башкарууну көрсөттү SCH23390 басып uncued сурайбыз узактыгын өзгөртүү жок сурайбыз жыштыгын кыскартуу менен сахароза керектөө25,26тинейджер кем чычкандар менен көргөзмөгө жалап үлгүсүнө окшош болгон,47. Мындай кырдаалда сурайбыз жыштыгын жөнгө психологиялык механизмдери так эмес да, ал тамактануу менен байланышкан болуп конкретт ‰‰ жана / же interoceptive ачкычтарды сугунбастан, тамак-аш издеп, керектөөнү жаңы башаламандыктарды түрткү жөндөмүнө ээ деген божомолдоолор бар25,26. Биздин жыйынтыктар жалап-жылдын жаңы жосунсуз ачык азык-жупташкан таяна жана бул таасир да D1 тинейджер сезгич кошулуу көз каранды экенин да такталып мүмкүн экенин көрсөтүп, бул түшүндүрүү кооптуу үчүн кээ бир колдоону камсыз кылуу.
башка айтылгандай5,10, CPF жылы тинейджер ролу салыштырмалуу аз мурдагы изилдөөлөр бар. Бирок, алгачкы изилдөө CS + начарлагандыгынын менчиктин тинейджер сезгич окуянын болгон α-flupenthixol ошол башкаруу издеп тамак-аш чакырган, бирок азык-түлүк керектөөсүн жогорулатуу CUE жөндөмү деп өзгөртүүсүз калтырганда табылган48, Кас D1 биздин табылгага каршы болуп калды, ал келип кал-жасалма сахароза жалап да таасирин тийгизбей койбойт. Бул ачык айырманы түшүндүрүп бере алган эки изилдөө боюнча көптөгөн мыйзам айырмалар бар. Мисалы, D1 тинейджер берүү биздин иргеп оюндар тамак боюнча CS + таасирин бузат көбүрөөк натыйжалуу болушу мүмкүн. Мындан тышкары, бул мурунку изилдөөдө48Бир шарты бул тамак-аш куру чычкандар даярдалган жана алардын үй клеткаларын бир уникалдуу Pavlovian аналоги жол-жобосун колдонууда сыналган күн бою шоссеси таратылды тамактандыруу сессияларды белги берүү үчүн колдонулган. Кийинчерээк, ал кал келемиш бир nondeprived абалында сыналган, атүгүл тамакты көмөк натыйжалуу болушу көрсөтүлгөн. Бул окутуу жаратылышын жана масштабын жана керектүү тамак берүү окутуу жана тесттен өткөрүү этаптарын боюнча өзгөрүүсүз экенин чындык бул CPF протокол сыноо учурунда адатка (стимул-жооп) тамактандыруу жооп пайдаланууга үндөгөн керек деп божомолдошот. overtraining тинейджер сигналдаштыруунун иштөөдө сыйлашыбыз издеп келип кал-жылдын апрел айында тамак көрсөтө алышат эске49Бул CPF бул мүмкүн адат негизделген түрү бул жерде сүрөттөлгөн Жүйөлүү калыптарынан тинейджер азыраак көз каранды болушу мүмкүн.
CPF жылы тинейджер ролу тууралуу аныкталат көп эмес болсо да, бул жүрүм-турум көрүнүш ghrelin жараша белгилүү50-52 Ден соолук-топтолуу гормон53 түп-тамырынан да тойгузуу жүрүм-турумун жөнгө салуу менен алектенген neuropeptide системалары,10 жана тинейджер белги54-56. Кызыктуусу, ghrelin каалоосун-дем таасирлери mesolimbic тинейджер белги байытып бул гормондун жөндөмдүүлүгүнө көз каранды57-60. Мисалы, ghrelin үчүн жакын тамак-аш издеп, керектөөнү азык-түлүк басаĩдатат, таасир жок жогорулатуу (мөөнөтү өткөндөй жалап) D1 тинейджер сезгич окуянын SCH-23390 кошо башкаруучу менен тосулуп болот60. Мындай жыйынтыгы боюнча, бир ghrelin жана тинейджер ортосундагы ушундай өз ара азык-жупташкан таяна тамактануу ашуун шыктандыруу таасир жашырылган болушу ыктымал деп күтүү мүмкүн.
Учурдагы жыйынтыктар азык-жупташкан ачкычтарды тамактануу жаңы башаламандыктарды түрткү менен ашыра баштаса болот деп көрсөтүп жатканда, мындай ачкычтарды башка жол менен азыктанып таасир бериши мүмкүн. Биздин которуу-жылдын билүү мамилени толугу менен азыктанып ачкычтарды түздөн-түз конкреттүү тамактандыруу жүрүш тактоочу менен ичүү себеп болот таануу болуп саналат. Мындан тышкары, CS + ишенимдүү азыркы изилдөөгө сурайбыз узактыгынан өзгөртө алган жок да, негизги азык булагы менен бир кыйла шарттуу CPF протоколун колдонуп акыркы изилдөө тамак ачкычтарды жалап башаламандыктарды узарат деген далил таба кылды53. Буга байланыштуу, даамдуу тамак-аш менен байланыштуу ачкычтарды сигналдарды татып appetitive orofacial кубулуштардын сөздөр өстүрүү мүмкүн экенин мурдагы отчеттор бар19-21, Даам hedonics башка чара же "келерлик". Демек, жакшы тамак-аш ачкычтарды алып каалоолордон менен, белгилүү бир тамактандыруу жооп стимулдоо менен, жана / же тамак-аш даам кабыл алуу менен, бир нече жолдор менен азыктанып түрткү ыктымал10. Бул жараяндар кал-potentiated ашыра тоюу, даана аялуу негизинде мүмкүн, балким, бул максат үчүн албастыгын жекече айырмачылыктарды түшүндүрүп1,61,62. Учурдагы жыйынтыктар тандап келемиштер менен CPF боюнча жактоочу жүйөлөргө тиешелүү компонентин талдоодо натыйжалуу мамилени көрсөтүп турат.
ыкмалары
Субъектилери жана аппараттары
Лонг Эванстын эркек келемиштери (N = 32 жалпы келемиш; 16-эксперимент үчүн n = 1 жана 16 жана 2-эксперименттер үчүн n = 3), салмагы 370–400 г, жуп температурада жана нымдуулукта тунук пластик капастарга салынган. - көзөмөлгө алынган виварий. Келемиштер бар болчу ад либитум Эксперимент жүргүзүү боюнча өз клеткаларын суу алуу мүмкүнчүлүгү. төмөндө көрсөтүлгөн Чычкан, эксперименттер белгилүү баскычтары учурунда азык-түлүк чектөө тартиби боюнча жайгаштырылган. Чарбачылык жана эксперименталдык жол UC Irvine Институттук Animal сактоо жана пайдалануу боюнча комитет (IACUC) тарабынан кабыл алынган жана Лабораториялык жаныбарларын сактоо жана пайдалануу боюнча улуттук изилдөө колдонмодо ылайык болгон.
Жүрүш-туруш тартиби окшош бөлмөлөрдүн (ENV-007, Med Associates, Сент Албанс, VT, АКШ) көргөзмө тасмалар, жеңил-начарлагандыгынын үстөл жайгаштыруу, жүргүзүлгөн. Сахароза чечим борбордон ар бир палатасынын, 2.5 см дат баспас болоттон сетка кабатка жогору бир мезгилдин акырына карата дубалга жайгашкан бир оюп пластикалык чөйчөгүнө бир шприц насостун аркылуу жеткирилип турган. А photobeam детекторунун азык-түлүк баштыкча кире беришинде жайгашкан сахароза керектөөнүн, ошондой эле Pavlovian аналоги учурунда коюлтулган мамиле жооп менен байланышкан башчысы жазууларды мониторинг жүргүзүү үчүн колдонулган. белгилүү бир сыноо сессияларында (эксперименттер 2 жана 3) жылы, сахароза чечим азык-түлүк чөйчөктөгү акыры дубал карама-каршы жайгашкан ~ 0.5 см бир 1.3 см тешик жайгашкан бир тартылуу семиз металл ичип атылып жалап менен алынган болушу мүмкүн. азык-түлүк чөйчөк жана металл атылып айрым кандай кайсаса, тынымсыз байланыш lickometer түзмөктү (ENV-250B, Med Associates, Сент Албанс, VT, США) колдонуу менен текшерүү учурунда жазылган. сахароза металл атылып алынган болушу мүмкүн Бир ак тунук plexiglass панели бардык учурунда тамак-аш, чөйчөктү турак акыры дубалдын алдында жайгашкан болчу. А houselight (3 W, 24 V) жарык жана күйөрман желдетүү жана өнүгүүнүн өбөлгөлөрү ызы-чуу менен камсыз каралган.
Pavlovian аналоги
Дюмин, алар ар бир 85% сахароза чечүү (2 мл) 60 жеткирүүнү алган турган журнал даярдоо, алардын дене салмактары 20 дуушар чейин өз эркин тойгузган дене салмагынын болжол менен 0.1% D сактоо үчүн азык-түлүк чектөө тартиби боюнча жайгаштырылган күн сайын сессия (1 ч). Радж анда Pavlovian пропагандалардан 10 д кабыл алды. Ар күн сайын аналоги сессиясынын бир 6-мин аудио бүркөлө боюнча 2 көрсөтүлүп бир катар турган (CS +; 80-дБ ак ызы-чуу же 10-Hz clicker да), өзгөрмө 3-мин аралыгы менен бөлүнгөн сыноолор менен (диапазону 2-4) . Ар бир CS + сыноо учурунда, 0.1 мл aliquots 2% сахароза чечүү (20 сек салып) (ж / а) сот күнүнө төрт сахароза берүүлөрдүн орточо, натыйжада бир 30-сөк кокустук убакыт тартибине ылайык, тамак-аш чөйчөгүнө жеткирилди . Пропаганда акыркы күнүндө, чычкандар, ошондой эле башка келип кал (CS-; альтернатива угуу сигнал) турган экинчи сессиясы берилген CS + сыяктуу эле берилген, бирок сахароза чечүү менен жупташкан эмес. Алдын ала жүрүш чөйчөк чен менен карама-каршы болгон чөйчөк ыкмаларды ылдамдыгын салыштыруу (photobeam тыныгуулар) CS башталганда эле биринчи жана сахароза жеткирүү ортосундагы мезгилде (Шартсыз тамактандыруу жүрүм-Колго түшүп калбаш үчүн) тарабынан өлчөнгөн аралык учурунда мамилелер сыноо аралыгы. Бардык чычкандар кийин беш күн мөөнөт берилди ад либитум кошумча текшерүүдөн өтүү алдында Pavlovian жаткан акыркы сессиясында кийин сактоо үчүн диета кармап алуу.
Карточкалар-potentiated тамак сыноо
Experiment 1
Бул эксперимент деп бүркөлө менен шартталган жооп мындай тренинг учурунда колдонгон ошол эле азык-түлүк чөйчөктү тартып, сахароза чечүү керектөөгө CS + таасирин баалоо (мисалы, чөйчөк мамиле) сыноо боюнча сахарозага алуу үчүн зарыл болгон жүрүм-турум менен шайкеш болгон. Pavlovian Пропаганда учурунда жоголгон салмакка ээ кийин, чычкандар чычкандар өздөрүнүн homecages менен тынч бойдон калды, анын ичинде 48 ч менен бөлүнгөн бир жуп менен CPF сыноолорду, кабыл алды. Ар бир CPF сессиясында (жалпы узактыгын 86 мин) учурунда, 2% же 20% сахароза чечим чычкан photobeam (чөйчөк ыкмалар) өтүп сайын үзгүлтүксүз кант менен 0.1 мл менен чөйчөктөн куюп менен азык-түлүк чөйчөгүнө жеткиликтүү болду. Ошентсе да, чөйчөктү ашыкчылыгы алдын алуу үчүн, сахароза жеткирүү гана, жок эле дегенде, 4 акыркы сахароза жеткирүү бери өткөн жана анда чычкан кийлигишип мезгилде жок дегенде беш кандай кайсаса, аткарылган болсо алынды. Бул сессиянын ичинде, катталган 2-мин аралыгы менен бөлүнгөн 4-мүн угуу сигналдарды ар noncontingently бир pseudorandom буйругу (ABBABAAB) менен 8 жолу берилген, болду. Биринчи сот чейин таяна аракеттеринин таасирин баалоо үчүн жеште, кошулуу үчүн уруксат берүү үчүн сессия башталгандан кийин 8 мүн баштады. Trial тартип биринчи CS сабактардын жарым CS + жана субъекттердин калган жарым CS- сунуш Ушундай Pavlovian окутуу шарттары менен боюнча эл болгон. сахароза топтолуу текшерүү тартиби, ошондой эле карама-каршы чарасын кабыл алып, экинчи жана жарым ар бир абалда биринчи 2% тест алуу жана 20% сыноо жарым, боюнча эл болгон (б.а., бардык жаныбарлардын айрым сыноолорго да топтолуусу алынган).
Experiment 2
Бул экспериментте, биз бүркөлө менен шартталган жооп Ушундай Pavlovian Пропаганда учурунда колдонгон чөйчөктүн караганда башка булактан сахароза чечүү керектөөгө CS +, таасир иликтенип сыноо боюнча сахарозага жалмап үчүн зарыл болгон жүрүм-турум туура келбейт болчу. Биз бир гана 2% сахароза абалын киргизилген биринчи сыноо. чычкандар Pavlovian Пропаганда учурунда жоголгон салмагын кайрадан уккандан кийин, алар эки күн сайын жыйналыш берилди (86 мүн узактыгы), алар металл атылып чыккан 2% сахароза чечүү үчүн чектелбеген мүмкүнчүлүгү бар болгон (тартылуу эмген бөтөлкөдөн аркылуу) бир кичинекей тешиктен ичинде жайгашкан жана азык-түлүк чөйчөктөн карама-жылдын акырына карата дубал. бул жерге кант издеп жаныбарларды ындыныбызды сүйлөйсүз жеткиликтүүлүк (анын ичинде кийинки CPF тесттер) менен жыйналыштарында ак Plexiglas кашектин дубал турак жай-түлүк чөйчөк алдында жайгашкан болчу. Сабактар угуу таяна жок бир жаңы булактан Rats тажрыйбасы ичип сахарозага берүү үчүн иштелип чыккан. Эртеси күнү, чычкандар, тескерисинче, чөйчөктөгү караганда, ошол 1% кант башка металл атылып боюнча үзгүлтүксүз жеткиликтүү болгон, Experiment 2 сүрөттөлгөн бир CPF сыноо отуруму кабыл алды.
Бул биринчи сыноодо CPF боюнча далилдер өтө эле аз болгондуктан, божомолдорго байланыштуу CS ортосундагы жооп атаандаштык үчүн + тамак-аш чөйчөк туудурган жана мамиле жүрүш атылып, биз түзүмүнүн кошумча сүйлөйсүз үйрөткөн (CS + болсо) чыгып сүйлөйсүз боюнча издеп сахарозага бекемдөө жана өчүрүшү сүйлөйсүз колдо болгон тамак-аш чөйчөк мамиле (ал панелдин менен каптады, анткени). Радж Ошондуктан кайра азык чектөө тартиби (Pavlovian аналоги стадиясында эле) жөнүндө 5% сахароза чечимге жетүү 10 мин турган бул жыйындардын бири менен, кошумча сүйлөйсүз окутуу тренигдери 20 д берилген чейин жайгаштырылган. Радж анда берилген 4 г болгон ад либитум Үй Chow мүмкүнчүлүгү бул стадиясында жоголгон салмагына ээ болууга мүмкүндүк берет. Кийинки, чычкандар тийет тамак ажыратылган болчу (20 ч) CS + жана CS- менен Pavlovian даярдоо сессияларын алып, баштапкы даярдоо акыркы күнүндө болгон (б.а., 20% кант менен CS + сыноо учурунда тамак-аш чөйчөгүнө салып) чейин. сүйлөйсүз ушул жана кийинки Pavlovian даярдоо учурунда бөлмөсүнө алынып жатканын карап көрөлү. боюнча Радж анда берилген ~ 20 ч алынган ад либитум башка чычкандар эки сыноолордун жылы 2% же 20% чейин берилген деп, биринчи сыналган бирдей эле үй металл атылып аркылуу эки CPF сыноолорго дуушар чейин чау, жеткиликтүүлүк (Experiment 1 эле).
Experiment 3
атылып менен тестирлөөнүн акыркы айлампасы учурунда CPF кыйла олуттуу далилдерди таап кийин Experiment 2 тартып чычкандар D1 тинейджер кабылдагычтарга тинейджер сигналдаштыруунун бул күчүнө көз каранды баа берүү үчүн кошумча тестирлөө берилди. Радж алгач 10% сахароза чечүүгө мүмкүнчүлүк берилди турган сүйлөйсүз кайра бир 20-мин сессияны берилди. чычкандар тездик менен кадимки .Эмнеге кайтып, анткени кийин кайтып келди ад либитум Үй чау курч 20-ч азык-түлүк ажыратууга төмөнкү, биз келемиш бул сүйлөйсүз даярдоо сессиянын ичинде ачка экенин камсыз кылуу үчүн, бул жол-жобосун колдонгон жана ар бир мурда күнү өткөрүлгөн кийинки Pavlovian кайра даярдоо (CS + жана CS- сессиялар, мурдагыдай эле), учурунда эки жыйынтыктоочу CPF тесттер. Радж дегенде 20 ч боюнча берилди ад либитум ар бир тест сессияга чейин үй-чау мүмкүндүк алуу. CPF сыноо бул акыркы айлампасы учурунда, чычкандар да сыноо учурунда атылып тартып 20% кант үзгүлтүксүз кирүүгө мүмкүнчүлүгү бар болчу. ар бир сыноо алдында он беш мин, чычкандар сахароза колдонууну болтурбоо үчүн жетиштүү болушу үчүн IP сайма (1 мл / кг) стерилденген наборун же SCH-23390 биринин (иргеп D1 тинейджер сезгич окуянын болгон) бир дозасын колдонуп (0.04 мг / кг) белгилүү берилди25,34,63. Rats сыноо максатында үчүн туруучу, эки дары-шарты текшерилген.
маалыматтарды талдоо
Баштапкы көз каранды чара бардык CPF сессияларында контакттык ликометрдин жардамы менен 10-мс токтому менен жазылган жеке жалаптар болгон. Ликометрди өлчөөдө келемиштер (лап же ооз) менен сахарозанын (же темирдин оозу) ортосундагы туруктуу байланыштан улам келип чыккан артефакттарды өтө сейрек кездештирдик. Бул экспонаттар жогорку жыштыктагы ликометр жооп реакциясы түрүндө болгон (> 20 Гц). Келемиштер максималдуу жылуулук ылдамдыгын көрсөтөт <10 Гц64, Биз 0.05-Hz округда жыштыгына ылайык, акыркы (эмес буюм) жалап-жылдын 20 секунд ичинде пайда болгон бардык жалоо жооп алынып салынат. жалоо жооптордун жок дегенде 20% бул критерийлерди такыр талдоо (1 1 Experiment 1 жылы келемиштей тартып сессиясында) алынып берилген алынып жаткан жылы Сессиялар.
Licking жүрүм-турум
ар бир сабактын, биз мезгил түрлөрү (Pre-CS +, CS +, алдын ала CS-, CS-) боюнча кандай кайсаса, жалпы саны аныкталат. Биздин негизги көз каранды чара (жалпы кайсаса) санап өзгөрмө болгондуктан, бул маалыматтар Пуассондун жооп бөлүштүрүү жана журналы шилтемеси иш менен жалпыланган сызыктуу аралаш-таасирлери моделдерин жардамы менен талданды 65-68. Бул статистикалык ыкма параметр баа абалы милдети деп (негизги таасири) жана жеке (туш келди таасир) берет. Жылы эксперименттер 1 жана 2, туруктуу таасирлери түзүмү жалпы тосуу кирген, үч жолу CS мезгилде ортосундагы өз ара (Pre, КС) × CS түрү (CS-, CS +) топтолушунун × (2%, 20%), жана төмөнкү тартиби негизги таасирлери жана өз ара. Эксперимент 3 үчүн, Drug (транспортту, SCH) сынамык долбоорго өзгөртүү жайгаштырууга топтолушунун үчүн алмаштырылып жиберилген. Бул алмашма категориялык божомолдоочу мамиле, бардык алкагында-каралат өзгөрмөлөр болгон жана таасирлери-код. Random-таасирлери модель тандоо Akaike маалымат критерийин баркка моделин аныктоо тартылган 69, Ошондой эле төмөнкү параметр боюнча маалыматтарды бөлүштүрүүдө саны 10 төмөн эмес, камсыз кылуу, ал эми 70,71. Бул чен-өлчөмдөрдү пайдаланып, мыкты туш-таасирлери CS мезгилди эске алуу менен объекттердин uncorrelated америкалык кирген эксперименттери боюнча түзүмү, CS түрү жана топтолушунун (же дарылар)72. Бардык статистикалык анализдер MATLAB өткөрүлдү (Math чыгармаларды; Natick, MA). бардык сыноолорго Alpha деңгээл 0.05 болчу. Бардык божомолдоочу категориялык эле, таасир көлөмү unstandardized регрессиялык W_, өкүлү 73, Деп билдирди b менен текст жана модель чыгаруу стол. Post туз пайдалануу менен ишке ашырылган өз ара анализ пост туз Fколдонуу Omnibus талдоонун ичиндеги жөнөкөй таасирин -tests coefTest MATLAB иштешет.
Сабаган жүрүм Microstructural талдоо
Жеке кандай кайсаса, башталган же Сабаган созулуучу уланууда да болуп кирген. кайсы бир копко чейин бир нече жолу катары менен кандай кайсаса, бөлүнбөсө болгон interlick аралыгы (ILI) 1 с ашкан жок74. жок дегенде 1 акыркы жалап алып өткөндөн кийин, кийинки жалоо бир жаңы Таймаштын башталышы болуп саналат. Жогоруда анализге жалпы кайсаса, кылган эле Унатамын мен жыштыгы жана узактыгы, биринчи чейинки CS жана CS мезгилге сессияларын бөлүү жолу менен эсептелет. Ошол мезгилдерде, ал деле бир аз дегенде 1 с Газдын катары аныкталган мезгил ичинде орун алган. Ар бир Таймаштын мөөнөтү Таймаштын биринчи жана акыркы жалап ортосундагы убакыт аралыгында катары эсептелет. өзүнчө кездешүүчү Жеке кандай кайсаса, оорум бөлүгү катары каттоодон өтүшкөн жок +. кийинки mediational анализдерди жүргүзүү үчүн үлгү өлчөмүн максималдаштыруу үчүн39, Сурайбыз жыштыгы жана узактыгы сурайбыз маалыматтар CS мезгилде жалпы таасирин баалоо эксперимент аркылуу ураган, CS түрү, жана бул microstructural чаралар жөнүндө топтолушу. Эксперимент 23390 жылы SCH-3 шартта маалымат бул анализдер камтылган эмес.
Бул маалыматтар CS мезгилге эске жалпыланган сызыктуу аралаш натыйжалуу моделдерин топтолушунун × CS мөөнөтү × CS түрү белгиленген-таасирлери түзүлүшүн камтыган (жана төмөнкү ара жана негизги таасирлери) жана-субъекттеринин uncorrelated америкалык бир туш-таасир түзүлүшү аркылуу анализделген , CS түрү жана топтолуу. жалпы Сабаган жүрүм-талдоо эле, Experiment 1 бир келемиштей бир сессия талдоого алынып салынды. сурайбыз жыштык талдоо улам жыштык маалыматтардын саны-түрү табияттын бир лог шилтемеси иш менен Пуассондун жооп бөлүштүрүүгө колдонулат. сурайбыз узактыгы талдоо өткөндөй мөөнөтү катары журналы шилтемеси иш менен гамма-жооп бөлүштүрүү иштеген 0 жана + ∞ ортосунда чектелген үзгүлтүксүз чара болуп саналат. Салыштыруу үчүн, ушул эле талдоо жалпы деле анализ жеке экспериментте катары талдоо журналы шилтемеси иш менен Пуассондун жооп бөлүштүрүү алган турган, эксперимент аркылуу кулап жалпы кайсаса боюнча чуркап кетти. сын CS мөөнөтү × CS түрү өз ара эле айтылган анализ ар келемиш-жылы болгон эксперимент, моделдердин экинчи сериясы сурайбыз жыштыгы жана сурайбыз узактыгына алышкан, окшош, бирок кошумча туруктуу таасир божомолдоолордун менен көз каранды эмес экенин камсыз кылуу CS мөөнөтү × CS түрү × Эксперимент. Эксперимент бир категориялык көз каранды болгон. Акырында, жүйөлүү жалап бир ырастаган чарасы катары40-42Биз гамма-жооп бөлүштүрүү менен жалпыланган сызыктуу аралаш-таасирлери моделин жана журналы шилтемеси иш-милдетин пайдалануу CS башталганда кийинки биринчи жалап азды (талдооn = 310). Бул модель CS Type × Концентрациясынын туруктуу эффекттер структурасын камтыган (жана бардык төмөнкү тартиптеги өз ара аракеттер жана негизги эффекттер) жана CS Type, Concentration жана CS Type × Concentration үчүн туураланган суб-субъекттердин тоскоолдуктар түзүмүн камтыган.
сурайбыз жыштыгы жана узактыгы сурайбыз Mediational талдоо
Эки бир нече ортомчулук моделдери43,75,76 таасирлери (же анын жоктугу) CS мезгилдин (Pre, CS) жана топтолуу (2%, 20%) CPF олуттуу сурайбыз жыштыгы жана / же сурайбыз узактыгы арачылык алынган аныктоо үчүн жүргүзүлгөн. CS мезгили Model-жылы, өзгөрүлмө X болгон CS мөөнөтү (Pre, CS), жыйынтык өзгөрүлмө Y Ошол мезгилде кандай кайсаса, жалпы саны, жана медиаторлор жыштыгы өткөндөй болду (M1) Жана сурайбыз узактыгы (M2). Concentration үлгү боюнча, X сахароза топтолуу болчу. Карточкалар-жылдын апрел айында Сабаган CS + сыноолорго үчүн, биринчи кезекте, айкын болгон (кара натыйжалары), Бир гана CS + сыноолор талдоого алынган. Ар бир келемиштей жана ар бир тест сессия үчүн, ар бир Таймаштын кандай кайсаса, жана ахлаксыздыкка жана орточо узактыгы орточо саны чейинки CS + жана CS + мөөнөтү белгиленет. Бул анализдер бардык келемишти эксперименттер 1 жана 2 чейин (16 × 2 × 2 × 2 тажрыйбаларды топтолушунун CS мезгилдерде экспериментте күнүнө келемишти = 128 маалымат п.п.) жана состояние маалыматтар Experiment 3 чейин (16 CS мезгилдерде 2 келемишти × = 32 маалыматтар упай) . жалпы Сабаган жүрүм-талдоо, ошондой эле, бир сессия Experiment 1 бир келемиштей үчүн 158 маалыматтарды бөлүштүрүүдө жалпы калтырып, талдоого алынып салынды. Кээде, чычкандар чейинки CS + же CS + сессиянын учурунда бир мезгилдерде (9 / 158; 9.5%) учурунда жалап эмес. Бул учурда, кандай кайсаса, жана ахлаксыздыкка орточо саны үчүн бош бир клетка катары калган орточо сурайбыз узактыгы үчүн "0" жана баалуулук катары код берилген. Ошол эле моделдер listwise Сотуу киришип чуркап кийин (б.а., сурайбыз узактыгы бош клетка кайсы катар алып салуу) сыяктуу мыйзам ченемдүүлүктөрү өткөрдү. Бул талдоо жалпы сызыктуу моделдерин (б.а., жөнөкөй же бир нече сызыктуу регрессиялык) тартууга, анткени, оң skewness үчүн туура сурайбыз жыштык жана жалпы жалоо маалыматтар чарчы-тамыры өзгөрүлүп, сурайбыз узактыгы маалыматтар берилди журнал-өзгөрттү. кыйыр таасир эмнени 95 кыйытып менен bootstrapping 10,000% барабар менен аныкталган. Регрессиялык сандары салттуу mediational талдоо отчетторун ылайык билдирди (мисалы, c"Түздөн-түз таасир = X on Y)43,75.
сурайбыз жыштыгы жана узактыгы боюнча кал-жылдын апрел айында өзгөртүүлөр айрым айырмачылыктар
Жогоруда айтылган анализдер CS + тобунун жалап микро түзүмүнө таасирин топ деңгээлинде баалоого мүмкүндүк берди. Биз ошондой эле бул эффектти чагылдырууда жеке айырмачылыктарды мүнөздөп бердик. Ар бир келемиш үчүн беттештин жыштыгы жана беттештин узактыгы боюнча эки айырмачылык упайы эсептелген. CS мезгилинин моделине параллель катары, CS + мезгилиндеги мушташуу жыштыгы CS + мезгилиндеги (башкача айтканда, CS + - CSге чейинки +) мезгилдин ичиндеги жыштыктын маанисинен чыгарылган; Концентрациялануучу модель үчүн, 2% сахарозаны текшерүү мезгилиндеги жыштык 20% сыноодон өткөндөн кийин тиешелүү мааниден алынып салынган (б.а. 20% -2%). Бул эсептөөлөр беттештин жыштыгынын өзгөрүшүн мүнөздөгөн чараларды көрсөттү (Δ)Frequency). Ушул эле эсептөөлөрү сурайбыз узактыгы кылган (б.а., ΔDuration). Ошентип, алдын ала CS + / CS + жана 2% / 20% маалыматтарды бөлүштүрүүдө ар бир жуп, сурайбыз жыштыгы жана узактыгы сурайбыз өзгөрүүсү аныкталган. Бул бөлүнүштөр каражаттары бир үлгүдөгү аркылуу 0 салыштырганда алынган t-test (α = 0.05) жок эч кандай жалпы өзгөрүүсүнүн Бөлүштүрүүчү жылыштарга баа берүү. Бул маалыматтарды бөлүштүрүүдө ар бир өзгөрмөлүү дыйканды участогунун менен жогорулатуу жана / же сурайбыз жыштыгы жана узактыгы азаят тарабынан категорияланган жана өкүлү болгон (мисалы, сурайбыз жыштыгы / CS + башталганда боюнча сурайбыз узактыгын көзү көбөйүшү), маалыматтар жараша аныктоо үчүн жол ар бир 2 × 2 Quadrant-жылы (сурайбыз жыштыгы / узактыгы × жогорулагандыгы / төмөндөгөндүгү) упай. айырма эсеби нөлгө барабар болгон маалымат пункт төмөндөшүнө (б.а., көбөйүү эмес) категориясында болгон. Chi-чакмак (χ2) Бул маалыматтарды бөлүштүрүүдө бөлүштүрүүнүн ушул төрт категория боюнча бирдей бөлүштүрүлгөн маалыматтарды башкача болчу (α = 0.05) же жокпу, аны такташа CS мөөнөтү жана топтолуу маалыматтарды да туура сыноолордун жакшылык. Ар бир экспериментте төрт бурап аркылуу бул маалыматтарды бөлүштүрүүдө болжол менен бирдей бөлүштүрүү болгон жок, эгерде аныкташ үчүн, жөнөкөй correlational CS мезгилге анализ жана байуусу маалыматтар ар бир экспериментте ар Quadrant маалымат пункттарынын санынын ортосундагы мамиле баалоо аткарылган жана ар бир Quadrant жалпы өлчөмдө аныктоосу боюнча маалыматтар пункттарынын санын күтүлүүдө тиешелүү.
сахароза керектөө Microstructural божомолдоочу
жалпыланган сызыктуу аралаш таасирлери анализ акыркы сериясы толугу менен тест сессияларында боюнча керектелген сахароза чечүү жалпы көлөмү CS + мезгилдерге чейинки CS + тартып сурайбыз жыштыгы жана узактыгы ушул чычкандарда өзгөрүшүнө алдын ала аныктоо үчүн жүргүзүлгөн. бардык дары-дармексиз шарттарына киргизилген маалыматтарды анализ, (башкача айтканда, 2% жана эксперименттер 20 жана 1 үчүн 2% сахароза тесттер жана Experiment 3 тартып состояние). талдоо журналы шилтемеси иш менен гамма-жооп бөлүштүрүү болжолдонууда. Жогоруда айтылгандай, биринчи талдоо (мл) керектелген бардык сахароза чечүүгө кетип жогорулайт 2 × 2 категориялык бирикмелердин ортосундагы өз ара жана негизги таасир / сурайбыз жыштыгы / узактыгы азаят. Экинчи талдоо АТС үзгүлтүксүз наркынын ортосундагы жана өз ара негизги таасир жалпы сахароза керектөөсүн кетипFrequency жана сахароза топтолуу.
маалыматтар бар
учурдагы эксперимент учурунда талдоого топтому негиздүү арызы боюнча тиешелүү жазуучу бар.
Электрондук кошумча материал
Acknowledgments
Бул изилдөө берет изилдөө тарабынан колдоого AG045380, DK098709, DA029035 жана MH106972 жыйынтыгын чыгарууга болгон. бюросу изилдөө долбоорлоо, маалыматтарды топтоо жана талдоо, жарыялоо жөнүндө чечим, же кол жазма даярдоодо эч кандай тиешеси болгон эмес.
Author Contributions
Капыстан боюна бүтүп, эксперименттер иштелип чыккан; BH жана ATL экспериментин жасаган; Банкомат жана статистикалык маалыматтарды талдоо. Бардык жазуучулар макала жазып, кол жазманы карап.
жазуулар
атаандаш кызыкчылык
Жазуучулар эч кандай кызыкчылыгын деп табылсын.
Шилтемелер
Электрондук кошумча материал
Кошумча маалымат 10.1038 / s41598-018-21046-0 бул кагазды коштоп жүрөт.
Жарчынын эскертүүсү: Springer Nature Жарыяланган карталардын жана институттук байланышта менен дубандарга талаптарын эске алуу менен нейтралдуу бойдон калууда.
Contributor маалымат
Эндрю Т. Marshall, E-mail: ude.icu@1aahsram.
Шон B. Ostlund, E-mail: ude.icu@dnultsos.
шилтемелер