Amphetamine никелүү аял тала чычканы менен жүрүм-туруму жана mesocorticolimbic тинейджер сезгич сөздөр өзгөртөт (2011)

Brain Res. Автордун кол жазмасы; PMC 25-жылдын 2011-июлунда жеткиликтүү.

акыркы редактору катары жарыяланган:

Brain Res. 7 январь, 2011; 1367: 213–222.

Жарыяланган онлайн Oct 8, 2010. чтыкта:  10.1016 / j.brainres.2010.09.109

PMCID: PMC3143067

NIHMSID: NIHMS312646

Бул макаланын жарыяланган акыркы редакцияланган версиясын ушул жерден таба аласыз Brain Рез

КУП башка макалаларды карагыла деп келтирет жарыяланган макала.

Баруу:

жалпылаган

Биз жакында эле социалдык моногамдык тыш чычканды түздүк (Microtus ochrogaster) коомдук жүрүм-турумдун амфетамин (AMPH) менен шартталган начарлашына мезокортиколимбикалык допаминдин (DA) катышуусун иликтөө үчүн жаныбарлардын модели катары. Биздин ишибиздин көпчүлүгү, бүгүнкү күнгө чейин, эркектерге багытталгандыктан жана жыныстык айырмачылыктар адатта AMPHге карата жүрүм-турумдук жана нейробиологиялык жооптордо билдирилгендиктен, бул изилдөө AMPH менен дарылоонун ургаачы чычкандардын жүрүм-турумуна жана нейробиологиялык таасирин изилдөөгө арналган. Биз шартталган жерге артыкчылык берүү (CPP) парадигмасын колдонуп, AMPHтин ургаачы чычкандардын жүрүм-турумдук таасири үчүн доза-жооп ийри сызыгын аныктадык жана кондициялоо төмөн жана орто (0.2 жана 1.0 мг/кг), бирок өтө төмөн эмес ( 0.1 мг/кг), AMPH дозалары CPP индукциялаган. Биз ошондой эле жүрүм-турумга ылайыктуу AMPH дозасынын (1.0 мг / кг) таасири DA концентрациясынын көбөйүшүнө алып келген ядронун аккумбенс (NAcc) жана caudate putamen, бирок орто префронталдык кортекс же ventral tegmental аймак (VTA) эмес, деп табылган. Акыр-аягы, AMPH кайталануучу таасири (1.0 күн катары менен күнүнө бир жолу 3 мг/кг; жакында эле DA рецепторунун экспрессиясын өзгөртүп, эркек талаа чычкандарында социалдык байланышты начарлатуучу инъекциялык парадигма) D1ди көбөйттү, бирок D2 эмес, рецептордогу mRNA NAcc жана D2 рецепторунун мРНКсы жана VTAдагы D2 сыяктуу рецептордун байланышы төмөндөгөн. Бул маалыматтар биргелешип, AMPH мезокортиколимбикалык DA нейротрансмиссиясын аймакка жана рецепторго мүнөздүү түрдө өзгөртөт, бул өз кезегинде ургаачы чычкандардын социалдык жүрүм-турумуна терең таасирин тийгизиши мүмкүн.

Keywords: Психостимулятор, Ядронун аккументтери, Вентралдык тегменталдык аймак, Авторецептор, Жуп байланышы, Шарттуу жерди тандоо

1. тааныштыруу

Баңгизатты кыянаттык менен пайдалануу, алардын жүрүм-турумуна, бир жагынан, мезокортиколимбикалык допамин (DA) системасына тийгизген таасири аркылуу күчтүү көзөмөл жүргүзөт деп ойлошот.Келли жана Berridge, 2002; Nesse жана Berridge, 1997; Nestler, 2004, 2005; Panksepp .Удаалаш., 2002), вентралдык тегменталдык аймакта (VTA) келип чыккан жана алдыңкы мээнин ар кандай аймактарына, анын ичинде ортоңку префронталдык кортекске (PFC) жана ядронун аккумбенстерине (NAcc) проектисин түзгөн DA өндүрүүчү клеткалардан турган нейрондук схема. Адаптивдүү максатка багытталган жүрүм-турумду пайда кылууда маанилүү ролду ойногон бул өтө сакталган нейрондук схема (Zahm, 2000) – анын ичинде бардык жаныбарлардын жүрүм-туруму (мисалы, тамактандыруу (Нараянан ж.б., 2010; Palmiter, 2007)) жана түргө мүнөздүү болгондор (мисалы, моногамдык түрдөгү жуптук байланыш (Aragona жана Wang, 2009; Кертис .Удаалаш., 2006; Жаш .Удаалаш., 2010)) – кыянаттык менен колдонулган баңги заттардын таасири менен олуттуу өзгөрөт. Мисалы, кокаин же амфетамин (AMPH) сыяктуу психостимулятордук дары-дармектердин курч жана/же кайталанма таасири мээнин мезокортиколимбикалык аймактарындагы нейрондук морфологиянын, DA рецепторунун экспрессиясынын жана сезгичтигинин өзгөрүшүнө алып келет.Генри и др., 1989; Генри менен Ак, 1995; Ху .Удаалаш., 2002; Nestler, 2005; Пирс жана Kalivas, 1997; Робинсон .Удаалаш., 2001, 1988; Робинсон менен Kolb, 1997; Ак жана Kalivas, 1998). Бул нейроадаптациялар жаныбарлардын жүрүм-турумундагы дары-дармектер менен шартталган өзгөрүүлөрдүн негизинде болушу мүмкүн деп эсептелет (Робинсон менен Бекер 1986), анын ичинде социалдык жүрүм-турум (карап чыгуу үчүн, караңыз (Жаш .Удаалаш., 2011)).

Биздин лабораториянын акыркы иши, коомдук жүрүм-турумга кыянаттык менен дары-дармектердин таасирине мезокортиколимбикалык DA катышуусун изилдөө үчүн мал модели катары прерий чычкан түздү.Liu .Удаалаш., 2010). Прерий чычкандары – социалдык моногамдык кемирүүчүлөр, алар узак убакыт чогуу жашагандан жана/же жупташкандан кийин тааныш өнөктөш үчүн артыкчылыктарды (б.а., өнөктөш артыкчылыктары) түзөт (Арал .Удаалаш., 1995; Картрайт .Удаалаш., 1992; Winslow .Удаалаш., 1993) жана мезокортиколимбикалык DA - өзгөчө NAccдеги DA нейротрансмиссиясы - бул процесс үчүн маанилүү (Aragona .Удаалаш., 2003, 2006; Aragona жана Wang, 2009; Кертис .Удаалаш., 2006; Гингрич .Удаалаш., 2000; Liu жана Wang, 2003; Wang .Удаалаш., 1999; Жаш .Удаалаш., 2010). Кызыктуусу, AMPH таасири мезокортиколимбикалык DA активдүүлүгүн жана эркек талаа чычкандарында нейротрансмиссияны олуттуу өзгөртөт. Мисалы, бир AMPH инъекциясы NAccдеги клеткадан тышкаркы DA деңгээлин бир топ жогорулатты.Кертис жана Wang, 2007). Кошумчалай кетсек, үч күндүк AMPH экспозициясы, экологиялык контекст менен жупташканда шарттуу орун артыкчылыктын (CPP) пайда болушуна түрткү берген, NAccдеги DA рецепторунун экспрессиясын рецепторго мүнөздүү түрдө өзгөрткөн (Liu .Удаалаш., 2010). Маанилүү нерсе, ошол эле дары-дармек менен дарылоо жупташуудан келип чыккан өнөктөш каалоолорунун пайда болушуна тоскоол болгон, бул мезокортиколимбикалык DA нейротрансмиссиясынын AMPH менен шартталган өзгөрүшү бул түрдөгү жуптардын байланышынын AMPH тарабынан индукцияланган бузулушунун негизин түзүшү мүмкүн экенин көрсөтүп турат (Liu .Удаалаш., 2010).

Жогоруда сүрөттөлгөн изилдөөлөр AMPH менен шартталган социалдык байланыштын бузулушун жана анын негизги нейрондук механизмдерин изилдөө үчүн эң сонун үлгү катары прерий чычканды аныкташканына карабастан, алар жалаң эркектерде жүргүзүлгөн. Демек, биз ургаачы талаа чычкандарында AMPHтин жүрүм-турумуна жана нейробиологиялык таасирлери жөнүндө абдан аз билебиз. Прерия чычкандарынын ургаачы чычкандарына караганда AMPHга көбүрөөк сезгич экенин далилдеген далилдер бар (Aragona .Удаалаш., 2007) жана башка түрлөрдөгү изилдөөлөр адатта AMPH жана башка психостимулятордук кыянаттык препараттарынын жүрүм-турумдук жана нейробиологиялык таасиринде жыныстык айырмачылыктарды билдирет (Бекер жана Ху 2008; Fattore .Удаалаш., 2008; Линч, 2006). Мисалы, ургаачы келемиштер кыймыл-аракетинин активдүүлүгүн жана AMPHге жооп катары жүрүм-турум сезгичтигин тезирээк пайда кылат (Кэмп жана Робинсон, 1988), кокаинди жана метамфетаминди өз алдынча башкарууну тезирээк алуу (Ху .Удаалаш., 2004; Линч, 2006; Линч менен Кэрролл, 1999; Рот жана Кэрролл, 2004) жана психостимуляторлорду алуу үчүн мотивациянын жогорку даражасын көрсөтөт (Робертс .Удаалаш., 1989; Рот жана Кэрролл, 2004) эркектерге караганда. Кошумчалай кетсек, психостимуляторлорго нейробиологиялык жоопто жыныстык айырмачылыктар, анын ичинде AMPH менен шартталган DA чыгаруудагы айырмачылыктар байкалган.Бекер 1990; Бекер жана Рамирес 1981), DA метаболизми (Кэмп жана Робинсон, 1988) жана дароо эрте ген экспрессиясы (Castner and Becker, 1996). Ургаачы тыш чычкандардагы AMPHтин нейробиологиялык таасирин изилдөө, ошондуктан кыянаттык менен пайдалануу, коомдук жүрүм-турум жана мезокортиколимбикалык DA дарыларынын ортосундагы мамилелерди изилдөө үчүн прерий чычкан моделин толук түзүү үчүн абдан маанилүү.

Учурдагы изилдөө аял талаа чычканындагы AMPH экспозициясынын жүрүм-турумуна жана нейробиологиялык таасирин изилдөө үчүн иштелип чыккан. Биз мурда эркек талаа чычкандарында түзүлгөн CPP парадигмасын колдондук (Liu .Удаалаш., 2010) аялдарда AMPH ар кандай дозаларынын жүрүм-турум актуалдуулугун изилдөө. Аялдар эркектерге караганда AMPHга көбүрөөк сезимталдыкты көрсөтөт (Aragona .Удаалаш., 2007; Бекер .Удаалаш., 2001; Кэмп жана Робинсон, 1988), биз ургаачы талаа чычкандары эркектерге караганда AMPHнын төмөнкү дозаларында CPP түзүшөт деп божомолдодук. Биз ошондой эле AMPH экспозициясынын DA концентрациясына жана DA рецепторунун генинин экспрессиясына жана мээнин ар кандай мезокортиколимбикалык аймактарында байланышына таасирин карадык. Биз AMPH таасири DA концентрациясын жана DA рецепторунун экспрессиясын рецепторго жана аймакка мүнөздүү түрдө өзгөртөт деп божомолдодук. Учурдагы изилдөөнүн натыйжалары бул түрдөгү ургаачылардын социалдык жүрүм-турумуна AMPHтин таасирин изилдеген келечектеги иш үчүн пайдалуу түшүнүк берет.

2. Жыйынтыгы

2.1. 1-эксперимент: AMPH кондициялоочу CPP

Эксперимент 1 ургаачы талаа чычкандарында AMPH-индукцияланган CPP үчүн доза-жооп ийри сызыгын түздү. Акыр-аягы, ургаачылардын доза-жооп ийри сызыгын эркектер менен салыштыруу үчүн, биз жакында эле эркек чычкандарда иштелип чыккан кондициялоо парадигмасын колдондук (Liu .Удаалаш., 2010). Субъекттер AMPH [0.0 (XNUMX) концентрациясы боюнча айырмаланган төрт эксперименталдык топтун бирине туш келди дайындалган.n=20), 0.1 (n=8), 0.2 (n=12), же 1.0 мг/кг (n=13)] алар AMPH кондициялоо сессияларында кабыл алынган (чоо-жайын көрүү үчүн Эксперименталдык процедураларды караңыз). Бардык субъекттер акыркы кондициялоо сессиясынан кийинки күнү дары-дармексиз абалда КППнын болушу үчүн сыналган. А КПП алдын ала тестирлөө менен салыштырганда пост-тест учурунда дары жупташкан капаска сарпталган убакыттын олуттуу өсүшү менен аныкталды.

Жалгыз туз менен дарыланган субъекттер [0.0 мг/кг; т(19)= 1.65; p<0.12] же эң аз [0.1 мг/кг камтыган туздуу; т(7)= 1.89; p<0.90] AMPH концентрациясы кондицияланганга чейин жана андан кийин дары-жупташтырылган камерада статистикалык жактан бирдей убакыт өткөргөн, ошондуктан, CPP түзгөн эмес (Сүрөт. 1A). Анын ордуна, субъекттер 0.2 [т(11)= 2.77; p<0.02] же 1.0 мг/кг [т(12)= 2.53; p<0.03] AMPH күчтүү CPP көрсөттү, анткени алар пост-тест учурунда дары-жупташтырылган камерада алдын ала сыноого караганда кыйла көбүрөөк убакыт өткөрүштү (Сүрөт. 1A). Дары-дармек менен дарылоодон мурун же андан кийин топтордун ичинде же алардын ортосунда кыймыл-аракетте эч кандай айырмачылыктар байкалган эмес (Сүрөт. 1B).

Анжир. 1 

Амфетамин (AMPH) менен шартталган жерге артыкчылык (CPP) жана ургаачы чычкандардын кыймыл-аракети. 0.0 күндүк кондициялоодо 0.1 (туздуу эрин гана) же 3 мг/кг AMPH алган ургаачылар CPP түзүшкөн эмес, анткени алар бирдей убакыт өткөрүшкөн. ...

2.2. Эксперимент 2: AMPH дарылоо mesokorticolimbic DA концентрациясын өзгөрттү

2-эксперимент PFC, NAcc, caudate putamen (CP) жана VTA сыяктуу мээнин тандалган аймактарында DA концентрациясына бир AMPH дарылоонун таасирин изилдеген.Сүрөт. 2A). Субъекттер туш келди эки эксперименталдык топтун бирине дайындалган, алар 0.9% туздуу эриндин бир жолу инъекциясын алышкан (n=6) же туздуу эриген 1.0 мг/кг AMPH (n=6). Бул доза ургаачы (1-эксперимент) жана эркек талаа чычкандарында (XNUMX-эксперимент) CPP индукциялоо үчүн жетиштүү болгондуктан тандалган.Aragona .Удаалаш., 2007; Liu .Удаалаш., 2010), анын эки жыныстагы жүрүм-турумунун актуалдуулугун көрсөтүү. Бардык субъекттер инъекциядан 30 мүнөт өткөндөн кийин курмандыкка чалынышты жана алардын мээ кыртышында DA концентрациясы электрохимиялык аныктоо (HPLC-ECD) менен жогорку натыйжалуу суюк хроматографияны колдонуу менен өлчөнөт.

Анжир. 2 

Мезокортиколимбикалык мээ аймактарында DA концентрациясына бир AMPH инъекциясынын (1 мг / кг) таасири. Ортоңку префронталдык кортекс (PFC), нуклеус аккумбенс (NAcc), куйруктуу путамен (CP) жана вентралдык ткандардын ткандарынын схемалык иллюстрациясы ...

Бир AMPH дарылоо мезокортиколимбикалык DA тутумунун ичинде регионго мүнөздүү түрдө DA концентрациясын өзгөрттү (Сүрөт. 2B). AMPH менен мамиле субъектилери NAcc [t(10) = 2.06; p<0.03] жана CP [t(10)= 2.07, p<0.03] туздуу инъекциялык башкарууларга караганда. Бирок, эч кандай топ айырмачылыктар PFC табылган [t(10)= 0.03; p<0.49] же VTA [t(10)= 1.41; p<0.09].

2.3. Эксперимент 3 жана 4: AMPH кайталанма таасири DA рецепторунун mRNA экспрессиясын жана байланышын өзгөртөт

Эксперименттер 3 жана 4, тиешелүүлүгүнө жараша, D1 кабылдагыч жана D2 кабылдагыч mRNA туюнтма жана D1 сыяктуу жана D2 сыяктуу кабылдагыч менен байланышуу боюнча кайталанган AMPH дарылоо таасирин изилдеп чыкты. Эркек талаа чычкандарына жасалган мурунку эксперименттер AMPHтин кайталанма таасири (1.0 күн катары менен күнүнө 3 жолу 24 мг/кг) акыркы инъекциядан XNUMX саат өткөндөн кийин NAccдеги DA рецепторунун экспрессиясын олуттуу түрдө өзгөртөрүн жана бул өзгөртүү AMPH-индукцияланган начарлашынын негизин түзүшү мүмкүн экенин көрсөттү. коомдук байланыш (Liu .Удаалаш., 2010). Ошондуктан, биз бул дары сайынуу парадигмасын аялдарда AMPHнын кайталануучу таасиринин нейробиологиялык таасирин иликтөө үчүн колдондук. Субъекттер туздуу инъекцияларды алган эки топтун бирине туш келди дайындалган (контролдоо, n=6) же 1.0 мг/кг AMPH камтыган туз (n=8), үч күн катары менен күнүнө бир жолу. Бардык субъекттер акыркы инъекциядан кийин 24 сааттан кийин курмандыкка чалынды. D1 кабылдагыч мРНКсынын жана D1 сыяктуу рецептордун байланышынын тыгыздыгы NAcc жана CPде өлчөнгөн, ал эми D2 рецепторунун мРНКсы жана D2 сыяктуу рецептордун байланышы NAcc, CP жана VTAда өлчөнгөн. D1R мРНКсы жана D1 сыяктуу рецепторлордун байланышы VTAда өлчөнгөн эмес, анткени мээнин бул аймагында алардын катышуусу жок (Weiner et al., 1991).

Кайталануучу AMPH экспозициясы DA рецепторунун mRNA экспрессиясын рецепторго жана аймакка мүнөздүү түрдө өзгөрттү. Кайталап AMPH дарылоону алган субъекттер NAccде D1 рецепторунун mRNA маркировкалоосунун кыйла жогору деңгээлин көрсөттү.t(12)= 2.85; p < 0.01], бирок CP эмес [t(12)= 1.96; p < 0.07], туздуу инъекциялык башкарууга караганда (Figs. 3А жана В). NAccде да D2 рецепторунун мРНК маркалоосунда эч кандай топтук айырмачылыктар табылган жок.t(12)= 1.56; p < 0.14] же CP [t(12)= 1.79; p <0.10] (Figs. 3С жана Д). Бирок, кайталанган AMPH дарылоо VTAдагы D2 рецепторунун мРНКсынын деңгээлин бир топ төмөндөткөн [t(12)= 3.11; p < 0.01] (Figs. 3 жана Ф).

Анжир. 3 

AMPH кайра-кайра башкаруунун (1 күн катары менен 3 мг/кг/күн) ургаачы талаа чычканындагы допамин рецепторунун mRNA этикеткасына тийгизген таасири. Кайталанма AMPH менен дарылоо D1 рецепторунун (D1R) мРНКсынын маркировкасын көбөйттү. ...

Кайталанма AMPH таасири D1 сыяктуу рецепторго эч кандай таасир тийгизген эмес (Figs. 4А жана В) же D2 сыяктуу рецептор (Figs. 4С жана Д) NAccдеги байланыш деңгээли [D1 сыяктуу: t(12)= 0.40; p < 0.35, D2 сыяктуу: t(12)= 0.77; p<0.23] же CP [D1 сыяктуу: t(12)= 0.63; p<0.27, D2 сыяктуу: t(12)= 0.91; p<0.19]. Бирок, AMPH менен дарыланган субъектилерде туздуу инъекцияланган контролдорго караганда VTAда D2 сыяктуу рецептор менен байланыштын деңгээли кыйла төмөн болгон.t(12)= 1.91; p<0.04] (Figs. 4E жана Ф).

Анжир. 4 

AMPH кайталап башкаруунун (1 күн катары менен 3 мг/кг/күн) ургаачы тыш чычканындагы допаминдик рецепторлордун байланыш деңгээлине тийгизген таасири. Кайталанма AMPH менен дарылоо D1 сыяктуу (A жана B) же D2 сыяктуу рецепторлордун байланыш деңгээлин (C жана D) өзгөрткөн жок. ...

3. талкулоо

Учурдагы изилдөө аял талаа чычкандарында AMPH экспозициясынын жүрүм-турумуна жана нейробиологиялык таасирин изилдеген. Жалпысынан, биздин маалыматтар AMPH жүрүм-туруму боюнча дозага көз каранды таасири бар экенин көрсөтүп турат, NAcc жана CP DA концентрациясын жогорулатат жана DA рецептор ген экспрессиясын жана кабылдагыч жана аймакка мүнөздүү түрдө байланышты өзгөртөт. Бул маалыматтар акыры бул түрдөгү аялдардын коомдук жүрүм-туруму боюнча AMPH таасирин иликтөө келечектеги изилдөөлөр үчүн пайдалуу түшүнүк менен камсыз болушу мүмкүн.

CPP негизги бекемдөөчү менен жупташкан экологиялык контекстке болгон артыкчылыкты чагылдырат (Бардо жана Bevins, 2000) – бул учурда, AMPH – жана көп учурда дары-дармек сыйлыгынын кыйыр болсо да, жүрүм-турумга тиешелүү чарасы катары колдонулат. Биздин натыйжалар AMPH аз жана орто дозалары менен дарылангандан кийин ургаачы талаа чычкандары CPP түзөрүн көрсөтүп турат. Ошол эле CPP парадигмасын колдонуу менен жетишилген эркек талаа чычкандарынын акыркы натыйжалары менен салыштырганда (Liu .Удаалаш., 2010), бул маалыматтар биргелешип, ургаачы чычкандарда CPP үчүн доза-жооп ийри сызыгынын солго жылышын көрсөтөт. Тактап айтканда, AMPHтин 0.2 мг/кг же андан жогору дозалары аялдарда CPPди индукциялаган, ал эми эркектерде CPP индукциясы үчүн 1.0 мг/кг же андан жогору AMPH дозалары талап кылынган (Liu .Удаалаш., 2010). Ургаачылардын доза-жооп ийри сызыгынын солго жылышы башка кондициялоо парадигмасын колдонгон прерий чычкандардын мурунку изилдөөсүнө шайкеш келет (Aragona .Удаалаш., 2007) жана ургаачылар эркектерге караганда AMPHтин жүрүм-турумдук эффекттерине көбүрөөк сезгич болушат деп болжолдойт — бул башка түрлөрдө ырааттуу түрдө далилденген (Кэмп жана Робинсон, 1988; Ху .Удаалаш., 2004; Линч, 2006; Линч менен Кэрролл, 1999; Робертс .Удаалаш., 1989; Рот жана Кэрролл, 2004) жана бул AMPHтин ургаачы чычкандардын коомдук жүрүм-турумуна тийгизген таасири үчүн маанилүү мааниге ээ болушу мүмкүн.

Бул изилдөөдө биз ошондой эле AMPH администрациясы – жүрүм-турумга ылайыктуу дозада (1.0 мг/кг) ургаачы талаа чычкандары үчүн – NAcc жана CPдеги DA концентрациясын жогорулатты, бирок PFC же VTA эмес. Бул натыйжалар DA концентрациясынын аймакка мүнөздүү AMPH-индукцияланган жогорулатууну көрсөтөт. Бир катар түрлөрдөгү мурунку изилдөөлөр AMPH инъекциясынан көп өтпөй NAcc жана CPде клеткадан тышкары DA релизинин индукциясын көрсөттү (Cho .Удаалаш., 1999; Клаузинг жана Боуер, 1999; Кертис жана Wang, 2007; Di Chiara .Удаалаш., 1993; Drevets .Удаалаш., 2001), бул изилдөөдө бул аймактарда DA концентрациясынын көбөйүшү DA чыгаруунун AMPH-индукцияланган күчөтүлүшүнө байланыштуу болушу мүмкүн. Бирок, DA концентрациясы DA синтезине жана метаболизмине да таасирин тийгизгендиктен, бул спекуляция кийинки эксперименттерде сыналышы керек. Кошумчалай кетсек, ургаачы тыш чычкандарда AMPH таасиринен кийин VTAдагы DA концентрациясынын төмөндөшүнө карай байкаларлык тенденция байкалган. Бул таасир анчалык деле байкалбаганы менен (p < 0.09), бул мээ аймагында DA концентрациясына AMPH таасирин жокко чыгаруу же жокко чыгаруу үчүн мындан ары эксперимент талап кылынат.

Ургаачы талаа чычкандарында AMPH экспозициясынын нейробиологиялык кесепеттерин тереңирээк түшүнүү үчүн биз DA рецепторунун mRNA экспрессиясына жана мээнин ар кандай аймактарында байланышууга кайталанган AMPH дарылоонун таасирин изилдедик. Биз AMPH дозасын жана инъекциялык парадигманы колдондук, ал жакында эле DA рецепторунун экспрессиясын өзгөртүүгө жана эркектердин талаа чычкандарынын социалдык жүрүм-турумун начарлатууга багытталган (Liu .Удаалаш., 2010). Биздин маалыматтар кайталанган AMPH экспозициясы NAccдеги D1 рецепторунун mRNA деңгээлин олуттуу жогорулатканын көрсөтүп турат. Окшош, бирок маанилүү эмес (p <0.07), эффект CP-де белгиленген, бул AMPH бул аймакта да D1R mRNA экспрессиясына таасир этиши мүмкүн экенин көрсөтүп турат. Ген экспрессиясындагы бул өзгөрүүлөргө карабастан, AMPH экспозициясы NAcc же CPдеги D1 сыяктуу рецепторлордун байланыш деңгээлин өзгөрткөн жок. D1 сыяктуу рецепторлордун эки түрү бар - D1 рецепторлору жана D5 рецепторлору - экөө тең биздин рецепторду байланыштыруучу экспериментте колдонулган D1 сымал лиганд менен белгилөө мүмкүнчүлүгүнө ээ. Бирок, D5 рецепторлору NAcc жана CP-де дээрлик жок болгондуктан (Missale .Удаалаш., 1998; Тибери жана башкалар, 1991), биздин маалыматтар, атап айтканда, D1 кабылдагыч белок деъгээлинде өзгөрүүлөрдүн жоктугун көрсөтүп турат. Ошо сыяктуу эле, башка кемирүүчүлөрдүн түрлөрү боюнча мурунку отчеттор AMPH же башка психостимуляторлордун кайра-кайра таасири мээнин бул аймактарында D1 рецепторлорунун жакындыгын же тыгыздыгын ишенимдүү түрдө өзгөртпөй турганын көрсөттү (караңыз:Пирс жана Kalivas, 1997; Ак жана Kalivas, 1998)), дары дарылоодон кийин бир айга чейин NAcc нейрондорунун D1 рецепторунун агонисттерине реакциясын жогорулатууга карабастан (Генри и др., 1989; Генри менен Ак, 1991, 1995). Биз ошондой эле AMPH менен дарылоодон кийин ургаачы талаа чычкандарында NAcc же CPде D2 рецепторунун mRNA же D2 сыяктуу рецепторлордун байланыш деңгээлинде эч кандай өзгөрүү болбогонун билдиребиз, бул келемиштер менен чычкандардагыдай (Richtand et al., 1997; Sora .Удаалаш., 1992) жана NAcc D1 рецепторлору AMPH кайталануучу таасирге жооп берүүдө көбүрөөк роль ойнойт деген сунуш (Берк жана Hyman, 2000).

Бул изилдөөнүн кызыктуу табылгасы кайталанган AMPH дарылоо D2 рецепторунун генинин экспрессиясынын жана ургаачы чычкандардын VTAсында D2 сыяктуу рецептордун байланышынын деңгээлин олуттуу төмөндөткөн. VTAдагы D2 рецепторлору A10 DA нейрондорунун somatodendritic аймактарында жайгашкан (VTAдан келип чыккан жана мезокортиколимбикалык аймактарга проектирленген DA проекциялык нейрондор) (Агажаниан жана Банни, 1977; Mercuri et al., 1997; Oades жана Холлидэй, 1987; Уайт жана Ванг, 1984б). Бул рецепторлор авторецепторлордун милдетин аткарат жана алардын активдешүүсү клетка мембранасынын гиперполяризациясына жана клетканын отунун бөгөт коюусуна алып келет (Mercuri et al., 1997) (карап чыгуу үчүн караңыз (Mercuri et al., 1992)), NAcc сыяктуу максаттуу аймактарга чыгарылган DA көлөмүн азайтуу (Usiello .Удаалаш., 2000). Демек, D2 рецепторунун блокадасы же гендин жок кылынышы A10 клеткасынын ингибициясынын жетишсиздигине жана ар кандай стимулдарга жооп иретинде DAнын NAccге толуп кетишине алып келет (Mercuri et al., 1997; Руж-Pont ж.б.., 2002). Ошондуктан, ушул изилдөөдө белгиленген VTAдагы D2 рецепторлорунун азайышы ургаачы талаа чычканындагы somatodendritic авторецепторлордун AMPH-индукцияланган төмөндөшүн көрсөтүшү мүмкүн. Авто-рецепторлордун тыгыздыгы A10 DA нейрондорунун активдүүлүгүнө тескери байланыштуу (Уайт жана Ван, 1984a), бул таасир күчөтүлгөн DA чыгаруу жана NAcc нейротрансмиссия алып келиши мүмкүн. Ошо сыяктуу эле, мурунку изилдөөлөр A10 DA нейрондорундагы соматодендриттик авторецепторлордун бир нече жолу психостимулятордун таасиринен кийин сезгичтигин көрсөттү, натыйжада A10 DA клеткаларынын спонтандык активдүүлүгү жана базалдык атышуу ылдамдыгы жогорулады.Генри и др., 1989) дары-дармек менен дарылоо аяктагандан кийин күн бою сакталышы мүмкүн (Акерман жана Уайт, 1990). Бирок D2 жана D3 рецепторлору тең VTAда көрсөтүлүп, допаминергиялык нейрондордо пресинаптикалык жактан локализацияланганын белгилей кетүү маанилүү.Диас жана башкалар, 1995; Mercuri et al., 1997), D2 сыяктуу кабылдагыч менен байланыштын учурдагы төмөндөшү рецептордун субтиптеринин биринин же экөөнүн тең өзгөрүшүнө байланыштуу болушу мүмкүн экенин көрсөтүп турат. AMPH таасири таасир эткен конкреттүү рецептордун субтипин билүү биздин маалыматтарды чечмелөө үчүн маанилүү, анткени D2, бирок D3 эмес, рецепторлор DA нейрондорунун авторецептордун бөгөт коюусу үчүн зарыл.Mercuri et al., 1997; Руж-Pont ж.б.., 2002). Ошентсе да, D3 рецепторлордун экспрессиясы D2 рецепторлоруна салыштырмалуу VTAда өтө төмөн болгондуктан (Bouthenet et al., 1991) жана спиперон D2 рецепторуна караганда D3ге көбүрөөк жакындыгын көрсөтөт (Missale .Удаалаш., 1998), кыязы, D2 сыяктуу рецепторлордун байланышына учурдагы таасирлер D2 рецепторлоруна караганда, D3 деңгээлинин белгилүү бир төмөндөшүн билдирет.

Ургаачыларга AMPHтин кайталануусунун нейробиологиялык таасирлери мурда эркек чычкандарда кездешкендер менен кээ бир окшоштуктарды көрсөтөт (Liu .Удаалаш., 2010), эки маанилүү айырмачылыктар көрүнүп турат. Биринчиден, AMPH тажрыйбасы эки жыныста тең NAccде D1 рецепторунун мРНКсын көбөйтсө да, бул көбөйтүүчү ген транскрипциясынын функционалдык натыйжалары эркектерде гана сакталып калган (б.а., аялдар D1 сыяктуу рецепторлордун байланыш деңгээлинде эч кандай өзгөрүүлөрдү көрсөткөн эмес, ал эми AMPH NAcc D1 рецепторунун белок деңгээлин жогорулаткан. эркектер). Бул айырмачылыктар бул функционалдык кесепеттерди аныктоо үчүн ар кандай сандык ыкмаларды колдонууга байланыштуу болушу мүмкүн (башкача айтканда, рецепторлорду байланыштыруу аялдарда колдонулган, ал эми эркектерде вестерн блоттинги колдонулган) же NAcc ичиндеги D1 рецепторлоруна кайталанган AMPH дарылоонун жыныстык өзгөчө таасирин көрсөтүшү мүмкүн. талаа чычкандарынын. Экинчиден, AMPH дарылоо эркек талаа чычкандарында VTAдагы D2 рецепторунун mRNA экспрессиясына эч кандай таасир тийгизген эмес (Liu .Удаалаш., 2010), бирок бир кыйла азайган, ошондой эле D2 кабылдагычтарды милдеттүү деңгээли, аялдарда - андан ары AMPH нейробиологиялык таасири жыныстык өзгөчөлүгүн көрсөтүп турат. Бул идея AMPH дарылоодон кийин ген экспрессиясындагы жыныстык айырмачылыктарды көрсөткөн башка түрлөрдөгү табылгалар менен колдоого алынат (Castner and Becker, 1996).

Mesokorticolimbic DA системасында AMPH-индукцияланган өзгөртүүлөр талаа чычкандарынын коомдук жүрүм-турумуна маанилүү кесепеттерге алып келиши мүмкүн. Жогоруда айтылгандай, бойго жеткен эркек жана ургаачы чычкандар жупташкандан кийин туруктуу жуп байланыш түзүшөт (Картер и др., 1995; Картрайт .Удаалаш., 1992; Winslow .Удаалаш., 1993) жана NAcc DA бул жүрүм-турумду эки жыныста тең рецепторго мүнөздүү түрдө жөнгө салат: D2 сыяктуу рецептордун активдешүүсү көмөктөшөт жана D1 сыяктуу рецептордун активдешүүсү өнөктөш артыкчылыктарынын пайда болушуна тоскоол болот (Aragona .Удаалаш., 2003, 2006; Aragona жана Wang, 2009; Гингрич .Удаалаш., 2000; Liu жана Wang, 2003; Wang .Удаалаш., 1999). Ошентип, мээнин мезокортиколимбикалык аймактарында AMPH менен шартталган өзгөрүүлөр, анын ичинде бул жерде билдирилгендер, талаа чычканындагы жуптарды бириктирүү жүрүм-турумуна олуттуу кесепеттерди алып келиши мүмкүн. Эркектерде, мисалы, NAccдеги D1 сыяктуу рецепторлордун AMPH менен шартталган көбөйүшү AMPH менен шартталган өнөктөштүн артыкчылыктарын түзүүнүн бузулушунун негизи деп эсептелет (Liu .Удаалаш., 2010), NAcc D1 рецепторунун активдештирүү жупташуудан келип чыккан өнөктөш каалоолорун тоскоол кылгандыктан (Aragona .Удаалаш., 2006). Кошумчалай кетсек, AMPH менен дарылоо учурунда D1 рецепторлорунун фармакологиялык блокадасы дозага көз каранды болуп, AMPH менен шартталган өнөктөштүн артыкчылыктарынын пайда болушунун бузулушун жок кылды, бул андан ары AMPH D1 рецепторлорунун механизми аркылуу жуптук байланышты начарлатышы мүмкүн экенин көрсөтүп турат (Liu .Удаалаш., 2010). Анын ордуна ургаачыларда, учурдагы ачылыштар көрсөткөн авторецептордун ингибиторунун жоктугунан улам (б.а., VTAдагы D2 рецепторунун экспрессиясынын азайышы), NAccде жупташуудан келип чыккан DA релизинин AMPH менен дарыланган чычкандарда күчөшү мүмкүн. DA концентрациясынын күчтүү көтөрүлүшү төмөн жакындыктагы D1 рецепторлорун активдештирет (Richfield .Удаалаш., 1989), бул neuroadaptation аялдардын коомдук байланыш боюнча маанилүү жүрүм-турум кесепеттери болушу мүмкүн.

Жыйынтыктап айтканда, учурдагы изилдөө AMPHтин жүрүм-турумга ылайыктуу дозасы DA концентрациясын жана бул түрдүн моногамдык социалдык жүрүм-турумуна катышкан негизги схема болгон ургаачы талаа чычкандарынын мезокортиколимбикалык DA тутумундагы рецепторлордун экспрессиясын өзгөртөрүн көрсөтүп турат. Бул натыйжалар AMPHтин жуп байланышына жана тартылган нейрохимиялык механизмдерге тийгизген таасирин изилдөө үчүн ургаачы чычкандардын келечектеги изилдөөлөрү үчүн негиз түзөт.

4. эксперименттик жол-жоболору

4.1. Жаныбарлар

Туткундагы ургаачы талаа чычкандары (Microtus ochrogasterИллинойс штатынын түштүгүндөгү популяциялардын тукумдарынан 21 күн болгондо эмчектен чыгарылып, анан бир жыныстуу бир тууган жуптарга бал карагайдан жасалган төшөктөр салынган пластик клеткаларга (29×18×13 см) жайгаштырылды. Алар 14:10 жарык: караңгы циклде (саат 0700:XNUMXдө жарык күйөт) сакталган. ад либитум тамак-ашка жана сууга жетүү. Температура 21±1°С сакталган. Бул изилдөөдө колдонулган бардык жаныбарлардын жашы 90 жана 120 күн болгон. Тажрыйбалар Флорида штатынын университетинин жаныбарларды багуу жана пайдалануу боюнча институттук комитетинин көрсөтмөлөрүнө ылайык өткөрүлдү.

4.2. Шарттуу жерге артыкчылык берүү парадигмасы

CPP аппараты мурда сүрөттөлгөндөй эле жана эки пластикалык капастан турган, алар көзгө көрүнүп тургандай (ак менен кара) жана бири-бирине көңдөй түтүк (Aragona .Удаалаш., 2007; Liu .Удаалаш., 2010). Биз жакында эле талаа чычкандарынын эркектеринде иштелип чыккан кондициялоочу парадигманы колдондук (Liu .Удаалаш., 2010). Кыскача айтканда, бардык субъекттерге 30-күнү 1 мүнөттүк алдын ала сыноо берилди жана ар бир клеткада өткөргөн убакыттын көлөмү аныкталды. Алдын ала тестирлөө учурунда адам аз убакыт өткөргөн капас дары менен жупташкан капас, ал эми экинчиси туздуу жупташкан капас болуп дайындалган. Кондициялоо кийинки үч күн бою күн сайын 40 мүнөттүк эки сеанс учурунда (2–4-күн) болгон. Эртең мененки сессияларда (0900 ч.) субъекттер физиологиялык эритилген 0.0, 0.1, 0.2 же 1.0 мг/кг d-AMPH сульфатынын (Сигма, Сент-Луис, МО, АКШ) интраперитонеалдык (ip) инъекцияларын дароо жайгаштыруунун алдында алышты. дары жупташкан капаска. Түштөн кийинки сеанстарда (1500 саат) субъекттер туздуу жупташкан клеткага жайгаштырар алдында дароо физиологиялык инъекцияны алышты. Бул эки сыноо күнүнө машыгуу графиги келемиштерде колдонулган (Кэмпбелл жана Спир, 1999; Чжоу .Удаалаш., 2010) жана биздин мурунку изилдөөбүздө эркек талаа чычкандарында колдонулган (Liu .Удаалаш., 2010). Андан тышкары, бул парадигма тандалып алынган, анткени биздин пилоттук маалыматтарда тең салмактуу жана туруктуу инъекция/кондициялоо парадигмалары (жарыяланбаган маалыматтар) менен мамиле кылынган субъекттердин жүрүм-турумунда эч кандай айырмачылык жок жана стандартташтырылган инъекция жана кыртыштарды чогултуу графиктери кийинки эксперименттерде DA маркеринин туюнтмасын өлчөө үчүн маанилүү болгон. ошондой эле эркек талаа чычкандарынын маалыматтары менен түз салыштыруу үчүн (Liu .Удаалаш., 2010). 5-күнү, бардык субъекттер 30 мүнөттөн кийинки тестте КППнын бар-жоктугун текшеришти. Жаныбарлардын клеткалардын ортосунда канча жолу өткөнү тестке чейинки жана кийинки сыноо учурунда катталып, кыймыл активдүүлүгүнүн көрсөткүчү катары колдонулган.

4.3. Ткань даярдоо

Тажрыйба 30 жана 2 жана 24-эксперименттеги акыркы инъекциядан кийин 3 сааттан кийин 4 мүнөттөн кийин предметтердин баштары тез кесилди. Алардын мээлери тез эле алынып, кургак музда тоңдурулуп, -80 °Cде сакталган. 2-эксперименттеги мээлер 300 мкм бийиктикте короналдык кесилиштерге бөлүнгөн жана бөлүктөрү эрүү жолу менен Superfrost/plus слайддарына орнотулган. Паксинос жана Уотсон келемиштердин мээ атласы (Paxinos жана Уотсон, 1998) мээнин ар кандай аймактарын, анын ичинде PFC (8-10-плиталар), NAcc (9-11), CP (10-12-плиталар) жана VTA (40-43-плиталар) аныктоо үчүн колдонулган, алардан эки тараптуу ткандардын соккулары. 1 мм диаметри алынган (Сүрөт. 2A) жана иштетилгенге чейин -80 °C сакталат. Мезокортиколимбикалык мээ аймагы болбосо да, CP биздин анализибизге киргизилген, анткени ал NAcc жана PFC сыяктуу VTAдан DAergic киргизүүнү алат (Oades жана Холлидэй, 1987) бирок талаа чычкандарынын өнөктөш артыкчылыктарын калыптандыруунун DAergic жөнгө салууга тиешеси жок окшойт (Aragona .Удаалаш., 2003, 2006; Liu жана Wang, 2003). 3 жана 4-эксперименттерде мээлер Superfrost/plus слайддарына эрүү менен орнотулган 10 мкм бөлүктөрдүн 14 комплектине кесилген.

4.4. DA казып алуу жана HPLC-ECD талдоо

DA экстракциясы мурда сүрөттөлгөндөй аткарылган (Aragona .Удаалаш., 2002), кыртыш үлгүлөрү 50% EDTA менен 0.1 M perchloric кислотасынын 0.02 мкл sonicated тышкары. DA концентрациясы жогоруда айтылгандай электрохимиялык аныктоо (HPLC-ECD) менен жогорку натыйжалуу суюк хроматографиянын жардамы менен бааланган (Кертис .Удаалаш., 2003) төмөндөгүлөрдү эске албаганда. Мобилдик фаза 75 мМ натрий дигидроген фосфат моногидратынан, 1.7 мМ 1-октансульфон кислотасы натрий тузунан, 0.01% триэтиламинден, 25 um EDTAдан жана 7% ацетонитрилден турат жана рН 3.0% phosphoric кислотасы менен 85 ге туураланган. агымынын ылдамдыгы 0.5 мл/мин болгон. Стандарттык ийри сызык жана чоку аянты мурда сүрөттөлгөндөй эсептелген (Aragona .Удаалаш., 2003). Аныктоо чеги бир үлгүгө ~10 pg болгон.

4.5. D1 жана D2 кабылдагыч мРНК үчүн in situ гибриддештирүү

3-эксперименттеги мээ бөлүмдөрүнүн альтернативалуу топтомдору иштетилди ордунда DA кабылдагыч мРНКнын гибриддештирүү этикеткалоо. Антисенс жана сезүү рибопробдору (Доктор О. Сивелли тарабынан Калифорния университетинде, Ирвайн, Калифорнияда марттык менен берилген) D1 жана D2 рецепторлорун mRNA этикеткалоо үчүн колдонулган жана мурда сүрөттөлгөндөй даярдалган (Liu .Удаалаш., 2010). Пробдор 37 ° C температурада 1 саатка тиешелүү ДНК шаблонунун 0.5 мкг/мклден турган транскрипцияга оптималдаштырылган буферинде өзүнчө белгиленген, [35S]-CTP, 4 мМ ATP, UTP жана GTP, 0.2 M dithiothreitol (DTT), RNasin (40 U / мкл) жана РНК полимераза (20 U / мкл). Андан кийин ДНК шаблону 1 U/мкл DNaseI менен сиңирилди. Зонддор хроматография колонналары (Bio-Rad, Hercules, CA) менен тазаланган жана андан кийин 50% деионизацияланган формамид, 10% декстран сульфат, 3× SSC, 10 мМ натрий фосфат буферинен (PB, pH7.4) турган гибриддештирүү буферинде суюлтулган. × Денхардттын эритмеси, 1 мг/мл ачыткы тРНКсы жана 0.2 мМ DTT 10×5 алуу үчүн6 cpm/ml.

Мээ бөлүктөрү 4% параформальдегидде 0.1 М фосфат буфердүү тузда (PBS) 4 мүнөткө 20 °Cде бекитилди, PBSте 10 мүнөт чайкалат жана 0.25% уксус ангидриди менен триэтаноламинге (рН 8.0) 15 мүнөткө иштетилди. спецификалык эмес байланыш. Андан кийин слайддар 2 × туздуу натрий цитратында (SSC) жууп, этанолдун (ETOH) концентрациясын жогорулатуу аркылуу суусуздандырылды (70, 95 жана 100%) жана абада кургатылган.

Ар бир слайд тиешелүү камтыган 100 мкл гибриддештирүү эритмесин алды 35S-белгиленген зонд капкак менен жабылып, андан кийин нымдалган камерада түнү бою 55 °Cде инкубацияланган. Инкубациялоодон кийин, капкак-слиптер 2 × SSCде алынып салынды, слайддар 2 × SSCде 5 мүнөткө эки жолу жуулду, андан кийин RNase буферинде (37 мМ Tris-HCl, 1 мМ EDTA жана 8) 0.8 саат бою 0.4 °Cде жуулду. M NaCl, pH 8.0) 25 мг/мл RNaseA камтыган. Андан кийин, слайддар SSC азайган концентрациясында (2× SSC, 1× SSC жана 0.5× SSC) ар бири 5 мүнөттөн жууп, 0.1× SSCде 65 °C температурада 60 мүнөт инкубацияланган. Акыр-аягы, слайддар бөлмө температурасына жеткирилген, ETOH концентрациясын жогорулатуу аркылуу суусуздандырылган жана абада кургатылган. Оптималдуу авторадиограммаларды түзүү үчүн, зондго жана кызыккан аймакка жараша BioMax MR тасмасына (Kodak, Rochester, NY) бөлүмдөр ар кандай убакыт аралыгында бекитилген. NAcc жана CP үчүн, D1R жана D2R мРНК менен белгиленген бөлүктөрү тиешелүүлүгүнө жараша 14 жана 60 саатка тасмага тартылды, ал эми D1 жана D2 сыяктуу кабылдагычтарды байланыштыруу үчүн белгиленген бөлүмдөр тиешелүүлүгүнө жараша 15 жана 6.5 ч. VTA үчүн D2R mRNA үчүн белгиленген бөлүмдөр 60 саатка жана D2 сыяктуу байланыш үчүн белгиленгендер 40 саатка дайындалган. Ар бир зонд үчүн РНКны башкаруу сезими да текшерилген жана күтүлгөндөй эч кандай белги берген эмес.

4.6. DA рецепторлорунун авторрадиографиясы

4-эксперимент үчүн мээ бөлүмдөрүнүн альтернативдик топтомдору D1 сыяктуу жана D2 сыяктуу рецепторлордун авторрадиографиясы үчүн иштетилди. D1 сымал лиганд [125I] SCH23982 жана D2 окшош лиганд [125I] 2′-iodospiperone PerkinElmer (Waltham, MA) алынган. DA рецепторлорунун авторадиографиясы мурда айтылгандай аткарылган (Aragona .Удаалаш., 2006).

4.7. маалыматтарды талдоо

1-эксперимент үчүн CPP жупташкан тест менен өлчөнгөндөй, алдын ала тестирлөө менен салыштырганда пост-тест учурунда дары менен жупташкан клеткада сарпталган убакыттын олуттуу көбөйүшү менен аныкталды. t-тест. Кыймыл-аракеттин активдүүлүгү эки тараптуу кайталануучу чен-өлчөмдөрдүн жардамы менен ANOVA тесттен кийинки кыймылды (предмет ичиндеги өзгөрмө) жана кыймылды дарылоо (предмет ортосундагы өзгөрмө) менен салыштырып талдоого алынган. 2-эксперимент үчүн ар бир үлгүдөгү DA концентрациясы чогултулган кыртыштын көлөмүн көзөмөлдөө үчүн ошол үлгүдөгү протеиндин жалпы концентрациясын колдонуу менен нормалдаштырылган. DA концентрациясынын нормалдаштырылган мааниси (pg/μg ткань) андан кийин туздуу контролдун орточо DA концентрациясынын пайызына айландырылды. Ар бир мээ аймагы үчүн топтордун ортосундагы пайыздык DA концентрациясы а менен салыштырылган t-тест. 3 жана 4-эксперименттерде авторадиограммалар компьютерлештирилген сүрөт программасы (NIH IMAGE 1.60) аркылуу NAcc, CP жана VTAда mRNA маркировкасынын же рецептордун байланышынын оптикалык тыгыздыгы үчүн талданган (PFC анализге киргизилген эмес, анткени бул аймак эч кандай жооп көрсөткөн жок. 2-экспериментте AMPH дарылоого). NAcc, CP жана VTA үчүн сүрөт анализинин rostral/caudal көлөмү эксперимент 2 үчүн сүрөттөлгөндөй эле. NAcc жана CP ортосундагы нейроанатомиялык айырмачылык Паксинос жана Уотсон келемиштердин мээ атласын колдонуу менен жасалган (Paxinos жана Уотсон, 1998) жол көрсөткүч катары, маркировка формасына да, алдыңкы комиссиянын жайгашкан жерине да шилтеме кылуу. Ар бир мээ аймагы үчүн бөлүмдөр субъекттердин ортосунда анатомиялык жактан дал келген жана ар бир субъект үчүн жеке каражаттар оптикалык тыгыздыкты эки тараптуу өлчөө жолу менен алынган. Фондун тыгыздыгы ар бир бөлүмдүн өлчөөсүнөн алынып салынды. Акыркы оптикалык тыгыздыктар туздуу башкаруунун пайызына айландырылды. mRNA же мээнин аймагындагы милдеттүү деңгээлдердеги топтук айырмачылыктар ар бир DA рецептору үчүн а t-тест. Маанилүүлүк деңгээли белгиленген p

Acknowledgments

Биз Кевин Янг менен Адам Смитке кол жазманы сын көз менен окуганы үчүн ыраазычылык билдиребиз. Бул иш Саламаттыкты сактоо улуттук институттары тарабынан KAY үчүн DAF31-25570, KLG үчүн MHF31-79600 жана ZXW үчүн DAR01-19627, DAK02-23048 жана MHR01-58616 гранттары тарабынан колдоого алынган.

Шилтемелер

кыскартуулар: AMPH, амфетамин; ANOVA, дисперсияны талдоо; CP, caudate putamen; CPP, шарттуу орун артыкчылык; DTT, дитиотреитол; DA, дофамин; ETOH, этанол; HPLC, жогорку натыйжалуу суюк хроматография; ip, intraperitoneal; PCF, орто префронталдык кортекс; NAcc, ядронун аккументтери; PBS, фосфаттык буфердик туз; ССК, туздуу натрий цитраты; PB, натрий фосфат буфери; VTA, вентралдык тементалдык аймак

REFERENCES

  1. Ackerman JM, White FJ. A10 somatodendritic допамин авторецепторунун сезгичтиги кокаинди кайталап дарылоодон баш тартуу. Neurosci. Летт. 1990;117:181–187. [PubMed]
  2. Агажанян Г.К., Банни Б.С. Допамин "autoreceptors": microiontophoretic бир клетка жазуу изилдөөлөр менен фармакологиялык мүнөздөмөсү. Наунин Шмидеберг аркасы. Pharmacol. 1977;297:1–7. [PubMed]
  3. Aragona BJ, Wang Z. моногамдык кемирүүчүлөрдүн түрүндөгү социалдык тандоонун допаминдик жөнгө салынышы. Фронт. Behav. Neurosci. 2009;3:1–11.
  4. Aragona BJ, Curtis JT, Davidson AJ, Wang Z, Stephan FK. Чычкандагы циркаддык убакыт-орунду үйрөнүүнүн жүрүм-туруму жана нейрохимиялык изилдөөсү. J. Биол. Ритмдер. 2002;17:330–344. [PubMed]
  5. Aragona BJ, Liu Y, Curtis JT, Stephan FK, Wang Z. A critily role for nucleus accumbens допамин эркек прерий чычкандарда өнөктөш-артыкчылыкты түзүү. J. Neurosci. 2003;23:3483–3490. [PubMed]
  6. Aragona BJ, Liu Y, Yu YJ, Curtis JT, Detwiler JM, Insel TR, Wang Z. Nucleus accumbens допамин дифференциалдуу түрдө моногамдык жуп байланыштарды түзүүгө жана сактоого ортомчулук кылат. Нат. Neurosci. 2006;9:133–139. [PubMed]
  7. Aragona BJ, Detwiler JM, Wang Z. Амфетамин сыйлыгы моногамдуу талаа чычканында. Neurosci. Летт. 2007;418:190–194. [КУП акысыз макала] [PubMed]
  8. Бардо МТ, Бевинс РА. Шарттуу орунга артыкчылык: бул биздин клиникага чейинки дары-дармектин сыйлыгын түшүнүүбүзгө эмне кошот? Психофармакология (Берл.) 2000;153:31–43. [PubMed]
  9. Бекер Ж.Б. striatum боюнча 17 бета-эстрадиол түздөн-түз таасири: допамин чыгарууда жыныстык айырмачылыктар. Синапс. 1990;5:157–164. [PubMed]
  10. Беккер Дж.Б., Ху М. Баңгизатты кыянаттык менен пайдалануудагы жыныстык айырмачылыктар. Фронт. Нейроэндокринол. 2008;29:36–47. [КУП акысыз макала] [PubMed]
  11. Беккер Дж.Б., Рамирес В.Д. Амфетаминдеги жыныстык айырмачылыктар in vitro чычкандын стриаталдык тканынан катехоламиндердин бөлүнүп чыгышына түрткү болгон. Brain Res. 1981;204:361–372. [PubMed]
  12. Беккер Дж.Б., Моленда Х, Хаммер Д.Л. Кокаин жана амфетаминге болгон жүрүм-турумдук жооптордогу гендердик айырмачылыктар. Баңгизатты кыянаттык менен пайдаланууда гендердик айырмачылыктарды ортомчу механизмдерге тийгизген таасири. Анн. NY Acad. Sci. 2001;937:172–187. [PubMed]
  13. Berke JD, Химэн SE. Көз карандылык, тинейджер жана эс молекулярдык механизми. Нейрон. 2000; 25: 515-532. [PubMed]
  14. Bouthenet ML, Souil E, Martres MP, Sokoloff P, Giros B, Schwartz JC. In situ гибриддештирүү гистохимиясын колдонуу менен келемиштердин мээсинде допамин D3 рецепторунун мРНКсынын локализациясы: допамин D2 рецепторунун мРНКсы менен салыштыруу. Brain Res. 1991;564:203–219. [PubMed]
  15. Camp DM, Robinson TE. Сенсибилизацияга ийкемдүүлүк. I. Жыныстык айырмачылыктар өнөкөт D-амфетамин менен дарылоонун кыймылга, стереотиптүү жүрүм-турумуна жана мээ моноаминдерине туруктуу таасири. Behav. Brain Res. 1988;30:55–68. [PubMed]
  16. Кэмпбелл Дж, Спир ЛП. Эрте иштетүүнүн амфетамин менен шартталган кыймыл-аракетти активдештирүүгө тийгизген таасири жана чоң келемиштерде шарттуу орун артыкчылыктары. Психофармакология (Берл.) 1999;143:183–189. [PubMed]
  17. Картер CS, DeVries AC, Getz LL. Сүт эмүүчүлөрдүн моногамиясынын физиологиялык субстраттары: талаа чычкан модели. Neurosci. Biobehav. Rev. 1995;19:303–314. [PubMed]
  18. Castner SA, Becker JB. Амфетаминдин келемиштин арка стриатумунда дароо эрте ген экспрессиясына тийгизген таасириндеги жыныстык айырмачылыктар. Brain Res. 1996;712:245–257. [PubMed]
  19. Чо АК, Мелега ВП, Кучзенски Р, Сегал ДС, Шмитц Д.А. Каудат-путамен допамин жана стереотиптик жооп профилдери тамырга жана тери астына амфетаминден кийин. Синапс. 1999;31:125–133. [PubMed]
  20. П, Боуер Дж.Ф. D-амфетаминдин бир нече дозасын кабыл алгандан кийин келемиштердеги амфетамин менен дофаминдин мээ температурасынын убакыт курсу жана каудат/путамен микродиализат деңгээли. Анн. NY Acad. Sci. 1999;890:495–504. [PubMed]
  21. Кертис JT, Wang Z. Амфетамин микротин кемирүүчүлөрдүн таасири: моногамдык жана бузуку чычкан түрлөрүн колдонуу менен салыштырма изилдөө. Неврология. 2007;148:857–866. [КУП акысыз макала] [PubMed]
  22. Кертис JT, Stowe JR, коомдук жана өкмөттүк эмес коомдук момолойлордун менен striatal тинейджер системасына особалардын ара Wang З. өзгөрүү таасири. Neuroscience. 2003; 118: 1165-1173. [PubMed]
  23. Кертис JT, Лю Y, Aragona BJ, Wang Z. Допамин жана моногамия. Brain Res. 2006;1126:76–90. [PubMed]
  24. Di Chiara G, Tanda G, Frau R, Carboni E. Амфетаминдин ядросунда допаминдин артыкчылыктуу бошотулушу жөнүндө: вертикалдуу имплантацияланган концентрдик диализдик изилдөөлөр менен алынган кошумча далилдер. Психофармакология (Берл.) 1993;112:398–402. [PubMed]
  25. Диас J, Levesque D, Lammers CH, Griffon N, Martres MP, Schwartz JC, Sokoloff P. келемиш мээдеги допамин D3 кабылдагычты билдирген нейрондордун Phenotypical мүнөздөмөсү. Неврология. 1995;65:731–745. [PubMed]
  26. Drevets WC, Gautier C, Price JC, Kupfer DJ, Kinahan PE, Grace AA, Price JL, Mathis CA. Адамдын вентралдык стриатумунда амфетамин менен шартталган дофаминдин бөлүнүп чыгышы эйфория менен байланыштуу. Биол. Психиатрия. 2001;49:81–96. [PubMed]
  27. Fattore L, Altea S, Fratta W. Баңгизатка көз карандылыкта жыныстык айырмачылыктар: жаныбарларды жана адамдарды изилдөө. Womens Health (Lond. Engl.) 2008;4:51–65. [PubMed]
  28. Гингрич B, Liu Y, C Cascio, Wang Z, арал TR. ядросу accumbens менен тинейджер D2 кабылдагычтар аял тала момолойлордун коомдук тиркөө үчүн абдан маанилүү (Microtus ochrogaster) Жүрүм-туруму. Neurosci. 2000;114:173–183. [PubMed]
  29. Генри DJ, White FJ. Кокаинди кайталап башкаруу келемиш ядросунун ичиндеги D1 допаминдик рецепторлордун сезгичтигинин туруктуу жогорулашына алып келет. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1991;258:882–890. [PubMed]
  30. Генри DJ, White FJ. Кокаинге карата жүрүм-турумдук сезгичтиктин туруктуулугу ядронун аккумбенс нейрондорунун бөгөт коюусун күчөткөн. J. Neurosci. 1995;15:6287–6299. [PubMed]
  31. Генри DJ, Greene MA, White FJ. Mesoaccumbens допамин системасында кокаиндин Electrophysiological таасирлери: кайталап башкаруу. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1989;251:833–839. [PubMed]
  32. Ху XT, Koeltzow TE, Купер DC, Робертсон GS, Ак FJ, Vezina P. Кайталануучу ventral tegmental аймак амфетамин башкаруу ядронун аккумбенс допамин D1 кабылдагыч сигнал өзгөртөт. Синапс. 2002;45:159–170. [PubMed]
  33. Ху М, Кромбаг HS, Робинсон Т.Э., Беккер Дж.Б. Кокаинди өз алдынча колдонууга ыкташуудагы жыныстык айырмачылыктардын биологиялык негиздери. Нейропсихофармакология. 2004;29:81–85. [PubMed]
  34. Insel TR, Preston S, Winslow JT. Моногамдуу эркекте жупташуу: жүрүм-турумдук кесепеттери. Physiol. Behav. 1995;57:615–627. [PubMed]
  35. Келли АЕ, Берридж КС. Табигый сыйлыктардын неврологиясы: көз карандылыкты пайда кылуучу дарыларга тиешелүүлүгү. J. Neurosci. 2002;22:3306–3311. [PubMed]
  36. Liu Y, Wang ZX. Ядро кылдат тинейджер аял тала момолойлордун менен жуп байланыш түзүүгө жөнгө салуу боюнча өз ара accumbens. Neuroscience. 2003; 121: 537-544. [PubMed]
  37. Liu Y, Aragona BJ, Young KA, Dietz DM, Kabbaj M, Mazei-Robison M, Nestler EJ, Wang Z. Nucleus accumbens допамин моногамдуу кемирүүчүлөрдүн түрүндөгү социалдык байланыштын амфетамин менен шартталган начарлашына ортомчулук кылат. Proc.Natl. Acad.Sci.USA 2010;107:1217–1222. [КУП акысыз макала] [PubMed]
  38. Линч WJ. Жыныстык айырмачылыктар дары-дармекти өз алдынча башкарууга аялуу. Exp. Клин. Психофармакол. 2006;14:34–41. [PubMed]
  39. Линч ВДЖ, Кэрролл ME. Келемиштерде өз алдынча кокаин менен героинди венага алууда жыныстык айырмачылыктар. Психофармакология (Берл.) 1999;144:77–82. [PubMed]
  40. Mercuri NB, Calabresi P, Bernardi G. Dopamine жана dopaminergic дарылардын electrophysiological иш-аракеттери нейрондор боюнча substantia nigra pars compacta жана ventral tegmental аймак. Life Sci. 1992;51:711–718. [PubMed]
  41. Mercuri NB, Saiardi A, Bonci A, Picetti R, Calabresi P, Бернарди G, Borrelli E. допамин D2 кабылдагыч жетишсиз чычкандардын dopaminergic нейрондорунун autoreceptor милдетин жоготуу. Неврология. 1997;79:323–327. [PubMed]
  42. Missale C, Нэш SR, Robinson SW, Jaber M, Caron MG. Допамин кабылдагычтары: структурадан функцияга. Physiol. Rev. 1998;78:189–225. [PubMed]
  43. Нараянан NS, Guarnieri DJ, DiLeone RJ. Метаболикалык гормондор, допамин схемалары жана тамактануу. Фронт. Нейроэндокринол. 2010;31:104–112. [КУП акысыз макала] [PubMed]
  44. Nesse RM, Berridge KC. Эволюциялык көз карашта психоактивдүү дары колдонуу. Илим. 1997;278:63–66. [PubMed]
  45. Nestler EJ. наркомания ооруулары молекулярдык механизмдери. Neuropharmacology. 2004; 47 (тобу 1): 24-32. [PubMed]
  46. Nestler EJ. Көз карандылыктын жалпы молекулярдык жолу барбы? Нат. Neurosci. 2005;8:1445–1449. [PubMed]
  47. Oades RD, Halliday GM. Ventral tegmental (A10) системасы: нейробиология. 1. Анатомия жана байланыш. Brain Res. 1987;434:117–165. [PubMed]
  48. Palmiter RD. Допамин тамактануу жүрүм-турумунун физиологиялык жактан тиешелүү ортомчусубу? Trends Neurosci. 2007;30:375–381. [PubMed]
  49. Panksepp J, Knutson B, Burgdorf J. Көз карандылыкта мээнин эмоционалдык системаларынын ролу: нейро-эволюциялык көз караш жана жаңы "өзүн-өзү отчет" жаныбар модели. Наркомания. 2002;97:459–469. [PubMed]
  50. Paxinos G, Watson C. Стереотаксикалык координаттардагы келемиш мээ. Academic Press; Сан Диего, CA: 1998.
  51. Пирс RC, Kalivas PW. Амфетамин сымал психостимуляторлорго жүрүм-турумдун сезгичтигинин схемалык модели. Brain Res. Brain Res. Rev. 1997;25:192–216. [PubMed]
  52. Richfield EK, Пенни JB, Жаш AB. чычкан борбордук толкунданып системасында тинейджер D1 жана D2 кабылдагыч арасындагы анатомиялык жана төп мамлекеттик салыштыруу. Neuroscience. 1989; 30: 767-777. [PubMed]
  53. Richtand NM, Kelsoe JR, Kuczenski R, Segal DS. Амфетамин менен дарыланган келемиштерде жүрүм-турумдук сенсибилизациянын өнүгүшү менен байланышкан допамин D1 жана D2 рецепторлорунун мРНК деңгээлин аныктоо. Нейрохим. Int. 1997;31:131–137. [PubMed]
  54. Робертс Д.С., Беннетт С.А., Викерс Дж. Эструс цикли келемиштерде прогрессивдүү катышы боюнча кокаинди өз алдынча башкарууга таасир этет. Психофармакология (Берл.) 1989;98:408–411. [PubMed]
  55. Робинсон TE, Бекер JB. өнөкөт amphetamine башкаруу өндүрүлгөн мээнин жана жүрүм-карыткан өзгөрүүлөр: amphetamine психоздун жаныбарлардын моделдеринин талдоо жана баа берүү. Brain Рез. 1986; 396: 157-198. [PubMed]
  56. Робинсон TE, Kolb B. Амфетамин менен мурунку тажрыйба тарабынан өндүрүлгөн ядро ​​аккумбенсиндеги жана префронталдык кортекс нейрондорундагы туруктуу структуралык өзгөрүүлөр. J. Neurosci. 1997;17:8491–8497. [PubMed]
  57. Робинсон TE, Jurson PA, Беннетт JA, Bentgen KM. ventral striatum менен тинейджер neurotransmission туруктуу маа- (ядро accumbens) (+) менен мурунку тажрыйбасы менен өндүрүлгөн - amphetamine: эркин көчүп келемиштер бир microdialysis изилдөө. Brain Рез. 1988; 462: 211-222. [PubMed]
  58. Робинсон TE, Gorny G, Mitton E, Kolb B. Кокаин өз алдынча башкаруу ядросу жана neocortex-жылы dendrites жана dendritic омурткалардын морфологиясын өзгөртөт. Синапс. 2001;39:257–266. [PubMed]
  59. Рот МЕН, Кэррол МЕН. IV метамфетаминди алууда жыныстык айырмачылыктар жана келемиштерде прогрессивдүү катышы боюнча кийинки тейлөө. Психофармакология (Берл.) 2004;172:443–449. [PubMed]
  60. Rouge-Pont F, Usiello A, Benoit-Marand M, Gonon F, Piazza PV, Borrelli E. Морфин жана кокаин менен шартталган клеткадан тышкаркы допаминдин өзгөрүшү: D2 кабылдагычтар тарабынан маанилүү көзөмөл. J. Neurosci. 2002;22:3293–3301. [PubMed]
  61. Сора I, Fujiwara Y, Tomita H, Ishizu H, Akiyama K, Otsuki S, Yamamura HI. Галоперидол же метамфетамин менен дарылоонун келемиштердин мээсинде эки допамин D2 рецептор изоформасынын мРНК деңгээлине таасиринин жоктугу. Jpn. J. Психиатрия Нейрол. 1992;46:967–973. [PubMed]
  62. Тибери М, Джарви КР, Сильвия С, Фалардо П, Гингрих Ж.А., Годинот Н, Бертран Л, Янг-Фенг ТЛ, Фремо RT, кенже, Карон М.Г. Клондоштуруу, молекулярдык мүнөздөмө жана экинчи D1 допамин рецепторунун субтипин коддоочу гендин хромосомдук дайындоосу: D1A рецепторуна салыштырмалуу келемиштердин мээсинде дифференциалдык экспрессия үлгүсү. Прок. Natl. Акад. Sci. АКШ 1991;88:7491–7495. [КУП акысыз макала] [PubMed]
  63. Usiello A, Baik JH, Rouge-Pont F, Picetti R, Dierich A, LeMeur M, Piazza PV, Borrelli E. Допамин D2 кабылдагычтардын эки изоформасынын айырмаланган милдеттери. Жаратылыш. 2000;408:199–203. [PubMed]
  64. Wang Z, Ю G, C Cascio, Liu Y, Гингрич B, арал TR. аял тала момолойлордун өнөктөш артыкчылык тинейджер D2 кабылдагыч-кыйыр жөнгө салуу (Microtus ochrogaster): жуп байланыш механизми? Behav. Neurosci. 1999;113:602–611. [PubMed]
  65. Weiner DM, Levey AI, Sunahara RK, Niznik HB, O'Dowd BF, Seeman P, Brann MR. келемиш мээсинде D1 жана D2 допамин кабылдагыч mRNA. Прок. Natl. Акад. Sci. АКШ 1991;88:1859–1863. [КУП акысыз макала] [PubMed]
  66. White FJ, Kalivas PW. Амфетамин жана кокаинге көз карандылык менен алектенген нейроадаптациялар. Алкоголдук ичимдиктерге көз каранды. 1998;51:141–153. [PubMed]
  67. White FJ, Wang RY. A10 допамин нейрондору: допамин агонисттеринин атуу ылдамдыгын жана сезгичтигин аныктоодо авторецепторлордун ролу. Life Sci. 1984a;34:1161–1170. [PubMed]
  68. White FJ, Wang RY. Чычкан вентралдык тегменталдык аймакта допамин авторецепторлорунун фармакологиялык мүнөздөмөсү: микроионтофоретикалык изилдөөлөр. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1984b;231:275–280. [PubMed]
  69. Картрайт JR, Катания KC, Картер CS. аял тала момолойлордун өнөктөш артыкчылык өнүктүрүү (Microtus ochrogaster): социалдык жана сексуалдык тажрыйбанын ролу. Хорм. Behav. 1992;26:339–349. [PubMed]
  70. Winslow JT, Hastings N, Carter CS, Harbaugh CR, Insel TR. моногамдуу талаа чычкандарында жуп байланышта борбордук вазопрессиндин ролу. Жаратылыш. 1993;365:545–548. [PubMed]
  71. Жаш KA, Gobrogge KL, Liu Y, Wang Z. Жуп байланыштын нейробиологиясы: социалдык моногамдык кемирүүчүлөрдүн түшүнүктөрү. Фронт. Нейроэндокринол. 2010 doi:10.1016/j.yfrne.2010.07.006. [КУП акысыз макала] [PubMed]
  72. Жаш KA, Gobrogge KL, Wang ZX. Кыянаттык жана коомдук жүрүм-турум дары ортосундагы өз ара жөнгө салууда mesocorticolimbic допаминдин ролу. Neurosci. Biobehav. Rev. 2011;35:498–515. [КУП акысыз макала] [PubMed]
  73. Zahm DS. Адаптивдүү жооп кайтаруунун кээ бир субкортикалдык субстраттарына интегративдик нейроанатомиялык көз караш. Neurosci. Biobehav. Аян 2000;24:85–105. [PubMed]
  74. Zhou JY, Mo ZX, Zhou SW. Амфетамин менен шартталган жерде артыкчылыктуу келемиш мээсинде ринхофиллиндин борбордук нейротрансмиттер деңгээлине тийгизген таасири. Fitoterapia. 2010;81(7):844–848. [PubMed]