Dopamine dia manome hery ny valim-panadihadiana amin'ny alalan'ny fampiroboroboana ny fientanentanana voavolavola ao amin'ny nucleus accumbens (2014)

Fampidirana

Ny dopamine mipoitra avy amin'ny faritra vegmental (VTA) mankany amin'ny NAc dia singa iray tena ilaina amin'ny lozam-pifanakalozana izay mampiroborobo ny fitadiavana fitadiavana karama (Nicola, 2007). Raha mihena tsikelikely ny asan'ny dopamine NAc, dia mety tsy dia mazoto miasa ny biby raha te hahazo valisoa (Salamone sy Correa, 2012) ary matetika tsy mamaly ny valin'ny valim-bavaka (Di Ciano et al., 2001; Yun et al., 2004; Nicola, 2007, 2010; Saunders sy Robinson, 2012). Ireo tsy fahampiana ireo dia vokatry ny faharetan'ny singa iray amin'ny karama mikajy: mitombo ny fihenan'ny fanombohana ny fitondran-tena, fa ny haingam-panatanjahantena, ny fahafahana mahita ny tanjona ary ny fitondran-tena ilaina mba hahazoana valisoa, ary ny fahaiza-manao mandoa ny valisoa dia tsy misy fiantraikany (Nicola, 2010). Ny Dopamine dia tokony hampiroborobo ny fomba fiasa amin'ny fiantraikany amin'ny asan'ny necron NAc, saingy mbola tsy mazava tsara ny toetran'io hery io. Ny habetsaky ny necron NAc dia mientanentana na manelingelina ny valin'ny valim-panoherana (Nicola et al., 2004a; Roitman et al., 2005; Ambroggi et al., 2008, 2011; McGinty et al., 2013), ary ny fanentanana dia manomboka alohan'ny fanombohana ny fihetsika manjavozavo ary mety haminavina ny tsy fahampiana hanombohana ny fikomiana (McGinty et al., 2013). Noho izany, ity hetsika ity dia manana ny toetra takiana amin'ny mari-pamantarana miankina amin'ny dopamine izay mampiroborobo ny fomba fiasa cued, saingy tsy fantatra raha manao izany.

Neurons amin'ny rafitra roa izay mandefa afferent glutamatergic amin'ny NAc, ny BLA ary ny dorsal medial PFC (Brog et al., 1993), dia mientanentana amin'ny faminaniany valisoa (Schoenbaum et al., 1998; Ambroggi et al., 2008), ary ny tsy fahavitrihana azo averina amin'ny iray amin'ireo rafitra ireo (Ambroggi et al., 2008; Ishikawa et al., 2008) na ny VTA (Yun et al., 2004) mampihena ny halehiben'ny fientanam-po mipoitra ao amin'ny NAc. Ireo fanamarihana ireo dia manoro hevitra fa ny fientanentanana NAc cue-evoked dia entin'ny fampidirana glutamatergic, fa raha tsy misy NAc dopamine, na dia ireo fampidiran-dresaka mahery vaika ireo aza dia tsy ampy hampiakatra ny fitomboan'ny tifitra. Na izany aza, ity fehin-kevitra ity dia manjavozavo. Maro ny neurons NAc no voasakan'ny cues (Nicola et al., 2004a; Ambroggi et al., 2011) ary tsy fantatra raha ny excitation na ny inhibitions no zava-dehibe kokoa amin'ny fampahavitrihana ny fitondran-tena. Fanampin'izany, ny tsy fihetsehan'ny VTA dia mety hampihena ny fientanentanana manavakavaka (DS) -evoked amin'ny alàlan'ny mekanika tsy miankina amin'ny dopamine maromaro: ny fihenan'ny cue encoding ao amin'ny BLA sy PFC, izay mahazo vinavina avy amin'ny VTA (Swanson, 1982); mampihena ny tifitra ny neurons GABAergic VTA izay mikendry ny NAc (Van Bockstaele sy Pickel, 1995); na fihenan'ny famoahana glutamate avy amin'ny neurons dopaminergika (Stuber et al., 2010). Farany, satria ny tsy fihetsehan'ny VTA dia mampihena tsy ny fitifiran'ny NAc DS-evoked ihany, fa koa ny fitondran-tena DS-evoked (Yun et al., 2004), Ny fientanentanana DS dia mety ho faharoa fa tsy fepetra ilaina amin'ny hetsika mikendry tanjona.

Mba hitsapana mivantana ny anjara andraikitry ny NAc dopamine amin'ny tifitra fitifirana cue-evoked, dia nanamboatra probe vaovao izahay mba hampiasaina amin'ny fitondran-tena ho an'ny biby mpikiky: andian-tsarimihetsika boribory manodidina ny cannula tsindrona afovoany, izay ahafahan'ny firaketana an-tsoratra ny hetsika mitifitra unit sy ny fampidirana ireo antagonista mpandray dopamine. ao amin'ny habaka extracellular manodidina ny neurons voarakitra (du Hoffmann et al., 2011). Ity fandaharana ity dia ahafahantsika mametraka fifandraisana misy eo amin'ny fampahavitrihana ny dopamine receptor, ny tifitra neuronal NAc, ary ny fitondran-tena mitady valisoa: raha manakana ny famantarana sy ny fanombohana ny fomba fiasa ny fanakanana ny NAc dopamine receptors, dia hanome porofo matanjaka fa miankina amin'ny valin'ny neuronal izany. dopamine endogenous ary io famantarana io dia ilaina amin'ny fitondran-tena manatona.

Fitaovana sy fomba fiasa

Animals.

Voalavo Long–Evan ​​lahy dimy ambin'ny folo (275–300 g rehefa tonga) no azo avy amin'ny Reniranon'i Charles ary nipetraka irery. Herinandro taorian'ny nahatongavan'izy ireo dia nokarakaraina nandritra ny minitra maromaro isan'andro nandritra ny 3 d ny voalavo mba hanazatra azy ireo amin'ny mpanandrana. Aorian'ny fahazarana, ny voalavo dia napetraka amin'ny sakafo voafetra 13 g ny voalavo voalavo isan'andro. Ad libitum nomena sakafo nandritra ny 7 andro taorian'ny fandidiana, ary avy eo dia naverina tamin'ny sakafo voarara ny biby. Ny fomba fiasa biby dia nifanaraka tamin'ny National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals ary nankatoavin'ny Institutional Animal Care and Use Committee of Albert Einstein College of Medicine.

Efitrano fiasana.

Ny andrana rehetra momba ny fitondran-tena sy ny fiofanana momba ny fitondran-tena dia natao tao amin'ny efitranon'ny Plexiglas namboarina manokana (40 sm toradroa, 60 sm ny haavony). Tao anatin'ireo kabinetra metaly izay natao ho cages Faraday ireo; Ny kabinetra dia nasiana foam acoustic ary ny feo fotsy dia nilalao tsy tapaka tamin'ny alàlan'ny fanamafisam-peo voatokana mba hampihenana ny fihainoana ny tabataba ivelany ao anaty efitrano. Ny efitrano fiasana dia nasiana fitoeran-tsoavaly teo amin'ny rindrina iray misy fanenitra azo averina teo amin'ny andaniny roa. Nisy photobeam teo anoloan'ny fitoeran'entana nampiasaina handrefesana ny fotoana fidirana sy fivoahana. Ny famahana ara-potoana ny rafitra fanaraha-maso ny fitondran-tena (Med Associates) dia 1 ms.

DS asa.

Ny biby dia nampiofanina tamin'ny asa DS nanaraka ny fomba fiasa mitovy amin'ny nampiasaina teo aloha (Nicola et al., 2004a,b; Ambroggi et al., 2008, 2011; Nicola, 2010; McGinty et al., 2013). Ny famantarana roa dia naseho iray isaky ny mandeha, na DS vinavina valisoa na fanentanana tsy miandany (NS). Ny feon'ny fandrenesana dia misy feon-kira (izay mandeha amin'ny hafainganam-pandeha 4 ka hatramin'ny 8 kHz mihoatra ny 400 ms) ary feo miato (tononina 6 kHz mandeha amin'ny 40 ms, miala amin'ny 50 ms); Ny faneken'ny tonony manokana ho an'ny DS na NS dia natao kisendrasendra manerana ny voalavo. Intertrial intervals (ITIs) dia nofantenana kisendrasendra avy amin'ny truncated exponential distribution miaraka amin'ny mean 30 s sy ambony indrindra 150 s. Ny NS dia naseho nandritra ny 10 s; Ny fanerena lever nandritra ny NS dia voarakitra fa tsy nisy vokany voarindra. Ny lever "mavitrika" sy "tsy mavitrika" dia nomena kisendrasendra ho an'ny lever havia sy havanana ho an'ny voalavo tsirairay tany am-piandohan'ny fiofanana ary tsy niova taty aoriana. Ny valin'ny lever tamin'ny lever mavitrika nandritra ny DS dia namarana ny cue, ary ny fidirana voalohany amin'ny fitoeran-javatra manaraka dia nahatonga ny fanomezana valisoa sucrose 10% tao anaty lavadrano iray tao amin'ny vata. Ny fampisehoana DS izay tsy namaly ny biby dia tapaka taorian'ny 10 s. Ny valiny nandritra ny ITI (eo anelanelan'ny fampisehoana an-tsarimihetsika) sy ny valinteny momba ny lever tsy mavitrika dia voarakitra fa tsy nitondra valisoa. Ny biby dia nampiofanina tamin'ny asa DS mandra-pamoakan'izy ireo> 80% amin'ny DSs sy <20% NSs amin'ny fotoam-piofanana 2 h.

Karazana microelectrode cannulated.

Taorian'ny fanofanana voalohany dia nampidirina tamin'ny microarrays cannulated ny voalavo misy electrodes microwire tungstène valo manodidina ny cannula mpitari-dalana microinjection afovoany. Namboarina sy napetaka tamin'ny microdrives namboarina araka ny voalaza teo aloha (du Hoffmann et al., 2011). Ny fihodinana feno amin'ny fihodin'ny famantaranandro dia nanetsika ny electrodes sy ny cannula ho toy ny singa ventrally 300 μm (tsy misy fihodinan'ny probes), ahafahantsika mirakitra an-tsoratra avy amin'ny mponina tsy manam-paharoa amin'ny neurons ao amin'ny biby iray ihany.

Mba hametahana ny arrays cannulated dia nomanina ho an'ny fandidiana ny voalavo ary napetraka tao anaty fitaovana stereotaxic araka ny voalaza teo aloha (du Hoffmann et al., 2011; McGinty et al., 2013). Ny fanenjehana dia nampidirina sy notazonina tamin'ny isoflurane (0.5-3%). Ny biby dia nahazo antibiotika (Baytril) avy hatrany alohan'ny fandidiana sy 24 ora aorian'ny fandidiana. Ny arrays cannulated dia napetraka amin'ny bilaterally ao amin'ny dorsal NAc core (1.4 mm aloha sy 1.5 mm lateral avy amin'ny bregma, ary 6.5 mm ventral avy amin'ny karandoha). Ny electrodes sy ny microdrives dia napetraka tao amin'ny karandohany miaraka amin'ny visy taolana sy ny akrilika nify, ary nampidirina tao amin'ny cannulae mpitari-dalana ny obturators tariby, ka ny faran'ny obturators dia nifandona tamin'ny faran'ny cannulae mpitari-dalana. Taorian'ny fandidiana, ny hodi-doha dia notsaboina tamin'ny Neo-Predef mba hisorohana ny aretina ary ny biby dia navela 1 herinandro fanarenana alohan'ny handehanana amin'ny fanandramana. Ho an'ny analgesia taorian'ny fandidiana, nomena ny biby 10 mg / kg ny zava-mahadomelina anti-inflammatoire nonsteroidal ketoprofen.

Zava-mahadomelina.

SCH23390 sy raclopride dia novidina tamin'ny Sigma. Amin'ny andro fitsapana, ny zava-mahadomelina dia voaomana vao haingana amin'ny famongorana azy ireo amin'ny saline sterile 0.9%. Ny zava-mahadomelina dia nomena tamin'ny dosie 1.1 μg SCH233390 amin'ny saline 0.55 μl isaky ny lafiny ary 6.4 μg raclopride amin'ny saline 0.8 μl isaky ny lafiny. SCH233390 sy raclopride dia nampidirina nandritra ny 12 sy 17.5 min, tsirairay avy. Tao anatin'ny fanandramana mpanamory, dia hitanay fa ny fampidirana raclopride amin'ny roa tonta maharitra 12 min dia misy fiantraikany lehibe nefa mandalo amin'ny tahan'ny valin'ny DS. Noho izany, mba hanitarana ny vokatra dia nampitombo ny faharetan'ny fampidirana raclopride izahay ka ny mombamomba ny ara-nofo amin'ny fiantraikany ara-panafody dia mitovy amin'ny an'ny SCH23390. Iray ihany ny tsindrona bilateral na unilateral natao isaky ny fivoriana fandraisam-peo (fivoriana iray isan'andro). Ny biby rehetra dia nahazo tsindrona antagonista tokana, fara fahakeliny, ary tsindrona mpanohitra iray (na maromaro). Nandritra ny andrana antagonista unilateral sasany, dia nampiditra saline izahay ho toy ny fanaraha-maso fiara mifanohitra amin'ny hemisphere nahazo antagonista.

Microinjection sy firaketana an-tsoratra.

Ny fitaovana ho an'ny microinjection sy firaketana simultaneous dia efa nofaritana teo aloha (du Hoffmann et al., 2011). Ny tariby fandraketana avy any amin'ny lampihazo dia nifarana tamin'ny commutator elektrika 24-channel miaraka amin'ny lavaka afovoany (Moog), izay nampita ireo famantarana tamin'ny rafitra firaketana electrophysiological. Ny syringe roa dia napetraka tao anaty paompy syringe tokana hita teo ivelan'ny efitrano; Ny tsipika ranon-javatra avy amin'ny syringe dia nitarika ho amin'ny fihodinan'ny ranon-tsolika roa (Instech Laboratories) napetraka eo ambonin'ny commutator. Nidina avy teo amin'ny swivel tamin'ny lavaka fanasan'ny commutator ny tsipika misy ranon-javatra, nihazakazaka nanaraka ny tariby firaketana, ary nifarana tamin'ny microinjector 33 gauge roa.

Talohan'ny fotoam-pandraiketana dia nofenoina ranon-drongony ireo microinjector ary natsofoka tao amin'ny cannulae mpitari-dalana ho an'ny biby. Ny toro-hevitra microinjector dia nitarina 0.5 mm mihoatra ny cannulae mpitari-dalana ka ny tendron'ny microinjector dia eo ambanin'ny tendron'ny electrode ary ~ 670 μm avy eo afovoan'ny electrode tsirairay. Alohan'ny hamenoana ny zava-mahadomelina, dia feno menaka mineraly ny tsipika ranoka sy microinjector, ary voamarika ny haavon'ny interface misy menaka mba hanamorana. post hoc fanamafisana fa natsindrona ilay fanafody. Farany, nifamatotra tamin'ny biby ny lohan-dohany ary niraikitra mafy tamin'ny tariby firaketana ny tsipika misy ranon-javatra mba hitazonana ireo microinjector eo amin'ny toerany mandritra ny faharetan'ny fanandramana. Ny biby voaomana amin'izany fomba izany dia navela hanao ny asa DS mandritra ny fe-potoana farafahakeliny 45 min, izay nandrakitra ny hetsika neural; avy eo, ny paompy syringe dia nalefa lavitra mba hampidirana ny fanafody ao amin'ny atidoha. Ny tsindrona dia tsy nitaky ny fikolokoloana ny biby na ny fanokafana ny varavaran'ny efitrano, ary nitohy tsy tapaka nandritra ny vanim-potoanan'ny baseline, infusion, ary postinfusion ny fotoam-pitondratena.

Ny mari-pandrefesana neural dia voarakitra miaraka amin'ny fanamafisam-peo amin'ny lohany (fahazoan'ny firaisankina), nohamafisina in-10,000, ary natao nomerika tamin'ny alàlan'ny fitaovana sy rindrambaiko ara-barotra (Plexon). Noraketinay avy amin'ny neurons 379 tamin'ny fivoriana firaketana / tsindrona 38 tamin'ny voalavo 15. Amin'ireo fotoam-pivoriana 38, ny 7 dia nariana noho ny fitondran-tena ratsy nandritra ny vanim-potoanan'ny preinjection na noho ny tsy fisian'ny neurons azo atokisana. Noho izany, ny famakafakana neuraly dia nifantoka tamin'ny fivoriana firaketana / tsindrona 31 izay noraketinay avy amin'ny neurons mitoka-monina 322 amin'ny voalavo 12. Aorian'ny fotoam-pandraiketana / tsindrona tsirairay, ny microdrive mitondra ny array electrode dia nandroso ~ 150 μm (antsasaky ny fihodinan'ny microdrive screw) mba hamindra ny electrodes ventrally mba handrakitra avy amin'ny mponina neurons vaovao. Raha vitsy (na tsia) ny neurons dia voamarika, dia nandroso isan'andro ny array mandra-pahitana ny neurons.

Analysis.

Ny angon-drakitra dia nozaraina ho vanim-potoana mialoha, postinjection, ary fotoana fanarenana, izay voafaritra, tsirairay avy, toy ny 45 min alohan'ny fampidirana ny antagonista, ny 40 min manomboka amin'ny fiafaran'ny tsindrona, ary ny 33 min (2000 s) farany amin'ny isaky ny fivoriana (izay naharitra, amin'ny fitambarany, 2-3 h). Ny fe-potoana aorian'ny tsindrona dia mifanitsy amin'ny fotoana ananan'ny zava-mahadomelina ny fiantraikany lehibe indrindra amin'ny fitondran-tena rehefa tsindrona amin'ny lafiny roa (Aviavy. 1C).

 

Figure 1.

Ny fiantraikan'ny antagonista receptor dopamine amin'ny fitondran-tena DS-cued. A, Schematic ny asa DS. B, Mediana (teboka) ary quartiles afovoany (tsipika mitsangana) an'ny DS (boasary) sy NS (manga) ny tahan'ny valiny amin'ny vanim-potoana mialoha ny fampidirana ho an'ny fotoam-pihetsiketsehana rehetra ...

Ny fitokanana singa tokana dia natao an-tserasera niaraka tamin'ny Offline Sorter (Plexon) tamin'ny fampiasana famakafakana singa fototra. Ireo singa manana onjam-peo voafaritra tsara (> 100 μV) izay tsy mitovy amin'ny haavon'ny tabataba (<20-50 μV) ihany no nampidirina tamin'ny famakafakana manaraka. Ny fizarana interspike interspike sy ny cross-correlograms dia nampiasaina mba hiantohana fa ny singa tokana dia mitoka-monina tsara amin'ny tsirairay sy amin'ny tabataba ambadika (rindrambaiko Neural Explorer; Nex-Tech). Ny mari-pamantarana momba ny spike voamarina dia nodinihina tamin'ny fomba fanao mahazatra ao amin'ny tontolo rindrambaiko R. Ny histograma fotoana peristimulus naorina manodidina ny DS sy NS, ao anaty dabam-potoana 50 ms, dia nampiasaina mba hamaritana sy hamantarana ny fientanam-po mipoitra amin'ny Sary 2A, , 3,3, , 4,4, , 55A, , 66A, , 77A, , 88A, ary and1010A-C. Mba hamaritana raha misy neuron iray nampiseho fientanentanana DS-evoked manan-danja, dia nokajiana ho an'ny vanim-potoanan'ny 10 s ny fizarana mety ho an'ny Poisson alohan'ny cue tsirairay. Ny neuron iray dia noheverina ho DS faly raha toa ka mampiseho ny isan'ny spike eo ambonin'ny elanelan'ny fahatokisana 99% ambony amin'ny fizarana ny taham-pifamoivoizana fototra amin'ny iray na maromaro 50 ms eo anelanelan'ny 50 sy 200 ms aorian'ny fanombohana cue. Ho an'ny neurons manana fientanam-po DS-evoked manan-danja amin'ny vanim-potoanan'ny preinjection, ny salan'isan'ny tifitra amin'ny 50 ms bins fotoana mihidy amin'ny DS sy ny NS dia azo isaky ny vanim-potoana isaky ny fivoriana, ary ny salan'isa sy median (Aviavy. 2C-E, , 55A, , 66A, , 77A, , 88A, , 1010B,C) nampitahaina ny tahan'ny tifitra manerana ny neurons. Satria ny neurons miaraka amin'ny fientanentanana NS azo tsapain-tanana dia saika mientanentana ihany koa amin'ny DS [tsy aseho, fa notaterina teo aloha (Ambroggi et al., 2011)], dia nandinika ny valin'ny NS ho an'ny neurons rehetra misy valiny DS manan-danja izahay. Raha tsy misy fanamarihana manokana, ny fampitahana statistika rehetra dia ampiasaina ao anatin'ny-neuron Wilcoxon rank sum test.

 

Figure 2.

Ny fientanentanana DS-evoked dia maminavina ny fitondran-tena mitady valisoa manaraka ary mametaka akaiky ny lever. A, Ny salan'isa preinjection amin'ny ora-event histograms mifanaraka amin'ny fiandohan'ny DS (trace orange) na NS (trace manga) ho an'ny neurons 145 miaraka amin'ny excitatory manan-danja. ...

 

Figure 3.

Ny neurons ohatra dia mampiseho fa ny antagonista D1 sy D2 dia mampihena ny fientanentanana DS-evoked. Ny rasters sy ny histograma mifanitsy amin'izany dia mampiseho ny fandoroana ny neurons DS-excited efatra samihafa mifanaraka amin'ny fanombohan'ny DS. Ny angon-drakitra dia avy amin'ny fitsapana 40 farany mialoha ny fanombohana ...

 

Figure 4.

Ny fiantraikan'ny tsindrona antagonista dopamine bilateral amin'ny fientanam-po mipoitra cue dia maminavina ny fiantraikan'ny fitondran-tena amin'ny alàlan'ny fitsapana. A, C, Famakafakana andrana amin'ny fitsapam-pahaizana momba ny fiodinan'ny neuronalin'ny fatran'ny voalavo mba hahatongavana amin'ny lever ho an'ireo neurons mitovy aseho ...

 

Figure 5.

Ny fampahavitrihana ny mpikatroka D1 dia ilaina amin'ny fientanentanana DS-evoked. A, Ny histograma amin'ny vanim-potoanan'ny hetsika mifandraika amin'ny fanombohan'ny DS ho an'ny neurons miaraka amin'ny fientanentanana DS-evoked manan-danja amin'ny vanim-potoana mialoha ny fampidirana. Ny soritra sy ny rahona dia manondro ny salan'isa ± SEM ...

 

Figure 6.

Ny fampahavitrihana ny mpikatroka D2 dia ilaina amin'ny fientanentanana DS-evoked. A, Ny histograma amin'ny vanim-potoanan'ny hetsika mifandraika amin'ny fanombohan'ny DS ho an'ny neurons miaraka amin'ny fientanentanana DS-evoked manan-danja amin'ny vanim-potoana alohan'ny fampidirana raclopride. Ny fientanam-po nateraky ny DS dia nihena tamin'ny alàlan'ny bilateral ...

 

Figure 7.

Ny fampahavitrihana ny mpandray D1 dia tsy ilaina amin'ny fientanentanana NS-evoked. A, Ny histograma amin'ny vanim-potoanan'ny hetsika mifandraika amin'ny fanombohan'ny NS ho an'ny neurons miaraka amin'ny DS-evoked excitation manan-danja amin'ny vanim-potoana preinjection. Mifanindry tanteraka ireo mponina ireo, ka mitovy ny neurons ...

 

Figure 8.

Ny fampahavitrihana ny mpikatroka D2 dia ilaina amin'ny fientanentanana NS-evoked. A, Ny histograma amin'ny vanim-potoanan'ny hetsika mifandraika amin'ny fanombohan'ny NS ho an'ny neurons miaraka amin'ny DS-evoked excitation manan-danja amin'ny vanim-potoana preinjection. Nihena ny fientanam-pon'ny NS amin'ny toe-javatra bilateral sy ipsilateral ...

 

Figure 10.

Ny fampidirana saline dia tsy misy fiantraikany amin'ny DS- na NS-evoked excitation ary na D1 na D2 receptor activation dia tsy ilaina amin'ny fikojakojana ny tahan'ny tifitra fototra. A, Single DS-excited neuron voarakitra nandritra ny fampidirana saline. Mitovy amin'ireo ny fivoriambe ...

Fa Figure 4, dia nanapa-kevitra izahay raha ny fiantraikan'ny tsindrona antagonista roa tonta amin'ny fahatapahan-jiro hahatongavana amin'ny lever dia mifandray amin'ny vokatry ny antagonista amin'ny halehiben'ny DS-evoked excitation amin'ny andrana-by-trial fototra. Voalohany, kajy ny salan'isan'ny tifitra avy amin'ny 100 ka hatramin'ny 400 ms taorian'ny nanombohan'ny DS isaky ny fitsapana ho an'ny neurons voarakitra rehetra izay naneho fientanam-po DS lehibe talohan'ny fampidirana bilateral an'ny mpanohitra. Avy eo, ho an'ny neuron tsirairay dia kajy ny coefficient correlation an'ny Spearman mampitaha ny halehiben'ny fitsapana amin'ny fisedrana ny DS-evoked excitation sy ny faharetan'ny voalavo hahatratra ny lever amin'ny fitsapana mifanaraka amin'izany. Ireo fifandraisana ireo dia nalaina tao amin'ny histograms in Figure 4B,D. Ny fitsapana DS rehetra dia nampidirina tamin'ity fanadihadiana ity; raha toa ka tsy nanindry ny lever ilay biby, dia 10 s (ny halavan'ny famelabelarana ambony indrindra) no nomena tamin'io fitsarana io. Noraisinay ireo coefficient mifandraika amin'ny vanim-potoana mialoha ny fampidirana araka ny voafaritra etsy ambony; dia nanitatra ny fe-potoana postinjection tamin'ny 1000 s mba hahazoana santionany midadasika kokoa amin'ny latency amin'ny fitsapana izay namalian'ny biby taorian'ny fampidirana bilateral. Mba hanombanana ny maha-zava-dehibe ny fifandraisan'ny tsirairay, dia nampiasa asymptotic roa-tailed izahay t- approximation satria tena marina p tsy azo kajy ny sanda rehefa misy fifamatorana amin'ny angon-drakitra. Avy eo dia nampiasa fitsapana Wilcoxon izahay mba hampitahana ny mediana amin'ny fizarana ny coefficient correlation alohan'ny sy aorian'ny fampidirana antagonista.

Satria ny neurons NAc dia manana taham-pitifirana ambany ambany miaraka amin'ny fetra ambany kokoa amin'ny elanelan'ny fahatokisana matetika mirefy aotra, sarotra kokoa ny mamantatra sy manombatombana noho ny fientanam-po. Noho izany, ho fanampin'ny fomba voalaza etsy ambony, izay nampiasaina hamantarana ny fientanam-po, dia nampiasa ihany koa ny famakafakana ny toetran'ny fiasan'ny mpandray (ROC), fomba iray saro-pady kokoa, mba hamaritana ny mety hisian'ny tahan'ny tifitra ao anatin'ny dabam-potoana 50 ms manaraka aorian'ny fanombohana cue. hafa noho ny tahan'ny tifitra tao amin'ny 10 s precue baseline. Ity fanadihadiana ity dia natao manokana ho an'ny vanim-potoana mialoha sy aorian'ny tsindrona. Ho an'ny koba tsirairay, dia kajy ny faritra ambanin'ny curve ROC (AUC); Ny sandan'ny AUC amin'ny 0.5 dia manondro fa tsy misy fahasamihafana amin'ny tifitra mialoha, fa ny sanda manakaiky ny 0 na 1 kosa dia manondro ny mety hisian'ny fanerena na ny fientanentanana ny neuron. Mba hanehoana amin'ny fomba tsy miangatra ny hetsika neural postcue manerana ny mponina manontolo amin'ny neurons voarakitra, ny tahan'ny tifitra ary ny sandan'ny AUC dia kajy ho an'ny 50 ms bins; Mba hanamafisana ny angon-drakitra dia nandroso 10 ms ny daba ho an'ny kajy AUC nifanesy. Ny soatoavina AUC nalamina dia nosokajiana ho sarintany hafanana misy famaha 10 ms (miaraka amin'ny sanda tsirairay maneho ny AUC ao anatin'ny 50 ms manaraka) Sary 5B, , 66B, , 77B, , 88B, ary and1010D,E.

Manaraka izany dia nofaritanay raha toa ny sandan'ny AUC, kajy ao anaty dabam-bary 50 ms tsy mifanipaka, dia hita taratra ny fahasamihafana lehibe amin'ny tifitra. Ho an'ny koba tsirairay, dia namorona sanda AUC 10,000 bootstrapped voalohany izahay avy amin'ny fanodinkodinana kisendrasendra ny tahan'ny tifitra fototra mialoha sy ny tahan'ny tifitra ao amin'ny koba postcue mifanaraka amin'izany. Avy eo dia nanapa-kevitra izahay ny mety ho roa rambony fa ny tena sanda AUC dia nalaina avy amin'ny fizarana ny sanda bootstrapped; raha toa ka <0.05 ny mety ho azo, dia noheverinay fa tsy mitovy amin'ny tsipika fototra ny tifitra ao anaty koba. Farany, noisainay ny isan'ny neurônina misy taham-pitifirana ao anatin'ny daba tsirairay izay lehibe kokoa na latsaka noho ny fitifirana fototra mialoha, ary namolavola ireo soatoavina ireo ho ampahany amin'ny fitambaran'ny mponina (Aviavy. 5C, , 66C, , 77C, , 88C, , 99B,D, , 1010F,G).

 

Figure 9.

Ny hetsika neural mifanaraka amin'ny fidirana amin'ny valizy dia tsy misy fiantraikany amin'ny tsindrona antagonista ipsilateral na contralateral D1 na D2. A, C, ny sanda ROC AUC dia kajy sy aseho araka ny voalaza ao Figure 5B, afa-tsy hoe lava kokoa (200 ms) sy mirindra ny dabam-potoana ...

Mba hampitahana ny ampahany amin'ny neurons mientanentana na voasakana amin'ny vanim-potoana mialoha ny fampidirana sy ny postinjection dia nampiasa fomba fampihenana angon-drakitra izahay. Voalohany, kajy ny ampahany amin'ny 50 ms bins eo anelanelan'ny 0 sy 1 s taorian'ny nanombohan'ny cue izay nanehoan'ny neuron tsirairay ny fientanam-po na ny fanakanana. Avy eo, nampitahainay ireo ampahany ireo tamin'ny vanim-potoana mialoha sy taorian'ny tsindrona tamin'ny fitsapana Wilcoxon. Ny neurônina izay tsy naneho fiovana lehibe tao amin'ny daba rehetra tamin'ny vanim-potoanan'ny preinjection sy ny postinjection dia nesorina tamin'ity famakafakana ity ary tsy tafiditra tao anatin'ireo tetika mampiseho ny ampahan'ny medianina amin'ny daba manan-danja (tetika dot sy whisker eo amin'ny ilany havanana amin'ny ampahany tsirairay Aviavy. 5C, , 66C, , 77C, , 88C, , 1010F,G). Ity fomba fiasa ity dia nanafoana ny fiantraikan'ny mponina be dia be amin'ny neurons tsy misy fahasamihafana eo amin'ny hetsika eo amin'ny varavarankelin'ny post-DS sy ny baseline mialoha ny DS; Ity mponina ity dia tsy dia mahaliana loatra, kanefa dia manome sanda tsy misy dikany maro izay mitongilana ny isan'ny median'ny daba manan-danja mankany amin'ny 0 ary manjavozavo ny fihenana sy ny fitomboan'ny ampahany amin'ny daba lehibe aorian'ny fampidirana.

Ny famakafakana mitovy amin'izany dia natao ho an'ny fitifirana mifandraika amin'ny fanjifana nitranga taorian'ny nidirany tao amin'ny vata valisoa. Ny biby dia nirona nijanona tao amin'ny fitoeran-javatra nandritra ny> 5 s; Noho izany, mba hisamborana ireo elanelam-potoana somary lava ireo, dia asehontsika ny valiny amin'ny fampiasana baoritra 200 ms (Aviavy. 9). Ny varavarankelin'ny fotoana fampitahana ny ampahany amin'ny neurons izay nientanentana tamin'ny vanim-potoanan'ny preinjection sy postinjection dia avy amin'ny 0 ka hatramin'ny 1.5 s, fa avy amin'ny 0 ka hatramin'ny 5 s ho an'ny inhibitions; fikandrana fanadihadiana fohy kokoa no nampiasaina ho an'ny fientanam-po satria nirona ho mandalo kokoa izy ireo. Ny famakafakana ROC dia natao tao amin'ny Albert Einstein College of Medicine High Performance Computing Cluster tamin'ny fampiasana ny fonosana pROC ho an'ny R.

Mba hampitahana ny tahan'ny fitifirana "baseline" mitranga ivelan'ny hetsika asa, dia nampitahainay ny salan'isan'ny tifitra ao anaty daba 10 s alohan'ny DS preinjection sy postinjection an'ny mpanohitra. Ity fomba fiasa ity dia mitovy amin'ny santionany kisendrasendra ny tahan'ny tifitra fototra satria ny DS dia aseho amin'ny mety ho mitovy amin'ny fotoana rehetra mandritra ny fotoam-pivoriana. Ny neurons dia sokajiana ho mampiseho fientanam-po DS-evoked manan-danja (alohan'ny fampidirana zava-mahadomelina) na tsia, ary avy eo ny tahan'ny tifitra fototra amin'ny vanim-potoanan'ny preinjection sy ny postinjection dia nampitahaina tao anatin'ireo vondrona ireo miaraka amin'ny fitsapana Wilcoxon.Aviavy. 10H,I). Nanao tsipika tsipika ho an'ny neurons DS-excited ihany koa izahay ary nampitaha ny tehezan'ity tsipika ity amin'ny tsipika firaisankina (slope of 1).

Raha nisy fampitahana maromaro natao tamin'ny ampahany amin'ny angona avy amin'ny lohahevitra iray ihany (Aviavy. 2C-E, , 55A,C, , 66A,C, , 77A,C, , 88A,C, , 99B,D, , 1010B,C,F,G), p nasiam-panitsiana i Bonferroni; ie, ny p ny sanda dia nampitomboina tamin'ny isan'ny fampitahana natao. nahitsy p noheverina ho manan-danja ny soatoavina raha p < 0.05. Ny fanitsiana rehetra dia natao tamin'ny faktiora 3 afa-tsy ny Figure 2C-E, izay nisy 2 ny factor.

Video fanaraha-maso.

Ao anatin'ny andrana andrana, ny toeran'ny voalavo dia norefesina tamin'ny alalan'ny fakan-tsary ambony (30 frames/s) sy rafitra fanaraha-maso informatika (Cineplex; Plexon). Ny rafitra dia nanara-maso ny x ary y toeran'ny LED roa samy hafa loko mipetaka amin'ny sehatry ny lohan-drakitra. Araka ny voalaza teo aloha (McGinty et al., 2013), dia nanao kajy centroid izahay izay mamaritra ny teboka afovoany eo anelanelan'ny toeran'ny LED ho an'ny frame video tsirairay. Ny teboka angon-drakitra tsy hita hatramin'ny frame 10 nifandimby dia nofenoin'ny interpolation linear; amin'ny tranga tsy fahita firy izay tsy hita ny sary>10 dia nariana ny angon-drakitra. Ho an'ny frame video tsirairay, dia nanao kajy ny SD ny elanelana misy eo amin'ny toeran'ny centroid amin'io frame io sy ao anatin'ny fikandrana fotoana ± 200 ms. Ireo fandrefesana SD ireo no mandrafitra ny tondro locomotor (LI) ho an'io frame io amin'ny horonan-tsary. Ny LIs niova fo dia nozaraina bimodally, miaraka amin'ny tampony ambany mampiseho vanim-potoanan'ny hetsika kely na tsy misy ary ny tendrony ambony maneho ny fihetsehana (Drai et al., 2000). Avy eo dia mampifanaraka ny fiasa Gaussian roa izahay amin'ny fizarana LIs, ary mamaritra ny tokonam-baravaran'ny hetsika ho toy ny teboka izay nifanintona kely indrindra ireo fiasa ireo.

Ny hetsika dia nofaritana ho frame valo farafahakeliny miaraka amin'ny LI eo ambonin'ny tokonam-baravarana locomotor. Mba hamaritana ny fotoana nanombohan'ny hetsika dia noferanay ny fanadihadiana tamin'ny fitsapana DS izay mbola nanombohan'ny biby ny biby ary avy eo dia nikajy ny elanelam-potoana eo anelanelan'ny fanombohana cue sy ny frame voalohany izay nihoaran'ny LI ny tokonam-pandehanana (Aviavy. 1D-F, , 22B,D). Raha tsy nisy hetsika hita maso norefesina tamin'ny fitsarana, dia nofaritana ho> 10 s ny faharetan'ny fitsarana (ny halavan'ny fanolorana cue, Aviavy. 1D). Nisy valiny mitovy amin'izany rehefa nesorina tamin'ny fanadihadiana ny fitsapana toy izany (tsy naseho). Ny fizarana DS-cued dia natambatra tamin'ny voalavo ary ny mediana dia nampitahaina tamin'ny fitsapana Wilcoxon. Mba hamaritana ny fahatarana amin'ny hafainganam-pandeha ambony indrindra sy ny hafainganam-pandehan'ny hetsika DS-cued lever-directed, dia nampiasa ny fitsapana rehetra izay nifarana tamin'ny milina fanontam-pirinty izahay na dia nandeha tamin'ny fanombohan'ny DS aza ny voalavo (Aviavy. 1E,F).

Histology.

Ny biby dia notsaboina lalina tamin'ny Euthasol ary nodiovina tamin'ny saline sy formalin 4%. Ny ankehitriny mivantana (15 μA) dia nandalo ny electrodes tsirairay ao amin'ny arrays mandritra ny ~ 30 s mba hiteraka ratra. Nesorina ny ati-doha ary notehirizina tao anaty formaline mandra-pikarakara azy. Alohan'ny hitetika amin'ny cryostat, ny atidoha dia voaro amin'ny alàlan'ny fandrobohana ao anaty sucrose 30% mandritra ny andro maromaro. Ny fizarana (50 μm) dia nolokoana ho an'ny akora Nissl mba hijerena ny cannula sy electrode tracks ary lesions (Aviavy. 11).

 

Figure 11.

Fanarenana ara-tantara amin'ny toerana fanindronana antagonista. Ny sary dia mampiseho fizarana roa amin'ny ati-doha voalavo izay mahafaoka ny ankamaroan'ny haavon'ny anterior-posterior amin'ny NAc (0.8 mm-2.8 mm anteriora avy amin'ny bregma). Ny teboka mainty dia maneho ...

Results

Nasehon'ny voalavo misy stimuli auditory roa amin'ny elanelana miovaova amin'ny 30 s: DS sy NS (Aviavy. 1A; Nicola et al., 2004a,b; Ambroggi et al., 2008, 2011; McGinty et al., 2013). Nisy fanerena lever nandritra ny DS namarana ny cue, ary nisy tsiranoka sucrose natolotra rehefa niditra tao amin'ny fitoeran'ny valisoa; raha tsy namaly ny biby tao anatin'ny 10 s, dia tapaka ny cue raha tsy nisy ny fanomezana valisoa ary nanomboka ny elanelam-pitsarana. Ny valiny nandritra io elanelam-potoana io sy nandritra ny NS dia tsy nisy vokany voalamina. Ny NS dia 10 s foana. Biby voaofana, izay namaly ny ankamaroan'ny DS fa vitsy ny NS (Aviavy. 1B), dia nambolena tamin'ny arrays cannulated mikendry ny fototry NAc. Nandritra ny fanandramana, ny biby dia nanao ny asa voalohany nandritra ny vanim-potoana 45 minitra mialoha ny fotoana nanoratana ny hetsika neural NAc. Avy eo, ny D1 receptor antagonist SCH23390 na ny D2 / 3 antagonist raclopride dia nampidirina bilaterally na unilaterally tao amin'ny NAc; Ny biby dia nijanona tao amin'ny efitrano miaraka amin'ny fifanandrinana amin'ny asa mandritra ny fampidirana ary farafahakeliny 75 min aorian'izay.

Mifanaraka amin'ny fianarana teo aloha (Yun et al., 2004; Nicola, 2010), ny fampidirana bilateral an'ny antagonista ao amin'ny fototry NAc dia nampihena be ny isan'ny DS izay namaly ny biby (Aviavy. 1C, soritra miloko matroka) ary nampitombo ny fahatarana hanombohana ny fihetsehana araka ny fandrefesana amin'ny alàlan'ny fanaraha-maso an-dahatsary amin'ny ampahany amin'ny fotoam-pivoriana (Aviavy. 1D, dian-tongotra miloko volondavenona). Mifanohitra amin'izany kosa, tsy nisy fiantraikany tamin'ny tahan'ny valin'ny DS ny fampidirana unilateral mitovy amin'izany (Aviavy. 1C, soritra mivolombolamena), fahatarana hanombohana hetsika aorian'ny fanombohan'ny DS (Aviavy. 1D, soritra volomboasary manjavozavo), ary ny fahatarana hahatongavana amin'ny lever na ny hafainganam-pandehan'ny hetsika mandritra ny fanatonana lever (Aviavy. 1E,F). Ireo angon-drakitra momba ny fitondran-tena ireo dia mampiseho fa ny dopamine NAc ao amin'ny hemisphere tokana dia ampy hitazonana ny fitondran-tena na dia ny fanakanana ny D1 na D2 / 3 receptors amin'ny hemispheres roa aza dia manimba ny valiny. Ity dissociation ity dia manome tombony amin'ny fanandramana manan-danja, satria mamela antsika hitsapa ny fiantraikan'ny antagonista dopamine amin'ny asan'ny neural rehefa miharatsy ny fitondran-tena (tsindrona bilateral) ary rehefa tsy izany (tsindrona tokana), ka manapaka ny mety hisian'ny fifanjevoana izay misy fiovana hita. amin'ny hetsika neural aorian'ny fampidirana antagonista dia faharoa amin'ny fiovan'ny fitondran-tena.

Noraketinay avy amin'ny neurons 322 NAc tamin'ny fivoriana firaketana / tsindrona 31 tamin'ny voalavo 12. Manodidina ny 45% amin'ireo neurons voarakitra dia nientanentana be tamin'ny fampisehoana DS. Ireo fientanentanana ireo dia nampiseho toetra mitovy amin'ny voalaza teo aloha (Yun et al., 2004; Nicola et al., 2004a; Ambroggi et al., 2011; McGinty et al., 2013; Morrison sy Nicola, 2014): lehibe kokoa noho ireo navoakan'ny NSs izy ireo (Aviavy. 2A); Nanomboka tamin'ny fotoana fohy izy ireo taorian'ny nanombohan'ny cue (~ 120 ms) ary niseho talohan'ny nanombohan'ny hetsika tarihin'ny lever (Aviavy. 2B); ary ny halehiben'izy ireo dia nifanaraka tamin'ny mety ho valin'ny fitondran-tena, ny faharetan'ny hetsika ary ny akaiky ny lever (McGinty et al., 2013; Aviavy. 2C-E).

Ny fampidiran-dresaka roa an'ny mpanohitra D1 na D2 / D3 dia nahatonga ny fihenan'ny haavon'ny DS-evoked excitation. Araka ny aseho amin'ny ohatra roa neurons (Aviavy. 3A,CIty vokatra ity dia tena voatonona tao anatin'ny minitra vitsy taorian'ny fampidirana, mifanaraka amin'ny fihenan'ny fara-tampony amin'ny fitondran-tenan'ny cue-evoked nateraky ny tsindrona (Aviavy. 3A,C, raster manga sy histograma). Rehefa niverina ny fiantraikan'ny fitondran-tena dia niverina ihany koa ny valin'ny tifitra (Aviavy. 3A,C, raster mainty sy histograma). Ity lamin'ny valiny ity dia nifanaraka tamin'ny neurons cue-excited (Aviavy. 5A, , 66A, histograms bilateral sy ny tsipika volombava). Manohana ny fiheverana fa ireo fientanam-po ireo dia mametraka ny tanjaky ny hetsika fanatonana lever, ny halehiben'ny fientanam-po nateraky ny cue nandritra ny vanim-potoana mialoha ny fampidirana dia naminavina ny faharetan'ny biby ho tonga amin'ny lever (Aviavy. 4A,C, ankavia). Taorian'ny tsindrona D1 na D2 antagonista bilateral, dia nivadika ho sanda ambony kokoa ireo latency ireo, matetika avo loatra ka tsy nisy valiny mihitsy tao anatin'ny fampisehoana 10 s cue (Aviavy. 4A,C, fizarana fahatarana havia sy havanana). Mahavariana, na dia nihena aza ny tifitra nateraky ny cue-evoked nataon'ireo mpanohitra, dia nanohy naminavina ny tanjaky ny valin'ny fitondran-tena nandritra ny vanim-potoana postinjection sy fanarenana (Aviavy. 4A,C, tetika raster havanana). Ity fanamarihana ity dia manondro fa ny fiantraikan'ny fitondran-tena sy ny neural amin'ny zava-mahadomelina dia nifanaraka tamin'ny fitsapana isaky ny fitsapana: ny fihenan'ny tifitra ateraky ny antagonista dopamine, ny lehibe kokoa ny latency hahatratra ny lever ary ny ambany kokoa ny mety hitranga. biby nahatratra ny lever mihitsy.

Mba hanombanana ny tsy fitoviana amin'ity fifamatorana amin'ny fitsapana ity, dia nikajy izahay, ho an'ny neuron cue-excited tsirairay, ny fifandraisan'ny Spearman eo amin'ny halehiben'ny fientanam-po sy ny faharetan'ny fanerena ny lever. Nametraka fiatoana 10 s izahay tamin'ny fitsapana izay tsy nisy valiny; noho izany dia nifamatotra tamin'ny laharana ambony indrindra ny fahatarana tamin'ireo fitsapana ireo. (Vokatra mitovy amin'izany no azo raha tsy nesorina tao amin'ny fanadihadiana ny fitsapana tsy misy valin'ny lever DS-cued; tsy naseho ny angon-drakitra.) Rehefa nampitahainay ny coefficients correlation tamin'ny vanim-potoanan'ny preinjection tamin'ireo tao anatin'ny vanim-potoanan'ny postinjection / fanarenana, dia hitanay fa saika ny rehetra ny coefficients dia ratsy tamin'ny vanim-potoana roa. Ankoatr'izay, ny antagonista dia tsy nisy fiantraikany lehibe teo amin'ny coefficient median na nanova ny fizarana mankany amin'ny sanda ratsy kokoa (Aviavy. 4B,D). Noho izany, tsy vitan'ny hoe maminavina ny faharetan'ny valin'ny fitondran-tena ny mponina ao amin'ny neurons cue-excited, fa ny fitomboan'ny valin'ny valin'ny valin'ny antagonista amin'ny fitsapana nomena dia voambara mialoha amin'ny fiantraikan'ny antagonista amin'ny fientanam-po amin'ny cue-evoked amin'io fitsarana io. Ireo valiny ireo dia manome porofo matanjaka ho an'ny andraikitry ny dopamine endogenous amin'ny fametrahana ny tanjaky ny valim-panontaniana mitady valisoa amin'ny cue: ny dopamine dia mampitombo ny fientanam-po amin'ny neurons NAc, izay miteraka fomba fijery fohy amin'ny lever.

Ny fandikana hafa amin'ireo valiny ireo dia ny fihenan'ny fientanam-po mipoitra dia vokatry ny fihenan'ny fitondran-tena - angamba satria ny fientanentanana dia manara-maso fotsiny (na miandry) ny valin'ny fitondran-tena fa tsy miteraka izany. Raha izany no izy, ny fampiharana ny antagonista amin'ny fomba izay tsy misy fiantraikany amin'ny fitondran-tena dia tsy tokony hampihena ny fientanam-po. Na izany aza, araka ny aseho amin'ny ohatra roa neurons (Aviavy. 3B,D), ny tsindrona unilateral na D1 na D2 / D3 antagonista dia nampihena be ny halehiben'ny fientanam-po nateraky ny cue na dia tsy nanova ny fitondran-tena aza ny tsindrona tokana. Ny vokatra mitovy amin'izany dia azo rehefa nivezivezy tamin'ny fientanam-po mipoitra cue voarakitra ao amin'ny NAc voatsindrona (Aviavy. 5A, , 66A, histograms ipsilateral); Ankoatr'izay, ny angon-drakitra antonony dia mampiseho fa ny fientanam-po mipoitra amin'ny neurons voarakitra ao amin'ny NAc contralateral amin'ny tsindrona dia tsy nisy fiantraikany (Aviavy. 5A, , 66A, histograms contralateral). Mba hialana amin'ny mety hisian'ny fampihenana ny fientanam-po amin'ny cue-evoked ipsilateral amin'ny tsindrona dia noho ny tsy fitoviana kely amin'ny mety ho valin'ny fitondran-tena, dia namerina ny fanadihadiana izahay taorian'ny nanesorana ny fitsapana rehetra izay tsy nanaovan'ny biby ny valin-gazety; vokatra mitovy amin'izany no azo (data tsy naseho; p <0.05 ho an'ny mpanohitra D1 sy D2, Wilcoxon). Ireo vokatra ireo dia manondro fa ny fihenan'ny antagonista amin'ny fientanam-po nateraky ny cue dia tsy azo inoana fa vokatry ny tsy fahombiazan'ny fitondran-tena.

Na dia mitovy amin'ny neurons aza ny toetra ara-nofo amin'ny fientanam-po nateraky ny cue, dia samy hafa kokoa ny fanakanana taorian'ny nanombohan'ny cue, matetika mampiseho ny fanombohana taty aoriana sy ny fandaharam-potoana tsy misy stereotype noho ny fientanentanana (Aviavy. 5B, , 66B). Ny famakafakana ny fanakanana (ary, amin'ny lafiny iray, ny fientanam-po) izay mifantoka amin'ny varavarankely iray dia mety tsy hahita ampahany lehibe amin'ny famantarana. Ankoatr'izay, ny fomba fitiliana statistika mahazatra dia tsy afaka mamantatra tsy tapaka ny fihenan'ny tahan'ny tifitra fototra, anisan'izany ny an'ny neuron NAc maro. Mba hialana amin'ireo olana ireo, dia naka fomba fiasa misimisy kokoa izay nohararaotinay izahay, ho an'ny dabam-potoana 50 ms postcue ao amin'ny neuron voarakitra rehetra, ny ROC AUC maneho ny fahasamihafana misy eo amin'ny tifitra ao anaty koba sy ny tsipika fototra. Sarintany hafanana amin'ny sandan'ny AUC amin'ny dabam-potoana mifanaraka amin'ny fanombohan'ny DS (Aviavy. 5B, , 66B) dia mampiseho fa ny fihenan'ny DS-evoked excitation taorian'ny tsindrona bilateral sy ipsilateral (fa tsy contralateral) an'ny D1 sy D2 antagonists dia nambara tamin'ny saika isaky ny neuron cue-excited ary nitranga nandritra ny fotoana manontolo ny fientanam-po. Mifanohitra amin'izany, ny fanakanana taorian'ny nanombohan'ny DS dia tsy nihena. Mba hamaritana ireo fiantraikany ireo, dia nanapa-kevitra izahay raha ny sandan'ny AUC tsirairay dia manondro fahasamihafana lehibe avy amin'ny baseline amin'ny alàlan'ny kajy ny sanda bootstrapped p izay maneho ny mety hisian'ny AUC santionany avy amin'ny fizarana ny AUC novokarina avy amin'ny taham-pifamoivoizana kisendrasendra sy postcue (jereo Fitaovana sy fomba). Araka ny asehon'ny teti-dratsin'ny ampahany amin'ny neurons mampiseho manan-danja (p <0.05) fientanam-po na fanakanana ao amin'ny daba tsirairay mifanaraka amin'ny fanombohan'ny DS (Aviavy. 5C, , 66C, tetika havia amin'ny tsanganana tsirairay), ny ampahany amin'ny fientanam-po, fa tsy ny fanakanana, dia nihena tamin'ny tsindrona bilateral sy ipsilateral an'ny mpanohitra. Ity fandikana ity dia nohamafisina ara-statistika tamin'ny fampitahana ny taham-pahafatesana mientanentana sy manakana ny fikandrana 1 s post-DS manontolo (Aviavy. 5C, , 66C, teboka teboka). Noho izany, ny fientanam-po taorian'ny nanombohan'ny DS dia nihena tamin'ny tsindrona antagonista D1 sy D2, saingy tsy nisy ny fanakanana.

Eny tokoa, nitombo ny isan'ny neurônina mampiseho fanakanana lehibe taorian'ny karazana tsindrona sasany (Aviavy. 5B,C, , 66B,C). Ireo fanakanana mipoitra ireo dia tsy azo inoana fa nahatonga ny fiantraikan'ny fitondran-tena amin'ny fampidirana antagonista bilateral satria tsy mifanaraka izy ireo (ohatra, nitranga taorian'ny bilateral sy contralateral, fa tsy ipsilateral D1 antagonist injection ary taorian'ny ipsilateral, fa tsy bilateral D2 antagonist injection) ary noho izany tsy manazava ny vokatry ny fitondran-tenan'ireo mpanohitra izy ireo. Ankoatr'izay, ireo fanakanana tara ireo dia nisongadina indrindra ~ 600 ms taorian'ny nanombohan'ny DS, fotoana izay, tao anatin'ny fepetra fanaraha-maso, ~ 50% amin'ny fitondran-tena mikendry tanjona dia efa natomboka (Aviavy. 2B). Noho izany, tsy azo inoana fa ny fanakanana mipoitra dia nanampy tamin'ny fitomboan'ny antagonista amin'ny alàlan'ny fanombohan'ny fomba fiasa na ny fampihenana ny mety ho valin'ny valiny. Mahavariana fa ny ankamaroan'ny fanakanana mipoitra dia niseho tao amin'ny neurons DS-excited, matetika amin'ny fiafaran'ny fientanam-po (antagonista D1 bilateral: 14/17 neurons, 82%; ipsilateral D2 antagonist: 11/16 neurons, 69%; Aviavy. 5B,C, , 66B,C), mifanaraka amin'ny mety hisian'ny fampihenana ny antagonista-induced ny valin-kafatra mampientanentana ary manohana ny fiheverana fa ny fandoroana ny neurons DS-excited dia mahatonga ny fanombohana ny fitondran-tena.

Famelabelarana NS, izay mahalana vao nahazo valin-kafatra (Aviavy. 1B), dia niteraka fientanam-po kely nefa tsy tapaka tao amin'ireo neurons izay nientanentanan'ny DS (Aviavy. 2A). Mahagaga fa tsy nihena ny fientanam-po nateraky ny NS tamin'ny antagonista D1, na amin'ny habeny (Aviavy. 7A) na amin'ny isan'ny neurons mientanentana (Aviavy. 7B,C). Mifanohitra amin'izany kosa, ny tsindrona antagonista D2 dia nampihena ny habeny sy ny isan'ny NS-evoked excitations (Aviavy. 8). Ny fanakanana NS-evoked dia tsy nihena ny antagonista (Aviavy. 7B,C, , 88B,C). Noho izany, ao anatin'ireo fepetra ireo dia ilaina ny fampahavitrihana ny mpandray ny D1 ho an'ny neurons NAc hamokatra fientanam-po lehibe ho setrin'ny fanentanana valisoa-milaza valisoa, fa ny fampahavitrihana ny mpandray ny D2 dia takiana amin'ny valin'ny valim-panadinana sy ny tsy miandany.

Noheverinay fa ny mety ho fihenan'ny fitondran-tena mitady valisoa taorian'ny fampidirana bilateral dia mety ho noho ny fahatapahan'ny fizotran'ny neural mifandraika amin'ny fanamafisana na ny fanodinana hedonic amin'ny valisoa. Ny dingana toy izany dia mety ahitana ny subpopulations amin'ny neurons NAc izay voasakana na mientanentana mandritra ny fihinanana sucrose (Nicola et al., 2004b; Roitman et al., 2005; Taha sy ny saha, 2005). Satria ny biby dia mbola nahazo valisoa taorian'ny fampidirana antagonista unilateral, dia afaka namaritra izahay raha miankina amin'ny fampidiran-dopamine receptor ny hetsika neuronal mifandraika amin'ny fanjifana valisoa. Nandinika ny tifitra izahay nandritra ny 5 s taorian'ny nidiran'ny biby tao amin'ny fitoeran'ny valisoa, ny vanim-potoana izay mitranga matetika ny fanjifana valisoa (Nicola, 2010). Amin'ny fampiasana fanadihadiana ROC, nampitahainay ny tifitra tao anaty dabam-bary 200 ms ao anatin'ity varavarankely ity amin'ny tsipika 10 s mialoha; Ny sarintanin'ny hafanana amin'ny sanda AUC vokarina dia mampiseho kely ny fiantraikan'ny tsindrona antagonista na ipsilateral na mifanohitra amin'ny tsindrona (Aviavy. 9A,C). Ny ampahany amin'ny neurons mientanentana sy voasakana dia tsy nisy fiantraikany tamin'ny antagonista (Aviavy. 9B,D), manoro hevitra mafy fa tsy miankina amin'ny dopamine ny fientanentanana sy ny fanakanana mifandraika amin'ny fihinanana. Nahazo vokatra mitovy amin'izany izahay rehefa nanao famakafakana mitovy amin'ny fampiasana 50 ms bins (data tsy aseho).

Mba hanilihana ny mety hisian'ny vokatra voamarika dia noho ny antony hafa ankoatry ny antagonista (ohatra, fikorontanana ara-batana vokatry ny tsindrona na singa sasany amin'ny fiaran-drongony) dia nanindrona saline izahay tamin'ny fanandramana sasany. Araka ny asehon'ny ohatra neuron (Aviavy. 10A) ary amin'ny alàlan'ny fientanentanana antonony manerana ny neurons cue-excited (Aviavy. 10B), Ny fientanam-po nateraky ny DS dia tsy niova tamin'ny tsindrona saline; Tsy nisy fiantraikany koa ny fientanam-po nateraky ny NS (Aviavy. 10C). Ankoatr'izay, ny tsindrona saline dia tsy nisy fiantraikany tamin'ny habetsaky ny neurons izay mampiseho fientanam-po sy fanakanana lehibe taorian'ny nanombohan'ny DS na NS (Aviavy. 10D–G).

Farany, nanontany izahay raha azo atao ny mamela ny fampahavitrihana dopamine ho an'ny fitondran-tena amin'ny alàlan'ny fandraisana anjara amin'ny taham-pitifiran'ny neurons NAc. Tsy mifanaraka amin'io petra-kevitra io, dia tsy nisy fiantraikany lehibe na ny D1 na D2 antagonista amin'ny taham-pifamoivoizan'ny DS-excited na neurons NAc hafa (Aviavy. 10H,I).

Discussion

Ireo valim-pikarohana ireo dia manolotra mekanika iray ahafahan'ny NAc dopamine hampiroborobo ny fitondran-tena mitady valisoa avy amin'ny fanentanana ara-tontolo iainana: ny fampahavitrihana dopamine receptor dia manamora ny fientanam-po mipoitra, izay mampiroborobo ny fanombohana fohy amin'ny fomba fiasa mifandraika amin'ny valisoa. Ity fehin-kevitra ity dia tohanan'ny fandinihana fa ny tsindrona dopamine antagonista bilateral dia samy nampitombo ny faharetan'ny hetsika (Aviavy. 1D) ary nampihena ny halehiben'ny fientanam-po nateraky ny cue (Aviavy. 33​-6). Ny fampihenana ny fientanam-po mipoitra amin'ny cue dia tsy mety ho vokatry ny fihetsika miharatsy satria ny tsindrona tokana dia tsy nanova ny fihetsika DS-cued (Aviavy. 1C-F), nefa mampihena lalina ny fientanam-po DS-evoked ao amin'ny tavy voatsindrona (Aviavy. 3B,D, , 5,5, ,6).6). Ireo fientanentanana ireo dia valin-kafatra lehibe indrindra ao amin'ny NAc (mitranga amin'ny 45% amin'ireo neurons voarakitra), ary izy ireo dia samy nialoha ny fanombohan'ny hetsika (Aviavy. 2B) ary naminavina ny fahatarana fanombohan'ny hetsika miaraka amin'ny tifitra lehibe kokoa amin'ny fitsapana misy fahatarana fohy kokoa (Aviavy. 2D) (McGinty et al., 2013; Morrison sy Nicola, 2014). Noho izany, ny excitation cue-evoked dia samy miankina amin'ny dopamine ary ilaina amin'ny fitadiavana valisoa mahery vaika.

Ny valiny dia mampiseho fa ny fientanam-po mipoitra, ary tsy misy endrika hafa amin'ny hetsika neural ao amin'ny NAc, dia azo inoana fa famantarana manakiana ao amin'ny faritra neural izay mametraka ny faharetan'ny hetsika mikendry ny tanjona. Ity fehin-kevitra ity dia avy amin'ny fandinihana fa ny antagonista dia nampihena ny fientanam-po mipoitra tsy misy fampihenana ny fanakanana cue-evoked, ny tifitra mifandraika amin'ny fanjifana, na ny tahan'ny tifitra fototra. Ankoatr'izay, ny fitsapana izay nahitana ny tsindrona bilateral an'ny antagonista mahomby indrindra amin'ny fampihenana ny fientanam-po dia ireo izay nahatonga ny fahasimban'ny fitondran-tena lehibe indrindra (Aviavy. 4), miady hevitra mafy amin'ny mety hisian'ny fiovana hafa tsy hita ao amin'ny encoding neuronal dia tompon'andraikitra amin'ny fiantraikan'ny fitondran-tena. Noho izany, ny angon-drakitray dia mampifandray mafy ny fampahavitrihana ny dopamine receptor ao amin'ny NAc, ny haben'ny fientanam-po mipoitra, ary ny faharetan'ny biby hanombohana fitadiavana valisoa.

Ny asa teo aloha dia naneho fa ny tsy fihetsehan'ny VTA izay nampihena ny fientanam-po sy ny fanakanana nateraky ny NAc cue dia nanakana ny biby tsy haneho fitondran-tena mihetsiketsika (Yun et al., 2004). Na izany aza, io fandinihana io dia tsy nanafoana ny mety ho fiantraikan'ny faritra ankolaka ireo fiovana ireo. Eto, asehontsika fa ny mpikatroka dopamine eo an-toerana amin'ny neurons voarakitra dia ilaina amin'ny fientanam-po mipoitra, manafoana ny mety ho fiantraikan'ny antagonista noho ny hetsika dopamine ambony ao amin'ny NAc. Mifanohitra amin'izany, na dia nihena aza ny inhibition cue-evoked tamin'ny inactivation VTA (Yun et al., 2004), tsy nahena noho ny tsindrona antagonista dopamine eo an-toerana izy ireo, ary noho izany dia tsy azo inoana fa vokatry ny hetsika mivantana dopamine ao amin'ny NAc ireo fanakanana ireo.

Ny fiantraikan'ny antagonista D1 sy D2 amin'ny fitondran-tenan'ny DS-evoked sy ny tifitra DS-evoked dia nitovy be. Ireo fanamarihana ireo dia mifanaraka amin'ny tsipika lava amin'ny fanandramana microinjection NAc izay nahatonga ny antagonista D1 sy D2 namokatra fiantraikany amin'ny fitondran-tena saika tsy hay hazavaina amin'ny fatra mitovy amin'ny antsika (Hiroi sy White, 1991; Ozer et al., 1997; Koch sy al., 2000; Eiler et al., 2006; Pezze et al., 2007; Lex sy Hauber, 2008; Liao, 2008; Nicola, 2010; Shin et al., 2010; Haghparast et al., 2012). Ireo vokatra ireo, miaraka amin'ny fifanoherana eo amin'ny fifantohana amin'ny antagonista amin'ny tsindrona izay takiana amin'ny fijerena ny fiantraikany (mm) sy ny fifandraisan'ny zava-mahadomelina ho an'ny tanjony (nm), dia manontany raha voafaritra ny fiantraikan'ny zava-mahadomelina. Na dia mety ho ambany kokoa noho ny fifantohana voatsindrona aza ny fifantohana mahomby amin'ny mpandray ny tsindrona noho ny fiparitahana, ny metabolism ary ny oksidation ny zava-mahadomelina, dia tsy fantatra ny fahombiazan'ny fitambaran'ireo dingana ireo. Noho izany, ny mety ho fomba ofisialy dia ny vokatry ny fitondran-tena sy ny electrophysiologique amin'ny SCH23390 sy ny raclopride dia vokatry ny zava-mahadomelina roa mamatotra mpandray iray na maromaro izay tsy voafatotry ny dopamine mihitsy. Antony maromaro no manohitra izany. Ny fitondran-tenan'ny cue-evoked dia voasakana tsy amin'ny SCH23390 sy raclopride ihany, fa amin'ny alàlan'ny fampidirana ny flupenthixol antagonista dopamine midadasika midadasika ao amin'ny NAc (Di Ciano et al., 2001; Saunders sy Robinson, 2012), amin'ny alàlan'ny tsy fihetsehan'ny VTA (Yun et al., 2004ary amin'ny alàlan'ny lesion'ny NAc miaraka amin'ny 6-hydroxydopamine (Parkinson et al., 2002), izay mamono ny fibra katekolaminergic. Ankoatr'izay, ny fampidirana NAc amin'ny dopamine reuptake blocker, D1 na D2 agonist receptor, na ny amphetamine mpanafaka dopamine dia mampitombo ny mety hisian'ny cued approach.Wyvell sy Berridge, 2000; Nicola et al., 2005; du Hoffmann sy Nicola, 2013). Farany, ny famporisihana ny tenany manokana amin'ny VTA dopamine neurons (fitondran-tena tsy isalasalana fa tazonin'ny dopamine neuron activation) dia atenuated amin'ny tsindrona SCH23390 na raclopride ao amin'ny NAc amin'ny dosie mitovy amin'ireo ampiasaina eto (Steinberg sy al., 2014). Sarotra ny mieritreritra mekanika tsotra iray izay mety ho tompon'andraikitra amin'ny tsirairay amin'ireo valiny ireo raha tsy misy ny fiheverana fa ny SCH23390 sy ny raclopride dia nanakana ny fiantraikan'ny dopamine endogenous.

Ny mety ho hafa dia ny hoe ny antagonista dia mamehy tsy ireo mpandray azy ireo ihany, fa ireo mpandray dopamine tsy misy kendrena koa. Amin'ny fifantohana amin'ny 10 μm na ambany kokoa, ny raclopride dia tsy mamehy ireo mpikatroka D1 (Hall et al., 1986); tsy voasedra ny fifantohana ambony kokoa. Noho izany, ny raclopride dia mety ho voafaritra manokana ho an'ny mpandray D2 / D3 na dia amin'ny fatran'ny tsindrona mm ampiasaintsika sy ny hafa aza, indrindra rehefa raisina ny diffusion, metabolism ary ny oxidation. Tombanana ho an'ny SCH23390 mifamatotra tsy tapaka amin'ny mpandray D2 mitovy amin'ny 1 sy 5 μm (Bourne, 2001; Mottola et al., 2002); Na dia milaza aza ireo soatoavina ireo fa ny SCH23390 dia mamehy ireo mpikatroka D2 / D3 amin'ny fifantohana voatsindrona, ny fahombiazan'ny SCH23390 amin'ny fanakanana ny fampahavitrihana ny D2-like receptors amin'ny dopamine dia tsy fantatra. Ny fandinihanay fa ny raclopride dia nampihena ny fientanam-po nateraky ny NS, fa ny SCH23390 dia tsy nanohana ny hevitra fa ny zava-mahadomelina dia niasa tamin'ny mpitsabo samihafa, fa tsy mampiseho mazava ny maha-izy azy. Na izany aza, na dia nanakana ny karazana receptor roa aza ny iray na izy roa mba hampihenana ny fientanam-po DS-evoked, dia hifanaraka tanteraka amin'ny fanatsoahan-kevitray fa ny fampahavitrihana ny endrika dopamine iray farafaharatsiny dia takiana amin'ny fientanam-po DS-evoked. Noho izany, na dia mbola tsy voavaly aza ny fanontaniana momba ny zava-mahadomelina, ity fanontaniana ity dia manamaivana ny fehin-kevitra lehibe indrindra fa ny dopamine dia manamora ny fomba fiasa amin'ny alàlan'ny fampitomboana ny fientanam-po.

Raha ny marina, ny zava-mahadomelina dia nanao zavatra manokana, ny fikarohanay fa ny D1 sy D2 / D3 antagonists dia samy nampihena ny fitifirana cue-evoked amin'ny ankamaroan'ny neurons cue-excited dia manoro hevitra fa ny fampahavitrihana ireo mpandray ireo dia mitarika synergistically amin'ny fientanam-po amin'ny neurons mitovy. Raha ny D1 sy D2 receptors dia hita amin'ny ankamaroan'ny mponina amin'ny neurons ao amin'ny NAc (Albin sy al., 1989; Gerfen et al., 1990), ny ampahany betsaka amin'ny NAc core sy ny akorandriaka neuron izay maneho ny D1 receptors dia misy mRNA ho an'ny D3 receptors (Le Moine sy Bloch, 1996), izay nosakanan'ny mpanohitra D2, anisan'izany ny raclopride. Ny fiaraha-miombon'antoka amin'ny D1 sy D3 dia manome mekanika mety ahafahan'ny dopamine hampiroborobo ny fientanam-po ao amin'ny neurons NAc amin'ny alàlan'ny fiantraikany synergistic izay ho voasakana na D1 na D2 / 3 antagonista (Schwartz et al., 1998). Raha tsy izany (na fanampiny), ny fifandraisana eo amin'ny D1 sy D2 (sy / na D3) dia mety hitranga amin'ny ambaratonga eo an-toerana (Goto sy Grace, 2005; Gerfen sy Surmeier, 2011). Ohatra, ny dopamine dia miasa amin'ny receptors D1 mba hampihenana ny famoahana GABA amin'ny neurons NAc (Nicola sy Malenka, 1997; Hjelmstad, NY, 2004), fiantraikany mety hampiroborobo ny fientanam-po miaraka amin'ny fampahavitrihana ny mpandray D2 / D3 amin'ny neurons spiny (Hopf et al., 2003). Marihina fa ireo mekanika ireo dia milaza fa ny dopamine dia tsy mampientanentana mivantana ny neurons NAc, fa mampitombo ny fientanam-pony ho setrin'ny fampidirana glutamatergic; Noho izany, afaka manazava izy ireo hoe nahoana no voasakana ny fientanam-po mipoitra tsy vitan'ny dopamine antagonista, fa koa amin'ny tsy fampandehanana ny amygdala basolateral sy ny cortex prefrontal (Ambroggi et al., 2008; Ishikawa et al., 2008), izay samy mandefa projections glutamatergic amin'ny NAc (Brog et al., 1993).

Ny fitoviana sy ny fahasamihafana misy eo amin'ny SCH23390 sy ny raclopride dia mety ho vokatry ny mekanika neural roa mifanohitra, misy dopamine phasic sy tonic. Satria na D1 sy D2 / D3 antagonists dia nampihena ny DS-evoked excitation, fa ny kely kokoa NS-evoked excitation nitranga tao amin'ny neurônina mitovy dia nihena ihany ny D2 / D3 antagonist (Aviavy. 8, ,9),9), dia hita fa ny dopamine dia mampiroborobo ny fanodinkodinana ny sandan'ny stimulus amin'ny alàlan'ny fampahavitrihana ny mpikatroka D1, fa manamora ny valin'ny tifitra amin'ny famantarana rehetra (na mifandray amin'ny vokatra sarobidy izy ireo na tsia) amin'ny alàlan'ny mpandray D2 / D3. Izany dia mety ho noho ny fifindran'ny dopamine phasic lehibe kokoa navoaka tao amin'ny NAc tamin'ny alàlan'ny valisoa-faminavina noho ny tsy miandany (Phillips et al., 2003; Roitman et al., 2004). Satria ny mpitsabo D2 / 3 dia manana fifandraisana ambony kokoa amin'ny dopamine noho ny D1 receptors, ny NS-evoked dopamine transients kely dia mety ho ampy mba hampihetsika ny D2 / 3 receptors ihany, fa ny DSs vinavina valisoa dia mety hampiakatra ny fifantohana dopamine amin'ny haavo avo lenta mba hampihetsika ireo mpandray D1. (Grace, 1991).

Raha tsy izany, ny halehiben'ny fientanentanana cue-evoked dia azo fehezina amin'ny tonika, fa tsy dopamine phasic. Ny haavon'ny dopamine tonika dia mety haneho ny vidin'ny tsy fandraisana andraikitra (Niv et al., 2007), ka mametraka ny tanjaky ny fampandehanan-draharaha. Noho izany, raha tratra ny haavon'ny dopamine tonika avo lenta, dia mety ho lasa mavitrika ireo mpandray dopamine ampy mba hanamora ny fientanam-po mipoitra ary hampihena ny faharetan'ny fomba fitadiavana valisoa. Ny mekanika mitovy amin'izany dia mety hifototra amin'ny fandraisana anjara fanta-daza amin'ny dopamine NAc amin'ny fanatanterahana asa tsy misy fepetra izay mitaky ezaka avo lenta (Salamone sy Correa, 2012), izay mampitombo ny fahatapahan'ny dopamine hanatona ny operandum (Nicola, 2010). Ny famantarana ivelany ivelany (ohatra, ny fahitana ny lever) na ny famantarana anatiny (ohatra, avy amin'ny fotoana na ny hanoanana) dia mety hiteraka fanatonana amin'ny alàlan'ny neurons NAc mampientanentana kokoa rehefa avo lenta ny vidin'ny fahafahana sy ny dopamine.

Raha fintinina, na inona na inona rafitra ara-pharmacologika manokana, ny vokatray dia mampiseho fa ny NAc dopamine dia manandratra ny fitadiavam-bola mitady asa amin'ny alalan'ny fampiakarana ny fanentanana ny necron NAc ho an'ny fanentanana tontolo iainana miavaka. Ny halehiben'ity fanentanana ity dia mametraka ny faran'ny foto-kevitra hanombohana valiny. Amin'ny alalan'io rafitra io, ny dopamine dia mamaritra ny hery sy ny mety hitranga amin'ny valisoa.

fanamarihana ambany pejy

References