Mampitombo ny fitomboan'ny fikarakarana samirery ny fisotroan-toaka maitso (2013)

Dianne P. Figlewicz,^1,2 Jennifer L. Jay,² Molly A. Acheson, Irwin J. Magrisso,⁴ Constance H. West,¹ Aryana Zavosh,² Stephen C. Benoit,³ ary Jon F. Davis³

Efa nitatitra izahay fa ny fihinanana sakafo matsiro be loatra dia mampitombo ny fanentanana ho an'ny sucrose amin'ny ratification adult. Ao anatin'ity fandinihana ity, dia notsapainay ny fiantraikan'ny zava-manan'aina, ny neurochemical, ary ny metabolika avy amin'ny sakafo matavy be dia be amin'ny raty nataon-dehilahy tamin'ny taonan'ny fahamaotiana, nandritra ny herinandro 5-8. Nandinika izahay fa ny fihinanana sakafo matavy be dia be dia be dia be dia be dia be, izay tsy miankina amin'ny fiovan'ny metabolika na ny fiovan'ny metabolites catecholamine neurotransmitter ao amin'ny nucleus accumbens. Na izany aza dia avo be ny halatr'ireo mRNA an'ny mRNA ao amin'ny hypothalamus. Nasehonay fa ny fampidinana ny neurons AGRP dia mifandray amin'ny fitondran-tena manosika, ary ny fitantanana ny AGRP exogenous (fahatelo cerebroventricular) dia nitarika fanentanana lehibe ho an'ny sucrose. Ireo fanamarihana ireo dia milaza fa ny fampihorohoroana sy ny fatran'ny AGRP ao amin'ny hypothalamus medial dia mety mitaky ny fitomboan'ny fitakiana ho an'ny sucrose vokatry ny fidirana amin'ny sakafo matavy. Farany, nampitahainay ny motivation ho an'ny sucrose amin'ny fombam-patsatsitsitsitsitsitsitsitsitsitsitsitsitsitsitsitsitsitsitsitsitsitra ny olon-dehibe ary nanamarika ny famporisihana ho an'ny sucrose ao anatin'ireo voalavo pubertal, izay mifanaraka amin'ny tatitra teo aloha fa ny zana-tsavily sy ny olombelona dia manana tombony lehibe kokoa amin'ny tsiro mahafinaritra, raha oharina amin'ny olon-dehibe. Miara-miasa ny fandinihanay fa ny fihinanana sakafo an-tapitrisany dia manana anjara mavitrika amin'ny fanindrahindrana ny tsiro mahafinaritra amin'ny biby adolantsento.

lohahevitra

Ireo ankizy dia lahy voalavo Albino avy any Simonsen (Gilroy, CA). Ny ratana dia voatahiry amin'ny chow (Laboratoire Rodent Diet 5001, LabDiet) na ny sakafo matavy loatra (31.8%, Research Diets Inc) ad libitum. Ny sakafo dia mifanandrify amin'ny votoatin'ny karbôgista manontolo (58% kcal vs. 51% kcal ho an'ny tavy ambany sy matavy). Ny fofona matavy dia manana siramamy maimaim-poana 6.23 gm ary ny sakafo matavy dia manana 29 gm% sucrose. Notazonina izy ireo tamin'ny 12: 12 handrohana maizina maizina miaraka amin'ny jiro ao amin'ny 6 AM. Raha tsy misy ny fanamarihana manokana, dia nentina tao amin'ny 3 herinandro ny raty, avy hatrany dia nisaotra, ary navela hifikitra hatramin'ny 5 herinandro. Amin'izao vanim-potoana izao, dia nanomboka ny fampiofanana sy ny fikarakarana fihinanana sy fitiliana. Ireo protocoles voafaritra voafaritra amin'ny antsipiriany etsy ambany, ary voafaoka ao table 1. Satria ny voalavo lahy dia mandalo amin'ny fahamaotiana ao amin'ny 6^th-7^th pahatapitry ny vanim-potoana, ny fandaharam-potoana tamin'ny fandalinana dia natao mba handinihana ny moka rehefa mandalo io dingam-pandrosoana io. Ny fepetra rehetra natao tamin'ny voalavo dia nanaraka ny torolàlan'ny NIH ho an'ny fikarakarana biby, ary nankatoavin'ny Animal Care and Use Sub-Committee ao amin'ny Komity sy ny Fampandrosoana ao amin'ny VA Puget Sound Health System.

  

table 1

Protocoles experimental

Sucrose

General Protocol. Ny fomba fiasa dia mifototra amin'ny fomba ambaranay (Figlewicz et al., 2008; Figlewicz et al., 2006). Ny fomba fampiofanana sy fisedrana rehetra dia natao teo anelanelan'ny 0700 sy 1200 hr. Ny fanandramana dia nahitana ny fizarana 2-3: fiofanana momba ny fanamafisam-peo sy fiarovana (FR); ny fandidiana sy ny fanarenana ao anaty koohinina voatondro (jereo table 1); ary fampiofanana mivoatra (PR) amin'ny fampiasana algorithm PR avy amin'i Richardson sy Roberts (Richardson & Roberts, 1996). Ny algorithm PR dia mila 1, 2, 4, 6, 9, 12, 16, 20, 28, 36, 48, 63, 83, 110, 145, 191, 251, 331, 437, 575, 759, 999, 999 ( sns) dia manery amin'ny famoahana ny entana amidy mandritra ny fivoriana, ary fitsapana mafy ho an'ny fanentanana sy ny valisoa (27). Ny voalavo dia nampiofanina tamin'ny fitantanana ny 5% sucrose (valisoa ML 0.5) natolotry ny lasantsy. Ny boaty mpihazakazaka, tarihin'ny rafitra Med Associates (Georgia, VT), dia manana fiatohana roa, fa iray monja (fitaovana mivezivezy mivezivezy sy mavitrika) dia navitrika ny valan-drivotra. Nosoratana ihany koa ny fanindriana ny lefona hafa (mpitatitra tsy mavitrika, mipetraka). Ny vahaolana sucrose dia natolotra tao amin'ny fonon-tsakafon'ny ronono ho an'ny fiterahana (Med Associates). Ny fampiofanana voalohany dia natao nandritra ny fivoriana iray isam-bolana nandritra ny andro 10 teo ambany fandaharam-potoana mitam-piofanana (FR1: nanamafy ny tsindry tsirairay), miaraka amin'ny fametrahana valisoa 50 sukrose natao isaky ny fotoam-pivoriana. Ny fivoriana tsirairay dia nanomboka tamin'ny fampidirana ny fitaovana entina mivezivezy sy ny fanazavana ny fotsy hoditra izay mijanona mandritra ny fivoriana manontolo. Ny feo 5 (2900 Hz, 20 dB ambony loko) + hazavana (7.5 W fotsy hoditra ambony eo amin'ny hivoatra mavitrika) dia mitohy ny famoahana valim-panafody, arahin'ny 20-sec ora aorian'ny dabam-pamokarana tsirairay. Ny fampiofanana PR dia natao ho an'ny 3 h / andro maromaro fara-fahakeliny nandritra ny folo andro. Ny famoahana isan'andro dia nifarana taorian'ny 30 minitra tsy misy valinteny mavitrika mavitrika namaly, taorian'izay dia nopotehana ny hazavana trano ary navotsotra ilay brakona mavitrika.

Ny vokatry ny AGRP amin'ny fitondran-tena mahomby

Satria ny vokatra azonay dia nampitombo ny fatran'ny mRNA an'ny AGRP tao anatin'ireo fitsaboana voalohan'ny pubertal nitondra ny sakafo matavy be dia be, te-hanamafy izahay fa ny AGRP dia mety hampitombo ny fitantanam-panjakana. Natsangana tamin'ny alalan'ny fampiofanana FR ny 5-wk efa tranainy, ary nomena kanelina ho any amin'ny valin'ny fahatelo (ICV) fahatelo. Taorian'ny herinandro fanarenana, ny fanamafisana ny fitsanganana amin'ny fitsaboana amin'ny fitsaboana angiotensin II (jereo Figlewicz et al., [2006]), ary ny fivoriana iray momba ny fampiofanana FR, dia nanomboka ny laharam-pahamehan'ny PR ny tenany. Taorianan'ny PR Day 1, voatondro ho an'ny iray amin'ireo tarika roa ny raty ka tsy midika izany fa tsy misy fahasamihafana eo amin'ny tarika roa (fiara CSF artificial, aCSF, na AGRP, 1 μl amin'ny 2 nmol). Nahazo tsindrona ny CSF (n = 0.01) na AGRP (n = 8) tamin'ny andro PR 7, 2, ary 5. Ny fitomboan'ny sakafo isan'andro dia nitazona nandritra ny fotoana fanofanana PR.

Ny vokatry ny taonan'ny fahaleovan-tena

Nampitaha ny fitondran-tena eo amin'ny fitantanan-draharaha eo amin'ny ratosan'ny pubertal sy ny tanora zokiny izahay, ny sakafo koba na ny sakafo 31.8% fat. Ny ratana dia naharitra roa herinandro nifanaraka tamin'ny VAPSHCS vivarium (3-5wk na 8-10 wk). Nomen'izy ireo sakafo nandritra ny vanim-potoana fitsapana / fampiofanana (4 wk). Araka izany, toy ny tamin'ny fanandramana voalohany, dia nodinihina ny ratification pubertal tao amin'ny 5-8 wk taona. Ny tanora zokiny dia nianatra tamin'ny 10-13 wk taona.

Famaritana ny vatana

Ny famoronana ny vatany dia nodorana tamin'ny fampiasana spectroscopie mahazatra hafahafa (QMR [Nixon et al., 2010]) mba hamaritana ny voka-dratsin'ny rano amin'ny vatan'ny olona, ​​izay iantsoana ny vatana amin'ny vatana. Ny biby dia napetraka tao amin'ny trano fantsom-panafody tsy nafenina, ary avy eo napetraka ao amin'ny milina QMR ny mpihazona ho an'ny fanandramana minitra 2, izay manatontosana ny fandrefesana ny triplicate. Ny tahiry dia voavonjy ao amin'ny solosaina mifandray (EchoMRI, Echo Medical Systems, Houston, TX) mba hanampiana tsy tapaka ny rano, ny tavy, ary ny masirasira manontolo.

Fitsaboana fandeferana glucose intravenous (IVGTT)

Ny IVGTT dia nahitana fihinam-boto tamin'ny koveta IV mitambatra, izay nifady hanina alina talohan'ny fandalinana, nampiasa fomba fanao mifototra amin'ny Frangioudakis, Gyte, Loxham, & Poucher (2008). Ny dipoavatra misy tsiranoka roa dia napetraka roa herinandro mialohan'ny fandalinana, araka ny fomba ambaranay (Figlewicz et al., 2009). Ny santionan-tsipika dia nalaina tao amin'ny t-10 min (0.5 ml mba hamaritana ny insuline sy ny glucose, amin'ny fotoana rehetra) sy ny t0 min. Ny raty dia nahazo fampidiran-kibon'ny 1 gmcose / 2ml / kg amin'ny 15-20 segondra ary manaraka ny mln 0.5 avy amin'ny saline. Ny santionan'ny ra dia nalaina tao amin'ny 5, 15, 30, 60, 90, ary 120 min. Noho ny fampidirana ny catheter mandritra ny dingana (noho izany, ny tsy fahafahana mahazo ny mombamomba ny ra), ny endritsoratra farany amin'ny navoakan'ny baseline / IVGTT dia ny 7-8 noho ny ratosan'ny fofona ary ny 8 noho ny saka mihinana sakafo 31.8%table 3). Voasoritra ny insuline Plasma amin'ny fampiasana Linco rat Insulin RIA kits (# RI-13K sy SRI-13K, Linco) ary ny glucose plasma dia voafaritra amin'ny YSI Glucose Analyzer). Ny faritra eo ambanin'ny curve (AUC) ho an'ny valiny avy amin'ny baseline dia novaina tamin'ny 5 min sy 120 min. Ny mari-pandrefesana HOMA dia novaina ho fifadian-kanina (glucose [mM] × insulinm [U / L]) / 22.5 ary nozaraina tamin'ny fampiasana ny fifadian-kanina natao ho an'ny insuline sy glucose.

  

table 3

Metabolic Parameters¹

Fifadian-kanina metabolika mifangaro

Ratsy avy amin'ny fanandramana 1 dia nifady hanina nandritra ny alina talohan'ny euthanasia, andro vitsy taorian'ny nahavitan'ny IVGTT. Nalaina am-pahatsorana ny ratana tamin'ny fisidinana isoflurane ary navotsotra. Nesorina haingana ny atidoha ary nokapohina tamin'ny azota tao amin'ny siramamy mba hanombohana ny fitsaboana mipnolojika mRNA sy ny nucleus catecholamines. Ny plasma serba na seramika dia ampiasaina mba hamantarana ny fisotroana insuline, glucose, leptine, ary triglycerides. Ho an'ny triglyceride, ny PHP sy ny mpahay siansa momba ny triglyceride Point Scientific # T7531-400 (Fisher # 23-666-418) sy ny fitsipika KIT # 7531-STD (Fisher # 23-666-422) dia nampiasaina ary ny 3 μl of serum dia notsongaina tamin'ny dika mitovy. Ny Plasma leptin dia nombana tamin'ny Millipore Linco RIA Kit # RL 83K.

Catecholamine HPLC Methods [Davis et al., 2008]

Nopotehina ny ratim-panafody isoflurane, ary nesorina haingana ny atidoha, nafangaro ary nitahiry tao amin'ny -80 ° C. Ny isam-batan'olona mikirakira ny mikraoba (NAcc) dia avy amin'ny biby tsirairay. Na dia nokarakaraina be aza ny fikarakarana mba hanamaivanana ny tsy fahampian-tsakafo amin'ny faritra manodidina ny atidoha, noho ny natiora sy ny haben'ny isam-borona tsirairay dia tsy namela antsika hanavaka ny faritra misy azy (izany hoe NAcc core vs. shell) ao anatin'ny NAcc. Ho an'ny famolavolana homogenization amin'ny fampiasana homogenizer ho an'ny sela (Biologics, Gainesville, VA), dia misy vahaolana antioxidant (0.4 N perchlorate, 1.343 mM ethylendiaminetetraacetic acid (EDTA) sy 0.526 mM metabisulfite ) Ny ampahany kely amin'ny homogenat ny sela dia ravina ao amin'ny 2% sodium dodecyl sulfate (SDS) (w / v) ho an'ny famaritana proteinina (Pierce BCA Protein Reagent Kit; Rockford, IL). Ny fampiatoana sisa tavela amin'ny 14,000 g amin'ny 20 minitra ao amin'ny tobim-pifamoivoizana mafana. Ny efi-trano dia natokana ho an'ny HPLC.

Ireo samples dia nosarahina tamin'ny tsanganana Microsorb MV C-18 (5 Am, 4.6_250 mm, Varian, Walnut Creek, CA) ary nodinihina tamin'ny DA, 3,4-dihydroxyphenylacetic asid (DOPAC) sy ny homovanillic asid (HVA), izay samy marika ny fahasimban'ny dopamine, 5-HT ary 5-HIAA. Ny finday dia hita amin'ny fampiasana finday iray mpikaroka kameranika 12 (CoulArray 5200, ESA, Chelmsford, MA) mifandray amin'ny rano 2695 Solvent Delivery System (Rano, Milford, MA) amin'ny fepetra manaraka: ny tahan'ny 1 ml / min. ny fahafaha-mahita ny 50, 175, 350, 400 ary 525 mV, ary; ny fanimbana ny mety ho an'ny 650 mV. Ny hetsika finday dia ny vahaolana 10% methanol tao H₂O X, 21 mg / l (0.1 M) Na10.65HPO0.075, 2 mg / l (4 M) heptanesulphon acid and 176 mg / l (0.8 mM) EDTA at a pH of 36. Zavatra tsy ampy / fanononana tsy ampy amin'ny teny alemaina Amin'ny tenim-pirenena hafa English² amin'ny 0.97. Ny samihafa fanaraha-maso ny kalitao dia notsongaina tamin'ny hazakazaka tsirairay mba hiantohana ny kalitao HPLC.

Orexigenic peptides mRNA qPCR

Nofarananay ny fanondroana ny peptide hypothalamique izay mamporisika ny sakafo ary tafiditra ao anatin 'ny antony manosika sy ny valisoa (Figlewicz & Sipols, 2010): neuropeptide Y (NPY [ Hahn, Breininger, Baskin, & Schwartz, 1998; Jewett et al., 1995; Kelley, Nannini, Bratt, & Hodge, 2001]); peptide agouti mifandray (AGRP [Aponte, Atasoy, & Sternson, 2011; Barnes, Argyropoulos, & Bray, 2010; Broberger et al., 1998; Hagan et al., 2000; Hahn, Breininger, Baskin, & Schwartz, 1998; Kaushik et al., 2011; Krashes et al., 2011; Rossi et al., 1998; Tracy et al., 2008]); and orexin (Cason et al., 2010; Choi, Davis, Fitzgerald, & Benoit, 2010). Ny voalavo dia novolavolaina tamin'ny fanatoranana isoflurane, ary nesorina haingana ny ati-doha, natsatoka ary notehirizina tamin'ny -80 ° C mandra-pitrandrahana azy. Ny hypothalamus medial sy lateral dia namboarina ho toy ny sakana iray mampiasa fiaramanidina fihenan'ny AHP-1200CPV (Thermoelectric Cooling America, Chicago, Il) izay mitazona hafanana 12 ° C tsy tapaka mandritra ny fizotran'ny fizarazarana. Ny totalin'ny RNA avy amin'ny teboka microdissected dia natokana ho an'ny Trizol reagent (Invitrogen, Carlsbad, CA) ary nodiovina tamin'ny alàlan'ny RNeasy Mini Kit (Qiagen, Valencia, CA) araka ny torolalan'ny mpanamboatra. Ny totalin'ny RNA dia notsaboina mba hanesorana izay mety ho fandotoana ADN genomika amin'ny alàlan'ny RNase free DNase (Promega, Madison, WI), ary nisaina tamin'ny alàlan'ny spectrophotometer NanoVue (GE Healthcare, Cambridge, UK). Ny kalitaon'ny RNA dia nohamafisin'ny electrophoresis gel agarose mahazatra. Ny ADN fanampiny (cDNA) dia avy eo retrotranscription (RT) avy amin'ny 1-2 μg of total RNA amin'ny fangaro fangaro hexamers sy oligo DT priming amin'ny fampiasana iScript cDNA Synthesis Kit (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA). Ny valiny tsy misy retrotranscription (tsy misy RT) dia nomanina isaky ny santionany ihany koa mba hifehezana ny fahalotoan'ny ADN genomika. Ny cDNA sy ny tsy-RT fanaraha-maso dia notampenana, ary 5-10 ng modely cDNA isaky ny santionany dia nampiasaina handrefesana ny fitenenana mRNA an'ireo génie voafantina tamin'ny alàlan'ny PCR be mpamaky amin'ny fampiasa ny MyIQ Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad, Hercules , CA) .Ny refy fandrefesana isaky ny santionany dia natao tamin'ny takelaka fantsakana iCycler 96 mahazatra, miaraka tsy misy fanaraha-maso modely (NTC) hahitana ny fahalotoan'ny hazo fijaliana, amin'ny habetsan'ny fanehoan-kevitra 20 μl misy 10 μl 2 × iQ Sybr Green Supermix (Bio- Rad, Hercules, CA), 2 μl 0.2-0.5 μM isaky ny primer, rano DEPC 3 μl, ary modely 5 μl. Ny fanehoan-kevitra qPCR rehetra dia nisy famakafakana miolakolaka mba hiantohana ny famaritana ny famantarana. Ny fitenenana mifandraika amin'ny zana-pizahantany tsirairay dia nisaina tamin'ny alàlan'ny extrapolation ho an'ny tsipika iray mahazatra izay mihazakazaka isaky ny takelaka ary azo avy amin'ny fanalefahana andiam-panandramana iray santionan'ny referansa cDNA, ary namboarina ho toy ny fanehoana ireo fototarazo (phicoprotein-kazo ribosomal asidra 36B4 ho an'ny fitenenana ao amin'ny sela hypothalamic, ary proteinina mitochondrial ribosomal L32 ho an'ny fitenenana ao amin'ny nucleus accumbens). Ireto manaraka filaharana manaraka ireto (IDT, San Diego, CA) dia nampiasaina hanamafisana ny prepro-orexin, NPY, ary AGRP: Prepro-orexin, Forward: 5'-TTCCTTCTACAAAGGTTCCCT-3 ', 5'-GCAACAGTTCGTAGAGACGGCAG-3 ′; NPY: Mandrosoa, 5- TACTCCGCTCTGCGACACTACATC-3 ′; Miverina: 5'-CACATGGAAGGGTCTTCAAGCC-3 '; AGRP, Mandrosoa: 5'-GCAGAAGGCAGAAGCTTTGGC-3 '; Miverina: 5'-CCCAAGCAGGACTCGTGCAG-3 ′.

cFos Immunocytochemistry (ICC) sy Quantitation

Ny Fluorescence ICC dia nampiasaina mba hamantarana ireo vatana sela FOS-positive sy AGRP-positive ao amin'ny hothothalamus medial, araka ny fomba fiasa napetraka (Figlewicz et al., 2011). Tamin'ny andro farany (Andro 10 PR), napetraka tao amin'ny efitranon'ny fitantanan-tena toy ny mahazatra ny voalavo, nandritra ny 90 min. Vantany vao vita ilay fivoriana 90 min lasa teo, dia nohosorana lalina tamin'ny sakafon'ny isoflurane ny voalavo ary namboarina niaraka tamin'ny NaCl 0.9% narahina vahaolana paraformaldehyde mangatsiaka 4%. Ny fotoana hanaovana ny fanatoranana sy ny euthanasia dia nifototra tamin'ny fotoana nahalalana ny tampon'asan'ny proteinina cFos tamin'ny hetsika 90-120 min-post. Ka ny fanehoana ny cFos dia hita taratra ny fampahavitrihana ny CNS amin'ny fanombohan'ny asa fiasa fa tsy vokatry ny biby miaina ilay asa. Nesorina ny atidoha ary napetraka tao amin'ny paraformaldehyde andro maromaro, avy eo napetraka tao amin'ny sukrosa-PBS 20%, avy eo ny vahaolana sucrose-PBS 30%. Ny ati-doha dia napetraka tao amin'ny cryostat (Leica CM 3050S cryostat) ho an'ny immunohistochemistry. Nampiasainay ny fomba fiasa napetrakay mba hamaritana ny proteinina cFos tsy voatanisa amin'ny faritra atidoha (Figlewicz et al., 2011). Ny sila-tandroka 12 μm dia nampidinina in-telo tao amin'ny salady phosphate (PBS, OXOID, Hampshire, Angletera). Ny fizarana dia nosasana ho an'ny 20 min amin'ny rano 100% ethanol / DI (50%, v / v) avy eo avy amin'ny PBS misasava, avy eo nosakanana amin'ny 1 ora amin'ny hafanan'ny efitra ao amin'ny PBS misy 5% normal goat or serum donkey. Nisasa imbetsaka imbetsaka ny seks ao amin'ny PBS ary nidaraboka tamin'ny 4 ° C nandritra ny vahaolana antibody voalohany tao PBS. Ny divay dia nosasana intelo tao amin'ny PBS ary avy eo nidona tao anaty haizina tao amin'ny efitra fisakafon'ny efitra tao amin'ny vahaolana antibody faharoa natao tao PBS nandritra ny ora 1. Nositranina indray tao amin'ny PBS indray ny fizarana ary nitaingina rindrina ary napetaka tao amin'ny ordinateur Vectashield (Medium, Vector, Burlingame, CA). Sary nalaina nalaina tamin'ny sehatra digitale nalaina tamin'ny alalan'ny mikrôskôpôfan'ny fluorescence Nikon Eclipse E-800 mifandraika amin'ny fakantsary fakantsary digitale Qimaging amin'ny alàlan'ny rindrambaiko NIS Elements (Nikon).

Araka ny fandinihan'ny PCR izay mampiseho ny fitombon'ny mRNA mRNA, dia nifantoka tamin'ny faritra fitsaboana medaly, indrindra ny ivon'ny ventromedial sy ny bakteria boribory (ARC)). Ireo fizarana 12 μm, atsy Atlas, dia novaina ho fivoahana sy fitomboana cFos ao amin'ny fizarana sy faritra mifangaro, mifototra amin'ny atlas of Paxinos sy Watson [2005]. Ho an'ny be loatra (amin'ny 40 × fampitomboana), dia voafaritra ny faritra atlas. Ny rindrambaiko NIS Elements (Nikon) dia nampiasaina mba hisamborana sary iray momba ny faritra tiana. Nisy faritra iray voafaritra ho an'ny fitomboana sy ny fatorana noho ny toetoetra tsara. Ny faritra sy dingana mitovy (fampiasana ny mari-pana) dia nampiasaina ho an'ny fizarana avy amin'ireo vondrona mpihinana, ary ny raki-tsarimihetsiky ny sela positive (quantitation) dia natao tamin'io fivoriana io ho an'ireo vondrona mpitsabo, mba hisorohana ny fiovan'ny fivoriana eo amin'ny sehatra. Ho an'ny famakafakana statistika, dia nalaina avy amin'ny rati'ny tsirairay ny isa raha tsy misy ny fizarana na feno amin'ny faritra tsirairay avy; Ny antontan'isa ho an'ny faritra iray dia tsy nalaina avy amin'ny raty raha tsy misy ny solontenan'ny bilateral eo amin'io faritra io.

Ankoatry ny fikajiana cFos dia notontosaina ny immunohistochemistry marobe miisa roa ho an'ny cFos sy AGRP. Satria tsy te hanakorontana ny fomba fiasan'ny biby izahay, dia tsy notsaboina tamin'ny colchisin izy ireo hanatsara ny fahitana ny AGRP. Noho izany dia azo atao ambanin-javatra ny fanaovana sary an-tsaina ireo neuron-tsaina AGRP. Ny fomba fandokoana roa ho an'ny AGRP dia azo ampitahaina amin'ny fanandramana ny cFos-immunoreactivity irery, afa-tsy ireo faritra ireo dia voasakana mandritra ny adiny iray amin'ny hafanan'ny efitrano ao amin'ny serum ampondra PBS-5%. Avy eo, ny fifangaroan'ny fos-Ab sy ny AGRP voalohany dia ampiasaina amin'ny fametahana indray alina amin'ny 4 ° C; Ary toy izany koa, ny antibodies faharoa dia tao anaty vahaolana iray ihany ary nisondrotra nandritra ny adiny iray tao anaty haizina tamin'ny hafanan'ny efitrano. Ny fanandramana fanatsarana voalohany dia natao mba hamaritana ny fanalefahana ny antibodiôma voalohany. Antibody voalohany ampiasaina dia ny anti-cFos bitro (1: 500) (sc-52) sy anti-AGRP (1: 100) (18634) (Santa Cruz Biotechnology, Inc., Santa Cruz, CA). Antiozika faharoa ampiasaina ny anti-bitro ampondra Cy3 (Jackson Immunoresearch; West Grove, PA), ary IgG fluor 488 ampondra anti-osy IgG (Molecular Probes, Eugene, OR); ny antibiotika ambaratonga faharoa dia natsipy tamin'ny 1: 500.

Statistical analyzes

Ny angon-drakitra vondrona dia aseho ho toy ny fahadisoana mahazatra ± an'ny mean (SEM) ao amin'ny lahatsoratra, Takelaka ary sary. Ny manan-danja dia faritana amin'ny p ≤ 0.05. Ny fampitahana statistika dia atao eo amin'ny vondrona andrana, aseho eo ambanin'ny "Valiny" amin'ny fampiasana ny 't'test an'ny mpianatra (ohatra, ny sakafo, ny taonany, na ny fampitahana ny fitsaboana). Ny "normalisation" data dia faritana rehefa ampiasaina.

Ny vokatry ny fihinanana sakafo matsiro be dia be dia be noho ny fitiavan-tsolika ho an'ny sucrose

Ny sakafo dia natokana ho an'ny sakafo 31.8% matavy nandritra ny wks 5-8, raha ny fivoriana momba ny fizaham-pahasalamana, dia nanana fanentanana lehibe ho an'ny sucrose, raha oharina amin'ny ratosoana. Araka ny aseho ao Sary 1a, dia tsy misy fahasamihafana ny fahaizamanao nandritra ny fampiofanana FR voalohany (averina ny FRDays 1-10 mavitrika mavitrika, 38 ± 5 vs 39 ± 2 ho an'ny chow vs. 31.8% fat dièse). Na izany aza, rehefa navadika ho lahasa goavana kokoa ny voalavo, dia nisy ny fampitomboana ny isan'ny milina mavitrika, ary ny valisoa azo avy amin'ny sucrose, fa tsy amin'ny totalin'ny fivoriana manontolo (Figure 1b). Tsy nisy fiantraikany teo amin'ny fitsaboana tratry ny fitsaboana tamin'ny isan'ireo tsindry tsy misy entana. Rehefa voaloto ny sakafo dia ny sakafo matavy be mandritra ny XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXx Noho izany, dia toa tsy misy fihenan'ny fitondran-tena mahatsara ny sakafo matsiro be loatra izay narehitra nandritra ny fe-potoana peri-pubertal. Ny angon-drakitra PH an'ny cohort dia voafintina ao table 2. Mba hanombohana ny famelabelarana ny rafitra fandraisana anjara amin'ny fitomboan'ny voankazo vokarin'ny vokatra ara-tsakafo dia nataonay maromaro ny metabolika sy ny CNS.

  

Figure 1

Ny PR manolo-kevitra amin'ny valim-pifidianana dia mitombo amin'ny ratios peripubertal manome sakafo 31.8% fat (n = 8). 1a. Amin'ny alalan'ny fivoriana FR, dia tsy misy fiantraikany ny fihinanana, fa ny vokatra ara-tsakafo dia miharihary rehefa miverina amin'ny paradigma PR ny rat. 1b. Data are ...

  

table 2

Ny vokatry ny Peri-Pubertal Diberiana Diberiana momba ny fampiroboroboana ny fandrosoana amin'ny tsimok'aretina

Ny vokatry ny fihinanana sakafo matavy be loatra amin'ny metabolika

Vantany vao vita ny fitsapana amin'ny fitondran-tena, ny vatana dia mifototra amin'ny raty izay nanampy ny fitsaboana amin'ny alàlan'ny sakafo sy ny fitondran-tena ao amin'ny wks 5-8. Ny raty dia nahazo fitsaboana tranainy (IVGTTs) ho an'ny fanadinana glucose (IVGTTs). Taorian'izay, ny plasma fifadian-kanina terminal sy serum dia nahazo ny fepetra fanampiny metabolika. Araka ny aseho ao table 3, tsy misy fahasamihafana eo amin'ny vatana, ny lanjan'ny vatana, ny fifadian-kanina ny insuline na ny glucose, ny fahatsapana ny insuline (HOMA) na ny valin'ny IVGTT, eo anelanelan'ireo ratifaly sy sakafo matavy. Tsy misy fahasamihafana eo amin'ny roa tonta ny fifadian-kanina momba ny fifadian-kanina ny leptinina sy ny triglyceride. Noho izany, na dia nisy fiantraikany manan-danja teo amin'ny antony manosika ho an'ny sucrose aza ny fitsaboana, dia mitaratra ny valin'ny fitondran-tena ao amin'ny raty matavy be loatra izay milefitra loatra.

Ny vokatry ny fihinanana sakafo matavy loatra amin'ny CNS homeostatic ary ny valin'ny neurochemistry

Ankoatra ny fandrefesana metabolika farany, ny atidoha avy amin'ny cohort izay nahitana fampidirana sakafo sy fampiofanana momba ny fitondran-tena nandritra ny herinandro 5-8 dia nodinihina ho an'ny nucleus accumbens amine profiles (n = 4 isaky ny taom-fisakafoanana) na mRNA ny tahan'ny hypochalamika orexigenic peptides. Araka ny aseho ao table 4, tsy misy fiantraikany goavana amin'ny fihinanana fatim-bolo lehibe eo amin'ny dopamine, ny norepinephrine, na ny metabolites serotoninina ao amin'ny nucleus accumbens, toeran'ny valisoa valisoa sy ny asa fanentanana (Ikemoto & Panksepp, 1996; Kelley & Berridge, 2002) izay misy ny rafi-pitantanana neurotransmitter tsirairay avy. Ao anatin'ny fitrandrahana hypothalamic, ny refin'ny mRNA an'ny peptides orexigenic, NPY, AGRP, ary orexin dia refesina. Ny fironana matanjaka nefa tsy misy dikany amin'ny fampitomboana ny AGRP ao amin'ny voalavo sakafon-tavy dia voamarina ao anatin'io vondrona io (n = 8 ho an'ny sakafo roa); noho izany dia naverinay ny paradigma fampiofanana momba ny sakafo / fitondran-tena amin'ny koohort fanampiny ary nandrefesana ny NPY, AGRP, ary orexin mRNA ao amin'ny hypothalamus. Ao amin'ny cohorts mitambatra, dia nahita fiakarana lehibe (p <0.05) amin'ny AGRP mRNA amin'ny voalavo nanome sakafo sakafo matavy be vs. fanaraha-maso chow (Figure 2), saingy tsy misy fiovana lehibe amin'ny fanehoan-kevitra NPY na orexin. Ho fanombanana ny fifandraisana mety eo amin'ny fomba fitenin'ny AGRP sy ny fomba fitantanana ny tenany, dia nandinika ny cFos sy ny AGRP ny neurons immunopositive amin'ny hypothalamus mediobasal. Vokatry ny voalavo ny sakafom-bolo na 31.8% fat diet; Ny sasany dia noraisina tamin'ny alalan'ny protocol protocol d'autorité (herinandro 5-8) ary ny hafa dia nokarakarain'ny fanaraha-maso fitondrantena. Sary 3a dia maneho ohatra amin'ny fiaraha-miasa amin'ny cFos sy ny AGRP amin'ny neuron bakteria boribory. Fintino ao amin'ny table 5, ny fampidirana ny neurons AGRP (fanehoana ny cFos-ICC sy ny AGRP-ICC ao anatin'ny sela) dia mifandraika amin'ny asa fitantanana ny tenany. Izany dia aseho amin'ny Figure 3b, izay isehoan'ny isan'ny neuron-nerveur (cFos-positive) ho toy ny sela ny sela amin'ny neuronaly, na ny isan-jato amin'ny neuron-n'ny AGRP: misy ny fampidirana ny neurons AGRP ao amin'ny raty manara-maso ny sucrose, , ao amin'ny vondron'olona ifotony. Ny fampitoviana amin'ny fitsaboana amin'ny alàlan'ny fitsaboana amin'ny isa ny neurons AGRP navotsotra tao amin'ny vondron'olona miandraikitra ny fizakan-tena sy ny fifehezana fanaraha-maso dia naneho ny fironana izay tsy nahatratra ny statistika manan-danja (chow, p = .078; 31.8% fat diet, p = .073) . Ny zava-dehibe dia tsy vitan'ny fampidirana ireo angona ireo ny AGRP ny fampidiran-tsiran-kevitra neuronal amin'ny fitondrantenan'ny tenany, fa noho ny fandaharam-potoana momba ny fandrefesana cFos (90 minitra taorian'ny nandraisan'ny voalavo tao amin'ny efitranon'izy ireo), ny expression cFos dia maneho ny asan'ny neurons AGRP fanantenana, na amin'ny firotsahana an-tsehatry ny fitantanana ny tenany. Nisy ny fiheverana tsy dia manan-danja amin'ny fitomboan'ny neurons AGRP-positive ao amin'ny vondron'olona miandraikitra ny fizakan-tena (fifandimbiasam-bava, p = 0.16). Ao anatin'ireo voalavo ireo, izay nahitana ny fihenan'ny hafanana teo amin'ireo antokom-pihinanana, dia nifanaraka koa ny isan'ny neurons AGRP. Tsy misy fiantraikany amin'ny fitsaboana amin'ny alika irery amin'ny alàlan'ny neurons AGRP-positive ao amin'ny fitsaboana amin'ny fitondran-tena.

  

Figure 2

Ny vokatry ny sakafo matavy 31.8% amin'ny fitenenana mRNA peptide hypothalamic medial. Ny data dia voalamina ho an'ny voalavo be sakafo matavy (n = 17) vs. ny fifehezana ny chow (n = 16). Ny AGRP mRNA dia avo be (p <0.05).

  

Figure 3

Famindrana ny neurons AGRP amin'ny fanombohan'ny fitantanana tena mahomby. 3a. Ny fiarahan'ny cFos sy ny AGRP amin'ny neuron bakteria bakteria, ny 60x. 3b. Ny isa azo ampiasaina (cFos-immunopositive) AGRP-immunopositive neurons amin'ny mediobasal hypothalamus ...

  

table 4

Ny Nucleus Accumbens Amine Metabolites

  

table 5

Agrp Neuron Activation: Ny fitsaboana sy ny fitondran-tena

Ny vokatry ny fitantanana ny AGRP momba ny antony manosika ny sucrose

Ny fandikana an'io fitadiavana io dia ny fanehoana ny AGRP ao amin'ny fombam-patsaram-pahaizan'ny puberta dia singa manan-danja eo am-pelatanana ny fitombon'ny siramamy amin'ny fikarakarana ny ratram-po matavy. Mba hanamafisana ny fahaiza-manaon'ny AGRP hampitombo ny motivation ho an'ny sucrose, dia ny AGRP no natsangana tamin'ny alàlan'ny valim-panafody fahatany amin'ny raty peri-pubertal nandritra ny fizarana PR an'ny paradigma. Io fitiliana dipoakan'ny AGRP io dia teo ambanin'ny tokonam-baravarana noho ny fanentanana ny tsimok'aretina nandritra ny tapa-bolana tao amin'ny paradigma PR, saingy nitombo ny fitomboan'ny fitantanana tena izy, araka ny aseho amin'ny Figure 4. (Mariho fa ny valin'ny sucrose tsirairay dia manana kalôria ao 0.1 kcal, noho izany dia manampy ny kalôria tsy dia mahafa-po ny fitantanana ny fizakan-tena mahomby amin'ny fitaterana isan'andro.) table 6 dia mampiseho ny angon-drakitra momba ny fampitam-baovao amin'ny alàlan'ny paradigma 9 andro, miaraka amin'ny AGRP na aCSF ny ICV amin'ny Days 2, 5, ary 8. Ao amin'ny fombam-panahin'ny AGRP, ny isan'ireo milina mavitrika mavitrika dia nitombo tsikelikely nandritra ny PR Days 2-10 (p = 0.03), ary tamin'ny andro tsy niriana (p = 0.048) miaraka amin'ny fironana mankany amin'ny fitomboana (averina) andro fampidirana. Ankoatra izany, ny Time Stop (izay maneho ny fotoana manontolo nialana tamin'ny asa fanatanterahana ny fizakan-tena) dia nihanitombo be tamin'ny andro tsy niriana (p = 0.02) miaraka amin'ny fironana mankany amin'ny fitomboan'ny ankapobeny, ary amin'ny andro fitsaboana. Ny isan'ireo valim-bolo saro-bazaha dia nihamafy tamin'ny ankapobeny nandritra ny PR Days 2-10 (p = 0.03). Tsy misy fiantraikany amin'ny fitsaboana AGRP amin'ny fihazonana tsy mavitrika midadasika, raha ampitahaina amin'ny fanaraha-maso ny CSCS, na eo anelanelan'ny fitsaboana sy ny tsy fisidinana. Ny vokatra dia manohana ny fandikana ny vokatry ny AGRP izay mitohy mba hampitombo ny fitantanana ny tombontsoa azo avy amin'ny fitondran-tena: ny ratiny dia nanosika bebe kokoa ny fitaovana mahomby, nahazo valisoa fanampiny, ary nandany fotoana bebe kokoa hanaovana ilay asa.

  

Figure 4

Ny AGRP (ICNUMX nmol) fahatelo (ICV) dia mampirisika ny fizakan-tena ao amin'ny paradigma PR, saingy tsy misy fiantraikany amin'ny sakafo isan'andro mandritra ny fotoam-pandalinana (PR Days 0.01-2, miaraka amin'ny famoahana ny andro 10, 2, ary 5) . Ahitana ny angona AGRP (n = 8) ...

  

table 6

Ny vokatry ny ICR AGRP vs. aCSF momba ny fampandrosoana ny vokatra ho an'ny sukrose

Ny fiantraikan'ny fiainana andavanandro amin'ny safidy sy ny antony manosika ho an'ny sucrose

Nandritra ny fanandramana farany, nanombatombana izahay raha toa ny mason-tsoa ho an'ny sucrose dia manavaka ny ratification pubertal sy adult. Voalohany indrindra dia nomena fitsapam-pahaizana saro-bidy ny 5-sy 10-wk. Ny safidy vahaolana avy amin'ny 0 ka hatramin'ny 20% sucrose, alohan'ny hanombohan'ny fanandramana sy ny fampiofanana momba ny fitantanana ny tenany. Araka ny aseho ao Sary 5a, ary tsy mifanaraka amin'ny hita tatitra hita ao amin'ny boky, ny voalavo pubertal dia toa manintona kokoa noho ny tovovavy tanora: ny voalavo ankapobeny teo aloha dia nanana ny tsimok'aretina 20% sucrose, fa ny voalavo voalavo kosa dia mampiseho ny tsimok'aretina amin'ny 15% sucrose. Taorian'izay dia samy nisara-panambadiana teo anelanelan'ny rato sy ny sakafo matavy nandritra ny fampiofanana sy ny fitsirihana ny tenany ny roa tonta. Nisy ny fiakarana kely maromaro fa tsy dia lehibe loatra tamin'ny isan'ny milina mavitrika nataon'ny mpitsidika peri-pubertal vs. adults (45 ± 3 vs. 37 ± 2, p = 0.05) tamin'ny faran'ny FR sessions, tsy misy fahasamihafana amin'ny isa valisoa be dia be na tsindrim-bary amin'ny mpitifitra tsy mavitrika. Araka ny aseho ao Figure 5b, dia nisy ny fiantraikany lehibe tamin'ny vanim-potoana nandritra ny fotoam-pirahalahiana, nandritra ny fotoam-pampianarana PR, ary nahitana fihenam-bidy mavesa-danja mialoha ny lahatenin'ny pubertal (n = 15) vs tanora (n = 14) (2-fomba ANOVA, PRDay × age; Ny vokatry ny taonany, p = 0.017, tsy misy fiantraikany mahaleotena amin'ny PRDay, tsy misy fifandraisana misy dikany). Na izany aza, dia nisy fiantraikany tamin'ny fiantraikany lehibe tamin'ny taon-jaza tamin'ny toe-java-manan'aina matavy saingy tsy nahomby ny statistika (p = .13). table 7 ny lisitry ny fitondrantenan'ny PR: ankoatra ny milina mavitrika mavitrika, ny ratina peri-pubertal dia nahazo valisoa be dia be ary nahitana ny firoboroboan'ny Stop Time. Ankoatr'izany, ny fihenan'ny raty peri-pubertal dia nanana fiakarana kely nefa manan-danja teo amin'ny tsindry momba ny paikady tsy mavitrika (na tsy dia mahafa-po), na dia ho an'ny peri-pubertal sy olon-dehibe raty aza, dia ny isan'ny milina tsy mavitrika dia ny 10% ny milina mavitrika mavitrika. Ireo vokatra ireo dia maneho fa ny ratin'ny peri-pubertal dia aleony ary hikaroka bebe kokoa ny sakafo mamy, ary ny vokatr'izany dia mety hiteraka fiovan'ny ronono matavy.

  

Figure 5

Ny tovovavy tanora dia nampitombo ny fanentanana ho an'ny valisoa azo avy amin'ny siramamy raha oharina amin'ny ratsy olon-dehibe. 5a. Fanandramana ho an'ny sûrrose ho an'ny zazakely (peri-pubertal, n = 15) ary ny fetin'ny tanora (n = 14). Ratsy dia manana 30 minitra mba hisotro amin'ny sokajy (0-20% sucrose). ...

  

table 7

Ny vokatry ny taona eo amin'ny Progressive Ratios Performance^a for Sucrose

Ity fikarohana ity dia tohanan'ny NIH manome DK40963. Dianne Figlewicz Lattemann dia manam-pahaizana momba ny asa fikarohana momba ny asa, biomedical research laboratory, Department of Veterans Affairs Puget Sound Health System, Seattle, Washington. Stephen Benoit dia tohanan'ny NIH DK066223 sy Ethicon Endosurgery Inc. Ireo mpanoratra dia misaotra ny Dr. Tami Wolden-Hanson ho fanohanana ny famaranana ny vatana; Dr. William Banks sy Lucy Dillman ho fanohanana ny fandrefesana triglyceride; ary i Amalie Alver, sy i Samantha Thomas-Nadler mba hanampy amin'ny fianarana amin'ny fitondran-tena.

• Andersen SL, Teicher MH. Fiatrehana, vanim-potoana mafampana ary zava-mitranga matotra amin'ny fahaketrahana eo amin'ny tanora. Trends in the Neuroscience. 2008, 31: 183-191. [PubMed]
• Aponte Y, Atasoy D, Sternson SM. Ny neuron AGRP dia ampy hamolavolana haingana ny fihetsika sakafo ary tsy misy fiofanana. Neuroscience Nature. 2011, 14: 351-355. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Barnes MJ, Argyropoulos G, Bray GA. Ny fihinanana sakafo matavy be dia be, fa tsy fifandrohizana aorian'ny fanentanana ny receptors mu opioid dia voasakana amin'ny totozin'ny AgRP knockout. Fikarohana momba ny atidoha. 2010, 1317: 100-107. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Bolaños CA, Barrot M, Berton O, Wallace-Black D, Nestler EJ. Ny fitsaboana methylphenidate mandritra ny fiterahana sy ny faharetan'ny fotoana dia mampihetsi-po ny fitondran-tena amin'ny fihetseham-po ara-pihetseham-po amin'ny adulthood. Biolojika. 2003, 54: 1317-1329. [PubMed]
• Bolaños CA, Glatt SJ, Jackson D. Fiterahana ny dopaminergique medikaly amin'ny raty periadolescent: fanadihadiana amin'ny fitondran-tena sy ny neurochemical. Fikarohana fikarohana momba ny atidoha. 1998, 111: 25-33. [PubMed]
• Brandon CL, Marinelli M, Baker LK, White FJ. Ny fihanaky ny fihetseham-po sy ny vulnerabilita amin'ny kôkainina manaraka ny fitsaboana methylphenidate amin'ny fitsaboana adolescents. Neuropsychopharmacology. 2001, 25: 651-61. [PubMed]
• Brandon CL, Marinelli M, White FJ. Ny fitomboan'ny adolescent amin'ny methylphenidate dia manatsara ny asan'ny raty midbrain dopamine neurons. Biolojika. 2003, 54: 1338-1344. [PubMed]
• Broberger C, Johansen J, Johansson C, Schalling M, Hokfelt T. Ny neuropeptide Y / agouti proteinina (AGRP) ny neuropeptide ao amin'ny siramamy ao amin'ny atidoha, amin'ny tazomoka mahazatra, tsy voatsabo, ary monosodium glutamate. Fitsipiky ny Akademia Nasionaly momba ny Siansa. 1998, 95: 15043-15048. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Cason AM, Smith RJ, Tahsili-Fahadan P, Moorman DE, Sartor GC, Aston-Jones G.Ny anjara asan'ny orexin / hypocretin amin'ny fitadiavana valisoa sy fiankinan-doha: misy vokany amin'ny hatavezina. Physiology & fitondran-tena. 2010, 100: 419-428. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Choi DL, Davis JF, Fitzgerald ME, Benoit SC. Ny anjara asan'ny orexin-A amin'ny fanirian-tsakafo ara-tsakafo, ny fitondran-tena mifototra amin'ny valim-panafody sy ny fampidirana ny fihinanana neuronalan'ny sakafo amin'ny sakafo. Neuroscience. 2010, 167: 11-20. [PubMed]
• Cizza G, Brown RJ, Rother KI. Mihabetsaka ny zava-mitranga sy ny fanamby ateraky ny diabeta. Famerenana kely. Journal of Investigative Endocrinological. 2012 epub May 8, 2012. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Coldwell SE, Oswald TK, Reed DR. Ny mariky ny fitomboana dia tsy mitovy amin'ny tanora manana safidy ambony noho ny siramamy ambany. Physiology & fitondran-tena. 2009, 96: 574-580. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Davis JF, Choi DL, Benoit SC. Insulin, leptine ary valisoa. Trends in endocrinology and metabolism. 2010, 21: 68-74. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Davis JF, Choi DL, Schurdak JD, Fitzgerald MF, Clegg DJ, Lipton JW, Figlewicz DP, Benoit SC. Ny Leptin dia manara-maso ny fandanjana angovo sy ny antony manosika amin'ny alàlan'ny hetsika amin'ny sehatra nasionaly miavaka. Biolojika. 2011a, 69: 668-674. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Davis JF, Choi DL, Schurdak JD, Krause EG, Fitzgerald MF, Lipton JW, Sakai RR, Benoit SC. Ny melanocortins afovoany dia manova ny asan'ny mesocorticolimbic sy ny fitondran-tena mitady ny sakafo ao amin'ny voalavo. Physiology & fitondran-tena. 2011b, 102: 491-495. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Davis JF, Tracy AL, Schurdak JD, Tschop MH, Clegg DJ, Benoit SC, Lipton JW. Ny fatran'ny siramamy azo avy amin'ny siramamy dia mihena ny valim-panafody sy ny môtera dopamine mesolimbic amin'ny rat. Neuroscience Behavioral. 2008, 122: 1257-1263. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Desor JA, Beauchamp GK. Ny fiovan'ny lavareny amin'ny safidin'ny olona mamy. Physiology & fitondran-tena. 1987, 39: 639-641. [PubMed]
• Desor JA, Greene LS, Maller O. Fampahafantarana ho an'ny mamy sy masira ao amin'ny 9- hatramin'ny 15 taona-taona sy olon-dehibe. Science. 1975, 190: 686-687. [PubMed]
• Drewnowski A. Miorina eo amin'ny angovo, haizim-pito, ary fiononana: ny fiantraikany amin'ny fanaraha-maso. Fanatsarana ny sakafo. 1998, 56: 347-353. [PubMed]
• Figlewicz DP, Bennett JL, Aliakbari S, Zavosh A, Sipols AJ. Ny insuline dia miasa ao amin'ny tranonkalan'ny CNS isan-karazany mba hampihenana ny fihinana sirakotin'ny akoho sy ny fitantanana ny tenany amin'ny raty. American Journal of Physiology. 2008, 295: R388-R394. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Figlewicz DP, Bennett JL, Naleid AM, Davis C, Grimm JW. Ny insuline intraventricular sy leptin dia mampihena ny fitantanan-tena Sukrosa amin'ny voalavo. Physiology & fitondran-tena. 2006, 89: 611-616. [PubMed]
• Figlewicz DP, Bennett-Jay JL, Kittleson S, Sipols AJ, Zavosh A. Sucrose fitantanana ny tenany ary fisintonana CNS amin'ny rat. Am J Physiol. 2011, 300: R876-R884. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Figlewicz DP, Ioannou G, Bennett Jay J, Kittleson S, Savard C, Roth CL. Ny vokatry ny fihinanana zava-mamy amin'ny antonony amin'ny fahasalamana metabolika ao amin'ny voalavo. Physiology & fitondran-tena. 2009, 98: 618-624. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Figlewicz DP, Sipole AJ. Fanamafisana ny angovo momba ny angovo sy ny valisoa. Pharmacology, Biochemistry, ary fitondran-tena. 2010, 97: 15-24. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Frangioudakis G, Gyte AC, Loxham SJ, Poucher SM. Ny fitsaboana fandeferana glucose intravenance amin'ny toro-hevitra voasokajy Wistar: fomba fanao mahazatra ho an'ny fanombanana ny tsindrona insuline glucose in vivo. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 2008, 57: 106-113. [PubMed]
• Hagan MM, Rushing PA, Pritchard LM, Schwartz MW, Strack AM, Van Der Ploeg LHT, Woods SC, Seeley RJ. Ny fiantraikan'ny lozam-panafody mahazatra amin'ny AgRP- (83-132) dia miteraka rafi-pitantanana hafa ankoatry ny sakana mpikirakira melanocortin. American Journal of Physiology. 2000, 279: R47-R52. [PubMed]
• Hahn TM, Breininger JF, Baskin DG, Schwartz MW. Ny fiheverana ny Agrp sy ny NPY amin'ny fifindran'ny sela mpihinana haingana. Neuroscience Nature. 1998, 1: 271-272. [PubMed]
• Hodos W. Fandrosoana be hoatr'izany. Science. 1961, 134: 943-944. [PubMed]
• Ikemoto S, Panksepp J. Disadisa eo anelanelan'ny fitsaboana sy ny fialan-tsiny vokatry ny fanodinana pharmacolojian'ny valan-javaboary valan-javaboary. Neuroscience Behavioral. 1996, 110: 331-345. [PubMed]
• Jewett DC, Cleary J, Levine AS, Schaal DW, Thompson T. Ny vokatry ny neuropeptide Y, insuline, 2-deoxyglucose, ary ny fihinanana sakafo eo amin'ny fihinan'ny sakafo. Psychopharmacology. 1995, 120: 267-271. [PubMed]
• Kaushik S, Rodriguez-Navarro JA, Arias E, Kiffin R, Sahu S, Schwartz GJ, Cuervo AM, Singh R. Autophagy amin'ny neurons hypothalamic Neurons Agregulares regulates nutrition and energy balance. Cell Metabolism. 2011, 14: 173-183. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Kelley AE, Berridge KC. Ny tsy fahasalaman'ny valisoa voajanahary: zava-dehibe ho an'ny zava-mahadomelina mampiankin-doha. Journal of Neuroscience. 2002, 22: 3306-3311. [PubMed]
• Kelley SP, Nannini MA, Bratt AM, Hodge CW. Ny neuropeptide-Y ao amin'ny paraventricular dia mampitombo ny fitantanana ny ethanol. Peptides. 2001, 22: 515-522. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Kohli R, Boyd T, Lake K, Dietrich K, Nicholas L, Balistreri WF, Ebach D, Shashidkar H, Xanthakos SA. Fandrosoana haingana an'i NASH tamin'ny fahazazany. Diary momba ny Gastroenterology zaza sy ny sakafo. 2010, 50: 453-456. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Krashes MJ, Koda S, Ye CP, Rogan SC, Adams AC, Cusher DS, Maratos-Flier E, Roth BL, Lowell BB. Ny fampidirana an-tsokosoko haingana ny neurons AgRP dia mamoaka fitondran-tena amin'ny totozy. Journal of Clinical Investigation. 2011, 121: 1424-1428. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Mennella JA, Pepino MY, Reed DR. Famaritana ara-pahaizana ara-pihetseham-po sy ara-tontolo iainana ny fahatsapana mangidy sy ny tiany. Pediatrics. 2005, 115: 216-222. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Myers KP, Sclafani A. Fampiroboroboana ny safidy tsaratsara. Psychobiology Developmental. 2006, 48: 380-388. [PubMed]
• Ny National Cancer Institute Programme Research Program. Loharano misy kalôria amin'ny sugara fanampiny ao amin'ny US Population, 2005-06. Updated 21 December 2010. [Access 21 September 2011]; 2010 Azo alaina avy amin'ny: http://riskfactor.cancer.gov/diet/foodsources/added_sugars/
• Nixon JP, Zhang M, Wang CF, Kuskowski MA, Novak CM, Levine JA, Billington CJ, Kotz CM. Famaritana ny rafitra fakan-tsary matevina amin'ny alàlan'ny fanadihadiana iray manontolo amin'ny hala-bato. Matavy loatra. 2010, 18: 1652-1659. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Ogden CL, Carroll MD. Fizarana Fanadihadiana momba ny fahasalamana sy ny sakafo. Ny herisetra ateraky ny atody eo amin'ny ankizy sy ny tanora: Etazonia, fironana 1963-1965 amin'ny 2007-2008. [Access 21 September 2011]; Fahasalamana E-Stat. 2010 2010 azo alaina avy amin'ny: http://www.cdc.gov/nchs/fastats/overwt.htm.
• Paxinos G, Watson C. Atlas ao amin'ny atidoha ratra amin'ny kôperativa stereotaxic. 5th. San Diego CA: Elsevier Academic Press; 2005.
• Richardson NR, Roberts DC. Ny tahan'ny fandrosoana dia manatsara ny fandinihan-tena amin'ny fikarakarana ny rongony amin'ny raty: fomba iray hanombanana ny fanamafisana ny fahaiza-manaony. Journal of Neuroscience Methods. 1996, 66: 1-11. [PubMed]
• Roitman MF, Stuber DG, Phillips PE, Wightman RM, Carelli RM. Dopamine dia miasa toy ny modulator mpanodina ny sakafo mitady. Journal of Neuroscience. 2004, 24: 1265-1271. [PubMed]
• Rossi M, Kim M, Morgan D, C, Edwards C, Sunter D, Abusnana S, Goldstone A, Russell S, Stanley S, Smith D, Yagaloff K, Ghatei M, Bloom S. C-terminal fragment of Agouti- Ny proteinina mifandray dia mampitombo ny sakafo ary manimba ny vokatry ny ala-melanocyte stimulant hormone in vivo. Endocrinology. 1998, 139: 4428-4431. [PubMed]
• Stanhope KL. Ny endriky ny siramamy amin'ny fructose izay misy ny fihanaky ny areti-mifindra sy ny metabolika. Fitsaboana fanao isan-taona momba ny fitsaboana. 2012, 63: 329-343. [PubMed]
• Sturman DA, Mandell DR, Moghaddam B. Ny tanora dia mampiseho fahasamihafana amin'ny fitondran-tena amin'ny olon-dehibe mandritra ny fianarana sy ny fandaniana fianarana. Neuroscience Behavioral. 2010, 124: 16-25. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Tracy AL, Clegg DJ, Johnson JD, Davidson TL, Woods SC. Ny antoko mpihira melanocortina AgRP (83-132) dia mampitombo ny fanononan'ny fitsaboana ho an'ny siramamy, fa tsy kôbhy hydrate, manamafy orina. Pharmacology Biochemistry, ary fitondran-tena. 2008, 89: 263-271. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]
• Vartanian LR, Schwartz MB, Brownell KD. Ny fiantraikan'ny zava-pisotro misy alikaola momba ny sakafo sy ny fahasalamana: famerenana sy fanadihadihana miverimberina. Gazety amerikana momba ny fahasalamam-bahoaka. 2007, 97: 667-75. [Gazety maimaim-poana PMC] [PubMed]