Am J Physiol Regul Integr Comp. 2011 Apr; 300 (4): R876-R884.
Navoaka tamin'ny aterineto 2011 Feb 9. doi: 10.1152 / ajpregu.00655.2010
PMCID: PMC3075076
1,2 Abstract
Nolazainay aloha fa ny fitantanana ny insuline ao amin'ny bakteria boribory amin'ny hypothalamus dia mihena ny fanentanana ho an'ny sucrose, izay novolavolaina ho an'ny fikarakarana ny tenany, amin'ny raty. Satria ny fampiasana ny rafi-pitabatabem-bahoaka (CNS) momba ny rafi-pitabatabana (CNS) dia tsy voavaly, tamin'ny fandalinana amin'izao fotoana izao, dia nandoko ny fitenenana c-Fos ho endriky ny fampidinana ny neuronaly. Nampiofana hoditra ho an'ny tsiranoka izahay, araka ny fandaharam-potoana mifangaro (FR) na fandrosoana (PR) ary maneho ny fanehoana ny tsy fahampian'ny C-Fos amin'ny CNS, raha oharina amin'ny fanehoan-kevitra c-Fos amin'ny fanaraha-maso. Nandinika ny fomba fitenin'ny c-Fos ao amin'ny hypothalamus medial (ny bakteria, ny paraventricular, ny retrochiasmatic, ny dorsomedial, ary ny ventromedial nuclei) ny fiaraha-miombon'antoka amin'ny fampisehoana ny PR, ary ny fanehoana c-Fos amin'ny hypothalamus lateral sy ny kernel ny stria terminalis miaraka amin'ny fanombohana ny fahombiazan'ny FR. Ny c-Fos dia nampitombo ny voambolana tao ambadik'ireo voalavo FR sy PR. Ny fianarantsika dia manantitrantitra ny maha-zava-dehibe ny rafi-pandaminana ho an'ny toetrandro ho an'ny toetrandro ary ny rafi-dalam-pandrosoana amin'ny fiatrehana ny andraikitra ara-tsakafo. Raha raisina ny andraikitry ny hypothalamus medial amin'ny fifehezana ny fandanjalanjana angovo, ny fandinihantsika dia manolo-kevitra fa io rafitra io dia mety hitondra anjara biriky amin'ny fametrahana ny fitsipika ao anatin'io toe-javatra lehibe kokoa momba ny homeostasis angovo io.
Ny distrikan'i mesolimbic dopaminergic (DA), anisan'izany ny vta tegmental (VTA) sy ny toeran'ny striatum sy cortical sites, dia voamarika fa mandray anjara mavitrika amin'ny lafiny mandrisika na mahafa-po amin'ny karazana zava-mahadomelina marobe (13, 22-24, 26, 48). Ny fikarohana vao haingana avy amin'ny laboratoara sy ny hafa dia maneho fa io làlam-pifandraisana io koa dia manana anjara lehibe amin'ny lafiny mandrisika na mahafa-po amin'ny sakafo. Ny fiaraha-miasa eo amin'ny fifandraisana sy ny anatomika amin'ny rafitra mifehy ny homoostasis dia manome soso-kevitra amin'ny alàlan'ny tatitra momba ny fihenan'ny valisoa amin'ny sakafo amin'ny alàlan'ny sakafo ara-pahasalaman'ny biby (10, 14, 16, 43). Ny fanitsiana ny valisoa, anisan'izany ny valisoa avy amin'ny sakafo, amin'ny toetry ny sakafo na ny metabolika, dia misy fiantraikany amin'ny mari-pamantarana tsy manam-paharoa sy endocrine, anisan'izany ny insuline (15), leptin (11, 18, 21, 30, 32), ghrelin (35), hormone melaninina mifantoka (MCH) (45), ary orexine (5, 7): ny fanatrehan'ny mpanome-kaody, ny fiasan'ny biochemika sy ny cellule, ary ny in vivo na ny fihetsika mampihetsi-po ireo famantarana ireo ao amin'ny rafi-pitantanana afovoan-tsolika (CNS) dia hita tato ho ato.
Ny sampandraharaham-pandrefesana faramparany koa dia naseho anjara tamin'ny anjara asan'ny fanomezana sakafo sy sakafo (2, 19, 28). Na izany aza, misy ny tranokalan'ny CNS fanampiny manampy. Mazava ho azy, efa fantatra matetika fa ny toerana ipetrahan'ny fikarakarana sy ny fihetsika mampiavaka ny tenany (hypothalamus lateral (LH)4, 31). Ny neurons Orexinergic sy ny leptin famantarana ao amin'ny LH dia fantatra ho manan-danja amin'ny famatsiana sy ny sakafo (5, 29, 30). Vao haingana no nanamarika fa mety hampihena ny fitondran-tena siramamy ny insuline na ny bakteria (ARC), na ny bakteria bakteria (ARC), fa ny fitantanana ny insuline ao amin'ny VTA na ny nucleus accumbens dia tsy misy fiantraikany amin'ity paradigma valisoa manokana ity (15). Araka izany dia toa hita fa ny toerana ipotamalika maro dia mety mitana anjara toerana manan-danja eo amin'ny fitadiavam-bidy sy ny fividianana entana, ary mifanaraka amin'izany, mety hisy ny fiheverana fa ny faritra ipothalamika dia mavitrika tokoa amin'ny fifandraisana amin'ny sakafo samirery. Mba hanombohana ity fitsapana ity, dia naneho ny fomba fitenin'ny c-Fos tao amin'ny CNS momba ny raty voaofana amin'ny paradigma samirery momba ny fizakan-tena isika, rehefa vita ny fampiofanana (FR), na ny fanatanjahan-tena maharitra (PR), asa mafy kokoa ho fanombanana ny motivation (20).
FITAOVANA SY FOMBA FIASA
Foto-kevitra.
Ny lohahevitra dia voalavo Albino lahy (325–425 g) avy any Simonsen (Gilroy, CA). Ny voalavo dia notazonina tao amin'ny chow ad libitum. Notazonina tamin'ny hazakazaka maizimaizina 12: 12-ha izy ireo ary nisy jiro nirehitra tamin'ny 6 maraina ary nozarina sy notsapaina teo anelanelan'ny 7 maraina sy antoandro, tao anatin'ny toe-piainana taorian'ny asa fananahana sy postabsorptive. Ny fomba rehetra natao tamin'ny voalavo dia manaraka ny torolalan'ny National Institutes of Health momba ny fikolokoloana biby ary nankatoavin'ny Komity mpikarakara momba ny biby sy fampiasa an'ny komity mpikaroka sy fampandrosoana ao amin'ny VA Puget Sound Health Care System.
Sucrose.
Ny fomba fiasa dia mifototra amin'ny fomba ambaranay (15) ary notanterahana tamin'ny raty natono. Ny fanandramana dia nahitana dingana telo: fanodinkodinana mba hanombohana fampiofanana, fampiofanana FR, ary fampiofanana mivoatra (PR) amin'ny fampiasana algorithm PR avy amin'i Richardson sy Roberts (38). Ny algorithm PR dia mila 1, 2, 4, 6, 9, 12, 16, 20, 28, 36, 48, 63, 83, 110, 145, 191, 251, 331, 437, 575, 759, 999, 999 ( sns) manery ny fitaovana entina hamerenana amin'ny laoniny ny entana mandritra ny fivoriana (38). Ny voalavo dia nampiofanina tamin'ny fitantanana ny 5% sucrose (valisoa ML 0.5) natolotry ny lasantsy. Ny boaty mpihazakazaka, tarihin'ny rafitra Med Associates (Georgia, VT), dia manana fiatohana roa, fa iray monja (fitaovana mivezivezy mivezivezy sy mavitrika) dia navitrika ny valan-drivotra. Nosoratana ihany koa ny fanindriana ny lefona hafa (mpitatitra tsy mavitrika, mipetraka). Araka ny efa hitantsika teo aloha, dia kely dia kely ny isan'ireo tsipika teo amin'ilay fitaovana tsy mavitrika (latsaky ny fefy 10 / fivoriana). Ny vahaolana sucrose dia natolotra tao anaty ranon-tsavoka ho an'ny tsimokaretina am-bava (Med Associates, St. Albans, VT). Ny fampiofanana voalohany dia natao nandritra ny fivoriana 1-h nandritra ny fandaharam-potoanam-pandrosoana maharitra (FR1: nanamafy ny gazety tsirairay). Ny fivoriana tsirairay dia nanomboka tamin'ny fametrahana ny fitaovana entina mivezivezy sy ny fahazavana amin'ny hazavana fotsy hoditra izay nitoetra nandritra ny fivoriana manontolo. Ny tononkalo 5 (2900 Hz, 20 dB ambony ambony) ary hazavana (7.5 W fahazavana fotsy eo ambonin'ny hetsika mavitrika) dia mitohy ny famoahana valisoa isan-karazany, miaraka amin'ny fotoana 20 izay manomboka amin'ny famokarana sucrose. Ny fampiofanana FR dia natao tamin'ny andro 10; Ny valin-kafatra azo antoka dia tanterahina amin'ny fivoriana fahadimy. Ny fampiofanana PR dia natao ho an'ny 3 h / andro faramparany ho an'ny andro 10. Ny lahasa PR dia nifarana taorian'ny 30 minitra tsy misy valinteny mavitrika mavitrika, izay nipoitra avy hatrany ny hazavana trano ary nesorina ny fitaovana entina mivezivezy; Navoaka tao amin'ny efitrano ny raty ary niverina tany amin'ny tranom-bahiny. "Atsaharo ny fotoana" voalaza table 2 dia maneho ny fotoana nanakatonana ny rafitra; Noho izany, ny haino aman-jery farany farany dia mety nitranga 30 minitra mialoha ny fotoana fijanonana. Fampahalalana momba ny fitondran-tena (table 2) dia maneho ny halavany sessions 6-10 ho fampiofanana FR, ary sessions 1-9 ho fampiofanana PR. Ny sombintsombin'ny fifehezana mifototra amin'ny fifehezana dia nesorina tao amin'ny efitrano fonenana ary napetraka tao amin'ny efitra efitrano madio miaraka amin'ny hazavana trano ho an'ny 60 min, ao anatin'ny efitrano fitsinjaram-pahefana, mba hanamboarana ny fikarakarana sy ny traikefa an-kibon'ny sela. Tsy nomena na inona na inona izy ireo hihinana na hisotro raha mbola ao anaty boaty mpihinana, ary tsy afaka nividy entana.
Amin'ny andro farany, ny raty dia napetraka tao amin'ireo efi-trano isaky ny andro fanazaran-tena ary notehirizina tao amin'ny efi-trano nandritra ny 90 minitra, ary avy eo nesorina, ho an'ny fanatoranana, ny fanosotra ary ny fanarahan-dia farany. Ny voalavo fanaraha-maso dia nampidirina tao amin'ny efitrano fandidiana ary notehirizina tao amin'ny efitrano fandidiana madio, toy ny isaky ny andro fiofanana, mandritra ny 90 min, ary avy eo nanaovana fanafody fanatoranana sy fofona. Vantany vao vita ilay fivoriana 90-min lasa teo, dia nohosorana lalina tamin'ny sakafon'ny isoflurane ny voalavo ary namboarina niaraka tamin'ny NaCl 0.9% narahina vahaolana paraformaldehyde mangatsiaka 4%. Ny fotoana hanaovana ny fanafody fanatoranana sy ny euthanasia dia nifototra tamin'ny fotoana nahalalana ny tampon'ny proteinina c-Fos tamin'ny 90-120 min taorian'ny hetsika. Noho izany, ny fitenenana c-Fos dia hita taratra ny fampahavitrihana ny CNS tamin'ny nanombohan'ny asa fitondra-tena fa tsy vokatry ny niainan'ny biby ny asa sy ny fidiran'ny sucrose. Nesorina ny atidoha ary napetraka tao amin'ny paraformaldehyde nandritra ny andro maromaro; avy eo, napetraka tao amin'ny sucrose-PBS 20% izy ireo, ary avy eo napetraka tao amin'ny vahaolana 30% sukrosa-PBS. Ny ati-doha dia napetraka tao amin'ny cryostat (Leica CM 3050S cryostat) ho an'ny immunohistochemistry.
c-Fos immunohistochemistry sy quantitation.
Nampiasa ny fomba fitsaboana niorina izahay mba handinihana ny proteinina c-Fos tsy mitongilana amin'ny sehatry ny atidoha (12). Ny tarehimarika mahazatra amin'ny atidoha manontolo dia natao tamin'ny c-Fos. Ny ampahany 12-μm dia tapaka ny fizarana korontana ao amin'ny atidoha 3 tao PBS (Oxoid, Hampshire, UK). Ireo sehatra dia nosakanana ho an'ny 1 h amin'ny hafanan'ny efitra ao amin'ny PBS izay misy 5% goat normal na serfa. Nisasa imbetsaka imbetsaka ny seks ao amin'ny PBS ary nidaraboka tamin'ny 4 ° C nandritra ny vahaolana antibody voalohany tao PBS. Ny divay dia nosasana intelo tao amin'ny PBS ary avy eo nidona tao anaty haizina tao amin'ny efitra fisakafon'ny efitra tao amin'ny vahaolana antibody faharoa natao tao PBS ho an'ny 1 h. Nositranina indray ny fizarana manaraka tao amin'ny PBS ary napetraka sy nirakotra tao amin'ny ordinateur Vectashield (Medium Laboratories, Burlingame, CA). Sary nalaina nalaina tamin'ny sehatra digitale nalaina tamin'ny alalan'ny Nikon Eclipse E-800 mikrosopope fluorescence mifamatotra amin'ny fakantsary Optiphot ary mampiasa ny Software Pro Software (Media Cybernetics, Silver Spring, MD).
Taorian 'izany, nifantoka tamin' ny faritra maromaro izahay izay mampiseho ny fahasamihafana eo amin 'ny toe-javatra, ny fandinihan-tena, ary ny fisainan' ny neuronaly. Raha ny tena izy dia nifantoka tamin'ny nokleary ny fototra sy ny akorany (NAc); Ny efitranon'ny afisy sy ny aoriana aforatry ny stria terminalis (aBNST, pBNST); tobim-pampielezena medialista [ventromedial nucleus (VMH), hothothalamus dorsomedial (DMH), paraventricular nucleus (PVN), faritra rural (RCH), ary ARC]; (hypothalamus lateral) (LH), anisan'izany ny faritra dorsal sy ventral ary ny faritra peridika (peF); VTA; Ny ati-doha (oliva matevina, hcloglossal (nXII) dia ny taratasy mivalona tokana, ny ivon'ny retikular aoriana, ary ny nuclei C1 / A1 adrenaline / noradrenaline]. Ny fizarana 12-μm avy amin'ny Atlas dia novaina ho fampiharana sy fitomboana c-Fos amin'ny fizarana sy faritra mifangaro, mifototra amin'ny atlasan'i Paxinos sy Watson (34). Jereo azafady table 1 ho an'ny kôperativa stereotaxic. Ny tanjona voalohany dia ny hampitaha ny asan'ny fitondran-tena tsirairay amin'ny fifehezany mifanaraka (PR vs. PRC; FR vs. FRC). Mba hanatsarana ireo fahasamihafana mety hiorina amin'ny fitondran-tena sy ny fepetra fanaraha-maso, dia voafantina ny peak mpandray anjara avy amin'ny vondrona PR sy FR mba hanaovana fanadihadiana. Noho izany dia nodinihina ny raty 4 / 12 PR sy 3 / 12 FR: Ireo nomerao ireo dia nanana lahatahiry fanontana mavesa-danja (endriny voalohany amin'ny fitondran-tena) izay lehibe kokoa noho ny fivilian-tsoratra tokana mihoatra ny dikan'ny vondrona tsirairay. Fihetsiketsehan'ny mpanara-maso (CCNUMX PRC sy 5 FRC ratasy, izay manatrika ao amin'ny efitranom-pandaminana amin'ny fotoana mitovy amin'ny FR na PR). Nisy vondrona fisiana telo hafa noraisina tamin'ny alalan'ny fomba fiasa FR ("FRext") mba hanombanana ny fotoana fanampiny nampiasana ny dingan'ny PR (izany hoe, ho an'ny 3 andro maromaro, rehefa voalavo amin'ny FR ary avy eo ny PR) mba hanombanana raha Ny fahasamihafana eo amin'ny FR sy PR dia vokatry ny asan'ny fitondran-tena na ny faharetan'ny paikady. Ny atidoha FRext dia tsy nodinihina sy nijerena rafitra ara-dalàna, fa ny faritra manokana misy tombontsoa dia nokarohina tamin'ireo vondrona efatra hafa, mba hamela ny tahan'ny mpifanaraka, araka ny voalaza manokana.
Ho an'ny be loatra (amin'ny 40 × fampitomboana), dia voafaritra ny faritra atlas. Ny rindrambaiko ImagePro Plus (Media Cybernetics) dia nampiasaina mba hisamborana sary iray misy ny faritra tiana. Nisy faritra iray voafaritra ho anisa, ary nisy tokonam-bidy ho an'ny cellule positive. Ny faritra sy dingana mitovy (fampiasana ny mari-pana) dia nampiasaina ho an'ny fizarana avy amin'ireo vondrona mpihinana, ary ny raki-tsarimihetsiky ny sela positive (quantitation) dia natao tamin'io fivoriana io ho an'ireo vondrona mpitsabo, mba hisorohana ny fiovan'ny fivoriana eo amin'ny sehatra. Ho an'ny famakafakana statistika, dia nalaina avy amin'ny rati'ny tsirairay ny isa raha tsy misy fizarana na feno amin'ny faritra tsirairay (araka ny voafaritra ao table 1); Ny angona ho an'ny faritra iray dia tsy nalaina avy amin'ny raty raha tsy misy ny solontenan'ny bilateral eo amin'io faritra io.
Qualitative double-labeled immunofluorescence analysis.
Ny fizarana atidoha dia nalaina avy tamin'ny voalavo izay nanisana ny c-Fos, ho an'ny immunohistochemistry misy marika roa. Satria tsy te hanakorontana ny fomba fiasan'ny biby izahay, dia tsy namboarina colchisin izy ireo mba hanatsara ny fahitana ny neurotransmitter peptide. Noho izany, voafetra ny fandinihana ireo phenotypes neuronal izay nifandray tamin'ny asa fitantanan-tena. Na izany aza, hanombohana ny fanombanana ireo phenotypes an'ny neurons navitrika amin'ny toerana CNS maromaro, ny sary nomerika (azo araka ny voalaza ao amin'ny fizarana etsy ambony) dia nalaina tamin'ny 20 ×, 40 ×, na 60 × (araky ny angano hita) . Ny fomba fandokoana roa amin'ny glutamate decarboxylase (GAD), tyrosine hydroxylase (TH), CRF, neuropeptide Y (NPY), peptide mifandraika amin'ny Agouti (AgRP), ary ny tryptophan hydroxylase dia azo oharina amin'ny fitsapana ny c-Fos-immunoreactivity eo aminy azy manokana, afa-tsy ny fifangaroan'ny c-Fos-Ab sy ny iray amin'ireo antikôdiôdiôla voalohany indrindra dia nampiasaina ho an'ny fampidirana am-bava mandritra ny alina amin'ny 4 ° C; torak'izany ihany koa, ny valim-panafody faharoa dia samy tao anatin'ny vahaolana iray ihany ary navoazina nandritra ny 1 ora tao anatin'ny haizina tamin'ny hafanan'ny efitrano. Ny fanasana etanol 20% 50-min talohan'ny dingana fanakanana dia nampiasaina ho an'ny famandrihana orexin. Ny fanandramana fanatsarana voalohany dia natao mba hamaritana ny fanalefahana ny antibodiôma voalohany. Antibodiasa voalohany nampiasaina dia ny bitro anti-c-Fos (1: 500) (sc-52) sy ny totozy anti-c-Fos (1: 800) (samy avy any Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA); totozy anti-GAD (1: 1,000), totozy anti-tyrosine hydroxylase (1: 500), ary ondry anti-tryptophan hydroxylase (avy amin'ny Chemicon, Temecula, CA); bitro anti-CRF (1: 500) (fanomezana avy amin'ny Dr. Wylie Vale, Salk Institute, CA); bitro anti-NPY (1: 1,000), bitro anti-AGRP (1: 1,000), ary osy anti-orexin A (1: 5,000) dia avy amin'ny Phoenix Pharmaceutical (St. Joseph, MO). Antiozika faharoa ampiasaina dia anti-bitro na anti-totozy (Jackson Immunoresearch; West Grove, PA), Alexa Fluor 3 anti-totozy na anti-bitro na ampondra anti-domba IgG (Molecular Probes, Eugene, OR) ; ny antibiotika ambaratonga faharoa dia voadona tamin'ny 488: 1. Ny c-Fos / MCH dia nanamarina tamim-pahamendrehana; voalohany, ho an'ny MCH (500: 1 mahery voalohany, Millipore) miaraka amin'ny anti-bitro anti-bitro (2,500: 488) ambaratonga faharoa. Ny slide dia nesorina tamin'ny serum osy mahazatra 1% ary voaloton'ny anti-c-Fos (500: 5) sy ny anti-bitro cy1-osy ho fanoherana faharoa. Ny fanasana etanol 500% 3-min talohan'ny dingana fanakanana dia nampiasaina ho an'ny fitsapana MCH.
Statistical analyzes.
Ny antontan'isan'ny vondrona dia aseho amin'ny hoe ± SE ao amin'ny lahatsoratra, latabatra, ary tarehimarika. Ny fahamendrehana dia voafaritra tahaka P ≤ 0.05. Ny fampitahana statistika dia atao amin'ny vondrona fanandramana (FR vs. PR) na ny vondrona fanandramana sy ny fanaraha-maso mifanaraka amin'izany (PR vs. PRC; FR vs. FRC) amin'ny fampiasana ny Student's unpaired t-test. Ny coefficients ampifandraisin'i Pearson eo amin'ny presseur lever mavitrika sy ny fitenenana c-Fos amin'ny faritra ati-doha isan-karazany, ary koa ny fifandraisan'ny fitenenana c-Fos eo amin'ny faritra ati-doha isan-karazany ao anatin'ny toe-javatra fanandramana mitovy, dia nisaina tamin'ny alàlan'ny statistika StatPlus: mac LE statistika fandinihana statistika ho an'ny kinova Mac OS 2009 avy amin'i AnalystSoft. Notsapainay ny fifandraisan'ny tsipika (Pearson's R statistika) eo anelanelan'ny c-Fos amin'ny faritra samy hafa an'ny CNS. Nandinika ny fifandraisana misy eo amin'ny c-Fos ihany koa izahay amin'ny faritra samy hafa sy ny fitondrantenan'ny CNS. Ny tahirin-kevitra FR sy PR amin'ny raty, izay nampiasana c-Fos dia nampiasaina ho an'ireny fifandraisana ireny.
VOKATRA
c-Fos quantitation.
Araka ny efa hitantsika teo aloha, ny isan'ireo milina mavitrika mavitrika dia nitombo be noho ny fampisehoana PR vs. (table 2), ary ny isan'ny valisoa azo avy amin'ny sucrose dia lehibe kokoa tamin'ny famoahana FR. Ny halavan'ny fotoana ho an'ny voalavo PR dia manodidina ny 90 min (fotoana fijanonana - 30). table 3 lisitra c-Fos voan'ny sela tsy voavolavola any amin'ny faritry ny faritra rehetra an'ny CNS izay nahitana fitomboana. Ny famintinana ny fomba fitenin'ny c-Fos ho an'ny fikambanana FR sy PR dia voafintina ao Aviavy. 1. Nisy ny fanamafisana ny hothothalamus medial (MHtot, vondrona ARC, PVN, RCh, DMH, ary VMH) amin'ny voalavo izay mitarika ny PR manerantany ho an'ny sucrose, saingy tsy misy ny fampidirana ankapobeny amin'ny voalavo mifamatotra amin'ny fanondranana FR raha ilaina amin'ny sucrose, raha oharina amin'ny fanaraha-maso tsirairay. Ao anatin'ny fombam-pandrefesana medialin'ny medikaly PR, dia nipoitra tao amin'ny PVN, ARC, ary VMH (Aviavy. 2). Ny fiasan'ny FR, fa tsy ny fampihavanam-pirenena PR, dia nifandraisany tamin'ny fisintonana manan-danja tao amin'ny LH (mifototra indrindra amin'ny fisoratana anarana ao amin'ny faritra avaratra). Ireo haino aman-jery mivaingana mivaingana sy ny fombam-pitenenana c-Fos dia azo oharina amin'ny FRext sy FR (MHtot, 946 ± 26 ary 911 ± 118; ARC, 176 ± 18 ary 186 ± 10; LHtot, 468 ± 79 ary 378 ± 34; LHpeF, 200 ± 31 ary 173 ± 15), izay manoro hevitra fa ny fahasamihafana eo amin'ny fomba fitenin'ny FR sy ny PR dia tsy mifandraika amin'ny faharetan'ny fanofanana / traikefa, fa amin'ny toetry ny asan'ny fitaovana. Ho an'ny vondrona FR dia nisy ny fiakaran'ny c-Fos amin'ny BNST, izay hita ao amin'ny aBNST sy ny pBNST. Ny fihanaky ny FR sy ny PR rehetra dia mifandray amin'ny fitomboan'ny neurons c-Fosinina ao amin'ny fonon'ny NAc; Ny c-Fos dia nitombo be dia be tao amin'ny foin'ny NAc avy amin'ny voalavo izay niasa tamin'ny fantsom-bokin'i FR, izay nisy fiheverana tsy dia lehibe loatra tamin'ny fisongadinan'ny c-Fos tamin'ny raty nampiasaina tamin'ny fanamafisana ny PR. c-Fos dia tsy nitombo tao amin'ny VTA niaraka tamin'ny tetikasan'ny PR, na dia nisy ny fiheverana tsy dia misy dikany amin'ny fitomboana aza dia voamarina amin'ny asa FR. Farany, nitombo be ny c-Fos tao amin'ny ivon'ny hypoglossal (nify XII) tao amin'ny atidohinan'ny ratina voaofana ho an'ny PR, fa tsy FR.
Ny fivoahana c-Fos dia hita any amin'ny faritra hafa an'ny CNS, anisan'izany ny amygdala sy ny cortex cerebral (Aviavy. 3). Na izany aza, ny fanehoan-kevitra dia notsoahina teo amin'ny fehezan-dalàna mifehy sy ny fiaraha-miasa amin'ny asa aman-draharaha momba ny PR sy FR, ka nanolo-kevitra fa ny vokadratsy tsy voafaritra amin'ny fomba fiasa (ny fandefasana, ny hetsika ao amin'ny efitranom-pitsaboana) dia mety ho nahatonga izany fihetsika izany. Tsy vita ny fatran-tseranana tany amin'ireny faritra ireny. Tahaka izany koa, ny fidirana ao amin'ny atidoha dia mitazona faritra hafa ankoatra ny nXII, saingy tranga nifanaraka tamin'ny fepetra mifehy ny asany sy ny asany, ary koa manolo-kevitra ny anjara andraikitra amin'ny fampihetseham-pihetseham-po na fampiharana fihetsika.
Notsapainay ny fifandraisana misy eo amin'ny expression c-Fos amin'ny faritra CNS samihafa. Ny fampifangaroana ny angona avy amin'ireo vondrona manery-lever, dia nahita fifandraisana ratsy teo amin'ny fitenenana c-Fos ao amin'ny LH sy ny VMH; noho izany, ny fampidirana ny VMH dia nifandray tamin'ny fihenan'ny fampahavitrihana ankapobeny ny LH (Pearson's R, -0.7986; t = -3.7534; P = 0.0056). Ary koa, nahita ny fifandraisana misy eo amin'ny c-Fos izahay any amin'ny faritry ny tanàna any amin'ny LH sy ny VTA (Pearson's R, 0.7772; t = 3.493; P = 0.0082), mifanaraka amin'ny fifandraisana misy eo amin'ny monosynaptic misy eo amin'ireo faritra roa ireo (jereo ny fifanakalozan-kevitra ao amin'ny Refs. 2 ary 13). Nahita fifandraisana ratsy be teo amin'ny expression c-Fos izahay tao amin'ny VTA vs. ny NAc-shell, na nosedraina manokana ho an'ny fampisehoana FR (Pearson's R, -0.9262; t = -4.9125; P = 0.008) na ho an'ny fampisehoana PR (Pearson's R, -0.9897; t = -9.7624; P = 0.0103), mifanaraka amin'ny anarana mahazatra miara-monina eo amin'ny faritra misy striatal mankany amin'ny fototra nigra sy VTA (2, 13). Notsapainay ihany koa ny fifandraisana misy eo amin'ny c-Fos expression amin'ny faritra CNS samihafa sy ny fitondran-tena. Ny fampifangaroana ny angona avy amin'ny vondrona manery-lever, dia nahita fifandraisana tsara teo anelanelan'ny c-Fos tao amin'ny ARC, sy ny milina fanodinam-bokatra (Pearson's R, 0.8208; t = 3.8017; P = 0.0067).
Famantarana ny neurônina mavitrika amin'ny tsirôrozina sy ny antony manosika ho an'ny sucrose.
Ao amin'ny tazomoka ao amin'ny atidoha, ny neon-c-Fos-positif tsara dia tsy naneho fiarovan-tena tsara ho an'ny TH, ny enzyme miady ho an'ny epinephrine sy ny norepinephrine (sy dopamine); Noho izany, ireo neurons catecholaminergic ireo dia toa tsy navitrika tamin'ny asa FR na ny PR. Na dia izany aza dia nisy ny neurons c-Fos-positif tsara, izay nanaporofo fa misy fiantraikany tsara amin'ny hydroxylase tryptophan, izay midika fa nisy neronerona serotoninina. Araka ny aseho ao Aviavy. 4, ao amin'ny ARC, ny sela c-Fos-positive sela dia voahodidin'ny fibrain'ny tavoahangy AGRP, ary misy lamina mitovy amin'ny tsy fahampian'ny NPY fibre / c-Fos (tsy hita). Ao amin'ny PVN, ny neurons c-Fos-positive dia toa nanodidina ny CRF-positive neurons, saingy tsy nisy ny kolokalisma (tsy voatondro). Aviavy. 5 dia maneho ny tsy fahampian-tsakafo ho an'ny orexine sy MCH ao amin'ny LH. Ny neurons Orexin dia hita ao amin'ny dLH sy ny peLH. Na dia nandinika ny neon-n'ny MCH aza izahay tao amin'ny peLH, dia tsy nisy ny kolokalozy tamin'ny c-Fos tao amin'izany faritra izany ao amin'ny LH. Na izany aza, dia nahitana ny cocosalization c-Fos ao amin'ny neurons orexin-positive ao amin'ny peLH (Aviavy. 6, ambony), ary tena voafetra ny c-Fos colocalization amin'ny MCH ao amin'ny vLH (Aviavy. 6, ambany). Tokony hohamafisina fa ny fihenan-toerana sy ny kolokaliela amin'ny c-Fos, dia mety ho ambany noho ny tsy fahampian'ny neurotransmitter peptide toy ny CRH, satria ny voalavo dia tsy nomanina tamin'ny colchicine. Farany, ao anatin'ny sehatry ny nucleus dia mamaritra ny fotony sy ny akorany (Aviavy. 7), c-Fos coimmunostaining miaraka amin'ny GAD, ny enzyme synthetic ho an'ny neurotransmitter GABA, dia voamarika, ho an'ny FR sy PR rat. Nisy ny fanamafisana mafy ny TH tao anatin'ny VTA; Na izany aza dia voamarik'ireo voan'ny c-Fos-positive ny sela ary tsy dia hita loatra fa ny colocalize amin'ny TH.
IARAHA-MIDINIKA
Ao amin'ny fianarana amin'izao fotoana izao, dia nampiasa ny fitenenana vao haingana, c-Fos, izahay mba hanombanana ny lamin 'ny firotsahana an-tsehatra CNS mifandraika amin'ny fanombohana ny fihazonana ny fisakanana siramamy amin'ny tenany manokana, na toy ny asa tsy mahomby (FR) na Asa sarotra mitaky tsikelikely amin'ny fisaintsainana ny fitadiavana valisoa amin'ny valisoa, toy ny sucrose, ary ny fampidirana amina rindran-kira (22, 24, 49) (PR). Ny hipothalamika fampifanarahana dia samy hafa amin'ny asa roa, miaraka amin'ny fidirana LH / limbic izay mibahan-toerana ao amin'ny asa FR ary ny fampidirana hetsika medial hipothalamika / limbic izay mibahan-toerana ao anatin'ny asa PR (jereo Aviavy. 1). Misy antony maromaro mety amin'izany. Voalohany, ireo "paradigm" ireo dia mety "mametaka" ho traikefa samy hafa amin'ny CNS. Ny voalohan-tsofina nokarakaraina tamin'ny fampisehoana FR dia mety hiandry asa mora sy mendrika. Ny fiheverana ny sakafo mahafa-po dia tokony hanan-kery eo amin'ny lamina c-Fos voatondro ao amin'ny ratin'ny FR. Ny fahasamihafana hita eo amin'ny endrika fampiharana dia maneho fa ny fahafahana faharoa-fa ny biby PR dia manana traikefa bebe kokoa amin'ny asa-dia tsy dia misy azo atao, ary ity dia tohanan'ny fandrefesana ny c-Fos amin'ny hypothalamus amin'ny raty izay nahazo ny fivoriana 20 FR , izay nampiseho fihetsiketsehana mitovy amin'ny vondrona FR, fa tsy ny vondrona PR. Ireo fomba roa ireo dia mety hosedraina amin'ny fampivoarana ny fahasarotan'ny fiofanana FR sy ny fanombanana ny fiovan'ny CNS hetsika, ka amin'izany dia milaza ny fiovan'ny kalitao eo amin'ny famolavolana fampiharana. Na izany aza, raha toa ny karazana fampiofanana sasany dia mety tsy mitaky ny famindrana CNS fampiharana, ny salanisa amin'ny valisoa azo avy amin'ny sucrose amin'ny fotoam-pivoriana dia mety hoe: ny asa PR dia mety hianatra fotsiny hoe "traikefa tsy dia mahafa-po", ary mety mifandray amin'ny asa tsy fahampian'ny fidiran'ny LH. Noho izany, ny lamin'asan'ny CNS fanombohana amin'ny fanombohan'ny fivoriana dia mety mitaratra ny toe-pifaneraserana iray, toy ny an'ny paradigman'ny toeram-pitsaboana: ny famerenana ny fampiatoana ao anatin'ny rafi-pandrefesana dia mifamatotra amin'ny fianarana sy ny antony manosika. Nandinika ny fiovaovan'ny c-Fos amin'ny fomba fijerin'ny mediam-bahoaka amin'ny FRC isika. Amin'ny ankapobeny ao amin'ny PVN, io fihanaky ny fahamendrehana io dia mety hanelingelina ny fidirana amin'ny raty FR, izay nahitana ny fironana amin'ny fitomboan'ny c-Fos vs. ratatsika FRC (table 3). Na izany aza, ny fihetsika hialan'ny haino aman-jery amin'ny ankapobeny dia tsy mitovy amin'ny biby FR sy FRC.
Tsara homarihina fa na dia tanjontsika aza ny hamantatra ireo tranonkalan'ny CNS izay mandray anjara amin'ny fanombohan'ny fihetsika, dia misy fiheverana kely ihany ny famahana ny fotoana. Araka ny resahina etsy ambany dia vao mainka mankamamy fa ny singa samihafa amin'ny fitondrantenan'ny fitaovam-pihetseham-batana na ny fitantanana dia afindra amin'ny alàlan'ny fampiatoana ny isan'ny neurons (13, 23, 33, 49). Tsy afaka manapaka tanteraka an'io fisintonana io noho ny fisondrotan-tsetroka na tsikelikely ny valisoa azo avy amin'ny valin-kafatra dia mety ho nanosika kely ny fampidinana ny hetsika izay hitanay. Ny fikarohana nataonay dia manome fototra ho an'ny fanadihadiana bebe kokoa momba ny anjara asan'ny CNS voafaritra amin'ny endriny samihafa na ny singa ao amin'ny andraikitry ny fizakan-tena, ary ho an'ny fandinihana toy izany, ny famandrihana ny fototarazo hafa avy hatrany izay misy "on" sy "off"36) dia tena ilaina.
Ny fifandraisana misy eo amin'ny c-Fos amin'ny faritra afovoan'ny atidoha dia manohana ny fifandraisana mahazatra eo amin'ny faritra ipotémique sy ny loha-hevitra voalohany amin'ity asa valisoa ity, toy ny LH sy ny VMH, ary eo amin'ny faritra tsy refesi-mandin'ny LH sy ny VTA (jereo ny adihevitra amin'ny Refs. 2 ary 13). Nandinika koa ny fifandraisana misy eo amin'ny c-Fos amin'ny faritra samihafa, sy ny fihetsika. Ny fifandraisana eo amin'ny c-Fos ao amin'ny ARC sy ny milina mavitrika dia mifanaraka amin'ny andraikitra tsara voafaritra tsara amin'ny asan'ny ARC amin'ny fihinanana sakafo (1); miaraka amin'ny fanandramantsika teo aloha fa ny tsimokaretin'ny insuline manokana ao amin'ny ARC dia nitombo ny fitantanana ny tenany (15); miaraka amin'ny tatitra vao haingana momba ny andraikitra mavesa-dan'ny ARC, sy ny neurons endorphinergic, amin'ny fahazoana sy ny fampiroboroboana ny fitantanana ny governemanta cocaine (40-42); ary miaraka amin'ireo projections fantatra amin'ny ARC mankany amin'ny NAc (17). Noho izany, ny ARC dia mety mitana anjara toerana lehibe amin'ny fitondran-tena manosika hitady sy hahazo karazana fanantenana mahafa-po, anisan'izany, fa tsy voafetra amin'ny sakafo. Farany, nandinika ny fidirana an-tsokosoko ny PVN sy ny VMH izahay tamin'ny fanombohan'ny fisian'ny sucrose PR. Izany dia mifanaraka amin'ny anjara asan'ny karazan'ireny santionan'ny fitsaboana medialina ireny amin'ny fametrahana ny tsimok'aretina, fampifandraisana mivantana amin'ny ARC, ary ny fifandraisana amin'ny rafi-pandrefesana (1, 27, 37).
Nahita fifamalinana goavana teo amin'ny c-Fos tamin'ny VTA vs. ny NAc-shell, na voazaha toetra amin'ny FR na ny asan'ny PR. Somary nahagaga ihany fa tsy voamarina ny fampiatoana ny VTA tamin'ny fifandraisan'i PR na FR ny fizakan-tena (mifanohitra amin'ny contrôles). Angamba io fitadiavana io dia maneho ny fandaharam-potoan'ny fepetra noraisintsika, mifantoka amin'ny toerana mety ho an'ny CNS izay mavitrika amin'ny fanombohan'ny asa, izay nampiofanana tsara ireo biby ireo. Izany dia mifanaraka amin'ny fandinihana sy ny fizotran'ny Schultz (44), ny fampidirana ny dopamine neuronal dia manondro tsindrim-peo na valisoa tsy nampoizina, ary mihena izany fisintonana izany miaraka amin'ny fiofanana. Na dia izany aza, ny famotsorana dopamine am-pilaminana nandritra ny safosafon'ny safosafon'ny biby nariana dia naseho fa hetsika tena mazava sy ara-nofo (39). Araka izany dia azo atao ny mihevitra fa ny fironana izay hitanay dia ho tena manan-danja tokoa amin'ny vondrona fianarana lehibe (izany hoe hery fanampiny statistika). Nandinika ny fidirana NAC izahay niaraka tamin'ny fanombohana ny fisotroan-tsaka FR sy PR. Ny fampidirana sy ny fihenan'ny necron NAc dia notaterina tamin'ny fifaneraserana amin'ny fahombiazan'ny valim-panafahana, ary ny lamin'ny fidirana / asa dia miankina amin'ny fampiofanana sy ny tontolo iainana, ary mifandray amin'ny singa samihafa amin'ny fitondrantena (ohatra, ny fironana, ny fomba fisainana, ny famoahana) (6, 33, 50). Araka ny noresahina tetsy ambony, ny fandrefesana ny c-Fos dia tsy manaisotra izany asa manokana izany. Carlezon dia nanolo-kevitra fa ny "valisoa" dia tena mifandray amin'ny fihenan'ny asa ataon'ny NAc neurons, izany hoe, ny neuron (3). Tsy mifanaraka amin'ny fandinihantsika ny fihenan-jo ara-pifandraisana NAc c-Fos raha oharina amin'ny fifehezana ny fanaraha-maso sy ny neurons c-Fos-positive miaraka amin'ny GAD, mifanaraka amin'ny fampiasana ny neon-nify (GABAergic), saingy tsy voamarina manokana ny "neconal" ". Ny fampidirana NAc sy ny fikolokoloana dia mety hitranga mandritra ny asa an-tselika, miaraka amin'ny endriny anatomika sy ara-nofo. Araka ny fijerin'ity fianarana ity dia mety hihevitra fa ny NAc dia tafiditra amin'ny fanombohan'ny fitaovana famokarana fitaovana, miaraka amin'ny fototry ny NAc izay manampy amin'ny fisorohana ny môtô sy ny shell NAc izay manampy amin'ny môtô sy ny anton-javatra manosika amin'ny asa.
Narahinay ihany koa ny fampidirana ireo faritra roa lehibe amin'ny BNST (aloha sy aoriana) amin'ny raty FR. Ny BNST dia ampahany amin'ny rafi-dalam-pandaminana izay mamindra ny valin'ny neuroendocrine ho an'ireo traikefa miverimberina (8, 9), ary amin'ny lafiny lehibe kokoa, dia mifandraika amin'ny fianarana momba ny fisavoritahana miverimberina. Na dia hita taratra tanteraka amin'ny fampihetseham-pihetseham-po miverimberina aza ny anjara andraikiny, ny soso-kevitra dia manolotra anjara lehibe ho an'ny BNST: Ny BNST dia mety hanova ny valin'ny CNS amin'ny fanantenana tsy tapaka, Koa satria hitanay izany fihetsika izany tamin'ny fanombohan'ny FR, fa tsy PR, ny fampisehoana, ny famerenana ny BNST dia mety ho mifamatotra amin'ny valim-pikarohana azo avy amin'ny fiofanana FR. Ny fandinihanay ny tsy fampidirana mivantana ny neuronan'ny CRF dia manoro hevitra fa ny fandraisana anjaran'izy ireo ho an'ny sucrose dia tsy mampiady saina loatra; Na izany aza, ny fitenin'ny c-Fos amin'ny neurons hafa ao PVN dia mifanaraka amin'ny fanodikodinan'ny rafi-pitaterana (46). Raha ny marina dia nitatitra i Ulrich-Lai sy ireo mpiara-miasa fa, amin'ny fampiasana paradigma isan-karazany / sakafo, ny tsiranoka sucrose dia mamolavola ny PVN (47). Farany, hitantsika ny fampiatoana ny ati-doha amin'ny hogoglossal miaraka amin'ny PR fa tsy ny fahombiazan'ny FR. Ny lanjan 'izany dia tsy azo saintsainina; Ny mety dia ny fahafaha-mihinana ny sucrose dia mety hihatsara amin'ny voalavo izay mamerina valisoa bitika kely.
Ny fitadiavana sikidy dia tokony ho raisina ho toy ny traikefa maro, mihamatanjaka ara-potoana, toy ny fitifirana dia miteraka famantarana marimaritra mifandraika amin'ny votoatin'ny kalôria, ary koa ny fahazarana sy ny fiantsorohana alliesthesia (25). Na dia ny fifantohan-tsaintsika aza dia mifantoka amin'ny fitaratry ny famantarana tsikelikely, toy ny insuline sy leptin, mba hanamafisana ny valisoa azo avy amin'ny sakafo, ny vokany dia mety ho azo ampiharina mivantana avy any amin'ny mpandidy sy ny neuropeptides izay mitana andraikitra amin'ny fotoana fohy na maharitra sakafo na valisoa sakafo (jereo ny fifanakalozan-kevitra ao amin'ny Ref. 14). Ny fandalinana amin'izao fotoana izao dia manome fahatakarana an-tsaina an'io; Hitantsika ny fampidinana ny neurônina sasany izay maneho na MCH na orexine, roa neuropeptides izay orexigenic. Ireo zava-baovao ireo, raha ny marina, dia mety hamaivanina ny anjara asan'ny MCH na ny orexine amin'ny valisoa amin'ny sakafo, satria ny fikarohana momba ny immunocytochemistry amin'ny fitsaboana tsy voatsabo dia azo antoka fa voafetra ny fisehon'ireo neuropeptides ireo. Ny fanondroana ny neuron orexine nokleary ao amin'ny LH dia mifanaraka tanteraka amin'ny fianarana maro izay miteraka neurons orexin amin'ny famatsiana, ny valisoa avy amin'ny sakafo, ary ny valisoa ho an'ny fanentanana ankapobeny kokoa (ohatra: 5, 7, 29). Hitantsika ny fampidinana ny neurons erexine. Aston-Jones sy ireo mpiara-miasa (5) dia nisintona ny andraikitry ny populaire samihafa ny neuronin'ny orexin amin'ny fihetsika valisoa ary nahatonga ny neurons ho an'ny neurons nexxin tamin'ny fanoherana, fa tsy ny valisoa isan-tsokajiny. Ny fikarohana ataontsika dia manome soso-kevitra ho an'ny LH orexin amin'ny fitsikerana, ary angamba amin'ny fironana eo amin'ny fitaovana entina mivezivezy na siansa ho an'ny fambolena sucrose.
Ny mendrika hoeritreretina amin'ny ho avy dia singa tokana na fanodinana azo tsapain-tsakoly. Na ny lamin 'ny firotsahana an-tsokosoko vao haingana no taterinay dia singa manokana ho an'ny sakafo ho toy ny fanentanana, na amin'ny ankapobeny ho an'ny hafa fanantenana, dia mbola tapa-kevitra. Araka ny voalaza tetsy ambony, indrindra indrindra amin'ny asa FR, ny fanalana ny valisoa sira-maromaro dia tokony andrasana hiteraka vokatra metabolika, miaraka amin'ny fanodinana ny famotsiana hormonina (ohatra cholecystokinin, ghrelin, insuline) ary ny fiovan'ny fidiram-pandrenesana sy ny CNS. Ireo fiovana ireo dia tsy andrasana hitana anjara toerana mivantana eo amin'ny famolavolana CNS izay efa nodinihintsika saingy mety hiantehitra amin'ny fianarana momba ny valisoa sirogosa mandritra ny fiofanana. Indraindray, mety hisy ny neuropeptides toy ny orexine.
Ny fianarantsika dia maneho, amin'ny fahalalantsika, ny fanehoan-kevitra voalohany amin'ny fanentanana ny ivon-toeram-pitsaboana miavaka manokana amin'ny fanombohana ny fitantanam-bola sokatra, anisan'izany ny PVN, tafiditra ao amin'ny homeostasis sy ny fihenan-tsakafo, ary ny ARC, izay manan-danja amin'ny omezan'ny angovo, ny fahatsapana ny sakafo, ary ny fanaraha-maso ny sakafo. Ny tena zava-dehibe dia nahitantsika ny fampiatoana ny "hypothalamus medial" sy ny NAc, miaraka amin'ny fisian'ny PR, izay milaza fa samy manana ny anjara andraikiny amin'ny fanombohana ny fitantanam-pamokarana soka-ponenana ny tranokala homeostatic sy sasany. Ny tranonkala fitiliana fanampiny dia mety haverina amin'ny fotoana manaraka ao amin'ilay asa.
Fahitana sy fahamendrehana
Raha ny marina, ny fianarana momba ny fitondran-tena mendrika sy ny valisoa dia mampiditra am-bava ny rafi-pandrefesana CNS, dia misy porofo maro manintona izay manasongadina ny fifaneraserana ara-pifandraisana mahazatra eo amin'ny rafi-pandehanana ankapobeny. Ny fandinihana amin'izao fotoana izao dia manolotra ny lanjany ho an'ireo ivon-toeran'ny hôpnothalamika manokana ao amin'ny asa an-tery ho an'ny sucrose. Ny fampiofanana avy amin'io fianarana io, ny fanadihadiana amin'ny ho avy dia afaka manombana raha ilaina ny anjara asan'ny hialan'ny medialista ary raha toa ny fampidirana azy dia tafiditra ao amin'ny fitadiavana ny valisoa amin'ny valisoa hafa toy ny zava-mahadomelina. Fanampin'izany, ny vokatry ny fandinihana dia manome ny antony handinihan-tena amin'ny fanovana ny fitondran-tena manosika amin'ny toe-javatra mifandraika amin'ny fiovan'ny toetr'andro miovaova, toy ny amin'ny fiterahana.
Omen'i
Ity fikarohana ity dia tohanan'ny National Institutes of Health Grant DK40963. Dr. Dianne Figlewicz Lattemann dia manam-pahaizana momba ny asa momba ny fikarohana siantifika, laboratoara fikarohana biomedikan'ny laboratoara, Department of Veterans Affaires Puget Sound Health System, Seattle, Washington. Dr. Sipols dia tohanan'ny Fivondronana Science of Grant 04.1116.
Fankasitrahana
Misaotra an'i Drs izahay. Yavin Shaham, Stephen Benoit, Christine Turenius ary JE Blevins ho an'ny torohevitra sy adihevitra mahasoa.
References
;