CRF системийг сонгон шалгаруулах систем нь ажил хаялт харанхуй талыг зуучилдаг (2009)

Байна. 2009 сар 24 сар; 106 (47): 20016 – 20020.

Нийтэлсэн онлайн байна 2009-р сарын 9. doi:  10.1073 / pnas.0908789106

PMCID: PMC2785284

Товч

Бие махбодийн жинг хянахдаа хоолны дэглэмээс хоол тэжээлийн дутагдлыг эргэлтэнд оруулах нь хорт хавдар үүсгэдэг. Энэхүү судалгаагаар идэш тэжээл нь завсарлагаатай хоол хүнсээр хангагдах завсарлагаас татгалзсан хархуудаас татсан хоол хүнсээр хооллож идэхээс сэргийлсэн ба картикотропин-ялгаруулагч хүчин зүйлээр илэрч буй үрэвсэлтэй байдал-1 (CRF1) рецептор антагонист-эргэх зан үйл, түүний дотор гипопаги, хоол идэвхи багатай хоол идэх сонирхол багасах, анионогеник шинжтэй зан төрх зэрэг болно. Илгээх нь CRF илэрхийлэл болон CRF нэмэгдсэн байна1 amygdala-ын цөмийн электрофизик хариу үйлдэл. Бид эсрэг шагнал экстрапоталик CRF-CRF -ийг элсүүлэхийг санал болгож байна1 хоолны дэглэмээс татгалзах үед бэлгийн хүчирхийллээс урьдчилан сэргийлэхтэй адил төстэй хоолны дэглэмийг сонгох, эрүүл хоол хүнс хэрэглэхээс зайлсхийх, амтат хоол идэхээс сэргийлэхэд сөрөг сэтгэл хөдлөл төрдөг.

Түлхүүр үг: идэх эмгэг, таргалалт, амтат хоол идэх, хоол хүнсээр хооллох зэргээс хамаарна

Таргалалтын болон хоолны дэглэмийн хэлбэрүүд нь мансууруулах бодисын донтохтой төстэй зүйлүүдийг түр зогсоох ээлжит хугацаагаар (өөрөөр хэлбэл, "хориотой" хоол идэхээс зайлсхийх зорилгоор хооллолт), дахилт (өөрөөр хэлбэл, эмгэг, ихэвчлэн хяналтгүй, амтат хоол) нь сөрөг үр дагаварыг үл харгалзан). Хоол тэжээлийг сайн мэддэг эерэг аргуудыг сайн мэддэг боловч, ) сөрөг аргуудын шинж чанарт бага анхаарал хандуулсан (-), тухайлбал урвуу урамшлыг зайлуулах замаар зан үйлийн хариу үйлдлийн магадлалыг нэмэгдүүлдэг (жишээлбэл, сөрөг сэтгэл хөдлөлийг багасгахын тулд амтат хоол хүнс хэрэглэх). Хүчирхийлэлд өртсөн эмийг удаан хугацаагаар ашиглах нь тасралтгүй хэрэглээ нь "сэтгэл мэдрэлийн хараат байдал" -д хүргэж болзошгүй бөгөөд эмийн тогтсон цэгийг хадгалахын тулд эмийн өндөр ба / эмийн хэрэглээ (, ). Иймэрхүү татгалзал нь мансууруулах бодисын хэрэглээг тасралтгүй үргэлжлүүлэн сэргээх сөрөг аргаар дамжуулан дахилтыг ашиглах, идэвхжүүлэх, ).

Эпипидотекик кортикотропин-ялгаралтын коэффициент (CRF) тархины стресстэй системүүд нь хар тамхи хэрэглэснээс хараат байдалд өртөх хүртэл хамааралтай байдаг бөгөөд энэ нь хүчирхийлэлд өртсөн эмийн хэрэглээ нь эерэг, арматурын механизм биш харин сөрөг үр дагаварт хүргэдэг. CRF нь архи, никотин, кокаин, хорт хавдар, амфетамин, тетрахидроканнаминол зэрэг хүчирхийллийн гол эм бүрийг татан авах хам шинжийн хамшинжийг сэдэлжүүлэхэд нөлөөлдөг., ). Адилтгуй байдлаар, хоолны дэглэмийн хамаарлын загварт харгалзах CRF системийн мэдрэлийн эмгэгийг өдөөхэд маш их амттай хоол хүнс хэрэглэснээр давтагдсан циклууд, , ).

үр дүн

Завсарлагатай хоол хүнсээр дамжин өргөжсөн хоол хүнс нэмэгдэх нь идэвхитэй хоол хүнс хэрэглэхээс татгалзах, хоолны дуршилгүй хоол идэх, хоол хүнс идэх,-). CRF-ийн таамаглалыг шалгах1 Систем нь эдгээр тэжээлийн дасан зохицуулалтыг удирддаг эрэгтэй Wistar хархнуудn (20) нь долоо хоног бүр Chow хоолны дэглэмийн зар сурталчилгаа (Chow / Chow) буюу 5-ийн өдөр (C үе шатанд) chow ad libitum-ыг өгдөг 2-ийн хоногийн амттай хоолны дэглэм (P phase) (Chow / Palatable ) (үзнэ үү Зураг S1 хоолны дэглэм болон хоолны дэглэмийн хувьд Зураг S2 хоолны дэглэмийн үр дүн, биеийн жингийн талаархи). 7-ийн хоолны дэглэмийн долоо хоногийн дараа хулганууд пептидийн бус CRF-ийг хүлээн авсан1 рентгенэн антагонист R121919 (0, 5, 10, болон 20 mg / kg, sc) нь Латин квадратын загварт). 1 h-ийн бэлдмэлүүд нь хоолны дэглэмээс сэлгэн залгихаас өмнө хоолны дэглэмээс хооллож байсан. R121919-ийн тунгаас хамаарч хоолны дэглэмийн хэрэглээ буурч, Chow / Palatable хархад ихэссэн хоол хүнс хэрэглэдэг (Diet Phase × Diet Schedule × Эмийн тун: F3,54 = 7.25, P Chow-ийн хяналтыг өөрчлөхгүйгээр <0.001). R121919 нь амттай хоолонд (P үе шат) дахин нэвтрэх үед өндөр амттай хоолны дэглэм буурсан (Зураг. 1A). Бие даасан туршилтаар ХХЗХ1 рецепторын антагонист идэш тэжээлээс (C үе шатанд) Chow / Palatable харханд бага зэргийн тэжээл өгдөгЗураг. 1B). Тиймээс чонон гипophagia болон хоолны дуршилтай хоол идсэний үр дүнд R121919 хэрэглэж байсан дугуйны далайцыг багасгасан (эхний бэлдмэлийн P үе шатанд хэрэглэж байсан ба эхний удаад Чвений В шатанд шилжсэн: Diet Schedule × Эмийн тун: F3,54 = 7.25, P <0.001) (Зураг. 1C). CRF-CRF-ийн дэвшилтэт ажилд орохыг дэмжих1 R121919 нь хоолны дэглэмийн дагуу хоолны дэглэмийн тогтолцоонд илүүтэйгээр хоолны дэглэмийг бууруулж, хоолны дэглэмд нэг удаа нойтон хоол идэхээс зайлсхийж, хоолны дэглэмээс эхлээд хоолны дэглэмийн эхний ээлжинд хоолны дэглэмийг нэмэгдүүлэхЗураг S3).

1 зураг. 

CRF-ийн үр нөлөө1 R121919 (-1 h урьдчилан боловсруулалт, 0, 5, 10, болон 20 mg / kg, sc) хуримтлагдсан 3-h дэх хүнсний хэрэглээA) P үе шат (идэх дуртай хоолонд шинэчилсэн), (B) C үе шат (хархнууд баяжихаас татгалзсан үед) ...

Түр зуурын хоол хүнсээр тасралтгүй, хүртээлтэй байхаас татгалзах нь сэтгэл түгшээсэн зан авирыг нэмэгдүүлдэг (). CRF-ийн таамаглалыг шалгах1 RxNUMX (121919, 0 mg / kg, sc, 20-h урьдчилан боловсруулалт) -ийг харгалзах эмчилгээний сөрөг шинж тэмдгүүдэд оролцдог бөгөөд өндөрлөг дээр нэмэх нь maze дахь субъектуудын дизайныг туршсан), 5-9 h дараа нь хоолны дэглэмээс аваад дараа нь chow-д шилжүүлнэ. Тээврийн хэрэгслийн эмчилгээнд Chow / Palatable хархнууд 7-ийн долоо хоногийн хоолны дэглэмээс гарах үед анионогены мэдрэмжийг тусгасан,Зураг. 2A), зөвхөн хоёр удаагийн мөчлөгийн дараа хараахан үзэгдээгүй нөлөө (Зураг S4). R121919-тэй урьдчилан бэлдмэл (20 мг / кг, хоолны дуршилтай хоол идсэний үр дүнд болон хоолны дуршил буурсан хоол хүнсэнд хэрэглэсэн тунг) нь Chow / Palatable харханд ноогдох хорт хавдрын өөрчлөлтийг өөрчилсөнгүй Diet Schedule × Dose: F1,43 = 7.25, P <0.02; Зураг. 2Зүүн). R121919-ийн удирдлагууд хаалттай гарыг оруулснаар ерөнхий үйл ажиллагааг өөрчлөх боломжгүй байв. Тиймээс R121919 нь сэтгэлийн хямралтай төстэй зан үйлийг таслан зогсоох, хоолны дэглэмтэй харьцах боломжийг хязгаарлаж, хяналтын зан үйлийг өөрчлөхгүйгээр CRF1 Системүүд.

2 зураг. 

CRF-ийн үр нөлөө1 рецептор антагонист R121919 (-1 h урьдчилан боловсруулалт, 0, 20 мг / кг, ск)n = 47) болон идэвхитэй харьцаа нь бага амттай хоол хүнсn = 17) эр бэлгийн хавьтагчаас хоол идэхээс татгалздаг ...

Илүүдэл хоол хүнсээр тасралтгүй, тасралтгүй нэвтрэхээс татгалзах нь идэвхитэй алдагдалд хүргэхээс сэргийлдэг, гипогофонтой төстэй зан үйлийн индекс). Харамсалтай нь арматурын процессийн харьцаатай хуваарийн дагуу бага зэргийн хүчилсэн арматурыг хариу арга хэмжээ авах үед урьд нь эмийн бэлтгэлийн үед илрүүлсэн саармагжуулалтын алдааг индексжүүлэх зорилгоор ашигласан.). CRF-ийн оролцоог тодорхойлох1 рецепторууд бид туршигдсан харьцаатай хуваарийн дагуу бага зэргийн согог олж авахын тулд хооллолт-дугуйтай хархнуудын гүйцэтгэлд R121919-ийн үр нөлөөг туршсан. Өмнөх үр дүнг баталгаажуулах (), тээврийн хэрэгслийн эмчилгээнд Chow / Palatable rats нь багассан цэгийг багасгахын тулд идэвхитэй багасгахын тулд ажиллах хүсэл эрмэлзлийг багасгаж, Chow / Chow хархаас) (Зураг S5). R121919-ийн урьдчилан боловсруулалт (20 мг / кг, хоолны дэглэмийн өөрчлөлтийг нэмэгдүүлж, хоолны дуршил буурах, хоолны дэглэмийн өөрчлөлтийг бууруулж үр дүнг тооцох) (breakpoint: Diet Schedule × Эм: F1,15 = 8.17, P <0.02; нийт хариу: Хоолны хуваарь × Эм: F1,15 = 9.14, P <0.01; Зураг. 2B, зүүн). R121919 нь Чоу / Palatable харханд гүйцэтгэлийг идэвхжүүлсэн нь RZNUMX нь 121919-ийн минутанд хариу үйлдэл хийхэд хаагдсан (Diet Schedule × Drug: F1,15 = 2.55, P <0.05) (Зураг. 2B зөв). Тиймээс, CRF1 рецепторын эсрэг антагонист нь урам зоригтой хомсдол дахь урвалын харьцаагаар дэвшилт-харьцаа нь идэвхитэй хомсдолтой байсныг илүүд үздэг.

Таашаалын хоол хүнсээс татгалзах нь стресстэй холбоотой extrahypothalamic CRF системийг идэвхжүүлдэг байж болзошгүй гэсэн таамаглалыг тестлэхийн тулд, CRF мРНХ-ийн түвшин, амйгдалийн төвийн пептидын түвшинг тоон бодит хугацааны ПГУ ба РИА-аар хэмжинэ. Харх нь 7-ийн долоо хоногт хооллолтоор хооллож, хооллож идэх юм. Мэдээ алдуулах, толгой эргэх мэс засал хийлгэсний дараа амигдалийн төв бөөмөөс тархины цууралт цуглуулсан бөгөөд хоол идэхээс сэргийлж, дараа нь буцаж ирсний дараа цуглуулсан. Chow / Chalk-ийн хархуудтай харьцуулахад Амёгдавын төвийн цөм дэх CRF мРНН-ийн илэрхийлэлд тав дахин их өсөлтийг өдөөсөнЗураг. 3A). Үүний эсрэгээр, CRF мРНХ нь хоол тэжээлийн шинэчлэгдэх боломжтой болгосон хяналттай адил түвшинд буцаж ирсэн (F2,19 = 6.97, P <0.01). Чоу / Тааламжтай хархнуудыг зөвхөн нэг удаа циклээр эргүүлэхэд амигдалагийн төв цөм дэх CRF мРНХ-ийн илэрхийлэл өөрчлөгдөөгүй (Chow / Chow vs. Chow / Palatable: 5.5 ± 2.2 vs. 6.3 ± 1.7 ns), CRF- -ийг аажмаар элсүүлэхэд дэмжлэг үзүүлэв. CRF1 хоолны дэглэмийн цочмог нөлөөнөөс илүү хоолны дэглэмийн тогтолцоотой байдаг. Үүнээс гадна CRF мРНХ-ийн экспресс нь цөмийн коликс, prefrontal cortex эсвэл insular cortex-д өөрчлөгдөөгүй бөгөөд үр дүнгийн бүсийн өвөрмөц байдлыг дэмжихЗураг S6). Сонирхолтой нь, гипоталамусын перруктрикусын нуклеотидын эсвэл ХХВ-ийн мРННХ-ийн илэрхийлэлд мэдэгдэхүйц өөрчлөлт ажиглагдахгүй байсан ба Chow / Palatable харханд ижил withdrawal цагтИнжир. S6 ба S7), гипоталикик гэхээсээ илүү амигдаларийн өөрчлөлтийг таамаглал дэвшүүлэх таамаглалыг санал болгож байна. Үүнээс гадна CRF пептидийн дархлааг идэвхитэй хоол тэжээлээс тэжээгддэг мал амьтны амин зангилааны төвд 70% нь идэш тэжээлийн амьтдаас өндөр байсан боловч идэх хоолны дэглэмийн түвшинд буцаж очсон хоол тэжээлээр дамжууланF2,24 = 4.01, P <0.01) (Зураг. 3B). Ийнхүү эмчилгээний үр дүнг хасах нь аминдэмийн төвийн цөм дэх стресстэй холбоотой CRF пептидийн системийг идэвхжүүлж, мансууруулах бодис, этилийн спиртийн загвараас гарсан үр дүнтэй ижил төстэй юм., ). Учир нь амин дэмийн төвийн цөм дэх экстрактотиклографийн CRF системийг идэвхжүүлснээр CRF идэвхжүүлэх нь түгшүүртэй холбоотой байдаг), одоогийн үр дүн нь тэтгэвэрт гарах сөрөг үр дагаварт үр дагавруудыг багасгах замаар сөрөг аргаар бэхжүүлсэн эд хөрөнгийг идэж болно).

3 зураг. 

Илүүдэл хоолны дэглэмийн үр нөлөөA) CRF mRNA ба (B) Amygdala төвийн цөмд CRF пептидийн илэрхийлэл. Харх (n = 45) нь 7-ийн долоо хоногийн турш хооллолтоор явдаг байсан бөгөөд amygdala цоолтуурын төвийн цөм цуглуулсан байв. CRF мРНХ ба пептидийн аль аль нь ...

ХХХ-ийн мэдрэмтгий байдлыг харуулахын тулд идэш тэжээлээс татсан хархууд илэрч магадгүй гэсэн таамаглалыг тестлэхэд оршино1 этилийн спиртийн гаргалтын үед тохиолддог амигдалийн төвийн цөмд γ-аминообутартын хүчил (GABA) сөрөг трансформаторыг), бид зүсэх бэлтгэлд амигидын мэдрэлийн төвийн цөмд GABAergic дамжуулалтанд R121919-ийн нөлөөг судалсан. Эрэгтэй хархнуудn = 14) нь 7-ийн долоо хоногийн турш хооллолтоор явдаг байсан бөгөөд бага зэргийн амтат саванд шилжсэний дараа золиослол хийсэн. Amygdala синтаксийн төвийн цөмд суурь GABAergic дамжуулалт нь хоолны түүхтэй холбоотой биш юм (n = 23 эсүүд) GABA-дарангуйлагч дараах шинж тэмдгүүдийн потенциал (IPSP) үүсгэхэд ашигладаг бүх эрч хүчийг ашиглана. Гэсэн хэдий ч R20 (121919 μM) -тэй 1-ийн минимум фауцыг өдөөсөн нь GABAA- Chow / Palatable харгана (ammgdala) мэдрэлийн төвүүдийн цөмд -IPSPs (M ± SEM: 30 ± 6%, n = 9 эсүүд) Чоу-хооллож буй хяналтаас (M ± SEM: 12 ± 6%, P <0.05, n = 11 эсүүд) (Зураг. 4). 30-ийн минутын дараагаар хоѐр бүлгийн IPSP-ууд ижил төстэй, суурь түвшинтэй буцаж ирдэг. Тиймээс amygdala CRF-CRF-ийг хэт идэвхгүйжүүлдэг1 этилийн спиртийн үед гарах үр нөлөө,), хооллолт-дугуйтай хархууд нь CRF-ийн дарангуйлах нөлөөнд мэдрэмтгий байдлыг харуулсан1 amygdala GABAergic дамжуулах төвийн цөмд рецепторын антагонист.

4 зураг. 

CRF-ийн үр нөлөө1 GABA дээр рецептор антагонист R121919A- Амьддамын төвийн цөмт -IPSPs-ийн эр бэлгийн эсэд ээлтэй эрчүүдийн Wistar хархандn = 14) хоол хүнсээр хүрэлцэхээс татгалздаг. (A) R121919 мэдэгдэхүйц буурсан ...

хэлэлцүүлэг

Хамтарсан үр дүн нь завсарлагатай, хөгжилтэй хоол хүнсээр дамжин өнгөрөх түүхийг стресстэй холбоотой экстрапотекукликемик CRF-CRF дахь дэвшилтэт, сэдэлтэй холбогдох мэдрэлийн тохируулгад хүргэдэг үйл ажиллагааны нотолгоог өгдөг.1 системүүд. Ялангуяа сонгомол CRF1 R121919-ийн рецептор антагонист RXNUMX нь хоол хүнсээр ялгарч ургаж буй харханд ялгаатай, сонгомлоор хооллож хооллож, байнгын идэш тэжээлийн хэрэглээг нэмэгдүүлж, амтат хоолыг шингээж авдаг. CRF1 Рецепторын антагонист нь хоол тэжээлээс гарахад харагдах сонирхол багатай тэжээлийг хариулахад сэтгэлийн түгшүүртэй мэт сэтгэгдэл төрүүлдэг. Хоолны дэглэмд нэвтрэхээс татгалзах нь CRF ген, пептидын илэрхийлэл нь амигдалийн төвийн цөмд, шинэчлэгдсэн хандалтаар устгагдсан үр нөлөө үзүүлсэн. Үүнээс гадна хоолны дэглэмтэй хархнууд ХХЗХ-ны дарангуйлагч нөлөөнд мэдрэмтгий байдлыг харуулсан1 amygdala-ийн цөмийн төвд GABAergic transmission дээр рецепторын антагонист, цаашид amygdala CRF-CRF1 систем. ХХХ-ийн экспресс болон электрофизиологийн мэдрэмж нь CRF-ийн экспресс нэмэгдэж,1 amygdala-ын төвд рецепторыг блоклох. CRF1 Урьдчилан хооллодог хүнсний бүтээгдэхүүнийг хэрэглэхээс өмнөхөн антагонист урьдчилан боловсруулалтыг эхлээд одоо байгаа CRF-CRF1 системийг татан буулгах ажиллагааг зогсоох. Хариулаагүй амьтанд үзүүлсэн хоолны дэглэмийн богино хугацааны хоолны цаг хугацаа) нь ХХХ-ийн пепсидын илэрхийлэл, чөлөөлөлт, үр нөлөөг хэвийн байлгах хугацааг тусгасан байж болно. Тиймээс хоолонд дуртай хоол идэх нь тархины урамшууллын тогтолцоонд аллотын өөрчлөлтийг өдөөх нь CRF-CRF1 amygdala төвийн цөм дэх системүүд.

Эдгээр үр дүн нь зөвхөн идээшилж идэхээс гадна төдийгүй сэдэл хүсэл тэмүүлэлтэй холбоотой байдаг. ХДХВ-ийн системийг дахин давтан идэвхжүүлэх нь тархинд өрсөлдөгчтэй төстэй үйл явцыг (өөрөөр хэлбэл, CRF-ийг элсүүлэх1 дамжуулагч систем) шагналын системд энгийн алдагдлаас ялгаатай. Систем хоорондын мэдрэлийн тохируулга) нь хүчирхийллийн бүх гол эмэнд хараат байдалд шилжих явцад тохиолддог (, ). Энэ судалгаагаар мансууруулах бодисын бус өдөөлтийг ерөнхийд нь харуулсан нь цаг хугацааны туршид гононик урвалын эрч хүчийг давтаж давтаж буй хувь хүмүүст өдөөлтийг өдөөж болно (). Дасан зохицох замаар ийм үйл явц нь хоол хүнс эрэлхийлэх, хэрэглээний зан үйлийг эрчим хүчээр баялаг, өндөр урамшуулалтай хоол хүнсэнд шилжүүлж болох бөгөөд энерги багатай, бага шагналтай хоол хүнс (эсвэл хүнсний бус) олж авах хүчин чармайлтыг бууруулж, хувьслын хувьд ашигтай дасан зохицох чадварыг бий болгодог. тэжээлийн зардал (жишээлбэл, махчин амьтдын өртөлт, хязгаарлагдмал цаг хугацаа, эрчим хүчний нөөц). Гэхдээ өнөөгийн нөхцөлд таргалалтыг өдөөдөг хоол хүнс нь бага амттай, гэхдээ илүү тэжээллэг хувилбараар ижил процессоос үүдэлтэй байж магадгүй юм.

Тиймээс CRF-ийн донтолттой төстэй өөрчлөлтүүд1 системүүд жолоодоход тусалж болно (i) эрчим хүчний өтгөн амтат хоол хүнс хэрэглэдэг, (ii) эрүүл сонголтыг дутуу үнэлэх, (iii) тааламжтай хоол хүнс хэрэглэхэд саад болдог сөрөг сэтгэл хөдлөлтэй холбоотой сөрөг, , -, ). Хүний нөхцөл байдалд орчуулагдсан, CRF системийн идэвхжүүлэлт нь таргалалт болон хоолны дэглэмийн эмгэгийн үед дахилтын идээт хоолыг идэж болно.

Материал, арга зүй

Субьектууд.

Эрэгтэй хархнуудn 155, 180-230 g, 45 хоногийн настай) 19 h: 10.5 h урвуу гэрэл цикл (8) -д утастай, хуванцар тор (12 × 12 × 10 инч) : 00 h гэрэл), чийгшил (60%), температур-хяналттай (22 ° C) виватор. Харханд Тарбад LM-485 Diet 7012: 65% (ккал) нүүрс ус, 13% өөх, 21% уураг, бодисын солилцоот эрчим хүч 341 cal / 100 g] болон 1 долоо хоногт усны зар libitum Туршилтын эхлэл. Лабораторийн амьтныг асрах, ашиглах талаархи үндэсний эрүүл мэндийн гарын авлага (NIH нийтлэлийн дугаар 85-23, 1996-ийн шинэчилсэн найруулга) болон "лабораторийн малын асрамжийн зарчмууд" (http://www.nap.edu/readingroom / ном товлорууд) ба Scripps Research Institute-ийн Мал аж ахуйн арчилгаа, хэрэглээний хорооноос баталсан.

Эм.

R121919 нь Chen et al-д тодорхойлсны дагуу синтез хийсэн. (). R121919 нь өндөр нягтаршилтай (Ki = 3.5 nM) сонгомол CRF1 бусад CRF-ийнхээс илүү физик шинж чанар бүхий физик шинж чанар бүхий антагонист1 антагонистууд (жишээ нь, logP ба logD буурсан, усны уусамтгай чанар нэмэгдсэн) (). Туршилтын хувьд R121919 нь 1 M HCl (10% эцсийн эзэлхүүн) -д ууссан бөгөөд 20% (wt / vol) 2-гидроксипроп-β-циклтектрин (Sigma-Aldrich) -ийн сүүлчийн тээврийн хэрэгслээр шингэрүүлнэ. NaOH рН 4.5. R121919 уусмал нь sc (sc) -ийг 2 мл / кг эзэлнэ.

Либитум Diet Alternation зар.

Тохирсоны дараа хархууд нь 3-4 хоногийн хоол тэжээл, биеийн жин, тэжээлийн үр ашгийн хувьд хоёр бүлэгт хуваагдсан. Нэг бүлэг нь долоо хоногт Chow / Chow / ad libitum 7 өдөр (Chow / Chow) зарагдсан бөгөөд хоёр дахь бүлэг нь 5-ийн өдөрт зориулсан chow ad libitum-тэй бөгөөд дараа нь 2-ийн ad libitum-ийн маш сонирхолтой , шоколад амттай, өндөр сахартай хооллолт ("хөгжилтэй", Chow / Palatable). Хоолны дэглэм нь хоол тэжээлээр бүрэн дүүрэн, шоколад, амттай, өндөр сахар (50% ккал), AIN-76A дээр суурилсан хоол хүнс юм. шоколад-амттай Формула 5TUL: 66.8% (ккал) нүүрс ус, 12.7% өөх, 20.5% уураг, метаболизмд оруулах эрчим хүч 3.48 ккал / гр; 45-мл нарийвчлалтай хүнсний үрлэн гэж нэрлэнэ., )]. Хурдны хувьд эхний долоо хоногт 5-ийн өдрүүд (зөвхөн chow) болон сүүлийн 2-ийн өдрүүд (туршилтын бүлгийн дагуух буурцаг эсвэл амтлагчид) -ыг бүх туршилтуудад C ба P үе шатууд гэж нэрлэдэг. Хоол тэжээл нь нэгэн зэрэг боломжгүй байсан. Чоу хоол хүнс нь 485-7012-г шахмал үржүүлсэн гэж 65-ээс бүрдэх 13 [21% (ккал) нүүрс ус, 341% өөх, 100% -ийн уураг, метаболизмд оруулах эрчим хүч 5 cal / 4 g] эсвэл 5TUM дэглэм [65.5 % (ккал) нүүрс ус, 10.4% өөх, 24.1% уураг, метаболизмд оруулах эрчим хүч 330 cal / 100 g; TestDiet]. Өмнөх судалгаануудын нэгэн адил Харлан Теклад LM-485 chow-ийг хооллолт, өндөрлөг дээр нэмэх-maze туршилтанд ашигласан), харин TestDiet 5TUM chow () нь дэвшилт-харьцаа, CRF мRNA, CRF пептидийн агууламж, кортикостерон RIA болон электрофизиологийн туршилтуудад ашиглагдав.

Өмнө нь хэвлэгдсэн шиг), хоолны дэглэмийн давуу тал, хоёр дахь хоолны дэглэмтэй холбоотой эхний хоолны дэглэмийн (ккал) хувиар тооцоолсон: 5TUL Шоколадны Diet (sugary Palatable diet) ба Харлан LM-485 chow (M ± SEM 90.7 ± 3.6%) болон 5TUL Шоколадтай хоол (амтат амтат хоолны дэглэм) vs. 5TUM chow Diet (M ± SEM preference 91.2 ± 3.7%).

Өргөтгөсөн Plus-Maze.

Өндөр нарийвчлалтай plus-maze тестийг Cottone et al-д тайлбарласнаар гүйцэтгэсэн. (). Chow / Palatable хархнууд 7-ийн долоо хоногийн туршид хооллож явдаг байсан бөгөөд дараа нь 20 mg / kg R121919 (-1 h, sc) болон 5-9 h-ийг туршина. → үе шат). Chow / Chow хяналтын хархууд нь субьектуудын дизайныг зэрэгцүүлэн туршиж үзсэн (n = 47). Чоу хоолны дэглэм нь шинжилгээний үе хүртэл зар libitum байсан. Дэлгэрэнгүй мэдээллийг SI Текст.

Хоол хүнс тэжээлийн ахиц дэвшлийн хуваарь.

Cottway et al-д тайлбарласанчлан хүнсний арматурын дэвшилтэт-харьцааны хуваарийг гүйцэтгэсэн. (). Өөрөөр заагаагүй бол амьтныг туршилтаар зар сурталчилгаа A / I chow (5 g шахсан үрэл) авсан байна. Хүнсний бэхжүүлэгчид нь шахмалаар хийсэн торны хоолны дэглэмийн найрлагатай адилхан 45-мг-ийн нарийвчлалтай үрлэн үрлэн юм. Хичээлүүд 14 мин-ийн харьцааг дуусгаагүй үед сүүлээр дууссан харьцаа нь break цэг гэж тодорхойлогдсон. Chow / Palatable хархнууд 7-ийн долоо хоногт хамгийн багадаа хоол хүнсэндээ зориулж, дараа нь R121919 (-1 h, sc) -ийг бэлдмэлээс (P → C фазаар) шилжүүлэн суулгах үед хэрэглэсэн. Chow / Chow хяналтын хархууд нь субьектуудын дизайныг зэрэгцүүлэн туршиж үзсэн (n = 17). R121919-ийн (0, 20 мг / кг биеийн жин, ск) -ын тунг хоёр хоолны дэглэмийн дагуу субъектив, тэнцвэржүүлсэн загвараар өгөв. Дэлгэрэнгүй мэдээллийг SI Текст.

Тооцооллын бодит хугацааны ПГУ.

Харх (n = 20) -ийг хоолны дэглэмийн дагуу 7 долоо хоногийн турш мөчлөгт хамруулж, мэдээ алдуулж, хоолны дэглэмийн хоёр нөхцөлд толгойг нь тайлав (долоо хоног бүрийн мөчлөгийн 5, 7 дахь өдөр). Тархины тархины матрицад тархийг хурдан арилгаж, титэм зүсэж, амигдалын төв цөм, бөөмийн бөөм, тусгаарлагдсан бор гадаргын хэсэг, урд талын бор гадаргын цоорхойг мөс шиг хүйтэн үе шатанд цуглуулав. Нийт РНХ-г тархины цоолтуур бүрээс амьтны эдээс РНХ ялган авах стандарт протоколыг ашиглан бэлтгэсэн. Нийт РНХ (1 мкг) -ийг үйлдвэрлэгчийн зааврын дагуу Oligo (dT) 20 байлцуулан урвуугаар хуулав. RT-PCR-ийн тоон урвалыг 20 μL эзэлхүүнтэй, 0.5 μM праймер ба 4 mM MgCl ашиглан явуулсан.2. Үр дүнг хоѐр дахь дериватив аргаар шинжлэн, эталон генийн КАЙА-ийн түвшинг илэрхийлэх зорилгоор хэвийнжүүлсэн дурын нэгжээр илэрхийлэгдэнэ. Өгөгдсөн дарааллын хувьд RT-ПГУ-ын хариу урвал ижил хугацаанд явагдана. Дэлгэрэнгүй мэдээллийг SI Текст.

Пептидийн хүчил олборлолт ба CRF RIA.

Харх (n = 25) нь хоолны дэглэмийн үед хамгийн багаар бодоход 7-ийн долоо хоногийн туршид хооллож, хооллолт, хоолны дэглэмийг хасч, долоо хоног бүрийн мөчлөгийн 5 болон 7-ийн өдрүүдэд идэгдсэн. Тархи тархины матрицад түргэн арилгаж, хэрчсэн, амиггандын цөмийн цул мөсний хүйтэн үеийг цуглуулсан. Пептидийн хүчил олборлолт нь аль хэдийн тодорхойлогдсон процедурыг). Зүрхний шигдээсийн шигдээсийн эдийг Zorrilla et al-аас тохируулсан эмзэг, өвөрмөц хатуу үе шатны RIA-тай тэнцүүлсэн. (). Дэлгэрэнгүй мэдээллийг SI Текст.

Corticosterone RIA.

Харх (n = 12) -ыг дор хаяж 7 долоо хоногийн турш хоолны дэглэмийн мөчлөгөөр хийсэн бөгөөд хоолны дэглэмийн хоёр нөхцөлд (долоо хоног бүрийн мөчлөгийн 5, 7 дахь өдөр) сүүлний цуснаас дээж авсан болно. Кортикостеронтой төстэй иммунореактивын сийвэн дэх түвшинг үйлдвэрлэгчийн зааврын дагуу (MP Biomedicals, Inc) худалдаалагдах боломжтой RIA иж бүрдэлээр тодорхойлов (). Дэлгэрэнгүй мэдээллийг SI Текст.

Электрофизиологийн судалгаа

Слезийн бэлтгэл.

Амёгдалагийн зүсмэлийн төвийн цөмийг өмнө нь тайлбарласан, ) хархаасn = 7 / бүлэг) 7-ийн долоо хоногт хамгийн багадаа 2-ийн долоо хоногт уржуулсэн, идэмхий, хасагдсан 3-95 h-ийн хоол идсэний дараа буцаана. Тархи нь хурдан устгаж, мөс хүйтэн хиймэл тархины хорт шингэн (aCSF) -ийг XNUMX% O2 ба 5% CO2. Зүсмэлүүд нь 30-ийн орчимд интерфэйсийн тохиргоог багасгаж, aCSF-г халааж, бүрэн усаар дүүргэж, тасралтгүй дулаанаар дүүргэсэн. Африкт агуулагдах концентрацийг олохын тулд мансууруулах бодисыг уусмалаас aCSF-д нэмсэн. 2-4 мл / мин-ийн хэт их хэрэглээний түвшинд эмийн концентраци нь 90-ийн минимум дахь агууламжийн агууламжийн 2% -д хүрнэ.

Электрофизиологи.

Амйгдалийн мэдрэлийн төвүүдийг цөмийн хурц микропроцессороор тасралтгүй хүчдэл буюу одоогийн хавчаарын горимоор бүртгэсэн. Ихэнх мэдрэлийн эсүүд нь амралтын мембраны ойролцоо байсан. Өгөгдлийг урьдчилан бэлтгэсэн аргаар олж авсан бөгөөд дараа нь шинжилгээнд зориулж pClamp програм хангамж ашиглан хадгалсан. Эмийн өвөрмөц тусгаарлагдсан GABAA рецепторт хориглодог дарангуйлагч шинж тэмдгүүд (GABAA-IPSPs) нь amygdala-ийн төв цистернд идэвхжүүлсэн трансген электродоор дотооддоо өдөөж, CNQX, APV, GABA глутамат рецепторыг хориглодог.B рецептор хориглогч CGP 55845A. Гар тус бүрийн хариу өгөх параметрийг тодорхойлохын тулд бид оролт-гаралтын протоколыг гүйцэтгэсэн. IPSP-ыг хамгийн их далайцтай болгоход шаардагдах хүчдэл хүртэл шаардагдах босгын гүйдлийн хязгаараас эхлээд янз бүрийн урсгалыг хэрэглэсэн. Бид 1-3 × (200) адил тэнцүү алхмуудыг (босго, хагас хамгийн дээд, хамгийн их) гурван удаа хэвийн болгосон. Хүчдэлийн одоогийн (VI) муруй үүсгэхийн тулд одоогийн алхмуудыг гиперполарацлах ба деполин (750-pA цэгэн түүвэр, XNUMX-ms үргэлжлэх хугацаа). Clampfit програмыг ашиглан бид IPSP-ийн хэмжээ болон VI хариултыг тоогоор илэрхийлсэн. Бүх арга хэмжээ нь сонгон шалгаруулах CRF-тэй тэмцэхийн өмнө бүх арга хэмжээг авсан1 рецептор антагонист R121919 (1 μM), superfusion үед (20 мин), дараа нь угаах (30 мин). Дэлгэрэнгүй мэдээллийг SI Текст.

Статистик.

Оюутны харьцуулсан бүлгийн харьцуулалт t(хоѐр бүлгийн харьцуулалт) буюу антибиотик шинжилгээ (ANOVA) (хамгийн багадаа гурван бүлгийн харьцуулалт), хамгийн сүүлчийн гол нөлөөллийн анализ буюу Newman-Keuls-ийн харьцуулалтыг чухал ач холбогдолтой олон төрлийн нөлөөллүүдийн дараа харьцуулсан (P <0.05). Тэжээлийн туршилтын өгөгдлийг гурван талт холимог ANOVA-ийн тусламжтайгаар хоолны дэглэмийн хуваарьт субьект хоорондын фактор, тун ба хоолны дэглэмийн үе шатыг субьектын хүчин зүйл болгон шинжлэв. Өндөр нэмсэн төөрдөг байшингийн туршилтын өгөгдлийг хоёр талт ANOVA-ээр хоолны дэглэмийн хуваарь, тунгаар шинжлүүлсэн. Арматурын туршилтын дэвшилтэт харьцааны хуваарийн хувьд завсарлага ба нийт хариу урвалыг хоёр чиглэлтэй холимог ANOVA-ийн тусламжтайгаар хоолны дэглэмийн хуваарьтай хамт субъектуудын хоорондын фактор, тунг субьектуудын доторх хүчин зүйл гэж үзэв. Эхний 5 минутын хугацаанд хариу өгөх хугацааг гурван талт холимог ANOVA-ийн тусламжтайгаар хоолны дэглэмийн хуваарьтай харьцуулж, субьект хоорондын хүчин зүйл болох тун ба цаг хугацааг дүн шинжилгээ хийв. Электрофизиологийн судалгаануудын өгөгдлийг харилцан хамааралтай ANOVA эсвэл субьект доторх ANOVA-ийн дагуу зохих ёсоор нь давтан арга хэмжээ авч шинжилсэн болно. Кортикостероны РИА-ийн өгөгдлүүдээс хоёр талт холимог ANOVA-г Diet Schedule-тай субьектын хоорондын фактор, Diet Phase-ийг субьектын доторх хүчин зүйл болгон шинжилсэн болно. Статистикийн багцыг Instat 3.0, Prism 4.0 (GraphPad), Systat 11.0, SPSS 11.5 (SPSS) ашигласан болно.

 

Нэмэлт материал

Мэдээллийг дэмжих: 

Талархал.

Майк Арендсын редакцийн туслалцаа, Мэри Гюхүн нарт захиргааны туслалцаа үзүүлэх, Боб Линц, Жанетел Helfield, Стефани Дела Круз, Молли Брэннан нарт техникийн туслалцаа үзүүлэхэд талархаж байна. Энэхүү ажил нь Чихрийн шижингийн үндэсний төв, Бөөрний эмгэг, Бөөрний эмгэгийг дэмжих DK70118, DK26741, P30DK56336 зэргээр дэмжигдсэн. Дакарын мансууруулах бодис тараах үндэсний хүрээлэн DA023680; Архидан согтуурахтай тэмцэх, архидан согтуурахтай тэмцэх үндэсний хүрээлэн AA016731 ба AA015566; Мэдрэлийн болон мэдрэлийн эмгэгийн үндэсний хүрээлэн IT32NS061847-01A2; AG028040 хөгшрөлтийн үндэсний институт; National Heart, Lung and Blood Institute Grant HL088083; Эллисоны анагаах ухааны сан; мөн Архидалт ба Донтох Судалгааны Pearson төв. Энэхүү ажлын хэсэг нь Эмийн эсрэг үндэсний хүрээлэнгийн Институтийн судалгааны хөтөлбөрүүд, Архидалт, архидан согтуурах үндэсний хүрээлэнгийн дэмжлэгтэйгээр хэрэгжсэн. Энэ бол Scripps Research Institute-ийн 19807 гар бичмэлийн дугаар юм.

Хөл тэмдэглэл

 

Зохиогчид сонирхлын зөрчилгүй гэж үздэг.

 

 

Энэ нийтлэл бол PNAS Шууд Захиалга юм.

 

 

Энэ нийтлэлд онлайнаар дэмжих мэдээллийг агуулж байна www.pnas.org/cgi/content/full/0908789106/DCSupplemental.

 

Ашигласан материал

1. Укровоу ND, Шуурхай Шуурхай үнэлгээний судалгаа. Мансууруулах бодисын донтолт бидэнд хэрхэн таргалалтыг ойлгоход тусалдаг вэ? Nat Neurosci. 2005; 8: 555-560. [PubMed]
2. Corwin RL. Хулгайлсан харх: Хэт их хэт их зан үйлийн загвар? Дур булаам. 2006; 46: 11-15. [PMC үнэгүй нийтлэл[]PubMed]
3. Боггиан ММ, бусад Таашаал ханамжтай хоол хүнс нь хэт таргалалтанд мэдрэмтгий байхаас үл хамааран хэтрүүлэн хооллодог гэж үздэг. Таргалалт ба таргалалтгүйгээр тарган туранхай, таргалалттай амьтны загвар. Int J Obes. 2007; 31: 1357-1367. [PubMed]
4. Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Элсэн чихэр донтохын нотолгоо: Цочмог, хэт их сахар хэрэглэсний зан төлөв, мэдрэлийн үрэвсэл. Neurosci Biobehav Rev. 2007; 32: 20-39. [PMC үнэгүй нийтлэл[]PubMed]
5. Teegarden SL, Bale TL. Хооллолтын давуу тал багасч хоол тэжээлийн дахилтын эрсдэл нэмэгддэг. Biol Psychiatry. 2007; 61: 1021-1029. [PubMed]
6. Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Опиоидоос хамааралтай харшлын эсрэг сөргөлдөөнтэй, маш их сонголттой хоол хүнс хэрэглэх боломж хязгаарлагдмал байдаг хархнуудад идэх дуртай хоол иддэг. Neuropsychopharmacology. 2008; 33: 524-535. [PubMed]
7. Koob GF. Донтолтын үед тархины стрессын тогтолцооны үүрэг. Neuron. 2008; 59: 11-34. [PMC үнэгүй нийтлэл[]PubMed]
8. Koob GF, Le Moal M. Мансууруулах бодисын хүчирхийлэл: Hedonic homeostatic dysregulation. Шинжлэх ухаан. 1997; 278: 52-58. [PubMed]
9. Ghitza UE, SM саарал, Epstein DH, Rice KC, Shaham Y. Антиогенийн эмийн бэлдмэл нь ратчены дахилтын загварыг хайж буй амтат хоолыг нөхөн сэргээж өгдөг: CRF1 рецепторуудын үүрэг. Neuropsychopharmacology. 2006; 31: 2188-2196. [PMC үнэгүй нийтлэл[]PubMed]
10. Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Илүүдэл хоол хүнсээр дамжин нэвтрэх нь харханд хяруу үржүүлэх чадварыг бууруулдаг. Am J Physiol. 2008; 295: R1066-1076. [PMC үнэгүй нийтлэл[]PubMed]
11. Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Сүрьеэгийн эмгэг, эмзэг бүлгийн эмгэг, бодисын солилцооны дасан зохицол, эмзэг хоол хүнсээр солигддог. Psychoneuroendocrinology. 2008; 34: 38-49. [PMC үнэгүй нийтлэл[]PubMed]
12. Бернер LA, Avena NM, Hoebel BG. Хулгайлсан, өөрийгөө хязгаарлаж, бие махбодийн жин нэмэгддэг Өөх тос багатай хоол хүнсээр хязгаарлагдахгүй. Таргалалт 2008; 16: 1998-2002. [PubMed]
13. Zorrilla EP, Koob GF. CRF1 антагонистуудын эмчилгээний чадамж нь сэтгэл түгшээсэн. Шинжээчдийн үзэл бодлыг судлах 2004; 13: 799-828. [PubMed]
14. Carobrez AP, Bertoglio LJ. Сэтгэл түгшүүрийн зан байдлын ёс зүйн болон түр зуурын анализ: 20-ийн өндөрлөг нэмэх-maze загвар. Neurosci Biobehav Rev. 2005; 29: 1193-1205. [PubMed]
15. Маркоу А, бусад Мансууруулах бодисын хайрын амьтны загварууд. Psychopharmacology. 1993; 112: 163-182. [PubMed]
16. George O, et al. CRF-CRF1 системийн идэвхжүүлэлт нь никотинаас хамааралтай харханд никотины бие даасан үйлчлэлийг зогсооход хүргэдэг. Proc Natl Acad Sci USA. 2007; 104: 17198-17203. [PMC үнэгүй нийтлэл[]PubMed]
17. Wells AS, NW уншина уу, Laugharne JD, Ahluwalia NS. Өөх тос багатай хоолны дэглэмийн өөрчлөлтийг хийснээр сэтгэлийн хөдөлгөөн өөрчлөгдөнө. Br J Nutr. 1998; 79: 23-30. [PubMed]
18. Cruz MT, et al. CRF1 рецептор антагонистууд нь vitabine in vitro төвийн amygdala дахь GABA-ийн этанолыг өдөөж сулруулдаг. Архины эмнэлэг Exp Res. 2008; 32: 6s1 P27A.
19. Koob GF, Bloom FE. Эмийн болон харгалзах эмийн молекулын механизм. Шинжлэх ухаан. 1988; 242: 715-723. [PubMed]
20. Flaherty CF, Grigson PS. Арматураас ялгаатай нь: Оролцооны эсрэг тэсрэг байдлын хариу урвалын үүрэг. J Exp Psychol. 1988; 14: 165-176. [PubMed]
21. Чен C, бусад 2,5-dimethyl-3-метилпиридин-6-yl) -4-dipropylaminopyrazolo [3, 7-a] пиримидин (NBI 1 / R5) болон бүтэц-идэвхтэй харилцан үйлчлэл бүхий цувралууд амаар идэвхтэй кортикотропин-ялгаруулагч хүчин зүйлүүд рецептор антагонистууд. J med Chem. 30775; 121919: 2004-47. [PubMed]
22. Cooper SJ, Francis RL. Хонины елен гэдэсний хоёр хоолыг ашиглан хлорбоазеоксоксидын цочмог буюу архаг арчилгааны ур нелее. J Pharm Pharmacol. 1979; 31: 743-746. [PubMed]
23. Laboure H, Saux S, Nicolaidis S. Тетраболийн параметрийн өөрчлөлтийн үр нөлөөг: Богино болон урт хугацааны хооллолт, биеийн жин. Am J Physiol. 2001; 280: R780-R789. [PubMed]
24. Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. FG 7142 нь хоол тэжээлийн хэмжээг багасгаж, эмэгтэй харханд тэжээлээр тэжээгддэг хоол тэжээлийн хувь хэмжээ, тогтмол хэмжээг бууруулдаг. Бензодиазепин урвуу урвалд орох нь хоол тэжээлийг багасгадаг. Neuropsychopharmacology. 2007; 32: 1069-1081. [PubMed]
25. Лахмам А, Григорийдис, Де Соуза Эб, Armario A. Тархины кортикотропиныг хүчин зүйлээс шалтгаалсан дархлааны идэвхтнүүд ба рецепторууд таван инжрийн эгнээнд орсон: Усан сэлэлтийн зан үйлтэй холбоотой. Brain Res. 1997; 750: 285-292. [PubMed]
26. Zorrilla EP, Valdez GR, Weiss F. Орон нутгийн CRF-like-immunoreactivity болон сийвэнгийн кортикостерон дааврын хэмжээ өөрчлөгдөж байгаа хархнуудад мансууруулах бодисыг удаан хугацаагаар алдах үед өөрчлөгдөж байна. Psychopharmacology. 2001; 158: 374-381. [PubMed]
27. Роберто М, Мадамба SG, Мур СД, Тогтвортой МК, Сиггинс Гр. Этилийн спирт amygdala нейрон дахь өмнөх болон дараахь оношлогооны хоёулангийнх нь хувьд GABAergic дамжуулалтыг нэмэгдүүлдэг. Proc Natl Acad Sci USA. 2003; 100: 2053-2058. [PMC үнэгүй нийтлэл[]PubMed]
28. Роберто М, Мадамба, Стифферфер, Парсонс Лх, Сиггинс Гр. Этилийн спиртээс хамааралтай харханд төвлөрсөн amabgala нь GABA-г суллажээ. J Neurosci. 2004; 24: 10159-10166. [PubMed]