DAT Gene Expression (2013) -ийг өөрчлөхгүйгээр удаан хугацаагаар өндөр өөх тос нь Dopamine Reuptake-ийг бууруулдаг.

  • Жексон Ж.Кон,
  • Елена Х.Чарап,
  • Дэвид Н.Поттер,
  • Стефани Р. Эйнер,
  • Митчел Ф.Ритман

Товч

Хоол тэжээлээс үүдэлтэй таргалалт (DIO) -ийг боловсруулах нь допамины дамжуулагч (DAT) илэрхийлэл, допамины давтамж зэрэг допамины дохиоллын олон талыг өөрчилдөг. Гэсэн хэдий ч DAT-ийн илэрхийлэл, функцэд суурилсан хоолны дэглэмийн өөрчлөлтийн цаг хугацаа, эдгээр өөрчлөлтүүд нь DIO-ийн хөгжилд хамааралтай эсэх нь шийдэгдээгүй хэвээр байна. Энд бид 2 буюу 6-ийн долоо хоногт өндөр (HFD) эсвэл бага (LFD) өөх тосыг хооллодог. Хоолны дараа мөөгөнцөр, шээсний ялгаралт нь дарангуйлагдсан ба статитын DAT функцийг цочмог хэвтрийн вирусийн талбайд (VTA) допамины эсүүдээр цахилгаанаар өдөөж, хурдан скрининг циклметрийн аргаар аарцгийн шүүдэс дэхь допамины концентрацийг өөрчлөх замаар үнэлдэг. Мөн түүнчлэн бид хоолны дэглэмийн протоколд өртсөний дараа могойн холбоотой DAT-ийн мембраны холбоотой DAT-ийн нөлөөг тоогоор харуулсан. Бидний эмчилгээний бүлгүүдийн аль нь ч биеийн жингээс ялгаатай. 6-ийн дараа LFD-ийн харханд хамаатай HFD-ийн харханд допамины дахин хэрэглэсэн хэмжээгээр алдагдсан. Үүнээс гадна, кофенд эмийн эмчилгээний сорилыг дагасан LFD-ийн харханд хамаатай HFD-ийн хэмжээ ихээхэн буурсан байна. Барууны бүдүүн гэдэсний шинжилгээгээр нийт DAT уургийн хооллолт ямар ч нөлөө үзүүлээгүй болохыг тогтоосон. Гэсэн хэдий ч, HFD-ийн 2 долоо хоногт 6 kDa DAT isoform нь synaptosomal мембрантай холбоотой фракцид ихээхэн хэмжээгээр буурсан боловч дахин боловсруулалтын төгсгөлөгтэй холбоотой фракц биш юм. Бидний өгөгдөл DAT-ийн үйлдвэрлэлийн өөрчлөлтөөс үл хамааран dopamine reuptake-ийн дагуу хоолны дэглэмээс шалтгаалсан өөрчлөлтийн талаарх нэмэлт нотолгоог гаргаж, DIO-ийн хөгжилгүйгээр ийм өөрчлөлтүүд илэрч болохыг харуулж байна. 

Нэр: Cone JJ, Chartoff EH, Potter DN, Ebner SR, Roitman MF (2013) DAT Gene Expression-ыг өөрчлөхгүйгээр Dopamine Reuptake-ыг удаан хугацаагаар хэрэглэв. PLANS ONE 8 (3): e58251. doi: 10.1371 / journal.pone.0058251

редактор: АНУ-ын Duke University Medical Center, Сидней Артур Симон

Хүлээн авсан: Аравдугаар сар 26, 2012; Хүлээн зөвшөөрсөн: Хоёрдугаар сарын 5, 2013; Нийтэлсэн: Гуравдугаар сарын 13, 2013

Зохиогчийн эрх: © 2013 Cone et al. Энэ бол зохиогчийн эрхээр хамгаалагдсан Ашиглалтын лицензийн нөхцөлд тараасан нээлттэй эх сурвалж юм. Энэ нь эх зохиогч, эх сурвалжийг кредитэд тавьснаар ямар ч орчинд хязгаарлалтгүйгээр ашиглах, түгээх, хувилах боломжийг олгодог.

Санхүүжилт: Энэхүү төслийг ДЭМБ-аас ДОТСНУМ (MFR) болон T025634-MH32-ийн Биоанагаахын Мэдрэлийн Сургалтын Хөтөлбөрөөс (JJC) дэмжсэн. Чикагогийн хамтын нийгэмлэгийн итгэлцлийн (SJLC) тэтгэлгээр UL067631RR1 (JJC) болон Чикагогийн Био-анагаахын консорциумаар дамжуулан судалгааны нөөцийн үндэсний төв, орчуулгын орчуулгын үндэсний төв, НИС-ийн тусламжтайгаар нэмэлт дэмжлэг үзүүлсэн. Контент нь зөвхөн зохиогчдын хариуцлага бөгөөд NIH буюу Чикагогийн Биоанагаахын консорциумын албан ёсны үзэл бодлыг илэрхийлэх албагүй болно. Санхүүжүүлэгч нар судалгааны дизайн, мэдээлэл цуглуулах, дүн шинжилгээ хийх, хэвлэн нийтлэх, эсвэл гар бичмэл бэлтгэхэд ямар ч үүрэг гүйцэтгээгүй.

Өрсөлдөх сонирхол: Зохиогчид өрсөлдөх ашиг сонирхол байхгүй гэж зарлав.

Оршил

Илүүдэл жин ба таргалалт нь АНУ болон дэлхийн хүн ам илүү их хувийг эзэлж байна [1], [2]. Хэдийгээр таргалалт хийх олон зам байдаг ч биеийн эрүүл мэндэд хамгийн их аюул заналхийлж буй нэг зүйл бол их идэмхий, илчлэг ихтэй хоол хүнс [3]. Үнэндээ хоол хүнсний эрчим хүчний нягтрал (ккал / гр) нь насанд хүрэгчдэд илүүдэл жин ба таргалалтад хүргэдэг [4], [5]. Хүнсний болон хүний ​​бус амьтдын хошногонд допамины ялгаралт үүсдэг [6], [7], [8], [9] хоол тэжээлийн нягтралын субъектив үнэлгээ нь амны хөндийн бөөрний мэдрэлийн хариу урвалын хүчтэй хамааралтай [10]. Тиймээс dopamine болон striatum эрчим хүчний нягт хоолонд тохирсон сонголт хийхэд нөлөөлдөг. Саяхан хоолны дэглэмийн ялгаа нь богино хугацаанд схемийн өөрчлөлт, хоол хүнсээр удирдуулсан зан үйлийг өөрчлөхөд хүргэж байгааг харуулж байна [11]. Гэсэн хэдий ч идэж уусан хоол хүнс, ялангуяа өөх тосны хувьд ялгаатай шинж тэмдэг илэрч байгаа нь нотлогдох магадлал бага юм.

Striatal dopamine signaling нь фермент тирозин гидроксилаза, өмнөх ба дараахикаптины допамины рецепторууд, presynaptic dopamine transporters (DATs) зэрэг допамины үйлдвэрлэл зэрэг хэд хэдэн хүчин зүйлээр зохицуулагддаг бөгөөд эдгээр нь бүгд таргалалтанд нөлөөлдөг [12], [13]. DAT-ийн тоо эсвэл функцэд өөрчлөлт нь сулруулсан dopamine-ийн нөлөөг өөрчилж, улмаар хэвийн үйл ажиллагаа [14], [15]. Орхигдуулсан хоол идсэний дараа гаргасан инсулин нь DAT функцэд нөлөөлж байгааг харуулсан [16], [17]. Тиймээс DAT нь хоолны дэглэмийн нөлөөнд нэрвэгдсэн хүмүүсийн нэг юм.

Сүүлийн үед таргалалт, DAT-ийн боломжууд болон DAT-ийн функционалаас шалтгаалсан өөрчлөлтүүдийн хоорондын хамаарлыг судлав. Биеийн жингийн индекс (BMI) нь хүний ​​шээсний DAT-тэй холбоотой сөрөг үр дагавартай байдаг [18]. DAT холболт нь өндөр өөх тос (HFD) хулганад хооллодог [19]. HFD-ийн шалтгаант таргалалт (DIO) нь хархнууд дахь DAT-ийн dopamine reuptake-ийн бууралттай түвшинтэй холбоотой байдаг. [20]. Эдгээр судалгаагаар HFD-ийн хэрэглэснээр хэт таргалалт нь допамины дохиоллын урьдчилсан сэргийлэх протоколууд, ялангуяа DAT-д нөлөөлж болзошгүйг харуулж байна. Гэсэн хэдий ч, Допамины дохиолол дахь хоолны дэглэмээс шалтгаалсан өөрчлөлтийн цаг хугацаа, DIO-ийн хөгжил нь мэдэгдэхүйц өөрчлөгдөхөд тодорхойгүй хэвээр байгаа эсэх нь тодорхойгүй байна. Бид DAT-ийн функцийг түргэвчилсэн вирустметр ашиглан dopamine release-ыг өдөөж, хулганад дахин дахин идэх хэмжээг тогтоох замаар DAT функцыг туршиж үзсэн. ДАХИНГА гений экспрессийг багасгасан нь dopamine reuptake буурсан эсэхийг тодорхойлохын тулд аммонийн талбайн талбайд болон ДНХ-ПГУ-аар бодит хугацааны цагт DAT mRNA-ийг хэмжсэн. Үүнээс гадна бид биохимийн бүлгийг хуваах процедурыг ашиглан, газрын синтаксоциал ба эндосомын мембран дахь DAT түвшинг тодорхойлохын тулд Барууны бүдгэрүүлэх шинжилгээг ашигласан. Харх нь 2 буюу 6 долоо хоногт өндөр эсвэл бага өөх тос агуулдаг байсан ч бүх хэмжилтийг DIO байхгүй байсан. Бидний үр дүнгээс харахад DIO-ийн бие даасан HFD-ийн тасралтгүй хэрэглээ нь DAT-ийн хэмжээ багасахгүйгээр амны хөндийн бөөмийн допаминий хэмжээг бууруулдаг.

Материал, арга зүй

Ёс зүйн тайлбар

Энэхүү судалгааг Эрүүл мэндийн Үндэсний хүрээлэнгийн лабораторийн амьтныг хамгаалах, ашиглах гарын авлагад заасны дагуу хийсэн болно. Протоколыг Иллинойс мужийн Чикаго их сургуулийн Амьтны эрүүл мэндийн хороо баталсан. Бүх мэс засал urethane anesthesia -ээр хийгдсэн бөгөөд зовлонг багасгахын тулд бүх хүч чармайлтыг хийсэн.

Субьектууд

Стандарт эр Sprague-Dawley харх (n = 67), ойролцоогоор 2 сартай ба 225-275-г жинлэнэ. Амьтад нь 26.5 ° C ба чийглэг- (50 ° X) температурын хяналттай орчинд (20 × 22 × 30 cm) байрладаг 12 h 12 h гэрлээр хянагдсан орчинд харанхуй цикл (07: 00 h). Харх нь байгууламжид нэг долоо хоногийн турш тохирсон зар сурталчилгаа стандарт лаборатори ба ус руу нэвтрэх.

Хоолны хэрэглээ ба биеийн жингийн хэмжилт

Тохирсоны дараа, хархыг жинлэн жинлэж, 1-ийн 4 бүлгийнхэнд анхдагч биеийн жинг тэнцвэржүүлсэн байна. Өөх тос багатай хоол хүнс (LFD, Research Diets, New Brunswick, NJ; D12450B; 10% коксолжсон өөх тос (3.85 kcal / g)). Бусад 2 бүлгүүд HFD (Судалгааны хоол, D12492, 60% килокалоритын өөх тос (5.24 ккал / г) -д хадгалагдсан. Хоол хүнс бүрийн хувьд хархнууд 2 буюу 6-ийн долоо хоногуудад (wks) аль алинд нь хадгалагдан үлдсэн байдаг. 4 бүлгүүд нь: LFD-2 wk (n = 18), HFD-2 wk (n = 16), LFD-6 wk (n = 16) болон HFD-6 wk (n = 17). Бүх бүлгүүд байсан зар сурталчилгаа ус нэвтрэх. Хоолны хэрэглээ ба биеийн жингийн хэмжилтийг 3 удаа / хон ба 3-р сард хийсэн ваттметрийн бичлэг эсвэл DAT уураг / мессежийн шинжилгээнд хамрагдсан хархад өгөгдлийг тусад нь мэдээлдэг.

Мэс заслын процедур ба допамины хэмжилт

Хоолонд өртсөний дараа биеийн жингээрээ ялгаагүй хархнуудын дэд хэсгийг вольтамметр бичлэгт (LFD-2 wk (n = 8), HFD-2 wk (n = 6), LFD-6 wk (n = 6) , ба HFD-6 wk (n = 7)) уретан (1.5 г / кг) наркозын дор [9,21-т заасны дагуу]. Гарын авлагын суваг (Bioanalyantic Systems, West Lafayette, IL) нь ховдолын стриатумаас дээш байрласан (урд тал нь 1.3 мм, хажуугийн хажуу талаас 1.5 мм), хлоржуулсан мөнгөн утас (Ag / AgCl) эстрад электродыг эсрэг талын бор гадаргын хэсэгт суулгасан бөгөөд хоёулаа гавлын ясыг зэвэрдэггүй ган эрэг ба шүдний цементээр бэхэлсэн. Нүүрстөрөгчийн шилэн электрод (CFE) агуулсан микроманипуляторыг гарын авлагын сувагт хийж электродыг ховдолын стриатум руу буулгасан. CFE ба эталон электродыг тайзны тавцантай холбож, CFE-ийн потенциалыг −0.4-аас +1.3 V (Ag / AgCl-ийн эсрэг) ба арын (400 V / s; 10 Hz) сканнердсан. Хоёр туйлт өдөөгч электрод (Plastics One, Roanoke, VA) -ийг аажмаар вентраль tegmental area / substantia nigra pars compacta (VTA / SNpc; 5.2 мм-ийн арын хэсэг, 1.0 мм-ийн хажуу ба эхний ээлжинд 7.0 мм-ийн вентрал) -аас 0.2 мм-ийн хэмжээтэй бууруулсан. . Нэмэх болгонд одоогийн импульсийн галт тэрэг (60 импульс, импульс тутамд 4 мс, 60 Гц, 400 µА) нийлүүлэгдсэн. Өдөөлт электродыг VTA / SNpc-д байрлуулж, CFE нь стриатумд байх үед өдөөлт нь допамины ялгаралтыг найдвартай үүсгэдэг - үндсэн бүрэлдэхүүн хэсгийн анализ ашиглан вольтамметр өгөгдлөөс гаргаж авдаг. [9], [22]; туршилт бүрийн дараа урсацын тарилгын системд СЕГ бүрийг тохируулсны дараа концентраци болгон хувиргадаг [23]. Идэвхжүүлсэн электродын байрлалыг хамгийн их хэмжээгээр гаргахад оновчтой болгосон. Дараа нь туршилт эхлэхээс өмнө CFE-ийн минимум 10 минутыг тэнцвэржүүлнэ. Допаминыг VTA / SNpc-ийн цахилгааны өдөөлтөөр (дээрхтэй ижил параметрүүдээр) өдөөж, допамины концентрацид өөрчлөлт гарсан нь -5-ээс 10-ийн хамаарлыг өдөөхөд хүргэсэн. Сэтгэлийг нь даруй өдөөгчөөр 0.9% -ийн давсны уусмалаар (10 mg / kg ip) уусгасан кокаин гидрохлоридаар тарьсан ба 10 мин дараа өдөөлтийг давтана. Хэрэглээний хүчдэл, өгөгдөл олж авах, дүн шинжилгээ хийх ажлыг LabVIEW (National Instruments, Austin, TX, USA) [22].

Dopamine Reuptake

Dopamine reuptake нь Demon Voltammetry Analysis Software (24, Wake Forest University, Winston-Salem NC) ашиглан загварчилсан. Энд бид задралын даэбаминыг хэмжих хэмжүүрийг хэмждэг. Tau нь допамины цэвэрлэгээний муруйн дийлэнх хэсгийг хамарсан экспоненциал муруйгаас гаралтай бөгөөд маш их хамааралтай (r = .9899) К-тайm, DAT-д зориулсан допамины давтагдашгүй байдал [24]. Допамины концентрацийн кокаин нь кофенд үзүүлэх нөлөөллийг тодорхойлохын тулд бид удирдлагын өмнө болон дараа авсан утгуудыг харьцуулсан.

Гистологи

Баримт бичлэг бүрийн дараа зэвэрдэггүй ган электрод (AM Systems #571500, Sequim, WA) нь CFE-тай ижил түвшинд хүртэл буурч, бичлэгийн байршлыг тэмдэглэх зорилгоор (10 μA, 4 s) хийсэн. Тархи нь 10% формацинд хадгалагдаж хадгалагдан үлдсэн. Хөнгөн бичил харуурыг микроскопоор ялган байршлыг тодорхойлохдоо coronal sections (50 μm) дээр тулгуурласан. Энд дурдагдсан бүх бичлэгийг амны хөндийн бөөгнөрөл дээр хийсэн [25].

Stroke-ийн эд эсийн эсийн давтац

Харх (LFD-2 wk, HFD-2 wk, LFD-6 wk, HFD-6 wk; n = 10 / бүлэг, биеийн жингийн ялгаа байхгүй). Биохимийн фракцыг дээр дурдсан протоколын дагуу гүйцэтгэсэн [26], жижиг өөрчлөлтүүдтэй. Тархи нь изопентанаар хөлдөөсөн, кростат (HM505E, Microm, Walldorf, Герман, -20 ° C) дээр хөлдөөсөн, шуурхай хүрэх хүртэл түргэн арилгасан. Хоёр талт 1-мм3 15.2-ыг 20-ийн 0.8 мл-хүйтэн TEVP (10 mM Tris суурь, 5 mM NaF, 1 mM Na3VO4, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, pH 7.4) + 320 мМ сахарозын буфер. Нийт homogenate (H) -ийн 100 мкл аликвотыг авав. H-ийн үлдсэн хэсэг нь 800 ° C-д 10 минутын хувьд 4 × g-т centrifuged байна. Pellet (P1, бөөм, том хагархай) 0.2 мл-ийн TEVP буферт сэргээж, хадгалж авав. Супернатан (S1) -ийг мөсөн дээр цэвэр хоолойгоор байрлуулсан байна. S1 нь 9200 ° C-д 15-ийн минутанд 4 × g-т центрифугдэж, Pellet (P2, түүхий synaptosomal мембран) болон туйлын (S2) үүсгэсэн. P2 нь TEVP + 35.6 mМ сахарозын буферийг нэг удаа угаана. Дараа нь 0.25 мМ сахарозын буфер 35.6 мл-ийг дахин шингэлж, 3-ийн хувьд мөстэй дээжийг хадгалж, 30-ийн миныг хадгалах замаар исэлдүүлэн угаана. Supernatant (S2) -ийг 165,000 h-д зориулж 2 × g-д цуглуулж, TEVP (3 мл) -д хадгалж, хадгалахад зориулж Pellet (P0.1, хөнгөн мембран, дахин боловсруулсан төгсгөлөг) үүсгэсэн. Бүх дээжийг -80 ° C-т поликарриамидийн гель электрофорез хүртэл хадгална.

Гель электрофорез ба Баруун Блоттинг

Уургийн агууламжийг Био-Рад DC уургийн шинжилгээний багц (Hercules, CA) ашиглан тодорхойлж, дээж тус бүрийн концентрацийг 0.3 мг / мл уураг болгон тохируулав. NuPAGE LDS (лити додецил сульфат) дээжийн буфер (Invitrogen, Carlsbad, CA) ба 50 мМ дититрейтолыг 70 ° С-т 10 минутын турш халаахаас өмнө дээж бүрт нэмсэн. Фракц тус бүрт тэнцүү хэмжээний уураг ачихын тулд дээж тус бүрээс 3 мкг-ийг NuPAGE Novex 4-12% Bis-Tris гель (Invitrogen) -т гель электрофорезоор ялгаж авав. Дараа нь уургийг поливинилиденийн фторын мембран (PVDF) руу шилжүүлсэн (PerkinElmer Life Sciences, Бостон, MA). Өвөрмөц бус холболтын хэсгүүдийг тасалгааны температурт 2 цагийн турш хаах буфер дотор хаасан (PBS-д 5% тослоггүй хуурай сүү ба 0.02% Tween 20 [PBS-T]). Дараа нь толбыг анхдагч эсрэгбие (1∶3000 хулганы моноклональ анти-NR2B [# 05–920, Millipore], 1∶5000 туулайн эсрэг DAT [# AB2231, Millipore] ба 1∶1000 хулганы моноклональ анти-трансферрин рецепторт өсгөвөрлөв) TfR) [# 13-6800, Invitrogen]. Толбыг 3 хэсэг болгон хуваасан: өндөр (> 97 кДа), дунд (46-97 кДа) ба бага (<46 кДа) жин ба хэсэг тус бүрийг таньсан эсрэгбиемээр шинжлэв. жингийн хязгаарт багтсан уураг.Ашигласан эсрэгбиемүүдийн молекул жин нь: NR2B, 180 kDa; DAT, 75, 64, 50 kDa; TrfR, 95 kDa. DAT-ийн дунд жингийн бүслүүрийг шинжилсний дараа эсрэгбиеийг инкубацийн аргаар хуулав. хөргөлтийн буфертэй (62.5 мМ Трис, 2% SDS, 100 мМ merc-меркаптоэтанол, рН 6.8) 15 минутын турш 50 градусын температурт. Блокуудыг дараа нь дахин хааж, анти-TfR-тай туршина. SeeBlue Plus 2 (Invitrogen) молекулын жинг тооцоолох зорилгоор будсан стандартыг боловсруулсан болно.

Protein immunoblots-ийг Carestream Molecular Imaging Software 5.0 ашиглан хийсэн. Цэвэр эрч хүч (сонирхол бүхий бүлгийг хасах тоогоор нь пикселүүдийн нийлбэрийг хассан) хамтлаг бүрээр тодорхойлно. Самбаруудын хоорондын харьцуулалтыг зөвшөөрөхийн тулд өгөгдөл 2 болон 6-ийн LFD контролуудад хэвийн болсон байна. Өгөгдлийг LFD ± SEM-тай харьцуулахад дундаж дахин индукцээр илэрхийлэгдэнэ.

Тоон бодит хугацааны урвуу дамжуулалт Полимеразын гинжин хэлхээний урвал (qRT-PCR)

Баруун бүслүүрийн анализ хийхэд тулгараад буй цус харвалтын дараах судалгаагаар хөлдөөсөн тархи нь VTA / SN рүү хүрэх хүртэл микротомийг судалдаг. Хоёр талт 1-мм3 VTA ба SN эдийг (дундаж жин = 15.0 мг) хийж, RNA-ийг PureLink RNA Mini Kit (Invitrogen) ашиглан гаргаж авсан. РНХ-ийн чанар, тоо хэмжээг Agilent Bioanalyzer 6000 дээр RNA 2100 Nano Chip (Agilent, Santa Clara, CA) ашиглан үнэлсэн. РНХ-ийн бүрэн бүтэн байдал (RIN) нь бүх дээжийг 7-ээс хэтэрсэн, өндөр чанарыг харуулж байна. Нийт РНХ-ийн нэг микрограмм нь cDNA-ийг ThermoHybaid iCycler (Thermo Scientific) -д iScript cDNA Synthesis Kit (BioRad) ашиглан синтезлэхэд ашигладаг. DAT (PrimeraginagCGTGCGTGACAT; Урвуу праймер: AAGGAAGGCTGGAAGAGAGC), ба TATA хайрцгийг холбох уураг (Tbp; Оруулах праймер: ACCTAAAGACCATTGCACTTCGTGCC, Урвуу праймер : GCTCCTGTGCACACCATTTTCCC) генүүд (Генбанкны гишүүдийн тоо NM_6, NM_3, болон NM_012694) нь NCBI Primer-BLASThttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/) болон Integrated DNA Technologies (Coralville, Iowa) компаниас худалдаж авсан. Муруйн муруйн шинжилгээ ба полакапиламид гель электрофорез нь праймерын өвөрмөц байдлыг баталсан. DAT, β-актин, ба Тбб-ийн холболтуудын урт нь 266, 182, болон 136 суурь хос байна.

Q-ПГУ-ын хэрэгсэл (iQ SybrGreen Supermix, BioRad) ашигласан. Энэ урвалыг 20 μL 2 μL 3 μL 4 μL 1 μL нь 10 μL cDNA дээжийг 95:5 шингэрүүлсэн бөгөөд MyiQ Single Color Real-Time PCR илрүүлэх систем (BioRad) дээр гүйцэтгэсэн. PCR дугуйн нөхцөл 40 ° C байсан бол 94 мин; 15 секундэд 60 s, 15 ° 72 s, 15 ° C нь 84 s-д зориулсан. 15 ° C-ийн уншилтыг температурын тохируулга дээр үндэслэн 1.00-ийн температурт цуглуулсан болно. Стандарт шингэрүүлэлтээр (0.2, 0.04, 0.008, XNUMX-fold) тогтоосон праймерын шингэрүүлэлтийн муруйг бүх эмчилгээний бүлгээс cDNA-ийн тэнцүү хольцтой мастер cDNA нөөцөөр үүсгэсэн. Бүртгэл10 шингэлэлтийн утгыг стандарт муруйлтын босоо мөчлөгийн утгын эсрэг тогтооно. MyiQ Оптик Системийн Програм хангамж (BioRad) нь өгөгдөлд дүн шинжилгээ хийхэд ашиглагдав. ДНХ-ийн загвар, дээжийн найрлагагүй дээжийн дээжүүд нь геномын ДНХ-ийг бохирдуулах, олшрохын тулд хянадаг. Илрүүлсэн утгууд нь дээж бүрийн дотоод стандарт ß-актин, Тбб-ийн дундаж утгуудад хэвийн байна. Өгөгдөл нь DAT / дотоод стандартуудын mRNA ± SEM-ийн харьцангуй түвшинд илэрхийлэгдэнэ.

Статистикийн анализ

DAT илэрхийллүүд нь хоёулаа хүний ​​амьдралын мөчлөгийн туршид динамикаар өөрчлөгддөг [27] болон хархнууд [28], [29]. Түүнээс гадна допамин болон зан авирын хариу үйлдэл нь залуу хархнууд боловсорч өөрчлөгддөг [30]. Тиймээс DAT-ийн хэмжигдэхүүн нь наснаас хамааран өөр өөр байж болох бөгөөд 2 wk болон 6 wk бүлгүүдийн хооронд утгатай харьцуулалт хийхийг хориглодог. Тиймээс бүлэг нь хоол хүнс, бие махбодийн жин, дээд dopamine концентраци, tau,% өөрчлөлт, харьцангуй генийн экспресс гэсэн утгыг 2 болон 6 wk бүлгүүдэд харуулсан. Баруун бүсийн шинжилгээний хувьд хэвийн DAT band-ийн эрчимшлийн бүлгийн зөрүүг 2 болон 6 wk бүлгүүдэд хоёуланг нь давтан хэмжих ANOVA (dietXfraction) аргыг тусад нь харьцуулсан болно. Статистик анализыг Графийн план 5 (Prism Inc) дээр гүйцэтгэсэн.

үр дүн

ЭМСМА нь өсөн нэмэгдэж буй хэрэглээг нэмэгдүүлдэг

Хоол хүнс эхлэхээс өмнө 2 wk (LFD: 275.22 +/- 4.1 g; HFD: 280.87 +/- 4.8 g; p = 0.37), эсвэл 6 долоо хоног (LFD: 287.31 +/− 4.9 гр; HFD: 289.44 +/− 5.1 гр; 6 долоо хоног p = 0.97) бүлгүүд. Өөр өөр найрлагатай хоолны дэглэм хэрэглэдэг хэдий ч бид 2 ба 6 долоо хоногийн дараа хоолны дэглэмийн бүлгүүдийн хооронд биеийн жингийн ялгаа илрээгүй (1a-b зураг; ns). 2 болон 6 хоол хүнс хэрэглэдэг хоёрын дараах хэрэглээний нийт кcals ялгаагүй1c-d зураг; ns). Гэсэн хэдий ч HFD-ийн хархууд өөх тосоос их хэмжээгээр хэрэглэдэг (1e-f зураг; 2 wks: t (32) = 25.59; 6 wks: t (31) = 27.54; p<0.0001 хоолны дэглэмийн аль алиных нь хувьд).

өнгөц зураг

Татаж авах:

PowerPoint слайд

том зураг

анхны зураг

Зураг 1. Хоолны хэрэглээ, биеийн жингийн хэмжилт.

Өөхний эцсийн жинд ЭМД-ын болон LFD-ийн хооронд ялгаа байгаагүй (a-b) эсвэл килокалорийн нийт хэмжээc-d) 2 буюу 6-ийн долоо хоногийн хоолны дэглэмийн дараах долоо хоногууд. (e-f) HFD хархнууд 2 долоо хоног болон 6 долоо хоногийн нөхцөлд (LFD) хархаас илүү их коксжих бодисыг их хэмжээгээр хэрэглэсэн (***p

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g001

Урт хугацааны ЭМСХ нь DA Reuptake-ийн хэмжээг бууруулдаг

Voltammetric бичлэгийг аарцгийнЗураг 2). Зураг 3 6-ийн хоолны дэглэмийн дараах хархаас авсан допамины концентрацид цахилгаанаар өдөөгдсөн өөрчлөлтийн төлөөллийг харуулсан. Суурь судалгаагаар допамины хэмжээ нь хоолны дэглэмийн болон хоолны дэглэмийн хугацааны хооронд ялгаагүй байв (4a-b зураг, аль аль нь). Гэсэн хэдий ч хувь хүний ​​жишээнд үзлэг хийхэд допамины концентрацийн дараах задралын хэмжээ нь 6-ийн хоолны дэглэмийн дараа хоолны дэглэмийн хооронд ялгаатай байгааг тогтоосонЗураг 3 Жишээ нь a-b). Баяжуулалтын хэмжээ нь DAT-ийн допамины клиренсээс хамаардаг [31], бид үүнийг мэдэхийн тулд нэг үе шатанд экспоненциал байдлаар загварчилсан болно. 2-ийн хоолны дэглэмийн дараах хооллолтын бүлгийн хооронд ялгаа байхгүй (4c зураг). Гэсэн хэдий ч, 6 хооллолтонд өртсөний дараа NT нь LFD-6 wk-тай харьцуулахад HFD-6 wk харханд мэдэгдэхүйц их байсан (4d зураг; t (11) = 2.668; p<0.05). Тиймээс HFD-ийн 6 wks нь LFD хэрэглэсэн амьтадтай харьцуулахад ховдолын стриатум дахь допамины клиренсийн түвшинг бууруулдаг.

өнгөц зураг

Татаж авах:

PowerPoint слайд

том зураг

анхны зураг

Зураг 2. Дахин анализ хийхээр бүртгүүлэх газруудын гистологийн шалгалт.

LFD-ээр хооллох рекорд сайтууд нь саарал өнгийн гурвалжин, HFD-ийн харханд кодчилдог. Тоонууд нь өмнө талд нь Bregma-д зайг зааж өгдөг. Paxinos ба Watson 2006-ээс авсан зураг.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g002

өнгөц зураг

Татаж авах:

PowerPoint слайд

том зураг

анхны зураг

Зураг 3. VTA / SNc-ийн цахилгаан өдөөлт нь допамины концентрацид фазын баяжуулалт үүсгэдэг.

6-ийн долоо хоногийн дараа олж авсан өгүүллийн төлөөллийн жишээ. a) Өнгөний хасах өнгөний талбай нь электродын янз бүрийн боломжит өөрчлөлтийн өнөөгийн өөрчлөлтийг (-5-0-ийн хамрах хүрээнээс хамаарах) өмнө болон дараа нь (0.1-10-ийн харьцангуй хамааралтай) өмнө VTA / SNc-ийн цахилгааны өдөөлтийг (STIM) хийнэ. Цаг хугацаа бол abscissa, электродын боломж нь зохицол бөгөөд одоогийн өөрчлөлтүүд нь хуурамч өнгөт кодлогдсон байна. LFD-0.6 wk-ийн идэвхижилд идэвхжихэд допамин [исэлдэлт (+ 0.2 V; ногоон) ба бууруулах (-6 V; b) HFD-6 wk хулганааас бусад а) -тэй адил байна. c) Допамины концентрацийг цаг хугацааны функцээр өнгөт талбайгаас а) аукционоор нь муруйн дагуу тодорхойлно. Хоёр улаан цэгүүд нь оргилын үед оргил цэг, допамины концентрацийг тэмдэглэдэг. Tau нь баруун талд тэмдэглэгдсэн байна. d) C) -д адилхан боловч өгөгдөл нь b) -ээс олборлодог.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g003

өнгөц зураг

Татаж авах:

PowerPoint слайд

том зураг

анхны зураг

Зураг 4. Өндөр өөх тосыг 6 долоо хоног хэрэглэснээр допамин дахин хэрэглэх хэмжээг бууруулж, кофенийг допамины хариу үйлдэл болгон бууруулдаг.

2-ийн дараах VTA / SNpc-ийн өдөөлтийг үүсгэсэн дундаж оргил допамины концентраци (a) эсвэл 6-ийн долоо хоног (b) кокаин тариулахаас өмнө хооллолтонд өртөх. c-d) 2-ийн дараах Tau-ийн дундажc) дуудаж эсвэл 6 wk (d) илүүд үздэг. TF нь LFD-6-ийн хархтай харьцуулахад HFD-6-ийн өндөр хөхний хархуудад их байсан (*p e-f) 2-т кокаин тариулсны дараа допамин концентрацийг өдөөсөн оргил дахь хувь хэмжээ (e) болон 6 (f) хэдэн долоо хоногийн турш хоолны дэглэмд өртөх. LFD-6 wk хархтай харьцуулахад HFD-6 вт-ийн хувь өөрчлөлт бага байсан (**p

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g004

Урт хугацааны HFD нь DA-ийн хариу урвал кокаиныг бууруулдаг

DAT дэх хоолны дэглэмд өөрчлөлт орсон эсэхийг цаашид судлахын тулд бид хархнууд DAT хориглогч кокаиныг тараасан. Цахилгаан өдөөлтийн дараах допамин концентраци нь допамин ялгарснаас үүдэлтэй боловч допаминыг DAT-ээр нэгэн зэрэг зайлуулах замаар хязгаарлагддаг. [21]Байна. Бид кокаины допамин дамжуулалтад үзүүлэх нөлөөг эмийн өмнөх үнэ цэнэтэй харьцуулахад (% -ийн өөрчлөлт) харьцуулан тодорхойлсон. Хоёр вантай HFD нь LFD-тай харьцуулахад% өөрчлөлтөд нөлөөлөөгүй (4e зураг; ns). Гэсэн хэдий ч 6 wk-ийн хоолны дэглэмийн дараа% өөрчлөлт нь LFD-тэй харьцуулахад HFD-д мэдэгдэхүйц бүдгэрсэн (4f зураг; t (10) = 4.014; p<0.01). Бидний үр дүнгээс харахад HFD-ийн 6-аас 2 биш W кокаин дахь допамины хариу урвалыг бууруулдаг болохыг харуулж байна.

HFD-ийг удаан хугацаагаар хэрэглэх нь синаптосомын мембран дахь DAT протеиний хувирлыг бууруулдаг

Урт хугацааны HFD-ийн нөлөө DAT тооны өөрчлөлттэй холбоотой эсэхийг тодорхойлохын тулд DAT уургийн хэмжээг нийт эд эсийн нэгэн төрлийн (H фракц), синаптосомын мембран (P2 фракц), эсийн доторхи эсийн дахин боловсруулалт (P3 фракц) -д тооцоолсон. DAT нь NУураг боловсорч гүйцсэний улмаас гликозилжилтийн түвшин нэмэгдэж байгаатай холбоотойгоор 50-аас 80 кДа-ийн хоорондох тодорхой молекул жинтэй гликопротеиныг холбосон. [32]Байна. Фракцийг синаптосомын мембраны фракц дахь NMDA рецепторын NR2B дэд хэсгээр баяжуулсан илэрхийллээр батлав. 5b зураг). 2 ба 6 wk-ийн хоолны дэглэмийн дараа нийт DAT уургийн хувьд ямар ч ялгаа олдсонгүй (өгөгдлийг харуулаагүй). DAT уургийн фракцын өвөрмөц ялгааг шалгахын тулд бид ANOVA (dietXfraction) гэсэн хоёр талын давтан хэмжүүрийг ашигласан. Вольтамметрийн туршилтуудын дагуу 2 вт-ийн хоолны дэглэм нь P2 эсвэл P3 фракцуудын аль ч DAT изоформын түвшинг өөрчлөхөд хангалтгүй байсан (Зураг. 5Байна. c, e, g; бүгд ns). Гэсэн хэдий ч 6 wk-ийн дараа хоолны дэглэмийн өртөлтийн дараа dietXfraction-ийн харилцан үйлчлэл ихээхэн байсан (F(1,18) = 8.361, p<0.01); 5d зураг) нь DAT-ийн 50 кД изоформын хувьд. Ийнхүү удаан үргэлжилсэн HFD нь P50 фракц дахь DAT-ийн 2 kD изоформыг эрс багасгаж, P3 фракцын өсөлтийн чиг хандлагыг үүсгэсэн. Бид 64 кД (хоолны дэглэм ба фракцын аль ч нөлөө үзүүлээгүй)5f зураг; ns) эсвэл 70 кД (Зураг 5h; n) DAT изоформууд.

өнгөц зураг

Татаж авах:

PowerPoint слайд

том зураг

анхны зураг

5 зураг. Өөх тос ихтэй хоолны дэглэмийн хэрэглээ нь ховдолын striatum дахь DAT уурагтай холбоотой мембраныг бууруулдаг.

a) (2) 1 × 1 мм-ийн эд эсийн цохилтыг DAT уургийн шинжилгээнд нэгтгэсэн ховдолын striatum-аас авсан зургийг харуулж байна. VStr = Ventral Striatum; DStr = Dorsal Striatum; cc = корпус callosum; ac = урд талын комисс. b) C – h хэлбэрээр өгөгдсөн өгөгдлийн баруун хэсгийг төлөөлнө. L = LFD; H = HFD; TfR = трансферрин рецептор; NR2B = NMDA рецепторын NR2B дэд хэсэг. c) 50 долоо хоногийн хоолны дэглэмийн дараах P2 эсвэл P3 фракцуудын хувьд 2 kD DAT уургийн хувьд ялгаа байхгүй байсан. d) 50 кД DAT уураг P2 (* =) -д мэдэгдэхүйц буурдаг p<.05), гэхдээ LFD-3 wk хархтай харьцуулахад HFD-6 wk дахь ховдолын хөндийн эдийн P6 фракц биш юм. 64 кД DAT уургийн хувьд 2 (e) эсвэл 6-ийн долоо хоног (f) илүүд үздэг. 70 (2 kD DAT уураг) -ын хооронд ямар ч ялгаа байхгүй байна.g) эсвэл 6-ийн долоо хоног (h) илүүд үздэг.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g005

P2 фракц дахь DAT уургийн түвшин буурсан эсэхийг тодорхойлохын тулд хэсэгчлэн DAT транскрипцийг бууруулж байсан тул VTA / SNc DAT mRNA түвшинг харх хэмжээтэй ижил харьцаатай адил хэмжсэн болно (6a зураг Жишээлбэл). 2 эсвэл 6 wk-ийн дараа хоолны дэглэмийн бүлгийн дунд тархины DAT mRNA-ийн хоорондох ялгаа ажиглагдаагүй (Зураг 6b – c; хоёулаа n). Тиймээс ховдолын striatum доторх DAT уургийн түвшний ялгаа нь DAT үйлдвэрлэлийн дутагдалтай холбоотой байх магадлал багатай юм.

өнгөц зураг

Татаж авах:

PowerPoint слайд

том зураг

анхны зураг

6 зураг. Өөх тос ихтэй хоолны дэглэмийн хэрэглээ нь DAT mRNA түвшинг өөрчлөхгүй. а)

VTA / SN-ээс авсан, DAT mRNA шинжилгээнд зориулж нэгтгэсэн 1 × 1 мм-ийн эдийн цоололтыг харуулж буй дүрс дүрс. cp = тархины савлуур; pc = хойд талын комисс; MM = medial mammillary цөм. 2 долоо хоногоос хойш DAT mRNA харьцангуй ялгаа байхгүй байна (b) эсвэл 6 долоо хоногт хоолны дэглэмд өртөх (c).

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g006

хэлэлцүүлэг

HFD-ийг удаан хугацаагаар хэрэглэх нь төв мэдрэлийн тогтолцоонд DIO болон хуванцар үүсэхэд хүргэдэг. Допамин мэдрэлийн эсүүд ба стриатал допамин рецепторууд нь HFD-ийн нөлөөлөлд өртсөн CNS зорилтот болон таргалалттай хүмүүст тохиолддог. [11], [13], [33]Байна. Энд бид HFD нь ховдолын судасжилтанд допаминыг нөхөн сэргээх хурд буурсан бөгөөд энэ нөлөө нь өртөх хугацаанаас хамаарна гэж мэдээлсэн. Чухал зүйл бол HFD-ийн DAT функцид DIO байхгүй үед үүссэн. Энэхүү судалгаанд бид бие махбодийн наалдамхай байдлыг тэмдэглэдэггүй байсан ч амьтдыг ДНХ өртсөний дараа зөвхөн биеийн жингээс хамаарч DIO буюу хоолны дэглэмд тэсвэртэй гэж ангилдаг. [34]Байна. Удаан хугацаагаар үргэлжилсэн HFD нь DAT-ийг саатуулдаг кокаиныг допамин ялгаруулалтын хэмжээг бууруулахад нөлөөлдөг. Баруун нугасны шинжилгээг ашиглан ховдолын судас дахь DAT уургийн түвшинг бид плазмын мембран эсвэл дахин боловсруулах эндосомоор баяжуулсан дэд эсийн фракц дотор байрлах DAT-ийг ялгаж харуулна. Плазмын мембрантай холбоотой DAT-ийн дутуу изоформын хэмжээ мэдэгдэхүйц буурсан болохыг бид илрүүллээ. Ийнхүү удаан үргэлжилсэн HFD нь DAT-ийн генийн илэрхийлэл эсвэл DAT mRNA-ийн тогтвортой байдлыг бууруулалгүйгээр DAT-ийн наймаа, эсвэл боловсорч гүйцэхэд хөндлөнгөөс нөлөөлж, DAT-ийн допаминыг нөхөн сэргээх түвшинг бууруулдаг. Түүнээс гадна, HFD-ийн халдвар авахаас хоёроос зургаан долоо хоногийн хоорондох хугацаа нь DAT-тай холбоотой хоолны дэглэмээс үүдэлтэй уян хатан байдлыг алдагдуулах хамгийн эхний цэг болж байгаа юм.

Таргалалт нь хоёуланд нь хоёуланд нь DAT хүртээмжтэй байдлыг харуулсан олон талт шинж тэмдгүүдтэй холбоотой байдаг [18] бөгөөд хулгана [19]Байна. Гэсэн хэдий ч саяхан ДИО-ийн хөгжил нь харх дахь допаминыг дахин авах түвшинг өөрчилдөг болохыг саяхан харуулав [20]Байна. Энэхүү судалгаа нь зөвхөн 4 долоо хоногийн HFD-ийн дараа экзоген хэрэглэсэн допаминыг хэрэглэсний дараа буурсан допаминыг нөхөн сэргээх ажиллагааг харуулсан боловч HFD дээр хадгалагдаж байсан амьтдыг анхны жингийн өсөлтөд үндэслэн сонгосон бөгөөд ингэснээр өвөрмөц популяцийг төлөөлж болох юм. Энэхүү үзэл бодолд нийцүүлэн HFD амьтад LFD хяналттай харьцуулахад илүү их илчлэг идэж, илүү их жин нэмсээр байв. Саяхны өөр нэг судалгаагаар 12 долоо хоногийн HFD-ийн дараахь хуучирсан хархуудад допаминыг нөхөн төлжүүлсэн талаар мэдээлсэн. [35]Байна. Гэсэн хэдий ч нөхөн төлжих хэмжилтийг хийж байх үед HFD-тэй хооллодог амьтны хоорондох лабораторийн chow хоолны дэглэмийн хоорондох биеийн жинд ихээхэн ялгаа байсан. Тиймээс допаминыг нөхөн сэргээх үйл ажиллагааны алдагдал нь DIO-ийн хөгжлийн шууд үр дүн буюу үүнээс өмнө үүссэн эсэх нь тодорхойгүй хэвээр байна. Эдгээр сүүлийн үеийн мэдээллээс ялгаатай нь дахин хооллолтын хэмжилт хийх үед бидний хоолны дэглэмийн бүлгийн хоорондох биеийн жин эсвэл нийт ккал хэрэглээний ялгаа олдсонгүй. 6-ийн дараа допаминыг нөхөн сэргээхэд өөр ялгаа байгааг олж мэдсэн боловч 2 биш, долоо хоногийн туршид HFD нь допаминыг нөхөн сэргээхэд гарсан хоолны дэглэмээс гарсан өөрчлөлт нь хоолны дэглэмийн найрлага дахь архаг, гэхдээ хурц биш өөрчлөлтийн хариу урвал гэдгийг харуулж байна. Үүнээс гадна, бидний үр дүнгээс харахад таргалалтын үр дүнд DAT дэх хоолны дэглэмийн өөрчлөлт нь өвчний хөгжилд хувь нэмэр оруулдаг. Ирээдүйн судалгаагаар DIO-д өөр өөр мэдрэмтгий байдаг амьтдын популяцийг тодорхойлох шаардлагатай байна [34] DAT-ийн илэрхийлэл / функцэд урьд өмнө байгаагүй ялгаатай буюу DAT-ийн хоолны дэглэмээс үүдэлтэй өөрчлөлтөд ялгаатай байдаг.

Бидний мэдсэнээр энэ нь HFD нь кокаины допаминий хариу урвалыг бууруулдаг болохыг харуулсан анхны судалгаа юм. Мансууруулах бодисын шагнал дахь допамины үүргийг харгалзан бидний хийсэн үр дүн нь ойролцоогоор 6 долоо хоногийн турш HFD-ээр хооллож байсан хархнууд нь хоолны дэглэмээр хооллож байгаа амьтдаас кокаиныг өөрөө удирдах чадвартай болох нь бага байгааг харуулж байна. [36]Байна. Чухал зүйл бол энэ нөлөө нь DIO-ийн хөгжлөөс хараат бус байсан. Нэмж хэлэхэд хархнууд нь DIO-д мэдрэмтгий байдлаар сонгогддог бөгөөд эдгээр нь кокаиний ашиг тусыг бууруулдаг болохыг харуулж байгаа бөгөөд эдгээр кокаиний ашиг шимт шинж чанарыг эдгээр амьтдад бүдгэрүүлж байгааг харуулж байна. [37]Байна. Бидний HFD-6 кг хархуудад ажиглагдсан кокаины хариу урвал буурсан нь striatal DAT-ийн хүртээмж буурсантай холбоотой байж болох юм. Гэсэн хэдий ч кокаин нь DAT-аас хамааралгүй механизмаар допамин дохиог нэмэгдүүлдэг. Тодруулбал, HFD нь кокаины өдөөгдсөн допамин vesicles-ийн нөөцийг сулруулж болзошгүй байсан. [38]Байна. Кокаин нь VTA-ийн доторх допамин мэдрэлийн эсүүдэд GABA-ийн халдвар дамжуулалтыг бууруулдаг [39] дофамин эсийн биетийн галын хэлбэлзлийг өдөөдөг [40]. Эдгээр үйл явцын аль нэг эсвэл бүхэлдээ ЭМД-ын үр дагаварт өртсөн байж болно. ЭМСХ нь кокаин болон мансууруулах бодисын өдөөлт мэдрэлийн дасан зохицох чадварыг хэрхэн өөрчилж байгааг харуулах механизмыг шийдэхэд чиглэнэ. [18]. ЭМСХХ-ийн хэрэглээ зан төлөвийг хоёуланг нь олгодог [41] ба допамины хариу үйлдэл [20], [42] DAT-тэй саад болох амфетамин руу. Хамгийн гол нь HFD-ийн хэрэглэж буй хархнууд хяналттай хоолны дэглэмийг хооллодог хархнуудтай харьцуулсан харшилтай байдаг нь DIO-г хөгжүүлдэггүй боловч амфетамин болзолт байрлалыг хөгжүүлээгүй хэвээр байна [41]. Энд тавигдсан өгөгдөлтэй хамт HFD-ийн хэрэглээ нь сэтгэцийн эмчилгээнд хариу үйлдэл үзүүлдэгийг харуулж байна. Хүчирхийллийн бүх эм нь допамины тогтолцоонд нөлөөлж, допамины дохиололыг эмээр өдөөх явдал нь донтолтыг бий болгоход чухал үүрэгтэй гэж үздэг. [43]. Тиймээс HFD-ийн харханд кокаин багасгасан хариу үйлдэл нь тарган хүмүүст насан туршдаа бодисын зүй бус эмгэг үүсэх эрсдлийг бий болгодог [44]. Кокаины шагналын субъектив үнэлгээ нь тарган хэвийн жинтэй харьцуулахад тарган хүмүүст ялгаатай байгаа эсэхийг ирээдүйн ажилд анхаарах хэрэгтэй.

Баруун бүслүүрийн шинжилгээгээр HFD-ийн хэрэглээ нь удаан хугацааны туршид DAT уургийн нийт бүтцэд нөлөөлөхгүй болохыг харуулж байгаа боловч гликсикжаагүй 50 kDa DAT isoform-ийн интацосомын мембран руу нэгтгэхийг багасгадаг. DAT glycosylation нь допамины тээвэрлэлтийг сайжруулж, мембраны гадаргуугийн тогтвортой байдлыг нэмэгдүүлдэг [45], [46], [47], хүнээс авсан гликозилгүй DAT [45], [46] түүнчлэн хархнууд [47] амархан dopamine тээвэрлэдэг. Түүнээс гадна дархлаажуулалттай туршилтууд нь глюкозилгүй DAT-ийн түвшинг сармагчин болон хүн хоёрын аль алин дахь булчингийн түлэгдэлтээс [47]. Эдгээр судалгаануудаас харахад 50 kDa DAT-ийн мембраны түвшин буурсан нь 6 болон HFD-ийн харханд харуулсан алдагдлыг нөхөхөд тус болдог. Бидний өгөгдөл нь HFD-ийн хэрэглээг харуулсан өмнөх судалгааны үр дүнтэй нийцэж байгаа бөгөөд хулганы амны хөндийн бөөгнөрлийн DAT-ийн боломжийг бууруулдаг [19]. Гэсэн хэдий ч энэ судалгаа нь ДАТ-ын нутагшуулалтыг өөр өөр эсийн тасалгаануудад хэмжиж чадаагүй. Үүнээс гадна бидний олдворууд нь DIO-ийн хархнуудын striatum дахь эсийн гадаргуу DAT-ийн бууралтыг харуулсан судалгаатай нийцэж байгаа юм [20]. Энэ судалгаагаар DAT-ийн нийт уураг нь DIO-ийн загвараар хооллодоггүй гэж мэдээлсэн. Энэ дата нь DAT-ийн нийт уураг нь HFD-ээр үрждэг харханд нөлөөлдөггүй болохыг харуулахын тулд өргөжүүлж байна. Тиймээс, ЭМДС-ийн хэрэглээний хугацааг уртасгах нь DAT-ийн илэрхийллийг өөрчилдөггүй боловч DAT-ийн наймаа эсвэл боловсролтонд саад болж болзошгүй юм.

2 эсвэл 6 хоёрын аль нэгний дараа VTA / SNpc DAT мРНХ-ийн түвшин ялгаатай байх нь DAT-ийн түвшин ерөнхийдөө бидний хоолны дэглэмд нөлөөлөөгүй гэсэн ойлголтыг дэмжиж байгаа юм. Энэ нь HFD хэрэглээний 17 долоо хоногийн дараах хулганы VTA дахь DAT мониторыг багасгасан өмнөх тайлангийн [12]. Гэсэн хэдий ч, энэхүү хооллолт нь 12-ийн долоо хоногт биеийн жингийн хувьд ялгаатай байсан тул DAT мРНХ-ийн түвшинг судалсан болно. Ийнхүү үр дүн нь ДОO-д хожуу үе шаттай дасан зохицох үйл явцыг төлөөлдөг. Дүгнэж хэлэхэд манай өгөгдөл нь HFD-д өртөх нь нийт DAT илэрхийллийг өөрчлөхгүйгээр мембранд хамааралтай DAT-ыг багасгах замаар стентатын dopamine reuptake-ийн үйл ажиллагааны өөрчлөлтийг бий болгодог. Хамгийн чухал нь ДАТ-д хоол хүнсээр өдөөгдсөн тасалдал нь ДОО-г эхлэхээс өмнө тохиолдож болох бөгөөд эдгээр өөрчлөлтүүд нь таргалалт хөгжүүлэхэд хувь нэмрээ оруулж чадна гэж бид үзэж байна.

Бидний өгөгдөл нь dopamine функцийн зохицуулалтад хооллолтыг нэмэгдүүлж буй хоол тэжээлд нөлөөлж байгаа бөгөөд DAT-ийн илэрхийлэл дэхь хоолны дэглэмд нөлөөлж буй өөрчлөлт нь допамины дохиолол дахь функциональ хамааралтай өөрчлөлтүүдэд хүргэдэг тухай нотолгоог бий болгодог. ДАТ-ээр дамжих богино хугацааны допамины дохиоллын динамикт хоол тэжээлийн зан үйлийн үр дагавар гарах магадлалтай. Хоол хүнстэй холбоотой өдөөлт нь стикатын допаминид фикикийн өсөлтийг нэмэгдүүлдэг [9], [48], [49]Энэ нь хүнсний чиглэлийн үйл ажиллагааг бэхжүүлж, хүчирхэгжүүлэх болно [50]. HFD-ийн хэрэглээний 6-ийн долоо хоногийн хэрэглээ нь фиброзын допамины хувилбарын үргэлжлэх хугацааг уртасгана гэдгийг харуулж байна. [51]. ДАТ-ийн дасан зохицох өөрчлөлт нь хоол тэжээлийн функцээр удаан хугацааны допамины дохиололыг өдөөх тэжээл-форвард механизмыг дэмжиж болох бөгөөд дифамин D1-ийн рецепторыг идэвхжүүлж, улмаар хандлагын зан төлөвт чухал үүрэгтэй. [52], [53], [54]. Цаг хугацаа өнгөрөхийн хэрээр богино хугацаанд стеериалины допамин ихсэх нь допамин D2 рецептор (D2R) -ийг багасгах зэрэг зохицуулалтыг дэмжиж болох бөгөөд энэ нь хүний ​​болон мэрэгчдийн таргалалтын загварт [11], [33]. Бидний судалгаагаар таргалалтыг хөгжүүлэх нь допамины дахин сэргэлтийг өөрчлөх шаардлага биш юм. Тиймээс хоолны дэглэмтэй холбоотойгоор мембран ДАТ-д буурч байгаа нь D2R-ийн дахилт, таргалалт болон ХПХ-ны хэрэглээний явцад бий болдог эмгэг өөрчлөлтийг үүсгэж эхлэхэд хүргэдэг. [11].

Талархал

Др. Талархал илэрхийлье. Jamie D. Roitman, Жеймс И. Маккутчеон нар гар бичмэлийн өмнөх хувилбаруудад ашигтай сэтгэгдэл үлдээжээ. Энэхїї бїтээлийн агуулга нь зєвхєн зохиогчийн їїргийг хїлээн зєвшєєрєх ба ЧУ-ын Чикагогийн Биоанагаахын консорциумын албан ёсны їзэл бодлыг илэрхийлэх албагїй болно.

Зохиогчдын оруулсан хувь нэмэр

Туршилтыг зохион бүтээсэн: JJC EHC MFR. Туршилт хийсэн: JJC DNP SRE. Өгөгдлийн дүн шинжилгээг: JJC EHC SRE MFR. Цаасан дээр бичсэн: JJC EHC MFR.

Ашигласан материал

  1. 1. Flegal KM, Carroll MD, Kit BK, Ogden CL (2012) АНУ-ын Насанд хүрэгчдийн 1999-2010-ийн биеийн жингийн индексийг тараах таргалалтын тархалт. JAMA 307: 491-497.
  2. 2. Ogden CL, Carroll MD, Curtin LR, McDowell MA, Табак CJ, нар. (2006) АНУ-д илүүдэл жин ба таргалалтын тархалт, 1999-2004. JAMA 295: 1549-1555.
  3. Харах зүйл
  4. PubMed / NCBI
  5. Google Scholar
  6. 3. Drewnowski A, Almiron-Roig E (2010) Өөх тэжээллэг хүний ​​хүний ​​үзэл бодол ба давуу тал. In: Montmayeur JP, le Coutre J, редакторууд. Өөх илрэх: Амт, нэхмэл, ба дараах үрэвсэлт үр нөлөө, Бүлэг 11. Boca Raton, FL: CRC Press.
  7. Харах зүйл
  8. PubMed / NCBI
  9. Google Scholar
  10. Харах зүйл
  11. PubMed / NCBI
  12. Google Scholar
  13. Харах зүйл
  14. PubMed / NCBI
  15. Google Scholar
  16. Харах зүйл
  17. PubMed / NCBI
  18. Google Scholar
  19. Харах зүйл
  20. PubMed / NCBI
  21. Google Scholar
  22. Харах зүйл
  23. PubMed / NCBI
  24. Google Scholar
  25. Харах зүйл
  26. PubMed / NCBI
  27. Google Scholar
  28. Харах зүйл
  29. PubMed / NCBI
  30. Google Scholar
  31. Харах зүйл
  32. PubMed / NCBI
  33. Google Scholar
  34. Харах зүйл
  35. PubMed / NCBI
  36. Google Scholar
  37. Харах зүйл
  38. PubMed / NCBI
  39. Google Scholar
  40. Харах зүйл
  41. PubMed / NCBI
  42. Google Scholar
  43. Харах зүйл
  44. PubMed / NCBI
  45. Google Scholar
  46. Харах зүйл
  47. PubMed / NCBI
  48. Google Scholar
  49. Харах зүйл
  50. PubMed / NCBI
  51. Google Scholar
  52. Харах зүйл
  53. PubMed / NCBI
  54. Google Scholar
  55. Харах зүйл
  56. PubMed / NCBI
  57. Google Scholar
  58. Харах зүйл
  59. PubMed / NCBI
  60. Google Scholar
  61. Харах зүйл
  62. PubMed / NCBI
  63. Google Scholar
  64. Харах зүйл
  65. PubMed / NCBI
  66. Google Scholar
  67. Харах зүйл
  68. PubMed / NCBI
  69. Google Scholar
  70. 4. Rolls BJ (2009) Хоолны эрчим хүчний нягтрал ба эрчим хүчний хэрэглээ хоорондын хамаарал. Физиологи ба зан байдал 97: 609–15.
  71. 5. Лопикве Ж., Бланкк ЭМ, Кеттел Хан Л, Сердула МК, Сеймур Ж.Д., бусад. (2006) Хоол тэжээлийн энергийн нягтрал нь АНУ-ын насанд хүрэгчдийн эрчим хүчний хэрэглээ болон биеийн жинтэй холбоотой байдаг. Клиникийн хоол тэжээлийн Америкийн сэтгүүл 83: 1362-8.
  72. Харах зүйл
  73. PubMed / NCBI
  74. Google Scholar
  75. Харах зүйл
  76. PubMed / NCBI
  77. Google Scholar
  78. Харах зүйл
  79. PubMed / NCBI
  80. Google Scholar
  81. Харах зүйл
  82. PubMed / NCBI
  83. Google Scholar
  84. Харах зүйл
  85. PubMed / NCBI
  86. Google Scholar
  87. Харах зүйл
  88. PubMed / NCBI
  89. Google Scholar
  90. Харах зүйл
  91. PubMed / NCBI
  92. Google Scholar
  93. Харах зүйл
  94. PubMed / NCBI
  95. Google Scholar
  96. Харах зүйл
  97. PubMed / NCBI
  98. Google Scholar
  99. Харах зүйл
  100. PubMed / NCBI
  101. Google Scholar
  102. Харах зүйл
  103. PubMed / NCBI
  104. Google Scholar
  105. Харах зүйл
  106. PubMed / NCBI
  107. Google Scholar
  108. Харах зүйл
  109. PubMed / NCBI
  110. Google Scholar
  111. Харах зүйл
  112. PubMed / NCBI
  113. Google Scholar
  114. Харах зүйл
  115. PubMed / NCBI
  116. Google Scholar
  117. Харах зүйл
  118. PubMed / NCBI
  119. Google Scholar
  120. Харах зүйл
  121. PubMed / NCBI
  122. Google Scholar
  123. Харах зүйл
  124. PubMed / NCBI
  125. Google Scholar
  126. Харах зүйл
  127. PubMed / NCBI
  128. Google Scholar
  129. Харах зүйл
  130. PubMed / NCBI
  131. Google Scholar
  132. Харах зүйл
  133. PubMed / NCBI
  134. Google Scholar
  135. Харах зүйл
  136. PubMed / NCBI
  137. Google Scholar
  138. Харах зүйл
  139. PubMed / NCBI
  140. Google Scholar
  141. Харах зүйл
  142. PubMed / NCBI
  143. Google Scholar
  144. Харах зүйл
  145. PubMed / NCBI
  146. Google Scholar
  147. Харах зүйл
  148. PubMed / NCBI
  149. Google Scholar
  150. Харах зүйл
  151. PubMed / NCBI
  152. Google Scholar
  153. Харах зүйл
  154. PubMed / NCBI
  155. Google Scholar
  156. 6. Small DM, Jones-Gotman M, Dagher A (2003) Хоол тэжээлийг өдөөсөн dopamine release нь эрүүний эрүүл сайн дурын ажилтнуудын хоолны дэглэмийн түвшинг үнэлдэг. NeuroImage 19: 1709-1715.
  157. 7. Bassero V, Ди Chiara G (1999) Допамины дамжлагад диафрагмын дамжуулалтын хариу үйлдэл нь цөм / цөмийн тасалгаанууд дахь цөм дэх хоол тэжээлийн нөлөөллийг харуулдаг. Мэдрэлийн өвчин 89: 637-41.
  158. 8. Roitman MF, Wheeler RA, Wightman RM, Carelli RM (2008) Бодит цаг хугацааны туршид химийн хариу үйлдэл нь урамшуулал ба урам зоригийг ялгаж салгана. Байгаль нуур судлаач 11: 1376-7.
  159. 9. Brown HD, McCutcheon JE, Cone JJ, Ragozzino ME, Roitman MF (2011) Хоолны үндсэн урамшуулал, шагнал урамшууллын өдөөлт нь стаци диопамины дохиоллын янз бүрийн хэв маягыг үүсгэдэг. Европын сэтгүүл зүйн сэтгүүл 34: 1997-2006.
  160. 10. Grabenhorst F, Rolls ET, Parris BA, d 'Souza AA (2010) Тархины тархи нь амны өөхгийн шагналын үнэ цэнийг илэрхийлдэг. Тархины цус харвалт 20: 1082-91.
  161. 11. Жонсон Ром, Kenny PJ (2010) Dopamine D2-ийн донтуулагчид, донтолттой адил шагналын алдагдал болон тарган хархнуудад идээт хоол иддэг. Байгаль нуур судлаач 13: 635-41.
  162. 12. Vucetic Z, Carlin JL, Totoki K, Reyes TM (2012) Хоол тэжээлээс үүдэлтэй таргалалт дахь допамины тогтолцооны омогенезийн өөрчлөлт. Мэдрэлийн сэтгэцийн сэтгүүл 120: 891-84.
  163. 13. St E, Spoor S, Bohon C, Small DM (2008) Таргалалтын болон хүнсний идэвхитэй холбоотой идэвхитэй хариу үйлдэл хоорондын холбоо TaqIA A1-ийн аллелиар зохицуулагддаг. Шинжлэх ухаан 322: 449-452.
  164. 14. Cragg SJ, Rice ME (2004) DAT-ийн синус дээр Dancing-г дуулжээ. Мэдрэлийн өвчин судлалын чиг хандлага 27: 270-7.
  165. 15. Dreyer JK, Herrik KF, Berg RW, Hounsgaard JD (2010) Рецепторийг идэвхжүүлэхэд физиологийн болон тоник допаминий нөлөөний нөлөөлөл. Мэдрэлийн сэтгүүл 30: 14273-83.
  166. 16. Figlewicz DP, Szot P, Chavez M, Вудс SC, Veith RC (1994) Интерпроцентикуляр инсулин нь VTA / substantia nigra харханд допамин дамжуулагч мRNA нэмэгдүүлдэг. Тархины судалгаа 644: 331-4.
  167. 17. Mebel DM, Wong JC, Dong YJ, Borgland SL (2012) Интеруляторын гадаргуу дахь инсулин нь хедонийн хооллолтыг бууруулж, дахин дахин хэрэглэснээр допамины концентрацийг бууруулдаг. Европын сэтгүүл зүйн сэтгүүл 36: 2336-46.
  168. 18. Чен PS, Ян YK, Yeh TL, Lee IH, Yao WJ, бусад. (2008) Биеийн жингийн индекс ба стомакатын dopamine-ийн хоорондын хамаарлыг сайн дурын сайн дурын ажилтнуудад олгодог-SPECT судалгаа. NeuroImage 40: 275-9.
  169. 19. Өмнөд Т, Хуанг XF (2008) Өндөр өөхтэй хоол хүнсэнд өртөх нь dopamine D2 рецепторыг нэмэгдүүлж dopamine дамжуулагч рецепторын нягтралыг бууруулж хулганууд нь accumbens болон caudate putamen-д буурдаг. Neurochemical research 33: 598-605.
  170. 20. Speed ​​N, Saunders C, Davis AR, Owens WA, Matthies HJG, нар. (2011) Үрэвсэлтэй хөдөлгөөнт Ажиллалтын дохиолол нь dopamine homeostasis-ыг тасалдуулж хооллолтыг нэмэгдүүлдэг. PloS нэг 6: e25169.
  171. 21. Roitman MF, Wescott S, Cone JJ, McLane MP, Wolfe HR (2010) MSI-1436 нь допамин дамжуулагчийн үйл ажиллагаанд нөлөөлөхгүйгээр цочмог хоолны хэрэглээг бууруулдаг. Эм, биохими, зан төлөв 97: 138-43.
  172. 22. Heien MLAV, Johnson MA, Wightman RM (2004) Хурдан скан циклметрийн аргаар илэрсэн neurotransmitters-ийг шийдвэрлэх. Шинжилгээний химийн 76: 5697-704.
  173. 23. Sinkala E, МкКуткон Жэ, Шак МЖ, Шмидт Е, Ритман MF, бусад. (2012) Хурдан скан циклметрийн хувьд микрофлуидид урсгалын үүртэй электрод шалгалт тохируулга хийх. Chip 12 дээр лаборатори: 2403-08.
  174. 24. Yorgason JT, España RA, Jones SR (2011) Чөтгөрт вонмонет ба шинжилгээний програм хангамж: олон удаагийн кинетик хэмжүүр ашиглан допамины дохиоллын кокаин өдөөгдсөн өөрчлөлтийг судлах. Мэдрэлийн ухааны аргын сэтгүүл 202: 158-64.
  175. 25. Paxinos G, ба Франклин KBJ (2004) Сэдвийн хортой координатад хулганы тархи. Сан Диего, CA: Эрдмийн Хэвлэлийн.
  176. 26. Hallett PJ, Коллинс TL, Standaert DG, Dunah AW (2008) Рецептор тархалт, хүн худалдаалах талаар судлах тархины эдэд биохими фракци хийх. Мэдрэлийн / редакцийн зөвлөлийн одоогийн протоколууд, Jacqueline N. Crawley ... [et al.] Бүлэг 1: Нэгж 1.16.
  177. 27. Мэн СЗ, Озава Я, Ито М, Такашима S (1999) Допаминий дамжуулагч, хөгшрөлттэй холбоотой өөрчлөлтүүд, D1 болон D2 рецепторууд хүний ​​суурь судасжилтын үед өөрчлөгдөнө. Тархины судалгаа 843: 136-144.
  178. 28. Moll GH, Mehnert C, Wicker M, Bock N, Rothenberger A, нар. (2000) Насанд хүрээгүй насанд хүрэхээс өмнө насанд хүрэгчдийн наснаас хойш хулганы тархины янз бүрийн бүс нутагт presynaptic monoamine тээвэрлэгчдийн нягтралын өөрчлөлтүүд. Хөгжлийн Тархины Судалгаа 119: 251-257.
  179. 29. Круз-Мурос, Афонсо-Ораяа Д, Абреу П, Перез-Дельгаро ММ, Родригес М, бусад. (2009) Допамины дамжуулагчийн илэрхийлэл ба нөхөн төлбөрийн механизмд хөгшрөлтийн үр нөлөө. Насжилтын Neurobiology 30: 973-986.
  180. 30. Адель К., Адлер КЖ, Кирштейн CL (2006) Өсвөр үеийнхний насанд хүрэгчид кокаин болзошгүй нөхцөл, кокаинаас үүдэлтэй dopamine насанд хүрэгчидээс ялгаатай байдаг. Европын эмийн сэтгүүл 550: 95-106.
  181. 31. Jones SR, Garris PA, CD хавтсыг, Винсман RM (1995) Булчингийн аммондидын цөм, caudate-putamen, бөөмөрхөгөнд агуулагдах допаминыг харьцуулсан харьцуулалт. Мэдрэлийн сэтгэцийн сэтгүүл 64: 2581-9.
  182. 32. Рао А, Симмонс, Соркин А (2011) Допаминарийн мэдрэлийн эсүүд дэх допамин дамжуулагчийг хэлнэ. Молекул ба эсийн мэдрэлийн систем 46: 148-58.
  183. 33. Ван GJ, Volkov ND, Thanos PK, Fowler JS (2009) Тархины допамины замын зураглал: таргалалтыг ойлгоход нөлөөлдөг. Донтох эмийн сэтгүүл 3: 8-18.
  184. 34. Levin BE, Dunn-Meynell AA, Balkan B, Keesey RE (1997) Sprague-Dawley могойд идэш тэжээлээр өдөөгдсөн таргалалт ба эсэргүүцлийг сонгох. АНУ-ын физиологийн сэтгүүл 273: R725-730.
  185. 35. Morris JK, Bomhoff GL, Gorres BK, Davis VA, Kim J, нар. (2011) Инсулин эсэргүүцэл нь нейтростизацийн допамины үйл ажиллагааг алдагдуулдаг. Туршилтын мэдрэлийн систем 231: 171-80.
  186. 36. Wellman PJ, Nation JR, Davis KW (2007) Өндөр өөх тосоор хооллодог хархад кокаины бие махбодийг захиран зарцуулах үнэ цэнийн бууралт. Эм, биохими, зан төрх 88: 89-93.
  187. 37. Thanos PK, Kim R, Cho J, Michaelides M, Anderson BJ, et al. (2010) Таргалалтад тэсвэртэй S5B харх нь таргалалтад өртөмтгий OM хархнуудаас илүү кокаины болзолтой газрыг илүүд үздэг болохыг харуулсан. Физиологи ба зан байдал 101: 713-8.
  188. 38. Venton BJ, Seipel AT, Phillips PEM, Wetsel WC, Gitler D, et al. (2006) Кокайн нь синапатинаас хамааралтай нөөц цөөрөмийг дайрснаар dopamine release-ийг нэмэгдүүлдэг. Мэдрэлийн сэтгүүл 26: 4901-04.
  189. 39. Стеффенсон SC, Тейлор SR, Хортон ML, Barber EN, Lyte LT (2008) Какаин нь GABA мэдрэлийн мэдрэмтгий мэдрэмтгий натрийн сувгийн ашиглалтын хамаарал бүхий блокжилтаар допамин нейронуудыг дарангуйлдаг. Европын мэдрэлийн сэтгүүл 28: 2028-2040.
  190. 40. Ши WX, Pun CL, Жоу Y (2004) Psychostimulants нь допамин мэдрэлийн галын үйл ажиллагаанд бага давтамжийн хэлбэлзлийг үүсгэдэг. Neuropsychopharmacology 29: 2160-2167.
  191. 41. Davis JF, Tracy AL, Schurdak JD, Tschop MH, Lipton JW, нар. (2008) Хоол тэжээлийн өөх өндөр түвшинд өртөхөд хар тамхи, сэтгэцэд нөлөөлөх эмчилгээнд үр дүнг өгдөг. Зан төлөвийн мэдрэлийн мэс ажилбар 122: 1257-63.
  192. 42. Geiger BM, Haburcak M, Avena NM, Moyer MC, Hoebel BG, нар. (2009) Мөөгөнцөрийн допамины мэдрэлийн эсийн шимэгчдийн хоолны дэглэмийн хордлого. Мэдрэлийн өвчин 159: 1193-9.
  193. 43. Hyman SE, Malenka RC, Nestler EJ (2006) Донтолтын мэдрэлийн механизм: Шагналтай холбоотой сургалтын болон санах ойн үүрэг. Донтолт 29: 565-598.
  194. 44. GE GE, Von Korff M, Saunders K, Miglioretti DL, Crane PK, бусад. (2006) АНУ-ын насанд хүрэгчдийн таргалалт, сэтгэцийн эмгэгийн хоорондын холбоо. Ерөнхий мэдрэлийн архив 63: 824-30.
  195. 45. Torres GE, Carneiro A, Seamans K, Fiorentini C, Sweeney A, et al. (2003) Хүний допамин дамжуулагчийг олзолж, хүн худалдаалах. Биологийн химийн шинжилгээний сэтгүүл 278: 2731-2739.
  196. 46. Li LB, Chen N, Ramamoorthy S, Chi L, Cui XN, нар. (2004) Хүний dopamine дамжуулагчийн функциональ болон гадны хүн худалдаалах үйл ажиллагаанд N-glycosylation-ийн үүрэг. Биологийн химийн шинжилгээний сэтгүүл 279: 21012-21020.
  197. 47. Afonso-Oramas D, Cruz-Muros I, de la Rosa DA, Abreu P, Giraldez T, et al. (2009) Допамины дамжуулагч гликозилаци нь паркинсоны өвчний дунд тархины dopaminergic эсийн эмзэгшилтэй холбоотой юм. Өвчний Neurobiology 36: 494-508.
  198. 48. Roitman MF, Stuber GD, Phillips PEM, Wightman RM, Carelli RM (2004) Dopamine нь хүнсний хайгуулын секунд горимоор ажилладаг. Мэдрэлийн сэтгүүл 24: 1265-71.
  199. 49. McCutcheon JE, Beeler JA, Roitman MF (2012) Sucrose-predictive cues нь saccharin-predictive cues-аас илүү фазын допамины хувилбарыг үүсгэдэг. 66-тэй Synapse: 346-51.
  200. 50. Flagel SB, Clark JJ, Robinson TE, Mayo L, Czuj A, нар. (2011) Сэргээх шагнал урамшуулал дээр допаминий сонгон шалгаруулах үүрэг. Байгаль 469: p53-7d.
  201. 51. Szczypka MS, Mandel RJ, Donahue BA, Snyder RO, Leff SE, et al. (1999) Вируст генийн төрлийг сонгон хооллож, допамины дутагдлын хулганаас сэргийлдэг. Neuron 22: 167-78.
  202. 52. Ди Ciano P, Кардинал RN, Cowell RA, Little SJ, Everitt BJ (2001) Павильоны хандлагын зан төлөвийг олж авах, гүйцэтгэлийг сайжруулахад NMDA, AMPA / kainate болон допамины рецепторын ялгаатай оролцоо. Мэдрэлийн сэтгүүл 21: 9471-9477.
  203. 53. Kravitz AV, Freeze BS, Parker PRL, Kay K, Thwin MT, бусад. (2010) Платининий хөдөлгүүрийн зан үйлийг basel ganglia-ийн optogenetic хянах горимоор зохицуулах. Байгаль 466: 622-6.
  204. 54. Kravitz AV, Tye LD, Kreitzer AC (2012) Арматур дахь шууд ба шууд бус зам дээрх зүрхний мэдрэлийн мэдрэмжүүд. Байгаль нуур судлаач 15: 816-818.