KUMMENTI: Għalkemm kemm l-istress, id-drogi ta 'abbuż u ċerti benefiċċji naturali jikkawżaw akkumulazzjoni ta' DeltaFosB, l-istress jattiva ċelloli downstream differenti u aktar tard riċetturi u ġeni differenti. Fi kliem ieħor, il-vizzji u r-reżistenza għall-istress jiddependu fuq mekkaniżmi fundamentalment differenti
J Neurosci. 2010 Oct 27; 30 (43): 14585-92.
Vialou V, Maze I, Renthal W, LaPlant QC, Watts EL, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Nestler EJ.
sors
Dipartiment tan-Newroxjenza Fishberg, Skola tal-Mediċina Mount Sinai, New York, New York 10029, l-Istati Uniti.
Astratt
Il-mekkaniżmi molekulari sottostanti l-adattamenti newronali indotti mill-istress u mid-droga mhumiex mifhuma kompletament. Molekula waħda implikata f'adattamenti bħal dawn hija ΔFosB, fattur ta 'traskrizzjoni li jakkumula fin-nukleu tal-gerriema accumbens (NAc), reġjun ewlieni ta' premju tal-moħħ, bħala rispons għal stress kroniku jew esponiment ripetut għal drogi ta 'abbuż. Thu l-mekkaniżmi ta ’traskrizzjoni upstream li jikkontrollaw l-induzzjoni ta’ ΔFosB billi dawn l-istimuli ambjentali jibqgħu intużaw. Hawnhekk, aħna nidentifikaw il-fattur ta 'traskrizzjoni li jiddependi mill-attività, fattur ta' rispons fis-serum (SRF), bħala medjatur ġdid 'il fuq ta' l-istress, imma mhux kokaina-, indott ΔFosB. L-SRF huwa rregolat fin-NAc kemm tal-pazjenti umani depressi kif ukoll tal-ġrieden esposti b'mod kroniku għat-telfa soċjali. Din ir-regolamentazzjoni ta 'tnaqqis tal-SRF hija assenti f'annimali reżiljenti. Permezz tal-użu ta 'mutaġenesi induttibbli, aħna nuru li induzzjoni medjata mill-istress ta' ΔFosB, li sseħħ b'mod predominanti fil-ġrieden reżiljenti, tiddependi mill-espressjoni SRF f'dan ir-reġjun tal-moħħ.. Barra minn hekk, it-tħassir ġenetiku speċifiku tan-NAc tal-SRF jippromwovi varjetà ta 'fenotipi simili għall-prodepressant u proanxiety u jagħmel l-annimali aktar sensittivi għall-effetti ta' ħsara tal-istress kroniku. B'kuntrast, aħna nuru li l-SRF ma għandux rwol fl-akkumulazzjoni ta 'ΔFosB fin-NAc b'reazzjoni għal esponiment kroniku għall-kokaina. Barra minn hekk, is-SRF speċifika għan-NAc m'għandha l-ebda effett fuq l-imġieba kkawżati mill-kokaina, li tindika li l-istress ta 'telfa soċjali kronika u l-esponiment ripetut tal-kokaina jirregolaw l-akkumulazzjoni tal-FosB u s-sensittività tal-imġieba permezz ta' mekkaniżmi indipendenti.
introduzzjoni
In-nukleu accumbens (NAc), reġjun ewlieni tal-premju tal-moħħ, huwa importanti għall-integrazzjoni ta 'inputs sensorji u konjittivi li jmexxu imgieba motivazzjonalment rilevanti b'reazzjoni għal stimoli ambjentali (Nestler u Carlezon, 2006; Sesack u Grace, 2010). In-NAc kien implikat ukoll f'anormalitajiet fl-imġieba assoċjati mal-vizzju tad-droga u d-dipressjoni. Għaldaqstant, l-immirar tan-NAc bi stimulazzjoni fil-fond tal-moħħ intwera li jtaffi l-imġieba bħad-depressjoni u d-dipendenza kemm fil-bnedmin kif ukoll fil-gerriema (Schlaepfer et al., 2008; Vassoler et al., 2008; Heinze et al., 2009; Kuhn et al., 2009).
L-esponiment ripetut għal drogi ta 'abbuż jew stress iwassal għal mudelli mibdula ta' espressjoni tal-ġene fin-NAc, potenzjalment sottostanti għall-kroniċità tal-vizzju u d-depressjoni (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007; Maze et al., 2010; Vialou et al ., 2010). Interessanti, il-fattur ta 'traskrizzjoni ΔFosB, prodott splice tal-ġene fosB, jakkumula fin-NAc b'reazzjoni għal esponiment ripetut ta' mediċina jew stress (Nestler, 2008; Perrotti et al., 2008; Vialou et al., 2010). ΔFosB ġie propost bħala bidla molekulari potenzjali li tiggwida t-tranżizzjoni mill-użu tad-drogi rikreattivi għall-istat dipendenti b'mod kroniku (Nestler et al., 1999; McClung et al., 2004; Renthal et al., 2009), billi l-akkumulazzjoni tagħha fin-NAc tissaħħaħ Tweġibiet ta 'sodisfazzjon għal diversi drogi ta' abbuż. Aktar reċentement, ir-rwol ta 'l-induzzjoni ta' ΔFosB fin-NAc wara l-istress ta 'telfa soċjali kronika (Nikulina et al., 2008; Vialou et al., 2010) ġie dilwit: ΔFosB jippromwovi risponsi attivi biex ilaħħaq ma' stimuli stressanti u jżid ir-reżistenza. Għalkemm l-induzzjoni tal-osFosB isseħħ b'mod dipendenti mill-istimulu, il-mekkaniżmi responsabbli għall-akkumulazzjoni tal-osFosB indotta mid-droga u mill-istress fin-NAc għadhom mhux magħrufa.
Il-fattur ta 'rispons tas-serum (SRF) huwa fattur ta' traskrizzjoni meħtieġ għall-attivazzjoni traskrizzjonali dipendenti fuq l-attività ta 'diversi ġeni bikrija immedjati, inklużi c-fos, fosb, Egr1, u Arc (Knöll u Nordheim, 2009). Studji reċenti wrew l-effetti tal-SRF fuq il-proprjetajiet morfoloġiċi u ċitoarkitettoniċi tan-newroni, inkluż ir-regolazzjoni tal-attività sinattika u l-formazzjoni taċ-ċirkwiti fil-moħħ adult (Knöll u Nordheim, 2009). Dawn is-sejbiet wassluna biex ninvestigaw jekk l-SRF huwiex regolat funzjonalment minn espożizzjoni kronika għal drogi ta 'abbuż jew stress, kif ukoll l-impatt potenzjali ta' tali regolamentazzjoni fuq l-induzzjoni ta 'osFosB taħt dawn il-kundizzjonijiet.
Hawnhekk, niddeskrivu mekkaniżmu ġdid li permezz tiegħu regolazzjoni baxxa ta 'SRF fin-NAc tippromwovi fenotipi prodepressanti u ansjjoġeniċi, u fl-aħħar iżżid il-vulnerabbiltà ta' annimal għall-effetti ta 'ħsara ta' stress kroniku. Dawn l-effetti huma medjati, parzjalment, mit-telf ta 'induzzjoni ta' osFosB fin-NAc ta 'annimali stressati. Tnaqqis osservat fl-espressjoni SRF u ΔFosB fit-tessut NAc postmortem miksub minn pazjenti depressi jappoġġjaw ir-rilevanza tas-sejbiet tagħna għad-depressjoni umana. Interessanti, dan il-mekkaniżmu li jikkontrolla l-akkumulazzjoni ta ’osFosB jidher li huwa speċifiku għall-istress: esponiment kroniku għall-kokaina m’għandu l-ebda effett fuq l-espressjoni SRF, it-tħassir SRF min-NAc m’għandu l-ebda impatt fuq l-akkumulazzjoni ta’ OsFosB wara esponiment kroniku għall-kokaina, u tali tħassir SRF m’għandu l-ebda effett fuq il-kokaina. imġieba kkaġunati. Din l-interazzjoni ġdida bejn SRF u ΔFosB, fil-kuntest ta 'stress, tista' tirrappreżenta mekkaniżmu omeostatiku importanti li jirregola s-sensittività ta 'individwu għal stress kroniku.
Materjali u Metodi
annimali
Il-ġrieden maskili C57BL / 6J ta 'tmien ġimgħat (laboratorju Jackson) intużaw fl-esperimenti kollha fl-imġieba u fil-bijokimika. L-annimali kollha ġew abitati fil-faċilità tal-annimali għal mill-inqas 1 ġimgħa qabel manipulazzjonijiet sperimentali u nżammu f'23 – 25 ° C fuq ċiklu ta 'dawl / skur 12 h (dwal mixgħula minn 7: 00 AM sa 7: 00 PM) b'ad libitum aċċess għall-ikel u l-ilma. L-esperimenti saru skont il-linji gwida tas-Soċjetà għan-Newroxjenza u l-kumitat istituzzjonali għall-kura u l-użu tal-annimali fl-Iskola tal-Mediċina Mount Sinai.
Għall-esperimenti tal-kokaina [blotting tal-Punent u l-immunopreċipitazzjoni kwantitattiva tal-kromatina (ChIP)], intużaw ġrieden irġiel C8BL / 10J ta 'ġimgħa minn 57- sa 6. L-annimali rċevew seba 'injezzjonijiet intraperitoneali kuljum ta' melħ jew kokaina (20 mg / kg kokaina-HCl; Sigma). Il-ġrieden intużaw 24 h wara t-trattament finali. Għal esperimenti fl-imġieba, il-ġrieden kienu miżmuma waħedhom fil-post-kirurġija u ġew ittrattati b'10 mg / kg (sensitizzazzjoni lokomotorja) jew 7.5 mg / kg (post ikkondizzjonat ta 'preferenza) kokaina-HCl intraperitonealment, kif deskritt hawn taħt.
Ġrieden Srffl / fl ġew iġġenerati kif deskritt qabel (Ramanan et al., 2005). Tneħħija ta 'Srf speċifika għan-NAc inkisbet permezz ta' injezzjoni sterjotossika u sovrapressjoni virali sussegwenti ta 'Cre recombinase (Cre) imdewba mal-proteina fluworexxenti ħadra (GFP) bl-użu ta' vettori ta 'virus adeno-assoċjati (AAV). Kien użat Cre-non-delete-nonself. AAV-GFP ġie injettat minflok AAV-Cre-GFP fil-ġrieden Srffl / fl bħala kontroll. Fil-qosor, il-ġrieden ġew anestetizzati bl-użu ta 'taħlita ta' ketamina (10 mg / kg) u xilazina (10 mg / kg), bil-koordinati stereotossiċi li ġejjin jintużaw għall-kunsinna virali: + 1.6 (anterjuri / wara), + 1.5 (laterali), - 4.4 (dorsali / ventrali) f'angolu ta '10 ° mil-linja tan-nofs (relattiva għal bregma). Total ta '0.5 μl ta' virus purifikat ingħata bilaterali fuq perjodu ta '5 min (0.1 μl / min), segwit minn 5 min ta' mistrieħ. Il-ġrieden ġew ittestjati XNUMx ġimgħat wara l-operazzjoni, meta l-espressjoni virali kienet massima, u s-siti ta 'injezzjoni virali ġew ikkonfermati għall-annimali kollha bl-użu ta' metodi istoloġiċi standard. L-effiċjenza ta 'l-espressjoni Cre medjata mill-virali kienet ivvalidata mill-immunohistochimika u b' reverse-transcriptase PCR għal Srf immexxija fuq punches NAc mikrodissettati minn annimali mogħtija AAV-Cre-GFP u AAV-GFP fin-NAc. Viruses AAV-GFP u AAV-Cre-GFP ġew iġġenerati kif deskritt qabel (Maze et al., 2).
Proċeduri ta 'l-imġieba
Telfa soċjali stress.
Il-ġrieden C57BL / 6J ġew soġġetti għal tensjoni soċjali kronika għal 10 ijiem konsekuttivi kif deskritt qabel (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010). Fil-qosor, kull ġurdien kien espost għal ġurdien ta 'min ikabbar irtirat CD1 maskili mhux familjari u aggressiv għal 5 min kuljum. Wara interazzjoni diretta ma 'l-aggressur CD1, l-annimali tqiegħdu f'kompartiment maġenb l-istess gaġġa għax-24 h li jmiss b'kuntatt sensorju iżda mhux fiżiku. L-annimali ta ’kontroll kienu alloġġjati f’gaġeġ ekwivalenti iżda ma’ membri ta ’l-istess razza. It-testijiet ta 'interazzjoni soċjali saru 24 h wara l-aħħar ġurnata tat-telfa.
L-evitar soċjali għal ġurdien maskili CD1 mhux familjari ġie vvalutat skont protokolli ppubblikati (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010). Il-ġurdien sperimentali ġie introdott għall-ewwel darba f'qasam miftuħ li fih gaġġa vojta ta 'xibka tal-wajer għal 2.5 min. Matul it-tieni sessjoni, ġurdien maskili CD1 mhux familjari ġie introdott fil-gaġġa bil-fili. Ġie mkejjel il-ħin imqatta 'fiż-żona ta' interazzjoni (kuritur wiesa 'ta' 8 cm madwar il-gaġġa). Is-segregazzjoni ta 'ġrieden megħluba f'subpopolazzjonijiet suxxettibbli u reżiljenti twettqet kif deskritt qabel (Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010). Peress li l-maġġoranza tal-ġrieden tal-kontroll qattgħu aktar ħin jinteraġixxu ma 'mira soċjali milli ma' għeluq ta 'mira vojta, proporzjon ta' interazzjoni ta '100 (ħin ugwali mqatta' fiż-żona ta 'interazzjoni fil-preżenza kontra l-assenza ta' mira soċjali) ġie stabbilit bħala cutoff. Ġrieden bi punteġġi <100 kienu ttikkettati bħala suxxettibbli, u dawk bi punteġġi ≥100 kienu ttikkettati bħala reżiljenti. Analiżi komportamentali estensiva, bijokimika u elettrofiżjoloġika jappoġġjaw il-validità ta 'dawn is-subpopolazzjonijiet distinti suxxettibbli u reżiljenti (Krishnan et al., 2007; Wilkinson et al., 2009; Vialou et al., 2010).
Biex teżamina l-vulnerabilità tal-ġrieden Srffl / fl għall-istress soċjali jegħleb, il-ġrieden, injettati bilateralment ma 'AAV-GFP jew AAV-Cre-GFP, ġew soġġetti għal tliet telfiet konsekuttivi fl-istess jum u mbagħad ittestjati għall-interazzjoni soċjali 24 h aktar tard. Din il-proċedura ta 'telfa sub-massima ġiet ivvalidata qabel biex tiżvela fenotipi ta' prosusċettibilità wara manipulazzjonijiet ġenetiċi (Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010).
Tgħallimna bla sahha.
Il-ġrieden Srffl / fl li jesprimu żżejjed jew AAV-GFP jew AAV-Cre-GFP ġew soġġetti għall-proċedura ta 'djufija mitgħallma kif deskritt qabel (Berton et al., 2007). Fil-qosor, il-ġrieden kienu esposti għal xokkijiet intermittenti u li ma jistgħux jiġu skansati għal 1 h matul 2 ġranet konsekuttivi (0.45 mA, 5 i tul). Dakinhar tat-test, il-ġrieden ġew introdotti mill-ġdid fil-kaxxa għal provi ta ’ħarba konsekuttivi ta’ 15. Matul kull prova, twasslet xokk kontinwu u l-ġrieden ingħataw l-opportunità li jaħarbu billi jidħlu fil-kompartiment maġenb, mhux elettriċi. Wara ħarba ta 'suċċess, il-bieb kien awtomatikament magħluq u l-latenza tal-ħruġ ġiet irreġistrata. Meta l-ġrieden ma kinux jaħarbu fi ħdan 25 i, il-prova ntemmet u ġiet irreġistrata bħala falliment. Studji preċedenti wrew li l-espressjoni virali fin-NAc u f'reġjuni oħra m'għandha l-ebda effett fuq l-imġieba tal-ħelsien mil-linja bażi fin-nuqqas ta 'stress (Newton et al., 2002; Berton et al., 2007).
Sensibilizzazzjoni lokomotorja.
Ġimagħtejn wara injezzjonijiet intra-NAc ta 'AAV-GFP jew AAV-Cre-GFP, ġrieden Srffl / fl ġew soġġetti għal sensitizzazzjoni tal-lokomotor. Ġrieden kienu abitwati fl-arena tal-lokomotur għal 30 min kuljum għal 4 d. Wara l-abitazzjoni, l-annimali ġew injettati intraperitonealment b'10 mg / kg kokaina-HCl u mqiegħda fil-kaxxi tal-lokomotturi. L-attivitajiet tal-lokomoturi tal-annimali ġew irreġistrati bl-użu ta 'sistema ta' photobeam (Strumenti ta 'San Diego) bħala pawżi tar-raġġ ambulatorju għal 30 min kuljum. Is-sensitizzazzjoni tal-lokomotor ġiet irreġistrata fuq perjodu ta '6 d.
Preferenza tal-post ikkundizzjonat.
Il-proċedura tal-ikkundizzjonar tal-post saret kif deskritt qabel (Maze et al., 2010), bil-modifiki li ġejjin. Fil-qosor, 18 d wara infużjonijiet intra-NAc ta 'AAV-GFP jew AAV-Cre-GFP fil-ġrieden Srffl / fl, l-annimali tqiegħdu fil-kmamar tal-ikkundizzjonar, li kienu jikkonsistu fi tliet ambjenti kuntestwalment distinti. Ġrieden li juru preferenza sinifikanti għal waħda miż-żewġ kmamar tal-ikkundizzjonar kienu esklużi mill-istudju (<10% tal-annimali kollha). Il-gruppi tal-ikkundizzjonar kienu aktar ibbilanċjati biex jaġġustaw għal kwalunkwe preġudizzju tal-kamra li għad jista 'jeżisti. Fil-ġranet sussegwenti, l-annimali ġew injettati bil-melħ u magħluqa f'kamra waħda wara nofsinhar għal 30 min u mbagħad injettati bil-kokaina (7.5 mg / kg, ip) u magħluqa għal 30 min fil-kamra l-oħra l-għada, daqs total ta ' żewġ sessjonijiet ta 'taħriġ ta' assoċjazzjoni għal kull trattament (żewġ melħ u żewġ tqabbil tal-kokaina). Fil-jum tat-test, il-ġrieden tqiegħdu lura fl-apparat mingħajr trattament għal 20 min u ġew ittestjati biex jevalwaw il-preferenza tal-ġenb. Ir-risponsi lokomoturi għall-kokaina ġew ivvalutati permezz ta ’pawżi tar-raġġ fil-kmamar imqabbdin mal-kokaina biex tiġi żgurata l-effettività tat-trattament tad-droga. Għall-gruppi kollha, il-lokomozzjoni tal-linja bażi b'reazzjoni għall-melħ ġiet ivvalutata biex tiżgura li l-lokomozzjoni ma kinitx affettwata minn trattament virali.
Testijiet ta 'mġieba oħra.
Ġrieden Srffl / fl ġew ittestjati f'testijiet ta 'kamp miftuħ, ċar / skur u għawm sfurzat ibbażati fuq protokolli ppubblikati (Vialou et al., 2010). L-attività tal-ġrieden fil-kamp miftuħ ġiet irreġistrata għal 5 min bl-użu ta ’sistema ta’ traċċar tal-vidjow (Ethovision) taħt kundizzjonijiet ta ’dawl aħmar. Għat-test tad-dawl / dlam, il-ġrieden tħallew jesploraw liberament kaxxa b'żewġt ikmamar magħmula minn arena illuminata kbira mqabbda ma 'arena magħluqa iżgħar. Il-ġrieden ġew ittestjati għal perjodu ta '5 min biex tkun evalwata l-ammont ta' ħin mgħoddi f'kull għeluq. Fit-testijiet open-field u light / dark, il-ħin imqatta 'fiċ-ċentru u fl-arena tad-dawl rispettivament ġie evalwat bħala indiċi invers ta' rispons relatat mal-ansjetà. Test ta '1 d-għawm sfurzat sar għal perjodu ta' 5 min. Żmien miżjud ta 'immobilità waqt it-test tal-għawm sfurzat ġie interpretat bħala imġieba bħal prodepressant. It-test ta 'l-għawm sfurzat 1 d intuża ħafna fil-ġrieden u ġie vvalidat bħala miżura ta' validità ta 'tbassir, minħabba li t-terapiji anti-dipressanti jnaqqsu l-ħinijiet ta' l-immobilità.
Immunohistokimika
Il-ġrieden Srffl / fl ġew anestetizzati u nħalqu ġol-kardja b'4% paraformaldehyde / PBS. L-imħuħ tneħħew u krijoprotettati f'XNUMx% sucrose / PBS. Sezzjonijiet koronali (30 μm) ġew maqtugħin fuq mikrotome tal-iffriżar u pproċessati għall-analiżi immunohistochimika. Il-validazzjoni ta 'knock-out ta' Srffl / fl twettqet bl-użu ta 'antikorp poliklonali dirett kontra SRF (30 / 1; Santa Cruz Biotechnology). L-espressjoni Cre ġiet ikkonfermata permezz tal-espressjoni GFP (tiġieġ poliklonali, 2000 / 1, Aves Labs) fl-imħuħ maqsuma, peress li l-Cre hija mdewba mal-GFP. Għall-kwantifikazzjoni tal-induzzjoni tal-ΔFosB wara t-telfa soċjali tal-istress fil-ġrieden Srffl / fl knock-out, ΔFosB ġie skopert bl-użu ta 'antikorp poliklonali tal-fenek mqajjem kontra r-reġjun N-terminali tal-proteina (8000 / 1; Santa Cruz Biotechnology). L-immaġini ttieħdu bil-mikroskopju konfokali (ingrandiment 1000 ×; Zeiss). In-numru ta 'ċelloli immunopositivi GFP magħduda bħala negattivi u pożittivi għall-immunoreattività ΔFosB ġie kwantifikat f'immaġini multipli għal kull annimal, bil-valuri medji kkalkulati sussegwentement għal kull annimal. Kull annimal kien ikkunsidrat bħala osservazzjoni individwali għal analiżi statistika.
Tessut tal-NAc tal-bniedem wara l-postmortem
Tessut tal-moħħ postmortem uman inkiseb mill-Dallas Brain Collection, fejn it-tessut jinġabar mill-Uffiċċju ta 'l-Eżaminatur Mediku ta' Dallas u l-Programm tat-Trapjant tat-Tessuti ta 'l-Università ta' Texas (UT) Southwestern wara kunsens mill-familjari li jmiss. It-tessut ġie analizzat kemm mill-irġiel kif ukoll min-nisa mqabbla għall-età, l-intervall postmortem, in-numru tal-integrità tal-RNA (RIN), u l-pH. Fatturi agonali speċifiċi, inklużi koma, ipoksja, deni, aċċessjonijiet, deidrazzjoni, ipogliċemija, falliment ta 'organi multipli, u inġestjoni ta' sustanzi newrotossiċi fil-ħin tal-mewt jinfluwenzaw l-integrità ta 'l-RNA fit-tessuti tal-moħħ postmortem (Tomita et al., 2004). Aħna użajna skala ta 'fattur agonali (AFS) biex nikkaratterizzaw kampjuni tat-tessuti fuq kull waħda minn dawn it-tmien kundizzjonijiet. In-nuqqas ta 'fattur agonali ġie assenjat punteġġ ta' 0 u l-preżenza tiegħu ġiet skorjata bħala 1 biex tipprovdi punteġġ AFS totali bejn 0 u 8. Tessut b'punti agonali ta '0 jew 1 jirrifletti kampjuni ta' kwalità tajba; id-demografija tal-każ hija mogħtija fit-Tabella 1. Kwalità tat-tessut eċċellenti ġiet ikkonfermata minn valuri għoljin ta 'RIN. Il-każijiet kienu soġġetti għal dissezzjoni standard qabel l-iffriżar ta 'malajr f'-40 ° C isopentane u ħażna f'-80 ° C; aktar dissezzjoni tan-NAc saret fuq tessut iffriżat. Il-bord ta 'reviżjoni istituzzjonali UT Southwestern irreveda u approva l-ġbir ta' dan it-tessut għall-użu ta 'riċerka. Saret intervista għal informatur dirett għal kull każ ta 'depressjoni f'data aktar tard, fejn ġiet dokumentata informazzjoni dwar il-marda tal-każ; dijanjosi ta 'kunsens ta' disturb depressiv maġġuri saret bl-użu ta 'kriterji DSM-IV minn żewġ psikjatri ta' riċerka. L-ebda wieħed mill-każijiet inklużi f'dan l-istudju ma kellu skrins tat-tossikoloġija tad-demm pożittivi għal drogi ta 'abbuż, alkoħol, jew drogi bir-riċetta ħlief antidepressivi. Minkejja t-trattament antidepressiv, is-suġġetti kollha kienu klinikament depressi fil-ħin tal-mewt. Kampjuni tat-tessuti ngħataw b'mod blinded għall-analiżi.
Tabella 1.
Dejta demografika għal studju postmortem uman
Imblott tal-Punent
Kampjuni NAc tal-bniedem u tal-ġurdien ġew ipproċessati kif deskritt qabel (Maze et al., 2010). Tessut iffriżat kien sonicated fi 5 mM HEPES lise buffer li fih 1% SDS bi inibituri tal-protease (Roche) u fosfatasi (Sigma). Il-konċentrazzjonijiet tal-proteina ġew determinati bl-analiżi tal-proteina Dc (Bio-Rad). Ammonti ugwali ta 'kampjuni ta' proteina ġew soġġetti għal SDS-PAGE u Western blotting. Western blots ġew probati bl-użu ta ’antikorpi għal SRF (1 / 2000; Santa Cruz Biotechnology) jew GAPDH (1 / 1500; Abcam) u mbagħad ġew skanjati u kwantifikati bl-użu ta’ sistema ta ’immaġni ta’ Odyssey (Licor).
Iżolament tal-RNA u PCR kwantitattiva
L-iżolament tal-RNA, il-PCR kwantitattiv (qPCR), u l-analiżi tad-dejta saru kif deskritt qabel (Maze et al., 2010; Vialou et al., 2010). Fil-qosor, l-RNA kien iżolat bir-reaġent TriZol (Invitrogen) u ġie purifikat aktar bil-mikro-kits RNAeasy minn Qiagen. Il-kampjuni tal-RNA kollha ġew determinati li għandhom valuri ta ’260 / 280 u 260 / 230 ≥1.8. It-traskrizzjoni b'lura saret bl-użu ta 'iScript (Bio-Rad). qPCR bl-użu ta 'SYBR aħdar (Quanta) sar bi sistema ta' PCR 7900HT RT Applied Biosystems bil-parametri taċ-ċiklu li ġejjin: 2 min f'95 ° C; Ċikli ta ’40 ta’ 95 ° C għal 15 s, 59 ° C għal 30 s, 72 ° C għal 33 s; u ssaħħan iggradat għal 95 ° C biex tiġġenera kurvi ta 'dissoċjazzjoni għall-konferma ta' prodotti PCR singoli. Id-dejta ġiet analizzata billi tqabblu l-valuri C (t) tal-kundizzjoni tat-trattament (kontroll vs ġrieden suxxettibbli jew reżiljenti, jew kontrolli umani kontra pazjenti depressi) mal-metodu ΔΔC (t) (Tsankova et al., 2006). Primers ΔFosB qPCR: foward, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT u b'lura, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG.
ĊIP
ChIP sar kif deskritt qabel (Maze et al., 2010) fuq punches NAC bilaterali miġbura minn ġrieden ta 'kontroll, suxxettibbli u reżiljenti (erba' punches XNUMx-gauge / mouse) 14 h wara l-aħħar esperjenza ta 'telfa u minn melħ u kokaina- annimali ttrattati 1 h wara t-trattament finali. It-tessut kien maqsum f'24% formaldehyde. Sussegwentement il-fissazzjoni ġiet interrotta permezz ta 'applikazzjoni tal-gliċina, u t-tessut kien maħsul u miżmum f'temperatura ta' -1 ° C sa l-użu. Il-kromatina mqaxxra ġiet inkubata matul il-lejl b'anticorp anti-SRF (Santa Cruz Biotechnology) li qabel kien marbut ma 'żibeġ manjetiċi (Dynabeads M-80; Invitrogen). Wara l-konnessjoni bil-maqlub u t-tisfija tad-DNA, l-irbit ta 'SRF mal-promotur tal-fosb ġie determinat mill-qPCR bl-użu ta' primer li jkopri reġjun tal-promotur tal-fosb li fih żewġ siti ta 'reazzjoni fis-serum ta' elementi li jorbtu. Il-pulldowns tal-SRF kienu arrikkiti b'mod sinifikanti meta mqabbla mal-kontrolli tal-ebda antikorpi. Sors tal-ġeneratur tal-ġeneratur tal-fosb: 'il quddiem, CCCTCTGACGTAATTGCTAGG u b'lura, ACCTCCCAAACTCTCCCTTC.
Analiżi statistika
ANOVAs f'direzzjoni waħda ntużaw biex iqabblu l-mezzi bejn ġrieden ta 'kontroll, suxxettibbli u reżiljenti f'analiżi bijokimika u ta' mġieba. ANOVAs b'żewġ direzzjonijiet intużaw biex iqabblu l-induzzjoni ta 'osFosB permezz ta' telfa soċjali fil-ġrieden knock-out lokali ta 'Srf, kif ukoll biex iqabblu l-effett ta' knock-out ta 'Srf fil-protokolli ta' djufija mgħallma u sensittività lokomotiva. It-testijiet tal-istudent intużaw biex iqabblu l-mezzi fl-effett ta 'knock-out ta' Srf fuq l-induzzjoni ta 'osFosB, u bejn gruppi fit-tessut postmortem uman u analiżi taċ-ĊIP tal-ġurdien. Differenzi bejn kundizzjonijiet sperimentali kienu kkunsidrati statistikament sinifikanti meta p ≤ 0.05.
Riżultati
L-espressjoni SRF u ΔFosB fid-dipressjoni umana u l-ġrieden soċjalment megħluba
Biex nesploraw rwol potenzjali għal SRF fl-iżvilupp ta 'mġieba depressivi, l-ewwel evalwajna l-espressjoni tal-proteina SRF f'NAc ta' pazjenti umani depressi postmortem. Suġġetti depressi wrew livelli SRF imnaqqsa b'mod sinifikanti f'NAc meta mqabbla mal-kontrolli mqabbla mal-età tagħhom (t (19) = 1.9; p <0.05) (Fig. 1A). Minħabba r-rwol ta 'SRF fir-regolazzjoni ta' espressjoni tal-ġene bikrija immedjata li tiddependi fuq l-attività (Ramanan et al., 2005), aħna ipotiżjajna li SRF jista 'jkun involut fil-kontroll tal-espressjoni ta' osFosB f'dan ir-reġjun tal-moħħ. B’appoġġ għal din l-ipoteżi, osservajna li l-livelli ta ’Rfosb mRNA tnaqqsu wkoll b’mod sinifikanti f’NAc ta’ bnedmin depressi (t (16) = 1.8; p <0.05) (Fig. 1B). Dan huwa konsistenti mas-sejbiet reċenti ta 'livelli mnaqqsa ta' proteina ΔFosB taħt dawn il-kundizzjonijiet ukoll (Vialou et al., 2010).
Figura 1.
Ripressjoni kronika kkawżata mill-istress ta 'SRF tikkorrelata ma' tnaqqis fit-traskrizzjoni ta 'osFosB f'NAc. A, B, Pazjenti depressi umani Postmortem juru livelli mnaqqsa ta 'proteina SRF (n = 10 / grupp; A) u espressjoni Δfosb mRNA f'NAc (n = 8 / grupp; B). C, Ġrieden soġġetti għal stress kroniku (10 d) ta 'telf soċjali kienu miġbura f'subpopolazzjonijiet suxxettibbli u reżiljenti. D, Stress ta 'telf soċjali kroniku jnaqqas il-livelli ta' proteini SRF f'NAc ta 'ġrieden suxxettibbli, iżda mhux ġrieden reżiljenti, meta mqabbel ma' kontrolli 24 siegħa wara t-test ta 'interazzjoni soċjali muri f'C. E, livelli ta' mRNA ta 'osFosB f'NAc mhumiex mibdula fi ġrieden suxxettibbli, iżda b'mod sinifikanti regolati minn fuq f'annimali reżiljenti (n = 7-15 / grupp). Il-proteina F, SRF turi rabta akbar mal-promotur tal-ġene fosb wara stress kroniku ta 'telf soċjali biss fi ġrieden reżiljenti, u mhux fi ġrieden suxxettibbli (n = 5 / grupp). Id-dejta murija hija espressa bħala medja ± SEM (rappreżentata bħala żbalji ta 'żball). Kon., Kontroll; Dep., Depress; Sus., Suxxettibbli; Res., Reżiljenti. * p <0.05 kontra l-kontroll; *** p <0.001 kontra l-kontroll; #p <0.05 kontra suxxettibbli; ## p <0.01 kontra suxxettibbli; ### p <0.001 kontra suxxettibbli.
Biex nestendu dawn is-sejbiet, użajna l-protokoll kroniku tal-istress tat-telfa soċjali fil-ġrieden. Żewġ gruppi distintivi ta 'ġrieden megħluba, suxxettibbli u reżiljenti, kienu apparenti (Krishnan et al., 2007) ibbażati fuq miżura ta' evitar soċjali, fejn annimali suxxettibbli wrew interazzjoni soċjali mnaqqsa b'mod sinifikanti meta mqabbla kemm ma 'annimali ta' kontroll kif ukoll ta 'reżiljenti (F (2,23, 157.2) = 0.001; p <0.001; testijiet t b'korrezzjoni Bonferroni, suxxettibbli vs kontroll, p <0.05; reżiljenti vs kontroll, p <0.01; reżiljenti vs suxxettibbli, p <1) (Fig. 2,32C). Jumejn wara l-aħħar episodju ta 'telfa, ġrieden ta' kontroll suxxettibbli, reżiljenti u mhux megħluba ġew analizzati għall-espressjoni SRF fin-NAc. Simili għas-sejbiet fid-depressjoni umana, il-livelli ta ’proteina SRF tnaqqsu b’mod sinifikanti f’NAc ta’ ġrieden suxxettibbli meta mqabbla ma ’kontrolli, filwaqt li l-livelli ta’ SRF ma kinux affettwati f’NAc ta ’ġrieden reżiljenti (F (4.7) = 0.05; p <0.05; testijiet t b’ Korrezzjoni ta 'Bonferroni, suxxettibbli vs kontroll, p <0.05; reżiljenti vs suxxettibbli, p <1) (Fig. XNUMXD).
Sussegwentement, eżaminajna l-espressjoni ta 'Rfosb mRNA f'NAc ta' dawn it-tliet gruppi ta 'annimali u osservajna żieda sinifikanti fl-espressjoni ta' osfosb f'annimali reżiljenti biss, b'tendenza iżda l-ebda żieda sinifikanti osservata f'ġrieden suxxettibbli (t (14) = 2.1; p <0.05 ) (Fig. 1E). Biex tkompli tinvestiga l-interazzjonijiet possibbli bejn il-livelli ta ’SRF u t-traskrizzjoni ta’ osfosb, użajna ChIP biex neżaminaw jekk l-irbit tal-SRF mal-promotur tal-ġene fosb kienx mibdul wara stress ta ’telfa soċjali kronika f’koorti separati ta’ ġrieden suxxettibbli u reżiljenti. Annimali reżiljenti wrew irbit SRF imtejjeb b'mod sinifikanti mal-promotur tal-fosb f'NAc meta mqabbel ma 'kontrolli (t (8) = 2.1; p <0.05) kif ukoll meta mqabbla ma' ġrieden suxxettibbli (t (8) = 2.0; p <0.05). L-ebda differenza ma ġiet osservata bejn il-kontrolli u l-ġrieden suxxettibbli, probabbilment tirrifletti n-nuqqas ta 'induzzjoni ta' SRF fil-ġrieden suxxettibbli (Fig. 1F).
Biex jikkonferma r-rwol ta 'SRF fir-regolamentazzjoni ta' osFosB wara stress ta 'telfa soċjali kronika, ġrieden Srffl / fl intużaw biex jeżaminaw l-effett ta' tħassir selettiv ta 'SRF min-NAc fuq induzzjoni ta' stress ta 'osFosB. Ġrieden Srffl / fl ġew injettati sterjotaxikament intra-NAc b'vetturi AAV li jesprimu GFP jew Cre-GFP. Knock-out speċifiku għan-NAc ta 'SRF ikkaġunat minn AAV-Cre-GFP ġie kkonfermat immunoistokimikament (Fig. 2A). Tabilħaqq, ma kien hemm l-ebda koinċidenza bejn it-tbajja SRF u l-espressjoni Cre, li turi l-effettività tan-knock-out. Fil-puntelli NAc mikrodisettati, sibna tnaqqis sinifikanti ta '50% fil-livelli ta' proteina SRF (t (11) = 4.3; p <0.001). Il-kobor x'aktarx jirrifletti l-fatt li frazzjoni ta 'tessut f'tali mikrodissezzjonijiet mhix infettata viralment.
Figura 2.
L-SRF timmedja l-induzzjoni ta ’osFosB bi stress kroniku ta’ telfa soċjali. A, Injezzjoni ta 'AAV-Cre-GFP fin-NAc ta' ġrieden Srffl / fl tirriżulta fin-knock-out tal-proteina SRF fin-newroni li jesprimu Cre. L-injezzjoni ta 'AAV-GFP kienet mingħajr effett li jidher. B, Tali knock-out selettiv ta 'SRF min-NAc jimblokka kompletament l-induzzjoni ta' osFosB fin-NAc wara stress kroniku ta 'telfa soċjali (n = 4 / grupp). Id-dejta murija hija espressa bħala medja ± SEM (rappreżentata bħala żbalji ta 'żball). * p <0.05 kontra l-kontroll AAV-GFP; ** p <0.01 kontra telfa AAV-GFP.
Aħna mbagħad wettaqna immunoistokimika kwantitattiva għal ΔFosB fin-NAc ta 'ġrieden megħluba Srffl / fl injettati intra-NAc jew b'AAV-Cre-GFP jew AAV-GFP. Wara stress kroniku ta 'telf soċjali, l-espressjoni ta' osFosB kienet ikkawżata b'mod sinifikanti f'NAc ta 'annimali injettati AAV-GFP (interazzjoni tal-virus × trattament, F (1,12) = 6.4; testijiet t b'korrezzjoni Bonferroni, kontroll vs telfa, p <0.05; AAV-Cre vs AAV-GFP, p <0.01). Madankollu, din l-induzzjoni ma ġietx osservata fi ġrieden Srffl / fl li kienu qed jirċievu AAV-Cre-GFP (Fig. 2B), u dan juri li l-induzzjoni ta 'osFosB fin-NAc bi stress kroniku teħtieġ SRF.
L-eliminazzjoni ta 'SRF fin-NAc tippromwovi fenotipi simili għall-prodepressjoni u proanxiety
Peress li l-induzzjoni ta 'osFosB minn stress ta' telfa soċjali kronika intwera qabel li timmedja r-reżiljenza (Vialou et al., 2010), aħna ipoteżejjajna li r-regolazzjoni 'l isfel ta' SRF, u t-telf li jirriżulta ta 'induzzjoni ta' osFosB, f'annimali suxxettibbli jista 'jirrappreżenta adattament negattiv li finalment jirrendi annimali aktar vulnerabbli għall-effetti ta 'ħsara ta' l-istress. Biex tittestja din l-ipoteżi, aħna kkaġunajna tħassir speċifiku għan-NAc lokali tal-ġene Srf fil-ġrieden adulti Srffl / fl kif deskritt hawn fuq, u l-ġrieden li jirriżultaw u l-kontrolli tagħhom ġew ittestjati f'batterija ta 'paradigmi ta' mġieba biex jiġu vvalutati d-depressjoni u l-ansjetà tal-linja bażi bħal imġieba. It-tħassir tan-NAc lokali ta 'SRF ippromwova effett ta' prodepressjoni kif imkejjel permezz tat-test tal-għawm furzat (t (30) = 2.5; p <0.05), kif ukoll effett ansjjoġeniku kif imkejjel fil-kamp miftuħ (t (38) = 1.9; p <0.05) u testijiet ċari / skuri (t (8) = 1.9; p <0.05). Għalhekk, ġrieden Srffl / fl li jirċievu AAV-Cre-GFP fin-NAc esibew latency imnaqqsa għal immobilità fit-test ta 'għawm furzat, inqas ħin fiċ-ċentru ta' kamp miftuħ, u inqas ħin fil-kompartiment tad-dawl ta 'kaxxa ħafifa / skura meta mqabbel ma 'annimali injettati AAV-GFP (Fig. 3A-C). Madankollu, it-tħassir intra-NAc ta 'SRF ma biddilx il-livelli tal-linja bażi ta' lokomozzjoni, li jissuġġerixxi li l-effetti ta 'mġieba osservati f'annimali knock-out ta' SRF ma kinux minħabba anormalitajiet fl-attività lokomotiva ġenerali (Fig. 3D). Din id-dejta hija interessanti fid-dawl ta 'rapporti preċedenti li jissuġġerixxu li, għalkemm ΔFosB fin-NAc jirregola mġieba depressiva, ma tidhirx li hija involuta f'reazzjonijiet relatati mal-ansjetà (Vialou et al., 2010). Is-sejbiet attwali tagħna li t-telf ta 'SRF jinduċi tweġibiet ansjjoġeniċi jissuġġerixxu li jagħmel dan permezz ta' miri oħra għajr osFosB.
Figura 3.
Knock-out tal-SRF min-NAc jippromwovi fenotipi simili għall-prodepressjoni u l-ansjetà. A – C, Knock-out selettiv ta 'SRF min-NAc, miksub permezz ta' injezzjoni AAV-Cre-GFP fin-NAc ta 'ġrieden Srffl / fl, inaqqas il-latency għall-immobilità fit-test tal-għawm furzat (n = 14-18 / grupp; A) u jnaqqas il-ħin mgħoddi fiċ-ċentru u l-ħin imqatta 'fil-kompartiment tad-dawl fil-kamp miftuħ (B) u t-testijiet tad-dawl / skur (C), rispettivament (n = 5-15 / grupp). D, L-ebda differenza fl-attività tal-lokomotur bażali ma ġiet osservata fil-kamp miftuħ ta 'ġrieden li rċevew injezzjonijiet intra-NAc ta' AAV-GFP jew AAV-Cre-GFP. E, F, Suxxettibilità akbar għal nuqqas ta 'saħħa mgħallma (n = 7-8 / grupp; E) u stress ta' telfa soċjali (n = 5-6 / grupp; F), kif imkejla, rispettivament, bil-latency biex jaħarbu u l-ħin ta 'interazzjoni soċjali . Id-dejta murija hija espressa bħala medja ± SEM (rappreżentata bħala żbalji ta 'żball). * p <0.05 kontra GFP jew kontra mira assenti; ** p <0.01 kontra GFP; *** p <0.001 kontra GFP.
Aħna wara studjajna jekk it-tħassir tal-SRF fin-NAc iżidx ukoll il-vulnerabbiltà ta 'annimal għall-effetti detrimentali ta' stress ripetut. Ġrieden Srffl / fl, injettati b'AAV-Cre-GFP jew AAV-GFP fin-NAc, ġew eżaminati f'żewġ mudelli ta 'depressjoni, tgħallmu nuqqas ta' saħħa u stress kroniku ta 'telfa soċjali. Fl-impotenza mgħallma, l-annimali Srffl / fl li jirċievu AAV-Cre-GFP urew latency miżjuda biex jaħarbu minn xokk tas-sieq wara espożizzjoni minn qabel għal stress inevitabbli ta 'xokk tas-sieq (trattament × provi interazzjoni, F (14,180) = 10.2; testijiet t b'korrezzjoni Bonferroni, p <0.001; AAV-Cre vs AAV-GFP, p <0.01), li jindika suxxettibbiltà miżjuda għal defiċits fl-imġieba kkaġunati mill-istress (Fig. 3E). Bl-istess mod, it-tħassir SRF lokali minn NAc żied ukoll l-istmerrija soċjali (t (10) = 1.8; p <0.05) meta mqabbel ma 'annimali ta' kontroll injettati AAV-GFP wara stress kroniku ta 'telf soċjali (Fig. 3F), effett bħal prodepression.
Nuqqas ta 'involviment ta' SRF fl-induzzjoni ta 'ΔFosB u risponsi ta' mġieba għall-kokaina
Minħabba li ΔFosB huwa indott ukoll fin-NAc b'reazzjoni għal drogi ta 'abbuż bħall-kokaina, kien ta' interess li jiġi eżaminat rwol potenzjali għal SRF fl-azzjoni tal-kokaina. B'differenza mill-istress ta 'telf soċjali kroniku, espożizzjoni ripetuta għall-kokaina ma biddlitx l-espressjoni tal-proteina SRF f'NAc (t (14) = 0.8; p> 0.05) (Fig. 4A) u ma kellha l-ebda effett fuq l-irbit SRF mal-promotur tal-ġene fosB f'dan ir-reġjun tal-moħħ (t (4) = 0.7; p> 0.05) (Fig. 4B). Dan jissuġġerixxi li, kuntrarjament għall-istress, l-induzzjoni ta 'osFosB wara kokaina kronika mhix medjata permezz ta' SRF. Aħna ttestjajna dan direttament billi eżaminajna jekk l-akkumulazzjoni ta 'osFosB wara kokaina kronika hijiex mibdula f'annimali Srffl / fl li jirċievu AAV-Cre-GFP kontra AAV-GFP fin-NAc. Aħna sibna li t-tħassir SRF ma kellu l-ebda effett fuq l-akkumulazzjoni ta ’osFosB ikkawżata mill-kokaina f’dan ir-reġjun tal-moħħ (Fig. 4C).
Figura 4.
It-telf ta 'SRF ma kellu l-ebda effett fuq l-induzzjoni tal-kokaina ta' ΔFosB jew l-imġieba rregolati mill-kokaina. A, B, Esponiment ripetut tal-kokaina (7 d, 20 mg / kg kokaina-HCl) ma kellu l-ebda effett fuq l-espressjoni tal-proteina SRF fin-NAc (A) jew fuq l-SRF li torbot mal-promotur tal-ġene fosB f'dan ir-reġjun tal-moħħ (B) 24 h wara esponiment għall-mediċina (n = 5 / grupp). L-akkumulazzjoni ta 'C, osFosB, imkejla immunoċitokimikament, wara esponiment kroniku għall-kokaina ma tkunx affettwata permezz ta' eliminazzjoni ta 'SRF speċifika għan-NAc. D, E, It-tħassir lokali ta 'SRF min-NAc ma kellu l-ebda effett fuq l-attività lokomotorja wara injezzjoni tal-melħ (d 1) fuq attività lokomotorja u sensitizzazzjoni indotta mill-kokaina (n = 8 / grupp) (d 1 – 7; D) jew il-preferenza tal-post ikkundizzjonat fuq il-kokaina (n = 8 / grupp; E). Id-dejta murija hija espressa bħala medja ± SEM (irrappreżentata bħala żbalji).
Biex insegwu din is-sejba sorprendenti, investigajna jekk knock-out ta 'SRF selettiv min-NAc ibiddel ir-risponsi ta' mġieba għall-kokaina. Konsistenti man-nuqqas ta 'regolamentazzjoni ta' SRF ta 'induzzjoni ta' osFosB bil-kokaina, knock-out speċifiku għal NAc ta 'SRF ma kellu l-ebda effett fuq l-attività lokomotiva kkaġunata minn kokaina akuta jew sensitizzazzjoni lokomotiva li dehru wara esponimenti ripetuti ta' kokaina (trattament × interazzjoni tal-ħin, F (4,80) = 0.3; p> 0.05) (Fig. 4D). Bl-istess mod, knock-out speċifiku għan-NAc ta 'SRF ma kellu l-ebda effett fuq il-preferenza tal-post ikkundizzjonata mill-kokaina (t (14) = 0.1; p> 0.05) (Fig. 4E), li tipprovdi miżura indiretta tal-premju tal-kokaina.
Diskussjoni
Dan l-istudju identifika l-SRF bħala medjatur ġdid upstream ta 'ΔFosB fin-NAc wara t-telfa soċjali kronika tal-istress, u jimplika SRF fl-iżvilupp ta' mġieba depressivi u ta 'ansjetà. Aħna nipprovdu evidenza diretta li l-istress ta ’telfa soċjali kronika jonqos il-livelli ta’ SRF fin-NAc ta ’annimali suxxettibbli, iżda mhux reżiljenti, u li din ir-regolamentazzjoni tipprevjeni l-induzzjoni ta’ ΔFosB f’dan ir-reġjun tal-moħħ, li wrejna li huwa meħtieġ biex tlaħħaq b’mod effettiv bl-istress kroniku, jiġifieri, ir-reżiljenza (Vialou et al., 2010). Tnaqqis simili fl-espressjoni SRF instab fin-NAc tal-bnedmin depressi, fejn ΔFosB mRNA u l-espressjoni tal-proteina tnaqqsu wkoll. B'kuntrast, il-livelli ta 'ΔFosB ma tnaqqsux fin-NAc ta' ġrieden suxxettibbli, minkejja tnaqqis fl-SRF, li jimplika mekkaniżmi oħra ta 'traskrizzjoni, li għadhom mhux magħrufa, fil-kontroll tal-espressjoni tal-ΔFosB. Rwol kawżali għall-SRF fil-medjazzjoni ta 'l-induzzjoni ta' ΔFosB fin-NAc wara stress kroniku ġie stabbilit bl-użu ta 'tħassir ġenetiku induttibbli ta' SRF minn dan ir-reġjun tal-moħħ. L-analiżi fl-imġieba tal-ġrieden b'dan l-eliminazzjoni ta 'l-SRF speċifika għan-NAc timplika aktar l-SRF bħala rwol ewlieni fl-iżvilupp ta' mġieba ta 'depressjoni u ta' ansjetà kkawżati mill-istress u dawk ta 'l-ansjetà. F'kuntrast qawwi, it-tħassir ta 'SRF ma kellu l-ebda effett fuq l-induzzjoni ta' ΔFosB b'reazzjoni għall-għoti ta 'kokaina kronika jew fuq l-effetti ta' l-imġieba ta 'l-kokaina. Dawn is-sejbiet jappoġġaw rwol speċifiku ġdid għall-istimolu għall-SRF fir-regolazzjoni tal-induzzjoni tal-osFosB u r-reazzjonijiet ta 'mġieba għal disturbi ambjentali distinti.
Traskrizzjoni medjata mill-SRF diġà ntweriet li twieġeb għall-attività sinattika, imqanqla fil-biċċa l-kbira minn żieda fluss ta 'kalċju, kif ukoll minn attività newrotrofika msaħħa, partikolarment fil-każ ta' fattur newrotrofiku derivat mill-moħħ (BDNF) (Bading et al., 1993; Xia et al., 1996; Johnson et al., 1997; Chang et al., 2004; Kalita et al., 2006; Knöll u Nordheim, 2009). Dan iqajjem il-mistoqsija interessanti ta 'għaliex l-SRF huwa rregolat fin-NAc ta' ġrieden suxxettibbli, iżda mhux reżiljenti, wara stress kroniku ta 'telfa soċjali. Dan ir-regolament differenzjali x'aktarx mhuwiex medjat minn sinjalazzjoni ta 'dopamina jew BDNF, peress li ġrieden suxxettibbli juru livelli ta' proteina BDNF u żiedu sinjalazzjoni 'l isfel fil-BDNF fin-NAc kif ukoll mill-isparar imsaħħaħ tal-fqigħ tan-newroni dopamine taż-żona tegmental ventrali (VTA), li jżommu n-NAc, billi Annimali reżiljenti juru livelli normali ta 'sinjalar BDNF u rati ta' sparar VTA (Krishnan et al., 2007). Possibbiltà alternattiva hija li l-espressjoni SRF tiġi mrażżna fin-NAc b'reazzjoni għal innervazzjoni glutamaterġika mibdula ta 'dan ir-reġjun tal-moħħ, li wrejna li huwa regolat b'mod differenzjali f' ġrieden suxxettibbli versus reżiljenti (Vialou et al., 2010). Hemm bżonn ta 'aktar xogħol biex tistudja direttament dan u mekkaniżmi oħra possibbli.
Studji riċenti li jużaw metodi tal-ġenoma kollha u metodi oħra jissuġġerixxu li ∼5-10% tal-ġeni fil-mira tal-SRF fin-newroni huma ġeni bikrija immedjati (Philippar et al., 2004; Ramanan et al., 2005; Etkin et al., 2006; Knöll u Nordheim, 2009). Dan huwa konsistenti mad-dejta tagħna li turi rwol kritiku għall-SRF fl-induzzjoni ta 'ΔFosB, prodott maqtugħ tal-fosb immedjat tal-ġene bikri, minħabba stress kroniku. Interessanti, bosta ġeni fil-mira tal-SRF identifikati f'dawn l-istudji varji jirrappreżentaw ukoll miri magħrufa ta 'ΔFosB fin-NAc (Kumar et al., 2005; Renthal et al., 2008, 2009; Maze et al., 2010). Fost dawn il-ġeni regolati komunement hemm bosta li huma magħrufa li jirregolaw iċ-ċitoskeletru newronali (per eżempju, Cdk5, Arc, u Actb). Dan, min-naħa tiegħu, huwa konsistenti mar-rapporti li l-SRF jinfluwenza d-dinamika tal-attina u l-motilità newronali f'bosta tipi ta 'ċelluli newronali (Alberti et al., 2005; Ramanan et al., 2005; Knöll et al., 2006), filwaqt li ΔFosB huwa magħruf li jaffettwaw il-ħruġ ta 'sinsla dendritika tan-newroni NAc (Maze et al., 2010). Tali endpoints funzjonali komuni jistgħu jirriflettu l-effetti konċertati ta 'SRF, flimkien ma' l-induzzjoni ta 'ΔFosB, li jaġixxu fuq serje ta' ġeni mmirati komuni li jinfluwenzaw morfoloġija newronali u, fl-aħħar, imġieba kumplessa.
L-SRF intwera wkoll li għandu rwoli kritiċi fir-regolazzjoni tal-plastiċità sinattika u l-espressjoni u l-imġieba tal-ġeni li jiddependu mill-attività newronali. Pereżempju, telf ta 'induzzjoni li tiddependi mill-SRF ta' ġeni minnufih immedjat b'reazzjoni għal esplorazzjoni volontarja ta 'ambjent ġdid jew attivazzjoni newronali permezz ta' aċċessjonijiet elettrokonvulsivi ġiet assoċjata ma 'potenzjalazzjoni sinattika fit-tul fil-ħippocampus ta' mutanti Srf (Ramanan et al. , 2005; Etkin et al., 2006). Barra minn hekk, l-eħfef tal-SRF f'ippopampi ntwera li jikkaġuna żbilanċi fid-dipressjoni sinattika fit-tul, espressjoni tal-ġene bikrija immedjata indotta minn kuntest ġdid, u abitazzjoni indebolita matul l-esplorazzjoni ta 'ambjent ġdid (Etkin et al., 2006). Din id-dejta tistabbilixxi l-importanza ta 'SRF fil-kapaċità ta' annimal li jadatta b'mod xieraq għal perturbazzjonijiet ambjentali, bħal fil-każ imsemmi hawn fuq ta 'tagħlim biex tidra għal ambjent ġdid, jew, fil-każ ta' adattament għal stimuli stressanti negattivi, biex tipprevjeni l-promulgazzjoni ta 'stress - żbilanċi fl-imġieba kkawżati, bħal fl-istudju preżenti tagħna. Għalhekk, aħna nosservaw li l-annimali li juru defiċits fl-espressjoni ta 'SRF, jew b'reazzjoni għal stress ta' telfa soċjali f'individwi suxxettibbli jew permezz ta 'knockdown dirett ta' SRF, juru imġieba depressiva u ansjetà simili. Minħabba li suġġetti umani depressi jippreżentaw ukoll livelli ta 'SRF imnaqqsa fin-NAc, huwa konċepibbli li SRF għandu rwol fundamentali fir-regolazzjoni tal-kapaċità ta' individwu li jadatta b'mod pożittiv għal stimuli ambjentali negattivi, parzjalment permezz tar-regolazzjoni tal-espressjoni ta 'osFosB fin-NAc.
MEKKANIŻMI LI JIDDIFFERU: ADDIZZJONI VS REŻISTENZA FL-ISTESS
Sejba sorprendenti tal-istudju preżenti hija li, għalkemm l-SRF hija meħtieġa għall-akkumulazzjoni ta 'ΔFosB fin-NAc b'reazzjoni għal stress kroniku, mhix meħtieġa għal induzzjoni ta' ΔFosB fl-istess reġjun tal-moħħ b'reazzjoni għal kokaina kronika. Bl-istess mod, l-SRF mhux meħtieġ għal risponsi ta ’mġieba normali għall-mediċina. Din id-dejta turi li, minkejja l-fatt li ΔFosB huwa indott fin-NAc b'reazzjoni għal ħafna tipi ta 'stimoli (Nestler et al., 1999; Nestler, 2008), jidher li hemm mogħdijiet molekulari distinti li jwasslu għal induzzjoni ta' ΔFosB. Spjegazzjoni possibbli għal dawn is-sejbiet hija t-tipi ta 'ċelloli parzjalment differenti li juru l-akkumulazzjoni ta' ΔFosB b'reazzjoni għal stress kontra kokaina. L-istress kroniku jinduċi ΔFosB bejn wieħed u ieħor fiż-żewġ subpopolazzjonijiet ewlenin tan-newroni medji spiniċi NAc, dawk li jesprimu prinċipalment D1 kontra D2 dopamine, filwaqt li l-kokaina kronika tinduċi ΔFosB fil-biċċa l-kbira fi ħdan in-newroni D1 + (Kelz et al., 1999; Perrotti et al). . Għalhekk, huwa possibbli li l-mogħdijiet dipendenti mill-SRF jistgħu jkunu importanti għall-induzzjoni ta 'ΔFosB fin-newroni D2004 +. Madankollu, dan ma jispjegax it-telf komplet ta 'induzzjoni ta' ΔFosB fil-ġrieden knock-out ta 'SRF wara stress kroniku, peress li l-induzzjoni sseħħ fiż-żewġ sottotipi newronali. Spjegazzjoni alternattiva hija li l-istress kroniku u l-kokaina kronika jaffettwaw kaskati ta ’sinjalazzjoni intraċellulari distinti, bis-saħħa tal-modi ta’ azzjoni distinti tagħhom fuq in-newroni NAc, bl-istress kroniku forsi jaħdem permezz ta ’trasmissjoni glutamaterġika mibdula, kif innotat qabel, u kokaina kronika li taħdem primarjament permezz ta’ D1 sinjalar tar-riċettur (Nestler, 2008). Possibbiltà oħra hi li l-induzzjoni tal-ΔFosB minn stress kroniku kontra l-kokaina kronika tiddependi fuq mekkaniżmi traskrizzjonali distinti li huma kkontrollati b'mod differenti minn inputs newrali distinti li jservu n-NAc minn diversi reġjuni ta 'projezzjoni glutamaterġika, pereżempju, minn diversi reġjuni ta' kortiċi prefrontal, ippokampus u amygdala. Ħafna xogħol ieħor huwa meħtieġ biex ikunu esplorati dawn il-possibbiltajiet u alternattivi.
Flimkien, is-sejbiet tagħna jidentifikaw mekkaniżmu traskrizzjonali ġdid li permezz tiegħu ΔFosB huwa indott fin-NAc biex jimmedja r-reazzjonijiet ta 'prossimità għal stimoli stressanti. Dan l-istudju jipprovdi wkoll għarfien ġdid importanti dwar ir-rwol li għandu l-SRF fil-livell tan-NAc fir-regolamentazzjoni ta 'mġieba simili għad-dipressjoni u l-ansjetà.. Li jinkiseb fehim aħjar tar-rwol tat-traskrizzjoni ta 'SRF fir-regolazzjoni ta' mġieba bħal dawn jgħin fl-identifikazzjoni ta 'miri tal-ġene ġodda involuti fir-reżiljenza għal disturbi relatati mal-istress, u jista' jiffaċilita l-iżvilupp futur ta 'terapiji antidepressivi aktar effettivi.
Dan ix-xogħol kien appoġġjat minn għotjiet mill-Istitut Nazzjonali tas-Saħħa Mentali u l-Istitut Nazzjonali dwar l-Abbuż tad-Droga u minn alleanza ta ’riċerka ma’ AstraZeneca. Nirringrazzjaw lil David D. Ginty talli pprovda lill-ġrieden Srffl / fl.
Il-korrispondenza għandha tkun indirizzata lil Eric J. Nestler, Dipartiment tan-Newroxjenza Fishberg, Skola tal-Mediċina Mount Sinai, Post wieħed Gustave L. Levy, Kaxxa 1065, New York, NY 10029-6574. [protett bl-email]
Copyright © 2010 l-awturi 0270-6474 / 10 / 3014585-08 $ 15.00 / 0
Referenzi
1. ↵
1 Alberti S,
2 Krause SM,
3 Kretz O,
4 Philippar U,
5 Lemberger T,
6 Casanova E,
7 Wiebel FF,
8 Schwarz H,
9 Frotscher M,
10 Schütz G,
11 Nordheim A
(2005) Il-migrazzjoni newronali fil-fluss migratorju tar-rostral murine teħtieġ fattur ta 'rispons fis-serum. Proc Natl Acad Sci USA 102: 6148 – 6153.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
2. ↵
1 Bading H,
2 Ginty DD,
3 Greenberg ME
(1993) Ir-regolamentazzjoni ta 'l-espressjoni tal-ġene fin-newroni ippokampali permezz ta' mogħdijiet distinti ta 'sinjalazzjoni tal-kalċju. 260 Xjenza: 181 – 186.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
3. ↵
1 Berton O,
2 McClung CA,
3 Dileone RJ,
4 Krishnan V,
5 Renthal W,
6 Russo SJ,
7 Graham D,
8 Tsankova NM,
9 Bolanos CA,
10 Rios M,
11 Monteggia LM,
12 DW Awto,
13 Nestler EJ
(2006b) Rwol essenzjali tal-BDNF fil-passaġġ tad-dopamina mesolimbika fit-telfa soċjali. 311 Xjenza: 864 – 868.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
4. ↵
1 Berton O,
2 Covington HE 3rd.,
3 Ebner K,
4 Tsankova NM,
5 Carle TL,
6 Ulery P,
7 Bhonsle A,
8 Barrot M,
9 Krishnan V,
10 Singewald MĠ
11 Singewald N,
12 Birnbaum S,
13 Neve RL,
14 Nestler EJ
(2007) L-induzzjoni ta 'ΔFosB fil-griż periaqueductal bit-tensjoni tippromwovi reazzjonijiet ta' kopertura attivi. Neuron 55: 289 – 300.
CrossRefMedline
5. ↵
1 Chang SH,
2 Poser S,
3 Xia Z
(2004) Rwol ġdid għall-fattur ta 'rispons fis-serum fis-sopravivenza newronali. J Neurosci 24: 2277 – 2285.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
6. ↵
1 Etkin A,
2 Alarcón JM,
3 Weisberg SP,
4 Touzani K,
5 Huang YY,
6 Nordheim A,
7 Kandel ER
(2006) Rwol fit-tagħlim għall-SRF: it-tħassir fil-forebrain tal-adulti jfixkel LTD u l-formazzjoni ta 'memorja immedjata ta' kuntest ġdid. Neuron 50: 127 – 143.
CrossRefMedline
7. ↵
1 Heinze HJ,
2 Heldmann M,
3 Voges J,
4 Hinrichs H,
5 Marco-Pallares J,
6 Hopf JM,
7 Müller UJ,
8 Galazky jien,
9 Sturm V,
10 Bogerts B,
11 Münte TF
(2009) Il-ġlieda kontra s-sensitizzazzjoni ta 'inċentivi fid-dipendenza severa mill-alkoħol bl-użu ta' stimulazzjoni fil-fond tal-moħħ tan-nukleu accumbens: aspetti kliniċi u bażiċi tax-xjenza. Neurosci ta ’quddiem 3 Hum: 22.
Medline
8. ↵
1 Johnson CM,
2 Hill CS,
3 Chawla S,
4 Treisman R,
5 Bading H
(1997) Il-kalċju jikkontrolla l-espressjoni tal-ġene permezz ta 'tliet mogħdijiet distinti li jistgħu jiffunzjonaw indipendentement mill-kaskata ta' sinjalazzjoni ta 'Ras / mitogen-protein kinases (ERKs). J Neurosci 17: 6189 – 6202.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
9. ↵
1 Kalita K,
2 Kharebava G,
3 Zheng JJ,
4 Hetman M
(2006) Ir-rwol tal-lewkimja akuta megakaryoblastika-1 fl-istimulazzjoni dipendenti mill-ERK1 / 2 tat-traskrizzjoni mmexxija mill-fattur tar-rispons fis-serum permezz ta 'BDNF jew żieda fl-attività sinattika. J Neurosci 26: 10020 – 10032.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
10. ↵
1 Kelz MB,
2 Chen J,
3 Carlezon WA Jr.,
4 Whisler K,
5 L-Indja L,
6 Beckmann AM,
7 Steffen C,
8 Zhang YJ,
9 Marotti L,
10 DW Awto,
11 Tkatch T,
12 Baranauskas G,
13 Surmeier DJ,
14 Neve RL,
15 Duman RS,
16 Picciotto MR,
17 Nestler EJ
(1999) L-espressjoni tal-fattur tat-traskrizzjoni osFosB fil-moħħ tikkontrolla s-sensittività għall-kokaina. Natura 401: 272 – 276.
CrossRefMedline
11. ↵
1 Knöll B,
2 Nordheim A
(2009) Versatilità funzjonali tal-fatturi ta 'traskrizzjoni fis-sistema nervuża: il-paradigma SRF. Xejriet ta 'Neurosci 32: 432 – 442.
CrossRefMedline
12. ↵
1 Knöll B,
2 Kretz O,
3 Fiedler Ċ,
4 Alberti S,
5 Schütz G,
6 Frotscher M,
7 Nordheim A
(2006) Il-fattur ta 'rispons fis-serum jikkontrolla l-assemblaġġ taċ-ċirkwiti newronali fl-ippokamp. Nat Neurosci 9: 195 – 204.
CrossRefMedline
13. ↵
1 Krishnan V,
2 Han MH,
3 Graham DL,
4 Berton O,
5 Renthal W,
6 Russo SJ,
7 Q Laplant,
8 Graham A,
9 Lutter M,
10 Lagace DC,
11 Ghose S,
12 Reistru R,
13 P tannanniku,
14 TA aħdar,
15 Neve RL,
16 Chakravarty S,
17 Kumar A,
18 Eisch AJ,
19 DW Awto,
20 Lee FS,
21 et al.
(2007) Adattamenti molekulari sottostanti għas-suxxettibilità u r-reżistenza għat-telfa soċjali f'reġjuni ta 'premju tal-moħħ. Ċellula 131: 391 – 404.
CrossRefMedline
14. ↵
1 Kuhn J,
2 Bauer R,
3 Pohl S,
4 Lenartz D,
5 Huff W,
6 Kim EH,
7 Klosterkoetter J,
8 Sturm V
(2009) Osservazzjonijiet dwar il-waqfien mit-tipjip mingħajr għajnuna wara stimulazzjoni fil-fond tal-moħħ tan-nukleu accumbens. Eur Addict Res 15: 196 – 201.
CrossRefMedline
15. ↵
1 Kumar A,
2 Choi KH,
3 Renthal W,
4 Tsankova NM,
5 Theobald DE,
6 Truong HT,
7 Russo SJ,
8 Q Laplant,
9 Sasaki TS,
10 Whistler KN,
11 Neve RL,
12 DW Awto,
13 Nestler EJ
(2005) Ir-rimodellar tal-kromatina huwa mekkaniżmu ewlieni sottostanti għall-plastiċità indotta mill-kokaina fi striatum. Neuron 48: 303 – 314.
CrossRefMedline
16. ↵
1 Maze I,
2 Covington HE 3rd.,
3 Dietz DM,
4 LaPlant Q,
5 Renthal W,
6 Russo SJ,
7 Mekkaniku M,
8 Mouzon E,
9 Neve RL,
10 Haggarty SJ,
11 Ren Y,
12 Sampath SC,
13 Hurd YL,
14 P Greengard,
15 Tarakhovsky A,
16 Schaefer A,
17 Nestler EJ
(2010) Rwol essenzjali tal-istone metiltrasferażi G9a fil-plastiċità indotta mill-kokaina. 327 Xjenza: 213 – 216.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
17. ↵
1 McClung CA,
2 Ulery PG,
3 Perrotti LI,
4 Zachariou V,
5 Berton O,
6 Nestler EJ
(2004) DeltaFosB: swiċċ molekulari għal adattament fit-tul fil-moħħ. Brain Res Mol Brain Res 132: 146 – 154.
Medline
18. ↵
1 Nestler EJ
Mekkaniżmi traskrizzjonali ta 'dipendenza: ir-rwol ta' deltaFosB. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 2008: 363 – 3245.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
19. ↵
1 Nestler EJ,
2 Carlezon WA Jr.
(2006) Iċ-ċirkwit ta 'premjazzjoni tad-dopamina mesolimbika fid-depressjoni. Psikjatrija Bijoloġika 59: 1151 – 1159.
CrossRefMedline
20. ↵
1 Nestler EJ,
2 Kelz MB,
3 Chen J
(1999) osFosB: medjatur molekulari ta 'plastiċità newrali u komportamentali fit-tul. Moħħ Res 835: 10 – 17.
CrossRefMedline
21. ↵
1 Newton SS,
2 Thome J,
3 Wallace TL,
4 Shirayama Y,
5 Schlesinger L,
6 Sakai N,
7 Chen J,
8 Neve R,
9 Nestler EJ,
10 Duman RS
(2002) L-inibizzjoni tal-proteina cAMP li torbot element ta 'proteina jew dynorphin fin-nukleu accumbens tipproduċi effett simili għal anti-dipressanti. J Neurosci 22: 10883 – 10890.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
22. ↵
1 Nikulina EM,
2 Arrillaga-Żamma I,
3 Miczek KA,
4 Martell RP Jr.
(2008) Tibdil fit-tul fl-istrutturi mesocorticolimbic wara t-telfa soċjali ripetuta tal-istress fil-firien: kors ta 'ħin ta' riċettur mu-opjojdi mRNA u immunosessività FosB / DeltaFosB. Eur J Neurosci 27: 2272 – 2284.
CrossRefMedline
23. ↵
1 Perrotti LI,
2 Hadeishi Y,
3 Ulery PG,
4 Barrot M,
5 Monteggia L,
6 Duman RS,
7 Nestler EJ
(2004) Induzzjoni ta 'osFosB fi strutturi tal-moħħ relatati mal-premju wara tensjoni kronika. J Neurosci 24: 10594 – 10602.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
24. ↵
1 Perrotti LI,
2 Weaver RR,
3 Robison B,
4 Renthal W,
5 Maze I,
6 Yazdani S,
7 Elmore RG,
8 DJ Knapp,
9 Selley DE,
10 Martin BR,
11 Sim-Selley L,
12 Bachtell RK,
13 DW Awto,
14 Nestler EJ
(2008) Xejriet distinti ta 'induzzjoni ta' DeltaFosB fil-moħħ minn drogi ta 'abbuż. Sinapsi 62: 358 – 369.
CrossRefMedline
25. ↵
1 Philippar U,
2 Schratt G,
3 Dieterich C,
4 Müller JM,
5 Galgóczy P,
6 Engel FB,
7 Keating MT,
8 Gertler F,
9 Schüle R,
10 Vingron M,
11 Nordheim A
(2004) Il-ġene fil-mira tal-SRF Fhl2 antagonizza l-attivazzjoni dipendenti minn RhoA / MAL ta 'SRF. Mol Cell 16: 867 – 880.
CrossRefMedline
26. ↵
1 Ramanan N,
2 Shen Y,
3 Sarsfield S,
4 Lemberger T,
5 Schütz G,
6 DJ Linden,
7 Ginty DD
(2005) SRF timmedja l-espressjoni tal-ġene indotta mill-attività u l-plastiċità sinattika iżda mhux il-vijabbiltà newronali. Nat Neurosci 8: 759 – 767.
CrossRefMedline
27. ↵
1 Renthal W,
2 Carle TL,
3 Maze I,
4 Covington HE 3rd.,
5 Truong HT,
6 Alibhai I,
7 Kumar A,
8 Montgomery RL,
9 Olson MT,
10 Nestler EJ
(2008) Delta FosB jimmedja d-desensibilizzazzjoni epigenetika tal-ġene c-fos wara esponiment kroniku għall-amfetamina. J Neurosci 28: 7344 – 7349.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
28. ↵
1 Renthal W,
2 Kumar A,
3 Xiao G,
4 Wilkinson M,
5 Covington HE 3rd.,
6 Maze I,
7 Sikder D,
8 Robison AJ,
9 LaPlant Q,
10 Dietz DM,
11 Russo SJ,
12 Vialou V,
13 Chakravarty S,
14 Kodadek TJ,
15 Munzell A,
16 Kabbaj M,
17 Nestler EJ
(2009) Analiżi tal-ġenoma madwar ir-regolazzjoni tal-kromatina permezz tal-kokaina tiżvela rwol għas-sirtuini. Neuron 62: 335 – 348.
CrossRefMedline
29. ↵
1 Schlaepfer TE,
2 Cohen MX,
3 Frick C,
4 Kosel M,
5 Brodesser D,
6 Axmacher N,
7 Joe AY,
8 Kreft M,
9 Lenartz D,
10 Sturm V
(2008) Stimulazzjoni fil-fond tal-moħħ biex tippremja ċirkwiti li ttaffi l-anhedonja fid-depressjoni maġġuri refrattarji. Neuropsikofarmakoloġija 33: 368 – 377.
CrossRefMedline
30. ↵
1 Sesack SR,
2 Grazzja AA
(2010) Netwerk ta 'premju tal-gangliji kortiko-bażali: mikroċirkwit. Neuropsikofarmakoloġija 35: 27 – 47.
CrossRefMedline
31. ↵
1 Tomita H,
2 MP Vawter,
3 Walsh DM,
4 Evans SJ,
5 PV Choudary,
6 Li J,
7 Overman KM,
8 ATZ ME,
9 Myers RM,
10 Jones EG,
11 Watson SJ,
12 Akil H,
13 Bunney WE Jr.
(2004) Effett ta 'fatturi agonali u ta' wara l-postmortem fuq il-profil ta 'espressjoni tal-ġene: kontroll tal-kwalità f'analiżi ta' microarray jew postmortem fil-moħħ tal-bniedem. Bij Psikjatrija 55: 346 – 352.
CrossRefMedline
32. ↵
1 Tsankova NM,
2 Berton O,
3 Renthal W,
4 Kumar A,
5 Neve RL,
6 Nestler EJ
(2006) Regolazzjoni kontinwa tal-kromatina tal-ippokamp fil-mudell ta 'ġurdien ta' depressjoni u azzjoni anti-dipressiva. Nat Neurosci 9: 519 – 525.
CrossRefMedline
33. ↵
1 Vassoler FM,
2 Schmidt HD,
3 Gerard ME,
4 KR famuż,
5 Ciraulo DA,
6 Kornetsky C,
7 Knapp CM,
8 Ittaqqab RC
(2008) L-istimulazzjoni fil-fond tal-moħħ tan-nukleu accumbens tnaqqas il-qoxra mill-ġdid tal-mediċina li tfittex il-firien mill-ġdid tal-mediċina li tfittex il-firda. J Neurosci 28: 8735 – 8739.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
34. ↵
1 Vialou V,
2 Robison AJ,
3 QC Laplant,
4 Covington HE 3rd.,
5 Dietz DM,
6 Ohnishi YN,
7 Mouzon E,
8 Rush AJ 3rd.,
9 Watts EL,
10 Wallace DL,
11 Iñiguez SD,
12 Ohnishi YH,
13 Steiner MA,
14 Warren BL,
15 Krishnan V,
16 Bolaños CA,
17 Neve RL,
18 Ghose S,
19 Berton O,
20 Tamminga CA,
21 Nestler EJ
(2010) ΔFosB fiċ-ċirkwiti ta 'premjazzjoni tal-moħħ jimmedja r-reżistenza għall-istress u r-reazzjonijiet ta' antidepressivi. Nat Neurosci 13: 745 – 752.
CrossRefMedline
35. ↵
1 Wilkinson MB,
2 Xiao G,
3 Kumar A,
4 LaPlant Q,
5 Renthal W,
6 Sikder D,
7 Kodadek TJ,
8 Nestler EJ
(2009) It-trattament b'imipramine u r-reżistenza għandhom regolazzjoni ta 'kromatina simili f'reġjun ewlieni ta' premju tal-moħħ. J Neurosci 29: 7820 – 7832.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
36. ↵
1 Xia Z,
2 Dudek H,
3 Miranti CK,
4 Greenberg ME
(1996) L-influss tal-kalċju permezz tar-riċettur NMDA jġib traskrizzjoni tal-ġene bikrija immedjata permezz ta 'mekkaniżmu li jiddependi mill-MAP kinase / ERK. J Neurosci 16: 5425 – 5436.
Test sħiħ Astratt / LIBERU
;