Jurnal Neuroscience, 15 March 2001, 21(6): 2123-2130;
+ Panganggit Author
Abstract
Panularan dopamin ing accumbens nukleus bisa diaktifake kanthi obatan, stres, utawa tindak tanduk sing motivasi, lan ekspirasi rangsangan kasebut bisa ngremenake respon dopamin. Tujuane sinau iki yaiku kanggo nemtokake perilaku seksual wanita ngaktifake neuron nukleus nukleus lan manawa pengalaman seksual kepungkur meluake respon neuron ing nukleus akrab kanggo amphetamine. Migunakake labeling immunocytochemical, ekspresi c-Fos ing subkategori beda (cangkang vs inti ing tingkat rostral, tengah, lan caudal) saka accumbens nukleus ditemokake ing hamster wadon sing wis akeh pengalaman seksual. Hamster wadon, diwenehi salah siji minggu nalika ngobrol seksual utawa isih naif sacara seksual, dites kanggo perilaku seksual kanthi paparan hamster lanang diwasa. Pengalaman seksual sadurungé ningkataké c-Fos labeling ing tingkat rostral lan caudal nanging ora ana ing tingkat tengah saka accumbens nukleus. Testing kanggo laku seksual tambah labeling ing inti, nanging ora cangkang, saka accumbens inti. Kanggo ngetrapake sing laku seksual wanita bisa nandhang sensitivitas neuron ing jalur dopamin mesolimbi, respon lokomotor wanita wadon sing laku seksual lan seksual naif menyang injeksi amphetamine banjur dibandhingake. Amphetamine nambah kegiatan umum lokomotif ing kabeh wanita. Nanging, kéwan seksual sing ditularaké luwih cepet amfetamin tinimbang iya kewan naif. Data kasebut nunjukake yen perilaku seksual wanita bisa ngaktifake neuron ing accumbens nukleus lan pengalaman seksual bisa ngliwati sensitivitas neuronal tumrap amphetamine. Kajaba iku, asil kasebut nyedhiyakake bukti tambahan kanggo beda fungsi antarane cangkang lan inti saka accumbens nukleus lan ing sumbu anteroposterior.
Neuron dopamin sing asalé saka tlatah tegal lan ventral tengah lan ngusulaké kanggo macem-macem nukleus forebrain, kalebu accumbens nukleus, minangka bagéan saka sistem dopamin mesolimbi. Sampeyan wis disaranake supaya sistem dopamin iki penting kanggo angger aturan tindak tanduk (appetitive behaviors)Mitchell lan Gratton, 1994; Salamone, 1994, 1996; Ikemoto lan Panksepp, 1999), uga nyegah obat kanggo penyalahgunaan (Pierre lan Vezina, 1998;Koob, 1999; Lorrain et al., 1999; McKinzie et al., 1999; Peoples et al., 1999; Bradberry et al., 2000). Pangopènan sistemik saka macem-macem obatan saka penyalahgunaan (umpamane, kokain, amphetamine, lan heroin) ngaktifake jalur dopamin (Pontieri et al., 1995; Nisell et al., 1997; Pierce lan Kalivas, 1997a; Tanda et al., 1997; Tanda lan Di Chiara, 1998; Barrot et al., 1999; Cadoni lan Di Chiara, 1999), lan pamindhahan kasebut marang agen-agen farmakologis kasebut bisa nyegah neuron-neuron dopamin-responsif kasebutRobinson et al., 1988; Kalivas et al., 1992; Kalivas lan Duffy, 1993; Pierce lan Kalivas, 1995; Kuczenski et al., 1997; Nisell et al., 1997; Birrell lan Balfour, 1998; Heidbreder lan Feldon, 1998; Cadoni lan Di Chiara, 1999; Cadoni et al., 2000). Riset nyedhiyakake bukti yen accumbens nukleus uga nanggapi sifat tartamtu sing ana hubungane karo kawin. Tingkat dopamin ekstrasel ing akumulasi nukleus nambah nalika interaksi seksual ing tikus wadon (Mermelstein lan Becker, 1995; Pfaus et al., 1995) lan hamsters (Meisel et al., 1993; Kohlert et al., 1997; Kohlert lan Meisel, 1999). Kaya karo obat sampingan, tes tingkah laku seksual uga nambah tekanan ing tingkat dopamin akrilik nukleus, sing nyatakake yen pengalaman seksual bisa ngrasakake neuron ing jalur dopamin (Kohlert lan Meisel, 1999).
Accumbens nukleus dumadi saka akeh subkategori sing béda anatomis, sing paling dikenal yaiku cangkang lan inti. Koneksi anatomi saka cangkang lan inti diverge, suggesting yen subregions iki ngatur fungsi beda (Crawley et al., 1985a,b; Heimer et al., 1991; Zahm lan Brog, 1992; Brog et al., 1993;Kalivas lan Duffy, 1995; Maldonado-Irizarry et al., 1995; Pierce lan Kalivas, 1995; Pontieri et al., 1995; Broening et al., 1997; Heimer et al., 1997; Kelley et al., 1997; Stratford lan Kelley, 1997; Heidbreder lan Feldon, 1998; Lanca et al., 1998; Bassareo lan Di Chiara, 1999; Di Chiara et al., 1999b; Groenewegen et al., 1999; Kelley, 1999; McKinzie et al., 1999; Zahm, 1999; Brown lan Molliver, 2000). Amarga sarasilane inti yaiku inti nukleus, ora jelas yen respon marang prilaku seksual wanita kasebut dilokalisasikake menyang sub-spesies sub-aksés sing utamane nyebar ing kabeh nukleus. Teknik sing sadurunge digunakake kanggo njawab pitakonan iki (contone, microdialysis) ora cukup sensitif spasial kanggo njelajah heterogenitas fungsional saka accumbens. Contoné, proses pangolahan immunocytochemical kanggo protein C-Fos nyedhiyakake sawijining cara kanggo nguji aktivasi selular sing diskrèsi ing antarane subregions saka accumbens nukleus. Mangkono, tujuan pertama saka eksperimen iki yaiku kanggo nemtokake manawa aktivasi selular sawise laku seksual wanita wis dilokalisasi menyang subregion spesifik saka accumbens nukleus.
Sifat sing menarik saka jalur dopamin iki yaiku sensitivitas silang. Ing tembung liya, neuron dopamin sadurunge sensitized menyang siji obat bakal nuduhake respon sensitized kanggo obat liyane sing diwenehi kanggo pisanan (Cunningham lan Kelley, 1992; Pierce lan Kalivas, 1997a; Birrell lan Balfour, 1998; Taylor lan Horger, 1999). Saliyane nglatih pemekaan ing antarane obatan, sawetara panliten nyatakake sensitisasi silang antarane eksposur sing kaping pirang-pirang marang agen farmakologis lan tindak tanduk alamiMitchell lan Stewart, 1990a,b; Tidey lan Miczek, 1997; Fiorino lan Phillips, 1999). Mulane, kita bakal sinau manawa jinis kéwan sing ngalami seksual lan ora aktif sacara seksual bakal nanggapi kanthi beda tumrap rangsangan novel sing dikenal kanthi cara ngaktifake jalur dopamin (kayata, sensitivitas silang), kayata amphetamine. Yen prilaku seksual wanita sensitizes path dopamin, banjur wadon sing laku seksual kudu nampilake respon perilaku ditambah menyang injeksi siji amphetamine.
BAHAN lan METODE
Cara umum
Kéwan. Hamster wong lanang lan wadon dikirim saka Charles River Laboratories (Kingston, NY) ing ~ 60 d umur. Wadon dijenengi individu, lan kéwan stimulus lanang disimpen ing klompok telung utawa papat ing kandang plastik (50.8 × 40.6 × 20.3 cm). Kamar koloni kewan iki dikelola ing suhu konstan (22 ° C) kanthi lampu mati antarane 1: 30 lan 11: 30 PM (14 / 10 hr cahya / siklus gelap). Pangan lan banyu kasedhiya ad libitum.
Prosedur sing digunakake ing eksperimen iki sesuai karo Institut Kesehatan Nasional Pedoman kanggo Care and Use of Laboratory Animals lan wis disetujoni dening Komite Pemanfaatan Kéwan lan Purdue.
Pengalaman seksual. Kira-kira minggu 1 sawisé wadon tiba ing laboratorium kasebut, bilateral dibarengi ing anestesi sodium pentobarbital (Nembutal) (8.5 mg per 100 gm bobot awak, ip). Sawise ovariektomi, wanita wadon wiwitane dibagi dadi rong kelompok. Siji klompok betina nampa 6 minggu pengalaman seksual karo pria rangsangan; grup liya tetep dadi naif seksual. Kabeh wadon padha hormati seminggu sawise minggu minggu 6. Ing loro 48 lan 24 sakwise pengalaman seksual, betina kasebut disuntik subcutaneously karo 10 μg estradiol benzoate ing ml 0.1 saka minyak cottonseed. Ing dina tes pengalaman, betina nampa 500 μg saka progesteron ing ml 0.1 saka minyak cottonseed (injeksi subkutan). Wanita sing ora nampa pengalaman seksual disuntikake karo regimen hormon lan tetep ana ing kandang ing ruang koloni. Ing 4-5 hr sawise administrasi progesteron, hamster lanang diwasa sing wis nampa pengalaman seksual kanthi nggunakake studi tingkah laku seksual liyane diselehake ing kandhang ngarep wanita eksperimen. Urutan kandhang sing ngandhut lanang diputer saben minggu kanggo ngurangi kemungkinan sing lanang lan wadon dipasangkan luwih saka sepisan sajrone minggu 6 pengalaman seksual.
Immunocytochemistry. Hamster wadon, sing tiwas kanthi overdosis sodium pentobarbital, padha karo intracardial perfused karo 25 mm PBS solusi, pH 7.5, kanggo 2 min (aliran tingkat, 25 ml / menit), diiringi 4% paraformaldehida ing PBS kanggo 20 min. Pemikiran kudu diisi kanggo 2 hr ing paraformaldehida lan disimpen ing 10% sucrose PBS sewengi ing 4 ° C.
Serat koronal 40 μm bagian beku ditampa liwat kabèh inti accumbens. Sawise telung 10 min rinses ing PBS, bagean diinkubake ing antibodi utama kanggo c-Fos (1: 6000 ing PBS karo 0.3% Triton X-100; Santa Cruz Bioteknologi, Santa Cruz, CA) utawa ing antibodi utama kanggo calbindin-D (28 kDa) (1: 6000 ing PBS karo 0.3% Triton X-100; Chemicon Internasional, Temecula, CA) ing 4 ° C kanggo 48 hr. Loro kelas c-Fos lan calbindin-D banjur diinkubasi kanggo min 45 ing suhu kamar ing anti-kelentit antibodi IgG biotinilasi antibodi antagonis (1: 200 ing PBS; Elite Vectastain ABC kit; Vector Laboratories, Burlingame, CA) inkubasi karo komplek peroksidase avidin-biotin (1: 50 ing PBS; Elite Vectastain ABC kit) kanggo 45 min ing suhu kamar, kanthi telung 10 rinses ing PBS sadurunge saben inkubasi. Sawise rong mbilas ing PBS lan menit 10 mbilas ing 0.1 m Tris buffer, pH 7.6, c-Fos lan calbindin-D diinkubasi kanggo 5 lan 10 min, ing 0.08% diaminobenzidine (DAB) (Aldrich, Milwaukee, WI) ing buffer Tris ngemot 0.003% hidrogen peroksida lan 0.015% nikel klorida. Kabeh bagean wis diresiki maneh ing buffer Tris lan banyu deionized lan banjur dipasang menyang slides krom-alum-dilapisi. Geser kasebut pepe, dehidrasi, dibungkus, lan kalebu tanduran nggunakake Permount (Fisher Scientific, Pittsburgh, PA).
Analisis mikroskopis. Jaringan saraf diwarnai kanggo calbindin-D, sing delineates cangkang lan inti saka accumbens nukleus (Jongen-Watch et al., 1994a; Johnson lan Kayu, 1999) digunakake kanggo ngenali siji bagean saben tingkat rostral, tengah, lan caudal saka inti dubur accumbens. Bagéan saka inti ing akusatif ing tingkat rostral, tengah, lan caudal diarani calbindin ditampilake ing Gambar 1 A-C. Wis dilapurake yen ana beda beda antarane inti lan cangkang ing immunoreactivity calbindin-D ing hamster Siria sing dibandhingake karo tikus, nanging pewarnaan kanggo peptida iki isih bisa mbatesi subregions saka accumbens nukleus (Johnson lan Kayu, 1999). Kothak sing kalebu wilayah sampling 0.1 mm2 (0.2 × 0.5 mm) diselehake ing endhas dorsal lan inti saka accumbens inti kanggo saben bagean. Gambar saben bagean dicithak jroning film transparan lan gambar kasebut banjur disemprotake menyang bagean c-Fos sing cocog kanggo saben kewan, supaya kothak ditempelake ing posisi sing padha kanggo kabeh kewan. Gambar 1, D lan E, nggambarake bagean caudal saka kewan sing nampa minggu kepenuhan seksual 6 lan dites kanggo perilaku seksual. Kothak iki diselehake ing inti inti nukleus akrab ing Figure 1 Dlan ing cangkang saka accudens caudal ing Tokoh1 E. Kothak kanthi dimensi sing padha dilebokake ing bagean jaringan sing padha ing korteks cingulate medial lan liwat inti medial lan dorsal caudate nukleus ing saben telung level sing diconto kanggo inti accumbens. Amarga kita hipotesis yen bisa ana variasi rostral-caudal ing efek kawin ing c-Fos, mung siji bagean per level sing dianalisis kanggo nambah presisi anatomi sampel kita. Jumlah sel c-Fos-imunoreaktif ing saben area sing dipilih diitung kanthi pambiyantu kamera video sing gegandhengan karo sistem analisis gambar komputerisasi (BioQuant MegM; R & M Biometrik, Nashville, TN).
Nucleus accumbens bagean tissue di wernani kanggo calbindin-D lan c-Fos. A-C yaiku bagean saka rostral (A), tengah (B), lan caudal (C) inti accumbens diwarnai (midline punika kiwa) kanggo calbindin, nggambaraké pamérangan antara cangkang lan inti subregions (asterisk). Ana 320 μm antarane bagean rostral lan tengah lan 240 μm antarane bagean tengah lan caudal. Gambar ngisor (D, E) yaiku conto c-Fos pewarnaan saka inti caudal (D) lan cangkang (E) saka accumbens nukleus (midline punika tengen) saka wanita sing laku seksual sing tiwas sawise test laku seksual. Ingpersegi dowo nggambarake wilayah sampling (0.2 × 0.5 mm).
Eksperimen 1
Eksperimen pertama nyelidiki efek pengalaman seksual lan uji coba induksi c-Fos ing inti accumbens, nukleus dorsal caudate, lan cortex cingulate. Tujuan eksperimen iki loro-lorone. Tujuan kapindho yaiku kanggo nemtokake manawa ana beda ing aktivasi seluler ing salah sawijining wilayah otak amarga pengalaman seksual lan / utawa tes tingkah laku sadurunge. Yen ekspresi c-Fos diowahi, banjur ditemtokake manawa owah-owahan bisa dilokalisasi menyang sub-wilayah tartamtu ing telung area otak sing dianalisis.
Hamster Siria wadon ditampa 6 minggu pengalaman seksual utawa tetep naif sacara seksual. Sajrone minggu pengalaman 6, jumlah wektu kumulatif sing wanita sing dianggep lordosis (immobility disertai dorsoflexion saka punggung) diukur kanggo saben sesi tes 10 min. Ora ana tindakan ngukur seksual lanang. Sajrone minggu 7, suntingan estradiol benzoat lan suntikan progesteron padha. Wektu iki, setengah saka wanita sing laku seksual lan naif dites kanggo laku seksual kanthi nempatake lanang diwasa ing kandhang ngarep. Wong wadon sing isih ana ing kandhang ngarep. Ing 60-90 min sawise cahya kanggo lanang, sing wadon padha intracardally perfused, lan otak padha diproses kanggo c-Fos expression. Sing wadon ora dites kanggo laku seksual padha perfot 4 hr sawise administrasi progesteron.
Analisis data. Amarga jumlah sel ora beda antarane wong wadon sing ora dites kanggo perilaku seksual sajrone minggu 7, tanpa mengaruhi pengalaman seksual kepungkur (pirsani Tabel1 kanggo conto), sing wadon eksperimen pungkasane dibagi dadi telung klompok perawatan kanggo analisis. Klompok pisanan sing wadon sing nampa minggu-minggu 6 saka pengalaman seksual lan dites kanggo perilaku seksual (pengalaman / test, n = 6). Kelompok kapindho kasebut kalebu wanita sing ora nampa pengalaman sadurunge, nanging dites kanggo perilaku seksual (ora pengalaman / test,n = 8). Klompok pungkasan ngandhut kabeh hamster wadon sing ora dites kanggo perilaku seksual, apa wae pengalaman seksual sadurungé (ora ana test, n = 13). Kelompok loro sing ora nampa tes laku seksual dikombinasikake kanggo nambah daya statistik ing analisis. Nomer c-Fos-stained sel saka inti duktus accumbens, dorsal caudate nucleus, lan cingulate cortex dibandhingake antarane telung golongan.
Perbandingan makna ± SEM nomer sel-sel F-imunoreaktif ing inti lan inti inti antarane ora ana kelompok perawatan test
Tulisan-tandha sel wis dianalisis nggunakake ANOVAs multifaktor. Prasaja utama efek ANOVA lan post hoc Tes Newman-Keuls ditindakake ing ngendi cocok. Data tindak tanduk (durasi lordosis) dianalisis nggunakake loro-buntut t test.
Eksperimen 2
Eksperimen kedua dibandingkeun kemampuan rangsangan novel, amphetamine, untuk memproduksi sensitisasi perilaku dalam hamsters perempuan yang seksual dan seksual naif. Ekspresi c-Fos ing accumbens inti, dorsal caudate nucleus, lan cingulate cortex dianalisis maneh kanggo nemtokake pola aktivitas selular padha karo asil sing diduweni ing Eksperimen 1.
Hamster Suriah wadon diwenehi 6 minggu pengalaman seksual utawa tetep naif seksual. Ing minggu 7, kabeh wadon diangkut menyang lingkungan novel (ie, aquarium kaca 10 galon ing kamar ora pati ngerti) 4 hr sawise administrasi progesteron. Wadon iki diselehake ing akuarium kaca 10 galon kanggo 10 min, sawise wektu setengah saka wadon wadon sing laku seksual lan seksual sing diterbitake diterbitaked-pthetamine sulfate (1 mg saben 1 kg bobot awak ing 1.0 ml saka 0.9% NaCl; hadiah saka Dr. David Nichols, Purdue University). Sing wadon isih disuntik karo 0.9% NaCl (1 mg saben bobot awak kg 1). Wadon kasebut banjur dilebokake maneh menyang akuarium 10 gallon kanggo tambahan 60 min. Sesi min 70 direkam kanggo analisis aktivitas umum lokomotore wadon. Wonten ing 30 min saksampune tes aktivitas umum, betina sami-sami perfuse, lan otakipun dipun proses kangge ekspresi c-Fos.
Analisis videotape. Sajrone minggu 7, acara min 70 nguji aktivitas lokomotif padha rekaman. Aquaum kaca 10 dipérang dadi telung wilayah witjaksono ing layar video, lan aktivitas lokomotif saka wadon dicathet ing segi jumlah wilayah sing nglewati.
Analisis data. Sajarah seksual sadurungé ora ngetokaké kegiatan lokomotor saka hamster wadon sing disuntik karo uyah; Mulane, wanita eksperimen dibagi dadi telung klompok perawatan kanggo analisis. Klompok pisanan sing wadon sing ditampa ing minggu 6 saka pengalaman seksual lan disuntikake karo amphetamine (pengalaman / amphetamine, n = 8). Kelompok kapindho kasebut kalebu wanita sing diwadhahi amphetamine nanging ora nampa pengalaman seksual (ora pengalaman / amphetamine,n = 8). Klompok pungkasan ngandhut kabeh hamster wadon sing disuntikake karo saline, manawa ana pengalaman seksual sadurungé (saline, n = 15). Aktivitas rata-rata lokomotor saka wadon dibandhingake ing antarane telung klompok perawatan antarane 70 min testing (ing periode 10 min) nggunakake rong faktor ANOVA. Prasaja utama efek ANOVA lan post hoc Tes Newman-Keuls ditindakake ing ngendi cocok.
Jumlah sel-sel sing dianggep kanggo c-Fos ora beda-beda ing antarane wanita sing disuntik karo uyah, ora ngenani pengalaman seksual kepungkur. Mulane, jumlah c-Fos-stained sel saka inti duktus accumbens, dorsal caudate nucleus, lan cingulate cortex dibandhingake antarane telung klompok perawatan kaya ing eksperimen pertama. Tulisan-tandha sel wis dianalisis nggunakake ANOVAs multifaktor. Prasaja utama efek ANOVA lan post hoc Tes Newman-Keuls ditindakake ing ngendi cocok.
RESULTS
Eksperimen 1
Tindakan seksual
Durasi lordosis sajrone tes kanggo laku seksual ing minggu 7 dibandhingake antarane pengalaman / tes lan ora ana pengalaman / kelompok uji. Rata-rata duration lordosis sak test 10 min ana 341 ± 53 detik kanggo pengalaman / test grup lan 478 ± 20 detik kanggo ora pengalaman / grup test. Badhak wadon ing grup pengalaman / tes wis dianggep minangka lordosis kanggo wektu sing luwih suwe ketimbang saka wong wadon ing kelompok pengalaman / tes (t 6 = 5.131; p = 0.05). Salajengipun, pengalaman seksual boten mangaruhi durasi lordosis. Analisis nuduhake yen ora ana perbedaan sing signifikan antarane durasi rata-rata kanggo minggu 1 (399 ± 44 detik) lan minggu 7 (341 ± 53 detik) kanggo wanita ing kelompok pengalaman / tes.
c-Fos expression in accumbens nucleus
ANOVA telung cara kaping perawatan kaping rostral-caudal cangkang-inti ora nemu efek utama sing signifikan ing perawatan lan ora ana interaksi telung cara antarane perawatan, level accumbens, lan cangkang-inti (Fig. 2); Nanging, loro interaksi loro-lorone sing penting (wektu perawatan cangkang-inti lan wektu perawatan tingkat rostral-caudal) dideteksi.
c-Fos expression ing cangkang lan inti saka accumbens inti ing tingkat rostral, tengah, lan caudal kanggo saben kelompok perawatan. ANOVA telung cara (kaping pamangan rostral-caudal tingkat inti cangkang) digunakake kanggo nliti efek pengalaman seksual lan prilaku ing tegese ± SEM nomer sel c-Fos. Ora ana efek utama perawatan lan ora ana interaksi telung cara ing antarane perawatan, level accumbens, lan inti cangkang.
Panularan kali perawatan interaksi cangkang inti ngungkapake efek utama sing signifikan saka klompok perawatan mung ing inti saka accumbens nukleus (Gbr. 3). Rata-rata banding kasebut nuduhake yen wong wadon sing dites kanggo perilaku seksual sajrone minggu 7 (pengalaman / test lan ora ana pengalaman / test) wis luwih akeh c-Fos-stained sel ing inti saka accumbens nukleus tinimbang sing wadon sing ora dites (ora test) (Newman-Keuls, p <0.01). Ora ana efek pengujian sing diamati ing cangkang inti accumbens. Kajaba iku, ora ana efek eksplisit pengalaman seksual ing jumlah sel sing nyebutake C-Fos ing cangkang utawa inti saka accumbens.
C-Fos expression ing cangkang lan inti saka accumbens inti, ambruk tengen tingkat rostral-caudal. ANOVA telung cara ngungkapake interaksi loro-lorone antarane perawatan lan tegese ± SEM nomer sel c-Fos ing cangkang lan inti saka accumbens nukleus (kali perawatan cangkang-inti;F (2,24) = 4.243; p<0.026). ANOVA siji arah sing mriksa interaksi iki nemokake efek utama sing signifikan saka klompok perawatan mung ing inti inti accumbens (F (2,24) = 7.341; p<0.003) lan ora ana ing cangkang accumbens (F (2,24) = 1.271; p> 0.1). Surat sing beda-beda nuduhake manawa beda antarane kelompok.
Peracunan kaping perawatan interaksi tingkat rostral-caudal nemokake efek utama sing signifikan saka klompok perawatan ing loro tingkat rostral lan caudal nanging ora ing tingkat tengah accumbens nukleus (Gagrag. 4). Newman-Keuls post hoc tes nuduhake yen wadon sing wis nampa 6 minggu pengalaman seksual lan dites kanggo perilaku seksual (pengalaman / test) wis luwih c-Fos-positif sel ing inti rostral accumbens saka wadon sing diuji nanging sing ora nampa pengalaman seksual sadurungé (ora pengalaman / test; p <0.05) lan wanita sing ora dites kanggo tumindak seksual (ora ana tes;p <0.01). Ing post hoc tes ngasilake asil sing padha kanggo accucens inti caudal. Wanita ing kelompok pengalaman / tes duwe jumlah sel sing luwih dhuwur sing ngandhut c-Fos ing inti sèl caesar tinimbang wadon ora nduweni pengalaman / grup tesp <0.05) lan ora ana klompok tes (p <0.01). Mula, tes tumindak seksual sajrone minggu 7 nambah jumlah sel bernoda c-Fos ing inti rostral lan caudal accumbens mung kanggo para wanita sing wis nampa 6 minggu pengalaman.
c-Fos ekspresi liwat ukuran rostral-caudal saka accumbens inti, ambruk tengen inti lan cangkang. Senajan ANOVA telung cara nuduhake yen interaksi loro-lorone antarane klompok perawatan lan tegese ± SEM nomer c-Fos sel liwat tingkat rostral-caudal saka accumbens nukleus mung nyedhaki tegese (F (4,48) = 2.365; p <0.066), kita ngetrapake saben level inti accumbens kanthi kapisah kanggo efek perawatan ing pewarnaan c-Fos. ANOVA siji arah mbukak efek utama sing signifikan saka klompok perawatan ing tingkat rostral (F (2,48) = 5.230; p<0.009) lan level caudal (F (2,48) = 7.455; p <0.002) nanging ora ing level tengah (F (2,48) = 1.744; p> 0.1) inti accumbens. Surat sing beda-bedanuduhake manawa beda antarane kelompok.
c-Fos expression ing inti caudate lan cingulate cortex
Jumlah sèl saka nukleus dorsal uga dianalisis nganggo ANOVA telung cara. Analisis kasebut mung nuduhake interaksi antarané perawatan lan ekspresi c-Fos ing inti tengah lan lateral caudate (F (2,24) = 3.514;p <0.046). Nanging, analisis kapisah inti inti caudate medial lan ANOVA siji arah ora ana bedane jumlah sel bernoda c-Fos ing antarane pengalaman / tes, ora ana pengalaman / tes, lan ora ana kelompok uji (Tabel2). Kajaba iku, ora ana efek utama pengalaman utawa prilaku seksual babagan jumlah sel sing ngandhut c-Fos, utawa interaksi, ditemokake ing cortex cingulate (data ora ditampilake).
Tegese ± jumlah SEM saka sel c-Fos-imunoreaktif ing inti tengah lan lateral caudate nukleus
Eksperimen 2
Kegiatan Locomotor
ANOVA (kaping pamriksan nalika periode pengobatan), mbandingaken kegiatan rata-rata saka wanita ing pengalaman / amphetamine, ora ana pengalaman / amphetamine, lan kelompok perawatan saline ing sakteruse tes 70 ngungkapake interaksi antarane klompok perawatan lan periode uji coba. Kanggo nliti interaksi kasebut, kelompok perawatan individu wis disebarake kanthi ANOVA siji-cara. Analisis kasebut nuduhake owah-owahan sing signifikan ing aktivitas umum sakwene nalika tes 70 kanggo rong kelompok wanita sing disuntikake karo amphetamine (pengalaman / amphetamine lan ora pengalaman / amphetamine). Nanging, aktivitas umum wadon sing ditampa uyah ora owah sacara signifikan ing menit 70 (Gagrag.5). Newman-Keuls post hoctes banjur digunakake kanggo nemtokake wektu uji 10 min beda. Saben macem-macem panandhesan nyatakake yen kegiatan umum saka wanita sing laku seksual sing diwenehi amphetamine sacara signifikan tambah 10 min sawise injeksip <0.05). Kajaba iku, dibandhingake karo 10 menit sadurunge injeksi, wanita ing klompok perawatan pengalaman / amfetamin tetep luwih aktif 20 menit (p <0.05) lan 30 menit (p<0.05) sawise injeksi. Bentenipun, efek amfetamin ing wanita naif seksual ora bisa ditemokake nganti 20 menit sawise injeksi. Ing wektu iki, wanita iki luwih aktif dibandhingake karo 10 menit sadurunge injeksi (p <0.05). Kajaba iku, kegiatan para wanita naif seksual sing diwenehi amfetamin tetep saya mundhak nganti 30 menit (p <0.05) lan 40 menit (p<0.01) sawise injeksi.
Efek amphetamine ing kegiatan umum hamsters wadon sing laku seksual lan seksual naif. ANOVA loro-lorone (wektu uji coba wektu perawatan) ngungkapake interaksi antarane klompok perawatan lan periode pangujian (F (12,150) = 2.288;p <0.011) kanggo rata-rata kegiatan ± SEM. ANOVA siji arah sing nyoba kelompok perawatan individu nuduhake pangowahan sing signifikan kanggo aktivitas umum kanggo wanita ing pengalaman / amphetamine (F (6,150) = 3.0468; p <0.008) lan ora ana pengalaman / amfetamin (F (6,150) = 3.893;p <0.001) klompok perawatan. Aktivitas wanita sing disuntik karo uyah ora owah (F (6,150) = 1.619;p <0.1). Posting hoc tes nuduhake yen wanita sing laku seksual nanggapi luwih cepet marang amphetamine, nuduhake yen aktivitas ing 10 min sawise injeksi. Wong wadon sing ora aktif sacara seksual ora nanggepi amphetamine nganti 20 min sawise injeksi. *p <0.05 lawan wektu sadurunge dites.
c-Fos expression
Ana telung cara ANOVA (kaping pamungkas tingkat rostral-caudal cangkang-inti) digunakake kanggo nliti efek pengalaman seksual lan amphetamine ing c-Fos expression ing accumbens nukleus. Ora ana efek utama perawatan lan ora ana interaksi telung cara ing antarane perawatan, level accumbens, lan inti cangkang. Salajengipun, analisis ora nuduhake interaksi antarane grup perlakuan lan ekspresi c-Fos ing cangkang lan inti saka accumbens utawa ing antarane klompok perawatan lan labeling c-Fos ing tingkat rostral, tengah, lan caudal saka accumbens nukleus ( data ora ditampilake).
Jumlah sèl saka nukleus dorsal uga dianalisis nganggo ANOVA telung cara. Analisis awal ngandharake ora ana efek signifikan saka pengalaman seksual sadurunge utawa amphetamine ing nomer sel-sel positif Fos. Kajaba iku, ora ana pangaruh saka pengalaman seksual sadurunge utawa amphetamine babagan jumlah sel sing ngandhut c-Fos ditemokake ing cortex cingulate nggunakake ANOVA loro-lorone (data ora ditampilake).
DISCUSSION
Tujuan investigasi iki ana loro. Kita pisanan nliti pengaruh pengalaman seksual ing aktivitas selular ing subregions beda saka accumbens inti. Masalah sing kapindho, manawa pengalaman seksual sadurungé bisa ngrasakake jalur dopamin mesolimbi, diselidiki kanthi mbandhingake respon perilaku kéwan seksual lan naif ing sawijining injeksi amphetamine. Temuan kita ora mung nuduhake yen perilaku seksual wanita bisa ngaktifake neuron ing accumbens nukleus nanging uga pengalaman seksual bisa nyuda sensitivitas neuronal tumrap amphetamine.
Efek tingkah laku seksual ing c-Fos expression ing cangkang lan inti saka accumbens nukleus
Pengujian perilaku seksual ningkatake c-Fos expression ing inti, nanging ora cangkang, saka accumbens nukleus, ndhukung riset sadurungé nunjukake yen nemu seksual siji bisa ngaktifake neuron ing inti sèl accumbens ing rodents wadon (Meisel et al., 1993; Joppa et al., 1995; Mermelstein lan Becker, 1995; Pfaus et al., 1995; Kohlert et al., 1997; Kohlert lan Meisel, 1999). Sastra kang ngrampungake dikotomi fungsional saka accumbens nukleus kasusun saka pirang-pirang lapuran saka owah-owahan diferensial ing transmisi dopamin ing cangkang lan inti saka accumbens nukleus kanggo nanggepi rangsangan farmakologi lan fisiologis. Pangopènan sawetara obat penyalahgunaan ngasilake mundhak selektif ing tingkat dopamin ekstrasel ing cangkang nukleus accumbens (Pontieri et al., 1995; Nisell et al., 1997; Pierce lan Kalivas, 1997a; Tanda et al., 1997; Tanda lan Di Chiara, 1998; Barrot et al., 1999; Cadoni lan Di Chiara, 1999). Kanthi cara sing padha, panganan apik banget (Tanda lan Di Chiara, 1998; Di Chiara et al., 1999a; Kelley, 1999), stres entheng (contone, kejut kaki) (Kalivas lan Duffy, 1995; Tidey lan Miczek, 1997; Bruijnzeel et al., 1999; Wu et al., 1999), lan lingkungan anyar (Rebec et al., 1997;Rebec, 1998) uga sacara selektif ningkatake transmisi dopamin ing kulit saka accumbens nukleus.
Temuan kita konsisten karo hipotesis yen cangkang lan inti sacara fungsional beda, sanajan kita nemokake inti, lan ora cangkang, dadi responsif marang tindak tanduk seksual. Nanging, mungkin ana owah-owahan ing immunoreactivity c-Fos ing cangkang saka accumbens nukleus, nanging owah-owahan kasebut ora dideteksi. Cangkang iki diorganisir sacara kompleks dadi sub-wilayah sing beda-beda, cangkang medial, ventral, lan lateral, kanthi bagian cedhak lan dorsal saka cangkang medial bisa dadi rong subspesif sing luwih béda (Groenewegen et al., 1999). Subkategori saka cangkang, uga bagian tengah lan lateral inti, nampa kombinasi sing beda saka input saka wilayah kortikal lan subkortis (Groenewegen et al., 1999). Salajengipun, dumunung ing subkategori punika minangka ensembles neuron ingkang béda sacara fungsional ingkang dipunorganisasi dados kompartemen anatomi ingkang bentenGroenewegen et al., 1999). Amarga efek saka perilaku seksual ing ekspresi c-Fos ing panliten iki mung ditemokake ing cangkang dorsomedial, mungkin jumlah sel c-Fos positif diganti ing subregion sing beda.
Senadyan pengamatan sing akeh fungsi akrab nukleus sing dilokalisasi ing wilayah cangkang, saengga bisa nggawe hipotesis yen sirkuit saraf beda ing njero nukleus ngasilake sifat-sifat penguat saka perilaku sing beda-beda. Carelli et al. (2000)wis kacathet bubar sing ngakoni nukleus neuron ing njerone ngetokake aktivitas neuronal sing padha nalika operator ngrespon marang loro penguat alam (yaiku pangan lan banyu) nanging pola tembakan sing beda sajrone nanggapi reaktor alami kumpara kokain. Wong-wong wis nyimpulaké yèn sirkuit saraf ing sirkulasi sing béda ing prosès nukleus ngolah informasi babagan panganan lan tetanèn liyané saka ganjaran kokain (Carelli et al., 2000).
Efek pengalaman seksual ing ekspresi c-Fos liwat sumbu rostral-caudal saka accumbens nukleus
Literatur nyinaoni organisasi subnuklear liwat inti-caudal accumbens yaiku cilik; Nanging, beda beda fungsional lan anatomi wis diamati. Temuan kasebut konsisten karo studi sing nyatakake angger-angger diferensial neurokimia lan tanggapan motor antarane sumbu rostral-caudal saka accumbens. Cholecystokinin (CCK) béda modulates efek dopamin-induced ing accucens nukleus lan caudal accumbens (Crawley et al., 1985a,b), ngedhunake hiperlocomotion sing diakibatake dening dopamine nalika ditrapake menyang accumbens caudal, sawijining wilayah sing ditambani dening neuron CCK colokalisasi karo dopamin (Crawley et al., 1985a,b; Lanca et al., 1998). Nanging, CCK ora aktif sacara aktif nalika disuntikake menyang inti nukleus accumbens, sawijining wilayah sing nampi proyeksi CCK lan dopaminCrawley et al., 1985a,b; Lanca et al., 1998). Sampeyan uga wis kacarita yen infus langsung amphetamine menyang cangkang rostral, cangkang caudal, utawa inti sing beda ndadekake aktivitas perilaku lan dopamin ekstraselular lan tingkat serotonin (Heidbreder lan Feldon, 1998). Regulasi opioid peptida, inti P, dopamin reseptor D1 (Voorn and Docter, 1992; Jongen-Watch et al., 1994b; Voorn et al., 1994), lan acetylcholine release (Jongen-Watch et al., 1995) dening agonis reseptor dopamin lan dopamin uga bedha antarane bagean rostral lan caudal saka accumbens, kanthi akusatif rustral sing luwih sensitif marang penipisan lan administrasi dopamin. Sanajan beda fungsional kasebut antara akrhasi rostral lan caudal wis kacarita, yèn beda fungsi fungsional iki isih durung dimangertèni.
Efek pengalaman seksual ing kegiatan lokomotif amethetamine-induced
Asile dilapurake ing kene lan ing sadurungé nyinaoni yen pengalaman seksual sadurungé nandhang respon neuronal tumrap tingkah laku seksual, sing nuduhaké ningkatake dopamin rilis (Kohlert lan Meisel, 1999) lan aktivitas selular ing accumbens nukleus (sinau iki). Nanging, salah sijine keprigelane menawa wanita wadon sing pengalaman ing studi sadurunge bisa nanggapi pengujian perilaku seksual lan isyarat lingkungan amarga pengalaman lan tes seksual ditindakake ing kamar sing padha. Lingkungan sing ana hubungane karo perilaku sing motivasi bisa entuk sifat insentif lan nambah tingkat dopamin ing inti accumbens (Reid et al., 1996, 1998; Watson and Little, 1999). Keprigelan sing kapindho yaiku amarga ngukur prilaku seksual lanang ora dicathet, ora dingerteni yen kelompok loro wadon sing dites kanggo perilaku seksual nampa stimulasi vaginoservasi sing bisa ditandingi. Wis dilapurake yen rangsangan vaginoservatif perlu kanggo dopamin release ing inti accumbens nalika kawin (Kohlert et al., 1997). Mbokmenawa wanita sing laku seksual nampa stimulasi vaginoservis luwih (ora diukur ing penelitian iki), saéngga nambah induksi c-Fos. Mulane, kanggo ngetestake sing laku seksual wanita sensitizes path dopamin mesolimbic, kita nyinaoni apa wadon seksual lan wadon naif respon beda menyang injeksi amphetamine, liyane rangsangan dikenal kanggo mediasi efek liwat jalur dopamin. Salajengipun, kangge mangertosi bilih respon sensitized ingkang dipuntindakaken inggih punika amarga tindak tanduk seksual lan sanesipun saking asosiasi lingkungan kanthi seksual, respon perilaku hamster amphetamine dipun uji ing lingkungan novel.
Amphetamine tambah aktivitas umum ing kabeh hamster wadon. Nanging, wanita sing laku seksual nanggapi kanthi cepet ing amphetamine tinimbang wanita wadon sing ora sacara seksual. Hasil kasebut ngetrapaké hipotesis sing ngalami perilaku seksual bisa nandhang sensitivitas neuron ing jalur dopamin mesolimbi lan nerangake yen owah-owahan ing pathway ngasilake respon perilaku sing sensitized marang prilaku motivasi alami lan stimulan psikomotor (cross-sensitization).
Panemon iki konsisten karo hipotesis sing ana mekanisme saraf konvergensi mediating respon narkoba lan prilaku seksual (Robinson lan Berridge, 1993; Pierce lan Kalivas, 1997b). Sawetara studi anyar wis ngetutake cross-sensitization antarane paparan tamba berulang lan prilaku motivasi alami. Tekanan sosial bisa ngurangi wektu koalisi kokain kanggo tikus (Tidey lan Miczek, 1997). Lingkungan diparake kanthi injeksi morfin sing berulang bisa ndadekake prilaku seksual ing tikus lanang (Mitchell lan Stewart, 1990a,b). Pretreatment saka amphetamine uga ndadekake prilaku seksual ing tikus lanang sing naif sacara seksual lan gegayutan karo release dopamine ditambahi ing accumbens nukleus (Fiorino lan Phillips, 1999).
c-Fos ekspresi dianalisis ing accumbens nukleus sawise perawatan amphetamine. Iki minangka hipotesis sing amphetamine bakal ningkatake ekspresi c-Fos ing accumbens nukleus, lan luwih gedhe ing wanita sing laku seksual. Nanging, ora ana efek amphetamine ing jumlah sel sing ngandhut c-Fos ditemokake ing salah sijine subregions saka accumbens nukleus. Punika bukti saka Tabel3 yen kéwan kontrol jroning ékspérimén 2 (wadon saline) duwé sel sing luwih dhuwur c-Fos-positif dibandhingaké karo kéwan kontrol jroning percobaan 1 (ora ana wanita uji). Badiani et al. (1998) kacarita sing anyar tambah c-fos isi mRNA ing accumbens inti, lan efek saka anyar ingc-fos Isi banget ing sawetara wilayah otak sing administrasi amphetamine ing lingkungan novel durung ngasilake tambahan tambahan. Mangkono uga, menawa kita sinau, stres bisa diangkut menyang lingkungan novel saka sintesis sing diaktivasi dening sintesis protèin c-Fos, kanthi mangkono masking owah-owahan ing ekspresi c-Fos sing diakibatake minangka amphetamine lan pengalaman seksual.
Tegese ± jumlah basal SEM ing sel c-Fos-immunoreaktif ing inti lan inti inti kanggo ngontrol kéwan ing percobaan 1 lan 2
Potensi pinunjul
Eksperimen iki gabung karo daftar studi sing akeh (Mitchell lan Stewart, 1990b; Fiorino lan Phillips, 1999; Miczek et al., 1999) nuduhake yen pengalaman kewan bisa nandhakake sensitivitas jalur dopamin mesolimbi kanggo tindak tanduk sing dadi bagéan saka repertoire alam saka kewan lan obat-obatan tartamtu sing disumurake dening manungsa (Wise and Bozarth, 1987). Masalah utama ing riset babagan penyalahgunaan narkoba yaiku kerentanan individu kanggo efek obatan (Newcomb, 1992; Robinson lan Berridge, 1993), lan sacara kolektif panliten kasebut bisa menehi pemahaman tumrap pangembangan kecanduan ing wong.
Cathetan sikil
- Ditampa Juni 8, 2000.
- Revisi ditampa Desember 12, 2000.
- Ditampa Desember 20, 2000.
Panaliten iki didhukung dening National Science Foundation Grant IBN-9723876. Matur nuwun Kanthi Melissa Zila, Shannon McCanna, Marchelle Baker, Michael Huntington, lan Deborah Shelley kangge pitulungan pakar kaliyan pamrih tingkah laku lan pangolahan c-Fos.
Korespondensi kasebut kudu ditujokake marang Dr. Robert L. Meisel, Departemen Ilmu Psikologi, Universitas Purdue, West Lafayette, IN 47907-1364. E-mail: [email dilindhungi].
- Hak cipta © 2001 Society for Neuroscience
;