KOMENTAR: Senadyan loro stres, obat-obatan penyalahgunaan lan bebungah alam tartamtu nyebabake akumulasi DeltaFosB, stres ngaktibake sel-sel horisontal beda lan reseptor lan gen sing beda-beda. Ing tembung liyané, adhiksi lan perlawanan kanggo kaku gumantung ing mekanisme dhasar sing beda-beda
J Neurosci. 2010 Oct 27; 30 (43): 14585-92.
Vialou V, Maze I, Renthal W, LaPlant QC, Watts EL, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Nestler EJ.
sumber
Departemen Neuroscience Fishberg, Sekolah Kedokteran Gunung Sinai, New York, New York 10029, Amerika Serikat.
Abstract
Mekanisme molekul sing ndasari stres- lan adaptasi neuronal sing dipigunakaké ing obat-obatan ora dimengerteni. Salah siji molekul sing disebabake ing adaptasi kuwi yaiku ΔFosB, faktor transkripsi sing dumadi ing aksis nukleus accumbens (NAc), minangka ganjaran uteg otak utamane, kanggo nanggepi stres kronis utawa ekspose berulang menyang obat-obatan penyalahgunaan. Tmekanisme transcriptional wiwitan ngontrol induksi ΔFosB dening rangsangan lingkungan tetep angel dipahami. Kene, kita nemtokake faktor transkripsi sing gumantung saka kegiatan, faktor serum tanggapan (SRF), minangka mediator hulu penekan stres, nanging ora cocaine-, mlebu ΔFosB. SRF dipérang dadi kendharaan ing NAC saka pasien-pasien manungsa sing nandhang lara lan ing tikus sacara kronis kapapar ing tekanan sosial. Downregulation SRF iki ora ana ing kéwan sing kuwat. Kanthi nggunakake mutagenesis induktif, kita nuduhake yen induksi ΔFosB, sing dumadi ing tikus resiken, gumantung marang ekspresi SRF ing wilayah otak. Salajengipun, pambusakan genetika NAC spesifik SRF nyurung macem-macem prodepressant- lan phenotype-kaya proanxiety lan nyipta kéwan sing luwih sensitif marang efek sing nyuda stres kronis. Contone, kita nduduhake yen SRF ora duwe peran ing akumulasi ΔFosB ing NAc minangka respon marang ekspansi kokain kronis. Salajengipun, knock-out SRF ora duwe efek ing cocaine-induced behaviors, nuduhake yen kronis asor sosial kronis lan ekspansi kokain bola ngatur akumulasi FosB lan sensitivitas prilaku liwat mekanisme independen.
Pambuka
Nukleus accumbens (NAc), utamane ganjaran otak utamane, penting kanggo nggabungake input sensori lan kognitif sing nuntun tindak tanduk motivasi kanggo nanggepi rangsangan lingkungan (Nestler lan Carlezon, 2006, Sesack lan Grace, 2010). NAc uga wis disebabake ing kelainan prilaku sing gegandhèngan karo kecanduan narkoba lan depresi. Dadi, penargetan NAC karo stimulasi otak jero wis dituduhake kanggo ngatasi perilaku depresi lan kecanduan kaya manungsa lan rodents (Schlaepfer et al., 2008; Vassoler et al., 2008; Heinze et al., 2009; Kuhn et al., 2009).
Panyebab sing diulang saka obat-obatan penyalahgunaan utawa kaku nyebabake owah-owahan pola ekspresi gene ing NAc, sing nyedhiyakake babagan kronis kecanduan lan depresi (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007; Maze et al., 2010; Vialou et al ., 2010). Menawa, faktor transkripsi ΔFosB, produk splice saka gen fosB, nyimpulake ing NAc minangka respon narkoba utawa stres berulang (Nestler, 2008, Perrotti et al., 2008, Vialou et al., 2010). ΔFosB wis diusulake minangka switch molekul potensial sing nuntun transisi saka nggunakake obat-obatan rekreasi menyang negara ketagihan kronis (Nestler et al., 1999; McClung et al., 2004; Renthal et al., 2009), minangka akumulasi ing NAc nambah ganjaran kanggo sawetara obatan penyalahgunaan. Saiki, peranan indeks ΔFosB ing NAc nyatakake stres asor sosial kronis (Nikulina et al., 2008; Vialou et al., 2010) wis diucapake: ΔFosB nyengkuyung respon tanggapan aktif kanggo rangsangan stres lan ningkatake ketahanan. Senajan induksi ΔFosB dumadi ing proses gumantung rangsangan, mekanisme sing tanggung jawab kanggo akumulasi ΔFosB ing narkotika lan nimbulake NAc tetep ora dingerteni.
Faktor respon serum (SRF) minangka faktor transkripsi sing dibutuhake kanggo aktivasi transkripsi sing gumantung karo aktivitas sawetara gen awal, kalebu c-fos, fosb, Egr1, lan Arc (Knöll and Nordheim, 2009). Panaliten pungkasan nuduhake efek SRF ing sifat morfologis lan sitokarkitektur neuron, kalebu regulasi aktivitas sinaptik lan pembentukan sirkuit ing otak wong diwasa (Knöll lan Nordheim, 2009). Temuan kasebut nyebabake kita neliti manawa SRF diatur kanthi efektif dening paparan narkoba penyalahgunaan utawa stres, uga pengaruh potensial saka regulasi kasebut ing induksi ΔFosB ing kahanan kasebut.
Ing kene, kita njlentrehake mekanisme anyar ing endi downregulasi SRF ing NAc ningkatake fenotipe prodepresan lan trigemogenik, pungkasane nambah kerentanan kewan kanggo efek stres kronis sing mbebayani.. Efek kasebut dimediasi, sebagian, amarga ilang induksi ΔFosB ing NAc kewan sing stres. Nyuda penurunan ekspresi SRF lan ΔFosB ing jaringan NAc postmortem sing dipikolehi saka pasien depresi ndhukung relevan karo temuan kita karo depresi manungsa. Apike, mekanisme iki kanggo ngontrol akumulasi ΔFosB katon khusus stres: eksposur kokain kronis ora ana pengaruh ekspresi SRF, pambusakan SRF saka NAc ora ana pengaruhe ing akumulasi ΔFosB sawise paparan kokain kronis, lan pambusakan SRF kasebut ora ana pengaruh ing kokain- tindak tanduk sing diinduksi. Interaksi novel iki antara SRF lan ΔFosB, ing konteks stres, bisa uga nuduhake mekanisme homeostatic penting sing ngatur sensitivitas individu tumrap stres kronis.
Bahan lan Metode
Animals
Wong lanang tikus C57BL / 6J wolung minggu (Jackson Laboratory) digunakake ing kabeh percobaan prilaku lan biokimia. Kabeh kewan diwenehake marang fasilitas kewan ing paling sethithik 1 minggu sadurunge manipulasi eksperimen lan dikelola ing 23-25 ° C ing siklus 12 / cahya gelap (lampu saka 7: 00 AM kanggo 7: 00 PM) karo iklan libitum akses menyang pangan lan banyu. Eksperimen diklumpukake miturut pedoman Society Neuroscience lan panitia lan panitia pemanfaatan kewan institusional ing Sekolah Kedokteran Gunung Sinai.
Kanggo eksperimen kokain [Kembang kapitalisasi lan imunopastipitalitas kromatin kuantitatif (Chip)], 8- kanggo tikus C10BL / 57 jantan 6 sing digunakake. Kéwan ditampa pitung injeksi intraperitoneal saben saline utawa kokain (20 mg / kg kokain-HCl; Sigma). Tikus dipigunakaké 24 h sawise perawatan pungkasan. Kanggo eksperimen perilaku, tikus padha ditempelake ing posthumously lan diobati kanthi 10 mg / kg (sensitisasi lokomotor) utawa 7.5 mg / kg (preferensi panggonan kahanan) cocaine-HCl intraperitoneally, kaya sing dijelasake ing ngisor iki.
Kripik / flik dicipta kaya sing diterangake sadurunge (Ramanan et al., 2005). Senyawa khas NAc wis ditindakake liwat injeksi stereotoksik lan overexpression virus sakteruse Cre recombinase (Cre) sing dadi protein neon neuron (GFP) nggunakake vektor virus sing ana hubungane (AAV). A Cre-mbusak dhewe digunakake. AAV-GFP disuntikake ing panggonan AAV-Cre-GFP ing tikus Srffl / fl minangka kontrol. Kanthi sedhela, tikus uga ana anesthetized kanthi nggunakake campuran ketamine (10 mg / kg) lan xylazine (10 mg / kg), kanthi koordinat stereotaxic ing ngisor iki kanggo pangiriman virus: + 1.6 (anterior / posterior), + 1.5 (lateral) 4.4 (dorsal / ventral) ing sudut 10 ° saka garis tengah (relatif marang bregma). Total 0.5 μl saka virus sing dimurnèkaké dikirim sacara bilali liwat periode min 5 (0.1 μl / min), diiringi 5 min liyane. Mangan dites nalika 2 minggu sawise operasi, nalika ekspresi virus maksimal, lan situs injeksi virus dikonfirmasi kanggo kabeh kewan nggunakake metode histologis standar. Efisiensi ekspresi Cre-mediated dipesthekake dening imunohistokimia lan reverse-transcriptase PCR kanggo Srf ditindakake ing pucuk NAOS microdisected saka kewan sing diwenehi AAV-Cre-GFP lan AAV-GFP menyang NAc. Virus AAV-GFP lan AAV-Cre-GFP digawe minangka sadurunge diterangake (Maze et al, 2010).
Prosedur tindak tanduk
Tekanan sosial kalah.
Tikus C57BL / 6J ditindakake kanggo kahanan sosial sing kronis kanggo 10 saben dina kaya sing kasebut ing ndhuwur (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010). Sakbanjure, saben mouse ana ing kahanan sing ora pati ngerti lan agresif CD1 sing pensiun kanggo 5 min saben dina. Sawisé interaksi langsung karo agresor CD1, kéwan banjur dilebokaké ing kompartemen jejer saka kandhang sing padha kanggo 24 h sabanjuré kanthi kontak sensori nanging ora fisik. Kéwan kontrol ditahan ing kandang sing padha nanging karo anggota galur sing padha. Tes interaksi sosial dianakake 24 h sawise dina akhir kekalahan.
Nyingkiri sosial tikus lanang CD1 sing ora pati ngerti ditaksir miturut protokol sing diterbitake (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010). Tikus eksperimen pisanan diwiwiti ing lapangan mbukak sing ngemot kandhang bolong kawat kosong 2.5 menit. Sajrone sesi kaping pindho, tikus lanang CD1 sing ora pati ngerti dilebokake ing kandhang kabel. Wektu sing ditindakake ing zona interaksi (koridor ambane 8 cm ngubengi kandhang) diukur. Pemisahan tikus sing dikalahake dadi subpopulasi sing rentan lan tahan banter ditindakake kaya sing wis diandharake sadurunge (Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010). Amarga mayoritas tikus kontrol nggunakake luwih akeh wektu kanggo sesambungan karo target sosial tinimbang karo kandhungan target kosong, rasio interaksi 100 (wektu sing padha ngenteni ing zona interaksi yen ora ana target sosial) dadi potongan. Tikus kanthi skor <100 ditandhani minangka rentan, lan sing duwe skor ≥100 ditandhani minangka tahan banter. Analisis prilaku, biokimia, lan elektrofisiologis ekstensif ndhukung validitas subpopulasi rentan lan tangguh sing beda (Krishnan et al., 2007; Wilkinson et al., 2009; Vialou et al., 2010).
Kanggo nliti kerentanan tikus Srffl / fl, kanggo tikus sosial, tikus, nyuntikake bilali karo AAV-GFP utawa AAV-Cre-GFP, padha tundhuk marang telung kalungguhan sing dikalahake ing dina sing padha lan banjur nyoba kanggo interaksi sosial 24 h mengko. Prosedur kekalahan submaximal iki wis divalidasi sadurunge kanggo ngumumake phenotypus keluhan manawa manipulasi genetika (Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010).
Sinau kawruh.
Mekanisme overexpressing AAV-GFP utawa AAV-Cre-GFP diduweni prosedur praktek helplessness kaya sing diterangake sadurunge (Berton et al., 2007). Secara singkat, tikus-tikus kasebut terkena intermiten, kejutan sikil sing ora bisa dilelepake kanggo 1 h liwat konsinyasi 2 dina (0.45 mA, durasi 5 s). Ing dina test, tikus diciptakake ulang menyang kothak kanggo 15 percobaan nguripake sacara berturut-turut. Sajrone saben uji coba, kejut sing dikirim terus lan tikus diwenehi kesempatan kanggo mlayu kanthi nglebokake kamar ing jejer, nonelectrified. Sawise nylametake kanthi sukses, lawang kasebut ditutup kanthi otomatis lan latensi uwal dicathet. Nalika tikus ora lolos ing 25, pangadilan kasebut diakhiri lan dicathet minangka gagal. Pasinaon sadurunge wis ditampilake yen ekspresi virus ing NAc lan wilayah liyane ora nduweni pengaruh ing prilaku ngilangi baseline tanpa anané stres (Newton et al., 2002, Berton et al., 2007).
Sensitivitas lokomotif.
Rong minggu sawise injeksi intra-NAc salah sawijining tikus AAV-GFP utawa AAV-Cre-GFP, clurut Srffl / fl kena sensitivitas lokomotor. Tikus dipasrahake menyang arena lokomotor udakara 30 menit saben dina suwene 4 d. Sawise biasa, kewan disuntik kanthi intraperitone kanthi 10 mg / kg kokain-HCl lan dilebokake ing kothak lokomotor. Kegiatan lokomotor kewan kasebut direkam nggunakake sistem photobeam (San Diego Instruments) amarga balok ambulat suwene 30 menit saben dinane. Sensitivitas lokomotor kacathet sajrone 6 d.
Preferensi panggonan sing kondhang.
Prosedur kahanan kahanan ditindakake kaya sing wis diandharake sadurunge (Maze et al., 2010), kanthi modifikasi kaya ing ngisor iki. Sedhela, 18 d sawise infus intra-NAc saka AAV-GFP utawa AAV-Cre-GFP ing tikus Srffl / fl, kewan dilebokake ing kamar kahanan, sing kalebu telung lingkungan sing beda kontekstual. Tikus sing nampilake pilihan sing signifikan kanggo salah sawijining rong kamar kahanan ora dikatutake ing panliten (<10% kabeh kewan). Klompok kondisioner luwih seimbang kanggo nyetel bias kamar sing isih ana. Ing dina sabanjure, kewan disuntik karo uyah lan diwatesi ing sawijining ruangan ing wayah awan suwene 30 menit banjur disuntik karo kokain (7.5 mg / kg, ip) lan diwatesi nganti 30 menit ing kamar liyane ing dina sabanjure, padha karo total rong puteran latihan asosiasi saben perawatan (rong garam lan pasangan pasangan kokain). Ing dina tes, tikus dilebokake maneh ing aparat tanpa perawatan sajrone 20 menit lan dites kanggo ngevaluasi preferensi sisih. Tanggepan lokomotor kanggo kokain ditaksir liwat balok balok ing kamar sing dipasangake kokain kanggo njamin efektifitas perawatan obat. Kanggo kabeh klompok, lokomosi awal minangka reaksi saline ditaksir kanggo mesthekake yen lokomosi ora kena pengaruh perawatan virus.
Tes tes liyane.
Mouse Srffl / fl dites test-open, lapangan cahya / peteng, lan dipeksa kanthi nggunakake protokol sing diterbitake (Vialou et al., 2010). Aktivitas tikus ing lapangan-lapangan kacathet kanggo 5 min nggunakake sistem pelacakan video (Ethovision) ing kondisi abang-lampu. Kanggo tes cahya / peteng, tikus diijini bebas njlajah kotak loro-kamar sing kasusun saka siji arena sing padhang sing gedhe sing disambungake menyang arena tertutup sing luwih cilik. Mangan dites kanggo periode 5 min kanggo ngetesake jumlah wektu sing ditindakake ing salah siji pager. Ing lapangan lapangan lan cahya / peteng tes, wektu ngginakaken ing tengah lan cahya arena, mungguh, wis dievaluasi minangka indeks inverse saka respon related kanthi kuatir. A 1 d dipeksa-nglangi tes wis conducted kanggo periode 5 min. Tambah wektu imobilitas sajrone tes nglangi bisa diinterpretasi minangka tingkah laku prodepresser. Test XnUMX d dipeksa nglangi wis digunakake sacara ekstensif ing tikus lan wis disahkeun minangka ukuran validitas prediksi, ing terapi antidepresan sing nyuda wektu immobility.
Immunohistochemistry
Kethokan Srffl / fl / anesthetized lan perfused karo 4% paraformaldehyde / PBS. Pemikiran wis dibusak lan diprotonasi ing 30 sukrosa / PBS. Coronal sections (30 μm) dipotong ing microtome pembekuan lan diproses kanggo analisis imunohistokimia. Validation of Srffl / knock-out was performed using antibody polyclonal directed against SRF (1 / 2000; Santa Cruz Biotechnology). Ekspres dikonfirmasi liwat ekspresi GFP (pitik poliklonal, 1 / 8000, Aves Labs) ing otak dissected, amarga Cre digabung karo GFP. Kanggo ngétifikasi indeks ΔFosB sawise kaku asor sosial ing tikus Srffl / fl knock-out, ΔFosB dideteksi nggunakake antibodi poliklonal terwelu sing dibangkitake ing wilayah N-terminal protein (1 / 1000; Santa Cruz Biotechnology). Gambar dijupuk kanthi mikroskop confocal (20 × magnification; Zeiss). Jumlah sel-sel imunopositif GFP sing diitung minangka negatif lan positif kanggo immunoreactivity ΔFosB diukur ing pirang-pirang gambar kanggo saben kewan, kanthi nilai atine kasil diitung kanggo saben kewan. Saben kewan dianggep minangka observasi individu kanggo analisis statistik.
Jaringan posisine manungsa
Jaringan otak postmortem manungsa dipikolehi saka Koleksi Brain Dallas, ing endi jaringan dikumpulake saka Kantor Pemeriksa Medis Dallas lan Program Transplantasi Jaringan Tissue Southwestern sawise idin saka sedulur liya. Tisu dianalisis saka pria lan wanita sing dicocogake kanthi umur, interval postmortem, nomer integritas RNA (RIN), lan pH. Faktor agonal spesifik, kalebu koma, hypoxia, pyrexia, kejang, dehidrasi, hypoglycemia, pirang-pirang kegagalan organ, lan konsumsi zat neurotoksik nalika mati nyebabake integritas RNA ing jaringan otak postmortem (Tomita et al., 2004). Kita nggunakake skala faktor agonal (AFS) kanggo ciri sampel jaringan ing saben wolung kahanan kasebut. Ora ana faktor agonal diwenehi skor 0 lan anane skor 1 kanggo nyediakake skor AFS total antara 0 lan 8. Tisu kanthi skor agonal 0 utawa 1 nuduhake conto kualitas sing apik; kasus demografi diwenehake ing Tabel 1. Kualitas jaringan sing luar biasa dikonfirmasi kanthi nilai RIN sing dhuwur. Kasus kena diseksi standar sadurunge pembekuan cepet ing op40 ° C isopentane lan panyimpenan ing -80 ° C; diseksi luwih lanjut saka NAc ditindakake ing jaringan beku. Papan kajian lembaga Southwestern kidul mriksa lan nyetujoni koleksi jaringan iki kanggo digunakake riset. Wawancara informan langsung ditindakake kanggo saben kasus depresi ing wektu mengko, ing endi informasi babagan penyakit kasus kasebut didokumentasikan; diagnosis konsensus kelainan depresi utama digawe nggunakake kriteria DSM-IV dening rong psikiater riset. Ora ana kasus sing kalebu ing panliten iki sing duwe layar toksikologi getih sing positif kanggo obat-obatan penyalahgunaan, alkohol, utawa obat resep kajaba antidepresan. Sanajan ana perawatan antidepresan, kabeh subjek nandhang depresi klinis nalika tiwas. Sampel jaringan diterbitake kanthi cara sing wuta kanggo analisis.
Tabel 1.
Data demografi kanggo sinau postmortem manungsa
Blotting Barat
Spesimen NAc manungsa lan mouse diproses minangka diterangake sadurunge (Maze et al., 2010). Jaringan beku di-sonicated ing 5 mM HEPES lisis buffer sing ngandung 1% SDS karo protease (Roche) lan inhibitor fosfatase (Sigma). Konsentrasi protein ditemtokake dening protein protein Dc (Bio-Rad). Jumlah protein sampel sing padha karo SDS-PAGE lan Western blotting. Weruh-wiji ing Kulon ditemokake kanthi nggunakake antibodi kanggo SRF (1 / 2000; Santa Cruz Biotechnology) utawa GAPDH (1 / 1500; Abcam) lan banjur dipindai lan diukur nganggo sistem imaging Odyssey (Licor).
Isolasi RNA lan PCR kuantitatif
Isolasi RNA, kuantitatif PCR (qPCR), lan analisis data sing ditindakake kaya sing diterangake sadurunge (Maze et al., 2010; Vialou et al., 2010). Sedhela, RNA diisolasi karo reagen TriZol (Invitrogen) lan luwih dimurnèkaké karo kit mikro RNAeasy saka Qiagen. Kabeh sampel RNA ditemtokake nduwe nilai 260 / 280 lan 260 / 230 ≥1.8. Transkripsi geguritan ditindakake nggunakake iScript (Bio-Rad). qPCR nggunakake SYBR green (Quanta) iki dilakokaké karo Sistem Biokimia Terapan 7900HT RT PCR kanthi paramèter siklus: 2 min ing 95 ° C; 40 siklus 95 ° C kanggo 15 s, 59 ° C kanggo 30 s, 72 ° C kanggo 33 s; lan diarani pemanasan kanggo 95 ° C kanggo mbentuk kurva pamisahan kanggo konfirmasi produk PCR tunggal. Data dianalisis kanthi cara mbandingaken nilai-nilai C (t) ing kondisi perawatan (kontrol vs rentan susceptible utawa resilient, utawa kontrol manungsa vs pasien depresi) kanthi metode ΔΔC (t) (Tsankova et al., 2006). ΔFosB qPCR primers: foward, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT and reverse, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG.
Chip
ChIP dileksanakake minangka sadurunge diterangake (Maze et al., 2010) ing pukulan NAc bilateral gabungan saka kontrol, rentan, lan resiken tikus (papat 14-gauge punches / mouse) 1 h sawise pengalaman asor pungkasan lan saka saline- kéwan sing dianggep 24 h sakwise perawatan pungkasan. Tissue disambungake ing formaldehida 1. Fiksasi iki banjur disusul liwat aplikasi gliserin, lan jaringan dicuci lan dijaga ing -80 ° C nganti digunakake. Sheared chromatin diinkubengi ing antawisipun antibodi anti-SRF (Santa Cruz Biotechnology) sing diwatesi manik magnetik (Dynabeads M-280; Invitrogen). Sawise mbalikke silang lan pemurnian DNA, pengikatan SRF marang promotor fosb ditemtokake dening qPCR nggunakake primèr sing nyakup wilayah promotor fosb sing ngandhut unsur serat nontoni. SRF pulldowns sacara signifikan diperkaya dibandhingake karo kontrol ora-antibodi. Mouse fosb promoter primers: maju, CCCTCTGACGTAATTGCTAGG lan mbalikke, ACCTCCCAAACTCTCCCTTC.
Analisis statistik
ANOVA siji arah digunakake kanggo mbandhingake cara antarane kontrol, tikus rentan, lan tahan banting ing analisis biokimia lan prilaku. ANOVA rong arah digunakake kanggo mbandhingake induksi ΔFosB kanthi kekalahan sosial ing tikus lokal sing metu saka Srf, uga kanggo mbandhingake efek saka Srf metu ing protokol helplessness lan lokomotor sing sinau. Tes t siswa digunakake kanggo mbandhingake cara ing pangertene Srf ing induksi ΔFosB, lan ing antarane klompok ing jaringan postmortem manungsa lan analisis ChIP mouse. Bedane kondisi eksperimen dianggep signifikan sacara statistik nalika p ≤ 0.05.
results
SRF lan ΔFosB ekspresi ing depresi manungsa lan tikus sosial dikalahake
Kanggo nggoleki peran potensial kanggo SRF ing pangembangan prilaku kaya depresi, pisanan kita evaluasi ekspresi protein SRF ing NAc pasien manungsa depresi postmortem. Subjek depresi ditampilake nyuda tingkat SRF ing NAc dibandhingake karo kontrol sing cocog karo umur (t (19) = 1.9; p <0.05) (Gbr. 1A). Amarga peran SRF kanggo ngatur ekspresi gen awal sing gumantung karo kegiatan (Ramanan et al., 2005), kita hipotesis manawa SRF bisa uga melu ngontrol ekspresi ΔFosB ing wilayah otak iki. Kanggo ndhukung hipotesis iki, kita ngerteni yen level Δfosb mRNA uga dikurangi sacara signifikan ing NAc manungsa depresi (t (16) = 1.8; p <0.05) (Gambar 1B). Iki cocog karo panemuan pungkasan tingkat protein ΔFosB sing nyuda ing kondhisi kasebut uga (Vialou et al., 2010).
Tokoh 1.
Penindasan sing nyebabake stres kronis saka SRF hubungane karo transkripsi ΔFosB sing mudhun ing NAc. Pasien depresi manungsa A, B, Postmortem nampilake tingkat suda protein SRF (n = 10 / kelompok; A) lan expressionfosb mRNA ekspresi ing NAc (n = 8 / kelompok; B). C, Tikus ngalami stres kekalahan sosial sing kronis (10 d) diklompokaké dadi subpopulasi sing rentan lan tahan banter. D, stres kekalahan sosial kronis nyuda tingkat protein SRF ing tikus rentan NAc, nanging tikus ora tahan banting, dibandhingake karo kontrol 24 jam sawise tes interaksi sosial sing dituduhake ing C. E, level mRNA osfosB ing NAc ora owah ing tikus rentan, nanging signifikan diregulasi ing kewan sing tangguh (n = 7-15 / klompok). Protein F, SRF nambah pengikatan promotor gen fosb sawise stres kekalahan sosial kronis mung ing ketahanan, lan ora gampang kena tikus (n = 5 / klompok). Data sing ditampilake ditulis minangka tegese ± SEM (diwakili minangka bilah kesalahan). Kon., Kontrol; Dep., Depresi; Sus., Rentan; Res., Cekel. * p <0.05 lawan kontrol; *** p <0.001 mungsuh kontrol; #p <0.05 lawan rentan; ## p <0.01 lawan rentan; ### p <0.001 lawan rentan.
Kanggo nggayuh temuan iki, kita nggunakake protokol stres kekalahan sosial kronis ing tikus. Loro klompok tikus sing dikalahake, rentan lan tahan banting, katon (Krishnan et al., 2007) adhedhasar ukuran panyingkiran sosial, ing endi kewan rentan ditampilake nyuda interaksi sosial dibandhingake karo kontrol lan kewan sing tangguh (F (2,23, 157.2) = 0.001; p <0.001; t tes kanthi koreksi Bonferroni, rentan vs kontrol, p <0.05; ketahanan vs kontrol, p <0.01; tangguh vs rentan, p <1) (Gambar 2,32C). Rong dina sawise episode kekalahan pungkasan, tikus kontrol rentan, tahan banting, lan ora dikalahake dianalisis ekspresi SRF ing NAc. Mirip karo temuan depresi manungsa, tingkat protein SRF sithik nyuda tikus rentan saka NAc dibandhingake karo kontrol, dene level SRF ora kena pengaruh ing NAc tikus tangguh (F (4.7) = 0.05; p <0.05; t tes kanthi Koreksi Bonferroni, rentan vs kontrol, p <0.05; tahan banter vs rentan, p <1) (Gbr. XNUMXD).
Sabanjure, kita mriksa ekspresi Rfosb mRNA ing NAc saka telung klompok kewan kasebut lan diamati paningkatan ekspresi Δfosb sing signifikan ing kewan sing tangguh, kanthi tren nanging ora ana kenaikan signifikan sing diamati ing tikus rentan (t (14) = 2.1; p <0.05 ) (Gambar 1E). Kanggo luwih mriksa kemungkinan interaksi antarane level SRF lan transkripsi Δfosb, kita nggunakake ChIP kanggo mriksa manawa pengikatan SRF karo promotor gen fosb diowahi sawise stres kekalahan sosial kronis ing kohort sing beda-beda tikus sing rentan lan tahan banter. Kewan sing tahan ditampilake kanthi nambah iketan SRF menyang promotor fosb ing NAc dibandhingake karo kontrol (t (8) = 2.1; p <0.05) uga dibandhingake karo tikus rentan (t (8) = 2.0; p <0.05). Ora ana bedane ing antarane kontrol lan tikus sing rentan, bisa uga nuduhake kekurangan induksi SRF ing tikus rentan (Gbr. 1F).
Kanggo ngonfirmasi peran SRF ing regulasi ΔFosB sawise stres kekalahan sosial kronis, tikus Srffl / fl digunakake kanggo mriksa efek pambusakan selektif SRF saka NAc ing induksi stres ΔFosB. Tikus srffl / fl disuntikake stereotaxically intra-NAc karo vektor AAV sing nyebutake GFP utawa Cre-GFP. Kunduran khusus NAc saka SRF sing diinduksi dening AAV-Cre-GFP dikonfirmasi imunohistokimia (Gbr. 2A). Pancen, ora ana tumpang tindih antarane noda SRF lan ekspresi Cre, sing nuduhake efektifitas ngalahake. Ing pukulan NAc sing microdissected, kita ndeteksi penurunan 50% tingkat protein SRF sing signifikan (t (11) = 4.3; p <0.001). Gedhene bisa uga nggambarake kasunyatan manawa bagean saka jaringan ing mikrodissection kasebut ora kena infeksi virus.
Tokoh 2.
SRF mediasi induksi ΔFosB kanthi stres kekalahan sosial kronis. A, Injeksi AAV-Cre-GFP menyang NAc tikus Srffl / fl nyebabake ngalahake protein SRF ing neuron ekspresi Cre. Injeksi AAV-GFP tanpa efek sing bisa dingerteni. B, Pungkasan selektif SRF saka NAc mblokir induksi ΔFosB ing NAc sawise stres kekalahan sosial kronis (n = 4 / klompok). Data sing ditampilake ditulis minangka tegese ± SEM (diwakili minangka bilah kesalahan). * p <0.05 lawan kontrol AAV-GFP; ** p <0.01 lawan kekalahan AAV-GFP.
Sabanjure, kita nindakake imunohistokimia kuantitatif kanggo ΔFosB ing NAc tikus Srffl / fl sing dikalahake nyuntikake intra-NAc kanthi AAV-Cre-GFP utawa AAV-GFP. Sawise kaku asor sosial kronis, ekspresi ΔFosB kena pengaruh signifikan ing NAc kewan sing disuntik AAV-GFP (interaksi × pangobatan virus, F (1,12) = 6.4; tes t karo koreksi Bonferroni, kontrol vs kekalahan, p <0.05; AAV-Cre vs AAV-GFP, p <0.01). Nanging, induksi iki ora diamati ing tikus Srffl / fl sing nampa AAV-Cre-GFP (Gambar 2B), nuduhake yen induksi ΔFosB ing NAc kanthi stres kronis mbutuhake SRF.
SRF ngetokake metu ing NAC ngembangake prodepresi- lan phenotypes kaya proanxiety
Wiwit induksi ΔFosB kanthi stres kekalahan sosial kronis sadurunge wis dituduhake kanggo mediasi ketahanan (Vialou et al., 2010), kita hipotesis yen mudhun pangaturan SRF, lan ilange induksi ΔFosB sing nyebabake, kewan rentan bisa uga nuduhake adaptasi negatif sing pungkasane digawe kewan luwih rentan marang efek stres sing mbebayani. Kanggo nyoba hipotesis iki, kita nyebabake ngilangi gen Srf khusus spesifik kanggo spesies Srf ing tikus Srffl / fl diwasa kaya sing diandharake ing ndhuwur, lan tikus sing diasilake lan kontrol kasebut dites ing batere paradigma perilaku kanggo netepake depresi awal lan kuatir- kaya tumindak. Penghapusan NAc lokal saka SRF ningkatake efek kaya prodepresi kaya sing diukur liwat tes renang-paksa (t (30) = 2.5; p <0.05), uga efek anxiogenik sing diukur ing lapangan terbuka (t (38) = 1.9; p <0.05) lan tes cahya / peteng (t (8) = 1.9; p <0.05). Dadi, tikus Srffl / fl sing nampa AAV-Cre-GFP menyang NAc nuduhake latensi ora obah ing tes berenang paksa, kurang wektu ing tengah lapangan terbuka, lan kurang wektu ing kompartemen cahya kothak cahya / peteng dibandhingake karo kewan sing disuntik AAV-GFP (Gambar 3A – C). Nanging, pambusakan intra-NAc saka SRF ora ngowahi tingkat awal lokomosi, nuduhake yen efek perilaku sing diamati ing kewan sing ngalahake SRF dudu amarga kelainan ing kegiatan lokomotor umum (Gambar 3D). Data kasebut narik kawigaten saka laporan sadurunge sing nuduhake manawa, sanajan ΔFosB ing NAc ngatur tumindak kaya depresi, katon ora melu reaksi sing gegandhengan karo kuatir (Vialou et al., 2010). Temuan saiki sing ngilangi SRF nyebabake reaksi anxiogenik nuduhake manawa liwat target liyane kajaba ΔFosB.
Tokoh 3.
SRF ngalahake metu saka NAc ningkatake fenotipe kaya prodepresi lan proanxiance. A – C, knock-out Selective saka SRF saka NAc, sing diraih liwat injeksi AAV-Cre-GFP menyang NAc tikus Srffl / fl, nyuda latensi immobilitas ing tes renang-dipeksa (n = 14-18 / klompok; A) lan nyuda wektu sing dienggo ing tengah lan wektu sing digunakake ing kompartemen cahya ing lapangan terbuka (B) lan tes cahya / peteng (C) (n = 5-15 / klompok). D, Ora ana bedane ing kegiatan lokomotor basal sing diamati ing lapangan mbukak tikus sing nampa injeksi intra-NAc AAV-GFP utawa AAV-Cre-GFP. E, F, Tambah kerentanan tumrap rasa ora berdaya sinau (n = 7-8 / klompok; E) lan stres kekalahan sosial (n = 5-6 / klompok; F), kaya sing diukur, kanthi latensi kanggo uwal lan wektu interaksi sosial . Data sing ditampilake ditulis minangka tegese ± SEM (diwakili minangka bilah kesalahan). * p <0.05 lawan GFP utawa lawan target sing ora ana; ** p <0.01 lawan GFP; *** p <0.001 mungsuh GFP.
Sabanjure kita sinau manawa SRF ngilangi NAc uga nambah kerentanan kewan kanggo efek mbebayani saka stres bola-bali. Tikus srffl / fl, disuntik karo AAV-Cre-GFP utawa AAV-GFP menyang NAc, ditliti ing rong model depresi, sinau ora kuwat lan stres kekalahan sosial kronis. Ing rasa ora kuwat sinau, kéwan Srffl / fl sing nampa AAV-Cre-GFP nampilake latensi sing luwih cepet kanggo ucul saka kejut sikil sawise ngalami stres kejut sikil sing ora bisa diendhani (perawatan × interaksi interaksi, F (14,180) = 10.2; t tes kanthi koreksi Bonferroni, p <0.001; AAV-Cre vs AAV-GFP, p <0.01), nuduhake kerentanan tumrap defisit perilaku sing nyebabake stres (Gbr. 3E). Kajaba iku, pambusakan SRF lokal saka NAc uga nambah keengganan sosial (t (10) = 1.8; p <0.05) dibandhingake karo kewan kontrol sing disuntik AAV-GFP sawise stres kekalahan sosial kronis (Gbr. 3F), efek kaya prodepresi.
Kurang keterlibatan SRF ing induksi ΔFosB lan respon perilaku marang kokain
Amarga ΔFosB uga disebabake ing NAc kanggo nanggepi obat-obatan penyalahgunaan kayata kokain, dadi luwih penting kanggo mriksa peran potensial kanggo SRF ing tumindak kokain. Ora kaya stres kekalahan sosial kronis, paparan kokain sing bola-bali ora ngowahi ekspresi protein SRF ing NAc (t (14) = 0.8; p> 0.05) (Gbr. 4A) lan ora ana pengaruhe kanggo pengikatan SRF marang promotor gen fosB ing wilayah otak iki (t (4) = 0.7; p> 0.05) (Gambar 4B). Iki nuduhake manawa bertentangan karo stres, induksi ΔFosB sawise kokain kronis ora ditengahi liwat SRF. Kita langsung nyoba karo mriksa apa akumulasi ΔFosB sawise kokain kronis diowahi ing kéwan Srffl / fl sing nampa AAV-Cre-GFP mungsuh AAV-GFP dadi NAc. Kita nemokake manawa pambusakan SRF ora ana pengaruhe tumrap akumulasi ΔFosB sing diakibatake kokain ing wilayah otak iki (Gambar 4C).
Tokoh 4.
Mundhut SRF ora duweni pangaruh ing induksi kokain ΔFosB utawa tindak tanduk cocaine. A, B, ekspirasi kokain sing diulang (7 d, 20 mg / kg kokain-HCl) ora ana pangaruh ing ekspresi protein SRF ing NAc (A) utawa ing SRF naleni menyang promotor gen fosB ing wilayah otak (B) 24 h sawise pajanan obat (n = 5 / grup). C, akumulasi ΔFosB, sing diukur immunocytochemically, pajanan cocaine kronis ora kena pengaruh saka SRF. D, E, Pamblokiran lokal SRF saka NAC uga ora duweni pangaruh ing kegiatan lokomotif sawise injection saline (d 1) ing aktivitas locomotor lan sensitisasi (n = 8 / group) cocaine (d 1-7; D) utawa ing kokain panggonan sing dipilih kahanan kokain (n = 8 / grup; E). Data sing ditampilake ditulis minangka tegese ± SEM (diwakili minangka bar error).
Kanggo ngetutake temuan sing nggumunake iki, kita nyelidiki manawa SRF sing milih-milih saka NAc ngowahi tanggepan prilaku kokain. Selaras karo kurang regulasi SRF induksi ΔFosB kanthi kokain, khusus metu-metu saka SRF ora ana pengaruhe tumrap aktivitas lokomotor sing diakibatake dening kokain akut utawa sensitisasi lokomotor sing katon sawise paparan kokain sing bola-bali (perawatan × interaksi wektu, F (4,80) = 0.3; p> 0.05) (Gambar 4D). Kajaba iku, knock-out SRF khusus NAc ora mengaruhi preferensi panggonan kondhisi kokain (t (14) = 0.1; p> 0.05) (Gbr. 4E), sing menehi ukuran kokain kanthi ora langsung.
Diskusi
Panliten iki nemtokake SRF minangka mediator hologram saka ΔFosB ing NAc sawise stress sosial sing kronis, lan ngakibatake SRF ing perkembangan depresi- lan tindak tanduk kaya pitutur. Kita nyedhiyani bukti langsung menawa stres sosial sing kronis bisa ngurangi tingkat SRF ing NAc sing rentan, nanging ora kuwat, kewan, lan downregulation iki ngalangi induksi ΔFosB ing wilayah otak iki, sing wis ditampilake perlu kanggo ngatasi stres kronis, ie, resilience (Vialou et al., 2010). Pangurangan sing padha ing ekspresi SRF ditemokake ing NAc saka manungsa sing nandhang sungkowo, ing ngendi ΔFosB mRNA lan ekspresi protein uga dikurangi. Contoné, tingkat ΔFosB ora dikurangi ing tikus tikus sing rentan, senadyan downregulation SRF, sing ngandhut mekanisme transkriptional liya, sing durung dingerteni, kanggo ngontrol ekspresi ΔFosB. A peran nyebabake SRF ing mediating induksi ΔFosB ing NAc sawise kaku kronis digawé kanthi nggunakake pambusakan genetik SRF saka wilayah otak. Analisis perilaku tikus karo SRF spesifik sing nyebabake SRF luwih-luwih mbuktekaken SRF minangka peran utama ing perkembangan baseline lan depresi sing ditimbulake stress-lan tindak tanduk kaya pitutur. Ing kontras striking, pambusakan SRF ora duweni pengaruh marang induksi ΔFosB kanggo nanggepi administrasi kokain kronis utawa efek prilaku kokain. Panemon iki ndhukung peran khusus rangsangan novel kanggo SRF ing aturan induksi ΔFosB lan respon perilaku marang gangguan lingkungan sing béda.
Transkripsi-mediasi SRF sadurunge wis ditampilake kanggo nanggapi aktivitas sinaptik, sing akeh dipicu dening paningkatan kalsium sing tambah, uga aktivitas neurotrofik sing luwih apik, utamane ing kasus neurotrophik faktor (BDNF) (Bading et al., 1993; Xia et al., 1996; Johnson et al., 1997; Chang et al., 2004; Kalita et al., 2006, Knöll lan Nordheim, 2009). Iki nuduhaké pitakonan sing menarik, ngapa SRF dikalahaké ing NAc sing rentan, nanging ora resik, tikus sawisé stres asor sosial sing kronis. Regulasi diferensial iki mbokmenawa ora ditengahi dening dopamin utawa sinyal BDNF, amarga tampilan tikus sing sensitif nambah tingkatan protein BDNF lan ningkatake batalane BDNF ing NAc lan uga tembusan sing diperlokaké saka neuron dopamine area ventrral tegmental (VTA), sing nyenengake NAc, kéwan sing resilièn nuduhaké tingkat normal sinyal penandaan BDNF lan VTA (Krishnan et al., 2007). Kemungkinan alternatif yaiku ekspresi SRF ditindakake ing NAc minangka respon marang lingkungan otak glutamatergia ing wilayah otak iki, sing dituduhake sacara béda ing rentan karo tikus resikona (Vialou et al., 2010). Karya luwih dibutuhake kanggo langsung sinau babagan mekanisme iki lan liyane.
Pasinaon sing anyar nggunakake génom-sudhut lan cara liya nuduhaké yèn gèn target ~5-10 saka SRF ing neuron minangka gen awal sing cepet (Philippar et al., 2004; Ramanan et al., 2005; Etkin et al., 2006; Nordheim, 2009). Iki konsisten karo data kita sing nuduhake peran kritis kanggo SRF ing induksi ΔFosB, produk sing dipotong saka gen awal langsung fosb, kanthi stres nemen. Saliyane, akeh gen target SRF sing ditemtokake ing macem-macem panaliten iki uga makili target ΔFosB ing NAc (Kumar et al., 2005; Renthal et al., 2008, 2009; Maze et al., 2010). Antarane gen umum sing diatur iki yaiku sawetara sing dikenal kanggo ngatur sitoskeleton neuron (umpamane, Cdk5, Arc, lan Actb). Iki uga cocog karo laporan yen pengaruh SRF dinamika aktip lan motility neuronal ing saperangan tipe sel neuron (Alberti et al., 2005; Ramanan et al., 2005; Knöll et al., 2006), dene ΔFosB dikenal kanthi jeneng nandhang kauripan dendritik tumrap saraf neuron NAc (Maze et al., 2010). Endpoint fungsi fungsional kaya iki bisa nggambarake efek concerted saka SRF, digabungake karo induksi saka ΔFosB, tumindak sajroning seri saka gen target sing umum kanggo morfologi neuronal lan, ing pungkasan, perilaku rumit.
SRF uga ditudhuh kanggo nindakake peran kritis ing regulasi plastisitas synaptic lan ekspresi gene lan perilaku gene gumantung neuronal. Contone, mundhut induksi gunggung gen awal langsung saka SRF minangka respon kanggo eksplorasi sukarela saka lingkungan novel utawa aktivasi neuronal dening kejang elektroconvulsif sing wis ana hubungane karo gangguan potensialasi synaptic jangka panjang ing hippocampus Srf mutan (Ramanan et al. , 2005; Etkin et al., 2006). Sabanjure, panipisan SRF ing hippocampus wis dituduhake kanggo nimbulaké defisit ing depresi sinapsis jangka-panjang, ekspresi gen awal langsung sing diakibatake dening konteks novel, lan gangguan habituasi nalika eksplorasi lingkungan novel (Etkin et al., 2006). Data kasebut negesake pentinge SRF ing kemampuan kewan kanggo adaptasi sing cocog karo gangguan lingkungan, kaya ing kasus sinau ing ndhuwur kanggo lingkungan anyar, utawa, nalika adaptasi karo stimulasi stres negatif, kanggo nyegah panyebaran stres -kurang cacat perilaku, kaya ing panelitian saiki. Mula, kita ngamati manawa kewan sing nuduhake kekurangan ekspresi SRF, minangka reaksi stres sosial ing individu sing rentan utawa liwat SRF langsung, nampilake prilaku depresi lan kuatir sing tambah. Amarga subyek manungsa sing depresi uga ngalami penurunan tingkat SRF ing NAc, bisa dingerteni manawa SRF duwe peran dhasar kanggo ngatur kemampuan individu supaya bisa adaptasi kanthi positif karo rangsangan lingkungan sing negatif, yaiku liwat regulasi ekspresi ΔFosB ing NAc.
GAGAL MUDAH: GANGGUAN VS STRESS RESISTANCE
Panemuan sing nggumunake babagan studi saiki yaiku, sanajan SRF dibutuhake kanggo akumulasi ΔFosB ing NAc kanggo nanggepi stres kronis, ora perlu induksi ΔFosB ing wilayah otak sing padha kanggo nanggepi kokain kronis. Kajaba iku, SRF ora dibutuhake kanggo respon perilaku normal kanggo obat kasebut. Data kasebut nuduhaké yèn ΔFosB diprakiraké ing NAc minangka réaksi rangsang (Nestler et al., 1999, Nestler, 2008), ana uga jalur molekul sing béda sing mimpin induksi ΔFosB. Salah sawijining katrangan kanggo temuan iki yaiku jinis sel sing béda-béda sing nuduhaké akumulasi FosB minangka nanggepi stres lawan kokain. Tegangan kronis nyebabake ΔFosB kira-kira ing loro subpopulations utama neuron spasm medium NAc, sing ngandhut luwih akeh D1 karo reseptor dopamin D2, dene kokain kronis ndadekake ΔFosB luwih akeh ing neuron D1 (Kelz et al., 1999; Perrotti et al., 2004) . Mangkono, mungkin jalur sing gumantung SRF bisa dadi penting kanggo induksi ΔFosB ing D2 + neuron. Nanging, iki ora bakal nerangake indhuksi induksi ΔFosB ing tikus SRF ngetokake sawise stres kronis, amarga induksi kasebut dumadi ing subtipe neuronal. Panjelasan alternatif yaiku stres kronis lan cocaine kronis nyebabake kasil intraselular sing beda, kanthi cara modis sing béda ing neuron NAc, kanthi stres kronis sing bisa digunakake liwat transmisi glutamatergia, kaya sing kacathet sadurungé, lan kokain kronis nyambut utamane liwat D1 reseptor signaling (Nestler, 2008). Ana kemungkinan liyane yaiku yen induksi ΔFosB kanthi stres kronis babagan kokain kronis gumantung marang mekanisme transkription sing béda-béda sing dikontrol dening input saraf sing beda-beda sajrone ngresiki NAc saka macem-macem daerah proyeksi glutamater, contone, sawetara wilayah korteks prefrontal, hippocampus, lan amygdala. Karya luwih akeh dibutuhake kanggo njelajah kemungkinan kasebut lan alternatif.
Saliyane, panemuan kita ngenali mekanisme transkripori novel ing ngendi ΔFosB diinduksi ing NAc kanggo ngetokake respon proresiliensi marang rangsangan stres. Panliten iki uga nyedhiyakake wawasan anyar sing penting babagan peran SRF ing tingkat NAC ing aturan depresi- lan tindak tanduk kaya pitutur. Entuk pangerten sing luwih apik babagan peran transkripsi SRF ing regulasi prilaku kasebut bakal mbantu ngenali target gen novel sing ana ing ketahanan kelainan stres, lan bisa nggampangake pangembangan terapi antidepresan sing luwih efektif.
Karya iki didhukung dening pamrentah saka Institut Kesehatan Mental Nasional lan Institut Nasional Penyalahgunaan Penyalahgunaan Obat lan dening aliansi riset karo AstraZeneca. Kita ngaturaken panuwun dhumateng David D. Ginty kangge nyediaken tikus Srffl / fl.
Korespondensi kudu ditujokake marang Eric J. Nestler, Departemen Neurosains, Fishberg School of Medicine, One Gustave L. Levy Place, Box 1065, New York, NY 10029-6574. [email dilindhungi]
Hak cipta © 2010 the authors 0270-6474 / 10 / 3014585-08 $ 15.00 / 0
Cathetan Suku
1. ↵
1. Alberti S,
2. Krause SM,
3. Kretz O,
4. Philippar U,
5. Lemberger T,
6. Casanova E,
7. Wiebel FF,
8. Schwarz H,
9. Frotscher M,
10. Schütz G,
11. Nordheim A
(2005) Migrasi neuronal ing aliran migratory murine rostral mbutuhake serum respon faktor. Proc Natl Acad Sci USA 102: 6148-6153.
Abstrak / FREE Full Text
2. ↵
1. Bading H,
2. Ginty DD,
3. Greenberg ME
(1993) Regulasi ekspresi gene ing neuron hippocampal kanthi path sinyal kalsium sing béda. Science 260: 181-186.
Abstrak / FREE Full Text
3. ↵
1. Berton O,
2. McClung CA,
3. Dileone RJ,
4. Krishnan V,
5. Renthal W,
6. Russo SJ,
7. Graham D,
8. Tsankova NM,
9. Bolanos CA,
10. Rios M,
11. Monteggia LM,
12. DW dhewe,
13. Nestler EJ
(2006b) Peran penting BDNF ing jalur dopamin mesolimbi ing stres asor sosial. Science 311: 864-868.
Abstrak / FREE Full Text
4. ↵
1. Berton O,
2. Covington HE 3rd.,
3. Ebner K,
4. Tsankova NM,
5. Carle TL,
6. Ulery P,
7. Bhonsle A,
8. Barrot M,
9. Krishnan V,
10. Singewald GM,
11. Singewald N,
12. Birnbaum S,
13. Neve RL,
14. Nestler EJ
(2007) Asembly saka ΔFosB ing werna abu-abu periaqueductal dening kaku ngusulake tanggapan coping aktif. Neuron 55: 289-300.
CrossRefMedline
5. ↵
1. Chang SH,
2. Poser S,
3. Xia Z
(2004): A novel peran serum respon faktor ing gesang neuronal. J Neurosci 24: 2277-2285.
Abstrak / FREE Full Text
6. ↵
1. Etkin A,
2. Alarcón JM,
3. Weisberg SP,
4. Touzani K,
5. Huang YY,
6. Nordheim A,
7. Kandel ER
(2006) Pawongan kanggo sinau kanggo SRF: pambusakan ing otak pambuka diwatesi LTD lan pembentukan memori langsung saka konteks novel. Neuron 50: 127-143.
CrossRefMedline
7. ↵
1. Heinze HJ,
2. Heldmann M,
3. Voges J,
4. Hinrichs H,
5. Marco-Pallares J,
6. Hopf JM,
7. Müller UJ,
8. Galazky I,
9. Sturm V,
10. Bogerts B,
11. Münte TF
(2009) Ngatasi sensitisasi insentif ing ketergantungan alkohol abot nggunakake stimulasi otak jero inti accumbens: aspek klinis lan ilmu dasar. Ngarep Hum Neurosci 3: 22.
Medline
8. ↵
1. Johnson CM,
2. Hill CS,
3. Chawla S,
4. Treisman R,
5. Bading H
(1997) Kalsium ngontrol ekspresi gene liwat telung saluran sing bisa dienggo sacara independen saka kinase sinyal-sinyal protein / mitogen-activated protein kinase (ERKs). J Neurosci 17: 6189-6202.
Abstrak / FREE Full Text
9. ↵
1. Kalita K,
2. Kharebava G,
3. Zheng JJ,
4. Hetman M
(2006) Peran leukemia akut megakaryoblastic-1 ing ERK1 / 2 gumantung stimulasi serat tanggapan serum sing didorong dening BDNF utawa aktivitas synaptic tambah. J Neurosci 26: 10020-10032.
Abstrak / FREE Full Text
10. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.,
4. Whisler K,
5. Gilden L,
6. Beckmann AM,
7. Steffen C,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L,
10. DW dhewe,
11. Tkatch T,
12. Baranauskas G,
13. Surmeier DJ,
14. Neve RL,
15. Duman RS,
16. Picciotto MR,
17. Nestler EJ
(1999) Ekspresi faktor ΔFosB ing otak ngontrol sensitivitas kanggo kokain. Alam 401: 272-276.
CrossRefMedline
11. ↵
1. Knöll B,
2. Nordheim A
(2009) Fungsionalitas fungsional saka faktor transkripsi ing sistem saraf: paradigma SRF. Trends Neurosci 32: 432-442.
CrossRefMedline
12. ↵
1. Knöll B,
2. Kretz O,
3. Fiedler C,
4. Alberti S,
5. Schütz G,
6. Frotscher M,
7. Nordheim A
(2006) Faktor serum nontor kontrol perakitan sirkuit neuronal ing hippocampus. Nat Neurosci 9: 195-204.
CrossRefMedline
13. ↵
1. Krishnan V,
2. Han MH,
3. Graham DL,
4. Berton O,
5. Renthal W,
6. Russo SJ,
7. Laplant Q,
8. Graham A,
9. Lutter M,
10. Lagace DC,
11. Ghose S,
12. Reister R,
13. Tannous P,
14. Green TA,
15. Neve RL,
16. Chakravarty S,
17. Kumar A,
18. Eisch AJ,
19. DW dhewe,
20. Lee FS,
21. et al.
(2007) Adaptasi molekular sing ndarbeni kerentanan lan perlawanan marang kekalahan sosial ing ganjaran otak. Cell 131: 391-404.
CrossRefMedline
14. ↵
1. Kuhn J,
2. Bauer R,
3. Pohl S,
4. Lenartz D,
5. Huff W,
6. Kim EH,
7. Klosterkoetter J,
8. Sturm V
(2009) Observasi ing penghentian udud kanthi ora ana hubungane karo stimulasi otak jero saka accumbens nukleus. Eur Addict Res 15: 196-201.
CrossRefMedline
15. ↵
1. Kumar A,
2. Choi KH,
3. Renthal W,
4. Tsankova NM,
5. Theobald DE,
6. Truong HT,
7. Russo SJ,
8. Laplant Q,
9. Sasaki TS,
10. Whistler KN,
11. Neve RL,
12. DW dhewe,
13. Nestler EJ
(2005) Remodeling kromatin minangka mekanisme kunci sing ndasari plastikitas cocaine ing striatum. Neuron 48: 303-314.
CrossRefMedline
16. ↵
1. Maze Aku,
2. Covington HE 3rd.,
3. Dietz DM,
4. LaPlant Q,
5. Renthal W,
6. Russo SJ,
7. Mekanik M,
8. Mouzon E,
9. Neve RL,
10. Haggarty SJ,
11. Ren Y,
12. Sampath SC,
13. Hurd YL,
14. Greengard P,
15. Tarakhovsky A,
16. Schaefer A,
17. Nestler EJ
(2010) Peran penting saka methyltransferase histone G9a ing plastisitas cocaine-induced. Science 327: 213-216.
Abstrak / FREE Full Text
17. ↵
1. McClung CA,
2. PG Ulery,
3. Perrotti LI,
4. Zachariou V,
5. Berton O,
6. Nestler EJ
(2004) DeltaFosB: switch molekuler kanggo adaptasi long-term ing otak. Brain Res Mol Brain Res 132: 146-154.
Medline
18. ↵
1. Nestler EJ
(2008) Mekanisme transkripional saka kecanduan: peran deltaFosB. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 363: 3245-3255.
Abstrak / FREE Full Text
19. ↵
1. Nestler EJ,
2. Carlezon WA Jr.
(2006) Sirkuit ganjaran dopamin mesolimbic ing depresi. Biologi Psikiatri 59: 1151-1159.
CrossRefMedline
20. ↵
1. Nestler EJ,
2. Kelz MB,
3. Chen J
(1999) ΔFosB: mediator molekuler neural lan behavioral plasticity jangka panjang. Brain Res 835: 10-17.
CrossRefMedline
21. ↵
1. Newton SS,
2. Thome J,
3. Wallace TL,
4. Shirayama Y,
5. Schlesinger L,
6. Sakai N,
7. Chen J,
8. Neve R,
9. Nestler EJ,
10. Duman RS
(2002) Inhibisi protèktif-mengikat protein cAMP utawa dynorphin ing inti saka accumbens nukleus ngasilake efek kaya antidepresan. J Neurosci 22: 10883-10890.
Abstrak / FREE Full Text
22. ↵
1. Nikulina EM,
2. Arrillaga-Romany I,
3. Miczek KA,
4. Hammer RP Jr.
(2008) Perubahan long-term ing struktur mesocorticolimbic sakwise ngatasi kekeselian sosial ing tikus: jamur reseptor mu-opioid mRNA lan immunoreaktivitas FosB / DeltaFosB. Eur J Neurosci 27: 2272-2284.
CrossRefMedline
23. ↵
1. Perrotti LI,
2. Hadeishi Y,
3. PG Ulery,
4. Barrot M,
5. Monteggia L,
6. Duman RS,
7. Nestler EJ
(2004) Inti saka ΔFosB ing struktur otak sing menehi ganjaran sawise stres nemen. J Neurosci 24: 10594-10602.
Abstrak / FREE Full Text
24. ↵
1. Perrotti LI,
2. Weaver RR,
3. Robison B,
4. Renthal W,
5. Maze Aku,
6. Yazdani S,
7. Elmore RG,
8. DJ Knapp,
9. Selley DE,
10. Martin BR,
11. Sim-Selley L,
12. Bachtell RK,
13. DW dhewe,
14. Nestler EJ
(2008) Pola sing beda ing induksi DeltaFosB ing otak kanthi narkoba. Synaps 62: 358-369.
CrossRefMedline
25. ↵
1. Philippar U,
2. Schratt G,
3. Dieterich C,
4. Müller JM,
5. Galgóczy P,
6. FB Engel,
7. Keating MT,
8. Gertler F,
9. Schüle R,
10. Vingron M,
11. Nordheim A
(2004) Gen target SRF Fhl2 ngalangi aktifitas RhoA / MAL sing gumantung saka SRF. Mol Cell 16: 867-880.
CrossRefMedline
26. ↵
1. Ramanan N,
2. Shen Y,
3. Sarsfield S,
4. Lemberger T,
5. Schütz G,
6. DJ Linden,
7. Ginty DD
(2005) SRF nganakake ekspresi gen pengaruh sing diilhami lan plasticity synaptic nanging ora ana daya uripe. Nat Neurosci 8: 759-767.
CrossRefMedline
27. ↵
1. Renthal W,
2. Carle TL,
3. Maze Aku,
4. Covington HE 3rd.,
5. Truong HT,
6. Alibhai Aku,
7. Kumar A,
8. Montgomery RL,
9. Olson EN,
10. Nestler EJ
(2008) Delta FosB mediasi desensitisasi epigenetic saka gen c-fos sawise eksposisi amfetik sing kronis. J Neurosci 28: 7344-7349.
Abstrak / FREE Full Text
28. ↵
1. Renthal W,
2. Kumar A,
3. Xiao G,
4. Wilkinson M,
5. Covington HE 3rd.,
6. Maze Aku,
7. Sikder D,
8. Robison AJ,
9. LaPlant Q,
10. Dietz DM,
11. Russo SJ,
12. Vialou V,
13. Chakravarty S,
14. Kodadek TJ,
15. Tumpukan A,
16. Kabbaj M,
17. Nestler EJ
(2009) analisis genom saka peraturan kromatin dening kokain mbukak peran kanggo sirtuin. Neuron 62: 335-348.
CrossRefMedline
29. ↵
1. Schlaepfer TE,
2. Cohen MX,
3. Frick C,
4. Kosel M,
5. Brodesser D,
6. Axmacher N,
7. Joe AY,
8. Kreft M,
9. Lenartz D,
10. Sturm V
(2008) stimulasi otak jero kanggo menehi hadiah circuitry ngenteni anhedonia ing depresi utama sing ana refleksi. Neuropsychopharmacology 33: 368-377.
CrossRefMedline
30. ↵
1. Sesack SR,
2. Grace AA
(2010) Jaringan pahala ganglia Cortico-basal: microcircuitry. Neuropsychopharmacology 35: 27-47.
CrossRefMedline
31. ↵
1. Tomita H,
2. Vawter MP,
3. Walsh DM,
4. Evans SJ,
5. PV Choudary,
6. Li J,
7. Overman KM,
8. Atz ME,
9. Myers RM,
10. Jones EG,
11. Watson SJ,
12. Akil H,
13. Bunney WE Jr.
(2004) Efek saka faktor agonal lan postmortem ing profil ekspresi gen: kontrol kualitas ing analisis microarray utawa postmortem otak manungsa. Biol Psikiatri 55: 346-352.
CrossRefMedline
32. ↵
1. Tsankova NM,
2. Berton O,
3. Renthal W,
4. Kumar A,
5. Neve RL,
6. Nestler EJ
(2006) Regulasi chromatin hippocampal ditindakake kanthi model mouse depresi lan tumindak antidepresan. Nat Neurosci 9: 519-525.
CrossRefMedline
33. ↵
1. Vassoler FM,
2. Schmidt HD,
3. Gerard ME,
4. KR terkenal,
5. Ciraulo DA,
6. Kornetsky C,
7. Knapp CM,
8. Pierce RC
(2008) Stimulasi otak jero inti saka sutra accumbens ngasilake cocaine priming-induced reinstatement saka tamba seeking ing clurut. J Neurosci 28: 8735-8739.
Abstrak / FREE Full Text
34. ↵
1. Vialou V,
2. Robison AJ,
3. Laplant QC,
4. Covington HE 3rd.,
5. Dietz DM,
6. YNN,
7. Mouzon E,
8. Rush AJ 3rd.,
9. Wat EL,
10. Wallace DL,
11. Iñiguez SD,
12. Ohnishi YH,
13. Steiner MA,
14. Warren BL,
15. Krishnan V,
16. Bolaños CA,
17. Neve RL,
18. Ghose S,
19. Berton O,
20. Tamminga CA,
21. Nestler EJ
(2010) ΔFosB ing sirkuit ganjaran otak ngirangi ketahanan kanggo kaku lan respon antidepresan. Nat Neurosci 13: 745-752.
CrossRefMedline
35. ↵
1. Wilkinson MB,
2. Xiao G,
3. Kumar A,
4. LaPlant Q,
5. Renthal W,
6. Sikder D,
7. Kodadek TJ,
8. Nestler EJ
(2009) Pengobatan lan ketahanan Imipramine ngetokake regulasi chromatin sing padha ing ganjaran otak utomo. J Neurosci 29: 7820-7832.
Abstrak / FREE Full Text
36. ↵
1. Xia Z,
2. Dudek H,
3. Miranti CK,
4. Greenberg ME
(1996) Panyimpenan kalsium liwat reseptor NMDA ngindhuksi transkripsi awal gen langsung dening mekanisme MAP kinase / ERK. J Neurosci 16: 5425-5436.
Abstrak / FREE Full Text
;