Запошљавање ЦРФ система посредује тамну страну компулзивног једења (КСНУМКС)

. КСНУМКС Нов КСНУМКС; КСНУМКС (КСНУМКС): КСНУМКС – КСНУМКС.

Објављено на мрежи КСНУМКС Нов КСНУМКС. дои:  КСНУМКС / пнас.КСНУМКС

ПМЦИД: ПМЦКСНУМКС

Апстрактан

Дијета за контролу тјелесне тежине укључује циклусе депривације од укусне хране која може промовирати компулзивну исхрану. Ова студија показује да пацови повучени из интермитентног приступа укусној храни показују прекомерно једење укусне хране након поновног приступа и афективног стања сличног повлачењу које карактерише кортикотропин-ослобађајући фактор-КСНУМКС (ЦРФ)1реверзибилно понашање рецептора антагониста, укључујући хипофагију, мотивационе дефиците да би се добила мање укусна храна и анксиогено-слично понашање. Повлачење је праћено повећаним ЦРФ изразом и ЦРФ-ом1 електрофизиолошка реакција у централном језгру амигдале. Предлажемо да се регрутује екстрахипоталамички ЦРФ-ЦРФ1 системи током повлачења из укусне хране, аналогни апстиненцији од злоупотребљених дрога, могу промовисати компулзивну селекцију укусне хране, подцењивање здравијих алтернатива и негативно емоционално стање када се спречава унос укусне хране.

Кључне речи: поремећаји исхране, гојазност, укусност, укусна зависност од хране, повлачење

Облици гојазности и поремећаји у исхрани, слични овисности о дрогама, могу се концептуализирати као кронична рецидивна стања с наизмјеничним периодима апстиненције (тј. Дијета да би се избјегла „забрањена“ укусна храна) и рецидивом (тј. Компулзивним, често неконтролисаним, једењем високих) укусна храна) која се наставља упркос негативним последицама (). Иако су позитивне армирајуће особине укусних намирница добро познате (, ), мање пажње је посвећено њиховим негативним појачавајућим особинама (-наиме, повећана вероватноћа одговора на понашање настала уклањањем аверзивног стимуланса (нпр. унос укусне хране за ублажавање негативних емоционалних стања). Интермитентни циклуси продужене употребе лекова злоупотребе могу прогресивно да доведу до "афективне зависности", посматране као потреба за вишим и / или правилнијим количинама лека да би се одржала одређена емоционална тачка као и негативно емоционално стање након престанка унос лекова (, ). Такво афективно повлачење може одржати употребу и мотивисати повратак кроз негативна појачавајућа својства континуиране и настављене употребе дрога, односно, ).

Екстрахипоталамички кортикотропин-фактор ослобађања мозга (ЦРФ) мождано је укључен у прелазак са употребе дроге на зависност, при чему унос злоупотребљених дрога постаје све више мотивисан овим негативним, а не позитивним, механизмима појачања. ЦРФ игра мотивационо релевантну улогу у синдромима апстиненције за све главне дроге злоупотребе, укључујући алкохол, никотин, кокаин, опијате, амфетамине и тетрахидроканабинол (, ). По аналогији, поновљени циклуси испрекиданог, проширеног приступа веома укусној храни претпостављени су да индукују неуроадаптације ЦРФ система сличне онима које се виде у моделима зависности од дроге (, , ).

Резултати

Интермитентни, проширени приступ укусној храни прогресивно доводи до подцењивања мање преферираних дијета када није доступна укусна храна и преједање укусне хране по поновном приступу (-). Да тестирамо хипотезу да је ЦРФ1 системи посредују ове адаптације храњења, мушки Вистар пацови (n = КСНУМКС) су добијали храну са храном ад либитум (Цхов / Цхов) дневно сваке недеље или су добијали храну ад либитум за КСНУМКС дана (Ц фаза) након чега је уследила врло укусна, слатка исхрана за КСНУМКС дана (П фаза) (Цхов / Палатабле) ) (види СКСНУМКС за распоред дијета и СКСНУМКС за ефекте распореда исхране на унос хране и телесну тежину). После КСНУМКС недеља бициклирања, пацови су примили непептидни ЦРФ1 антагонист рецептора РКСНУМКС (КСНУМКС, КСНУМКС, КСНУМКС и КСНУМКС мг / кг, сц) у латинском квадратном дизајну (). Третманима је дат КСНУМКС х пре него што се пребаци са укусне исхране на храну или храну са храном. РКСНУМКС је зависио од дозе, смањио унос исхране и повећао унос хране у храни код Цхов / Палатабле пацова (Фаза исхране × Распоред дијета × Доза лека: F3,54 = КСНУМКС, P <0.001), без промене уноса цхов контрола. Р121919 је смањио унос изузетно укусне дијете након поновног приступа укусној храни (П фаза) (Сл. КСНУМКСA). У независним тестовима, ЦРФ1 антагонист рецептора повећан унос мање укусне хране у штакорима Цхов / Палатабле повучених из укусне исхране (Ц фаза) (Сл. КСНУМКСB). Тако, уклањањем и хипофагије и преједања укусне хране, РКСНУМКС смањује амплитуду циклуса уноса (разлика између уноса током прве укусне П фазе и првог повлачења у фазу цхов-а: Распоред дијета × Доза лека: F3,54 = КСНУМКС, P <0.001) (Сл. КСНУМКСC). Подржавање прогресивног регрутовања ЦРФ-ЦРФ1 системима у историји исхране, а не ефектом акутне исхране, РКСНУМКС није смањио унос хране након једног излагања исхрани или повећао унос хране током првог повлачења из укусне хране (СКСНУМКС).

Сл. КСНУМКС. 

Ефекти ЦРФ-а1 антагонист рецептора РКСНУМКС (предтретман КСНУМКСх, КСНУМКС, КСНУМКС, КСНУМКС и КСНУМКС мг / кг, сц) на кумулативном уносу хране КСНУМКС-х (A) П фаза (након обновљеног приступа укусној храни), (B) Ц фаза (када су пацови повучени из укуса ...

Повлачење из повременог, проширеног приступа укусној храни такође може повећати понашање слично анксиозности (). Да тестирамо хипотезу да је ЦРФ1 рецептори су укључени у негативне емоционалне бихевиоралне знакове који прате повлачење из укусне хране, пацовима су давани РКСНУМКС (КСНУМКС, КСНУМКС мг / кг, сц, КСНУМКС-х предтретман) и тестирани у дизајну између субјеката у повишеном плус-лабиринту (КСНУМКС – КСНУМКС х након што је прешао са укусне исхране на храну. Штакори који су третирани са Цхов / палатабилним препаратима показали су мање отвореног времена него контроле са храном, што одражава анксиогени ефекат, током повлачења из КСНУМКС недеља бициклирања (Сл. КСНУМКСA), ефекат који још није примећен након само два циклуса повлачења (СКСНУМКС). Предтретман са РКСНУМКС-ом (КСНУМКС мг / кг, доза која је модулирала и преједање укусне хране и подцењивање хране) блокирала је смањење у истраживању Цхов / Палатабле пацова у дози која није променила понашање лавиринта у контролним контролама ( Распоред дијета × Доза: F1,43 = КСНУМКС, P <0.02; Сл. КСНУМКСА Лефт). Администрација РКСНУМКС-а није промијенила опћу активност мјерену као записи затворених руку. Према томе, РКСНУМКС је блокирао повећано понашање слично анксиозности повезано са повлачењем из интермитентног, проширеног приступа укусној храни, без промене понашања контрола, што сугерише регрутовање ЦРФ-а1 системи.

Сл. КСНУМКС. 

Ефекти ЦРФ-а1 антагонист рецептора РКСНУМКС (предтретман КСНУМКС х, КСНУМКС, КСНУМКС мг / кг, сц) на повишеном понашању плус-лабиринта (n = КСНУМКС) и прогресивни однос који одговара за мање укусну храну (n = КСНУМКС) код мужјака Вистар пацова повучених из укусне хране ...

Повлачење из интермитентног, проширеног приступа укусној храни такође може довести до мотивационих дефицита да би се добиле мање префериране дијете, потенцијални индекс хипоедоничног понашања (). Аналогно томе, одговор на мање пожељне појачиваче под прогресивним распоредом појачања претходно је коришћен за индексирање мотивационих дефицита који се виде током повлачења дроге (). Одредити укљученост ЦРФ-а1 Рецепторима, тестирали смо ефекте РКСНУМКС-а на перформансе пацова који су били подвргнути исхрани, да би добили мање преферирану храну под прогресивним распоредом. Потврђивање претходних налаза (, Цхов / Палатабле пацови третирани са носачем показали су смањену мотивацију да раде како би добили мање укусну храну, која се одражава смањеном тачком прекида и смањеним укупним одговорима емитованим у поређењу са Цхов / Цхов пацовима () (СКСНУМКС). Предтретман РКСНУМКС-ом (КСНУМКС мг / кг, доза ефикасна у повећању хипофагије цхов-а, смањење хиперфагије укусне хране и смањење анксиогеног-сличног понашања) селективно уклања недостатке у прогресивном омјеру у штакорима са цикличном промјеном хране у дози која је била неучинковита у контроли хране (прекидна тачка: Распоред дијета × Лек: F1,15 = КСНУМКС, P <0.02; укупан број одговора: Распоред исхране × Лек: F1,15 = КСНУМКС, P <0.01; Сл. КСНУМКСB, лево). Против алтернативног тумачења да је РКСНУМКС омогућио извођење у Цхов / Палатабле пацовима смањењем постингестиве засићења, РКСНУМКС је блокирао дефиците у одговору већ у КСНУМКС мин на сесију (Распоред исхране * Друг: F1,15 = КСНУМКС, P <0.05) (Сл. КСНУМКСБ Десно). Стога, ЦРФ1 антагонисти рецептора уклањају мотивационе дефиците у прогресивном односу који одговарају мање пожељним појачивачима окуса који се виде код животиња повучених из интермитентног, проширеног приступа храни која је веома укусна.

Да би се тестирала хипотеза да повлачење из укусне хране може активирати екстрахипоталамички ЦРФ систем повезан са стресом, нивои ЦРФ мРНК и пептида у централном језгру амигдале су мерени квантитативним ПЦР у реалном времену и РИА, респективно. Пацови су били обрађени за исхрану током КСНУМКС недеља или су се хранили непрекидно. Након анестезије и декапитације, мождани ударци из централног језгра амигдале су сакупљени током повлачења из и након обнављања приступа укусној исхрани. Повлачење укусне хране код Цхов / Палатабле пацова изазвало је петоструко повећање експресије ЦРФ мРНА у централном језгру амигдале у поређењу са Цхов / Цхов пацовима (Сл. КСНУМКСA). Насупрот томе, ЦРФ мРНК се вратила на нивое сличне контроли са обновљеним приступом укусној храни (F2,19 = КСНУМКС, P <0.01). Експресија ЦРФ мРНА у централном језгру амигдале није се променила када су пацови Цхов / Палатабле само једном циклирани (Цхов / Цхов вс. Цхов / Палатабле: 5.5 ± 2.2 наспрам 6.3 ± 1.7 нс), подржавајући прогресивно регрутовање ЦРФ- ЦРФ1 историје исхране, а не акутним ефектом исхране. Поред тога, експресија ЦРФ мРНК није се променила у нуцлеус аццумбенс, префронталном кортексу или инсуларном кортексу, подржавајући регионалну специфичност налаза (СКСНУМКС). Занимљиво је да нису запажене значајне промене у експресији ЦРФ мРНК у паравентрицуларном језгру хипоталамуса или у циркулишућем кортикостерону у истој тачки излучивања код Цхов / Палатабле пацова (Фигс. СКСНУМКС и СКСНУМКС), сугеришући хипотезу да су промене у амигдаларним, а не у хипоталамичким, ЦРФ системима стреса просечно субсервесне адаптације понашања. Штавише, ЦРФ пептидна имунореактивност у централном језгру амигдале животиња повучених из укусне исхране била је КСНУМКС% већа него код животиња које су храњене храном, али су се вратиле на контролне нивое храњене храном са приступом на укусну исхрану (F2,24 = КСНУМКС, P <0.01) (Сл. КСНУМКСB). Стога, повлачење укусне хране активирало је ЦРФ пептидни систем повезан са стресом у централном језгру амигдале, аналогно налазима у моделима повлачења лека и етанола (, ). Зато што је обновљени приступ укусној храни смањио активацију екстрахипоталамичког ЦРФ система у централном језгру амигдале, при чему је активација ЦРФ повезана са анксиозношћу (), садашњи резултати такође указују да би укусна храна могла добити негативна својства јачања ослобађањем негативних афективних посљедица апстиненције ().

Сл. КСНУМКС. 

Утицај укусне измене дијете (A) ЦРФ мРНА и (B) ЦРФ експресија пептида у централном језгру амигдале. Пацови (n = КСНУМКС) су били обрађени за исхрану током КСНУМКС недеља, а централно језгро амигдалских удараца је сакупљено. И ЦРФ мРНА и пептид ...

Да би се тестирала хипотеза да пацови повучени из укусне хране могу показати повећану осетљивост на ЦРФ1 антагонистичка модулација γ-аминобутирне киселине (ГАБА) сигнализације у централном језгру амигдале, која се јавља током повлачења етанола (), испитали смо ефекат РКСНУМКС-а на ГАБАергични пренос централног језгра амигдалних неурона у припреми резова. Мушки пацови Вистар (n = КСНУМКС) су били циклирани храном за КСНУМКС недеље и жртвовани након пребацивања на мање укусну храну. Базални ГАБАергични пренос у централном језгру амигдалне синапсе није се разликовао у односу на историју исхране (n = КСНУМКС ћелије) у свим интензитетима подражаја који се користе за изазивање ГАБА-инхибиторних постсинаптичких потенцијала (ИПСП). Међутим, КСНУМКС мин суперфузија са РКСНУМКС (КСНУМКС μМ) изазвала је веће смањење евоцираног ГАБАA-ИПСПс у централном језгру амигдалских неурона Цхов / палатабилних пацова (М ± СЕМ: КСНУМКС ± КСНУМКС%, n = КСНУМКС ћелије) него у контролама са храном (М ± СЕМ: КСНУМКС ± КСНУМКС%, P <0.05, n = КСНУМКС ћелије) (Сл. КСНУМКС). Након периода испирања КСНУМКС мин, ИПСП-ови обе групе вратили су се на сличне базне нивое. Према томе, конзистентно са претераном активацијом амигдалне ЦРФ-ЦРФ1 систем и ефекти који се виде током повлачења етанола (), пацови који су били циклизовани у исхрани показали су повећану осетљивост на инхибиторне ефекте ЦРФ-а1 антагониста рецептора на централном језгру амигдалне ГАБАергичне трансмисије.

Сл. КСНУМКС. 

Ефекти ЦРФ-а1 антагонист рецептора РКСНУМКС на ГАБАA-ИПСПс у централном језгру амигдале након историје алтернативног приступа прехрани код мужјака Вистар пацова (n = КСНУМКС) повучен из укусног приступа храни. (A) РКСНУМКС се значајно смањио ...

Дискусија

Колективни резултати дају функционалне доказе да повијест повременог, проширеног приступа укусној храни доводи до прогресивних, мотивационо релевантних неуроадаптација у екстрахипоталамичком ЦРФ-ЦРФ-у повезаном са стресом1 системима. Конкретно, селективни ЦРФ1 антагонист рецептора РКСНУМКС диференцијално и селективно утицао на храњење пацовима који су били циклички обрађени храном, повећавајући редовни унос хране и смањујући унос веома укусне хране по поновном приступу. Тхе ЦРФ1 антагонист рецептора такође селективно блокира повећано понашање слично анксиозности и мотивационе дефиците у одговору на мање пожељну храну која је виђена током повлачења из укусне исхране. Повлачењем приступа укусној исхрани повећан је ЦРФ ген и експресија пептида у централном језгру амигдале, ефекти који су елиминисани са обновљеним приступом. Поред тога, пацови који су били циклизовани у исхрани показали су повећану осетљивост на инхибиторне ефекте ЦРФ-а1 антагониста рецептора на ГАБАергичној трансмисији у централном језгру амигдале, што даље указује на претерану активацију ЦР-ЦРФ амигдале1 систем. Прекомерно конзумирање укусне хране након поновног приступа може бити резултат повећане активације ЦРФ система управо завршеног периода повлачења, који се види као повећана експресија ЦРФ и електрофизиолошка осетљивост на ЦРФ1 блокада рецептора у централном језгру амигдале. ЦРФ1 предтретман антагониста непосредно пре укусног приступа храни се тиме тумачи да би се супротставио почетно још присутној ЦРФ-ЦРФ1 прекомерно активирање система повлачења. Кратак временски ток укусне хране која се иначе може видети код нетретираних животиња () може одражавати временски ток којим се експресија, ослобађање и ефекти ЦРФ пептида нормализују када се поново успостави приступ укусној храни, као што се види у овој студији. Стога, повремено конзумирање укусних дијета може изазвати алостатско померање у системима награђивања мозга уз регрутовање ЦРФ-ЦРФ-а против награде1 системи у централном језгру амигдале.

Ови резултати имају импликације не само за принудну исхрану, већ и за мотивацију уопште. Поновљена активација хедонских система изазвала је процесе сличне противници у мозгу (тј. Регрутовање ЦРФ-а1 које су се разликовале од једноставног губитка функције у системима предајника награђивања. Такве неуроадаптације између система () такође се јављају током преласка на зависност од свих главних дрога злоупотребе (, ). Генерализација на подражаје који нису лекови у овој студији сугерише да мотивациони процеси могу бити поремећени код појединаца који доживљавају поновљене контрасте у интензитету хедонских стимуланса током времена (). Прилагодљиво, такви процеси могу преусмерити потрагу за храном и конзуматорно понашање ка енергетски густој храни с високом наградом, док истовремено обезвређују напоре да се добије мање енергетски богата храна са ниским наградама (или непрехрана), адаптација која је еволуционо корисна када постоје трошкови исхране (нпр. изложеност предаторима, ограничено време и енергетски ресурси). Међутим, у данашњем окружењу исти процеси могу покретати унос хране која промовише гојазност на штету мање укусних, али можда хранљивијих алтернатива.

Према томе, промене зависности у ЦРФ-у1 системи могу помоћи (i) унос енергетски густе укусне хране, (ii) конзумирање здравијих алтернатива, и (ИИИ) повезано негативно емоционално стање које настаје када се спријечи приступ укусној храни (, , -, ). Преведено на људско стање, активација ЦРФ система може промовисати повраћај исхране код гојазности и сродних поремећаја исхране, као и друге негативне мотивационе последице цикличне апстиненције од укусне хране.

Материјал и метод

Субјецтс.

Мушки пацови Вистар (n = КСНУМКС, КСНУМКС – КСНУМКС г, КСНУМКС дана) су добијени од Цхарлес Ривер и једнократно смештени по доласку у пластичне кавезе (КСНУМКС × КСНУМКС × КСНУМКС инча) у КСНУМКС х: КСНУМКС х обрнути светлосни циклус (КСНУМКС) : КСНУМКС х офф), влажност (КСНУМКС%) и температурно контролисани (КСНУМКС ° Ц) виваријум. Пацови су имали приступ храни са глодарима на бази кукуруза [Харлан Теклад ЛМ-КСНУМКС дијета КСНУМКС: КСНУМКС% (кцал) угљикохидрат, КСНУМКС% масти, КСНУМКС% протеина, енергија метаболизма КСНУМКС кал / КСНУМКС г] и вода ад либитум за КСНУМКС седмицу прије почетак експеримената. Експерименталне процедуре су се придржавале Националног института здравља Водич за његу и употребу лабораторијских животиња (НИХ Публицатион нумбер КСНУМКС – КСНУМКС, ревидирани КСНУМКС) и “Принципи лабораторијске заштите животиња” (хттп://ввв.нап.еду/реадингроом) / боокслабратс) и одобрен од стране Институционалног одбора за његу и употребу животиња Сцриппс Ресеарцх Институте.

Дроге.

РКСНУМКС је синтетисан као што је описано у Цхен ет ал. (). РКСНУМКС је висок афинитет (Ki = КСНУМКС нМ) селективни ЦРФ1 антагониста са физиохемијским својствима која су супериорна у односу на многе друге ЦРФ1 антагонисти (нпр. смањена логП и логД, повећана растворљивост у води) (). За тестирање, РКСНУМКС је прво растворен у КСНУМКС М ХЦл (КСНУМКС% коначне запремине), затим разблажен до коначног носача КСНУМКС% (вт / вол) КСНУМКС-хидроксипропил-П-циклодекстрина (Сигма-Алдрицх), титриран са НаОХ до пХ КСНУМКС. РКСНУМКС раствор је примењен сц (сц) у запремини КСНУМКС мЛ / кг.

Ад Либитум Диет Алтернатион.

Након аклиматизације, пацови су подељени у две групе које су одговарале за унос хране, телесну тежину и ефикасност исхране из претходних КСНУМКС – КСНУМКС дана. Једна група је добила храну са храном (“Цхов”) ад либитум КСНУМКС дана у недељи (Цхов / Цхов), а другој групи је обезбеђена храна ад либитум за КСНУМКС дана сваке недеље, а затим КСНУМКС дана ад либитум приступа високо укусним , са чоколадном аромом, високо сахарозном исхраном ("укусан"; Цхов / Палатабле). Укусна исхрана је нутриционистички комплетна, са чоколадом, високо сахароза (КСНУМКС% кцал), АИН-КСНУМКСА-базирана исхрана која је упоредива у макронутријентним пропорцијама и густини енергије са храном [ТестДиет; формула КСНУМКСТУЛ: са КСНУМКС% (кцал) угљених хидрата, КСНУМКС% масти, КСНУМКС% протеина, енергија метаболизма КСНУМКС кцал / г; формулисане као КСНУМКС-мг прецизне хранљиве пелете да би повећале његову предност, )]. За краткоћу, први КСНУМКС дани (само хлеб) и последњи КСНУМКС дани (чау или укусни према експерименталној групи) сваке недеље се помињу у свим експериментима као Ц и П фазе. Дијете никада нису биле доступне истовремено. Храна је била или Харлан Теклад ЛМ-КСНУМКС дијета КСНУМКС [КСНУМКС% (кцал) угљикохидрат, КСНУМКС% масти, КСНУМКС% протеина, енергија метаболизма КСНУМКС цал / КСНУМКС г] или КСНУМКСТУМ дијета формулисана као КСНУМКС- до КСНУМКС-г екструдиране пелете [КСНУМКС % (кцал) угљених хидрата, КСНУМКС% масти, КСНУМКС% протеина, енергија метаболизма КСНУМКС цал / КСНУМКС г; ТестДиет]. Слично претходним студијама, Харлан Теклад ЛМ-КСНУМКС цхов је коришћен у хранидбеним и повишеним експериментима са плус-лабиринтом ((), док је тестДиет КСНУМКСТУМ цхов () је коришћен у прогресивном односу, ЦРФ мРНА, ЦРФ пептидном садржају, кортикостерон РИА и електрофизиолошким експериментима.

Као што је претходно објављено (, релативне преференције у исхрани, израчунате као проценат дневног уноса (кцал) прве исхране у односу на другу исхрану, биле су следеће: КСНУМКСТУЛ Чоколадна дијета (шећерна укусна исхрана) насупрот Харлан ЛМ-КСНУМКС цхов (М ± СЕМ) преференца КСНУМКС ± КСНУМКС%) и КСНУМКСТУЛ чоколадна дијета (шећерна исхрана) наспрам КСНУМКСТУМ цхов исхране (М ± СЕМ преференца КСНУМКС ± КСНУМКС%).

Повишена Плус-Мазе.

Повишени плус-лабиринт тест је изведен као што је описано у Цоттоне ет ал. (). Штакори са Цхов / Палатабле су били подвргнути циклусу исхране током најмање КСНУМКС недеља, а затим су претходно третирани било са носачем или КСНУМКС мг / кг РКСНУМКС (-КСНУМКС х, сц) и тестирани КСНУМКС-КСНУМКС х након што су пребачени из укусне исхране у храну (П) → Ц фаза). Цхов / Цхов контролне пацове су тестиране истовремено у дизајну између субјеката (n = КСНУМКС). Храна за храну била је доступна до лансирања до времена тестирања. За више детаља, погледајте СИ Тект.

Прогрессиве-Ратио Сцхедуле оф Реинфорцемент фор Фоод.

Распоред прогресивног односа ојачања за храну је изведен као што је описано у Цоттоне ет ал. (). Животиње су добијале ад либитум А / И храну (екструдиране пелете КСНУМКС г) у својим кавезима код куће током читавог експеримента, осим ако није другачије назначено. Хранидачи су били КСНУМКС-мг пелете са чау-прецизношћу, идентичне по саставу екструдираној домаћој храни из кавеза. Сесије су завршене када испитаници нису попунили однос за КСНУМКС мин, са задњим завршеним омјером дефинираним као пријеломна точка. Штакори са Цхов / Палатабле су били подвргнути циклусу исхране током најмање КСНУМКС недеља, а затим су претходно третирани са РКСНУМКС (-КСНУМКС х, сц) у време преласка са укусне исхране на храну (П → Ц фаза). Цхов / Цхов контролне пацове су тестиране истовремено у дизајну између субјеката (n = КСНУМКС). Дозе РКСНУМКС-а (КСНУМКС, КСНУМКС мг / кг телесне тежине, сц) су дате у оквиру унутар субјеката, уравнотеженог дизајна током два циклуса исхране. За више детаља, погледајте СИ Тект.

Квантитативна Реал-Тиме ПЦР.

Пацови (n = 20) су током седмице вожени дијетом, анестезирани и обезглављени током два режима дијете (7. и 5. дан сваког недељног циклуса). Мозак је брзо уклоњен и коронално пресечен у мождани матрикс, а централно језгро амигдале, нуцлеус аццумбенс, оточни кортекс и префронтални кортекс су сакупљени на ледено хладној позорници. Укупна РНК је припремљена из сваког ударца мозга користећи стандардни протокол за екстракцију РНК из животињских ткива. Укупна РНК (7 μг) је затим обрнуто транскрибована у присуству Олиго (дТ) 1 према упутствима произвођача. Квантитативне РТ-ПЦР реакције спроведене су у запремини од 20 μЛ применом 20 μМ прајмера и 0.5 мМ МгЦл2. Резултати су анализирани методама другог деривата и изражени у произвољним јединицама, нормализовани према нивоима експресије референтног гена, ЦипА. Све РТ-ПЦР реакције за дату секвенцу су изведене унутар истог циклуса. За више детаља, погледајте СИ Тект.

Екстракција пептидне киселине и ЦРФ РИА.

Пацови (n = КСНУМКС) су били циклирани у исхрани најмање КСНУМКС недеља, анестезирани и одсечени током два услова исхране (дана КСНУМКС и КСНУМКС сваког седмичног циклуса). Мозгови су брзо уклоњени и нарезани коронално у матрици мозга, а централно језгро амигдалских удараца сакупљено је на ледено хладној фази. Екстракција пептидне киселине је пратила већ успостављену процедуру (). Имунореактивност сличну ЦРФ-у ткива је квантификована са осетљивом и специфичном РИА чврсте фазе адаптиране од Зоррилла ет ал. (). За више детаља, погледајте СИ Тект.

Цортицостероне РИА.

Пацови (n = 12) су били на дијеталном циклусу најмање 7 недеља и узоркована је репна крв током два дијететска стања (5. и 7. дан сваког недељног циклуса). Нивои имунореактивности сличних кортикостерону у плазми одређивани су комерцијално доступним комплетом РИА, према упутствима произвођача (МП Биомедицалс, Инц.) (). За више детаља, погледајте СИ Тект.

Електрофизиолошке студије

Слице Препаратион.

Централно језгро резова амигдала припремљено је као што је претходно описано (, ) од пацова (n = КСНУМКС / група) која је била подвргнута циклусу исхране најмање КСНУМКС недеља, анестезирана и одсечена КСНУМКС-КСНУМКС х након што је повучена из укусне хране. Мозгови су брзо уклоњени и стављени у ледено хладну вештачку цереброспиналну течност (аЦСФ) гасовану са КСНУМКС% О2 и КСНУМКС% ЦО2. Резови су исечени, инкубирани у конфигурацији интерфејса за око КСНУМКС мин, и потпуно потопљени и континуирано суперфузирани са топлим, гасовитим аЦСФ. Лекови су додати у аЦСФ из основних раствора да би се добиле познате концентрације у суперфузату. При коришћењу брзина суперфузије КСНУМКС – КСНУМКС мЛ / мин, концентрације лека достижу КСНУМКС% концентрације резервоара у КСНУМКС мин.

Електрофизиологија.

Забиљежили смо средишње језгре неурона амигдала с оштрим микропипетама користећи дисконтинуирани мод напона или струје. Већину неурона држали смо близу њиховог мембранског потенцијала. Подаци су добијени предпојачалом и похрањени за каснију анализу помоћу пЦламп софтвера. Фармаколошки изолован ГАБАA инхибиторне постсинаптичке потенцијале посредоване рецепторима (ГАБАA-ИПСП) су изазвани стимулацијом локално унутар централног језгра амигдале кроз биполарну стимулирајућу електроду док су суперфузирали блокаторе глутаматних рецептора ЦНККС и АПВ и ГАБАB рецептор блоцкер ЦГП КСНУМКСА. Да бисмо одредили параметре одговора за сваку ћелију, извршили смо улазно-излазни протокол. Примењен је опсег струја, почевши од прага прага потребног за изазивање ИПСП-а до напона потребног за изазивање максималне амплитуде. Нормализовали смо три интензитета стимулуса једнаких корака (праг, пола максимални и максимални) као КСНУМКС – КСНУМКС ×. Хиперполаризујуће и деполаризујуће струјне кораке (КСНУМКС-пА инкременти, КСНУМКС-мс трајање) су такође примењене за генерисање напонско-струјних (ВИ) крива. Квантификовали смо евоциране ИПСП амплитуде и ВИ одговоре помоћу Цлампфит софтвера. Све мере су предузете пре суперфузије са селективним ЦРФ-ом1 антагонист рецептора РКСНУМКС (КСНУМКС μМ), током његове суперфузије (КСНУМКС мин), и следећег испирања (КСНУМКС мин). За више детаља, погледајте СИ Тект.

Статистика.

Групна поређења су користила Студентова t-тестови (поређења у две групе) или анализа варијанце (АНОВА) (најмање три групе за поређење), потоње интерпретирано једноставном анализом главних ефеката или Невман-Кеулс поређењем након значајних омнибус ефеката (P <0.05). Подаци из експеримента храњења анализирани су тросмерним мешаним АНОВА-има са распоредом исхране као фактором између субјеката и дозом и фазом дијете као факторима унутар субјеката. Подаци из повишеног експеримента са плус-лабиринтом анализирани су двосмерним АНОВА-има са распоредом исхране и дозом као факторима између испитаника. За распоред прогресивног односа експеримента ојачања, тачка прекида и укупни одговори анализирани су двосмерним мешаним АНОВА-ом са дијеталним распоредом као фактор између субјеката и дозом као фактор унутар субјеката. Временски ток реаговања током првих 5 минута анализиран је тросмерним мешаним АНОВА-ом са распоредом исхране као фактором између субјеката и Дозом и временом као факторима унутар субјекта. Подаци из електрофизиолошких студија анализирани су са АНОВА између испитаника или са АНОВА унутар субјеката, уз поновљене мере, према потреби. Подаци РИА кортикостерона који су анализирани двосмерним мешаним АНОВА-ом са дијеталним распоредом као фактор између субјекта и дијеталном фазом као фактор унутар субјекта. Коришћени статистички пакети су Инстат 3.0, Присм 4.0 (ГрапхПад), Систат 11.0 и СПСС 11.5 (СПСС).

 

Додатни материјал

Признања.

Захваљујемо Мике Арендс-у за уредничку помоћ, Мари Гицхухи за административну помоћ, и Боб Линтз, Јеанетте Хелферс, Степхание Дела Цруз и Молли Бреннан за техничку помоћ. Овај рад је подржан од стране Националног института за дијабетес и дигестивне и бубрежне болести ДККСНУМКС, ДККСНУМКС и ПКСНУМКСДККСНУМКС; Национални институт за злоупотребу дрога ДАКСНУМКС; Национални институт за злоупотребу алкохола и алкохолизам Грантови ААКСНУМКС и ААКСНУМКС; Национални институт за неуролошке поремећаје и мождани удар ИТКСНУМКСНСКСНУМКС-КСНУМКСАКСНУМКС; Национални институт за старење Грант АГКСНУМКС; Национални институт за срце, плућа и крв Грант ХЛКСНУМКС; Медицинска фондација Еллисон; и Пеарсонов центар за истраживање алкохолизма и зависности. Део овог рада је подржан од стране Интрамурал Ресеарцх програма Националног института за злоупотребу дрога и Националног института за злоупотребу алкохола и алкохолизма. Ово је број рукописа КСНУМКС из Института Сцриппс Ресеарцх.

Фусноте

 

Аутори не објављују сукоб интереса.

 

 

Овај чланак је ПНАС Дирецт Субмиссион.

 

 

Овај чланак садржи информације на мрежи на адреси ввв.пнас.орг/цги/цонтент/фулл/КСНУМКС/ДЦСупплементал.

 

Референце

КСНУМКС. Волков НД, Висе РА. Како нас наркоманија може помоћи да схватимо гојазност? Нат Неуросци. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Цорвин РЛ. Бингеинг пацови: Модел повременог прекомјерног понашања? Апетит. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ПМЦ бесплатан чланак] [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Боггиано ММ, ет ал. Висок унос укусне хране предвиђа преједање неовисно о осјетљивости на гојазност: животињски модел мршавог и претилог храњења и гојазности са и без преједања. Инт Ј Обес. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Авена НМ, Рада П, Хоебел БГ. Докази за зависност од шећера: Бихевиорални и неурохемијски ефекти повременог уноса шећера. Неуросци Биобехав Рев. КСНУМКС; КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ПМЦ бесплатан чланак] [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Теегарден СЛ, Бале ТЛ. Смањење прехрамбених преференција доводи до повећане емоционалности и ризика за повратак хране. Биол Псицхиатри. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Цоттоне П, Сабино В, Стеардо Л, Зоррилла ЕП. Негативни контраст зависни од опиоида и конзумирање код пацова са ограниченим приступом храни која је веома пожељна. Неуропсицхопхармацологи. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Кооб ГФ. Улога можданих стресних система у овисности. Неурон. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ПМЦ бесплатан чланак] [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Кооб ГФ, Ле Моал М. Злоупотреба дрога: Хедонистичка хомеостатска дисрегулација. Наука. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Гхитза УЕ, Граи СМ, ​​Епстеин ДХ, Рице КЦ, Схахам И. Анксиогени лијек иохимбине поново успоставља укусну храну која тражи у моделу релапса пацова: Улога ЦРФКСНУМКС рецептора. Неуропсицхопхармацологи. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ПМЦ бесплатан чланак] [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Цоттоне П, Сабино В, Стеардо Л, Зоррилла ЕП. Повремени пожељни приступ храни смањује појачавајућу ефикасност хлеба код пацова. Ам Ј Пхисиол. КСНУМКС; КСНУМКС: РКСНУМКС – КСНУМКС. [ПМЦ бесплатан чланак] [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Цоттоне П, Сабино В, Стеардо Л, Зоррилла ЕП. Конзуматорне, анксиозне и метаболичке адаптације код женки пацова са наизменичним приступом преферираној храни. Псицхонеуроендоцринологи. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ПМЦ бесплатан чланак] [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Бернер ЛА, Авена НМ, Хоебел БГ. Бингеинг, самоограничење и повећана телесна тежина код пацова Са ограниченим приступом исхрани са слатким мастима. Гојазност. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Зоррилла ЕП, Кооб ГФ. Терапијски потенцијал антагониста ЦРФКСНУМКС за анксиозност. Екперт Опин Инвестиг Другс. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Царобрез АП, Бертоглио Љ. Етолошке и временске анализе понашања сличног анксиозности: Повишени модел плус-лабиринта КСНУМКС година. Неуросци Биобехав Рев. КСНУМКС; КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Маркоу А, ет ал. Животињски модели жудње за дрогом. Псицхопхармацологи. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Георге О, ет ал. Активација ЦРФ-ЦРФКСНУМКС система посредује повлачење никотинске само-примене код пацова зависних од никотина. Проц Натл Ацад Сци УСА. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ПМЦ бесплатан чланак] [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Веллс АС, Прочитај НВ, Лаугхарне ЈД, Ахлувалиа НС. Промене расположења након преласка на исхрану са ниским садржајем масти. Бр. Ј Нутр. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Цруз МТ, ет ал. Антагонисти ЦРФКСНУМКС рецептора блокирају ослобађање ГАБА изазваног етанолом у централној амигдали ин витро и ин виво. Алцохол Цлин Екп Рес. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКСсКСНУМКС ПКСНУМКСА.
КСНУМКС. Кооб ГФ, Блоом ФЕ. Ћелијски и молекуларни механизми зависности од дроге. Наука. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Флахерти ЦФ, Григсон ПС. Од контраста до појачања: Улога контингенције одговора у контрасту предвиђања. Ј Екп Псицхол. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Цхен Ц, ет ал. Дизајн КСНУМКС-диметил-КСНУМКС- (КСНУМКС-диметил-КСНУМКС-метилпиридин-КСНУМКС-ил) -КСНУМКС-дипропиламинопиразоло [КСНУМКС, КСНУМКС-а] пиримидин (НБИ КСНУМКС / РКСНУМКС) и односи структуре и активности серије моћних и орално активни антагонисти рецептора фактора који ослобађају кортикотропин. Ј Мед Цхем. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Цоопер СЈ, Францис РЛ. Ефекти акутне или хроничне примене хлордиазепоксида на параметре исхране коришћењем две текстуре хране на пацовима. Ј Пхарм Пхармацол. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Лабоуре Х, Саук С, Ницолаидис С. Ефекти промене текстуре хране на метаболичке параметре: Краткорочни и дугорочни обрасци исхране и телесна тежина. Ам Ј Пхисиол. КСНУМКС: КСНУМКС: РКСНУМКС – РКСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Цоттоне П, Сабино В, Стеардо Л, Зоррилла ЕП. ФГ КСНУМКС специфично смањује величину оброка и брзину и правилност непрекидног храњења код женки пацова: Докази да инверзни агонисти бензодиазепина смањују укус хране. Неуропсицхопхармацологи. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Лахмаме А, Григориадис ДЕ, Де Соуза ЕБ, Армарио А. Имунореактивност и рецептори за фактор ослобађања можданог кортикотропина у пет инбредних сојева пацова: Однос према принудном пливању. Браин Рес. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Зоррилла ЕП, Валдез ГР, Веисс Ф. Промене у нивоима регионалне ЦРФ-имунореактивности и плазма кортикостерона током продуженог повлачења лека код зависних пацова. Псицхопхармацологи. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Роберто М, Мадамба СГ, Мооре СД, Таллент МК, Сиггинс ГР. Етанол повећава ГАБАергични пренос и на пре- и постсинаптичким местима у централним амигдалним неуронима пацова. Проц Натл Ацад Сци УСА. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ПМЦ бесплатан чланак] [ЦроссРеф]
КСНУМКС. Роберто М, Мадамба СГ, Стоуффер ДГ, Парсонс ЛХ, Сиггинс ГР. Повећано ослобађање ГАБА у централној амигдали пацова зависних од етанола. Ј Неуросци. КСНУМКС: КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС. [ЦроссРеф]