Шабакаи Кортсиалӣ барои Департаменти рафтор ва муносибатҳои стрессҳо, ки аз ҷониби Cholecystokinin мувофиқат мекунад: Нақши ΔFosB (2014)

мавҳум

Фаъолияти нейронии коҳишёбандаи medial prefrontal medial (mPFC) бо депрессия, ки боиси мағлубшавии иҷтимоӣ ва рафтори ба изтироб дар мушҳо алоқаманд аст, алоқаманд аст. Бо вуҷуди ин, механизмҳои молекулавӣ, ки ба фаъолияти коҳишёфтаи mPFC ва нақши продепрессории он асос ёфтаанд, номаълум мемонанд. Мо дар ин ҷо нишон медиҳем, ки индуксияи омили транскриптсияи ΔFosB дар mPFC, хусусан дар минтақаи прелимбикӣ (PrL), ҳассосияти стрессро мерасонад. In Индуксияи ФосБ дар PrL пас аз стрессҳои шикастаи иҷтимоӣ ва аз ҳад зиёд фишори pressionFosB дар ин минтақа, вале на дар минтақаи наздик ба инфралимб (IL), дар мушҳои ҳассос ба таври интихобӣ рух дода, ҳассосияти баландро баланд кардааст. OsFosB ин эффектҳоро қисман тавассути тавассути рецептори холецистокинин (CCK) –B ба вуҷуд овард: Блоки CCKB дар mPFC як фенотипи тобоварро ба вуҷуд меорад, дар ҳоле ки маъмурияти CCK ба mPFC таъсири ансиогенӣ ва депрессантиро ба стрессҳои иҷтимоӣ тақлид мекунад. Мо қаблан дарёфтем, ки ҳавасмандии оптогенетикии нейронҳои mPFC дар мушҳои ҳассос якчанд вайроншавиҳои рафториро, ки пас аз стресси музмини иҷтимоии иҷтимоӣ дида мешаванд, иваз мекунад. Аз ин рӯ, мо фарз кардем, ки ҳавасмандкунии оптогенетикии пешгӯиҳои кортикалӣ таъсири патологии CCK-ро дар mPFC наҷот медиҳад. Пас аз инфузияи CCK дар mPFC, мо пешгӯиҳои mPFC-ро оптогенетикӣ ба амигдала ё ядроҳои афзор, ду сохти субкортикалӣ, ки ба танзими рӯҳ равона шудаанд, ҳавасманд кардем. Ҳавасмандкунии пешгӯиҳои кортикоамигдала таъсири ансиогении CCK-ро бозмедорад, гарчанде ки ба нишонаҳои дигари шикасти иҷтимоӣ ҳеҷ гуна таъсир ба мушоҳида нарасидааст. Баръакс, ҳавасмандкунии пешгӯиҳои corticoaccumbens барҳам додани пешгирии иҷтимоӣ ва норасоии афзалиятҳои сахарозаро аз ҷониби CCK баргардонд, аммо на таъсири ансиогенӣ. Дар якҷоягӣ, ин натиҷаҳо нишон медиҳанд, ки камбудиҳои иҷтимоӣ аз рафтори стресс, ки тавассути омили мутобиқшавии молекулавӣ дар mPFC бо иштироки ΔFosB ва CCK тавассути тарҳҳои кортикалӣ ба ҳадафи мушаххаси субкортикӣ амалӣ мешавандs.

Калидвожаҳои: accumbens, amygdala, изтироб, CCK, депрессия, mPFC

Муқаддима

Якчанд минтақаҳои анатомикӣ ва функсионалии бо ҳам пайвастаи майнаи мағзи сар, аз ҷумла medial prefrontal cortex (mPFC), гиппокампус, амигдала ва accumbens ядрои (NAc) дар миёнаравии нишонаҳои асосии депрессия ва изтироб ҳастанд (; ; ; ; , ; ; ). Масалан, набудани бозгашти кортикалӣ ба амигдала бо эҳсосоти дисфорикӣ алоқаманд аст ва ҳангоми табобати муваффақ ба сатҳи муқаррарӣ бармегардад. Таъсири антидепрессантӣ барангехтани амиқи майнаи кортигенси субгенуалии cingulate cingulate, майдони mPFC, бо барқароркунии фаъолияти кортикалӣ ва субкортикалии мағзи сар ба сатҳи муқаррарӣ алоқаманд аст (; ). Ба ин монанд, ҳавасмандкунии амиқи майнаи NAc антидепрессант ва анксиолитик мебошад ва бо мубодилаи моддаҳо дар NAc, амигдала ва mPFC алоқаманд аст (; ; ). Ин маълумотҳо як фарзияи шабакаи асабро дар бораи ихтилоли рӯҳӣ дастгирӣ мекунанд, ки дар онҳо табобати антидепрессант, новобаста аз механизмҳо, фаъолиятро дар ноҳиявҳои ғайрифаъолии кортикалӣ ва аз ҳад зиёд субкортикҳо ба эътидол меоранд (; ; ; ; ; ).

Моделҳои ҳайвон, ки дучори таъсири доимии фишори ҷисмонӣ ё равонӣ мебошанд, сохтор ва фаъолияти нейронҳоро дар mPFC халалдор мекунанд (), амигдала (), гиппокампус (), ва NAc (; ). Стресси музмини музминии музмини иҷтимоӣ, модели аз ҷиҳати ахлоқии рӯҳафтодагӣ (), фаъолияти нейронии mPFC-ро ҳамчун кам шудани ифодаёбии Zif268 ва c-Fos коҳиш медиҳад (; ). Ғайр аз он, ҳавасмандкунии оптогенетикии mPFC ин камбудиҳоро бозмедорад ва ба монанди антидепрессант таъсир мерасонад), аҳамияти mPFCро дар падидаҳои ба рӯҳ алоқаманд тасдиқ мекунад. Твай хояндаҳо mPFC, мисли приматҳо, рафтори эҳсосотиро қисман тавассути пешбиниҳо ба амигдала (BLA) ва NAc назорат мекунад; ; ). Бо вуҷуди ин, механизмҳои молекулавӣ, ки ин нақши mPFC миёнаравӣ мекунанд, номаълум боқӣ мемонанд.

Тадқиқоти мазкур дар аввал ба ΔFosB, омили устувори транскриптсия, ки дар NAc бо стресси шикасти музмини иҷтимоӣ, ки он ба ҳассосияти стресс муқобилат мекунад, равона карда шудааст (). Мо харитасозии ҳамаҷонибаи индуксияи «ФосБ» -ро пас аз стресс мағлуб карда, ёфтем, ки ба тадқиқоти қаблӣ монанд аст (; ; ), индуксияи қавӣ дар mPFC. Тааҷҷубовар буд, ки мо ёфтем, ки чунин индуксияи ФосБ дар mPFC ба ҳассосияти стресс мусоидат мекунад. Мо рецептор холецистокинин (CCK) -B-ро ҳамчун ҳадафи молекулавии ΔFosB дар mPFC муайян кардем, ки дар он нейротрансменти CCKergic ҳам таъсироти ансиогенӣ ва ҳам депрогеногении фишори иҷтимоӣ ба амал омадаанд (, ). Мо дарёфтем, ки фаъолияти CCK дар mPFC ҳам барои оқибатҳои изтироб ва ҳам рӯҳафтодии фишори иҷтимоӣ ҳам зарур ва ҳам кофист. Ғайр аз он, бо истифода аз равишҳои оптогенетикӣ, мо амалҳои мушаххаси CCK-ро дар зервазифаҳои mPFC нишон медиҳем: CCK дар пешбиниҳои mPFC-BLA аломатҳои изтиробро миёнаравӣ мекунанд, дар ҳоле ки CCK дар пешбиниҳои mPFC-NAc аломатҳои депрессияро миёнаравӣ мекунанд.

Мавод ва усул

Таҷриба 1: харитасозии ҳамаҷонибаи мағзи osFBB аз ҷониби стресси музмини иҷтимоӣ.

Мушҳои мардонаи ҳаштҳафтаи C57BL / 6J барои 10 рӯз пай дар пай ҳамчун стресси шикасти иҷтимоӣ дучор шуданд (тавре ки қаблан тавсиф шуда буд (; ; ) (ниг Љадвали 1; Намоиши 1A). Хулоса, ҳар як муш барои 1 дақиқа дар як рӯз муши селексионери нафақахӯр CD5 барои як шабонарӯз дучор шуд. Пас аз ҳамкории мустақим бо агрессор CD1 (5 дақиқа), ҳайвонҳо дар як ҳамсояи ҳамшабеҳи ҳамон қафас барои 24 h бо ҳассосӣ, вале ҷисмонӣ набуданд. Ҳайвоноти назоратӣ дар қафасҳои баробар ҷойгир карда мешуданд, вале бо аъзои ҳамон шиддат. Санҷишҳои ҳамкории иҷтимоӣ 24 соат пас аз рӯзи ниҳоии мағлубият гузаронида шуданд. Канорагирии иҷтимоӣ аз мушаки ношиноси CD1 тибқи протоколҳои нашршуда баҳо дода шуд. Вақтро дар “минтақаи ҳамкорӣ” (долони паҳнои 8-см, ки дар қафас ҷойгир аст) сарф карда шуд. Ҷудошавии мушҳои мағлубшуда ба зергурӯҳҳои ҳассос ва тобовар тавре ки дар боло тавсиф шуда буд, анҷом дода шуд (; ). Азбаски аксарияти мушҳои назоратӣ бо ҳамроҳии ҳадафи иҷтимоӣ назар ба замимаи холии ҳадаф вақти бештар сарф мекунанд, таносуби мутақобилаи 100 (вақти баробари дар минтақаи мутақобила дар ҳузури ва набудани ҳадафи иҷтимоӣ сарфшуда) ҳамчун қатъ истифода мешавад: мушҳо бо нишондиҳандаҳои <100 ҳамчун "қобили қабул" ва онҳое, ки холҳои ≥100 доранд, "тобовар" номгузорӣ шудаанд. Таҳлилҳои васеи рафторӣ, биохимиявӣ ва электрофизиологӣ эътибори ин зерпопулятсияҳои ҳассос ва тобоварро дастгирӣ мекунанд (; ; ).

Ҷадвали 1.  

Рақами миёнаи (± SEM) ядрои FosB-иммунореактивӣ дар як мм2 дар минтақаҳои мушакҳои назорат, осебпазир ва тобовар дар майдони 24 с пас аз стресси музмин (10 d) иҷтимоӣ
Тасвири 1.  

Inиндуксияи ФосБ дар mPFC ба ҳассосияти стресс мусоидат мекунад. A, Расмҳои фотомикографии намояндагии иммуногистохимияи osFosB дар mPFC 24 соат пас аз охирҳои эпизодҳои 10 шикасти иҷтимоӣ. B, Индуксияи osFosB дар GABAergic ба амал намеояд ...

Дарҳол пас аз озмоиши иҷтимоии иҷтимоӣ, мушҳо бо 4% параформальдегид / PBS дохил карда, анестезия карда шуданд ва комил карда шуданд. Ҳуҷайраҳо ба ΔFosB ҳисоб карда мешаванд+ нейронҳо дар NAc тавре, ки қаблан тавсиф шуда буданд, иҷро карда шуданд (). Майнаҳо бо 30% сахароза криопротектор карда шуда буданд ва қисмҳои короналӣ (30 мкм) дар микротроми яхкунӣ бурида шуданд ва барои иммуногистохимия коркард карда шуданд. Қисматҳои озод шинокунанда дар буфери басташаванда, ки дорои 0.3% Triton ва 3% саратони муқаррарии буз буданд, ҷойгир карда шуданд. OsFosB бо истифода аз антителаҳои харгӯшаи поликлоналӣ, ки бар зидди қисми N-терминалии сафеда (1 / 1000 Santa Cruz Biotechnology, каталог # sc-48) дар ҳамин буфер муайян карда шуда, пас бо антибиотикҳои бузи зидди харгӯшаи IgG ва авидин-биотин коркард карда шудааст усули мураккаби пероксидаза бо DAB ҳамчун субстрат (Laboratories Vector). Вақтҳои исобгирии диаминобензидин барои ҳама шароитҳо доимӣ буданд (100 s). Иловаро насб карда, обшор мекарданд ва сарпӯш мекарданд. Cells Ҳуҷайраҳои FosB-иммунопозитивӣ ранги ранги қаҳварангро дар ядро ​​нишон доданд ва аз ҷониби нозир як нобино ба шароити табобат бо истифода аз микроскоп (20 × magnification) ҳисоб карда шуд. Се қисми интихобшудаи мағзи сар, ки ҳар як майдони майнаи сарро барои ҳар як муш барои санчиш интихоб кардаанд. Тақсими анатомикии ҳар як минтақаи майна тавассути муқоиса кардани фасл бо атласи мағзи Paxinos муш карда шудааст. Шароит барои иммуногистохимия барои кам кардани сатҳи заминавӣ ба ҳадди ақал оптимизатсия карда шудааст, ки имкон медиҳад ҳуҷайраҳои ΔFosB-мусбат муайян карда шаванд. Арзиши миёна барои ҳар як ҳайвон ҳисоб карда шуд ва ҳамчун як мушоҳида алоҳида барои таҳлили оморӣ ҳисоб карда шуд. Гарчанде ки антиденои истифодашуда ҳам ΔFosB ва ҳам FosB-и дарозумрро эътироф мекунад, мо бо роҳи ғарб медонем, ки танҳо ΔFosB дар шароити омӯхташуда муайян карда мешавад (; ).

Таҷриба 2: муайянкунии фенотипи нейронии FosB-и иҷтимоӣ дар mPFC.

Барои таҳқиқи ифодаи ΔFosB дар нейронҳои кортикалии GABAergic, мо бофтаҳои аз мушҳои GAD2-tdTomato, ки дучори стрессҳои шикасти иҷтимоӣ ва барои ΔFosB будаанд, тавре ки дар боло тавсиф шудааст, истифода кардем (нигаред) Намоиши 1B). Мышҳо аз тарафи мушҳои зотпарварии GAD2-Cre тавлид шуданд (Gad2tm2 (cre) Zjh / J; JAX саҳҳомии 010802) () бо (B6.Cg-Gt (ROSA) 26Sortm9 (CAG-tdTomato) Hze / J; рақами саҳҳомии JAX 007908), ки tdTomato-и идорашавандаро иҷро мекунанд (варианти RFP).

Таҷриба 3: Таъсири рафтории BFBB аз ҳад зиёд дар прелимбик (PrL) ва infralimbic (IL) cortex.

Ҷарроҳии стереотаксикӣ дар мушҳои мардони калонсол (8 ҳафта) барои гузаронидани HSV-ΔFosB-GFP ё HSV-GFP ба минтақаҳои PrL ё IL-и mPFC гузаронида шудааст. Хулоса, мушҳо бо истифодаи омехтаи кетамин (10 мг / кг) ва ксилазин (1 мг / кг) анестезизатсия карда шуданд ва координатаҳои зерини стереотаксионӣ барои таҳвили вирусӣ барои PrL истифода шуданд: 1.8 мм (пешу / паси), 0.65 мм (паҳлуӣ) ), −2.2 мм (dorsal / ventral); ва барои IL: 1.9 мм (пеш / баъдтар), 0.75 мм (паҳлуии), −2.8 мм (dorsal / ventral) бо кунҷи 10 ° аз мобайн (нисбат ба брегма). Ҷамъи 0.5 мкл вируси тозашуда дар тӯли як давраи 5 дақиқа (0.1 мкл / мин) дуҷониба расонида шуд ва пас аз 5 дақиқа истироҳат карда шуд. Сомонаҳои тазриқи вирусӣ бо истифода аз усулҳои стандартии гистологӣ тасдиқ карда шуданд (нигаред ба) Намоиши 1C). Ҳарчанд имкон надорад, ки дар Mice бо IL дар мушҳо бо дақиқии комил, интихоб карда шавад Тасвири 1C тасвир кунед, ки ба мақсадҳои як минтақа ё ба минтақаи дигар ниҳоят имконпазир аст. Дар ҳақиқат, таъсири фарқкунандаи рафторӣ, ки ҳадаф аз ду минтақа гирифта шудааст (нигаред ба натиҷаҳо) ин равишро тасдиқ мекунад. Гурӯҳи аввали мушҳо танҳо дар таҷрибаҳои зерҳимояи шикасти иҷтимоӣ истифода шуданд (нигаред) Намоиши 1D). Се рӯз пас аз ҷарроҳӣ, мушҳо дар ҳамон рӯз ду шикасти пайдарпай ба даст оварданд ва баъдтар барои 24 баъдтар иҷтимоиёти иҷтимоӣ санҷида шуданд. Ин тартиби submaximal мағлубият қаблан тасдиқ карда шуд, то зуҳуроти фенотипҳои мутобиқатпазириро пас аз дастурҳои генетикӣ (; ).

Як дуввуми мушҳо барои озмудани авзои изтироб ва рафтори рӯҳафтодагӣ ба депрессия истифода шуданд (нигаред) Намоиши 1E – Ҷ). Як рӯз пас аз ҷарроҳӣ, мушҳо бо маҳлули сахароза 1% (w / v) ҷойгир карда шуданд. Рӯзи дигар, мушҳо метавонанд як шиша об ва як шишаи маҳлули сахароза 1% -ро интихоб кунанд, ки ҳар рӯз иваз карда мешавад. Истеъмоли маҳлули сахароза барои 24 h дар давоми рӯзи чорум ва панҷум пас аз ҷарроҳӣ чен карда шуд ва ҳамчун фоизи миқдори умумии моеъи қабулшуда ифода ёфтааст. Мушҳо дар майдони кушод (рӯзи 3), лазерии плюс лазерӣ (рӯзи 4), равобити иҷтимоӣ (рӯзи 5 саҳар) ва шиноварии маҷбурӣ (рӯзи 5 нисфи рӯз) дар асоси протоколҳои нашршуда санҷида шуданд (). Мо дарёфтем, ки бо ин тартиби санҷиш, натиҷаҳои санҷишҳои баъдӣ ба санҷишҳои қаблӣ таъсир намерасонанд (). Фаъолияти мушҳо дар майдони кушод барои 5 дақиқа бо истифодаи системаи видеокамера (Ethovision) дар шароити нури сурх сабт шудааст. Лабораторияи болоӣ аз ду хати интиқоли рости ҳамвор иборат буда, 60 см аз болои фарш ҷойгир шудааст ва ба ду силоҳи кушода ва ду пӯшида тақсим мешавад. Мушҳо ба таври ҷудогона дар маркази лабиринт ҷойгир карда шуда буданд ва дар тӯли 5 дақиқа ҳар як бозуи озодро таҳқиқ мекарданд. Дар озмоишҳои кушод ва баландошёнаи лабиринт, вақти дар марказ ва яроқҳои кушод мутаносибан ҳамчун индекси баръакси посухҳои марбут ба изтироб истифода мешуд. Озмоиши маҷбурии шиноварӣ дар тӯли як дақиқа 5 дақиқа гузаронида шуд. Вақти зиёдшудаи беқурбшавӣ дар озмоиши маҷбурии шиноварӣ ҳамчун рафтори пропрессионӣ маънидод карда шуд. Ин озмоиши рӯзии 1 дар мушҳо ба таври васеъ истифода шудааст ва ҳамчун ченаки дурустии пешгӯишаванда тасдиқ карда мешавад, зеро дар он маводи мухаддир антидепрессант вақти ҳаракатро коҳиш медиҳад.

Дар ниҳоят, як гурӯҳи ҷудогонаи мушҳо дар дохили MOFC бо HSV-osFosB сӯзонда шуд ва пас аз мағлубияти субсимсималӣ барои муоширати иҷтимоӣ санҷида шуд (нигаред ба Намоиши 1K).

Векторҳои HSV аз Рачаэл Нев (Институти Технологияи Массачусетс) ба даст оварда шуданд. Генҳои шавқовар (osFosB ва GFP) таҳти як промоутер CMV мебошанд. Ин векторҳо дар нашрияҳои пешин ба таври васеъ тасдиқ карда шудаанд (масалан, ).

Озмоиш 4: таъсири стрессҳои музмини иҷтимоӣ ба сатҳи ресепторҳои CCKB дар mPFC.

Дар 24 соат пас аз озмоиши иҷтимоии иҷтимоӣ, мағзҳо зуд тоза карда шуданд ва ба таври серӣ иловарӣ карда шуд ва mPFC босуръат ҷудо шуда, дар болои ях ях бастааст (нигаред) Намоиши 2A,B). Ҷудокунии RNA, qPCR ва таҳлили маълумот тавре ки қаблан тавсиф шуда буданд (; ). РНК бо реагенти ТриЗол (Invitrogen) ҷудо карда шуда, минбаъд бо маҷмӯаҳои микро RNAeasy аз QIAGEN пок карда шуд. Ҳама намунаҳои RNA муайян карда шуданд, ки арзиши 260 / 280 ва 260 / 230 ≥1.8 мебошанд. Тарҷумаи баръакс бо истифодаи iScript (Bio-Rad) анҷом дода шуд. qPCR бо истифода аз SYBR Green (Quanta) бо системаи биосистемаҳои татбиқшудаи 7900HT RT PCR бо параметрҳои сикли зерин иҷро карда шуд: 2 дақ дар 95 ° C; Даврҳои 40 аз 95 ° C барои 15 s, 59 ° C барои 30 s ва 72 ° C барои 33 s; ва гармидиҳии дараҷабандишуда ба 95 ° C барои тавлид кардани хатҳои диссоциация барои тасдиқи маҳсулоти ягонаи PCR. Маълумот тавассути муқоисаи C таҳлил карда шудt аҳамияти ҳолати табобат (мушҳои ҳассос ё тобовар ё муқовимат ба HSV-ΔFosB vs HSV-GFP) бо ΔΔCt метод (). Дастурҳои qPCR инҳоянд: ΔФосБ, пеш, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT ва баръакс, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG; CCKB, пеш, ACCCTTTATGCGGTGATCTTTC ва баръакс, ATGAGCACGTTTCCGCCAA; CCK, пеш, AGCGCGATACATCCAGCAG ва баръакс, ACGATGGGTATTCGTAGTCCTC; GAPDH, пеш, AGGTCGGTGTGAACGGATTTG ва баръакс, TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA.

Тасвири 2.  

Блокадаи ресепторҳои CCKB дорои пресурентсия, таъсири антидепрессант аст. A, Ғалабаи иҷтимоӣ сатҳи ресепторҳои CCKB-ро дар mPFC танҳо дар мушҳои устувор паст мекунад (n = 8 – 10). *p <0.05, дар муқоиса бо назорат (ANOVA яктарафа). **p <0.05 ...
Озмоиш 5: таъсири ofFosB ба рецепторҳои CCKB ва cFos.

Мушҳо дар дохили PrL бо HSV-ΔFosB сӯзандору шуданд. Дар 72 соат пас аз ҷарроҳӣ, дар авҷи изофабори вирусӣ, маконҳои тазриқӣ дар зери микроскоп флуоресцентҳо ҷудо карда шуданд (нигаред ба Намоиши 2C). Ҷудокунии RNA, qPCR ва таҳлили маълумот тавре ки дар боло тавсиф карда шуд. qPCR дастурҳои зерин мебошанд: c-fos, forward, AATCCGAAGGGAACGGAATAAGA ва баръакс, TGCAACGCAGACTTCTCATCT.

Таҷриба 6: Таъсири блокадаи ΔFosB ба сатҳи ресепторҳои CCKB ва тобоварӣ ба омилҳои фишори равонӣ.

Мушҳои калонсолон бо HSV-GFP ё HSV-unJDD ба PrL сӯзонда шуданд (нигаред ба Намоиши 2D-F). ΔJunD як мутанти ихтисоршудаи N-терминали JunD мебошад, ки ҳамчун антагонисти доминатори манфии ΔFosB амал мекунад. Mice барои 5 d дар як рӯз ду маротиба ба шикасти иҷтимоӣ дучор шуданд. Ин протоколи зудамали шикасти иҷтимоӣ, ки бо давраи ифодаи трансгенсии ҳадди HSV кӯтоҳ карда шудааст, қаблан истифода шуда, барои баланд шудани сатҳи гурезии иҷтимоӣ нишон дода шуда буд (). Дар 24 соат пас аз эпизоди охирин, мушҳо бе наркоз сар бурида шуданд, то таъсири анестетикҳоро ба сатҳи сафедаи нейронҳо пешгирӣ кунанд. Бофтаи сироятёфта дар ингибиторҳои дорои PBS дорои протеаза (Роше) ва фосфатаза (Сигма-Олдрич) бо истифода аз зарбаи 15-дараҷа хориҷ карда шуд ва фавран дар яхи хушк ях карда шуд. Намунаҳо бо sonication сабук дар буферии тағирёфтаи RIPA якхела карда шуданд: пойгоҳи 10 мм Tris, 150 мм хлориди натрий, 1 мм EDTA, 0.1% SDS, 1% Triton X-100, 1% deoxycholate натрий, pH 7.4 ва протеаза ва фосфатаза ҳамчун боло. Пас аз илова кардани буфери Лаеммли, сафедаҳо дар гелҳои градиенти 4-15% полиакриламаид (Criterion System; Bio-Rad) ҷудо карда шуданд ва блотинги Ғарбӣ бо истифода аз системаи Одиссей (Li-Cor) мувофиқи протоколҳои истеҳсолкунанда гузаронида шуд. Мембранаҳо бо антителаи ретсептории CCKB (1/1000, Acris, каталоги # AP01421PU-N) холӣ карда шуданд. Гурӯҳи дигари мушҳо бо AAV-ΔJunD ё AAV-GFP дар PrL сӯзандор карда шуданд ва сипас, пас аз 5 ҳафтаи ҷарроҳӣ барои ифодаи максималии трансген, мушҳо ба протоколи шикасти субмаксималӣ супорида шуданд. Онҳо барои ҳамкории иҷтимоӣ 24 соат пас аз шикасти охирин озмоиш карда шуданд.

Таҷриба 7: Таъсири антагонисти дохили-mPFC CI-988, як CCKB, ба пешгирии иҷтимоӣ ва ангедония, ки боиси стресс аст.

Каннулаи дутарафа (1.0 мм каннула то масофаи каннула, 1.8 мм пешина, инжектор −2.2 мм dorsal / ventral) ҳадафи mPFC ба мушҳои ҳассос ҷойгир карда шуданд (нигаред ба Намоиши 2G,H). Пас аз як ҳафта пас аз ҷарроҳӣ, 10 ng CI-988 бевосита ба mPFC ворид карда шуд ва ҳадафаш асосан PrL буд. Пас аз он, мушҳо барои рафтори иҷтимоии онҳо озмуда шуданд. Афзалияти сахароза барои боқимонда 24 соат чен карда шуд. CI-988 (Tocris Bioscience) дар намак шӯр карда шуда, алвоктӣ ва яхкарда шудааст. Ширинии ниҳоӣ дар рӯзи таҷриба омода карда шуд. Озмоиши иловагӣ дар мушҳои ҳассос бо CI-988, ки ба таври дохилӣ ба (2 мг / кг) 30 дақиқа пеш аз санҷиши алоқаи иҷтимоӣ гузаронида шудааст, гузаронида шуд.

Озмоиш 8: таъсири агонисти CCKB ба ҳассосияти фишори иҷтимоӣ ва баръакс бо роҳи ҳавасмандкунии оптогенетикии пешгӯиҳои mPFC ба BLA ё NAc.

AAV-CaMKII-ChR2-EYFP ё AAV-CaMKII-EYFP ба рости mPFC ворид карда шуда буданд, боз ҳам пеш аз ҳама ба PrL нигаронида шуда буд (ниг. Намоиши 3A –G). Панҷ ҳафта пас нахҳои оптикӣ дар рости NAc (1.4 пеш / паси, 2.6 паҳлуии, −4.7 дорсал / вентралӣ дар кунҷи 25 ° аз мобайн) ё BLA (−1.6 пешӣ / баъдӣ, 3.1 паҳлуии, al4.7 dors) ҷойгир карда шуданд / ventral бидуни кунҷ аз мобайн). Дар давоми ҳамон як ҷарроҳӣ каннули дуҷониба ба mPFC ҷойгир карда шудааст (ба боло нигаред). Канула ва нахҳо ба косахона бо сементи дандон пайваст карда шуда буданд. Сипас ба Mice иҷозат дода шуд, ки 1 ҳафта пеш аз оғози таҷрибаҳои рафтор барқарор карда шаванд. Мушҳо ба шикасти submaximal дучор шуда, пас 24 h баъдтар барои ҳамкориҳои иҷтимоӣ, бевосита пас аз лабони баланд ва лабиринти баланд ва бартарии сахароза барои 24 h боқимонда санҷида шуданд. Дар 30 дақиқа пеш аз санҷиши алоқаи иҷтимоӣ, нисфи мушҳо бо CCK-8 (10 ng) ба mPFC ворид карда шуданд, дар ҳоле ки нисфи дигар воситаҳои нақлиёт (шӯр) буданд. Мушҳо дар ҷуфтҳо санҷида шуданд (воситаи- ва муши бо CCK-8 муносибаткардашуда, бо AAV-GFP ё AAV-ChR2). CCK-8 (Сигма) дар шӯр гудохта, аликотизатсия карда ва яхкарда шудааст. Ширинии ниҳоӣ рӯзи таҷриба омода карда шуд.

Тасвири 3.  

Ҳассосияти фишори CCK-8, ки аз фишор вобаста аст, аз пешгӯиҳои мушаххаси кортикалӣ вобаста аст. A, Дар 24 соат пас аз шикасти субмаксималии иҷтимоӣ ва дақиқаҳои 30 пас аз инфузияи CCK-8, минтақаҳои пешгӯии mPFC ҳангоми санҷиш барои ҳамкории иҷтимоӣ лазерӣ шудаанд. Инфузияи CCK-8 ...

Мутобиқи протоколҳои нашршуда ҳавасмандкунии оптикӣ амалӣ карда шуд (). Фибрҳои оптикӣ (Thor Laboratories) ба таври хроникӣ ворид карда шуда тавассути адаптери FC / PC ба диодҳои лазерии 473 nm (Crystal Lasers, BCL-473-050-M) пайваст карда шуданд. Барои тавлиди набзи нури кабуд стимулятор (Agilent, #33220A) истифода шуд. Дар давоми ҳама ҳавасмандкунӣ, 40 ms инъикоси 100 Hz (паҳнои хӯшае аз хNUMX ms) ҳар 9.9 с ба минтақаҳои терминал дар BLA ё NAc танҳо дар тӯли озмоиши иҷтимоии иҷтимоӣ, тақлид карда ба шакли шабеҳи кортикалӣ фаъолият. Шиддати нури нахи оптикӣ қабл аз ҳар истифода аз санҷиши рӯшноӣ санҷида шуд (Thor Laboratories, S3A) ва шиддатнокии нур ∼130 мВт буд. Ин протоколи ҳавасмандкунӣ, ки қаблан электрофизиологӣ тасдиқ карда шуда буд (), мусодираро дар асоси мушоҳидаҳои рафторӣ ва набудани ифодаи c-Fos берун аз минтақаҳои оптогенетикӣ ҳавасманд накардааст ().

Таҷриба 9: таъсироти агонисти CCKB ба фаъолияти нейронии mPFC, ки тавассути сатҳи c-Fos mRNA чен карда мешавад.

Каннаҳои дутарафа ба мушҳои калонсолон гузошта шуда буданд, ки ҳадафи mPFC буданд (нигаред ба Намоиши 3H). Пас аз як ҳафтаи истироҳат, мушҳо ба шикасти субмаксималӣ гирифтор шуданд ва баъдтар бо CCK-8 24 сӯзонида шуданд. Пунктҳои mPFC баъд аз сукути маводи мухаддир 30 дақиқа гирифта шуданд ва намунаҳо барои таҳлили mRNA тавре ки дар боло тавсиф шудаанд, омода карда шуданд.

Хонаи чорво.

Мушҳои мардонаи ҳаштмоҳаи C57BL / 6J (Лабораторияи Ҷексон) истифода мешуданд. Ҳама мушҳо ҳадди аққал 1 ҳафта қабл аз коркарди таҷрибавӣ дар маконҳои зист ҷойгир буданд ва дар 23 ° C – 25 ° C дар 12 с / даври торик нигоҳ дошта мешуданд (дар 7: 00 AM) бо Озодӣ " дастрасӣ ба ғизо ва об. Таҷрибаҳо мутобиқи дастурҳои Ҷамъияти неврологӣ ва Кумитаи институтсионалии нигоҳубин ва истифодаи ҳайвонот дар Мактаби тиббии Икаҳ дар кӯҳи Синай гузаронида шуданд.

Таҳлили оморӣ.

Маълумотҳои намоишшуда ҳамчун миёнаи ± SEM ифода карда мешаванд (ҳамчун қатори хато нишон дода шудаанд). АНВА-ҳои яктарафа барои муқоиса кардани воситаҳо байни мушҳои назоратӣ, тобовар ва тобовар дар таҳлили иммуногистохимиявӣ, биохимиявӣ ва рафторӣ истифода бурда шуданд. Як роҳи ANOVA -ҳо барои муқоиса кардани воситаҳо дар байни GFP-назорат ва ΔFosB изофабор дар PrL ё IL дар майдони кушод, баландошёна лабиринт, шиноварии маҷбурӣ ва санҷишҳои бартаридошта истифода шуданд. Барои муқоиса кардани воситаҳо дар байни GFP-назорат, ΔFosB-PrL ва ΔFosB-IL дар санҷиши таъсири иҷтимоӣ. Барои муқоисаи эффектҳои CCK-8 бо ҳама ё бе омезиши оптогенетикӣ дар ҳама таҷрибаҳои рафторӣ ва инчунин таъсири инфузияи ΔFBB ё CI-988 ба канорагирии иҷтимоӣ истифода бурда шуд. Дар мавриди зарурӣ, баъди таваллуд таҳлилҳо бо истифода аз Бонферронӣ гузаронида шуданд баъди таваллуд озмоиш. Донишҷӯён t санҷишҳо барои муқоисаи воситаҳои таъсири инфузияи CI-988 ба афзалияти сахароза ва озмоишҳои маҷбурии шиноварӣ ва CCK-8 ба c-Фос сатҳи mRNA. Фарқияти байни шароити озмоишӣ кай ҳисоб карда шуданд, ки аз ҷиҳати оморӣ аҳамиятноканд p ≤ 0.05.

Натиҷаи

Харитасозии майнаи индуксияи «ФосБ» тавассути фишори доимии шикасти иҷтимоӣ

Мо аввал индуксияи ФосБ тавассути иммуногистохимия дар мушҳои назоратшаванда, тобовар ва тобоварро пас аз ҷараёни стресси музмин (10 d) -и иҷтимоӣ, бо таваҷҷӯҳ ба минтақаҳои мағзи сар ва мобайнои мобайнӣ, ки қаблан дар аксуламалҳои фишор оварда мешуданд, омӯхтем. Баъд аз ҳодисаи охирини шикасти ҳайвонҳо 24 соат таҳлил карда шуд. Стрессҳои музмини иҷтимоӣ ΔFosB-ро дар минтақаҳои сершумори майна бо шакли мушаххас байни мушҳои устувор ва ҳассос мушоҳида мекунад. Чунон ки нишон дода шудааст Љадвали 1 ва Тасвири 1A, IL, BLA, gyrus дандонпизишкии гиппокампус, стриатуми дорсалӣ ва ядрои NAc дар мушҳои устувор фаъолшавии афзалиятнокро нишон доданд; чунин натиҷаҳо дар NAc бо натиҷаҳои интишоршуда мувофиқат мекунанд (). Дар муқоисаҳои ҳайратангез, мушҳои ҳассос дар PrL, septum паҳлуӣ ва ядроҳои бистарии stria terminalis бештар индуксия нишон доданд. Якчанд минтақаҳои мағзи сар нишон доданд, ки "мушакҳои ба ҳам тобовар ва тобовар индуксияи" ФосБ "доранд; ба он шомили орбитофронталии орбитал (OFC, минтақаи дигари PFC), ҷилди NAc, рапси дорсалӣ ва хокистарии перигекуативӣ (PAG) дохил мешаванд.

Барои муайян кардани зертропи нейронӣ, ки индуксияи ΔFosB дар минтақаҳои кортикалӣ доранд, мушҳои GAD2-tdTomato ба стресси музмини музминии иҷтимоӣ гирифтор шуданд. Immun Иммунитети фосБ дар мушҳои ҳассос дар нейронҳои GABAergic муайян карда намешуданд (Намоиши 1B), ки бозёфтҳои қаблии индуксияи мушаххаси osFosB -ро дар нейронҳои пирамидаҳои кортикалии пас аз дигар шаклҳои стресс музмин тасдиқ мекунанд (). Дар мушҳои назоратнашуда, сатҳи ибтидоии "ФосБ дар саросари майна ба сатҳи таҳқиқотҳои қаблӣ монанд буданд (, ) бо сатҳи НАc ва striatum dorsal дар муқоиса бо дигар минтақаҳо, ба истиснои gyrus дандонпизишкӣ, ки сатҳҳоро бо сатҳи минтақаҳои стриаталӣ муқоиса мекунанд (Љадвали 1).

ΔФосБ дар mPFC ба ҳассосияти стресс мусоидат мекунад

Барои пайгирӣ намудани ин бозёфтҳо, мо ба PrL тамаркуз кардем, зеро мо қаблан нишон дода будем, ки фаъолсозии оптогенетикии ин минтақа дар парадигми шикасти иҷтимоӣ ба мисли антидепрессант таъсир расонд (). Барои санҷидани оқибатҳои функсионалии индуксияи «ФосБ дар ин минтақаи мағзи сар, мо ба таври шадид аз« ФосБ »дар PrL мушҳои назоратӣ (Намоиши 1C) ва онҳоро ба курси фаръии фишори шикасти иҷтимоӣ гирифтор кард, ки он дар ҳайвонҳои муқаррарӣ гурезиши иҷтимоиро водор намекунад. Мушҳои аз ҳад зиёд фишоровардашуда socialFosB дар PrL нисбат ба мушҳои назоратшавандаи GFP-эмгузаронидашуда ба шикасти иҷтимоӣ бештар дучор шуданд, зеро онҳо пас аз мағлубияти субсимсималӣ рафтори иҷтимоӣ дар канор гузоштанд (ҳамкорӣ, F(2,38) = 2.847, p > 0.05, таъсири асосии вирус, F(2,38) = 6.013, p <0.05; Санҷиши баъди Bonferroni t = 2.447, p <0.05) (Намоиши 1D). Ин мушҳо инчунин дар озмоиши маҷбурии шиноварӣ дар як рӯз 1 рӯза нишон доданд,F(2,31) = 6.448, p <0.05; Санҷиши баъди Bonferroni t = 3.518, p <0.05) (Намоиши 1E), таъсири баръакс аз он ки маводи доруи антидепрессант тавлид мешавад. Баръакси ин, "изофаи фишори фишор дар PrL якчанд чораҳои ибтидоии рафтори изтироб, афзалияти сахароза, таъсири иҷтимоӣ ё фаъолияти локомотивро тағир надод (Намоиши 1F – Ҷ). Дар якҷоягӣ, ин бозёфтҳо фарзияи дастгирии индукси интихобии osFosB -ро дар PrL мушҳои ҳассос ба осебпазирии стресс ва оқибатҳои харобиовари он мусоидат мекунанд. Баръакси ин, изофаи фишори «ФосБ дар минтақаи дигари mPFC, IL ба рафтори ибтидоии эҳсосотӣ ё посухҳо ба стресс мағлубияти иҷтимоӣ таъсире накард. (Намоиши 1Д – Ҷ), дар ҳоле ки ΔFFB изофаи фишор дар medial OFC ба мусоидат ба тобоварӣ ба шикасти музмини иҷтимоӣ майл дошт, гарчанде ки ин таъсир аҳамияти омориро касб накардааст (ҳамкорӣ, F(1,31) = 1.741, p > 0.05, таъсири асосии вақти ҳамкорӣ, F(1,31) = 14.170, p <0.05; Санҷиши баъди Bonferroni t = 3.860, p <0.05 дар дохили гурӯҳи GFP; t = 1.960, p <0.05 дар доираи ΔFosB; таъсири вирус, t = 2.447, p <0.05) (Намоиши 1K).

ΔFosB ба индуксияи CCKB дар mPFC мусоидат мекунад

Ҳайати зиёди далелҳо чунин ақидаро дар бар мегиранд, ки CCK, нейропептити фаровони мағзи сар дар механизми нейробиологии стресс ва изтироб нақши муҳим дорад (). Аз ҷумла, баровардани CCK дар mPFC ҳангоми стрессҳои иҷтимоӣ дар каламушҳо бо рафтори ба изтироб алоқаманд (). Гарчанде ки иштироки CCK дар депрессияи инсон номуайян аст, далелҳои охир ба нақши он дар рафтори иҷтимоии депрессия дар депрессия дар каламушҳо ишора мекунанд (). Ҳамин тавр, мо фарз кардем, ки тағирот дар сатҳи ресепторҳои CCK ё CCKB (инчунин бо CCK2 маъруф аст) дар mPFC метавонад ба фарқияти байни мушҳои ҳассос ва тобовар мусоидат кунад. Дар 48 соат пас аз ҳодисаи шикасти ниҳоӣ, сатҳи CCKB mRNA танҳо дар mPFC аз мушҳои тобовар коҳиш ёфт (F(2,18) = 8.084, p <0.01; Bonferroni баъди санҷиш, t = 3.104, p <0.05 ва назорат; t = 5.113, p <0.01 ва ҳассос) (Намоиши 2A). Дар сатҳи CCR mRNA дар мушҳои ҳассос ё тобовар ҳеҷ фарқият мушоҳида нашудааст (маълумот нишон дода нашудааст). Мо афзоиши in -ро мушоҳида кардемФосБ сатҳи mRNA танҳо дар мушҳои ҳассос мувофиқ ба маълумотҳои сафеда, ки дар боло гузориш дода шудааст (F(2,18) = 5.246, p <0.01; Санҷиши баъди Bonferroni t = 3.336, p <0.05 ва ҳассос; t озмоиш t(12) = 2.138, p <0.05 нисбат ба назорат) (Намоиши 2B). Зеро ΔFosB транскрипсияи генҳои сершуморро танзим мекунад (; ), мо фикр кардем, ки он метавонад ифодаи CCKB mRNA-ро танзим кунад. Барои ҳалли ин савол, мо аввал ΔFosB-ро дар PrL аз ҳад зиёд фишурда кардем ва дарёфтем, ки ин амалиёт сатҳи CCKB mRNA-ро дар ин минтақа баланд мекунад (t(12) = 2.012, p <0.05 ва GFP) (Намоиши 2C). Ҷолиб аст, ки мо низ коҳишро мушоҳида кардем c-Фос сатҳи mRNA пас аз xFosB over overpression (t(11) = 3.382, p <0.01) (Намоиши 2C). Т.бозёфтҳои гизӣ боз ҳам гувоҳӣ медиҳанд, ки «индуксияи ФосБ дар PrL мушҳои ҳассос механизми фаъоли ҳассосият тавассути пешгирии фурӯпошии CCKB дар мушҳои устувор мебошад.

Барои таҳкими минбаъдаи ин мушоҳидаҳо, мо "Junun", шарики ҳатмии "FosB" -ро, ки домени трансактивии худро надоранд ва ба ин васила ҳамчун антагонисти бартаридоштаи манфӣ амал мекунад ва таъсири онро ба зуҳуроти стрессии CCKB муайян кардем. Мо тасдиқ кардем, ки стрессҳои музмини музминии иҷтимоӣ дар сатҳи протеини CCKB дар PrL мушҳои ҳассос афзудаанд (t озмоиш t(12) = 2.289, p <0.05 нисбат ба назорат) (Намоиши 2D,E). Гузашта аз ин, чунин индукс аз ҷониби "overdesspression Junun дар ин минтақа комилан манъ карда шуд (F(2,20) = 6.306, p <0.01, пас аз санҷиши Bonferroni t = 3.615, p <0.01) (Намоиши 2D,E), ки гипотезаро, ки ΔFosB миёнаравии ифодаи CCKB-ро ба миён меорад, дастгирӣ мекунад. Ғайр аз он, муҳосираи фаъолияти osFosB дар PrL, тавассути ифодаи маҳаллии unJunD, инчунин тобовариро барои шикасти стресс мусоидат кард (t озмоиш t(16) = 2.114, p = 0.05 против назорат) (Намоиши 2F). Механизми сабукгардонии CCKB дар мушҳои устувор бояд муайян карда шавад.

Нақши CCKB дар тобоварӣ ва ҳассосияти стресс

Барои бевосита санҷидани нақши танзими CCKB дар PrL дар миёнаравии ҳассосият ва тобоварӣ, мо антагонисти антагонисти ретсепторҳои интихобии CCKB CI-988 (10 ng) -ро бевосита ба ин минтақаи мушҳои ҳассос ворид кардем. CI-988 ретсепторҳои CCKB-ро муассир мекунад дар вирус зеро он наздикии наномоларӣ ва интихоби баландро барои зертобеи ресепторҳои CCKB нишон медиҳад (). Муҳосираи фаъолияти CCKB ҳамкориҳои иҷтимоиро ба таври қавӣ афзоиш дод (Намоиши 2G) (ҳамкорӣ, F(1,20) = 7.795, p <0.05; маводи мухаддир F(1,20) = 5.38, p <0.05, пас аз санҷиши Bonferroni t = 3.615, p <0.01). Инфузи CI-988 инчунин норасоии афзалияти сахарозаро, ки дар мушҳои ҳассос мушоҳида шудааст, барҳам дод (t(8) = 2.681, p <0.05) (Намоиши 2H). Ҳарду натиҷаи рафтор нишон медиҳанд, ки муҳосираи амали CCK дар PrL ба мисли антидепрессантҳои пурқувват таъсир мерасонад. Ҷолиб он аст, ки ҳангоми дохилӣ ба таври ғайримуқаррарӣ CI-988 дар самти пешгирии канорагирӣ аз иҷтимоӣ бесамар буд (маълумот нишон дода нашудааст).

Барои санҷидани баръакс, фаъолсозии CCKB дар PrL метавонад канорагирии иҷтимоӣ ва коҳиши афзалияти сахарозаро, ки бо стрессҳои музмини иҷтимоии музд оварда шудаанд, омӯхта, таъсири инфузияи маҳаллии CCK-8 (10 ng), шакли бартарии CCK дар мағзи сарро омӯхтем. , оид ба депрессия- ва рафтори марбут ба изтироб. Микдори маводи мухаддир аз руи натичахои пешина дар адабиёт интихоб карда шуд (; ; ). Мушҳо ба стрессҳои субмсималии иҷтимоӣ 24 соат пеш аз санҷиши рафтор дучор шуда буданд (Намоиши 3A). CCK-8, ки 30 дақиқа пеш аз санҷиш шомил карда шудааст, барои пешгирӣ кардани иҷтимоӣ дар санҷиши алоқаи иҷтимоӣ ва инчунин кам шудани вақти сарфшуда дар яроқи кушода дар лабони баландкардашуда баландтар буд (SI: BLA ,action, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; таъсири асосии маводи мухаддир, F(1,22) = 11.75, p <0.05; Санҷиши баъди Bonferroni t = 2.957, p <0.05; NAc: ҳамкорӣ, F(1,26) = 6.688, p <0.05, пас аз санҷиши Bonferroni t = 2.816, p <0.05; EPM: BLA, ҳамкорӣ, F(1,22) = 8.0, p <0.01; Санҷиши баъди Bonferroni t = 2.509, p <0.05 таъсири дору; t = 2.528, p <0.05 таъсири вирус; NAc, t озмоиш t(17) = 1.961; p <Таъсири маводи мухаддир дар дохили гурӯҳи eYFP) (Намоиши 3Б – Э, чап). Дар афзалиятҳои сахароза ҳеҷ фарқият мушоҳида нашудааст (Намоиши 3F,G, чап). Ниҳоят, инфузияи CCK-8 дар рафтори (муоширати иҷтимоӣ ва баландшавии плюс лабиринт) мушҳои беэътино дар ин таҳлилҳо ягон маълумоте надорад (маълумот нишон дода нашудааст). ТНатиҷаҳои hese нишон медиҳанд, ки баландшавии фаъолияти CCKB-и миёнаравии ФосБ дар мушҳои ҳассос дар муқоиса бо мушҳои устувор, ба баъзе камбудиҳои рафтори стресс, ки ин ҳайвонҳо намоиш додаанд, мусоидат менамояд.

Блоки басташавии ҳассосияти CCK аз ҷониби фишор ба воситаи фаъолсозии пешгӯиҳои кортикалӣ ба BLA бар зидди NAc

Фаъолияти асабҳои коҳишёфтаи mPFC ба рафтори ба депрессия монанд дар мушҳо, бо ҳавасмандии оптогенетикии нейронҳои mPFC аз мушҳои ҳассос таъсир мерасонанд, ки ба антидепрессант монанданд (). Ҳамин тавр, мо фарз кардем, ки CCK метавонад дар PrL амал намуда, фаъолияти нейрониро манъ кунад ва ба ин васила рафтори ба депрессия монандро нишон диҳад. Мувофиқи ин фарзия, мо коҳишро мушоҳида кардем c-Фос сатҳи mRNA дар PrL дар ҷавоб ба инфузияи CCK ба ин минтақаи мағзи сар (t(13) = 2.235, p <0.05) (Намоиши 3H).

Мо минбаъд фарз кардем, ки ҳавасмандии оптогенетикии mPFC амалҳои антидепрессантро бо роҳи муқобилат кардани таъсири CCK ба фаъолияти нейронӣ амалӣ мекунад. Ҳангоми санҷиши ин гипотеза мо сохторҳои зеркортикалиро, ки ба таъсири анксиогенӣ ва продепрессионии CCK миёнаравӣ мекунанд, мавриди таҳқиқ қарор додем. Нейронҳои пирамидии лоиҳаи mPFC сахт ба NAc ва BLA, ду сохти лимбик, ки дар аксуламали рафторӣ ба стресс таъсир расонданд. Нишон дода шудааст, ки фаъолияти ҳарду минтақаи майна дар ибрози рафтори изтироб ва ба депрессия нақши муҳим дорад (; ). Аз ин рӯ, мо озмоиш кардем, ки оё ҳавасмандгардонии пешгӯиҳои глутамератикӣ аз PrL ба NAc ё BLA ба оқибатҳои зараровари микроинфузияи CCK ба PrL муқобил хоҳанд буд (Намоиши 3A). Мо AAV-CaMKII-ChR2-EYFP ё AAV-CaMKII-EYFP -ро ҳамчун назорат ба PrL ворид кардем. Тарғибгари CaMKII ба воситаи ифодаи вирусӣ ба нейронҳои пирамидҳои глутаматерикӣ дар минтақаҳои кортикӣ равона шудааст. Пас аз он ба мо вақти кофӣ (6 ҳафта) барои интиқол додани трансгенҳо ба терминалҳои асабии ин нейронҳои пирамидӣ дар NAc ва BLA (Намоиши 3I). Mice мағлубияти иҷтимоии submaximal ба даст овард; 24 соат баъдтар, мо CCK-8-ро ба PrL ворид кардем ва баъд аз 30 дақиқа, пас аз он, ки робитаи иҷтимоӣ ҳангоми ҳавасмандии оптогенетикии терминалҳои глутаматтерикӣ дар NAc ё BLA чен карда шуд. Дарҳол пас аз санҷиши алоқаи иҷтимоӣ, мушҳо дар баҳогузории плюс лазерӣ барои арзёбии рафтори марбут ба изтироб арзёбӣ шуданд ва сипас барои бартарии сахароза ба арзон кардани анҳония.

Ҳавасмандкунии оптогенетикӣ аз пешгӯиҳои глутамератикӣ ба NAc аз пешгирии иҷтимоӣ, ки дар дохили PRL CCK-8 оварда шудааст (баръакс, F(1,26) = 6.688, p <0.05, ягон таъсири дору дар гурӯҳи ChR2) (Намоиши 3C). Баръакси ин, чунин ҳавасмандгардонии PrL ба NAc ба рафтори монанди изтироб, ки дар лабони баландошёна чен карда шудааст ()Намоиши 3E); Аммо, чунин ҳавасмандӣ бартарияти сахарозаро дар муқоиса бо мушҳои ҷудошуда афзоиш додааст (ҳамкорӣ, F(1,20) = 5.77, p <0.05; Санҷиши баъди Bonferroni t = 2.998, p <Таъсири ҳавасмандкунӣ дар дохили ҳайвоноти табобаткардаи CCK-0.05) (Намоиши 3G).

Намунаи рафтори мухталиф бо ҳавасмандкунии оптогенетикии пешгӯиҳои глутамератикӣ ба BLA дида шуд. Чунин барангехтан аз канорагирии иҷтимоӣ, ки тавассути инфузияи дохили прил CCL-8 оварда шудааст, монеъ намешавад (ҳамҷояшавӣ, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; таъсири асосии маводи мухаддир, F(1,22) = 11.75, p <0.05; бе таъсир дар гурӯҳи ҳавасмандгардонӣ, t озмоиш t(12) = 2.054, p <0.05) (Намоиши 3B). Аммо, барангехтани afferents BLA таъсироти анксиолитикиро нишон додааст, ки инро вақти зиёд дар дастаҳои кушод дар лабҳои кушод ва лабиринти баланд нишон дода шудааст (ҳамкорӣ, F(1,22) = 8.0, p <0.01; Санҷиши баъди Bonferroni t = 2.528, p <0.05 таъсири вирус дар дохили гурӯҳҳои табобати CCK-8) (Намоиши 3D). Ҳавасмандкунии пешгӯиҳои глутаматриҷӣ ба BLA ба афзалияти сахароза таъсири назаррас нарасонд (ҳамкорӣ, F(1,22) = 2.08, p > 0.05) (Намоиши 3F).

мубоҳиса

Натиҷаҳои таҳқиқоти мазкур далелҳои мутобиқшавии молекулиро, ки дар PrL рух медиҳанд, нишон медиҳанд, ки ба фишори иҷтимоӣ гирифтор мебошанд. Мо пас аз фишори доимии шикасти иҷтимоӣ, ки дар он ҷо "ФосБ аз ҳад зиёд ба ҳассосияти стресс мусоидат мекунад, мо дар ин зергурӯҳи mPFC индуксияи" ФосБ "-ро нишон медиҳем. Мо ресептори CCKB-ро ҳамчун як генаи мақсаднок, ки аз ҷониби ΔFosB дар PrL танзим карда мешавад, муайян кардем, аз афташ протеини CCKB -ро дар мушҳои ҳассос ба вуҷуд оварда, ба пешгирии танзими ифодаи CCKB, ки ба таври интихобӣ дар мушҳои тобовар рух медиҳад. Мо минбаъд нишон додем, ки вуруди як агонисти CCK ба PrL рӯҳафтодагӣ ва вайронкунии аномалияҳои рафторро дар аксуламали стресси иҷтимоӣ пешгирӣ мекунад, дар сурате ки блокадаи фаъолияти ресепторҳои CCKB дар ин минтақаи мушҳои ҳассос ин таъсирҳоро пешгирӣ мекунад. Мо минбаъд аз асбобҳои оптогенетикӣ барои муайян кардани микросхемаҳои дар проанхитатсия ва просессҳои ба продепрессион монандии CCK дар PrL истифода бурдем. Гарчанде ки пешгӯиҳои кортико-NAc камбудиҳои муздро миёнаравӣ мекунанд, ки аз канорагирии иҷтимоӣ ва коҳиши афзалияти сахароза шаҳодат медиҳад, ин микроқимат ба таъсири ансиогении CCK ба PrL воридшуда таъсир намерасонад. Ва баръакс, пешгӯиҳои кортикалӣ ба BLA зуҳуроти рафтори марбут ба изтиробро миёнаравӣ мекунанд, аммо ба пешгирии иҷтимоии фишори иҷтимоӣ ё касри афзалиятҳои сахароза таъсир намерасонанд. Дар якҷоягӣ, ин маълумотҳо нишон медиҳанд, ки тағирот дар PrL пас аз стрессҳои мағлубшавии иҷтимоӣ дар бисёр камбудиҳои рафтор тавассути пешбиниҳои мушаххас subcortical амал мекунанд.

ΔФосБ: харитасозии шабакаи стрессии лимбикӣ ва нақш дар mPFC

ImmunФосБ иммуногистохимия нейронҳои гирифтори стрессҳои музминро бо ҳалли яккаса муайян мекунад ва барои харитасозии схемаи нейронии ба танзим даровардашуда истифода шудааст (; ; ). Мо ин методологияро барои нишон додани он нишон додем, ки стресси музмини музминии музмин иҷтимоии ΔFosB-ро дар якчанд минтақаи майна бо хусусиятҳои фарқияти байни гурӯҳҳои тобовар ва ҳассос ба вуҷуд меорад; дар баъзе минтақаҳо танҳо дар мушҳои тобовар индуксия нишон дода шудааст, дигарон танҳо мушҳои ҳассос ва дигарон дар ҳар ду ҳолат (Љадвали 1). Кори қаблӣ нишон дод, ки «индуксияи ФосБ дар NAc ё PAG ventral ба тобоварӣ ба стрессҳои музмин мусоидат намуда, ба аксуламали антидепрессант мусоидат мекунад (; ).

Доштани ΔFosB дар PrL мушҳои ҳассос ва якҷоя бо бозёфтҳои қаблӣ, ки ҳавасмандии оптогенетикии ин минтақа ба таъсироти антидепрессант таъсир мерасонанд (), моро водор кард, ки таъсири ФосБро дар ин минтақаи кортикӣ омӯзем. Дар муқоиса бо бозёфтҳои NAc ва ventral PAG, мо дарёфтем, ки ΔFosB дар PrL ҳассосияти стресси музди иҷтимоии музтарибаро пешгирӣ мекунад ва ба мисли продепрессия дар озмоиши маҷбурии шиноварӣ, бе таъсир ба рафтори ба изтироб монанд ё афзалияти сахароза мусоидат мекунад. Дар муқоиса бо PrL, дар Илл дар наздикии мо таъсироти аз ҳад зиёди вазнини FosB ёфт нашуд. Тадқиқоти ба наздикӣ дар сатҳи мушакҳои устувор сатҳаш баландтари ФосБ дар Илмро муайян кард ва ин субрегионаро ба устуворӣ ба фишори иҷтимоӣ такмил дод (). Ҳамин тариқ, барои омӯзиши нақшҳои дифференсиалӣ барои ин ду зергурӯҳҳои mPFC, ки дар дигар соҳаҳои рафтор самараи муқобил оварда шудаанд, таҳқиқоти иловагӣ заруранд; ; ). Мо қаблан гузориш дода будем, ки одамони депрессия сатҳи поёнии ΔFosB -ро дар NAc нишон медиҳанд), wдар ин ҷо сатҳҳои баландтари osFosB дар PFC (минтақаи Brodmann 46) -и одами депрессия нишон дода шудаанд (). Дигар минтақаҳои cortical дар омӯзиши охирин баррасӣ карда нашуд. Дар ҳар сурат, ин бозёфтҳо дар якҷоягӣ норасоиҳои мушаххасро дар ифодаи ΔFosB дар депрессияи одам дастгирӣ мекунанд, ки дар он ҷо омили транскрипсия ба осебпазирии стресс хеле гуногун аст. Таҳқиқоти оянда омӯхтани таъсири ΔFosB дар бисёр минтақаҳои дигари мағзи сар, ки дар он ҷо индуктсия мешавад, ҷолиб хоҳад буд (Љадвали 1) оид ба вокунишҳои стресс.

Як механизме, ки тавассути он “индуксияи ФосБ дар PrL метавонад ба рафтори ба депрессия мусоидат кунад ин тавассути фурӯзон кардани фаъолияти PrL мебошад. OsFosB нишон дода шудааст, ки ҷавобҳои AMPA-и глутаматиро пахш мекунад, ва c-Фос ифода, дар neuron spiny миёна NAc (; ; ). Ҳамин тавр, мо коҳишро ёфтем c-Фос ифода пас аз xFosB изофабори дар PrL. Ҳамин тариқ, индуксияи ФосБ дар PrL метавонад барои коҳиш додани фаъолиятҳои нейронӣ, ки дар ин минтақа пас аз стресси доимии шикасти иҷтимоӣ дида мешавад, ҷавобгар бошад. Чунин коҳиш ёфтани оҳанги PrL дар мавриди ҳадафҳои субкортикии худ, ба монанди BLA ва NAc, интизори тарс ва қобилияти хомӯш кардани вокунишҳои эҳсосотӣ ба стресс мебошад (, ). Гузашта аз ин, осеби mPFC аксуламалҳои ҳассосшудаи фишори равониро ва камбудиҳоро дар аз байн рафтани тарс меоварад (; ; ; ) бо ишора ба он, ки беқурбшавӣ аз сабаби стресс тавассути mPFC, миёнамуддат тавассути inFosB миёнаравӣ метавонад ба депрессия ва дигар ихтилолҳои вобаста ба стресс мусоидат кунад ().

Нақши CCK дар осебпазирии стресс

Мо шаҳодат медиҳем, ки ресептори CCKB ҳадафи ΔFosB мебошад, зеро индуксияи "ФосБ дар PrL мушҳои ҳассос танҳо як механизмест, ки тавассути он" FosB таъсири худро ба пропрессионӣ ба ин минтақа мерасонад. Гарчанде ки амалҳои мушаххаси CCK дар микросхемаҳои mPFC номуайян боқӣ мондаанд, дар хояндаҳо CCK дар дохили interneurons GABAergic локализатсия шудаанд (). Фикр карда мешавад, ки фаъолияти нейронҳои пирамидии кортикалиро тавассути тақвият додани релефи GABA маҳаллӣ ва бевосита ба рецепторҳои CCKB, ки нейронҳои пирамидӣ ифода мекунанд; ; ; ). Ҳамин тариқ, нейрон транскриптсияи CCKergic метавонад ба кам шудани фаъолияти PrL дар боло қайдшуда мусоидат кунад.

CCK як агенти ансиогенӣ буда, маъмурияти системавии агонистҳои CCKB боиси ҳамлаҳои ваҳшатангез дар ихтиёриёни солим мегардад. Беморон ба ҳамлаҳои ваҳшиёна майл доранд, пас аз таъсири CCK ҳассос гарданд (; ). Якчанд таҳқиқот таъсири анксиогении CCK дар хояндаҳоро тасдиқ карданд (). Озодкунии CCK дар mPFC ҳангоми стресс мағлубият дар каламушҳо бо рафтори ба изтироб алоқаманд алоқаманд аст (); Зерқисматҳои PrL ва IL дар ин таҳқиқот фарқе надоштанд. Ба наздикӣ, муҳосираи системавӣ ва музмини CCKB бо CI-988 ба каламушҳо ба мисли антидепрессантҳо таъсир расонд (). CI-988 вақти имтиҳони норасогиро дар санҷиши маҷбурии шиноварӣ муқаррар кард. Он инчунин гиперактивии меҳвари гипоталамикӣ-гипофизӣ-адреналҳо, камшавии ҳаҷми гиппокампал ва паҳншавии ҳуҷайраҳо ва коҳиши афзалияти сахарозаро, ки одатан аз шикасти иҷтимоӣ ба вуҷуд омадаанд, пешгирӣ кардааст. Дар ин ҷо, мо ин натиҷаҳоро бо нишон додани таъсири антидепрессанти CI-988 ба PrL мушҳои ҳассос тасдиқ мекунем, гарчанде ки як тазриқи ягонаи система ин таъсирро тақлид накардааст.

Илова бар амалҳои шадиди CCK дар PrL, мо сатҳи пастшавии CCRB mRNA-ро дар мушҳои устувор муайян кардем, ки метавонанд мутобиқшавии молекулавӣ бар асоси тобоварӣ бошанд. Дар ҳақиқат, тағирот дар оҳанги CCKergic, махсусан сатҳи CCKB, як механизми муҳими ибрози ташвиш мебошанд. Мышаҳои трансгендики CCKB-ро дар мағзи пешӣ вазнинии шадид ва аксуламали тарсро нишон медиҳанд (). Ёфтани мо дар бораи сатҳҳои тағирёфтаи CCKB байни мушҳои тобовар ва ҳассос метавонад ба фарқиятҳои фенотипӣ дар изтироб ва рафтори шабеҳи депрессия мусоидат кунад. Дар ин ҷо, мо PrL-ро ҳамчун як оксигени муҳим барои таъсири анксиогенӣ ва prodepressant CCK дар заминаи стрессҳои иҷтимоӣ нишон медиҳем. Бо вуҷуди ин, якчанд минтақаҳои дигари мағзи сар ба амалҳои рафтории CCK, аз ҷумла BLA, hippocampus, NAc ва PAG (; ; ; ; ). Инчунин, мо дар сатҳи сафедаҳои CCKB зиёд шудем, аммо на mRNA, дар mPFC ҳайвонҳои ҳассос. Ин бозёфтҳо нишон медиҳанд, ки гарчанде сатҳи mRNA аксар вақт бо сатҳи сафедаҳо ҳамоҳанг аст, аммо ин на ҳамеша чунин аст ().

Таҷрибаҳои оптогенетикии мо нишон медиҳанд, ки фаъолнокии афзояндаи пешгӯиҳои глутамататриҷӣ аз PrL ба NAc ё BLA таъсири CCK-ро дар PrL бармегардонад. Барои муайян кардани он, ки ин таъсири ҳавасмандкунии оптогенетикӣ аз ҷониби ҳамон нейронҳои PrL, ки аз ҷониби CCK назорат карда мешаванд, таҳқиқоти иловагӣ заруранд. Ҷолиб он аст, ки маълумоти мо нақшҳои фарқкунандаи ин ду микросхемаро дар миёнаравӣ кардани соҳаҳои гуногуни вайроншавии рафтор нишон медиҳад. Лоиҳаи Cortico-NAc anhedonia ва мукофотро назорат мекунад; далели он, ки он танзими пешгирии иҷтимоиро ба танзим медарорад, ин нишона бештар инъикоси коҳиши ҳавасмандӣ ва подош барои рафтори иҷтимоӣ мебошад, на нигаронии афзудаи иҷтимоӣ. Ин хулоса бо қобилияти ислоҳи ин бензодиазепинҳо мувофиқат намекунад (), ва бо намоиши охирин, ки ҳавасмандгардонии mPFC аз NAc мукофот ва ҳавасмандкуниро барои нашъамандӣ афзун мекунад (). Баръакси ин, лоиҳаи Cortico-BLA аломатҳои марбут ба изтиробро, ки бо адабиёти калон дар хояндаҳо ва одамон мувофиқанд, назорат мекунад (ба боло нигаред).

Хулоса, натиҷаҳои тадқиқоти мазкур шакли минтақаҳои майнаи мағзи сарро, ки ба ҳайвонҳои ҳассос ва тобовар дучор шудаанд муайян мекунанд ва тағиротро дар PrL нишон медиҳанд, ки ба ҳассосият мусоидат мекунанд. Ин дигаргуниҳо шомили индуксияи osFosB ва индуктсияи ресептори CCKB мебошанд. Баръакси ин, муҳосираи амали CCK дар PrL ба таъсироти антидепрессант ва анксиолитикӣ монанд мусоидат мекунад. Мо инчунин ҳадафҳои субкортикии ин нейронҳои пирамидии кортикалиро, ки ин амалҳоро миёнаравӣ мекунанд, бо як ноҳияви корти-НА барои рафтори вобаста ба депрессия муҳим ва як ҳалқаи cortico-BLA, ки барои рафтори ба изтироб алоқаманд муҳиманд, таъсис медиҳем. Дар ҳоле ки таҳқиқоти клиникии антагонистҳои CCKB дар беморони гирифтори депрессия дар 1990s натиҷаҳои умедбахш надоданд, бозёфтҳои ҳозира арзиши баррасии потенсиали табобатии чунин агентҳоро дар ҷамъиятҳои беморони сатҳи стресс баланд нишон медиҳанд.

Далелҳо

 

Ин кор аз ҷониби Институти Миллии Солимии Рӯҳӣ (EJN) ва Бунёди Тадқиқоти Мағзи & Рафтор Алянси Миллӣ оид ба Тадқиқот оид ба Шизофрения ва Депрессия Ҷоизаи муфаттиши ҷавони ҷавон ба В.В.

 

 

Муаллифон манфиатҳои молиявии рақобатро эълон мекунанд.

 

Адабиёт

  • Акирав I, Марун М. Нақши гардиши medial prefrontal cortex-amygdala дар таъсири стресс дар аз байн рафтани тарс. Plast Neural. 2007; 2007: 30873. doi: 10.1155 / 2007 / 30873. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Барбас Х, Блатт Ҷ. Дурнамои хоси топографӣ аз майдони rhesus майдонҳои prefrontal гуногунро ба таври функсионалӣ фарқ мекунанд. Ҳиппокампус. 1995; 5: 511 – 533. doi: 10.1002 / hipo.450050604. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Бекер C, Thièbot MH, Touitou Y, Hamon M, Cesselin F, Benoliel JJ. Сатҳи мукаммалшудаи экстрацеллютулярии маводи холецистокинин дар шакли намунаи лаззати шикасти иҷтимоӣ дар каламуш. J Neurosci. 2001; 21: 262 – 269. [Садо Ояндасоз]
  • Бекер C, Zeau B, Rivat C, Blugeot A, Hamon M, Benoliel JJ. Дигаргуниҳои рафторӣ ва биологӣ дар шакли депрессия, ки боиси шикасти иҷтимоии такроршаванда дар каламҳо: ҷалби холецистокинин. Мол психиатрия. 2008; 13: 1079 – 1092. doi: 10.1038 / sj.mp.4002097. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Белчева I, Белчева С, Петков В.В., Петков В.Д. Ассиметрия дар аксуламалҳои рафторӣ ба холецистокинин microinjected ба ядрои каламушҳо ба accumbens ва amygdala. Нейрофармакология. 1994; 33: 995 – 1002. doi: 10.1016 / 0028-3908 (94) 90158-9. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Benoliel JJ, Bourgoin S, Mauborgne A, Pohl M, Legrand JC, Hamon M, Cesselin F. GABA, ки дар ҳар ду ретсепторҳои GABAA ва GABAB амал мекунанд, ба бастани маводҳои холецистокинин аз мағзи каламуш дар in vitro монеъ мешаванд. Майнаи Res. 1992; 590: 255 – 262. doi: 10.1016 / 0006-8993 (92) 91103-L. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Бертон О, МакКлунг КА, Дилеон Р.Ҷ., Кришнан В, Рентхал W, Руссо С.Ҷ., Грэм Д, Цанкова Н.М., Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Нақши асосии BDNF дар роҳи допаминии mezolimbic дар стрессҳои мағлубшавии иҷтимоӣ. Илм. 2006; 311: 864 – 868. doi: 10.1126 / илм.1120972. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Бертон О, Ковингтон Х., 3rd, Эбнер К, Цанкова Н.М., Карле Т.Л., Улеры П, Бхонс А, Баррот М., Кришнан V, Сингewалд Г., Сингвейлд N, Бирнбаум С, Нев Р.Л., Нестлер Е.Д. Омили «ФосБ» дар хокистарии перуактивативӣ бо фишори равонӣ ба аксуламали фаъоли фишор мусоидат мекунад. Нейрон. 2007; 55: 289 – 300. doi: 10.1016 / j.neuron.2007.06.033. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Bewernick BH, Hurlemann R, Matusch A, Kayser S, Grubert C, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Lemke M, Cooper-Mahkorn D, Cohen MX, Brockmann H, Lenartz D, Sturm V, Schlaepfer TE. Нуклеус бармеангезад, ки ангезиши амиқи мағзи сар сатҳи депрессия ва изтиробро дар депрессия тобовар табобат мекунад. Biol психиатрия. 2010; 67: 110 – 116. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.09.013. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Брадвежн Ҷ, Кожицки Д., Шриуки С. Ҳассосияти баландро ба холецистокинин тетрапептид дар халалёбии ваҳм: бозёфтҳои клиникӣ ва рафторӣ. Arch Gen психиатрия. 1991; 48: 603 – 610. doi: 10.1001 / archpsyc.1991.01810310021005. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Бремнер ҶД. Оё стресс ба мағзи сар осеб мерасонад? Biol психиатрия. 1999; 45: 797 – 805. doi: 10.1016 / S0006-3223 (99) 00009-8. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Бремнер ҶД. Стресси осеби равонӣ: таъсирот ба майна. Диалогҳо Clin Neurosci. 2006; 8: 445 – 461. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Бремнер ҶД. Neuroimaging дар вайроншавӣ пас аз стресс ва дигар ихтилолҳои вобаста ба стресс. Neuroimaging Clin Шимолӣ Ам. 2007; 17: 523 – 538. doi: 10.1016 / j.nic.2007.07.003. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Britt JP, Benaliouad F, McDevitt RA, Stuber GD, Wise RA, Bonci A. Синаптит ва профили рафтории воридоти сершумори глутамататорӣ ба accumbens ядро. Нейрон. 2012; 76: 790 – 803. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Burgos-Robles A, Bravo-Rivera H, Quirk GJ. Нейронҳои прелимбикӣ ва инфралимбӣ ҷанбаҳои фарқкунандаи рафтори инструменталиро нишон медиҳанд. PLoS Яке. 2013; 8: e57575. doi: 10.1371 / jurnal.pone.0057575. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Chen Q, Nakajima A, Meacham C, Tang YP. Оҳанги баландшудаи холецистокининергикӣ механизми муҳими молекулавӣ / нейрониро барои изҳори изтироб дар мушро ташкил медиҳад. Proc Natl Acad Sci ИМА A. 2006; 103: 3881-3886. doi: 10.1073 / pnas.0505407103. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Чой DC, Gourley SL, Ressler KJ. Аломати Prelimbic BDNF ва TrkB муттаҳидсозии ҳам омӯзиши эмотсионалӣ ва ҳам аватарро танзим мекунад. Тарҷумаи равонӣ. 2012; 2: e205. doi: 10.1038 / tp.2012.128. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Кристофел Д.Д., Голден С.А., Думитриу Д., Робисон А.Ҷ., Янссен В.Г., Аҳн Х.Ф., Кришнан В, Рейс С.М., Хан М.Ҳ., Аблес Ҷ.Л., Эйш А. А., Дитс Д.М., Фергюсон Д. , Руссо С.Ҷ. Кинасаи IκB пластикӣ ва синтетикӣ ва рафтори фишори аз шикасти иҷтимоӣ зарароварро танзим мекунад. J Neurosci. 2011; 31: 314 – 321. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4763-10.2011. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Ковингтон Ӯ, 3rd, Kikusui T, Goodhue J, Nikulina EM, Hammer RP, Jr, Miczek KA. Стресси кӯтоҳи шикасти иҷтимоӣ: Таъсири дарозмуддат ба кокаин ҳангоми ифроти binge ва zif268 mRNA дар амигдала ва қабати пеш аз корт. Нейропсихофармакология. 2005; 30: 310 – 321. doi: 10.1038 / sj.npp.1300587. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Ковингтон HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Таъсири антидепрессант барангехтани оптогенетикии кортиалияи medial prefrontal. J Neurosci. 2010; 30: 16082 – 16090. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Ковингтон HE, 3rd, Лазер I, Sun H, Bomze HM, DeMaio KD, Wu EY, Dietz DM, Lobo MK, Ghose S, Mouzon E, Neve RL, Tamminga CA, Nestler EJ. Нақши метиллясияи гистронии репрессивӣ дар осебпазирии ба кокаин овардашуда ба стресс. Нейрон. 2011; 71: 656 – 670. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.007. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • де Монтижи C. Холецистокинин тетрапептид ҳамлаҳои шабеҳро ба ихтиёриёни солим водор мекунад: бозёфтҳои пешакӣ. Arch Gen психиатрия. 1989; 46: 511 – 517. doi: 10.1001 / archpsyc.1989.01810060031006. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • De Witte P, Heidbreder C, Roques B, Vanderhaeghen Ҷ.Ҷ. Таъсири муқобили холецистокинин октапептид (CCK-8) ва тетрапептид (CCK-4) пас аз ворид кардан ба қисми каудалии ядро ​​ё ба қисми ростралӣ ва рентгенияи мағзи сар. Neurochem Int. 1987; 10: 473 – 479. doi: 10.1016 / 0197-0186 (87) 90074-X. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Diorio D, Viau V, Meaney MJ. Нақши кортиалияи medial prefrontal (cingulate gyrus) дар танзими аксуламали гипоталамикӣ-гипофиз-адреналҳо ба стресс. J Neurosci. 1993; 13: 3839 – 3847. [Садо Ояндасоз]
  • Drevets ВК. Тадқиқотҳои нейроиматикӣ ва невропатологии депрессия: оқибатҳои хусусиятҳои маърифатӣ-эмотсионалии ихтилоли равонӣ. Curr Opin Neurobiol. 2001; 11: 240 – 249. doi: 10.1016 / S0959-4388 (00) 00203-8. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Фалес Кл, Барч Д.М., Рандл М.М., Минтун М.А., Снайдер А.З., Коэн Ҷ.Д., Мэтьюз Ҷ, Шелин Ю. Коркарди тағйирёфтаи дахолати эҳсосотӣ дар системаи ноҳиявии аффектӣ ва когнитивӣ-назоратӣ дар депрессияи асосӣ. Biol психиатрия. 2008; 63: 377 – 384. doi: 10.1016 / j.biopsych.2007.06.012. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Фалес Кл, Барч Д.М., Рундл М.М., Минтун М.А., Мэтьюз Ҷ, Снайдер А.З., Шелин Ю. Табобати антидепрессант дар вақти коркарди мудохилаи эҳсосотӣ дар депрессияи асосӣ, гипоактиватсияро дар кортекси дутарафаи префронталиро муқаррар мекунад. J Таъсир ба Disord. 2009; 112: 206 – 211. doi: 10.1016 / j.jad.2008.04.027. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Федер А, Нестлер EJ, Чарни Д.С. Психобиология ва генетикаи молекулии устуворӣ. Nat Rev Neurosci. 2009; 10: 446 – 457. doi: 10.1038 / nrn2649. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Сарчашмаҳои кортикалии CRF, NKB ва CCK ва таъсири онҳо ба ҳуҷайраҳои пирамида дар неокортекс. Cereb Cortex. 2006; 16: 1440 – 1452. doi: 10.1093 / cercor / bhj081. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Grubert C, Hurlemann R, Bewernick BH, Kayser S, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Sturm V, Schlaepfer TE. Амнияти нейропсихологии ядро ​​ҳавасмандкунии амиқи майнаро барои депрессияи асосӣ афзоиш медиҳад: Таъсири ҳавасмандкунии 12-моҳ. Ҷаҳон J Biol психиатрия. 2011; 12: 516 – 527. doi: 10.3109 / 15622975.2011.583940. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Груэтер Б.А., Робисон А.Ҷ., Нев Р.Л., Нестлер Е.Ҷ., Маленка Р.К. OsФосБ функсияи мустақим ва ғайримустақими ядро ​​ба таври дифференсиалӣ тақвият медиҳад. Proc Natl Acad Sci ИМА A. 2013; 110: 1923-1928. doi: 10.1073 / pnas.1221742110. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Таносуби байни сафеда ва фаровонии mRNA дар хамиртуруш. Gygi SP, Rochon Y, Franza BR, Aebersold R. Мол Cell Биол. 1999; 19: 1720 – 1730. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Heidbreder CA, Groenewegen HJ. Cortex medial prefrontal дар каламуш: далел барои фарқияти дорсо-вентралӣ, ки ба хусусиятҳои функсионалӣ ва анатомикӣ асос ёфтааст. Нашри Neurosci Biobehav; Rev. 2003; 27: 555 – 579. doi: 10.1016 / j.neubiorev.2003.09.003. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Холсон RR. Зараррасии кортикалии пешии мезали ва бемории дар каламушҳо: I. Реактиватсия ба ҳавасмандкунии аверс. Физиолав рафтор. 1986; 37: 221 – 230. doi: 10.1016 / 0031-9384 (86) 90224-6. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Keedwell ТҶ, Эндрю C, Williams SC, Браммер MJ, Филлипс ML. Робитаи нейронии анҳония дар вайроншавии асосии депрессия. Biol психиатрия. 2005; 58: 843 – 853. doi: 10.1016 / j.biopsych.2005.05.019. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Кеннеди SH, Giacobbe P. Депрессияи тобовар табобат: пешравиҳои терапияи соматикӣ. Энн клиникаи равонӣ. 2007; 19: 279 – 287. doi: 10.1080 / 10401230701675222. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Кеннеди Ш., Эванс К.Р, Крюгер С., Мэйберг Ҳ.С., Мейер Ҷ.Ҳ., МакКэнн С., Арифуззман А.И., Ҳуле С, Ваккарино Ф. Тағирот дар мубодилаи минтақавии глюкозаи мағзи сар бо томографияи эмитентони позитрон пас аз табобати пароксетини депрессияи асосӣ чен карда мешаванд. Ам J психиатрия. 2001; 158: 899 – 905. doi: 10.1176 / appi.ajp.158.6.899. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Кришнан V, Han MH, Грэм Д.Л., Бертон О, Рентхал W, Руссо С.Ҷ., Лаплант Қ, Грэм А, Луттер М, Лагей DC, Ғозе S, Рейстер Р, Таннус П, Грин TA, Нев РА, Чакраварти S, Кумар А , Eisch AJ, Self DW, Lee FS ва дигарон. Мутобиқатҳои молекулавӣ, ки ба ҳассосият ва муқовимат ба шикасти иҷтимоӣ дар минтақаҳои мукофоти мағзи сар мегузоранд. Ҳуҷайра. 2007; 131: 391 – 404. doi: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Кришнан V, Нестлер Эҷ. Нейробиологияи молекулавии депрессия. Табиат. 2008; 455: 894 – 902. doi: 10.1038 / табиат07455. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Лехманн М.Л., ғанисозии муҳити зисти Herkenham M. устувории стрессро ба шикасти иҷтимоӣ тавассути роҳи нейроанатомии ба корти инфралимбӣ тобовар таъмин мекунад. J Neurosci. 2011; 31: 6159 – 6173. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Leistedt SJ, Linkowski P. Brain, шабакаҳо, депрессия ва ғайра. Евро Neuropsychopharmacol. 2013; 23: 55 – 62. doi: 10.1016 / j.euroneuro.2012.10.011. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Мэйберг Х.С., Лозано А.М., Воон В, МакНели Х., Семинович Д., Ҳамани С, Шввалб Ҷ.М., Кеннеди Ш. Ҳавасмандкунии чуқури майна барои депрессия тобовар. Нейрон. 2005; 45: 651 – 660. doi: 10.1016 / j.neuron.2005.02.014. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Нақши асосии метилтрансферазаи гистони G9a дар пластикӣ тавассути кокаин. Илм. 2010; 327: 213 – 216. doi: 10.1126 / илм.1179438. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • McClung CA, Nestler EJ. Танзими изҳори ген ва мукофоти кокаин аз ҷониби CREB ва DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208 – 1215. doi: 10.1038 / nn1143. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Милад MR, Quirk GJ. Нейронҳо дар хотираи medial prefrontal kortex барои аз байн рафтани тарс. Табиат. 2002; 420: 70 – 74. doi: 10.1038 / табиат01138. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Нахас З, Андерсон Б.С., Боркардт Ҷ., Арана А.Б., Ҷорҷ М.С., Ривз С.Т., Такакс И. Biol психиатрия. 2010; 67: 101 – 109. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.08.021. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Никулина Э.М., Арриллага-Романи I, Мицек К.А., Ҳаммер Р.П., Jr Тағироти дарозмуддат дар сохторҳои мезокортиколимбикӣ пас аз фишори такрории иҷтимоии такрорӣ дар каламушҳо: курси вақти рецепторҳои му-опиоид mRNA ва FosB / DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2008; 27: 2272 – 2284. doi: 10.1111 / j.1460-9568.2008.06176.x. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Noble F, Roques BP. Ресепторҳои CCK-B: химия, биологияи молекулавӣ, биохимия ва фармакология. Prog Neurobiol. 1999; 58: 349 – 379. doi: 10.1016 / S0301-0082 (98) 00090-2. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Noble F, Wank SA, Crawley JN, Bradwejn J, Serogogy KB, Hamon M, Roques BP. Иттифоқи байналмилалии фармакология: XXI. Сохтор, тақсимот ва функсияҳои ретсепторҳои холецистокинин. Такмили фармакол 1999; 51: 745 – 781. [Садо Ояндасоз]
  • Перез де ла Мора М, Эрнандес-Гомез А.М., Мендез-Франко Ҷ, Фукси К. Холецистокинин-8 меафзояд, К (+) - азхудкардашуда [3Ҳ] таркиби кислотаи гамма-аминобутирӣ дар иловаро аз майдонҳои мухталифи майна. Eur J Фармакол. 1993; 250: 423 – 430. doi: 10.1016 / 0014-2999 (93) 90029-H. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Ҷалби «ФосБ» дар сохторҳои мукофотонидашудаи мағзи сар пас аз стрессҳои музмин. J Neurosci. 2004; 24: 10594 – 10602. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Намунаҳои фарқкунандаи тағирёбии DeltaFosB дар майна тавассути нашъамандӣ. Синапс. 2008; 62: 358 – 369. doi: 10.1002 / syn.20500. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Радли Ҷ.Ҷ., Рошер А.Б., Миллер М, Янссен В.Г., Листон С, Ҳоф PR, McEwen BS, Morrison JH. Стресси такрорӣ ба талафоти сутунмӯҳра дар дендритӣ дар корти каламуши medial prefrontal мусоидат мекунад. Cereb Cortex. 2006; 16: 313 – 320. doi: 10.1093 / cercor / bhi104. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB пас аз экспрессияи музмини амфетамин генезияи десенсибятсияи эпигенетикии генофонди c-fos миёнаравӣ мекунад. J Neurosci. 2008; 28: 7344 – 7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Резаят М, Роҳбахш А, Зарриндест М.Р., Массудӣ Р, Ҷаҳангири Б. Холецистокинин ва GABA дар ҳамбастагии гориппампуси дорсҳо дар озмоиши баланди плюс-лабони изтироб. Физиолав рафтор. 2005; 84: 775 – 782. doi: 10.1016 / j.physbeh.2005.03.002. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Ричард JM, Berridge KC. Cortex prefrontal хоҳиш ва тарсро ба вуҷуд меорад, ки дар натиҷаи вайроншавии ядро ​​ба глутамат оварда мешавад. Biol психиатрия. 2013; 73: 360 – 370. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.08.009. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Rotzinger S, Vaccarino FJ. Зерсистемаҳои ретсепторҳои холецистокинин: нақш дар модулясияи рафтори марбут ба изтироб ва мукофот дар моделҳои ҳайвонот. J Психиатрия Neurosci. 2003; 28: 171 – 181. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Schlaepfer TE, Cohen MX, Frick C, Kosel M, Brodesser D, Axmacher N, Joe AY, Kreft M, Lenartz D, Sturm V. Ангезиши амиқи мағзи сарфарозгардонии схема анҳонияро дар депрессияи асосии тобовар сабук мекунад. Нейропсихофармакология. 2008; 33: 368 – 377. doi: 10.1038 / sj.npp.1301408. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Sierra-Mercado D, Padilla-Coreano N, Quirk GJ. Нақшҳои ҷудошудаи кортесси прелимбӣ ва инфралимбӣ, гиппокампуси ventral ва amgdala bazolateral дар ифода ва аз байн рафтани тарси шартӣ. Нейропсихофармакология. 2011; 36: 529 – 538. doi: 10.1038 / npp.2010.184. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Силва М.Г., Бойл М.А., Finger S, Numan B, Bouzrara AA, Almli CR. Таъсири рафтории lesions калон ва хурд аз kortex medial frontal rat. Exp Resain Brain. 1986; 65: 176 – 181. [Садо Ояндасоз]
  • Somogyi P, Hodgson AJ, Smith AD, Nunzi MG, Gorio A, Wu JY. Популяцияҳои мухталифи нейронҳои GABAergic дар ғилофаки визуалӣ ва гиппокампуси гурба маводи соматостатин- ё холецистокинин-иммунореактивӣ доранд. J Neurosci. 1984; 4: 2590 – 2603. [Садо Ояндасоз]
  • Surget A, Tanti A, Leonardo ED, Laugeray A, Rainer Q, Touma C, Palme R, Griebel G, Ibarguen-Vargas Y, Hen R, Belzung C. Антидепрессантҳо нейронҳои навро барои беҳтар кардани танзими вокуниш ба фишор ҷалб мекунанд. Мол психиатрия. 2011; 16: 1177 – 1188. doi: 10.1038 / mp.2011.48. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Танигучи Ҳ, Ҳ М, Ву П, Ким С, Паик Р, Сугино К, Квитзани Д., Фу Ю, Лу Ҷ, Лин Ю, Миоши Г, Шима Ю, Фишелл Г., Нелсон С.Б., Хуан ЗҶ. Манбаи хатҳои драйверҳои Cre барои ҳадафи генетикии нейронҳои GABAergic дар кортексияи мағзи сар. Нейрон. 2011; 71: 995 – 1013. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.07.026. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Teyssier JR, Ragot S, Chauvet-Gelinier JC, Trojak B, Bonin B. Фаъолсозии намунаи ифодаи ген дар DeltaFOSB дар cortex-и дороларди қаблӣ дар пешмонаи беморони гирифтори ихтилоли асосии депрессивӣ. J Таъсир ба Disord. 2011; 133: 174 – 178. doi: 10.1016 / j.jad.2011.04.021. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Цанкова Н.М., Бертон О, Рентхал У, Кумар А, Нев Радио, Нестлер Е.Ҷ. Танзими устувори хрокамини хипокампалӣ дар модели муши депрессия ва амали антидепрессант. Nat Neurosci. 2006; 9: 519 – 525. doi: 10.1038 / nn1659. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Tye KM, Prakash R, Kim SY, Fenno LE, Grosenick L, Zarabi H, Thompson KR, Gradinaru V, Ramakrishnan C, Deisseroth K. Amygdala circuitry миёнаравии назоратии баръакс ва дуҷонибаи изтироб. Табиат. 2011; 471: 358 – 362. doi: 10.1038 / табиат09820. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Ковингтон Х., 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Wattts EL, Wallace DL, Igiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolaños CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA ва дигарон. DeltaFosB дар гардишҳои мукофоти мағзи сар тобовариро ба стресс ва аксуламали антидепрессант мекунад. Nat Neurosci. 2010; 13: 745 – 752. doi: 10.1038 / nn.2551. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Вогт Б.А., Финч Д.М., Олсон CR. Гетерогении функсионалӣ дар cingulate cortulate: минтақаҳои арзёбии иҷроияи қаблӣ ва баъдӣ. Cereb Cortex. 1992; 2: 435 – 443. doi: 10.1093 / cercor / 2.6.435-a. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Wilkinson MB, Xiao G, Kumar A, LaPlant Q, Renthal W, Sikder D, Kodadek TJ, Nestler EJ. Табобати имипрамин ва тобоварӣ танзими хроматинро дар модулҳои депрессия афзоиш медиҳад, дар ядрои муш мушоҳида мешавад. J Neurosci. 2009; 29: 7820 – 7832. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0932-09.2009. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Индуксияи DeltaFosB дар орбитаи фронталӣ таҳаммулпазириро ба номутобиқатии маърифатии кокаин мусоидат мекунад. J Neurosci. 2007; 27: 10497 – 10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Yaksh TL, Furui T, Kanawati IS, Go VL. Рафтани холецистокинин аз корти мағзи сар ва мағзи сар дар in vivo: нақши GABA ва системаҳои ретсепторҳои глутамат. Майнаи Res. 1987; 406: 207 – 214. doi: 10.1016 / 0006-8993 (87) 90784-0. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]
  • Зановели JM, Netto CF, Guimarães FS, Zangrossi H., Jr Инъексияҳои хокистарии холисистокинини систематикӣ ва дохилии дорсали октапептиди сулфаткардашуда (CCK-8s) вокуниши шабеҳро ба каламушҳо, ки ба сатҳи T-лабони пешниҳодшуда оварда мерасонанд. Пептидҳо. 2004; 25: 1935 – 1941. doi: 10.1016 / j.peptides.2004.06.016. [Садо Ояндасоз] [Ҷой]