Танзими шиддатноки DeltaFosB, FosB ва cFos дар давраи худтанзимкунӣ ва бозгашти кокаин (2010)

J Нейрохим. Дастнависи муаллиф; дар PMC Oct 1, 2011 дастрас аст.
Нашр шудааст дар шакли охирин таҳияшуда ба монанди:
J Нейрохим. Окт 2010; 115 (1): 112 – 122.

Дар Интернет нашр шудааст Aug 3, 2010. doi:  10.1111 / j.1471-4159.2010.06907.x

Нусхаи ниҳоии таҳриршудаи ин мақоларо дар ин ҷо дастрас кардан мумкин аст Нейрохимем
Ба мақолаҳои дигар дар PMC нигаред класс мақолаи нашршуда.

мавҳум

Гӯшдории музмини маводи мухаддир тағиротро дар профилҳои экспрессияи генҳо, ки гумон аст, ки рушди нашъамандӣ бошад, ба вуҷуд меорад. Таҳқиқоти мазкур танзими омилҳои транскриптӣ, аз ҷумла cFos, FosB ва osFosB, дар минтақаҳои стриаталӣ ҳангоми маъмурияти музмин ба таври музмини дохили варақаи кокаин дар худидоракунии худсохторҳо ва зоғон дида баромад. Мо дарёфтем, ки cFos, FosB ва ΔFosB намунаҳои ифодаи минтақавӣ ва муваққатиеро нишон медиҳанд, ки миқдори зиёди сафеда ΔFosB дар қабати аккумуляторҳои ядроӣ (NAc) ва ядро ​​пас аз идораи музмин кокаин афзоиш меёбад, дар ҳоле ки ΔFosB дар каудат-путамен (CPu) боқӣ мемонад ба маъмурияти шадид ё музмин монанд аст. Баръакс, таҳаммулпазирӣ ба мРНК-и кокаин, ки ба aineFosB дар ҳама минтақаҳои СНиумX бо маъмурияти музмин оварда шудааст, ба вуҷуд омадааст. Таҳаммулпазирӣ инчунин ба ифодаи FosB, махсусан дар қабати NAc ва CPu таҳия шудааст. Ҷолиб аст, ки таҳаммулпазирӣ ба индуксияи cFos-кокаин аз назорати ихтиёрии истеъмоли кокаин дар минтақаҳои вентралӣ, вале на дорсальҳои стриаталӣ вобаста буд, дар ҳоле ки танзими FosB ва ΔFosB дар худидоракунии кокаин ва ҳайвонот яксон буд. Ҳамин тариқ, "нейротаптапсияҳои миёнаравӣ дар ФосБ дар CPU эҳтимолан пеш аз он, ки бо оғози истеъмоли дохили сӯзандоруҳои кокаин пайдо мешуданд ва дар якҷоягӣ бо ҷамъшавии зиёди ΔFosB дар NAc, метавонанд ба зиёд шудани рафтори ҷустуҷӯи кокаин мусоидат кунанд.

Калидвожаҳои: кокаин, худидоракунии маъмурӣ, ихроҷ, striatum, Fos

Муқаддима

Таъсири такрорӣ ба доруҳои вобастагӣ ба neuroadaptations дар роҳҳои муздашон мағзи сар меоварад, ки гумон аст, ки ҳам рушди истеъмоли маводи мухаддир ва ҳам устуворӣ ба дилгиркунӣ ва бозгаштан ба рафтори ҷустуҷӯи маводи мухаддир ҳангоми боздорӣ асос ёфта бошанд. Бисёре аз ин нейроаппаратҳо дар натиҷаи омилҳои транскрипсия ва танзими минбаъдаи экспрессияи генҳо ба вуҷуд меоянд, ки метавонанд ба сохтор ва функсияи нейрон таъсири дарозмуддат дошта бошанд (Zhang ва диг. 2006). Оилаи Фосилаи омилҳои транскрипт таваҷҷӯҳи махсус доранд, зеро аъзоёни ин оила моделҳои фарқкунандаи индуксияро дар минтақаҳои стратиалӣ пас аз дучоршавии шадид ва музмини кокаин нишон медиҳанд. Ҳангоми кокаин ба таври шадиди ғайрифаъол ва ғайримуқаррарӣ ворид карда мешавад (яъне тавассути тазриқи дохилитераптӣ (IP)) cFos ва FosB mRNA ва сафедаҳоро дар ҳарду (caudate-putamen, CPu) ва ventral (nucleus accumbens, NAc) зиёд мекунад striatum (Грайбиел ва диг. 1990; Ҷавонон ва диг. 1991; умед ва диг. 1992), дар ҳоле, ки таҳаммулпазирӣ ба ин аксуламал бо маъмурияти пассивии музмин рух медиҳад (умед ва диг. 1992, 1994; Алибхай ва диг. 2007). Баръакс, сатҳи стриаталии ΔFosB (35-37 кДа), варианти устувори буришшудаи тақсимшудаи Фосфат ген, пас аз дучоршавӣ бо музмин, вале на шадид кокаин баланд мешаванд (умед ва диг. 1994; Nye ва диг. 1995; Chen ва диг. 1995, 1997). Ин изофотҳои устувори ΔFosB метавонанд бо сафедаҳои мухталифи оилавии Jun нисбат ба ҳам cFos ё FosB ()Chen ва диг. 1995) ва инчунин худи ҳамҷинсгароёни функсионалиро ташкил карда метавонад (Jorissen) ва диг. 1997) бо ишора ба он, ки ташаккули дифференциалии протеин-1 (AP-1) пас аз кокаин музмин метавонад ифодаи генро дар сайтҳои AP-1 тавре тағйир диҳад, ки аз ифодаи ген дар натиҷаи таъсири шадиди кокаин фарқ кунад (Умед, 1998; Келз ва Нестлер, 2000). Тағйироти дифференсиалӣ дар профилҳои ифодаи ген низ вобаста аз он, ки баландшавии ФосБ кӯтоҳмуддат ё дарозмуддат аст, сурат мегирад ва ин тағирот метавонад ба ифодаи дифференсионии рафтори миёнарави кокаин оварда расонанд. (МакКлунг ва Нестлер, 2003). Таъсири музмин ба дигар доруҳо, аз ҷумла амфетамин, морфин, Δ9-CC, никотин, этанол ва фенсиклидин инчунин ба ҷамъшавии изофотҳои устувор osFosB дар минтақаҳои стратиалӣ оварда мерасонанд (МакКорун ва диг. 2004; Пиротти ва диг. 2008). Гузашта аз ин, бозёфтҳои охир нишон медиҳанд, ки таъсири манфии байни ҷамъшавии "ФосБ ва cFos-и амфетаминӣ, ки метавонад таҳаммулпазириро ба индуксияи cFos пас аз гирифторшавии музмини stimulant пайдо шавад (Ихтиёрӣ ва диг. 2008). Якҷоя ин бозёфтҳо фарзияро ба вуҷуд оварданд, ки изоформҳои изофосфатии «ФосБ» метавонанд ҳамчун «калиди молекулӣ» амал кунанд ва гузариш аз истеъмоли аввалияи маводи мухаддир ба ҳолати бештар вобастаи биологӣ мусоидат кунанд (Нестлер ва диг. 2001; Nestler, 2008).

Дар ҳоле ки аксари таҳқиқоти қаблӣ барои омӯзиши заҳролудшавии сафедаҳои оилаи Fos аз усулҳои такрории паса кокаин истифода мебурданд ва якчанд намунаҳои ин муқаррарот вуҷуд доранд, вақте ки кокаин ба воситаи дохиливаридӣ (IV) дар тӯли якчанд соат маъмулан ба шакли сӯиистифодаи инсон маъмул аст. Як таҳқиқот нишон дод, ки cFos mRNA дар CPU пас аз як ҷаласаи ягонаи 30-дақиқа худидоракунии кокаин дар мушҳо (Кузмин ва Йоханссон, 1999) эҳё шудааст, дар ҳоле ки дар CPU каламушҳо пас аз ҳарду зерсохторӣ ягон тағйирот пайдо нашудааст. 3 рӯз) ё музмин (ҳафтаи 6-12) худидоракунии кокаин (Daunais) ва диг. 1993, 1995). Пас аз давраи хориҷшавӣ, афзоиши сафеда дар сафеда cFos дар NAc дар каламушҳо бо истеъмоли пешакии кокаин коҳиш меёбад (Бен-Шаҳар ва диг. 2004), дар ҳоле ки дараҷаи баланди cFos пас аз дучоршавӣ ба нишонаҳои марбут ба кокаин дар тамоми стириум пайдо мешавад (Neisewander ва диг. 2000; Куфахл ва диг. 2009). Дар муқоиса бо cFos, зиёдшавии сафедаи ΔFosB пас аз худидоракунии музмин кокаин дар тӯри стратиум нишон дода шудааст ва ин ҷамъоварӣ ҳадди аққал 1 рӯз пас аз хориҷ шудан метавонад идома ёбад (Пич ва диг. 1997; Перотти ва диг. 2008). Аммо, гузоришҳое вуҷуд надоранд, ки тағиротро дар аксуламал ба сафедаҳои сершумори оилаи Fos ба чунин маъмурияти варидшавии кокаин бо таъсири шадид ё музмин муқоиса кунанд. Бо назардошти таъсири эҳтимолии байни ΔFosB ва cFos, қобилияти ташаккули дифференсиалии комплексии AP-1 барои ба вуҷуд овардани эффектҳои дифференсиалӣ дар ифодаи ген ва таъсири эҳтимолии ин фарқиятҳо ба рафтори миёнарави кокаин, инчунин тасдиқ кардани тағирот дар ифодаи cFos, FosB ва ΔFosB, ки пас аз маъмурияти ғайри шартӣ ба вуҷуд меоянд, дар ҳолате пайдо мешаванд, ки кокаин ихтиёран худидоракунии маъмурӣ мешавад ва муайян кардани он, ки ин тағирот пас аз ба итмом расидани маъмурияти кокаин чӣ қадар метавонад идома ёбад. Аз ин рӯ, дар таҳқиқоти мазкур, мо таъсири маъмурияти музминии музминии IV-и кокаинро ба зуҳури ΔFosB, FosB, ва cFos дар минтақаҳои стриаталӣ ҳангоми ҳам истеъмол ва ҳам аз истеъмоли кокаин муқоиса кардем. Мо танзими дарёфтшударо бо худидоракунии ихтиёрӣ бо танзими ҳайвонот, ки миқдори якхела ва шакли муваққатии кокаинро тавассути инфузияҳои ғайримуқаррарии пас аз гирифторшавӣ ба шадид ва музмин гирифтан муқоиса кардем Бо дарназардошти он, ки FosB ва ΔFosB вариантҳои тақсимшудаи ҳамонанд Фосфат ген, мо инчунин танзими mRNAҳои FosB ва ΔFosB -ро бо танзими сатҳи сафеда муқоиса кардем.

Тартибҳои таҷрибавӣ

Мавзӯъҳо ва ҷарроҳӣ

Каламушҳои марди калонсолон Sprague-Dawley, ки дар аввал вазнашон тақрибан 250-300 g буданд, дар муҳити аз ҳарорату намӣ танзимшаванда дар даври сабук ва торикии 12 h ҷойгир карда шуданд (дар 7: 00 AM). Ҳайвонот ғизо ва об мехӯрданд Озодӣ " дар ҳама ҳолатҳо, ба истиснои он, ки онҳо ҳангоми 85% вазни бепули хӯрокхӯриро ҳангоми омӯзиши фишанг барои граната сахароза (45 мг, BioServ) нигоҳ доштанд. Омӯзиши фишанг дар палатаҳои вентилятсияшаванда (Мед Ассошиэйтс, Ҷорҷия, ВТ) то он даме, ки талабот ба даст оварда шаванд (пораҳои 100 дар як сессия барои 3 пайдарпай) дар зери ҷадвали мустаҳкамшудаи 1 (FR1) гузаронида шуд. Пас аз он ҳайвонот сер шуданд Озодӣ " ҳадди аққал 24 соат пеш аз ҷарроҳӣ. Барои ҷарроҳӣ ба каламушҳо атропин (0.04 мг / кг, пӯсти зеризаминӣ) ба нафаскашӣ дода шуда буд ва ба анестезияи пентобарбитали натрий (50 мг / кг, IP) ба раги рости ҷигар дохил карда шуд.Эдвардс ва диг. 2007a). Пас аз ҷарроҳӣ, каламушҳо барои пешгирии сироят тазриқи пенициллин (200,000 IU / кг, ба дохили мушакҳо) дода шуданд ва катетерҳо ҳар рӯз бо 0.2 мл гепаринизатсияи (20 IU / мл) бактериостатикии намаки гентамицин сулфати (0.33 мг / мл) шуста мешаванд. Ҳама амалиётҳои озмоишӣ мутобиқи Институти миллии тандурустӣ гузаронида шуданд Дастур барои нигоҳубини ва истифодаи ҳайвонҳои лабораторӣ, ва аз ҷониби Кумитаи институтсионалии нигоҳубин ва истифодаи ҳайвонот (IACUC) аз ҷониби Маркази табибони ҷанубу ғарбии UT тасдиқ карда шудааст.

Тартиби дастгоҳҳо ва худидоракунӣ

Пас аз барқароркунии 1 wk аз ҷарроҳӣ, ҳайвонҳо ба якчанд гурӯҳҳои таҷрибавӣ / вақти аз ҳам ҷудо тақсим шуданд (Намунаи 1A), ва дар палатаҳои санҷишӣ дар ҷаласаҳои ҳаррӯза, тавре ки қаблан тавсиф шуда буд, баргардонданд (Эдвардс ва диг. 2007b). Каламушҳо дар гурӯҳи назорат нашуда, танҳо дар як рӯз дар қафасҳои хонаашон бидуни таъсир ба муҳити худидоракунӣ нигоҳ дошта мешуданд. Ба каламушҳо дар гурӯҳи худидоракунии кокаин (CSA) иҷозат дода шудааст, ки ихтиёран худидоракунии кокаинро (0.5 мг / кг / 50 мкл) таҳти ҷадвали мустаҳкамшудаи 1 (FR1) дар ҷаласаҳои ҳаррӯзаи 4 с, ки 6 рӯз гузаронида мешавад / wk, барои як рӯз 18 рӯз. Ҳар як фишанги фишанги фаъол як инфузияи 2.5 s кокаинро истеҳсол кард, ки бо равшании чароғе дар кюи болои фишанги фаъол алоқаманд буд. Нури хонагӣ ҳангоми инфузияҳои кокаин хомӯш карда шуд ва давраи иловагии 12.5 s пас аз инфузия дар он буд, ки нури хонагӣ хомӯш буд. Лев ҳангоми ҷавоб додан дар давраи инфузия ва танаффуси вақт сабт шуд, аммо ягон натиҷа надошт. Дар камераҳо фишанги иловагии ғайрифаъол мавҷуд буд, аммо посух ба ин фишанг бидуни натиҷа буд. Каламушҳо дар гурӯҳи юзини музмин (CY) барои каламушҳои худидоракунии фаъол муттаҳид карда шуданд ва миқдор ва шакли муваққатии ба шарикони худидоракунанда шабеҳи инфузияи кокаин гирифтанд. Каламушҳо дар гурӯҳи юнити шадид (AY) инчунин ба каламушҳо дар гурӯҳи CSA музмин муттаҳид карда шуданд, аммо ба ҷои кокаин то инфузияи пасфасси пассивӣ то рӯзи охирини худидоракунӣ қабул карда шуданд, вақте ки онҳо аввалин ҷаласаи инфузионии ғайрифокалии кокаинро барои аввалин бор гирифтанд. вақт. Дар ниҳоят, ба гурӯҳи Saline SA иҷозат дода шуд, ки худидоракунии шӯрро дар тамоми ҷараёни ҷарроҳӣ, озмоиш ё дигар тартиботи озмоишӣ дар муқоиса бо назоратҳои табобатнашаванда муайян кунад. Муқоиса байни гурӯҳҳои AY ва CY барои муайян кардани тағирот дар вокуниши cFos, FosB ё ΔFosB бо таъсири шадид ва музмини кокаин истифода мешуд, дар ҳоле ки CSA ва CY барои муайян кардани тағирот дар cFos, FosB ё orFosB ифода ёфта буданд махсусан ба мукофотпулӣ ва таъсири фармакологии кокаин марбут аст. Матоъ аз ҳама гурӯҳҳои омӯзишӣ фавран пас аз ҷаласаи ниҳоии 4 h барои муқоисаи танзими аз кокаин алоқаманд дар cFos, FosB ва osFosB ҷамъоварӣ карда шуд ва барои баъзе гурӯҳҳои омӯзишӣ бо 24 h ё 3 бофтаҳои ҷамъоваришудаи тағирёбии кокаин муайян карда шуд wk пас аз имтиҳони ниҳоии санҷиш. Тартиби миқдори blot ғарбӣ ва RT-PCR ҳангоми ҷудошавии subregatal subriatal барои рафъи мушкилоти эҳтимолии марбут ба реаксияи реактивии антиденҳо ва баланд бардоштани ҳассосият барои муайян кардани тағйирот истифода шуданд.

Тасвири 1  

(A) Ҷадвали тасвири маъмурияти кокаин ва хуруҷи (WD) режимҳо. Хатҳои қатъӣ нишон медиҳанд, ки инфузияҳои дохиливаридии кокаин (0.5 мг / кг / инфузия) дар худидоракунии музмини музмин (CSA) ва ҳайвоноти музмини музмин (CY) дар маҷмӯъ ...

Ҷамъоварии матоъ

Каламушҳо бо шуоъдиҳии радиорелегӣ ба минтақа равона карда шуданд (5 кВт, 1.5 с, Муримачи Киаи, Токио, Ҷопон). Майнаҳо зуд пароканда ва хунук карда шуда буданд ва нуқтаҳои дуҷонибаи матоъ (ҷарроҳии 14) аз қабати ядроҳо (NAc), ядрои NAc ва caudate-putamen (CPu) аз иловаро аз 1.5 мм бурида дар асоси координатҳо гирифта шуданд. Паксинос ва Ватсон (1998), тасвир дар Тасвири 1B). Намунаҳои бофтаи бо соникатсия дар буфери лизис, ки дорои протеаз ва фосфатаза ингибиторҳо доранд, гомогенӣ карда шуданд. Сипас гомогенатҳо барои дақиқаҳои 5 судак карда шуданд ва дар болои ях гузошта шуданд ва баъдан аз тарафи Лоудри муайян карда шудани консентратсияи сафедаҳо гузаронида шуд. Сипас гомогенатҳо дар намунаҳои 20 мкг ҷудо карда шуданд ва дар -80 ° C то истифода бурда шуданд.

Блотҳои Ғарбӣ

Намунаҳои матоъ ба ҷелонҳои 12% полиакриламид барои ҷудо кардани электрофорез дар Tris / Glycine / dodecyl sulfat sulfate sulfine buffed şine намакгузорӣ карда шуданд (TGS; Bio-Rad, Hercules, CA). Пас аз ҷудо шудан, намунаҳо тавассути электрофорез (250 mA барои 18 h) ба мембранаҳои флюоридии поливинилидин (PVDF; Amersham, Piscataway, NJ) интиқол дода шуда, баъдан дар 3% шири хушк ва 1 × Tris / Tween маҳлули намакдори намакдор (TTBS; Bio) баста шуданд -Рад, Геркулес, CA) як шабонарӯз дар 4 ° C. Сипас мембранаҳо дар 1 инкубатсия карда шуданд: 1000 дар об кардани антиденои ибтидоии Фра (аз ҷониби доктор Майкл Иадарола, Институти Миллии Саломатӣ, Бетезда, MD) дар як ҳалли 3% шир / 1 × TTBS дар як шабонарӯз дар 4 ° C. Мембранаҳо шуста шуданд. дар 1 × TTBS (4 маротиба, 15 дақиқа ҳар як) ва дар 1 × TTBS дорои ислоҳи 1: 25000 дар таҳшин кардани антителои дуввум бар зидди харгӯш ба пероксидаза (асбоби био-Rad, Геркулес, CA) барои 1 h дар ҳуҷра аст ҳарорат. Мембранҳо боз шуста шуданд ва пас аз он бо истифода аз Pierce Super Signal West Dura (Термо Фишер Илм Инк., Рокфорд, IL) кашфи химилюминесцентсия дар Hyperfilm (ECL плюс; Amersham) коркард шудааст. Ҷойгиркунии гурӯҳҳои сафедаҳои cFos, FosB ва ΔFosB дар тасвир оварда шудаанд Тасвири 1C. Мо дар ин таҳқиқот танҳо шаклҳои устувори ифодашудаи osFosB (яъне 35-37 kDa) -ро интихоб кардем, зеро маҳз ҳамон шаклҳое мебошанд, ки онҳо ҳангоми истифодаи музмини маводи мухаддир ҷамъ мешаванд ва нейропластикаро, ки вобастагӣ (Нестлер ва диг. 2001). Scion Image (Фредерик, MD) барои таъини иммунотерапияи мутлақ ба гурӯҳҳо истифода шуд ва сканер барои гирифтани аксҳои рақамии филмҳо истифода шуд. Пас аз ошкоркунӣ, мембранаҳо кушода шуданд ва барои β-тубулин дубора санҷида шуданд (1: 200000, Cell Signaling, Danvers, MA). Сатҳи β-тубулин ҳамчун назорати боркунӣ барои ба эътидол овардани сатҳи сафедаҳои ба Fos вобаста истифода бурда мешуд.

ҶТ-PCR

Миқдори RT-PCR (qRT-PCR) барои муайян кардани тағироти FosB ва ΔFosB mRNA фавран ва 24 h пас аз маъмурияти кокаин истифода шуд. Ҳайвонот тавассути декапитсияи босуръат эвтутатсия карда шуда, ядрои NAc, қабати NAc ва CPU, чӣ тавре ки тасвир шудааст ҷудо карда шуданд (Грэм ва диг. 2007; Бахтелл ва диг. 2008). Намунаҳои инфиродӣ фавран дар RNA-STAT-60 (IsoTex Diagnostics Inc, Friendswoodwood, TX) якхела карда шуданд ва дар яхи хушк то истихроҷи mRNA тибқи дастури истеҳсолкунанда ях карданд. Хулоса, ба ҳар як намуна хлороформ илова шуда, қабати обӣ пас аз центрифуга ҷудо карда шуд. Миқдори умумии mRNA бо изопропанол дар ҳузури акриламиди хаттӣ (Ambion, Austin, TX) тунук карда шуд. Намунаҳо центрифуга карда шуданд ва пеллетҳои ҷудошудаи mRNA бо 70% этанол шуста шуданд ва дубора дар оби DEPC партофта шуданд. Амагї mRNA бо DNAase коркард карда шуд (Амбион, Фостер Сити, Калифорния) ва баръакс ба cDNA бо hexamers тасодуфӣ бо истифода аз Superscript III (Invitrogen, Carlsbad, CA) гузаронида шуд. Пасиҳамҳои ибтидоӣ, ки барои афзоиши FosB, ΔFosB ва глицердегид-3-фосфати дегидрогеназа (GAPDH) истифода мешуданд, 5′-GTGAGAGATTTGCCAGGGTC-3 ′ ва 5′-AGAGAGAAGCCGTCAGGTTG-3 ′, 5′-AGGCAGTAGGAGGAGGAGGAGAG ′, Ва мутаносибан 3′-AGGTCGGTGTGAACGGATTTG-5 ′ ва 3′-TGTAGACCATGTAGTTAGAGGTCA-5. Ҳадди давра (cT) аз реаксияҳои сегона бо истифода аз ҳосилаи дуюми каҷи ампликатсия ҳисоб карда шуданд. Арзиши FosB ва ΔFosB cT ба арзишҳои GAPDH cT ()cT) эътидол оварда шуданд, зеро GAPDH аз ҷониби кокаин танзим карда нашудааст. Тағироти пӯшишҳо бо усули ΔΔcT ҳисоб карда шуданд, тавре ки қаблан тавсиф шуда буд (дастури биологии замима).

Таҳлили оморӣ

Сатҳи ҳар як сафеда ҳамчун% тағирёбанда аз назорати табобатнашуда барои ҳар як минтақаи мағзи сар ва нуқтаи вақт ифода карда шуд ва гурӯҳҳои омӯзишӣ бо таҳлили яктарафаи ихтилоф (ANOVA) муқоиса карда шуданд, ва сатҳи аҳамият дар p <0.05 муқаррар карда шуд. Таъсири умумӣ бо муқоисаҳои пост-ҳок бо истифода аз санҷишҳои Fishers LSD пайгирӣ карда шуд. Таносуби байни истеъмоли кокаин ва тағирёбии сатҳи сафеда бо истифодаи регрессияи хаттӣ арзёбӣ карда шуд.

Натиҷаи

Ҳайвонот дар гурӯҳи CSA, ки ба таври ихтиёрӣ худидоракунии кокаинро иҷозат доданд, дар ҳафтаи сеюми SA (рӯзҳои 13-18) намунаҳои устувори худидоракунии кокаинро намоиш доданд. Дар тӯли ҳафтаи охири SA истеъмоли миёнаи рӯзонаи кокаин дар каламушҳои CSA ва шарикони CY онҳо 46.9 (± 1.8) мг / кг / рӯз буд (диапазон: 37-60 мг / кг / рӯз). Дар рӯзи санҷиши ниҳоӣ, каламушҳои CSA дар таркиби 0 h (WD) гурӯҳи худкор 44.5 (± 2.5) мг / кг кокаин (диапазони 25.5-57.5 мг / кг) ва миқдори шабеҳи кокаин аз ҷониби CY гирифта шуданд. ва шарикони AY.

Танзими дифференсионии протеини "ФосБ" дар минтақаҳои сриаталӣ пас аз кокаини шадид ё музмин

Танзими дифференсионии протеини osFosB дар минтақаҳои стратиалӣ фавран пас аз 4 h пас аз воридшавии кокаин (0 h WD) пайдо шуд. Дар қабати NAc, танҳо кокаинҳои музмин дар гурӯҳҳои CSA ва CY (45-61%) назар ба назоратҳои табобатнашуда зиёдтар истеҳсол карданд (Намунаи 2A, F4,60 = 4.22, p = 0.005). Дар ядрои NAc, афзоиши назаррас дар ΔFosB (41%) пас аз дучоршавӣ бо шадиди гурӯҳи AY (Намунаи 2B, F4,60 = 17.04, p <0.001) ва афзоишҳои ҳатто калонтар (89-95%) пас аз кокаини музмин пайдо шуданд. Бар хилофи ҷамъшавии greaterFosB дар NAc бо маъмурияти кокаини музмин, CPu афзоиши шабеҳи ΔFosB (86-102%) дар байни ҳам гурӯҳҳои кокаин шадид ва ҳам музминро нишон дод (Тасвири 2C, F4,78 = 19.09, p <0.001). Дар афзоиши ΔFosB байни гурӯҳҳои CSA ва CY дар ҳама гуна минтақаҳои стриаталӣ фарқе набуд, ки нишон медиҳад, ки танзими он бо таъсири кокаин сарфи назар аз истеъмоли ихтиёрии кокаин алоқаманд аст. Танзими ΔFosB на камтар аз 24 соат пас аз кокаини музмин дар пӯсти NAc идома ёфт (F2,32 = 5.19, p = 0.02), NAc аслӣ (F4,60 = 4.53, p = 0.02) ва CPU (F2,34 = 12.13, p <0.001), аммо пас аз 3 ҳафта ба сатҳи ибтидоӣ баргашт. Ҳамин гуна афзоиш дар ΔFosB ҳангоми муқоисаи гурӯҳҳои кокаин бо гурӯҳи Saline SA пайдо шуд, ба истиснои он, ки афзоиши камтарини пӯсти NAc-и ҳайвоноти AY дар муқоиса бо Saline SA аҳамият ба даст оварданд, аммо на ба назорати табобат. Бо вуҷуди ин, ягон танзими назарраси ΔFosB дар ҳайвоноте, ки дар тӯли омӯзиш шӯрро дар муқоиса бо назоратҳои табобатнашуда идора мекарданд, вуҷуд надошт, ки нишон медиҳад, ки танзими ΔFosB аз кокаин аст ва натиҷаи расмиёти ҷарроҳӣ ё санҷиш нест.

Тасвири 2  

Танзими ΔFosB фавран пас аз истеъмоли кокаин ва дар ҳафтаҳои 24 h ва 3 WD. Сатҳи ΔFosB (35-37 кДа) ҳамчун тағирёбии миёнаи ± SEM фоиз аз назорати коркарднашудаи хонагӣ ифода карда мешавад (Назорат). Матоъ аз шӯр ...

Таҳаммулпазирӣ ба танзими сафедаи FosB пас аз кокаини музмин

Дар муқоиса бо танзими ΔFosB, таъсири яккарата ба 4 с IV маъмурияти кокаин дар сафедаҳои сриаталии 3 сафедаи FosB зиёдтар ба вуҷуд овард, аммо таҳаммулпазирии назаррас дар аксуламали мазкур пас аз маъмурияти музмини кокаин ба вуҷуд омад. Дар қабати NAc, FosB фавран пас аз маъмурияти музмин дар ҳарду гуруҳои CY ва CSA (260 h) дар маъмурияти шадиди кокаин дар ҳайвонҳои AY зиёд шуд (4%), аммо ин афзоиш коҳиш ёфт (ба 142-146%).Намунаи 3A, F4,77 = 23.16, p <0.001). Ҳамин гуна афзоиш дар FosB (295%) дар CPu аз ҳайвоноти AY ёфт шуд, ки пас аз маъмурияти кокаини музмин дар гурӯҳҳои CY ва CSA низ коҳиш ёфтанд (ба 135-159%) (Тасвири 3C, F4,69 = 13.362, p <0.001). Дар ядрои NAc, маъмурияти шадиди кокаин афзоиши назарраси FosB (164%) дар ҳайвоноти AY нисбат ба дигар минтақаҳои мағзи сар ба вуҷуд омад; аммо, ин афзоишҳо назар ба афзоиш пас аз маъмурияти музмин (109-112-%) дар гурӯҳҳои CY ва CSA (Намунаи 3B, F4,57 = 20.23, p <0.001). Тавре ки бо ΔFosB ёфт, танзими FosB пас аз кокаини музмин тавассути назорати ихтиёрии истеъмоли кокаин тағир дода нашудааст. Бо вуҷуди ин, дар муқоиса бо ΔFosB, афзоиши сафедаи FosB натавонист ҳам дар қабати NAc ва ҳам пас аз 24 соат боқӣ монад, гарчанде ки афзоиши боқимонда (38-52%) дар CPu идома ёфт (F2,32 = 3.590, p <0.05). Сатҳи ФосБ аз расмиёти ҷарроҳӣ ё санҷиш дар ҳайвоноти худидоракунии шӯр таъсир нарасонд.

Тасвири 3  

Танзими FosB фавран пас аз истеъмоли кокаин ва дар 24 h ва 3 ҳафта WD. Сатҳи сафедаҳои FosB (46-50 кДа) ҳамчун тағирёбии миёнаи ± SEM фоиз аз назорати коркарднашудаи хонагӣ ифода карда мешавад (нигаред ба Тасвири 2 афсона барои ихтисорот) ...

Аттентатсияи ҳам индуксияи osFosB ва FosB mRNA пас аз кокаини музмин

Таъсири шадиди ба 4 с маъмурияти дохили вояи кокаин дар ΔFosB mRNA дар қабати NAc зиёд шудааст (ҳамин хел 11-16)F3,19 = 15.82, p <0.001), ядрои NAc (F3,19 = 13.275, p <0.001 ва CPu (F3,11 = 5.78, p = 0.03) ҳангоми муқоиса бо идоракунии Saline SA (0 h WD, Намунаи 4A). Аммо, ин вокуниш дар гурӯҳои CY ва CSA пас аз маъмурияти музмини кокаин дар қабати NAc (3-4 парма), ядрои NAc (қатораи 4) ва CPu (3 пӯшиш) сахт қатъ карда шуд. Сарфи назар аз он, ки маъмурияти шадиди IV кокаин дар сафедаҳои FosB нисбат ба ΔFosB зиёдтар истеҳсол кардааст, маъмурияти шадиди кокаин нисбат ба ΔFosB (4-9) дар ҳама минтақаҳои 11 (зиёдшавии 16-3) нисбат ба RFosB (XNUMX-XNUMX баробар) зиёдшавии нисбатан камтари mRNA-ро ба назар мегирад.Намунаи 4B). Ин вокуниш пас аз кокаини музмин дар қабати NAc амалан бекор карда шуд (F3,19 = 26.22, p <0.001) ва CPu (F3,11 = 4.24, p <0.05), гарчанде ки афзоишҳои хурд, вале назаррас (2 маротиба) дар гурӯҳҳои CY ва CSA дар ядрои NAc боқӣ монданд (F3,19 = 11.10, p <0.001). Афзоиши кокаин ҳам дар ΔFosB ва FosB дар ҳайвоноти AY пас аз 24 h WD дар муқоиса бо ҳамин гурӯҳи назорати Saline SA нигоҳ дошта нашуд. Таҳлили минбаъдаи таносуби FosB ба ΔFosB mRNA дар нуқтаи вақти 0 h WD нишон дод, ки маъмурияти кокаин миқдори нисбии FosB ба ΔFosB mRNA дар пӯсти NAc ба таври назаррас коҳиш ёфтааст (F3,19 = 4.79, p = 0.02), NAc аслӣ (F3,19 = 4.49, p = 0.02) ва CPU (F3,11 = 5.59, p = 0.03) ба туфайли ташаккулёбии изофоти ΔFosB ва новобаста аз таҳаммулпазирии назаррас ба аксуламали тавассути кокаин дар ҳарду mRNA пас аз маъмурияти музмин (Тасвири 4C). Дар ин таносубҳо ягон фарқияти ҷиддӣ вуҷуд надошт, оё кокаин тавассути инфузия ё худ инфузия тавассути инфузияи яклухт гирифта шудааст ва таносуби нисбии FosB: ΔFosB аз рӯи нуқтаи вақти 24h WD дар ҳар се минтақаи майна ба ҳолати муқаррарӣ баргашт (маълумот нишон дода нашудааст).

Тасвири 4  

Танзими mRNA барои FosB ва ΔFosB фавран пас аз истеъмоли кокаин ва дар 24 h WD. Миқдори RT-PCR транскриптҳо барои ΔFosB (A), FosB (B) ва таносуби FosB / ΔFosB (C) ҳамчун миёна ифода карда мешаванд ± ...

Таҳаммулпазирии вобаста ба пурзӯр ба cFos-и кокаин дар NAc

Дар муқоиса бо танзими маҳсулоти генофики FosB, ки вокуниши фармакологӣ ба кокаинро новобаста аз маъмурияти ғайрифаъол ё ихтиёрӣ нишон медиҳад, танзими cFos дар минтақаҳои NAc дар муқоиса бо ҳайвонот тавассути инфузияҳои ғайрирасмии кокаин аз контексти худидоракунии кокаин сахт таъсир кард. Гӯшдории кокаин сатҳи сафедаҳои cFos (109-126%) ҳам дар ниҳони NAc ва ҳам бо идоракунии шадид ё музмин дар гурӯҳҳои AY ва CY (зиёд шудааст) афзудСурати 5A-B). Бо вуҷуди ин, вақте ки инфузияҳои кокаин ба таври ҳассос дар аксуламали ҳайвонҳои худидоракунанда расонида шуданд, ин посух коҳиш ёфт (ба 55%) дар ҷилди NAc (F4,60 = 9.14, p <0.001), ва натавонистааст cFos -ро дар ядрои NAc ба таври назаррас афзоиш диҳад (F4,57 = 5.92, p <0.001). Дар CPu, таҳаммулпазирӣ ба cFos-ҳои кокаин, ки бо маъмурияти кокаини ғайрифаъол ё ихтиёрӣ таҳия шудааст (Тасвири 5C) ва индуксияи cFos дар ҳайвонҳои AY (164%) дар ҳарду гуруҳи CY ва CSA коҳиш ёфтанд (ба 45-57%) (F4,67 = 13.29, p <0.001), монанд ба рушди таҳаммулпазирӣ дар индуксияи сафедаи FosB дар ҳама 3 зерқисматҳои стриаталӣ. Ҳамин тариқ, таҳаммулпазирии марбут ба тақвият ба cFos-и кокаин, ки махсусан дар минтақаҳои мезолимикии стриатум рух додааст. Дар ҳама 3 минтақаи стриаталӣ, афзоиши cFos дар ҳайвоноти худидоракунии шӯр ёфт нашуданд ва пас аз 24 h WD идома наёфтанд.

Тасвири 5  

Танзими cFos фавран пас аз истеъмоли кокаин ва дар 24 h WD. Сатҳи сафедаҳои cFos (52-58 kDa) дар каламушҳои назоратӣ (Назорат, Салейн SA), дар каламушҳо, ки кокаинҳои ғайрифаъолро шадид (AY) ё музмин (CY) гирифтаанд ва дар каламушҳо, ки зери ...

Робита байни истеъмоли кокаин, cFos ва osFosB дар зертобҳои striatum

Азбаски миқдори худидоракунии кокаин дар байни ҳайвоноти инфиродӣ ва шарикони ҳамроҳашон гуногун аст, мо миқдори истеъмоли кокаинро бо индуксияи cFos, FosB ва ΔFosB тавассути таҳлили чандсолаи регрессионӣ муқоиса кардем (нигаред) Ҷадвали иловагӣ 1 барои натиҷаҳои ҳама таносуби эҳтимолӣ). Алоқаҳои назаррас байни истеъмоли кокаин ва сатҳи cFos дар каламушҳо мавҷуд буданд, ки тавассути инфузияҳои ғайрифаъол идоракунии шадиди кокаинро ба даст оварданд ва ин муносибатҳо дар зергурӯҳҳои дорсалӣ ва вентралӣ фарқ мекарданд. Дар ядрои NAc, индуксияи cFos фавран пас аз 4 h маъмурияти шадиди IV кокаин бо истеъмоли кокаин сахт ва манфӣ пайваст карда шуданд, дар сурате, ки дар қабати NAc муносибати монанд, вале ночиз пайдо шуд (Намоиши 6). Баръакс, индуксияи cFos бо истеъмоли кокаин дар CPU ба таври мусбӣ робита дошт. Байни истеъмоли кокаин (ё фаъол ё ғайрифаъол) ва сафедаҳои FosB ё ΔFosB дар ҳама минтақаи зеризаминии стриаталӣ ягон алоқамандии назаррас вуҷуд надорад. Аммо, таносуби мусбати байни сатҳи cFos ва shellFosB дар қабати NAc 24 h пас аз кокаин вуҷуд дошт, аммо танҳо дар ҳайвонҳое, ки кокаинро тавассути худидоракунии ихтиёрӣ қабул карданд (Намоиши 7), ва бо вуҷуди он, ки сатҳи умумии cFos дар 24 h WD тағир наёфта буданд. Тамоюлҳои монанд (p <0.07) барои таносуби мусбӣ байни сатҳҳои cFos ва ΔFosB фавран пас аз 4 соати худидоракунии кокаин дар ядрои NAc ва дар CPu ҳайвонот, ки бори аввал кокаин мегиранд (гурӯҳи AY) пайдо шуданд.

Тасвири 6  

Таносуби ҳудудии байни истеъмоли кокаин ва иммуноретективии cFos пас аз кокаини шадид (AY). Фоизи фоизи афзоиш дар масунияти аз cFos бо истеъмоли кокаин дар ҷаласаи ниҳоӣ дар ядрои NAc (A) манфӣ ва ба таври мусбӣ вобаста аст ...
Тасвири 7  

Таносуби назаррас байни cFos ва osFosB дар қабати NAc дар ҳайвонҳои худидоракунанда. Фоизи афзоиши афзоянда аз масунияти immunForactF ба immunFosB пас аз 24 h WD дар худидоракунии кока аст ...

мубоҳиса

Дар таҳқиқоти мазкур мо таъсири таъсири шадид ва музмини дохили варақаи кокаин ё худидории музминро дар танзими сатҳи FosB, FosB ва cFos дар қабати NAc, NAc ва CPu subregatal striatal баррасӣ кардем. Таҳқиқоти қаблӣ собит кардаанд, ки osФосБ танҳо пас аз дучоршавӣ ба якбора зиёд мешавад ва пас аз он ки маъмурияти шадиди кокаин бо истифодаи тазриқи IP кокаин (умед ва диг. 1994, Nye ва диг. 1995; Chen ва диг. 1995). Ҳамин тариқ, мо дарёфтем, ки таъсири экспрессии музминии IV кокаин дар ҳама минтақаҳои стриалӣ, ки новобаста аз он аст, ба таври ихтиёрӣ ё ғайрифаъол гузаронида шудааст, зиёд шудааст. Бо вуҷуди ин, як фарқияти ҷиддӣ аз таҳқиқоти қаблӣ дар он аст, ки маъмурияти шадиди кокаин дар сатҳи сафеда ΔFosB ҳам дар NAc ва ҳам CPU афзудааст ва ба қабати NAc наздик шудааст. (p <0.1). Яке аз шарҳи имконпазири ин фарқ метавонад миқдор ва / ё мӯҳлати таъсири кокаин бошад, зеро каламушҳо дар гурӯҳи AY дар тӯли як соати 4 соат инфузияи сершумори IV кокаин гирифтанд, ки миқдори истеъмоли кокаин аз 25.5 то 57.5 ​​мг / кг дар саросари ҷаҳон буд ҳайвонҳои инфиродӣ, ки аз миқдори 10-20 мг / кг зиёдтар мебошанд, одатан бо як тазриқи як bolus IP истифода мешаванд (умед ва диг. 1994; Ли ва диг. 2006). Илова бар ин, кокаин тавассути роҳи мустақими IV идора карда шуд, ки сатҳи баландтари сатҳи мағзи кокаин ва дофаминро, ки дар тӯли ҷаласа мавҷуданд, ба вуҷуд меорад ва ин таъсирҳо одатан дар давоми як соат пас аз ворид кардани IP аз байн мераванд (Bradberry, 2002). Ҳамин тариқ, қобилияти ΔFosB барои ҷамъоварӣ пас аз як маротиба дучори шадиди кокаин, аз қувват ва давомнокии ҳавасмандкунии кокаин, ки дар тадқиқоти мазкур истифода шудааст, вобаста аст. Дар ҳар сурат, дарёфтани он, ки "ФосБ пас аз як бор дучор шудан ба кокаин метавонад ҳосил кунад, нишон медиҳад, ки" ФосБ метавонад таъсири худро нисбат ба қаблан фикр кардашуда зудтар ба даст орад, эҳтимолан дар натиҷаи зарбаи аввалаи худидоракунӣ.

Ҷолиб он аст, ки миқдори ΔFosB дар тӯли маъмурияти музминии кокаин байни минтақаҳои дорсаль ва вентралий дуртриалӣ фарқ мекард. Дар ядрои NAc, миқдори ΔFosB фавран пас аз рӯзи ниҳоии маъмурияти музмин (0 h WD) аз миқдоре, ки пас аз қабулкунии шадид пайдо шуд, ду баробар зиёдтар аст ва зиёдшавии ΔFosB дар қабати NAc танҳо пас аз истифодаи музмин , новобаста аз он, ки кокаин худидоракунии буд ё тавассути инфузияи ғайрирасмии яклухт гирифта шудааст. Афзоиш бо идоракунии музминии музмини кокаин эҳтимолан ҷамъшавии протеини баландсифати ΔFosB -ро инъикос менамояд, зеро онҳо ҳадди аққал 24 соат пас аз таъсири охирин боқӣ монданд. Баръакси ин, зиёдшавии миқдори ΔFosB дар CPU бо таъсири шадид ё музмин фарқ карда натавонист, ки эҳтимолияти шифтро дар натиҷаи таъсири шадид дар ин минтақаи мағзи сар тавсиф мекунад. Бо вуҷуди ин, ҳатто дар CPU, ҷамъшавии сафедаи ΔFosB пас аз гирифтории музмин ба афзоиши доимии ΔFosB мусоидат кардааст, зеро таҳаммулпазирии қавӣ ба мРНК-и кокаин ба воситаи osFosB дар ҳама минтақаҳои мағзи 3 бо идоракунии музмин таҳия шудааст.

Идоракунии шадиди кокаини IV инчунин сатҳи дарозии сафедаи FosB-ро афзоиш дод, дар муқоиса бо ядрои NAc дар қабати CPu ва NAc зиёдтар шуд. Аммо, mRNA барои FosB тақрибан 10 маротиба дар қабати NAc ва камтар аз 5 маротиба дар ядрои CPu ва NAc ҳосил шуд. Таҳаммулпазирии назаррас ба қобилияти кокаин барои эҷоди ҳам mRNA ва сафеда барои FosB бо маъмурияти музмин таҳия шудааст, гарчанде ки индуксияи пасти сафедаи FosB боқӣ монд ва метавонад бо ΔFosB барои шарикони ҳатмии AP-1 рақобат кунад. Таносуби нисбии FosB / ΔFosB mRNA низ тавассути маъмурияти шадиди кокаин бо сабаби индуксияи нисбатан бештари ΔFosB коҳиш ёфта, бо гузоришҳои қаблӣ бо истифодаи амфетамин (Алибхай ва диг. 2007). Дар муқоиса бо бозёфтҳои қаблӣ бо табобатҳои такрории амфетамин, коҳиш ёфтани таносуби нисбии FosB / ΔFosB mRNA аз кокаини шадид пас аз воридшавии музмин боқӣ мондааст, ки индуксияи нисбатан баландтари ΔFosB-ро аз FosB инъикос мекунад.

Далели он, ки сатҳи FosB пас аз истифодаи шакли шадиди кокаин ва давомнокии маъмурият, ки барои истеъмоли маводи мухаддир ба инсон бештар хос аст, ба раванди вобастагӣ таъсири муҳим дорад. Ҳамин тариқ, osFosB метавонад ба фаъолияти ҳатмии AP-1 бо истифодаи аввалияи кокаин мусоидат кунад, агар вояи мувофиқ худидоракунанда бошад. Бо вуҷуди ин, osFosB бо ҳам пайвастани FosB ва cFos барои фаъолияти ҳатмии AP-1 рақобат хоҳад кард ва боиси ифлосшавии генҳо ва нейропластикӣ, ки аз идоракунии музмин ҳангоми фарогирии баланд ҳангоми cFos ва FosB баланд мешавад Ҳамин тавр, osFosB метавонад пас аз воридшавии музмини кокаин аз ҳисоби зиёдтар ҷамъоварӣ дар striatum ventral ва коҳиш ёфтани рақобат барои шарикони ҳатмии AP-1 дар ҳарду ва стриатумҳои ventral таъсир расонад. Бо дарназардошти он, ки ифроти барзиёди мушаххаси стратологии osFosB ангезаро барои кокаин меафзояд (Colby ва диг. 2003), чунин тез ҷамъшавии ΔFosB бо таъсири аввалияи кокаин метавонад истифодаи кокаинро дар марҳилаҳои аввали раванди вобастагӣ зиёд кунад. Ғайр аз он, чунин ифодаи намоён ва паҳншудаи ΔFosB дар тӯли стриатум бо таъсири шадид метавонад фаъолияти ҳатмии AP-1-ро тавре тағйир диҳад, ки ба ташаккули одатҳои ҳассос тавассути ҷалби барвақти схемаҳои дорсалӣ мусоидат кунад (Белин ва Эверит, 2008).

Бо назардошти устувории изоформҳои ΔFosB, сатҳи osFosB баъд аз ҷаласаи охирини маъмурияти кокаин дар сатҳи 24 баландтар боқӣ монд, ки бо тадқиқотҳои қаблӣ бо истифодаи маъмурияти музминии музмин (Пич ва диг. 1997; Перотти ва диг. 2008). Тадқиқотҳои дигар бо истифодаи маъмурияти ғайрименсиалии тазриқи IP кокаин муайян карданд, ки ҷамъшавии osFosB метавонад ҳафтаи хуруҷи 1-2 дошта бошад (умед ва диг. 1994; Brenhouse ва Stellar, 2006; Ли ва диг. 2006), гарчанде ки мо барои ин тағиротҳо 3 ҳафта пас аз қатъ шудани маъмурияти кокаин ягон далеле наёфтем. Дар якҷоягӣ, ин тадқиқотҳо нишон медиҳанд, ки ҷамъшавии ΔFosB метавонад дар муддати нисбатан кӯтоҳи хуруҷ (<3 ҳафта) идома ёбад ва мустақиман ба истифодаи доимии кокаин мусоидат кунад, аммо метавонад мустақиман ба майли бештар барои бозгаштан дар хуруҷи тӯлонӣ мусоидат накунад. Аммо, immunFosB иммунореактивӣ дар нейронҳои стриаталии дорои D1 ретсептордор пас аз хуруҷи 30-рӯза аз кокаини такрорӣ дар мушҳо (Ли ва диг. 2006). Чунин намунаҳои мушаххас ба ячейкаҳо нисбат ба таҳлили тамоми матоъ, ки дар тадқиқоти мазкур истифода шудаанд, ба ҷамъшавии боқимондаи ΔFosB ҳассосанд ва ё шояд тағироти "ФосБ" на танҳо дар муш, балки нисбат ба каламушҳо дарозтаранд. Инчунин мумкин аст, ки ΔFosB рӯйдодҳои транскриптиро ба вуҷуд оварда, ба тағироти морфологии дарозмуддат ба монанди ташаккули сутунмӯҳра дар дендритӣ дар нейронҳои стриаталӣ дорои D1 (Ли ва диг. 2006; Мека ва диг. 2010). Дар робита ба ин, якчанд ҳадафҳои ΔFosB, аз ҷумла Cdk5 ва NFκB пас аз кокаини музмин зиёд мешаванд ва ин омилҳо метавонанд системаи гардиши ядроиро тавассути тағирот дар сохтор ва / ё функсияи нейрон тағир диҳанд (Анг ва диг. 2001; Benavides ва Bibb, 2004; Nestler, 2008). Ҳамин тариқ, имкон дорад, ки ҷамъшавии устувори osFB ҳангоми гирифтан барои таъсири дарозмуддати истеъмоли мухаддироти эм ва ё амалиёти ҷустуҷӯ зарурат набошад, балки ба ҷои он метавонад як "калиди молекулавӣ" бошад, ки равандҳои сершумори ҳуҷайраро, ки гузариш ба вазъиятҳои биологии вобасташуда (Нестлер ва диг. 2001).

Tӯ тадқиқоти мазкур нишон дод, ки ҷамъшавии кокаин бо миёнаравии «ФосБ аз назорати ихтиёрии истеъмоли кокаин дар ҳайвонҳои худидоракунанда, ки бо таҳқиқоти қаблӣ бо истифодаи қоидаҳои иммуногистохимиявӣ ва мухаддироти сершумори сӯиистифода таъсир намерасонад. (Перотти ва диг. 2008; Пич ва диг. 1997). Ин нишон медиҳад, ки болоравии кокаин дар ΔFosB ва FosB эҳтимолан ба аксуламали фармакологӣ ба кокаин ё ҳодисаҳои дигари сигнализатсия рецепторҳои моноаминергикӣ дар поёноб алоқаманд аст. Баръакси ΔFosB, мо дарёфтем, ки рушди таҳаммулпазирӣ ба cFos-и кокаин тавассути NAc ба назорати ихтиёрии истеъмоли кокаин дар NAc таъсир расонидааст, аммо на дар CPU. Ҳамин тариқ, таҳаммулпазирӣ ба cFos дар NAc ҳосилшуда дар ҳайвонҳое, ки тавассути инфузияи музмин ба таври инфиродӣ якдаки кокаинро гирифтаанд, дар муқоиса бо инфузияи шадиди яккок ба амал наомад. Ин бозёфтҳо аз гузоришҳои сершумор оид ба таҳаммулпазирӣ ба cFos-и ба ангезанда нигаронидашуда дар NAc, вақте ки маводи мухаддир тавассути сӯзандоруи IP гузаранда ба таври назаррас фарқ мекунанд (умед ва диг. 1994; Nye ва диг. 1995; Chen ва диг. 1995, 1997; Алибхай ва диг. 2007). Бо назардошти он, ки таҳаммулпазирӣ ба cFos дар ҳайвонҳои худидоракунии кокаин якчанд таҳқиқотро бо тазриқи такрории IP ба ҳам монанд менамояд, набудани таҳаммул бо идоракунии сурурангези музмини дохиливарданӣ метавонад ба стресс вобаста бо сӯзандоруи якчанд ва пешгӯинашавандаи яккарата кокаин алоқаманд бошад (Goeders 1997). Аз даст додани таҳаммулпазирӣ дар ventral, на striatum dorsal, бо таъсири интихобии ба микросхемаҳои лимбии, ки дар аксуламалҳои ҳавасмандӣ ва эҳсосӣ иштирок мекунанд, мувофиқат хоҳад кард. Илова бар ин, дар ҳоле ки таҳаммул ба ҷалб намудани cFos дар кокаин, ки худидоракунанда дар ҳайвонҳо ба вуҷуд омадааст, дар сафҳаи NAc протеини cFos дар сатҳи пас аз сессияи худидоракунӣ and50% зиёд ба назар мерасад ва тамоюли (p <0.1) барои афзоиши cFos низ дар ядро ​​рух додааст. Сабабҳои ин ихтилоф эҳтимолан фарқияти байни тазриқи IP ва инфузияҳои сершумори IV-ро дар муддати 4 соат инъикос мекунанд, ки дар боло муҳокима карда шуд. Индуксияи боқимондаи cFos дар NAc пас аз худидоракунии музмини кокаин як кашфи навест, ки нақши онро дар раванди вобастагӣ аз нав баррасӣ мекунад, ки комплексҳои AP-1, ки дорои cFos, ΔFosB ва FosB мебошанд, ҳамаашон то андозае пас аз таъсири музмин ҳамзистӣ мекунанд. .

Бо назардошти далелҳои охир, ки cFos мустақиман ба воситаи ҷамъшавии ΔFosB дар striatum dorsal танзим карда мешавад (Ихтиёрӣ ва диг. 2008), ҷолиб он аст, ки cFos-и кокаин дар CPU бо зиёдшавии ΔFosB бо таъсири шадиди кокаин мувозӣ буданд. Як эҳтимол он аст, ки ҷамъшавии ΔFosB бо маъмурияти шадид дар ҷаласаи 4 h хеле дер ба амал омада, ба индуксия ба cFos таъсир мерасонад, дар ҳоле ки мавҷудияти он 24 h пас аз кокаин дар ҳайвонҳои музмин табобатшаванда ба ба вуҷуд овардани cFos бо таъсири минбаъдаи кокаин монеъ мешавад. Ин ғоя бо тамоюл (p = 0.067) барои таносуби мӯътадили мусбии байни cFos ва ΔFosB дар CPU бо идоракунии шадиди кокаин (0 h WD) мувофиқат мекунад. Ин мафҳум инчунин бо таносуби қавии мусбати байни индуксионии cFos ва истеъмоли кокаин дар CPU ҳайвоноти шадиди зоғӣ мувофиқат мекунад. Ин бозёфтҳо нишон медиҳанд, ки ба мисли osFosB, вокуниши cFos метавонад вояи кокаинро, ки гирифта шудааст, инъикос намояд. Бо вуҷуди ин, дар NAc, ҷамъшавии зиёди BFB бо маъмурияти музминии музминии кокаин наметавонад мавҷудияти таҳаммулро дар аксуламали cFos дар ин ҳайвонҳо ҳисоб кунад. Ғайр аз он, гарчанде ки таҳаммулпазирӣ ба индуксияи cFos дар ҳайвонҳои худидоракунанда аён гардид, таносуби мусбати байни cFos боқимонда ва ΔFosB дар қабати NAc пас аз хуруҷи 24 h боиси таъсири манфии байни cFos ва ΔFosB дар striatum ventral нест. Тафовути дигар аз маълумоти CPU дар он аст, ки cFos дар ядрои NAc фавран баъди истеъмоли кокаин ба таври манфӣ алоқаманд буданд, ки метавонад тахифилаксияро дар дохили сессия нишон диҳад, ки бо зиёд шудани вояи дар стриатумии ventral рух медиҳад.

Дар маҷмӯъ, бозёфтҳои таҳқиқоти мазкур нишон медиҳанд, ки cFos, FosB ва osFosB пас аз маъмурияти шадид ва музмини варидшавии кокаин шакли махсуси минтақаро ифода мекунанд. Ин шеваҳои ифода аз вобастагӣ аз миқдор ва миқдори таъсири мухаддирот вобастагӣ доранд ва таҳаммулпазирӣ ба cFos-и кокаин алоқаманд аз худидории ихтиёрии кокаин вобастагии зиёд дорад. Натиҷаҳо инчунин нишон медиҳанд, ки "ФосБ бо ҳам ба таври шадиди ва ҳам музминии кокаин тавассути тазриқи дохиливардӣ ҷамъ шуда метавонад, ки ақидаи" ФосББ метавонад дар равандҳои барвақт, ки рафтори зиёдтари кокаинро афзоиш медиҳанд ва ба рушди нашъамандии кокаин мусоидат мекунанд, муҳим аст. Дар ниҳоят, фаҳмидани он, ки чӣ гуна osFosB метавонад ба таври ғайримустақим ба ҳавасмандии доимии дору ҳангоми истеъмол тавассути таъсироти нисбатан кӯтоҳмуддат ба зуҳури ген ҳангоми истифодаи кокаин ва давраи пеш аз истеъмол таъсир расонад. Кӯшишҳо барои муайян кардани ҳадафҳои гуногуни поёноб ва таъсири онҳо ба морфология ва / ё функсияҳои нейронӣ дар ниҳоят нақши ΔFosB ва дигар антигенҳои марбут ба Фосро дар ифодаи рафтори вобастагӣ муайян мекунанд.

Маводҳои иловагӣ

Ҷадвали S1

Ҷадвали иловагӣ 1. Натиҷаҳои умумии таносуб барои таҳлилҳои хаттии регрессионӣ. Се панели чап дорои таносуби байни истеъмоли кокаин ва сатҳи cFos (панели боло), FosB (панели миёна) ё ΔFosB (панели поён) мебошанд. Се панели рост дорои таносуби байни cFos ва ΔFosB (панели боло), cFos ва FosB (панели миёна) ва FosB ва ΔFosB (панели поён) мебошанд. Минтақаҳои нисбии мағзи сар ва нуқтаҳои вақти WD барои ҳар як таҳлили инфиродӣ дар якҷоягӣ бо r- ва p-арзишҳои мувофиқ нишон дода шудаанд. * p <0.05, T0.1> p> 0.05.

тасдиыот

Муаллифон нисбати ин асар ҳеҷ гуна ихтилофи манфиатҳоро изҳор намекунанд. Ин кор аз ҷониби грантҳои NIH DA 10460 ва DA 08227 ва аз ҷониби Профессори Весли Гиллиланд дар таҳқиқоти биотиббӣ дастгирӣ карда шуд.

Ихтисораҳои истифодашуда

  • ВПМ - Воҳиди Пардозиши Марказӣ
  • caudate-putamen
  • НАК
  • нусхабардорӣ
  • AY
  • юғи шадид
  • CY
  • юғи музмин
  • CSA
  • худидоракунии кокаин
  • WD
  • бозхонди
  • IV
  • варид
  • IP
  • дохилӣ.

Адабиёт

  • Алибхай IN, Green TA, Potashkin JA, Nestler EJ. Танзими Фосфат ва ΔfosB Ифодаи mRNA: Дар in vivo ва inro vitro. Майнаи Res. 2007; 1143: 22 – 33. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Фукуссияи омили атомии-B дар ядро ​​ба воситаи маъмурияти музмини кокаин. J Нейрохим. 2001; 79: 221 – 224. [Садо Ояндасоз]
  • Бахтелл РК, Чой К.Х., Симмонс Д.Л, Фалкон Е, Монтегия Л.М., Нев Л.Н., Худи Д.В. Нақши баён GluR1 дар ядро ​​нейронҳоро дар ҳассосияти кокаин ва рафтори ҷустуҷӯи кокаин афзоиш медиҳад. Eur J Neurosci. 2008; 27: 2229 – 2240. [Садо Ояндасоз]
  • Belin D, Everitt BJ. Одатҳои ҷустуҷӯи кокаин аз пайвастагии силсилавии ба допамин вобаста, ки вентральро бо striatumи dorsal мепайвандад. Нейрон. 2008; 57: 432 – 441. [Садо Ояндасоз]
  • Benavides DR, Bibb JA. Нақши Cdk5 дар нашъамандӣ ва пластикӣ. Энн NY Acad Sci ИМА. 2004; 1025: 335 – 344. [Садо Ояндасоз]
  • Гузариш аз истифодаи назоратшаванда ба истеъмоли маводи мухаддир бо гум шудани ҳассосият алоқаманд аст. Майнаи Res. 2004; 995: 46 – 54. [Садо Ояндасоз]
  • Bradberry CW. Динамикаи допамин аз ҳабс дар амалҳои шадид ва музмини кокаин. Асабшинос. 2002; 8: 315 – 322. [Садо Ояндасоз]
  • Brenhouse HC, Stellar JR. c-Fos ва ΔFosB дар минтақаҳои ҷудогонаи қабати accumbens ядро ​​дар каламушҳои ҳассос кокаин ба таври гуногун иваз карда мешаванд. Behav Neurosci. 2006; 137: 773 – 780. [Садо Ояндасоз]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabepppu Y, Hop BT, Nestler EJ. Танзими сафедаҳои ба мисли ФосБ ва ФосБ тавассути мусодираи электроконвульсия ва кокаин. Мол Фармакол. 1995; 48: 880 – 889. [Садо Ояндасоз]
  • Chen J, Kelz MB, Hope BT, Nakabepppu Y, Nestler EJ. Антигенҳои музмини музмини Fos: вариантҳои устувори osFosB, ки дар майна тавассути табобати музмин ба вуҷуд меоянд. J Neurosci. 1997; 17: 4933 – 4941. [Садо Ояндасоз]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Давомнокии изофаи стрессии ҳуҷайраи стосиалии osFosB ҳавасмандии кокаинро зиёд мекунад. J Neurosci. 2003; 23: 2488 – 2493. [Садо Ояндасоз]
  • Эдвардс С, Вислер К.Н., Фуллер DC, Орсулак Ҷ.Д., Худ DW. Тағироти марбут ба нашъамандӣ дар D1 ва D;2 аксуламалҳои рафтории ретсепторҳои допамин баъд аз худидоракунии музмин кокаин. Нейропсихофарм. 2007a; 32: 354 – 366. [Садо Ояндасоз]
  • Эдвардс S, Грэм Д.Л, Бахтелл РК, Худи Д. Пас аз худидории музмин ба таҳаммулпазирии мушаххас ба фосфилизатсияи сафеда, ки аз тарафи CAMP танзим карда мешавад, таҳаммулпазирии минтақа мебошад. Eur J Neurosci. 2007b; 25: 2201 – 2213. [Садо Ояндасоз]
  • Goeders ІН. Нақши нейроэндокрин дар тақвияти кокаин. Психонеуроэндокринол. 1997; 22: 237 – 259. [Садо Ояндасоз]
  • Грейбиел А.М., Мораталла Р, Робертсон Ҳ.А. Амфетамин ва кокаин фаъолсозии мушаххаси генофонди c-fos дар воҳидҳои стриосома-матрица ва воҳидҳои лимбии стриатумро бармеангезанд. Proc Natl Acad Sci ИМА. 1990; 87: 6912 – 6916. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Грэм Д.Л., Эдвардс С, Бахтелл РК, ДиЛеоне Р.Ҷ., Риос М, Худи Д. Фаъолияти динамикии BDNF дар ядро ​​бо истифодаи кокаин афзоиш меёбад. Nat Neurosci. 2007; 10: 1029 – 1037. [Садо Ояндасоз]
  • Умед B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Танзими экспрессияи генҳои фаврӣ ва ҳатмии AP-1 дар ядрои каламуш бо кокаини музмин афзоиш меёбанд. Proc Natl Acad Sci ИМА. 1992; 89: 5764 – 5768. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Бастани як маҷмӯи дарозмӯҳлати AP-1, ки дар таркибҳои фосфатҳои таркиби фосфорӣ бо мағзи кокси музмин ва дигар табобати музмини ҷудошуда ташкил шудааст. Неурон. 1994; 13: 1235-1244. Бояд гуфт,Садо Ояндасоз]
  • Умед BT. Кокаин ва комплекси транскриптсияи AP-1. Энн NY Acad Sci. 1998; 844: 1 – 6. [Садо Ояндасоз]
  • Jorissen HJMM, Ulery PG, Henry L, Gourneni S, Nestler EJ, Rudenko G. Dimerization ва хосиятҳои ДНК-ҳатмии омили транскриптсияи ΔFosB. Биохимия. 2007; 46: 8360 – 8372. [Садо Ояндасоз]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, ва дигарон. Ифодаи омили транскрипт ΔFosB дар мағзи ҳассосият ба кокаинро назорат мекунад. Табиат. 1999; 401: 272 – 276. [Садо Ояндасоз]
  • Kufahl PR, Zavala AR, Singh A, Thiel KJ, Dickey ED, Joyce JN, Neisewander JL. Ифодаи с-Фос, ки ба барқарор кардани рафтори ҷустуҷӯи кокаин бо нишонаҳои шартии вокуниш вобаста аст. Синапс. 2009; 63: 823 – 835. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Ли K, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Кокаин аз ҷониби ташаккули сутунмӯҳраи дендритӣ дар D1 ва D2 допамин ретсепторҳои дорои нейронҳои торикии миёна дар атумҳои ядрой. Proc Natl Acad Sci ИМА. 2006; 103: 3399 – 3404. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Maze I, Covington HE, III, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren YH, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Нақши асосии метилтрансферазаи гистони G9a дар пластикӣ тавассути кокаин. Илм. 2010; 327: 213 – 216. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. ΔFosB: гузариши молекулавӣ барои мутобиқати дарозмуддат дар майна. Мол Brain Res. 2004; 132: 146 – 154. [Садо Ояндасоз]
  • Neisewander JL, Baker DA, Fuchs RA, Tran-Nguyen LTL, Palmer A, Marshall JF. Изҳори ақидаи Fos ва рафтори ҷустуҷӯи кокаин дар каламушҳо пас аз дучор шудан ба муҳити худидоракунии кокаин. J Neurosci. 2000; 20: 798 – 805. [Садо Ояндасоз]
  • Nestler EJ, Barrot M, Self DW. ΔФосБ: Калиди устувори молекулавӣ барои нашъамандӣ. Proc Natl Acad Sci ИМА. 2001; 98: 11042 – 11046. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Nestler EJ. Механизмҳои транскриптсияи вобастагӣ: нақши osFosB. Phil Trans R Soc B. 2008; 363: 3245-3255. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Nye HE, Hope BT, Келз MB, Iadarola M, Nestler EJ. Омўзиши ферментологии танзими хронометражии музмини мушакии FOS аз тарафи кокаин дар стриат ва атомҳои атроф. Ҷаббор Расул. 1995; 275: 1671-1680. Бояд гуфт,Садо Ояндасоз]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Ҷалби «ФосБ» дар сохторҳои мукофотонидашудаи мағзи сар пас аз стрессҳои музмин. J Neurosci. 2004; 24: 10594 – 10602. [Садо Ояндасоз]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B ва дигарон. Намунаҳои фарқкунандаи «ФосБ дар мағзи сар ба воситаи нашъамандӣ. Синапс. 2008; 62: 358 – 369. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Паксинос G, Ватсон GC. Майнаи каламуш дар координатаҳои стереотаксикӣ. 4th. Ню Йорк: Матбуоти академӣ; 1998.
  • Pich EM, Pagliusi SR, Tessari M, Talabot-Ayer D, van Huijsduijnen RH, Chiamulera C. Субстратҳои асабҳои асаб барои хосиятҳои иловагии никотин ва кокаин. Илм. 1997; 275: 83 – 86. [Садо Ояндасоз]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I ва дигарон. OsФосБ миёнаравии эпигенетикии байни c-fos ген пас аз Гӯшдории музмини амфетамин. J Neurosci. 2008; 28: 7344 – 7349. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Уоллес Д.Л, Виалу V, Риос Л ва дигарон. Таъсири DeltaFosB дар ядро ​​ба рафтори табиии марбут ба мукофот афзоиш меёбад. 2008; 28: 10272 – 10277. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Ҷавон С.Т., Поррино Л.Ҷ., Иадарола М.Ҷ. Кокаин сафедаҳои striatal c-Fos-immunoreactive -ро тавассути dopaminergic D ба вуҷуд меорад1 ретсепторҳо. Proc Natl Acad Sci ИМА. 1991; 88: 1291 – 1295. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
  • Ҷанг Ҷ, Ҷанг Л, Ҷио Х, Ҷанг Q, Ҷанг Д, Лу Д, Катс JL, Xu M. c-Фос ба харидани ва нобудсозии тағйирёбии доимии кокаин мусоидат мекунад. Нейроосес. 2006; 26: 13287-13296. Бояд гуфт,Садо Ояндасоз]