Ҳосили простатитҳои дандеттилро ба ташаккули шарикии шарик дар функсияҳои занонаи prairie (2013)

Nat Neurosci. Дастнависи муаллиф; дар PMC Jan 1, 2014 дастрас аст.

Нашр шудааст дар шакли охирин таҳияшуда ба монанди:

Nat Neurosci. Jul 2013; 16 (7): 10.1038 / nn.3420.

Интишори онлайн Jun 2, 2013. doi:  10.1038 / nn.3420

PMCID: PMC3703824

NIHMSID: NIHMS477621

Нусхаи ниҳоии таҳриршудаи ин мақоларо дар ин ҷо дастрас кардан мумкин аст Н.Н. Нососчи

Ба мақолаҳои дигар дар PMC нигаред класс мақолаи нашршуда.

Гузаштан ба:

мавҳум

Дар prairie vogie иҷтимоӣ аз (Микроскус ochrogaster), ҷуфтшавӣ пайванди ҷуфтҳоро ба вуҷуд меорад, ки бо ташаккули афзалияти шарикӣ оғоз шуда, аз ҷониби як қатор нейротрансмиттерҳо, аз ҷумла окситоцин, вазопрессин ва допамин танзим карда мешаванд. Дар ин ҷо мо механизмҳои потенсиалии эпигенетикиро, ки миёнаравии танзими ҷуфтҳоро баррасӣ кардаанд, баррасӣ кардем. Мо нишон медиҳем, ки ингибиторҳои гистагии дезетилаза натрий ва TrichoStatin A (TSA) дар ташаккули бартарии шарикон дар холигии занбӯрҳо дар сурати набудани ҷуфтшавӣ мусоидат мекунанд. Ин бо танзими мушаххаси окситоцин (OTR) ва ретсепторҳои вазопрессин V1a (V1aR) дар афзоиш ёфтани ядро ​​тавассути зиёд шудани ацетилизатсияи гистон дар таблиғи худ алоқаманд буд. Ғайр аз он, бартарии шарикони TSA аз ҷониби муҳосираи OTR ё V1aR дар аккомпенди ядрой пешгирӣ карда шуд. Муҳим он аст, ки афзалияти ҳамшарики ҳамтои шабеҳ ҳамон танзими эпигенетикии OTR ва V1aR промоутерони генро чун TSA ба вуҷуд овард. Ин мушоҳидаҳо нишон медиҳанд, ки TSA ва ҳамҷоякунӣ бартарии шариконро тавассути ҳодисаҳои эпигенетикӣ осон мекунанд ва исботи бевоситаи мустақими танзими эпигенетикии ҷуфтҳо мебошанд.

Муқаддима

Вобастагии иҷтимоӣ хусусияти муҳими рафтори иҷтимоии инсон аст ва камбудиҳои иҷтимоии маърифатӣ хусусиятҳои маъмул дар бисёре аз ихтилолоти психиатрӣ, аз ҷумла ихтилоли шизофрения ва аутизм, инчунин вобастагӣ ва депрессия мебошанд1. Ноқилҳои прираи иҷтимоӣ аз ҷиҳати иҷтимоӣМикроскус ochrogaster) ҳамчун як намунаи ҷолиб барои таҳқиқи асосҳои нейробиологии замимаи иҷтимоӣ пайдо шуданд, зеро ҳам лабораторияҳо ва ҳам одамони зинда алоқаи дарозмуддати ҷуфтиро барпо мекунанд2-4ки бо ташаккули рафтори интихобии мансубият нисбат ба шарик оғоз мешаванд, афзалият номида мешавад5. Ин ташаккули афзалияти шарикӣ дорои як қатор нейротрансмиттерҳо ва системаҳои гормонӣ, аз ҷумла нейропептидҳои окситоцин ва вазопрессин (AVP) ва допаминии mesolimbic мебошанд5.

In умумӣ, ташаккули афзалияти шарик тавассути тавассути AVP нейротрансмиссия дар ventral pallidum ва septum паҳлуии (LS) дар мардҳо ва окситоцин нейротрансфератсия дар accumbens ядрои (NAcc) ва корти прелимбӣ дар холигии занона миёнаравӣ карда мешавад6-8.

Одатан дар мукофоти табиӣ ба монанди ҷуфт шудан, допамин инчунин ҳамчун миёнарави муҳими афзалияти шарикӣ дар ҷойҳои холӣ амал мекунад. Фаъолсозии ретсепторҳои навъи допамин D2R (D2R) дар NAcc мусоидат мекунад, дар ҳоле ки фаъолсозии ресепторҳои навъи D1 (D1R) ташаккули афзалияти шарикро дар ҳам ҷойҳои мардона ва ҳам занона пешгирӣ мекунад.9-11.

Муҳим он аст, ки тағирот дар ифодаи генҳои окситоцин ва ретсепторҳои AVP V1a, OTR ва V1aR, мутаносибан метавонанд ба афзалияти шарикон ба таври назаррас таъсир расонанд. Дар холаҳои занбӯрпарварии зан, масалан, аз ҳад зиёд OTR дар NAcc ба бартарии шарикон дар набудани ҷуфтшавӣ мусоидат мекунад12-14.

Ғайр аз танзими ҳамбастагии ҷуфтҳо, окситоцин ва АВП инчунин дар доираи васеи рафторҳои иҷтимоӣ, аз ҷумла эътирофи иҷтимоӣ, таҷовуз ва нигоҳубини модар татбиқ карда мешаванд.15, 16. Қобили қайд аст, ки вайроншавии рафтори охирин дар хояндаҳо боиси нейротапсияи дарозмуддат тавассути механизмҳои эпигенетикӣ, аз ҷумла метилизатсияи ДНК-и альфа ретсепторҳои эстрогенӣ мегардад.17 ва генҳои AVP18, инчунин ацетилизатсияи гистони препаратдори рецепторҳои глюкокортикоид19. Ғайр аз он, ингибиторҳои гистосаклифтез (HDAC), ки экспрессияи генро тавассути афзоиши ацетилизатсияи гистон дар мағзи хоянда беҳтар мекунанд.20, метавонад ин тағиротро баргардонад19, ва бевосита ба рафтори иҷтимоӣ ба монанди қабули ҷинсӣ таъсир расонад21. Муҳим он аст, ки дар хатти ҳуҷайраҳои саратони шуш, ингибитор HDAC трихостатин А (TSA) транскриптсияи OTR-ро мустақиман тавассути тариқи густариши ацетилатсияи гистон афзоиш медиҳад.22.

Аз ин рӯ, як заминаи эпигенетикиро дар ташаккули афзалияти ҳамшарикӣ дар гирду атроф пешниҳод кардан мумкин аст. Барои санҷидани ин гипотеза, мо аввал таъсири ду ингибиторҳои HDAC, бутирати натрий (NaB) ва TSA-ро ба ташаккули афзалияти ҳамшарикӣ дар холигии занони калонсол арзёбӣ кардем. Пас аз он, мо механизмҳои молекулавии миёнаравиро дар бораи таъсири TSA дар ҳавасманд кардани ҳамшарики бартарӣ дар доғи занона таҳқиқ кардем. Дар ниҳоят, мо дарёфтем, ки оё тағиротҳои эпигенетикиро, ки TSA дар ҷараёни истиқомат ба амал омадааст, тавассути ҷуфтшавӣ низ ба амал овард.

Натиҷаи

Табобати TSA бартарии шариконро осон мекунад

Ноқилҳои занонаи прайри ҷинсӣ ба таври ғайрирасмӣ ба таври махсус сӯзонда шуданд (icv.) бо CSF ё CSF дорои 0.08, 0.4 ё 4 ng TSA фавран пеш аз сукунати 6-соат бо як мард бе ҷуфт, ва сипас афзалияти шарики онҳо санҷида шуд. Шаш соати ҳамзабонӣ бо мард бидуни ҷуфт барои ташаккули бартарии шарикӣ дар холати занҷираи занона мусоидат намекунад4 ва ҳамин тариқ ин парадигмаи рафтор барои арзёбии таъсири маводи мухаддир ба мусоидат ба ташаккули афзалияти шарикӣ васеъ истифода шудааст5.

Ҳайвонҳои табобатшудаи CSF нишон доданд, ки алоқаҳои ғайримустақим бо шарикӣ ё шахси бегона пас аз 6 соатҳои муштарак бидуни ҷуфтшавӣ (t15= 0.76, P = 0.46; Намоиши 1a). Бо вуҷуди ин, ҳайвонот бо TSA дар ҳама вояи санҷидашуда муомила бо шарикӣ нисбат ба шахси бегона бештар вақт сарф карданд (t8= 4.35, P = 0.002 барои TSA 0.08 ng гурӯҳ; t15= 3.63, P = 0.002 барои TSA 0.4 ng гурӯҳ; ва t8= 2.58, P = 0.03 барои TSA 4 ng гурух). Муҳим он аст, ки дар фаъолияти локомотив фарқияти гурӯҳӣ пайдо нашудааст (F3,46 = 1.25, P= 0.30, Намунаи 1b) ва ягон рафтори хашмгинонаи зани озмоишӣ нисбат ба шахси бегона ё шарик мушоҳида карда нашуд ва нишон дод, ки оқибатҳои TSA ба афзалияти иҷтимоӣ хосанд, на ба тағир додани локомотив ё бадбинии иҷтимоӣ ба бегона.

Тасвири 1  

Як сӯзандоруи шадиди трихостатин А (TSA) ташаккули бартарии шариконро дар холигии занҷираҳои зан дар сурати набудани ҷуфтшавӣ мусоидат мекунад. (a) Моеъи ғадуди мағзи сар (CSF), ки зан дар ҳолати набудани ҳамсари ҷуфтшуда дар муддати 6 соат ба мард дучор шудааст ...

Барои омӯхтани он, ки оё TSA гетонҳои ацетилизатсияро дар сохторҳои майна, ки дар ташаккули афзалияти шарикӣ иштирок мекунанд, як гурӯҳи алоҳидаи духтарон бо вояи миёнаи TSA (0.4) сӯзандору карда шуд. nж) ва дар сурати набудани ҷуфтшавӣ дар тӯли 30 дақиқа, 2 ё 9 соат бо мард зиндагӣ мекунад. Қобили қайд аст, ки ҳеҷ гуна тағироти назаррас дар сатҳи гетонии гетонии H3 (Lys14) дар ҳар лаҳзаи дилхоҳ ҳам NAcc ва ҳам путаменти кауд муайян карда нашудааст (P > 0.05 барои ҳама гурӯҳҳо, Расми 1в & д). Ин нишон медиҳад, ки TSA ба ташаккули афзалияти шарикон дар набудани ҷуфтшавӣ мусоидат мекунад, сарфи назар аз он, ки ба гетон гетонии H3 глобалии ацетилизатсия дар NAcc ё путаменаи каудат таъсир нарасондааст.

Муҳим он аст, ки бутират натрий бартарии ҳамшарикро дар холигии занона пас аз ҳамроҳи мард бо 6 соат бе ҷуфтшавӣ, ки бо афзоиши гистони гетонии H3 гилеми (Lys14) дар NAcc (Тасвири иловагӣ 1). Таъсири TSA ба ташаккули афзалияти шарикӣ бо ин васила метавонист бо ингибиторҳои дигари HDAC таҷдид карда шавад, ки иштироки ҷилавгирӣ аз HDAC-ро тақозо мекунад, на ин ки таъсири ғайрирасмии TSA дар мусоидат ба бартарии шарикӣ. Бо назардошти он, ки TSA inhibitor дараҷаи I / II HDAC нисбатан мушаххас ва аффин аст23, 24, ва таъсири рафтори TSA нисбат ба NaB намоёнтар буд, мо TSA-ро бар NaB барои таҳқиқи робитаҳои молекулавии мушаххас дар қисмҳои зерини таҳқиқот истифода бурдем.

Таносуби молекулии афзалияти шарикони TSA-ро дастгирӣ кунед

Азбаски тағъирот дар дараҷаи ифодаи ген дар гилеми NAcc бо стратегияҳои гуногуни ҷуфтшавӣ байни холаҳои якранг ва ғайримогамикӣ ва бо тағир додани ташаккули афзалияти шарикӣ дар ҷойҳои водиҳо алоқаманд буданд12, 13, 25, 26, мо баҳо додем, ки оё ташаккули афзалияти шарики аз ҷониби TSA бо вариантҳои ифодаи ген дар NAcc алоқаманд буд ё не.

Табобати TSA (0.4 ng, icv.) болоравии сатҳи OTR mRNA дар NAcc пас аз 2 соат дар якҷоягӣ дар муқоиса бо идоракунии CSF боэҳтиёт шудааст (t10 = 2.38, P = 0.038, Намоиши 2a), ки пас аз 9 соатҳои истиқоматӣ тамаркуз ёфт (t9 = 2.17, P = 0.058, Намунаи 2b). Гарчанде ки болоравии ночиз, вале начандон назарраси V1aR mRNA дар NAcc 2 пас аз тазриқи TSA ба назар мерасид, фарқияти гурӯҳҳо дар ягон нуқтаи барои дигар mRNAҳои дигар ченкардашуда муайян карда нашуданд, аз ҷумла D1R ё D2R (P > 0.05, Намунаи 2a, б). Муҳим он аст, ки дар ягон нуқтаи дилхоҳ ва дар ҳар як mRNA чен карда нашудааст, фарқияти гурӯҳӣ мушоҳида нашудааст.P > 0.05 барои ҳама гурӯҳҳо, Тасвири 2c, d) бо ишора ба он, ки афзоиши шумораи OTR mRNA дар ҳайвонҳои табобатшаванда ба NAcc хос аст. Ғайр аз он, чунин танзими танҳо пас аз ҳамроҳи мард бо мард мавҷуд буд, зеро сатҳи OTR ва V1aR mRNA дар NAcc пас аз тазриқи TSA бе истиқоматгоҳ (OTR: 2% ± 100.0 барои CSF, 11.70% ± 86.7 барои TSA) пас аз тазриқи TSA 12.11 соат бетағйир монд. гурӯҳ, t12 = 0.79, P = 0.444; V1aR: 100.0% ± 26.24 барои гурӯҳи CSF, 92.3% ± 13.75 барои гурӯҳи TSA, t9 = 0.27, P = 0.791).

Тасвири 2  

Табобати TSA (0.4 nж) ретсепторҳои окситоцин (OTR) ва вазопрессин (V1aR) дар холигии занбӯрпарварии зан ҳангоми ҷобаҷогузорӣ бо мард дар ҳолати набудани ҷуфтшавӣ ба танзим медароранд. Сатҳи OTR mRNA (a, b) ва сафеда (e, f) пас аз 2 (a, e) ва 9 соат ба танзим дароварда шуданд ...

Дар баробари сатҳи баландтари OTR mRNA, ҳайвонҳои табобаткардаи TSA инчунин сатҳи баландтари сафедаи OTR-ро дар ҳарду нуқта дар NAcc (2 соат) нишон доданд: t10 = 2.34, P = 0.041; Соатҳои 9: t10 = 3.16, P = 0.01, Сурати 2e, f), аммо аз путамен ботлоқ нест (t10 = 0.41, P = 0.69, Сурати 2g, h). Ҷолиб он аст, ки ҳангоми тағирёбии ҷиддии сатҳи V1aR mRNA дар NAcc дар 2 ё 9 пас аз тазриқи TSA муайян карда намешавад (Намунаи 2a, б), сатҳи сафедаи V1aR дар муқоиса бо ҳайвонот бо CSF, дар NAcc дар 9 соат ба таври назаррас баланд шуд (t9 = 3.46, P = 0.007, Намоиши 2f), аммо путамэнро боэътимод накунед (t10 = 0.98, P = 0.35, Сурати 2h). Гарчанде ки бо баъзе тафовутҳо, сатҳи сафедаҳои D1R ва D2R дар NAcc ва путамати каудат аз ҷониби маъмурияти TSA ба таври назаррас таъсир накардаанд (P > 0.05, Тасвири 2e-h).

TSA ба ацетилатсияи гистронҳои октрат ва avpr1a мусоидат мекунад

Афзоиши ҳам mRNA ва сатҳи сафедаҳо барои OTR пас аз истиқомат дар TSA пешниҳод карданд, ки TSA эҳтимол транскрипсияи охтр, рамзгузории ген барои OTR, ба ҷои тағир додани тарҷума ё гардиши сафеда. Ғайр аз он, сатҳи сафедаҳои V1aR дар NAcc баландтар буданд, ки бо зиёдшавии ночиз, вале ба таври назаррас дар сатҳи mRNA пас аз табобат TSA алоқаманд набуданд (Намоиши 2). Бо дарназардошти он, ки TSA ингибитори дараҷаи I ва II HDAC мебошад23, 24, 27, мо фарз кардем, ки TSA афзоиши ацетилизатсияи гистонро дар охтр ва avpr1a промоутерон дар NAcc, баъдан такмилдиҳии нусхабардории онҳо. Гурухи нави хайвонот гирифтанд icv. тазриқи TSA (0.4) nж) ва фавран пеш аз қурбонӣ бо як мард бидуни ҳамсари ҳамсоя зиндагӣ кунанд. Равзанаи вақти 30-дақиқа дар асоси корҳои қаблӣ, ки ҳадди аксар афзоиши ацетилатсияи гистро пас аз воридкунии TSA маҳаллӣ ба каламушҳо ва мушҳо интихоб шудааст, интихоб карда шуд28, 29. Ацетилатсияи H3K14 дар охтр ва avpr1a сипас промоутерон тавассути хроматин дар бораи иммунопреципент таҳлил карда шуданд.

Дар баробари баланд шудани сатҳи OTR mRNA ва сафеда, ки қаблан мушоҳида шуда буданд, ҳайвонҳои табобаткардаи TSA дар гетонҳои H460 дар баландшавии хеле баланд (+ 3%) -ро нишон доданд. охтр Пешбарандаи ген, дар муқоиса бо контролҳои CSF, дар NAcc (t10 = 5.88, P = 0.0002), аммо аз путаменти каудатӣ набаред (t9= 0.31, P = 0.76, Намоиши 3a). Ғайр аз он, гистон H3 асетилизатсия дар avpr1a промоутер пас аз маъмурияти TSA (+ 30%) дар NAcc (196 мин) ба таври назаррас баланд бардошта шуд (t10 = 3.12, P = 0.01), аммо аз путамати каудатӣ набарояд (t9= 0.38, P = 0.71), дар муқоиса бо идоракунии CSF боэҳтиёт (Намунаи 3b). Аз ин рӯ, TSA макони гетонҳои ацетилизатсияро махсусан дар NAcc дар аввали 30 дақиқа пас аз оғози ҳамзабонӣ бо мард афзоиш дод.

Тасвири 3  

Табобати TSA acetylation гистонро тақвият медиҳад охтр ва avpr1a пешбарандагон дар давраи якҷоя бо мард дар набудани ҷуфтшавӣ. Гистон H3 ацетилизатсия (Lys14) дар охтр (а) ва avpr1a (б) промоутерон дар accumbens ядрои (NAcc) зиёд шуд, аммо на ...

TSA тавассути OTR ва V1aR афзалиятҳои ҳамшариконро осон менамояд

Аз маҷмӯи қаблии таҷрибаҳо, як модели молекулии амал ба вуҷуд меояд, ки дар он замон ҳангоми истиқомат TSA ацетилатсияи гистонро дар охтр ва avpr1a промоутерон, баъдан транскрипсияи худро такмил медиҳанд ва дар натиҷа сатҳи сафедаҳои OTR ва V1aR то 9 соат пас аз оғози давраи ҳамзабонӣ баланд мешавад. Муҳим он аст, ки ин таъсири TSA ба макон хос аст, зеро параметри каудат бетаъсир мемонад. Дар ин ҷо мо озмоиш кардем, ки оё ин афзоиш аз ҷониби TSA дар OTR ва V1aR ба мусоидат ба ташаккули афзалияти шарикон алоқаманд аст. Ноболи занбурӯғи тазриқии дохили-NAcc аз TSA (0.04) гирифтандng дар як тараф) ё бо пешгирии тазриқи пешакӣ (30minutes пеш аз тазриқи TSA, 0.5ng дар як тараф) -и CSF ё CSF, ки яке аз ду антагонистҳои мухталифи OTR (OTA (B) ва OTA (T)) ё antagonist V1aR (V1aRA) дорад. Дарҳол пас аз тазриқи TSA, духтарон дар тӯли 6 соат бе мард зиндагӣ карда, сипас имтиҳони бартарии шарикро гирифтанд.

Ҳайвонҳои табобатшудаи CSF бартарии шарикро намедиданд (t5 = 0.17, P = 0.87, Намоиши 4a). Бо вуҷуди ин, ҳайвоноти аз ҷониби TSA табобатшуда дар паҳлӯи паҳлӯ бо “шарик” назар ба “шахси бегона” вақти зиёдтар сарф карданд ва ишора мекунанд, ки як тазриқи ягонаи TSA ба таври мустақим ба NAcc барои мусоидат намудан ба ташаккули афзалияти шарикон кофӣ астt5 = 7.04, P = 0.0009). Ҷолиб аст, ки муҳосираи OTR ё V1aR бо табобати пешакӣ бо OTA (B), OTA (T) ё V1aRA оқибатҳои TSA-ро пешгирӣ карданд (P > 0.05 барои ҳамаи гурӯҳҳо). Азбаски дар фаъолияти локомотивҳо фарқиятҳои гурӯҳӣ ёфт нашуданд (F4,32 = 1.89, P = 0.14, Намунаи 4b), ин маълумотҳо пешниҳод мекунанд, ки TSA дар NAcc ба воситаи механизмҳои OTR- ва V1aR ташаккули афзалияти ҳамшарикро ба тариқи мушаххас ба рафтор осон мекунад.

Тасвири 4  

Афзалияти шарики TSA, ки окситоцин- (OTR) ва вазопрессин (V1aR) -ро дар бар мегирад, аз ҷониби нейротранссистемаи рецепторҳои миёнаравӣ дар accumbens занона талаб карда мешавад. (a) TSA бартарии ҳамшариконро ҳангоми ворид шудан ба ядроҳои атомӣ (0.04) осон мекунад ng дар ҳар тараф), ...

Ҳамсӯҳбатшавӣ нейроаптатсияҳои шабеҳро ҳамчун TSA ба амал меорад

Пас аз мушоҳидаҳои қаблии мо, мо муайян кардем, ки потенсиали эпигенетикии окситоцин ва нейротрансмиссияи вазопрессин дар NAcc барои мусоидат ба ташаккули афзалияти шарик дар набудани ҷуфтшавӣ кофӣ буд. Барои таҳқиқ кардани он, ки оё ин нейроаппаратҳо дар вақти ташаккули табиии афзалияти шарикӣ рух медиҳанд, холҳои занбӯрпарварӣ дар вақти 24 соат дар ҳузури ҷуфт шудан бо мард бо мард зиндагӣ мекарданд, ки афзалияти шариконро ба миён меорад4, ва қурбонӣ. Дар муқоиса бо духтарони соддалавҳ зиёдшавии сатҳи OTR ва V1aR mRNA ва сафеда дар NAcc ба мушоҳида расид (OTR: + 38%, t10 = 2.68, P = 0.02 барои mRNA, ва + 58%, t8 = 3.05, P = 0.01 барои сафеда; V1aR: + 89%, t14= 2.53, P = 0.02 барои mRNA, ва + 26%, t20 = 2.23, P = 0.037 барои сафеда, Намунаи 5a, б).

Тасвири 5  

Ҳамзабонӣ бо ҷуфтшавӣ ба баландшавии окситоцин (OTR) ва вазопрессин (V1aR) дар ҳавзаҳои афзояндаи ядрои (NAcc) холҳои занбӯрҳо мусоидат мекунад. Ҳамроҳи 24h бо марде, ки ҳамроҳи ҷуфтҳояш OTR (a) ва V1aR (b) mRNA ва сафедаро танзим мекунад ...

Азбаски ҳам сатҳи mRNA ва сафедаҳо барои OTR ва V1aR аз ҷониби ҳамхобагӣ бо ҷуфтшавӣ зиёд шуданд, мо минбаъд таҳқиқ кардем, ки оё ин танзимот бо густариши эпигенетикӣ алоқаманд аст ё не охтр ва avpr1a транскриптсияи генҳо. Ҳамин тариқ, як партияи нави духтарон бо мард дар тӯли 6 соат бо ҷуфтшавӣ ва H3K14 дар якҷоягӣ дар назди охтр ва avpr1a промоутерон, ки тавассути хроматини иммунопреципиент чен карда шудаанд. Дар баробари OTR ва V1aR mRNA ва сафедаҳо, холҳои занбӯрпарварӣ баландшавии H3K14-ро дар охтр ва avpr1a таблиғгарон дар NAcc, дар муқоиса бо духтарони соддалавҳаи ҷинсӣ (охтр: t9 = 2.64, P = 0.02; avpr1a: t9 = 2.91, P = 0.017 Тасвири 5c, d). Ин маълумотҳо нишон медиҳанд, ки парадигмаҳои муштараке, ки бартарии ҳамшарикро дар холати занона бартарӣ медиҳанд, танзими OTR ва ифодаи V1aR -ро дар NAcc тавассути механизмҳои эпигенетикӣ, ки пас аз муоинаи TSA мушоҳида мешаванд, ба вуҷуд меоранд.

мубоҳиса

Дар таҳқиқоти мазкур, мо бори аввал гузориш медиҳем, ки танзими эпигенетикии ташаккули афзалияти шарикон. Аввалан, мо нишон додем, ки зиёдшавии ацетилизатсияи гистон дар NAcc аз ҷониби маъмурияти ингибитор HDAC ба ташаккули бартарии шарикон дар холигии занони калонсол дар сурати набудани ҷуфтшавӣ мусоидат мекунад. TҲамин тавр, мо далелҳои мустақимро ошкор намудем, ки ташаккули афзалияти шарик дар духтарон эпигенетикӣ аст, чунки ҳамзабонӣ ва ҳамсарӣ бо мард афзоиш ёфтааст охтр ва avpr1a ифодаи генҳо тавассути адетилатсияи гистонидашудаи мукаммал дар NAcc. Маъмурияти TSA дар NAcc бартарии шариконро ба миён овард ва ба сатҳи баландтари OTR mRNA ва сафедаҳо дар NAcc оварда расонид. Ғайр аз он, гарчанде ки гистологияи гистологии глобалии H3 дар духтарони TSA мутаассир нашудааст, миқёси бойшавии ацетилизатсияи гистон дар охтр промоутер дар NAcc барвақттар аз маъмурияти TSA пас аз 30 дақиқа мушоҳида карда шуд. Дар ниҳоят, бастани OTR дар NAcc барои пешгирии афзалияти шарикони TSA мусоидат кард, кифоя буд. Азбаски тағиротҳои ба ин монанд эпигенетикӣ асосёфта пас аз ҳамҷояшавӣ бо ҳамсарӣ, тибқи тартиботе, ки афзалияти шариконро талаб мекунад, муайян карда шуданд, маълумоти мо модели танзими эпигенетикии рафтори иҷтимоиро пешниҳод карданд. Dҳамзабонӣ бо мард, TSA ё ҳамсар, зуд гистони мушаххаси H3-ро дар охтр Промоутер дар NAcc, ки транскрипсияи онро беҳтар мекунад, боиси сатҳи OTR mRNA ва сафедаҳо мегардад ва баъдан ба ташаккули афзалияти шарик мусоидат мекунад.

Дар холаҳои занбӯрпарварии занона, 6 соати ҳамроҳи мард бо ҳамсар надоштан ташаккули афзалияти шариконро водор намекунад4ва ин парадигмаи рафтор барои санҷиши таъсири манипулятсияҳои фармакологӣ ба ҳавасмандкунии афзалияти шарикӣ истифода шудааст5. Дар таҳқиқоти мо, дар ҳоле ки назорати шӯр ё CF-табобат бартарии шариконро инкишоф надод, холаҳои занбӯрпарварӣ бо NaB ё TSA муносибат карданд. Азбаски на NaB ва TSA ба локомотивҳои умумӣ таъсир накарданд, таъсири онҳо ба афзалияти шарикон ба назар мерасид, на ба таъсироти дуввум ба локомотив. Таъсири мушаххаси TSA онро мушоҳидаҳои молекулярии мо тасдиқ карданд. Дар ҳақиқат, гарчанде идора карда мешавад icv., мо тавонистем, ки тағироти мушаххаси генро дар NAcc пайдо кунем, аммо на дар сохтори ҳамсоя, аз ҷумла путамен кауд. Ғайр аз ин, ҳатто дар дохили NAcc, D1R ва D2R mRNA ва сафедаҳо бетаъсир монданд. Чунин мушаххасот барои ингибиторҳои васеи HDAC ба монанди TSA, ки ҳам ба синфҳои I ва II HDAC-ҳо таъсир мерасонад, тааҷубовар аст. Бо вуҷуди ин, TSA гузориш дод, ки ба ифодаи танҳо як гурӯҳи хурди генҳо дар геномияи ширхӯрӣ таъсир мерасонад30-32, аз ҷумла дар мушҳо20.

Мо дар ин ҷо нишон додем, ки acetylation histone H3 дар Lys14 дар охтр промоутер, тағирот дар робита бо транскрипсияи гендерии васеъ, аз ҷумла ҳангоми пластикии мағзи сар33, 34, сатҳи баландтари OTR mRNA ва сафедаҳоро таъкид мекунад. Дар посух ба TSA, ацетилизатсияи гистон дар охтр промоутер меафзояд ва барои фаъол кардани транскриптсияи он дар хати ҳуҷайраи инсон мусоидат мекунад22, дастгирӣ ёфтани моро дастгирӣ мекунад охтр метавонад эпигенетикӣ танзим карда шавад. Азбаски муҳосираи маҳаллии OTR дар NAcc барои пешгирии оқибатҳои рафтории TSA кифоя буд, маълумоти мо шаҳодат медиҳад, ки изҳороти TTRA аз ҷониби OTR дар NAcc дар ҷамоагӣ барои мусоидат ба ташаккули афзалияти шарикон миёнаравӣ кард. Гузашта аз ин, 24 соат бо ҳамҷоякунӣ бо ҷуфти ҳамсар, ки тартиби боэътимоди бартарии шарикро дар холати занҷираи занона нишон медиҳад, афзоиши чунин ифодакунандаи OTR дар занонаи NAccро ба вуҷуд овард. Ин комилан бо иштироки маълуми окситоцин ва ресепторҳои он дар нейробиологияи ташаккули афзалияти шарикӣ дар холаҳои занона аст. Ҷуфтшавӣ болоравии сатҳи окситоцин дар изофаи NAccро афзоиш медиҳад25, ва инфузияи маҳаллии окситоцин ба NAcc, дар набудани ҷуфтшавӣ ба бартарии шарик мусоидат мекунад8. Ғайр аз ин, антагонистҳои OTR ташаккули афзалияти шарикро, ки аз ҷониби маъмурияти окситоцин ё ҷуфт оварда шудааст, бозмедоранд8, 35. Муҳим он аст, ки изофабори вирусии миёнаравии OTR дар NAcc зан барои мусоидат ба ташаккули афзалияти шарик шарик кофист12, 13.

Илова бар тақвияти нақши OTR, натиҷаҳои мо инчунин далелҳо барои фаъолсозии изҳороти ген OTR тавассути механизмҳои эпигенетикӣ ҳангоми якҷоя зиндагӣ бо мард дар набудани ҷуфтшавӣ, пешниҳод мекунанд. Дар ҳақиқат, гарчанде ки барои муайян кардани афзалияти шарикӣ нокифоя аст, чунин ҳамоҳангӣ бидуни ҷуфт кардан ба муддати кӯтоҳ равандҳои нейробиологиро дар асоси ташаккули афзалияти шарикӣ фаъол мекунад. Масалан, ду соати озодшавии мард ба мард боиси баландшавии ночиз, вале ғайримуссибат ҳангоми окситоцин дар NAcc зан мегардад25. Аз ин рӯ, пешниҳод кардан мумкин аст, ки TSA ё NaB нерӯҳои нейроаппаратҳоро, ки аз ҷониби ҳамҳабитшавӣ бо мард ба вуҷуд омадаанд, ба рушди афзалияти шарикӣ мусоидат мекунад. Ҷолиб он аст, ки чунин потенсиал аллакай дар хояндаҳо хабар дода шудааст, ки ингибиторҳои дараҷаи I ва II HDAC, аз ҷумла NaB ва TSA, муттаҳидкунии як чорабинии омӯзиширо мусоидат мекунанд, ки боиси ташаккули хотираи дарозмуддат дар ҳайвоноти назоратӣ намегардад.36, 37. Барои пуштибонӣ аз ин мафҳум, муддати тӯлонии зиндагии муштарак (масалан., 48hours) ҳатто дар сурати надоштани ҳамсар, афзалияти шариконро бармеангезад4. Инчунин қайд кардан муҳим аст, ки ҳамбастагӣ бо ҷуфтшавӣ дар занҳои NAcc танзимгари танзими OTR ва V1aR тавассути ҳамон механизмҳои эпигенетикӣ, ки пас аз якҷоя зиндагӣ бо табобати TSA мушоҳида мешаванд, нишон медиҳад, ки TSA ва ҷуфтшавӣ ба ҳамон як роҳ мусоидат мекунанд ташаккули афзалияти шарик. Муҳимаш он аст, ки TSA дар сурати набудани якҷоя зиндагӣ бо мард, OTR ва V1aR-ро дар NAcc-и зан намесозад. Дар маҷмӯъ, ин фарзияро дастгирӣ мекунад, ки TSA ба ташаккули афзалияти шарикӣ тавассути потенсиализатсияи нейротаптапсияҳои эндогенӣ, ки табиатан аз ҷониби ҳамҳайба бо мард ба вуҷуд оварда шудааст, мусоидат мекунад, на ба худ фаъол кардани ин ё ине дигар neuroadaptations.

Oомӯзиши ur инчунин нақши муҳимро дар NAcc V1aR дар ташаккули афзалияти шарики зан нишон медиҳад, зеро ҳайвоноти табобатшудаи TSA сатҳи баланди V1aR-ро нишон медиҳанд, ки муҳосираи онҳо ташаккули афзалияти шарикони TSA-ро пешгирӣ кардааст. Ғайр аз он, ин таъсирҳо бо ацетилизатсияи гистони баландтарин дар avpr1a промоутер, сарфи назар аз баландшавии назарраси V1aR mRNA, бо сабаби нуқтаи ғайримутаносиби вақт. Гарчанде ки мо наметавонем танзими мӯътадилии сафедаҳоро аз ҷониби TSA тавассути ацетилатсияи сафедаҳои ғайри гистрон истисно кунем38, ин бозёфт шаҳодат медиҳад, ки, ба монанд охтр промоутер, TSA метавонад мусоидат кунад avpr1a транскрипт ба воситаи ацетилатсияи гистонҳои маҳаллӣ. Ҳол он ки саҳми AVP дар ҳамбастагии зану мард тавсиф карда шудааст5, нақши он дар рафтори занон ҳанӯз ҳам баҳснок аст. Аз як тараф, а icv. Сӯзандоруи AVP ташаккули афзалияти ҳамшарикро дар ҳамсар ва мард, ки бо муҳосираи V1aR ё OTR пешгирӣ карда мешавад, осон мекунад39. Аз тарафи дигар, а icv. тазриқи антагонисти V1aR афзалияти шарики ҳамсӯҳбатшавандаро дар мардон мепӯшонад, аммо на дар занҳо,40. Аммо, ҳамаи ин таҳқиқот истифода шуданд icv. сӯзандоруҳо, пешгирии фаҳмиши минбаъда дар сохторҳои ҳамроҳ. Дар ин ҷо, мо далелҳои аввалро пешниҳод мекунем, ки AVP нейротрансмиссия дар NAcc метавонад ба ташаккули афзалияти шарикӣ дар холаҳои занона ҷалб карда шавад, дар ҳоле ки аксарияти адабиётҳо иштироки худро дар соҳаҳои гуногун ба монанди палидум, септумҳои паҳлуӣ, ядрои катии stria terminalis, ва amgdala дар писарон5. Аз ин рӯ, ҷолиб он аст, ки басташавии OTR ё V1aR дар NAcc-и зан барои пешгирии ташаккули афзалияти шарикӣ пас аз табобати TSA кофӣ буд ва ишора мекунад, ки ташаккули афзалияти шарик ҳам фаъолсозии ҳам V1aR ва OTR-ро талаб мекунад.. Т.бозёфтҳои ӯ мушоҳидаҳои қаблиро дар холаҳои мардикории мардона мувофиқат мекунанд ва дастгирӣ мекунанд, ки дастрасии ҳамзамон ба OTR ва V1aR дар LS барои афзалияти шарики AVP аз ҷониби шарикон муҳим аст6. Ғайр аз он, мушоҳидаҳои болоравии сатҳи ҳам OTR ва V1aR дар ҳайвоноти табобаткардаи TSA минбаъд талаботи фаъолсозии яквақтаи AVP ва нейротрансляторҳои окситоцинро барои пайваст кардани ҷуфт дастгирӣ мекунад.

Дар якҷоягӣ бо окситоцин ва AVP, нейротрансмиссияи допамин дар NAcc ба ташаккули афзалияти шарикӣ дар холаҳои занона модул мекунад9. Гарчанде ки ҳамсар ҷудошуда допаминро дар NAcc фароҳам меорад9, тағирот дар сатҳи ресепторҳо танҳо пас аз муддати тӯлонӣ ба мушоҳида мерасад, ки аз 24h - ҳамоҳангсозӣ бо ҷуфтшавӣ, ки барои нигоҳдории алоқаи ҷуфт муҳим аст10. Мувофиқи ин мушоҳидаҳо, холаҳои занбӯрпарварӣ, ки бо TSA муносибат карда шудаанд, бартарии шариконро дар фарқияти назаррас дар ресепторҳои допамин D1R ва D2R нишон доданд. Аз ин рӯ, набудани танзими ретсепторҳои допамин боз як далели хусусияти TSA-ро таъмин мекунад.

Маълумоти мо бори аввал як ҷузъи эпигенетикӣ дар нейробиологияи пайвастшавии ҷуфт пешниҳод мекунад ва пешниҳод мекунад, ки TSA дар холаҳои занбӯруғ «ҳолати рухсатӣ» -ро ба вуҷуд меорад, посухи молекулавии табииро ба ҳамзабонӣ тақвият мебахшад ва ба ташаккули муносибатҳои қавитари иҷтимоӣ мусоидат мекунад ки ба афзалияти шарикон оварда мерасонад. Аз ин рӯ, тасаввур кардан дар бораи он, ки афзалияти шарики аз ҷониби TSA дастгиришаванда метавонад боз ҳам тақвият дода шавад ва боиси пайванди доимӣ гардад. Гарчанде ки мушаххасоти HDAC-ҳои мушаххас ҳанӯз номаълум боқӣ мемонад, аз ин рӯ, таҳқиқи минбаъдаи таъсири TSA ба дигар рафтори марбут ба стратегияи якхелаи зиндагӣ дар ғурфаҳои ҷазираҳо, ба монанди таҷовузи интихобӣ ва нигоҳубини волидайн ҷолиб хоҳад буд. Бо назардошти аҳамиятнокии холҳои прерия дар моделсозии механизмҳои нейробиологии алоқаи ҷуфт дар одамон5, ва ингибиторҳои умедбахши HDAC аллакай дар озмоишҳои клиникӣ24, 41, 42, маълумоти мо имкониятҳои нави фармакологиро барои таъсир расонидан ба рафтори иҷтимоӣ ба вуҷуд меоранд.

Усулҳои

Мавзӯъҳо

Voles prairie зан содда ҷинсӣ (Микроскус ochrogaster) аз колонияҳои зотпарварӣ дар рӯзи 21 синнашон аз пистон шир гирифта шуда, дар ҷуфтҳои бародару хоҳарони ҳамҷинс дар қафасҳои пластикӣ (12 × 28 × 16 см) бо об ва хӯрок таъмин карда шудааст Озодӣ ". Ҳама қафасҳо зери як 14 нигоҳ дошта мешуданд: 10 с даври рӯшноӣ ва торик ва ҳарорат тақрибан 20 ° C буд. Ҳангоми ба синни 70 - 90 расидан ҳамаи ҳайвонҳо ба таври тасодуфӣ ба гурӯҳҳои таҷрибавӣ тақсим карда шуданд. Саршумори ҳайвоноти истифодашуда ба таҳқиқоти қаблии саҳроӣ аз ҷониби гурӯҳи мо ва дигарон дар якҷоягӣ бо таҳлили нерӯ асос ёфтааст. Тартиби таҷрибавӣ аз ҷониби Кумитаи институтсионалии нигоҳубин ва истифодаи ҳайвонот дар Донишгоҳи давлатии Флорида тасдиқ карда шуд.

маводи мухаддир

Бутирати натрий (NaB), ки дар намакҳо гудохта шудаанд ва Трихостатин А (TSA), ки дар интиқолдиҳандаи сунъии ғадуди мағзи ғарбӣ (CSF, BioFluids, Роквилл, MD) харида шудаанд, ҳам аз Сигма-Олдрих (Сент-Луис, MO) харида шудаанд. NaB ба таври амудӣ сӯзандор карда шуд (ip) ҳангоми вояи 600 мг / кг, ки бо сабаби талқин кардани ацетилизатсияи гистон дар якчанд сохторҳои майна дар мушҳо43, 44. Ба ин монанд, миқёси вояи истифодашуда барои TSA ба корҳои қаблӣ муайян карда шуда, самаранокии онро дар ҳаводиси рӯйдодҳои гистони маҳаллӣ ва тағирёбии ифлоси ген дар хояндаҳо муайян кард19, 20. Антагонисти ретсепти интихобии V1aR V1aRA, d(CH.)2)5[Tyr (Me)] AVP ва antagonist OTA (B), [d(CH.)2)5, Tyr (ман)2, Тахсил4, Тир-НХ29] -ОВТ), аз Bachem (Torrance, CA) ба даст оварда шуданд. Дуввум, интихобкунандаи боз ҳам бештар интихобкунандаи OTR, OTA (T), dГли-НХ2-d(CH.)2)5 [Тир (ман)2, Тр4] ОВТ45, аз ҷониби доктор Морис Маннинг (Донишгоҳи Толедо, OH) хайрхоҳона дастгирӣ карда шуд. Ин антагонистҳо ва возаҳои истифодашуда дар асоси таҳқиқоти қаблӣ, ки интихоби худро барои V1aR ё OTR нишон доданд, интихоб карда шуданд35, 39, 46-49.

Каннулясияи стереотаксикӣ ва микроинексия

Духтарон бо пентобарбитали натрий (вазни бадан 1mg / 10g) ва каннули дастгоҳи пӯлоди зангногир 26 (Plastics One, Roanoke, VA) ба таври ғайримуқаррарӣ ҷойгир карда шуда, ба майдони паҳлуӣ нигаронида шудаанд (яктарафа; бари нӯг дар −2.5 мм, 0.6X мм) rostral, 1.0 mm паҳлӯ ва 2.6 mm ventral to bregma) ё макон ба мушаххас ба NAcc (дутарафа; бари бинӣ дар −2.5 mm, 1.7 mm rostral, ± 1.0 mm дутарафа ва 4.5 mm ventral to bregma). Баъд аз 3 рӯзи барқароршавӣ, ба субъектҳо микроинъексияҳои ҳам CSF ё CSF гирифтанд, ки дорои консентратсияи гуногуни TSA мебошанд. Вақте ки антагонистҳои интихобӣ барои OTR ё V1aR истифода мешуданд, онҳо 30 дақиқа пеш аз TSA ворид карда мешуданд. Сӯзандорҳо бо сӯзанаки ченаки 33, ки 1 мм аз каннулаи роҳнамо ба минтақаи ҳадаф дароз карда шудааст, дар ҳаҷми тазриқи 500 nL ба рентгени паҳлуӣ (icv.) ё 200 nL дар ҳар тараф ба NAcc. Сӯзан ба сӯзандоруи Гамильтон (Хэмилтон, Рено, НВ) тавассути қубурҳои полиэтилен-20 пайваст карда шуд ва депрессияи плунжер оҳиста гузаронида шуд, ки барои як маротиба тазриқи 1 лозим аст. Дар охири таҷриба, ҳама предметҳо бо дезапапсияи зуд қурбонӣ карда шуданд ва майнаҳо барои санҷидани ҷойгиркунии каннула аз ҷониби нозир ба шароити озмоишӣ ҷудо карда шуданд. Мавзӯъҳо бо канотҳои нодуруст ҷойгиршуда аз таҳлили додаҳо хориҷ карда шуданд.

Санҷиши афзалият дар якҷоягӣ ва ҳамшарикӣ

Дарҳол пайравӣ кунед ip., icv., ё сӯзандоруи дохили-NAcc, занҳо дар тӯли 6 соат бидуни ҷуфт бо мард зиндагӣ мекарданд. Набудани ҷуфтшавӣ бо омӯзиши рафтори видео сабт карда шуд. Барои таҳқиқи нейроаппаратҳо, ки аз ҷониби ҳамҳаракат бо ҳамсарӣ ва занони эстроген ҷаббида шудаанд (2µg дар як рӯз, ip., дар давоми 3 рӯз) дар давоми 6 ё 24 соат бо мард зиндагӣ мекард ва ҳузури ҷуфт кардан тафтиш карда шуд як шохаи дар навори видео (аз 6 то 11 дар давоми аввалин 6 соатҳои истиқоматӣ).

Озмоиши афзалияти шарикӣ фавран пас аз истиқомати 6-соат, тавре ки дар боло тавсиф шуда буд, иҷро карда шуд11. Хулоса, дастгоҳи санҷишии се камера аз қафаси бетараф иборат буд, ки ба ду қафаси шабеҳи параллел пайваст карда шудааст, ки дар ҳар як ҷунбиши ҳавасмандкунанда - як марди ношинос "бегона" ё "шарики" -и марди шинос, ки дар давраи ҳамзистӣ истифода мешуданд. Субъектҳои занона дар давоми озмоиши 3-соата озодона дар саросари дастгоҳ ҳаракат мекарданд ва мардони ангезанда дар дохили қафасҳои худ баста шуданд, ки бо ҳам тамоси мустақим надоштанд. Тамоми ҷаласа ба навор гирифта шуд ва муддати тамоси паҳлӯ ба паҳлӯ бо субъект ё шарик ё ношинос баъдтар аз ҷониби як озмоишгари омӯзишдида, ки аз гурӯҳҳои биологӣ бехабаранд, миқдор дода шуд. Афзалияти шарик ҳамчун субъектҳое муайян карда шуд, ки дар тамоси бадан бо шарик нисбат ба бегона вақти зиёдтар сарф мекунанд, тавре ки аз ҷониби як ҷуфт, дуҷониба муайян карда мешавад t-тест. Ғайр аз он, дастгоҳи се камера бо фотобейзор-сенсорҳо муҷаҳҳаз шуда буд, ки имкон медиҳад, ки фаъолияти локомотив бо нишон додани шумораи воридшавии зан ба камераҳои ҳавасмандкунанда муайян карда шавад. Ин холҳои локомотив ба ин васила ба мо имкон медиҳад, ки таъсири рафтори дуввумро ба маводи мухаддир ба рафтори духтарон назорат кунем, аз қабили фаъолияти умумӣ, изтироб ё таҳқиқи тағйирёфтаи муҳити нав, ки одатан гурӯҳи мо ва дигарон истифода мебаранд12.

Истихроҷи RNA ва сафедаҳо

Духтарон тавассути декапитсияи тез қурбонӣ карда шуданд ва мағзҳо фавран ҷудо карда шуданд ва дар ях хушк. Қисматҳои Coronal (200 µm) дар криостат бурида шуда, ба слайдҳо ба слайдҳои микроскоп васл карда шуданд. Пунктсияҳои бофтаи дуҷониба бо диаметри 1 мм аз тамоми NAcc ва каудати путамен гирифта шуданд, ки қисми онҳо минтақаи назорат буда, дар at80 ° C то коркард нигоҳ дошта мешаванд. Ҷамъи RNA ва сафедаҳо бо истифодаи протоколи TRI-Reagent мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда (Маркази Молекулаҳои Тадқиқот, Цинциннати, OH) ҳосил карда шуданд.

Таҳлили ифлосшавии сафедаҳо бо Western-blot

Пас аз ҷудоӣ дар гели 10% полиакриламид (15% барои гистонҳо), сафедаҳо ба мембранаҳои нитроцеллюлоза интиқол дода шуда, бо антиденаҳои зерини ибтидоӣ инкубатсия карда шуданд: анти-OTR (sc-8102, 1: 1000), -V1aR (sc-18096, 1: 500), -D1R (sc-33660, 1: 1000), -D2R (sc-9113, 1: 1000, Санта-Крус биотехнология, Санта Крус, CA), -aktin (A2066, 1: 1000: 3, 14: 06, Xma) Сент-Луис, MO) ё гистони анти-ацетил H911 (Lys1, # 1000 – 3, 05: 928) ва ҳамагӣ H1 (# 1000 – 81, 96: 6.0, Милипор, Темекула, CA). Ҳама антиденҳо барои истифодаи онҳо дар одамон, каламушҳо ва мушҳо тасдиқ карда шудаанд, ки дар онҳо вулқонҳо вискӣ фоизи баланди гомологияро ташкил медиҳанд (аз 3 то 3%). Пас аз гибридизатсия бо як антителотерапияи дуюмдараҷаи HRP, мембранаҳо бо ECL (ECL SuperSignal West Dura, суботити биотехнологии Пирс, Рокфорд, IL) кашф карда шуда, дар филми Fuji XAR (Fuji Film, Токио, Ҷопон) фош карда шуданд. Санҷиш бо истифода аз нармафзори AIS XNUMX Image (Imaging Research, St. Catharines, Онтарио, Канада) анҷом дода шуд ва ҳама сигналҳо дар дохили як мембрана барои актинӣ муқаррар карда шуданд, ба истиснои сигнали ацетил-HXNUMX, ки ба миқдори умумии гистони HXNUMX муқаррар карда шуда буд. Баъд аз ин, маълумотҳои муқаррарӣ ҳамчун фоизи ҳайвоноти табобатшудаи CSF ифода карда мешаванд.

Реаксияи занҷири нимҳазорсолаи воқеии полимеразҳо (RT-PCR)

0.5 мкг умумии РНК барои синтези иловагии ДНК коркард шуд ва сипас тавре ки қаблан тавсиф шуда буд таҳлил карда шуд50 бо нормализатсия ба ген ба никотинамид аденин динуклеотиди дегидрогеназа (NADH). Ҳама аксуламалҳо бо се нусха иҷро карда шуданд ва хусусияти онҳо бо таҳлили ҷараёни об ва ҷудошавӣ дар gel 2% Agarose тасдиқ карда шуд. Пасиҳамоии дар Primers истифода бурда ба таври зерин буданд: 5'-TCCAAGGCCAAAATCCGCACGG-3 »(Fwd) ва 5'-GGCAGAAGCTTCCTTGGGCGC-3» (Ваҳй) барои OTR, 5'-GAGGTGAACAATGGCACTAAAACC-3 »(Зеро) ва 5'-CCAGATGTGGTAGCAGATGAAGC-3 ' (Ваҳй) барои AVP1aR, 5'- TTAACAACAATGGGGCTGTG-3 »(зеро) ва 5'-GGCATGAGGGATCAGGTAAA-3» (Ваҳй) барои D1R, 5'-GTGAAGGCGCTGTAGAGGAC-3 »(зеро) ва 5'-CGGTGTGTTCATCATCTGCT-3» (Ваҳй ) барои D2R ва 5'-CTATTAATCCCCGCCTGACC-3 '(Барои) ва 5'-GGAGCTCGATTTGTTTCTGC-3' (Rev) барои NADH. Маълумотҳои мӯътадилшуда бо фоизи ҳайвоноти табобатшудаи CSF ифода карда мешаванд.

Хроматин Иммунопреатсия

Гистон H3 ацетилизатсия (Lys14) дар NAcc ва пункти матоъҳои каудати ботанта бо истифодаи маҷмӯи протеини Magna ChIP G Tissue (Millipore, Temecula, CA) тибқи дастури истеҳсолкунанда таҳлил карда шуд. Хулоса, пас аз ҳамбастагӣ бо 1% формальдегид, хроматин бо истифодаи Misonix XL-2000 ба пораҳои 200-600 bp каҷ карда шуд. Иммунопрептатсияи гистони ацетилшудаи H3 (Lys14) баъд аз антиденти 10µg зидди антицетил-H3 (Lys14) (Милипор) дар як шабонарӯз дар 4 ° C анҷом дода шуд. Пас аз шустушӯй, элютсия аз маҳлулҳо ва баргардонидани робитаи байниҳамдигарӣ, ДНК-и immunoprhibitated дар се нусха аз ҷониби RT-PCR дар платформаи iCycler (ниг. Ба боло) бо каҷи дохили стандартии аз намунаҳои омезиши INPUT сохташуда таҳлил ва таҳлил карда шуд. Ин дастурҳо барои тақвият додани як минтақаи 236 bp тӯл мекашанд, ки 128 bp болооб аз рамзикунонии аввалин exon барои prairie vole OTR (охтр, Ҳамроҳшавии Genbank #AF079980), ё минтақаи 192 bp дарозмуддат ҷойгир шудааст 141 bp болооб аз рамзикунонии аввалин exon барои prairie vole V1aR (avpr1a, Ҳамроҳшавии Genbank #AF069304). Пасиҳамҳо чунин буданд: 5'-CTCCGGAGCCGGGGCTAAGT-3 '(Fwd) ва 5'-ACCGCTTCCCCGAGAGTAGGG-3' (Rev) барои охтр, ва 5'-GGTGGACCAGCCAGACCCCA-3 '(Fwd) ва 5'-TGCAGAGCCAGGCGCTTTCC-3' (Rev) барои avpr1a. Ҳар як намуна бо арзиши дахлдори INPUT муқаррар шудааст ва баъдан маълумот бо фоизи ҳайвоноти табобатшудаи CSF ифода карда мешавад.

Таҳлили оморӣ ва коркарди маълумот

Барои таҳлили бартарияти шарикон, ҳайвоноте, ки рафтори ҷуфтшавӣ дар давраи истиқоматӣ ва ё канюлаҳои нодуруст нишон дода шудаанд, истисно карда шуданд. Барои ҳама таҳлилҳои молекулавии дигар, ҳангоми зиёдтар муайян кардани ҳадди аксар як нуқтаи маълумот барои як гурӯҳи биологӣ хориҷ карда шуд. Аксарияти таҷрибаҳо такрор карда шуданд, ба истиснои он вақте ки натиҷаҳо хеле равшан буданд. Вақти иртибот дар паҳлӯи паҳлӯ бо ҳайвони ҳавасмандкунанда ҳангоми озмоиши афзалияти шарик бо ду ҷуфтшудаи дугона таҳлил карда шуд t-тест. Нишондиҳандаҳои локомотив бо истифодаи ду дума таҳлил карда шуданд t-тест (барои ду гурӯҳ) ё яктарафа ANOVA (барои зиёда аз ду гурӯҳ) ва ҳангоми зарурат, PLSD Фишер баъд озмоишҳо бо ҳадди ниҳоии муҳим гузаронида шуданд P <0.05. Пас аз санҷиши эътидол, ҳамаи маълумоти дигар бо ду дум таҳлил карда шуданд t-тест, ки дар муқоиса бо вариантҳои баробар ё нобаробар қаблан озмудашуда. Ҳама таҳлили оморӣ бо истифодаи нармафзори StatView (SAS Institute) гузаронида шудааст. Ҳангоми стандартизатсия кардани маълумотҳо ба идоракунии дахлдори онҳо (% CSF, Saline ё Mating group), таҳлили оморӣ аз рӯи маълумоти хомӣ гузаронида шуд.

тасдиыот

Ин кор аз ҷониби Институти Миллии Солимии рӯҳӣ (NIMH) грантҳои MHR21-083128 ба MK ва ZW дастгирӣ карда шуд ва MHR01-058616 то ZW Мо инчунин ба доктор Морис Маннинг барои тӯҳфаи саховатмандонаи antagonist OTA (T) ташаккур мегӯем.

Далелҳо

 

Мушкилоти фоизҳо: Муаллифон ҳеҷ гуна мухолифати манфиатҳоро эълон накардаанд.

Саҳмияҳои муаллиф

HW, FD ва YL таҷрибаҳо гузаронидаанд. HW ва FD маълумотро таҳлил карданд. HW, FD, ZW ва MK таҳқиқотро таҳия намуданд. FD, ZW ва MK коғазро навиштааст. Ҳама муаллифон натиҷаҳоро муҳокима намуда, дастнависро шарҳ доданд.

Адабиёт

1. Бора Е, Юкел М, Аллен NB. Нейробиологияи рафтори тобеъи инсон: оқибатҳои ихтилоли равонӣ. Андешаҳои ҷорӣ дар психиатрия. 2009; 22: 320 – 325. [Садо Ояндасоз]
2. Томас Ҷ.А., Бирни EC. Системаи нигоҳубини падару модар ва системаи mating of prairie vole, (Микроскус ochrogaster) Экология ва сотсиологияи рафторӣ. 1979; 5: 171 – 186.
3. Гетц Л.Л., Ҳофманн Ҷ.Э. Ташкилоти ҷамъиятӣ дар гирду атрофи зиндонҳои озод,Микроскус ochrogaster) Экология ва сотсиологияи рафторӣ. 1986; 18: 275 – 282.
4. Williams JR, Катания KC, Картер CS. Таҳияи афзалиятҳои шарикӣ дар холаҳои занбӯрпарварӣ (Microtus ochrogaster): Нақши таҷрибаи иҷтимоӣ ва ҷинсӣ. Гормонҳо ва рафтор. 1992; 26: 339 – 349. [Садо Ояндасоз]
5. Янг К.А., Гоброгге К.Л., Лю Ю, Ванг З. Нейробиологияи пайвастагии ҷуфтҳо: Фикрҳо аз хояндаҳои иҷтимоӣ. Сарҳадҳо дар Neuroendocrinology. 2011; 32: 53 – 69. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
6. Лю Ю, Куртис Ю.Т., Ван З. Васопрессин дар ҷарроҳии паҳлуӣ ташаккули риштаи ҷуфтҳоро дар холигии мардона (Microtus ochrogaster) Асабҳои рафторӣ танзим мекунад. 2001; 115: 910 – 919. [Садо Ояндасоз]
7. Lim MM, LJ ҷавон. Схемаҳои нейронии ба вазопрессин вобаста, ки дар ташаккули алоқаи ҷуфтӣ дар vole prairie monogamous ҳастанд. Асабшиносӣ. 2004; 125: 35 – 45. [Садо Ояндасоз]
8. Лю Y, Wang ZX. Нуклеус окситоцин ва дофаминро афзоиш медиҳад, то ташаккулёбии пайвандҳои ҷуфтро дар холаҳои занҷираи занона танзим кунад. Асабшиносӣ. 2003; 121: 537 – 544. [Садо Ояндасоз]
9. Гингрич Б, Лю Ю, Каскио C, Ванг З, Инсел TR. Репсепторҳои допамин D2 дар аккумуляторҳои ядроӣ барои алоқамандии иҷтимоӣ дар холигии занона (Microtus ochrogaster) Асабҳои рафторӣ муҳиманд. 2000; 114: 173 – 183. [Садо Ояндасоз]
10. Aragona BJ ва диг. Nucleus accumbens допамин ба таври гуногун дар ташаккул ва нигоҳдории алоқаи ҷуфтҳои якхела мусоидат мекунад. Nat Neurosci. 2006; 9: 133 – 139. [Садо Ояндасоз]
11. Лю Ю, ва дигарон. Nucleus accumbens допамин ба беқурбшавии пайванди иҷтимоӣ дар амфетамин тавассути як навъи хояндаҳо мусоидат мекунад. Мурофиаҳои Академияи илмҳои миллӣ. 2010; 107: 1217 – 1222. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
12. Keebaugh AC, LJ ҷавон. Афзоиши изҳори ресепторҳои окситоцин дар ядрои афзуншавии холаҳои занбӯрҳои пеш аз таваллуд пеш аз таваллуди зан, аллопарсенталӣ ва ташаккули афзалияти шарикро чун калонсолон афзоиш медиҳад. Гормонҳо ва рафтор. 2011; 60: 498 – 504. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
13. Росс Ӯ ва дигарон. Тағирот дар зичии ретсепторҳои окситоцин дар нуклеус Accumbens ба рафтори мутафовит дар варақаҳои якхела ва бисёрзанагӣ таъсири фарқкунанда дорад. Маҷаллаи Neuroscience. 2009; 29: 1312 – 1318. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
14. Питков Л.Ҷ. ва дигарон. Мусоидат ба ҳамбастагӣ ва ташаккули ҷуфтшуда тавассути интиқоли ген ретсепторин Васопрессин ба варами варидӣ ба сутуни монологӣ. Маҷаллаи Neuroscience. 2001; 21: 7392 – 7396. [Садо Ояндасоз]
15. Винема Ҳ. Барои фаҳмидани он, ки чӣ тавр таҷрибаҳои иҷтимоии ибтидоӣ рафтори иҷтимоии танзимшавандаи окситоцин ва вазопрессинро тағйир медиҳанд. Гормонҳо ва рафтор. 2012; 61: 304 – 312. [Садо Ояндасоз]
16. Фрэнсис Д.Д., Янг Л.Ҷ., Мейнэй М.Ҷ., Инсел Т.Р. Тафовутҳои табиие, ки дар нигоҳубини модарон ба амал омадаанд, бо ифодаи ресепторҳои окситоцин ва вазопрессин (V1a) алоқаманданд: Фарқиятҳои гендерӣ. Маҷаллаи нейроэндокринология. 2002; 14: 349 – 353. [Садо Ояндасоз]
17. Шампан FA ва дигарон. Нигоҳубини модар ба алоқамандии метилизатсионии ретсепторҳои эстроген-α1b ва рецепторҳои эстроген-α ифода дар минтақаи пешоби прептитикии насли зан. Эндокринология. 2006; 147: 2909 – 2915. [Садо Ояндасоз]
18. Мургатройд C ва дигарон. Барномаҳои метилизатсионии ДНК динамикӣ таъсири манфии доимии стрессҳои давраи ибтидоӣ доранд. Nat Neurosci. 2009; 12: 1559 – 1566. [Садо Ояндасоз]
19. Weaver ICG ва дигарон. Барномасозии эпигенетикӣ бо рафтори модарон. Nat Neurosci. 2004; 7: 847 – 854. [Садо Ояндасоз]
20. Weaver ICG, Meaney MJ, Szyf M. Таъсири нигоҳубини модар ба рафтори транскриптои гиппокампалӣ ва рафтори марбут ба изтироб дар насл, ки дар калонсолӣ бозгаштанд. Мурофиаҳои Академияи миллии илмҳои Иёлоти Муттаҳидаи Амрико. 2006; 103: 3480 – 3485. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
21. Бонту, Ҷ. Паттиссон, Рисман Е.Ф. Ба даст овардани қабули ҷинсӣ: Ролҳои ацетилатсияи хроматин, ретсепторҳои эстроген-α ва гормонҳои тухмдон. Эндокринология. 2011; 152: 3172 – 3181. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
22. Zhong S, Fields CR, Su N, Pan YX, Робертсон KD. Боздори фармакологӣ аз тағирёбии эпигенетикӣ ва ҳамзамон бо профилҳои ифодаи ген, ҳадафҳои нави метилизатсияи барзиёди ДНК ва дезетилатсияи гистро дар саратони шуш нишон медиҳанд. Онкоген. 2007; 26: 2621 – 2634. [Садо Ояндасоз]
23. Йошида М., Хоринучи С., Беппу Т. Трихостатин А ва трапоксин: зондҳои химиявии нав барои нақши ацетилизатсияи гистон дар сохтор ва функсияи хроматин. Bioessays. 1995; 17: 423 – 430. [Садо Ояндасоз]
24. Моннерет C. ингибиторҳои гистати дакетилаза. Маҷаллаи аврупоии химияи доруворӣ. 2005; 40: 1 – 13. [Садо Ояндасоз]
25. Росс Ӯ ва дигарон. Тавсифи системаи окситоцин, ки рафтори тобеъро дар холигии занбӯрҳо танзим мекунад. Асабшиносӣ. 2009; 162: 892 – 903. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
26. Ҷавонон LJ, Huot B, Nilsen R, Wang Z, Insel TR. Тафовутҳои намудҳо дар экспрессияи ген ретсепторҳои окситоцин: таҳлили муқоисавии гурӯҳҳои промотор. Маҷаллаи нейроэндокринология. 1996; 8: 777 – 783. [Садо Ояндасоз]
27. Witt O, Deubzer HE, Milde T, & Oehme I. Оилаи HDAC: Ҳадафҳои марбут ба саратон кадомҳоянд? Мактубҳои саратон. 2009; 277: 8-21. [Садо Ояндасоз]
28. Vecsey CG ва дигарон. Ингибиторҳои гистоне Deacetylase беҳтар кардани хотира ва пластикии синаптӣ тавассути CREB: Фаъолкунии транскриптсияи CBP-вобастагӣ. Маҷаллаи Neuroscience. 2007; 27: 6128 – 6140. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
29. Monsey MS, Ota KT, Akingbade IF, Hong ES, Schafe GE. Тағироти эпигенетикӣ барои мустаҳкамкунии хотираи тарс ва пластикии синаптӣ дар амигдалаи паҳлӯ муҳиманд. PLOS ONE. 2011; 6: e19958. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
30. Ван Линт С, Эмилиани С., Вердин Е. Ифодаи қисми ками генҳои ҳуҷайра дар ҷавоб ба гиперацетилатсияи гистон тағйир дода мешавад. Ифодаи ген. 1996; 5: 245 – 253. [Садо Ояндасоз]
31. Mariadason JM, Corner GA, Augenlicht LH. Такрори генетикӣ дар роҳҳои роҳҳои камолоти ҳуҷайравии колон, ки бо кислотҳои равғанҳои кӯтоҳ занҷири занҷирӣ ба амал омадаанд: Муқоиса бо трихостатин А, Сулиндак, ва Куркумин ва оқибатҳои химиопрофилактсияи саратони колон. Тадқиқоти саратон. 2000; 60: 4561 – 4572. [Садо Ояндасоз]
32. Halsall J, Gupta V, O'Neill LP, Turner BM, Nightingale KP. Генҳо аксар вақт аз гиперасетилатсияи гистонии глобалӣ, ки аз ҷониби ингибиторҳои HDAC ба вуҷуд оварда шудаанд, паноҳ меёбанд. PLOS ЯК. 2012; 7: e33453. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
33. Ито К, Адкок I. Ацетилатсияи гистон ва дакетилатсияи гистон. Биотехнологияи молекулавӣ. 2002; 20: 99 – 106. [Садо Ояндасоз]
34. Molfese DL. Пешравии асабоният тавассути эпигенетика: Механизми молекулии омӯзиш ва хотира. Нейропсихологияи рушд. 2011; 36: 810 – 827. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
35. Ҷавонон LJ, Lim MM, Gingrich B, Insel TR. Механизмҳои мобилии замимаи иҷтимоӣ. Гормонҳо ва рафтор. 2001; 40: 133 – 138. [Садо Ояндасоз]
36. Hawk JD, Florian C, Abel T. inhibition after intraphippocampal of class I histone deacetylases хотираи дарозмӯҳлати ҷойгиршударо такмил медиҳад. Омӯзиш ва хотира. 2011; 18: 367-370. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
37. Стефанко Д.П., Барретт Р.М., Лю AR, Реолон Г.К., Вуд МА. Модулсозии хотираи дарозмуддат барои шинохти объект тавассути inhibition HDAC. Мурофиаҳои Академияи илмҳои миллӣ. 2009; 106: 9447 – 9452. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
38. Янг XJ, Seto E. Acetylation Lysine: Crosified Codified бо дигар тағиротҳои пас аз транслотатикӣ. Ҳуҷайраҳои молекулавӣ. 2008; 31: 449 – 461. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
39. Cho MM, DeVries AC, Williams JR, Carter CS. Таъсири окситоцин ва вазопрессин ба бартарии шарикон дар холигии занбӯрҳои мардона ва занона (Microtus ochrogaster) Neurosioral рафтор. 1999; 113: 1071 – 1079. [Садо Ояндасоз]
40. Insel TR, Hulihan TJ. Механизми мушаххаси гендерӣ барои пайваст кардани ҷуфтҳо: Окситоцин ва ташаккули афзалияти шарикон дар холаҳои якхела. Нейрологияи рафтор. 1995; 109: 782 – 789. [Садо Ояндасоз]
41. Stimson L, La Thangue NB. Биомаркерҳо барои пешгӯии посухҳои клиникӣ ба ингибиторҳои HDAC. Мактубҳои саратон. 2009; 280: 177 – 183. [Садо Ояндасоз]
42. Iannitti T, Palmieri B. Барномаҳои клиникӣ ва таҷрибавии фенилбутирати натрий. Маводи мухаддир дар R&D. 2011; 11: 227-249. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]
43. Кумар А, ва дигарон. Барқарорсозии хроматин як механизми калидӣ аст, ки дар Striatum пластикии аз ҷониби кокаин барангехта мебошад. Нейрон. 2005; 48: 303 – 314. [Садо Ояндасоз]
44. Schroeder FA, Lin CL, Crusio WE, Akbarian S. Таъсири антидепрессантӣ ба мисли Histone Deacetylase Inhibitor, Бутирати натрий дар муш. Психиатрияи биологӣ. 2007; 62: 55 – 64. [Садо Ояндасоз]
45. Маннинг M, ва дигарон. Пептидҳо ва ғайри пептиди агонистҳо ва антагонистҳо барои вазопрессин ва окситоцин V1a, V1b, V2 ва OT: асбобҳои таҳқиқотӣ ва агентҳои эҳтимолии терапевтӣ. Дар: Inga DN, Rainer L, муҳаррирон. Пешравӣ дар таҳқиқоти майна. Elsevier; 2008. саҳ. 473 – 512. [Садо Ояндасоз]
46. Witt DM, Insel TR. Як антагонисти окситоцин интихобшуда Атенуатҳоро осон мекунад. Прогестерон барои рафтори ҷинсии занона. Эндокринология. 1991; 128: 3269 – 3276. [Садо Ояндасоз]
47. Winslow JT, Hastings N, Carter CS, Harbaugh CR, Insel TR. Нақши вазопрессини марказӣ дар пайвастагии ҷуфтӣ дар холаҳои моногамии прагра. Табиат. 1993; 365: 545 – 548. [Садо Ояндасоз]
48. Insel T. Oxytocin - невропептид барои мансубият: далелҳо аз таҳқиқоти рафторӣ, авториадиографии ретсепторҳо ва муқоисавӣ. Психоневроэндокринология. 1992; 17: 3-35. [Садо Ояндасоз]
49. Намунаҳои тақсимоти ресепторҳои вазопрессин дар мағзи сар, ки бо ташкили ҷамъият дар хояндаҳои микротрин алоқаманданд. Маҷаллаи Neuroscience. 1994; 14: 5381 – 5392. [Садо Ояндасоз]
50. Холлис F, Duclot F, Gunjan A, Kabbaj M. Фарқиятҳои инфиродӣ дар таъсири шикасти иҷтимоӣ ба анҳедония ва ацетилатсияи гистон дар гиппокампуси каламуш. Гормонҳо ва рафтор. 2011; 59: 331 – 337. [Матолиби марбут ба PMC] [Садо Ояндасоз]