ኦርጅኔጅቲክስ / Dopamine D2 ተቀባዮች በ cocaine-induced behavior behavior sensitization (2014)

መሄድ:

ረቂቅ

በኒውክሊየስ አክሰንስንስ (ኤን.ኤ.ሲ) ውስጥ ለረጅም ጊዜ የዘለቀ መድኃኒት ማስተርጎም (መድሃኒት) በአደገኛ መድኃኒቶች ሱስ ለተያዙ ሱስዎች አስተዋፅኦ እንዲያደርጉ ታቅዶ ነበር. በዚህ ውስጥ የኮኬይን ዲክስክስ ኒውሮንስ (MSN) የዶክሚን D2 ተቀባዮች (D2Rs) የ cocaine-induced behavior behavior sensitization (ኤች ኤምኤስ) መወያየት. ሰርካይ-ዚንዲን-2 (CHR2) ምስጢራዊ የሆኑ የ Adeno-associated vascular vectors ወደ D2R-Cre ተሻጋሪ አይሴክስ NACE ይላካሉ. ይህ በ Nc ውስጥ D2R-MSN ዎችን በከፍተኛ ሁኔታ እንዲታዩ እንድናደርግ አስችሎናል. ምክንያቱም በ D2R-MSN የፎቶ ማነጣጠር በአጎራባቢያዊ የ MSN ሶፍትዌሮች (IPSCs) ውስጥ የታገዘ በመሆኑ የ D2R-MSN ዎች የአከባቢን መቆጣጠሪያዎችን ይዟል. የ NAC D2R-MSN ን የፎቶግራፊ ማሳመር Vivo ውስጥ ማነሳሳትን እና የኮኬይን-አቀፋዊ ባህሪን ማነቃነቅ መንስኤንም አልነካም. ይሁን እንጂ በአደንዛዥ ዕጽ መውጣቱ ወቅት የፎቶ ማሞገሻ (ኮምፕሊንሽን) በመባል የሚታወቀው የ cocaine-induced behavior behavior sensitization. እነዚህ ውጤቶች እንደሚያሳዩት D2R-MSNs የ NAC በፅንሰ-ተነሳሽነት በዲፕላስቲክ ውስጥ ቁልፍ ሚና ይጫወታል, እናም አደገኛ ዕፅ መውሰድን ካቆመ በኋላ ድጋሚ ሊከሰት ይችላል.

ቁልፍ ቃላት: የመድሃኒዝም, መካከለኛ አኳኋን ሴልሚኖች, ዳፖሚን D2 ተቀባዮች, ኮኬይ, የአደገኛ ሱሰኝነት

መግቢያ

Dopamine (DA) ምልክት ከሽልማት መጠበቅ እና በግብ የተመራ ባህሪ (ጥበበኛ, 2004; ጎቶ እና ግሬስ, 2005; ብሪጅ, 2007). በጣም የታወቁ የዶይፔርግ ዲስኦርጂ በሽታዎች ከዕፅ ሱሰኝነት (ሮቢንሰን እና ቤርሪ, 1993, 2003). ሱስ የሚያስይዙ ንጥረ ነገሮችን በተደጋጋሚ ከተከተለ በኋላ ለውጦችን በማድረግ ረገድ ለውጦችን የሚያመጣው ለውጥ በዲ ኤም ሞቢሚክ መንገድ ውስጥ በሞለኪዩል እና በሴሉላር ደረጃ ላይ ይገኛል. እነዚህ አደገኛ መድሃኒት እና የአደገኛ መድሃኒት ባህሪያት አሉታዊ አሉታዊ ተፅእኖዎች ቢያጋጥሟቸውም ወደ አደገኛ መድሃኒት (ፐሮግራም) ማጋለጥ ሊያስከትል ይችላል (ቶማስ እና ሌሎች, 2008; ባይክ, 2013). በ mesomimbic dopaminergic ስርዓት ውስጥ የሚደረጉ ማሻሻያዎች የአደንዛዥ ዕፅ ሱሰኝነትን ለመረዳት ቁልፍ ናቸው.

Dopamine D1 receptors (D1R) እና D2 ተቀላሾች (D2R) እጅግ በጣም በተገለጸው መካከለኛ ሚዛን ውስጥ በሚገኙ መካከለኛ እርኩሳን ነርቮች (MSN). በኒውክሊየስ አክሰንስንስ (ኤን.ኤ.ሲ) (ኒክሊየስ አክሰንስንስ) በተሰኘው የአራስ ወለድ ቧንቧ ውስጥ ለረጅም ጊዜ የዘለቀ ውስጣዊ ማስተካከያ የሱስ እና የአደንዛዥ ዕፅ ማራዘሚያ እና ልምዶች (Lobo and Nestler, 2011; ስሚዝ እና ሌሎች, 2013). ከአስፐርፐር እጽዋት አካባቢ የዶፔንጂሊስ ሴል አካላት አብዛኛውን ጊዜ NAC ናቸው. ከኤክስሲ ውስጥ ከሴሎች ውስጥ ከ 95% ውስጥ በአሜሪካ አራት ዋና ዋና የአንጎል ክልሎች ውስጥ የመቀስቀሻ ግብዓቶች ይገኙበታል. እነዚህ ቅድመ ብሬንዳክ ኮርቴክስ, የሂፖካምፓየስ ወሳኝ ንዑስ ክፍል, የስታንዳላ አውሎፓላ እና ታፓላዎች (Sesack and Grace, 2010; ሉሽከር እና ማሌንካ, 2011). በ NAC ውስጥ ያሉ MSN በ ሁለት ዋና ዋና ንዑስ ክፍሎች ሊከፈሉ ይችላሉ: የ D1Rs ን የሚገልጹ ቀጥተኛ ዱካዎች እና በቀጥታ ፕሮጀክቱ ወደ ሚያዚያ አጋዥ የድንበር አካባቢዎችን እና ቀጥተኛ ዱካዎችን የ D2Rs እና በፕሮጀክት ወደ ፓረንታል (Kreitzer and Malenka, 2008; Sesack and Grace, 2010; ሉሽከር እና ማሌንካ, 2011; ስሚዝ እና ሌሎች, 2013). MSN የጂአይቢሲ (GABAergic) ስለሆኑ የ MSN ን ነርቭ ሴሎች ሥራ ማስኬድ ዝቅተኛውን ዒላማቸውን የሚያግዱ GABAergic (Chevalier and Deniau, 1990). ስለዚህ, የ D1R-MSN ን ማግበር midbrain DA ነርቮቶችን ያስደስታል, ይህም ከሽልማት ጋር የተዛመዱ ስነምግባር ደንቦች (ሉስከር እና ማሌንካ, 2011; Bocklisch et al., 2013).

በሴሎች ውስጥ በተፈጠረ መንገድ ክሬስ ሪcomቢንስን የሚገልጹ ዘረ-መል (genetically engineered) ፍተሻዎችን በመጠቀም በቅርብ የተደረጉ ጥናቶች ለ D1R-MSNs እና D2R-MSN በኬኬን ሱሰኛ ባህሪያት የተለያዩ ሚናዎችን አሳይተዋል. እንደነዚህ ያሉ አይጥሞዎች መርዛማ የሆኑ መርዛማዎችን, የመርሳኔጅ ሴሚስቶችን ወይም DREADD (በዲዛይን መድሃኒት ውስጥ ብቻ የተንቀሳቀሱ የንድፍ ተቀባይ ማዕከላት) ጄኔቲካዊ ዒላማዎችን ለመምረጥ በ D1R-MSN ወይም በ D2R-MSN ለመምረጥ ይችላሉ. ይህ አቀራረብ የ MSN ን ጉዳይ በሱስ ላይ በሚሰነዘሩ ባህርያት ላይ አንዳንድ መግባባትን እንዲፈጠር አድርጓል: D1R-MSN ስርጭቶች ሱስ የሚያስይዙ ባህሪዎችን የሚያራምዱ ቢሆኑም ለአደገኛ መድሃኒት (ሱስ) ማራኪ ቫይረስ ማጎልበት (D2R-MSN) (ሂኪዲ እና ሌሎች, 2010; Lobo እና ሌሎች. 2010; ፈርግሰን እና ሌሎች, 2011; Bock እና ሌሎች, 2013). የኮኬን መነፅር በሁለቱም የ MSN ሕዝብ ላይ የጂን (የዲናፕቲክስ) ማስተካከያ እና ለውጥ (የሎክ እና ሌሎች, 2010; ሎባ እና ናስለር, 2011; Grueter et al., 2013). ምንም እንኳን D1R-MSNs እና D2R-MSN ጨዋታዎች በ cocaine-mediated ሱስ የሚያገለግሉ ባህሪያት የሚጫወቱ ቢመስሉም የ D2R-MSN በትክክል መያዙ ግልጽ አይደለም.

ከዚህ ቀደም የ D2R ኩባንያ (ኮኦ) አይኖች መደበኛውን ኮኬይን-ተጨባጭ የባህሪ ማነቃቂያ እና የኮኬይን ጠባይ ማሳየት ያሳያሉ, በ D2R አለመኖር (Baik et al.,) 1995; ኮሰመር እና ሌሎች, 2002; ሲም እና ሌሎች. 2013). ይሁን እንጂ አደንዛዥ ዕፅ ማቋረጥ በሚከሰትበት ጊዜ ለጭንቀት መጋለጥ የሚያኮረጉትን የኮኬይን ምግባሮች ማነቃቃት እንዲሁም የኮኬይን ጠበቆች እና ልምዶች በ D2R KO አይጦች (Sim እና ሌሎች, 2013). በ NAC ውስጥ የተወሰኑ የ D2R መሰንጠቂያዎች መሰረታዊ የኮርፖች እንቅስቃሴን ወይም የኮኬይን ችግር ያስወግዱ ባህሪን ማነቃነቅ አይደለም, ነገር ግን የኮኬይን-ነብስ ባህሪን ማነቃቃትን (ፐ / 2013). እነዚህ ግኝቶች በኒ.ኤ.ሲ ውስጥ የ D2R እገዳዎች ኮኬይን-ተኮር ባህሪን ማነቃነቅን አይከላከለም የሚል ጽንሰ-ሃሳብ በጥብቅ እንደሚጠቁሙት. ይልቁንም, በ NAC ውስጥ D2R በካንሰር መፈለግ እና እንደገና መታደስ ባህሪያት መጨመርን በሚጨምርበት ጊዜ በሚፈጠር ጭንቀት ምክንያት የሲምፕቲክ ለውጦችን ለመቆጣጠር ልዩ ሚና ይጫወታሉ (Sim እና ሌሎች, 2013).

እዚህ ውስጥ የ NAc D2R-MSN ዎች ውስጥ ኮኬይንን ያስከተለውን የባህሪ ማነቃነቅ ማነቃነቅ የበለጠ ለመገምገም የመርህ-ገዳማዊነት መርሆችን ተጠቅመናል. የአዕምሮ እድገት ስኬቶችን በመጠቀም የ D2R-MSN ዎች ፎቶን ማስፋት የአከባቢን መቆጣጠሪያ ዑደቶች በአጎራባች MSN ላይ በ NAc እንዲንቀሳቀሱ እናገኛለን. የ NAC D2R-MSN ዎች የፎቶግራፊ መላሽ Vivo ውስጥ ማነሳሳትን ወይም የኮኬይን-ነክ ባህሪን ማነቃነቅን አይመለከትም. ይሁን እንጂ መድሃኒት በሚወስዱበት ጊዜ በ NAC D2R-MSN ተደጋጋሚ ማስገባቶች ኮኬይን-በልብ ሱስ ሊያስይዙ የሚችሉ ባህሪያትን ይቀንሳል. ውጤቶቻችን የሚያሳዩት D2R-MSNs የ NAC ፐርሰንት-ፕሮቲንትን ለመግታት ቁልፍ ሚና የሚጫወቱ እና አደገኛ ዕፅ መውሰድን ካቆሙ በኋላ እንደገና እንዲከሰት ሊያደርግ ይችላል.

ቁስአካላት እና መንገዶች

አይጥ

D2-Cre BAC ዝርጋሜ ኩኪ በ C57Bl / 6 የጀርባ ስሪት (Mutant Mouse Regional Resource Centers, B6.FVB (Cg) -Tg (Drd2-cre) ER44Gsat / Mmucd) አግኝተዋል. በባህሪ ሙከራዎች, የ D2-Cre ክሮኒን (D2-Cre transgene) የሚጎድላቸው ቆዳዎች ለ D12-Cre አይሴሎች እንደ ቁጥጥር ሆነው ያገለግሉ ነበር. አይጦች በተከታታይ የሙቀት እና እርጥበት ሁኔታ ውስጥ እና በ "12-h light, XNUMX-h ጥቁር መርሃግብር" በተወሰኑ ተላላፊ-ነክ እንቅፋቶች ውስጥ ይጠበቁ ነበር. የእንስሳት እንክብካቤ እና አያያዝ የተከናወኑት በኮሪያ ዩኒቨርሲቲ እና በ KIST በተቋም ተቋማት የእንስሳት እንክብካቤ እና ኮምፐተር ኮሚቴዎች በተፈቀዱ ደረጃዎች ነው.

የቫይረስ ቫይረስ ዝግጅት

pAAV-EF1a-DIO-hChR2 (H134R) -EYFP-WPRE በአጠቃላይ በ Karl Deisseroth (Stanford Univ.) በደንብ ተዘጋጅተዋል. ለኤ አይ ቪ ዝግጅት ሲባል HEK293T የሕዋስ ክፍሎች በ DMEM ሚዲያዎች ውስጥ አንቲባዮቲክስ እና ኤፍ ቢ ኤስ (FBS) ይባላሉ. ከመተላለፉ በፊት በነበረው ቀን, ከ 90-ሴንቲግሬድ እቃዎች በ 4 ልጥፎች ውስጥ ከአራት ሳጥኖች በላይ በአምስት 10-ሴንቲግ ቂጣዎች ላይ ተቀርፀው እና ለ 15-18 ሰዓቶች ወይም እስከ 22 እስከ 60% ቅልቅል ድረስ እንዲቆዩ ተደርገዋል. የ HEK70T ህዋሶች በ pPEA-DIO-CHR293-EYFP, pAAV-DJ እና pHelper ተይዘው የ jetPEI የማስተላለፊያ (QBiogenene) በመጠቀም ተሻገሩ. ዲ ኤን ኤ / ዲኤምኤም / አይኢፒ ኮክቴል በክብደት ሙቀቱ ለ xNUMX ደቂቃ ውስጥ በመዞር እና በማባዛት ነበር. ከተለቀቀ በኋላ, ወደ እያንዳንዱ የ 2 ሴንቲግሬድ ስኳር የመቀላቀል ድብድ ተጨመሩ. የተሻገሩ ሴሎች ተሰባስበው ከተለቀቁ በኋላ በ 20% በሶዲክስኮለሌት (ሲግማ; ዲክስNUMX) እና በ 15 ንጥሎች / ml ቤንሶኒ ናይቼይስ ንጋት (ሲግማ; E48) በ 0.5 ° C ለ 6750 ሰዓቶች ሲቀላቀሉ. በ 50 xg ውስጥ ለ 1014 ደቂቃ በመጠፍፈፍ የተንቀሳቃሽ ስብርባሪዎችን ካስወገደ በኋላ ከፍተኛው ተቆጣጣሪ በ 37mm mm PVDF ማጣሪያ (ሚሊፖሮቨ) ውስጥ ተጣራ. የ AAV-DJ ን ቅንጦችን ማጣራት የ HiTrap heparin አምዶች አምዶች (የ GE Healthcare) በመጠቀም ነው የተከናወነው. ለኤ.ኤስ.ቪኢን አተኩሮ ማከማቸት, የ "X" ባለ የ 1 ሞለኪል ክብደት ቆርቆሮን በመጠቀም የአሚካን አልት-3000 ማዕከላዊ ማጣሪያ ማጣሪያዎች ተተገበሩ. ተለቅ ያለ ቫይረስ ተሰክቷል እና ለዘመናዊ ማከማቻ በ -90 ° C. የመጨረሻው የቫይራል ስብስብ 15 ~ 0.45 × 15 ነበር12 ለእያንዳንዱ የ AAV ቫይረስ ቫይረስ ቅንጣቶች.

ስቴሪቴክሲካል መርፌን እና የኦፕቲካል ፋይበር ምደባ

እንስሳት በአንድ ግራም ክብደት በ 1.6 letl ዞልቴል እና በ 0.05 µl በ xylazine (ሮምፓን ፣ ቤየር) በአይ ip መርፌዎች በማደንዘዣቸው እና በስቴሮታክስ መሣሪያ (ዴቪድ ኮፕፍ መሳሪያዎች ፣ ቱጁኛ ፣ ሲኤ) ውስጥ ተተክለዋል ፡፡ ለቫይረሶች መርፌ ፣ ባለ 31 ልኬት መርፌ መርፌ በሁለት 2 ኤል ቫይረስ በ 0 ° (AP +1.7 ፣ ML ± 1.3 ፣ DV −4.5) በ 0.1 ኡል / ደቂቃ ውስጥ በሁለት rallyል ቫይረስ ውስጥ ለማስገባት ጥቅም ላይ ውሏል ፡፡ ቀስ ብሎ ከመነሳቱ በፊት መርፌው ከተከተተ በኋላ መርፌው ለ 10 ደቂቃ በቦታው ላይ ቆሟል ፡፡ ለመትከል የ fiber-optic cannula የዚርኮኒያ ፍሬን (1.25 ሚሜ ዲያሜትር እና 4.5 ሚሜ ርዝመት) እና የኦፕቲካል ፋይበር ጠፍጣፋ ጫፍ (ዲያሜትር 200 µm) ያካተተ ነበር ፡፡ የ D2-MSNs ን ለማብራት የፋይበር-ኦፕቲክ ካንሱላ ወደ ኤንኤች ውስጥ መትከል ቫይረሶችን ከተከተቡ በኋላ ወዲያውኑ ተከናውኗል ፡፡ የፋይበር-ኦፕቲክ ካንሱላ ለመትከል መጋጠሚያዎች ኤንኤን ለማነጣጠር የ 0 ° (AP +1.7 ፣ ML ± 1.35 ፣ DV −4.2) ጥግ ነበሩ ፡፡ የኦፕቲካል ፋይበርን መልሕቅ ለማገዝ ሁለት ዊንጮዎች ከፋይበር ኦፕቲክ ካንሱላ ተከላ ተከላ ጀርባ ላይ ወደ ቅሉ ተጣበቁ ፡፡ የራስ ቅሉ ላይ ያለውን የፋይበር ኦፕቲክ ካንሱላን ለመጠገን ሲ እና ቢ ሱፐር ቦንድ (ሳን ሜዲካል) በካንሱላ መሠረት ዙሪያ ባለው የራስ ቅል ወለል ላይ ተተግብሯል ፡፡ የ C & B Superbond አንዴ ከተጠናከረ በኋላ cannula ከመያዣው ተለቀቀ እና የጥርስ ሲሚንቶ (ፖሊ-ኤፍ ፣ ዴንትስፕል) በካንሱላ እና ዊልስ ዙሪያ ተተግብሯል ፡፡ በቆሻሻ መጣያ ጣቢያው ዙሪያ መሰንጠቂያውን ለመዝጋት የቬትበንድ ህብረ ህዋስ ማጣበቂያ (3 ሜ ፣ 7003449) ጥቅም ላይ ውሏል ፡፡ ከተተከሉ በኋላ አይጦች ለ 5 ተከታታይ ቀናት ንዑስ-ንዑስ አንቲባዮቲክ መድኃኒቶች (ኤንሮፍሎክስዛን ፣ 12 mg / ኪግ ፣ ኪ 5 ሸ) እና የህመም ማስታገሻ (ካርፕሮፌን ፣ 24 mg / ኪግ ፣ ኪ 3 ሰ) ተሰጥተዋል ፡፡

In vivo ፎቶአፕምፕሎም

አንድ የ 200 μm የእጅ መያዣ ክሬም በተፈጥሯዊ ሊሠራ በሚችል ኦክስቲክ ፋይበር ከውጭ ጋር ተያይዟል. ኦክስጅቲክ ፋይበር በካርድ / ኤክሲ ተለዋዋጭ ወደ ሰማያዊ ላሜራ አውዲዮ (473 nm, MBL-III 473-150 mW), እና ነጭ ህዋሶችን በማነቃቂያ (BNC 575) በኩል ተገኝተዋል. የ ChR2 ን ዘወር ያሉ የነርቭ ሴል ፎቶ የማስነሳት ንድፍ, የ 20 Hz ፍጥንት, የ 5 ms ፒኒ ርዝመት እና የ 2-5 ሚውር የኃይል ኃይል ነበር. ከእንኳን ገመድ የተወጣው የብርሃን ሀይል የኃይል ቆጣሪ (PM100D) በ S121C ብርሃን ዳሳሽ በመጠቀም ይለካ ነበር.

የስነምግባር ትንታኔ

የስነምግባር ሙከራዎች በ 2-11 ሳምንቶች ውስጥ በኤሌክትሪክ ፍተሻዎች የተጠቁ አይነተኮቸሮች ካልሆነ በስተቀር በሴት ልኬክስ D13-Cre ክሬኩ ላይ በ 5-6 ሳምንታት ውስጥ ተፈጽሟል. በእድሜ ጋር የተጣጣሙ D2-Cre and Cre አቲቭ መቆጣጠሪያ አይጦች በቫይረስ ተለክፈው እና በተናጥል ተጠባባቂ ተደርገው በመዋል እና በባህሪው ፈተና እስከመጨረሻው ድረስ ወደ ቤት ውስጥ እንዲገቡ ተፈቅዶላቸዋል. በእያንዲንደ ማወዲዯሪያ (ሙከራ) ወቅት አኩሪ-ነገርዎችን ሇመፍጠር እና ውጥረትን ሇመቀነስ (የሙከራ ክፌሌ ብሩህነት 60 lux) ሉሆን ይችሊሌ. እያንዳንዱ የሙከራ መሳሪያ በ 70% ኤታኖል አማካኝነት ሊከሰቱ የሚችሉ የማሽተት ምልክቶችን ለማስወገድ በመሞከር መካከል ይጸዳል.

የኮኬይ መነቃቃት

የኮኬይን ማነቃነቅን ለመጀመር, አይጦች ለ xNUMX ተከታታይ ቀናት ለጨው ኢንፌክሽን (ip) የተጋለጡ ና በሲሊን ወይም ኮኬይን (3 mg kg-1, ip) ለ 5 ተከታታይ ቀናት. አይጦም በጨው (የ 0.9% NaCl) ወይም በጨው (30) G መርፌ ውስጥ በመሟሟት በካንከን ሃይድሮክሎራይድ (ጆንሰን ጄኒ, ኢዲንበርግ, ዩኬ) ተላከ. ከእያንዳንዱ መርፌ ፈሳሾቹ ለ "30" በ "ክፍት የመስክ" ክፍል ውስጥ ለአግድሞቦ ማራቶር እንቅስቃሴ ሙከራ ተፈትነው ነበር. የፎቶ ምፕሎሚሽን ተጽእኖን ለመለካት እና የስነ-ድምጽ ማነቃቂያ ስራን ለመለካት (ምስል (ምስል</s></s></s>5), 5), በቤት ውስጥ ቤቶች ውስጥ በ xNUMX min ክፍለ ጊዜ በኬክሮስ ሁለት የኬብል ኦክቲክ ፓትካሎች በ NAC ውስጥ ለ 4 3-min ክፍለ ጊዜዎች በቢራ ብርሃን ማብራት በሁለት በኩል ተሰጥቶላቸዋል. በመዳፊት የራስ ቅል ላይ የተቀመጠው ፋይበር ኦፕቲክ ካኖው የተባለ ቫኪዩክ ተወርውሮ እና ቢያንስ ቢያንስ የ "30 min የእረፍት ጊዜ" ተሰጠ. በዚህ ጊዜ አይጦቻቸው ኮኬይ ወይም ጨው (ኮት ኮንሰክስ-ካርት 10d) ይጣሉ. የማነቃቂያው ጅማሮ ከተነሳ በኋላ ኮኬይን የሶላሚን መርፌ ሳይጨምር ለ 1 ቀናት ተለያይቷል. በዚህ የማቋረጥ ጊዜ ውስጥ, ምንም ዓይነት የፎቶ ማነጣጠር አልተተገበረም. የመድሃኒዝም ማነቃቂያ (ኮኬይን) ባህሪይ (ማነን) ወደ መኪናው ማነቃቂያ (ጁንኤክስ) ሲጨመር (5 mg kg kg-1, አይ ፒ) በሥዕል መልክ እንደተቀመጠው የ NAc ን ስእል በማስነሳት / ካሳየ በኋላ ምስል 5A.5A. በ cocaine መክሰስ ጊዜ ውስጥ የፎቶ ምሽት ተጽእኖን ለመለካት (ምስል (ምስል 6), 6), አይጦችን ከላይ ለተጠቀሰው ለተነሳሳሽነት ተመሳሳይ ፕሮቶኮል ተጨምሮባቸዋል (በስዕል ምስል 5) 5) ፎቶግራፍ ከማንሳት በስተቀር. የኮኬይን ማነቃነቅ ከተነሳሱ በኋላ የ 1 ቀናት ውስጥ ጠቅላላው የማቋረጥ ጊዜ ውስጥ ለ 14 h በየአይ.ሲ. ከ "14" ቀናት በኋላ ማቋረጥ በኋላ, ሁሉም የአክቴጅኖች ቡድኖች የኮኬይን መጠኑ ተለጥፈው (10 mg kg-1).

ስእል 1 

መካከለኛ ሽፋን ያላቸው ኒውሮኖችን ኒውክሊየስ ኮምፕልስ (ኒውክሊየስ) እምብርት (ሀ) የ AAV-DIO-CHR2-EYFP ቫይረስ ቫይሬክተሮች በመስጠት የ ChR2 ምረጽ በ NAc D2R ኒርኖች ላይ. ልኬት አሞሌዎች: የጀርባ ምስል, 1 mm mm insert, 200 μm. (ለ) ሚስጥራዊ ምስሎች ...
ስእል 2 

የ D2RCre-MSN ን የፎቶግራፊ (ጂኦሜትሪክ) አካባቢያዊ ተከላካይ ዑደቶችን ይፈጥራል. (ሀ) የ CHR2 ን የማይገልጽ እና ቀስ ብሎ የተቀመጠው ህፃን (ቀስለስ ራስ) የገለጸ የኒውሲክ ስኬት ምስልን የሚያሳይ ምስልን የሚያሳይ ምስል እና የ ፎቶግራፍ ሊነሳ ይችላል. (ለ) IPSC ...
ስእል 3 

የ NAC ሴሎች ባህሪያት. (ሀ) በ Alexa 594 የተሙ የነርቭ ሕዋሳት ሁለት-ፍቶሮን ብርሃን ፈሳሽ ምስል. (A1) ከ ChR2 + / AP ቡድን ነርቮንን ያሳያል (A3) አንድ ነርቮን ከ ChR2- / IPSC ቡድን ያሳያል. (A2) ና (A4) ከምስሎች ከፍተኛ ማጉላት ያላቸው ምስሎች ናቸው ...
ስእል 4 

በ Nc በ basal locomotor እንቅስቃሴ ውስጥ በ D2-MSN ውስጥ በ In-vivo መርጦ ማግኔቲቭ ማግበር ውጤቶች. (ሀ) ዲያጂንክስ-ሲአክቲቭ የዓይን-ግኝት-ኤክስ-ኤፍ-ፒኤን (NAV) እና በፋይልስ ኦፕቲክ ካንደላ በሁለትዮሽ የተተከሉ እርከኖች. 2 nm ሰማያዊ ብርሀን ማነቃቃት ...
ስእል 5 

ኮኬይን በሚነካበት ወቅት የ D2-MSN የማንቃት ውጤቶች. (ሀ) በማነሳሳት እና በማነሳሳት ጊዜ ለኮኬይን ማነቃቂያነት እና የ D2-MSN ን ለማነሳሳት የሙከራ ዕቅድ. ሰማያዊ ብርሃን መብራት (2 ~ 5 mW, 5 ms, 20 Hz) በአራት ...
ስእል 6 

በተደጋጋሚ በተደጋጋሚ የኮኬይን ተጋላጭ በሚደረግበት ወቅት በ D2-MSN ማስኬድ ውጤቶች. (ሀ) ወደ ኮኬይን በሚወስዱበት ወቅት የ D2-MSN ፎቶዎችን የሚያነቃቃኝ የሙከራ ዕቅድ. ሰማያዊ ብርሃን ማብራት (2 ~ 5 mW, 5 ms, 20 Hz) ለስምንት የ 3- ደቂቃዎች ጊዜዎች ተላልፏል ...

የኢንፎርፍሎሉሲንስ እና ድብልቅ የላለስ ማይክሮስኮፕ

ለፀረ-ቮይስሲንስ (ቮይሮይዘርስሲንስ), አይጦች በ Zoletil (Virbac, 1.6 μ ኤል / g, በጀርባ) እና በ 0.05 μ ኤል / g ሮፒኖ (ቤየር) ማጣሪያ ማጣሪያ ማጣሪያ (ማጽዳት) በ 0.1 M PBS እና በ 4% parformaldehyde / ፒቢሲ መፍትሄ (ሲግማ) በመጠቀም ጠርዜሶባቸዋል. ከላይ እንደተጠቀሰው የበረዶ ቀዝቃዛ ፈሳሽ ለነበረው 4 h ከዚያ ላይ አንጎል ተወግዷል እና ለድህሩ ተይዟል. ከዚያ በኋላ ለአንዳንድ ቁሶች በ 90 ደቂቃ ውስጥ በ 30% ፖታስየም / 0.1 ኤም ፒቢቢ ውስጥ ተወስደዋል. በዚያን ጊዜ አንጎል የበረዶ ግግር (ሬንጅ) ከተደረገ በኋላ የ 2-μm ወፍራም የኮርኖች ክፍል በቅኝት ወረቀት (ሊካ ሲ ጂንክስ, ጀርመን) ተዘጋጅተዋል. የ 40 μm ክፍሎችን በ 1900 ኤም PBS ውስጥ በ 40 M PBS እና በ 1% Triton X-0.1 የያዘ የ XBRXRXX (5: 0.2, Millipore, AB100P) በ 2 ° C ክልክል በሆነ የ 1 ° C ክኒን ያካትታል. 500X ን ሲይዝ ከ PBS ጋር ሲጠልቅ ናሙናዎች በ Alexa ለ Fluor 5084 ፍየል ፀረ-ጥንቸል ኢግሪጂ (4: 0.2; ሞለኪላር ፕሮብስ, ዩጂን, ኦ.ኤስ.) እና 100 μl / ml 1, 568-diamidino-1-phenyl-indole HCl (DAPI, Sigma, St. Louis, ሞዳይ, ዩኤስኤ) በፒቢኤስ ውስጥ 500% የተለመደው ፍየል ስነም እና 0.2% Triton X-4 የያዘ. እንደ አሉታዊ ቁጥጥር, ናሙናዎች በ DAPI እና በሁለተኛው የፀረ-እንቲ ብቻ (ኤችአይቪ) ይባዛሉ. ክፍሎቹ በ C6 Plan Apo × 2 / 1 የውሃ ሚስጥራዊ Laser Scanning System (LSM 0.2, Zeiss, Berlin, ጀርመን) ላይ ተመርተዋል.

ኤሌክትሮፊዚዮሎጂ እና ፎቶ የማስነሳት በኒውክሊየስ ውስጥ አጣባቂዎች ናቸው

አይጦቻው የ ChR4-EYFP ምቹ ሀሳብን ለማርካት በቫይረስ ክትባት ውስጥ ለዘመናዊ ሙከራዎች 2 ሳምንታት ጥቅም ላይ ውለዋል. በዚህ ጊዜ አይጦች በአይነም አንጎል ማዘጋጀትና ማከምን ይጀምሩ ነበር. አንጎሉ በፍጥነት ተወስዶ ወዲያውኑ በበረዶ ቀዝቃዛ መፍትሄ (በ mM) 250 Sucrose, 26 NaHCO3, 10 D-Glucose, 3 Myo-inositol, 2.5 KCl, 2 ናቡኪውሬ, 1.25 NaH2PO4, 0.5 አስትሮቢክ አሲድ, 1 ኮኒረስ አሲድ እና 7 MgCl2 በ 95% ኦውስ የተሞላ2/ 5% CO2 (pH = 7.4). ኤንአይሲን ያካተተ የኮርኖል አንሶላ (ናኒ ሲት Oክስሲድ) በመጠቀም የተዘጋጁት (በ Leica VT 250 S) የተዘጋጁ እና በ (mM) ውስጥ (በ ኤም ኤም) የያዙ የጅብሪድ ሲቲስቲክ ሲቲሲየም ፊንጢጣ (ACSF) ውስጥ ይፈለፈላሉ: 1200 D-glucose, 11 NaCl, 125 NaHCO3, 1.25 NaH2PO4, 2.5 KCl, 1.25 MgCl2 እና 2.5 CaCl2 ከመቅዳት በፊት ለ 34 ሰዓታት በ 1 ° C. ስሊዎች ወደ O ፍ ሞላ የሚገመግመው የመኖሪያ ክፍል ውስጥ ይዛወራሉ2-saturated ACSF መፍትሔ ቀጣይነት ባለው መልኩ አስደናቂ ነው. በ NAc እና VTA ያሉ ሕዋሳት በ 2-photon ማይክሮስኮፕ (ኦሊፒፒ FV1000 MPE, ቶኪዮ, ጃፓን) አማካኝነት በ 25X ውኃ የማጥመቂያ ሌንስ እና በዲ ኤም ኤ ዲ ፒ ኦፕቲክስ አማካኝነት የተቀረጹ ናቸው. የሴል-ክሎሜትድ ክላብ ቀረጻዎች ከ NAC ሴሎች የተገኙ ሲሆን ባለብዙ ዲላስግራፍ 700B ማጉያ እና ዲጂታ 1440A አሃዛዊ (ሞለኪዩላር መሳሪያዎች, ኤል.ኤል.). መረጃው በ pCLAMP 10.2 ሶፍትዌር በመጠቀም ናሙና በ Clampfit 10.2 ሶፍትዌር (ሞለኪዩላር መሳሪያዎች, ኤል.ኤል.) በመጠቀም ተመርምረው ተመርተዋል. በ 3-5 ኤምኤም መካከል ተቃውሞዎችን በሚወክል ውዝግብ ውስጥ ያሉ ፓatch ኤሌክትሮዶች በውስጥ ውስጥ (በ ኤም ኤም) ውስጥ (በውሂቃዊ ኤም) ውስጥ ተጨምረዋል: 130 K-gluconate, 2 NaCl, 2 MgCl2, 20 HEPES, 4 ና2ATP, 0.4 ና3GTP, 0.5 EGTA እና 10 ና2- 7.3 ፎ KOH ን በመጠቀም ፒኤች ወደ 1 ተስተካክሏል ፡፡ ቢኩኩሊን (10 µM) በአንጎል ቁርጥራጭ ላይ የመታጠቢያ-ተተግብሮ ነበር የሙከራ ንዑስ ክፍል ውስጥ የ GABA ተቀባዮችን ለማገድ ፡፡

የ ChR2-EYFP ን የሚገልጹ የ NAC ሕዋሳት በ LED ብርሃን ምንጮች (460 ± 27 nm, UHP-mic-LED-460, Prizmatix) ፎቶግራፍ እንዲታዩ ተደርገዋል. ከኤ ዲ ኤልው ሰማያዊ ብርሃንን ይበልጥ ተጣርቶ ተቆጣጠራት እና በቅንጦት ማጣሪያ (470-495 nm) የተሰራ ማጣሪያ ባለው ማጣሪያ ኩርባ ተወስዷል. የብርሃን ብልጭታ (የ 10 ms ርዝመት, 0.0366-0.354 ሞዊ / ሚሜ2) በ 25-5 Hz በተደጋጋሚዎቹ የ 40X ዓላማዎች በኩል ለአንጎለሉ ቅሪቶች ተሰጥተዋል. በአንደ ሙከራዎች ውስጥ, ፎቶኮንቶች በ 2 ዘለላ መብራቶች ላይ ምላሽ በሚሰጡበት በ ChR2-ሕዋሶች ውስጥ ይለካሉ.

ስታቲስቲክስ ትንታኔ

መረጃው እንደ ± ሰከንድ ቀርቧል እና በሁለት ጭንቅላቱ ተማሪ ላይ ተንትኖ ነበር t-የወያይ ወይም በባለ ሁለት ጥራጥሬዎች ትንተና በመቀጠልም በቦንፈርሮን ከልኡክ ጽሁፍ ውጭ ሞክር. ሀ P-የ <0.05 ዋጋ እንደ አኃዛዊ ጠቀሜታ ተደርጎ ተቆጥሯል ፡፡

ውጤቶች

መካከለኛ ሽፋን ያላቸው ኒውሮኖችን ኒውክሊየስ ኮምፕልስ (ኒውክሊየስ) እምብርት

በ "ኮኬይ-ተኮር ሱስ" ውስጥ ያሉ የ NAc D2R-MSN ዎች ሚና ለመወሰን, የ NAc D2R ነርቮቶችን ለማነቃነጥ የመረመረብ ዘዴ ተጠቅመን ነበር. የ D2R-MSN ን በብርሃን ተፅእኖ ለመቆጣጠር በጥንቃቄ ለመቆጣጠር በ AAV-DIO-CHR2-EYFP የሚባዙ የቫይረስ ቬኬታዎችን በ D2R-Cre BAC ዝርጋጭ አይኖች ውስጥ ተጭነው ነበር. በቫይረስ መርዛማነት ከዘገዩ ሳምንታት ውስጥ, በ NAc (የችኮላ) ውስጥ ጠንካራ የ ChR4-EYFP መግለጫ ተገኝቷል. (ምስል 1A) .1A). በ D2RX-MSN ውስጥ የ ChR2 ኤክስፕሬሽን ልዩነት በፀረ-ሙልፊሙሊንሲንስ ማሕበራዊ ትንተና ተረጋግጧል: የ YFP-መለያ የተሰየመ ChR2 መግለጫ በ NAX (ካርታ) በ D2R ውስጥ በጋራ ተካቷል. (ምስል 1B), 1B), ይህም CHR2 በ NAX ውስጥ በ D2R ውስጥ ነርቮሮችን የሚያሳዩበት መሆኑን ያሳያል.

ምንም እንኳን እንደዚህ ዓይነቱ አቀራረብ በሌሎች ጥናቶች ጥቅም ላይ ውሏል (ለምሳሌ, Lobo et al. 2010), የቫይረስ የፍሳላ ክውነቶች ዝርዝሮች ከአንዱ ላብራቶሪ ወደ ሌላ ይለያያሉ, ይህም በተለየ የሙከራ ሁኔታዎቻችን ውስጥ መርጣ-ጤዛ ቁጥጥር ለመመዝገብ አስፈላጊ ያደርገዋል. ሙሉውን ህዋስ የ patch ክላብ ቀረጻዎችን ከኤስኤምኤስ በ NAc ክፈፎች በማድረግ የ ChR2 ን የተገቢነት መግለጫ ገምተናል. MSN በ <1> ተለይቶ የሚታወቀው በአንጻራዊነት ከፍተኛ ትንተና ያለው የማረፊያ ብስባሽ እምቅ (RMP) ነው, በተለምዶ ከ -90 ሺህ mV የበለጠ አሉታዊ; (80) በተለመደው ወቅታዊ አዝጋሚ ምላሽ (AP) ላይ መደበኛ የሆነ የ AP ማጣሪያ አካሄድ; (2) ረዥም ጊዜ መዘግየት ወቅት የመነሻ ፓምፑን ለመጀመሪያ ጊዜ ኤ.ፒ. (3) የቫይረስ የ "ሾል" አለመኖር (hypergolarization) -ከተነቃቃ (ኤርትራ) -የተመረጡት የ "ዥን" አለመኖር (Ih); እና (5) በአንጻራዊነታቸው ትንሽ ሴል ያላቸው የሰውነታቸው ክፍሎች (ቻንች እና ኪቲይ, 1985; ኦዶንለን እና ግሬስ, 1993; ሌ ሙይን እና ብሎክ, 1996; Taverna et al., 2008). ሰማያዊ መብራት (470 nm) በጠቅላላ የእይታ መስክ ላይ ተተግብሯል (0.78 mm2) በቮልቴጅ-ኤክስኤምኤስ ውስጥ--69 mV አቅም አለው. የተወሰኑ የ MSN ግንኙነቶች CHR2 ን ሲገልጹ, የዩ ኤፍ ኤ ፈሳሽነት በሱቶቻቸው (በአዕምሮች ላይ ቀስቶች 1C1, C3). እንደነዚህ ያሉት የነርቭ ሴሎችም ከፍተኛ መጠን ያለው ፎቶኮራጐችን (ፈጣን ብርሃን ፈጣሪዎች) ያሳያሉ. (ምስል 1D) .1D). በፎክቸር ብርሃን-አዙር እና ከፍተኛ መጠን መካከል ያለው ግንኙነት (ምስል (ምስል 1E) 1E) ከፍተኛ መጠን ያለው የብርሃን መጠን መለዋወጥ የ 0.054 ± 0.0023 ሞ / ወር ነው2 እና ከፍተኛ ከፍተኛውን የ 1.16 ± 0.16 nA (አማካኝ ± ግማሽ, n = 4).

በአሁኑ-ቁጥጥር ሁኔታዎች ስር, የ ChR2 ን የሚገልጹ የ MSN ግንኙነቶች ለብርሃን እምሰታ ባቡሮች (የ 10 ms ርዝመት) በሚሰጡት ተዓማኒነት (ኤፒኤስ) ምስል 1F) .1F). በእነዚህ ሁኔታዎች ከብርሃን ጥልቀት ከ 0.1 mW / mm የበለጠ ነው2 (ኤክስ (ምስል 1G, 1G, n = 5). ኤችፒዎች በ ፎቶቶሚሚል ቮልቴጅ በሚባሉት ፍጥነቶች እስከ 20 Hz ተስተካክለው ይንቀሳቀሳሉ, በ 40 Hz ላይ ግን ቀላል በሆነ የፀሐይ ግፊት የተደረጉ ምላሾች (ኤስፕሊንሲቭ) 1F, G).

የ D2R-MSN ን የፎቶግራፊ ማድረጊያ የአከባቢን የመቆጣጠሪያ ዑደትዎች ያነሳል

በ NAC በአካባቢያዊ ወረዳዎች ውስጥ የ D2R-MSN ን መዘዞች ያስከተላቸውን ውጤቶች ለመመርመር, በ ChR2-negative MSN ዎች ላይ የምላሽነት ምላሾችን በመለካት የ presynapttic MSN የ ChR2 ን ፎቶ አንስተን ቀጥለን እናሳያለን (ምስል (ምስል 2A) .2A). በሥዕሉ ላይ የሚታየው የነርቭ ሴል ምስል 2A2A የ EYFP ፍልፈርስነት አለመኖር እንደታየው እንደ Chr2 አይገልጽም, እንዲሁም በስዕሉ ላይ እንደሚታየው የአጭር ጊዜ መቅረጫ ፎቶግራፎች አለመኖር ምስል 1D.1D. ሆኖም, ልጥፎች (ትራንስፓርሲቲክስ) MSN እንደ-xNUMX mV ሊሆኑ የሚችሉ አቅም ሲያዙ, የ 69 ms ርዝመት መብራቶች በ 10 ± 9.0 ms (የ "n" (ምስል 2B, 2B, n = 15). የእነዚህን ምላሾች ባህርይ ለመወሰን ልኬሲፓቲክ ማሽነሪ እምችቶች ከ -NUMNUMX mV እስከ -99 mV መካከል ልዩነት አላቸው, እና ቀላል መብራት ተተካ. (ምስል 2C) .2C). ብርሃን-ተነሳሽ ምላሾች ከሴጣው እምቅ ችሎታ ጋር የተለያየ ናቸው (ምስል (ምስል 2D, 2D, n = 6) እና በ-81 ± 3.4 mV ጥገኛቸውን ተቀይሯል. የ "ክሎሪን ዪንስ" ህልዮት (¡ሉት Œ ¡¡Œ ¡Œ ¡Œ ¡Œ ¡Œ ¡Œ ¡¡Œ ¡¡Œ ¡¡¡ª ƒ ¡Œ ¡¡¡ሲA ተቀባይ. ይህን ዕድል ለመሞከር, GABAA ሪቻርድ ባርኩሉሊን (10 μM) ተቀባይ ወደ ውጫዊ መፍትሄው ተጨምሯል. ይህ መድሃኒት ቀላል የሆኑትን ምላሾች ሙሉ በሙሉ አግዷል (ምስል (ምስል 2B), 2B), የብርሃን-ግቤ ምላሾች የ GABAergic መቆጣጠሪያ ልምዶች የኃይል ማመንጫዎች (IPSCs) ናቸው.

ከ ፎቶ ፕሮቶሞሊሽን ምላሾች ላይ በመነሳት, ከላይ በተጠቀሱት የተነሳ በ ፎቶ የማስነሻ (ChR4 + AP) ላይ ኤፒሲዎችን ለማጥፋት በቂ የሆነ መጠን ያለው CHR1 የሚለኩ የ 2 ቡድኖች (2) (2) ሕዋሳትን (CHR2 + No No AP) በመጨመር አነስተኛ ንዑስ መጠን (ChR2) የሚያመለክቱ ናቸው. (3) የ ChR2 ምንም መግለጫ ያልነበራቸው የፀጥታ ክፍሎች (IPSCs) ከ Chronx !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! ChR2 (ChR2- / IPSC); እና (XRXX) CHR4- አሉታዊ ሕዋሳትን (IPSCs) ያላሳዩ ሌሎች የ MSNs (ChR2- / No IPSC) ፎቶዎችን ላላሳዩ. በእያንዳንዱ ምድብ ውስጥ ያሉ ሴሎች አንጻራዊ ስሌት በምስል ይታያል ምስል 2E2E (n = 53). በአጠቃላይ, ከሴሎች ውስጥ ግማሽ ያህል የሚሆኑት (45.3%) ChR2 (የቡድኖች ድምር (1) እና (2)) አሉ. እኛ ካስያትናቸው የ MSN ወጦች መካከል በፎቶግራፊ (ሞገድ) ፎቶ አንጸባራቂዎች ውስጥ ምንም ፎቶኮንጎች እና አይፒሲዎች አልተገኙም. ይህ የሚያመለክተው D2R-አዎንታዊ MSN በ NAC ውስጥ በዚህ ተመሳሳይ ሕዋስ ውስጥ ያሉ ሌሎች አባላት እንዳይሸጡ አያመለክትም.

ይህ ለብርሃን ግብረመልሶች ማሳየት የ ChR2 + / No AP cells (የቡድን 2) እና የ ChR2- / No IPSC ሕዋሶች (የቡድን 4) የፎቶግራፊ (ሞገድ) ወደ የወረዳ እንቅስቃሴ ሊያመጡ የሚችሉ የኤሌክትሪክ ምልክቶችን አያስገኙም. ስለዚህ የፎቶ-ፐጂሚሽን (ኮምፕሊፕሽን) በቪሲጂን ተግባር ላይ ለመግለጽ, ኤንአርሲ ፎቶግራፍ በማንሳት እና የ ChR2- / IPSC ሕዋሶች (የቡድን 1) ሲሆኑ, የ APK ን (ኤክስፒኤ) የሚያመነጩትን የ ChR2 + AP APMSs (ቡድን 3) ባህሪያት በዝርዝር አስቀምጠናል. ለ ChR2 + / AP MSN MSN ልጥፎች (ትራንስፕሬፕቲክ) ናቸው. በኤንሲ ውስጥ የሚገኙት ChR2 + / AP እና ChR2- / IPSC ህዋሶች እንደ ተጣማጅ የነርቭ ሴሎች (ፊንጢጣ ነርቮች) ተለይተዋል (ምስል (ምስል 3A) .3A). በነዚህ ሁለት ቡድኖች የነርቭ ሴልፎሎም ወይም ኤሌክትሮፊስኪያዊ ባህርያት ላይ ምንም ልዩነት የለም. ለምሳሌ, በነዚህ ሁለት ቡድኖች የነርቭ ሴታቶች መጠናቸው ተመሳሳይነት አላቸው (ምስል (ምስል 3B) .3B). በተጨማሪም, RMPs (-83.0 ± 1.7 vs. -85.0 ± 1.8 mV; mean ± sem; n = 10, ምስል ምስል 3C) 3C) እና የግቤት ድብድሮች (113 ± 15 vs. 133 ± 13 MΩ, n = 6, ምስል ምስል 3D) 3D) እንዲሁም አይለያዩም (p > 0.05 ባለ ሁለት ጅራት የተማሪ t-test) በወቅቱ በጥራጥሬዎች ምላሽ (ኤፍ ፒ 3E, F) ተመሳሳይ ነበሩ (p > 0.05 ባለ ሁለት ጅራት የተማሪ t-ወተት, n = 6). በማጠቃለያ ውስጥ በ NAc ውስጥ የ D2R-MSN ን የፎቶ አነሳሽነት ከ D2R-MSN ዎች ጋር በጣም ተመሳሳይ የሆኑ የ Postynaptic ኒውሮኖችን የሚያስኬዱ ነገር ግን D2R ን አይገልጽም.

ኮኬይን በሚያነሳሽ የባህሪ ማነቃቂያ (ኤችአይኤን) D2R-MSN ውስጥ የመርጦሽ ማነቃቂያ ማበረታቻ

ቀጥሎ የተዘረዘሩትን የባህሪ መዘዞች ተመለከትን Vivo ውስጥ የ NAC D2R-MSN ዎች ፎቶን ማስፋት. ምክንያቱም በ Dorsal striatum ውስጥ የ D2R-MSN ን (ፎቶግራፍ ማንሳት) የሎሚሮተር እንቅስቃሴን (Kravitz እና ሌሎች, 2010), የ Accumbens D2R-MSN ማንቂያ በ basal locomotor እንቅስቃሴ ላይ ተፅዕኖዎችን በመግለጽ ጀምረናል. ለዚህ ዓላማ, የ D2R-Cre አይሴሎች በዲኤን-ኤ ቪ-ቻይሮክስክስ-ኤYFP ቫይረስ ወደ ሁለቱ የ NAC (D2-Cre (+) NAc-ChR2) ተላከ. D2R-MSN ን በኋላ ሰማያዊ ብርሃን (2 nm, 473 ms pulse ቆንጆ, 5 Hz) በኦፕቲካል ፋይበር በኩል ወደ NAC ይላካሉ. ፎቶቶሚሊሊ በተጠቀሰው የ 20 ደቂቃ ክፍለ ጊዜ ውስጥ በአክሳሪው እንቅስቃሴ ውስጥ በሚገኙበት ቦታ ውስጥ አይጦች በሚቀመጡበት አራት የ 3- (ምስል 4A) .4A). በአንጻራዊነት ደግሞ ከቁጥር ባልሆኑ ጥቁር ጭራነት የሌላቸው አይጦች ጋር በተመሳሳይ መልኩ በቫይረስ የተላከ እና ተመሳሳይ ሰማያዊ ብርሃንን ያገኙ ነበር. D2-Cre (+) NAC-ChR2 አይጦች ከመቆጣጠሪያ D2R-Cre (-) NAC-CHR2 አይጥሎች ጋር ተመጣጣኝ ወይም ትንሽ ከፍ ባለ ደረጃ ላይ ያሉ የመነሻ ልምምድ እንቅስቃሴዎችን አሳይተዋል (Figures 4B, C). በ D2R-Cre (+) NAc-ChR2 አይጥ ውስጥ የ D2R-MSN ን የፎቶግራፊ (ፐርሰፕሽን) የብርሃን ማበረታቻ ቆሞ ከተቀሰቀሰው በኋላ እንደገና ተሞልቶ የነበረው የመኪና ሞተር ለውጥ ከፍተኛ ነበር. (ምስል 4B) .4B). በቁጥጥርሙ D2R-Cre (-) NAc-ChR2 አይጦች ውስጥ እንደዚህ አይነት ውጤቶች አልተገኙም (Figures 4B, C), የፎቶ ምግሪሚሽን ውጤቶች የተከሰቱት የኣንጐል ህብረ ህዋሳት እንደ ማሞገስ ሳይሆን ከተወሰኑ ተፅዕኖዎች ይልቅ የ ChR2 ን በማንቀሳቀስ ነው. ስለዚህ, መረጃዎቻችን በ NAc ውስጥ የ D2R-MSN ፎቶ አንሺዎች (MOS) በጨረቃ አሽከርካሪዎች እንቅስቃሴ መቀነስን እንደሚያመለክቱ ያሳያል.

እነዚህ ውጤቶች በ Nc ውስጥ የ D2R-MSN ዎች እንቅስቃሴን የመቆጣጠር ችሎታችንን ከፍቶልናል Vivo ውስጥ. ከዚህ በመቀጠል እኛ ይህንን ኮምፒተርን በተደጋጋሚ ኮኬይን ለማስተዳደር የ D2R-MSN እንቅስቃሴን በባህሪ ማነቃነቅ ተፅእኖ ላይ ለመጫን ተጠቅመናል. የስነምግባር ማነቃነቅ የሚያመለክተው ወደ ኮምፕሊን ማመላለሻዎች, ለምሳሌ እንደ ኮኬይን, ለመንኮራኩር እንቅስቃሴ ለማነሳሳት ቀጣይ የአደገኛ መድሃኒቶች ችሎታን ለማሳደግ ነው. ይህ ሂደት ወደ ማነሳሳትና መግለጫዎች ደረጃዎች ሊለያይ ይችላል. ጅማሬዎች የባህሪ ማነቃቃትን (ቫንደርደርሪን እና ካሊቫስ, 2000; ሲም እና ሌሎች. 2013), ምንም እንኳን የአደገኛ መድሃኒት (እጽን) ማቋረጥ (ለቫንደርቼርና ክሎቫስ, 2000; ሲም እና ሌሎች. 2013). ስለዚህም በያንዳንዱ ጊዜ በ D2R-MSN ውስጥ የ DXNUMXR-MSN ን እንቅስቃሴ ለመቆጣጠር መርጦ-ኦን-ኦክስቲክስን በሚጠቀሙበት ጊዜ ኮኬይን በተነሳ በተደጋጋሚ በሚታወቀው የኮኬይንስ ግፊት ማነቃቂያ ባህሪያት መርምረናል.

በ 3 ቀናት ውስጥ ለጨው ኢንፌክሽን ከተጋለጡ በኋላ, በ 15 ተከታታይ ቀናት ውስጥ አይጦች በኮኒን (5 mg / kg) ውስጥ ይላካሉ እና እያንዳንዱ ክትባት ከተደረገ በኋላ ለ xNUMX ደቂቃዎች የተመዘገቡ ናቸው. (ምስል 5A) .5A). ፎቶቶስimሊይ ኮኬይድ ከመደረጉ በፊት በ 30 ደቂቃዎች ጊዜ የተላለፈ ሲሆን, የብርሃን ጠፍቶ በ 3 ደቂቃዎች የጨረቃ የጊዜ ርዝመት ውስጥ የ 5 ደቂቃዎች የማብራሪያ ጊዜዎችን በማስተላለፍ ላይ ይገኛል (ምስል (ምስል 5A) .5A). በ NAC ውስጥ የ D2R-MSN የፎቶግራፊ (ሞዛይሽን) በ basal locomotor እንቅስቃሴ ያነሰ በመሆኑ (ምስል (ምስል 4), 4), ፎቶስተርሚሊን ለኮኬይን መከሊከያ ባህሪ ምላሽ እንዳይሰጥ ለመከላከል የኮኬይን አስተዳደር ከመጀመሩ በፊት ወዲያውኑ ተገኝተው ነበር.

ሁለቱም ቁጥጥር D2-Cre (-) NAc-ChR2 አይጥ እና D2-Cre (+) NAc-ChR2 አይጥ በተደጋጋሚ በተደጋገመ የኮኬይን መርፌ ምላሽ በመሰጠቱ ተጨባጭ የመኪና ሞተር እርምጃዎችን አሳይተዋል. (ምስል 5B), 5B), የስሜት ቀውስ ጅማሮትን ያመለክታል. በዲኤንኤክስ ውስጥ የ D2R-MSN በፎቶግራፍ ማራዘም ባህሪን ማነቃቃትን የሚያነሳሳ አይመስልም, ምክንያቱም ኮኬይን ያስከተላቸው የባህርይ ማነቃቃት በ D2-Cre (+) NAc-ChR2 አይጥ ውስጥ እና በ D2-Cre (-) NAC-CHR2 መቆጣጠሪያዎች ተመሳሳይ ነበር.

ለ 15 ቀናት ያህል ይህንን ኮኬይን (5 mg / kg) መድሃኒት ከተደገፉ በኋላ መድሃኒቱ ለ 14 ቀናት ተለያይቶ እና የአነቃቃቂነት መግለጫ ደረጃው ከመጠን በላይ መጠን ያለው ኮኬይን (10 mg) /ኪግ). የስነስርዓቱ መግለጫ (Expression of the sensitization) መድሃኒት ማቋረጥ (ለስቴቱ እና ለካሊቫስ, 2011; ሲም እና ሌሎች. 2013). የ D2R-MSN ን ሚና በስነ-ስርአተ-ነገር ውስጥ ያለውን ለመመርመር, NAC ኮኬይን ከማስተዳደር በፊት ወዲያውኑ ፎቶግራፍ እንዲነሳ ተደርጓል (ምስል (ምስል 5A) 5A) እና የማነቃቃቱ ሂደት በካኖን መርፌ የተከሰተው የመኪና ሞተር እንቅስቃሴ መጠን ይለካ ነበር.

በሁለቱም ኮኬይ-በቅድሚያ የተገኙ የኩሬዎች-D2-Cre (-) NAC-CHR2 አይጥ (D2-Cre (-) :: coc-coc) እና D2-Cre (+) NAC-CHR2 (D2-Cre (+): : coc-coc) -የፎቢውስ ብስባሽነትን ማሳየት (ምስል (ምስል 5C) .5C). የኮኬይን ማነቃቂያ ምድብ ጊዜ በሁለቱ ቡድኖች መካከል ያለው ሁኔታ ተመሳሳይ ነበር (ምስል 5C), 5C), በሁለት ቡድኖች መካከል የሚታይ ልዩነት የለም. እነዚህ ሁለቱ የፎቶግራፊ ሞገዶች (ሙከራዎች) አንድ ላይ ተወስደዋል ይህም በ NAc ውስጥ የ D2R-MSN ማስኬድ (activation of cocaine-induced behavioral sensitization) መነሳሳት ላይ ተጽዕኖ አያደርግም.

መድሃኒት በመውሰድ ወቅት የ NAc D2R-MSN ን (ፎቶግራፍ) ማስነሳት

በተደጋጋሚ ኮኬይን ከተጋለጡ በኋላ የድንገተኛ ጊዜ መድሃኒት በሚከሰትበት ጊዜ የድንገተኛ ጊዜ ችግር በዲ ኤን ኤ ሲ (ሲክ እና ወ.ዘ. ውስጥ) ላይ በተደረገ የሲፕቲፕቲ ፕላስቲክ ለውጥ ጋር የተያያዘውን የኮኬይን ፈላጊ እና የመተንፈስ ባህሪያትን መቆጣጠርን የሚቆጣጠር D2R- 2013). ይህም የሚያመለክተው መድሃኒት መውጣትን የሚያካትቱ አደገኛ መድሃኒቶች ከአደገኛ ዕጢዎች መነካካት ጋር የተለያየ መሆኑን ነው. ስለዚህ የኮኬይን ወጪ በሚቀንሱበት ጊዜ በዲኤንኤክስ ውስጥ የ D2R-MSN ፎቶ የማስነሳት ሁኔታ የኮኬይን ምላስ ባህሪን ማነቃቃትን ለመግለጽ.

ከላይ በተዘረዘሩት በተደጋጋሚ በተደጋጋሚ ኮኬይን በመጨመር የባህሪ ማነቃቃት ስሜት ከተፈጠረ በኋላ, የ D2-Cre (-) እና D2-Cre (+) አይጦች ለሁለት የ 14 ቀናት የማቆያ ጊዜን በሁለት ቡድኖች ተከፋፍሏል-አንድ ቡድን በየቀኑ ሰማያዊ ብርሀን ማበረታታት NAC ለ 1 h (3 ደቂቃ x 8 ጊዜ), ሌላኛው ቡድን ግን አልነበረም (ምስል (ምስል 6A) .6A). ኮኬይን በ "ኮኬይን" በሚተላለፍበት ጊዜ በ "ኤክስሲ" ላይ የ D2R-MSN የፎቶ ሰሜት ሽግሽግ የ "DxNUMX-Cre" (-) :: coc-coc coco (-) :: (ምስል 6B) .6B). በተቃራኒው, በ D2-Cre (+) :: ኮካ-ኮክ አይኮስ, በአደገኛ መድሃኒት ጊዜ በሚታወቀው ጊዜ በተደጋጋሚ የፎቶግራፊ (ፐሮግራም) ሽግሽግ (ኒስ) (ምስል 6B), 6B), ምንም እንኳ የኮኬይን የማጓጓዣ ሂደት ጊዜ ምንም ተጽዕኖ አላሳደረበትም (ስዕል (ምስል 6C) .6C). ስለዚህ, መድሃኒት በሚወስዱበት ወቅት በ D2R-MSN የፎቶ ማስወገጃ (ኮንሰርት) ፎቶን ማነሳሳት (ኮኬይ × ፎቶ-መነቃቃት መስተጋብር) F(1,18) = 11.08, P = 0.0037, ምስል ምስል 6B) .6B). የእንሰሳት መድሃኒት በተወሰደበት ወቅት የ D2R-NAC MSN ኤንጅኖች ማግበር የኮኬይን ጠበቆች እና መጥፎ ባህሪያት ተጽዕኖ እንደሚያሳድሩ እነዚህ መረጃዎች ያመለክታሉ.

ዉይይት

ኮኬይን-የተራዘመ የባህርይ ማነቃነቅ በሜፖርቶኮልቢምሲስ ስርዓት የተሻሻለ የዲንሚንጌል ስርጭት ጋር የተያያዘ መሆኑን የሚያሳዩ በቂ ማስረጃዎች አሉ. በተለይም የባህሪ ማነቃቂያው አገላለጽ በተከታታይ የተዛባ የአደገኛ መድሃኒት ተውላጠ-መድሃኒት በተደጋጋሚ የመቋቋም ዘዴዎች (Kalivas and Duffy, 1990; ሮቢንሰን እና ቤርሪ, 1993; Kalivas et al., 1998) ለተነሳሱ የአደንዛዥ ዕጾች ፍላጎት (ሮቢንሰን እና ቤርሪ, 1993; Kalivas et al., 1998; ስቴኬይ እና ካሊቫስ, 2011). በኤንኤች ውስጥ በዲ ኤን ኤ ውስጥ በሞለኪዩል, በሴሉላር እና በባህሪው የፕላስቲክ ለውጥ የተደረጉ ለውጦች በኤም ኤች ኤ ኤን ኤ (DAs receptor signaler) ጋር በመተባበር ኮኬይን ያደረሱ ተለዋዋጭ ለውጦች መድኃኒት-ተኮር መድሃኒቶችን (Lobo et al, 2010; ሽሚት እና ፒሲስ, 2010; ፈርግሰን እና ሌሎች, 2011; ፓስካል እና ሌሎች. 2011; Bocklisch et al., 2013; Grueter et al., 2013).

ኮንቴይነሪንግ (ጄኔቲቭ) ፍተሻ በመጠቀም በቅርብ ጊዜ የተደረጉ ጥናቶች ክሬም ሪአይቢንሰንስ (ኩኪን) ሪኮንቢስ (ኩኪን) ሪሴይንስን (ኮንሰክንቢንሲስ) በካኪን ሱሰኛ ባህሪያት ውስጥ ለ D1R-MSN ወይም D2R-MSN ዎች ገልጸዋል. በተደጋጋሚ በተደጋጋሚ የኮኬይን አስተዳደር ከ xNUMX ቀናት በኋላ የ NX መርጦ የጨረቃ መርገጫ መቆጣጠሪያዎች (locomotor) እንቅስቃሴን ያጠናክራሉ, ነገር ግን የ D1R-MSN ማግበር ምንም ውጤት የለውም (Lobo et al. 2010). እነዚህ መረጃዎች ኮኬይን በተደጋጋሚ መነካካቱ በ NAC ውጤት ውስጥ የ D1R-MSN ውጤቶችን ያሻሽላል. የ «D1R» ን አሻሽል (MSN ን) በቲትሮን መርዛማ (ቲታኖስ) መርዛማ (ቲቢ) 2010) በኬክስ ኮንዲሽነር (CPP) የሚቀንሱ ሲሆን በ D2R-MSN ዎች ውስጥ የሲክሲፕቲክ መተላለፍን (ሂኪዲ እና ሌሎች, 2010). የ "D1R-MSN" የኦርጅናል አሻሽል (ኦርጅናል) ማወቂያን በጀርባ አጣቃሹ ላይ ቀጣይ ማጠናከሪያዎችን ያሳድጋል, ነገር ግን የ D2 ን ተቀባይ መለዋወጫዎችን (ማነጻጸሪያ ልምዶች) ማራዘም ጊዜያዊ ህመም ያስከትላል (Kravitz እና ሌሎች, 2012). በቅርብ ጊዜ የተደረገ ጥናት ደግሞ በኬሚጄኒክስ ዘዴ በኩል የ D2R-MSN ን መከልከል ኮኬይን ለማግኘት ማነሳሳትን ያበረታታል, የ "D2R-MSN" መርጦ ማግኔቲቭ ማግኔቲኮችን ኮኬይን እራስን ማስተዳደርን (ብሎክ እና ሌሎች, 2013). በሌላ በኩል, ቦክስስሊስ እና ሌሎች. (2013) የ NAC ፕሮጀክቱ D1R-MSN ን በ VTA ውስጥ በተለይም ለ GABAergic neurons በ D2R-MSN በኩል በቀጥታ ለ VTA አልያዘም. ይህ ኔትወርክ የዲ ኤክስ ኤን-ኤክስ-ኤምኤስ (ኦርሞኒክስ) ማመቻቸት (DA) ን ነርቮኖች (ዲ ኤን ኤን-ኤክስ) -ሲኤስ (ሴራንስ) (ኦን-ኔርንስ) ይባላል-ይህም በመጨረሻ ኮኬይን-የተራቀቁ ሱስ የሚያስከትሉ ባህሪያትን (Bocklisch et al, 2013).

እነዚህ ሁለት MSN ያላቸው የህዝብ ቁጥር መመስረት ቢመስሉም, MSN የተለያዩ ግብዓቶችን ያገኛሉ እና ከሌሎች ወደ አንጎል አካባቢ የተለያዩ ውፅዋቶች እንዳላቸው እንዲሁም በ MSN እና በሌሎች የውስጣዊ ክፍል ውስጥ አካባቢያዊ ዑደቶችን በማቋቋም የ D1R- MSNs እና D2R-MSNs ውስብስብ እና የተለያዩ ሞለኪውላዊ, ሴሉላር እና የባህርይ ውጤቶች ሊሆኑ ይችላሉ.

ቀደም ሲልም D2R የአደገኛ መድሃኒት በሚወሰዱበት ጊዜ ለታመመው የሲንፕቲክ ለውጥ ማሻሻያ አስተዋፅኦ እንዳሳየና እነዚህም እንደ ቀድሞ ኮኬታማነት እና የአደንዛዥ ዕፅ መድሃኒቶች ሳይወስዱ እንደገና ኮኬይን ለማግኘት መሞከር ይችላሉ (Sim እና ሌሎች, 2013). በ Nca ውስጥ የ D2R-MSN ፎቶ አንሺዎችን (ፎቶኮፒሚክስ) በ basal locomotor እንቅስቃሴ መቀነስ መቻሉን ያሳያል. Lobo et al. (2010) የ MSN ንዑስ ተመን ቢነቃ መሳሪያው ውስጥ ምንም ለውጥ አልተገኘም, ነገር ግን የቤል ሞቶር እንቅስቃሴዎችን ወደ ፎቶ የማስነቅፋዊ ምላሾች ፈጣን ምላሾችን ከመመርመር ይልቅ አጠቃላይ የሙከራ ተጓዳኝ እንቅስቃሴዎችን ብቻ ይመረምራሉ. Kravitz et al. (2010) በተጨማሪ በ Dorsal striatum ውስጥ የ D2R-MSN መርጦ ማግኔቲክ ማግኔቲቭ እንቅስቃሴ የመንገደኞች እንቅስቃሴን ቀንሶታል. ስለዚህ, የካልካን ማዞሪያ እንቅስቃሴ እንቅስቃሴዎች የኒኮን D2R-MSN በፎቶ ማነጣጠር እና የእነዚህን የነርቮቶች ፎቶ በሰፊው በማንሳት የቦክስ ማሽከርከሪያውን የጊዜ ሂደት ለመፈተሽ ለመጀመሪያ ጊዜ የኛ መረጃ ነው.

በዚህ ጥናት ውስጥ በ "ኤክስሲ" ውስጥ የ "D2R-MSN" መርጦ መውሰጃ (ማግኔቲቭ) ማግበር የስነምግባር ማነቃቂያ መነሳሳት ላይ ተጽዕኖ አላሳደረም. ይሁን እንጂ በአደገኛ መድሃኒት ጊዜ ውስጥ የ D2R-MSN ን ፎቶ የማስነሳት የኮኬይንስ-ማነቃነቅ (sensitization) መግለጫን አቃልሎታል. ስለዚህ, መረጃዎቻችን የ D2R-MSN በጋርዮሽ አገላለጽ ወይም በሌሎች የአከፋፈል ዘዴዎች ወቅት የሚቀያየር ሲሆን በተለይም በሲቲፕቲክ ፕላስቲክ ላይ ለውጦች እንዲቀነቅኑ ያደርጋል. እነዚህ MSN ያላቸው በሱስ ሱስ ጋር የተዛመዱ ባህርያት ያላቸው ልዩነት እንዲፈጠር የሚያደርጉ ሴል-አይነት ልዩ ማስተካከያዎችን እንዴት እንደሚሠሩ ማወቅ አይታወቅም. Grueter et al. (2013) ΔFosB በ ኤንአር (Nc) ውስጥ የሴክተስቲካዊ ንብረቶችን እና ከክፍለ-ምድብ-በተለየ የፋሽን አይነት ከሽልማት ጋር የተያያዙ ባህሪዎችን ይለዋወጣል. በቅርቡ, Chandra et al. (2013) የ D2RX-MSN ን በተደጋጋሚ መ Chr1 ማስኬድ እና በ D2R-MSN ዎችን አለመመዝገቡ የኬሚን ተፅእኖ ተመሳሳይነት ያለው የቲሚክስንክለሌተን ተስተካክለው የቲሚክስNUMX ጂን ዝቅተኛ ደንብ እንዲፈጠር አድርጓል. ስለዚህ, የአደንዛዥ ዕጽ ባህሪዎችን ዘላቂ ውጤት የሚያስገኙትን ዘዴዎች ለመረዳት በእነዚህ ኤስ ኤም ኤስ ውስጥ ያሉ ሞለኪውላዊ ክስተቶችን በተደጋጋሚ መድሃኒት ማስተርጎም ከሚያስከትሉ መድሃኒቶች መቆጣጠር አስፈላጊ ነው.

ኮኬይን ከተጋለጡ በኋላ የተወሰኑ ለውጦች ብቻ በበርካታ ሳምንታት ውስጥ ስለሚታዩ ከተደጋጋሚ መድሃኒት መድሐኒት ጋር ሲነፃፀሩ, ማቋረጥ በጣም አስፈላጊ ሚና እንደሚጫወት ተነግሯል. ይህ እንደሚያመለክተው መታቀብ የፕላስቲክ ልማት ለማስፋት ወሳኝ አስታራቂ ነው (ሮቢንሰን እና ቤሪጅ, 2003; ባውሬው እና ዎልፍ, 2005; Boudreau et al, 2007; Kourrich እና ሌሎች, 2007). እነዚህ ግኝቶች በ "ኤክስኤ" ለውጦችን በ D2R-ጥገኛ ምልክት ቁጥጥር ስር ያሉትን ለውጦችን ሊያመጣ እንደሚችል ያመላክታል. በዲ ኤን ሲ ውስጥ መድሃኒት በሚነሳበት ጊዜ የ D2R-MSN ን ማስኬድ ውጤታችን የኮኬይን-ተነሳሽ ባህሪን ማነቃነቅን የሚነካ መሆኑ ለዚህ ሃሳብ የማያቋርጥ ድጋፍ ይሰጣል.

ቀደም ሲል በዶክተሮ ማጨሻ ጊዜ ለጭንቀት በተደጋጋሚ መጋለጥ የኮኬይን ምልቀት ማነቃቂያ ባህሪያትን እንዲሁም ኮኬይን ፈላጊዎችን እና ልምዶችን በ D2R KO አይጥ (ኮሜ. 2013). አደንዛዥ ዕጽ መውጣትን በሚመለከት በ D2R-MSN ን ማስነሳት የፎቶ አነሳሽነት (sensitization) ን የሚያዳክም መስሎ ሊታይ ይችላል. በከፍተኛ ትስስር ውስጥ ያሉ የሲንፕቲክ ፕላስቲክ መጠይቅ በ D2R KO አይኖክስ ውስጥ የተለወጠ (ሲም እና ወ.ዘ., 2013). ምንም እንኳ እስካሁን ድረስ የ D2R MSN የማስነሳት ወይም ለረጅም ጊዜ የሚቆይ ውጥረት በሲፕቲፕቲክ ፕላስቲክ ውስጥ ተመሳሳይ ለውጦችን ቢያመጣም, የኛን ግኝቶች የኔክስን ኤክስኤክስ D2R-MSN በጠቅላላው የዲፕላስቲክ ውስጥ ቁልፍ ሚና በመጫወት እና የዕፅ ሱሰኝነት ከፈጸመ በኋላ እንደገና ይከሰት. በዚህ ዲስትሪክ ውስጥ የ D2R-MSN ን ፎቶአፕሎሚሽን እና በዲፕሎፕቲስቲክ ውስብስብነት ላይ የሚከሰት ውጥረት ውጤቶችን ለመመርመር እና ለማነፃፀር በ D2R MSN ውስጥ የተካሄዱ ነርቭ ዑደቶች (circuits) ሰርተፊኬቶች ላይ ተጨማሪ ምርመራ ማካሄድ ይጠበቅበታል.

ሌላ የ D2R-MSN ን የሚገልፅ ሊኖር የሚችል ሚና ከ NAC የ D1R-MSN ዎች ውፅዓት እንዳይገድብ ማድረግ ሊሆን ይችላል. ቀደም ሲል የተደረጉ ጥናቶች እንደሚያሳዩት MSN የሩቅ ገዳዮችን ረጅም ዘመናዊ መካከለኛ ፍንጮችን ቢሰነዝሩ, በአዞሮን (ግሮሰተርስ) እና በአጣቃፊ ነጠብጣብ ነርቭ ሴልቶች (ጓሮቫ, 1975; ፕሪስተን እና ሌሎች. 1980; ዊልሰን እና ግሮቮስ, 1980). ይሄ በ NAC ውስጥ ለ MSN አካባቢያዊ የሲዊክቲክ ግንኙነት መኖሩን ሊያመለክት ይችላል. በአከርካሪ ወራቶች ውስጥ በአክራሬት ስታይራት (Czubayko and Plenz, 2002; Tunstall et al., 2002; ኮስ እና ሌሎች. 2004; ጉስታፕሰን እና ሌሎች, 2006). በተጨማሪም በዊንዶም በተደጋጋሚ የ MSN ተጠባባቂ የሆኑ የ MSN ን ዘሮች (ሰርኪኖች) በተሳታፊነት የተሰሩ የሲንክሎች (synapses) ዘፍጋፊ አይደሉም, D2R-MSN ከሌሎች የ D2R-MSN እና ከ D1R-MSN ዎች ጋር synaptic ግንኙነቶችን ያደርገዋል, D1R-MSN ደግሞ ከሌሎች ጋር የሚመሳሰሉ የሲንፕቲክ ግንኙነቶችን ይመሰርታል. D1R-MSNs (Taverna et al., 2008). በአካባቢያዊ ተደጋጋሚ የአሲኖል መያዣዎች መካከል ያለው የ GABAergic ግንኙነት በዲኤችአይፕስ (MSN) መካከል በአጠቃላይ ሪፖርት ተደርጓል (Taverna et al. 2004) እስካሁን ድረስ ግልፅ ግን አሁንም D2R-MSN በአካባቢያዊ የአከባቢ ማይክሮባኪያዎችን ይመሰርቁ ወይም በአራት ወረዳዎች ውስጥ በአክሲዮኖች ውስጥ በአክቲኮቻቸው ውስጥ በአክሲዮን ውስጥ አስተዋፅዖ ያደርጋሉ. የእኛ መረጃ እንደሚያሳየው በ NX ውስጥ CHR2 ን ሲገልጹ የ D2R-MSN በ D1R ን ከሚገልጹ ከጎረቤት የ MSN ግንኙነቶች ጋር የሚመሳሰሉ የሲቲፒክስ ግንኙነቶችን ያደርጉ እና D2R-MSN በ "D1R-mediated" ሱስ የሚያስይዙ ባህሪዎችን ለማስተዋወቅ አፅንዖት ይሠራል.

ለማጠቃለል, በ NAc D2R-MSN ዎች መርጦ ማግኔቶች (ማግኔቲቭ) ማግበር በኮኬይን ሱሰኝነት ውስጥ በሚፈጠር ኮንትራክተኝነት ምክንያት የሚቀነሱ የፕላስቲክ እቅዶችን ይቀንሳል. በማቆያ ጊዜው ውስጥ የ D2R-ጥገኛ ተመስርቶ እንቅስቃሴው የኮኬይን ማነቃቂያ ባህሪን ማነቃነቅ ቁልፍ ተቆጣጣሪ ሆኖ ሲገኝ, D2R-MSN ለዕፅዋት መፈለግ እና እንደገና ወደ ማፈግለጫነት ለረጅም ጊዜ መግባባት አስፈላጊ ሸምጋዮች ናቸው. በተደጋጋሚ በሚታወቅ የአደንዛዥ እጽ ተጋላጭነት ውስጥ የተካተቱ የ NAC D2R-MSN በተለየ የዲ ኤን ኤክስ D2R-MSN ከተለዩ መርገጫዎች ጋር በመተባበር በ DXNUMXR-ጥገኛ ምልክት ምልክት መለየት, በአደገኛ ዕፅ መውሰጃ ሕክምናዎች ውስጥ ለአንዳንዶቹ ጣልቃ-ገብነት ጣልቃገብነት መስጠት.

የፍላጎት መግለጫ ግጭት

ደራሲዎቹ ያደረጉት ጥናት የተካሄደው ምንም ዓይነት የንግድና ገንዘብ ነክ ያልሆኑ ግንኙነቶች ሳይኖር ሲቀር ነው.

ምስጋና

ይህ ሥራ በሀገራዊ የምርምር ፋውንዴሽን (ጆን ሂዩን ሀይክ, ግራንት ቁጥር 2013M3C7A1056101) እና በቢዮሎጂ እና ቴክኖሎጂ ቴክኖልጂ በሳይንስ, ኢመይል እና የወደፊት ዕቅድ (ሚኒስቴሩ) በገንዘብ ድጋፍ የተገኘ ሲሆን, የሳይንስ, የመመቴክ እና የወደፊት ዕቅድ (በጆርጅ ጄ. አውጉስቲን) የሚደገፈው የአገሪቱ ብሔራዊ የምርምር ተቋም (ኤንአርኤፍ) ለሆነው የገንቢ ፕሮግራም (ወደ ጃ-ሃዩን ታንግ, ግራንት ቁጥር 2013M3A9D5072550) , WCI 2009-003), እንዲሁም በኮሪያ ዩኒቨርሲቲ ግራንት (ወደ ጃ-ሃዩን ባይክ) እና ከናሽናል ሪሰርች ፋውንዴሽን ከሲንጋፖር (ለጆርጅ ጄ. አውጉስቲን) የሰጠው ድጋፍ.

ማጣቀሻዎች

  1. ባይክ ጄ ኤች (2013). ሽልማት ጋር በተዛመዱ ስነምግባሮች ላይ የዲፖሚን ምልክት ማሳያ. ፊት ለፊት. የነርቭ መስመሮች 7: 152 10.3389 / fncir.2013.00152 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  2. Baik JH, Picetti R., Saiardi A, Thiriet G., Dierich A., Depaulis A, et al. (1995). ዶክሚን D2 ተቀባይ የሆኑት የፔንሲንያን-ሊዮ ሞተር የአካል ጉዳት እጦት. ተፈጥሮ 377, 424-428 10.1038 / 377424a0 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  3. ብራይግ ኬ ሲ (2007). በዶፊምሚን የተሸለመውን የሽርክር ውዝግብ ሽርጉር ማበረታታት. ሳይኮሮፋርማሲዮሎጂ (ቤል) 191, 391-431 10.1007 / s00213-006-0578-x [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  4. ቦክ ራ, ሺን ጄኤ, ካፕላን አር, ዳባ ኤ, ማርኬ ኢ., Kramer PF, et al. (2013). አጣዳፊ የሆነውን ቀጥተኛ ያልሆነ ጎዳና ማጠናከሪያን (ኮኬይን) መጠቀምን ለመቋቋም የሚያስችል ጥንካሬን ያስፋፋል. ናታል. ኒውሮሲሲ. 16, 632-638 10.1038 / nn.3369 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  5. ቦክሊሲስ ሲ, ፖስኮሊ ቫ., ዎንንግ ጂሲ, የቤት ዲቪ, ዩቮን ሲ., De ሮ ኤም., Et al. (2013). ኮታ ባክቴሪያ ውስጥ የዲታሚን የነርቭ ሴሎች በጋላ ባክቴሪያ ውስጥ በጂቢ ኤሌክትሮኒካዊ ልውውጥ ስርጭትን ይቆጣጠራል. ሳይንስ 341, 1521-1525 10.1126 / science.1237059 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  6. Boudreau AC, Reimers JM, Milovanovic M, Wolf ME (2007). የሴሎች ሴል በአክቱ ኒውክሊየስ ውስጥ ያሉ የ AMPA መቀበያዎች ኮኬይን በማቋረጥ ጊዜ ይጨምራሉ, ነገር ግን ተጨባጭነት ያላቸው ፕሮቲን kinases በተደረገ ለውጥ ምክንያት የኮኬይን ውስጣዊ ውስጣዊ ውስጣዊ ግስጋሴ ናቸው. ኒውሮሲሲ. 27, 10621-10635 10.1523 / jneurosci.2163-07.2007 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  7. Boudreau AC, Wolf ME (2005). ከኮኬይን የስነምግባር ማነቃቃት በ Nucleus accumbens (ኒውክሊየስ አክሰንስ) ውስጥ ከኤፒኤፍ መቆጣጠሪያ ገጽታ ጋር የተያያዘ ነው. ኒውሮሲሲ. 25, 9144-9151 10.1523 / jneurosci.2252-05.2005 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  8. ቻንዳ አር, ሌንድ ጄ ዲ, ካንጋርዝ ኤም., ሻውሁሪ ዲ., ሽሮደር ጌል, ሃን ኤች ኤ, እና ሌሎች. (2013). ኒውክሊየስ አክሰቨንስ (ኒውክሊየስ) ንብርትስ (ኒውክሊየስ) ንብርት (ኒውክሊየስ) ንብርት (ኒውክሊየስ) ንብርት (ኒውክሊየስ) ንብርት (ኒውክሊየስ) ንብርት (ኒውክሊየስ) የኒውክሊየስ ንፅፅር መከልከል የሲያክስክስን ኮኬይን (ማእከላዊ) ማዕከላዊነትን ይለውጣል ፊት ለፊት. ሞል. ኒውሮሲሲ. 1: 1 6 / fnmol.13 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  9. ቀዳሚ, ኤቲ ቲ ቲ (1985). የኒውክሊየስ አክቲንግስ የነርቭ ሴልኖች-የውስጥ አካላት (labeling) ጥናት. Brain Res. 347, 112-116 10.1016 / 0006-8993 (85) 90894-7 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  10. ኮዝመር አል, ኤልሜር GI, Rubenstein M., Low MJ, Grandy DK, Katz JL (2002). በ dopamine D2 ተቀባዮች የተጋለጡ አይጦች ውስጥ የኮኬይ ተገጣጣሚዎች መንቀሳቀስ እንቅስቃሴ እና የኮኬይን መድልዎ. ስኪፎርመሪያሎጂ (ቤል) 163, 54-61 10.1007 / s00213-002-1142-y [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  11. ኬቫለር ጂ. ዲኖዩ ጄ ኤም (1990). መሰረታዊ አሰራሮችን እንደ ወሳኝ ሂደት በድርታዊ ተግባራት መግለጫ ውስጥ. አዝማሚያዎች ኒውሮሲስ. 13, 277-280 10.1016 / 0166-2236 (90) 90109-n [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  12. Czubayko ዩ, ፕሌን ዲ (2002). በአስከፊ የፊንጢጣ ነጠብጣብ ነርቮች መካከል በተሳሳተ የሲዊክቲክ ሽግግር. ትዕዛዝ. ናታል. አካድ. Sci. USA 99, 15764-15769 10.1073 / pnas.242428599 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  13. ፈርግሰን ኤስኤን, ኢስካዚዲ, ኢሺካዋ ኤም, ዋታታል ኤምጄ, ፊሊፕስ ፒኢ, ዶን ኤ, et al. (2011). የመሸጋገሪያው የነርቭ ሴል መገደድ ቀጥተኛ እና ቀጥተኛ የሆኑ መንገዶችን በማነቃቂያነት የሚያገልግልበትን ሚና ያሳያል. ናታል. ኒውሮሲሲ. 14, 22-24 10.1038 / nn.2703 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  14. Goto Y, Grace AA (2005). የኒዎክሊየስ አክቲቭስ ዲስፕሊንሲንግ (ኔፖንስርጂክ) የአመክንዮሽንና የአሰራር ስርዓትን በግብ የተመራ ባህሪን ያስተካክላል. ናታል. ኒውሮሲሲ. 8, 805-812 10.1038 / nn1471 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  15. Grofová I. (1975). ንፅህና እና ፓሊይድል ኒራየኖች ለይቶ ለማወቅ. የዩኒቨርሲቲው ፓወርያድዳሲን ከአዞ ዝርጋታ ወደ ኋላ ለማጓጓዝ የሚያስችል የሙከራ ጥናት. Brain Res. 91, 286-291 10.1016 / 0006-8993 (75) 90550-8 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  16. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC (2013). ΔFosB በተለያየ መልኩ ኒውክሊየስ ቀጥተኛ እና ቀጥተኛ ያልሆነ የእግር ጉዞን ተግባር ያስተላልፋል. ትዕዛዝ. ናታል. አካድ. Sci. USA 110, 1923-1928 10.1073 / pnas.1221742110 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  17. ጉስታፕሰን ኒው, ገረሽህ-ዳርማራ ኢ., ዙርኪኦ ዩ.ኤ., ብላክዌል ኬ. ቲ., ፕሌን ዲ (2006). በዊልተስ አየር ማይክሮዌቭ ውስጥ ግፊትን እና ግብረ-ስፔፕቲክ ትራንስፎርሜሽን (ግብረ-መልስ) ግፊትን እና ወቅታዊ-ክላስተር ትንተና. ኒውሮፊስቶስ. 95, 737-752 10.1152 / jn.00802.2005 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  18. ሂኪዳ ታ., ኪምራ ኬ, ዋዳ ኖር, ፊኩቢኪ ኬ., ናካኒሲ ኤስ (2010). በቀጥታ እና በተዘዋዋሪ ቀጥተኛ ባልሆኑት ስኬታማ የአኗኗር ዘይቤዎች ውስጥ ሽልማቶችን እና አፀያፊ ባህሪያትን ልዩ የሚያደርጉ ሚናዎች. Neuron 66, 896-907 10.1016 / j.neuron.2010.05.011 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  19. Kalivas PW, Duffy P. (1990). በኒውክሊየስ አክሰንስ ውስጥ በካልፎላር dopamine ውስጥ የሚከሰተው የአኩሪ እና ዕለታዊ የኮኬይ ሕክምና ውጤት. ድምር 5, 48-58 10.1002 / syn.890050104 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  20. Kalivas PW, Pierce RC, Cornish J., Sorg BA (1998). የኮኬይን ሱሰኝነት በሚያስከትለው ውስጣዊ ግፊት እና እንደገና በማዘግየት የማነቃቃት ሚና. ጄ. ሳይኮፋርኮኮል. 12, 49-53 10.1177 / 026988119801200107 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  21. ኮሎስ ቴ. ቴፐር ጄ ኤም, ዊልሰን ሲጄ (2004). በ neostriatum ውስጥ የፒስ እና የጃፓን ስፒሪንግ ነርቮች የሚባሉትን የ IPSC ዎችን ማወዳደር. ኒውሮሲሲ. 24, 7916-7922 10.1523 / jneurosci.2163-04.2004 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  22. Kourrich S., Rothwell PE, Klug JR, ቶማስ ሜ ኤክስ (2007). የኮኬ ተሞክሮ በኒውክሊየስ ክሩዌልስ ውስጥ ሁለት አቅጣጫዊ የዲፕላስቲክ ንጣፎችን ይቆጣጠራል. ኒውሮሲሲ. 27, 7921-7928 10.1523 / jneurosci.1859-07.2007 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  23. Kravitz AV, በ BS, Parker PR, Kay K., Thwin MT, Deisseroth K., et al. (2010). የፓንኮንሲያን ሞራል ባህሪዎችን በመከተል የመነቀን ጋንግልያ ወረዳን የመቆጣጠር ችሎታ. ተፈጥሮ 466, 622-626 10.1038 / nature09159 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  24. Kravitz AV, Tye LD, Kreitzer AC (2012). ተጨባጭ እና ቀጥተኛ ያልሆኑ ለስላሳ ወራጅ ነርቭ ሴራዎች ተለይተው የሚታወቁባቸው ሚናዎች. ናታል. ኒውሮሲሲ. 15, 816-818 10.1038 / nn.3100 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  25. Kreitzer AC, Malenka RC (2008). የቲራቲካል ፕላስቲክ እና ኦካንጅ ጋንግሊያ ዑደት. ተፈጥሮ 60, 543-554 10.1016 / j.neuron.2008.11.005 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  26. ሊ ሚነር ሲ., ቦሎ ቢ. (1996). በኒውክሊየስ አክቲንግስ ውስጥ በ peptidergic ኒውሮኖች ውስጥ የ D3 dopamine መቀበያ (ኤክሰምፔን) ተቀባይነት መግለጫ: ከ D1 እና D2 dopamine መቀበያዎች ጋር ማነፃፀር. የነርቭ ሳይንስ 73, 131-143 10.1016 / 0306-4522 (96) 00029-2 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  27. Lobo MK, Covington HE, 3rd, Chaudhury D., Friedman AK, Sun H, Damez-Werno D., et al. (2010). የሕዋስ ዓይነቶች የተወሰነ የቢንዲን ሽልማትን መቆጣጠርን የሚያካትቱ የ BDNF መዘዞች. ሳይንስ 330, 385-390 10.1126 / science.1188472 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  28. Lobo MK, Nestler EJ (2011). በአደገኛ ዕፅ ሱስ የተያዘው የወሲባዊ እኩልነት ተግባር-ቀጥተኛ እና ቀጥተኛ ያልሆነ ቀጥተኛ የአየር ማእዘን የነርቭ ሴሎች. ፊት ለፊት. ኒውኖታ. 5: 41 10.3389 / fnana.2011.00041 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  29. Lüscher C., Malenka RC (2011). ሱስ በተጠናወተው የአሲድፕቲክ ፕላስቲክ (ፕላስቲክ) ላይ የተመሰረተ ነው. Neuron 69, 650-663 10.1016 / j.neuron.2011.01.017 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  30. O'Donnell P., ግሬድ AA (1993). የካልኩልና የሞራላዊ ባህርያት የካልኩልና የሴል ነርቮች በስትሮጅን ውስጥ የተመዘገቡ ናቸው. ድምር 13, 135-160 10.1002 / syn.890130206 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  31. ፓስሎት ቫ. ቱያንዩልፍ ኤም, ሉሽች ሲ. (2011). የኮኬይን ተገላቢጦሽ-ሲስፕቲክ ፐሮቴሽን የተከተለ የአደገኛ መድሃኒት ባህሪን ዳግም አስገብቷል. ተፈጥሮ 481, 71-75 10.1038 / nature10709 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  32. ፕሪስተን RJ, ጳጳስ ጋ, ኪታይ ቲ (1980). መካከለኛ የፊንጢጣ የነርቭ ሴል በአክቴ ኔኦስትአአቲም (በኔዘር ኦልአሮቴራቲም): ውስጠኛ የአራዊት የፔሮዳዳሰት ጥናት. Brain Res. 183, 253-263 10.1016 / 0006-8993 (80) 90462-x [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  33. ሮቢን ቲ ቴራት, ቢራሪ ኬ. ኬ .ሲ (1993). የአደንዛዥ ዕፅ ፍላጎቶች አስፈላጊነት የነርቭ መሠረት-የሱሰኝነት ማነቃቂያ ቀስቃሽ ፅንሰ-ሀሳብ. Brain Res. Brain Res. ራዕይ 18, 247-291 10.1016 / 0165-0173 (93) 90013-p [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  34. ሮቢን ቲ ቴራት, ቢራሪ ኬ. ኬ .ሲ (2003). ሱስ. Annu. ቄስ 54, 25-53 10.1146 / annurev.psych.54.101601.145237 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  35. ሽሚድ ኤችዲ, ፒሲሲሲ RC (2010). በጋተማቲን ልምምድ ውስጥ የሚከሰተው የኮኬይንን የደም-መለዋወጫ ልምምድ-እንደ ልምምድ እና ሱሰኝነት ያሉ የስነ-አዕምሮ ግብዓቶች. Ann. የኒው ዮርክ አካድ. Sci. 1187, 35-75 10.1111 / j.1749-6632.2009.05144.x [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  36. Sesack SR, Grace AA (2010). Cortico-basal Ganglia ሽልማት አውታረመረብ: ማይክሮኮየር. Neuropsychopharmacology 35, 27-47 10.1038 / npp.2009.93 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  37. ሲም ሮል, ቺይ ኤይ. TY, Lee HJ, ካንግ ኤዪ, ዮን ኤስ., ጂን ኤም., PL, et al. (2013). ከውጥረት ጋር ተያያዥነት ያላቸው ሱስ የሚያስከትሉ የዲ ፖታመር D2 ተቀባዮች ሚና. ናታል. የጋራ. 4: 1579 10.1038 / ncomms2598 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  38. Smith RJ, Lobo MK, Spencer S., Kalivas PW (2013). በ D1 እና D2 ውስጥ የኮኬን ማስተካከያ ማስተካከያ የአምፑራንስ ነርቮች (አሻንጉሊቶች (ዲኬቲሞም) ቀጥተኛ እና ቀጥተኛ ያልሆኑ መንገዶች ላይ ተመሳሳይ አይደለም). Curr. Opin. ኒዩሮቢያን. 23, 546-552 10.1016 / j.conb.2013.01.026 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  39. Steketee JD, Kalivas PW (2011). ዕፅ በመውሰድ - የባህሪ ማነቃነቅ እና ወደ መድሃኒት መፈለጊያ ባህሪ መጨመር. ፋርማኮል. ራዕይ 63, 348-365 10.1124 / pr.109.001933 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  40. Taverna S., Ilijic E., Surmeier DJ (2008). የፓርኪንሰን በሽታዎች ሞዴሎች ውስጥ በተደጋጋሚ የሚከሰቱ ተለዋዋጭ ወሳኝ የነርቭ ኒውሮንስ ግንኙነቶች ተለዋዋጭ ናቸው. ኒውሮሲሲ. 28, 5504-5512 10.1523 / JNEUROSCI.5493-07.2008 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  41. Taverna S., van Dongen YC, Groenewegen HJ, Pennartz CM (2004). መካከለኛ እርከን የነርቭ ሴል ውስጥ በአክቴል ኒውክሊየስ ጎድጓድ ውስጥ የሚገኙ የሲፓሎጂያዊ ማስረጃዎች ቀጥተኛ ፊዚካዊ ማስረጃ. ኒውሮፊስቶስ. 91, 1111-1121 10.1152 / jn.00892.2003 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  42. ቶማስ ኤምጄ, ካሊቫስ ፖል, ሻሃም ኤ (2008). በሞሊሚቢሚክ dopamine ስርዓት እና የኮኬይ ሱሰኝነት የነርቭ ችግር. BR. ጄ. ፋርማኮል. 154, 327-342 10.1038 / bjp.2008.77 [PMC ነፃ ጽሑፍ] [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  43. Tunstall MJ, Oorschot DE, Kean A., Wicks JR (2002). በአክቴክ ራትሬት (spinner projection neurons) መካከል በአይሮፕላር ነጠብጣብ መካከል ያለ ግንኙነት. ኒውሮፊስቶስ. 88, 1263-1269 10.1152 / jn.00886.2001 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  44. Vanderschuren LJ, Kalivas PW (2000). በዲፔማርጂግ እና በግሉታርጂጂ ስርጭት ውስጥ የመተንተን እና የስነምግባር ማነቃቂያዎች ለውጥ-የቅድመ ክላሲካል ጥናቶች ወሳኝ ግምገማ. ስኪፎርመሪያሎጂ (ቤል) 151, 99-120 10.1007 / s002130000493 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  45. Wilson CJ, Groves PM (1980). የአክቴ ኔኦስትአአምተም የተባለ የጋራ ንጣፍ ነጠብጣብ አሠራር እና የሲናፕቲክስ ትስስር: - የዩኔሪዲስት ፒራሮዳሲስ ውስጠኛ ክፍልን የሚጨምር ጥናት. ጄ. ኮም. ኒውሮል. 194, 599-615 10.1002 / cne.901940308 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]
  • Wise RA (2004). ዶፖሚን, ትምህርት እና ተነሳሽነት. ናታል. ኔቨር ኔቨርስሲ. 5, 483-494 10.1038 / nrn1406 [PubMed] [ማጣቀሻ ማጣቀሻ]