Diabetologia. 2017; 60 (8): 1502-1511.
በኦንላይን የታተመ 2017 May 20. መልስ: 10.1007/s00125-017-4305-4
PMCID: PMC5491592
ቺሳዮ ኮዙካ,1 ታዲሺ ካናሜ።,2 ቺጉሳ ሺሚዙ-ኦቤቤ,3 ቾቲሺ ታካማማ።,3 ማሳato Tsutsui።,4 Masayuki Matsushita,5 ኬኮ አቤ።,6,7 ና ሂሮኪ Masuzaki።
1
ረቂቅ
ዓላማዎች / መላምት።
የአመጋገብ ቅባቶችን መወገድ በሰዎችና በሰው አካል ውስጥ ከመጠን በላይ ውፍረት ያስከትላል። የሰዎችና የወተት ተዋጽኦዎች በቅርቡ የተደረጉ ጥናቶች የአዋቂዎች የአእምሮ ሽልማት ሥርዓትን ከማጥፋት ጋር በተያያዘ ሱስ የመያዝ ሱስን እንደ አልኮሆል ፣ ኒኮቲን እና ናርኮዚኮዝ ሱስን የመያዝ የተለመደ ዘዴ እንዳላቸው አሳይተዋል ፡፡ ከፍተኛ ስብ (አመጋገብ) አመጋገብ (ኤች.አይ.ዲ.) ዲፕamine D2 receptor (D2R) ምልክትን ፣ በአዕምሮ ሽልማት ስርዓት ተቆጣጣሪው ላይ ምልክትን እንደሚጠቁም ተደም heል ፣ በዚህም ምክንያት የሄሞናዊነት መጠጣትን ያስከትላል። ቀደም ሲል ቡናማ-ሩዝ-ነክ ባዮኬሚካዊ አካል የሆነው ኦ-oryzanol በሃይፖታላላም ቁጥጥር በኩል የኤች.አይ.ቪ. ምርጫን እንደመረመረ ቀደም ብለን ሪፖርት አድርገናል ፡፡ ስለሆነም ኦ-ኦርዛንሆል በአዕምሮ ሽልማት ስርዓት ውስጥ የአንጎልን ሽልማት ስርዓት ሊቀይር የሚችልበትን ሁኔታ መርምረናል ፡፡
ዘዴዎች
ወንድ ኤክስ.ኤን.ኤክስXXLL / 57J አይጦች በኤፍኤፍዲ መመገቡ በአፍ በ γ-oryzanol የተያዙ ሲሆን በ D6R ምልክት ማድረጊያ ውስጥ የተሳተፉ ሞለኪውሎች ቁመት ተገመገሙ ፡፡ የ D2R አስተዋዋቂው የዲ ኤን ኤ ውህደት እና የዲስትሪክቱ የስብ ስብስቦች ምርጫዎች ላይ የተደረገው የለውጥ ለውጥ γ-oryzanol ላይ ምርመራ ተደረገ ፡፡ በተጨማሪም ፣ በምግብ ምርጫ ፣ በ D2R የምልክት ምልክት እና በክፍለ-ጊዜው ውስጥ የ DNMTs ደረጃዎች ላይ የዲኤንኤክስኤክስ-ኤክስ-5′-deoxycytidine, የዲ ኤን ኤ methyltransferases (DNMTs) ኃይለኛ ተከላካይ. በ DNMTs እንቅስቃሴ ላይ የ γ-oryzanol መገደብ ተፅእኖ በኢንዛይም ግምገማ ተደረገ ፡፡
ውጤቶች
አይጦች ከኤች.አይ.ዲ. የሚመገቡት ጊዜ ውስጥ የ “D2Rs” ምርት D2R (የ D2R) አስተዋዋቂው አካባቢ የዲ ኤን ኤ ውህደትን በመጨመር ቀንሷል። የ γ-oryzanol የቃል አስተዳደር የ DNMTs ን አገላለፅ እና እንቅስቃሴ ቀንሷል ፣ በዚህም በክፍለ-ጊዜው ውስጥ የ D5Rs ደረጃን ይመልሳል። በ ‹2-aza-XNUMX′-deoxycytidine› ላይ ያለው ዲኤንኤምቲኤፍ ፋርማኮሎጂካል መከልከል ለአመጋገብ ስብም ምርጫን አመጣሽ ያደርገዋል ፡፡ ከእነዚህ ግኝቶች ጋር የተጣጣመ ፣ ኢንዛይም ኢንዛይም ኢንዛይም γ-oryzanol የ DNMTs ን እንቅስቃሴ እንደገታ አሳይቷል ፡፡
መደምደሚያዎች / ትርጓሜ።
የ 'D2R' ማስተዋወቂያ ክልል በአይጦች ሁኔታ ውስጥ γ-oryzanol ameliorates ኤች.ዲ.ኤን. የእኛ የሙከራ ምሳሌ γ-oryzanol እንደ ልብወለድ ልብ ወለድ ንጥረ ነገር አዲስ ልብወለድ ዋና ትኩረትን ያጎላል ፡፡
ኤሌክትሮኒክ ተጨማሪ ማቴሪያሎች
የዚህ ጽሑፍ የመስመር ላይ ሥሪት (doi: 10.1007 / s00125-017-4305-4) በአቻ-የተገመገሙ ግን ያልተፈቀደ ተጨማሪ ቁሳቁስ ይ containsል ፣ እሱም ለተፈቀደላቸው ተጠቃሚዎች ይገኛል።
መግቢያ
ከመጠን በላይ ውፍረት ባለው ግለሰቦች ውስጥ ከመጠን በላይ መጠጣት ከአልኮል ፣ ከኒኮቲን እና ከአደንዛዥ ዕፅ ሱስ ጋር ተያያዥነት ያላቸው የተለመዱ አሠራሮች [1]። እንዲሁም የምግብ ፍላጎት እና የሆርሞን ደንብ ፣ የአንጎል ወሮታ ስርዓት ፣ በተለይም የዶፓሚን ተቀባይ መቀበያ ምልክት ፣ ከሱስ ሱሰኛ ወይም ሄዶኒክኒክ የመመገብ ባህሪ ጋር በቅርብ የተቆራኘ ነው [2]። በአይጦች ውስጥ ከዚህ በፊት የተደረገ ጥናት እንዳሳየው የወሲብ Dopamine D2 ተቀባይ (D2R) በ lentivirus-mediated short hairpin ጣልቃ አር ኤን ኤ በፍጥነት ሱስ ያስከተለ ሱሰኝነትን የመሰለ ሽልማትን ጉድለቶች እና የግዳጅ መሰል የምግብ ፍለጋን [3]። በተቀነሰ የ D2R ድግግሞሽ ምክንያት ፣ የዶርየስ ስተርታም በሰዎች እና በአይጦች ላይ ባሉ ከሰውነት ውስጥ ከሚገኙ ዘንቢል ቁጥጥር ቡድኖች ጋር ሲወዳደር ለምግብ ሽልማት አነስተኛ ምላሽ ይሰጣል [3-5]። በዚህ ፅንሰ-ሀሳብ መሠረት ፣ Taqአይ ANKK1 የዘር ሐረግ (የ DRD2 / ankyrin ድግግሞሽ እና 1 ን የያዘው kin kin ጎራ የሚያሳይ) ፣ በሰው ላይ ካለው ውፍረት ጋር ተያይዞ [6] ፣ ከክብደት ቀዶ ጥገና በኋላ ክብደት መቀነስ የሚያስከትለው ጉዳት ከፍ ካለው የ ‹D2R density› ጋር የተቆራኘ ቢሆንም7]። እነዚህ መረጃዎች የስታቲስቲክ D2R ከመጠን ያለፈ ውፍረት ለማከም እንደ ልብ ወለድ ቴራፒ targetላማ አድርገው በጥብቅ ይጠቁማሉ ፡፡ ሆኖም የአንጎል ሽልማት ስርዓት ላይ የተሠሩ አንዳንድ መድኃኒቶች ከባድ የስነ-አዕምሮ ችግሮችን ጨምሮ ከፍተኛ ጉዳት አስከትለዋል ፣ በመጨረሻም ውሎ አድሮ ክሊኒኮች ለቀው እንዲወጡ ተደርገዋል [8].
የዝግመታዊ ለውጥ ማሻሻያዎች ለእድገትና ልዩነት ልዩ ብቻ አይደሉም ፣ ግን ደግሞ በአመጋገብ እና በአኗኗር ዘይቤም ጨምሮ በአካባቢ ለውጦች ምክንያት ስለሚነሱም [9]። የዲ ኤን ኤ ውህደት የጂን አገላለጽ መረጋጋት ዋነኛው የዝርያ ክስተት ነው [9]። በአይጦች ውስጥ የእናቶች ከፍተኛ የስብ አመጋገብ (ኤች.አይ.ዲ.) የእናቶች ተጋላጭነት በመካከለኛው ማዕከላዊ የሽልማት ሥርዓት ውስጥ ዲ ኤን ኤ ውህደትን ይለውጣል ፣ ኤች.አይ.ዲ.ኤስ በቡኖቹ ላይ ከመጠን በላይ መጠጣት ያስከትላል።10]። በተለይም ፣ የዲ ኤን ኤ methyltransferases (DNMTs) በመመገቢያ ባህሪ እና በአካላዊ እንቅስቃሴ ደንብ ውስጥ ወሳኝ ሚና ይጫወታሉ [10, 11] በመጥቀስ ዲኤንኤምኤቲዎች ከመጠን በላይ ውፍረት – የስኳር ህመም ሲንድሮም ለመያዝ የሚያስችሉ ሕክምናዎችን እንደሚሰጡ ተስፋ ያደርጋሉ ፡፡ እንደ አስፈላጊነቱ ፣ ካፊሊክ አሲድ እና ኤጊጊጋሎተቺን ጨምሮ አንዳንድ የተፈጥሮ ምግብ-ነክ ንጥረነገሮች እንደ ዲ.ኤን.ኤም.ቲ.12, 13].
በቅርቡ ባሳዮ-ቡናማ ሩዝ-ተኮር አካል γ-oryzanol ፣ የ ferulic acid ester እና በርካታ የፊዚስተሮቶች ድብልቅ ፣ በሃይፖታላሚክ endoplasmic reticulum (ER) ውጥረትን በመቀነስ የአመጋገብ ስብን ምርጫ እንደሚቀንስ በቅርቡ አሳይተናል።14]። አይጦች እና ጥንቸሎች ውስጥ ፣ በአፍ የሚመራው ኦር-ኦኒዛኖል በፍጥነት ከሆድ አንጀት ውስጥ ተወስዶ በዋነኝነት ወደ አንጎል ተሰራጭቷል [15, 16]። እነዚህን ግኝቶች አንድ ላይ በመሰብሰብ በማዕከላዊው የነርቭ ሥርዓት ላይ የሚሰሩ ተፈጥሯዊ-ተፈጥሯዊ ምርቶች ከመጠን በላይ ውፍረት ያለው የአመጋገብ ሁኔታ ባህሪይ ጤናማ አማራጭ ሊሆኑ ይችላሉ ፡፡ በዚህ ዐውደ-ጽሑፍ እኛ ኦ-oryzanol በአንጎል ሽልማት ስርዓት ውስጥ የዲ ኤን ኤ ውህደት ሁኔታን ይቀይረዋል የሚል መላምት ሞክረናል ፣ በዚህም አይጦች ውስጥ የኤች.ዲ.ኤፍ.
ዘዴዎች
እንስሳት
ከቻርልስ ወንዝ ላቦራቶሪዎች ከጃፓን (ካናጋዋ ፣ ጃፓን) የተገኘ የሰባት ሳምንት ዕድሜ ያላቸው ወንድ C57BL / 6J አይጦች በተወሰኑ-በሽታ አምጪ-ነፃ ሁኔታዎች ውስጥ በ 3 ሰከንድ በ 4 ሰዓት / 24 ሰዓት መብራት / ጨለማ ዑደት. ከሳምንት ጋር ከተለማመዱ በኋላ የ 12 ሳምንት ዕድሜ ያላቸው አይጦች ክብደታቸው የተስተካከለ እና እያንዳንዱን ሙከራ ለማካሄድ በሁለት ወይም በሦስት ቡድን ተከፍለዋል ፡፡ አይጦቹ ምግብና ውሃ በነፃ እንዲያገኙ ተፈቅዶላቸዋል ፡፡ ሁሉም የእንስሳት ሙከራዎች በሪኩዩስ ዩኒቨርሲቲ የእንስሳት ሙከራ ሥነ ምግባር ኮሚቴ (ቁጥር 12 ፣ 8 እና 5352) ፀድቀዋል ፡፡
የ γ-oryzanol እና 5-aza-2′-deoxycytidine አስተዳደር
የኤችኤችዲድ ምርጫን ለመገምገም ፣ γ-oryzanol (ዋኮ ንፁህ ኬሚካል ኢንዱስትሪዎች ፣ ኦስካ ፣ ጃፓን) ቀደም ሲል እንደተገለፀው በምግብ ምርጫ ሙከራ ወቅት ለኤክስ -XX-ሳምንት-አመት አይጦች በምስጢር እንዲተዳደር ተደርጓል ፡፡14, 17]። ለሌሎቹ ሙከራዎች 12079% γ-oryzanol ን የያዘው ኤችዲኤፍዲ (D0.4B ፣ የምርምር ምግቦች ፣ ኒው ብሩንስዊክ ፣ ኤንጄ ፣ ዩኤስኤ) እንደ ንጣፍ ሆኖ የተሠራ ነበር ፡፡ የአመጋገብ አካላት በኤሌክትሮኒክ ተጨማሪ ቁሳቁሶች (ኢ.ኤም.ኤም) ሠንጠረዥ ውስጥ ይታያሉ ፡፡ 1. ከ 12 ሳምንታት መመገብ በኋላ ቲሹ ከስትሮቱም እና ከ ‹ሃይፖታላመስ› ተሰብስቧል ፡፡ ከአይጦቹ አማካይ ምግብ መመገብ የሚገመት የ γ-oryzanol ዕለታዊ መጠን በግምት 320 μ ግ / ግ የሰውነት ክብደት ነበር ፡፡ የ γ-oryzanol መጠን ቀደም ሲል እንደተገለጸው ተወስኗል [14]. ባለ 5-aza-2′-deoxycytidine (5-aza-dC ፣ ሲግማ-አልድሪች ፣ ሴንት ሉዊስ ፣ ኤምኤ ፣ ዩኤስኤ) በሳምንት ሦስት ጊዜ ለ 0.25 ሳምንታት በመርፌ (በ 12 μ ግ / ግ የሰውነት ክብደት) ተተክሏል [18].
ለምግብ ስብ ምርጫ ምርጫ መገመት ፡፡
ስለ አመጋገብ ስብ ምርጫዎችን ለመገምገም ፣ የምግብ ሙከራዎች ከዚህ በፊት እንደተገለፀው በቾ እና ኤች ኤችዲዲ (D12450B እና D12451; የምርምር አመጋገቦች) መካከል ምርጫን አቅርበዋል ፡፡14]። የአመጋገብ አካላት በ ESM ሠንጠረዥ ውስጥ ይታያሉ ፡፡ 1. በአጭሩ አይጦቹ ለ chow እና ለ HFD ነፃ መዳረሻ እንዲኖራቸው ተፈቅዶላቸዋል ፡፡ የቾው እና የኤች.አይ.ዲ. መመጠጫዎች በየሳምንቱ ይለካሉ እና ለአመጋገብ ስብ ምርጫ ምርጫ ለውጦች ተንትነዋል ፡፡ የኤችኤፍ ዲ ዲ ምርጫ በቀመር መሠረት ይሰላል-HFD preference = [(HFD ቅበላ / አጠቃላይ የምግብ ቅበላ) × 100]።
ለዲ ኤን ኤ ማቲሚዚየም የቢሚፋፋ ቅደም ተከተል።
ዲ ኤን ኤ ዲኔሳይስ የደም እና ቲሹ ኪት (QIAGEN ፣ ቶኪዮ ፣ ጃፓን) በመጠቀም ተጣራ ፡፡ የዲ ኤን ኤ መፍትሄው አዲስ ከተዘጋጀው 3 ሞል / ሊ ናኦኤች ጋር ተቀላቅሎ በ 37 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ውስጥ ለ 15 ደቂቃ ተጨምሮ ወደ 5.3 ሞል / ሊ ዩሪያ ፣ 1.7 ሞል / ሊ ሶዲየም ቢሱልፋት እና 4.9 ሚሜል / ሊ ሃይድሮኪንኖን ተጨምሮበታል ፡፡ መፍትሄው ለ 15 ሰከንድ በ 95 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ በ 30 ዲግሪ የደም መርጋት እና ለ 50 ደቂቃ በ 15 ዲግሪ ሴንቲ ግሬድ ታክሏል [19]። በቢሱፋይት የታከመው ዲ ኤን ኤ MinElute PCR ንፅፅር መሣሪያን (QIAGEN) በመጠቀም ተጸድቷል እና በፒ.ፒ.አር. የ KAPA HiFi HotStart Uracil + ReadyMix PCR Kit (KAPA ባዮስካል ሲስተምስ ፣ ወወልድ ፣ ኤምኤ ፣ ዩኤስኤ) እና የ D2R ማስተዋወቂያ ክልል ባለው የ CpG ጣቢያ አካባቢ ፕሪሚየሮች ተሻሽሏል ፡፡ . የቀዳሚዎቹ ቅደም ተከተሎች እንደሚከተለው ነበሩ-ማስተላለፍ ፕሪመር ፣ 5′-GTAAGAATTGGTTGGTTGGAGTTAAAA-3 ′; ተቃራኒ ፕራይመር ፣ 5′-ACCCTACCCTCTAAAACCACAACTAC-3 ′። ቀጥሎም ፣ አስማሚ ቅደም ተከተሎች በአ Aንስተርተር ኤኤምፒአይፒ XP በመጠቀም (ቤክማን ኮልተር ፣ ብሮን ፣ ሲኤ ፣ ዩኤስኤ) በመጠቀም ተጨምረው ተፀዱ ፡፡ ናሙናው በአምራቹ ፕሮቶኮል መሠረት ቅደም ተከተል ለማስያዝ ናሙናዎች በ GS Junior (Roche ዲያግኖስቲክስ ፣ ቶኪዮ ፣ ጃፓን) ላይ ተጭነው ተጭነዋል ፡፡ የማይክሮሚዝ መጠን በሁሉም የሳይቶሺያ ቅሪቶች ውስጥ methylated ሳይቶሲየስ መቶኛ ይገለጻል።
የ DNMT እንቅስቃሴ ማረጋገጫ።
የዲኤንኤምኤንቲ የኢንዛይም እንቅስቃሴ እንቅስቃሴ ግምገማ የተከናወነው በአምራቹ ፕሮቶኮሎች መሠረት በ EpiQuik ዲ ኤን ኤ ሜቲይተርፍፍፍፍ እንቅስቃሴ / ኢንጂንግ አሴይ ኪት (ኤፒጂentek ቡድን ፣ ብሩክሊን ፣ ዩኤስኤ) እና የኢ.ሲ.ጂ.ሲ.የኢንጂኔሽን መተትያ ኪሳ (ሲሲዮ ጃፓን ፣ ቺባ ፣ ጃፓን) በመጠቀም ነው ፡፡
በዲ ኤን ኤ methylation ላይ የእያንዳንዱ ግቢ የመከላከል እንቅስቃሴን ለመገምገም S-adenosyl-l-homocysteine (SAH) የሚለካው በእያንዳንዱ ግቢ ውስጥ (ምርመራዎችን ለማጣራት 20 μ ሞል / ሊ) ፣ S-adenosyl methionine (SAM; 10 μmol / l) እና DNMT substrate (4 ng / μl) በ 37 ° ሴ ለ 90 ደቂቃዎች ፡፡ ማይክል-ሜንተን ኪነቲክስን ለመገምገም DNMT1 (20 μ ሞል / ሊ) በ γ-oryzanol ፣ SAM (5 μmol / l) እና በተጠቀሰው የፖሊ ዲአይ-ዲሲ መጠን በ 37 ° ሴ ለ 90 ደቂቃዎች ታጥቧል ፡፡ DNMT3a (100 μmol / l) እና DNMT3b (100 μmol / l) በ γ-oryzanol ፣ SAM (5 μmol / l) እና በተጠቀሰው የ poly dG · dC መጠን በ 37 ደቂቃ በ 120 ደቂቃ ታጥቀዋል ፡፡ ምርመራዎቹ በአራት እጥፍ ተከናውነዋል ፡፡ የተጣራ ፕሮቲን (0.75 mg / ml) በሳም (5 μ ሞል / ሊ) ፣ ፖሊ ዲአይ-ዲሲ (5 μ ግ / ml) ፣ እና ፖሊ dG · dC (5 μ ግ / ml) በ 40 ደቂቃ በ 120 ደቂቃ ታክሏል ፣ እና የ SAH አሠራር ተለካ ፡፡
ከኤስትሮጂን ጋር የተገናኘ ተቀባይ-γ የእንቅስቃሴ ማረጋገጫ።
በኢስትሮጂን ጋር በተዛመደ ተቀባይ-γ (ERRγ) ላይ ‹γ-oryzanol› እምቅ ተቃዋሚ እንቅስቃሴ በሰው አምራች ፕሮቶኮል መሠረት በሰው ኢስትሮጂን-ተዛማጅ ተቀባይ ጋማ ሪፖርተር አሰይ ሲስተም (አይንዶጎ ባዮሳይንስ ፣ ስቴት ኮሌጅ ፣ ፒኤ ፣ አሜሪካ) ተገምግሟል ፡፡ በአጭሩ የሰው-አጥቢ እንስሳት ዘጋቢ ህዋሳት ገባሪ ኢአርአርኤን በተከታታይ የሚገልፁት በእያንዳንዱ ቅጥር ግቢ ለ 24 ሰዓታት በተገለፀው መጠን ተጋላጭ ሆነዋል ፡፡
የምዕራባው ቦምብ
ይህ ቀደም ሲል እንደተገለፀው [20] ከ D2R (1 500 ፣ ጥንቸል) ፣ ከዶፓሚን አጓጓዥ (DAT ፣ 1 500 ፣ ጥንቸል) ፣ ፀረ ታይሮሲን ሃይድሮክሳይስ (TH; 1: 1000, ጥንቸል) (AB5084P, AB1591P እና AB152, Merck Millipore, Billerica, MA, ዩ ኤስ ኤ) ፣ የምልክት አስተላላፊ እና የ ‹3cription (STAT3α ፣ 1: 1000 ፣ ጥንቸል) ፣ DNMT1 (1: 1000 ፣ ጥንቸል) ፣ DNMT3a (1 1000 ፣ ጥንቸል) (ቁጥር 8768 ፣ 5032 እና 3598 ፣ የሕዋስ ምልክት ቴክኖሎጂ ፣ ቶኪዮ ፣ ጃፓን) ፣ DNMT3b (1 μg / ml ፣ ጥንቸል) ፣ ERRγ (1: 1000, ጥንቸል) እና β-actin (1: 10,000, አይጥ) (ab16049, ab128930 and ab6276; Abcam, Cambridge, MA, USA).
በቁጥር የእውነተኛ ጊዜ PCR።
የጂን አገላለጽ አገላለፅ ቀደም ሲል እንደተገለፀው ተመረመረ [14]. mRNA ደረጃዎች በተለምዶ ለ Rn18 ሴ (18S rRNA). ለቁጥር የእውነተኛ ጊዜ PCR ትንተናዎች ያገለገሉት የዋና ዋና ስብስቦች በ ESM ሰንጠረዥ ውስጥ ተዘርዝረዋል። 2.
ስታትስቲክስ ትንታኔ
መረጃዎች እንደ አማካይ are SEM ይገለፃሉ። ባለአንድ አቅጣጫ ANOVA እና ተደጋጋሚ መለኪያዎች ANOVA እና ከዚያ በኋላ በርካታ የንፅፅር ሙከራዎች (የቦንፈርሮኒ-ዱን ዘዴ) በሚተገበሩበት ቦታ ጥቅም ላይ ውለዋል ፡፡ የተማሪ t ሙከራው በሁለት ቡድኖች መካከል ያለውን ልዩነት ለመተንተን ጥቅም ላይ ውሏል. ልዩነቶች በ ጉልህ ተደርገው ይወሰዳሉ በ p <0.05.
ውጤቶች
በኤክስኤንኤክስኤክስ-አሃ-ዲሲ ፋርማኮሎጂካል ኬሚካሎች በአይጦች ውስጥ ለምግብ ስብ የሚፈለጉትን ይመክራሉ
አይጦች ኤችኤችዲዲን በሚመግብበት ጊዜ በ ‹D2R› ማስተዋወቂያ ክልል ውስጥ ያለው የዲ ኤን ኤ ውህደት በዶሮ ከሚመግብ የአመጋገብ ስርዓት ጋር ሲነፃፀር በከፍተኛ ደረጃ አድጓል ፡፡ (ምስል. 1a) .1ሀ). በሌላ በኩል ፣ በ D2R በሚተዋወቀው ደጋፊ ክልል ውስጥ hypothalamic ዲ ኤን ኤ ማቲኢዚሽን በሾላ አመጋገብ ስር ከሚታየው ከፍ ያለ ይመስላል (p <0.01) (ምስል (ምስል 1a, 1ሀ ፣ ረ) እና በኤች.ኤስ.ዲ.ዲ. አልተቀየረም (ምስል. (ምስል. 1f) .1ረ). አይጦች ኤች.አይ.ዲ. በተመገቡበት ጊዜ በ ‹D2R›› ውስጥ ባለው የከፍተኛው የ D5R ማስተዋወቂያ ክልል ውስጥ ያለው የዲ ኤን ኤ ውህደት በተመጣጠነ የዲኤምኤም.ት. (ምስል. 1a) .1ሀ). በተቃራኒው ፣ በኤች አይቲኤምኤምኤስ ውስጥ ባለው የ D2R ማስተዋወቂያ ክልል ውስጥ ያለው የዲ ኤን ኤ ውህደት በ 5-aza-dC (ምስል 1) ሕክምናው በእጅጉ አልተቀየረም። (ምስል. 1f) .1ረ) በ 20 ሳምንት ዕድሜ ላይ ባሉ ወንዶች አይጦች ኤች ኤፍ ዲ ዲን ለ 12 ሳምንታት ሲመገቡ ኤም አር ኤን ኤ እና የፕሮቲን መጠን D2R በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል (ምስል XNUMX) ፡፡ (ምስል.1b, 1b, k, l). በተቃራኒው ፣ የዶፓሚን D1 ተቀባዮች (D1Rs) የተቀመጠ በ ፣ በ Drd1) ፣ በ adenylyl cyclase እና በ CAMP-medira intracellular ምልክታዊ ምልክት ላይ ወደ D2Rs ተቃራኒ የሆነ እርምጃ የሚወስደው (ምስል 1) ፡፡ (ምስል. 1c) .1ሐ). በተጨማሪም ፣ ከ ‹D2R› ምልክት ማድረጊያ ጋር የተዛመዱ ሌሎች ሞለኪውሎች ደረጃ በ‹ ኤምአርኤ ›እና / ወይም በፕሮቲን ደረጃ (ምስል) ላይ ለውጥ የለም ፡፡ (ምስል.1d, 1d ፣ ኢ ፣ ኬ ፣ ሜ)። በሌላ በኩል hypothalamus ላይ በግልጽ የሚታዩ ለውጦች አልተታዩም ፣ D2R (ምስል ፡፡ (ምስል. 1g – ሜ) .1g – m) በተለይም ፣ የፕሮቲን ደረጃዎች D2R እና TH በሃይፖታላምየስ ውስጥ ከሚገኙት እጅግ በጣም ዝቅተኛ ናቸው (ምስል. (ምስል.1l, 1l ፣ ሜ)በአንጎል ሽልማት ስርዓት ውስጥ የዶፓምሚን ተቀባይ ተቀባይ ምልክት አንፃራዊ ጠቀሜታ የሚያንፀባርቅ ሊሆን ይችላል ፡፡
በ D2R ውስጥ በአስተዋዋቂው የዲ ኤን ኤ ውህደት በአመጋገብ ስብ ውስጥ ያለውን ምርጫ ይለውጥ እንደሆነ ለመመርመር የ 5-aza-dC- የታመሙ አይጦች አመጋገብ ባህሪ ተተነተነ ፡፡ እንደተጠበቀው ፣ የኤክስኤምኤክስX-aza-dC በኤች.አይ.ዲ. አመጋገቢ አይጦች (ምስል ምስል) ውስጥ ለ ‹D5R› የፕሮቲን ደረጃ ለ D2R በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል ፡፡ (ምስል.1b, 1b, k, l). በሌላ በኩል ግን, በደረጃዎች ምንም ውጤት አልነበራቸውም Drd1, Th ና Slc6a3 (በ DAT ኮድ ማስመሰል) በክፍለ-ጊዜው ውስጥ ፣ ወይም በ ደረጃዎች። Drd2, Drd1, Th ና Slc6a3 hypothalamus ውስጥ (ምስል. (ምስል. 1c – e, 1)c - e, g – m). በተሽከርካሪ ሕክምና የሚደረግላቸው አይጦች ኤች.አይ.ዲ.ን የሚመርጡ ቢሆኑም ለኤች.አይ.ዲ. ተመራጭነት በ 5-aza-dC- የታከለው አይጦች (በተሽከርካሪ አያያዝ አይጦች ውስጥ የ 88% እሴቶች) በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። (ምስል. 1n) .1n). ስለሆነም በ 5-aza-dC የሚደረግ ሕክምና በሰውነት ክብደት ውስጥ የሚገኘውን ትርፍ ቀንሷል (ምስል. (ምስል. 11)o) ፡፡
γ-oryzanol በኤች.አይ.ዲ.-በተመረቱ አይጦች ውስጥ የ DNMTs ደረጃን ቀንሷል።
ቀደም ሲል እንደዘገበው [14] ፣ የ “oryzanol” የቃል አስተዳደር በአወንታዊ የወንዶች አይጥ በመመደብ የ HFD (በ xNUMX% በመኪና-አያያዝ እሴቶች) ምርጫን በእጅጉ አሳክቷል (ምስል) ፡፡ (ምስል. 2a), 2ሀ) ፣ የሰውነት ክብደት መጨመር በግልጽ እንዲታይ ምክንያት ሆኗል (ምስል. (ምስል. 2b) .2ለ). ስለሆነም የ “or-oryzanol” እምቅነት በ ‹ኤክስ-ኦይዛንኖል› ኤፒአይዲኔሽን ሞዲዩሽን ላይ በፍተሻው ውስጥ ገምግመናል ፡፡
በአጥቢ እንስሳት ውስጥ ሦስት ዋና DNMTs-DNMT1, 3a እና 3b አሉ. የዲ ኤን ኤም ቲክስNUMX ተግባራት የዲ ኤን ኤ ሚቲየሌሽን ለመቆጠብ, DNMT1a እና 3b ደግሞ አዲስ የዲ ኤን ኤ መቲኢሌት እንዲጠቀሙ በማገዝ ረገድ ሚና አላቸው [21]. ጂ-ኦሮዛኖልን በ DNMT ዎች ላይ ሊያስከትል የሚችለውን ተፅእኖ ለመቃኘት በ vivo ውስጥ በ HFD-fed mice አኖዎች ላይ የ DNMT ደረጃዎችን ገምግመናል. በኤችአይኤድ ዲ ኤን ኤ ውስጥ በዲ ኤን ኤ ቲ ኤም ኤ እና በፕሮቲን እጢዎች ላይ ምንም ተጽእኖ የማያስከትል ቢሆንም γ-ኦያዛኖል በተባበረ የዲ ኤን ኤ ቲ ቲ ኤም ኤ የሚዛመቱ የዲ ኤን ኤ ቲ ቲ ቲ ቲ ኤም ቲዎች መጠን በጣም ዝቅተኛ በሆነ መጠን ግን በሂትለቱም (Fig. (ምስል. 2c – e, 2)c-e, g-i, k-n). ይህ መረጃ γ-ኦሺዛኖል በዲ ኤን ኤ ቲ ኤም ኤ ደረጃዎች ላይ በንፁህ-ነክ በሆነ መንገድ ሊቆጣጠራል. በተመሳሳይ ሁኔታ, 5-aza-dC የ mNNAMT3a እና 3b የኤችአርኤን መጠን በሬቲሞም (ESM Fig. 1a-d).
ቀደም ብሎ በተደረገው ጥናት መሠረት የ DNMT1 ኤኤንአርኤኤን በከፍተኛ ደረጃ ቁጥጥር የተደረገበት, በከፊል በኑክሌር ተቀባይ ተቀባይ ERRγ [22] ላይ, የ ER-R-ጀን እንቅስቃሴ የ ጂ-ኦያዛኖል ሊያስከትል የሚችለውን ውጤት መርምረናል. በተፈጥሮ ውስጥ የሌላቸው የአጥቢ እንስሳት ህዋሳት (ኤረር), የ XRXX-hydroxy tamoxifen, ኃይለኛ የ "ERRγ" ተለዋዋጭ አበረታች, የ ERRγ እንቅስቃሴ በከፍተኛ ደረጃ ቀንሷል. ልብ ይበሉ, γ-ኦሺዛኖል በከፊል የ ERRγ እንቅስቃሴ (በግምት በቀን ውስጥ የ xNUMX% ቅናሽ) (Fig. (ምስል. 3a) .3ሀ). ከሁሉም በላይ ERRγ በጣም በተገለፀው ውስጥ በተገለፀው ውስጥ እንጂ በታተሙት ውስጥ አልነበረም (Fig. (ምስል.3b-d) .3b-d). የሬቲሞም ሁኔታ በተቃራኒ γ-ኦይዛዛኖል ከፍተኛ መጠን ያለው የዲ ኤን ኤም ቱንክስን መጠን በከፍተኛ ፍጥነት ያሻሽላል (Fig. (ምስል.2k, 2k, l). እነዚህ ውጤቶች ቢያንስ ቢያንስ በከፊል, STAT3α, የ DNMT1 አዎንታዊ ተቆጣጣሪ [23], በሂማሃውስ (ሰፓዮላመስ) ውስጥ በብዛት የተገለፀ ቢሆንም በሬቲቱም (Fig. (ምስል. 33)e-g).
የጂ-ኦያዛኖልን የዲ ኤን ኤ ቲ ኤም ስርአቶች በቪቪኦ እንቅስቃሴ ላይ በበለጠ ለመገምገም የዲ ኤን ኤ ሚቲዚየሽን የተባእት ፕሮቲን እና የ DNMT ዎች ጠንካራ ተፅዕኖ ፈጣሪዎች, HHF በተመገበው የጂኦ-ኦይዛኖል ተሸካሚ ፍጥረታት ላይ ተመርምሮ ተገኝቷል. በ HFD-fed and chow-fed types (Hs. (ምስል.2f, 2f, j). በእርግጠኝነት ጂ-ኦይዛዛኖል በአሳታፊው ሳተላይት (SAH) ላይ ቅነሳ ይቀንሳል (Fig. (ምስል.2f) 2f) ነገር ግን በሂማሃውስ (Fig. (Fig.2j), 2j), ይህም ጂ-ኦይዛዛኖል የዲ ኤን ኤ ቲ ኤም ምርመራ እንቅስቃሴ በ HFD-fed mice ውስጥ በተፈለገው መልኩ ተወስኖ እንዲቆይ ሊያደርግ ይችላል.
በዲ ኤን ኤ ቲ ኤም ውስጥ ጂ-ኦያዛኖል ውስጥ ያሉ ዊዝሆልኖል የተባይ መቆጣጠሪያዎችን ኢንትራቲክ ትንታኔዎች
በመቀጠሌ የ ጂ-ኦረዛኖሌን በዲኤንአርሲዎች ሊይ በሚሠራው እንቅስቃሴ ቫሮይሮ ውስጥ ተፅእኖ ተደረገ. የጂ-ኦያዛኖል, የሮሊሊክ አሲድ, የ 5-aza-dC, ሆሎፒሪሮል (ተወካይ D2R ጠለፋ), ኳን ፔሮሌል (ተወካይ D2R አርቶኒስት) እና ሳትኤን ከ DNMT ዎች ላይ ተፅዕኖ ይደረግባቸዋል. እንደ አዎንታዊ ቁጥጥር, የአቅጣጫ ጠቋሚው (አክሽን) በአክቲቭ ጥገኛ (DTMT) ተግባራት ላይ እጅግ ተፅዕኖ አሳድሯል. (Fig.4a-f) .4a-f). እንደሚጠበቀው, Halfopididol እና Quinpirole በ DNMTs (ESM Fig. 2). በርግጥ, ጂ-ኦይዛዛኖል የ DNMT1 እንቅስቃሴዎችን (አይ.ሲ.50 = 3.2 μ ሞል / ሊ) ፣ 3 ሀ (አይሲ50 = 22.3 ol ሞል / ሊ) እና 3 ለ (ከፍተኛው መከልከል 57%) (ምስል XNUMX) (Fig.4d-f) .4d-f). በተቃራኒው የፕሮቲን አሲድ (ፉርሊክ አሲድ) እንቅስቃሴ, የጂ-ኦሺያኖል ሜታሎላይት (ጂ-ኦያዛኖል) ሜጋኖልት ከግ-ዖ-ኦያዛኖል (Fig. (ምስል. 44)d-f).
በ DNMTs ላይ የ γ-ኦሺዛኖል መቆጣጠሪያ ባህሪያትን በተጨማሪ መርምረናል. በዲ ኤንአርኤች ውስጥ በ ጂ-ኦሺያኖል ላይ የ γ-ኦሺያኖሽን መቆራረጥን ለመገምገም የ SAH ማዋቀር ይለካ ነበር. በዲ ኤን ኤም-ተማራጭ የዲ ኤን ኤ መቲኢይሽን ውስጥ ስለ ሳህኤን ውህደት የተቀመጠው መረጃ ማይክል-ሜየንነሲን (ጂ-ኦሺንኖል) ለመገኘት እና አለመኖር (Fig. (Fig.4g-i) .4g-i). በ DNMT1-mediated የዲ ኤን ኤ መቲሚየን (ሜኤሚዬቲቭ) ውስጥ, የዲጂ-ሆፍስ-ትንተና-γ-ኦሺዛኖል በ V ከፍተኛ የ SAH ምስረታ (ተሽከርካሪ ፣ 597 pmol / ደቂቃ ፣ γ-oryzanol 2 μmol / l, 619 pmol / min; γ-oryzanol 20 μmol / l, 608 pmol / min) ፣ γ-oryzanol ምናልባት የጨመረው K m (ተሽከርካሪ ፣ 0.47 μ ግ / ml ፣ γ-oryzanol 2 μ ሞል / ሊ ፣ 0.67 μ ግ / ml ፣ γ-oryzanol 20 μmol / l ፣ 0.89 μg / ml) (ምስል (ምስል.4j) .4j). እነዚህ ውጤቶች γ-ኦሺዛኖል በአንዱነት በተወሰነ ውድድር DNMT1 ን ያግዱታል. በሌላ በኩል, ለዲኤንኤቲኤክስቲክስ- እና የ 3b- ሚዲያን የዲ ኤን ኤ መቲኢሌት, ጂ-ኦሺያኖል ጎድ V ከፍተኛ የ SAH ምስረታ (DNMT3a: ተሽከርካሪ, 85.3 pmol / ደቂቃ; γ-oryzanol 2 μmol / l, 63.1 pmol / ደቂቃ; γ-oryzanol 20 μmol / l, 42.5 pmol / min; DNMT3b: ተሽከርካሪ, 42.3 pmol / ደቂቃ; γ -oryzanol 2 μmol / l; 28.0 pmol / ደቂቃ, γ-oryzanol 20 μmol / l, 15.0 pmol / ደቂቃ) እና በተመሳሳይ K m ለዚህ ምላሽ (DNMT3a: ተሽከርካሪ, 0.0086 μg / ml; γ-oryzanol 2 μmol / l, 0.0080 μg / ml; γ-oryzanol 20 μmol / l, 0.0058 μg / ml; DNMT3b: ተሽከርካሪ, 0.0122 μg / ml; γ- ኦሪዛኖል 2 μ ሞል / ሊ ፣ 0.0097 μg / ml ፣ γ-oryzanol 20 μ ሞል / ሊ ፣ 0.0060 μg / ml) (ምስል XNUMX) (ምስል.4k, 4k, l). እነዚህ ውጤቶች γ-ኦሺዛኖል DNMT3a እና 3b ን ቢያንስ በአንፃራዊ መልኩ አግባብ የሌለው በሆነ መንገድ ያግዱታል.
γ-oryzanol በኤች.አይ.ዲ.-በተመረቱ አይጦች ውስጥ የ D2R ደረጃን ይጨምራል።
ቀጥሎም γ-oryzanol የዲኤንኤንኤቲኤዎችን ማዕከላትን በመጨመር የግድግዳ D2R ይዘትን ሊጨምር የሚችልበትን አጋጣሚ ፈትንነው ፡፡ በኤችኤፍዲ-አመጋገብ አይጦች ውስጥ ፣ የ “oryzanol” የአፍ አስተዳደር በ D2Rs አስተዋዋቂው ክልል ውስጥ የቃል ዲ ኤን ኤ ውህደት በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል ፡፡ (ምስል. 5a), 5ሀ) ፣ በሃይፖታላምየስ (ይህን ምስል) አላደረገም (ምስል. (ምስል. 5f) .5ረ). በእነዚህ ግኝቶች መሠረት mRNA እና D2R የፕሮቲን ደረጃዎች በተገቢው ሁኔታ ጨምረዋል (ምስል. (ምስል.5b, 5b, g, k, l). ከ 5-aza-dC (ምስል ጋር በሕክምናው ላይ ካለው መረጃ ጋር ተመሳሳይ) ፡፡ (ምስል.1), 1) በ አር ኤን ኤ እና በፕሮቲን ደረጃዎች ላይ ምንም ተጨባጭ ተፅእኖዎች አልነበሩም ፡፡ Drd1, Th ና Slc6a3 (DAT) በደረጃው ውስጥ ፣ እና በደረጃዎች ላይ ምንም ተጽዕኖ የለም። Drd1, Th ና Slc6a3 hypothalamus ውስጥ (ምስል. (ምስል. 5c – e, 5)c-e, h-k, m).
የቀደሙት ጥናቶች እንደሚያሳዩት የ D2R እና DNMT1 ደረጃዎች ቢያንስ በከፊል በ NF-κB በኩል በኤር ጭንቀቶች እና እብጠት የተስተካከሉ ናቸው [17, 24, 25]. ስለሆነም ከጭንቀት ጋር ተያያዥነት ያላቸውን እና ከማስታገስ ጋር የተዛመዱ ጂኖችን ደረጃ መርምረናል ፡፡ ቀድሞ እንደታየው [26], የ HFD ቴኒኤፍ-α (ኮርፖሬሽን)ታንፋ), ሞሎይቼ ኬሚካዊቲን ፕሮቲን-1 (MCP-1) (Ccl2) ፣ C / EBP ተመሳሳይ ፕሮቲን (ጩፕ), ER-localized DnaJ4 (ERdj4) (Dnajb9) እና በተሰነጠቀ የ ‹X-box ማሰር ፕሮቲን 1› ውስጥ የተረጨ ቅጽ ()Xbp1 ሴ) በሃይፖታላላም ውስጥ ግን በስታቲሞም ውስጥ አይደለም (ምስል. (ምስል.6) .6). በተለይም የኤፍኤፍዲን ከኦ-oryzanol ጋር መደመር የተጠናከረውን መግለጫ አገላለጽ በእጅጉ ቀንሷል ፡፡ Ccl2, ጩፕ, Dnajb9 ና Xbp1 ሴ በቀጥታ በሃይፖታላም ውስጥ ግን በስታቲሞም ውስጥ አይደለም (ምስል. (ምስል. 66)).
ዉይይት
በዚህ ጥናት ውስጥ ዋነኛው ግኝት γ-ኦሺዛኖል በአክስትሮቴራዎች ላይ ከፍተኛ ኃይል ያለው የ DNMT አንቲፊኬሽን ሆኖ ሲያገለግል, ቢያንስ ቢያንስ በከፊል የዲ ኤን ኤኤም ዲ (ኤች ኤፍዲ) በኤፒቬንሲክ ማወዛወዝ በ D2R መለዋወጥ. ከኤች.ዲ.ዲ. አመጋገቢ አይጦች ውስጥ የ D2R ደረጃዎች በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሰዋል ፣ የ D1R ፣ TH እና DAT ግን አልተቀየሩም (ምስል. (ምስል xNUMXb – e ፣ 1)b-e, k-m). እነዚህ መረጃዎች በአፈ-ወበድ ላይ በሚታወቀው የምግብ ሽልማት ላይ ወሳኝ ሚና የሚጫወቱት ወሳኝ ሚና ሲጫወቱ, ወፍራም እፅዋት በእብድ ወሲባዊ ፈውስ (ሄች ኤፍዲ) ላይ ከፍተኛ ጫና እንደሚያሳዩ ከሚታወቀው አስተሳሰብ ጋር የሚስማማ ነው.3]. አሁን ባለው ጥናት ፣ በኤች.አይ.ዲ.-መመገብ አይጦች ከ ‹5-aza-dC› ን በከፍተኛ ደረጃ የጨመረው የ ‹XXXXRR› (ምስል) ፡፡ (ምስል.1b, 1b, k, l) ምናልባት በ D2R አስተዋዋቂው ክልል ውስጥ ባለው የዲ ኤን ኤ ውህደት ደረጃ መቀነስ (ምስል) ፡፡ (ምስል. 1a), 1ሀ) እና በዚህም ምክንያት የአመጋገብ ስብን ምርጫ እንደ ቀነሰ (ምስል. (ምስል. 1n) .1n). በኤችኤችዲኤፍ ላይ በሚሆኑበት ጊዜ ይህ ግኝት የምግብ ሽልማት ግንዛቤን በተመለከተ የስታቲክስ D2Rs ወሳኝ ሚና ይደግፋል ፡፡
የእኛ የብልት ማበረታቻ ማሳያ የ “or-oryzanol ን በ DNMTs ላይ ያለው የመከላከል እንቅስቃሴ ከሜታቦሊክ ተፈራቂ አሲድ ይልቅ ጠንካራ ነበር (ምስል) ፡፡ (ምስል. 4d – ረ) ፣ 4።d-f) የ ‹ኦ-oryzanol› አጠቃላይ አወቃቀር በ ‹ዲኤምኤምኤዎች› ላይ ላለው የመገደብ እርምጃ አስፈላጊነት በመጠቆም ፡፡ በ HFD-fed ድካም ውስጥ, ጂ-ኦሪዛኖል በአጠቃላይ በአጠቃላይ በአጠቃላይ የዲ ኤን ኤ ቲ ኤም ቲጂን (ዲ ኤን ኤም ቲ) ውስጥ የተካተቱትን ደረጃዎች እና እንቅስቃሴዎች ይቀንሳል. D2R በፓኬታሙ. ከዚህም በላይ የቪክቶሪያ ጥናቶቻችን የ γ-ኦሺዛኖል ለኤንጂኤምኤም (ኤረሪ) በተቃራኒው ለኤንኤችኤምኤምኤክስ (DNMT1) ምርት አወንታዊ ተቆጣጣሪነት ይጠቀምበታል.22] እና በመቀጠልም የ DNMT1 እንቅስቃሴን በመቀነስ (Fig. (ምስል. 3a) .3ሀ). እንደ እውነቱ ከሆነ ፣ ኤሪአር በድብቅ ሁኔታ ውስጥ ተገል expressedል ነገር ግን በአይጦች ውስጥ hypothalamus ውስጥ አይደለም (ምስል. (ምስል. 3b) .3ለ). እነዚህ መረጃዎች እንደሚጠቁሙት-oryzanol ቢያንስ በከፊል በከፊል በኤአርአር እገዳን በኩል የ ‹MRNA› ን የ ‹mRNA› ደረጃን የመቀነስ አቅም አለው ፡፡ ከስታቲም በተቃራኒ γ-oryzanol ከኤች.አይ.ዲ. አመጋገብ አይጦስ / hypothalamus ውስጥ በ D1R ደረጃ ላይ ምንም ውጤት አላሳየም (ምስል) ፡፡ (ምስል.NUMNUMGክስ, 5g, k, l).
በሌላ በኩል እኛ γ-oryzanol በሃይፖታላምየስ ውስጥ የ DNMT1 ን በከፍተኛ ደረጃ ከፍ እንዳደረገ አሳይተናል ነገር ግን በፍሬም ውስጥ አይደለም (ምስል. (ምስል.2k, 2k, l). አስከፊ በሆነ የቲ-ሊምፎማ ህዋሳት ውስጥ የ “DNMT3” ን የ DNMT1 ይዘት እንደሚጨምር STATXNUMX ታይቷል [23]. ከዚህ ቀደም በዩ.ኤፍ.ኤፍ-ውስጥ ከሚመገቡ ፍንዳታዎች ውስጥ γ-ኦሺዛኖል በሂወተ-ኢንሴቲክቲቭ STAT3 ፎስፌላርሊን ውስጥ በሂወተ-14]. እንዲሁም STAT3α በእርግጠኝነት በሃይፖታላም ውስጥ በግልጽ የተገለፀው ግን አይጦች ውስጥ ባለው ግጭት ውስጥ አይደለም (ምስል) ፡፡ (Fig.3e-g) .3e - g). እነዚህ መረጃዎች በዲኤምኤክስኤንኤክስኤክስኤክስኤክስኤክስኤክስኤክስኤክስኤክስኤክስኤክስኤ እና መካከል ባለው ልዩነት መካከል ያለው ልዩነት ቢያንስ በከፊል በክልሉ ውስጥ ያለው የ STAT1α እና ERRγ ንጣፍ አይጦች ውስጥ በአንዴ ሊወሰድ እንደሚችል ለመገመት ያስችሉናል ፡፡ የበለስ. (ምስል.ክስNUMNUMB-g) .3b - ሰ). በጠቅላላው ፣ በክሪስታል እና በሃይፖታሊየስ መካከል ያለው የኤሬአር እና የ STAT3 expression አገላለጽ ሁኔታ ምሳሌ ይመስላል ፡፡ በውጤታችን መሠረት የ ERRγ ምርት በብዛት በሚገኝበት የ “γ-oryzanol” የ ‹MRNA› ን እና የኤንዛይም እንቅስቃሴን እንደ ኤቲአርኤል አሉታዊ ተቆጣጣሪ ሊቀንስ ይችላል ብሎ መገመት ምክንያታዊ ነው። በተቃራኒው ፣ የ STAT1α ምርት የበላይ በሆነበት hypothalamus ውስጥ ፣ γ-oryzanol በቅደም ተከተል የ DNMT3 ን ደረጃ ሊጨምር ይችላል።
አንድ የቅርብ ጊዜ ጥናት በኤች ኤች.አይ.ዲ. dysregugugu የአመጋገብ ባህሪን በማስነሳት የትንታኔ D2R ምልክትን ማገገም [3] ፣ ከመጠን በላይ ውፍረት ላላቸው ሕመሞች የክብደት መቀነስ DNMTs መከልከል ያለውን ጠቀሜታ በመጥቀስ። በሌላ በኩል ፣ ከዚህ በፊት የተደረገ ጥናት በሜላኖክ ግራንስት ተቀባይ ኤክስኤንኤል ጂን ውስጥ የተገለፀው የዲ ኤን ኤ ውህደት በተወሰነ hypothalamic ኑክሊየስ ውስጥ የተገለፀው የዲ ኤን ኤ ውህደት ከመጠን በላይ ውፍረት ያላቸውን አይጦች (ፕሮቲኖች) ከመጠን በላይ ውፍረት ሊኖረው ይችላል [27]. የበሽታ መከላከያ ዘዴዎችን ለማብራራት ተጨማሪ ጥናቶች ቢኖሩም, እነዚህ ጥናቶች በሆስፒድኤስ-ሄልዝ-ኤዴስ-ሄልዝ-ኤዴስ (ከኤች.አይ.ፒ.
በቅርብ ጊዜ ኤች.አይ.ዲ. በፔንጊኒንግ ደሴቶች ውስጥ የ D2R ን ደረጃ እንደጨመረ ሪፖርት አድርገናል [17, 24]. ምናልባት እንዲህ ዓይነቱ ማራገፊያ ቢያንስ ቢያንስ በከፊል በ "NF-κB" አማካይነት በአር ኤስ ኤ እና በፀጉር ቁስለት አማካይነት መካከለኛ ሊሆን ይችላል, ምክንያቱም በ D2R ክልል ውስጥ ብዙ የ NF-κB ምላሽ ሰጪ አካላት አሉ.17, 24]. በተጨማሪም በቅርብ የተደረገ ጥናት እንደሚያሳየው TNF-a እና IL-1β የዲ ኤን ኤ ኤም-ሲኑክስ ኤን ኤች (HFD-fed \25]. በዋናነት ፣ የወቅቱ ጥናት ኤች.አይ.ዲ.ኤ በዋናነት hypothalamus ውስጥ በዋናነት በኤች አይ ቪ ጭንቀትን እና እብጠትን የሚመታ እንጂ በድፍረቱ ውስጥ አለመገኘቱን ያሳያል (ምስል) ፡፡ (ምስል.6) .6). በሙከራ ምሳሌያችን ውስጥ የሕብረ ሕዋሳት ፣ የክልል ፣ እና የቦታ-ተኮር የዲ ኤን ኤ ውህደትና ደም መፋሰስ ጥልቅ ዘዴዎች ተጨማሪ ምርመራን መጠበቅ አለባቸው።
Γ-oryzanol በኤች አይ ቪ ጭንቀት hypothalamic ደንብ አማካይነት የኤችአይ.ዲ. ምርጫን የሚያረጋግጥ ከቀዳሚ ሪፖርታችን ጋር በመሆን [14] ፣ γ-oryzanol እንዲሁም የሄዶኒክ እና ሜታቦሊዝም መመገብን የመቋቋም ባህሪይ ልዩ ንብረትን ይወክላል። የተወሰኑ ፀረ-ፀረ-ድስት መድሃኒቶች አደገኛ መድሃኒቶች ስለሚያመጡ [8] ፣ ለአንጎል ሽልማት ስርዓት ተፈጥሯዊ ምግብ ላይ የተመሠረተ አቀራረብ ከመጠን በላይ ውፍረት — የስኳር ህመም ሲስተምን በደህና ለማከም የታሰበ ነው [16]. በዚህ ምሳሌ ውስጥ γ-oryzanol የተለየ የስነ-ምህዳራዊ ሞዳላዊ ባህሪ ያለው ተስፋ ሰጪ የፀረ-አልባነት እጩ ነው ፡፡
ማረጋገጫዎች
የጃፓን ኦክላሆቶ (የጃፓን የሪኪዩስ ዩኒቨርስቲ) ጽሑፉን በመከለሱ እናመሰግናለን ፡፡ ኤም. ሀታታ ፣ ኤች ኬ ካሺሮ ፣ I. አቶቶ እና ሲ Noguchi (የጃፓን የሪኪዩስ ዩኒቨርስቲ) ለጽሕፈት ድጋፍ እናመሰግናለን።
አጽሕሮተ
| 5-aza-dC | 5-aza-2'-deoxycytidine |
| D1R | Dopamine D1 ተቀባይ። |
| D2R | Dopamine D2 ተቀባይ። |
| DAT | ዶፓሚን አጓጓዥ። |
| DNMT | ዲ ኤን ኤ methyltransferase። |
| ER | Endoplasmic ሪታኒክ |
| ERR | ከኤስትሮጂን ጋር የተገናኘ ተቀባይ። |
| HFD | ከፍተኛ ቅባት ያለው አመጋገብ |
| ሳህ | S-አዶኒስ-ኤል-ሆኪሲ ሳይንቲን |
| ሳም | S- አዴኖይል ሜቲየንይን። |
| STAT3α | የትራንስክሪፕት የትራፊክ አስተላላፊ እና አንቀሳቃሹ የ ‹3α› ምልክት ፡፡ |
| TH | ታይሮሲን hydroxylase |
ማስታወሻዎች
የውሂብ ተገኝነት
በዚህ ጥናት ወቅት የሚመነጩ እና / ወይም የተተነተኑ ጥያቄዎች ከተገቢው ፀሐፊ በሚቀርቡት ጥያቄዎች ላይ ይገኛሉ.
የገንዘብ ድጋፍ
ይህ ሥራ በከፊል የጃፓን የሳይንስ ማስተዋወቂያ (ጂኤስፒኤስ ፣ ካኪኤንጊ ግራንት ቁጥሮች 15K19520 እና 24591338) ፣ የሳይንስ ፣ ቴክኖሎጂ እና ፈጠራ (CSTI) ፣ የመስቀል-ሚኒስትሪ ስትራቴጂካዊ ፈጠራ ማስተዋወቂያ (ፕሮጄክት) ምክር ቤት በከፊል በ ድጋፍ ሰጪ-ድጋፍ-ድጋፍ የተደገፈ ነው። (ኤስ.አይ.ፒ.) 'የሚቀጥለውን ትውልድ እርሻ ፣ ደን እና ዓሳ ማጥመድ ቴክኖሎጂዎች' ፣ የሎተሪ ፋውንዴሽን ፣ የጃፓን ፋውንዴሽን ኢንዛይሞሎጂ ፣ አዲስ ኢነርጂ እና የኢንዱስትሪ ቴክኖሎጂ ልማት ድርጅት (NEDO) ፣ የህይወት ሳይንስ አውታረ መረብ ምስረታ (የመድኃኒት መስክ መስክ) ) (የኦኪናዋ አውራጃ, ጃፓን) እና የጃፓን የኦኪናዋ አውራጃ የህክምና ክለቦች ፕሮጄክት ፕሮጀክት እና የኦኪናዋ ሱቅ (የኦኪናዋ ሱፐርፋሬሽን, ጃፓን) ድጋፍ በማድረግ ከኦኪናዋ መስተዳደር የገንዘብ ድጋፍ ጋር.
የፍላጎት ጥምር።
ከዚህ የእጅ ጽሑፍ ጋር የተቆራኘ የፍላጎት ድርድር አለመኖሩን ደራሲዎቹ ያውጃሉ ፡፡
መግለጫ መግለጫ
ኬኬ እና ኤች ኤም ጥናቱን ያቀዱት ፡፡ CK እና ቲኬ ሙከራዎቹን አከናውነዋል እና ውሂቡን አሰተዋተ. ቲኬ, CS-O, CT, MT, MM እና KA ለውሂብን ለመተርጎም አስተዋፅኦ አድርገዋል. CK እና HM የእጅ ጽሑፉን ጽፈዋል ፡፡ ሁሉም ደራሲዎች ለመረጃ ትርጓሜ አስተዋፅኦ አበርክተዋል ፡፡ ሁሉም ደራሲዎች የእጅ ጽሑፉን በማሻሻሉ የመጨረሻውን ስሪት አፀደቁ ፡፡ ኤች.ኤም.ኤ ለዚህ ሥራ ዋስትና ነው ፣ ለሁሉም መረጃዎች ሙሉ ተደራሽ ነበረው እንዲሁም የመረጃን ትክክለኛነት እና የመረጃ ትንተና ትክክለኛነት ሙሉ ሀላፊነት ይወስዳል ፡፡
የግርጌ ማስታወሻዎች
ኤሌክትሮኒክ ተጨማሪ ማቴሪያሎች
የዚህ ጽሑፍ የመስመር ላይ ሥሪት (doi: 10.1007 / s00125-017-4305-4) በአቻ-የተገመገሙ ግን ያልተፈቀደ ተጨማሪ ቁሳቁስ ይ containsል ፣ እሱም ለተፈቀደላቸው ተጠቃሚዎች ይገኛል።
ማጣቀሻዎች
;