አስተያየቶች-በፓርኪንሰን የመዳፊት ሞዴል ውስጥ የመርገጥ ልምምድ የአካል ብቃት እንቅስቃሴ ዶፓሚን D2 ተቀባዮችን ከፍ አድርጓል ፡፡ ሱሶች የ D2 ተቀባዮች ማሽቆልቆልን ያስከትላሉ ፣ ይህም በከፊል ለሰውነት ማነስ መንስኤ ነው ፡፡ የአካል ብቃት እንቅስቃሴ ለማድረግ ሌላ ምክንያት ፡፡
እንቅስቃሴ ቀውስ
መጠን 25, እትም 16, ገጾች 2777-2784, 15 ዲሴምበርግ 2010
ረቂቅ
የዚህ ጥናቱ አላማ የጥልቅ ፉድ ማሳለጥ የተደረገባቸው የፒኤምፒ አይ ኤች አይ ኤች አይ ቪ (ኤድ-ፒን-ኤክስ) ኤክስፕሎይድ (DA-D2R) ነክ ለውጦችን ለመመርመር ነበር. በምእራባዊው የሲንኮንሮሮንሮሰሞዎች እና ምዕራባዊው የክትባት መመርመርን ትንታኔ መጠቀም Vivo ውስጥ የፔትቶር ኤሌክትሮኒካዊ ቲሞግራፊ (PET) ምስል ኤዲ-D2R የተወሰነ ሌጅን ሲጠቀም [18Flypide welypheide, እጅግ ከፍተኛ መጠን ያለው የትንሽማሽ ስፖርት ልምምድ የዲ ኤም ቲ ፒ (ዲ ኤን ኤን ኤክስ) የጨመረው የዲ ኤም ሲ ኤክስ (የዲ ኤን ኤስ) ኤክስፕሬሽን ሲሆን በዲ ኤም ቲ ፒ (ኤን ኤፒ.ፒ. በ dopamine-depleted basang ganglia ውስጥ በ D-D2R ውስጥ የሚደረግ የአካል ብቃት እንቅስቃሴዎች መለወጫ መካከለኛ የሰውነት መስመሮች (MSN) ተግባራት እና የባህሪ ማገገም (መለኪያ) መለዋወጥ ጋር ተመጣጣኝ ነው. ከሁሉም በላይ, በዚህ ጥናት ውስጥ የተገኙ ውጤቶች ከ PET ምስል ምስል ጋር [18F-D2R ለውጥ ከፍተኛ-ጥንካሬን በማጥበቂያ ስፖርት ውስጥ በሚገኙ ግለሰቦች ከፓርኪንሰንስ ዲዚዝ (PD) ጋር የተደረጉ ለውጦችን ለመፈተሽ ሞክር.
የአካል ብቃት እንቅስቃሴ በፐርኪንሰን በሽታ (ዲኤን) ውስጥ ባሉ ሕመምተኞች ላይ የኃይል ብቃት ችሎታውን ያሻሽላል.1-3 እንደ 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) መዳፊት ያሉ የእንስሳ ሞዴሎች በሞተር ብስለት ምክንያት የአካል ብቃት እንቅስቃሴን ለማሻሻል የሚረዱ የሞለኪውላዊ ሞተሮችን ለመመርመር ወሳኝ መሳሪያ ያቀርባሉ.4-6 ዳፖሚን D1 እና D2 ተቀባዮች (DA-D1R እና DA-D2R) በ dopamine ዋነኛ ኢላማዎች (ሚዲኤም) ላይ በሚታወቀው መካከለኛ ሚዛን ሴልፎኖች (MSN) ላይ እና የፆፊነት ባህርያትን እና ሴሉላር ምልክት ማሳየት ናቸው. በተለይም የዶላርታርጂክ እና ዶፔሚርጂክ ኒውሮቬንቴሽን በ "ዶስትሮላታል" ስታይቶም ውስጥ ወደ ሞተር ተግባር (ኮምፕዩተር) ለመሰየም የሚመራውን የዲታክቲክ ፕላስቲክ ቅርጽ (ዲኤምሲክስ) ዘመናዊ ዲፕሬቲክ (PSD) ን ዋነኛ ሚና ይጫወታል. የዲኤክስ-D2R ሚና በ ሞተራይተር ቁጥጥሩ ውስጥ እንደመሆኑ የሞተር ብስለትን መጨመር ማሻሻል በተወሰነ ርቀት ላይ የዲ ኤክስ-ዲክስክስሮክስ ኤክስፕሬሽን አካሄድ መኖሩን ለመመርመር ተመለከትን.
የፔትቶርክስ ልቀት ቲሞግራፊ (PET) - ከዲ ኤን ዲ-ዲክስክኤክስ ሬዲዮ ቴራኮሮች ጋር የመተዋወቅ ስራ በሰዎች የሰውነት እንቅስቃሴ ላይ የረጅም ግዜ ጥናቶችን የመተግበር ብቃት ይሰጣል. ቀደም ሲል በተደረገው የ "ኤሮቢክ" ልምምድ ላይ የተካሄዱ ጥናቶች ዶክሚን በተለመደው ግለሰቦች እንዲለቁ ለማድረግ ሞክረዋል7 እና ምንም ለውጥ በ [11ሲድላፕረደር ተገኝቷል, ዶክተሮቹ የዶፖምሚን መጠን መቀነስ ላይ ትንሽ ለውጥ መደረጉን እንዲያመለክቱ ተደርገዋል. ይሁን እንጂ በ DA-D2R የአረፍ-ቃላት እና በሲምፕቲክ እንቅስቃሴ ላይ ያለው ልምምድ ገና አልተመረመረም. የፒኤቲ ኢምጂጅ ሌጅ [18F] flypride በዲ ኤል-D2R እና DA-D3R ጥልቅ እና ልዩነት ምክንያት ይህንን ለመመርመር እጅግ በጣም ጥሩ መሣሪያ ነው, እና ከ [11C] raclopride በመሰረቱ መነሻው የውስጠኛው ዶፓማሚ ደረጃዎች በቀላሉ ሊፈናቀሉ አይችሉም.7-10 ይህ (በእንሰሳት ላይ የተቀመጠው የዱፊላማን መሟጠጥ)18F] መሞከር,9,11 ነገር ግን በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል [11C] የ raclopride ማሰር8 ይህም የሚጣጣም በሚመስለው ትስስር (ለምሳሌ,Kd) ከመቀበያ ቁጥር ይልቅ (Bከፍተኛ).
የ [18F] flypride በ dopamine በመርካቱ ምክንያት ለውጦችን ለመቋቋም ያገለግላል, ይህም በእሱ ላይ አነስተኛ ውጤት ያስከትላል Kd or Bከፍተኛ በመነሻ መስመር ወይም በከፋ ሁኔታ, እኛ [18F] በዲ ኤም ኤስ ፒ አይ ኤስ ሞዴል ውስጥ ከፍተኛ ልምምድ በማድረግ DA-D2R መጨመር በ MPTP መጨመር ላይ ያለንን መላምት ለመፈተሽ ሞክረናል.9,10,12,13 በተጨማሪም የእኛን የፒኢኢ ምስል መለዋወጥ እርምጃዎች ለመደገፍ, ተመሳሳይ የሆኑ የእንስሳት የመድሃኒት ደረጃ ላይ ኤን-ዲክስክሮማክ ፕሮቲን ላይ የተደረጉ ለውጦችን ለመለካት የ synaptoneurosomal ዝግጅቶችን በምዕራባዊው የበሽታ መከላከያ ህዋስ ትንተና ዘዴ ተጠቀሙ. የአካል ብቃት እንቅስቃሴ በ DA-D2R መግለጫ እና [18F] በሳይን ወይም በፒኤምኤፒ የተያዙ አይጦችን በቡድን ይያዙ.
ስልቶች
እንስሳት, የሕክምና ቡድኖች እና የ MPTP አስተዳደር
የሴክስ C57BL / 6 አይጥታዎች 8 ሳምንታት (ቻርለር ወንዝ ላቦራቶሪስ, ዊሊንግተን, ኤም.ኤ) በድምሩ ሙቀት ቁጥጥር በሚደረግበት ክፍል በ 12 h light / 12 በጨለማ ዑደት የተቀመጡ ነበሩ. ሁሉም ሂደቶች የተከናወኑት በ USC IACUC በተፈቀደው መሠረት ለቤተ-ሙከራ እንስሳት እንክብካቤ እና አጠቃቀም በ NIH መመሪያ መሠረት ነው. በአራት የቴክኖሎጂ ቡድኖች ውስጥ በአጠቃላይ 164 አይነቶች ጥቅም ላይ ውለዋል (1) saline (n = 42), (2) saline plus exercise (n = 55), (3) MPTP (n = 57) እና (4) MPTP ፕላስ ልምምድ (n = 42). በሴክተሮች ውስጥ አራት ፔንታሮቲክ መርፌዎች በ 20 mg / kg MPTP (በነፃ መሰረት, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) በ 0.9% የጨው መጠን, በ 2-h ክፍተቶች ውስጥ ወይም በ 4 ቱ በከፊንቲዜኖል ውስጥ የ 0.1 ml 0.9% NaCl እንደ ቁጥጥር. ሌኦንጂን በዲ ኤችአርፒሲ ትንተና በዲፓሚን ደረጃዎች ተረጋግጧል. በዲ ኤም ፒ ሲ አስተዳደር ከ 12 ቀናት በኋላ በሴፕተም አይጥ (10 ± 82.2 ng / mg ፕሮቲን) የሴፕተም መጥፋት (48.0 ± 8.4 ng / mg ፕሮቲን) ጋር ሲነፃፀር. በጥናቱ መጨረሻ ላይ በ MPTP እና በኤፒቲፒ (269.5 ± 24.9 ng / mg ፕሮቲን) (በ 69.8 ± 11.7 ng / mg ፕሮቲን) መካከል በሚገኙ የዱፕሜይን ደረጃዎች መካከል ምንም ልዩነት አልታየም. ይሁን እንጂ በሰሊን እና በጨው (77.9 ± 12.0 ng / mg ፕሮቲን) ጋር ሲነፃፀር በሳልቢኔን እና በጨው ልምምድ (315.2 ± 9.0 ng / mg ፕሮቲን) ጭማቂ ዳፊላማን ጨምሯል.F(3,16) = 7.78; P <0.05)
የትሬንጅብል ሙከራ
መልመጃ ከተመረበ በኋላ 5 ቀናት ተጀምሯል. ከሁለት የስፖርት ቡድኖች (ሰሊም ልምምድ ልምምድ እና ፒ.ፒ.ፒ. እና ልምምድ) የሚዳረስ አይጦች በ 100-ሴ.ሜ የተሽከርካሪ ማንቀሳቀስ (Exer 6M, Columbus Instruments, OH) በተራቀቀ ፍጥነት በ "6 weeks" (5 ቀናት / ሳምንት) የ 60 MINIMEX ቀን እና የ 18-20x ሜትር x ርዝመት.5,6
ማግኔቲክ ሬዞናንስ ኢሜጂንግ
የአይጤ አንጎል ሦስት ጎኖሜትሪ ሲቲክስ (MRI) ምስሉ በ 1-T ማይክሮ ኤምአር (Bruker Biospin, Billerica, MA) ተገኘ. የምስል ግኝቶች ልኬቶች: TE = 7 ms, TR = 46.1 ሚክስ, የ 6292.5- ሚሜ ቀዳዳ ውፍረት, የ 0.4-mm ማይክሮሴል ውፍረት, 0.45 × 128 × 128 ማትሪክስ መጠን.
ራጂኮሚስትሪ
የ <18F] flypride ቀድሞውኑ በ "ፎስለ ፊኪር" ምትክ በ "ኒውክለፋይል" ምትክ ተተክቷል [18F] በብጁ የተሰራ የራጂ ኬሚስትሪ መሣሪያዎችን በመጠቀም.12 የማንፃት ማጣሪያ በኦክስቶኔትሪክ እና በሶዲየም ፎስፌት ስሚሪት ተንቀሳቃሽ ሞተር (8: 2) በመጠቀም በ "C55" (45) Phenomenex Luna ዓምድ በኋለለ-ኤች ኤችፒኬሲ ላይ ተገኝቷል. የ UV absorption በ 254 nm እና AUFS 0.05 በለ. ራዲዮአክቲቭ ጫፍ (የጊዜ ማቆየት 17 ደቂቃ) ወደ [18F] ፍጥነት መሰብሰብ ተሰብስቦ በሰብል ማዞሪያ ፍሳሽ ላይ ተበላሽቷል. የመጨረሻው ምርቱ ለዝኖውጂየምነት, ለስላሳነት, ለ pH እና ለኦርጋኒክ መሟሟት በጋዝ ክሎሜትሮ ምርመራ ተፈትቷል. የተወሰኑ እንቅስቃሴዎችን እና የሬድዮ ኬሚካላዊ ንጽሕናን በ C8 (2) Phenomenex Luna ትንታኔ በመጠቀም በ Waters HPLC ስርዓት ተመርምሯል. የተወሰደ እንቅስቃሴ በ 3,000-12,000 Ci / mmol ክልል ውስጥ ነበር.
የ PET መቆጣጠሪያዎች እና የምስል ትንታኔ
ባለ 20 ፈጻሚዎች ለ PET ምስል መቅረጽ ጥቅም ላይ ውለዋል (n = 6 saline, n = 3 ሰልሚ እና ልምምድ, n = 5 MPTP, እና n = 6 MPTP እንዲሁም ልምምድ). ቅኝቶች ከ "XIXX-min" ማሰራጫ ጋር በ "4-min" ዝርዝር አቀማመጥ ፕሮቶኮል በ "XIXX-min" የማስተላለፊያ ፕሮቶኮል በ "Concorde microPET R60" ስካነር (ሲቲሲ ኮሊኮርድ ማይክሮሲስስ, ኖክስቪል, ቲኒ) 68የጂ ምንጭ. [18F] fallypride (10.92-11.28 MBq) በዥረት ቅኝት መጀመሪያ ላይ በደረት ላስቲክ (ነጠላ ቦነስ) ውስጥ ተገጥሏል. አይጦች በ 2% isofluorane እና 98% ኦክሲጅን ሰመመን ላይ ሰመመ. ተለዋዋጭ የዝርዝር ሁነታ ውሂብ በ 26 ክፈፎች (6 x 20 ሰከንድ, 4x40 ሰከንድ, 6x1 ደቂቃ እና 10x5 ሰከንድ) እና በ OSEM ሁለት የዝግጅት አቀራረብ (የዝርዝር ትዕዛቶች መጠበቅ ከፍተኛነት ማሳደጊያ) እና የ 18 የማፕ አፕሊያንስ (የላቀ የኋላ posti) የመልሶ ማጎልበቻ ቀመር.14 በድጋሚ የተገነቡ ምስሎች ጭንቅላቱን ለመያዝ ተቆርጠው በቋሚነት በረቀቀ Z-direction በ XigTax 128 × 128 x 63 ሚሜ ውስጥ 0.4 × 0.4 × 0.4 ምስል መፍጠር3 voxels. የሬቲም ዲም-ከፍተኛ ደረጃ ማስተካከያ እምቅ ድባብ (BP) ምስሎች በተደጋጋሚ ተለዋዋጭ ምስሎች ከፋይሊንደር ቲሹ ማጣቀሻ ሞዴል በመጠቀም15 እና Logan እንዝቦች16 በሬታቱም እና በጣም ዝቅተኛ እንቅስቃሴ በሰውነት ውስጥ (የመማሪያ ክልል) በጣም ከፍተኛ እንቅስቃሴ አለው. የአካል ቅርጽ ያላቸው የትራፊክ ክልሎች (ራቲም እና ክሬልሆል) በራይፒ (ስሪት 8.21Beta) በመጠቀም በኤምአርአይኤም (MRI) ውስጥ በፒኢ (ፒኢ) ምስሎች በተፈጠሩት በሁለቱም ስብስቦች ውስጥ በሰው ተወስኖ ነበር.17 የተወሰነ የ [18F] በአይጤው ወራቴራም ላይ በማስታረቅ ትክክለኛውን / ትክክለኛ ያልሆነውን የቢንዶን ጥምርታ መለኪያ (BP) በመጠቀም ተከናውኗል.18,19 በሬታቱም ውስጥ ጥምረት ልዩነት ለማሳየት አራት አይጦች ይመረቱ 1290 ሊትር በኋላ ሊጎንዳ ከተሰነጠቀ በኋላ ናኖቭ ኦክስጅን በ xNUMX-μm ውፍረት እና በ phospho-imager (የታንዛኒክስ 60, GE Healthcare Inc., Piscataway , ኒኢ) (የበለስ. 1). ጥናቶች እንዳመለከቱት [18F] በትክክል መሙላት ለ DA-D2R ያስገድዳል, እና በጣም ትንሽ DA-D3R በሉታሬም ውስጥ ሲኖር አስገቢው DA-D2R መኖሩን ያመለክታል.9,10,12,13
ለ HPLC እና ለፕሮቲን ትንታኔ የተዘጋጀ የቲሹ ክምችት
በጥናቱ መጨረሻ, አንጎል በፍጥነት የተወገዘ እና የጀርባ አጣጣፍ ተመስርቶ በአካሎሚ ክምችት ላይ ከንፅማር 1.2 እስከ 0.6 ያለው ሲሆን ካፒየስ ካሊሶም እንደ ዳርሲየም ድንበር, የኳንሲስ ደሴኖም በስተጀርባ የድንበር ድንበር ሲሆን, የቢሮ ጠርዝ.20
የ HPPP የዲፖታ እና የሜትራቦላይት ትንተና
በቡድን ውስጥ በሚገኙ ተመሳሳይ የዲፓሚን መጠን (n = 4 በቡድን) በኤኬኤችኤል አማካኝነት በኤሌክትሪክ ኬሚካዊ ተገኝነት ተወስነዋል.6 ስርዓቱ አንድ የ 150 × 3.2 ሚሊሜትር የኋልዮሽ C-18 አምድ (የ 3 μሜትር ዲያሜትር) እና CoulArray 5600A (ESA, Chelmsford, MA) የተሰሩ የ ESA ራስ-ንፅፅር (ESA, Chelmsford, MA) የተሰራ ሲሆን, ከአራት -75, 50, 220, እና 350 mV ያላቸው አቅም ያላቸው ቻናሎች ትንታኔ ሴል.
ምዕራባዊ Immunoblot ትንታኔ
በ DA-D1R እና DA-D2R በሲምፕኪቲክ ኤክስፕሬሽን ኤክስፐርት ላይ ተፅዕኖ የተደረገበት ከስምንት የተጣመሩ የዱርዶለቶች ወራጅነት የተሰራውን በሲንኮንዮሮሮሜል ዝግጅቶች ላይ ተተንት ነበር.21 ይህ አሰራር በሶስት ስብስቦች ውስጥ በአንድ የሙከራ ቡድን ውስጥ በጠቅላላው 24 ክሬኖች (በአንድ ቡድን ውስጥ n = 3 ቅድመ- ለኤኤን-ዲክስNUMXR (~ 1 kDa), DA-D50R (~ 2 kDa), የ tyrosine hydroxylase (50 kDa), የ dopamine መጓጓዣ (58 kDa) እና α-tubulin (የ 68 kDa) (እንደ የመጫኛ ቁጥጥር) በምዕራባውያን የበሽታ መከላከያ ላይ ጥናት ተደረገ22 ለንግድ ተስማሚ የሆኑ የመጀመሪያዋ ፀረ እንግዳ አካላት (ጥንቸል ፖሊclሎን እና መዳፊት የሞኖሊናል ፀረ እንግዳዎች, ሚሊፕረር, ቴሙካላ, ካ.ቁ) ይጠቀማሉ. የፕሮቲን ባንዶች በንጹህ ፍየል ፍየል የበቆሎ ፀጉር ወይም ፀረ-አንት ሁለተኛ ፀረ እንግዳ አካላት በ IRDye680 ወይም IRDye800 (Rockland, Gilbertsville, PA). የፍሎረሰንት ቫይረስ ማጣሪያው በሂውስተር ኢንጂን ኦክስሲ (ኤን-ኮር ዲስክሲ) አቅራቢያ ኢንዲከን ኢምፔሬሽን ፓርኪንግ አቅራቢያ በሚገኝ ኦዲሲ 2.1 ሶፍትዌር (LI-COR Biotechnology, Lincoln, NE) በመጠቀም መጠኑ ሲለካው ተገኝቷል. ውጤቱም ከጨው ቡድን ጋር ሲነፃፀር አንጻራዊ የእዝግ ንፅፅር ደረጃዎች (ለ 100% እንዲሆን ተደርጎ).
ስታቲስቲክስ ትንታኔ
በ [በ BP የ [18የ Flyphide, DA-D1R, እና DA-D2R ፕሮቲን ደረጃዎች የተሻሉ በባህላዊ ልዩነቶች (ANOVA) አሰሳ ተካሂደዋል. ልምምድ). ለትራዳዊ ፍጥነት ማፈላለጊያ ፍተሻው ጊዜ እንደ የፕሮጀክቱ ሁኔታ (ሳምንት 1, 2, ወዘተ) እና እንደ ውስጣዊ ሁኔታ (ከጨው ጋር በማነጻጸር በ MPTP) ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላል. የቦንፈርሮኒ የድህረ ፈተና ጊዜ ጥቅም ላይ የሚውለውን ትርጉም በሚገመግሙበት ጊዜ በርካታ ንፅፅሮችን ለማስተካከል ጥቅም ላይ ውሏል. የማጉላት ደረጃ ወደ ተቀናብሯል P <0.05. የቡድን ልዩነቶችን ተግባራዊ ጠቀሜታ ለመመርመር በቡድኖች መካከል ያለው የልዩነት መጠን ግምት የውጤት መጠንን (ES) በመጠቀም ይሰላል (ES = Mean)የቡድን 1 - ትርጉምየቡድን 2/ ኤስዲየተዋሃደ) ኢ.ኤስ.ኤስ ፍላጎት ባለው ህዝብ ውስጥ የሚደረግ የሕክምና ተፅእኖን የሚያንፀባርቅ ሲሆን እንደ አነስተኛ (<0.41) ፣ መካከለኛ (0.41-0.70) ወይም ትልቅ (> 0.70) ባሉ በተቀመጡት መመዘኛዎች ሪፖርት ይደረጋል ፡፡23 ትንተና የተካሄደ Prism5 ለዊንዶውስ (ግራፕፓድ, ሳን ዲዬጎ, ኬ) በመጠቀም ነው.
ውጤቶች
ከፍተኛ-ጥንካሬ ታንሽል የአካል ብቃት እንቅስቃሴ በ MPTP-Lesioned Mice ውስጥ የተሻሻለ የሞተር አክቲቭ አካሄድ
ከ MPTP-lingioning እና የአካል ብቃት እንቅስቃሴው መጀመሪያ በፊት የሁለቱም የአካል ብቃት እንቅስቃሴዎች በሁለቱ የአካል ብቃት እንቅስቃሴዎች አማካኝ የመነሻ መነሻዎች ተመሳሳይ ነበሩ (የጨው ማራዘሚያ ልምምድ: 11.7 ± 1.1 m / min እና MPTP እና ልምምድ: 11.2 ± 1.1 m / ደቂቃ). የ xNUMX ሳምንታዊ የየዕለቱ ልምምድ ከሁሉም የአካል ብቃት እንቅስቃሴዎች በጨዋማ እና በአዕምሮ እንቅስቃሴዎች ላይ ከፍተኛ መጠን ያለው ፍጥነት ያሳዩ. ከኤች. ፒ.ቲ.ፒ. ኤፒኤስ እና የአካል እንቅስቃሴ ፍችዎች ጋር ሲነጻጸር በሳምንታት ውስጥ 6 እስከ 1የበለስ. 2). ይሁን እንጂ የፒ.ፒ.ፒ. እና የአካል እንቅስቃሴ ፍጥቶች ተመሳሳይ ቁጥር ያላቸው የጨዋታ ፍጥነት ያላቸው ሲሆኑ በጨርቃ ጨርቅ እና በጨርቃ ጨርቅ አጥንት ልምምድ ላይ (አፕቲቭ) (5 ± 17.2 m / min) እና በሳምንቱ (3.6 ± 22.0 m / min) እና በሳምንት 1.5 (6 ± 19.2 m) / min እና 1.2 ± 22.2 m / ደቂቃ respectively). ቀደም ሲል እንደ ተዘገበው, ከኤክስፕሬል ማሠልጠኛ ያልወሰዱ የፒ.ፒ.ፒ.-የታጠቁ አይጦች በ 0.9- ሳምንት የማስፈፀም ጊዜ መጨረሻ መጨረሻ ላይ የ 7.0 ± 0.3 m / min ከፍተኛ የሞተሩ ቫልዩክ የሞተር ማንሳትን ያመጣል.5
ከፍተኛ-ጥንካሬ ታንሽኑ ልምምድ የጨመረ DA-D2R ግን DA-D1R ፕሮቲን አልያዘም
የምዕራፍ ፍሰት ትንታኔ እንደሚያሳየው ከፍተኛ-ጥንካሬ ስታይሚል ሙከራ በከፍተኛ ደረጃ ተፅዕኖ ያሳደረ DA-D2R እና DA-D1R ደረጃዎች በ dorsal striatum በ synaptoneurouroomomal preparationsየበለስ. 3). የፒ.ፒ.ፒ. እና የአካል ብቃት እንቅስቃሴ አይጦች ከኤፒቲፒ አይጦዎች ጋር ሲነፃፀር በተዳሰሰ DA-D48.8R ላይ የ 2% ጭማሪ አለው (ምስል 3B), እና በ DA-D2R ፕሮቲን ደረጃ (መለኪያ) እና በኤፒቲፒ (ፒኤፒፒሲ) ላይ በሲኢን-ኤም-ኤF(1,8) = 6.0; P <0.05) ፡፡ በተቃራኒው በቡድኖች መካከል በ DA-D1R ፕሮቲን ደረጃዎች ላይ ምንም የአካል እንቅስቃሴ ውጤት አልነበረም (ምስል 3A; F(1,8) = 0.1, P = 0.78). የፒ.ፒ.አ.ፒ (ፐፕታሲንግ ፐንጎንት) ብቻውን አልነበሩትም-DA2R (F(1,8) = 0.0; P = 0.88) ወይም DA-D1R መግለጫ (F(1,8) = 0.0; P = 0.92). በተጨማሪም, ማይብሊን dopaminergic fibers ጥምረት ሁለት የተለያዩ ፕሮቲን ምልክቶች, tyrosine hydrooxylase (TH; ምስል 3C) እና ዲፓይን ማጓጓዣ (DAT; ምስል 3D), የኤች.አይ.ፒ.አይ.ፒ. ተጓዳኝ የቲታ (ፕሮቲን)F(1,8) = 757.3; P <0.05) እና DAT አገላለጽ (F(1,8) = 218.0; P <0.05)
ከፍተኛ መጠን ያለው የመንጠባጠፍ እንቅስቃሴ መለማመዱ የጨመረው [18F] Fallypride Binding Potential (BP)
የምዕራባውያን የፀረ-ፕሮቲን ፐርፕሎፕስትን (Total immuniblotting) ትንታኔዎች (ሁለንተናዊ እና ውስጣዊ የተንቀሳቃሽ ስልክ መደብሮች) Vivo ውስጥ ከፍተኛ ጥራት ያለው DA-D2R-የተወሰነ ሬዲዮሊንድ (ፒኤን-ምስል)18F] flypride የአካል ብቃት እንቅስቃሴ (ኤኤፍ-ዲክስክኤክስ) በተገኙበት ላይ ያለውን ልምምድ ሊያመለክት ይችላል (የበለስ. 4). ስታትስቲክስ ትንታኔ የአካል ብቃት እንቅስቃሴ (ተፅእኖ) ከፍተኛ ተጽዕኖ እንዳለው ያሳያል.F(1,16) = 12.3; P <0.05) እንዲሁም የ MPTP ቁስለት (F(1,16) = 160.3; P በኤም.ቲ.ፒ.ፒ እና በአካል ብቃት እንቅስቃሴ መካከል ጉልህ የሆነ መስተጋብር የለውም (<0.05)F(1,16) = 3.5; P = 0.07) በ [18F] አጥብቆ ይያዙ. የቦንፈርሮኒ የድኅረ-ተኮር ትንተና በፒ.ፒ.ቲ. (MPTP) እና በ MPTP እና በመጥመድ አጥንት (ፒኤፒ)t = 1.1, Df = 1, 16; P <0.01) ፣ እና በጨው እና በጨው እና በተጨማሪ የአካል እንቅስቃሴ አይጦች መካከል ከፍተኛ ልዩነት የለም (t = 4.1, Df = 1, 16; P > 0.05) ፡፡ በተለይም የ MPTP እና የአካል ብቃት እንቅስቃሴ አይጦች በ 73.1% ጭማሪ አሳይተዋል ፡፡18F] ከፒኤምፒ አይጦሮች ጋር ሲነጻጸር ለኤምፒፒኤም እና ለስራ ልምምድ (XPMX + 7.1 የአማካይ የ BP እሴቶች); የፒኤምፒ አይጦችን አማካይ የ BP እሴቶች: 0.7 ± 4.1) (ምስል 4B). በተጨማሪም የሳልሜን እና የአካል ብቃት እንቅስቃሴ ልጆችን ቁጥር በ 8.2% ጭማሪ አግኝቷል [18F] የጨው አይጦች (13.2 ± 1.0) ጋር ሲነፃፀር የ BP (12.2 ± 0.3) አመንጭ. ከነዚህ ግኝቶች ጋር ወጥነት ያለው "ውጤት ማሳያ" ስሌቶች በሰንሰንት ቡድኖች (ES = 2.61) መካከል ከሚታየው በ MPTP ቡድኖች (ES = 0.94) መካከል ከፍተኛ ተነሳሽነት ተስተውሏል.
ውይይት
ይህ ጥናት ከፍተኛ-ጥንካሬን የማጥበሪያ ስፖርተ ምግብ ወደ ማደግ ይመራል.18FMP (DA-D2R ተገኝነት) በፒኤምፒ የተጠኑ አይጦች ውስጥ ይገኛል. በተቃራኒው በጠቅላላ የዲፓሚን መጠን በፒኤምኤፒ (ኤፒቲፒ) እና በአካል ብቃት እንቅስቃሴ (ኤክስፕሬሽን) መካከል ከፍተኛ ለውጥ አልተደረገም. [18F] flypride በጣም የሚመርጥ DA-D2 / D3R ባንዲራ (BP) Vivo ውስጥ የሚገኙ ተቀባይዎችን መለካት (Bከፍተኛ) / የማስያዣነት ዝምድና (Kd). DA-D2Rs በ dorsal striatum ውስጥ በከፍተኛ ደረጃ የዱፕሜን ተቀባይ ተቀባይ አምሣያ ሲሆን,18F] BP ስለኤችአይ-D2R ቁጥር መጨመር የሚያመለክት ሲሆን በምዕራቡ immunoblotting እና በአርማታ hybridization histochemistry ውስጥ በመጠቀም striatal ስለኤችአይ-D2R mRNA የግልባጭ መግለጫ ላይ ጭማሪ በማሳየት የእኛን ቀደም ጥናቶች በመጠቀም ፕሮቲን መግለጫ ውስጥ መጨመር የተደገፈ ነው fallypride.5 ይህ የ BP ከፍታ ትርጓሜ ተጨማሪ ድጋፍ ያገኛል [18F] በዲፓይን (ዲፓይን) መስፈርት በዲ ኤም ፒ ሲ አይጦች ውስጥ ሊከሰት የማይችል ነው, ምክንያቱም የ dopamine መጠን በጣም ዝቅተኛ ስለሆነ.24 ስለሆነም, ጽንሰ-ሀሳባዊ ጥንካሬ ለውጥ (Kd) የማይጠበቁ እና በቢ ፒ (BP) ላይ ውጤት የማያስከትሉ ናቸው. በፒ.ፒ.ፒ አይጥ ውስጥ ያለው ልምምድ የበለጠ የተጎዱትን የአንጎል ሙከራ በጨጓራ ተቀባይ ቁጥር (ዳይሚንጂን) ቁጥር በጨጓራ የአንቲኖልጂ ኒውሮጅን (ቫይረሰንት) ቁጥር (ዲ ኤን-ኤን-ሲ-ቫይረር) እንዲጨምር ማድረግ ሲሆን, የዶምፊን መጠኖች ደግሞ እየጠፉ ይሄዳሉ. የፒ.ፒ.ፒ.ድ አኩሪ አተር ምላሾችን መጨመር የተጎዳውንና የተመጣጠነ አዕምሯችንን ከአእምሮው ለመላቀቅ ያደርገዋል. በዲ ኤም ቲፒ አይጥ ውስጥ ያለው የ dopamine መጠን በአካል ብቃት እንቅስቃሴ ላይ ከፍተኛ ለውጥ እንደማያመጣ ማስታወቅያ በ DA-D2R የተሃድሶ ለውጦችን ለማነጻጸር የሚስማማ ማሻሻያ ሞተር ማሳየት በጣም አስፈላጊ ነው.
የ PET ምስል በመጠቀም በዲ ኤም ፒ (ፒ.ፒ.ሲ.) የጨመረው የጨው ማከም (ሴል-አሲድ) ጋር በተገናኘ በዲ ኤክስ-ዲክስክስ ኤክስፒ ሲቀነስ ተመልክተናል. ይህ በዲ ኤን-ዲክስክኤክስ ፕሮቲን ውስጥ ምንም ለውጥ ያልተደረገበት ከምዕራባውያን የክትባት ህጻናት በተቃራኒው ነበር. DA-D2R በፔን እና በጨጓራ ዘር መካከል ባሉት ሚዛኖች መካከል ባለው ሚዛን መጨመር ይገኛል. በዲ ፖታሚን-ደካማ ሁኔታ ውስጥ, የማካካሻ እርምጃዎች ለዲ ኤን-ዲክስNUMXR በውጪኛው ውህደት ውህደት ለውጦችን ሊያስከትል ይችላል, ይህም ለ [18F] አጣብቂኝ አስጊ ነገር ግን በምዕራባዊው የክትባት መከላከያ ግንዛቤ ውስጥ ይገኛል.
እንደ ግኝታችን በተቃራኒው በዲ ኤክስ-ዲክስክሲዮ ውስጥ የማካካሻ ጭማሪ በ PD እና በፒ.ፒ.ሲ ውስጥ ላልሆኑ ሰዎች, ወይም በ 2-OHDA ውስጥ በሚገኙ ግለሰቦች ላይ ሪፖርት ተደርጓል.25 የ ሥነ ጽሑፍ ውስጥ, ስለኤችአይ-D2Rs ማጣት, dopaminergic ነርቮች መካከል ብልሹነት ጋር ሪፖርት ምክንያት ነው ይቀራል dopaminergic ተርሚናሎች እና / ወይም striatopallidal የነርቭ ወይም cholinergic interneurons ውስጥ ጨምሯል ልምምድ ላይ ጨምሯል አገላለጽ ከ ስለኤችአይ-D2Rs ውጤቶች ውስጥ መጨመር በአንጻሩ. በ PET ጥናታችን እና በፅሁፎች መካከል ያለው ልዩነት ምናልባት በስነ-ፍተ-ጥናቱ መካከል ያለውን የጠለላው ስብስብ ልዩነት ምክንያት ሊሆን ይችላል.11 በተለይም, በ MPTP-induced cell loss ውስጥ ከፍተኛ መጠን ያለው የ presynaptic DA-D2Rs መጥፋት ምናልባት በቆሽቱ ብቻ የሚከሰቱ ማናቸውንም ልኬቶች ማካካሻ ለውጦችን ለማካካስ በቂ ሊሆን ይችላል. በአማራጭ, አለመቻላችን ምክንያት 2 በተቃርኖ 82 ቀናት ላይ ጥናት (10% ዶፓሚን መመናመን መጨረሻ ላይ ዶፓሚን ደረጃዎች መጠነኛ የሆነ ማግኛ ወደ MPTP (ያልሆኑ ልምምድ) አይጦች ሊሆን ይችላል ውስጥ ስለኤችአይ-D68R BP ውስጥ መጨመር እና መግለጫ ደረጃ እንዲያከብሩ % በ 42 ቀናት ውስጥ ያለመቀንጠፍ). ይሁን እንጂ ይህ የዲ ኤም ፒ (ፒ.ፒ.ፒ) እና ሌሎች የአካል ብቃት እንቅስቃሴ (ጂኦሜትሪ) አዋቂዎችን (የአክቲቭ አኩሪ አጥንቶች ከሌላው ልዩነት ጋር ምንም ልዩነት ያልነበረው) የዶፖሚን አነስተኛ ዳግመኛ ተገኝቷል. ይህ የ DA-D2R BP ጭማሪ ነበር.
ስለኤችአይ-D1Rs እና D2Rs አብዛኞቹ በቅደም cholinergic interneurons እና glutamatergic ውስጥ ተርሚናሎች እና dopaminergic ነርቮች ኮርቴክስ (ወይም thalamus) የሚመነጩ እና substantia nigra pars compacta, ላይ ተገልጿል ተጨማሪ ተቀባይ ጋር MSNs መካከል dendritic ይቆላለፋሉ ላይ የተገለጹ ናቸው.26 የ dopamine ዋና ዋና ሚና በ MSN ላይ corticostriatal ወይም thalamostriatal glutamatergic ኒውሮጅን ማስተርጎም ነው. የ Glutamatergic ኒውሮቬንሽን በ DA-D1Rs በኩል ይሻሻልና በ DA-D2Rs ቀንሷል.27-29 በ dopamine መሟጠጥ ሁኔታዎች ስር, የድንበር እና የሲምፕቲክ ግንኙነቶች በ "DA-D2R" ውስጥ የቀጥታ ጎዳናዎችን የያዙ የ "ሰርቪስ" ን በ "ጠቋሚ" ጠፍተዋል.30 ይህ ጭንቀት በከፍተኛ ፍጥነት በጨው መጠን (glutamatergic corticostriatal neurotransmission) በመጨመሩ በ MSN ተጠያቂነት ሁኔታ ውስጥ ይገኛል.31-33 በእንስሳት ሞዴሎች (ዲኤንፒ) ውስጥ ይህ የጨጓራ ቅባት መጨመር ከፓንኮንሲያን-እንደ ሞተር ባህሪ ጋር የተቆራኘ ነው.34 ዳፖምሚን ወይም የእርሶ አዛውንቶን በመተግበር የዚህ ከፍተኛ ንጽጽር ሁኔታን ማሸነፍ የፓርኪሶን ሞተር ብክነትን ያስከትላል.35,36 እነዚህን ሪፖርቶች እና ግኝቶች ብርሃን ውስጥ, ከፍተኛ ጫና ያለው እንቅስቃሴ የሚያስገኘውን ጥቅም (ነገር ግን ስለኤችአይ-D2R ቀጥታ መተላለፊያ) ወደ ቀጥተኛ መተላለፊያ ውስጥ ጨምሯል ስለኤችአይ-D1R መግለጫ በኩል የሚጠቁሙ dopaminergic ለማሳደግ እና በኩል ሞተር ተግባር ለማሻሻል መሆናቸውን ተቀነባበረ የሆቴሉካዊ ስሜትን ማስወገድ.
የጥናታችን ዋና መደምደሚያ, ከፍተኛ ጥንካሬ ያለው ማራኪ ማራመጃ ማለማመድ, በተፈጠረው የአንጎል ክፍል ውስጥ በጣም በተደጋጋሚ የሚታየው DA-D2Rs በተባበረ የዲ ኤን ኤክስ-ኤክስፕሬስ አፕሊኬሽን አማካኝነት የተራቀቀ የጭረት ማራመጃዎችን ያቀርባል. በግኝታችን መሰረት, ግልጽ ያልሆነ የ PET ምስል ቀረጻ አቀራረብ ከ [18F] መዘግየት ከፍተኛ የትንሽ መራመድ ልምምድ በ PD ውስጥ ለሆኑ ግለሰቦች በ DA-D2R ለውጦችን ለውጦችን እንደሚፈላልግ ለመመርመር ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል. ጥናቶቻችን በዲፓንሚን የእንስሳት ሞዴል ላይ እና በዲ.ዲ. ግለሰቦች ላይ ምስል እና የአካል ልምምድ ግንዛቤን ለማግኝት ምክንያታዊ እና የንድፍ ጥናታዊ ምርምር አስፈላጊነት የሚያንፀባርቅ ነው.
ምስጋና
ይህ ሥራ ፓርኪንሰን በሽታ ፋውንዴሽን, ቡድን ፓርኪንሰንስ (ሎስ አንጀለስ), የ ፓርኪንሰንስ አሊያንስ ወደ ግሪንሊፍ ፓርኪንሰንስ በሽታ ትምህርት ግሩፕ, NINDS RO1 NS44327-1, ኒያ (ከ አንድ የ USC CTSI ሙሉ የሙከራ ግራንት ፕሮግራም ከ ስጦታ, እና ለጋስ ገንዘብ የተደገፈ ነበር AG 21937) እና የአሜሪካ ጦር NETRP W81XW-04-1-0444. MGV የ USC Neuroscience ምረቃ ኘሮግራም Merit Fellowship ተቀባይ ነው. በአሜሪካ የዩኤስሲ አነስተኛ የእንስሳት ምስል ማዕከላዊ (ፒኤምአይፒ) ምስል በመደገፍ እና Rasp Park (ዶ / ር ፒተር ኮን) ከአሜሪካን አነስተኛ የእንስሳት ምስል ማዕከል ጋር በመተባበር ማእከላዊ ማይግራንት (MRI) ለማገዝ በሳማን ምርምር ኢንስቲትዩት ትናንሽ የእንስሳት ምስል ምርምር ምርምር ማዕከል (ዶ / ር ሬክስ ሞአስ) ማመስገን እንወዳለን. በሂልተን የስነ-ልቦለ-ፍራንሲስ (ሜኤን) እና ኤቨረር አበርናቲ (HLCL) ትንበያ ላይ ስላለው የእርሻ ሥራ እርዳታን ያሲያን (ሊሊያን ላይ) ማመስገን እንፈልጋለን. ጆርጅ እና ማሪላሎ ቦይን, ቫልተር እና ሱዛን ዶንጋር እንዲሁም ሮቤርቶ ጎንዛሌዝን ጨምሮ ለዩኤስሲ ፒርኪንደን በሽታዎች ጥናት ጓደክቶች በጣም አመስጋኞች ነን.
የግርጌ ማስታወሻዎች
ሊያስከትል የሚችል የፖሊሲ ግጭት: ምንም ሪፖርት የሚደረግበት ምንም ነገር የለም.
ማስታወሻ ተጨምሯል ይህ ጽሑፍ በ 19 October 2010 ላይ በመስመር ላይ ታትሟል. ስሕተት በኋላ ተለይቶ ተለይቷል. ይህ ማስታወቂያ ሁለቱም ተስተካክለው ለማቅረብ በኦንላይን እና በህትመት ስሪቶች ውስጥ ተካተዋል.
የፋይናንስ መግለጫዎች: የዩኤስሲ የነርቭስ ዲግሪ ፕሮግራም Merit Fellowship (MV), NINDS RO1 NS44327-1 (ኤምቪ, ጄ W, JW, MJ እና GP), USC CTSI ሙሉ የሙከራ ፕሮግራም (QL, AN, MJ, GP).
የደራሲ ሚናዎች: ሁሉም ጸሐፊዎች ይህን ጽሑፍ ለማመንጨት በጣም አስፈላጊ ናቸው. የምርምር ፕሮጀክቶች ንድፍ: GP, BF, MJ, RL, JW. የፕሮጀክት አፈፃፀም-MV, QL, AN, CW, MJ, GP. የውሂብ ስብስብ, ሂደት, ስታትስቲክስ ትንታኔ-MV, QL, BF, AN, RL, MJ, GP. የማንበብ ዝግጅት: MV, QL, BF, RL, JW, MJ, GP.
ማጣቀሻዎች
36. ካላቢሲ ፒ, ፒሳኒ ኤ, ካቶንዜስ ዲ, በርናዳዊ ጂም የዶክቲፕቲክ ፕሮቲንነትና በ dopamine እና gluta
;