Deteczione di alteratorii moleculari in methamphetamine -activated neurons di Fos d'una sola rata dorsali striatum utilizendu l'usservatori di cellu di attivazione di fluoriscenza (FACS) (2013)

A metamfetamina è altre droghe attivanu una piccula proporzione di tutti i neuroni in u cervellu. Avemu sviluppatu in precedenza un metudu basatu nantu à a classificazione di cellule attivate da fluorescenza (FACS) per caratterizà l'alterazioni molecolari indotte selettivamente in neuroni attivati ​​chì esprimenu u marcatore di attività neurale Fos. In ogni casu, stu metudu hè bisognu di aggregazione di campioni da parechji rati. Avà descrivimu un metudu mudificatu basatu in FACS per caratterizà l'alterazioni molecolari in i neuroni striatali dorsali chì esprimenu Fos da un unicu ratu utilizendu una strategia di pre-amplificazione multiplex.

L'immunoistochimica Fos è NeuN (un marcatore neuronale) indicanu chì u 5-6% di i neuroni striatum dorsali sò stati attivati ​​90 min dopu à injections acute metamphetamine (5 mg / kg, ip) mentre chì menu di 0.5% di i neuroni sò stati attivati ​​da injections saline.

Avemu usatu FACS per separà i neuroni marcati NeuN in neuroni Fos-positivi è Fos-negativi è hà valutatu l'espressione di mRNA utilizendu RT-qPCR da menu di cinque neuroni Fos-positivi. A metamfetamina induce un aumentu di 3-20 volte di l'arcu di geni precoci immediati, homer-2, c-fos, fosB è e so isoforme (ΔfosB è una nova isoforma ΔfosB-2) in i neuroni Fos-positivi ma micca Fos-negativi. L'induzione immediata di l'ARNm di u gene precoce era 10 volte più bassa o assente quandu valutata in campioni non classificati da homogenati di striatum dorsale unicu. U nostru metudu mudificatu rende fattibile studià alterazioni molecolari uniche in i neuroni attivati ​​da droghe o cues associati à droghe in mudelli cumplessi di addiction.

A metamfetamina è altre droghe attivanu una piccula proporzione di tutti i neuroni in u cervellu. Riportemu quì un metudu migliuratu per caratterizà l'alterazioni molecolari indotte selettivamente in neuroni attivati ​​chì esprimenu u marcatore di attività neurale Fos. Avemu usatu FACS inseme cù a pre-amplificazione PCR mirata per valutà l'espressione genica indotta da metanfetamina acuta da un pocu di 5 neuroni chì esprimonu Fos da un unicu striatu dorsale di ratto. A metamfetamina induce aumenti di 3-20 volte di i geni precoci immediati (IEG) in neuroni Fos-positivi ma micca Fos-negativi. A pre-amplificazione di PCR mirata permette di studià alterazioni molecolari uniche in i neuroni attivati ​​da droghe o cues associati à droghe in mudelli cumplessi di dipendenza.

Publicatu 2013. Questu articulu hè un travagliu di u Guvernu di i Stati Uniti è hè in u duminiu publicu in i Stati Uniti.