Dopamina, Noradrenaline è Differences in Sexual Behavior between Roman High and Low Avoidance Male Rats: A Microdialysis Study in the Prefrontal Cortex Medial

I MUVRINI

Linea romana High-(RHA) e Low-Avoidance (RLA) rata di ratte, sceltu inizialmente per l'acquistazione rispettivamente rapida vs povera di a risposta di evità attiva in a shuttle-box (Bignami, 1965; Broadhurst è Bignami, 1965; Driscoll è Bättig, 1982; Fernández-Teruel et al., 2002; Giorgi et al., 2007) mostranu diffirenzi significativu in l'attività sessuale quand'elli sò messi in prisenza di una rata femminile sessuale. In effetti, i rati RHA mostranu livelli più elevati di motivazione sessuale cà i rati RLA, cumu rivelatu u più altu numeru di erezzioni pene senza cuntattu dimustrati da questi ratti quandu pusati in presenza di una femina receptiva inaccessibile, è prestazioni copulatrici migliori cà i rati RLA, cum'è revelatu da e differenze significative in numerosi paràmetri copulatori truvati principarmenti in u primu test copulatore trà e dui linee di rata, ma ancu dopu cinque testi copulatori, ancu s'è attenuati (Sanna et al., 2014a). Trà i differenzi i più pronunziati truvati trà i rati RHA è RLA hè u percentu di topi chì inizianu a muntagna è intruduce è chì ejaculanu in prima prova copulatrice, 80% di rati RHA contra 40% di rati RLA, rispettivamente (Sanna et al., 2014a). Un grande corpu di evidenza sperimentale suggerisce chì un tonu dopaminergicu funziunalmentu hè involuttu in e differenze di copulazione trà i rati RHA è RLA. In fattu, i diversi modelli copulatori di rati RHA è RLA sò stati trovati per esse cambiati in modu sfarente da l'apomorfina, un agonista mistu di u receptore di dopamina D1 / D2 somministratu à dosi chì facilitanu u cumpurtamentu sessuale, è da haloperidol, un antagonista di recettore di dopamina D2, amministratu in dosi bassu chì inhibiscenu u cumpurtamentu sessuale (Sanna et al., 2014b). Sicondu, i rati RLA sò stati trovati per esse più sensibili à a facilitazione è l'inibizione di u cumpurtamentu sessuale induutu da apomorfina è haloperidol, rispettivamente, cumu dimustratu da e modifiche più grande induse da i dui farmaci principalmente quandu somministrati à dosi più bassi in parametri copulatori differenti in Rati RLA rispettu à i rati RHA (Sanna et al., 2014b). Forse più impurtante per stu studiu, i sfarenti mudelli copulatori di rati RHA è RLA sò ancu cunnessi cù e differenze in l'attività di e neurone dopaminergiche mesolimbiche, chì l'attività hè ben cunnisciuta per aumentà durante u cumpurtamentu sessuale (Pfaus et al., 1990; Pleim et al., 1990; Pfaus è Phillips, 1991; Damsma et al., 1992; Wenkstern et al., 1993; Balfour et al., 2004; Pitchers et al., 2010, 2013; Beloate et al., 2016). In effetti, a pesar di i rati RHA e RLA sperimentati da sessualmente e valori sessuale hanno valori basali simili di dopamina extracelulare in dialisi dal nucleus accumbens, i concentrazioni di dopamina extracelulare e acido 3,4-dihydroxyphenylacetic (DOPAC, unu di i so metaboliti principali) ), sò stati trovati per aumentà di manera differente in i dialisi ottenuti da u nucleu accumbens shell di naïve è sessuali RHA è RLA sperimentati sessu in i dui fasi anticipatoria è cunsumatori di cumpurtamentu sessuale. E differenze sopra eranu più marcate trà i rati RHA sessualmente naïve e RLA, ma persistevanu trà i rati RHA è RLA sperimentati sessualmente, anche se tendenu à diminuire in questi ratti, cume trovu cù e differenze in u cumpurtamentu sessuale (Sanna et al., 2015).

U rolu funziunale di l'aumentu di l'attività dopaminergica in u nucleu accumbens vistu durante l'attività sessuale (sia in e fasi apetitive è cunsumatori di u cumpurtamentu sessuale) hè sempre una materia di dibattitu ancu di quellu vistu durante l'alimentazione chì, cum'è l'attività sessuale, hà una forte. valenza motivazionale. Cusì, anche se a dopamina in u nucleu accumbens hè implicata in motivazione è neurone dopaminergiche mesolimbiche sò generalmente chjamate neurone gratificanti, in l'ultimi anni 15, studi recenti sustenenu l'ipotesi chì a dopamina mesolimbica ùn hè micca implicata cù l'espressione primaria di cumpurtamenti motivati ​​o gratificanti, ma piuttostu cù apprendimentu è memoria di associazioni di ricumpenza di stimuli (Agmo et al., 1995; Berridge è Robinson, 1998; Ikemoto è Panksepp, 1999; Pitchers et al., 2013, 2014; Beloate et al., 2016; Salamone et al., 2016). In linea cù questa ipotesi, u bloccu di i receptori di dopamina in u nucleu accumbens o inattivazione di neurone dopaminergici in l'area tegmentale ventrale sò stati trovati recentemente incapaci di altere l'espressione di aspetti apetitivi e consumativi di u cumportamentu copulatoriu in i rati maschili (Pitchers et al., 2013, 2014; Beloate et al., 2016).

Tuttavia, ùn pò esse esclusu un rolu di altri spazii cerebrali chì cuntenenu dopamina in e differenze sopra in u cumpurtamentu sessuale trà i rati RHA è RLA. Sicondu hè ben cunnisciutu chì a dopamina esercite effetti facilitatori nantu à l'anticipazione è a fasi cunsumatori di cumpurtamentu sessuale in animali di laboratoriu è ancu in l'omu micca solu in u nucleus accumbens (Everitt, 1990; Pfaus et al., 1990; Hull et al., 1991; Pfaus è Everitt, 1995; Melis è Argiolas, 2011), ma ancu in altri spazii cerebrali, cum'è l'area preoptica mediana, l'ipotalamo è i so nuclei (vale à dì, nucleu paraventriculare (PVN)). Pfaus è Phillips, 1991; Argiolas è Melis, 1995, 2005, 2013; Hull et al., 1995, 1999; Melis è Argiolas, 1995; Melis et al., 2003; Succu et al., 2007; Pfaus, 2010). Un'altra zona chì cuntene dopamina è chì pò ghjucà un rolu in u cumpurtamentu sessuale hè a cortezza prefrontal mediale (mPFC; Fernández-Guasti et al., 1994; Agmo è Villalpando, 1995; Agmo et al., 1995; Hernández-Gonzáles et al., 1998, 2007; Kakeyama et al., 2003; Balfour et al., 2006; Afonso et al., 2007; Davis et al., 2010; Febo, 2011). Infatti, in questa zona di u cervellu si trovanu a fine nervosa di e neurone dopamine mesocorticali, cù i so corpi cellulari localizzati in l'area tegmentale ventrale cum'è neurone dopamine mesolimbiche. In quantu à u nucleus accumbens, u rolu esattu di questa zona cerebrale in u cumpurtamentu sessuale hè luntanu da esse chjaru. In effetti, e lezioni di u mPFC si trovanu di solitu incapace di altere u cumpurtamentu sessuale di i rati maschili cun una sessuale femminileFernández-Guasti et al., 1994; Agmo è Villalpando, 1995; Agmo et al., 1995; Hernández-Gonzáles et al., 1998, 2007; Kakeyama et al., 2003; Balfour et al., 2006; Afonso et al., 2007), nè l'espressione di preferenza di u locu cundizionatu per a ricumpensa sessuale (Davis et al., 2010). Tuttavia i lesioni mPFC, chì ùn anu micca alteratu l'apparenza di preferenza di u locu cundizionatu per a ricompensa sessuale, aboliscenu in i stessi animali a capacità di furmà avversione cundiziunata versu l'attività sessuale quandu abbinata cù stimuli aversivi (Davis et al., 2010) è u focu di e cellule selettive durante avvicinamenti di cumpurtamentu di un ratu maschile versu una femina inaccettabile sessuale sò state misurate in u mPFC di rati masculini (Febo, 2011). Questi risultati anu purtatu à suggerisce chì l'attivazione mPFC durante u cumpurtamentu sessuale svolge un rolu in l'integrazione di l'infurmazioni esterni è interni per l'esekuzione è u cuntrollu di cumpurtamenti diretti in scopu piuttostu chè in l'espressione di risposte innate à rinforzatori naturali Goto è Grace, 2005). In cunsegna, unitu à u nucleus accumbens, mPFC face parte di un sistema neurale cumplessu implicatu in a modulazione di un cumpurtamentu motivatu (cumportamentu direttu à u scopu), chì richiede l'integrazione di informazioni cognittive da mPFC, informazioni emotive da amigdala e contesto- infurmazioni in relazione cù l'ippocampu, in u nucleus accumbens (Goto è Grace, 2005).

L'evidenza sperimentale suggerisce chì a liberazione di dopamina in l'MPFC hè implicata in a regulazione adattativa di un cumpurtamentu motivatu, è chì una deregulazione di sti meccanismi hè pensata di ghjucà un rolu in patologiche o malfattive cundizioni, cume i disordini psichiatri cume schizofrenia, deficit di attenzione e iperattivi TDAH), depressione (Dunlop è Nemeroff, 2007; Masana et al., 2011), o abusu di sustanza è cumportamentu di ghjocu (Everitt è Robbins, 2005). Curiosamente, l'attività di dopamina liberata in u mPFC pò esse influenzata da noradrenalina (NA), presente in u mPFC à livelli più elevati di a dopamina, è in particulare da u trasportatore NA (NET), chì ùn hè micca solu più abbundante cà u trasportatore di dopamina (DAT) in u mPFC (Carboni et al., 1990, 2006; Gresch et al., 1995; Westernik et al., 1998), ma mostra ancu una affinità pè a dopamina ancu più alta di quellu per a NA (Cornu, 1973). Siccomu a dopamina è a NA cooperanu spessu in parechje funzioni mPFC, da a memoria di travagliu è a furmazione attraziunale è a mudificazione versu l'apprendimentu di inversione, l'inibizione di a risposta è a risposta à l'estressi (vede Robbins è Arnsten, 2009), questu susciteghja a pussibilità chì a dopamina, sola o inseme cù NA, in u mPFC pò ancu ghjucà un rolu in e differenze di cumpurtamentu trà i rati RHA è RLA, cumpresi quelli chì si trovanu in cumpurtamentu sessuale.

Per pruvà sta ipotesi, l'attività di u sistema dopaminergicu mesocorticale è di u sistema noradrenergicu in u mPFC sò state studiate in i dui linee RHA è RLA per mezu di microdialyse intracerebral. Brevemente, a dopamina (è u so metabolit principal DOPAC) è a NA eranu misurate in dialisi ottenuti da i compartimenti prelimbic (PrL) è infralimbic (IL) di mPFC di naïve sessualmente (p.e., mai esposti à una femina ricettiva) è RHA sperimentati sessualmente Rati RLA (p.e., chì sò stati sottoposti à cinque teste preliminari di copulazione e mostranu livelli constanti di attività copulatoria) quandu pusati in presenza di una femina receptiva inaccessibile è durante l'interazione sessuale diretta per cromatografia liquida di alta pressione accumpagnata da una rilevazione elettrochimica (HPLC-ECD).

Materiale è Metodi

animali

Rasi di razza masculina RHA è RLA (N = 30 per ogni linea, pesa ≈300 g à l'iniziu di u travagliu sperimentale) eranu tutti da a culunia fundata in 1998 à l'Università di Cagliari, in Italia (Giorgi et al., 2007). E prucedure utilizate per a ripruduzzione selettiva di a culonia sarda sò state già discritte in dettaglio (Giorgi et al., 2005).

I rati femine SD ovariectomizati (250 – 300 g à l'iniziu di u travagliu sperimentale) aduprati in tutti l'esperimenti, sò stati uttinuti da Envigo (San Pietro al Natisone, Italia). L'animali eranu acclimati quattru per a gabbia (38 cm × 60 cm × 20 cm) à l'alloghji di u Dipartimentu di Scienze Biomediche di l'Università di Cagliari per un minimu di 10 ghjorni prima di l'iniziu di l'esperimenti, à 24 ° C, umidità. 60%, 12 h invertit / ciclu scuru (luci spuse da 08: 00 h à 20: 00 h), acqua è cibo di laboratorio standard ad libitum. L'animali si sò manipulati ogni ghjornu per 1 – 2 min in tuttu u periodu di abitudine, per limità a tensione di manipulazione durante l'esperimenti; Inoltre, u cuntattu cù u persunale di mantenimentu di l'animali era limitatu à un servitore unicu è a colazione in i casci di casa ùn hè mai stata cambiata nè u ghjornu prima nè u ghjornu di l'esperimenti. Tutti l'esperimenti sò stati realizati trà 10: 00 h è 18: 00 h. Stu studiu hè statu fattu in cunfurmità cù e recommandations di e linee di e comunità europee, a Directiva di settembre 22, 2010 (2010 / 63 / EU) è a Legislazione Italiana (DL March 4, 2014, n. 26). U protokollu hè statu appruvatu da u Cumitatu Eticu per l'Esperimentu di l'animali di l'Università di Cagliari (N ° d'Autorizazione 361 / 2016-PR, 08 d'aprile, 2016 à FS).

Gruppi sperimentali

I rati RHA è RLA masculini, sessualmente ingenuiuti è cù sperienza sessuale sò stati usati. I fili sessualmente ingenu ùn sò mai stati esposti à una sessione-ovariectomizata è estradiol + receptiva sessuale + femina primata di progesteronu; i ciculi sperimentati sessualmente eranu rati chì avianu già cinque teste di copulazione consecutiva di 60 min à intervalli di ghjorni 3 cù una femina receptiva (Sanna et al., 2014a,b). E femine eranu purtate in estru per trattamentu cun l'estradiol benzoate subcutaneu (200 μg / rata in oliu d'arachide) è progesterona (0.5 mg / rat in oliu d'arachide), 48 h è 6 h prima di teste di copulazione, rispettivamente. Oestrus hè statu verificatu da a colorazione di May-Grunwald-Giemsa è l'esame microscòpicu di i smears vaginali 1 h prima di l'esperimenti. In accordu cù studii precedenti (Sanna et al., 2014a,b, 2015) cinque teste di copulazione preliminare sò state trovate suffirenziali per avè i rati Romani maschili di e duie linee chì mostranu livelli custanti di attività copulatoria: per esempiu, i rati RHA è RLA sperimentalmente sessuali anu soddisfatu u criteriu di almenu una ejaculazione ottenuta in ogni di l'ultime dui testi. (un ratu RHA è dui rati RLA chì ùn anu micca suddisfattatu stu criteriu, sò stati scartati in questa fase). Dui ghjorni dopu à questi testi copulatori preliminari, i rati Romani sessualmente sperimentati sottoponevanu una chirurgia stereotossica per l'implantazione di una sonda di microdialysis in u mPFC cum'è descritta in seguitu (Sanna et al., 2015).

Microdijalisi in u mPFC durante u Comportamentu Sessuale

U ghjornu prima di a microdialisi, i rati sessualmente naïve o experimentati RHA e RLA sono stati posizionati in un apparecchiu stereotossicu (Stoelting Co., Wood Dale, IL, USA) in anestesia isoflurane (1.5% –2%; Harvard Apparat, Holliston, MA, USA) e implantate cù una sonda di microdialysisi casuale verticale (membrana di dialisi ≈3 mm di superficie libera; Melis et al., 2003), è direttu unilateralmente in i compartimenti mPFC, PrL è IL (coordinate: 3.0 mm anteriore è 0.7 mm laterali a bregma, e 5.5 mm ventral a dura; Paxinos è Watson, 2004). U ghjornu di l'esperimentu, l'animali sò stati trasfiruti durante a fase scura di u ciculu à a gabbia di accoppiamentu (45 cm × 30 cm × 24 cm), chì era situatu in una stanza di prova sonora illuminata da una luce rossa tenue è cuntenente in un'altra piccula gabbia Plexiglas (15 cm × 15 cm × 15 cm) cù buchi 25 (Ø 2 mm) in i mura verticali per permette interazzione visuale, olfactiva è acustica ma micca diretta. Dopu un periodo di abitudine di 2 h, a sonda di microdialisi hè stata cunnessa à una pompa di microinfusione CMA / 100 (Harvard Apparatus, Holliston, MA, USA) con tubo di polietilene e perfezionata con una soluzione Ringer (147 mM NaCl, 3 mM KCl e 1.2 mM CaCl₂, pH 6.5), à un flussu di 2.5 μl / min. Dopu un periodu di equilibriu di 2 h di u mediu di perfusione cù u fluidu extracellulare, alcune di dialisi di 37.5 μL sò state raccolte ogni 15 min durante l'esperimentu in tubi di polietilene refrigerati da ghiaccio per a misurazione di a concentrazione di dopamina, DOPAC è NA, cum'è deskrittu. quì sottu. Dopu a racolta di almenu quattru aliquoti dialysate, una rata femina receptiva hè stata introdotta in a piccula gabbia situata à l'internu di a gabbia per 30 min. Duranti questi 30 min, sò stati riuniti altri dui aliquoti di dialisi. In questi cundizioni i rati masci ùn ponu micca interagisce direttamente cù a femina, ma mostranu erezzioni senza cuntattu (vede quì sottu). Dopu stu periodu, a piccula gabbia hè stata rimessa, a copulazione hè stata permessa per 75 min, è di altre cinque aliquote di dialisi sò stati colti. À a fine di stu periodu, a femina era stata alluntanata da a gabbia di mating e una aliquota addiziale di u dialettu hè stata recullata (Pfaus è Everitt, 1995; Melis et al., 2003; Sanna et al., 2015). I paràmetri sessuali rilativi à e fasi anticipative è cunsumatori di cumportamentu sessuale sò stati registrati in tuttu l'esperimentu (vede quì sottu).

Comportamentu Sexuale

Diversi paràmetri di motivazione sessuale è performance copulatoria ligati à e fasi anticipative è cunsumatori di cumportamentu sessuale sò stati registrati in tuttu l'esperimentu da un osservatore chì ùn era micca cunnisciutu di e cundizioni sperimentali specifiche, per esempiu, chì ùn cunnosci micca a linea è u livellu di a sperienza sessuale. di l'animali utilizati in quellu esperimentu (vede quì sottu). Brevemente, a latenza à a prima erezione senza cuntattu (NCPEL, cronometrata da l'intruduzione di a femina receptiva in a gabbia picca interna) è a so frequenza (NCPEF, u numeru di erezzioni pene senza cuntattu chì accade in u periodu in quale a femina hè prisente in a gabbia interna) sò stati registrati. Questi erezioni di pene mediate da feromone, chì si presentanu in rati maschili putenzialmente sessuali in a presenza di una femina receptiva inaccessibile, sò cunsiderate un indice impurtante di excitazione sessuale (Sachs et al., 1994; Sachs, 2000; Melis et al., 2003). Quandu l'interazione sessuale hè stata permessa, per esempiu, durante a copulazione, a latenza per muntà è intromità (ML è IL, cronometrata da a rimozione di a piccula gabbia interna finu à u primu montu o a prima intromissione, rispettivamente); frequenza di montatura è intromissione (MF è IF, u numaru di monti è intromissioni, rispettivamente, in a prima serie di attività copulatrice è durante tuttu u periodu di copulazione); latenza à l'ejaculazione (EL, cronometrata da a prima intromissione di a prima serie finu à l'ejaculazione); frequenza di l'ejaculazione (EF, u numaru totale d'ejaculazioni durante u teste di copulazione) è l'intervalu post-ejaculatori (PEI, cronometratu da a prima ejaculazione finu à a prossima intromissione), sò stati registrati. In più, l'efficacità copulatoria (CE; u numeru di intromissioni di una serie determinata divisa da a somma di u numeru di monti è di l'intromissioni in a stessa serie) è l'intervalle inter-intromissioni (III; u rapportu trà a latenza di l'ejaculazione di una serie determinata è u numeru di intromissioni in quella serie) sò stati ancu calculati per a prima serie di attività copulatrice (Sachs è Barfield, 1976; Meisel è Sachs, 1994; Melis et al., 2003; Sanna et al., 2014a,b, 2015).

Determinazione di Concentrazioni di Dopamine, DOPAC è Noradrenaline in u Dialysate da mPFC

I cuncentrazioni di Dopamina, DOPAC è NA sò stati misurati in 20 μL di u listessu aliquote di dialisi da u mPFC per cromatografia liquida di alta pressione (HPLC) accoppiata à una rilevazione elettrochimica utilizendu una doppia cellula 4011 (Coulochem II, ESA, Cambridge, MA, USA) cum'è digià descrittu (Melis et al., 2003). A deteczione hè stata fatta in modalità di riduzzione in + 350 è −180 mV. L'HPLC hè stata equipata cun una colonna Supelcosil C18 (7.5 cm × 3.0 mm id, 3 μm dimensione di particella; Supelco, Supelchem, Milano, Italia), eluita cù citrato 0.06 M / acetato pH 4.2, contenente metanolo 20% v / v, 0.1 mM EDTA, 1 μM trietilamina, e 0.03 mM sodium dodecyl sulfate in fase mobile, a un flusso di 0.6 mL / min e temperatura ambientale. A sensibilità di l'analisi era 0.125 pg per dopamina, 0.1 pg per DOPAC è 0.2 pg per NA.

Histologia

À a fine di l'esperimenti, i rati anu statu uccisu da a decapitazione, u cervellu immediatamente hè statu alluntanatu da u craniu è immersu in 4% formaldehyde aquoso per i ghjorni 12-15. Dopu stu periodu, i sezzioni cerebrale coronali 40 μm sò state disposte cun microtomu di congelazione, macchiatu cù u Neutru Rossu è inspeccionatu in un microscopiu di cuntrastu di fasa. A pusizione di a punta di a sonda hè stata localizata in u mPFC da seguità u trattu di a sonda attraversu una seria di sezzioni di u cervellu (vede a Figura 1). Solu i rati chì si trovanu chì anu a parte attiva di a membrana di dializazione sò posizionati bè in i compartimenti PrL è IL di u mPFC sò stati cunsiderati per a valutazione statistica di i risultati (un ratu di ogni gruppu sperimentale hè stata scartata in questa fase).

statistiche

Analisi statistiche di dati biochimici (dopamina, DOPAC è NA) è cumportamentali (NCPEL è NCPEF, ML, IL è EL, MF, IF è EF, è PEI) e dati sò stati fatti o tutti i sugetti sperimentali (cume tradiziunalmente hè statu fattu in studi di rata maschile cumportamentu copulatoriu) o escludendu quelli soggetti chì ùn anu micca copulatu per l'ejaculazione durante l'esperimentu di microdialisi. In u primu casu, quandu tutti l'animali sò stati cumpresi in l'analisi, l'animali chì ùn anu micca mostratu NCPE in u mumentu chì a femina era inaccessibile o ùn anu micca montatu o intromit o ejaculatu cù a femina dispunibile eranu attribuiti i rispettivi punteggi di gamma completa: 1800 s si u male ùn hà micca mostratu NCPE in u 30 min in chì a femina era inaccessibile; 900 s per ML è IL se u male ùn hà micca montatu o intromitatu cù a femina dispunibile; 1800 s per EL si u male ùn hà righjuntu l'ejaculazione è 600 s per PEI se u male ùn hà micca intruduttu dopu a prima ejaculazione. In u sicondu casu, quelli animali chì ùn anu micca copulatu per l'ejaculazione sò stati esclusi da l'analisi. Hè statu fattu per valutà se e differenze in u cumpurtamentu sessuale ponu esse correlazziate cù e differenze in i cuncentrazioni di dopamina extracellulare, DOPAC è NA in u mPFC di e linee di rata rumana durante e duie fasi di l'attività sessuale escludendu pussibili interferenze cunfusioni per via di l'inclusione di sughjetti chì ùn anu micca mostratu cumportamentu sessuale assignendu valori fissi per i parametri sessuale analizati.

Diversi analisi statìstichi sò stati realizati cù ANOVAs in modu di rilevà è caratterizà megliu e pussibuli differenze trà e cundizioni sperimentali utilizati. Prima di fà ANOVAs, seti di dati di ognuna di e sfarenti variabili sperimentali sò stati inspeccionati per l'omogeneità di varianze trà i quattru gruppi sperimentali (fatti cù tutti l'animali o cù topi copulanti à l'ejaculazione solu) cù a prova di Bartlett o di Levine secondu u casu. Quandu si trovanu differenzi significativi in ​​varianze, i set di dati sò stati trasformati in logaritmi (vale à dì, i valori Y sperimentali mudificati in i valori Log Y), anu verificatu novu per l'omogeneità di variances è dopu analizate da ANOVAs. Brevemente, i paràmetri cumportamentali ottenuti prima (per esempiu, cù e femine inaccessibili) è durante a prima serie di attività copulatoria (da a prima muntagna / intromissione à a prima muntagna / intromissione dopu a prima ejaculazione) di rati RHA machini naïve è sessualmente sperimentati durante a microdialysis sò stati analizzati da dui ANOVAs, utilizendu a linea di rata è u livellu di sperienze sessuale in quantu trà fattori di sughjetti (i valori medii di i paràmetri di cumportamentu sò riportati in a Tabella 1 e lu F valori è livelli di significativu di analisi ANOVA in Tabella 2).

Inoltre, un analisi generale di e dati ottenute da ogni rattu durante a microdialisi hè stata fatta calculendu prima l'AUCs ottenute tracciandu i valori di e cuncentrazioni di dopamina, DOPAC o NA o u numeru di erezzioni senza cuntattu, monti, intromissioni è ejaculazioni vs u tempu (partendu 1 h dopu l'intruduzione di u rattu masciu in a gabbia di riunione à a fine di l'esperimentu −180 min divisu in fraccioni di 15 min per i valori neurochimici - o à u mumentu quandu a femina hè stata introduta in a gabbia di accoppiamento. per i paràmetri cumportamentali) è dopu paragunendu i valori calculati per dui modi ANOVAs utilizendu a linea di u ratu è u livellu di sperienza sessuale trà i fatturi di u sughjettu (i valori medii di l'AUC di parametri neurocimichi è di comportamentu sò riportati in a Tabella). 4 e lu F valori è livelli di significativu di analisi ANOVA in Tabella 5). Infine, un analisi puntuale più puntuale di ogni inseme di dati (vale à dì, i valori di e cuncentrazioni di dopamina, DOPAC, NA è u numeru di erezzioni senza cuntattu, monti, intromissioni, e ejaculazioni versu u tempu) hè statu fattu da factorial. ANOVAs per misure ripetute, aduprendu a linea di u ratu è u livellu di l'esperienza sessuale in quantu à i fatturi di u sughjettu è u tempu (vale à dì, frazioni di dialisi) cum'è in u fattore di sughjetti (u F i valori è i livelli di significatività di questi analisi ANOVA sò detti in a Tabella 6). Analisi simili sò stati realizati ancu cunsiderendu solu i valori basali di i paràmetri neurochimici (l'ultimi quattru aliquoti dialisi riuniti prima di l'intruduzione in a gabbia di accoppiamento di a femina ricettiva), chì i valori medii sò riportati in a Tabella. 3. Comu prima, ma micca interazioni di seconda ordine sò stati trovati quandu esegue ANOVA factoriali generale per misure ripetute, in particulare Line × Tempo è Esperienza × Interazioni di u tempu per parametri neurochimici (vede Tabella 6), ANOVA in dui sensi cù a linea o u livellu di sperienza sessuale in quantu à u fattore di u sughjettu è u tempu cume in u fattore di u sughjettu sò stati realizati nantu à sti insemi di dati, cumparendu direttamente sessu naïve o RHA sperimentati vs. rati RLA, o sessualmente sperimentati vs. rati RHA naïve o sperimentate sessualmente vs rati RLA naïve. I risultati di u post hoc cuntrasti sàvii realizati utilizendu a prova HSD di Tukey nantu à l'interazioni significativu rivelati da sti ANOVA di dui modi sò riportati in Figura 2. In tutti l'altri casi, post hoc paraguni ùn sò micca signalati, postu chì ANOVAs ùn ​​anu rivelatu alcuna interazzione significativa trà a linea di rata, u livellu di sperienza sessuale è u tempu. L'analisi statistiche sò stati tutte realizate cù Graph Pad 5 (PRISM, San Diego, CA, USA) è STATISTICA 12 (Statsoft, Tulsa, OK, USA) cù u livellu di significanza stabilitu à P <0.05.

Risposte alla lingua

I rati RHA è RLA mostranu un numeru sferentu di erezzioni senza contattu è mudelli differenti di cumportamentu copulatori

In linea cù studi precedenti (Sanna et al., 2014a,b, 2015), un numeru sfarente di u sessu maschile RHA e di ratti RLA s'impegnavanu in attività sessuale quand'elli sò cunghjunati cun una femina ricettiva durante a raccolta di aliquote dialisi da u mPFC per microdialyse intracerebrale. Brevemente, in stu studiu 10 fora di 12 rati RHA maschili sessualmente ingenui (83%) copulati in l'ejaculazione in u so primu test copulatorio, contra 6 solu di rati RLA naïve 12 (50%) durante l'esperimentu di microdialysis. Questa differenza hè stata trovata ancu in i rati RHA maschili è RLA sperimentati sessualmente (dopu cinque testi copulatori), sebbene attenuati, cù tutti i rati 12 RHA arrivati ​​all'ejaculazione contro 9 fora di i rati 12 RLA durante a microdialysia. Sempre d'accordu cù studi previ, ancu in stu studiu e duie linee di rati romani anu presentatu latenzie diffirenti è frequenze di erezzioni pene senza cuntattu quandu esposti à una femina ricettiva inaccessibile, è ancu diverse mudelli di cumportamentu copulatori durante l'interazione sessuale. Queste differenzi sò stati truvati sia quandu cunsiderendu i dati di tutti l'animali sperimentali di un gruppu datu, independentemente chì si copulavanu in l'ejaculazione o micca (per esempiu, assignendu puntuazioni cumpletu à quelli animali chì ùn anu micca mostratu u cumpurtamentu, vale à dì in rati chì ùn anu micca copulatu in l'ejaculazione) o quandu cunzidira i dati di l'animali chì anu dimostratu u cumpurtamentu di un determinatu gruppu solu (p.e. animali chì anu copulatu per l'ejaculazione; Tabella) 1). Dunque, l'analisi statistiche di i valori di eretti senza cuntattu (NCPE) è di i paràmetri copulatori misurati in a prima serie di attività copulatoria da ANOVAs bidirettu anu svelatu differenzi significativu trà e duie linee di ratu, sia quandu si cunsiderevanu tutti i rati sperimentali o i rati copulatori in i quattru gruppi sperimentali (vede a Tabella 2). In fattu, quandu i dati ottenuti da tutti l'animali sperimentali sò stati cunsiderati, u numeru di erezzioni senza cuntattu era più altu è i NCPEL, ML, IL è PEI eranu significativamente più brevi in ​​i rati RHA paragunatu à i rati RLA. Inoltre, l'EF è a CE eranu più altu, mentri u III era significativamente più cortu, in i rati RHA paragunatu à i rati RLA. Alcune di e differenze sopra citate trà e duie linee di rata rumana tendenu à diminuì o spariscenu cù testi copulatori ripetuti. Tuttavia, alcune di queste differenze eranu ancora presenti dopu a stabilizzazione di u cumpurtamentu sessuale da l'esperienza sessuale ripetuta. Risultati simili sò stati ottenuti quandu cunzidiravanu solu i valori di l'animali di i quattru gruppi sperimentali chì copulavanu per l'ejaculazione, eccettu per l'EF (vede i Tabelli 1, 2).

Concentrazioni Basali di Dopamina Extracellulare, DOPAC è Noradrenaline in mPFC Dialysates da Sexualmente Naïve e RHA Experienziati è RLA RLA

Sutta e cundizioni sperimentali attuali, i quantità di dopamina, DOPAC è NA in i dialisi ottenuti da u mPFC di tutti (p.e., indipendentemente ch'è sò copulati in l'ejaculazione o micca), i rati RHA e RLA sexualmente naïve, eranu 2.32 pg è 2.11 pg per dopamina, 322.56 pg è 124.42 pg per DOPAC è 6.05 pg è 2.24 pg per NA, rispettivamente, in 20 μl di dialisi. Quantità simili sò state misurate in i dialisi ottenuti da mPFC di rati RHA e RLA sperimentati sessualmente (dopamina: 3.73 pg è 3.33 pg, DOPAC: 353.62 pg è 133.32 pg, NA: 7.17 pg è 2.78 pg in rati RHA e RLA, rispettivamente) . Questi valori indicanu una cuncentrazione di ≅0.8 – 1.2 nM è ≅95 – 100 nM per dopamina è DOPAC extracelulari, è ≅1.8 – 2.2 nM per NA extracelulari, in mPFC di rati RHA, e una concentrazione ≅0.8 – 1.2 nM è ≅35 – 40 nM per dopamina è DOPAC extracelulari, rispettivamente, è ≅0.6 – 0.9 nM per NA extracelulari, in mPFC di rati RLA (Tabella 3). I valori sopra sò stati ottenuti dopu un periodu di equilibriu 2 h di u buffer di dialisi cù u fluidu extracellulare mPFC. Siccomu a ripresa di dopamina autentica, DOPAC è NA di e sonde di dialisi hè stata stimata vicinu à 20%, a concentrazione di dopamina extracelulari, DOPAC è NA pò esse stimata vicinu à ≅4 – 5 nM in entrambe linee per dopamina, ≅500 è ≅ 200 nM per DOPAC è ≅10 è ≅4 nM per NA in mPFC di rati RHA è RLA, rispettivamente. L'ANOVA factoriali per misure ripetute fatti nantu à i valori sopra dopu a trasformazione di u logaritmu, anu revelatu diffirenzi significativu in i livelli basali di dopamina tra i rati sessualmente naïve e sessuali (F_(1,44,132) = 26.05, P <0.001), è in i livelli basali di DOPAC (F_(1,44,132) = 63.36, P <0.001) è di NA (F_(1,44,132) = 42.14, P <0.001) trà topi RHA è RLA (ultimi quattru campioni raccolti prima di l'introduzione di a femina in a piccula gabbia). Valori similari sò stati trovati quandu si cunsidereghja solu surci chì anu copulatu à l'ejaculazione durante l'esperimentu di microdialisi (Table 3). Ancu in questu casu ANOVA factoriali per misure ripetute realizate nantu à i valori dopu a trasfurmazione di u logaritmu anu revelatu diffirenzi significativu in i livelli basali di dopamina trà i rati naïve sessualmente è sessuali (F_(1,33,99) = 26.97, P <0.001), è in i livelli basali di DOPAC (F_(1,33,99) = 42.95, P <0.001) è di NA (F_(1,33,99) = 27.63, P <0.001) trà i topi RHA è RLA.

I Concentrazioni di Dopamina Extracellulari, DOPAC è Noradrenaline in mPFC Dialysates da Sexualmente Naïve e RHA Experienziati è Rati RLA Cambia Diferentemente durante l'attività sessuale

A prisenza di e femine receptive inaccessibili in a gabbia interna interna è una interazione sessuale diretta successiva ha aumentatu i cuncentrazioni di dopamina, DOPAC è NA extracelulari in i dialisi mPFC ottenuti da i rati maschili sessuamente naïve e sperimentati RHA e RLA, anche se cù differenze significative trà i duie linee di rata è u livellu di cundizioni di sperienza, sia quandu cunzidira tutti l'animali sperimentali o solu quelli chì copulavanu in l'ejaculazione (Figura 2). In fattu, ANOVA in dui sensi di l'AUC di e concentrazioni di dopamina, DOPAC è NA, hà dimustratu chì u cuntenutu generale di dopamina, DOPAC è NA di tutta a prova, eranu significativamente più alti in rati RHA in comparatione cù i rati RLA, è in sessu sperienza cumparata cù i rati naïve (vede a Tabella 4 per i valori AUC è Tabella 5 di F valori è livellu di significazione). Queste differenzi sò stati ancu cunfermati da ANOVA factoriali di puntu à puntu per misure ripetute di dopamina, DOPAC è NA quantità di e duie linee di rata sessualmente naïve e sperimentate à longu l'esperimentu, chì anu revelatu effetti principali significativu di Line, Experience, Time è Line significativu × Time. è Esperienza × Interazioni di primu ordine (vede a Tabella 6 di F valori è livellu di significazione).

I Concentrazioni di Dopamina Extracellulare, DOPAC è Noradrenalina in mPFC Dialysates ottenuti da Sexualmente Naïve RHA e RAT Rati Cambia Diferentemente durante Attività Sessuale

In sessu RHA e RLA ratti dopamina extracelulari, ma micca DOPAC, aumentu prima quandu pusatu in presenza di e femine inaccessibili, mentre NA anu aumentatu solu in i rati RHA. In i rati RHA naïve, a dopamina extracelulari hè aumentata ancu in u primu 15 min d'interazione sessuale cume truvata cù DOPAC è NA. L'incrementi in dopamina extracelulari, DOPAC è NA duravanu per tuttu u tempu di copulazione, cù dopamina, DOPAC è NA, raggiunendu un valore massimu in 60 min, 75 min è 75 min, rispettivamente, poi dopamina extracelulari è, in una misura più minima, DOPAC è NA , diminuite à i valori simili à i basali dopu a rimuzione di a femina.

Per d 'altra banda, u primu aumentu significativu, è u valore piccu, in a dopamina extracelulari, DOPAC è NA hè accadutu in rati RLA naïve durante a prima 15 min di copulazione. Tuttavia, a variazione da i rati RHA, in i rati RLA dopamina extracelulari, DOPAC è NA tendevanu à vultà à i valori simili à i basali in u primu 30 min d'interazione diretta cù a femina (vede Figurine 2A, C, E).

Finalmente, durante a copulazione, l'aumentu in dopamina extracelellale era più grande è più persistente in RHA sessualmente naïve cà i rati RLA (vede Figura 2A) mentre chì in assenza di a femina e so cuncentrazioni eranu simili, beni micca identiche, attraversu e duie linee di rata (vede sopra è Tabella 3). Curiosamente, anche se nessuna differenza hè stata truvata trà e duie linee romane in l'aumentu percentuale di DOPAC è, in una misura minore, cuncentrazioni NA durante a presenza di e femine receptive, una differenza di più di duie volte in i valori assoluti di cuncentrazioni di DOPAC è NA. hè stata osservata trà e duie linee di rata tramindui in cundizioni basali (vedi Tabella 3) è in tuttu u teste cù a femina receptiva (vede Fig 2C, E).

I Concentrazioni di Dopamina Extracellulari, DOPAC è Noradrenalina in mPFC Dialysates ottenuti da RHA e RLA Sperimentati Sessualmente Cambia Diferentemente durante l'attività sessuale

Cum'è truvatu in i rati RHA e RLA sexualmente naïve, a presenza di e femine inaccessibili è l'interazione interattiva diretta diretta hà purtatu à un aumentu di dopamina è DOPAC extracelulari in u dialisi di mPFC ottenuta da rati masculi RHA è RLA. Tuttavia, ancu in questu casu sò state trovate differenze in relazione à e linee, sia quandu cunzidiravanu tutti l'animali sperimentali o, in misura minore, solu quelli chì copulavanu in l'ejaculazione (Figura 2). In i sessi RHA sperimentati sessualmente è i rati RLA u primu aumentu di a dopamina extracelulari hè accaduta cù a femina inaccessibile. Dopu, a concentrazioni di dopamina hà aumentatu durante a copulazione in i dui linee di rata. I cuncentrazioni di dopamina anu righjuntu u so picculu valore dopu 45 – 60 min di copulazione, è diminuinu lentamente versu i valori basali à a fine di a prova copulatoria (vede Figura 2B). Analogamente à i rati naïvuli sessualmente, a concentrazione di dopamina extracelulari era più elevata in i rati RHA sperimentati sessualmente in paragunà à i rati RLA principalmente in l'aliquote di dialisi raccolte durante a parte centrale di a fase di copulazione (dopu 30-45 min di copulazione). I cuncentrazioni di DOPAC anu aumentatu durante a presenza di a femina inaccessibile solu in i rati RHA, mentre chì a crescita in un ugualu in i dui linee di rata durante a copulazione (i valori massimi à 75 – 90 min), è tendevanu à vultà à i valori basali à a fine di u test copulatorio (vede a Figura 2D). I cuncentrazioni NA anu aumentatu ancu in i dui fili di rati sperimentati sessualmente dopu l'intruduzione di e femine chì righjunghjenu i valori massimi à 90 min in i rati RHA è 45 min in i rati RLA 2F). A differenza di dopamina (vede sopra), una differenza simile hè stata truvata in l'aumentu di DOPAC è di cuncentrazioni NA in rati sperimentati sessualmente da e due linee quandu cunsiderendu tutti l'animali vs. Tuttavia, cum'è truvatu in rati sessualmente naïve, anche se l'aumentu percentuale di DOPAC è NA cuncentrazioni eranu simili, differenzi significativu in i valori assoluti di DOPAC è NA sò stati trovati trà ratti RHA è RLA sessualmente durante u test (vale à dì, prima, durante è dopu a prisenza di a donna receptiva), cù i rati RHA mostranu valori più altu ch'è i rati RLA (vede a Tabella 3 per i valori basali è Figuri 2D, F per i valori à longu teste).

L'esperienza sessuale influenza i cambiamenti in i cuncentrazioni di Dopamine è Noradrenaline in i Dialysates di mPFC ottenuti da i rati RHA e RLA durante l'attività sessuale

Un paragone di e concentrazioni di dopamina è NA extracelellulari in rati sessualmente naïve e sperimentati RHA è RLA dimostrava chì l'esperienza sessuale hà cambiatu a concentrazione di dopamina extracelulari è, in una misura più nica, di NA in entrambe e linee di rata, sia quandu cunsideremu tutti l'animali sperimentali. o quelli chì copulavanu solu à l'ejaculazione (Figuri 2A, B, E, F). Dunque, una differenza significativa hè accaduta in i valori basali di dopamina trà sessu ingenu è sperienze di rati di e duie linee (vede Tabella 3) è i valori di dopamina durante l'attività copulatoria eranu in generale più altu in i rati RHA è RLA sperimentati sessualmente in paragunà à i so omologi ingenui (vede Figura 2B). Oltremente, in rati RHA sperimentati sessualmente, anche se l'aumentu di dopamina truvata durante a presenza di e femine inaccessibili seguita u listessu schema tempurale vistu in rati sessualmente naïve, differenzi in u mudellu di tempu sò stati trovati durante a copulazione. In fattu, in questu casu, in variazione da ciò chì osservò in i rati RHA sessualmente naïve (un piccu principale à 60 min), dui valori principali di picculu sò stati trovati, u primu dopu 15 min è u sicondu dopu 45 min di copulazione. Dopu questu ultimu aumentu, i valori di a dopamina tendenu à vultà à i valori basali (vede a Figura 2B).

Una stampa simile hè stata trovata in i sessi naïve vs rati RLA sperimentati. In fattu, simile à ciò chì si trova in i rati RHA, ancu in i rati RLA experimentati, un mudellu temporale caratterizatu da trè aumenti principali di a dopamina extracelulari hè stata trovata: u primu cù femina inaccessibile è l'altru dui durante a copulazione, vale à dì, dopu 15 min è 60 min di copulazione (vede Fig 2A, B). In generale, l'esperienza sessuale pari chì produce più cambiamenti di longa durata in u mudellu tempurale di liberazione di dopamina in tramindui fili di rattu quandu passanu da un ingrossu sessuale à a cundizione sperimentata.

Cumu mostra in Figuri 2C – F, solu picculi diferenze sò stati rilevati in a cuncentrazione di DOPAC è NA trà i rati ingenu è sperienze di e duie linee. Tuttavia, una tendenza micca significativa in NA extracellulare versu valori più altu in sperienze cumparati cù i rati ingenu hè stata osservata in basale (prima di l'intruduzione di a femina ricettiva, vede Tabella 3) è in l'ammontu NA generale, cum'è revelatu da i valori AUCs (vede Tabella 4) calculatu nantu à i cuncentrazioni extracelulari ottenute da tutta a prova (prima è durante a presenza di a donna receptiva). Infine, u modellu tempurale di e cuncentrazioni di NA era assai simile quandu paragunò i ratti sperimentati di e duie linee di rata cù i so omicidi omi, indichendu chì l'esperienza sessuale pò purtà à un aumentu generale in NA extracelellare piuttostu cà à mudificazioni di u mudellu di a so crescita. 2E, F).

Cambiamenti in Concentrazioni di Dopamina Extracellulare è Noradrenaline in mPFC Dialysates ottenuti da Sexualmente Naive e Rati Experimentati Rati e RLA Occasionanu Concomitante cù Cambiamenti in Comportamentu Sessuale

E sfarenze in i cuncentrazioni di dopamina extracellulare, DOPAC è NA in i dialisi ottenuti da mPFC si trovanu in rati sessualmente naïve e sperimentati RHA è RLA durante a prova (Figura 2) hè accaduta cun modifiche in paràmetri sessuali diffirenti misurati durante e duie fasi principali di l'esperimenti (vale à dì, inaccessibili femminili è dispunibili per u male, rispettivamente), chì includenu, trà l'altri, erezzioni pene senza cuntattu (Figuri 3A, B), monti (Figuri 3C, D), intromissioni (Figuri 3E, F) è ejaculazioni (Figuri 3G, H). Queste diffirenzi sò stati truvati sia quandu cunzidiravanu tutti l'animali sperimentali o quelli chì copulavanu solu per l'ejaculazione. In fatti, un analisi preliminariu di i valori di l'AUC di sti parametri da ANOVA duie direzioni (vede Tabella 4 per i valori AUC è Tabella 5 di F valori è livellu di significativu) seguitatu da un'analisi puntuale di i valori di sti parametri lungo l'esperimentu da ANOVA factoriali per misure ripetute anu revelatu effetti principali significativi di Line, Esperienza, Tempu, significativu di prima ordine Line × Time and Experience × Interazioni di tempu, è una significativa interazione di seconda ordine per e muntagne (vede a Tabella 6 di F valori è livellu di significazione). Sicondu, in linea cù studi previ (Sanna et al., 2015): (i) i rati RHA sessualmente naïvi anu dimustratu più erezzioni di pene senza cuntattu, monti, intromissioni è ejaculazioni cà i so contraparti RLA; (ii) i rati RHA sperimentati sessualmente anu dimustratu un numeru più altu di erezzioni pene senza cuntattu, intromissioni è ejaculazioni cà i so omi RLA; e (iii) rati sperimentati di e due linee, è in particulari i rati RLA, anu dimustratu più erezzioni di pene senza cuntattu, intromissioni è ejaculazioni cà i so omi sessuale. In fattu, mentre in i rati RHA, a più parte di i cambiamenti produtti da l'esperienza sessuale hè accaduta in u percorsu di u tempu piuttostu cà in a frequenza di i paràmetri di u cumpurtamentu (per esempiu, i ratti sperimentati copulati principarmenti in a prima metà di u test, mentri i rati ingenui mostranu una tendenza copulatoria simile in tutta a prova), in i rati RLA, una migliione generale più marcata di u cumpurtamentu sessuale, principalmente in u performance sessuale, hè stata prodotta da l'esperienza sessuale, cumu rivelatu da i cambiamenti di i valori di parametri copulatori in rati RLA sperimentati in comparatione cù i so contraparti naïve.

Articulu discussione

Stu studiu cunferma è estende i risultati di studi previ dimustrendu chì i rati RHA è RLA, chì mostranu significativamente stili di ripruduzzione in risposta à e cundizioni aversive (Driscoll è Bättig, 1982; Giorgi et al., 2003a; Steimer è Driscoll, 2003), mostranu modelli di cumportamentu distinti in prisenza d'una femina receptiva inaccessibile è durante testi copulatori classici (Sanna et al., 2014a,b, 2015). In cunsegna, ancu stu studiu mostra chì i rati RHA sexualmente naïve (mai esposti à una femina ricettiva prima) anu manifestatu una motivazione sessuale più elevata è un rendimentu sessuale megliu cumparatu cù i rati RLA naivamente sessuale, per esempiu, i rati RHA mostranu un numeru più altu di erezzioni pene senza cuntattu (feromone- erezzioni pene induse cunsiderate un indice di excitazione sessuale; Sachs et al., 1994; Sachs, 2000) è sferenti cambiamenti pro-sessuali in parechji paràmetri copulatori cum'è truvatu in studii precedenti (Sanna et al., 2014a,b, 2015). Queste differenzi anu persi in e duie linee di rata rumana dopu l'acquisizione di l'esperienza sessuale, vale à dì dopu à stabilizazione di cumportamentu sessuale cù cinque esposizioni à e teste di copulazione cù una femina ricettiva. Stu studiu mostra ancu per a prima volta chì in e linee di RHA è RLA, sia in a cundizione naiva o sperimentata, eretture pene senza cuntattu è interazione sessuale, si sò cunsiderate simultaneamente à un aumentu di e concentrazioni di dopamina extracelulari (è u so metabolite principale DOPAC ) è NA in i dialysates ottenuti da microdialyisi intracerebrale da u mPFC di e duie linee di rata rumane. Curiosamente, questi aumenti di dopamina e NA extracelulari in u mPFC parevenu esse assuciatu cù e sferenze sia in u fenotipu di u ratu sia in u livellu di sperienza sessuale. In cunsegna, cum'è ampiamente dimustratu in a sezione Risultati, i rati sessualmente naïve e RHA sperimentati mostranu aumenti più elevati è di durata in dopamina è NA extracelellulari quandu paragunati à i so omologi RLA, sia in a fase apetitiva sia in cunsumativa di cumpurtamentu sessuale. Inoltre, i rati sperimentati sessualmente di e duie linee romane mostranu aumenti di più alta è di longa durata in dopamina extracelulari è NA in u mPFC in e duie fasi di u cumpurtamentu sessuale in paragunà à i so omi. Infine, tutte e differenze sopra in dopamina è NA extracelellulari in u mPFC eranu apparentemente ligate à e differenze in i paràmetri di u cumpurtamentu sessuale, per esempiu, i ratti sessualmente sperimentati di e duie linee romane mostranu una motivazione sessuale più elevata è prestazioni copulatrici migliori quandu paragunate cù i so omologi naïve. e rati sessualmente naïve è sperimentati RHA anu dimustratu una motivazione sessuale più elevata è prestazioni copulatrici megliu quandu paragunate à i so omi sessualmente naïve è esperti RLA.

In quantu à l'aumento di dopamina extracelulari truvata in u dialysate mPFC durante l'attività sessuale, u primu aumentu hè accadutu in u primu 15 min dopu l'intruduzione di a femina sessuale in l'apparecchio di accoppiamento, quandu a femina era inaccessibile à u male, chì generalmente mostra in questa cundizione senza cuntattu erezzioni pene. Un secondu è più grande aumentu di dopamina extracelulare hè accadutu durante u primu 15 min dopu à a femina era fatta accessibile à u male per a copulazione. Curiosamente, mentre chì in a cundizione naïve a dopamina extracellulare aumentava principalmente in a prima parte di a prova cù a femina accessibile cù una tendenza à riturnà à i valori basali in a seconda parte, in a condizione sessuale sperimentata a dopamina rimane elevata in tutta a prova righjunghjendu i valori massimi dopu a 45 – 60 min di copulazione in i dui linii di rata rumana.

Oltre a diffarenze sopra in dopamina extracellulare durante e sfarenti fasi di l'attività sessuale trà RHA è RLA ratti in a cundizione sessualmente naïve è sperimentata, stu studiu mostra ancu sferenze impurtanti è altamente significative in a cuncentrazione DOPAC extracellulare trà e duie linee romane di prima. , valori basali) è dopu l'intruduzione di a femina receptiva in l'apparechju di accoppiamentu. Di conseguenza, i valori basali di DOPAC extracelulari in u dialysate mPFC sò stati truvati in i rati RHA per esse circa 2.6-volte più altu di quelli chì si trovanu in rati RLA. Questa diffarenza trà i rati RHA è RLA hè accaduta è persiste in e cundizioni sessualmente naïve è sperimentate malgradu di differenzi assai modesti in i valori basali di dopamina extracelulari in i dialysati mPFC ottenuti da e due linee di rata romana in queste condizioni sperimentali. Pigliate inseme, queste differenze puderianu indicà un fatturatu di dopamina sfarente à u livellu di u mPFC trà e duie linee di rata rumana. In cunsegna, a cuncentrazione di DOPAC riflette generalmente a quantità di dopamina liberata è ripresa da i terminali nervi dopaminergici è cunvertita in DOPAC per monoaminooxidasi (MAO; Carlsson, 1975). Eccu, e concentrazioni DOPAC basali più elevate truvate in rati RHA suggerenu chì quantità più elevate di dopamina sò liberate è recapturate da terminazioni nervosi dopaminergique in mPFC di rati RHA, per esempio, una attività basale più alta di u sistema dopaminergicu mesocortical di rati RHA quandu paragunata à RLA rati. Un tonalità dopaminergica mesocorticale più alta in i rati RHA hè sustinuta da e concentrazioni di dopamina extracelulari più alte chì si trovanu durante l'attività sessuale in u dialysate mPFC sia di rati RHA sia di sesso e di sperienza rispetto a quelli di i so omologi RLA. In questu rispettu, hè pertinente ricurdà chì un tonu dopaminergicu più altu hè cunsideratu cum'è responsabile, almenu in parte, di parechji di i tratti di cumportamentu diffirenti è ancu opposti presenti in rati RHA è RLA. In conseguenza, i rati RHA sò cuperti attivi, cercatori altamente impulsivi, di novità è di sensazione, è propensi à ingestione è abusu di parechje classi di droghe di addiczione, mentre chì i rati RLA sò coperchi reattivi, iperemotionali è propensi à sviluppà sintomi simili à a depressione (Zeier et al., 1978; Giorgi et al., 1994, 2003b, 2007; Corda et al., 1997, 2014; Escorihuela et al., 1999; Steimer è Driscoll, 2003; Lecca et al., 2004; Giménez-Llort et al., 2005; Carrasco et al., 2008; Fattore et al., 2009; Moreno et al., 2010; Coppens et al., 2012; Díaz-Morán et al., 2012; Sabariego et al., 2013; Manzo et al., 2014a,b; Oliveras et al., 2015), cumprese a motivazione sessuale più elevata è un megliu rendimentu copulatoriu di rati sessualmente naïve è sperimentati vs di rati RHA (Sanna et al., 2015). A più alta crescita in i cuncentrazioni di dopamina extracelulari trovata in dialisi da u mPFC di rati sessualmente naïve e RHA sperimentati s'assumiglia à i cuncentrazioni di dopamina extracelulari più alte trovate in dialisi da nucleo accumbens di navi sessualmente e con RHA sperimentati rispettu à i so omologi RLA (Sanna et al., 2015). Tuttavia, a differenza di mPFC, i livelli basali di dopamina è DOPAC extracellulari in u dialisi da u nucleu accumbens sia di sessu naïve e di sperimentati RHA è RLA ratti ùn differianu micca significativamente (Sanna et al., 2015). Cusì, u tonu dopaminergicu mesolimbicu più altu in u nucleu accumbens di rati RHA sessualmente naïve e sperimentati pò esse inferitu solu da e concentrazioni di dopamina extracelulari superiori trovate in i dialisi da i nuclei accumbens di rati RHA quandu paragunati cù i controparti RLA in presenza di i receptivi femina, è micca da una attività dopaminergica basale sfarente rivelata da i livelli basali più alti è inferiori di cuncentrazione DOPAC in rati RHA è rati RLA, rispettivamente, cum'è truvatu in mPFC in stu studiu. Questu hè ancu in linea cù i risultati di i rapporti di prima chì mostranu chì i livelli di dopamina extracelulari in u dialisatu da u mPFC di rati RHA sò stati trovati più elevati di quelli di i ratti RLA, mentre chì i livelli simili di dopamina sò stati trovati in u dialisatu da a cunchiglia di u nucleu accumbens. di dui rati RHA è RLA in diverse cundizioni sperimentali (D'Angio et al., 1988; Scatton et al., 1988; Willig et al., 1991; Giorgi et al., 2003a, 2007). Malgradu e differenze sopra sopra tra mPFC è nucleus accumbens, l'esperienza sessuale pari à pruduce in l'MPFC aumenti duranti più longu di u mudellu tempurale di liberazione di dopamina in e duie linee di rata rumana quandu passanu da l'ingenu sessuale à a condizione sperimentata. Eranu generalmente più altu in i rati RHA cà i rati RLA. Ciò hè qualcosa sfarente di ciò chì si trova in u nucleu accumbens, induve l'esperienza sessuale tende à spustà a dopamina extracellulare aumenta a prima parte di a prova copulatoria in i rati RHA, mentre l'aumentu in tuttu u test di copulazione in rati RLA (Sanna et al., 2015).

A nostra sapienza, stu studiu mostra ancu per a prima volta chì non solu a dopamina extracelulari, ma ancu a NA extracelulare cresce durante l'attività sessuale in u dialisi da u mPFC sia di ratti RHA sia di RLA, cum'è truvatu cù dopamina, ma ancu in questu casu cun sferenze riguardanti a linea di rata rumana è à a sperienza sessuale. In particulare, a variazione da i livelli di dopamina basali chì si trovanu assai simili in a dialisi da u mPFC sia di RHA sia di RLA, i livelli basali di NA extracellulari in u dialisi da mPFC di rati RHA eranu significativamente più altu (circa 2,5-volte ) cà quelli di i rati RLA. I motivi di queste differenze sò scunnisciuti, ma cum'è discututu sopra per dopamina è DOPAC, questi risultati ponu indicà chì un tono noradrenergico basale più altu esiste almenu in a corteccia mPFC di rati RHA quandu paragunati à i rati RLA. Un tonu noradrenergicu più altu pò ancu esse implicatu in i tratti di cumpurtamentu differenti è spessu opposti presenti in i rati RHA è RLA, cum'è discututu sopra per dopamina. Un ulteriore sustegnu per un tonu noradrenergicu più altu in i rati RHA rispettu à i rati RLA in u mPFC deriva da i risultati chì dimostranu chì e differenze in i livelli basali extracelulari di NA persistevanu ancu durante l'attività sessuale in entità sessualmente naïve e sperimentate, per esempiu, i livelli di NA extracelulari aumentavanu in u dialysate mPFC in rati RHA quandu esposti à e femine inaccessibili è durante tuttu u periodu di copulazione assai più cà in rati RLA, in quali i livelli di NA anu aumentatu solu in u primu 15 min di u periodu di copulazione, dopu chì i livelli NA anu tornatu à i valori basali . Questi cambiamenti in i livelli di NA extracelellulari sò stati veduti in a cundizione sessualmente naïve è sperimentata, ma l'aumentu in i livelli di NA eranu più elevati in i rati RHA è RLA sperimentati sessualmente in paragunà à i so omi sessualmente naïve. Cusì, l'esperienza sessuale apparentemente induce una potentazione ulteriore di l'attività noradrenergica in u mPFC di rati RHA è, in una misura minore, di rati RLA, cum'è già discututu per a dopamina. I toni cuncomitanti superiori noradrenergici è dopaminergici in i mPFC di rati RHA quandu paragunati à i rati RLA meritano qualchì cumentu. Infatti, hè statu informatu chì l'attività noradrenergica in u mPFC pò influenzà a liberazione di dopamina per mezu di sfarenti mekanismi (per esempiu, vede Carboni et al., 1990, 2006; Gresch et al., 1995; Westernik et al., 1998 è referenze quì). Unu di questu hè in relazione cù l'attività di u NET, chì hè statu dimustratu per unisce a dopamina cun una affinità ancu più alta di quellu per NA in sinaptosomi ottenuti da l'omogenei di PFC (Cornu, 1973). Si avissi da succede in u mPFC in vivoA dopamina liberata in u mPFC pò esse ricuperata micca solu da dopaminergici ma ancu da terminali nervi noradrenergici à una velocità ancu più alta di quella di a NA. Questa pò causà à turnu un aumento in a liberazione di dopamina da i terminali dopaminergici (per esempiu, un tonu dopaminergicu aumentatu) per compensà a quantità di dopamina eliminata da a fossa sinaptica; cusì, u tonu noradrenergicu più altu truvatu in i rati RHA puderia cuntribuisce, almenu in parte, à u tonu dopaminergicu più altu truvatu in a mPFC di i rati RHA quandu paragunatu à i rati RLA. Ulteriori studii sò obligati à verificà sta pussibilità. In particulare, a diffarenza di l'attività noradrenergica identificata in stu studiu in u mPFC trà i rati RHA è RLA puderia ancu ghjucà un rolu in a so risposta differente à u trattamentu antidepressivo. In fattu, i rati RHA sò cunsiderate un mudellu di resistenza è i rati RLA sò un mudellu di vulnerabilità à a depressione. In cunsegna, un trattamentu agutu o cronicu cù antidepressivi cum'è desipramina, fluoxetina è clorimipramina, tutti melloravanu significativamente i risposti di comportamentu in u test di natazione forzata in rati RLA senza affettà e risposte di rati RHA (Piras et al., 2010, 2014).

Finalmente, stu studiu cunferma è estende i risultati precedenti chì mostranu chì u mPFC hè involuttu in u cuntrollu di u cumpurtamentu sessuale, ancu s'è u rolu esattu di questa zona di u cervellu in u cumpurtamentu sessuale hè luntanu da esse chjaru (Fernández-Guasti et al., 1994; Agmo è Villalpando, 1995; Agmo et al., 1995; Hernández-Gonzáles et al., 1998, 2007; Kakeyama et al., 2003; Balfour et al., 2006; Afonso et al., 2007; Davis et al., 2010; Febo, 2011). Recentemente, u focu di e cellule selettive in u mPFC durante avvicinamenti di cumpurtamentu di un ratu maschile versu una femmina sessuale inaccessibile hè stata mostrata usendu un paradigma di registrazione di u focu cellulare (Febo, 2011). Curiosamente, e neurone chì ùn anu micca rispostu durante a prima esposizione di u male à a femina ricettibile inaccessibile, diventanu attivi durante a seconda esposizione, cum'è se l'esperienza precedente puderia induce cambiamenti plastichi purtendu à variazione in e risposte di u cumpurtamentu. Tuttavia, e lezioni cù l'acidu ibotenicu di u mPFC sò state trovate incapace di altere u cumpurtamentu sessuale di i rati maschili cù una donna sessuale sessuale, nè l'espressione di preferenza di u locu cundizionatu per ricumpensa sessuale. Tuttavia, l'abilità di furmà aversione cundiziunata versu l'attività sessuale quandu accoppiata cù stimuli aversivi hè stata trovata completamente abolita in questi animali lesionati (Davis et al., 2010). Ciò suggerisce chì l'attivazione mPFC durante u cumpurtamentu sessuale ghjucà un rolu in l'integrazione di l'infurmazioni esterni è interni per l'esecuzione è u cuntrollu di cumpurtamenti diretti à u scopu piuttostu chè in l'espressione di risposte innate à rinforzatori naturali (vede Goto è Grace, 2005). Più impurtante per stu travagliu, parechji studi anu dimustratu chì e zoni cerebrali implicati in motivazione sessuale è comportamento sessuale, cume nucleo accumbens, area tegmentale ventrale, area preoptica mediale, nucleo di stria terminalis, amigdala basolaterale e nucleo talamico subpafascicular parvocellulare. da u mPFC durante l'attività sessuale (vede Balfour et al., 2006). Parechje di queste zoni cerebrali participanu à un circuitu neurale cumplessu intarvena in u cuntrollu di u cumpurtamentu sessuale, da a motivazione sessuale è a ricumpensa à u rendimentu sessuale. Stu circuitu include neurone ossitocinergiche originate da PVN di l'ipotalamo (PVN) e progetta a l'area tegmentale ventrale, nucleus accumbens, hipocampo, amigdala, PFC, nucleo di stria terminalis, medulla oblongata e midollo spinale, mesolimbico / mesocortical dopaminergico neuroni proiettate da l'area tegmentale ventrale al nucleus accumbens è PFC, neuroni dopaminergiche incertohypothalamic e neurone glutamatergiche chì participanu à u livellu locale è di u sistema in parechje aree del circuitu (vede Melis è Argiolas, 1995, 2011; Melis et al., 2003, 2007, 2009, 2010; Succu et al., 2007, 2008, 2011). Cusì, l'aumentu di a dopamina extracellulare (ma ancu di NA) in i dialisi da u mPFC vistu durante l'attività sessuale puderia indicà chì u mPFC hè una parte attiva di stu circuitu, vale à dì, i neuroni dopaminergici mesocorticali participanu à u cuntrollu di l'attività sessuale inseme. cù neurone noradrenergiche, mesolimbiche dopaminergique, oxytocinergic e glutamatergiche, anche se pare micca strettamente necessaria per l'espressione di un cumpurtamentu sessuale (Davis et al., 2010). In linea cù questa ipotesi, stu studiu mostra chì e differenze in a liberazione di dopamina è NA in u mPFC durante l'attività sessuale sò accadute simultaneamente cù differenze in u numeru di erezzioni pene senza cuntattu è cambiamenti in i parametri copulatori, cù una liberazione più alta di dopamina è NA durante e fasi appetittive è cunsumatori cunnesse à una motivazione sessuale più elevata è prestazioni copulatrici megliu in tramindui fili di rata rumana è in e cundizioni sessuale naïve è di sperienza.

A discussione detta sopra hè basata principalmente nantu à l'incrementu cunnisciutu di a dopamina extracelulari chì si trova in u nucleu accumbens di i rati maschili durante l'attività sessuale (Pfaus et al., 1990; Pleim et al., 1990; Pfaus è Phillips, 1991; Damsma et al., 1992; Wenkstern et al., 1993). Tuttavia a dopamina è altri neurotransmettitori puderanu esse liberati in u mPFC (è in u nucleu accumbens) in altre cundizione sperimentale, cum'è durante u stress o affruntà (Thierry et al., 1976; Fadda et al., 1978), chì ùn sò micca strettamente legati à u cumpurtamentu sessuale. Cusì, si pò sustene chì l'aumentu di dopamina truvatu in dopamina extracelulare in u mPFC (stu studiu) o in u nucleu accumbens (Sanna et al., 2015), hè legatu più à u stress secundariu per, o à copre cù a presenza è / o interazzione cù a femina sessuale invece di l'attività sessuale. Questa puderia avè una certa rilevanza in i rati RHA è RLA, chì mostranu stili di ripruduzzione marcatumente sfarenti è attivazione di l'asse ipotalamo-pituitaria-suprarrenale in risposta à e cundizioni aversive (i rati RLA mostranu l'attivazione di questu assi assai più altu ch'è a rata di RHA; Carrasco et al., 2008; Díaz-Morán et al., 2012). Questa aumenta ancu a pussibilità chì l'hormoni di stress (vale à dì, corticosteroidi) puderanu influene ancu l'attività dopaminergica in u mPFC è altre zone di u cervellu. Eppuru i rati RLA sò coperchi reattivi è mostranu un cumpurtamentu iperemotionale caratterizatu da l'ipomotilità è a congelazione, mentre chì i rati RHA mostranu un cumpurtamentu di coping proattivu destinatu à ottene u cuntrollu di u stressorDriscoll è Bättig, 1982; Willig et al., 1991; Escorihuela et al., 1999; Steimer è Driscoll, 2003; Giorgi et al., 2007). Ancu s'ellu hè impussibile di escludere cumpletamente chì questu pò accade in topi sessualmente ingenui (chì ùn anu mai interagitu cun una femina ricettiva prima) è in topi RLA sessualmente ingenui in particulare (vede sopra), questu hè improbabile. In e nostre cundizioni sperimentali tuttu u pussibule hè fattu per evità ogni tipu di stress (vede a Sezione "Materiali è Metodi") è l'esperimenti sò organizzati in tale modu chì i masci ùn interagiscenu micca immediatamente cù a femina, ma solu dopu à 30 minuti di esposizione per ella , Durante u quale l'aumentu misuratu di dopamina hè assai inferiore à quellu chì si verifica durante l'interazione sessuale. Se l'aumentu di dopamina truvatu in u mPFC (è in u nucleu accumbens) di i topi Rumani (i topi RHA è RLA sessualmente ingenui anu livelli basali di dopamina extracellulare in u dialisatu da u mPFC è u nucleu accumbens, assai simile) eranu veramente secondarii à u stress dovutu à, o affruntà a presenza di / interazione cù a femina: (i) l'incremento di dopamina si sarebbe trovu assai più altu in u primu periodu di tempu quandu i masci sò messi in presenza di a femina è micca più tardi, cum'è truvatu durante a copulazione; è (ii) l'aumentu di dopamina si prevede di scomparsa o di esse fermamente riduttu dopu l'acquisizione di una attività sessuale stabile, vale à dì, quandu i prucessi di apprendimentu (cumpresu a gestione di a novità) sò stati cumpletati è ghjucanu solu un rolu minore in l'esecuzione di sessuale attività, mentre chì in cuntrastu cuntinueghja à accade quandu l'attività sessuale hè ripetuta. In altre parole, a dopamina extracellulare in u mPFC (è in u nucleu accumbens) aumenta sempre durante a copulazione, ancu dopu chì u comportamentu sessuale sia statu amparatu. Ulteriori studii sò richiesti per chiarisce u rolu funzionale di sta crescita di l'attività dopamina in u mPFC (è in u nucleu accumbens; vede a Sezione "Introduzione è Riferimenti" in questu).

In cunclusione, stu studiu mostra per a prima volta chì a presenza di, è ancu di più, l'interazione cù una femina sessuale hè quella chì porta à un aumentu di dopamina è NA in extracelulare in u dialisu da u mPFC di naïve sessualmente (mai esposta à stimuli sessuale ) e sessualmente sperimentate (chì anu sottopusutu cinque teste preliminari di copulazione e mostranu prestazioni sessuali stabili) RHA è RLA, i mostri RHA, chì mostranu significativamente stili di coping in risposta à e cundizioni aversive è à i modelli differenti di cumportamentu copulatoriu cù una femmina sessuale. Secondo, a cuncentrazione di dopamina è NA hè stata truvata più alta in u dialisate da u sessu naïve è di sperienze RHA sperienze quandu paragunatu cù i so omologi RLA durante i dui fasi anticipatori è cunsumatori di attività sessuale. Questi risultati ponu esse dovuti in parte à un tonu dopaminergicu è noradrenergicu in a mPFC di i rati RHA più altu di quellu di i ratti RLA, secondu a rappurtazione di dopamina in u nucleus accumbens (Sanna et al., 2015). D’altronde, a dopamina è a NA mPFC extracelulari si trovanu altamente crescente in RHA sperimentata sessualmente è, in una misura più bassa, in rati RLA paragunati à i so omologi sessualmente ingenui in cundizioni basali, ma ancu durante e fasi apetitive e consumatrici di un cumpurtamentu sessuale. Ciò suggerisce chì l'esperienza sessuale induce prucessi di plastica chì potenzanu in più a dopamina è a neurotransmissione NA in u mPFC, cume trova per a dopamina in u nucleu accumbens di e duie linee di rata romana (Sanna et al., 2015). E sferenze sopra in neurotransmissione dopaminergica è noradrenergica in u mPFC di e duie linee romane pò ghjucà un rolu micca solu in i sfarenti mudelli di cumportamentu sessuale, ma ancu in i tratti di comportamentu sferenti è spessu opposti chì caratterizeghjanu queste dui linee di rata.

Contributions Autor

FS, AA, MRM, OG è MGC dissenu u prughjettu. FS è JB dissenu, realizanu è analizanu e dati da cumportamentu sessuale è esperimenti di microdialysis. MAP, OG è MGC, selezziunati e crescite ratti Romani. FS, AA, MRM, OG è MGC anu supervisatu u studiu. FS, AA, MRM, OG è MGC scrivevanu u manoscrittu. Tutti l'autori anu discututu i risultati è anu cummentatu u manuscrittu.

Funding

Stu travagliu era sustinutu parzialmente da subvenzioni da u Ministeru di l'Università è di a Ricerca in Italia (MIUR) (Indipendenza scientifica di i ghjovani Ricercatori, SIR 2014, Code n ° RBSI14IUX7) à FS, da a Regione Autonoma di Sardegna (ARS) (LR 7 / 2007 , "Promozione di a Ricerca Cientifica è l'innuvazione tecnologica in Sardegna", Fondu suciale Europeu, 2007 – 2013, Codice di Prughjettu N ° CRP-59842) à OG, è da l'Università di Cagliari à AA, MRM, FS, OG è MGC.

Declarazione di Conflict of Interest

I autori dicianu chì a ricerca hè stata capunanzata in l'assenza di qualsiasi relazioni cummerciale o finanziarii chì puderia esse interpretatu com'è un cunflittu di interessu interessanti.

Acknowledgments

Dottore Barbara Tuveri, Università di Cagliari, per l'alloghju è a cura di animali.

Vede ancu