COMMENTS: વ્યસનમાંથી પુનઃપ્રાપ્તિ પછી લાંબા સમય સુધી ડેલ્ટાફોસ્બ ટ્રેસ પાછળ છોડે છે તે પુરાવા. વિશિષ્ટરૂપે વ્યસન એપીજેનેટિક ફેરફારોનું કારણ બને છે, જે પરિણામ સ્વરૂપે ડેલ્ટાફોસ્બનો વધુ ઝડપી સમાવેશ થાય છે. આ સમજાવે છે કે કેવી રીતે સ્થગિત થાય છે, વર્ષો પછી સંપૂર્ણ ફુડવાળા વ્યસનીમાં ઝડપથી વધારો થઈ શકે છે.
જે ન્યુરોસી. લેખક હસ્તપ્રત; PMC 2013 જાન્યુઆરી 25 માં ઉપલબ્ધ છે.
અમૂર્ત
ΔFOSB, એક ફોસ્બ જનીન ઉત્પાદન, કોકેઈન જેવા દુરુપયોગની દવાઓના વારંવાર સંપર્ક દ્વારા ન્યુક્લિયસ એક્યુમ્બન્સ (NAC) અને કૌડેટ પુટામેન (CPU) માં પ્રેરિત થાય છે. આ ઇન્ડક્શન વારંવાર ડ્રગના સંપર્કમાં જોવા મળતી જનીન અભિવ્યક્તિ અને વર્તણૂકીય અસામાન્યતાઓના અસામાન્ય પેટર્નમાં ફાળો આપે છે.
અહીં, અમે મૂલ્યાંકન કર્યું કે ઉંદરોમાં ડ્રગના સંપર્કનો દૂરસ્થ ઇતિહાસ અનુગામી કોકેઈન એક્સપોઝર દ્વારા ઉત્તેજિત ફોસ્બ જનીનની ઇન્ડ્યુસિબિલિટીમાં ફેરફાર કરી શકે છે કે નહીં. અમે બતાવીએ છીએ કે અગાઉના ક્રોનિક કોકેઈન વહીવટ, ત્યારબાદ વિસ્તૃત ઉપાડ, ΔFOSB mRNA ના વધુ તીવ્ર ઇન્ડક્શન અને વારંવાર કોકેઈન રી-એક્સપોઝર પછી ΔFOSB પ્રોટીનના ઝડપી સંચય દ્વારા પુરાવા મુજબ NAC માં ફોસ્બ ની ઇન્ડ્યુસિબિલિટીમાં વધારો કરે છે . CPU માં આવા કોઈ પ્રાઇમ્ડ ફોસ્બ ઇન્ડક્શન જોવા મળ્યા ન હતા, હકીકતમાં, CPU માં ΔFOSB mRNA ના અનુગામી તીવ્ર ઇન્ડક્શનને દબાવવામાં આવ્યું હતું.
આ અસામાન્ય પેટર્ન Fosb અભિવ્યક્તિ Fosb જનીન પ્રમોટરમાં ક્રોમેટિન ફેરફારો સાથે સંકળાયેલી છે . પહેલાના ક્રોનિક કોકેઈન વહીવટથી ફક્ત NAc માં Fosb પ્રમોટર પર RNA પોલિમરેઝ II (Pol II) બંધનમાં લાંબા સમય સુધી વધારો થાય છે , જે સૂચવે છે કે Pol II "સ્ટોલિંગ" પ્રાઇમ્સ Fosb કોકેઈનના ફરીથી સંપર્કમાં આવવા પર આ પ્રદેશમાં ઇન્ડક્શન માટે . કોકેઈન પડકાર પછી જનીન પ્રમોટરમાંથી Pol II ના પ્રકાશનને ટ્રિગર કરે છે, જે વધુ ઝડપી Fosb ટ્રાન્સક્રિપ્શન માટે પરવાનગી આપે છે. કોકેઈન પડકાર NAc માં Fosb પ્રમોટર પર દમનકારી હિસ્ટોન ફેરફારોને પણ ઘટાડે છે , પરંતુ આવા દમનકારી ગુણને વધારે છે અને CPu માં સક્રિય ગુણ ઘટાડે છે.
આ પરિણામો ફોસ્બ પ્રમોટર પર ક્રોમેટિન ગતિશીલતામાં નવી સમજ આપે છે અને પ્રાઇમ્ડ માટે એક નવલકથા પદ્ધતિ જાહેર કરે છે ફોસ્બ કોકેઈનના ફરીથી સંપર્કમાં આવવા પર એનએસીમાં ઇન્ડક્શન.
પરિચય
ગંભીર પ્રતિકૂળ પરિણામો હોવા છતાં ડ્રગ વ્યસન અનિવાર્ય ડ્રગ શોધ અને લેવા દ્વારા વર્ગીકૃત થયેલ છે ( કાલિવ્સ એટ અલ., 2005 ; હાઇમેન એટ અલ., 2006 ). ક્રોનિક ડ્રગ એક્સપોઝર વેન્ટ્રલ સ્ટ્રાઇટમ (અથવા ન્યુક્લિયસ એકમ્બન્સ; NAc) અને ડોર્સલ સ્ટ્રાઇટમ (અથવા કૌડેટ પુટામેન; CPU), ડ્રગ રિવોર્ડ અને વ્યસનમાં ફસાયેલા સ્ટ્રાઇટલ સ્ટ્રક્ચર્સમાં જનીન અભિવ્યક્તિમાં સતત ફેરફારોનું કારણ બને છે ( ફ્રીમેન એટ અલ., 2001 ; રોબિન્સન અને કોલ્બ, 2004 ; શાહમ અને હોપ, 2005 ; મેઝ અને નેસ્લર, 2011 ). ΔFOSB, તાત્કાલિક-પ્રારંભિક જનીન, Fosb દ્વારા એન્કોડ કરાયેલ એક કાપેલું અને સ્થિર પ્રોટીન , એ NAc અને CPU માં વર્ચ્યુઅલ રીતે બધી દુરુપયોગની દવાઓના ક્રોનિક સંપર્ક દ્વારા પ્રેરિત એક સારી રીતે લાક્ષણિક ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળ છે, જ્યાં તે વારંવાર ડ્રગ એડમિનિસ્ટ્રેશન માટે સંવેદનશીલ વર્તણૂકીય પ્રતિભાવોમાં મધ્યસ્થી કરે છે ( નેસ્લર, 2008 ). જોકે, દુરુપયોગની દવાના પહેલાના ક્રોનિક સંપર્કમાં ΔFOSB ના અનુગામી ઇન્ડક્શનમાં ફેરફાર થાય છે કે કેમ તે અજાણ રહે છે.
અમે તાજેતરમાં અનુમાન લગાવ્યું હતું કે ક્રોનિક ડ્રગ એક્સપોઝરના પ્રતિભાવમાં ક્રોમેટિન ફેરફારો લક્ષ્ય મગજના પ્રદેશોમાં ચોક્કસ જનીનોની ઇન્ડ્યુસિબિલિટીમાં ફેરફાર કરી શકે છે ( રોબિસન અને નેસ્લેર, 2011 ). વધતા પુરાવા દર્શાવે છે કે ક્રોનિક વહીવટ પછી દુરુપયોગની દવાઓ ફોસ્ફોરાયલેશન, એસિટિલેશન અને હિસ્ટોન ટેઇલ્સના મેથિલેશન સહિત અનેક પ્રકારના ફેરફારો દ્વારા ક્રોમેટિનની રચના અને ટ્રાન્સક્રિપ્શનલ સુલભતામાં ફેરફાર કરે છે. સેલ કલ્ચર સિસ્ટમ્સમાં તાજેતરના કાર્યમાં "ઇન્ડ્યુસિબલ" જનીનોના પ્રમોટરને તેમના અભિવ્યક્તિ પહેલાં RNA પોલિમરેઝ II (Pol II) ની ભરતી પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કરવામાં આવ્યું છે, જેમાં Pol II પ્રોક્સિમલ પ્રમોટર પ્રદેશો અને ટ્રાન્સક્રિપ્શન સ્ટાર્ટ સાઇટ (TSS) ની આસપાસ "સ્થગિત" સ્થિતિમાં સતત બંધાયેલ છે ( કોર અને લિસ, 2008 ; નેચેવ અને એડેલમેન, 2008 ). પછી અટકેલા પોલ II નું સક્રિયકરણ પ્રમોટર અને TSS પ્રદેશોમાંથી તેના છટકી જવા અને આ "પ્રાઇમ્ડ" જનીનોના ટ્રાન્સક્રિપ્શન માટે જવાબદાર માનવામાં આવે છે ( ઝેઇટલિંગર એટ અલ., 2007 ; સાહા એટ અલ., 2011 ; બેટૈલે એટ અલ., 2012 ).
અહીં, અમે બતાવીએ છીએ કે કોકેઈનના પહેલાના ક્રોનિક એક્સપોઝર, ત્યારબાદ લાંબા સમય સુધી ઉપાડનો સમયગાળો, ફોસ્બ જનીનની ઇન્ડ્યુસિબિલિટીને અનુગામી કોકેઈન વહીવટમાં બદલી નાખે છે, જેમાં NAc ને ઇન્ડક્શન માટે પ્રાઇમ કરવામાં આવે છે જ્યારે CPu નથી. ત્યારબાદ અમે NAc અને CPu માં Fosb જનીન પ્રમોટર પર અલગ ક્રોમેટિન હસ્તાક્ષરો ઓળખીએ છીએ જે Fosb જનીનની આવા અસ્પષ્ટ ઇન્ડ્યુસિબિલિટી સાથે સંકળાયેલા છે , જેમાં ફક્ત NAc માં Fosb પ્રોક્સિમલ પ્રમોટર પર સ્થગિત પોલ II ની ભરતી તેમજ મગજના બંને પ્રદેશોમાં ઘણા સક્રિય અથવા દમનકારી હિસ્ટોન ફેરફારોમાં ફેરફારનો સમાવેશ થાય છે. આ પરિણામો ફોસ્બ જનીન પ્રમોટર પર ક્રોમેટિન ગતિશીલતામાં નવીન સમજ પ્રદાન કરે છે અને પ્રથમ વખત એવી પદ્ધતિ સૂચવે છે કે જેના દ્વારા પોલ II પ્રાઇમ્સને સ્થગિત કરવાથી કોકેઈનના ફરીથી સંપર્કમાં આવવા પર NAc માં વધુ સક્રિયકરણ માટે Fosb મળે છે.
સામગ્રી અને પદ્ધતિઓ
પ્રાણીઓ
બધા પ્રયોગોમાં ઉપયોગમાં લેવાતા નર સ્પ્રેગ ડોલી ઉંદરો (250-275 ગ્રામ; ચાર્લ્સ રિવર લેબોરેટરીઝ) ને 12 કલાકના પ્રકાશ/અંધારા ચક્ર (સવારે 7 વાગ્યે લાઇટ ચાલુ) પર આબોહવા-નિયંત્રિત રૂમમાં જોડીમાં રાખવામાં આવ્યા હતા, જેમાં ખોરાક અને પાણીની સુવિધા ઉપલબ્ધ હતી . બધા પ્રાણીઓને તેમના ઘરના પાંજરામાં કોકેન (15 મિલિગ્રામ/કિલો, ip) અથવા ખારા (ip) સાથે દસ દિવસ માટે દિવસમાં બે વાર ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યા હતા. માઉન્ટ સિનાઈ ખાતે સંસ્થાકીય પ્રાણી સંભાળ અને ઉપયોગ સમિતિ (IACUC) દ્વારા પ્રાણીઓના પ્રયોગોને મંજૂરી આપવામાં આવી હતી.
લોકોમોટર માપન
પ્રાણીઓને 1 કલાક માટે પ્રથમ દિવસે લોનોમોટર ચેમ્બરમાં વસવાટ કરવામાં આવ્યો હતો, અને પછી ફોટોબેમ પ્રવૃત્તિ સિસ્ટમ (સાન ડિએગો ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ્સ) નો ઉપયોગ કરીને સોલિન ઈન્જેક્શન પછી લોનોમોટર પ્રવૃત્તિ માટે દેખરેખ રાખવામાં આવી હતી. દરરોજ લોનોમોટર ચેમ્બરમાં 1 કલાકની વસતિ પછી, કોકેન (15 એમજી / કિગ્રા, આઈપી) ને 2 દિવસો માટે દરરોજ સંચાલિત કરવામાં આવતું હતું અને પ્રાણીઓને ફરીથી 1 કલાક માટે લોકમોટર પ્રવૃત્તિ માટે મોનિટર કરવામાં આવતું હતું.
ઇમ્યુનોહિસ્ટોકેમિસ્ટ્રી
પ્રાણીઓને તેમના છેલ્લા ડ્રગ એક્સપોઝર પછી 24 કલાક પરફ્યુઝ કરવામાં આવ્યા હતા. ΔFOSB/FOSB ઇમ્યુનોરેએક્ટિવિટી વર્ણવ્યા મુજબ મળી આવી હતી ( પેરોટી એટ અલ., 2004 ). વેસ્ટર્ન બ્લોટિંગે પુષ્ટિ આપી કે કોકેઈન ઇન્જેક્શન ΔFOSB ને પ્રતિબિંબિત કર્યા પછી 24 કલાક કે તેથી વધુ સમય સુધી ΔFOSB/FOSB જેવી ઇમ્યુનોરેએક્ટિવિટી જોવા મળી હતી, જેમાં FOSB શોધી શકાતું નથી (બતાવેલ નથી).
આરએનએ અલગતા, રિવર્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન, અને પીસીઆર
NAc અને ડોર્સોલેટરલ/ડોર્સોમેડિયલ CPu ના દ્વિપક્ષીય 12-ગેજ પંચ વર્ણવ્યા મુજબ મેળવવામાં આવ્યા હતા ( પેરોટી એટ અલ., 2004 ), સૂકા બરફ પર થીજીને પ્રકાશિત પ્રોટોકોલ અનુસાર પ્રક્રિયા કરવામાં આવી હતી ( કોવિંગ્ટન એટ અલ., 2011 ). ΔFOSB અને FOSB mRNA ને આઇસોફોર્મ વિશિષ્ટ ΔFOSB અને FOSB પ્રાઇમર્સ ( અલીભાઈ એટ અલ., 2007 ) સાથે જથ્થાત્મક PCR (qPCR) નો ઉપયોગ કરીને માપવામાં આવ્યા હતા . ΔFOSB અને FOSB mRNA સ્તરોને GAPDH mRNA સ્તરોમાં સામાન્ય બનાવવામાં આવ્યા હતા, જે કોકેઈનના સંપર્કથી પ્રભાવિત થયા ન હતા (બતાવેલ નથી).
વેસ્ટર્ન બ્લોટિંગ
ERK44/42 [એક્સ્ટ્રાસેલ્યુલર સિગ્નલ રેગ્યુલેટેડ કાઇનેજ-44/42] અને ફોસ્ફોERK44/42 (pERK), AKT [થાઇમોમા વાયરલ પ્રોટો-ઓન્કોજીન] અને p-AKT, SRF ( સીરમ રિસ્પોન્સ ફેક્ટર ), અને pSRF, CREB [cAMP રિસ્પોન્સ એલિમેન્ટ બાઇન્ડિંગ પ્રોટીન], અને pCREB સામે એન્ટિબોડીઝનો ઉપયોગ કરીને, NAc અને CPU પંચ ઉપર જણાવ્યા મુજબ એકત્રિત કરવામાં આવ્યા હતા અને વેસ્ટર્ન બ્લોટિંગ માટે પ્રક્રિયા કરવામાં આવી હતી (કોવિંગ્ટન એટ અલ., 2011). દરેક લેન પર બ્લોટ કરેલા પ્રોટીનની માત્રા એક્ટિન અથવા ટ્યુબ્યુલિનના સ્તર સુધી સામાન્ય કરવામાં આવી હતી, જે કોકેઇનના સંપર્કથી પ્રભાવિત ન હતા.
Chromatin ઇમ્યુનોપેરેઇગ (ચિપ)
વર્ણવ્યા મુજબ ChIP માટે તાજા વિચ્છેદિત NAc અને CPu પંચ તૈયાર કરવામાં આવ્યા હતા ( Maze et al., 2010 ). દરેક પ્રાયોગિક સ્થિતિનું વિશ્લેષણ પ્રાણીઓના સ્વતંત્ર જૂથોમાંથી ત્રિપુટીમાં કરવામાં આવ્યું હતું. દરેક ChIP નમૂના માટે, દ્વિપક્ષીય NAc અને CPu પંચ પાંચ ઉંદરો (10 પંચ) માંથી એકત્રિત કરવામાં આવ્યા હતા. ચોક્કસ હિસ્ટોન ફેરફારો માટે ઉપયોગમાં લેવાતા એન્ટિબોડીઝ પ્રકાશિત થયેલા ( Maze et al., 2010 ) જેવા જ છે ; તેના કાર્બોક્સિલ ટર્મિનલ ડોમેન (CTD) રિપીટ રિજન (Pol II-pSer5) ના Ser5 પર ફોસ્ફોરીલેટેડ Pol II માટે એન્ટિબોડીઝ abcam 5131 માંથી મેળવવામાં આવ્યા હતા. Fosb માટે ChIP પ્રાઇમર્સના ચાર સેટ ડિઝાઇન કરવામાં આવ્યા હતા ( Lazo et al., 1992 ; Mandelzys et al., 1997 ): 1F: GTACAGCGGAGGTCTGAAGG, 1R: GAGTGGGATGAGATGCGAGT; 2F: CATCCCACTCGGCCATAG, 2R: CCACCGAAGACAGGTACTGAG; 3F: GCTGCCTTTAGCCAATCAAC, 3R: CCAGGTCCAAAGAAAGTCCTC; 4F: GGGTGTTTGTGTGGTGG, 4R: AGAGGAGGCTGGACAGAACC. વર્ણવ્યા મુજબ ઇનપુટ DNA માટે ક્રોમેટિન ફેરફારોના સ્તરોની તુલના કરવામાં આવે છે ( મેઝ એટ અલ., 2010 ).
આંકડાકીય વિશ્લેષણ
અહેવાલ કરેલા બધા મૂલ્યો સરેરાશ છે - સેલ-ગણતરી માટે લોમમોટર પ્રવૃત્તિ અને સેલ-ગણતરી માટેના ડેટાનું વિશ્લેષણ બે-માર્ગ એનોવા દ્વારા સારવાર અને ઈન્જેક્શન સાથે પરિબળો તરીકે કરવામાં આવ્યું. QPCR પ્રયોગોનું પરિબળ તરીકે સારવાર સાથે વન-વે એનોવા દ્વારા સમય સમય દીઠ વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું. જ્યારે નોંધપાત્ર મુખ્ય અસરો જોવા મળી હતી (પી <0.05), બોનફ્રોરોની પોસ્ટ-હોક પરીક્ષણો ડ્રગ-નિષ્કપટ ક્ષારયુક્ત પશુઓ (^ આંકડાઓમાં) અને ડ્રગ-નિષ્કપટ કોકેન-સારવારવાળા પ્રાણીઓ (આંકડાઓમાં) ની તુલના માટે લેવામાં આવી હતી. બહુવિધ તુલનામાં સુધારણા સાથે, વેસ્ટર્ન બ્લotટિંગ અને ચિપ ડેટા માટે અનપાયર્ડ બે-પૂંછડીવાળા વિદ્યાર્થી ટી-પરીક્ષણોનો ઉપયોગ કરવામાં આવતો હતો.
પરિણામો
ગ્રેટર કોકેન-અનુભવી ઉંદરોના એનએસીમાં, પરંતુ સી.પી.યુ. માં Fosb inducibility
કોકેઈનના પહેલાના ક્રોનિક કોર્સના પ્રભાવની તપાસ કરવા માટે, ત્યારબાદ લાંબા સમય સુધી ઉપાડનો સમયગાળો, કોકેઈન પડકારના પ્રતિભાવમાં ફોસ્બ જનીનની ઇન્ડ્યુસિબિલિટી પર, જે ઉંદરોને પહેલા 10 દિવસ માટે ખારા અથવા કોકેઈન (15 મિલિગ્રામ/કિગ્રા) સાથે દરરોજ બે વાર ip ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યા હતા, તેમને 28 દિવસના ઉપાડ પછી દવાના પડકાર ડોઝ આપવામાં આવ્યા હતા ( આકૃતિ 1A ). અમે સૌપ્રથમ પ્રાણીઓના એક જૂથમાં લોકોમોટર પ્રતિભાવો માપ્યા જેથી કોકેઈનના પહેલાના સંપર્ક દ્વારા લોકોમોટર સંવેદનશીલતાના ઇન્ડક્શનની પુષ્ટિ થાય, જે ડ્રગ વહીવટનું અપેક્ષિત કાયમી પરિણામ હતું. કોકેઈનનો અનુભવ ધરાવતા અને -ભોળા ઉંદરોએ સમાન બેઝલાઇન લોકોમોટર પ્રવૃત્તિ દર્શાવી, જેમાં ડ્રગ-ભોળા પ્રાણીઓ સામે કોકેઈન પડકાર તેમના ગતિમાં વધારો કરે છે ( આકૃતિ 1B . પુનરાવર્તિત માપ દ્વિ-માર્ગી ANOVA, સારવાર: F 1,66 =30.42, p<0.0001; કોકેઈન પડકાર: F 2,66 =58.39, p<0.0001; સારવાર x કોકેઈન પડકાર: F 2,66 =8.56, p=0.0005, બોનફેરોની પોસ્ટ-ટેસ્ટ ^ p<0.001). આ કોકેઈન પડકારે કોકેઈન-અનુભવી ઉંદરોમાં નોંધપાત્ર રીતે વધુ લોકોમોટર પ્રવૃત્તિ, એટલે કે, સંવેદનશીલતા પ્રેરિત કરી (બોનફેરોની પોસ્ટ-ટેસ્ટ *p<0.001).
એનએસી અને સીપીયુમાં ΔFOSB અભિવ્યક્તિ પર આ કોકેન-પ્રેટરેટમેન્ટ રેજીમેન્સની અસરોનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે, અમે Δફોસબી પ્રોટીનને માપ્યું છે જેમાં ઇમ્યુનોહિસ્ટોકેમિકલ પદ્ધતિઓનો સમાવેશ થાય છે. 24 કલાક કોકેન-નાઇવ પછી કોકેઈન-અનુભવી પ્રાણીઓ અને કોકેન-અનુભવી પ્રાણીઓને 0, 1, 3, અથવા 6 દૈનિક કોકેન પડકાર સાથે સારવાર આપવામાં આવી હતી. ઇન્જેક્શન (15 એમજી / કિલો; જુઓ ફિગ 1A). અગાઉ સ્થાપના કરી હતીનયે એટ અલ., 1995), એક્સએનએક્સએક્સ કોકેઇન ઇન્જેકશન નોંધપાત્ર રીતે નૅક અને સી.પી.યુ.માં એફઓએસબી પ્રોટીનને પ્રેરિત કરવા માટે પૂરતા હતા અને કોકેઇન ઈન્જેકશનના 3 દિવસ પછી તેનું સંચય નોંધપાત્ર રહ્યું હતું (ફિગ 1C. પુનરાવર્તિત પગલાં બે માર્ગો ANOVA, એનએસી કોર, સારવાર: એફ1,28= 23.5, પી <0.0001; કોકેન પડકાર: એફ3,28= 49.16, પી <0.0001; સારવાર એક્સ કોકેન પડકાર: એફ3,28= 6.83, પૃષ્ઠ = 0.0014; એનએસી શેલ, સારવાર: એફ1,28= 18.69, પી <0.0001; કોકેન પડકાર: એફ3,28= 31.52, પી <0.0001; સારવાર એક્સ કોકેન પડકાર: એફ3,28= 3.21, પી <0.05; સીપીયુ, સારવાર: એફ1,28= 9.47, પી <0.001; કોકેન પડકાર: એફ3,28= 19.74, પી <0.0001; સારવાર એક્સ કોકેન પડકાર: એફ3,28= 0.94, પી> 0.05. એનએસી કોર, શેલ અને સીપીયુ, બોનફ્રોરોની પોસ્ટ-પરીક્ષણોમાં ^પી <0.05). કોકેન-અનુભવી પ્રાણીઓમાં, ઉપાડના 28 દિવસ પછી પણ એનએસી અથવા સીપીયુમાં ફોસબ ઇન્ડક્શન ચાલુ રાખવાનો કોઈ પુરાવો નથી, અગાઉના અહેવાલો સાથે સુસંગત છે કે timeફોસબી સિગ્નલ આ સમય બિંદુ દ્વારા સંપૂર્ણપણે વિખેરાઈ જાય છે (નયે એટ અલ., 1995), આ અભ્યાસમાં આ સમયનો ઉપયોગ થતો હતો. આશ્ચર્યજનક રીતે, જો કે, કોકેન-અનુભવી ઉંદરો જે 3 અથવા 6 કોકેઈન પડકાર ઇન્જેક્શન્સ પ્રાપ્ત કરે છે તે દર્શાવે છે કે એનએસીમાં મોટા પ્રમાણમાં ΔFOSB પ્રોટીન ઇન્ડક્શન, કોર અને શેલ પેટાવિભાગોમાં દેખીતી અસર (ફિગ 1C. બોનફરોની પોસ્ટ-ટેસ્ટ્સ * પી <0.05). તેનાથી વિપરિત, સીપીયુમાં osફોસબી પ્રોટીનનું આટલું મોટું ઇન્ડક્શન જોવા મળ્યું નથી; તેના બદલે, સમાન ક્ષેત્રમાં - FOSB ઇન્ડક્શન 3 અથવા 6 દિવસ પછી કોકેન-નેવ અને -અનુભવી ઉંદરોમાં કોકેઇન ચેલેન્જ ઇન્જેક્શન પછી આ ક્ષેત્રમાં જોવા મળ્યું હતું.ફિગ 1C).
કોકેઈન પડકારના પ્રતિભાવમાં NAc અને CPU માં થતા ટ્રાન્સક્રિપ્શનલ ફેરફારોની સમજ મેળવવા માટે, અમે 28 દિવસના ઉપાડ પછી કોકેઈન-ભોળા અને અનુભવી ઉંદરોને આપવામાં આવેલા એક જ કોકેઈન અથવા ખારા ઈન્જેક્શન પર ΔFOSB અને FOSB mRNA ટ્રાન્સક્રિપ્ટ્સની ઇન્ડ્યુસિબિલિટીના સમય અભ્યાસક્રમ (45, 90, અને 180 મિનિટ)નો અભ્યાસ કર્યો ( આકૃતિ 1A જુઓ ). ખારા પડકારની તુલનામાં, કોકેઈન પડકારે કોકેઈન-ભોળા પ્રાણીઓના NAc અને CPu બંનેમાં ત્રણેય સમય બિંદુઓ પર ΔFOSB અને FOSB mRNA સ્તરોમાં ઝડપી વધારો પ્રેરિત કર્યો ( આકૃતિ 1D . પુનરાવર્તિત માપ પ્રતિ સમય બિંદુ એક રીતે ANOVA; બોનફેરોની પોસ્ટ-ટેસ્ટ ^ p<0.05). NAc માં, અમે કોકેઈન પડકાર પછી કોકેઈન-ભોળા પ્રાણીઓની તુલનામાં કોકેઈન-અનુભવી પ્રાણીઓમાં વધુ ΔFOSB અને FOSB mRNA ઇન્ડક્શન જોયું, જેની અસર 90 મિનિટ પર નોંધપાત્ર હતી જ્યારે, તેનાથી વિપરીત, CPU માં ΔFOSB અને FOSB mRNA ની ઇન્ડ્યુસિબિલિટી કોકેઈન-અનુભવી પ્રાણીઓમાં નોંધપાત્ર રીતે ઘટી હતી ( આકૃતિ 1D . બોનફેરોની પોસ્ટ-ટેસ્ટ % p=0.08, *p<0.05).
કોકેન-અનુભવી ઉંદરોના એનએસી અને સીપીયુમાં અપસ્ટ્રીમ સિગ્નલિંગ પાથવેઝનું લક્ષણ
કોકેઈનના પહેલાના ક્રોનિક કોર્સ પછી NAc અને CPu માં Fosb જનીનની બદલાયેલી ઇન્ડ્યુસિબિલિટી માટે એક શક્ય સમજૂતી એ છે કે કોકેઈન એક્સપોઝરનો દૂરસ્થ ઇતિહાસ ફોસ્બ જનીન ઇન્ડક્શનના અપસ્ટ્રીમ સિગ્નલિંગ માર્ગોમાં કાયમી ફેરફારો લાવી શકે છે જેથી કોકેઈન પડકાર પછી જનીનને અસામાન્ય ડિગ્રી તરફ પ્રેરિત કરે. આ પૂર્વધારણાનો અભ્યાસ કરવા માટે, અમે બે ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળો, SRF અને CREB નું વિશ્લેષણ કર્યું, જે તાજેતરમાં આ મગજના પ્રદેશોમાં ΔFOSB ના કોકેઈન ઇન્ડક્શન માટે જરૂરી હોવાનું દર્શાવવામાં આવ્યું છે ( વિઆલોઉ એટ અલ., 2012 ) અપસ્ટ્રીમ પ્રોટીન કિનેસેસ, ERK અને AKT સાથે, જે કોકેઈન ક્રિયામાં પણ સામેલ છે ( વાલજેન્ટ એટ અલ., 2000 ; લુ એટ અલ., 2006 ; બૌડ્રેઉ એટ અલ., 2009 ). અમે આ વિવિધ પ્રોટીનના કુલ અથવા ફોસ્ફોરીલેટેડ સ્તરોમાં કોઈપણ ફેરફારો શોધવામાં નિષ્ફળ રહ્યા જે Fosb ની બદલાયેલી ઇન્ડ્યુસિબિલિટીને સમજાવી શકે , જેમાં SRF, CREB, અથવા AKT માં કોઈ ફેરફારનો સમાવેશ થતો નથી ( આકૃતિ 2B, C ). કોકેઈન પડકારના પ્રતિભાવમાં NAc માં pSRF અને pCREB માં ફેરફારનો અભાવ તાજેતરના અહેવાલ સાથે સુસંગત છે, જેમાં બંને ફક્ત ક્રોનિક કોકેઈન દ્વારા નોંધપાત્ર રીતે પ્રેરિત હોવાનું જાણવા મળ્યું છે ( વિઆલોઉ એટ અલ., 2012 ).
ડ્રગ-ભોળા પ્રાણીઓના NAc અને CPu માં, પ્રારંભિક ડ્રગ એક્સપોઝર પછી 20 મિનિટ પછી ( આકૃતિ 2A ), એક જ કોકેઈન ચેલેન્જથી pERK42/44 ના સ્તરમાં ઘટાડો થયો ( આકૃતિ 2B, C. બે પૂંછડીવાળા વિદ્યાર્થી ટી-ટેસ્ટ: *p<0.05). તીવ્ર કોકેઈન એડમિનિસ્ટ્રેશન પછી આ પ્રદેશોમાં PERK સ્તરમાં વધારો થયો હોવાના અગાઉના અહેવાલો છે ( વાલજેન્ટ એટ અલ., 2000 ). વારંવાર કોકેઈન ઇન્જેક્શનમાંથી ઉપાડ દરમિયાન NAc માં ERK ફોસ્ફોરાયલેશનની તપાસ કરતા અન્ય પેપર્સ સાથે આની તુલના કરવી મુશ્કેલ છે ( બૌડ્રેઉ એટ અલ., 2007 ; શેન એટ અલ., 2009 ), જેમ કે અમારા અભ્યાસમાં PERK ને ઉપાડના 28 દિવસ પછી અને કોકેઈન અથવા સલાઈન ચેલેન્જ પછી માપવામાં આવ્યું હતું. કોકેઈનનો અનુભવ કરનારા ડ્રગ-ભોળા પ્રાણીઓની સરખામણીમાં, કોકેઈનનો અનુભવ કરનારા ઉંદરોમાં, 28 દિવસના ઉપાડ પછી, કોકેઈનના ફરીથી સંપર્કમાં આવવાથી, CPu માં pERK42/44 સ્તરમાં નોંધપાત્ર વધારો થયો ( આકૃતિ 2B, C. બે પૂંછડીવાળા વિદ્યાર્થી ટી-ટેસ્ટ: *p<0.05).
પર Chromatin લેન્ડસ્કેપ કોકેન-અનુભવી ઉંદરોના એનએસી અને સીપીયુમાં ફોસ્બ જિન પ્રોમોટર
અમે આગળ તપાસ કરી કે શું Fosb જનીન ઇન્ડ્યુસિબિલિટીમાં ફેરફાર તેના ક્રોમેટિન માળખામાં ફેરફાર સાથે સંકળાયેલા છે. હિસ્ટોન ફેરફારોના ત્રણ સારી રીતે લાક્ષણિકતાવાળા સ્વરૂપો સામે નિર્દેશિત એન્ટિબોડીઝનો ઉપયોગ કરીને NAc અને CPu પર ChIP કરવામાં આવ્યું હતું: જનીન સક્રિયકરણ સાથે સંકળાયેલ હિસ્ટોન H3 (H3K4me3) ના Lys4 નું ટ્રાઇમેથિલેશન, અને જનીન દમન સાથે સંકળાયેલ H3K27me3 અને H3K9me2. અમે કોકેનના પડકાર ઇન્જેક્શન વિના અથવા સાથે 28 દિવસના ઉપાડ પછી કોકેન-ભોળા અને અનુભવી ઉંદરોનું વિશ્લેષણ કર્યું, 1 કલાક પછી પ્રાણીઓની તપાસ કરવામાં આવી ( આકૃતિ 3A ). NAc માં, અમને કોકેન પડકારની ગેરહાજરીમાં Fosb જનીન પ્રમોટર સાથે આ ત્રણ હિસ્ટોન ફેરફારોમાંથી કોઈપણના બંધનમાં કોઈ નોંધપાત્ર ફેરફારો જોવા મળ્યા નથી , જોકે H3K9me2 ના સ્તરમાં ઘટાડો થવાનો વલણ હતો ( આકૃતિ 3B-D . બે પૂંછડીવાળો વિદ્યાર્થી ટી-ટેસ્ટ. # p=0.2 સંબંધિત ડ્રગ નેઇવ નિયંત્રણોની તુલનામાં). કોકેઈન ચેલેન્જ પછી આ અસર નોંધપાત્ર બની હતી અને જનીનના પ્રોક્સિમલ પ્રમોટર પ્રદેશ માટે ચોક્કસ હતી ( આકૃતિ 3C . *p<0.05). જ્યારે કેટલાક જનીનો પર H3K9me2 નું સ્તર ખૂબ ઓછું હોય છે, ત્યારે Fosb જનીન પ્રમોટર નિયંત્રણ પરિસ્થિતિઓમાં NAc માં આ માર્કનું નોંધપાત્ર સ્તર દર્શાવે છે ( મેઝ એટ અલ., 2010 , ડેટા બતાવેલ નથી). તેનાથી વિપરીત, CPu માં, અમને H3K4me3 બંધનમાં નાના પરંતુ નોંધપાત્ર ઘટાડા અને H3K27me3 બંધનમાં વધારો જોવા મળ્યો, Fosb પ્રમોટર પર કોકેઈન ચેલેન્જની ગેરહાજરીમાં, પડકાર પછી અસરો ગુમાવી દીધી ( આકૃતિ 3D . *p<0.05).
અમે આગળ Fosb જનીન સાથે Pol II બંધનકર્તાની તપાસ કરી , જે સેલ કલ્ચરમાં તાજેતરના તારણોના આધારે કરવામાં આવ્યું હતું કે TSSs પર Pol II નું સ્ટોલીંગ, જે તેના CTD રિપીટ ક્ષેત્રમાં Ser 5 પર ફોસ્ફોરાયલેશન દ્વારા વર્ગીકૃત થયેલ છે, તે જનીનોના પ્રાઇમિંગ સાથે સંકળાયેલ છે (પરિચય જુઓ). આમ અમે જનીનના ચાર અલગ અલગ પ્રદેશોમાં Fosb સાથે Pol II-pSer5 બંધનકર્તાનું વિશ્લેષણ કર્યું ( આકૃતિ 3B ). આ વિશ્લેષણમાં લાંબા સમય સુધી ઉપાડ પછી, નિયંત્રણોની તુલનામાં કોકેઈન પડકારની ગેરહાજરીમાં, કોકેઈન-અનુભવી પ્રાણીઓના NAc માં તેના પ્રોક્સિમલ પ્રમોટર પ્રદેશમાં અને તેના TSS ની આસપાસ Fosb જનીન પર Pol II-pSer5 નું નોંધપાત્ર સંવર્ધન જાહેર થયું ( આકૃતિ 3E . *p<0.05). આ સંવર્ધન Fosb ના બે જનીન બોડી પ્રદેશોમાં સ્પષ્ટ નહોતું , જે સરળ પ્રાયોગિક સિસ્ટમોમાં વર્ણવેલ Pol II નું સ્ટોલીંગ સાથે સુસંગત હતું. રસપ્રદ વાત એ છે કે, કોકેઈન પડકાર પછી, Pol II-pSer5 બંધનકર્તાએ હજુ પણ સંવર્ધનના સંકેતો દર્શાવ્યા હતા, જોકે હવે તે નોંધપાત્ર રીતે નથી, Fosb પ્રોક્સિમલ પ્રમોટર પ્રદેશ ( આકૃતિ 3E . % p=0.1) પર, પરંતુ TSS પર નિયંત્રણ સ્તરો પર પાછા ફર્યા. CPu માં તારણો વધુ ચલ હતા, Pol II-pSer5 બંધનકર્તાની કોઈ સ્પષ્ટ પેટર્ન જોવા મળી ન હતી.
ચર્ચા
આ અભ્યાસ કોકેઈનના વારંવાર સંપર્કમાં આવવાના બંધ થયાના અઠવાડિયા પછી ફોસ્બના સતત નિયમનમાં નવી સમજ આપે છે . અમે બતાવીએ છીએ કે અગાઉના ક્રોનિક કોકેઈન વહીવટ NAc માં ફોસ્બ જનીનને વધુ પ્રેરક બનાવે છે, જેના પરિણામે દવાના ફરીથી સંપર્કમાં આવવા પર ΔFOSB નું ઝડપી સંચય થાય છે. NAc માં ΔFOSB ઇન્ડક્શન કોકેઈન પ્રત્યે સંવેદનશીલ વર્તણૂકીય પ્રતિભાવોમાં મધ્યસ્થી કરે છે તેના પુરાવાઓની પ્રબળતાને ધ્યાનમાં રાખીને ( નેસ્લેર, 2008 ), અમારા તારણો લાંબા સમય સુધી ઉપાડ પછી આવા સંવેદનશીલ પ્રતિભાવોના વધુ ઝડપી પુનઃસ્થાપન માટે એક નવીન પદ્ધતિ જાહેર કરે છે.
અમે દર્શાવીએ છીએ કે NAc માં ΔFOSB નું ઉન્નત ઇન્ડક્શન Fosb જનીનમાં ક્રોમેટિન ફેરફારો સાથે સંકળાયેલું છે જે તેને વધુ ઇન્ડક્શન માટે પ્રાઇમ કરવાની અપેક્ષા રાખવામાં આવશે. આમ, અમે ક્રોનિક કોકેન વહીવટમાંથી 4 અઠવાડિયાના ઉપાડ પછી હાજર જનીનના પ્રોક્સિમલ પ્રમોટર અને TSS પ્રદેશો સાથે પોલ II ના જોડાણમાં વધારો બતાવીએ છીએ. TSS પર આવા પોલ II સંવર્ધન કોકેન પડકાર પર ઝડપથી ખોવાઈ જાય છે અને Fosb ઇન્ડક્શન, કોષ સંસ્કૃતિમાં એક મોડેલ સાથે સુસંગત છે જે પોલ II ને જનીન સક્રિયકરણ પર TSS માંથી મુક્ત કરવામાં આવે છે (પરિચય જુઓ). કોકેન પડકાર H3K9me2 ના બંધનમાં ઝડપી ઘટાડો પણ પ્રેરે છે - જનીન દમનનું ચિહ્ન - Fosb પ્રમોટરને. તેનાથી વિપરીત, અમને ઘણા ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળો, અથવા તેમના અપસ્ટ્રીમ કિનાસેસનો કોઈ કાયમી ઇન્ડક્શન મળ્યો નથી, જે મધ્યસ્થી કરવા માટે જાણીતા છે Fosb કોકેન દ્વારા ઇન્ડક્શન. આ પરિણામો અમારી પૂર્વધારણાને સમર્થન આપે છે કે NAc માં ΔFOSB નું ઉન્નત ઇન્ડક્શન Fosb જનીનના એપિજેનેટિક પ્રાઇમિંગ દ્વારા મધ્યસ્થી કરવામાં આવે છે અને અપસ્ટ્રીમ ઇવેન્ટ્સના અપરેગ્યુલેશન દ્વારા નહીં.
CPu માટે ખૂબ જ અલગ પરિણામો પ્રાપ્ત થયા. કોકેઈન પડકાર પહેલાં કોકેઈન-અનુભવી ઉંદરોમાં Fosb પર પોલ II ના સ્ટોલ થવાના કોઈ પુરાવા નહોતા , જોકે જનીન દમન સાથે સુસંગત નાના પરંતુ નોંધપાત્ર હિસ્ટોન ફેરફારો હતા: H3K27me3 બંધનકર્તામાં વધારો અને H3K4me3 બંધનકર્તામાં ઘટાડો. Fosb ઇન્ડક્શનમાં ઘટાડો સાથે સુસંગત અપસ્ટ્રીમ ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળો અથવા કિનાસેસમાં પણ કોઈ ફેરફાર થયો ન હતો. આ તારણો સૂચવે છે કે ક્રોનિક કોકેઈન વહીવટ પછી, એપિજેનેટિક ફેરફારો CPu માં Fosb જનીન ઇન્ડ્યુસિબિલિટીને ઘટાડવા માટે સેવા આપે છે, જે NAc માં જોવા મળતા પ્રાઇમિંગથી વિપરીત છે. જો કે, જ્યારે આ અસરો કોકેઈનના ફરીથી સંપર્કમાં આવવા પર ΔFosB mRNA ઇન્ડક્શનને દબાવી દે છે, ત્યારે ΔFosB પ્રોટીનના સંચયમાં કોઈ નુકસાન થતું નથી. આ વિરોધાભાસ હેઠળની પદ્ધતિને હવે વધુ તપાસની જરૂર છે.
વધુ સામાન્ય રીતે, અમારા પરિણામો એક મોડેલને સમર્થન આપે છે જ્યાં ક્રોનિકા કોકેઈન એડ્મિનિસ્ટ્રેશનના પ્રતિભાવમાં વિશિષ્ટ જનીનો પર ક્રોમેટિન લેન્ડસ્કેપમાં ફેરફાર એ તે જનીનોને પ્રાથમિકતા આપે છે અથવા તે પછીના ઇન્જેક્શન માટે ડ્રગના ફરીથી સંપર્કમાં આવે છે. આવા વર્ણકોષીય ફેરફારો, જેને "એપિજેનેટિક સ્કાર્સ" તરીકે જોવામાં આવે છે, તે જીન્સના સ્થિર રાજ્ય એમઆરએનએ સ્તરના વિશ્લેષણમાં ચૂકી જશે. આ રીતે, વ્યસનના ઉપદ્રવની લાક્ષણિકતા વિકૃતિના પરમાણુ પેથોજેનેસિસ વિશે તાજા માહિતી જાહેર કરવા વચન આપે છે, જે નવા ઉપાયોના વિકાસ માટે માઇન્ડ કરી શકાય છે.
સંદર્ભ
- અલીભાઇ આઈ, ગ્રીન ટીએ, પોટાશિન જેએ, નેસ્લેર ઇજે. એફઓએસબી અને ડેલ્ટાફોસબી એમઆરએનએ અભિવ્યક્તિનું નિયમન: વિવો અને ઇન વિટ્રો અભ્યાસમાં. મગજનો અનાદર 2007;1143: 22-33. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]
- બેટૈલે એઆર, જેરોનિમો સી, જેક્સ પીઇ, લરામી એલ, ફોર્ટિન એમ, ફોરેસ્ટ એ, બર્જરન એમ, હેન્સ એસડી, રોબર્ટ એફ. યુનિવર્સલ આરએનએ પોલિમરેઝ II સીટીડી સાયકલ ઇઝેક્સ્ટ્રેટેડ છે જે જિનેસિસ સાથે કિનાઝ, ફોસ્ફેટાસ અને ઇસોમેરેઝ એન્ઝાઇમ્સ વચ્ચેનું સંકલન કરે છે. મોલ સેલ. 2012;45: 158-170. [પબમેડ]
- બૌદ્રેઉ એસી, રિમર્સ જેએમ, મિલોવોનોવિક એમ, વુલ્ફ એમ. કોકેઈન ઉપાડ દરમિયાન વધારો થતાં ઉંદર ન્યુક્લિયસમાં કોષની સપાટી એએમપીએ રીસેપ્ટર્સ વધે છે પરંતુ કોટિન પડકાર પછી મિત્જેન-સક્રિય પ્રોટીન કેનાસમાં સક્રિય સક્રિયકરણ સાથે જોડાણમાં આંતરિક થાય છે. જે ન્યૂરોસી 2007;27: 10621-10635. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]
- બૌદ્રેઉ એસી, ફેરારીયો સીઆર, ગ્લક્સમેન એમજે, વુલ્ફ એમ. સિગ્નલિંગ પાથવે અનુકૂલન અને નવલકથા પ્રોટીન કાઇનેઝ એ સબસ્ટ્રેટ્સને કોકેઈન માટે વર્તણૂક સંવેદનશીલતા સાથે સંબંધિત છે. જે ન્યુરોકેમ. 2009;110: 363-377. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]
- કોર એલજે, લિસ્સ જેટી. આરએનએ પોલિમરેઝ II ના પ્રમોટર-પ્રોક્સિમાલ થોભો દ્વારા ટ્રાન્સક્રિપ્શન નિયમન. વિજ્ઞાન 2008;319: 1791-1792. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]
- કોવિંગ્ટન HE, 3rd, મેઝ આઈ, સન એચ, બોમ્ઝ એચએમ, ડેમાઇઓ કેડી, વુ ઇવાય, ડાયટ્ઝ ડીએમ, લોબો એમકે, ઘોસ એસ, મોઝોન ઇ, નેવ આરએલ, તમિંગા સીએ, નેસ્લેર ઇજે. કોકેન-પ્રેરિત નબળાઈમાં તાણમાં હિસ્ટોન મેથિલિએશન માટે દમનની ભૂમિકા. ચેતાકોષ 2011;71: 656-670. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]
- ફ્રીમેન ડબલ્યુએમ, નાડર એમએ, નાડર એસએ, રોબર્ટસન ડીજે, ગીયોઆ એલ, મિશેલ એસએમ, દૌનીસ જેબી, પોરિનો એલજે, ફ્રીડમેન ડીપી, વ્રના કે. બિન-માનવીય સજીવ ન્યુક્લિયસમાં ક્રોનિક કોકેન-મધ્યસ્થી ફેરફારો જેન અભિવ્યક્તિને સંલગ્ન કરે છે. જે ન્યુરોકેમ. 2001;77: 542-549. [પબમેડ]
- હાયમેન એસઈ, મલેન્કા આરસી, નેસ્લેર ઇજે. વ્યસનની ન્યુરલ મિકેનિઝમ્સ: ઇનામ-સંબંધિત શિક્ષણ અને મેમરીની ભૂમિકા. અન્ના રેવ ન્યૂરોસી 2006;29: 565-598. [પબમેડ]
- કાલિવાસ પીડબ્લ્યુ, વોલ્કો એન, સીમન્સ જે. અનમેનેબલ ઇનટ્રેશન ઇન વ્યસન: પ્રીથેન્ટલ-એસેમ્બન્સ ગ્લુટામેટ ટ્રાન્સમિશનમાં પેથોલોજી. ચેતાકોષ 2005;45: 647-650. [પબમેડ]
- લાઝો પીએસ, ડોર્ફમેન કે, નોગુચી ટી, મટેઇ એમજી, બ્રાવો આર. સ્ટ્રોકચર અને ફોસબી જીનનું મેપિંગ. એફઓએસબી ફોસબી પ્રમોટર્સની પ્રવૃત્તિને ડાઉનગ્રેટ કરે છે. ન્યૂક્લીક એસીડ્સ રિસ. 1992;20: 343-350. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]
- લુ એલ, કોઆ ઇ, ઝાઈ એચ, હોપ બીટી, શાહમ વાય. કોકેઈન વ્યસનમાં ERK ની ભૂમિકા. પ્રવાહો ન્યૂરોસી 2006;29: 695-703. [પબમેડ]
- મંડેલ્ઝીસ એ, ગ્રુડા એમએ, બ્રાવો આર, મોર્ગન જી. કેનિક એસિડ-સારવારના FOSB નલ ઉંદરના મગજમાં સતત સતત ઉન્નત 37 કેડીએ ફોસ-સંબંધિત એન્ટિજેન અને એપી-એક્સ્યુએનએક્સ-જેવી ડીએનએ-બાઇન્ડિંગ પ્રવૃત્તિની ગેરહાજરી. જે ન્યૂરોસી 1997;17: 5407-5415. [પબમેડ]
- રસ્તા હું, નેસ્લેર ઇજે. વ્યસન ની epigenetic લેન્ડસ્કેપ. એન એન એકડ વૈજ્ઞાનિક 2011;1216: 99-113. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]
- મેઝ 1, કોવિંગ્ટન HE, 3rd, ડાયટ્ઝ ડીએમ, લાપ્લૅન્ટ ક્યૂ, રાંથલ ડબ્લ્યુ, રુસો એસજે, મિકેનિક એમ, મોઝોન ઇ, નેવ આરએલ, હાગર્ટ્ટી એસજે, રેન વાય, સંપથ એસસી, હર્ડ વાયએલ, ગ્રેન્ગાર્ડ પી, ટેરાખોવસ્કી એ, સ્કેફર એ, નેસ્લેર ઇજે. કોકેન-પ્રેરિત પ્લાસ્ટિસિટીમાં હિસ્ટોન મેથિલટ્રાન્સફેરેઝ G9A ની આવશ્યક ભૂમિકા. વિજ્ઞાન 2010;327: 213-216. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]
- નેચેવ એસ, એડલમેન કે. પ્રમોટર્સ-પ્રોક્સિમલ પોલ II: જ્યારે વસ્તુઓ ગતિમાં સ્થિર થાય છે. સેલ સાયકલ. 2008;7: 1539-1544. [પબમેડ]
- નેસ્લેર ઇજે. સમીક્ષા કરો. વ્યસનની ટ્રાન્સક્રિપ્શન પદ્ધતિઓ: ડેલ્ટાફોસબીની ભૂમિકા. ફિલોસ ટ્રાન્સ આર સોસ લોન્ડ બી બાયોલ સાયન્સ. 2008;363: 3245-3255. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]
- નયે હે, હોપ બીટી, કેલ્ઝ એમબી, ઇડારોલા એમ, નેસ્લેર ઇજે. સ્ટ્રેટમ અને ન્યુક્લિયસ સંક્ષિપ્તમાં કોકેન દ્વારા ક્રોનિક એફઓએસ-સંબંધિત એન્ટિજેન ઇન્ડક્શનના નિયમનના ફાર્માકોલોજિકલ અભ્યાસ. જે ફાર્માકોલ એક્સપ થેર. 1995;275: 1671-1680. [પબમેડ]
- પેરોટી લિ, હૈદિશી વાય, ઉલરી પીજી, બારોટ એમ, મોન્ટેગિયા એલ, ડુમન આરએસ, નેસ્લેર ઇજે. દીર્ઘકાલીન તણાવ પછી પુરસ્કાર-સંબંધિત મગજ માળખાંમાં ડેલ્ટાફોસબીનો સમાવેશ. જે ન્યૂરોસી 2004;24: 10594-10602. [પબમેડ]
- રોબિન્સન ટી, કોલ્બ બી. દુરુપયોગની દવાઓના સંપર્કમાં સંકળાયેલું સ્ટ્રક્ચરલ પ્લાસ્ટિસિટી. ન્યુરોફાર્માકોલોજી 47 પુરવઠો. 2004;1: 33-46. [પબમેડ]
- રોબિસન એજે, નેસ્લેર ઇજે. વ્યસનની ટ્રાન્સક્રિપ્શન અને એપિજેનેટિક પદ્ધતિઓ. નેટ રેવ ન્યૂરોસી 2011;12: 623-637. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]
- સાહા આર.એન., વિસિંક ઇએમ, બેઇલી ઇઆર, ઝાઓ એમ, ફાર્ગો ડીસી, હવાંગ જેવાય, ડાયગલ કેઆર, ફેન જેડી, એડલમેન કે, ડુડેક એસએમ. આર્ક અને અન્ય આઇઇજીની ઝડપી પ્રવૃત્તિ-પ્રેરિત ટ્રાંસિસ્લેશન poised આરએનએ પોલિમરેઝ II પર આધાર રાખે છે. નેટ ન્યુરોસી 2011;14: 848-856. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]
- શાહમ વાય, આશા બીટી. માદક દ્રવ્યોની શોધમાં પાછલા ભાગમાં ન્યુરોડેપ્ટેશનની ભૂમિકા. નેટ ન્યુરોસી 2005;8: 1437-1439. [પબમેડ]
- શેન એચડબલ્યુ, તોડા એસ, મુસ્સાવી કે, બૌનનાઇટ એ, ઝહમ ડીએસ, કાલિવિયા પીડબલ્યુ. કોકેઈન-પાછી ખેંચેલી ઉંદરોમાં બદલાતી ડેંડ્રિટિક સ્પાઇન પ્લાસ્ટિસિટી. જે ન્યૂરોસી 2009;29: 2876-2884. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]
- વેલેજન્ટ ઇ, કોર્વોલ જેસી, પાના સી, બેસોન એમજે, માલ્ડોનાડો આર, કેબોચે જે. કોકેન-ફાયદાકારક ગુણધર્મો માટે એક્સ્ટ્રા સેલ્યુલર સિગ્નલ-રેગ્યુલેટેડ કિનેઝ કેસ્કેડનો સમાવેશ. જે ન્યૂરોસી 2000;20: 8701-8709. [પબમેડ]
- ઝિઇટલિંગર જે, સ્ટાર્ક એ, કેલીસ એમ, હોંગ જેડબ્લ્યુ, નેચવે એસ, એડલમેન કે, લેવિન એમ, યંગ આરએ. આરએનએ પોલીમિરેઝ ડ્રોસોફિલા મેલાનોગસ્ટર ગર્ભમાં વિકાસ નિયંત્રણ નિયંત્રણ જીન્સ પર સ્થગિત. નેટ જિનેટ 2007;39: 1512-1516. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]
- વિઆલૌ વીએફ, ફેંગ જે, રોબિસન એજે, ફર્ગ્યુસન ડી, સ્કોબી કે.એન., મેઝી-રોબિસન એમ, મોઉઝન ઇ, નેસ્લેર ઇજે. સીરમ પ્રતિભાવ પરિબળ અને સીએએમપી પ્રતિક્રિયા તત્વ બંધનકર્તા પ્રોટીન બંને ફોસબીના કોકેન ઇન્ડક્શન માટે આવશ્યક છે. જે ન્યૂરોસી 2012 સ્વીકાર્યું. [પી.એમ.સી. મફત લેખ] [પબમેડ]