સુક્રોઝ સોલ્યુશન પર દરરોજ બેન્જીંગ કર્યા પછી, ખોરાકની વંચિતતા ચિંતાને ઉત્તેજિત કરે છે અને ડોપામાઇન / એસીટીલ્કોલાઇન અસંતુલન (2008)

દુરુપયોગની દવાઓ લેવા જેવી જ રીતે ખાંડ પર બિંગિંગ ન્યુરલ માર્ગો સક્રિય કરી શકે છે, જેના પરિણામે નિર્ભરતાના સંબંધિત ચિહ્નો પરિણમે છે. વર્તમાન પ્રયોગો પરીક્ષણ કરે છે કે નહીં તે ઉંદરો જે સુક્રોઝ પર બેન્જીંગ થઈ રહ્યા છે અને ત્યારબાદ ઉપહાર જેવા ઉપાયના નિદર્શન ચિહ્નો ઉપવાસ કરે છે. 12-H ની વંચિતતા પર XatsX-h અવર્ગીકરણ પછી XatsX-H ની એક્સટેક્સ રાખવામાં આવી હતી, 12% સુક્રોઝ સોલ્યુશન અને 10 દિવસો માટે ચા, પછી 28 એચ માટે ઉપવાસ કરવામાં આવ્યો હતો. આ પ્રાણીઓએ એલિવેટેડ પ્લસ-મેઝના ખુલ્લા હાથ પર ઓછો સમય ગાળ્યો હતો, તેવી જ રીતે વંચિત જાહેરાત લૅબિટમ ચા જૂથ સાથેની ચિંતા, જે ચિંતાને સૂચવે છે. માઇક્રોડાયલિસિસે બહારના સેલ્યુલર એસેટીલ્કોલાઇનમાં સંમિશ્રિત વધારો અને ન્યુક્લિયસ એક્મ્બમ્બન્સ શેલમાં ડોપામાઇન પ્રકાશનમાં ઘટાડો દર્શાવ્યો હતો. આ પરિણામો હાઈપોગ્લાયકેમિયાને કારણે દેખાતા નથી. તારણો સૂચવે છે કે સુક્રોઝ અને ચા પર ઉપવાસ પછીનો ખોરાક એક રાજ્ય બનાવે છે જેમાં ચિંતા અને ફેરફાર થાય છે, ડોપામાઇન અને એસીટીકોલાઇન સંતુલન. આ નાલોક્સનની અસરો જેવી જ છે, જે ઑફીટ-જેવા ઉપાડ સૂચવે છે. આ ખાવાના કેટલાક વિકારોમાં એક પરિબળ હોઈ શકે છે.

1.1. સામાન્ય પદ્ધતિઓ

Male Sprague-Dawley ઉંદરો ટેકોનિક ફાર્મ્સ (જર્મનાટાઉન, એનવાય) માંથી મેળવવામાં આવ્યા હતા અથવા ટેકોનિક ફાર્મ્સથી ઉદ્ભવેલ સ્ટોકમાંથી પ્રિન્સટન યુનિવર્સિટી વિવેરિયમ ખાતે ઉછેરવામાં આવ્યા હતા. ઉંદરોને એકસમાન 12-H પ્રકાશ પર વ્યક્તિગત રૂપે રાખવામાં આવ્યા હતા: 12-H ડાર્ક સાયકલ. તમામ કાર્યવાહી પ્રિન્સટન યુનિવર્સિટી ઇન્સ્ટિટ્યૂશનલ એનિમલ કેર એન્ડ યુઝ કમિટી દ્વારા મંજૂર કરવામાં આવી હતી.

1.2. પ્રયોગ 1: ખાંડ-બિન્ગીંગ ઉંદરોમાં ઉપવાસ કરતી વખતે ચિંતા અસ્પષ્ટ છે?

મુખ્ય પ્રાયોગિક જૂથમાં (300-450 g) ઉંદરો (અંતર્ગત ખાંડ + ચૌ; n = 9) 12-h અવક્ષયની આહાર પર જાળવવામાં આવી હતી, 12-H એક્સ XXX% (ડબ્લ્યુ / વી) સુક્રોઝ સોલ્યુશન પ્લસ સ્ટાન્ડર્ડ રોડન્ટ ચાઉ (લેબડીટ #10, PMI, સેન્ટ લૂઇસ, એમઓ, 5001 કેકેલ / જી) 3.02 દિવસો માટે દરરોજ શ્યામ તબક્કામાં 4 એચ શરૂ કરી રહ્યા છે [13]. નિયંત્રણ જૂથ (જાહેરાત લિબિટમ ચા; n = 7) ને માનક ઉંદર ચૉ તરફ લિબીટમ ઍક્સેસની મંજૂરી આપવામાં આવી હતી. બધા પ્રાણીઓને પાણી ઉપલબ્ધ જાહેરાત લિબિટમ હતી. એક્સપર્ટિમેન્ટ્સ 2 અને 3 માં વપરાતા અન્ય જૂથો (ઇન્ટમિટન્ટ ચા અને એડ લિબીટમ ખાંડ) એ ચિંતા માટે પરીક્ષણ કરાયું ન હતું કારણ કે તેઓ અગાઉના અહેવાલમાં નાલોક્સોન અથવા ઉપવાસ પછીના ઉપાડના વર્તણૂકલક્ષી ચિહ્નો બતાવવામાં નિષ્ફળ રહ્યા હતા [3].

28 દિવસે, સામાન્ય 12-h અવગણના પછી, પ્રાયોગિક જૂથમાં ઉંદરોને વધારાના 24 એચ માટે ખાંડ અને ચાઉની ઍક્સેસ નકારવામાં આવી હતી. નિયંત્રણ જૂથને 36 એચ માટે ચા માટે પણ વંચિત કરવામાં આવ્યું હતું. આ સમય દરમિયાન, પ્રાણીઓએ પાણીની લિબીટમ પ્રવેશની જાહેરાત ચાલુ રાખી. ત્યારબાદ ફાઇલ, લિપ્પા, બીઅર અને લિપ્પાની તકનીકનો ઉપયોગ કરીને પ્રાણીઓને 5 મિનિટ માટે એલિવેટેડ પ્લસ-મેઝમાં વ્યક્તિગત રીતે મૂકવામાં આવ્યા હતા [14]. આ ઉપકરણમાં ચાર હાથ હતાં, દરેક 10 સે.મી. પહોળાઈ 50 સે.મી. લાંબી હતી, અને ફ્લોરથી 60 સે.મી. ઊંચાઈ ધરાવતી હતી. બે વિરોધી હથિયારો ઉચ્ચ અપાર દિવાલોથી ઘેરાયેલી હતી. અન્ય બે હથિયારોમાં કોઈ રક્ષણાત્મક દિવાલો નહોતી. પ્રયોગ લાલ પ્રકાશ હેઠળ કરવામાં આવ્યો હતો. ઉંદરોને રસ્તાના મધ્યમાં મુકવામાં આવ્યા હતા અને એક ખુલ્લા અથવા બંધ બખ્તરની સામે ફેરવાયા હતા. પ્રત્યેક પ્લસ-મેઝ ટ્રાયલનો વિડિઓ ટેપ કરવામાં આવ્યો હતો અને ઓપન બામ, બંધ હાથ અથવા રસ્તાના મધ્ય ભાગમાં સારવારની સ્થિતિમાં અંધારૂપ દ્વારા માથા અને ફોરપાઓ સાથે પસાર કરવામાં આવેલા સમય માટે કેટલો સમય લાગ્યો હતો.

1.3. પ્રયોગ 2: ઉપવાસ કરતી વખતે ખાંડ-બિન્ગીંગ ઉંદરોએ ડીએ અને એસીએચમાં ફેરફાર કર્યો છે?

ઉંદરોનો એક અલગ જૂથ (350-450 g) માઇક્રોોડાયલિસિસ માટે માર્ગદર્શિકા કેન્યુલાસને રોપવા માટે સર્જરી કરાવ્યો. ઉંદરોને 20 એમજી / કિલો ઝાયલેઝિન અને 100 મિલિગ્રામ / કિલો કેટામાઇન (આઇપી) સાથે એનેસ્થેઝાઇઝ્ડ કરવામાં આવશ્યક છે જેમ કે કેટામાઇન સાથે જરૂરી છે (100 એમજી / કિલો, આઈપી). દ્વિપક્ષીય 21 ગેજ સ્ટેનલેસ-સ્ટીલ માર્ગદર્શિકા કેન્યુલાસ પાછળના મધ્યવર્તી સંક્ષિપ્ત શેલ (અગ્રવર્તી: + 1.2 એમએમ, બાજુનું: 0.8 એમએમ અને વેન્ટ્રલ: 4.0 એમએમ, બ્રેગમા, મિડાગિત્િટલ સાઇનસ અને સ્તર ખોપડીની સપાટીની અનુક્રમે, અનુક્રમે) નું લક્ષ્ય રાખ્યું હતું. સ્ટીરિઓટેક્સિક સાધનનો ઉપયોગ કરીને.

ઓછામાં ઓછા 1 અઠવાડિયા માટે ઉંદરોને શસ્ત્રક્રિયામાંથી પુનઃપ્રાપ્ત કરવાની મંજૂરી આપવામાં આવી હતી. પ્રયોગ 1 ની પ્રક્રિયાઓ જેવી જ, એક પ્રાયોગિક જૂથ (n = 6) 12-h અવક્ષય પર 12- એચ એક્સ્યુએક્સ-એક્સ વપરાશ 10% સુક્રોઝ અને સ્ટાન્ડર્ડ રોડન્ટ ચા છે, 4 એચ શ્યામ તબક્કામાં શરૂ કરીને, XINGX દિવસો માટે બિન્ગીંગને પ્રેરણા આપવા માટે (એટલે ​​કે, ઇન્ટરમિટન્ટ ખાંડ + ચા). એક નિયંત્રણ જૂથને સમાન શેડ્યૂલ પર કોઈ સુક્રોઝ (ઇન્ટમિટન્ટ ચા, n = 7), જ્યારે અન્ય જૂથ દૈનિક એડ લબિટમ ચા પર રાખવામાં આવ્યો હતો (n = 6). દિવસ 28 પર, દરેક ઉંદરને માઇક્રોોડિલેસીસ ચેમ્બરમાં ખસેડવામાં આવ્યો હતો અને ન્યુરોટ્રાન્સમીટર પુનઃપ્રાપ્તિને સ્થિર કરવા માટે પ્રયોગ કરતા પહેલા એક્રેલિક સિમેન્ટ 14-16 એચ સાથે એક તપાસ દાખલ કરવામાં આવી હતી અને તેની તપાસ કરવામાં આવી હતી. ઇક્કોક્સી (સ્પેક્ટ્રમ મેડિકલ કંપની, લોસ) સાથે અંતમાં સીલ્યુલોઝ ટ્યૂબિંગની માઇક્રોડાયલિસિસ ટિપ સાથે 37 ગેજ સ્ટેનલેસ સ્ટીલ ટ્યુબની અંદર સિક્લિક ગ્લાસ ટ્યૂબિંગ (26 μm આંતરિક વ્યાસ, પોલિમિક્રો ટેક્નોલૉજીસ ઇન્ક, ફોનિક્સ, એઝેડ) ની માઇક્રોોડાયલાસિસ પ્રોબ્સનું નિર્માણ કરવામાં આવ્યું હતું. એન્જલસ, સીએ, 6000 મેગાવોટ, 0.2 એમએમ બાહ્ય વ્યાસ × 2.0 એમએમ લાંબા) [15]. તપાસો 5 એમએમ માર્ગદર્શિકા કેન્યુલામાંથી ફેલાયેલ છે જે એસેમ્બન્સ શેલમાં હેતુપૂર્વકની સાઇટ સુધી પહોંચે છે. બફર રેન્જરના સોલ્યુશન (142 એમએમ NaCl, 3.9 એમએમ કેસીએલ, 1.2 એમએમ CaCl સાથે ચકાસણીઓ પ્રભાવિત કરવામાં આવી હતી.₂, 1.0 એમએમ એમજીસીએલ₂, 1.35 એમએમ ના₂એચપીઓ₄, 0.3 એમએમ નાહ₂PO₄, pH7.35) સ્ટેબિલાઇઝેશન અવધિ માટે અને XIMX μL / min 0.5 એચ પર પ્રયોગ પહેલા અને સમગ્ર પ્રયોગ માટે 1.3 μL / મિનિટના પ્રવાહ દર પર. તેના એન્ઝાઇમેટિક ડિગ્રેડેશનને અવરોધિત કરીને એસીએની બેઝલ પુનઃપ્રાપ્તિ સુધારવા માટે રિંગરના સોલ્યુશનમાં નેઓસ્ટીગમાઇન (2 μM) ઉમેરવામાં આવ્યું હતું.

જ્યારે અંતિમ 12-H સુક્રોઝ ઍક્સેસ અવધિ દિવસ 28 પર સમાપ્ત થઈ, ત્યારે ચાવ, સુક્રોઝ અને પાણી બધા ઉંદરોમાંથી દૂર કરવામાં આવ્યાં. ડાયાલિસિસ પ્રયોગના 36 એચ માટે પાણી દૂર કરવામાં આવ્યું હતું કારણ કે પીવાનું પાણી ડીએ અને એસીએના બેઝલાઇન સ્તરોને બદલી શકે છે [16], જે પરિણામો ભંગ કરશે. 1, 3 અને 20 એચ ઉપવાસ કર્યા પછી 12 એચ (24 × 36-min નમૂનાઓ) માટે માઇક્રોોડીયાલીસ નમૂનાઓ એકત્રિત કરવામાં આવ્યા હતા (કોઈ ખોરાક, ખાંડ અથવા પાણી ઉપલબ્ધ નથી). પ્રત્યેક નમૂનાનું વિભાજન કરવામાં આવ્યું હતું, ડીએ વિશ્લેષણ માટે અર્ધ અને એસીએ માટે અર્ધ.

1.4. ડોપામાઇન અને એસીટીકોલોલાઇન assays

ડીએ અને તેના મેટાબોલાઇટ્સ 3,4-ડાયહાઇડ્રોક્સિ-ફેનિલસેટીક એસિડ (ડીઓપીએસી) અને હોમોવાનેલિક એસિડ (એચવીએ) નું વિપરીત તબક્કો, ઇલેક્ટ્રોકેમિકલ ડિક્ટેક્શન (એચપીએલસી-ઇસી) સાથે ઉચ્ચ પ્રદર્શન પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફી દ્વારા વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું. સેમ્પલ્સને 20-μL નમૂના લૂપમાં એક્સજેક્ટ કરવામાં આવ્યું હતું જેમાં 10-cm અને 3.2 μm, C3 પેકિંગ (બ્રાઉનલી કંપની મોડલ 18, સેન જોસ, CA) સાથે 6213-cm કૉલમ છે. મોબાઇલ તબક્કામાં 60 એમએમ સોડિયમ ફોસ્ફેટ, 100 μM ઇડીટીએ, 1.24 એમએમ હેપ્ટેનસોફ્લોનિક એસિડ, અને 5% વોલ / વોલ મેથેનોલ શામેલ છે. ડીએ, ડીઓપીએસી અને એચવીએને કોલ્યુમેટ્રિક ડીટેક્ટર (ઇએસએ કંપની મોડેલ 5100A, ચેમ્સફોર્ડ, એમએ) સાથે માપવામાં આવી હતી. + 500 એમવી પર કન્ડીશનીંગ સંભવિત સેટ સાથે, અને કાર્યક્ષમ કોષ સંભવિત -400 એમવી પર.

એસીએચને 20-સે.મી. સી 10 વિશ્લેષણાત્મક ક columnલમ (ક્રોમ્પેક ઇંક., પાલો અલ્ટો, સીએ) સાથે 18-sampleL નમૂના લૂપનો ઉપયોગ કરીને રિવર્સ ફેઝ એચપીએલસી-ઇસી દ્વારા માપવામાં આવ્યું. એસીએચને ઇમ્બોબિલાઇઝ્ડ એન્ઝાઇમ રિએક્ટર (એસિટિલકોલિનેસ્ટેરેઝ અને સિગ્મા, સેન્ટ લૂઇસ, એમઓ અને ક્રોમ્પેક ઇન્ક., પાલો અલ્ટો, સીએ દ્વારા ક columnલમ દ્વારા કોલિન oxક્સિડેઝ) દ્વારા બીટાઈન અને હાઇડ્રોજન પેરોક્સાઇડમાં રૂપાંતરિત કરવામાં આવ્યું હતું. પીએચ 200 પર મોબાઇલ તબક્કો 8.0 એમએમ પોટેશિયમ ફોસ્ફેટ હતો. એમ્પીરોમેટ્રિક ડિટેક્ટરનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો (ઇજી એન્ડ જી પ્રિન્સટન એપ્લાઇડ રિસર્ચ, લોરેન્સવિલે, એનજે). એજી – એજીસીએલ સંદર્ભ ઇલેક્ટ્રોડ (ઇજી એન્ડ જી પ્રિન્સટન એપ્લાઇડ રિસર્ચ) ના સંદર્ભમાં 500 એમવી સેટ કરેલા પ્લેટિનમ ઇલેક્ટ્રોડ (બીએએસ, વેસ્ટ લફેટે, આઈએન) પર હાઇડ્રોજન પેરોક્સાઇડનું oxક્સિડાઇઝેશન કરવામાં આવ્યું હતું.

ત્રણ, 20-min નમૂનાઓ 12, 24 અને ઉપવાસના 36 એચ પર એકત્રિત કરવામાં આવ્યા હતા. દરેક કલાક માટે, ત્રણ નમૂનાઓ માટેનો ડેટા સરેરાશ હતો. દરેક જૂથ માટે DA અને ACH માટેના ડેટાને 12-h અવગણના સમય બિંદુના ટકામાં રૂપાંતરિત કરવામાં આવ્યા હતા, જ્યારે ઇન્ટરમિટન્ટ-ફેડ ઉંદરો સામાન્ય રીતે ખોરાકની અપેક્ષા રાખતા હતા.

1.5. હિસ્ટોલોજી

પ્રયોગ હિસ્ટોલોજીના અંતે માઇક્રોડાયલિસિસ ચકાસણી પ્લેસમેન્ટ ચકાસવા માટે કરવામાં આવ્યું હતું. ઉંદરોને સોડિયમ પેન્ટોબાર્બીટલનો વધુ પડતો જથ્થો મળ્યો હતો અને જ્યારે XenX% સોલાઇન સાથે XNTX% ફોર્મેલ્ડેહાઇડ દ્વારા ગ્રહણ કરવામાં આવ્યું હતું ત્યારે ઊંડા એન્સેસાઇઝ્ડ કરવામાં આવ્યા હતા. મગજને દૂર કરવામાં આવ્યા હતા, સ્થિર કર્યા હતા, અને પ્રયોગકર્તાઓએ વિભાગોનું નિરીક્ષણ કર્યું હતું કારણ કે તેઓ ચકાસણી ટીપ્સની સાઇટ્સ ત્યાં સુધી (0.9 μm કાપી નાંખ્યું, એસેમ્બન્સની શરૂઆતથી શરૂ થાય છે) ત્યાં સુધી હતા. એકવાર ચકાસણી ટ્રૅકની કલ્પના કરવામાં આવી, તે પછી તેઓ પેક્સિનોસ અને વાટ્સનના એટલાસનો ઉપયોગ કરીને પ્લોટ કરવામાં આવ્યા હતા [17].

1.6. પ્રયોગ 3: સુક્રોઝ પર ક્રોનિક બિન્ગીંગને લીધે બ્લડ ગ્લુકોઝના સ્તરમાં ફેરફાર થાય છે?

ત્રણ જૂથોમાં ઉંદરો (300-350 g) પર 28 દિવસો માટે (એક) અંતરાય ખાંડ + ચા (12-h અવગણના પછી 12-H ની 10% સુક્રોઝ સોલ્યુશન અને ચાઉ સુધી એક્સચેંજ થાય છે, 4 h થી શ્યામ તબક્કામાં શરૂ થાય છે. ; n = 10), (બી) ઇન્ટરમિટન્ટ ચા (12-h અવગણના પછી 12-h નો ઉપયોગ પ્રમાણભૂત ઉંદર ચા (કોઈ સુક્રોઝ) સુધી પહોંચવાનો છે, 4 h ને શ્યામ તબક્કામાં શરૂ કરવો; n = 10), અથવા (સી) જાહેરાત લિબિટમ ચા (n = 9). ચાઉ અને ખાંડને દૂર કરવામાં આવ્યા હતા અને પૂંછડીના રક્ત નમૂનાઓને 12, 24 અને 36 એચ અવગણના પછી એકત્રિત કરવામાં આવ્યા હતા. પૂંછડીની ટોચ પરથી લોહી એક પ્રાણી દ્વારા હળવાશથી પકડીને એક પ્રાણી દ્વારા એકત્રિત કરવામાં આવ્યો હતો, જ્યારે બીજાએ એક બરછટ સ્કેલપેલ સાથે પૂંછડીની ટોચ પરથી 5 મીમીની એક નાની ચીટ બનાવી હતી. કેશિલરી ટ્યુબમાં લોહી એકત્રિત કરવામાં આવ્યું હતું, સેન્ટ્રિફ્યુગ્ડ અને સીરમ પછી એનાલોક્સ GM7 ફાસ્ટ એન્ઝાઇમેટિક મેટાબોલાઇઝર (એનાલોક્સ, લ્યુનબર્ગ, એમએ) સાથે ગ્લુકોઝ સ્તર માટે વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું. એક્સ્યુએનએક્સ-ડે એક્સેસ પીરિયડ દરમિયાન, ખાંડ અને ચાના ઇન્ટેક દરરોજ માપવામાં આવતા હતા, અને શરીરના વજનને સાપ્તાહિક માપવામાં આવતું હતું. બોડી વેઇટ્સનો પણ અવગણના દરમિયાન દર વખતે પોઇન્ટ કરવામાં આવે છે.

1.7. આંકડા

પ્લસ-મેઝ ડેટાનું વિશ્લેષણ એક-પૂંછડી, અજાણ્યા વિદ્યાર્થીની સાથે કરવામાં આવ્યું હતું t-શ્રેષ્ઠ કોહેન d, જે અસર માપને માપે છે [18], અને p_{પ્રતિનિધિ}, જે પ્રતિકૃતિની સંભાવના પૂરી પાડે છે [19], પણ ગણતરી કરવામાં આવી હતી. ડીએ અને એસીએ માટેના ડેટાને બે-રસ્તોના પુનરાવર્તિત પગલાંઓનો ઉપયોગ કરીને સામાન્ય રીતે વર્ણવેલ બેઝલાઇનથી ટકા તફાવત તરીકે વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું છે, ANOVA પછી પોસ્ટ ટુક ટેસ્ટો. બ્લડ ગ્લુકોઝ સ્તર, શરીરના વજન અને ઇન્ટેક ડેટાનું વિશ્લેષણ એનોવા દ્વારા કરવામાં આવેલા બે પગલાં દ્વારા કરવામાં આવતાં પગલાંઓ દ્વારા કરવામાં આવ્યું છે.

2.1. શારીરિક વજન, ખાંડના સેવન અને ચાનો વપરાશ

પ્રયોગ 28 માં 3-day ઍક્સેસ અવધિ દરમિયાન એકત્રિત કરાયેલા ડેટામાં જાણવા મળ્યું છે કે સ્યુક્રોઝના બેન્ગ-ઍક્સેસ સાથેના ઉંદરોએ 28-દિવસના એક્સપોઝર સમયગાળા દરમિયાન સુક્રોઝના વપરાશમાં વધારો કર્યો છે (F(27, 279) = 4.9, p <0.001; ફિગ. 1A), સુક્રોઝ અથવા ગ્લુકોઝ સાથેની અમારી પાછલા અહેવાલોમાં જે બતાવવામાં આવ્યું છે તેના જેવું જ એક શોધ [3,20]. ચાના ઇન્ટેક ડેટામાં જૂથોમાં નોંધપાત્ર તફાવત જોવા મળ્યો છે. ખીલના ખાંડના વપરાશ સાથેના ઉંદરોએ જાહેરાતની લિબિટમ અને ઇન્ટરમિટન્ટ ચાઉ જૂથો કરતાં ઓછી ચાવી લીધી છે (F(2,26) = 60.8, p <0.001; ફિગ. 1B). જો કે, કુલ દૈનિક કેલરીના વપરાશમાં જૂથોમાં કોઈ તફાવત હોતો નથી (ફિગ. 1C).

  

ફિગ 1

28-day વપરાશ અવધિ દરમિયાન ખાંડ અને ચાનો વપરાશ કરવો. એ) અંતરાયયુક્ત ખાંડ સાથે ઉંદરો + ચાએ સમયાંતરે તેમના કુલ દૈનિક ખાંડના વપરાશમાં વધારો કર્યો. બી) અંતરાયયુક્ત ખાંડ સાથે ઉંદરો + ચૌથી ચતુર્ભુજ ચાવ અને જાહેરાત લિબિટમ કરતાં ઓછી ચમ ...

28-દિવસ ઍક્સેસ અવધિ દરમિયાન જૂથોમાં શરીરના વજનમાં કોઈ તફાવત નહોતો; જો કે, ત્યાં સમયનો પ્રભાવ હતો, બધા ત્રણ જૂથો 28 દિવસો ઉપર વજન મેળવે છે (F(4,104) = 298.9, p <0.001). Vation 36 કલાકની વંચિતતા દરમિયાન, બધા જૂથો માટે શરીરના વજનમાં સમય ઘટાડો થયો (F(2,52) = 1957.8, p <0.001), કોઈપણ સમયે જૂથોમાં કોઈ તફાવત વિના (12, 24 અથવા 36 એચ).

2.2. પ્રયોગ 1: ખાંડ-બિન્ગીંગ ઉંદરોમાં ઉપવાસ કર્યા પછી ચિંતાના વર્તણૂંક સૂચકાંકો

જ્યારે 5 મિનિટ માટે એલિવેટેડ પ્લસ-મેઝમાં મૂકવામાં આવે છે, ત્યારે ખોરાકની વંચિતતાના 36 એચ પછી ખંજવાળ કે જે અગાઉ સ્થૂળ ખાંડ પર જાળવવામાં આવી હતી + ચાએ ખુલ્લી આર્મ પર ઓછો સમય (18 ± 4 સેક, 6% કુલ સમય) પસાર કર્યો પ્લસ-મેઝ સમાન વંચિત જાહેરાત લિબિટમ-ચા જૂથ સાથે તુલના કરે છે જેમાં સુક્રોઝનો અનુભવ નથી (34 ± 8 s, 11% કુલ સમય; t(16) = 2.01, p <0.05, d = 1.03, જ્યાં 0.8 અથવા ઉચ્ચને મોટી અસર માપ માનવામાં આવે છે [18], અને p_{પ્રતિનિધિ} = 0.87; ફિગ 2).

  

ફિગ 2

એલિવેટેડ પ્લસ-મેઝની ખુલ્લી હાથ પર કેટલો સમય પસાર થયો. અગાઉથી વંચિત જાહેરાત લૅબિટમ ચા જૂથની તુલનામાં ફાસ્ટિંગના 36 એચ પછી ખુલ્લા હાથ પર નોંધપાત્ર રીતે ઓછો સમય પસાર કરનાર ઉંદરો. ...

2.3. એક્સપર્ટમેન્ટ 2: સુગર-બિન્ગીંગ ઉંદરોએ ફાસ્ટિંગ કરતી વખતે એનએસી શેલમાં એક્સ્ટ્રા સેલ્યુલર ડીએ ઘટાડ્યું છે અને ACH વધારો કર્યો છે.

જૂથ અને સમય (12, 24 અને 36 એચ અવગણના) વચ્ચે મહત્વપૂર્ણ ક્રિયાપ્રતિક્રિયા હતી ()F(4,28) = 2.86, p <0.05; ફિગ. 3A). ઉપવાસના 24 એચ પછી, ડી.બી.એ જાહેરાત લ્યુબિટમ ચા જૂથ માટે અગાઉ એક્સટ્યુમન્ટ ખાંડ + ચા અને 68 ± 6% માટે જૂથ માટે 72 ± 5% ઘટાડો કર્યો હતો, જ્યારે ઇન્ટરમિટન્ટ ચા જૂથ (95 ± 7%) માટે અપરિવર્તિત બાકી છે. . ઉપવાસના 36 એચ પછી એક્સ્ટ્રા સેલ્યુલર ડીએ અંતરાયિત સુક્રોઝ + ચા જૂથ (61 ± 14%) માટે ઓછો રહ્યો અને આ સમયે તે જાહેરાત લિબિટમ ચા જૂથ (113 ± 14%) કરતા નોંધપાત્ર રીતે ઓછું હતું, p <0.05) અને તૂટક તૂટક ચો જૂથ (104 ± 15, p <0.05).

  

ફિગ 3

એક્સ્ટ્રા સેલેલ્યુલર ડીએ અને એસીએ એનએસીમાં 24 અને 36 એચ ઉપવાસ કર્યા પછી. એ) ઉપવાસના 36 એચ પછી, ડીએ (DA) અંતરાયયુક્ત ખાંડ + ચૌ જૂથ (કાળો પટ્ટી) ની છૂટક ચૌ (ગ્રે બાર) અને જાહેરાત લિબીટમ ચા (સફેદ) કરતાં નોંધપાત્ર રીતે ઓછી હતી. ...

DA અથવા ACh (અંતરિયાળ ખાંડ + ચૌ = = 12 ± 1.6 પૃષ્ઠ અને 0.3 ± 0.4 PMol / નમૂના; ઇન્ટરમિટન્ટ ચા = 0.1 ± 1.5 પૃષ્ઠ અને 0.4 ± 0.7 PMOL / નમૂનો; જાહેરાત માટે 0.3 h ના વંચિતતા પછી જૂથોમાં કોઈ મતભેદ નથી. libitum chow = 1.4 ± 0.3 પૃષ્ઠ અને 0.7 ± 0.3 pmol / નમૂનો; અનુક્રમે ડીએ અને એસીએચ).

ઉપવાસના 24 એચ પછી, બધા જૂથો માટે DOPAC સ્તરમાં ઘટાડો થયો હતો (F(2,34) = 33.8, p <0.001). સમાન, તેમ છતાં, ઉપવાસના 36 કલાકમાં અ-નોંધપાત્ર વલણ જોવા મળ્યું. એચવીએ પ્રકાશન પર સમયની અસર પણ હતી (F(2,34) = 6.97, p <0.001). DOPAC અને DA ની જેમ, HVA માં તમામ જૂથોના ઉપવાસના 24 કલાકમાં ઘટાડો થયો હતો (કોષ્ટક 1). જો કે, ઉપવાસના 36 એચ દ્વારા, એચવીએ આંતરવિગ્રહયુક્ત ખાંડ + ચૌ જૂથ (119 ± 20%) માટે વધારે હતું, પરંતુ જાહેરાત લિબિટમ ચા અને ઇન્ટરમિટન્ટ ચા જૂથ માટે થોડો ઘટાડો થયો હતો.

  

કોષ્ટક 1

પ્રયોગ 2 માં ડીઓપીએસી અને એચવીએ સ્તર માટેનાં મૂલ્યો

એક્સ્ટ્રા સેલેલ્યુલર ACH એ ડીએની વિરુદ્ધ દિશામાં બદલાયું. જૂથ અને સમય વચ્ચે એક મહત્વપૂર્ણ ક્રિયાપ્રતિક્રિયા હતી (F(4, 30) = 4.81, p <0.005; ફિગ. 3B). એક્ચમિટન્ટ સુક્રોઝ + ચા જૂથ (24 ± 115%) માટે ઉપવાસના 10 એચ પછી એએચએ વધારો થયો છે. p <0.05), પરંતુ જાહેરાત લિબિટમ ચો જૂથ (77 ± 13%) અથવા તૂટક તૂટક ચો જૂથ (90 ± 15%) માટે નહીં. એડ લિબિટમ ચો (± 36 ± ૧%%) માં જોવાયેલા સ્તરોની તુલનામાં, આંતરરાષ્ટ્રીય સુક્રોઝ + ચો જૂથ (૧164 ± ૧%%) માટે એસીએચ વધતા fasting 14 કલાકના ઉપવાસ પછી આ તફાવત વધાર્યો હતો; p <0.05) અને તૂટક તૂટક ચો (104 ± 15%; p <0.05) નિયંત્રણ જૂથો.

નોંધ કરો કે બેઝલાઇન પગલાં ઉપવાસના પહેલા 12 એચ પછી જ્યારે લેવામાં આવ્યા હતા ત્યારે સુક્રોઝ + ચા અને ઇન્ટરમિટન્ટ ચા ઉંદરો સામાન્ય રીતે ખોરાક મેળવશે. આમ, 36-h ઉપવાસ સમય-બિંદુ 24-H માપ પછી બરાબર 12 કલાક હતું. સર્કિડિયન ચક્રમાં આ બિંદુએ ચો-ફેડ કંટ્રોલ જૂથોએ ડીએ અથવા એસીએમાં ફેરફાર બતાવ્યો ન હતો, જ્યારે ખાંડ-બેન્ગીંગ જૂથમાં નોંધપાત્ર પ્રમાણમાં ડીએ અને ઉચ્ચ એસી હતી.

હિસ્ટોલોજીએ ચકાસ્યું છે કે ચકાસણી પ્લેસમેન્ટ મુખ્યત્વે એનએસીના શેલમાં હતા (ફિગ 4).

  

ફિગ 4

પ્રોબ ટ્રેક પ્લેસમેન્ટ સૂચવે છે કે માઇક્રોોડાયલિસિસના નમૂનાઓ મુખ્યત્વે મધ્યમ એનએસી શેલમાંથી બ્રગ્મામાં 1.2 અને 1.7 અગ્રિમ વિમાનોમાં ખેંચાયા હતા [17]. CPU = caudate putamen, ACBC = accumbens core, ACbSh = accumbens શેલ.

2.4. પ્રયોગ 3: ખાંડ-બિન્ગીંગ ઉંદરોમાં ઉપવાસ પછી ઉપાડના ચિહ્નો સીધા હાઇપોગ્લાયસીમિયાથી સંબંધિત નથી.

જૂથોમાં રક્ત ગ્લુકોઝ સ્તરમાં કોઈ નોંધપાત્ર તફાવત ન હતો (12 એચ = 5.1-7.8 એમએમઓએલ માટે રેન્જ, 24 એચ = 4.6-6.9 એમએમઓએલ માટે રેન્જ, 36 એચ = 4.2-6.4 એમએમઓએલ માટે રેંજ). તેમ છતાં, સમયની અસર હતી, જેમાં રક્ત ગ્લુકોઝનું પ્રમાણ ઘટીને 36 એચ ની અવગણના દરમિયાન તમામ જૂથો માટે ઘટ્યું હતું (F(2,52) = 52.8, p <0.001).

3.1. ખાંડ-બિન્ગીંગ ઉંદરોમાં ઉપવાસ દરમિયાન ચિંતાના વર્તણૂકલક્ષી સંકેતો

એલિવેટેડ પ્લસ-મેઝ એ ચિંતાના સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવામાં આવતા પ્રાણીઓના પરીક્ષણોમાંથી એક છે [14,21], અને સામાન્ય ચિંતા બંને માટે વ્યાપકપણે માન્ય કરવામાં આવી છે [22] અને ડ્રગ ઉપાડ દ્વારા પ્રેરિત ચિંતા [23]. એક્સપર્ટમેન્ટ 1 ના પરિણામો સૂચવે છે કે ખાંડની અંતર્ગત પહોંચના આહારના ઉપવાસ પછી ઉપવાસની અસર એલિવેટેડ પ્લસ-મેઝ દ્વારા માપવામાં આવે છે. અગાઉથી ખાંડ પર બેન્જીંગ કરવામાં આવતી ઉંદરો જાહેરાત લ્યુબિટમ ચા જૂથ માટે 6% ની તુલનામાં રસ્તાના ખુલ્લા હાથ પર 11% સમય ગાળ્યા હતા. આ ડેટા અન્ય લોકો દ્વારા પ્રાપ્ત મૂલ્યોની શ્રેણીમાં છે, અને પરિણામો સામાન્ય રીતે આ પ્રક્રિયાનો ઉપયોગ કરીને મળતા સમાન છે [24,25]. આ શોધ ઓછો ઓપન-બાહ્ય સંશોધન સમાન છે જે મોર્ફાઇનથી સ્વયંસંચાલિત ઉપાડ પછી દેખાયો છે [26]. અગાઉના અભ્યાસોમાં, પ્રાણીઓ કે જે ખાંડ અને ચૉવની લૅબિટમ આહાર પર રાખવામાં આવ્યાં હતાં, તે નાલોક્સનને સંચાલિત કરતી વખતે ચિંતાના કોઈ સંકેતો દર્શાવતા નહોતા, જ્યારે પ્રાણીઓ અંતર્ગત ખાંડ પર જાળવી રાખતા હતા અને ચા ડાયોક્સૉનની સમાન માત્રાને સંચાલિત કરતી વખતે ચિંતા દર્શાવતી હતી [3]. ઍડ લિબીટમ વપરાશ એ એમ્ફેટામાઇનને ક્રોસ સેન્સિટાઇઝેશન સહિત, પરાધીનતાના અન્ય વર્તણૂંક ચિહ્નો ઉત્પન્ન કરવામાં નિષ્ફળ રહ્યો છે [27] અને મદ્યપાનનો ઉપચાર કરવા [28]. ખાંડની અંતર્ગત પહોંચ આ વર્તણૂક ઉત્પન્ન કરે છે. અવલોકનક્ષમ અસરોને વેગ આપવા માટે આંતરિક પ્રવેશની અગત્યતા એ તારણો દ્વારા સૂચવવામાં આવે છે કે જેમાં લિબીટમ સેક્રેરીનથી દૂર થવું એ ડિપ્રેસિવ-જેવા વર્તણૂકમાં પરિણમ્યું નથી [29], જે બીજો વર્તન છે જે ઉપાડ દરમિયાન અવલોકન કરી શકાય છે. આ અગાઉના અભ્યાસોને ધ્યાનમાં રાખીને, લિબિટમ ખાંડની જાહેરાત વર્તમાન પ્રયોગમાં કરવામાં આવી નથી.

અભ્યાસોએ એ પણ બતાવ્યું છે કે તે સુક્રોઝ આહારનું સંચાલન નથી, પરંતુ આહારમાંથી લાંબા સમયથી અસ્થિરતા છે જે સુક્રોઝ-બિન્ગીંગ ઉંદરોમાં ચિંતાના સંકેતોને વેગ આપે છે. અમે અગાઉ અહેવાલ આપ્યો છે કે દરરોજ 12-H વપરાશ સાથે ખાંડ-બેન્ગીંગ ઉંદરો, 12-h અવગણના પછી, સામાન્ય 12-H, દૈનિક પછી દૈનિક ચિંતાનો સંકેત, અલ્ટ્રાસોનિક તકલીફ કોલ્સ અથવા એલિવેટેડ પ્લસ-મેઝ પર ચિંતા દર્શાવતા નથી ખોરાકની અવગણનાની અવધિ [3]. વર્તમાન પરિણામો પુષ્ટિ કરે છે કે 36-h અવગણનાથી ચિંતાની ઘટના થાય છે.

એક્સપર્ટમેન્ટ 1 માં ઉપવાસ દરમિયાન ચિંતાની શોધ એફીટ જેવા જેવા ઉપાડ ચિહ્નો સમાન છે જે ઓપીઓડ એન્ટિગોનિસ્ટ, નાલોક્સન [3]. ખાંડ-બેન્ગીંગ ઉંદરોમાં નાલોક્સનની સંવેદનશીલતા ખોરાકના પરિણામે એન્ડોજેન ઓપીયોઇડ રીસેપ્ટર્સમાં ફેરફાર સૂચવે છે. અહેવાલોમાં આ પુષ્ટિ મળી છે કે સ્વાદિષ્ટ ખોરાક પરની બિંગીંગ એન્કેફાલિન એમઆરએનએ અને એનએસીમાં μ-opioid રીસેપ્ટરને બંધ કરી દે છે [30-32]. સંભવિત અભ્યાસમાં અવલોકન થયેલ અવગણના પછીના ઉપાડના સંકેતો સંભવ છે કે ખાંડ-પંજાબ પ્રાણીઓમાં અંતઃસ્ત્રાવી ઓપીયોઇડ ઉત્તેજનાની અછત છે.

આ પરિણામો અફીણ જેવા ઉપહાર ચિહ્નો કે ઉપવાસને અનુસરતા, અથવા જે સ્વયંભૂ રીતે ખીલે છે, તે અગાઉ ખાંડ પર બેન્જીંગ કરતા હોય તેવા અન્ય અહેવાલો સાથે સંમત છે. તકલીફના સોમાજિક ચિહ્નો ઉપરાંત3], શરીરના તાપમાનમાં આક્રમક વર્તણૂક અને ઘટાડો નોંધવામાં આવ્યો છે [10]. વર્તન અને શરીરવિજ્ઞાનમાં આ પરિવર્તન એફીયેટ્સમાંથી ઉપાડ દરમિયાન જોવા મળતા સમાન છે [33,34], અને થિયરીને સમર્થન આપે છે કે ખાંડના સોલ્યુશનમાં અચાનક પ્રવેશની આહારથી ઓફીટ-જેવા ઉપાડના સંકેત મળે છે.

3.2. ખાંડ-બિન્ગીંગ ઉંદરોમાં ઉપવાસ દરમિયાન એક્સ્ટ્રા સેલેલ્યુલર ડીએ અને એસીએચ

ઉપવાસના 36 એચ પર, બંને નિયંત્રણ જૂથોની તુલનામાં, ડીએના સ્તરો આંતરડાના ખાંડ + ચા જૂથ માટે નોંધપાત્ર ઘટાડો થયો હતો. આ સૂચવે છે કે ખાદ્યપદાર્થો અને પાણીની વંચિતતા ખાંડ પર બીંગિંગના ઇતિહાસ સાથે ઉંદરોમાં ડી.એ.એ. ટોનને નુકસાન પહોંચાડી શકે છે. તે જ સમયે, એક્સ્ટ્રા સેલ્યુલર એસી એલિવેટેડ છે, જે ઓપીયોઇડ ઉપાડ-જેવા રાજ્ય સૂચક છે.

નિયંત્રણ જૂથોએ આ અસર બતાવી નથી. આ 36-h ટાઇમ પોઇન્ટ પર, જે 12-h ટાઇમ પોઇન્ટ તરીકે લાઇટ / ડાર્ક ચક્રનો સમાન તબક્કો છે, ડીએ જાહેરાત લિબિટમ ચા જૂથ માટે બેઝલાઇન સ્તરો પર પાછો ફર્યો હતો (ફિગ. 3A). આ સૂચવે છે કે જાહેરાત લિબિટમ ચા જૂથમાં ડીએ (DA) ની રજૂઆત, પાઉલસન અને રોબિન્સન દ્વારા સૂચવવામાં આવતાં દૈનિક લય પછી [35]. અન્ય લોકોએ સ્ટ્રાઇટમમાં સમાન ફેરફારો સૂચવ્યાં છે [36,37]. આ દૈનિક અસર ઇન્ટરમિટન્ટ ચાઉ જૂથ સાથે જોવા મળી ન હતી, સંભવતઃ કારણ કે ચિકિત્સા ખોરાક ડીએ (DA) ના પ્રકાશનની સામાન્ય સર્કિડિયન લય બદલી શકે છે.

અંતર્ગત ખાંડ + ચૌ જૂથમાં એક્સ્ટ્રા સેલ્યુલર ડીએમાં લાંબા ગાળાના ઘટાડા મોર્ફાઇનથી સ્વયંસંચાલિત ઉપાડ દરમિયાન જાણ કરવામાં આવેલી સમાન છે [7], અને નિષ્ઠા પછી ખાંડના સેવનને ફરીથી સ્થાપિત કરવા માટે ભૂમિકા ભજવી શકે છે [38]. ઇન્ટરમિટન્ટ ચાઉ ગ્રૂપ સાથેના પરિણામો, જેણે કોઈ પણ સમયે ડીએ (DA) ના પ્રકાશનમાં પ્રમાણમાં થોડું ફેરફાર દર્શાવ્યું છે, સૂચવે છે કે ખાંડ અને ચૉઉ પરના બિન્ગીંગનું મિશ્રણ, માત્ર ચૉ નહીં, તે પ્રભાવિત અસરો ઉત્પન્ન કરવા માટે મહત્વપૂર્ણ છે.

જોકે, ડીઓપીએસી અને એચવીએ સામાન્ય રીતે ડીએ જેવા પેટર્નનું પાલન કરે છે, આ હંમેશા કેસ નથી. હાલના પ્રયોગમાં, ડીઓપીએસી અને એચવીએએ ડીએ સાથે અવલોકન કરેલ દૈનિક ભિન્નતા બતાવ્યું નહોતું, અને તેના બદલે સમય સાથે દબાવવામાં આવી હતી. જોકે અન્ય લોકોએ એનએસીમાં આ ચયાપચયમાં સર્કેડિયન વધઘટની જાણ કરી છે [35], અમે એવા કોઈપણ કાગળોથી પરિચિત નથી જેણે 36 એચ માટે ઉપવાસ દરમિયાન આ સ્તરો માપ્યા છે. આમ, વર્તમાન પ્રયોગમાં, ઉપવાસથી ચીઓ નિયંત્રણ જૂથમાં ડીએ ચયાપચયને અસર થઈ શકે છે.

એસીએચ સ્તરો ઉપવાસના 36 એચ પછી જૂથો વચ્ચે નોંધપાત્ર તફાવત દર્શાવે છે. એન.એચ.સી. માં એએચએ ઇન્જેસ્ટિવ વર્તણૂંકમાં સંકળાયેલી છે [39] અને ખાસ કરીને આત્મવિશ્વાસ [40-44], અને, જ્યારે ડીએ ઓછો હોય, એસીએ એવર્સનને પ્રોત્સાહિત કરી શકે છે [40,45-48]. પ્રવર્તમાન પ્રયોગમાં ઉપવાસ દરમિયાન ખીલ ખાંડ + ચાવ ઉંદરોમાં જોવા મળતા ACH માં નોંધપાત્ર વધારો પુરસ્કાર-વંચિત હોવાના નકારાત્મક પાસાંઓને અનુરૂપ હોઈ શકે છે. પાછલા અભ્યાસોએ થિયરીને ટેકો આપ્યો છે કે અહીં જાણ કરાયેલ તારણો સુક્રોઝ ડાયેટથી વંચિતતાના પરિણામ છે. સુક્રોઝ રીઝોલ્યુશન ડીએ પર ઉભા થતા ઉંદરો અને એનએસીમાં એસીએચ રીલીઝનું શોષણ દર્શાવવું [20,49], જે લાંબી વંચિતતા દરમિયાન જોવા મળતા વર્તમાન પરિણામોની વિરુદ્ધ છે. ઇન્ટરમ્યુટન્ટ ખાંડ + ચા જૂથમાં એસએ અને એસીએ વચ્ચે અસંતુલન, પરંતુ નિયંત્રણ જૂથોમાં, પ્રયોગ 1 માં જોવાયેલી ચિંતામાં ફાળો આપી શકે છે.

3.3. ખાંડ-બિન્ગીંગ ઉંદરોમાં ઉપવાસ દરમિયાન બ્લડ ગ્લુકોઝનું સ્તર

હાયપોગ્લાયકેમિયા એક વિપરીત સ્થિતિમાં પરિણમી શકે છે જેનાથી પ્રાણી ખાવાથી ભાગી જવાનો પ્રયત્ન કરી શકે છે. આ વિપરીત સ્થિતિ સાથે સંકળાયેલા વર્તણૂકો એ નાલોક્સોન વહીવટ દરમિયાન અથવા સુક્રોઝ-બિન્ગીંગ ઉંદરોમાં ઉપવાસ કરતા સમાન છે [50]. ઘણા પરિબળો મગજ પુરસ્કાર પ્રણાલીને પ્રભાવિત કરી શકે છે. જો કે, હાઈપોગ્લાયકેમિઆ અને અસ્વસ્થતા દરમિયાન જોવાયેલા વર્તણૂકો વચ્ચેની સમાનતાને લીધે, આ અભ્યાસમાં લોહીના શર્કરાના સ્તરને માપવામાં આવે છે, જેથી તેની ખાતરી કરવામાં આવે કે અવલોકનક્ષમ અસરો ખાલી ગ્લેસેમિક સ્થિતિને કારણે નથી. બ્લડ ગ્લુકોઝ સ્તર બધા જૂથોમાં સમાન હતા અને તેથી વર્તણૂકલક્ષી તફાવતો અથવા ડીએ અને એસીએચ રિલીઝમાં ફેરફાર માટે જવાબદાર નથી. તે અનુમાન કરી શકાય છે કે તેનો અર્થ એ થાય કે ઇન્સ્યુલિનનું સ્તર જૂથોમાં સુસંગત રહ્યું છે, કારણ કે રક્ત શર્કરાના સ્તરમાં ફેરફાર જોવા મળ્યા નથી અને ખોરાકના શેડ્યૂલ્સના પરિણામે શરીરના વજન અલગ નથી. આમ, વર્તમાન તારણો, તેમજ તે અમારી અગાઉની રિપોર્ટમાં [30] સૂચવે છે કે વર્તન અને ન્યુરોકેમિકલ ફેરફારો બ્લડ ગ્લુકોઝ સ્તરમાં તફાવતોનું પરિણામ નથી. તેના બદલે તેઓ એન્ડોજનસ ઓપીયોઇડ અને ડીએ સિસ્ટમ્સમાં ફેરફારના સંયોજનને કારણે હોઈ શકે છે.

આ સંશોધન યુએસપીએચએસ ગ્રાન્ટ એએ-એક્સ્યુએનએક્સ (બીજીએચ) અને ડીએ-એક્સ્યુએનએક્સ અને ડીકે-એક્સ્યુએનએક્સ (એનએમએ માટે ફેલોશીપ્સ) દ્વારા સમર્થિત હતું.