બેસલ ગેંગલિયા ડિસફંક્શન મેદસ્વીપણું (2016) માં શારીરિક નિષ્ક્રિયતા માટે ફાળો આપે છે

ઑનલાઇન 29 ડિસેમ્બર 2016 ઉપલબ્ધ

વધારે બતાવ

http://dx.doi.org/10.1016/j.cmet.2016.12.001

હાઈલાઈટ્સ

• સ્થૂળતા શારીરિક નિષ્ક્રિયતા સાથે સંકળાયેલ છે

• મેબેસ ઉંદર ઓછું સ્ટ્રેઆટલ D2R બંધન ધરાવે છે, જે તેમની નિષ્ક્રિયતા સમજાવી શકે છે

• જી પુનર્સ્થાપિત_i આઇએમએસએન માં સિગ્નલિંગ મેદસ્વી ઉંદરના શારીરિક પ્રવૃત્તિ સ્તરને બચાવે છે

• વજન વધારવાના કારણ કરતાં શારીરિક નિષ્ક્રિયતા વધુ પરિણામ છે

સારાંશ

જાડાપણું શારિરીક નિષ્ક્રિયતા સાથે સંકળાયેલું છે, જે વજન વધારવાના સ્વાસ્થ્યના પરિણામોને વધારે છે. જો કે, આ સંગઠન મધ્યસ્થી કરે છે તે પદ્ધતિઓ અજ્ઞાત છે. અમે અનુમાન કર્યો હતો કે ડોપામાઇન સંકેતલિપીમાં થતી ખામીઓ સ્થૂળતામાં ભૌતિક નિષ્ક્રિયતામાં ફાળો આપે છે. આની તપાસ કરવા માટે, અમે દુર્બળ અને મેદસ્વી ઉંદરમાં ડોપામાઇન સિગ્નલિંગના બહુવિધ પાસાઓને પરિમાણિત કર્યું છે. અમે જોયું કે સ્ટ્રાઇટમમાં D2- પ્રકાર રીસેપ્ટર (D2R) બંધનકર્તા છે, પરંતુ D1- પ્રકાર રીસેપ્ટર બંધનકર્તા અથવા ડોપામાઇન સ્તર નથી, મેદસ્વી ઉંદરમાં ઘટાડો થયો છે. સ્ટ્રેનાલ માધ્યમ સ્પાઇની ચેતાકોષમાંથી આનુવંશિક રીતે દૂર કરેલા D2Rs દુર્બળ ઉંદરમાં મોટર પ્રવૃત્તિને ઘટાડવા માટે પૂરતા હતા, જ્યારે જી પુનર્સ્થાપિત કરવું_i આ ચેતાકોષમાં સિગ્નલિંગ મેદસ્વી ઉંદરની પ્રવૃત્તિમાં વધારો થયો છે. આશ્ચર્યજનક વાત એ છે કે, ઓછી D2R ધરાવતી ઉંદર ઓછી સક્રિય હતી, તેમ છતાં તે નિયંત્રણ ઉંદર કરતાં ડાયેટ-પ્રેરિત વજનમાં વધુ નબળા ન હતા. અમે નિષ્કર્ષ કાઢીએ છીએ કે સ્ટ્રેટલ D2R સંકેતલિપીમાં થતી ખામી સ્થૂળતામાં ભૌતિક નિષ્ક્રિયતામાં ફાળો આપે છે, પરંતુ નિષ્ક્રિયતા સ્થૂળતાના કારણ કરતાં વધુ પરિણામ આપે છે.

ગ્રાફિકલ એબ્સ્ટ્રેક્ટ

આકૃતિ વિકલ્પો

કીવર્ડ્સ

સ્થૂળતા
ડોપામાઇન;
શારીરિક પ્રવૃત્તિ;
કસરત;
D2;
સ્ટ્રેટમ;
મેદસ્વી
વજનમાં ઘટાડો

પરિચય

સ્થૂળતા શારીરિક નિષ્ક્રિયતા સાથે સંકળાયેલ છે (બ્રાઉનસન એટ અલ., 2005 અને એક્કેકાકિસ એટ અલ., 2016), જે પ્રકાર II ડાયાબિટીસ અને કાર્ડિયોવેસ્ક્યુલર રોગની નકારાત્મક આરોગ્ય અસરોને સંયોજિત કરે છે.ડી રેઝેન્ડે એટ અલ., 2014 અને શર્મા એટ અલ., 2015). આ સંગઠનને આગળ ધપાવવાની પદ્ધતિઓ જાણીતી નથી, સ્થૂળતા સાથે વસતીમાં શારીરિક પ્રવૃત્તિ સ્તરમાં ફેરફાર કરવા માટે અસરકારક હસ્તક્ષેપની અભાવમાં એક હકીકત રજૂ થાય છે (એક્કેકાકિસ એટ અલ., 2016). રસપ્રદ વાત એ છે કે મેદસ્વીપણું સ્ટ્રાઇટલ ડોપામાઇન (ડીએ) સિગ્નલિંગમાં ફેરફાર સાથે સંકળાયેલું છે, જેણે મેદસ્વીતામાં પુરસ્કારની તકલીફોની કલ્પનાઓ તરફ દોરી ગઇ છે (બ્લમ એટ અલ., 2011, કેની, 2011 અને વોલ્કો અને વાઇઝ, 2005). સ્ટ્રાઇટલ ડીએ (DA) મોટરના આઉટપુટ સાથે સખત રીતે જોડાયેલ હોવા છતાં, કેટલાક અભ્યાસોએ તપાસ કરી છે કે ડાયેટ-પ્રેરિત ડોપામિનેર્જિક ફેરફારો કેવી રીતે શારીરિક નિષ્ક્રિયતામાં ફાળો આપે છે. અમે પૂર્વધારણા કરીએ છીએ કે સ્થૂળ ડીએ સંકેત સ્થૂળતામાં અસ્થિર છે અને તે શારીરિક નિષ્ક્રિયતામાં ફાળો આપે છે. શારિરીક નિષ્ક્રિયતાના જૈવિક કારણોને સમજવાથી વધતી પ્રવૃત્તિ માટે અસરકારક હસ્તક્ષેપ થઈ શકે છે, અને સ્થૂળતાવાળા વ્યક્તિઓમાં આરોગ્ય સુધારી શકે છે.

સ્ટ્રાઇટલ ડીએ મોટે ભાગે મોટર નિયંત્રણમાં સામેલ છે. આ પાર્કિન્સન રોગ જેવા મોટર વિકારમાં સ્પષ્ટ છે, જે મિડબ્રેઇનમાં ડોપામિનેર્જિક ન્યુરોનની મૃત્યુ દ્વારા વર્ણવવામાં આવે છે અને પરિણામે સ્ટ્રેટલ ડી.એ. (હોર્નીક્યુવિક્સ, 2010). ડીએ દ્વારા મોડ્યુલેટેડ સ્ટ્રાઇટલ પ્રોજેક્શન ન્યુરોન્સની બે વસ્તી સીધી અને પરોક્ષ પાથવે મધ્યમ સ્પાઇની ન્યુરોન્સ (ડીએમએસએનએસ અને આઇએમએસએનએસ) તરીકે ઓળખાય છે (એલેક્ઝાંડર અને ક્રુચર, 1990, ડીલોંગ, 1990 અને ગેરફેન એટ અલ., 1990). ડીએમએસએન જીને વ્યક્ત કરે છે_s-ડેપ્લડ ડીએક્સટીએક્સએક્સ રીસેપ્ટર (D1R) અને ગ્લોબસ પૅલિડસના મુખ્ય ભાગ અને આંતરિક ભાગમાં પ્રોજેક્ટ, જ્યારે આઇએમએસએન જીને વ્યક્ત કરે છે._i-ડેપ્લડ D2R અને ગ્લોબસ પેલિડસ (GPe) ના બાહ્ય ભાગ પર પ્રોજેક્ટ (ગેરફેન એટ અલ., 1990, લે મોઈન અને બ્લોચ, 1995 અને લેવી એટ અલ., 1993). આઇએમએસએન (DMSNUMXR) માંથી આઇએક્સએનએસ (DMSNUMXR) નું આનુવંશિક નિવારણ, અથવા આઇએમએસએન (OMSN) ના ઓપ્ટોજેનેટિક ઉત્તેજન, એ ચળવળને ઘટાડવા માટે પૂરતું છે (ક્રેવિટ્ઝ એટ અલ., 2010 અને લીમોસ એટ અલ., 2016). D2R ડિસફંક્શન અને મેદસ્વીતા વચ્ચેની લિંક્સના આધારે, અમે અનુમાન કર્યો છે કે મેદસ્વી પ્રાણીઓએ આઇએમએસએન આઉટપુટમાં ફેરફાર કર્યો છે, જેના પરિણામે શારીરિક નિષ્ક્રિયતા છે.

અહીં, અમે ડીએનએના ડાયાબિટીંગ અને ડાયેટ-પ્રેરિત મેદસ્વી ઉંદરના ઘણા પાસાઓની તપાસ કરી. D2R બંધન મેદસ્વી ઉંદરમાં ઘટાડવામાં આવ્યું હતું, જ્યારે D1R બંધનકર્તા અને બાહ્યકોષીય DA સ્તરો અપરિવર્તિત રહ્યા હતા. મેદસ્વી ઉંદર પણ સ્ટ્રાઇટલ ફાયરિંગમાં વિક્ષેપ દર્શાવે છે અને આંદોલન ઘટાડ્યું છે. આઇએમએસએન દ્વારા આનુવંશિક રીતે ડીએક્સએનએક્સઆરઆરને દૂર કરવાથી દુર્બળ ઉંદરમાં પ્રવૃત્તિ ઓછી થઈ છે, જ્યારે જી પુનઃસ્થાપિત કરી છે_i આઇએમએસએનમાં સિગ્નલિંગ મેદસ્વી ઉંદરની પ્રવૃત્તિમાં વધારો થયો છે. આ પરિણામો સ્થાપિત કરે છે કે આઇએમએસએનમાં D2R સંકેત દ્વિ-દિશાત્મક રૂપે શારીરિક પ્રવૃત્તિમાં ફેરફાર કરી શકે છે. અમે પછી પૂછ્યું કે ઓછી D2R સિગ્નલિંગવાળી ઉંદર તેમની ઓછી પ્રવૃત્તિને લીધે, ઉચ્ચ ચરબીયુક્ત આહાર પર વજન વધારવા માટે વધુ નબળા છે. આ કરવા માટે, અમે ડીએક્સટીએક્સએક્સઆરમાં ઉંદર વચ્ચે બંધનકર્તા, તેમજ ઉંદરમાં સ્ટ્રેટલ D2Rs ના આનુવંશિક નિવારણ સાથે કુદરતી તફાવતના સંદર્ભમાં વજન ગેઇનની તપાસ કરી. જોકે, D2R ની નીચલા સ્તરવાળી ઉંદરની શારીરિક પ્રવૃત્તિના નીચા સ્તરો હતા, તેમ છતાં તેઓએ ઉંદરને સમાન D2R સાથે સમાન દર પર વજન પ્રાપ્ત કર્યું. આ શારિરીક પ્રવૃત્તિ અને વજનમાં વધારો વચ્ચેના મજબૂત કારણ સંબંધો સામે દલીલ કરે છે. અમે નિષ્કર્ષ કાઢીએ છીએ કે D2R સિગ્નલિંગમાં ક્ષતિઓ સ્થૂળતામાં શારિરીક નિષ્ક્રિયતામાં ફાળો આપે છે પરંતુ તે નિષ્ક્રિયતા જરૂરી વજન વજન તરફ દોરી નથી.

પરિણામો

ડાયેટ-પ્રેરિત સ્થૂળતા એ શારીરિક નિષ્ક્રિયતા સાથે સંકળાયેલી હતી

સી 57 બીએલ / / જે નર ઉંદર (–-– મહિના) ને પ્રમાણભૂત ચો (દુર્બળ, એન =)) અથવા -ંચી ચરબીયુક્ત ખોરાક (મેદસ્વી, એન = 6) ને 3 અઠવાડિયા માટે ખવડાવવામાં આવ્યો હતો (આકૃતિ એસ 1એ). સપ્તાહ 2 થી શરૂ કરીને અને સપ્તાહ 18 સુધી ચાલુ રાખીને, મેદસ્વી ઉંદરોમાં દુર્બળ ઉંદરો કરતા શરીરનું વજન અને ચરબીનું પ્રમાણ નોંધપાત્ર રીતે વધારે છે (પી <0.0001; આંકડા 1એ અને S1બી). લીન સમૂહનો નોંધપાત્ર ફેરફાર થયો નથી (આકૃતિ એસ 1સી). અમે દર 2 અઠવાડિયામાં 18 અઠવાડિયા (ઇથોવિઝન; નોલ્ડસ ઇન્ફર્મેશન ટેક્નોલોજીઓ) માટે ખુલ્લા મેદાનમાં પ્રવૃત્તિનું સ્તર માપ્યું છે. મેદસ્વી ઉંદરોમાં સપ્તાહ 4 થી શરૂ થતાં અને સપ્તાહ 18 સુધી ચાલુ રહેવા કરતાં પાતળા ઉંદરની ઓછી પ્રવૃત્તિ હતી (પી <0.0001; આંકડા 1બી અને 1 સી). સપ્તાહમાં 18, મેદસ્વી ઉંદર ખસેડવામાં ઓછો સમય પસાર કરે છે (પી = 0.005), ઓછી હલનચલન (પી = 0.0003) હતી, અને જ્યારે ખસેડતી હતી ત્યારે ધીમી ગતિ હતી (પી = 0.0002; આકૃતિ 1ડી) દુર્બળ ઉંદર સંબંધિત. રીઅરિંગ અને માવજત નોંધપાત્ર રીતે બદલ્યાં નથી (આકૃતિ 1ડી). જ્યારે ઘરનાં પાંજરામાં ચાલતા વ્હીલ્સની givenક્સેસ આપવામાં આવે ત્યારે મેદસ્વી ઉંદર પણ દુર્બળ ઉંદરથી ઓછા દોડતા હતા (પી = 0.0005; આકૃતિ 1ઇ). અમે પરીક્ષણ કર્યું કે શું ચળવળની ખામી મેદસ્વી જૂથમાં વજન વધારવા સાથે સહસંબંધિત છે. તેમ છતાં વજનમાં વધારો ઉચ્ચ ચરબીયુક્ત ખોરાકના કેલરીક સેવનથી સહસંબંધિત હતો.આકૃતિ 1એફ), તે ખુલ્લા ક્ષેત્રમાં ચળવળ સ્તરો સાથે અથવા ઉચ્ચ ચરબીયુક્ત આહાર સમયગાળા દરમ્યાન ઊર્જા સાથે સંકળાયેલું ન હતું (આંકડા 1જી અને 1H). રસપ્રદ વાત એ છે કે, જ્યારે આપણે પ્રયોગના પહેલા અઠવાડિયામાં ખોરાક લેવાનું પરીક્ષણ કર્યું ત્યારે આ જ સહસંબંધો યોજાયા હતા.આંકડા 1I-1K) સૂચવે છે કે ઉચ્ચ ચરબીવાળા આહારનો પ્રારંભિક સ્તર (પરંતુ ચળવળ અથવા ઊર્જા ખર્ચ) બાદમાં વજનમાં વધારો થવાની આગાહી કરવામાં આવતી નથી.

આકૃતિ 1.

ક્રોનિક હાઇ-ફેટ ડાયેટ શારીરિક નિષ્ક્રિયતા તરફ દોરી ગયું

(એ) ઉંદરએ ઊંચી ચરબીયુક્ત આહારને ઉંદરને આપવામાં આવતી પ્રમાણભૂત ચાઉ કરતાં વધુ વજન મેળવ્યું અને અઠવાડિયા 2 થી શરૂ કરીને 18 (F_(18,252) = 62.43, પી <0.0001).

(બી અને સી) (બી) ઓપન ફિલ્ડ પ્રવૃત્તિના ઉદાહરણ-પ્લોટ દર્શાવે છે કે (સી) મેદસ્વી ઉંદર અઠવાડિયાથી 4 ની શરૂઆતમાં લીન ઉંદરની સરખામણીમાં શારીરિક પ્રવૃત્તિમાં ઘટાડો કરે છે અને 18 (F_(10,140) = 4.83, પી <0.0001).

(ડી) ઉચ્ચ ચરબીવાળા આહાર પર 18 અઠવાડિયા પછી, મેદસ્વી ઉંદરોએ ખસેડવામાં સમય ઓછો કર્યો હતો (ટી₍₁₄₎ = 3.32, પી = 0.005), હલનચલનની આવર્તન ઘટાડો (ટી₍₁₄₎ = 4.74, પી = 0.0003), અને ગતિ કરતી વખતે ગતિ ઓછી થઈ (ટી₍₁₄₎ = 4.69, પી = 0.0002) દુર્બળ નિયંત્રણોને સંબંધિત. મેદસ્વી ઉંદરોએ પણ ઉછેર ઘટાડવાનું વલણ દર્શાવ્યું (પી = 0.07).

(E) જ્યારે ઘરના પાંજરામાં ચાલી રહેલા વ્હીલની ઍક્સેસ આપવામાં આવે ત્યારે, મેદસ્વી ઉંદરને લીન ઉંદર (ટી₍₁₄₎ = 4.55, પી = 0.0005).

(એફ – એચ) કુલ વજનમાં પ્રયોગ દરમિયાન (એફ) energyર્જાના વપરાશ (આર = 0.74, પી = 0.04) સાથે નોંધપાત્ર સંબંધ છે, પરંતુ (જી) energyર્જા ખર્ચ (આર = 0.52, પી = 0.19) કે (એચ) ખુલ્લા મેદાનની ગતિ (r = 0.19, p = 0.65).

(I – K) કુલ વજનમાં પ્રથમ સપ્તાહ દરમિયાન (I) સરેરાશ energyર્જા વપરાશ (r = 0.88, p = 0.004) સાથે નોંધપાત્ર સંબંધ છે, પરંતુ (જે) energyર્જા ખર્ચ (r = −0.19, p = 0.66) , અથવા (કે) ખુલ્લા મેદાનની ગતિ (r = 0.36, p = 0.38).

આંકડાકીય વિશ્લેષણ. (એ અને સી) ટુ-વે વાર પુનરાવર્તિત પગલાં ANOVA પછી બેન્જામિની-હોચબર્ગ ખોટી શોધ દર સાથે પોસ્ટ હોક ટી પરીક્ષણ; (ડી અને ઇ) unpaired વિદ્યાર્થી ટી પરીક્ષણ; (એફ-એચ) રેખીય રીગ્રેશન; ^*પી <0.05, ^**પી <0.01, ^***પી <0.0001 વિરુદ્ધ દુર્બળ. (I – K) રેખીય રીગ્રેસન; ^***પી <0.001 વિરુદ્ધ દુર્બળ ઉંદર.

આકૃતિ વિકલ્પો

સ્થૂળતા એ ડોપામાઇન D2R બાઇન્ડિંગમાં ઘટાડો સાથે સંકળાયેલી હતી

શારિરીક નિષ્ક્રિયતાને આધારે મિકેનિઝમ્સને ઓળખવા માટે, અમે ડીએનએના બહુવિધ પાસાઓને દુર્બળ અને મેદસ્વી ઉંદરમાં સંકેત આપીએ છીએ. ઉંદરોની અગાઉની રિપોર્ટ્સ સાથે સુસંગત, D2R- જેવા રીસેપ્ટર બંધનકર્તા (ઑટોરાડિયોગ્રાફી દ્વારા ³એચ-સ્પીપેરોન, ત્યારબાદ કહેવાતા D2R બંધનકર્તા મેદસ્વી ઉંદરોમાં દુર્બળ ઉંદર (પી <0.0001) ની સરખામણીએ ઓછું હતું; આંકડા 2એ અને 2 બી), તે શોધ જે ત્રણેય સ્ટ્રિએટલ પેટા વિભાગોમાં મહત્વનું હતું (ડોર્સોમdડિયલ: પી = 0.004; ડોર્સોટલલ: પી <0.0001; વેન્ટ્રલ: પી <0.001; આંકડા S2એ અને એસ 2 બી). જો કે, ડી 2 આર બંધનકર્તા દુર્બળ અથવા મેદસ્વી જૂથમાં શરીરની ચરબી સાથે સંબંધિત નથી (પૃષ્ઠ> 0.55 બંને માટે); આકૃતિ 2સી), સૂચવે છે કે, જોકે D2R બંધન અને ચરબી સંગ્રહ બંને ક્રોનિક હાઇ-ફેટ ડાયેટ દ્વારા બદલવામાં આવે છે, આ ચલો એકબીજા સાથે સંબંધિત હોઈ શકતા નથી.

આકૃતિ 2.

હાઇ-ફેટ ડાયેટ ઇમ્પાયર્ડ સ્ટ્રાઇટલ ડોપામાઇન ડીએક્સએનએક્સએક્સઆર બાઇન્ડિંગ

(એ) સ્ટ્રાઇટલ D2R ની છબીઓ જે માપવામાં આવે છે તેના દ્વારા માપવામાં આવે છે ³એચ-સ્પાઇરોન ઓટોરોડીગ્રાફી.

(બી) પ્રાણઘાતક D2R બંધનને લીંબુ ઉંદર (ટી₍₂₅₎ = 5.02, પી <0.0001).

(સી) સ્ટ્રિએટલ ડી 2 આર બંધનકર્તા દુર્બળ (પી = 0.95) અથવા મેદસ્વી ઉંદર (પી = 0.56) માં શરીરની ચરબીની ટકાવારી સાથે સંબંધિત નથી.

(ડી-એફ) (ડી) સ્ટ્રાઇટલ D1R બંધન (ટી₍₂₄₎ = 1.31, પી = 0.20), (ઇ) કુલ ડોપામાઇન સામગ્રી (ડીએ; ટી.)₍₁₃₎ = 0.85, પી = 0.41) અને (એફ) ટાઇરોસિન હાઇડ્રોક્સિલેઝ (ટીએચ) ઘનતા (ટી)₍₁₄₎ = 0.48, પી = 0.64) આહાર જૂથો વચ્ચે જુદા ન હતા.

આંકડાકીય વિશ્લેષણ. વ્યક્તિગત ઉંદર સાથે મીન; n = 8–19 ઉંદર / જૂથ; વિદ્યાર્થીની ટી પરીક્ષણ (બી અને ડી – એફ) અથવા રેખીય રીગ્રેસન (સી); ^*પી <0.01.

આકૃતિ વિકલ્પો

અમે D2R બાઇન્ડિંગમાં સ્થૂળતા-મધ્યસ્થી ઘટાડા હેઠળના મિકેનિઝમને ઓળખવાનો પ્રયાસ કર્યો. આ કરવા માટે, અમે તફાવતો શોધી Drd2 એમઆરએનએ (સીટુ હાઇબ્રીડાઇઝેશન દ્વારા) અને તે ત્રણેય સ્ટ્રિએટલ પેટા વિભાગો (ડોર્સોમdડિયલ: પી = 0.92; ડોર્સોટલલ: પી = 0.90; વેન્ટ્રલ: પી = 0.34;) માં તે યથાવત છે. આકૃતિ એસ 2સી). અમે કુલ ડી 2 આર પ્રોટીન સ્તરને પ્રમાણિત કરવા માટે પશ્ચિમી બ્લોટ્સ કર્યા અને 50- અથવા 70-કેડીએ બેન્ડ્સમાં ક્યાંય કોઈ ફેરફાર કર્યો નથી, જે D2R (બંને p> 0.95 બંને,) ના વિવિધ ગ્લાયકોસિલેશન સ્ટેટ્સનું પ્રતિનિધિત્વ કરવાનું માન્યું છે. આંકડા S2ડી અને એસએક્સએનએક્સએક્સઇએ ()જ્હોન્સન અને કેની, 2010). છેવટે, અમે અગાઉ અહેવાલ પ્રમાણે D2R માં ઘટાડો સાથે સંબંધિત હોઈ શકે છે તે જોવા માટે દુર્બળ અને મેદસ્વી ઉંદરમાં મેટાબોલિક ડિસફંક્શનના માર્કર્સનું મૂલ્યાંકન કર્યું છે (ડન એટ અલ., 2012). મેદસ્વી ઉંદરમાં ઉપવાસ કોલેસ્ટ્રોલ (પી <0.0001), લેપ્ટિન (પી <0.0001), ગ્લુકોઝ (પી = 0.0002), ઇન્સ્યુલિન (પી = 0.001), અને પ્રતિકાર આધારિત-હોમિયોસ્ટેટિક મોડેલ આકારણી (હોમા-આઇઆર) (પી <0.001) હતી. , પરંતુ ટ્રાઇગ્લાઇસેરાઇડ્સ અથવા મફત ફેટી એસિડ્સ નહીં (આંકડા S1ડી-એસએક્સ્યુએનએક્સજેજે). જો કે, આ પરિબળોમાંથી કોઈ પણ સ્થૂળ ઉંદર (D1R) સાથે બંધબેસતા નથી.

D1R- જેવા બંધનકર્તા (ઑટોરાડિયોગ્રાફી દ્વારા ³એચ- SCH23390, ત્યારબાદ કહેવાતા D1R બંધનકર્તા) મેદસ્વી અને દુર્બળ ઉંદર (પી = 0.20;) વચ્ચે ભિન્ન ન હતા; આકૃતિ 2ડી). સ્ટ્રિએટલ ડી.એ. સામગ્રીમાં પણ કોઈ તફાવત નહોતા, સ્ટ્રિએટલ ટીશ્યુ પંચ્સ (પી = 0.41) ની ઉચ્ચ-પ્રદર્શન પરિવર્તન પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફી (એચપીએલસી) દ્વારા માપવામાં આવે છે; આકૃતિ 2ઇ), અથવા ટાયરોસિન હાઇડ્રોક્સિલેઝ ઇમ્યુનો-લેબલિંગ (પી = 0.64; આકૃતિ 2એફ). મેબેસ ઉંદરમાં બેસલ ડીએમાં તફાવતોની બહુવિધ અહેવાલોના પ્રકાશમાંકાર્લિન એટ અલ., 2013, ડેવિસ એટ અલ., 2008, વેસેટીક એટ અલ., 2012 અને વાંગ એટ અલ., 2014), અમે નો-નેટ ફ્લક્સ માઇક્રોડાયલિસીસ (નવા ઉંદર, n = 6 જૂથ દીઠ) નો ઉપયોગ કરીને આ મુદ્દાની વધુ શોધખોળ કરી. અમે ફરીથી એક્સ્ટ્રાસેલ્યુલર ડીએ (પી = 0.99) અથવા તેના બે ચયાપચય, 3,4, di-ડાયહાઇડ્રોક્સિફેનિલેસ્ટીક એસિડ (ડીઓપીએસી) (પી = 0.85) અને હોમોવાનિલીક એસિડ (એચવીએ) (પી = 0.68, આકૃતિ એસ 3), આ પદ્ધતિ સાથે, સૂચવે છે કે સ્થૂળતા આ પ્રયોગોમાં એક્સ્ટ્રા સેલ્યુલર ડી.એ. ટોનમાં ઘટાડા સાથે સંકળાયેલ નથી.

ચળવળ-સંબંધિત સ્ટ્રાઇટલ ફાયરિંગ મેબેસ ઉંદરમાં વિક્ષેપ પાડ્યો હતો

અમે સ્ટ્રિએટલ ડી 2 આર બંધનકર્તા સ્ટ્રિએટલ ન્યુરોનલ આઉટપુટને કેવી રીતે બદલી શકે છે અને ત્યાં ચળવળના ઘટાડામાં ફાળો આપી શકે છે તે તપાસવા અમે વિવો ઇલેક્ટ્રોફિઝિયોલોજીમાં પ્રદર્શન કર્યું. અમે દુર્બળ અને મેદસ્વી ઉંદરના ડોર્સોમેડિયલ સ્ટ્રાઇટમ (જૂથ દીઠ એન = 3 ઉંદર, હિસ્ટોલોજી) માં રેકોર્ડ કર્યું આકૃતિ 3એફ). તેમ છતાં મેદસ્વી ઉંદર એકંદરે ઓછા પ્રમાણમાં ખસેડવામાં આવ્યા છે, ચલાવવામાં આવેલી હલનચલનનો વેગ આ જૂથો વચ્ચે જુદો નથી (પી = 0.55; આકૃતિ 3એ), અમને દુર્બળ અને મેદસ્વી ઉંદર વચ્ચે ચળવળ-સંબંધિત ફાયરિંગની તુલના કરવાની મંજૂરી આપે છે. પાતળા મલ્ટિ-યુનિટ સ્પિકિંગ રેટ દુર્બળ અને મેદસ્વી ઉંદરો (દુર્બળ, 2.1 ± 0.4 હર્ટ્ઝ; મેદસ્વી, 2.0 ± 0.7 હર્ટ્ઝ; પી = 0.93) વચ્ચે ભિન્ન ન હતા. જો કે, ચળવળ-સક્રિયકૃત એકમોનો વ્યાપ (આકૃતિ 3બી) મેદસ્વી ઉંદરોમાં નોંધપાત્ર રીતે નીચો હતો (પી <0.0001; આકૃતિ 3સી). આ "ચળવળ-સક્રિયકૃત" એકમોની અમારી આંકડાકીય વ્યાખ્યા પર આધારિત નથી, કારણ કે આપણે મેદસ્વી વિરુદ્ધ દુર્બળ ઉંદરમાં તમામ રેકોર્ડ યુનિટ્સના સરેરાશ પ્રતિભાવમાં હલનચલનની આસપાસ સ્પિકિંગમાં ઘટાડો જોયો (એનોવા, પી <0.0002 દ્વારા ક્રિયાપ્રતિક્રિયા; આંકડા 3ડી અને 3E). અમે તારણ કાઢ્યું છે કે સ્ટ્રાઇટમમાં કુલ સ્પાઇકિંગ દર અલગ નહોતો, પરંતુ ચળવળની આસપાસ સ્પાઇક્સની સંસ્થા મેદસ્વી ઉંદરમાં વિક્ષેપ પાડ્યો હતો.

આકૃતિ 3.

સ્ટ્રિયટમમાં ચળવળ-સંબંધિત ફાયરિંગ મેબેસ ઉંદરમાં વિક્ષેપિત થયો હતો

(એ) ચળવળના ઇવેન્ટ્સમાં દુર્બળ અને મેદસ્વી ઉંદરમાં સમાન વેગ હતો.

(બી) સ્ટ્રાઇટલ ન્યુરોન્સમાં ચળવળ-સક્રિય અને બિન-પ્રતિભાવ ફાયરિંગના ઉદાહરણો.

(સી) મેદસ્વી ઉંદરોમાં ચળવળ-સક્રિયકૃત ન્યુરોન્સનું પ્રમાણ ઓછું હતું (પી = 0.002).

(ડી) બધા રેકોર્ડ ન્યૂરન્સની સરેરાશ હિલચાલ સંબંધિત ગોળીબાર.

(E) આહારના સંપર્ક પછી આંદોલન સંબંધિત ગોળીબાર નોંધપાત્ર રીતે ઓછો હતો (આહાર × ચળવળની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા, એફ_(1,171) = 14.77, પી <0.0002).

(એફ) યોજનાકીય (માંથી અનુકૂલિત ફ્રેન્કલિન અને પેક્સિનોસ, 1997) દુર્બળ અને મેદસ્વી રેકોર્ડિંગ ઉંદરમાં ઇલેક્ટ્રોડ એરે પ્લેસમેન્ટ દર્શાવતું (n = 3 દરેક).

આંકડાકીય વિશ્લેષણ. (સી) ફિશરની ચોક્કસ ચકાસણી. (ડી અને ઇ) ટુ-વે વાર પુનરાવર્તિત પગલાંઓ ANOVA.

આકૃતિ વિકલ્પો

Obese Mice માં આઇએમએસએન આઉટપુટ પુનર્સ્થાપિત પ્રવૃત્તિ સ્તરોની અવરોધ

આઇએમએસએનના આઉટપુટને ઘટાડવાથી મેદસ્વી ઉંદરમાં ચળવળ વધી શકે છે કે કેમ તે ચકાસવા માટે, અમે એક નિરોધક જી વ્યક્ત કરવા માટે ક્રાઇ-રેકોમ્બિનેઝ (Cre) આધારિત વ્યૂહરચનાનો ઉપયોગ કર્યો હતો._iમેદસ્વી ઉંદરના આઈ.એમ.એસ.એન. માં ડિઝાઇનર દવાઓ (KOR-DREADD) દ્વારા વિશેષરૂપે સક્રિય કરાયેલ કપ્પા ઓપ્ડિઓડ રીસેપ્ટર ડિઝાઇનર રીસેપ્ટરઆકૃતિ 4એ). જોકે એડિનોસિન 2A-receptor Cre (A2A-Cre) માઉસ અગાઉ ઇમ્યુનોસ્ટેનિંગ સાથે માન્ય કરવામાં આવ્યું હતું, જે દર્શાવે છે કે ક્રે અભિવ્યક્તિ સ્ટ્રાઇટલ આઇએમએસએન (IPMS)કુઇ એટ અલ., 2013 અને લીમોસ એટ અલ., 2016), અમે સીટો હાઇબ્રીડાઇઝેશનમાં ડબલ ફ્લોરોસન્ટ સાથે આ લાઇનની વધારાની માન્યતા કરી. લગભગ તમામ ન્યુરોન્સ (98.7 ગણાતા ન્યુરોનમાંથી 0.6% ± 1,301%) બંનેએ વ્યક્ત કરી ક્રે અને Drd2 એમઆરએનએ, જ્યારે ખૂબ જ ઓછા (1.3% - 0.6%) ક્યાં વ્યક્ત કરી હતી ક્રે or Drd2 એમઆરએનએ, પરંતુ બન્ને નહીં, એ ખાતરી કરે છે કે એક્સએક્સએનએક્સએ-ક્રાય લાઇન વિશ્વાસપૂર્વક આઇએમએસએન (IMSNs) આકૃતિ એસ 4).

આકૃતિ 4.

આઇબીએસએનની ડીએઆરએડીડી-મધ્યસ્થ નિરોધ Obese Mice માં શારીરિક પ્રવૃત્તિને પુનઃસ્થાપિત કરે છે

(એ) કૉર-ડ્રેડડ અભિવ્યક્તિનું ચિત્ર, અને યોજનાકીય (અનુકૂલિત ફ્રેન્કલિન અને પેક્સિનોસ, 1997) એક્સએક્સએનએક્સએ-ક્રે માસમાં તમામ કોર-ડ્રેડડના વાયરલ ઇન્જેક્શન સાઇટ્સનું વર્ણન કરે છે; અસ્પષ્ટતા આપેલ સ્થાનમાં ઉંદરને વ્યક્ત કરતી વાઇરસની સંખ્યા સૂચવે છે.

(બી) ડીએમએસઓ (ટી₍₇₎ = 3.056, પી = 0.02).

(સી-જી) સીએલબી વહીવટ પછી, મેદસ્વી ઉંદર (સી) હિલચાલની આવર્તન, (ડી) એવરેજ હિલચાલ સમયગાળો, અને (ઇ) સંચાલિત ગતિ, જ્યારે સંચાલિત ડીએમએસઓની તુલનામાં બિન-નોંધપાત્ર ફેરફારો દર્શાવે છે. (એફ) સાલ-બી વહીવટ પાલનની આવર્તનમાં વધારો (ટી₍₇₎ = 3.116, પી = 0.02), પરંતુ (જી) માવજત કરવાની આવર્તનને નોંધપાત્ર રીતે બદલ્યું નથી.

(એચ) ડી.એમ.એસ.ઓ. (ટી.) ની તુલનામાં સાલબી સાથે ઇન્જેકશન કરતી વખતે લીન ઉંદર વધુ ખસેડ્યું₍₉₎ = 3.3, પી = 0.01).

(I) સેલબીએ જંગલી પ્રકારના ઉંદરમાં હલનચલનને અસર કરી નથી કે જે KOR-DREADD (p = 0.77) વ્યક્ત કરતી નથી.

આંકડાકીય વિશ્લેષણ. (બી – આઇ) જોડી વિદ્યાર્થીઓની ટી પરીક્ષણો; અર્થ વ્યક્તિગત ઉંદર સાથે; n = 6-10 ઉંદર / જૂથ.

આકૃતિ વિકલ્પો

કેઓઆર-ડ્રેએડડી એગોનિસ્ટ સાલ્વિનોરીન-બી (સેલબી) ના ઇન્જેક્શનએ કેઓઆર-ડ્રેએડડી (પી = 0.02) દર્શાવતા મેદસ્વી ઉંદર દ્વારા પ્રવાસનું અંતર વધાર્યું હતું; આકૃતિ 4બી). સાલબીએ ઉછેરની આવર્તન પણ વધારી (પી = 0.02; આકૃતિ 4એફ) અને આવર્તનમાં વધારો તરફ વલણ (ટી₍₇₎ = 1.64, પી = 0.12), પરંતુ સમયગાળો અથવા ગતિ નહીં, ચળવળ (આંકડા 4સી – 4E). સાલબીના ઇન્જેક્શનથી દુર્બળ ઉંદરોમાં પણ હિલચાલ વધી (પી = 0.01; આકૃતિ 4એચ), પરંતુ જંગલી પ્રકારના ઉંદરમાં નથી કે જેમણે KOR-DREADD (p = 0.73) વ્યક્ત કરી નથી; આકૃતિ 4હું). અમે નિષ્કર્ષ કાઢીએ છીએ કે આઇએમએસએનના આઉટપુટને ઘટાડવા બંને પાતળા અને મેદસ્વી પ્રાણીઓની હિલચાલના સ્તરને વધારવા માટે પૂરતી છે.

ઓછા D2R સ્તર ફ્યુચર વેઇટ ગેઇન્સમાં પ્રાણીઓનું પૂર્વદર્શન નહીં કરો

છેવટે, આપણે તપાસ કરી કે શું D2R સંકેતલિપીમાં અસ્તિત્વમાં રહેલા તફાવતો ડાયેટ-પ્રેરિત મેદસ્વીતા પ્રત્યે વ્યક્તિગત ઉંદરને આગળ ધપાવી શકે છે. આ પ્રશ્નનો ઉકેલ લાવવા માટે, અમે માઇક્રો-પોઝિટ્રોન ઇમિશન ટોમોગ્રાફી (માઇક્રો-પીઇટી) સાથે કર્યું ¹⁸ઉચ્ચ-ચરબીયુક્ત ખોરાકના સંપર્કમાં પહેલા બેઝલાઇન D2R ઉપલબ્ધતા નક્કી કરવા માટે એફ-ફલીપ્રાઇડ (આકૃતિ 5એ). અમે ઉંદર વચ્ચે D2R બંધનકર્તા સંભવિતમાં ઉચ્ચ સ્તરનું ભિન્નતા નોંધ્યું છે, જેમ કે અન્ય લોકોએ બતાવ્યું છે (કોન્સ્ટેન્ટાઇન્સુ એટ અલ., 2011). ડી 2 આર પ્રાપ્યતામાં વ્યક્તિગત તફાવતો ખુલ્લા મેદાનમાં હલનચલન સાથે સકારાત્મક રીતે સંબંધિત હતા (પી = 0.045; આકૃતિ 5બી), ચળવળમાં D2R ની ભૂમિકા સાથે સુસંગત. માઇક્રો-પીઈટી સ્કેનીંગ પછી, પ્રાણીઓ 18 અઠવાડિયા સુધી ઉચ્ચ ચરબીયુક્ત આહાર પર જાળવવામાં આવ્યા હતા, જેથી પરીક્ષણ કરવા માટે કે ઓછી ડી 2 આરવાળા ઉંદર આહાર પ્રેરિત વજન વધારવા માટે વધુ સંવેદનશીલ છે કે નહીં. આશ્ચર્યજનક રીતે, અમને એ તરફનો ટ્રેન્ડ મળ્યો હકારાત્મક પ્રારંભિક ડી 2 આર પ્રાપ્યતા અને આ પ્રયોગ દરમ્યાન વજન વધારવાની વચ્ચેનો સંબંધ (પી = 0.10; આકૃતિ 5સી). જો કે આ સહસંબંધ મહત્વપૂર્ણ નથી, તે પૂર્વધારણા સામે દલીલ કરે છે કે ઓછી D2R પ્રાપ્યતા અથવા ઓછી ભૌતિક નિષ્ક્રિયતા પ્રાણીઓને વજન વધારવા માટે વધુ જોખમી બનાવે છે. આ અમારા તારણો સાથે પણ સુસંગત હતું કે ન તો બેઝલ ઓપન ફિલ્ડ પ્રવૃત્તિ, અથવા સમગ્ર પ્રયોગમાં ખુલ્લી ફિલ્ડની પ્રવૃત્તિ, વજન ગેઇન સાથે સંકળાયેલ (આંકડા 1એફ-1K).

આકૃતિ 5.

બેસલ ડીએક્સએનએક્સએક્સઆર બાઇન્ડિંગે ફ્યુચર વેઇટ ગેઇન આગાહી કરી નથી

(એ) સ્ટ્રાઇટમ અને સેરેબિલમનો ઉપયોગ કરીને D2R માઇક્રો-પીઈટી ઉપલબ્ધતા વળાંક ¹⁸એફ-ફેલીપ્રાઇડ.

(બી અને સી) (બી) બંધારણ સંભવિત મૂળભૂત ખુલ્લા ક્ષેત્રની ચળવળ (આર = 0.56, પી = 0.045) સાથે સંકળાયેલ છે, અને (સી) ઉચ્ચ ચરબીવાળા ખોરાક-પ્રેરિત વજન ગેઇન (આર = 0.50, પી) સાથેના સકારાત્મક સંબંધ તરફ વલણ ધરાવે છે. = 0.10, n = 12–14 ઉંદર).

(ડી) ઉંદરમાં D2R (ટોચ) અને આઇએમએસએન-Drd2-કેઓ ઉંદર (નીચે).

(ઇ અને એફ) (ઇ) આઇએમએસએન-Drd2-કે.ઓ. ઉંદર ખુલ્લા ક્ષેત્રમાં (શ₍₈₎ = 2.99, પી = 0.02) અને (એફ) હોમ કેજ પર ચાલતા વ્હીલ્સ પર (પી = 0.01, એન = 5–19 ઉંદર / જૂથ).

(જી) આઇએમએસએન-Drd2-કેઓ ઉંદર અને Drd2-ફ્લોક્સ્ડ કિટ્ટરમેટ નિયંત્રણોએ ઉચ્ચ ચરબીયુક્ત આહાર (એફ_(5,70) = 1.417, પી = 0.23; n = 6-10 ઉંદર / જૂથ).

(એચ – જે) (એચ) નોર્મલાઇઝ્ડ એનર્જી ઇન્ટેક (પી = 0.60), (આઇ) energyર્જા ખર્ચ (પી = 0.47), અથવા (જે) આરઇઆર (પી = 0.17) આઈએમએસએન-ડી 2 આર-કો વચ્ચે કોઈ નોંધપાત્ર તફાવત નથી. ઉંદર અને કચરાપેટી નિયંત્રણો.

આંકડાકીય વિશ્લેષણ. (બી અને સી) લીનિયર રીગ્રેશન; (ઇ, એફ, અને એચ-જે) unpaired વિદ્યાર્થી ટી પરીક્ષણ; (જી) બે માર્ગો વારંવાર-પગલાં ANOVA, ^*પી <0.05.

આકૃતિ વિકલ્પો

પ્રવૃતિના સ્તરો અને વજનમાં અગાઉથી અસ્તિત્વમાં રહેલા તફાવતો વચ્ચેના સંબંધને વધુ અન્વેષણ કરવા માટે, અમે એક આનુવંશિક માઉસ મોડેલનો લક્ષ્યાંક કાઢી નાખવા સાથેનો લાભ લીધો. Drd2 આઇએમએસએન (જીએમએન) માંથી જનીન (આઇએમએસએન-Drd2-કેઓ) પરંતુ અન્ય સેલ પ્રકારોમાં સાચવેલ અભિવ્યક્તિ ( ડોબ્સ એટ અલ., 2016 અને લીમોસ એટ અલ., 2016). જેમ અગાઉ અહેવાલ છે, આઇએમએસએન-Drd2-કે ઉંદર ખુલ્લા મેદાનમાં કચરાપેટી નિયંત્રણો કરતા ઓછા ખસેડવામાં આવ્યા છે (p = 0.02; આકૃતિ 5ઇ) અને ઘરનાં પાંજરામાં ચાલતા વ્હીલ્સ પર (પી = 0.01; આકૃતિ 5એફ). ઉપરોક્ત પ્રયોગો સાથે સુસંગત, આઇએમએસએન-Drd2-કે ઉંદરો જ્યારે વધુ ચરબીયુક્ત આહાર પર મૂકવામાં આવે છે ત્યારે તેમના કચરાના નિયંત્રણ કરતાં વધુ વજન નથી મેળવતા (પી = 0.23; આકૃતિ 5જી). તેમના ઉર્જા ઉપયોગને વધુ નજીકથી ચકાસવા માટે, અમે આઇએમએસએન-આઇએનએલની સરખામણી કરવા માટે અણુ કેલરીમેટ્રી પ્રયોગો કર્યા હતા.Drd2-કટો ઉંદર માટે કચરાપેટી નિયંત્રણો. અમને energyર્જા વપરાશ (પી = 0.60), energyર્જા ખર્ચ (પી = 0.47), અથવા શ્વસન વિનિમય ગુણોત્તર (આરઇઆર) (સીઓનો ગુણોત્તર) માં નોંધપાત્ર તફાવતો મળ્યાં નથી.₂ ઓ ઉત્પાદન₂ વપરાશ [વીકો₂/ વીઓ₂], પી = 0.17) આઈએમએસએન-ડીઆરડી 2-કો ઉંદરો અને તેમના લિટરમેટ કંટ્રોલ વચ્ચે, સૂચવે છે કે આઇએમએસએન-ડીઆરડી 2-કો ઉંદરોની ગતિમાં ઘટાડો એ energyર્જાના ઉપયોગના ફેરફારોમાં અનુવાદિત નથી (આંકડા 5એચ-એક્સએનટીએક્સજે). છેવટે, અમે હદ સુધી સંશોધન કર્યું કે સ્ટ્રેટલ D5R (જેમ કે આપણા મેદસ્વી ઉંદરમાં જોવા મળતા) માં નાના ઘટાડા, ચળવળ અને વજનમાં વધારો નિયંત્રિત કરી શકે છે. આ કરવા માટે, અમે માઉસ લાઇનનો ઉપયોગ કર્યો છે જે સ્ટ્રાઇટલમાં 2% -30% ઘટાડો થાય છે Drd2 એમઆરએનએ (આઇએમએસએન-ડ્રેડએક્સએનએક્સ-હેટ) ( લીમોસ એટ અલ., 2016). આ ઉંદરોએ પણ ઓછી હિલચાલનું પ્રદર્શન કર્યું, જે દર્શાવે છે કે ડી 2 આરની આંશિક પછાત મોટરની ખોટ પેદા કરવા માટે પૂરતી છે (પી = 0.04; આકૃતિ એસ 5એ). IMSN-Drd2-KO ઉંદરની જેમ, iMSN-Drd2-het ઉંદર ઉચ્ચ ચરબીયુક્ત ખોરાક-પ્રેરિત વજન વધારવા માટે વધુ સંવેદનશીલ નથી (પી = 0.89; આકૃતિ એસ 5બી). અમે નિષ્કર્ષ કાઢીએ છીએ કે સ્ટ્રેટલ D2R માં ફેરફાર ચળવળને બદલવા માટે પૂરતી છે, પરંતુ કેલરી સંતુલન અથવા ઉંદરમાં વજનનું વજન નથી.

ચર્ચા

જાડાપણું શારિરીક નિષ્ક્રિયતા સાથે સંકળાયેલું છે, જે ઘણી વાર વજન વધારવામાં યોગદાન આપતું હોવાનું મનાય છે. વધુમાં, મેદસ્વીતાવાળા લોકોમાં ઓછા પ્રવૃત્તિ સ્તરમાં ફાળો આપવા માટે વધારાની એડિપોસીટીની કલ્પના કરવામાં આવી છે (એક્કેકિસ અને લિન્ડ, 2006 અને વેસ્ટર્ટરપ, 1999), જોકે આ વિચાર સીધો ચકાસવાનું મુશ્કેલ છે. રસપ્રદ વાત એ છે કે, લોકો જે ખોરાક દ્વારા વજન ગુમાવે છે (ડી બોઅર એટ અલ., 1986, ડી ગ્રૂટ એટ અલ., 1989, માર્ટિન એટ અલ., 2007 અને રેડમેન એટ અલ., 2009) અથવા બારીટ્રિક સર્જરી (બર્ગલિન્ડ એટ અલ., 2015, બર્ગલિન્ડ એટ અલ., 2016, બોન્ડ એટ અલ., 2010 અને રેમિરેઝ-મેરેરો એટ અલ., 2014) તેમની નિષ્ક્રિયતાને લીધે એડિપોસીટીના વજન સામે દલીલ કરતાં, તેમના પ્રવૃત્તિ સ્તરમાં વધારો નહીં કરો. અહીં, અમે પૂર્વધારણાની તપાસ કરી કે ડાયેટ-પ્રેરિત મેદસ્વીતા સ્ટ્રેટલ ડીએ ટ્રાન્સમિશનમાં ખામી દ્વારા શારિરીક નિષ્ક્રિયતાનું કારણ બને છે. અગાઉના કામ સાથે સુસંગત, અમે જોયું કે ક્રોનિક હાઇ-ફેટ ડાયેટ સ્ટ્રાઇટલ D2R બંધનકર્તા (હજનલ એટ અલ., 2008, હુઆંગ એટ અલ., 2006, નારાયણસ્વામી એટ અલ., 2013, વેન ડી ગિસેન એટ અલ., 2012 અને વેન ડી ગિસેન એટ અલ., 2013). અમે મેદસ્વી ઉંદરમાં સ્ટ્રેટલ ન્યુરોનની મોટર-સંબંધિત ફાયરિંગમાં ખાધ પણ જોયેલી. જી સાથે ઇન્ટાઇટિંગ આઇએમએસએન_i-ડુપ્ડ ડ્રેડડી મેદસ્વી ઉંદરમાં બચાવેલી પ્રવૃત્તિ, દર્શાવે છે કે વધારે પડતા ઉંદરતા સાથે ઉંદર સામાન્ય રીતે ખસેડી શકે છે જ્યારે બેસલ ગેંગલિયા આઉટપુટ પુનઃસ્થાપિત થાય છે.. આશ્ચર્યજનક રીતે, જોકે, બેઝલ ડીએક્સટીએક્સએક્સઆર માપ અથવા નૈતિક પ્રવૃત્તિ વજન ગેજેટ સાથે સંકળાયેલ છે, તે એક બિંદુ કે જે આપણે બહુવિધ પ્રયોગોમાં જોયેલી છે. આ ઉંદરોના અભ્યાસના વિપરીત છે, જે પ્રજાતિઓ અથવા પ્રાયોગિક તફાવતોને પ્રતિબિંબિત કરી શકે છે (માઇકલાઇડ્સ એટ અલ., 2012). અમે નિષ્કર્ષ કાઢીએ છીએ કે D2R માં ઘટાડો અને ત્યારબાદ શારિરીક નિષ્ક્રિયતા મેદસ્વીતાના પરીણામો છે, પરંતુ ઉંદરમાં વધુ વજન વધારવા માટે તે જરૂરી રૂપે જોડાયેલ નથી.

બદલાયેલ D2R સિગ્નલિંગ અને મેદસ્વીતા વચ્ચેની લિંક પ્રથમ માનવીઓમાં ઓળખી કાઢવામાં આવી હતી અને શરૂઆતમાં તે અન્ય લોકો દ્વારા નકલ કરવામાં આવી હતી (ડી વેઇઝર એટ અલ., 2011, કેસલ એટ અલ., 2014, વોલ્કો એટ અલ., 2008 અને વાંગ એટ અલ., 2001). જો કે, તાજેતરના કામમાં આ શોધને પ્રશ્નમાં કહેવામાં આવ્યું છે (કારાવાગીયો એટ અલ., 2015, કોસગ્રોવ એટ અલ., 2015, ડન એટ અલ., 2012, ગુઓ એટ અલ., 2014, કાર્લસન એટ અલ., 2015, કાર્લસન એટ અલ., 2016, સ્ટીલે એટ અલ., 2010 અને તુમિનેન એટ અલ., 2015). ક્લિનિકલ અભ્યાસોમાં જોવાયેલી વિસંગતતાઓને સમજવા માટે વધારાની સંશોધનની આવશ્યકતા હોવા છતાં, તેઓ ક્લિનિકલ અભ્યાસ અને પીઇટી ઇમેજિંગમાં સંકળાયેલ જટિલતાઓને પ્રતિબિંબિત કરી શકે છે. દાખલા તરીકે, રેકોલોરાઇડ, રેડિયો-લિગૅન્ડ ઘણા અભ્યાસોમાં ઉપયોગમાં લેવાય છે, તેને એન્ડોજેન્સ DA દ્વારા વિસ્થાપિત કરી શકાય છે, અને તેથી બાહ્ય ડીએલ ટોનમાં તફાવતોથી પ્રભાવિત થઈ શકે છે. (હોર્સ્ટમેન એટ અલ., 2015). આ ઉપરાંત, D2R સ્તર અને સ્થૂળતા વચ્ચેનો સંબંધ બિન-રેખીય હોઈ શકે છે, જેમ કે સ્થૂળતાના વિવિધ સ્તરો ધરાવતા દર્દીઓમાં D2R માં ફેરફારો અલગ હોઈ શકે છે (હોર્સ્ટમેન એટ અલ., 2015). છેલ્લે, ઊંઘની અવધિ જેવા પરિબળો (વાયર્સ એટ અલ., 2016) અને કેફીનનું સેવન (વોલ્કો એટ અલ., 2015) D2R બંધનને પણ પ્રભાવિત કરી શકે છે, અને મોટાભાગના ક્લિનિકલ અભ્યાસોમાં જાણ અથવા નિયંત્રિત નથી. ભિન્નતાના આ સ્રોતો પ્રાણી અભ્યાસોમાં ઘટાડો કરી શકાય છે, જે D2R એમઆરએનએમાં ઘટાડોની સતત ચિત્રને રંગે છે (મેથેસ એટ અલ., 2010 અને ઝાંગ એટ અલ., 2015), પ્રોટીન (એડમ્સ એટ અલ., 2015 અને જ્હોન્સન અને કેની, 2010), અને રીસેપ્ટર બંધનકર્તા (હજનલ એટ અલ., 2008, હુઆંગ એટ અલ., 2006, નારાયણસ્વામી એટ અલ., 2013, વેન ડી ગિસેન એટ અલ., 2012 અને વેન ડી ગિસેન એટ અલ., 2013) મેદસ્વી ઉંદરો માં. આપણું કાર્ય સાહિત્યના આ જૂથને અહેવાલ આપે છે કે ડીએ સિગ્નલિંગના અન્ય પાસાંઓ મેદસ્વી ઉંદરમાં અપરિવર્તિત રહે છે, તે પણ D2R માં ઘટાડો સાથે. વધુમાં, D2R ના બંધનકર્તામાં અવલોકન આપેલ ઘટાડો ³એચ-સ્પાઇરોન, પરંતુ કુલ D2R પ્રોટીનમાં કોઈ ફેરફાર નથી Drd2 એમઆરએનએ, અમે માનીએ છીએ કે ડીએક્સએનએક્સએક્સઆરમાં ફેરફારથી રીસેપ્ટર આંતરિકકરણ જેવા પોસ્ટ-ટ્રાન્સલેશનલ ફેરફારોનો સમાવેશ થઈ શકે છે. તેમ છતાં આપણા ડેટા સૂચવે છે કે સ્થૂળતામાં શારીરિક પ્રવૃત્તિ ઘટાડવા માટે D2R બંધન ઓછું છે, શારીરિક પ્રવૃત્તિને કારણે ઘણા બધા પરિબળોથી અસર થાય છે જેમાં આનુવંશિક અને પર્યાવરણ ( બૌમન એટ અલ., 2012). અમે માનીએ છીએ કે તે સંભવ છે કે સ્થૂળતામાં શારીરિક નિષ્ક્રિયતા સાથે સંકળાયેલ એકમાત્ર ન્યુરોલોજીકલ પરિવર્તન D2R છે. દાખલા તરીકે, ઘેરલિન, લેપ્ટીન અને ઇન્સ્યુલિન જેવા પરિભ્રમણશીલ હોર્મોન્સમાં ફેરફાર ડોપામિનેર્જિક ન્યુરોન્સ પર થાય છે અને તે પ્રવૃત્તિને પ્રભાવિત કરી શકે છે.મુરે એટ અલ., 2014). છેવટે, જો કે અમે D1R માં ફેરફારોનું પાલન ન કર્યું હોવા છતાં, અમે સીધા પાથવે ચેતાકોષના ન્યુરોનલ ફાયરિંગમાં ફેરફારોને નકારી શકતા નથી જે શારીરિક પ્રવૃત્તિને પ્રભાવિત પણ કરી શકે છે.

તે સ્પષ્ટ નથી કે D2R ની ઉપલબ્ધતામાં વ્યક્તિઓ વજન વધારવા માટે પૂર્વવ્યાખ્યાયિત કરે છે. માનવ સાથે Drd2 Taq1A એલિલે D2R ની ઉપલબ્ધતા ઘટાડી છે અને મેદસ્વીતાના જોખમમાં વધારો કર્યો છે ( બ્લમ એટ અલ., 1996, સુથાર એટ અલ., 2013, નોબલ એટ અલ., 1991, સ્ટાઇસ એટ અલ., 2008 અને થomમ્પસન એટ અલ., 1997). આ ઉપરાંત, ડીએક્સએનએક્સએક્સઆરએસના વૈશ્વિક વિખરાયેલા ઉંદરને વધુ ચરબીયુક્ત ચરબીયુક્ત ખોરાક પર વજન પ્રાપ્ત થયું છે, જેને શારીરિક નિષ્ક્રિયતા માટે આભારી છે (બીલર એટ અલ., 2015). તેનાથી વિપરીત, સ્ટ્રાઇટલ D2R માં વ્યક્તિગત ભિન્નતા (કુદરતી અથવા આનુવંશિક પ્રેરિત) અમારા અભ્યાસમાં પ્રવૃત્તિ સ્તર સાથે સંકળાયેલ છે, પરંતુ વજન ગેઇન સાથે સહસંબંધિત નથી. અમારા અભ્યાસમાં એક મહત્વપૂર્ણ તફાવત એ હતો કે અમારા આનુવંશિક મોડેલને સંપૂર્ણપણે આઇએમએસએન (DMSNUMXR) માંથી D2R દૂર કરવામાં આવ્યા હતા. આ ઉપરાંત, ખાદ્ય સેવન અને ઉર્જા ખર્ચના કાળજીપૂર્વક માપવાથી જાણવા મળ્યું છે કે આ ચેતાકોષો પર D2R ને મેનિપ્યુલેટીંગથી ઊર્જા સંતુલનમાં ફેરફાર થયો નથી. જેમ કે, વૈશ્વિક ડીએક્સએનએક્સએક્સઆર કાર્ય અને ઊર્જા સંતુલન વચ્ચેની લિંક્સ દર્શાવે છે તે અભ્યાસ અન્ય સેલ પ્રકારો પર D2R ની અસરોને અવલોકન કરી શકે છે. અમારા પ્રયોગો નિષ્કર્ષને સમર્થન આપે છે કે શારિરીક નિષ્ક્રિયતા મેદસ્વીપણાનું પરિણામ છે પરંતુ વજનમાં પરિવર્તન લાવવા માટે તે પૂરતું નથી.

વધતા પુરાવા હોવા છતાં કે શારીરિક પ્રવૃત્તિ કાર્ડિયોવેસ્ક્યુલર આરોગ્યમાં સુધારણા સાથે સંકળાયેલી છે અને અન્ય કેટલાક ક્રોનિક રોગોમાં જોખમ ઘટાડે છે, સ્થૂળતા સાથે શારીરિક પ્રવૃત્તિ ઓછી રહે છે (એક્કેકાકિસ એટ અલ., 2016). સ્થૂળતા સાથે વ્યક્તિઓમાં શારિરીક નિષ્ક્રિયતાને આધારે સેલ્યુલર અને પરમાણુ મિકેનિઝમ્સની સમજણની અભાવે શારીરિક પ્રવૃત્તિ સ્તર વધારવા માટે અસરકારક હસ્તક્ષેપની અભાવ પ્રતિબિંબિત થાય છે. અહીં, અમે બેસલ ગેંગ્લિયા ફંક્શનમાં બદલાવ માટે ભૌતિક નિષ્ક્રિયતાને લિંક કરીએ છીએ, સ્થૂળતાવાળા વ્યક્તિઓમાં શારિરીક પ્રવૃત્તિની અભાવ માટે જૈવિક સમજણ પ્રદાન કરીએ છીએ.

પ્રાયોગિક પ્રક્રિયાઓ

વિષયો અને આહાર

બધા અભ્યાસોમાં, ઉંદરને વ્યક્તિગત ધોરણો (12-કલાક પ્રકાશ / શ્યામ ચક્ર, 21-22 ° સે), ખાદ્ય અને પાણીની liક્સેસથી મુક્ત રાખવામાં આવ્યા હતા. ઉંદરોને ક્યાં તો પ્રમાણભૂત ચા આહાર (5001 રોડેન્ટ ડાયેટ; 3.00 કેસીએલ / જી પ્રોટીનમાંથી 29% energyર્જા, ચરબીમાંથી 13%, અને કાર્બોહાઇડ્રેટથી 56%; લેબડાઇટ) અથવા ઉચ્ચ ચરબીયુક્ત આહાર (ડી 12492; 5.24 કેસીએલ / જી સાથે પૂરા પાડવામાં આવ્યા હતા. પ્રોટીનમાંથી નીકળતી 20% energyર્જા, ચરબીમાંથી 60%, અને કાર્બોહાઇડ્રેટથી 20%; સંશોધન આહાર). ડાયાબિટીઝ અને પાચક અને કિડનીના રોગો પર નેશનલ ઇન્સ્ટિટ્યૂટની એનિમલ કેર અને ઉપયોગ સમિતિના માર્ગદર્શિકા અનુસાર તમામ કાર્યવાહી કરવામાં આવી હતી.

ટ્રાન્સજેનિક કંડિશનલ નોકઆઉટ આઇએમએસએન-Drd2-એડોનોસિન 2A રીસેપ્ટર જનીનના નિયમનકારી ઘટકો દ્વારા સંચાલિત ક્રિસને ઉદ્ભવતા ઉંદરને પાર કરીને કે.ઓ. ઉંદર બનાવવામાં આવ્યા હતા.ઍડોરાએક્સએક્સએક્સએ) (B6.FVB (સીજી) -ટીજી (ઍડોરાએક્સયુએનએક્સ-ક્રે) કેજીએક્સએનએક્સજીએસએસટ / એમમુક્ડ; GENSAT; 2-UCD) ઉંદર શરતી વહન સાથે Drd2 નલ એલિલ્સ B6.129S4 (એફવીબી) -Drd2^{tm1.1Mrub / જે}, JAX020631 (બેલો એટ અલ., 2011).

શારીરિક રચના અને ઊર્જા ખર્ચ ગણતરીઓ

બોડી કમ્પોઝિશનનો ઉપયોગ દર બીજા અઠવાડિયે કરવામાં આવે છે ¹એચ-એનએમઆર સ્પેક્ટ્રોસ્કોપી (ઇકોએમઆર-એક્સ્યુએનએક્સએચ; ઇકો મેડિકલ સિસ્ટમ્સ). એનર્જી ખર્ચનો ઉપયોગ ઊર્જા સંતુલન ગણતરી દ્વારા કરવામાં આવ્યો હતો (ગુઓ એટ અલ., 2009 અને રવુસીન એટ અલ., 2013):

ઊર્જા ખર્ચ = મેટાબોલીજેબલરેટિએન્ટેક- (Δફટમાસ + Δફટ-ફ્રીમાસ).

મેથજેક્સ ચાલુ કરો

ઓપન-ફીલ્ડ પ્રવૃત્તિ

ફેનોટાઇપર પાંજરામાં (×૦ × cm૦ સે.મી.; નોલ્ડસ આઇટી) ખુલ્લા ક્ષેત્ર પરીક્ષણો લેવામાં આવ્યા હતા, અને ઇથોવિઝન વિડિઓ વિશ્લેષણ સ softwareફ્ટવેર (સંસ્કરણ 30; નોલ્ડસ આઇટી) નો ઉપયોગ પરીક્ષણ દરમિયાન ઉંદરને ટ્રેક કરવા માટે કરવામાં આવતો હતો.

ઘર કેજ વ્હીલ ચાલી રહેલ

લો-પ્રોફાઇલ વાયરલેસ રનિંગ વ્હીલ્સ (મેડ એસોસિએટ્સ) દર 72 અઠવાડિયામાં 3 કલાક માટે (આહાર-આધારિત મેદસ્વીતાના પ્રયોગો) અથવા સતત (આઇએમએસએન-) ઉંદરના ઘરના પાંજરામાં મૂકીને વ્હીલ રિંગિંગને માપવામાં આવી હતી.Drd2-કેઓ પ્રયોગો).

બ્લડ મેઝર

બલિદાનવાળા પ્રાણીઓમાંથી ઓક્યુલર નસો લોહીનો ઉપયોગ 4-hr ફાસ્ટ પછી સીરમ મેટાબોલાઇટ્સ અને હોર્મોન્સના વિશ્લેષણ માટે થયો હતો.

ડોપામાઇન રિસેપ્ટર ઑટોરાડિયોગ્રાફી

સ્ટ્રાઇટા (−0.22, 0.14, 0.62 અને બ્રિગ્માથી 1.18 મીમી, સ્ટ્રાઇટમની સંપૂર્ણ હદને આવરી લેતા) ના સ્તરે જમણા ગોળાર્ધમાં 12 મી.મી. વિભાગોમાં ક્રિઓઝેક્શન કરવામાં આવ્યું હતું. સ્લાઇડ્સ ઓગળતી અને અસીફ બફર (20 એમએમ હેપ્સ, 154 એમએમ એનએસીએલ, અને 0.1% બોવાઇન સીરમ આલ્બ્યુમિન [બીએસએ]; પીએચ 7.4) માં 20 મિનિટ માટે 37 મિનિટ માટે પીગળી અને પૂર્વસંવેદન કરવામાં આવી હતી. ડી 1 આર બંધનકર્તાનું મૂલ્યાંકન 1.5 એનએમ ટ્રીટિયમ લેબલવાળા એસસીએચ -23390 (પર્કીન-એલ્મર) અને 100 એનએમ કેટેન્સરિન સાથે 60 મિનિટે 37 ડિગ્રી સેલ્સિયસ ધરાવતા અસાફ બફરમાં સ્લાઇડ્સ ઉતારીને કરવામાં આવ્યું હતું. ડી 2 આર બાઈન્ડિંગનું મૂલ્યાંકન 600 પીએમ ટ્રાઇટિયમ-લેબલવાળી સ્પીપરોન (પર્કીન-એલ્મર) અને 100 એનએમ કેટેન્સરિન સાથે 100 મિનિટ માટે 37 ° સે. યોગ્ય રેડિયોલિગandંડ સાથેના સેવનને પછી, સ્લાઇડ્સને 10 મિનિટ માટે 4 ડિગ્રી વોશ બફર (10 એમએમ ટ્રિસ-એચસીએલ, 154 એમએમ એનએસીએલ) માં બે વાર ધોવાઈ, અને પછી પાણીમાં ડૂબવું (0 ° સે) અને રાતોરાત સૂકવવા દેવામાં આવી. ત્યારબાદ સ્લાઇડ્સને 7 (ડી 1 આર બંધનકર્તા) અથવા 11 દિવસ (ડી 2 આર બંધનકર્તા) માટે ફોસ્ફર-ઇમેજિંગ પ્લેટોમાં ખુલ્લી મૂકવામાં આવી હતી અને ફોસ્ફોઇમેજર (ચક્રવાત; પર્કિન-એલ્મર) નો ઉપયોગ કરીને વિકસિત કરવામાં આવી હતી. વિશ્લેષણ માટે, tiપ્ટિક્વન્ટ ઇમેજ વિશ્લેષણ સ softwareફ્ટવેર (પર્કીન-એલ્મર) નો ઉપયોગ કરીને રુચિના ક્ષેત્રોની રૂપરેખા અને વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું.

પશ્ચિમી બ્લોટિંગ

પશ્ચિમી વિરોધી માઉસ એન્ટિ-ડીએક્સયુએનએક્સએક્સડીઆર એન્ટિબોડી (2: 1; સાન્ટા ક્રૂઝ; એસસી-એક્સ્યુએનએક્સએક્સ) અથવા માઉસ એન્ટી-ગેપડીએચ એન્ટિબોડી (500: 5303; સાન્ટા ક્રૂઝ; એસસી-એક્સયુએનએક્સ) સાથે ઉકાળવામાં આવ્યા હતા અને તે પછી બકરી વિરોધી માઉસ આઇજીજી- એચઆરપી (1: 1,000; સાન્ટા ક્રૂઝ; એસસી-એક્સ્યુએનએક્સ). કેમેલ્યુમાઇન્સન્સ સિગ્નલ ઉન્નત કેમેલ્યુમાઇન્સન્સ વેસ્ટર્ન બ્લોટિંગ ડિટેક્શન રેજેન્ટ્સ (બાયો-રેડ) નો ઉપયોગ કરીને જનરેટ થયો હતો અને કેમડોક ઇમેજિંગ સિસ્ટમ (બાયો-રેડ) સાથે દ્રશ્યમાન થયો હતો.

સિતુ હાઇબ્રિડાઇઝેશનમાં

સી.એન.ટી. સંકર (એડવાંસ્ડ સેલ ડાયગ્નોસ્ટિક્સ) માં આર.એન.એનસ્કોપ મલ્ટીપ્લેક્સ ફ્લોરોસન્ટ એસે કીટનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. ટૂંકમાં, formalપચારિક નિયત ભાગોને ઇથેનોલમાં ડિહાઇડ્રેટ કરવામાં આવ્યા હતા ત્યારબાદ પ્રોટીઝ એક્સપોઝર. ત્યારબાદ વિભાગો આરએનએસ્કોપ ઓલિગોન્યુક્લિયોટાઇડ પ્રોબ્સ સાથે સંકરિત કરવામાં આવ્યા હતા Drd2. તપાસ હાઇબ્રીડાઇઝેશન પછી, આરએનએસ્કોપ પ્રોટોકોલ્સ મુજબ સિગ્નલ એમ્પ્લીફાયર સાથે સ્લાઇડ્સ ઉભરાયેલા હતા. પછી સ્લાઇડ્સ આરએનએસ્કોપ વૉશ બફર સાથે ધોવાઇ હતી. છેવટે, DAPI counterstain સાથે સ્લાઇડ્સ માઉન્ટ કરવામાં આવી હતી.

હાઇ-પર્ફોમન્સ લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી ઇલેક્ટ્રોકેમિકલ ડિટેક્શન સાથે

અગાઉ વર્ણવ્યા પ્રમાણે, વિદ્યુતસાયણિક શોધ (એચપીએલસી-ઇસી) સાથે રિવર્સ-તબક્કામાં ઉચ્ચ-પ્રભાવશાળી પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફીનો ઉપયોગ કરીને ડીએની શોધ માટે ડાબેરી હેમિઝિક્શન્સ પર પ્રક્રિયા કરવામાં આવી હતી.કિલપટ્રિક એટ અલ., 1986).

ટાયરોસિન હાઈડ્રોક્સાઇલેઝ ઇમ્યુનોહિસ્ટૉકેમિસ્ટ્રી

સ્લાઇડ-માઉન્ટ થયેલ વિભાગો 10% તટસ્થ બફર્ડ ફોર્મ્યુલિનમાં ઠીક કરવામાં આવ્યા હતા, 0.1 એમ ટીબીએસ (પીએચ 7.5) માં કોગળા અને 3% સામાન્ય ગધેડા સીરમ, 0.3% ટ્રાઇટોન એક્સ -100, અને સસલા વિરોધી ટાઇરોસિન હાઇડ્રોક્સિલેઝ એન્ટીબોડી ધરાવતાં પ્રાથમિક એન્ટિબોડી સોલ્યુશનમાં સેવામાં આવ્યા હતા. (1: 1,000; મિલિપોર; MAB152) 23 3 સે. પછીના દિવસે, ટીશ્યુમાં ટીશ્યુ વિભાગો કોગળા કરવામાં આવ્યા હતા અને ગૌણ એન્ટિબોડી સોલ્યુશનમાં 0.3% સામાન્ય ગધેડો સીરમ, 100% ટ્રાઇટોન એક્સ -555, અને બકરી વિરોધી સસલાને એલેક્ઝા ફ્લૂર 132 (મિલિપોર; એક્યુ XNUMX એફ) માં જોડવામાં આવ્યા હતા. દરેક ઉંદર માટે, બે સ્ટ્રાઇટલ વિભાગોનું વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું, સિવાય કે ચાર ઉંદર (બે એચએફડી, બે ચૌ), જ્યાં ફક્ત એક જ વિભાગનું વિશ્લેષણ નબળા પેશી અથવા છબીની ગુણવત્તાને કારણે કરવામાં આવ્યું હતું.

માઇક્રો-પીઈટી

ઉંદર સાથે ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવી હતી ¹⁸આઇસોફ્લુરેન એનેસ્થેસીયા હેઠળ હોય ત્યારે પૂંછડી નસ દ્વારા 2.5 μL ની વોલ્યુમમાં 0.34 ± 130 એમસીઆઈ / એનએમએલની વિશિષ્ટ પ્રવૃત્તિ સાથે એફ-ફાલિપ્રાઇડ. માઇક્રો-પીઈટી સ્કેન 2 કલાક માટે હાથ ધરવામાં આવ્યું હતું, જે દરમિયાન વિશ્લેષણ માટે 25 ફ્રેમ્સ લેવામાં આવી હતી. માટે સમય-પ્રવૃત્તિ વળાંક ¹⁸એએફએનઆઇ સૉફ્ટવેરનો ઉપયોગ કરીને રુચિના ક્ષેત્રોમાં એફ-ફેલીપ્રાઇડ (આરઓઆઇ) કાઢવામાં આવ્યા હતા (https://afni.nimh.nih.gov/afni) અને કિનનેટિક પરિમાણો ડીએક્સટીએનએક્સએક્સઆર બંધન સંભવિત નિર્ધારિત કરવા માટે કસ્ટમ MATLAB સ્ક્રિપ્ટ (સંદર્ભ પેશીઓ તરીકે ઉપયોગમાં લેવાતી સેરીબેલમ સાથે) દ્વારા ચાર-કમ્પાર્ટમેન્ટ મોડેલ માટે યોગ્ય હતા.લેમ્મેર્સ્મા અને હ્યુમ, 1996).

વીવો ઇલેક્ટ્રોફિઝિયોલોજીમાં

રેકોર્ડિંગ્સ 32 ટેફલોન-કોટેડ ટંગસ્ટન માઇક્રોવાયર્સ (35-મીમી વ્યાસ) ધરાવતા ઇલેક્ટ્રોડ એરેથી બનાવવામાં આવ્યા હતા, જેમાં ડોર્સોમેડિયલ સ્ટ્રાઇટમ (અગ્રવર્તી / પશ્ચાદવર્તી [એ / પી]: +0.8; મધ્યવર્તી / બાજુની [એમ / એલ]: +1.5 સમાવિષ્ટ: +2.6 ; ડોર્સલ / વેન્ટ્રલ [ડી / વી]: બ્રિગ્મા દીઠ .XNUMX મીમી), અને વ્યવસાયિક સ softwareફ્ટવેર (lineફલાઇન સોર્ટર અને ન્યુરોએક્સપ્લોર; પ્લેક્સન) સાથે પ્રક્રિયા કરવામાં આવે છે.

સ્ટીરિઓટેક્સિક વાયરલ વેક્ટર ઈન્જેક્શન

ઉંદરને ટૂંક સમયમાં આઇસોફ્લુરેન એક્સપોઝર દ્વારા એનેસ્થેસાઇટીઝ કરવામાં આવ્યા હતા. એકવાર deeplyંડા નિશ્ચેતન થયા પછી, મધ્યરેખા સાથે એક જ ચીરો બનાવવામાં આવ્યો, ખોપરીને બહાર કા ,વામાં આવી, અને દ્વિપક્ષીય ક્રેનોટોમી બનાવવામાં આવી (એ / પી: +0.5; એમ / એલ: g 1.5 મી.મી. બ્રિગ્મા). અવરોધક કોર-ડ્રેએડડી (સાયન-ડીઆઈઓ-હ્કોર્ડ-આઇઆરઇએસ-એમસીટ-ડબલ્યુપીઆરઇ; 0.5 μL) ધરાવતા વાઈરલ વેક્ટરને ડોર્સોમેડિયલ સ્ટ્રાઇટમ (ડી / વી, −2.8 મીમી ખોપરીની ટોચ પરથી) માં દ્વિપક્ષીય રીતે ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવ્યા હતા અને તે માટે વ્યક્ત કરવાની મંજૂરી આપવામાં આવી હતી. પ્રયોગના 9 અઠવાડિયા પહેલા.

નો-નેટ ફ્લુક્સ માઇક્રોડાયલિસિસ અને ડોપામાઇન એનાલિસિસ

ઉંદરના ડોર્સલ સ્ટ્રાઇટમમાં બેસલ એક્સ્ટ્રાસેલ્યુલર ડીએ, ડ DપOPક અને એચવીએનું માપન ન noન-ફ્લક્સ માઇક્રોડાયલિસીસ અભિગમ દ્વારા કરવામાં આવ્યું હતું. એકતરફી 2-મીમી પ્રોબ્સ (18-કેડીડીએ મેમ્બ્રેન કટoffફ) નમૂના સંગ્રહ પહેલાં 1 કલાક માટે 1 μL / મિનિટ પર કૃત્રિમ સેરેબ્રોસ્પાઇનલ પ્રવાહી (એસીએસએફ) ના સતત પરફ્યુઝન સાથે કેન્યુલા રોપ્યા પછી 4 અઠવાડિયા પછી સ્ટીરિયોટેક્સિકલી રોપવામાં આવ્યા હતા (જુઓ પૂરક પ્રાયોગિક પ્રક્રિયાઓ). એક્સ્ટ્રા સેલ્યુલર ડીએ સ્તરને માપવા માટે નો-નેટ ફ્લક્સ પ્રયોગ ડાયાલીસીસ ચકાસણી દ્વારા એસીએસએફમાં ડી.એ. (છ, 0, 2.5, 5, 10, અને 20 એનએમ) ની છ જુદી જુદી સાંદ્રતાને અવ્યવસ્થિત રીતે શુદ્ધ કરીને કરવામાં આવ્યો હતો. પ્રત્યેક ડી.એ. સાંદ્રતા 40 મિનિટ માટે ઘટાડવામાં આવી હતી, અને પછી કેટેકોલેમાઇન અધોગતિને રોકવા અને −30 ° સે થી વધુ સ્થિર થવા માટે, 2 એમએમ એચસીએલના 10 μL માં વત્તા 2.5 × 100-મિનિટ નમૂનાઓ એકત્રિત કરવામાં આવે છે. ન્યુરોકેમિકલ વિશ્લેષણ માટે, એમ્પ્રોમેટ્રિક તપાસ સાથે જોડાયેલી ઇઝોક્રેટ એચપીએલસી સિસ્ટમનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો (એચપીએલસી-ઇસી; બેસી એલસી -1 સી). વિશ્લેષણમાં યોગ્ય ચકાસણી પ્લેસમેન્ટ સાથેના ફક્ત ઉંદરને શામેલ કરવામાં આવ્યા હતા (આકૃતિ એસ 3ઇ).

આંકડા

ગ્રાફપેડ પ્રિઝમ (સંસ્કરણ 6.07; ગ્રાફપેડ સ Softwareફ્ટવેર) નો ઉપયોગ કરીને આંકડાકીય વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું. જ્યાં સુધી જણાવ્યું ન હોય ત્યાં સુધી, બે-પૂંછડીવાળા વિદ્યાર્થીની ટી પરીક્ષણોનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. નહિંતર, બે-પૂંછડીની જોડી બનાવવામાં આવેલી ટી પરીક્ષણો, એક-માર્ગ પુનરાવર્તિત પગલાં એનોવા અથવા દ્વિ-માર્ગ પુનરાવર્તન-પગલાં એનોવા જ્યારે યોગ્ય અને કહેવા મુજબ ઉપયોગમાં લેવાય છે. એનોવા પછીની પોસ્ટની તુલના માટે ટી પરીક્ષણો કરવામાં આવ્યા હતા. પરિણામોને પી <0.05 ના આલ્ફામાં અથવા બેજામિની-હોચબર્ગ ખોટા શોધ દર (એફડીઆર) કરેક્શન દ્વારા નક્કી કરવામાં આવેલા આલ્ફા સાથે, જ્યાં યોગ્ય હોય ત્યાં નોંધપાત્ર માનવામાં આવ્યાં હતાં.

લેખક ફાળો

ડીએમએફ, કેડી, ટીજેઓ, એમએસ, એકે, આઈપીએસજીઆરવીએએ, એમઆર, કેડીએચ અને એવીકે, પ્રયોગો ડિઝાઇન કરે છે. ડીએમએફ, કેડી, ટીજેઓ, એમએસ અને એવીકે, વર્તન પ્રયોગો કરે છે અને વિશ્લેષણ કરે છે. આઇ.પી.એ વેસ્ટર્ન બ્લોટિંગ પ્રયોગો કર્યા. ડીએમએફ, અને એવીકે વિવો ઇલેક્ટ્રોફિઝિયોલોજિકલ ડેટામાં પ્રદર્શન અને વિશ્લેષણ કર્યું. ડીએમએફ, જે-એસએલ, જેજી અને એવીકેએ માઇક્રો-પીઈટી પ્રયોગો કર્યા અને તેનું વિશ્લેષણ કર્યું. ડીએમએફ, કેડી, ટીજેઓ, અને એવીકે હસ્તપ્રત લખી. બધા લેખકોએ પરિણામોની ચર્ચા કરી અને હસ્તપ્રત પર ટિપ્પણી કરી.

સમર્થન

આ કાર્ય એનઆઈએચ, નેશનલ ઇન્સ્ટિટ્યુટ ઑફ ડાયાબિટીસ અને પાચન રોગ અને કિડની રોગો (એનઆઈડીડીકે) ના ઇન્ટ્રામ્યુરલ રિસર્ચ પ્રોગ્રામ દ્વારા સમર્થિત હતું. અમે સી.આઇ.આઈ.ડી.ડી.કે પર સીટમ મેટાબોલાઇટ્સ અને હોર્મોન્સ, એન્ડ્રેસ બ્યુનોન્નોનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે ડોપામાઇન માઇક્રોોડાયલાઇઝિસ પ્રયોગો અને ડૉ. જુડિથ વોલ્ટર્સ, ડૉ. ક્રિસ્ટિન ડુપ્રે અને ડૉ. ક્લેર ડેલવિલેને એચ.પી.એલ.સી.ની મદદ માટે સહાયતા સાથે માઉસ મેટાબોલિઝમ કોરનો આભાર માગીએ છીએ. ડોપામાઇન પેશી સામગ્રી વિશ્લેષણ. અમે ડો. સ્કોટ યંગને તેમના પ્રયોગશાળા સાધનોના ઉપયોગ માટે અને બંધનકર્તા અભ્યાસો સાથે સહાય કરવા બદલ પણ આભાર માગીએ છીએ. પ્રાયોગિક ડિઝાઇન અને હસ્તપ્રતની કાળજીપૂર્વક વાંચન પર ઇનપુટ માટે AVK પ્રયોગશાળા, માર્ક રીટમેન અને નિક રાયબાના સભ્યોને પણ આભાર.

પૂરક માહિતી

દસ્તાવેજ S1. પૂરક પ્રાયોગિક કાર્યવાહી અને આંકડા S1-S5.

પીડીએફ ફાઇલો સાથે સહાય કરો

વિકલ્પો

દસ્તાવેજ S2. લેખ પ્લસ પૂરક માહિતી.

પીડીએફ ફાઇલો સાથે સહાય કરો

વિકલ્પો

સંદર્ભ

એડમ્સ એટ અલ., 2015
ડબલ્યુકે એડમ્સ, જેએલ સુસમાન, એસ. કૌર, એએમ ડી'સુઝા, ટીજે કેફર, સીએ વિન્સ્ટ્સસ્લે
લાંબા ગાળાના, ઉંદરોમાં ચરબીવાળા ઉચ્ચ ચરબીવાળા ખોરાકમાં ઇમ્પ્લસે નિયંત્રણ અને વેન્ટ્રલ સ્ટ્રેટલ ડીએક્સટીએક્સએક્સ રીસેપ્ટર સિગ્નલિંગ ઘટાડે છે - વ્યસનની નબળાઇના બે માર્કર્સ
યુરો. જે ન્યુરોસી., 42 (2015), પૃષ્ઠ. 3095-3104
ક્રોસફેફ

ઝડપી કડીઓ