પ્રો નેટ નેટ એકેડ સાયન્સ યુએસએ. 2009 નવે 24; 106 (47): 20016-20020.
ઑનલાઇન 2009 નવેમ્બર 9 પ્રકાશિત. ડોઇ: 10.1073 / pnas.0908789106
પી.એમ.સી.આઈ.ડી.
પીટ્રો કોટૉન,a,b,c,d,1,2 વેલેન્ટિના સેબીનો,a,b,c,d,1 મારિસા રોબર્ટો,a,c,d મીકલ બાજો,e લારા પોકરોઝ,a જેનિફર બી. ફ્રીહૌફ,a,c,d,f ઇવા એમ. ફેકેટ,a,c,d લુકા સ્ટેર્ડો,g કેનનર સી ચોખા,h દિમિત્રી ઇ. ગ્રિગોરીડિસ,i બ્રુનો કોન્ટી,d,e જ્યોર્જ એફ. કોઓબ,a,c અને એરિક પી. ઝોરીલાa,c,d,2
અમૂર્ત
શરીરના વજનને નિયંત્રિત કરવા માટે ખોરાક લેવાથી સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાંથી વંચિત થવાના ચક્રનો સમાવેશ થાય છે જે અનિવાર્ય ખોરાકને પ્રોત્સાહન આપી શકે છે. હાલના અભ્યાસ બતાવે છે કે ઉંદરો નવીનતમ વપરાશ પર સ્વાદિષ્ટ ભોજન પ્રદર્શનના ખાદ્યપદાર્થોના અતિશય ખાદ્યપદાર્થોના અતિશય વપરાશથી દૂર થતાં અને કોર્ટિક્રોપ્રોપિન-મુક્ત કરનાર પરિબળ - 1 (સીઆરએફ) દ્વારા વર્ગીકૃત કરાયેલ અસરકારક ઉપાડ જેવા રાજ્યમાંથી પાછો ખેંચી લે છે.1) રીસેપ્ટર એન્ટિગોનિસ્ટ-રીવર્સિબલ વર્તણૂંક, હાયપોફાગિયા, પ્રેરણાદાયક ખામીઓ ઓછી સ્વાદિષ્ટ ભોજન મેળવવા માટે, અને એન્સેજેજેનિક-જેવી વર્તણૂંક. સીઆરએફ અભિવ્યક્તિ અને સીઆરએફમાં વધારો થયો હતો1 એમીગડાલાના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસમાં ઇલેક્ટ્રોફિઝિઓલોજિકલ પ્રતિભાવ. અમે પ્રસ્તાવ આપીએ છીએ કે એન્ટિ-પુરસ્કાર એક્સ્ટિપોપોથેલેમિક સીઆરએફ-સીઆરએફની ભરતી1 સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાંથી ઉપાડ દરમિયાન સિસ્ટમો, દુરૂપયોગિત દવાઓથી દૂર રહેવાની સમાનતા, સ્વાદિષ્ટ ભોજનની અનિવાર્ય પસંદગીને ઉત્તેજન આપી શકે છે, તંદુરસ્ત વિકલ્પોની અશુદ્ધતા અને નકારાત્મક ભાવનાત્મક ખોરાકને અટકાવવામાં આવે ત્યારે નકારાત્મક ભાવનાત્મક સ્થિતિને અટકાવી શકે છે.
સ્થૂળતા અને ખાવુંના વિકારો, જે ડ્રગની વ્યસન સમાન છે, તેને સ્થાયી થવાની અવધિ (જેમ કે, "પ્રતિબંધિત" નકામા ખોરાકને ટાળવા માટે ટાળવા) અને લાંબા સમયથી થતાં (લાંબા સમયથી અનિયંત્રિત, ઉચ્ચ - સ્વાદિષ્ટ ખોરાક) જે નકારાત્મક પરિણામો હોવા છતાં ચાલુ રહે છે (1). જોકે સ્વાદિષ્ટ ભોજનના હકારાત્મક મજબુત ગુણધર્મો જાણીતા છે (2, 3), તેમના નકારાત્મક પ્રતિકારક ગુણધર્મોને ઓછું ધ્યાન આપવામાં આવ્યું છે (4-6), એટલે કે વ્યુત્પન્ન ઉત્તેજનાને દૂર કરીને ઉત્પાદિત પ્રતિસાદની વધેલી સંભાવના (દા.ત. નકામી ભાવનાત્મક સ્થિતિઓને દૂર કરવા માટે સ્વાદિષ્ટ ભોજનની સેવન). દુરુપયોગની દવાઓના વિસ્તૃત ઉપયોગના અંતરાય ચક્રો ક્રમશઃ "અસરકારક નિર્ભરતા" તરફ દોરી શકે છે, જે નીચે આપેલા લાગણીશીલ સમૂહ બિંદુને જાળવવા માટે અને વધુ પડતા નશીલા ભાવનાત્મક સ્થિતિને જાળવવા માટે ઉપચારની ઉચ્ચ અને / અથવા વધુ નિયમિત માત્રા તરીકે જોવામાં આવે છે. ડ્રગ ઇન્ટેક (7, 8). આવા અસરકારક ઉપાડનો ઉપયોગ અનુક્રમે સતત અને ફરી શરૂ થતા ડ્રગના ઉપયોગની નકારાત્મક પ્રતિકારક સંપત્તિઓ દ્વારા ઉપયોગ અને પ્રેરણાને પ્રેરિત કરી શકે છે (7, 8).
એક્સ્ટ્રાહિયોપાથેમિક કોર્ટીકોટ્રોપિન-રિલીઝિંગ ફેક્ટર (સીઆરએફ) મગજની તાણ પ્રણાલી ડ્રગના ઉપયોગથી નિર્ભરતામાં પરિવર્તનમાં સામેલ છે, જે દરમિયાન દુરૂપયોગિત દવાઓનો વપરાશ હકારાત્મક, મજબૂતીકરણ પદ્ધતિઓ કરતાં, આ નકારાત્મક દ્વારા વધુ ને વધુ પ્રેરિત થાય છે. સીઆરએફ એ દારૂ, નિકોટિન, કોકેન, અફીટ, એમ્ફેટામાઇન્સ અને ટેટ્રાહાઇડ્રોકાનાબીનોલ સહિતના દુરુપયોગની દરેક મુખ્ય દવા માટે ઉપાડ સિન્ડ્રોમમાં પ્રેરણાત્મક રીતે સંબંધિત ભૂમિકા ભજવે છે.7, 8). સમાનતા દ્વારા, અંતરાયના પુનરાવર્તિત ચક્ર, અત્યંત સ્વાદિષ્ટ ભોજન સુધી વિસ્તૃત પહોંચની સીઆરએફ સિસ્ટમને નુઅરોડેપ્ટેશનને પ્રેરિત કરવા માટે કલ્પના કરવામાં આવી હતી જે ડ્રગના નિર્ભરતા મોડેલ્સમાં જોવા મળતા સમાન છે (4, 5, 9).
પરિણામો
આકસ્મિક, સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાં વિસ્તૃત પ્રવેશ પ્રગતિશીલ રીતે ઓછી પ્રાધાન્યયુક્ત ખોરાકની અછત તરફ દોરી જાય છે જ્યારે સ્વાદિષ્ટ ખોરાક ઉપલબ્ધ ન હોય અને નવીનતમ ઍક્સેસ પર સ્વાદિષ્ટ ભોજનનો વધુ પડતો ખોરાક લેવા માટે (10-12). સીઆરએફની પૂર્વધારણા ચકાસવા માટે1 સિસ્ટમ્સ આ ખોરાક અનુકૂલન મધ્યસ્થી કરે છે, પુરુષ વિસ્તાર ઉંદરો (n = 20) દર અઠવાડિયે ચાઉ ડાયેટ એડ લિબિટમ (ચાઉ / ચાઉ) દરરોજ આપવામાં આવતી હતી અથવા 5 દિવસો (સી તબક્કા) માટે ચાઉ એડિશન આપવામાં આવી હતી, ત્યારબાદ 2 દિવસો (પી તબક્કા) માટે ખૂબ જ સ્વાદિષ્ટ, ખાંડયુક્ત ખોરાક (ચા / પલાટેબલ) ) (જુઓ ફિગર એસએક્સએનટીએક્સ ખોરાક શેડ્યૂલ અને ફિગર એસએક્સએનટીએક્સ ખોરાકના સેવન અને શરીરના વજન પરના ખોરાકના શેડ્યૂલની અસરો માટે). ખોરાક સાયકલિંગના 7 અઠવાડિયા પછી, ઉંદરોને બિન-પેપ્ટાઇડ સીઆરએફ પ્રાપ્ત થયો1 લેટિન-સ્ક્વેર ડિઝાઇનમાં રીસેપ્ટર વિરોધી R121919 (0, 5, 10 અને 20 એમજી / કિલો, એસસી)13). સુગંધિત આહારથી ચૌથી અથવા ચાથી સ્વાદિષ્ટ ભોજન તરફ સ્વિચ કરતા પહેલા 1 એચ સારવાર આપવામાં આવી હતી. આરએક્સ્યુએનએક્સએક્સ ડોઝ - ચૉઉ / પૅલેટેબલ ઉંદરો (ડાયેટ તબક્કો × ડાયેટ સમયપત્રક × ડ્રગ ડોઝ: F3,54 = 7.25, P <0.001), ચા નિયંત્રણનાં ઇન્ટેકને બદલ્યા વિના. આર 121919 એ સ્વાદિષ્ટ ખોરાક (પી તબક્કો) ની નવી accessક્સેસ પર ખૂબ જ સ્વાદિષ્ટ આહારનો વપરાશ ઘટાડ્યો (ફિગ 1A). સ્વતંત્ર પરીક્ષણોમાં, સીઆરએફ1 રીસેપ્ટર એન્ટિગોનિસ્ટ ચાલાકીવાળા ખોરાક (સી તબક્કા) માંથી પાછી ખેંચી લેવામાં આવેલી ચા / પલાટેબલ ઉંદરોમાં ઓછી ચામડીવાળા ચાના સેવનમાં વધારો કરે છે (ફિગ 1B). આમ, બંને ચા હાઈપોફાગિયા અને સ્વાદિષ્ટ ભોજનના અતિશય આહારને લીધે, આરએક્સએનટીએક્સએક્સે ઇન્ટેક સાઇકલિંગના વિસ્તરણ (પ્રથમ સૌમ્ય પી તબક્કા દરમિયાન સેવન વચ્ચેનો તફાવત અને ચાઉ તબક્કામાં પ્રથમ ઉપાડનો તફાવત: ડાયેટ સૂચિ × ડ્રગ ડોઝ: F3,54 = 7.25, P <0.001) (ફિગ 1C). સીઆરએફ-સીઆરએફની પ્રગતિશીલ ભરતીને ટેકો આપવો1 ડાયેટ હિસ્ટરી દ્વારા ડાયેટ હિસ્ટરી દ્વારા સિસ્ટમો, આરએક્સ્યુએનટીએક્સએ ખોરાક પ્રત્યે એક જ સંપર્ક કર્યા પછી સ્વાદિષ્ટ ભોજનની માત્રામાં ઘટાડો કર્યો નથી અથવા સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાંથી પ્રથમ ઉપાડ દરમિયાન ચાના વપરાશમાં વધારો કર્યો છે.ફિગર એસએક્સએનટીએક્સ).
સ્થગિતતામાંથી ઉપાડ, સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાં વિસ્તૃત પ્રવેશ પણ ચિંતા જેવી વર્તણૂકમાં વધારો કરી શકે છે (11). સીઆરએફની પૂર્વધારણા ચકાસવા માટે1 રીસેપ્ટર્સ નકારાત્મક ભાવનાત્મક વર્તણૂક ચિહ્નોમાં સામેલ છે જે સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાંથી ઉપાડને અનુસરતા હોય છે, ઉંદરોને આરએક્સએનએક્સએક્સ (121919, 0 મિલિગ્રામ / કિલોગ્રામ, સ્કે, 20-h પ્રેટ્રેટમેન્ટ) સંચાલિત કરવામાં આવ્યા હતા અને એલિવેટેડ પ્લસ-મેઝ (એલિવેટેડ પ્લસ-મેઝ)14), 5-9 એચ સુગંધિત આહારથી ચા તરફ ફેરવાયા પછી. વાહન સારવાર ચૌ / પલાટેબલ ઉંદરોએ ચાઉ કંટાળી ગયેલી નિયંત્રણો કરતા ઓછું ખુલ્લું આર્મ સમય દર્શાવ્યું છે, જે એક્સિજેજેનિક-જેવી અસરને દર્શાવે છે, આહાર સાયકલિંગના 7 અઠવાડિયાથી ઉપાડ દરમિયાન (ફિગ 2A), એક પ્રભાવ હજુ સુધી બે ઉપાડ ચક્ર પછી જોવા મળ્યો નથી (ફિગર એસએક્સએનટીએક્સ). R121919 (20 મિલિગ્રામ / કિલોગ્રામ, ડોઝ જે સ્વાદિષ્ટ ભોજનની વધુ પડતી અતિશય ખાવું અને ચાના અતિશયોક્તિયુક્ત એમ બંનેને પ્રેરિત કરે છે) સાથે પ્રત્યાઘાત, ડોઝ પર ચા / પલાટેબલ ઉંદરો દ્વારા ખુલ્લા હાથ સંશોધનમાં ઘટાડો અવરોધિત થયો છે જે ચા નિયંત્રણમાં પ્લસ-મેઝ વર્તણૂકને બદલતા નથી ( ડાયેટ સૂચિ × ડોઝ: F1,43 = 7.25, P <0.02; ફિગ 2ડાબી બાજુ). R121919 વહીવટ બંધ બખ્તર એન્ટ્રીઝ તરીકે માપવામાં આવતી સામાન્ય પ્રવૃત્તિને બદલ્યું નથી. તેથી, આરએક્સએનટીએક્સએક્સે વધેલી ચિંતા-જેવી વર્તણૂંકને અવરોધિત કરવાથી અટકાવી દીધી, નિયંત્રણોની વર્તણૂક બદલ્યાં વિના, સીઆરએફની ભરતી સૂચવતા, સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાં વિસ્તૃત પહોંચ,1 સિસ્ટમો
સ્થગિતતામાંથી ઉથલપાથલ, સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાં વિસ્તૃત પ્રવેશથી પ્રેરિત ખાદ્ય ખામી ઓછી પસંદીદા ખોરાક મેળવવા માટે પરિણમી શકે છે, હાયપોહેડોનિક-જેવી વર્તણૂંકની સંભવિત અનુક્રમણિકા (10). એકસરખું, મજબૂતીકરણના પ્રગતિશીલ-રેશિયો શેડ્યૂલ હેઠળ ઓછું પસંદ કરેલું ગસ્ટરેટરી રિઇનફોર્સર્સ માટે જવાબ આપતા પહેલા ડ્રગ ઉપાડ દરમિયાન જોવાયેલી પ્રેરણાત્મક ખામીને અનુક્રમિત કરવા માટે ઉપયોગમાં લેવાય છે (15). સીઆરએફની સામેલગીરી નક્કી કરવા1 રીસેપ્ટર્સ, અમે પ્રોગ્રેટીવ-રેશિયો શેડ્યૂલ હેઠળ તેમની ઓછી પસંદગીની ચા મેળવવા માટે ડાયેટ સાયકલવાળી ઉંદરોના પ્રભાવ પર R121919 ની અસરોની ચકાસણી કરી. અગાઉના તારણોની ખાતરી કરી રહ્યા છીએ (10), વાહન-સારવાર ચા / પૅલેટેબલ ઉંદરોએ ઓછા ચાલાકીવાળા ચાને મેળવવા માટે પ્રેરણા ઘટાડ્યું, જે ઓછા બ્રેપોપોઇન્ટ દ્વારા પ્રતિબિંબિત થાય છે અને ચા / ચાઉ ઉંદરોની તુલનામાં ઉત્સર્જિત કુલ પ્રતિભાવો ઘટાડે છે (10) (ફિગર એસએક્સએનટીએક્સ). આરએક્સયુએનએક્સએક્સ પ્રેટરેટમેન્ટ (121919 મિલિગ્રામ / કિલોગ્રામ, ચાઉ હાઇપોફેગિયાને વધારવામાં અસરકારક ડોઝ, સ્વાદિષ્ટ ભોજન હાયપરફેગિયા ઘટાડવા અને એનેક્સીજેનિક જેવી વર્તણૂક ઘટાડે છે) ડાયો સાયકલવાળી ઉંદરોમાં પ્રગતિશીલ-ગુણોત્તર પ્રભાવમાં ખામીને ખામીયુક્ત રીતે નિયંત્રિત કરે છે જે ચા નિયંત્રણમાં બિનઅસરકારક હતું. (બ્રેકપોઇન્ટ: ડાયેટ શેડ્યૂલ × ડ્રગ: F1,15 = 8.17, P <0.02; કુલ જવાબો: આહાર સૂચિ × ડ્રગ: F1,15 = 9.14, P <0.01; ફિગ 2B, બાકી). વૈકલ્પિક અર્થઘટન સામે કે R121919 એ પોસ્ટિંગસ્ટેસ્ટિવ રેશિયો ઘટાડીને ચા / પલાટેબલ ઉંદરોમાં પ્રદર્શનને સરળ બનાવ્યું, R121919 એ સત્રમાં 5 મિનિટ જેટલી વહેલી તકે પ્રતિક્રિયામાં ખામી અવરોધિત કરી. (ડાયેટ શેડ્યૂલ × ડ્રગ: F1,15 = 2.55, P <0.05) (ફિગ 2બી અધિકાર). તેથી, સીઆરએફ1 રિસેપ્ટર એન્ટિગોનિસ્ટ પ્રગતિશીલ ગુણોત્તરમાં પ્રેરણાત્મક અભાવને અવરોધે છે, જે ઓછા પસંદગીના ગસ્ટરેટરી રિઇનફોર્સર્સને પ્રતિક્રિયા આપે છે, જે પ્રાણીઓમાં ખલેલ પાછી ખેંચી લેવાયેલી પ્રાણીઓમાં જોવા મળે છે.
સુગંધિત ખોરાકમાંથી ઉપાડવાની પૂર્વધારણાને ચકાસવા માટે તાણ સંબંધિત સંબંધિત એક્સ્ટિપોથોથેલેમિક સીઆરએફ સિસ્ટમ, સીઆરએફ એમઆરએનએના સ્તરો અને એમિગડાલાના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસમાં પેપ્ટાઇડ સક્રિય કરી શકે છે, અનુક્રમે જથ્થાત્મક રીઅલ-ટાઇમ પીસીઆર અને આરઆઇએ દ્વારા માપવામાં આવે છે. ઉંદરોને 7 અઠવાડિયા અથવા ડાયેટ-સાઇકલ કરવામાં આવતું હતું. એનેસ્થેસિયા અને ડિસેપ્ટેશન પછી, એમીગડાલાના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસમાંથી બ્રેઇન પંચ્સને સ્વાદિષ્ટ ભોજનની પ્રાપ્તિમાંથી અને પછી નવીકરણ બાદ ઉપાર્જિત કરવામાં આવ્યા હતા. ચા / પલાટેબલ ઉંદરોમાં સ્વાદિષ્ટ ભોજનને પાછું ખેંચવાની પ્રક્રિયાએ ચાઉ / ચાઉ ઉંદરોની સરખામણીમાં એમીગડાલાના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસમાં સીઆરએફ એમઆરએનએ અભિવ્યક્તિમાં પાંચ ગણા વધારો કર્યો હતો.ફિગ 3A). તેનાથી વિપરીત, સીઆરએફ એમઆરએન તાજગીયુક્ત ખોરાકમાં નવીનીકૃત ઍક્સેસ સાથે નિયંત્રણ-જેવા સ્તરો પર પાછો ફર્યો (F2,19 = 6.97, P <0.01). જ્યારે સી.એફ.એફ. - ની પ્રગતિશીલ ભરતીને સમર્થન આપ્યું ત્યારે ચૌઉ / પેલેટેબલ ઉંદરો ફક્ત એક જ વાર ચ were કરવામાં આવ્યા હતા ત્યારે ચૌગ / ચૌચ વિ ચૌચ / તાજગી: 5.5 ± 2.2 વિ. સીઆરએફ1 ડાયેટ હિસ્ટરી દ્વારા સિસ્ટમ્સની તીવ્ર અસરને બદલે સિસ્ટમ્સ. વધુમાં, સીઆરએફ એમઆરએનએ અભિવ્યક્તિ નવિક્લસ એક્મ્બમ્બન્સ, પ્રિફ્રન્ટલ કોર્ટેક્સ અથવા ઇન્સ્યુલર કોર્ટેક્સમાં બદલાતી નથી, જે તારણોની ક્ષેત્રીય વિશિષ્ટતાને સમર્થન આપે છે (ફિગર એસએક્સએનટીએક્સ). રસપ્રદ વાત એ છે કે, સીઆરએફ એમઆરએનએ અભિવ્યક્તમાં કોઈ નોંધપાત્ર ફેરફાર હાયપોથલામસના પેરાવેન્ટ્રિક્યુલર ન્યુક્લિયસ અથવા ચાઉ / પલાટેબલ ઉંદરોમાં સમાન ઉપાડના સમયના બિંદુએ કોર્ટીકોસ્ટેરોન પરિભ્રમણમાં જોવા મળ્યો હતો (ફીગ્સ S6 અને S7), જે હાયપોથેલામિકની જગ્યાએ એમિગડાલરમાં બદલાવની પૂર્વધારણા સૂચવે છે, સીઆરએફ તાણ પ્રણાલીઓએ નજીકથી વર્તણૂકલક્ષી અનુકૂલનને બચાવી લીધું છે. તદુપરાંત, સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાંથી પાછી ખેંચી લેવાયેલી પ્રાણીઓની એમીગડાલાના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસમાં સીઆરએફ પેપ્ટાઇડ ઇમ્યુનોરેક્ટીવીટી ચા-ફેડ પ્રાણીઓ કરતાં 70% વધારે હતી, પરંતુ સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાં પ્રવેશ સાથે ચા-ફેડ કંટ્રોલ લેવલમાં પરત આવી હતી.F2,24 = 4.01, P <0.01) (ફિગ 3B). આમ, સ્વાદિષ્ટ ભોજનને પાછું ખેંચીને એમીગડાલાના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસમાં તાણ-સંબંધિત સીઆરએફ પેપ્ટાઇડ સિસ્ટમ સક્રિય કરે છે, જે ડ્રગ અને ઇથેનોલ ઉપાડના મોડેલ્સમાં તારણો સમાન છે (7, 8). કારણ કે સ્વાદિષ્ટ ખોરાકમાં નવો વપરાશ એમીગડાલાના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસમાં એક્સ્ટિપોથોથેલામિક સીઆરએફ સિસ્ટમ સક્રિયકરણમાં ઘટાડો થયો, જેમાં સીઆરએફ સક્રિયકરણ ચિંતા સાથે સંકળાયેલું છે (16), વર્તમાન પરિણામો પણ સૂચવે છે કે સ્વાદિષ્ટ ખોરાક નકારાત્મક અસરકારક પરિણામોને દૂર કરીને નકારાત્મક મજબૂતીકરણ ગુણધર્મો મેળવી શકે છે (17).
ધારણાને ચકાસવા માટે કે જે સ્વાદિષ્ટ માંસમાંથી ઉંદરોને પાછો ખેંચી લેવામાં આવે છે તે સીઆરએફમાં સંવેદનશીલતા બતાવી શકે છે1 γ-aminobutyric એસિડ (જીએબીએ) નું વિરોધી મોડ્યુલેશન એમીગડાલાના મધ્યવર્તી કેન્દ્રમાં સંકેત આપે છે, જે ઇથેનોલ ઉપાડ દરમિયાન થાય છે (18), અમે સ્લાઇસની તૈયારીમાં એમ્ગીડાલા ચેતાકોષના કેન્દ્રીય ન્યુક્લિયસના ગેબેઅર્જિક ટ્રાન્સમિશન પર R121919 ની અસરની તપાસ કરી. પુરૂષ વિસ્તાર ઉંદરો (n = 14) 7 અઠવાડિયા માટે ડાયેટ-સાયક્લેડ હતા અને ઓછી સ્વાદિષ્ટ ચાઉમાં ફેરવાયા પછી બલિદાન આપ્યું હતું. ઍમીગડાલાના સંક્રમણના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસમાં બેસલ ગેબાર્જિક ટ્રાન્સમિશન ખોરાક ઇતિહાસના સંબંધમાં અલગ નથી.n = 23 કોશિકાઓ) તમામ ઉત્તેજના તીવ્રતામાં ગેબા-અવરોધક પોસ્ટસિનેપ્ટિક સંભવિત (આઈપીએસપી) વિકસાવવા માટે વપરાય છે. જો કે, XXX મિનિટ સુપરક્સ્યુઝન R20 (121919 μM) દ્વારા વિકસિત GABA માં વધુ ઘટાડો થયો.AChow / Palatable ઉંદરો (એમ ± સેમ: 30 ± 6% ના amygdala ચેતાકોષ ના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસ માં આઇઆઇપીએસપીએસ, n = 9 કોષો) ચા-ફેડ કંટ્રોલ્સ કરતા (એમ ± સેમ: 12 ± 6%, P <0.05, n = 11 કોશિકાઓ ()ફિગ 4). 30 મિનિટના ધોવાણ સમયગાળા પછી, બંને જૂથોના આઈપીએસપી સમાન, બેઝલાઇન-જેવા સ્તરો પર પાછા ફર્યા. તેથી, અમગડાલા સીઆરએફ-સીઆરએફના અતિ સક્રિયકરણ સાથે સુસંગત1 ઇથેનોલ ઉપાડ દરમિયાન જોવાતી સિસ્ટમ અને અસરો (18), ડાયેટ સાયક્લેડ ઉંદરોએ સીઆરએફની અવરોધક અસરોને વધારે સંવેદનશીલતા બતાવી1 એમીગડાલા ગેબેઅર્જિક ટ્રાન્સમિશનના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસ પર રીસેપ્ટર વિરોધી.
ચર્ચા
સામૂહિક પરિણામો વિધેયાત્મક પુરાવા આપે છે કે અંતરાયનો ઇતિહાસ, સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાં વિસ્તૃત પ્રવેશ પ્રગતિશીલ તરફ દોરી જાય છે, તાણ સંબંધિત સંબંધિત એક્સ્ટિપોપોથેલેમિક સીઆરએફ-સીઆરએફમાં પ્રેરણાત્મક રીતે સંબંધિત ન્યૂરોડેપ્ટેશન1 સિસ્ટમો. ખાસ કરીને, પસંદગીયુક્ત સીઆરએફ1 રિસેપ્ટર વિરોધી R121919 ડાયેટ-બાઇક્લડ ઉંદરોમાં ભિન્ન અને પસંદગીયુક્ત અસરગ્રસ્ત ખોરાક, નિયમિત ચાના વપરાશમાં વધારો અને નવીનતમ ઍક્સેસ પર અત્યંત સ્વાદિષ્ટ ભોજનનો વપરાશ ઘટાડવો. સીઆરએફ1 રીસેપ્ટર એન્ટિગોનિસ્ટે પસંદ કરેલ અસ્વસ્થતા જેવી વર્તણૂંક અને પ્રેરણાત્મક ખામીઓને ઓછી પસંદીદા ચા તરફ પ્રતિભાવ આપવા માટે અવરોધિત કર્યા છે જે સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાંથી ઉપાડ દરમિયાન જોવામાં આવ્યાં હતાં. સુગંધિત આહારની પ્રાપ્તિને કારણે એમીગડાલાના મધ્યવર્તી કેન્દ્રમાં સીઆરએફ જનીન અને પેપ્ટાઇડ અભિવ્યક્તિમાં વધારો થયો છે, જે અસરો નવીનીકૃત ઍક્સેસથી દૂર કરવામાં આવી હતી. આ ઉપરાંત, ડાયેટ-સાયક્લેડ ઉંદરોએ સીઆરએફની અવરોધક અસરોને વધારે સંવેદનશીલતા બતાવી1 એમીગડાલાના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસમાં ગેબેઅર્જિક ટ્રાન્સમિશન પર રીસેપ્ટર એન્ટિગોનિસ્ટ, આગળ એમિગડાલા સીઆરએફ-સીઆરએફનું અતિક્રમણ સૂચવે છે.1 સિસ્ટમ. નવીકરણ પર તાજગીયુક્ત ખોરાકની અતિશય ખાવું સીઆરએફની વધેલી અભિવ્યક્તિ અને સીઆરએફમાં ઇલેક્ટ્રોફિઝિયોલોજિકલ સંવેદનશીલતા તરીકે જોવામાં આવેલી માત્ર સીઆરએફ સિસ્ટમ સક્રિયકરણના વધેલા સીઆરએફ સિસ્ટમ સક્રિયકરણના પરિણામે થઈ શકે છે.1 એમીગડાલાના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસમાં રીસેપ્ટર અવરોધ. સીઆરએફ1 દ્વેષપૂર્ણ ખોરાકની પ્રાપ્તિ કરતા પહેલા વિરોધી પ્રત્યાઘાત એટલે પ્રારંભિક હાજર સીઆરએફ-સીઆરએફનો વિરોધ કરવાનો અર્થ થાય છે.1 ઉપાડની સિસ્ટમ અતિક્રમણ. નકામા પ્રાણીઓમાં અન્યથા જોઇ શકાય તેવા સ્વાદિષ્ટ ખોરાકના ટૂંકા સમયનો અભ્યાસ કરવો (10) વર્તમાન અભ્યાસમાં જોવા મળ્યા મુજબ, સ્વાદિષ્ટ ભોજનની પ્રાપ્યતા પ્રાપ્ત થઈ જાય તે પછી સીઆરએફ પેપ્ટાઇડની અભિવ્યક્તિ, પ્રકાશન અને પ્રભાવો સામાન્ય સમય પ્રાપ્ત થાય છે તે સમયનો અભ્યાસ કરી શકે છે. આમ, સ્વાદિષ્ટ ભોજન ખાવાથી મગજ પુરસ્કાર સિસ્ટમ્સમાં એલોસ્ટિક પુરસ્કાર સીઆરએફ-સીઆરએફની ભરતી સાથે એલોસ્ટિકેટિક પાળી પેદા કરી શકે છે.1 Amygdala ના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસ માં સિસ્ટમો.
આ પરિણામો માત્ર ફરજિયાત ખાવા માટે નહીં, પરંતુ સામાન્ય રીતે પ્રેરણા માટે પણ છે. હેડનિક સિસ્ટમ્સના વારંવાર સક્રિયકરણથી મગજમાં પ્રતિસ્પર્ધી-જેવી પ્રક્રિયાઓ (જેમ કે, સીઆરએફની ભરતી1 સર્કિટ્રી) જે પુરસ્કાર ટ્રાન્સમીટર સિસ્ટમ્સમાં કાર્યના સરળ નુકસાનથી અલગ હતા. આવા સિસ્ટમ વચ્ચે નુઅરોડેપ્ટેશન્સ (19) દુરુપયોગની તમામ મુખ્ય દવાઓ પર નિર્ભરતાની સંક્રમણ દરમિયાન પણ થાય છે (7, 8). વર્તમાન અભ્યાસમાં બિન-ડ્રગ ઉત્તેજના માટેના સામાન્યીકરણ સૂચવે છે કે પ્રેરણાત્મક પ્રક્રિયાઓ એવા વ્યક્તિઓમાં વ્યગ્ર થઈ શકે છે કે જેઓ સમયાંતરે સુક્ષ્મ ઉત્તેજનાની તીવ્રતામાં વારંવાર વિરોધાભાસ અનુભવે છે (20). અનુકૂલનશીલ રીતે, આવી પ્રક્રિયાઓ -ર્જા-ગાense, ઉચ્ચ-ઇનામવાળા ખોરાક તરફના ખોરાકની શોધમાં અને ઉપચારાત્મક વર્તનને બદલી શકે છે, જ્યારે ઓછા energyર્જાથી સમૃદ્ધ, ઓછા વળતરવાળા ખોરાક (અથવા બિન-ખોરાક) મેળવવાના અવમૂલ્યન પ્રયત્નો, જ્યારે ત્યાં ઉત્ક્રાંતિ રૂપે ઉપયોગી થાય છે ઘાસચારાના ખર્ચ (દા.ત., શિકારીના સંપર્કમાં, મર્યાદિત સમય અને energyર્જા સંસાધનો). જો કે આજના વાતાવરણમાં, તે જ પ્રક્રિયાઓ એવા ખોરાકનો વપરાશ કરી શકે છે જે ઓછા સ્વાદિષ્ટ ખર્ચે સ્થૂળતાને પ્રોત્સાહન આપે છે, પરંતુ કદાચ વધુ પૌષ્ટિક વિકલ્પો.
આમ, સીઆરએફમાં વ્યસન-જેવા ફેરફારો1 સિસ્ટમો ડ્રાઇવને મદદ કરી શકે છે (i) ઊર્જા-ગાઢ સુગંધિત ખોરાકનો વપરાશ, (ii) તંદુરસ્ત વિકલ્પોની અછત, અને (iii) સંકળાયેલ નકારાત્મક લાગણીશીલ સ્થિતિ કે જે જ્યારે સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાં પ્રવેશ કરે ત્યારે અટકાવે છે (4, 5, 10-12, 17). માનવીય સ્થિતિમાં અનુવાદિત, સીઆરએફ સિસ્ટમ સક્રિયકરણ મેદસ્વીપણું અને સંબંધિત ખાવુંના વિકારોમાં ખાવુંને ફરીથી ઘટાડવા પ્રોત્સાહિત કરે છે તેમજ સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાંથી ચિકિત્સા અસ્થિરતાના અન્ય નકારાત્મક પ્રેરણાત્મક સિક્વલ.
સામગ્રી અને પદ્ધતિઓ
વિષયો.
પુરૂષ વિસ્તાર ઉંદરો (n = 155, 180-230 જી, 45 દિવસ જૂનું) ચાર્લ્સ નદીમાંથી પ્રાપ્ત થયું હતું અને એક 19 એચ માં વાયર-ટોપ્ડ, પ્લાસ્ટિક પાંજરામાં (10.5 × 8 × 12 ઇંચ) આગમન પછી સિંગલ-હાઉસિંગ: 12 એચ રિવર્સ લાઇટ સાયકલ (10 : 00 એચ લાઇટ્સ બંધ), ભેજ- (60%) અને તાપમાન-નિયંત્રિત (22 ° C) વિવેરિયમ. ઉંદરોને મકાઈ-આધારિત ઉંદરના ચા [હાર્લન ટેક્લાડ એલએમ-એક્સ્યુએક્સએક્સ ડાયટ 485: 7012% (કેકેસી) કાર્બોહાઇડ્રેટ, એક્સ્યુએનએક્સ% ચરબી, 65% પ્રોટીન, ચયાપચયક્ષમ ઊર્જા 13 કેલ / 21 જી] અને 341 અઠવાડિયા પહેલા પાણીની લિબિટમની ઍક્સેસ હતી. પ્રયોગો શરૂ કરો. પ્રયોગાત્મક કાર્યવાહી રાષ્ટ્રીય આરોગ્ય સંસ્થાઓની સંભાળ અને ઉપયોગ માટે લેબોરેટરી પ્રાણીઓની કાળજી (એનઆઈએચ પબ્લિકેશન નંબર 100-1, સુધારેલું 85) અને "પ્રયોગશાળા પ્રાણી સંભાળના સિદ્ધાંતો" (http://www.nap.edu/readingroom / પુસ્તકોની યાદી) અને સ્ક્રીપ્સ સંશોધન સંસ્થાના સંસ્થાકીય એનિમલ કેર અને ઉપયોગ સમિતિ દ્વારા મંજૂર કરવામાં આવી હતી.
દવા.
ચેન એટ અલમાં વર્ણવ્યા પ્રમાણે R121919 નું સંશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું. (21). આરએક્સએનટીએક્સએક્સ એક ઉચ્ચ આકર્ષણ છે (Ki = 3.5 એનએમ) પસંદગીયુક્ત સીઆરએફ1 અન્ય ઘણા સીઆરએફ કરતા ચિકિત્સાકીય ગુણધર્મો સાથેના વિરોધી1 વિરોધી (દા.ત., લોગીપી અને લોગડ ઘટાડો, પાણીમાં દ્રાવ્યતા વધારી) (13). પરીક્ષણ માટે, R121919 સૌ પ્રથમ 1 એમ એચ.સી.સી. (અંતિમ વોલ્યુંમના 10%) માં સોલ્યુબિલાઇઝ કરવામાં આવ્યું હતું, ત્યારબાદ 20% (WT / VOL) 2-hydroxypropyl-β-cyclodextrin (સિગ્મા-એલ્ડરિચ) ના અંતિમ વાહનને મંદ કરવામાં આવ્યું હતું, પાછળનું શીર્ષક NaOH થી pH 4.5. R121919 સોલ્યુશનને એસસી (એસસી) ની 2 એમએલ / કિલોગ્રામની માત્રામાં સંચાલિત કરવામાં આવી હતી.
એડ લિબિટમ ડાયેટ ઓલ્ટરટેશન.
અનુકૂલન પછી, ઉંદરોને ખોરાકના સેવન, શરીરના વજન અને પાછલા 3-4 દિવસોમાંથી ફીડ કાર્યક્ષમતા માટે મેળ ખાતા બે જૂથમાં વહેંચવામાં આવ્યા હતા. એક જૂથને ચાઉ આહાર ("ચાઉ") આપવામાં આવ્યું હતું જે દર અઠવાડિયે (ચૌ / ચાઉ) લિબિટમ 7 દિવસો આપવામાં આવતું હતું, અને બીજા જૂથને દર અઠવાડિયે 5 દિવસો માટે લિબિટમ પ્રદાન કરવામાં આવતું હતું, ત્યારબાદ જાહેરાતના 2 દિવસો લૅબિટમની ઍક્સેસ અત્યંત સ્વાદિષ્ટ , ચોકોલેટ સ્વાદ, ઉચ્ચ-સુક્રોઝ ડાયેટ ("પલેટટેબલ"; ચાઉ / પલાટેબલ). સ્વાદિષ્ટ ભોજન એ પોષક રીતે સંપૂર્ણ, ચોકોલેટ-સ્વાદવાળી, ઉચ્ચ-સુક્રોઝ (50% કેકેસી), એઆઈએન-એક્સ્યુએનએક્સએક્સ-આધારિત આહાર છે જે ચૉઇટ આહારમાં મેક્રોન્યુટ્રિઅન્ટ પ્રમાણ અને ઊર્જા ઘનતા સાથે સરખાવે છે [ટેસ્ટડિઅટ; ચોકલેટ-સ્વાદવાળી ફોર્મ્યુલા 76TUL: 5% (કેકેસી) કાર્બોહાઇડ્રેટ, 66.8% ચરબી, 12.7% પ્રોટીન, ચયાપચયક્ષમ ઉર્જા 20.5 કેકેલ / જી; તેની પ્રાધાન્યતા વધારવા માટે 3.48-એમજી ચોકસાઇના ખોરાક ગોળીઓ તરીકે રચિત (22, 23)]. સંક્ષિપ્ત માટે, પ્રત્યેક અઠવાડિયાના પ્રથમ 5 દિવસો (ફક્ત ચૌ) અને છેલ્લા 2 દિવસ (પ્રાયોગિક જૂથ અનુસાર ચા અથવા સ્વાદિષ્ટ) ને C અને P તબક્કાઓના બધા પ્રયોગોમાં સંદર્ભિત કરવામાં આવે છે. ડાયેટ્સ એક સાથે ઉપલબ્ધ નહોતા. ચાઉ આહાર ક્યાં તો હાર્લન ટેક્લાડ એલએમ-એક્સ્યુએનએક્સ ડાયેટ 485 [7012% (કેકેસી) કાર્બોહાઇડ્રેટ, 65% ચરબી, 13% પ્રોટીન, ચયાપચયક્ષમ ઊર્જા 21 કેલ / 341 g] અથવા 100UM આહાર 5 થી 4-g એક્સ્ટ્રુડ ગોળો [5] તરીકે રચાયેલું હતું. % (કેકેસી) કાર્બોહાઇડ્રેટ, 65.5% ચરબી, 10.4% પ્રોટીન, ચયાપચયક્ષમ ઉર્જા 24.1 કેલ / 330 g; ટેસ્ટડિઅટ]. અગાઉના અભ્યાસોની જેમ, હાર્લન ટેક્લાડ એલએમ-એક્સ્યુએક્સએક્સ ચાનો ખોરાક અને એલિવેટેડ પ્લસ-મેઝ પ્રયોગોમાં ઉપયોગ થયો હતો (11), જ્યારે ટેસ્ટડેટ 5TUM ચાઉ (10) પ્રગતિશીલ ગુણોત્તર, સીઆરએફ એમઆરએનએ, સીઆરએફ પેપ્ટાઇડ સામગ્રી, કોર્ટીકોસ્ટેરોન આરઆઇએ અને ઇલેક્ટ્રોફિઝિઓલોજિકલ પ્રયોગોમાં ઉપયોગમાં લેવાય છે.
પહેલાં પ્રકાશિત (જેમ10), સંબંધિત આહાર પસંદગીઓ, બીજા આહારના સંબંધમાં પ્રથમ આહારના દૈનિક ઇન્ટેક (કેકેસી) ની ટકાવારી તરીકે ગણતરી કરાઈ હતી, તે નીચે મુજબ હતી: 5TUL ચોકલેટ ડાયેટ (ખાંડની પૅલેટિબલ આહાર) વિરુદ્ધ હાર્લન એલએમ-એક્સ્યુએનએક્સ ચાઉ (એમ ± SEM) પસંદગી 485 ± 90.7%) અને 3.6TUL ચોકલેટ ડાયેટ (મીઠું પૅલેટિબલ આહાર) વિરુદ્ધ 5TUM ચા ડાઇટ (એમ ± SEM પસંદગી 5 ± 91.2%).
ઉન્નત પ્લસ-મેઝ.
કોટ્ટોન એટ અલમાં વર્ણવ્યા મુજબ એલિવેટેડ પ્લસ-મેઝ ટેસ્ટ કરવામાં આવ્યું હતું. (24). ચાઉ / પલાટેબલ ઉંદરો ઓછામાં ઓછા 7 અઠવાડિયા માટે ડાયેટ-સાયક્લેડ હતા અને ત્યારબાદ વાહન અથવા 20 એમજી / કિલો R121919 (-1 એચ, એસસી) સાથે પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું અને સ્વાદિષ્ટ ભોજનથી ચા (પી) થી ફેરવાયા પછી 5-9 એચ પરીક્ષણ કર્યું હતું. → સી તબક્કો). ચાઉ / ચાઉ કંટ્રોલ ઉંદરોને વચ્ચેની વિષયોની ડિઝાઇનમાં એક સાથે પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું (n = 47). ચાવ ડાયેટ પરીક્ષણ સમયે ત્યાં સુધી જાહેરાત ઉપલબ્ધ હતી. વધુ વિગતો માટે, જુઓ એસઆઈ ટેક્સ્ટ.
ખોરાક માટે મજબૂતીકરણની પ્રગતિશીલ ગુણોત્તર સૂચિ.
ખોરાક માટે મજબૂતીકરણનો પ્રગતિશીલ ગુણોત્તર શેડ્યૂલ કોટૉન એટ અલમાં વર્ણવ્યા મુજબ કરવામાં આવ્યો હતો. (10). જ્યાં સુધી અન્ય ઉલ્લેખિત ન હોય ત્યાં સુધી પ્રાણીઓને તેમના પ્રયોગ દરમિયાન તેમના ઘરના પાંજરામાં એ / આઈ ચાઉ (5 g એક્સ્ટર્ડેડ ગોળીઓ) ની જાહેરાત મળી. ફૂડ રીઇનફોર્સર્સ 45-mg ચોક-ચોકસાઇ ગોળીઓ હતા, જે ઘરની પાંજરામાં ચાના ખોરાકની બહારની રચનામાં સમાન હતા. સત્ર પૂર્ણ થયું જ્યારે વિષયોએ 14 મિનિટ માટે ગુણોત્તર પૂર્ણ કર્યું ન હતું, બ્રેકપોઇન્ટ તરીકે વ્યાખ્યાયિત છેલ્લા પૂર્ણ ગુણોત્તર સાથે. ચાઉ / પલાટેબલ ઉંદરો ઓછામાં ઓછા 7 અઠવાડિયા માટે ડાયેટ-સાયક્લેડ હતા અને ત્યારબાદ આરએક્સટીએક્સએક્સ (-121919 એચ, એસસી) સાથે ચાલાકીયુક્ત આહારથી ચા (પી → સી તબક્કો) સુધી ફેરવાતા હતા. ચાઉ / ચાઉ કંટ્રોલ ઉંદરોને વચ્ચેની વિષયોની ડિઝાઇનમાં એક સાથે પરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું (n = 17). R121919 (0, 20 મિલિગ્રામ / કિલોગ્રામ વજન વજન, એસસી) ની માત્રા અંદરના વિષયોમાં, બે આહાર ચક્રમાં વિરોધાભાસી ડિઝાઇન આપવામાં આવી હતી. વધુ વિગતો માટે, જુઓ એસઆઈ ટેક્સ્ટ.
જથ્થાત્મક રીઅલ-ટાઇમ પીસીઆર.
ઉંદરો (n = 20) એ 7 અઠવાડિયા સુધી આહાર-સાયકલ કરવામાં આવ્યા હતા, બે આહારની સ્થિતિ (દરેક સાપ્તાહિક ચક્રના દિવસો 5 અને 7) દરમિયાન એનેસ્થેસીયાવાળા અને વિચ્છેદનશીલ હતા. મગજને ઝડપથી મગજની મેટ્રિક્સમાં કા removedી નાખવામાં આવ્યો હતો અને એમીગડાલા, મધ્યવર્તી એક્મ્બમ્બન્સ, ઇન્સ્યુલર કોર્ટેક્સ અને પ્રિફ્રન્ટલ કોર્ટેક્સ પંચની મધ્યસ્થ માળખા બરફ-કોલ્ડ સ્ટેજ પર એકત્રિત કરવામાં આવી હતી. પ્રાણીઓના પેશીઓમાંથી આરએનએ નિષ્કર્ષણ માટે પ્રમાણભૂત પ્રોટોકોલનો ઉપયોગ કરીને દરેક મગજ પંચમાંથી કુલ આરએનએ તૈયાર કરવામાં આવ્યો હતો. ત્યારબાદ ઉત્પાદકની સૂચના મુજબ કુલ આર.એન.એ. (1 Olg) ઓલિગો (ડીટી) 20 ની હાજરીમાં ઉલટા લખી હતી. માત્રાત્મક આરટી-પીસીઆર પ્રતિક્રિયાઓ 20-volumeL વોલ્યુમમાં 0.5 μM પ્રીમર્સ અને 4 એમએમ એમજીસીએલનો ઉપયોગ કરીને કરવામાં આવી હતી.2. પરિણામોના બીજા-વ્યુત્પન્ન પધ્ધતિઓ દ્વારા વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું અને મનસ્વી અવરોધોમાં વ્યક્ત કરવામાં આવ્યું હતું, જે સંદર્ભ જનીન, સાયપાના અભિવ્યક્તિ સ્તરને સામાન્ય બનાવ્યું હતું. આપેલ અનુક્રમ માટે બધી RT-PCR પ્રતિક્રિયાઓ એક જ રનમાં કરવામાં આવી હતી. વધુ વિગતો માટે, જુઓ એસઆઈ ટેક્સ્ટ.
પેપ્ટાઇડ એસિડ એક્સ્ટ્રેક્શન અને સીઆરએફ આરઆઇએ.
ઉંદરો (n = 25) ઓછામાં ઓછા 7 અઠવાડિયા માટે આહાર-સાયક્લેડ કરવામાં આવ્યા હતા, એનેસ્થેટીઝ્ડ, અને બે આહારની સ્થિતિઓ (દરેક સાપ્તાહિક ચક્રના 5 અને 7 દિવસો) દરમિયાન ડિસેપિટિટેડ. મગજના મેટ્રિક્સમાં મગજ ઝડપથી દૂર કરવામાં આવે છે અને કાટમાળ કાપી નાખવામાં આવે છે, અને એમીગડાલા પંચના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસને આઇસ-કોલ્ડ સ્ટેજ પર એકત્ર કરવામાં આવે છે. પેપ્ટાઇડ એસિડ નિષ્કર્ષણ પહેલાથી સ્થાપિત પ્રક્રિયાને અનુસરે છે (25). ટીશ્યુ સીઆરએફ-જેવી ઇમ્યુનોરેક્ટીવીટી ઝૉરિરિલા એટ અલથી અનુકૂલિત સંવેદનશીલ અને વિશિષ્ટ સોલિડ-તબક્કા આરઆઇએ સાથે પ્રમાણિત કરવામાં આવી હતી. (26). વધુ વિગતો માટે, જુઓ એસઆઈ ટેક્સ્ટ.
કોર્ટીકોસ્ટેરોન આરઆઇએ.
ઉંદરો (n = 12) ઓછામાં ઓછા 7 અઠવાડિયા સુધી આહાર-ચક્ર કરવામાં આવતા હતા, અને બે આહાર પરિસ્થિતિઓ (દરેક સાપ્તાહિક ચક્રના 5 અને 7 દિવસ) દરમિયાન પૂંછડીનું લોહીનું નમૂના લેવામાં આવ્યું હતું. કોર્ટીકોસ્ટેરોન જેવી ઇમ્યુનોએરેક્ટિવિટીના પ્લાઝ્મા સ્તરને ઉત્પાદકની સૂચનાઓ અનુસાર (એમપી બાયોમેડિકલ્સ, ઇન્ક.) વ્યાપારી રૂપે ઉપલબ્ધ આરઆઈએ કીટ સાથે નક્કી કરવામાં આવ્યા હતા.26). વધુ વિગતો માટે, જુઓ એસઆઈ ટેક્સ્ટ.
ઇલેક્ટ્રોફિઝિઓલોજિકલ સ્ટડીઝ
સ્લાઇસ તૈયારી.
અગાઉ વર્ણવ્યા પ્રમાણે એમિગડાલા સ્લાઇસેસનું કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસ તૈયાર કરવામાં આવ્યું હતું (27, 28) ઉંદરોથી (n = 7 / જૂથ) જે ઓછામાં ઓછા 7 અઠવાડિયા માટે આહાર-સાયક્લેડ કરવામાં આવી હતી, એનેસ્થેટીઝ્ડ, અને સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાંથી પાછી ખેંચી લેવા પછી 2-3 એચ નાબૂદ કરી. મગજ ઝડપથી દૂર કરવામાં આવ્યા હતા અને આઇસ-કોલ્ડ કૃત્રિમ મસ્તિષ્ક પ્રવાહી (એસીએસએફ) માં મૂકવામાં આવ્યા હતા જે 95% O સાથે ગેસ હતું2 અને 5% CO2. આશરે 30 મિનિટ માટે ઇન્ટરફેસ ગોઠવણીમાં ઉકાળીને કાપી નાંખ્યું, અને સંપૂર્ણ રીતે ડૂબી ગયું અને સતત ગરમ, ગેસવાળા એસીએસએફ સાથે સુપરફ્યુઝ કરવામાં આવ્યું. સુપરફ્યુસેટમાં જાણીતા સાંદ્રતા પ્રાપ્ત કરવા માટે સ્ટોક સોલ્યુશન્સમાંથી એસીએસએફમાં ડ્રગ્સ ઉમેરવામાં આવ્યા હતા. 2-4 એમએલ / મિનિટ સુપરફ્યુઝન દરનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે, ડ્રગ સાંદ્રતા 90 મિનિટની અંદર જળાશયની સાંદ્રતાના 2% સુધી પહોંચે છે.
ઇલેક્ટ્રોફિઝિઓલોજી.
અમે એમ્ગીડાલા ચેતાકોષના કેન્દ્રિય ન્યુક્લ્યુસને રેકોર્ડ કર્યું છે જે તીવ્ર માઇક્રોપીપેટ્સ સાથે બંધ થતી વોલ્ટેજ- અથવા વર્તમાન-ક્લેમ્પ મોડનો ઉપયોગ કરે છે. અમે તેમની વિશ્રામી કલા વીજસ્થિતિમાનની નજીક મોટાભાગના ન્યુરોન્સ રાખ્યા. ડેટાને પ્રિમ્પ્લિફાયર સાથે સંપાદિત કરવામાં આવ્યો હતો અને PClamp સૉફ્ટવેરનો ઉપયોગ કરીને પાછળથી વિશ્લેષણ માટે સ્ટોર કરાયો હતો. ફાર્માકોલોજિકલી ગૅબા અલગA રીસેપ્ટર-મધ્યસ્થ અવરોધક પોસ્ટસિનેપ્ટિક સંભવિત (GABAA-આઇઆઇપીએસપી) એ બાયપોલર ઉત્તેજક ઇલેક્ટ્રોડ દ્વારા એમ્ગડાલાના કેન્દ્રિય ન્યુક્લિયસની અંદર સ્થાનિક રીતે પ્રેરણા આપીને ઉત્પન્ન થઈ હતી જ્યારે ગ્લુટામેટ સંવેદના બ્લોકરો સીએનક્યુએક્સ અને એપીવી અને જીબીએB રીસેપ્ટર બ્લોકર CGP 55845A. દરેક સેલ માટેના પ્રતિભાવ પરિમાણોને નિર્ધારિત કરવા માટે, અમે ઇનપુટ-આઉટપુટ પ્રોટોકોલ કર્યું. વધુમાં વધુ વિસ્તરણ માટે જરૂરી વોલ્ટેજ સુધી આઇપીએસપી મેળવવા માટે આવશ્યક થ્રેશોલ્ડ વર્તમાનથી શરૂ થતા પ્રવાહોની શ્રેણી લાગુ કરવામાં આવી હતી. અમે ત્રણ પગલાંઓને ત્રણ પગલાંઓ (થ્રેશોલ્ડ, અર્ધ-મહત્તમ, અને મહત્તમ) 1-3 × ની ત્રણ તીવ્રતાને સામાન્ય બનાવ્યું. હાલના પગલાઓનું હાઇપરપોલરાઇઝિંગ અને વિધ્રુવીકરણ (200-PA ઇન્ક્રીમેન્ટ્સ, 750-ms સમયગાળો) પણ વોલ્ટેજ-ચાલુ (VI) વળાંક પેદા કરવા માટે લાગુ કરવામાં આવ્યાં હતાં. અમે ક્લેમ્પફિટ સૉફ્ટવેરનો ઉપયોગ કરીને વિકસિત આઇપીએસપી એક્પ્લિપ્ટ્યુડ્સ અને છઠ્ઠા પ્રતિસાદોનો જથ્થો આપ્યો. પસંદગીના સીઆરએફ સાથે સુપરફ્યુઝન પહેલાં તમામ પગલાં લેવામાં આવ્યા હતા1 તેના સુપરફ્યુઝન (121919 મિનિટ) દરમિયાન અને રીસપ્ટર વિરોધી R1 (20 μM), અને વૉશઆઉટ (30 મિનિટ) પછી. વધુ વિગતો માટે, જુઓ એસઆઈ ટેક્સ્ટ.
આંકડા
જૂથની તુલનાએ સ્ટુડન્ટ્સનો ઉપયોગ કર્યો t-ટાસ્ટ્સ (બે-જૂથ તુલના) અથવા ભિન્નતા (ANOVA) (ઓછામાં ઓછા ત્રણ-જૂથ તુલના) નું વિશ્લેષણ, બાદમાં સરળ મુખ્ય અસર વિશ્લેષણ અથવા ન્યુમેન-કેલ્સ નોંધપાત્ર અર્થનિર્ધારણ શાસ્ત્ર અસરો પછી તુલના કરે છે.P <0.05). ખોરાક પ્રયોગમાંથી મળેલા ડેટાનું વિશ્લેષણ ત્રિ-માર્ગ મિશ્ર એનોવા દ્વારા ડાયેટ શેડ્યૂલ સાથેના-વિષયના પરિબળો તરીકે ડોઝ અને ડાયેટ ફેઝ વચ્ચેનું-પરિબળ છે. એલિવેટેડ પ્લસ-મેઝ પ્રયોગના ડેટાનું આહાર શેડ્યૂલ અને ડોઝ સાથેના બે-માર્ગ એનોવા દ્વારા વિષયોના પરિબળો તરીકે વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું. મજબૂતીકરણના પ્રયોગના પ્રગતિશીલ-ગુણોત્તર શેડ્યૂલ માટે, બ્રેકપોઇન્ટ અને કુલ જવાબોનું વિશ્લેષણ બે-માર્ગ મિશ્ર એનોવા દ્વારા ડાયેટ શેડ્યૂલ સાથે-વિષય પરિબળ તરીકે અને ડોઝને અંદરના વિષયોના પરિબળ તરીકે કરવામાં આવ્યું. પ્રથમ 5 મિનિટ દરમિયાન પ્રતિક્રિયા આપવાનો સમય-અભ્યાસક્રમ, ડાયટ શેડ્યૂલ સાથેના ત્રણ-માર્ગ મિશ્ર એનોવા દ્વારા વિષયોના પરિબળો અને વિષયના પરિબળ તરીકે ડોઝ અને ટાઇમ તરીકે વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું. ઇલેક્ટ્રોફિઝિયોલોજિકલ અભ્યાસના ડેટાનું વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યું હતું વચ્ચેના વિષયોના એનોવા અથવા વિષયોની અંદર એનોવા સાથે વારંવાર પગલાં લેવામાં આવે તો તે યોગ્ય છે. કોર્ટીકોસ્ટેરોન આરઆઈએના ડેટા જ્યાં બે-વે-મિક્સ એનોવા દ્વારા ડાયેટ શિડ્યુલ સાથે વિશ્લેષણ કર્યાં છે તે અંતર્ગત-વિષયના પરિબળ તરીકેના-વિષયના પરિબળ અને ડાયેટ ફેઝ તરીકે છે. ઉપયોગમાં લેવામાં આવેલા આંકડાકીય પેકેજોમાં ઇન્સ્ટાટ ,. 3.0, પ્રિઝમ (.૦ (ગ્રાફપેડ), સિસ્ટેટ 4.0 અને એસપીએસએસ 11.0 (એસપીએસએસ) હતા.
સમર્થન.
અમે સહાયક સહાય માટે માઇક આરેન્ડ્સ, વહીવટી સહાય માટે મેરી ગિચુહી અને તકનીકી સહાયતા માટે બોબ લિંટેઝ, જીનેટ હેલ્ફર્સ, સ્ટેફની ડેલા ક્રૂઝ અને મોલી બ્રેનનને આભારી છીએ. આ કાર્ય નેશનલ ઇન્સ્ટિટ્યુટ ઑફ ડાયાબિટીસ અને ડાઇજેસ્ટિવ અને કિડની ડિસીઝ ગ્રાન્ટ્સ DK70118, DK26741, અને P30DK56336 દ્વારા સમર્થિત હતું; નેશનલ ઈન્સ્ટિટયૂટ ઓન ડ્રગ એબ્યુઝ ગ્રાન્ટ ડૅક્સ્યુએક્સએક્સ; દારૂના દુરૂપયોગ અને મદ્યપાન પર રાષ્ટ્રીય સંસ્થા એએક્સએનટીએક્સએક્સ અને એએક્સએનટીએક્સએક્સ; ન્યુરોલોજીકલ ડિસઓર્ડર અને સ્ટ્રોક ગ્રાન્ટ નેશનલ ઇન્સ્ટિટ્યુટ ઇન્સ્ટિટ્યુટ, એક્સએક્સટીએક્સએક્સએક્સએક્સએક્સએક્સએક્સ-એક્સએનએક્સએક્સએક્સએક્સએક્સ; એજીંગ ગ્રાન્ટ AG023680 પર નેશનલ ઇન્સ્ટિટ્યુટ; નેશનલ હાર્ટ, ફેફસાં અને બ્લડ ઇન્સ્ટિટ્યૂટ ગ્રાન્ટ એચએલએક્સએનએક્સએક્સ; એલિસન મેડિકલ ફાઉન્ડેશન; અને મદ્યપાન અને વ્યસન સંશોધન માટે પીઅર્સન સેન્ટર. આ કાર્યનો એક ભાગ નેશનલ ઇન્સ્ટિટ્યુટ ઓન ડ્રગ એબ્યુઝના ઇન્ટ્રામ્યુરલ રિસર્ચ પ્રોગ્રામ્સ અને આલ્કોહોલ એબ્યુઝ એન્ડ મદ્યપાનના રાષ્ટ્રીય સંસ્થા દ્વારા સમર્થિત હતો. આ સ્ક્રીપ્સ સંશોધન સંસ્થામાંથી હસ્તપ્રત નંબર 016731 છે.
ફૂટનોટ્સ
લેખકો વ્યાજના કોઈ સંઘર્ષની જાહેરાત કરે છે.
આ લેખ પી.એન.એસ.એસ. ડાયરેક્ટ સબમિશન છે.
આ લેખમાં ઑનલાઇન સમર્થન માહિતી શામેલ છે www.pnas.org/cgi/content/full/0908789106/DCS પૂરક.
સંદર્ભ
;