ડોપામાઇન ડીએક્સએનએક્સએક્સ રીસેપ્ટર્સમાં વ્યસન-જેવી ઇનામ ડિસફંક્શન અને મેદસ્વી ઉંદરો (બાહ્ય ઉંદરો) માં કંટાળાજનક ખોરાક.

ટિપ્પણી: આ અભ્યાસ દર્શાવે છે કે જ્યારે પ્રાણીને અમર્યાદિત accessક્સેસ આપવામાં આવે છે, ત્યારે એક મજબૂત કુદરતી રિફોર્સ (ખૂબ ઉત્તેજક ખોરાક) ડી 2 રીસેપ્ટર્સમાં ઘટાડો લાવી શકે છે. આ ઘટાડો લગભગ તમામ ઉંદરોમાં જોવા મળ્યો હતો, અને તદ્દન ઝડપથી થયો. જ્યારે “ખૂબ જ સ્વાદિષ્ટ” ખોરાક દૂર કરવામાં આવ્યો ત્યારે, ઉંદરોએ સામાન્ય ચોળ ખાવાની ના પાડી. "ખૂબ જ સ્વાદિષ્ટ" ખાદ્ય વપરાશ સાથે વિદ્યુત આંચકા જોડવા છતાં ઉંદરો દ્વિસંગી ચાલુ રાખતા હતા.

• સંપૂર્ણ અભ્યાસ

નેટ ન્યુરોસી 2010 મે; 13(5): 635-641. ઑનલાઇન 2010 માર્ચ 28 પ્રકાશિત. ડોઇ:  10.1038 / nn.2519

અમૂર્ત

અમે શોધી કાઢ્યું કે મેદસ્વીપણાનો વિકાસ નૈતિક પુરસ્કાર પ્રતિસાદમાં પ્રગતિશીલ રીતે વધી રહેલા ખાધના ઉદભવ સાથે થયો હતો. કોકેઈન અથવા હેરોઈન દ્વારા પ્રેરિત ઇનામ હોમિયોસ્ટેસિસમાં સમાન પરિવર્તનોને અનૌપચારિક અને અનિવાર્ય ડ્રગ લેતા સંક્રમણને ટ્રિગર કરવામાં નિર્ણાયક માનવામાં આવે છે. તદનુસાર, અમે મેદસ્વીમાં કંટાળાજનક-જેવા ખોરાકની વર્તણૂંકને શોધી કાઢ્યું પરંતુ ચપળ ઉંદરો નહીં, જે સ્વાદિષ્ટ ખોરાક વપરાશ તરીકે માપી શકાય છે જે વિપરીત શરતી ઉત્તેજના દ્વારા વિક્ષેપ માટે પ્રતિકારક હતો. સ્ટ્રાઇટલ ડોપામાઇન ડીએક્સએનએક્સએક્સ રીસેપ્ટર્સ (D2Rs) મેદસ્વી ઉંદરોમાં ડાઉનreg્યુલેટેડ હતા, જેમ કે માનવીઓમાં ડ્રગ્સની વ્યસન હોવાનું જણાવાયું છે. તદુપરાંત, સ્ટ્રેટલ D2R ના લેન્ટિવાયરસ-મધ્યસ્થીના નકામા પતનથી ઝડપથી વ્યસન-જેવી ઇનામની ખામી અને ઉંદરોમાં માંગતા આવશ્યક આવશ્યક ખોરાકની શરૂઆત ઝડપથી વધવા યોગ્ય ઉચ્ચ-ચરબીવાળા ખોરાકની વૃદ્ધિ સાથે ઝડપી થઈ. આ ડેટા દર્શાવે છે કે સ્વાદિષ્ટ ભોજનની વધારે પડતી કલ્પના મગજ પુરસ્કાર સર્કિટ્સમાં વ્યસન-જેવા ન્યુરોડેપ્ટીવ પ્રતિસાદને ટ્રિગર કરે છે અને ફરજિયાત ખાવાનું વિકાસ કરે છે. તેથી સામાન્ય હેડનિક મેકેનિઝમ મેદસ્વીપણું અને ડ્રગની વ્યસનને ઓછી કરી શકે છે.

પરિચય

ભોજન આનંદ અને ઈનામથી પ્રભાવિત થાય છે, અને ખોરાકના પુરસ્કાર મેળવવાથી વપરાશને શક્તિશાળી રીતે પ્રોત્સાહિત કરવામાં આવે છે., 1. તેમ છતાં, મેદસ્વીપણામાં ફાળો આપતા હેડોનિક મિકેનિઝમ્સ નબળી સમજી શકાય છે. જન્મજાત લેપ્ટિનની ઉણપવાળા હાઈપરફgicજિક માણસોમાં, ડોર્સલ અને વેન્ટ્રલ સ્ટ્રાઇટમમાં પ્રવૃત્તિ, જે મગજના ઇનામ સર્કિટના મુખ્ય ઘટકો હોય છે, તે ફૂડ 2 ની છબીઓના પ્રતિભાવમાં નોંધપાત્ર રીતે વધે છે, અને લેપ્ટિન રિપ્લેસમેન્ટ થેરેપી, સ્ટ્રિએટલ પ્રવૃત્તિ અને ખોરાક -3 ને 'રુચિ પણ ધ્યાન આપે છે'. . આ સૂચવે છે કે સ્ટ્રાઇટમ ખોરાકની વર્તણૂકના હેડોનિક પાસાઓમાં મહત્વપૂર્ણ છે. તે તાજેતરમાં દર્શાવવામાં આવ્યું હતું કે દુર્બળ નિયંત્રણો 3 ની તુલનામાં મેદસ્વી વ્યક્તિઓમાં ખૂબ જ સ્વાદિષ્ટ ખોરાકના પ્રતિભાવમાં સ્ટ્રિએટમનું સક્રિયકરણ ભૂંસી નાખવામાં આવે છે. તદુપરાંત, ડીઆરડી 4 – એએનકેકે 2 જનીન લોકસના ટાકીઆઆ એલીલ ધરાવતા વ્યક્તિઓમાં ડોર્સલ સ્ટ્રાઇટumમ અને લાંબા ગાળાના વજનમાં વધારોની હાયપોફંક્શન સૌથી વધુ ઉચ્ચારવામાં આવે છે, જે સ્ટ્રિએટલ ડી 1 આર અભિવ્યક્તિમાં ઘટાડો કરે છે અને વ્યક્તિઓને પદાર્થ પરાધીનતા વિકૃતિઓ તરફ દોરી બતાવે છે. આ અને સમાન અવલોકનોથી દરખાસ્ત તરફ દોરી છે કે ઈનામ પ્રક્રિયામાં થતી ખામી એ સ્થૂળતાના વિકાસ માટેનું જોખમકારક પરિબળ હોઈ શકે છે, અને તે સ્થૂળતાવાળા વ્યક્તિઓ વળતરની અતિસંવેદનશીલતાને વળતર આપવા માટે સ્વાદિષ્ટ ખોરાકનો અનિવાર્યપણે વપરાશ કરી શકે છે. નોંધપાત્ર રીતે, તે સ્પષ્ટ નથી કે ઇનામ પ્રક્રિયામાં ઉણપ ઘટક છે અને મેદસ્વીતા પહેલા છે, અથવા સ્વાદિષ્ટ ખોરાકનો વધુ પડતો વપરાશ ઇનામની અવ્યવસ્થાને વેગ આપી શકે છે કે કેમ અને આહાર દ્વારા પ્રોત્સાહિત સ્થૂળતામાં ફાળો આપે છે.

વજનવાળા અને મેદસ્વી વ્યક્તિઓની વ્યાખ્યા આપતી લાક્ષણિકતા એ છે કે જાણીતા નકારાત્મક સ્વાસ્થ્ય અને સામાજિક પરિણામો હોવા છતાં પણ તેઓ વધુ પડતું ખાવું લે છે. ખરેખર, ઘણા વજનવાળા વ્યક્તિઓ તેમના ખાદ્ય વપરાશને મર્યાદિત કરવાની ઇચ્છા વ્યક્ત કરે છે, તેમ છતાં તેમનો ઇન્ટેક નિયંત્રિત કરવા માટે સંઘર્ષ કરે છે અને તેમની ઊર્જા જરૂરિયાતો 7, 8 કરતાં વારંવાર વપરાશ કરે છે. નકારાત્મક પરિણામ પ્રત્યે સંવેદનશીલ ખોરાક આપવાની વર્તણૂક, જે માનવ ડ્રગ વ્યસનીઓમાં જોવા મળતા ડ્રગ્સ લેવાનું વર્તન સમાન છે, જે નકારાત્મક પરિણામો 9 જેટલું જ અશુદ્ધ છે. અહીં અમે ઉંદરોમાં મગજ પુરસ્કાર સિસ્ટમ્સની સંવેદનશીલતા પર એક સુગમતા ઉચ્ચ ચરબીવાળા આહારની વિસ્તૃત પહોંચની અસરોની તપાસ કરી. અમે ડાયેટ-પ્રેરિત હેડનિક ડિસેરેગ્યુલેશન અને બાકાત ખોરાકની ઉદ્ભવની વચ્ચેની લિંકની પણ તપાસ કરી. છેવટે, અમે આ વ્યસન-જેવી વર્તણૂકલક્ષી પ્રતિસાદમાં સ્ટ્રેટલ D2R ની ભૂમિકાની તપાસ કરી.

મેદસ્વી ઉંદરોમાં વ્યસન-જેવી ઇનામની ખાધ

સ્વાદિષ્ટ ઉચ્ચ ચરબીવાળા ખોરાકની પ્રતિબંધિત અથવા વિસ્તૃત ofક્સેસના પ્રભાવને ચકાસવા માટે, અમે બાજુના હાયપોથાલેમસમાં દ્વિધ્રુવી ઉત્તેજક ઇલેક્ટ્રોડ સાથે પુરુષ વિસ્ટર ઉંદરો (300−350 ગ્રામ) તૈયાર કર્યા અને 10-14 ડી માટે તાલીમબદ્ધ તાલીમ માટે સ્થિર પુરસ્કાર થ્રેશોલ્ડ સ્થાપિત ન થાય ત્યાં સુધી વર્તમાન-થ્રેશોલ્ડ મગજ ઉત્તેજના પુરસ્કાર (BSR) પ્રક્રિયા. બીએસઆર પ્રક્રિયામાં, ઉંદરો ઉત્સાહપૂર્ણ ઇલેક્ટ્રોડ દ્વારા લાભદાયક ઇલેક્ટ્રિકલ સ્વ-ઉત્તેજના મેળવવા માટે જોરશોરથી પ્રતિક્રિયા આપે છે, સ્વ-ઉત્તેજના વર્તનને જાળવી રાખતી ન્યૂનતમ ઉત્તેજનાની તીવ્રતા સાથે વળતરની થ્રેશોલ્ડ 4 કહેવામાં આવે છે. મૂળભૂત શરતો હેઠળ લાંબી અવધિમાં ઇનામ થ્રેશોલ્ડ સ્થિર અને અનલિટર્ડ રહેવાને કારણે, આ પ્રક્રિયા મગજની પુરસ્કાર પ્રણાલીની પ્રતિભાવ માટે સંવેદનશીલ માપ પ્રદાન કરે છે. સ્થિર બીએસઆર થ્રેશોલ્ડની સ્થાપના પછી (સતત ત્રણ સત્રોમાં થ્રેશોલ્ડમાં <10% ભિન્નતા તરીકે વ્યાખ્યાયિત થયેલ), અમે ઉંદરોને ત્રણ જૂથોમાં ફાળવ્યા જે જૂથો વચ્ચેના શરીરના વજન અથવા ઇનામ થ્રેશોલ્ડમાં કોઈ તફાવત દર્શાવતા નથી. આ ત્રણેય જૂથોને 'કેફેટેરિયા-શૈલી' આહારમાં વિશિષ્ટ givenક્સેસ આપવામાં આવી હતી જેમાં સ્વાદિષ્ટ consumptionર્જા-ગાense ખોરાકનો સમાવેશ થાય છે જે માનવ વપરાશ માટે સહેલાઇથી ઉપલબ્ધ છે (Methનલાઇન પદ્ધતિઓ જુઓ). ઉંદરોમાં 10 ક (ચો-ફક્ત ઉંદરો; n = 0), 9 ક (પ્રતિબંધિત એક્સેસ ઉંદરો; n = 1), અથવા 11-18 ક (વિસ્તૃત-એક્સેસ ઉંદરો; n = 23) માટે દરરોજ આહારની accessક્સેસ હતી. સતત 11 દિવસ. કાફેટેરિયા આહાર ઉંદરોમાં આહાર-પ્રેરણા મેદસ્વીપણાને પરિણામે ઓળખાય છે. બધા ઉંદરોની પાસે પ્રમાણભૂત પ્રયોગશાળા ચો માટે એડ લિબિટમ hadક્સેસ પણ હતી, જેમાં પુરસ્કાર થ્રેશોલ્ડ્સ, વજનમાં વધારો અને સમગ્ર કેલરી ઇનટેક નોંધાયેલ છે.

ચાઉ માત્ર અથવા મર્યાદિત-ઍક્સેસ જૂથો (ફિગ. 1a) ની તુલનામાં કાફેટેરિયા આહારમાં વિસ્તૃત ઍક્સેસ સાથે ઉંદરોમાં વજન નોંધપાત્ર રીતે વધ્યું છે. વજન ફક્ત ઉંદરોની સરખામણીમાં પ્રતિબંધિત-વપરાશના ઉંદરોમાં પણ વધારો થયો છે, પરંતુ આ અસર આંકડાકીય મહત્વ સુધી પહોંચી શકી નથી. વિસ્તૃત-ઍક્સેસ ઉંદરોમાં મેદસ્વીતાના વિકાસમાં મગજ પુરસ્કાર કાર્યમાં નબળી પડતી ખામી સાથે નજીકથી સંકળાયેલું હતું, જે પ્રગતિશીલ ઉન્નત બીએસઆર થ્રેશોલ્ડ (ફિગ. 1b) માં પ્રતિબિંબિત થાય છે. કારણ કે ત્રણ જૂથ (સપ્લિમેન્ટરી ફિગ. 1) માં બીએસઆર માટે પ્રતિક્રિયા લેટેન્સીઝમાં કોઈ તફાવત જોવા મળ્યો ન હતો, વર્તણૂકીય કામગીરીમાં ખામીઓ આ અવલોકન માટે જવાબદાર નથી. બ્રેઇન ઇનામ ફંક્શનમાં સમાન ખામીઓ ઉછેરમાં ઉછેરવામાં આવી હોવાનું જાણવામાં આવ્યું છે પરંતુ ઇન્ટ્રાવેન્સસ કોકેન અથવા હેરોઈન સ્વ-વહીવટ માટે એક્સનટેક્સ ઍક્સેસ નથી 12, 13, 14. આમ, સુગંધિત ઉચ્ચ ચરબીવાળા ખોરાકમાં વિસ્તૃત પ્રવેશ મગજ પુરસ્કાર કાર્યમાં વ્યસન-જેવી ખામીઓને પ્રેરિત કરી શકે છે, પ્રેરણાના એક મહત્વપૂર્ણ સ્રોત તરીકે માનવામાં આવે છે જે વધારે પડતું ખાવું ચલાવે છે અને મેબેસીટીએક્સએક્સ, 1 ના વિકાસમાં યોગદાન આપે છે.

આકૃતિ 1: કાફેટેરિયાની આહારમાં વિસ્તૃત ઍક્સેસ સાથે ઉંદરોમાં વજન વધારો અને પુરસ્કાર તકલીફ.

(a) મીન (± સેમ) ફક્ત ચો-ફક્ત વજનમાં વધારો, પ્રતિબંધિત accessક્સેસ અને વિસ્તૃત-એક્સેસ ઉંદરો (×ક્સેસ-ડે ઇન્ટરેક્શન: F39,702 = 7.9, પી <0.0001; * પી <0.05 ચો-ઓનલાઈન જૂથની તુલનામાં, આ પછીનો ટેસ્ટ). (બી) મીન (± સેમ) બેઝલાઇન ઇનામ થ્રેશોલ્ડથી ટકાવારી ફેરફાર (.ક્સેસ-સમય ક્રિયાપ્રતિક્રિયા: F78,1092 = 1.7, પી <0.0005; * પી <0.05 ફક્ત ચો-ફક્ત જૂથની સરખામણીમાં, આ પછીની પરીક્ષા).

જ્યારે આપણે ખોરાકની વર્તણૂંક વિગતવાર (ફિગ. 2) તપાસ કરી હતી, ત્યારે અમને જાણવા મળ્યું હતું કે કુલ દૈનિક કેલરીની માત્રા ચૌ-ફક્ત અને મર્યાદિત-ઍક્સેસ ઉંદરો (ફિગ. 2a, ડી) વચ્ચે સમાન હતી. તેનાથી વિપરીત, વિસ્તૃત ઍક્સેસ ધરાવતી ઉંદરોમાં કુલ કેલરીનો વપરાશ પ્રતિબંધિત-ઍક્સેસ અને ચૌદ માત્ર ઉંદરો (ફિગ. 2a, ડી) કરતા લગભગ બમણો હતો. જો કે પ્રતિબંધિત-ઍક્સેસ અને ચોમાફ માત્ર ઉંદરો લગભગ સમાન દૈનિક કેલરી સેવન (ફિગ. 2a, ડી) જાળવી રાખે છે, પ્રતિબંધિત-ઍક્સેસ ઉંદરોએ ચા (ફિગ. 33b, ડી) માંથી તેમના દૈનિક કેલરીના ફક્ત ~ 2% પ્રાપ્ત કર્યા છે, જે સૂચવે છે કે તેઓએ બેન્ગી જેવા ખોરાકની વર્તણૂંક વિકસાવી અને કાફેટેરિયા ડાયેટએક્સએક્સએક્સ (ફિગ. 66d) માં તેમના 1 એચ એક્સેસ સત્ર દરમિયાન તેમના દૈનિક કેલરીના સેવનના ~ 15% નો વપરાશ કર્યો. એક્સ્ટેંડેડ-એક્સેસ ઉંદરોએ ચા (ફિગ. 2b) માંથી તેમના કુલ કેલરિક સેવનના માત્ર એક નાના ભાગ (~ 5%) પ્રાપ્ત કર્યા છે; તેઓ લગભગ ફક્ત (ફિગ. 2d) કાફેટેરિયા આહારનો ઉપયોગ કરે છે. મર્યાદિત- અને વિસ્તૃત-ઍક્સેસ જૂથોમાં ડાયેટરી પસંદગીમાં પાળી પણ માત્ર ચંદ્ર (ફિગ. 2c અને સપ્લિમેન્ટરી ફિગ. 2) ની તુલનામાં ચરબીના સેવનમાં નોંધપાત્ર વધારો દર્શાવે છે. અગાઉના અહેવાલો 2 સાથે સુસંગત, વિસ્તૃત-ઍક્સેસ ઉંદરોમાં સમય સાથે ઘટાડો કરવા માટે કાફેટેરિયા આહારના વપરાશની વલણ હતી. આ સમય સાથે કાફેટેરિયા આહારના ભાગ રૂપે પ્રદાન કરવામાં આવતી ખોરાક વસ્તુઓની સુગમતાને સહનશીલતાના વિકાસને પ્રતિબિંબિત કરે છે. તેમ છતાં, કાફેટેરિયાની આહાર વિરુદ્ધ પ્રમાણભૂત ચાઉની પસંદગી આ ઉંદરો (સપ્લિમેન્ટરી ફિગ. 16) માં સતત ઊંચી રહી. આ ડેટા દર્શાવે છે કે વિસ્તૃત પરંતુ ઉચ્ચતમ ચરબીવાળી આહારમાં મર્યાદિત ઍક્સેસ ન વ્યસન-જેવી ઇનામની ખાધ, અતિશય આહાર અને હોમિયોસ્ટેટિક ઊર્જા સંતુલનને નુકસાન પહોંચાડે છે. તેનાથી વિપરીત, સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાં પ્રતિબંધિત વપરાશ વપરાશના બેન્ગી જેવા પેટર્નને વેગ આપે છે, પરંતુ હોમિયોસ્ટેટિક ઊર્જા સંતુલન અથવા મગજ પુરસ્કાર કાર્યને વિક્ષેપિત કરતું નથી. જો કે, તે શક્ય છે કે સતત 3 કરતા વધુ દિવસ માટે કાફેટેરિયા આહારમાં પ્રતિબંધિત પ્રવેશ નોંધપાત્ર વજન વધારો અને મગજ પુરસ્કાર કાર્યમાં વિક્ષેપ પેદા કરશે.

આકૃતિ 2: કાફેટેરિયા આહારમાં વિસ્તૃત વપરાશ સાથે ઉંદરોમાં વપરાશની પેટર્ન.

(એ) મીન (± સેમ) ચો-ફક્ત, પ્રતિબંધિત accessક્સેસ અને વિસ્તૃત-એક્સેસ ઉંદરોમાં દૈનિક કેલરી ઇનટેક (:ક્સેસ: F1,324 = 100.6, પી <0.0001; સમય: F18,324 = 7.8, પી <0.0001; accessક્સેસ × સમય ક્રિયાપ્રતિક્રિયા: F18,324 = 4.6, પી <0.0001; * પી <0.05 ચો-ઓનલાઈન જૂથની તુલના, આ પછીની પરીક્ષણ). (બી) ચો થી સરેરાશ દૈનિક કેલરી ઇન્ટેક (m સેમ) (:ક્સેસ: એફ 2,504 = 349.1, પી <0.0001; સમય: એફ 18,504 = 5.9, પી <0.0001; એક્સેસ × સમય ક્રિયાપ્રતિક્રિયા: એફ 36,504 = 3.52, પી <0.0001; * પી <0.05 ચો-ઓનલાઈન જૂથની તુલના, આ પછીની પરીક્ષણ). (સી) સરેરાશ ચરબીમાંથી દરરોજ કેલરીની માત્રા (± સેમ) (:ક્સેસ: એફ 2,486 = 118.7, પી <0.0001; સમય: એફ 18,486 = 8.8, પી <0.0001; એક્સેસ × સમય ક્રિયાપ્રતિક્રિયા: એફ 36,486 = 6.2, પી <0.0001; * પી <0.05 ચો-ઓનલાઈન જૂથની તુલનામાં, આ પછીની પરીક્ષણ). (ડી) સરેરાશ (± સેમ) કુલ કેલરી ઇન્ટેકની તુલના, અને owક્સેસના સમગ્ર 40-દિવસના સમયગાળા દરમિયાન, ચોમાંથી ફક્ત વપરાશ કરેલ કેલરી (:ક્સેસ: એફ 2,54 = 25.0, પી <0.0001; કેલરી સ્રોત: એફ 2,54 = 1235.2, પી <0.0001; એક્સેસ × કેલરી સ્રોત ક્રિયાપ્રતિક્રિયા: F2,54 = 485.7, પી <0.0001; *** પી <0.001 ફક્ત ચો-ફક્ત જૂથની કુલ કેલરીની તુલનામાં, ### પી <0.001, કુલ કેલરીની તુલનામાં ઉંદરો સમાન જૂથ, પોસ્ટ હોક પરીક્ષણ).

40 ડી પછી, ઉંદરોને હવે સ્વાદિષ્ટ આહારની accessક્સેસની મંજૂરી નહોતી પરંતુ માનક પ્રયોગશાળા ચોમાં એડ લિબિટમ પ્રવેશ મેળવવો ચાલુ રાખ્યો હતો. અમે આ અમલમાં મૂકાયેલા 'ત્યાગ' સમયગાળા દરમિયાન દરરોજ ઈનામ થ્રેશોલ્ડ અને ચાના વપરાશનું મૂલ્યાંકન કર્યું છે. પુરસ્કાર થ્રેશોલ્ડમાં elevંચાઇ એ વિસ્તૃત-એક્સેસ ઉંદરોમાં ઓછામાં ઓછા 2 અઠવાડિયા સુધી ચાલુ રહેતી હતી જ્યારે તેઓને સ્વાદિષ્ટ આહાર (ફિગ. 3 એ) ની .ક્સેસ ન હોય. આ સ્વ-સંચાલિત કોકેઈન 48 ના ત્યાગતા ઉંદરોમાં નોંધાયેલા રિવાર્ડ ફંક્શનમાં પ્રમાણમાં ક્ષણિક (h 13 ક) ખાધ સાથે વિરોધાભાસી છે. આ ત્યાગના સમયગાળા દરમિયાન, કેલરી ઇનટેક (ફિગ. 3 બી) અને શરીરના વજનમાં ધીમે ધીમે ઘટાડો (ફિગ. 3 સી) વિસ્તૃત એક્સેસ ઉંદરોમાં પણ, અને મર્યાદિત-વપરાશ ઉંદરોમાં ઓછા પ્રમાણમાં, આ સુસંગતતાના સમયગાળા દરમિયાન, અગાઉના અહેવાલો 11, 15. ત્યાગના 14 ડી પછી, ઉંદરો માર્યા ગયા અને ઇલેક્ટ્રોડ પ્લેસમેન્ટ્સ ક્રેસિલ વાયોલેટ સ્ટેનિંગ દ્વારા નક્કી કરવામાં આવ્યા (ફિગ. 3 ડી).

આકૃતિ 3: કાફેટેરિયાની આહારમાં વિસ્તૃત ઍક્સેસ સાથે ઉંદરોમાં નિષ્ઠા દરમિયાન સતત પુરસ્કાર અને અસ્થિભંગ.

(એ) સ્વાદિષ્ટ ઉચ્ચ ચરબીયુક્ત આહાર (:ક્સેસ: એફ 2,112 = 3.7, પી <0.05; સમય: એફ 4,112 = 2.3, પી> 0.05; * પી. 0.05; * પી. માંથી ત્યાગ દરમ્યાન મૂળભૂત પુરસ્કાર થ્રેશોલ્ડ્સ (m સેમ) માંથી સરેરાશ ટકાવારી ફેરફાર. <14 ચો-ફક્ત જૂથ સાથે પોસ્ટ કરો, આ પછીની પરીક્ષણ). (બી) ઉચ્ચ ચરબીયુક્ત આહાર (બેઝલાઇન) ની accessક્સેસના અંતિમ દિવસે અને માત્ર ત્યાગના 2,168 ડી દરમિયાન જ્યારે માત્ર પ્રમાણભૂત ચો ઉપલબ્ધ હતો (calક્સેસ: એફ 41.7 = 0.0001, પી <6,168 ; સમય: એફ 65.6 = 0.0001, પી <12,168; એક્સેસ × સમય ક્રિયાપ્રતિક્રિયા: એફ 38.3 = 0.0001, પી <0.05; * પી <14 ફક્ત ચો-ફક્ત જૂથની તુલનામાં, આ પછીની પરીક્ષા). (સી) ઉચ્ચ ચરબીયુક્ત આહાર (બેઝલાઈન) ની highક્સેસના છેલ્લા દિવસે શરીરના વજનની તુલનામાં સરેરાશ શરીરના વજનમાં (m સેમ) પરિવર્તન કરો અને ત્યાગના 1,126 ડી દરમિયાન જ્યારે ફક્ત પ્રમાણભૂત ચો ઉપલબ્ધ હતો (:ક્સેસ: એફ 37.2 = .0.0001 7,126.૨, પી <3.1; સમય: એફ 0.01 = 7,126, પી <40.9; એક્સેસ × સમય ક્રિયાપ્રતિક્રિયા: એફ 0.0001 = 0.05, પી <XNUMX; * પી <XNUMX ફક્ત ચો-જૂથ, પોસ્ટ હ hક પરીક્ષણની તુલનામાં). (ડી) ચો-ઓનલી (ત્રિકોણ), પ્રતિબંધિત accessક્સેસ (ચોરસ) અને વિસ્તૃત એક્સેસ (વર્તુળો) ઉંદરોના બાજુના હાયપોથાલેમસમાં બીએસઆર ઉત્તેજીત ઇલેક્ટ્રોડ્સના સ્થાનનું Histતિહાસિક પુનર્નિર્માણ.

મેદસ્વી ઉંદરોમાં સ્ટ્રાઇટલ D2Rs: પુરસ્કારની ખોટમાં ભૂમિકા

અમે હવે આ અનુમાનનું પરીક્ષણ કર્યું છે કે સ્વાદિષ્ટ કેફેટેરિયાના આહારમાં વધુ પડતો ઉપયોગ સ્ટ્રિએટલ ડી 2 આર ઘનતાને ઘટાડે છે, વ્યસન જેવા પુરસ્કારની અતિસંવેદનશીલતાના વિકાસમાં ફાળો આપે છે. ચો-ઓનલાઈન જૂથની તુલનામાં વિસ્તૃત-raક્સેસ ઉંદરોમાં શરીરના વજનમાં આંકડાકીય રીતે નોંધપાત્ર વધારો ન થાય ત્યાં સુધી ચો-ઓનલાઈન, પ્રતિબંધિત accessક્સેસ અને વિસ્તૃત-એક્સેસ ઉંદરોને કેફેટેરિયાના આહારમાં પ્રવેશની મંજૂરી આપવામાં આવી હતી (પી <0.05 ; ફિગ. 4 એ). અહેવાલ મુજબ ભારે ગ્લાયકોસાઇલેટેડ (~ 70 કેડીએ) મેમ્બ્રેન-બાઉન્ડ સ્વરૂપની મર્યાદિત અભિવ્યક્તિ પ્રતિબંધિત orક્સેસ અથવા ચો-ઓનલી ઉંદરોની તુલનામાં વિસ્તૃત-એક્સેસ ઉંદરોમાં ઓછી હતી (ફિગ. 2 બી; Onlineનલાઇન પદ્ધતિઓ જુઓ). જ્યારે આપણે શરીરના વજન (પ્રકાશ અથવા ભારે) ના સરેરાશ વિભાજનને આધારે દરેક groupક્સેસ જૂથમાં ઉંદરોને બે પેટા જૂથોમાં વહેંચ્યા, ત્યારે અમને શરીરના વજન અને સ્ટ્રિએટલ ડી 4 આર અભિવ્યક્તિ (ફિગ. 2 એ, સી) વચ્ચેનો સ્પષ્ટ વ્યસ્ત સંબંધ મળ્યો. અમે અગ્લીકોસાઇલેટેડ અપરિપક્વ (~ 4 કેડીએ) અને D39R (સપ્લિમેન્ટરી ફિગ. 51) 2 ના ઇન્ટરમિટેટલી ગ્લાયકોસાઇલેટેડ સાયટોપ્લાઝમિક (k 4 કેડીએ) સ્વરૂપોના અભિવ્યક્તિમાં આંકડાકીય રીતે નોંધપાત્ર ઘટાડો થયો નથી, જે દર્શાવે છે કે વિસ્તૃત-એક્સેસ ઉંદરોમાં સ્ટ્રિએટલ ડી 17 આર અભિવ્યક્તિ સંભવત is છે. ટ્રાંસ્ક્રિપ્શન પછીની પદ્ધતિઓ દ્વારા નિયમન.

આકૃતિ 4: વજન વધારવું સ્ટ્રાઇટલ D2R સ્તરથી વિરુદ્ધ છે.

(એ) ફક્ત ચૌ, મર્યાદિત-પ્રવેશ અને વિસ્તૃત-એક્સેસ ઉંદરોને શરીરના વજનના સરેરાશ વિભાજન પર આધારિત accessક્સેસ શરત દીઠ બે જૂથોમાં વહેંચવામાં આવ્યા હતા: લાઇટ (એલ) અથવા હેવી (એચ). (બી) દરેક જૂથના તમામ ઉંદરો અને ડી 2 આર સ્તરોમાંથી આખા સ્ટ્રિએટલ સંકુલને પશ્ચિમી બ્લોટીંગ દ્વારા માપવામાં આવ્યું હતું. પટલ સાથે સંકળાયેલ ડી 2 આર બેન્ડનો ઉકેલો 70 કેડીએ કરવામાં આવ્યો હતો, અને પ્રોટીન-લોડિંગ નિયંત્રણ નીચે દર્શાવવામાં આવ્યું છે (.-એક્ટિન, 43 કેડીએ). પૂરક લંબાઈના ઇમ્યુનોબ્લોટ્સ પૂરક આકૃતિ 12 માં બતાવ્યા પ્રમાણે છે. (સી) ચો-ફક્ત, સ્ટ્રિટેમ restrictedક્સેસ અને એક્સટેન્ડેડ-એક્સેસ ઉંદરોમાં સંબંધિત પ્રમાણમાં D2R પ્રમાણમાં ડેન્સિટોમેટ્રી (એફ 2,6 = 5.2, પી <0.05, મુખ્ય) દ્વારા માન્ય કરવામાં આવ્યું હતું ofક્સેસની અસર; * પી <0.05 અને ** પી <0.01 ચો-ઓન-એલ જૂથની તુલનામાં).

આગળ, સ્ટ્રેટલ D2R માં બ્રેઇન ઇનામ ફંક્શનમાં ડાયેટ-પ્રેરિત ઘટાડાઓની કાર્યક્ષમ સુસંગતતા ચકાસવા માટે, અમે ડીએક્સટીએક્સએક્સઆર (લેન્ટી-ડીએક્સNUMએક્સઆરએસ; ફિગ.) ને પછાડવા માટે આરએનએ (SHRNA) માં દખલ કરવા માટે ટૂંકા વાળના વિરામને પહોંચાડવા માટે લેન્ટિવાયરલ વેક્ટરની રચના અને માન્યતા આપી હતી. 2 અને સપ્લિમેન્ટરી ફિગ. 2). લેન્ટિ-ડીએક્સએનએક્સએક્સઆર સાથે સારવારમાં થતી ઉંદરોમાં પુરસ્કાર થવાની શરૂઆત થતાં લગભગ તરત જ કાફેટેરિયા આહારમાં વિસ્તૃત પ્રવેશની પરવાનગી આપવામાં આવી હતી, જ્યારે પ્રમાણમાં ટૂંકા સમયગાળા દરમિયાન ખાલી લેન્ટિવાયરસ વેક્ટર (લેન્ટી-કંટ્રોલ) સાથેના વિસ્તૃત-ઍક્સેસ ઉંદરોમાં પુરસ્કાર થ્રેશોલ્ડ્સ અનધિકૃત રહી હતી. કાફેટેરિયા આહારની ઍક્સેસ (5 ડી; ફિગ. 5a). ઉંદરોના બંને જૂથોમાં રિસ્પોન્સ લેટન્સીઝ અનલૉર્ટેડ હતા, જે દર્શાવે છે કે આ પ્રભાવ કાર્ય પ્રદર્શનમાં પૂરતો ઘટાડો નથી (સપ્લિમેન્ટરી ફિગ. 2). લેન્ટિ-ડીએક્સNUMએક્સઆરએસ અથવા લેન્ટી-કંટ્રોલથી સારવાર કરાયેલા ઉંદરોમાં પુરસ્કાર થ્રેશોલ્ડ્સ પણ અનલૉર્ટ કરવામાં આવ્યાં હતાં, જેનો ઉપયોગ ફક્ત એક જ સમયગાળા (ફિગ. 14b) કરતા વધુ ચોકમાં હતો.

થ્રેશોલ્ડ સતત અસ્થિરતાના વધારાના 15 ડી દરમિયાન ઉંચાઇથી ઉભા રહેતા હતા જ્યારે બધી ઉંદરો માત્ર માનક ચા (પૂરક ફિગ. 7) સુધી જ ઍક્સેસ કરતી હતી. સ્ટ્રેટલ ડીએક્સએનએક્સઆરઆરની નકામાતાએ કારણે આહાર-પ્રેરિત પુરસ્કાર હાયફૉંક્શનમાં નબળાઈ વધારી પરંતુ મગજ પુરસ્કાર સિસ્ટમ્સની આધારરેખા પ્રવૃત્તિમાં ફેરફાર કર્યો નહીં.

આકૃતિ 5: સ્ટ્રેટલ D2R અભિવ્યક્તિના લેન્ટિવાયરસ-મધ્યસ્થ નોકડાઉન.

(એ) સ્ટ્રિએટલ વિસ્તારોની ગ્રાફિકલ રજૂઆત જેમાં લેન્ટિ-ડી 2 રશ વધુ પડતો પ્રભાવિત હતો. ડાબી સ્ટ્રાઇટલ ગોળાર્ધમાં લીલા વર્તુળો તે સ્થાનોનું પ્રતિનિધિત્વ કરે છે કે જ્યાં વાયરલ પ્રેરણાને લક્ષ્યાંકિત કરવામાં આવી હતી. જમણા સ્ટ્રિએટલ ગોળાર્ધમાં લીલો સ્ટેનિંગ એ લેન્ટિ-ડી 2 આરશ ઉંદરોના મગજથી લીલા ફ્લોરોસન્ટ પ્રોટીન (જીએફપી) માટે પ્રતિનિધિ ઇમ્યુનોકેમિસ્ટ્રી સ્ટેનિંગ છે. (બી) લેન્ટિ-ડી 2 આરશ ઉંદરોના સ્ટ્રાઇટમમાં ડી 2 આર અભિવ્યક્તિના ઘટાડો પ્રતિનિધિ ઇમ્યુનોબ્લોટ. પૂરક આકૃતિ 13 માં પૂરક લંબાઈના ઇમ્યુનોબ્લોટ્સ બતાવવામાં આવ્યા છે. (સી) લેન્ટિ-કંટ્રોલ અને લેન્ટિ-ડી 2 આરશ ઉંદરોના સ્ટ્રેટમમાં ડી 2 આરની સંબંધિત પ્રમાણમાં, ડેન્ટિટોમેટ્રી દ્વારા જથ્થાબંધ (* પી <0.05 લેન્ટિ-કંટ્રોલ જૂથની તુલનામાં, પોસ્ટ હોક ટેસ્ટ) ). (ડી) લેન્ટિ- D2Rsh વેક્ટર દ્વારા સ્ટ્રાઇટમમાં ગ્લોયલ સેલ્સનું ચેપ લાગ્યું નથી. લીલો સ્ટેનિંગ એ વાયરસથી જીએફપી છે; લાલ એસ્ટ્રોસાઇટ માર્કર ગ્લાયલ ફાઇબ્રીલેરી એસિડિક પ્રોટીન (જીએફએપી) છે; સેલ ન્યુક્લીને વાદળીમાં ડીએપીઆઈ સ્ટેનિંગ દ્વારા પ્રકાશિત કરવામાં આવે છે. સફેદ તીર ગ્લિઓસિસના સ્થાનિક વિસ્તારને દર્શાવે છે જે ફક્ત સ્ટ્રાઇટમમાં વાયરસ ઇન્જેક્શનની સાઇટ પર જોવા મળે છે, આસપાસના પેશીઓમાં નહીં કે જેમાં વાયરસ ફેલાયો છે. આ ક્ષેત્રમાં પણ, કોઈ પણ એસ્ટ્રોસાયટ્સ જીએફપી પોઝિટિવ નથી. વિસ્તૃત છબીમાં પીળા તીર, લાક્ષણિક જીએફપી-નેગેટિવ એસ્ટ્રોસાઇટ્સને પ્રકાશિત કરે છે જે મળ્યાં છે. (ઇ) લેન્ટિ-ડી 2 આરશ વેક્ટર દ્વારા સ્ટ્રાઇટમમાં ન્યુરોનલ ઇન્ફેક્શનનું ઉચ્ચ સ્તર. લીલો સ્ટેનિંગ એ વાયરસથી જીએફપી છે; લાલ એ મજ્જાતંતુ પરમાણુ માર્કર ન્યુએન છે; સેલ ન્યુક્લીને વાદળીમાં ડીએપીઆઈ સ્ટેનિંગ દ્વારા પ્રકાશિત કરવામાં આવે છે. વિસ્તૃત છબીમાં પીળા તીર GFP- હકારાત્મક અને સ્ટ્રાઇટમમાં ન્યુન-પોઝિટિવ ન્યુરોનને પ્રકાશિત કરે છે. (એફ) લેન્ટિ-ડી 2 આરશ ઉંદરોના સ્ટ્રાઇટમમાં વાઈરલ ચેપગ્રસ્ત (જીએફપી-પોઝિટિવ) ન્યુરોનની ઉચ્ચ-વિસ્તૃતતા છબી, જે મધ્યમ સ્પાઇન ન્યુરોન્સની લાક્ષણિક આકારવિષયક સુવિધાઓ દર્શાવે છે.

આકૃતિ 6: સ્ટ્રેટલ D2R ના નકડાઉનથી કાફેટેરિયાની આહારમાં વિસ્તૃત ઍક્સેસ સાથે ઉંદરોમાં નિષ્ક્રિયતાને પુરસ્કાર આપવા માટે નબળાઈ વધે છે.

(એ) લેન્ટિ-કંટ્રોલ અને લેન્ટ-ડી 2 આરશ ઉંદરોમાં બેઝલાઇન ઇનામ થ્રેશોલ્ડથી મીન (± સેમ) ટકાવારીમાં ફેરફાર કે જેણે સતત 14 દિવસ સુધી કેફેટેરિયાના આહારમાં પ્રવેશ કર્યો હતો (વાયરસ: એફ 1,156, 5.9 = 0.05, પી <13,156; સમય: એફ 2.2 = 0.05, પી <13,156; વાયરસ-સમય ક્રિયાપ્રતિક્રિયા: એફ 2.2 = 0.05, પી <0.05; # પી <2, ક્રિયાપ્રતિક્રિયા અસર). (બી) લેન્ટિ-કંટ્રોલ અને લેન્ટ-ડી 14 આરશ ઉંદરોમાં પાયા-ફક્ત hadક્સેસ ધરાવતા બેઝલાઇન ઇનામ થ્રેશોલ્ડ્સથી મીન (± સેમ) ટકાવારીમાં ફેરફાર. (સી) મીન (± સેમ) ઉંદરોનો કેલરી ઇનટેક માત્ર 2,28 ડી ચો દરમ્યાન અથવા વિસ્તૃત એક્સેસ (accessક્સેસ: એફ 135.6 = 0.0001, *** પી <14). (ડી) મીન (m સેમ) ચ chના માત્ર 2,28 ડી દરમ્યાન વજનમાં વધારો અથવા વિસ્તૃત accessક્સેસ (:ક્સેસ: એફ 96.4 = 0.0001, પી <0.001; *** પી <XNUMX, mainક્સેસની મુખ્ય અસર).

અમે શોધી કાઢ્યું કે કેલરિક ઇન્ટેક (ફિગ. 6c) અને વજન ગેઇન (ફિગ. 6d) લેંટી-ડીએક્સNUMએક્સઆરએસમાં અને સમાન લૅન્ટિ-કંટ્રોલ જૂથોમાં માત્ર-ચાવી અથવા વિસ્તૃત-ઍક્સેસ શરતો (સપ્લિમેન્ટરી ફીગ્સ. 2 અને 8) હેઠળ સમાન હતા. આમ, સ્ટ્રેટેલ D9R નોકડાઉન કાફેટેરિયા આહાર માટે ન તો પસંદગીની પસંદગી કરે છે અથવા કુલ સ્વાદિષ્ટ કેલરીના વપરાશમાં જ્યારે સ્વાદિષ્ટ ભોજન વપરાશ માટે મુક્ત રીતે ઉપલબ્ધ હતું.

મેદસ્વી ઉંદરોમાં અવ્યવસ્થિત ખોરાક: સ્ટ્રેટલ D2R માટે ભૂમિકા

આગળ આપણે આ અનુમાનનું પરીક્ષણ કર્યું કે કેફેટેરિયાના આહારમાં વિસ્તૃત વપરાશવાળા ઉંદરોમાં અનિવાર્ય જેવા આહાર ઉભરી શકે છે અને સ્ટ્રિએટલ ડી 2 આર સિગ્નલિંગની ખામી આ અસરમાં ફાળો આપી શકે છે. વિસ્તૃત ઉંદરોમાં આંકડાકીય રીતે નોંધપાત્ર વજનમાં વધારો થાય ત્યાં સુધી ચો-ઓનલાઈન, પ્રતિબંધિત accessક્સેસ અને વિસ્તૃત એક્સેસ ઉંદરોને 40 ડી માટેના કેફેટેરિયા આહારની accessક્સેસની મંજૂરી આપવામાં આવી હતી (ચો <ફક્ત ઉંદરોની તુલનામાં પી <0.05; ડેટા નથી) બતાવેલ). ત્યારબાદ ઉંદરોના તમામ ત્રણ જૂથોને stableપરેન્ટ ચેમ્બરમાં stable- d ડી માટે કાફેટેરિયાના આહારમાં દરરોજ ફક્ત 30૦ મિનિટની પ્રવેશની મંજૂરી આપવામાં આવી હતી ત્યાં સુધી સ્થિર ઇન્ટેક પ્રાપ્ત ન થાય ત્યાં સુધી (દૈનિક સેવનમાં <5% ભિન્નતા તરીકે વ્યાખ્યાયિત). દરેક conditionક્સેસની સ્થિતિમાંના અડધા ઉંદરોને પગના આંચકા (સજા પામેલા જૂથ) ની વહેંચણી સાથે જોડાયેલા પ્રકાશ (કન્ડિશન્ડ પ્રોત્સાહન) ના સંપર્કમાં આવ્યા હતા, જ્યારે દરેક જૂથના બાકીના ઉંદરો પગના આંચકાની ગેરહાજરીમાં ક્યૂ લાઇટના સંપર્કમાં આવ્યા હતા (અજાણ્યા જૂથ) ). પરીક્ષણના દિવસે, અમે સ્વાદિષ્ટ ખોરાકના વપરાશ પર એકલા ક્યૂ લાઇટ એક્સપોઝરની અસરોની તપાસ કરી (ફિગ. 7; Methનલાઇન પદ્ધતિઓ જુઓ). અમને જોવા મળ્યું કે 10-મિનિટ બેઝલાઇન સત્રો દરમિયાન સરેરાશ કેલરીનો સેવન ફક્ત વિસ્તૃત-raક્સેસ ઉંદરો (ફિગ. 7 એ, બી) કરતા ચો-ફક્ત અને પ્રતિબંધિત andક્સેસ ઉંદરોમાં વધારે હતો. આ સૂચવે છે કે ચો-ફક્ત અને પ્રતિબંધિત accessક્સેસ ઉંદરો તૂટક તૂટક 30૦-મિનિટના sessionક્સેસ સત્રો દરમિયાન સ્વાદિષ્ટ ખોરાક પર પથરાયેલા છે, તે હકીકત પ્રતિબિંબિત કરે છે કે આ ઉંદરોએ તેમના દૈનિક કેલરી ઇન્ટેકનો ~ 7-30% વપરાશ કર્યો છે, સામાન્ય રીતે k 40 કેકેલ, આ સત્રો દરમિયાન (ફિગ. 50 એ, બી). તેનાથી વિપરીત, વિસ્તૃત-એક્સેસ ઉંદરો આ દ્વિસંગી જેવા ખોરાકની વર્તણૂક વિકસાવવા માટે પ્રતિરોધક લાગે છે, કદાચ કારણ કે તેમનો સ્વાદિષ્ટ ખોરાકનો સતત un૦ દિવસ સુધીનો ખાદ્યપદાર્થોની સ્થાપનાની રીત, જે પ્રમાણમાં પરિવર્તન કરવા માટે પ્રમાણમાં જટિલ નહોતી. બેઝલાઈન અવધિ (ફિગ. 100 એ) દરમિયાન ઇન્ટેકની તુલના કરવામાં આવે ત્યારે, ચો-ફક્ત, પ્રતિબંધિત accessક્સેસ અથવા વિસ્તૃત-એક્સેસ જૂથોમાંથી શિક્ષાત્મક ઉંદરોમાં ખોરાકના વપરાશ પર ક્યૂ લાઇટ રિપ્લેની કોઈ આંકડાકીય નોંધપાત્ર અસરો અમે પરીક્ષણના દિવસે નિહાળી નથી. એકલા કયૂ લાઈટમાં કોઈ પ્રેરક ક્ષતિ નહોતી. સજા પામેલા ઉંદરોમાં, આઘાત-જોડી કયૂ લાઈટમાં ચો-ફક્ત અને પ્રતિબંધિત accessક્સેસ ઉંદરોમાં સ્વાદિષ્ટ ખોરાકની માત્રામાં નોંધપાત્ર ઘટાડો થયો છે. જો કે, ક્યુ લાઇટ વિસ્તૃત-એક્સેસ ઉંદરોમાં સ્વાદિષ્ટ ખોરાકના વપરાશ પર કોઈ અસર કરી નહીં, તે દર્શાવે છે કે પ્રતિકૂળતાની આગાહી કરનારા પર્યાવરણીય સંકેતો પ્રત્યે તેમનો વપરાશ અસંવેદનશીલ છે. વિસ્તૃત-raક્સેસ ઉંદરોમાં પાયાની energyર્જા ઇન્ટેક અન્ય જૂથો કરતા ઓછી હતી. તેમ છતાં, કારણ કે સમાન સમયગાળા દરમિયાન ચાનો વપરાશ ખૂબ ઓછો હતો (ફિગ. 7 ડી), આ શક્ય નથી કે આ 'ફ્લોર ઇફેક્ટ' રજૂ કરે જે આપણાં તારણોને મૂંઝવણમાં મૂકે છે. સાથે મળીને, અમારા ડેટા એ વિચારને સમર્થન આપે છે કે અનિવાર્ય જેવી ખાવાની વર્તણૂક ઉંદરોમાં ડ્રગ 40 ની વિસ્તૃત historyક્સેસના ઇતિહાસ સાથે જોવા મળતી અનિવાર્ય કોકેન-લેવાની સમાનતા અનુસાર વિસ્તૃત-એક્સેસ ઉંદરોમાં ઉભરી શકે છે.

આકૃતિ 7: સંવેદનશીલ-જેવા સ્વાદિષ્ટ ભોજન માટે જવાબ.

(a) મીન (± સેમ) 30-મિનિટ બેઝલાઇન સત્રો દરમિયાન અને શિક્ષાત્મક ઉંદરોમાં સ્વાદિષ્ટ ખોરાકનો વપરાશ જ્યારે ઉંદરો તટસ્થ કન્ડિશન્ડ ઉત્તેજનાના સંપર્કમાં આવ્યો હતો જે અગાઉ પગના આંચકા સાથે જોડાયેલ ન હતો (:ક્સેસ: F2,20 = 5.2, પી <0.05; # પી <0.05 ફક્ત ચો-ઉંદરોની તુલનામાં). (બી) મીન (± સેમ) punished૦-મિનિટ બેઝલાઇન સત્રો દરમિયાન અને સખત ઉંદરોમાં સ્વાદિષ્ટ આહારનો વપરાશ જ્યારે ઉંદરોને કંડિશનિવ સ્ટીમ્યુલસનો સંપર્ક કરવામાં આવ્યો હતો જે અગાઉ પગમાં આઘાતજનક પગ સાથે જોડાયેલું હતું (accessક્સેસ: F30 = 2,21 , પી <3.9; ક્યૂ: એફ 0.05 = 1,21, પી <8.6; એક્સેસ × ક્યુ ઇન્ટરેક્શન: એફ 0.01 = 2,21, પી <4.7; * પી <0.05 બેઝલાઇન સત્ર દરમિયાન ઇન્ટેકની તુલનામાં, # પી <0.05 સરખામણીમાં ચો-ફક્ત ઉંદરો). (સી) મીન (± સેમ) -૦-મિનિટ બેઝલાઇન સત્રો દરમિયાન અને લેન્ટિ-કંટ્રોલ અને લેન્ટ-ડી 0.05 આરશ ઉંદરોમાં પરીક્ષણના દિવસે સ્વાદિષ્ટ આહારનો વપરાશ કે જેમાં પહેલા ચા-ફક્ત અથવા કેફેટેરિયાના આહારની વિસ્તૃત પ્રવેશ હતી (ક્યૂ: એફ 30, 2 = 1,26, પી <29.7; * પી <0.0001, ** પી <0.05 બેઝલાઇન સત્રો દરમિયાન ઇનટેકની તુલનામાં, આ પછીના પરીક્ષણ). (ડી) મીન (± સેમ) 0.01-મિનિટ બેઝલાઇન સત્રો દરમ્યાન અને લેન્ટિ-કંટ્રોલ અને લેન્ટ-ડી 30 આરશ ઉંદરોના પરીક્ષણના દિવસે, જેનો કેવળિયામાં ફક્ત ચા અથવા ફક્ત વિસ્તૃત વપરાશ હતો (ચા: F2 = 1,26, પી <44.9; * પી <0.0001, ** પી <0.05 બેઝલાઇન સત્રો દરમિયાન ઇનટેકની તુલનામાં, આ પછીના પરીક્ષણ).

અંતમાં, અમે લેન્ટિ-કંટ્રોલ અને લેન્ટ-ડી 2 આરશ ઉંદરોમાં ખોરાકની માત્રા પર સજા-જોડીયુક્ત કન્ડિશન્ડ પ્રેરણાના પ્રભાવોની તપાસ કરી કે જેની પાસે પહેલા ફક્ત ચાની accessક્સેસ હતી અથવા કાફેટેરિયાના આહારની વિસ્તૃત વપરાશ હતી (ફિગ. 6 માંથી ઉંદરો). અમને જાણવા મળ્યું છે કે 30-મિનિટ બેઝલાઇન સત્રો દરમિયાન બેઝલાઇન સ્વાદિષ્ટ ખોરાકની માત્રા ચારેય જૂથો (ફિગ. 40 સી) માં સમાન રીતે (ંચી (k 7 કેસીએલ) હતી. વધુમાં, કુલ દૈનિક ચાવ વપરાશ (ઘરના પાંજરામાં) કન્ડિશનિંગ સત્રો દરમિયાન અને પરીક્ષણના દિવસે (પૂરક ફિગ. 10) ઉંદરોના તમામ ચાર જૂથો વચ્ચે સમાન હતું. કેફેટેરિયાના આહારમાં 14 prior પહેલાંની ખાદ્યપદાર્થો, તેથી ઉંદરો જેમ કે> કેફેટેરિયા ખોરાકમાં 40 ડી વિસ્તૃત પ્રવેશ (ફિગ. 7 એ, બી) ની seenક્સેસ હોય તેવી જ રીતે બાયન્જીસ જેવી ખાવાની વર્તણૂકને અવરોધવા માટે પૂરતું ન હતું. અવિવેકી કયૂ લાઇટ ઉત્તેજનાએ લેન્ટિ-કંટ્રોલ અને લેન્ટ-ડી 2 આરશ ઉંદરોમાં સ્વાદિષ્ટ ખોરાકનો વપરાશ અટકાવ્યો હતો જે અગાઉ ચો-ઓનલી એક્સેસ હતી (ફિગ. 7 સી). એ જ રીતે, અસ્પષ્ટ સ્થિતિયુક્ત ઉત્તેજનાએ લેન્ટિ-કંટ્રોલ ઉંદરોમાં સ્વાદિષ્ટ ખોરાક લેવાનું ખલેલ પાડ્યું હતું જે અગાઉ કેફેટેરિયાના આહારમાં 14 ડી વિસ્તૃત વપરાશ ધરાવે છે. તેનાથી વિપરિત, અવિવેકી કન્ડિશન્ડ પ્રેરણાએ લેન્ટિ-ડી 2 આરશ ઉંદરોમાં સ્વાદિષ્ટ ખોરાકના વપરાશ પર કોઈ અસર કરી ન હતી જે અગાઉ કેફેટેરિયા આહાર (ફિગ. 14 સી) ની 7 ડી વિસ્તૃત hadક્સેસ ધરાવે છે. આ ઉંદરોમાં બીએસઆર થ્રેશોલ્ડ નોંધપાત્ર રીતે ઉન્નત રહ્યો જ્યારે પરીક્ષણ સત્ર પછી h 48 કલાકે નોંધાયેલું, જ્યારે થ્રેશોલ્ડ સ્થિર અને ઉંદરોના અન્ય ત્રણ જૂથોમાં અવ્યવસ્થિત રહ્યું

(પૂરક ફિગ. 11). લેન્ટિ-ડીએક્સએનએક્સઆરઆરસીમાં વિસ્તૃત ખોરાકના સેવનના સાનુકૂળ ઉત્તેજના-પ્રેરિત દમનના પ્રતિરોધને ચકાસવા માટે શાસ્ત્રીય કન્ડીશનીંગ પ્રોસેસમાં વિકલાંગતા માટે ગૌણ નથી, અમે ઓછી ચાલાકતાવાળા પ્રમાણભૂત ચાના વપરાશ પર વિપરીત શરતી ઉત્તેજનાની અસરોનું પરીક્ષણ કર્યું છે. ઉંદરના બધા ચાર જૂથ. સ્વાદિષ્ટ ખોરાકની બેન્ગી જેવી વપરાશથી વિપરીત, અમે શોધી કાઢ્યું કે ઉંદરોના તમામ ચાર જૂથો 2 મિનિટના બેઝલાઇન સત્રો (ફિગ. 2d) દરમિયાન થોડો ચા (~ 30 કેસીએલ) ખાઈ ગયા હતા અને ચાના તમામ ચાર જૂથમાં ચાના વપરાશમાં વિક્ષેપ થયો હતો. અવ્યવસ્થિત શરતી ઉત્તેજના (ફિગ. 7d) ના સંપર્કમાં એક સમાન તીવ્રતા. આ ડેટા દર્શાવે છે કે સ્ટ્રેટલ D7R ના નકામા દાગીનાથી સ્વાદિષ્ટ ખોરાકની ખાવાની જેમ જ ઉભરતા ઉદભવને વેગ આપ્યો હતો, પરંતુ ફક્ત વિસ્તૃત ઍક્સેસના ઇતિહાસ સાથે ઉંદરોમાં જ. તદુપરાંત, કારણ કે ફરજિયાત ખાવાનું ફક્ત લેન્ટી-ડીએક્સયુએનએક્સઆરએસચ ઉંદરોમાં જ શોધાયું હતું, જેણે બીએસઆર થ્રેશોલ્ડને ઉન્નત કરી હતી, આહાર પ્રેરિત પુરસ્કાર હાયફૉન્ક્શન એ અનિવાર્ય ખોરાક મેળવવાના ઉદ્ભવ માટે જરૂરી પૂર્વવર્તી બની શકે છે.

ચર્ચા

સુગંધિત ઉચ્ચ ચરબીવાળા ખોરાકની ઍક્સેસની સરળતા મેદસ્વીપણું માટે એક મહત્વપૂર્ણ પર્યાવરણનું જોખમ પરિબળ માનવામાં આવે છે. અમને જાણવા મળ્યું છે કે અત્યંત સ્વાદિષ્ટ કાફેટેરિયા-શૈલીની આહારમાં વિસ્તૃત પહોંચના પરિણામે વધારે પડતા વજન અને વજનમાં વધારો થયો છે, જે ઉંદરોમાં બીએસઆર થ્રેશોલ્ડને પ્રગતિશીલ બનાવે છે. બીએસઆર થ્રેશોલ્ડ્સ પરની આ અસરને મગજ પુરસ્કાર સર્કિટ્સની ધીરે ધીરે પ્રતિક્રિયા આપીને સમજાવી શકાય છે, ખોરાકની મર્યાદા અને વજન ઘટાડવાથી 19 વધી શકે છે, જ્યારે તીવ્ર વધારે પડતો ઉપચાર ક્ષણમાં બીએસઆર માટે પ્રતિક્રિયા આપીને, 20 ઘટાડી શકે છે. આ શોધ એ કામના વિસ્તરણનું પ્રતિનિધિત્વ કરે છે જે બતાવે છે કે ઇન્ટ્રાજેસ્ટ્રિક ફીડિંગ ટ્યુબએક્સએક્સએક્સ દ્વારા ઉંદરોનું તીવ્ર ઉપચાર, અને ગેસ્ટ્રિક ડિસ્ટન્સ અથવા ઇન્રાવાવેન્સ ગ્લુકોગન ઇન્ફ્યુઝન જે પોસ્ટપ્રાન્ડેલિઅલ સેટિટીક્સ xNUMX, 21, 21 ની નકલ કરે છે, પાછળથી હાઈપોથેલામિક્સ બીએસઆરને પ્રદાન કરે છે અને તેના માટે પ્રતિક્રિયા જેવી પ્રતિક્રિયા આપે છે. ઉત્તેજના22. પાછલા કાર્યમાં એ પણ દર્શાવવામાં આવ્યું છે કે આંતરરાષ્ટીય ટ્યુબ દ્વારા વારંવાર બળતણ-ખોરાક આપતી ઉંદરો ~ તેમના વજનમાં ~ 23 જી વધારો થયો છે તે જ રીતે બીએસઆર માટે પ્રતિક્રિયાના દરમાં ઘટાડો થયો છે, જે શરીરનું વજન સામાન્ય છે ત્યાં સુધી ચાલુ રહે તેવું અસર XXX. ઉંદરોના આ તારણો મુજબ, લેટરલ હાયપોથેલેમિક બીએસઆર માટે બિલાડીઓમાં પ્રતિક્રિયા આપીને પહેલા સિયેટેશનએક્સએક્સક્સને ખોરાક આપ્યા હતા, જે દર્શાવે છે કે મગજ પુરસ્કાર કાર્ય અને ચયાપચયની સ્થિતિ વચ્ચેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓ સચવાય છે અને આમ માનવોમાં પણ જોવા મળે છે. માનવીમાં કાફેટેરિયા-શૈલીના આહારના વપરાશની સરળતા અને પરિણામે વધુ પડતું પર્યાવરણ યોગદાન એ પશ્ચિમ સમાજો XXX માં વર્તમાન સ્થૂળતા રોગચાળા માટે મહત્વપૂર્ણ પર્યાવરણીય યોગદાન માનવામાં આવે છે. અમારું ડેટા દર્શાવે છે કે ઇનામ હાયફૉન્ફક્શન ઉંદરોમાં ઉદ્ભવે છે જે માનવજાત દ્વારા ઉપભોગ કરેલા સમાન સ્વાદુપિંડના કાફેટેરિયાનું આહાર વધારે પ્રમાણમાં વધારે કરે છે અને તે વધુ વજન મેળવે છે તેમ આ અસર ક્રમશઃ વધુ ખરાબ બને છે. નોંધપાત્ર રીતે, ઇનામ થ્રેશોલ્ડ એલિવેશન સાથેના તમામ ઉંદરો ≥24% પાસે BSR ઇલેક્ટ્રોડ્સ ફોર્નિક્સના ~ 25 μm ની અંદર સ્થિત છે. આ વિસ્તારમાં પુરસ્કાર-સંબંધિત ચેતાકોષોની સંવેદનશીલતા ખોરાકના નિયંત્રણ દ્વારા વધેલી છે જે ચરબીવાળા હૉર્મોન લેપ્ટિન પ્રત્યે સંવેદનશીલ છે, અને આ મગજ ક્ષેત્રને ખોરાક પુરસ્કાર 200 માટે મહત્વપૂર્ણ સબસ્ટ્રેટ ગણવામાં આવે છે. મગજના સર્કિટ્સ કે જે ખોરાકની હેડનિક્સને નિયમન કરે છે તે પોસ્ટિંગસ્ટેસ્ટિવ સિગ્નલો દ્વારા અવરોધિત થાય છે જે તાજેતરની માનવ ઇમેજિંગ અભ્યાસો સાથે સુસંગત છે જે દર્શાવે છે કે ગેસ્ટિક ડિટેન્શન એક્સએનએક્સ અને ગટ-ડેરિવેટેડ પોસ્ટપ્રૅન્ડિયલ ફેક્ટર પેપ્ટાઇડ YY23-26 (PYY) 19 એ મગજના પ્રદેશોની પ્રવૃત્તિમાં ફેરફાર કરે છે. પુરસ્કાર પ્રક્રિયામાં સામેલ છે. આ ઉપરાંત, પુરસ્કારની વધારે પડતા વજન દ્વારા ઇનામ સિસ્ટમ્સ પણ અવરોધિત થાય છે. તાજેતરના અહેવાલો સૂચવે છે કે લેપટિન, ઉર્જા સંતુલનનું મુખ્ય નિયમનકાર, મગજના પેશીઓમાં પ્રવેશી શકે છે અને પુરસ્કાર સર્કિટ્સ 20, 500, 27, 28 ની પ્રવૃત્તિને અવરોધિત કરી શકે છે.

વધારે વજનવાળા ઉંદરોમાં પુરસ્કારની ખામી એ સ્વાદિષ્ટ ખોરાક દ્વારા તેમના અતિશય દબાણનો વિરોધ કરવા માટે મગજની પુરસ્કારની સર્કિટ્સની મૂળભૂત સંવેદનશીલતામાં પ્રતિસ્પર્ધી ઘટાડાને પ્રતિબિંબિત કરી શકે છે. આવા ડાયેટ-પ્રેરિત ઈનામ હાઇપોફંક્શન નકારાત્મક વળતર 6, 32 ની અવસ્થાને ટાળવા અથવા ઘટાડવા માટે ઉચ્ચ-વળતરવાળા 'ઓબેસોજેનિક' આહારનો વપરાશ કરવાની પ્રેરણા વધારીને મેદસ્વીતાના વિકાસમાં ફાળો આપી શકે છે. Extended૨. આ અમે વિસ્તૃત-એક્સેસમાં નિરીક્ષણ કરેલ હાયપોફેગિયા માટે જવાબદાર હોઈ શકે છે. જ્યારે ઉડાન ભરેલું ખોરાક પાછું ખેંચી લેવામાં આવતું હતું ત્યારે માત્ર ઉંદરો અને પ્રતિબંધિત accessક્સેસ ઉંદરોમાં ઓછા પ્રમાણમાં, ફક્ત ઓછા સ્વાદિષ્ટ ચા ઉપલબ્ધ હતા. આ પ્રકારનું દૃશ્ય માનવ મગજની ઇમેજિંગ અભ્યાસના ડેટા સાથે પણ સુસંગત છે જેમાં ખૂબ જ સ્વાદિષ્ટ ખોરાકના પ્રતિભાવમાં સ્ટ્રાઇટમના નિષ્ક્રિય સક્રિયકરણ, ખાસ કરીને આનુવંશિક પymલિમ્ફોમ્સવાળા વ્યક્તિઓમાં સ્ટ્રિએટલ ડી 2 આર અભિવ્યક્તિમાં ઘટાડો કરવાનું માનવામાં આવે છે, જે લાંબા ગાળાના વજનમાં વધારો સાથે સંકળાયેલ છે. તે સ્પષ્ટ નથી થયું કે મેદસ્વીપણાના વિકાસમાં મેદસ્વી વ્યક્તિમાં આવી ઇનામની અતિસંવેદનશીલતા પ્રગટ થાય છે અને તે ફક્ત આનુવંશિક પરિબળો ('ઈનામની અછત સિન્ડ્રોમ') સાથે સંબંધિત છે કે કેમ કે અતિશય આહાર ઇનામ પ્રક્રિયામાં વિક્ષેપ લાવી શકે છે. અમારું ડેટા દર્શાવે છે કે સ્વાદિષ્ટ -ર્જાના ખોરાક અને ત્યારબાદના અતિશય ખાવું ખાઈને મળતી અસર વધારે છે અને તેથી તે સ્થૂળતાના વિકાસને પ્રોત્સાહન આપે છે. અહીં મેદસ્વી ઉંદરોમાં નોંધાયેલા કે સમાન ઇનામની તકલીફ પણ ઉંદરોમાં નસમાં કોકેઇન અથવા હેરોઇન સ્વ-વહીવટની વિસ્તૃત ofક્સેસના ઇતિહાસ સાથે મળી આવે છે, પરંતુ પ્રતિબંધિત એક્સેસ 4, 12, 13 નો ઇતિહાસ ધરાવતા લોકોમાં નહીં. ઉપરાંત, સંક્રમણ અનિયમિત દવાઓની શોધમાં આ ડ્રગ પ્રેરિત ઈનામ નિષ્ક્રિયતા, 14, 12, 32 દ્વારા પ્રેરિત ઘટતા ઇનામની સતત સ્થિતિને દૂર કરવાના પ્રયાસને પરિણામે દરખાસ્ત કરવામાં આવી છે. આમ, આપણો ડેટા સૂચવે છે કે સ્થૂળતા અને માદક દ્રવ્યો વ્યસન અંતર્ગત હેડોનિક પદ્ધતિઓ શેર કરી શકે છે.

સ્ટ્રેટલ D2R અભિવ્યક્તિનું ડાઉનરેગ્યુલેશન સ્વાદિષ્ટ ભોજનની વધારે પડતી સંવેદના માટે એક નોંધપાત્ર ન્યુરોડેપ્ટીવ પ્રતિભાવ છે. ખરેખર, સ્ટ્રેટલ D2R ઘનતામાં ઘટાડો વજનવાળા વ્યક્તિઓએક્સએક્સએક્સ, 4 અને ઉંદરો 34, 35 માં જોવા મળે છે. તેનાથી વિપરીત, ઍનોરેક્સિયા નર્વોસાવાળા વ્યક્તિઓએ સ્ટ્રેટલ D36R2 એલિવેટેડ છે, અને બારીટ્રિક (ગેસ્ટિક બાયપાસ) શસ્ત્રક્રિયા પછી મેદસ્વી વ્યક્તિઓમાં વજન ઘટાડવું એલિવેટેડ સ્ટ્રેટલ D37R ઘનતા 2 સાથે સંકળાયેલું છે. જનીન પોલીમોર્ફિઝમ, તાકીઆ એએક્સએનએક્સએક્સ એલિલે તરીકે ઓળખાતું પરિણમે છે, જે સ્ટ્રેટલ D28R ઘનતામાં ઘટાડો કરે છે, અને આ એલિલેને પકડવા માટેના વ્યક્તિઓ સ્થૂળ વસ્તી 1 માં વધારે પ્રતિનિધિત્વ કરે છે. તાકીઆ એલિલે આલ્કોહોલ, ઓપીયોઇડ અને સાયકોમોટર ઉત્તેજક વ્યસન 2 માં નબળાઈ વધારે છે. સ્થાયી D4R ઘનતામાં ઘટાડો, રચનાત્મક આનુવંશિક પરિબળો દ્વારા અથવા અતિશય આહારના પરિણામે થાય છે તેથી તે સ્થૂળતાના ન્યુરોબાયોલોજીકલ મિકેનિઝમ્સમાં યોગદાન આપી શકે છે. અમે શોધી કાઢ્યું છે કે 38 કેડીએ ડીએક્સએનએક્સએક્સ આઇસોફોર્મનું સ્ટ્રેઅલ લેવલ, જે કલા-સંબંધિત D2R ને પ્રતિબિંબિત કરે છે, તે ફક્ત ચૌ-ફક્ત, પ્રતિબંધિત અને વિસ્તૃત-ઍક્સેસ જૂથો (ફિગ. 70) માંથી ઉંદરોમાં શરીરના વજનથી સંબંધિત હતા. સ્ટ્રેટલ D2R અભિવ્યક્તિની ઘોંઘાટ, ડોર્સોલેટર સ્ટ્રાઇટમ (ફિગ. 2) માં મુખ્યત્વે મુખ્યત્વે, કાફેટેરિયા આહારના સંપર્કમાં લગભગ તરત વધારો થવાની બીએસઆર થ્રેશોલ્ડ્સને કારણે. સ્ટ્રેટલ ડીએક્સટીએક્સએક્સઆર અભિવ્યક્તિમાં ઘટાડાથી ઉંદરોમાં પુરસ્કાર હાયફૉન્ક્ક્શનના ઉદ્ભવમાં ઝડપથી વધારો થયો છે, જેમાં અત્યંત સ્વાદિષ્ટ ભોજન માટે વિસ્તૃત ઍક્સેસ છે, માનવીય મગજની ઇમેજિંગ ડેટા સાથે સુસંગત શોધ જે સૂચવે છે કે સ્ટ્રેલેટલ D4R ઘનતામાં ખામીઓ મેદસ્વી વ્યક્તિઓ 2 માં હાઇફૉંક્શનને વળતર આપવા માટે ફાળો આપે છે.

લેન્ટી-ડીએક્સએનએક્સએક્સઆરશ ઉંદરોની ત્રણ વિશેષતાઓ પણ નોંધપાત્ર છે. પ્રથમ, જોકે સ્ટ્રેટલ ડીએક્સએનએક્સએક્સઆર નોકડાઉનને સ્વાદિષ્ટ ભોજનમાં વિસ્તૃત પ્રવેશ સાથે જોડવામાં આવ્યો હતો, પરિણામે બીએસઆર થ્રેશોલ્ડને વધારવામાં આવ્યું હતું, નિયંત્રણ ઉંદરોની તુલનામાં આ ઉંદરોમાં કેલરીના સેવન અથવા વજનમાં કોઈ તફાવત નહોતો. આ તે હકીકતને પ્રતિબિંબિત કરે છે કે ઉંદરોને માત્ર કેફીટેરિયા આહારની એક્સેસની એક્સ્યુએક્સડી ડી હતી. લાંબા ગાળાના વપરાશથી સમય જતાં ઊંચા વજનમાં વધારો થઈ શકે છે, તેવી જ રીતે મનુષ્યમાં સ્ટ્રેટલ D2R સિગ્નલિંગ 2 માં ખાધ સાથે વજનમાં વધારો થવાની સંભાવના છે. જો કે, કાફેટેરિયા આહારમાં માત્ર 14 ડી સુધી મર્યાદિતતાનો ફાયદો એ છે કે વિસ્તૃત ઍક્સેસ ધરાવતી નોકડાઉન ઉંદરો એકમાત્ર જૂથ હતો જે એલિવેટેડ બીએસઆર થ્રેશોલ્ડ્સ બતાવવાનું હતું, અને આ આપણને ફરજિયાત વિકાસમાં પુરસ્કારના હાયફૉન્ક્ક્શનની સંભવિત ભૂમિકાનું મૂલ્યાંકન કરવાની મંજૂરી આપે છે. ખાવું (નીચે જુઓ). બીજું, બીએસઆર થ્રેશોલ્ડ સ્થિર રહી અને નોકડાઉન ઉંદરોમાં અવિચારી રહ્યા, જે માત્ર ચૌ માટે જ ઉપલબ્ધ હતી. આ સૂચવે છે કે એકલા સ્ટ્રેટલ D2R અભિવ્યક્તિ એકલા પુરસ્કાર સંવેદનશીલતાને પ્રેરિત કરવા માટે પૂરતી નહોતી; તેના બદલે, તે ઓછી કિંમતી સંવેદનશીલતાના આ રાજ્યના ઉદ્ભવને વેગ આપવા માટે સ્વાદિષ્ટ ભોજનની વધુ સંમતિ સાથે વાતચીત કરવા લાગતું હતું. મગજ પુરસ્કાર સર્કિટ્સમાં અન્ય અનુકૂલનશીલ જવાબો તેથી કાફેટેરિયા આહારમાં વિસ્તૃત ઍક્સેસ સાથે ઉંદરોમાં પુરસ્કાર સંવેદનશીલતાને ટ્રિગર કરી શકે છે. આ ધ્યાનમાં રાખીને, અમે નોંધીએ છીએ કે D4R એગોનિસ્ટ બ્રૉમોક્રિપિટેન leptin14 નું પરિભ્રમણ સ્તર ઘટાડે છે, અને લેપ્ટિન ઓછામાં ઓછા ભાગમાં ખાદ્ય પદાર્થોને રોકવાથી અટકાવે છે જે ખોરાક 2, 2, 39 પર હેડનિક પ્રતિભાવોને નિયંત્રિત કરે છે. આમ, શક્ય છે કે શરીરના વજનમાં વધારો કરવાના પ્રતિભાવમાં સ્ટ્રેટલ D3R નું ડાઉનગ્રેશન લેપ્ટીન સંકેત વધે છે અને તે મગજ પુરસ્કાર સિસ્ટમ્સ પર આ એડિપોકિનની અવરોધક અસરોને વેગ આપે છે. છેવટે, અમે નોંધીએ છીએ કે અમે અમારા લેન્ટિવાયરસ વેક્ટર્સને ડોર્સોલેટર સ્ટ્રાઇટમ તરફ લક્ષ્ય બનાવ્યું છે. આ મુખ્યત્વે તકનીકી કારણોસર હતું, સ્ટ્રાઇટમમાં વાયરસના વિતરણ માટે કેન્યુલેની બાજુની સ્થાનાંતરણને કારણે અમે બીએસઆર થ્રેશોલ્ડ નિર્ણય માટે ઇન્વેવેલિંગ હાયપોથેમિક ઉત્તેજક ઇલેક્ટ્રોડને સમાવવા માટે સક્ષમ પણ થયા. આમ, તે શક્ય છે કે સ્ટ્રાઇટમના અન્ય વિસ્તારોમાં, ખાસ કરીને ડોર્સમેડિયલ અને વેન્ટ્રલ વિસ્તારો (ન્યુક્લિયસ એક્યુમ્બન્સ કોર અને શેલ) ના અન્ય ક્ષેત્રોમાં નોકડાઉન માટે D30R નું લક્ષ્ય, સંભવિત આહારની ગેરહાજરીમાં પણ બીએસઆર થ્રેશોલ્ડને ઉન્નત કરી શકે છે.

ડોર્સોલટ્રલ સ્ટ્રાઇટમ ઉત્તેજીત-પ્રતિક્રિયાની ટેવ પ્રકાર શીખવા માટે ભારે ફસાયેલા છે, કારણ કે ઉપભોગના વર્તનના વિકાસમાં પ્રતિબિંબિત થાય છે જે સંતૃપ્તિ પહેલાં ખોરાક દ્વારા અથવા ઘોર ઉત્તેજના સાથે જોડીને અવમૂલ્યન માટે અસંવેદનશીલ છે. મુખ્યત્વે ડોર્સોસ્ટેરલ સ્ટ્રાઇટમને લક્ષ્ય બનાવીને, આપણે ડી 40 આરની વસતીને નીચે પછાડી દીધી છે જે અનિયમિત જેવા ખાવા માટેના વિકાસમાં ઉંદરની નબળાઈને નિયંત્રિત કરે છે. અનિવાર્ય વર્તણૂકોમાં સ્ટ્રિએટલ ડી 2 આર માટેની ભૂમિકાને ધ્યાનમાં રાખીને, માનવ ડીઆરડી 2 – એએનકેકે 2 જનીન લોકસનું ટાકીઆઆ એલે alle જે લો સ્ટ્રેટલ ડી 1 આર ડેન્સિટી 2 ના પરિણામ રૂપે બ્લન્ટ્સ સ્ટ્રિએટલ એક્ટિવેશનમાં પરિણમે છે અને મેદસ્વીતા 5 ની સંવેદનશીલતાને વધારે છે — પણ નકારાત્મક પરિણામો સાથે ક્રિયાઓ ટાળવા માટે શીખવાની ખોટ 4. નકારાત્મક પરિણામ લાવી શકે તેવા વર્તન પર અવરોધક નિયંત્રણનો અભાવ એ મેદસ્વીપણું અને માદક દ્રવ્યો બંનેની લાક્ષણિકતા છે, જેમાં નકારાત્મક સામાજિક, આરોગ્ય અથવા નાણાકીય પરિણામો હોવા છતાં વપરાશી વર્તણૂક ચાલુ રહે છે. માદક દ્રવ્યોના વ્યાપક પ્રમાણમાં ઇતિહાસ સાથેના ઉંદરોમાં કોકેન લેવાની વર્તણૂક નકારાત્મક પરિણામ (પગનો આંચકો) 4 ની આગાહી કરે છે તેવા પ્રતિકૂળ શરતયુક્ત ઉત્તેજના દ્વારા વિક્ષેપ માટે પ્રતિકૂળ અને પ્રતિરોધક બની શકે છે. એ જ રીતે, ઉંદરો કે જે અગાઉ સ્વાદિષ્ટ ઉચ્ચ ચરબીયુક્ત આહારની accessક્સેસ ધરાવતા હતા, ઉંદરો કરતાં સ્વાદિષ્ટ ખોરાક મેળવવા માટે પ્રતિકૂળ વાતાવરણમાં (તેજસ્વી રીતે પ્રકાશિત) વધુ સમય પસાર કરશે, જેનો આહાર 41 નો અનુભવ ન હતો. અમને જાણવા મળ્યું છે કે કેફેટેરિયાના આહારમાં વિસ્તૃત વપરાશવાળા ઉંદરોમાં સ્વાદિષ્ટ ખોરાકનો વપરાશ એ જ રીતે અવ્યવસ્થિત શરતી ઉત્તેજના પ્રત્યે સંવેદનશીલ નથી. આ અસરમાં સ્ટ્રિએટલ ડી 18 આર માટેની ભૂમિકા સાથે સુસંગત, સ્ટ્રાઇટલ ડી 42 આર નોકડાઉન ઉંદરોમાં ફરજિયાત જેવા ખાવું જોવા મળ્યું હતું, જેનો અગાઉ કાફેરેરિયાના આહારમાં 2 ડીનો વિસ્તૃત પ્રવેશ હતો પરંતુ નિયંત્રણ જૂથોમાં નહીં. ન્યુરોસિક્ટીટ્રી દ્રષ્ટિકોણથી, સ્વાદિષ્ટ ખોરાકની વિસ્તૃત પહોંચ કોર્ટીકોસ્ટ્રિએટલ પાથમાં પ્લાસ્ટિસિટીને ઉત્તેજીત કરી શકે છે, ત્યાં અનિષ્ટ પ્રાણીઓને અનિવાર્ય જેવા વર્તનના વિકાસ માટે વધુ સંવેદનશીલ બનાવે છે, જેમાં સ્ટ્રિએટલ ડી 2 આર સંકેતોમાં આ પ્રક્રિયામાં વધારો થાય છે. ખરેખર, મેદસ્વી વ્યક્તિઓમાં ઘટાડો સ્ટ્રિએટલ ડી 14 આર ઘનતા એ પ્રેફ્રન્ટલ અને bitર્બિટોફ્રન્ટલ કોર્ટિકલ વિસ્તારોમાં ઘટાડેલા મેટાબોલિઝમ સાથે સંબંધ ધરાવે છે જે વર્તન 2 પર અવરોધક નિયંત્રણ લાવે છે.

ખાસ કરીને, બાષ્પીભવનની જેમ જ સ્વાદિષ્ટ ખોરાકની વપરાશ માત્ર નોકડાઉન ઉંદરોમાં મળી આવી હતી, જે અગાઉ કાફેટેરિયા આહારમાં વધારો થયો હતો, નહી કે નિયંત્રણ ઉંદરોમાં કે જે સમાન સમયગાળા માટે કાફેટેરિયા આહારમાં વધારો થયો હતો અથવા નકામા ઉંદરોમાં ચાઉ માત્ર ઍક્સેસ. અગાઉ વિસ્તૃત પ્રવેશ અને અન્ય જૂથો સાથે નોકડાઉન ઉંદરો વચ્ચેનું મુખ્ય તફાવત તેમની સતત ઉન્નત બીએસઆર થ્રેશોલ્ડ હતી. આ પુરસ્કાર હાયપોફંક્શનના સામાન્ય ન્યુરોબાયોલોજીકલ મૂળ અને બાધ્યતા જેવા ખાવુંના ઉદભવને પ્રતિબિંબિત કરે છે, જે અસ્થાયી રૂપે સંકુચિત અને સ્વતંત્ર ઘટના છે. વૈકલ્પિક રીતે, ડાયેટ-પ્રેરિત પુરસ્કાર હાઇફંક્શન એ નકારાત્મક મજબૂતીકરણ માટે સબસ્ટ્રેટ તરીકે સેવા આપી શકે છે જે ખાધાયુક્ત-જેવા ખાદ્ય પદાર્થો 14, 32, 33 ના વિકાસને સરળ બનાવે છે. જે પણ અંતર્ગત મિકેનિઝમ્સ છે, આપણા તારણો દર્શાવે છે કે મેદસ્વી ઉંદરોમાં સ્વાદિષ્ટ ખોરાક માટે વ્યસન-પ્રતિક્રિયાત્મક પ્રતિક્રિયા આપી શકે છે, અને સૂચવે છે કે સ્ટ્રેટલ D2R સિગ્નલિંગમાં ખામી આ વર્તનના વિકાસમાં નબળાઈને વધારે છે.

સારાંશમાં, આપણે શોધી કાઢ્યું કે મગજનો પુરસ્કાર પ્રણાલીઓની વધારે પડતી ઉત્તેજનાથી સ્વાદિષ્ટ, ઊર્જા-ગાઢ ખોરાક દ્વારા પુરસ્કારની સંવેદનશીલતા અને બાધ્યતા-જેવા ખાવુંનો વિકાસ થાય છે. મેદસ્વી ઉંદરોમાં આ મેલાડેપ્ટીવ વર્તણૂકલક્ષી પ્રતિક્રિયા કદાચ સ્ટ્રેટલ D2R સિગ્નલિંગમાં ડાયેટ-પ્રેરિત ખાધમાંથી ઉદભવે છે. દુરૂપયોગની દવાઓનો ઓવરકાન્સમ્પશન એ જ રીતે સ્ટ્રેટલ D2R ઘનતાને ઘટાડે છે, પુરસ્કારની હાઇફંક્ક્શનની ગહન સ્થિતિને પ્રેરિત કરે છે અને ડ્રગ-લેવાની વર્તણૂંકની વર્તણૂંકને ઉદભવે છે. તેથી અમારા તારણો મગજ પુરસ્કાર સર્કિટ્સમાં સમાન ન્યુરોડેપ્ટીવ પ્રતિસાદોમાંથી સ્થૂળતા અને ડ્રગ વ્યસન ઉદ્ભવતા સૂચવે છે કે પાછલા વર્ક4, 19, 42, 45, 46, 47 ને સપોર્ટ કરે છે.

પદ્ધતિઓ

ઉંદરો

પ્રયોગોના પ્રારંભમાં 300-350 g નું વજન ધરાવતા પુરુષ વિસ્તાર ઉંદરો ચાર્લ્સ નદીમાંથી મેળવવામાં આવ્યા હતા. આગમન પછી, 12-H પ્રકાશ-શ્યામ ચક્ર (2200 એચ પર લાઇટ) પર સતત તાપમાને ઉંદરોને વ્યક્તિગત રૂપે રાખવામાં આવ્યા હતા. ઉંદરોને પ્રયોગના સમયગાળા માટે પ્રમાણભૂત લેબોરેટરી ચા અને પાણીની લિબીટમ ઍક્સેસની પરવાનગી આપવામાં આવી હતી. સ્ક્રીપ્સ ફ્લોરિડાની સંસ્થાકીય એનિમલ કેર અને યુઝ કમિટી દ્વારા બધી કાર્યવાહી મંજૂર કરવામાં આવી હતી, અને ઉંદરોને નેશનલ ઇન્સ્ટિટ્યુટ ઑફ હેલ્થ દ્વારા પ્રાણી સંભાળના સિદ્ધાંતોને લગતા માર્ગદર્શિકા અનુસાર સારવાર કરવામાં આવી હતી.

સર્જિકલ પ્રક્રિયાઓ.

બીએસઆર ઉત્તેજક ઇલેક્ટ્રોડ્સ સાથે તૈયાર કરેલા ઉંદરોને ઓક્સિજનમાં 1-3% આઇસોફ્યુરેનના ઇન્હેલેશન દ્વારા સૌ પ્રથમ એન્થેસાઇઝ્ડ કરવામાં આવ્યું હતું અને સ્ટીરિઓટેક્સિક ફ્રેમ (કોપ્ફ) માં સ્થાન આપવામાં આવ્યું હતું. બાઇપોલર બીએસઆર ઇલેક્ટ્રોડ્સ (11 એમએમ લાંબી) પાછળના ભાગમાં હાયપોથલામસ (એન્ટેરોપોસ્ટેરિઅર, -યુજીએક્સએક્સ એમએમ, બ્રેગમાથી; એક્સઓએક્સએક્સ એમપી, મધ્ય રેખાથી ± 0.5 મીમી, ડરસોવેન્ટ્રલ, ડ્યુરાથી 1.7 એમએમ), ઇન્ટિસર બારને ઇન્ટરનલ લાઇનથી 8.3 એમએમ સુધી ગોઠવવામાં આવી હતી. ) 5. વાયરસ ઇન્જેક્શન્સ પ્રાપ્ત કરતી ઉંદરો પણ દ્વિપક્ષીય માર્ગદર્શિકા કેન્યુલા (47 ગેજ, 23 મીમી લાંબી) સાથે સ્ટ્રાઇટમ (ઍંટેરોપોસ્ટેરિઅર, એક્સજીએક્સએમ એમએમ, બ્રેગ્મા, મીડિયોલેટેરલ, ± 14 એમએમ મિડલાઇનથી; ડોર્સોવેન્ટ્રલ, ડ્યુરાથી એક્સએક્સએક્સ એમએમ), 2.8 અને ભરાયેલા છે. 3.1-એમએમ શૈલીઓ સાથે. ચાર સ્ટેનલેસ સ્ટીલ ખોપડી ફીટ અને ડેન્ટલ એક્રેલિકે ઇલેક્ટ્રોડ અને કેન્યુલાને સ્થાને રાખ્યું હતું. શસ્ત્રક્રિયા પછી 2.4 ડી માટે દરેક 48 એચ પછી એકવાર સર્જિકલ ઘાનાને ટોપિક એન્ટિબાયોટિક સાથે સારવાર આપવામાં આવી હતી. ચંદ્રને 14-12 ડી શસ્ત્રક્રિયામાંથી પુનઃપ્રાપ્ત કરવાની મંજૂરી આપવામાં આવી હતી અને પછી તેને બીએસઆર થ્રેશોલ્ડ પ્રક્રિયામાં તાલીમ આપવામાં આવી હતી.

બીએસઆર પ્રક્રિયા

બીએસઆર ઉત્તેજના માટે પ્રતિક્રિયા આપવા માટે ઉંદરોને તાલીમ આપવામાં આવી હતી, સિવાય કે ડિસ્ક્રીટ-ટ્રાયલ વર્તમાન-થ્રેશોલ્ડ પ્રક્રિયા જે અન્યત્ર 10, 14 જેવી છે. સંક્ષિપ્તમાં, 5-μA પગલાંઓમાં ઉતરતા અને ચઢતા શ્રેણીમાં વૈકલ્પિક રીતે બીએસઆર વર્તમાન સ્તર બદલાતા હતા. દરેક પરીક્ષણ સત્રમાં, ચાર વૈકલ્પિક ઉતરતા / ચડતા શ્રેણી રજૂ કરવામાં આવ્યા હતા. પ્રત્યેક શ્રેણીઓ માટે થ્રેશોલ્ડને સતત બે વર્તમાન તીવ્રતા વચ્ચે મધ્યબિંદુ તરીકે વ્યાખ્યાયિત કરવામાં આવ્યું હતું, જેના માટે ઉંદરોએ ઓછામાં ઓછા પાંચમાંથી ત્રણ ટ્રાયલમાં પ્રતિભાવ આપ્યો હતો, અને સતત બે વર્તમાન તીવ્રતાઓ જેના માટે ઉંદરોએ ત્રણ અથવા વધુ પાંચ અજમાયશમાં જવાબ આપ્યો ન હતો. સત્રનું એકંદર થ્રેશોલ્ડ ચાર વ્યક્તિગત શ્રેણી માટેના થ્રેશોલ્ડના મધ્ય તરીકે વ્યાખ્યાયિત કરવામાં આવ્યું હતું. દરેક પરીક્ષણ સત્ર સમયગાળામાં આશરે 30 મિનિટ હતો. સ્થાયી બીએસઆર થ્રેશોલ્ડ્સને 10 સતત દિવસોમાં થ્રેશોલ્ડમાં ≤5% ભિન્નતા તરીકે વ્યાખ્યાયિત કરવામાં આવી હતી, સામાન્ય રીતે તાલીમના 10-14 ડી પછી સ્થપાયેલી. પ્રત્યેક પરીક્ષણ સત્ર માટે પ્રતિક્રિયા વિલંબને તમામ ટ્રાયલની સરેરાશ પ્રતિક્રિયા વિલંબ તરીકે વ્યાખ્યાયિત કરવામાં આવી હતી જેમાં હકારાત્મક પ્રતિભાવ થયો હતો.

વાયરલ પેકેજિંગ અને ડિલિવરી.

ટૂંકા હેરપિન આરએનએ પહોંચાડવામાં આવી હતી અને પીઆરએનએટી-યુ 6.2 / લેન્ટ વેક્ટર સિસ્ટમ (જેનસ્ક્રિપ્ટ) નો ઉપયોગ કરીને રચનાત્મક રીતે વ્યક્ત કરવામાં આવી હતી. વાઈરલ કણો ઉત્પાદકના પ્રોટોકોલ અનુસાર તૈયાર કરવામાં આવ્યા હતા. સંક્ષિપ્તમાં, એચ.કે. 293 એફટી કોષોને shRNA શામેલ વેક્ટર (5CC-GGATCCCGCAGCAGTCGAGCTTTCTTCAAGAGAAAGCTCGACTGCTGCGCTTTTTTCAACTCGAG-3 ′), અથવા વીકરા વીજ પેજ (રિક્સેડ hctgen) પછી 72, વીરા વીજ પેકેજ (ચેપ), વીકરા વીજ પેકેજ (ચેપ), (ViraPG) દ્વારા બદલી દેવામાં આવ્યા હતા. સુપરમેનટન્ટ પછી અલ્ટ્રાસેન્ટ્રિફ્યુગેશન (24 જી, બેકમેન કlલ્ટર એસડબ્લ્યુ 76,755 ટીઆઈ રોટર., 32 મિનિટ, 90 ડિગ્રી સે.) દ્વારા એકત્રિત કરવામાં આવ્યું હતું અને વાયરલ ટાઇટર નિર્માતાની સૂચનાઓ અનુસાર ફ્લોરોસેન્સ-સક્રિયકૃત સેલ સોર્ટિંગ દ્વારા નક્કી કરવામાં આવ્યું હતું. ઉપયોગ ન થાય ત્યાં સુધી વાયરસનું નિયંત્રણ અને -4 ° સે તાપમાને પ્રકાશ-સુરક્ષિત બ boxesક્સમાં કરવામાં આવ્યું.

સ્થિર બીએસઆર થ્રેશોલ્ડ ધરાવતી ઉંદરો દરેક મગજ ગોળાર્ધના સ્ટ્રાઇટમમાં ત્રણ સાઇટ્સ પર દ્વિપક્ષીય વાયરલ ઇંજેક્શન પ્રાપ્ત કરે છે (ઇન્જેક્શન દીઠ 2 μl, ઇન્જેક્શન વચ્ચે 1 μl min-1, 1 મિનિટ, ઉંદર દીઠ છ ઇંજેક્શન). બીએસઆર થ્રેશોલ્ડ મૂલ્યાંકન ફરીથી શરૂ થઈ તે પહેલાં ઇન્ટ્રાસ્ટ્રિએટલ ઇન્જેક્શનથી ઓછામાં ઓછી 2-3 ડી પુનઃપ્રાપ્તિ માટે ઉંદરોને મંજૂરી આપવામાં આવી હતી. ઇફેક્ટ્સ પછી 33 ડી માટે દૈનિક બીએસઆર થ્રેશોલ્ડ મૂલ્યાંકન ચાલુ રહ્યું છે જેથી ઉંદરોને કાફેટેરિયા આહારમાં પ્રવેશની મંજૂરી આપતા પહેલા મહત્તમ સ્ટ્રેઅલ D2R નોકડાઉન પ્રાપ્ત થાય તે સુનિશ્ચિત કરવામાં આવે. આ 2 ડી (Lenti data) બતાવ્યા વિના લેન્ટિ-કંટ્રોલ અને લેન્ટી-ડીએક્સ્યુએનએક્સઆરએસટી ઉંદરો વચ્ચે બીએસઆર થ્રેશોલ્ડમાં કોઈ ફરક નથી.

ઇમ્યુનોબ્લોટિંગ.

કાફેટેરિયાની આહારમાં નિયમિતપણે સુનિશ્ચિત થયા પછી ઉંદરો લગભગ 1 એચ માર્યા ગયા હતા, અને મગજ ઝડપથી દૂર કરવામાં આવ્યાં હતાં. ~ 1-2 એમએમ જાડાઈના મગજના વિભાગો એક બરફના બ્લોક પર એક કોરનલ મગજ મેટ્રિક્સ (1-mm સ્લાઇસ અંતરાલ; પ્લાસ્ટિક વન) અને ડોર્સલ સ્ટ્રાઇટમ (બ્રીગ્મા: ~ 2.2 થી -0.26 મીમી) ની પેશીઓના પંચનો ઉપયોગ કરીને તૈયાર કરવામાં આવ્યા હતા. સ્ટ્રાઇટલ ટિશ્યુ પંચ્સ ઝડપથી એકત્રિત કરવામાં આવ્યાં હતાં, સ્થિર થતા હતા અને ઉપયોગ કર્યા વિના -80 ° C પર સંગ્રહિત હતા. વ્યક્તિગત નમૂનાઓ બરફ પર થાકેલા હતા અને સ્ટ્રેટલ પેશીઓની સમાન માત્રાને સમૂહ જૂથોના વજન-આધારીત સરેરાશ વિભાજન (પૂલ દીઠ 7-10 ઉંદરો) આધારે પુલ કરવામાં આવી હતી. 500 μl આઇસ-કોલ્ડ આરઆઇપીએ બફર (થર્મો સાયન્ટિફિક) માં સોડિયમ ઓર્થોઆનાડેટ, ફોસ્ફેટસે કોકટેલ ઇનહિબિટર 1 અને 2 (સિગ્મા-એલ્ડરિચ), લ્યુપ્પેપ્ટીન અને પેપસ્ટેટિન હોમોજેનાઇઝેશન પહેલાં ટિસ્યૂને ફરીથી મુકવામાં આવ્યું હતું. ટીસ્યુ લેસેટ્સને સેમ્પલ બફરમાં 10 મિનિટ માટે ઉકાળીને 4% -20% અથવા 10% ટ્રાઇસ-ગ્લાયસીન એસડીએસ જેલ્સ (ઇન્વિટ્રોજન) પર લોડ કર્યું હતું. પ્રોટીનને નાઇટ્રોસેલ્યુલોઝ મેમ્બરમાં ટ્રાન્સફર કરવામાં આવ્યું હતું, જે 1 એચ માટે ~ 23-25 ° C (5% નોન-ફેટ ડ્રાય દૂધ અને પીબીએસ, પીએચ 0.2 માં 20% ટ્વિન-7.4) પર અવરોધિત હતું, અને રાતોરાત XNTX ° C પર પ્રાથમિક એન્ટિબોડીમાં ઉકાળી ગયું હતું. નીચેના પ્રાથમિક એન્ટિબોડીઝ બ્લોક સોલ્યુશનમાં ઘટાડાયેલા હતા: D4R માઉસ મોનોક્લોનલ (સાન્ટા ક્રૂઝ, 2: 1) અથવા β-actin mouse monoclonal (સાન્ટા ક્રૂઝ, 100: 1). કેમલ્યુમ્યુનેસેન્ટ ઇસીએલ રેજેન્ટને હર્જરડિશ પેરોક્સિડેઝ-કન્જુગેટેડ ગૌણ એન્ટિબોડીઝ (અમરસમ, 200: 1) સાથે ઉકળતા પછી ઉમેરવામાં આવ્યું હતું. D2,000DR (~ 2 કેડીએ) XMPX, 70 નું પુખ્ત સંલગ્ન સ્વરૂપ પ્રોટીન-લોડિંગ કંટ્રોલ (β-actin; 17 કેડીએ) માટે સામાન્ય કરવામાં આવ્યું હતું અને એનઆઇએચ ઇમેજ જે સૉફ્ટવેરનો ઉપયોગ કરીને ડેન્સિટૉમેટ્રી દ્વારા પ્રમાણિત કરવામાં આવ્યું હતું.

ઇમ્યુનોકેમિકલ વિશ્લેષણ.

ઉંદરોને એનેસ્થેસાઇઝ્ડ કરવામાં આવી હતી અને ટ્રાંસકાર્ડિલી પી.બી.એસ. (પીએચ 4) માં 7.6% પેરાફોર્મેલ્ડેહાઇડ સાથે પ્રભાવિત થઈ હતી. મગજ દૂર કરવામાં આવ્યા હતા, રાતોરાત પોસ્ટફિક્સ કરી અને ઓછામાં ઓછા 30 એચ માટે સુક્રોઝ (PBS માં 7.4% સોલ્યુશન, પીએચ 72) માં સંગ્રહિત. ફ્રોઝન ટીશ્યુ વિભાગો (30 μm જાડાઈ) માઇક્રોટૉમમાંથી એકત્રિત કરવામાં આવ્યા હતા અને 3-X XXX-5 ° C પર 0.3 એચ માટે અવરોધિત (100% BSA, 1% સામાન્ય બકરી સીરમ અને 23% સામાન્ય બકરી સીરમ અને 25% ટ્રિટોન X-4). નીચેની પ્રાથમિક એન્ટિબોડીઝ બ્લોક સોલ્યુશનમાં ઉમેરવામાં આવી હતી અને રાતોરાત 1 ° C પર ઉકાળી હતી: ચિકન પોલિક્લોનાલ જીએફપી (અબકૅમ, 1,000: 1) થી; સસલા મોનોક્લોનલથી જીએફએપી (મિલિપોર, 1,000: 1); માઉસ મોનોક્લોનલથી ન્યુન (મિલિપોર, 1,000: 23). ~ 25-488 ° સે પર ફ્લોરોસન્ટ ડાયે-કન્જેજ્યુટેડ સેકન્ડરી એન્ટિબોડીઝ સાથે વિભાગોને સેવન કરવામાં આવ્યા હતા: એન્ટી-ચિકન-એક્સ્યુએનએક્સ-એનએમ ડાઇ (જેકસન ઇમ્યુનો રિસર્ચ, 1: 1,000), વિરોધી સસલા-594-nm ડાઇ (ઇન્વિટ્રોજન, 1: 1,000 ), અને એન્ટી-માઉસ-594-nm ડાઇ (ઇન્વિટ્રોજન, 1: 1000). વિભાગોને વેક્ટશીલ્ડ માઉન્ટ મીડિયા સાથે ડીએપીઆઇ (વેક્ટર લેબ્સ) અને કવરસ્લીપ સમાવવામાં આવ્યું હતું. ઓલિમ્પસ BX61 ફ્લોરોસેન્સ માઇક્રોસ્કોપ (× 2 ઉદ્દેશ્ય) અથવા ઓલિમ્પસ કન્ફૉકલ માઇક્રોસ્કોપ (× 10 અને × 100 ઉદ્દેશ્યો) નો ઉપયોગ કરીને છબીઓ લેવામાં આવી હતી.

ખોરાક આપવાની પ્રક્રિયા.

ખાદ્ય ઉત્પાદનોને ઢીલા પથારી સામગ્રીથી ગળી જવાથી રોકવા માટે કાગળ પથારી (આલ્ફા પેડ; શેફર્ડ સ્પેશિયાલિટી પેપર્સ) પર ઉંદરોને વ્યક્તિગત રૂપે રાખવામાં આવ્યા હતા. કાફેટેરિયા આહારમાં બેકોન, સોસેજ, ચીઝકેક, પાઉન્ડ કેક, ફ્રોસ્ટિંગ અને ચોકોલેટનો સમાવેશ થાય છે, જે ઉંદરોને ઉપલબ્ધ કરવામાં આવે તે પહેલાં વ્યક્તિગત રીતે વજનયુક્ત હતું. કાફેટેરિયાની ડાયેટ ફૂડ વસ્તુઓ નાના મેટલ રીસેપ્ટકલ્સમાં વિતરિત કરવામાં આવી હતી. સ્ટાન્ડર્ડ લેબોરેટરી ચા સહિતના તમામ ખાદ્ય ચીજોનું ફરીથી ભોજન સત્ર પૂરું થયા પછી ફરીથી વજન મેળવ્યું. વિવિધ મેક્રોન્યુટ્રન્ટ્સમાંથી કેલરીનો વપરાશ ઉત્પાદક દ્વારા પૂરા પાડવામાં આવતી પોષક માહિતીનો ઉપયોગ કરીને કરવામાં આવ્યો હતો.

ખોરાકની વર્તણૂંકની ક્યૂ-પ્રેરિત દમન.

ખોરાક આપવાની પ્રક્રિયાઓ બીએસઆર પ્રયોગોમાં ઉપયોગમાં લેવાતી સમાન પરિમાણો જેવા ધ્વનિ-એટેન્યુએટેડ operaપરેન્ટ ચેમ્બર્સમાં થઈ હતી. ઉંદરોને ntપરેન્ટ ચેમ્બરમાં મૂકવામાં આવ્યા હતા અને 30 મિનિટ સુધી કાફેટેરિયા આહાર અથવા ચામાં પ્રવેશ મેળવ્યો હતો. ફૂડ પ્રોડક્ટ્સ નાના ધાતુના ગ્રહણમાં વિતરિત કરવામાં આવી હતી. બધી ખાદ્ય ચીજોનું વજન ભરવાના સત્રો પહેલાં અને પછી વજન કરવામાં આવ્યું હતું, જે ઉંદરોના સામાન્ય ખોરાકના સમયગાળા દરમિયાન હાથ ધરવામાં આવતા હતા. ઉંદરોના ઘરના પાંજરામાં પૂરા પાડવામાં આવતી રચના કરવા સમાન 45-મિલિગ્રામ ચો ચોરોનાં વપરાશ દ્વારા ચૌ વપરાશનું મૂલ્યાંકન કરવામાં આવ્યું હતું. ત્યારબાદ ઉંદરોને કાફેટેરિયાના આહારમાં દરરોજ 30 મિનિટની perક્સેસની મંજૂરી આપવામાં આવી ત્યાં સુધી સ્થિર ઇન્ટેક પ્રાપ્ત ન થાય ત્યાં સુધી (દૈનિક ઇન્ટેકમાં <10% ભિન્નતા તરીકે વ્યાખ્યાયિત), જેમાં 5-7 ડી જરૂરી હોય છે. આ પાયાના સમયગાળા દરમિયાન સ્વાદિષ્ટ ખોરાકની માત્રામાં સ્થિરતા પછી, દરેક પ્રવેશની સ્થિતિમાં ઉંદરોને બે જૂથો માટે ફાળવવામાં આવ્યા હતા: શિક્ષાત્મક (પગના આંચકા પ્રાપ્ત કરનારા) અને શિક્ષા વિના (પગનો આંચકો ન મળતા). ત્યારબાદ ઉંદરોને સતત તે જ fourપરેન્ટ ચેમ્બરમાં ચાર દિવસ કન્ડિશનિંગ સત્રો રાખવામાં આવ્યાં હતાં જેમાં તેઓને અગાઉ સ્વાદિષ્ટ ખોરાકની .ક્સેસ હતી. 30-મિનિટ કન્ડીશનીંગ સત્રો દરમિયાન ક્યૂ લાઇટ (કન્ડિશન્ડ સ્ટીમ્યુલસ) 10 મિનિટ માટે સક્રિય થઈ હતી, 10 મિનિટ માટે બંધ કરવામાં આવી હતી, અને પછી 10 મિનિટ માટે પાછું ચાલુ કરવામાં આવે છે. સજા પામેલા ઉંદરોને ફક્ત ક્યૂ લાઇટની રજૂઆત દરમિયાન પગનો આંચકો મળ્યો (0.5 સે માટે 1.0 એમએ; ~ 10-મિનિટ અંતરાલ સાથે 1 ઉત્તેજના). શિક્ષાત્મક ઉંદરોને તે જ રીતે ક્યૂ લાઇટ સાથે રજૂ કરવામાં આવ્યા હતા, પરંતુ પગના આંચકા વિના. પરીક્ષણના દિવસે, અંતિમ કન્ડીશનીંગ સત્ર પછીના દિવસે, સજા પામેલા જૂથોમાં ઉંદરોને તૂટક તૂટક પગનો આંચકો મળ્યો (કુલ પાંચ ઉત્તેજના) 5 મિનિટ માટે ક્યુ લાઇટની સક્રિયકરણ સાથે જોડી. પગલાના આંચકાની ગેરહાજરીમાં અજાણ્યા ઉંદરો ફરીથી ક્યૂ લાઇટના સંપર્કમાં આવ્યા. Punishment-મિનિટની સજાની અવધિ પછી, બધા ઉંદરોને min૦-મિનિટ સત્ર માટે સ્વાદિષ્ટ ખોરાકની accessક્સેસ મંજૂરી આપવામાં આવી હતી કન્ડિશન્ડ સ્ટીમ્યુલસ તૂટક તૂટક સક્રિય થઈ હતી (5 મિનિટ ક્યૂ લાઇટ ચાલુ, 30 મિનિટ ક્યૂ લાઇટ બંધ, 10 મિનિટ ક્યૂ લાઇટ ચાલુ).

આંકડાકીય વિશ્લેષણ.

બેસલાઇન પુરસ્કાર થ્રેશોલ્ડ્સને દરેક વિષય માટે કાફેટેરિયા આહારની ઍક્સેસ પહેલાં 5 ડી માટે સરેરાશ થ્રેશોલ્ડ મૂલ્ય તરીકે વ્યાખ્યાયિત કરવામાં આવી હતી. વળતર થ્રેશોલ્ડને બેઝલાઇન થ્રેશોલ્ડ મૂલ્યથી ટકાવારીમાં ફેરફાર તરીકે વ્યક્ત કરવામાં આવ્યા હતા. બેઝલાઇન પુરસ્કાર થ્રેશોલ્ડ મૂલ્યો, વજનમાં વધારો, કેલરી વપરાશ, અને ચરબીમાંથી કેલરી વપરાશની ટકાવારી પરનો ડેટા બે-પરિબળ દ્વારા, વિશ્લેષણના પુનરાવર્તન-પગલાંના વિશ્લેષણ, ઍક્સેસ (ફક્ત ચા, ફક્ત ઍક્સેસ અથવા વિસ્તૃત ઍક્સેસ), કેલરી સ્રોત દ્વારા કરવામાં આવ્યો છે. સ્ટાન્ડર્ડ ચા અથવા કાફેટેરિયા આહાર), વાયરસ (લેન્ટી-કંટ્રોલ અથવા લેંટી-ડીએક્સએનએક્સઆરએચએસ) અને કય (દંડ સાથે જોડાયેલ અથવા અનપેક્ષિત), આંતરિક-પરિબળ પરિબળ તરીકેની વચ્ચેના પરિબળો અને સમય તરીકે. જ્યારે યોગ્ય હોય ત્યારે, તફાવતના વિશ્લેષણમાં મુખ્ય અસરોનો વધુ બોનફોરોની પોસ્ટ હોક પરીક્ષણો દ્વારા વધુ વિશ્લેષણ કરવામાં આવતો હતો. ગ્રાફિક્સ પ્રિઝમ સૉફ્ટવેરનો ઉપયોગ કરીને બધા આંકડાકીય વિશ્લેષણ કરવામાં આવ્યા હતા.

સંદર્ભ

સંદર્ભ

પત્રવ્યવહાર:

પાઉલ જે કેની ([ઇમેઇલ સુરક્ષિત])