Prefrontal Cortical Circuit fyrir þunglyndi og kvíða-tengd hegðun Miðlað af Cholecystokinin: Hlutverk ΔFosB (2014)

Abstract

Minnkuð miðgildi forstilla heilaberkis (mPFC) taugafrumuvirkni tengist félagslegu ósigri af völdum þunglyndis og kvíða eins og hegðun hjá músum. Samt sem áður eru sameindirnar sem liggja að baki minnkaðri mPFC virkni og fortryggingarhlutverki þess óþekktar. Við sýnum hér að örvun á umritunarstuðlinum osFB í mPFC, sérstaklega á prelimbic svæðinu (PrL), miðlar næmi fyrir streitu. Δ FosB örvun í PrL kom sérhæfð fram í næmum músum eftir langvarandi félagslegt ósigur streitu og ofþrýsting ΔFosB á þessu svæði, en ekki á nærliggjandi infralimbic (IL) svæði, jók streitu næmi. Δ FosB framkallaði þessi áhrif að hluta til með því að örva kólecystokinin (CCK) -B viðtaka: CCKB hömlun í mPFC örvar fjaðrandi svipgerð en gjöf CCK í mPFC líkir eftir kvíða- og þunglyndisáhrifum félagslegrar streitu. Við fundum áður að optogenetic örvun mPFC taugafrumna í næmum músum snýr að nokkrum hegðunarfrávikum sem sjást eftir langvarandi félagslegt ósigur streitu. Þess vegna gerðum við okkur í hugarlund að optogenetic örvun á barksteraskotum myndi bjarga sjúklegum áhrifum CCK í mPFC. Eftir CCK innrennsli í mPFC örvuðum við optogenetically mPFC áætlanir til basolateral amygdala eða nucleus accumbens, tvö undirkortalaga uppbyggingu sem tók þátt í stjórnun skapsins. Örvun á barksteramýglaástungu hindraði kvíðaáhrif CCK, þó að engin áhrif hafi sést á önnur einkenni félagslegs ósigurs. Aftur á móti, örvun á framreikningum barkstera hafði snúið við félagslega forðast CCK-völdum og súkrósa-skort en ekki kvíðalík áhrif. Saman benda þessar niðurstöður til þess að félagslegur streita af völdum hegðunarskorts sé miðlaður að hluta til af sameindaaðlögun í mPFC sem felur í sér ΔFosB og CCK í gegnum barkstigsspár að aðgreindu undirkortagildum.s.

Leitarorð: accumbens, amygdala, kvíði, CCK, þunglyndi, mPFC

Hvernig gengur lífið dag frá degi? Er það í jafnvægi og allt eins og það á að vera? Er jafnvægi hvort sem litið er á veraldlega stöðu eða andlega? Lífið er eins og það er. Það er ekki alltaf sólskyn. Það koma reglulega lægðir með rok og rigningu. Við vitum að í heildar samhenginu er lægð hluti af vistkerfi að leita að jafnvægi. Stundum erum við stödd í miðju lægðarinnar. Þar er logn og gott veður, sama hvað gengur á þar sem stormurinn er mestur. Sama lögmál gildir varðandi þitt eigið líf. Ef þú ert í þinn miðju, þínum sannleik þá heldur þú alltaf jafnvægi átakalaust. Sama hvað gustar mikið frá þér þegar þú lætur til þín taka. Huldufólk hefur gefið okkur hugleiðslu sem hjálpar okkur að finna þessa miðju, finna kjarna okkar og sannleikann sem í honum býr. Þegar þú veist hver þú ert og hvers vegna þú ert hér, mun líf þitt vera í flæðandi jafnvægi. Hugleiðslan virkjar þekkinguna sem er í vitund jarðar og færir hana með lífsorkunni inn í líkama okkar. Þar skoðar hún hugsana og hegðunar munstrið og athugar hvort það myndar átakalausu flæðandi jafnvægi. Hinn möguleikinn er falskt jafnvægi sem hafa þarf fyrir að viðhalda með tilheyrandi striti, áhyggjum og ótta. Síðan leiðbeinir þessi þekking okkur að því jafnvægi sem er okkur eðlilegt. Við blómstrum átakalaust, líkt og planta sem vex átakalaut frá fræi í fullþroska plöntu sem ber ávöxt.

Nokkur anatómískt og virkni samtengd limbísk heilasvæði, þar með talið forstilla heilaberki (mPFC), hippocampus, amygdala og nucleus accumbens (NAc), er haft í huga að miðla lykilleinkennum þunglyndis og kvíða (; ; ; ; , ; ; ). Sem dæmi má nefna að skortur á barksterum við amygdala er í tengslum við vanlíðandi tilfinningar og snýr aftur að eðlilegu stigi eftir árangursríka meðferð. Þunglyndislyf áhrif djúps örvunar á heila undirlags heilabarkar, sem er svæði mPFC, eru tengd endurreisn barkstera og undirbarkstera í heila að eðlilegu stigi (; ). Á sama hátt er djúp heilaörvun NAc þunglyndislyf og kvíðastillandi og er í samræmi við breytt umbrot í NAc, amygdala og mPFC (; ; ). Þessi gögn styðja taugakerfis tilgátu um geðraskanir þar sem geðdeyfðarmeðferð, óháð fyrirkomulagi, staðlar virkni í báðum undirvirkum barksterum og ofvirkum barksterum.; ; ; ; ; ).

Dýralíkön sem fela í sér langvarandi útsetningu fyrir líkamlegu eða sálrænum streitu skerða uppbyggingu og virkni taugafrumna í mPFC (), amygdala (), hippocampus () og NAc (; ). Langvinnur félagslegur ósigur streita, siðfræðilega gilt fyrirmynd þunglyndis (), dregur úr mPFC taugavirkni eins og ályktað er um minni tjáningu Zif268 og c-Fos (; ). Ennfremur snýr optogenetic örvun á mPFC þessum skorti og hefur þunglyndislyf eins og áhrif (), sem staðfestir mikilvægi mPFC við skapstengt fyrirbæri. Thann nagdýrum mPFC, eins og hjá prímötum, stjórnar tilfinningalegri hegðun að hluta til í gegnum áætlun til basolateral amygdala (BLA) og NAc (; ; ). Engu að síður eru sameindirnar sem miðla þessu hlutverki mPFC óþekktar.

Núverandi rannsókn beindist upphaflega að ΔFosB, stöðugum umritunarstuðli sem örvast í NAc af langvarandi félagslegu ósigursálagi þar sem það er á móti streitu næmi (). Við gerðum heila-breiða kortlagningu af ΔFosB örvun eftir ósigur streitu og fundum, svipað og fyrri rannsóknir (; ; ), öflug framkalla í mPFC. Okkur kom á óvart að slíkur ΔFosB örvun í mPFC stuðlar að næmi streitu. Við bentum á kólecystokinin (CCK) -B viðtaka sem sameindamarkmið ΔFosB í mPFC, þar sem CCKergic taugaboð hefur verið beitt í bæði kvíða- og þunglyndisáhrifum félagslegrar streitu (, ). Við fundum að CCK virkni í mPFC er bæði nauðsynleg og nægjanleg fyrir kvíða- og þunglyndisáhrif félagslegs álags. Að auki, með því að nota optogenetic aðferðir, sýnum við fram á sérstakar aðgerðir CCK í mPFC undirhringrásum: CCK í mPFC-BLA spá miðlar kvíðaeinkenni en CCK í mPFC-NAc spá miðlar þunglyndiseinkenni.

Efni og aðferðir

Tilraun 1: kortlagning á heila um ΔFosB örvun vegna langvarandi félagslegrar ósigursálags.

Átta vikna gamlar C57BL / 6J karlkyns músar voru háðar langvarandi félagslegu ósigursálagi í 10 daga samfellt eins og lýst er áður (; ; ) (sjá Tafla 1; Fig. 1A). Í stuttu máli var hver mús útsett fyrir framandi, árásargjarn karlkyns CD1 eftirlaun ræktunar mús í 5 mín á dag. Eftir bein samskipti við CD1 árásaraðilinn (5 mín.) Voru dýr sett í aðliggjandi hólf í sama búri fyrir næsta 24 h með skynjunar, en ekki líkamlega snertingu. Eftirlitsdýr voru hýst í sambærilegum búrum en með meðlimi af sama stofni. Próf á félagslegum samskiptum voru framkvæmd 24 klst eftir lokadag ósigur. Félagslegur varnir gegn ókunnum CD1 karlmús var metinn samkvæmt útgefnum samskiptareglum. Tíminn sem var á „samskiptasvæðinu“ (8 cm breiður gangur umhverfis búrið) var mældur. Aðgreining ósigurra músa í næmar og seigur undirbyggingar voru gerðar eins og áður hefur verið lýst (; ). Vegna þess að meirihluti samanburðar músa eyðir meiri tíma í samskipti við félagslegt markmið en með tómt markhólf er milliverkunarhlutfall 100 (jafn tíma sem varið er á samskiptasvæðinu í nærveru og fjarveru félagslegs markmiðs) notað sem afmörkun: mýs með stig <100 eru merktar sem „næmar“ og þær með stig ≥100 sem „seigur“. Víðtækar atferlis-, lífefnafræðilegar og lífeðlisfræðilegar greiningar styðja gildi þessara sérstöku næmu og seiglu undirþátta (; ; ).

Tafla 1.  

Meðalfjöldi (± SEM) FosB-ónæmisaðgerðarkjarna á mm2 á heila svæði við stjórnun, næmar og seigur mýs 24 h eftir langvarandi (10 d) félagslegt ósigur streitu
Mynd 1.  

Δ FosB örvun í mPFC stuðlar að næmi fyrir streitu. A, Fulltrúar ljósmyndir af ΔFosB ónæmis- og æðasjúkdómi í mPFC 24 h eftir síðustu 10 þætti um félagslega ósigur. B, Innleiðsla ΔFosB á sér ekki stað í GABAergic ...

Rétt eftir félagslega milliverkunarprófið voru mýs svæfðar og perfused í hjarta með 4% paraformaldehýð / PBS. Hólf telja fyrir ΔFosB+ taugafrumur í NAc voru gerðar eins og áður hefur verið lýst (). Gáfur voru krotverndaðar með 30% súkrósa og kransæðahlutar (30 μm) voru skornir á frystingu smáfrumu og unnir fyrir ónæmisheilbrigðafræði. Frífljótandi hlutar voru ræktaðir fyrir í hindrandi biðminni sem innihélt 0.3% Triton og 3% venjulegt geitasermi. Δ FB greindist með því að nota margliða mótefni gegn kanínum, sem alin voru upp á N-endahluta próteinsins (1 / 1000 Santa Cruz líftækni, verslun # sc-48) í sama jafnalausn, síðan unnin með lítínýleruðu geita gegn kanínu IgG mótefnum og avidin-biotin peroxidase flókin aðferð með DAB sem undirlag (Vector Laboratories). Meðgöngutími diaminobenzidins var haldið stöðugum við allar aðstæður (100 s). Sneiðar voru festar, þurrkaðar og huldu þær. Os FB-ónæmisbælandi frumur sýndu ákveðinn brúnan litun í kjarnanum og voru magngreindir af áheyrnarfulltrúa blindur við meðferðarskilyrðin með smásjá (20 × stækkun). Þrír valdir heilaþættir sem spanna hvert heila svæði voru valdir á hverja mús til magngreiningar. Anatomic aðgreining hvers heila svæði var framkvæmd með því að bera hlutann saman við Paxinos músa heila atlas. Aðstæður fyrir ónæmisheilun voru hámarkaðar til að draga úr bakgrunnsgildum í það minnsta sem gerir kleift að bera kennsl á osFosB-jákvæða frumur. Meðalgildi voru reiknuð fyrir hvert dýr og talið sem sérstök athugun fyrir tölfræðilega greiningu. Þrátt fyrir að mótefnið sem notuð er þekkir bæði ΔFosB og FosB í fullri lengd, þá vitum við með því að vestræna blotting að aðeins ΔFosB er greinanlegt við þær aðstæður sem rannsakaðar voru (; ).

Tilraun 2: auðkenning á félagslegri streitu af völdum ΔFosB taugafrumgerð í mPFC.

Til að skoða tjáningu ΔFosB í barksterum GABAergic taugafrumum notuðum við vefi frá GAD2-td tómat músum sem voru útsettir fyrir langvarandi félagslegu ósigursálagi og lituðu fyrir ΔFosB eins og lýst er hér að ofan (sjá Fig. 1B). Mýs voru búnar til með ræktun á knockin GAD2-Cre músum (Gad2tm2 (cre) Zjh / J; JAX lager númer 010802) () með (B6.Cg-Gt (ROSA) 26Sortm9 (CAG-tdTomato) Hze / J; JAX lager númer 007908) sem bera með floxed-stop stjórnað tdTomato (RFP afbrigði).

Tilraun 3: hegðunaráhrif overFosB of tjáningar í prelimbic (PrL) og infralimbic (IL) heilaberki.

Stereotaxic skurðaðgerð var framkvæmd á fullorðnum karlmúsum (8 vikur) til að sprauta HSV-ΔFosB-GFP eða HSV-GFP í PrL eða IL svæði mPFC. Í stuttu máli voru mýs svæfðar með því að nota blöndu af ketamíni (10 mg / kg) og xýlazíni (1 mg / kg), og eftirfarandi stereótaxísk hnit voru notuð til veirumyndunar fyrir PrL: 1.8 mm (fremri / aftari), 0.65 mm (hliðlæg) ), −2.2 mm (bak / ventral); og fyrir IL: 1.9 mm (fremri / aftari), 0.75 mm (hlið), −2.8 mm (rygg / leg) í horninu 10 ° frá miðlínu (miðað við Bregma). Alls var 0.5 μl af hreinsaðri vírus gefinn tvíhliða yfir 5 mín. Tímabil (0.1 μl / mín.) Og síðan 5 mín. Hvíld. Veirusprautustaðir voru staðfestir með stöðluðum vefjafræðilegum aðferðum (sjá Fig. 1C). Þó að það sé ekki mögulegt að marka sértækt PrL á móti IL í músum með fullkominni nákvæmni, eru gögnin í Mynd 1C sýna fram á að mjög hagkvæmt er að miða aðallega við eitt svæði eða annað. Reyndar, hin sérstaka hegðunaráhrif sem fengust við að miða á svæðin tvö (sjá Niðurstöður) styðja þessa nálgun. Fyrsta lotan af músum var eingöngu notuð í tilraun með samfélagsleg ósigur (submaximal) Fig. 1D). Þremur dögum eftir skurðaðgerð voru músir látnir vinna í tveimur ósigrum í röð sama dag og voru síðan prófaðir á félagslegum samskiptum 24 h seinna. Þessi óeðlilega ósigursaðferð hefur verið staðfest áður áður til að sýna svipgerð svipgerð eftir erfðabreytingar (; ).

Önnur lota af músum var notuð til að prófa basal kvíða- og þunglyndishegðun (sjá Fig. 1E – J). Degi eftir aðgerðina voru músar að venja sig með 1% (w / v) súkrósa lausn. Daginn eftir gátu mýs valið á milli vatnsflösku og 1% súkrósa lausnarflösku, skipt daglega. Sykurskammtalausn fyrir 24 klst. Var mæld á fjórða og fimmta degi eftir skurðaðgerð og gefin upp sem hundraðshluti af heildarmagni vökvans sem tekinn var upp. Mýs voru prófaðar á víðavangi (dagur 3), hækkuð plús völundarhús (dagur 4), félagsleg samskipti (dagur 5 morgun) og þvinguð sund (dagur 5 síðdegis) próf byggð á útgefnum samskiptareglum (). Við höfum komist að því að með þessari röð prófana hefur árangur af síðari prófunum ekki áhrif á fyrri (). Virkni músa á víðavangi var skráð í 5 mín. Með því að nota myndspurningarkerfi (Ethovision) við rauð ljós skilyrði. Hækkað plús völundarhús samanstóð af tveimur beinum gatnamótum sem voru staðsettar 60 cm fyrir ofan gólfið og skipt í tvo opna og tvo lokaða handleggi. Mýs voru settar hvert fyrir sig í miðju völundarhússins og leyfðu að kanna hverja handlegg frjálst í 5 mín. Í víðavangsrannsóknum og hækkuðum völundarhúsaprófum var tíminn í miðju og opnum örmum notaður sem öfug vísitala kvíðatengdra svara. Einn dags þvinguð sundpróf var gerð í 5 mín. Aukinn tími hreyfigetu meðan á þvinguðu sundprófi stóð var túlkaður sem framþróunarlík hegðun. Þetta 1 daga próf hefur verið mikið notað í músum og staðfest sem mælikvarði á forspárgildi, þar sem geðdeyfðarlyf draga úr hreyfanleika.

Að lokum var aðskildum hópi músa sprautað innan mOFC með HSV-ΔFosB og prófað á félagslegum samskiptum eftir undirmaximal ósigur (sjá Fig. 1K).

HSV vektorar voru fengnir frá Rachael Neve (Massachusetts Institute of Technology). Genin sem vekja áhuga (osFosB og GFP) eru undir CMV verkefnisstjóra. Þessir vektorar hafa verið fullgildir í fyrri ritum (t.d. ).

Tilraun 4: áhrif langvarandi félagslegrar streitu á CCKB viðtakastig í mPFC.

Klukkan 24 klukkustund eftir prófið á félagslegum samskiptum voru gáfur fljótt fjarlægðir og þeim skorið í röð og mPFC var fljótt krufið og fryst á þurrum ís (sjá Fig. 2A,B). RNA einangrun, qPCR og gagnagreining voru framkvæmd eins og áður hefur verið lýst (; ). RNA var einangrað með TriZol hvarfefni (Invitrogen) og var hreinsað frekar með RNAeasy örbúnaði frá QIAGEN. Ákvarðað var að öll RNA sýni væru með 260 / 280 og 260 / 230 gildi ≥1.8. Afturritun var gerð með iScript (Bio-Rad). qPCR með því að nota SYBR Green (Quanta) var framkvæmt með Applied Biosystems 7900HT RT PCR kerfi með eftirfarandi lotu breytum: 2 mín. við 95 ° C; 40 lotur 95 ° C fyrir 15 sekúndur, 59 ° C fyrir 30 sekúndur, og 72 ° C fyrir 33 sekúndur; og flokkað hitun að 95 ° C til að búa til aðgreiningarferli til staðfestingar á stökum PCR vörum. Gögn voru greind með því að bera saman Ct gildi meðferðarástandsins (næmir eða seigir samanborið við samanburðarmýs, eða HSV-ΔFosB vs HSV-GFP) með ΔΔCt aðferð (). qPCR grunnur eru eftirfarandi: ΔFosB, fram, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT og öfugt, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG; CCKB, áfram, ACCCTTTATGCGGTGATCTTTC og öfugt, ATGAGCACGTTTCCGCCAA; CCK, áfram, AGCGCGATACATCCAGCAG og öfugt, ACGATGGGTATTCGTAGTCCTC; GAPDH, áfram, AGGTCGGTGTGAACGGATTTG og öfugt, TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA.

Mynd 2.  

Blokkun á CCKB viðtakanum hefur forveru, þunglyndislyf eins. A, Félagslegur ósigur lækkar CCKB viðtakastig í mPFC aðeins hjá seigum músum (n = 8 – 10). *p <0.05, samanborið við stýringu (einstefna ANOVA). **p <0.05 ...
Tilraun 5: áhrif ΔFosB á CCKB viðtakann og cFos gildi.

Músum var sprautað í PrL með HSV-FosB. Í 72 klst. Eftir skurðaðgerð, þegar hámarki veiruofsjáningar, voru stungustaðir krufðir undir flúrljómandi smásjá (sjá Fig. 2C). RNA einangrun, qPCR og gagnagreining voru framkvæmd eins og lýst er hér að ofan. qPCR grunnur eru eftirfarandi: c-fos, fram, AATCCGAAGGGAACGGAATAAGA og öfug, TGCAACGCAGACTTCTCATCT.

Tilraun 6: Áhrif ΔFosB hömlunar á streituvaldandi CCKB viðtaka stig og seiglu.

Fullorðnum músum var sprautað tvíhliða með HSV-GFP eða HSV-unJunD í PrL (sjá Fig. 2D-F). UnJunD er styttu stökkbreytt stökkbreytt stökkbrigði af JunD sem virkar sem ríkjandi-neikvæð mótlyf ΔFosB. Mýs urðu fyrir félagslegum ósigri tvisvar á dag fyrir 5 d. Þessi flýta fyrir félagslegu ósigri, stytt til að fara saman við tímabil hámarks tjáningu HSV transgena, hefur verið notuð áður og sýnt er framkalla hámarks stig félagslegs forðast (). 24 klukkustundir eftir síðasta álagsþátt voru músir afhöfðaðar án deyfingar til að forðast áhrif svæfingarlyfja á taugapróteinmagn. Sýktur vefur var fjarlægður í PBS-innihaldandi próteasa (Roche) og fosfatasa (Sigma-Aldrich) hemlum með því að nota 15 gauge kýla og frosinn strax á þurrís. Sýni voru einsleit með ljósmeðferð í breyttum RIPA biðminni: 10 mm Tris basi, 150 mm natríumklóríð, 1 mm EDTA, 0.1% SDS, 1% Triton X-100, 1% natríum deoxýkólat, pH 7.4 og próteasa og fosfatasa hemlar sem hér að ofan. Eftir að Laemmli biðminni hafði verið bætt við voru prótein aðskilin á 4–15% pólýakrýlamíð halla hlaupum (Criterion System; Bio-Rad) og Western blotting var framkvæmd með Odyssey kerfinu (Li-Cor) samkvæmt siðareglum framleiðanda. Himnur voru þurrkaðar út með CCKB viðtaka mótefni (1/1000, Acris, vörulisti AP01421PU-N). Öðrum hópi músa var sprautað með AAV-ΔJunD eða AAV-GFP í PrL og síðan, 5 vikum eftir aðgerð til að leyfa hámarks tjáningu transgena, voru mýsnar lagðar undir ósigraráætlun. Þeir voru prófaðir fyrir félagsleg samskipti 24 klst eftir síðasta ósigur.

Tilraun 7: áhrif innra mPFC CI-988, CCKB mótlyfs, á félagslega forða af völdum félagslegrar forvarnar og svæfingar.

Tvíhliða holnál (1.0 mm rennsli til nálarfrumna, 1.8 mm að framan, inndælingartæki −2.2 mm riddar / ventral) miðuð við mPFC voru ígrædd í næmar mýs (sjá sjá: Fig. 2G,H). Viku eftir aðgerð var 10 ng af CI-988 innrennsli beint í mPFC og miðaði fyrst og fremst á PrL. Mýs voru síðan prófaðar fyrir hegðun sína á félagslegum samskiptum. Sykrósastilling var mæld fyrir 24 klst. Sem eftir var. CI-988 (Tocris Bioscience) var leyst upp í saltvatni, skipt út og fryst. Endanleg þynning var unnin á tilraunadeginum. Önnur tilraun var gerð í næmum músum með CI-988 gefnum í kviðarhol (2 mg / kg) 30 mín fyrir próf á félagslegum samskiptum.

Tilraun 8: áhrif CCKB örva á næmi fyrir félagslegu álagi og snúningi með optogenetic örvun á mPFC áætlun til BLA eða NAc.

AAV-CaMKII-ChR2-EYFP eða AAV-CaMKII-EYFP var sprautað í rétta mPFC, sem miðaði aftur fyrst og fremst á PrL (sjá Fig. 3A – G). Fimm vikum síðar voru sjóntaugar ígræddir í hægri NAc (1.4 fremri / aftari, 2.6 hlið, −4.7 riddar / ventral í horni 25 ° frá miðlínu) eða BLA (−1.6 framhlið / aftari, 3.1 hlið, −4.7 dorsal) / ventral án horn frá miðlínu). Við sömu skurðaðgerðir voru tvíhliða kanyl sett í mPFC (sjá hér að ofan). Hylkjum og trefjum voru fest við höfuðkúpuna með tannsementi. Músum var síðan leyft 1 viku að jafna sig áður en hegðunartilraunir hófust. Mýs voru látnar verða undir óeðlilegum ósigri, síðan prófaðar 24 h seinna vegna félagslegra samskipta, beint fylgt eftir með hækkuðum plús völundarhúsi og fyrir súkrósa val á 24 klst. Sem eftir var. Á 30 mínútu fyrir félagsleg samskiptapróf voru hálfri músunum gefnar með CCK-8 (10 ng) í mPFC á meðan hinn helmingurinn fékk burðarefni (saltvatn). Mýs voru prófaðar í pörum (ökutæki og CCK-8 meðhöndluð mús, með AAV-GFP eða AAV-ChR2). CCK-8 (Sigma) var leyst upp í saltvatni, skipt út og fryst. Lokaþynning var undirbúin daginn sem tilraunin var gerð.

Mynd 3.  

CCK-8-framkallað streita næmi fer eftir sérstökum sparkspeglum. A, Eftir 24 klst. Eftir undirmaximal félagslegan ósigur og 30 mín. Eftir CCK-8 innrennsli voru mPFC vörpunarsvæði örvuð með leysi við prófun á félagslegum samskiptum. CCK-8 innrennsli ...

Optísk örvun var framkvæmd samkvæmt útgefnum samskiptareglum (). Ljós trefjar (Thor Laboratories) voru ígræddir í langan tíma og tengdir með FC / PC millistykki við 473 nm bláa leysir díóða (Crystal Lasers, BCL-473 – 050-M). Örvandi (Agilent, #33220A) var notaður til að búa til bláar ljóspúlsar. Við allar örvunir voru 40 ms springur af 100 Hz (9.9 ms gaddur á breidd) bláar ljóspúlsar gefnar á 3 s hverri á endasvæði í BLA eða NAc yfir lengd félagslegra samskiptaprófa til að líkja eftir springu-líku barksterum. virkni. Staðfesting ljósleiðaraljóssins var staðfest fyrir hverja notkun með ljósnemi (Thor Laboratories, S130A) og ljósstyrkur var ∼15 mW. Þessi örvunarregla, sem áður var staðfest rafræn lífeðlisfræðileg (), framkölluðu ekki flog á grundvelli atferlismælinga og skortur á tjáningu c-Fos utan optogenetically örvaðra svæða ().

Tilraun 9: áhrif CCKB örva á mPFC taugafrumuvirkni mæld með c-Fos mRNA stigum.

Tvíhliða kanar voru ígræddar á fullorðnar mýs sem miðuðu við mPFC (sjá Fig. 3H). Eftir viku hvíld voru músir látnir vinna undir undantekningalegum ósigri og gefa þeim CCK-8 24 klst. Síðar. mPFC kýlingar voru teknar 30 mínútum eftir innrennsli lyfsins og sýni undirbúin fyrir mRNA greiningu eins og lýst er hér að ofan.

Dýrahúsnæði.

Notaðar voru átta vikna gamlar C57BL / 6J karlmúsar (Jackson rannsóknarstofan). Allar músir voru byggðar á dýraaðstöðunni í að minnsta kosti 1 viku fyrir tilraunameðferð og var haldið við 23 ° C – 25 ° C á 12 klst. Ljós / dökkri lotu (ljós logað á 7: 00 AM) með ad libitum aðgangur að mat og vatni. Tilraunir voru gerðar í samræmi við viðmiðunarreglur Félags um taugavísindi og stofnananefnd um dýraumönnun og notkun við Icahn School of Medicine við Sinai-fjall.

Tölfræðilegar greiningar.

Gögn sem sýnd eru eru gefin upp sem meðaltal ± SEM (táknað sem villustika). Ein leið ANOVA voru notuð til að bera saman leiðir milli stjórna, næmra og seiglu músa í ónæmisfræðilegum, lífefnafræðilegum og atferlisgreiningum. Einhliða ANOVA voru notuð til að bera saman leiðir milli GFP stýringar og osFosB ofþrýstings í PrL eða IL í víðavangi, upphækkuðu plús völundarhús, þvinguðu sundi og súkrósa valprófum. Tvíhliða ANOVA-lyf voru notuð til að bera saman leiðir milli GFP-stjórna, ΔFosB-PrL og ΔFosB-IL í félagslegu samskiptaprófinu. Tvíhliða ANOVA-lyf voru notuð til að bera saman CCK-8 áhrif með eða án optogenetic örvunar í öllum hegðunartilraunum, svo og áhrifum ΔFosB oftryggingar eða CI-988 innrennslis á félagslega forðast. Þegar við á post hoc greiningar voru gerðar með Bonferroni post hoc próf. Nemendur t próf voru notuð til að bera saman leiðir til áhrifa CI-988 innrennslis á súkrósa val og þvingaðar sundpróf og CCK-8 á c-Fos mRNA stig. Mismunur milli tilraunaaðstæðna var talinn tölfræðilega marktækur þegar p ≤ 0.05.

Niðurstöður

Heilakort kortlagning ΔFosB örvunar með langvarandi félagslegu ósigursálagi

Við könnuðum fyrst ΔFosB örvun með ónæmisgeislunarlækningum í samanburðar-, næmum og seigluðum músum eftir tímabundið langvarandi (10 d) félagslegt ósigtspennu, með áherslu á framheilasvæðið og milliliðasvæðin sem áður höfðu verið beitt í álagssvörum. Dýr voru greind 24 klst. Eftir síðasta ósigur þáttarins. Langvinnur félagslegur streita örvar ΔFosB á fjölmörgum heila svæðum með greinileg mynstur sem sést á milli seigandi og næmra músa. Eins og sést á Tafla 1 og Mynd 1A, IL, BLA, dentate gyrus of hippocampus, dorsal striatum, og NAc core sýndi ákjósanlega virkjun í seigum músum; slíkar niðurstöður í NAc eru í samræmi við birtar niðurstöður (). Aftur á móti sýndi næmar mýs meiri örvun í PrL, hliðar á septum og rúmkjarna af stria terminalis. Nokkur heilasvæði sýndu sambærilega ΔFosB örvun í næmum og seigur músum; þar á meðal voru heilaberki utan svigrúm (OFC, annað svæði PFC), NAc skel, riddar á baki og grátt grindarhol (PAG).

Til að bera kennsl á taugategundina sem sýnir ΔFosB örvun á barksturshéruðum, voru GAD2-td tómatamúsir háðir langvarandi félagslegu ósigursálagi. Δ FB ónæmisvirkni í næmum músum var ekki greinanleg í GABAergic taugafrumum (Fig. 1B), sem staðfestir fyrri niðurstöður um sértæka örvun ΔFosB í barksterum í barksterum eftir annars konar langvarandi streitu (). Hjá ómeiddum samanburðarmúsum grunngildi os FosB þéttni milli heila svæða var svipað og greint var frá í fyrri rannsóknum (, ) með miklu hærra basalmagni í NAc og ristli á baki samanborið við önnur svæði, að einu undantekningunni af tannbeini, sem sýndi stig sem eru sambærileg við þau sem eru á dreifbýli. (Tafla 1).

ΔFosB í mPFC stuðlar að næmi fyrir streitu

Til að fylgja eftir þessum niðurstöðum einbeittum við okkur að PrL vegna þess að við höfum áður sýnt að optogenetic örvun þessa svæðis hafði þunglyndislyf eins og samfélagsleg ósigur hugmyndafræði (). Til að prófa hagnýtar afleiðingar ΔFosB örvunar á þessu heilasvæði, ofreyndum við ΔFosB í PrL stjórnunarmusa. (Fig. 1C) og lagt þá undir ómaximal námskeið vegna félagslegs ósigurs streitu, sem hvetur ekki til félagslegs forðast hjá venjulegum dýrum. Mýs sem ofreyndi ΔFosB í PrL voru næmari fyrir félagslegum ósigri en GFP-sprautaðar samanburamúsar að því leyti að þær sýndu félagslega forðast hegðun eftir undirmaximal félagslegan ósigur (samspil, F(2,38) = 2.847, p > 0.05, helstu áhrif vírusa, F(2,38) = 6.013, p <0.05; Bonferroni eftirpróf t = 2.447, p <0.05) (Fig. 1D). Þessar mýs sýndu einnig aukna hreyfigetu í 1 dags þvinguðu sundprófi (F(2,31) = 6.448, p <0.05; Bonferroni eftirpróf t = 3.518, p <0.05) (Fig. 1E), áhrif þvert á þau sem framleidd eru með þunglyndislyfjum. Aftur á móti breytti overFosB oftrygging í PrL ekki nokkrum mælikvörðum á kvíða eins og hegðun, súkrósa val, félagsleg samskipti eða hreyfivirkni (Fig. 1F – J). Saman styðja þessar niðurstöður þá tilgátu að sértæk örvun ΔFosB í PrL af næmum músum stuðli að varnarleysi fyrir streitu og skaðlegum afleiðingum þess. Aftur á móti hafði overFosB ofþjáning á öðru svæði mPFC, IL, engin áhrif á tilfinningalega hegðun í upphafi eða á viðbrögð við félagslegu ósigri streitu (Fig. 1D – J), en over FosB ofþrýstingur í miðlægum OFC hafði tilhneigingu til að stuðla að seiglu við langvarandi félagslegum ósigri, þó að þessi áhrif náðu ekki tölfræðilegri þýðingu (samspil, F(1,31) = 1.741, p > 0.05, helstu áhrif samskiptatíma, F(1,31) = 14.170, p <0.05; Bonferroni eftirpróf t = 3.860, p <0.05 innan GFP hópsins; t = 1.960, p <0.05 innan ΔFosB hópsins; áhrif vírusa, t = 2.447, p <0.05) (Fig. 1K).

ΔFosB stuðlar að framkalla CCKB í mPFC

Stór hluti sannana styður þá hugmynd að CCK, sem er mikið taugapeptíð í heila, gegnir mikilvægu hlutverki í taugasálfræðilegum aðferðum streitu og kvíða (). Sérstaklega tengist losun CCK í mPFC við félagslegt álag hjá rottum kvíðatengd hegðun (). Þrátt fyrir að þátttaka CCK í þunglyndi manna sé enn óljós, benda nýlegar vísbendingar til hlutverks þess í félagslegri ósigring af völdum þunglyndis eins og hjá rottum (). Við komum þannig fram að breytingar á magni CCK eða CCKB viðtakans (einnig þekktur sem CCK2) viðtaki í mPFC gætu stuðlað að mismun milli næmra og seigandi músa. Á 48 klst. Eftir loka ósigur þáttarins lækkaði CCKB mRNA gildi í mPFC eingöngu við seigum músum (F(2,18) = 8.084, p <0.01; Bonferroni eftirpróf, t = 3.104, p <0.05 samanborið við stjórn; t = 5.113, p <0.01 vs næmir) (Fig. 2A). Enginn munur sást í CCK mRNA stigum í hvorki næmum né seigur músum (gögn ekki sýnd). Við sáum aukningu ΔFosB mRNA stig aðeins í næmum músum í samræmi við próteingögnin sem greint er frá hér að ofan (F(2,18) = 5.246, p <0.01; Bonferroni eftirpróf t = 3.336, p <0.05 á móti næmum; t próf t(12) = 2.138, p <0.05 samanborið við stjórn) (Fig. 2B). Vegna þess að ΔFosB stjórnar uppskrift fjölmargra gena (; ), töldum við möguleikann á að það gæti stjórnað tjáningu CCKB mRNA. Til að takast á við þessa spurningu, ofreyndum við ΔFosB fyrst í PrL og komumst að því að þessi meðferð stýrir upp CCKB mRNA stigum á þessu svæði (t(12) = 2.012, p <0.05 á móti GFP) (Fig. 2C). Athyglisvert fannst okkur einnig fækkun í c-Fos mRNA stigum eftir expFosB ofþjáningu (t(11) = 3.382, p <0.01) (Fig. 2C). Tþessar niðurstöður benda ennfremur til að ΔFosB örvun í PrL af næmum músum sé virkur næmi fyrirkomulagsins með því að koma í veg fyrir bælingu CCKB sem sést hjá seigum músum.

Til að styrkja þessar athuganir enn frekar tjáðum við ΔJunD, aFosB bindingaraðila sem skortir transvirkjunar lén sitt og virkar þar með sem ríkjandi neikvæð mótlyf, og ákvörðuðum áhrif þess á framkallaða CCKB tjáningu. Við staðfestum að langvarandi félagslegur ósigur streita jók CCKB próteinmagn í PrL næmra músa (t próf t(12) = 2.289, p <0.05 samanborið við stjórn) (Fig. 2D,E). Þar að auki var slík framköllun fullkomlega hindruð af ΔJunD ofþjáningu á þessu svæði (F(2,20) = 6.306, p <0.01, Bonferroni eftirpróf t = 3.615, p <0.01) (Fig. 2D,E), styðja þá tilgátu að ΔFosB miðli streituvaldandi CCKB tjáningu. Ennfremur, hindrun á ΔFosB virkni í PrL, með staðbundnum ΔJunD tjáningu, stuðlaði einnig að seiglu til að vinna bug á streitu (t próf t(16) = 2.114, p = 0.05 vs stjórn) (Fig. 2F). Enn á eftir að skýra fyrirkomulagið sem liggur að baki niðurfellingu CCKB í seiglum músum.

Hlutverk CCKB í seiglu og næmi fyrir streitu

Til að prófa hlutverk CCKB reglugerðar í PrL beint við að miðla næmi móti seiglu, innrenndum við sértæka CCKB viðtakablokkinn CI-988 (10 ng) beint á þetta heili svæði næmra músa. CI-988 mótmælir CCKB viðtaka á áhrifaríkan hátt in vivo vegna þess að það sýnir nanomolar sækni og mikla sértækni fyrir CCKB viðtakategundina (). Hömlun á virkni CCKB jók mjög félagsleg samskipti (Fig. 2G) (samspil, F(1,20) = 7.795, p <0.05; eiturlyf F(1,20) = 5.38, p <0.05, Bonferroni eftirpróf t = 3.615, p <0.01). Innrennsli CI-988 snéri einnig við hallanum á súkrósaæxli sem sást hjá næmum músum (t(8) = 2.681, p <0.05) (Fig. 2H). Báðar niðurstöður hegðunar benda til þess að hindrun á CCK verkun í PrL hafi sterk þunglyndislyf eins. Athyglisvert er að þegar CI-988 var gefið í kviðarhol var árangurslaus til að snúa við félagslegri forðast (gögn ekki sýnd).

Til að prófa samtölin, að virkjun CCKB í PrL gæti miðlað félagslegri forðast og minnkað súkrósa í kjölfar langvinns félagslegrar ósigur streitu, við skoðuðum áhrif staðbundins innrennslis CCK-8 (10 ng), sem er aðalform CCK í heila , varðandi þunglyndi og kvíða sem tengjast hegðun. Skammtur lyfsins var valinn út frá fyrri niðurstöðum í fræðiritunum (; ; ). Mýs voru útsettar fyrir undirmaximal félagslegu ósigri streitu 24 h fyrir hegðunarpróf (Fig. 3A). CCK-8, innrennsli 30 mín fyrir próf, nægði til að framkalla félagsleg forðast í félagslegum samskiptaprófum sem og minnka tíma sem varið var í opnum örmum í upphækkuðu plús völundarhúsi (SI: BLA, samspil, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; helstu áhrif lyfsins, F(1,22) = 11.75, p <0.05; Bonferroni eftirpróf t = 2.957, p <0.05; NAc: samskipti, F(1,26) = 6.688, p <0.05, Bonferroni eftirpróf t = 2.816, p <0.05; EPM: BLA, samspil, F(1,22) = 8.0, p <0.01; Bonferroni eftirpróf t = 2.509, p <0.05 lyfjaáhrif; t = 2.528, p <0.05 vírusáhrif; NAc, t próf t(17) = 1.961; p <0.05 lyfjaáhrif innan eYFP hópsins) (Fig. 3B – E, vinstri). Enginn munur sást á valinu á súkrósa (Fig. 3F,G, vinstri). Að lokum hafði innrennsli CCK-8 engin áhrif á hegðun (félagsleg samskipti og hækkuð plús völundarhús) naivna, ósigraða músa í þessum prófunum (gögn ekki sýnd). Tþessar niðurstöður sýna fram á að osFosB-miðluð aukning á virkni CCKB í PrL hjá næmum músum, samanborið við seiglu mýs, stuðlar að einhverjum af streituvaldandi hegðunarskorti sem þessi dýr sýna.

Hömlun á næmni CCK-framkallað fyrir streitu með því að virkja barksterafviski á BLA á móti NAc

Lækkuð taugastarfsemi mPFC er í samræmi við þunglyndi eins og hegðun hjá músum, með optogenetic örvun mPFC taugafrumna af næmum músum sem framleiða þunglyndislyf eins.). Við ímynduðum okkur þannig að CCK gæti virkað í PrL með því að hamla taugavirkni og þar með valdið þunglyndislegri hegðun. Í samræmi við þessa tilgátu sáum við fækkun í c-Fos mRNA gildi í PrL sem svar við CCK innrennsli inn á þetta heila svæði (t(13) = 2.235, p <0.05) (Fig. 3H).

Næstum við tilgátum að optogenetic örvun mPFC beiti geðdeyfðarverkun sinni með því að andmæla áhrifum CCK á taugavirkni. Við að prófa þessa tilgátu könnuðum við undirkerfisvirki sem miðluðu við kvíðabólgu- og framþrýstingslík áhrif CCK. Pýramída taugafrumur mPFC verka þungt til NAc og BLA, tveggja limbískra mannvirkja sem hafa áhrif á hegðunarviðbrögð við streitu. Sýnt hefur verið fram á að breytt virkni beggja heila svæða gegnir mikilvægu hlutverki í tjáningu kvíða og þunglyndis hegðunar (; ). Við prófuðum því hvort örvun glútamatergískra spáa frá PrL til NAc eða BLA myndi vinna gegn skaðlegum áhrifum CCK örgjafa í PrL (Fig. 3A). Við sprautuðum AAV-CaMKII-ChR2-EYFP, eða AAV-CaMKII-EYFP sem stjórn, í PrL. Vitað er að CaMKII verkefnisstjórinn miðar veirutjáningu á glutamatergic pýramída taugafrumur á heilaberki. Við leyfðum svo nægum tíma (6 vikur) til að flytja transgenin til taugstöðva þessara pýramída taugafrumna í NAc og BLA (Fig. 3I). Mýs fengu félagsleg ósigur undir einkenni; 24 klst. Síðar innrenndum við CCK-8 í PrL og 30 mín. Eftir það var félagsleg samskipti mæld við optogenetic örvun glutamatergic skautanna í NAc eða BLA. Strax eftir félagsleg samskiptapróf voru mýs metnar í hækkuðu plús völundarhúsi til að meta kvíða tengda hegðun og síðan með tilliti til súkrósa til að meta anhedonia.

Optogenetic örvun á PrL glutamatergic spá til NAc snéri að fullu félagslegri forðast af völdum intra-PrL CCK-8 (samspil, F(1,26) = 6.688, p <0.05, engin lyfjaáhrif í ChR2 hópnum) (Fig. 3C). Aftur á móti hafði slík PrL til NAc örvun engin áhrif á kvíða lík hegðun eins og hún var mæld í upphækkuðum plús völundarhúsi (Fig. 3E); slík örvun jók þó val á súkrósa samanborið við óstimplaðar mýs (samspil, F(1,20) = 5.77, p <0.05; Bonferroni eftirpróf t = 2.998, p <0.05 örvunaráhrif innan CCK-8 meðhöndlaðra dýra) (Fig. 3G).

Mjög mismunandi hegðunarmynstur sást með optogenetic örvun á PrL glutamatergic spá til BLA. Slík örvun kom ekki í veg fyrir félagslega forðast af völdum innrennslis PrL CCK-8 (samspil, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; helstu áhrif lyfsins, F(1,22) = 11.75, p <0.05; engin áhrif í örvuðum hópi, t próf t(12) = 2.054, p <0.05) (Fig. 3B). Samt sem áður örvaði BLA afferents kvíðalík áhrif eins og gefið er til kynna með auknum tíma í opnum örmum hækkaðs völundarhúss (samspil, F(1,22) = 8.0, p <0.01; Bonferroni eftirpróf t = 2.528, p <0.05 vírusáhrif innan CCK-8 meðferðarhópa) (Fig. 3D). Örvun á glutamatergic spá til BLA hafði engin marktæk áhrif á súkrósa val (milliverkun, F(1,22) = 2.08, p > 0.05) (Fig. 3F).

Discussion

Niðurstöður þessarar rannsóknar veita vísbendingar um sameindaaðlögun í PrL sem liggja að baki næmi fyrir félagslegu álagi. Við sýnum framkalla ΔFosB í þessu mPFC undirsvæði eftir langvarandi félagslegt ósigur streitu, þar sem osFosB ofþrýstingur stuðlar að næmi streitu. Við greindum CCKB viðtakann sem eitt markgen sem er stjórnað af FosB í PrL, og framkalla greinilega CCKB prótein í næmum músum og koma í veg fyrir að stjórnun á CCKB tjáningu er valin hjá sértækum músum. Við sýndum ennfremur að innrennsli CCK örva í PrL stuðlar að þunglyndis- og kvíða líkum hegðunarfrávikum til að bregðast við félagslegu álagi en hindrun á virkni CCKB viðtaka á þessu svæði næmra músa hindrar þessi áhrif. Við notuðum næst optogenetic verkfæri til að bera kennsl á örhringrásina sem tók þátt í proanxiety- vs prodepression-líkum aðgerðum CCK í PrL. Þrátt fyrir að glutamatergic spár með barkstera-NAc miðli umbunarskorti sem sést af félagslegri forðast og minnkaðri súkrósa val, hefur þessi örrás ekki áhrif á kvíðaáhrif CCK innrennslis í PrL. Aftur á móti miðla barksteraframkvæmdir við BLA fram á birtingu kvíðatengds atferlis en hafa engin áhrif á félagslega streitu af völdum félagslegrar forvarna eða súkrósa valskorts. Saman sýna þessi gögn að breytingar á PrL virka eftir langvarandi félagslegt ósigur streitu miðla fjölmarga hegðunarskerðingu með sérstökum undirkortagerðaráætlunum.

ΔFosB: kortleggja limbískt streitukerfi og hlutverk í mPFC

Δ FosB ónæmisheilbrigðafræði greinir taugafrumur sem verða fyrir langvarandi streitu með einfrumugerð og hefur verið notuð til að kortleggja álagsstýrða taugakerfi (; ; ). Við notuðum þessa aðferðafræði til að sýna fram á að langvarandi félagslegur ósigur streita örvar ΔFosB á nokkrum heilasvæðum með mismunandi munur á milli seigur og næmir hópar, þar sem sum svæði sýna örvun hjá seigum músum, öðrum aðeins í næmum músum og enn öðrum við báðar aðstæður (Tafla 1). Fyrri vinna sýndi fram á að ΔFosB örvun í NAc eða ventral PAG stuðlar að seiglu við langvarandi streitu og stuðlar að svörun þunglyndislyfja (; ).

Innleiðing ΔFosB í PrL hjá næmum músum, ásamt fyrri niðurstöðum um að optogenetic örvun á þessu svæði hefur þunglyndis áhrif (), hvatti okkur til að kanna áhrif ΔFosB á þessu heilaberki. Andstætt niðurstöðum í NAc og ventral PAG fundum við að ΔFosB í PrL stuðlar að næmi fyrir langvarandi félagslegu ósigursálagi og framleiðir svipaða áhrif í þvinguðu sundprófi, án þess að hafa áhrif á kvíða eins og hegðun eða súkrósa. Öfugt við PrL fundum við engin áhrif af expFosB ofþjáningu í nærliggjandi IL. Nýleg rannsókn fann hækkað magn ΔFosB í IL hjá seigum músum og hafði í för með sér þennan undirsvið í seiglu gagnvart félagslegu álagi (). Frekari rannsóknir eru því nauðsynlegar til að takast á við mismunandi hlutverk fyrir þessa tvo mPFC undirsvæði, sem sýnt hefur verið fram á að hafa gagnstæð áhrif á öðrum atferlislénum (; ; ). Við greindum frá því áður að þunglyndir menn sýndu lægra magn af BFosB í NAc sem var skoðað eftir fósturlát (), wHér hefur verið sýnt fram á hærra magn af osFosB í dorsolateral PFC (Brodmann svæði 46) þunglyndra manna (). Önnur barksterasvæði voru ekki skoðuð í síðari rannsókninni. Í öllum tilvikum styðja þessar niðurstöður saman svæðisbundið frávik í expressionFosB tjáningu í þunglyndi hjá mönnum, þar sem umritunarstuðullinn hefur mjög mismunandi áhrif á varnarleysi vegna streitu. Það væri áhugavert í framtíðarrannsóknum að kanna áhrif ΔFosB á fjölmörgum öðrum heilasvæðum þar sem það er framkallað (Tafla 1) um álagssvörun.

Einn gangur sem ΔFosB örvun í PrL gæti stuðlað að þunglyndislægri hegðun er með því að bæla PrL virkni. Sýnt hefur verið fram á að FOS bælir viðbrögðum AMPA glútamats, og c-Fos tjáningu, í NAc miðlungs spiny taugafrumum (; ; ). Sömuleiðis fundum við fækkun í c-Fos tjáning eftir ΔFosB ofþjáningu í PrL. Þannig gæti ctionFosB örvun í PrL verið ábyrg fyrir minni taugastarfsemi sem sést á þessu svæði eftir langvarandi félagslegt ósigur streitu. Búast mætti ​​við að slíkur minnkandi tón PrL um undirkortagerðarmarkmið þess, svo sem BLA og NAc, myndi auka ótta tjáningu og vanhæfni til að slökkva á tilfinningalegum viðbrögðum við streitu (, ). Ennfremur valda mPFC-sárunum næmari streituviðbrögðum og skorti á útrýmingu ótta (; ; ; ), sem bendir til þess að skerðing af völdum streituvaldandi mPFC, meðal annars miðluð með ΔFosB örvun, gæti stuðlað að þunglyndi og öðrum streitu tengdum kvillum ().

Hlutverk CCK í varnarleysi vegna streitu

Við leggjum fram vísbendingar um að CCKB viðtakinn sé markmið „FosB“, þannig að ΔFosB örvun í PrL af næmum músum er aðeins einn gangur þar sem osFosB hefur áhrif á svipaða áhrifa á þessu svæði. Þó að sértækar aðgerðir CCK í mPFC rafrásum séu enn óljósar, í nagdýrum, er CCK staðbundið innan GABAergic internurons (). Talið er að bæla virkni barkalítils pýramída taugafrumna með því að auka staðbundna losun GABA og vinna beint á CCKB viðtaka sem tjáðir eru af pýramída taugafrumum (; ; ; ). Þannig gæti CCKergic taugaboðafræðingur stuðlað að minni PrL virkni sem getið er hér að ofan.

CCK er kvíðastillandi lyf, með kerfisbundinni gjöf CCKB örva sem framkalla læti árásir hjá heilbrigðum sjálfboðaliðum. Sjúklingar sem hafa tilhneigingu til ofsakláða verða ofnæmir eftir útsetningu fyrir CCK (; ). Nokkrar rannsóknir hafa staðfest kvíðaáhrif CCK á nagdýrum (). Losun CCK í mPFC við ósigur streitu hjá rottum tengist kvíðatengdri hegðun (); PrL og IL undirsvæði voru ekki aðgreind í þessari rannsókn. Nýlega hefur kerfisbundin langvarandi hömlun á CCKB með CI-988 haft þunglyndislyf eins og rottur (). CI-988 staðlaði hreyfanleika í þvinguðu sundprófi. Það kom einnig í veg fyrir ofvirkni undirstúku-heiladinguls-nýrnahettna, minnkaði hippocampal rúmmál og fjölgun frumna og minnkaði súkrósa sem venjulega var framkölluð með félagslegum ósigri. Hér staðfestum við þessar niðurstöður með því að sýna þunglyndislyf eins og CI-988 innrennsli í PrL af næmum músum, þó að ein kerfisbundin innspýting líki ekki eftir þessum áhrifum.

Til viðbótar við bráðaaðgerðir CCK í PrL, bentum við á minnkað magn CCKB mRNA í seiglum músum, sem gæti verið sameindaaðlögun undirliggjandi seiglu. Reyndar eru breytingar á CCKergic tón, sérstaklega CCKB stigum, mikilvægur búnaður til að tjá kvíða. Erfðabreyttar mýs sem ofreyna CCKB í framheilanum sýna aukna kvíða og óttaviðbrögð (). Niðurstaða okkar um breytt CCKB gildi á milli seigla og næmra músa gæti stuðlað að svipgerðarmun á kvíða og þunglyndislíkri hegðun. Hér sýnum við PrL sem mikilvægt líffærafræðilegt undirlag fyrir kvíðalyf og áhrif á þunglyndi CCK í tengslum við félagslegt álag. Engu að síður taka nokkur önnur heilasvæði þátt í atferlisaðgerðum CCK, þar á meðal BLA, hippocampus, NAc og PAG (; ; ; ; ). Einnig fundum við aukningu á CCKB próteinmagni, en ekki mRNA, í mPFC næmra dýra. Þessar niðurstöður undirstrika að þrátt fyrir að mRNA gildi samsvari oft próteinmagni er þetta ekki endilega tilfellið ().

Optogenetic tilraunir okkar sýna að aukin virkni glutamatergic áætlunar frá PrL til NAc eða BLA mótmælir áhrifum CCK í PrL. Frekari rannsókna er þörf til að komast að því að þessi áhrif optogenetic örvunar eru miðluð af sömu PrL taugafrumum og er stjórnað af CCK. Athyglisvert er að gögn okkar leiða í ljós mismunandi hlutverk þessara tveggja örrásanna við að miðla mismunandi sviðum hegðunarfráviks. Barksterar-NAc vörpun stjórnar anhedonia og umbun; sú staðreynd að það stýrir félagslegum forðast staðfestir að þetta einkenni endurspeglar frekar minnkaða hvatningu og umbun fyrir félagslega hegðun en ekki aukinn félagsfælni. Þessi niðurstaða er í samræmi við vanhæfni benzódíazepína til að leiðrétta þetta óeðlilegt (), og með nýlegri sýningu að mPFC örvun NAc eykur umbun og hvatningu fyrir misnotkun lyfja (). Aftur á móti stjórnar barkstera-BLA vörpun kvíðatengdra einkenna, í samræmi við stórar fræðirit um nagdýr og menn (sjá hér að ofan).

Niðurstaðan er sú að Niðurstöður þessarar rannsóknar bera kennsl á mynstur í limbískum heilasvæðum sem hafa áhrif á næm og seigur dýr og sýna breytingar á PrL sem stuðla að næmi. Þessar breytingar fela í sér örvun ΔFosB og örvun þess á CCKB viðtakanum. Aftur á móti stuðlar hindrun á CCK aðgerðum í PrL þunglyndislyfjum og kvíðalíkum áhrifum. Við komum einnig að staðbundnum markmiðum þessara barkalíffræðilegu taugafrumna sem miðla þessum aðgerðum, með barkstera-NAc hringrás sem er nauðsynleg fyrir þunglyndistengda hegðun og barkstera-BLA hringrás sem er nauðsynleg fyrir kvíðatengda hegðun. Þrátt fyrir að klínískar rannsóknir á CCKB-mótlyfjum hjá þunglyndissjúklingum í 1990 skiluðu ekki efnilegum árangri, benda núverandi niðurstöður til þess að endurskoða lækningarmöguleika slíkra lyfja hjá undirhópum sjúklinga sem verða fyrir miklu álagi.

Neðanmálsgreinar

 

Þessi vinna var studd af National Institute of Mental Health (EJN) og Brain & Behavior Research Foundation National Alliance fyrir rannsóknir á geðklofa og þunglyndi Young Investigator Award til VV

 

 

Höfundarnir lýsa ekki neinum samkeppnislegum hagsmunum.

 

Meðmæli

  • Akirav I, Maroun M. Hlutverk miðrandi forrétthyrnds heilabarkar-amygdala í streituáhrifum á útrýmingu ótta. Taugaplast. 2007; 2007: 30873. doi: 10.1155 / 2007 / 30873. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Barbas H, Blatt GJ. Topografískt sértækar hippocampal spár miða að aðgerðum aðgreindum forstilltu svæðum í rhesus apanum. Hippocampus. 1995; 5: 511 – 533. doi: 10.1002 / hipo.450050604. [PubMed] [Cross Ref]
  • Becker C, Thièbot MH, Touitou Y, Hamon M, Cesselin F, Benoliel JJ. Aukið utanfrumuvökva í barkstera af kólecystokinínlíku efni til fyrirmyndar um von á félagslegum ósigri hjá rottum. J Neurosci. 2001; 21: 262 – 269. [PubMed]
  • Becker C, Zeau B, Rivat C, Blugeot A, Hamon M, Benoliel JJ. Endurtekin félagsleg ósigur af völdum þunglyndis eins og hegðunar- og líffræðilegar breytingar á rottum: þátttaka kólecystokiníns. Mol geðlækningar. 2008; 13: 1079 – 1092. doi: 10.1038 / sj.mp.4002097. [PubMed] [Cross Ref]
  • Belcheva I, Belcheva S, Petkov VV, Petkov VD. Ósamhverfa í hegðunarviðbrögðum við kólecystokiníni ör sprautað í rottum kjarna accumbens og amygdala. Neuropharmology. 1994; 33: 995 – 1002. doi: 10.1016 / 0028-3908 (94) 90158-9. [PubMed] [Cross Ref]
  • Benoliel JJ, Bourgoin S, Mauborgne A, Pohl M, Legrand JC, Hamon M, Cesselin F. GABA, sem starfar við bæði GABAA og GABAB viðtaka, hindrar losun kólecystokinínlíkra efna úr rauðra mænu in vitro. Brain Res. 1992; 590: 255 – 262. doi: 10.1016 / 0006-8993 (92) 91103-L. [PubMed] [Cross Ref]
  • Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Nauðsynlegt hlutverk BDNF í mesólimbískum dópamínleiðum í félagslegu ósigri streitu. Vísindi. 2006; 311: 864 – 868. doi: 10.1126 / vísindi.1120972. [PubMed] [Cross Ref]
  • Berton O, Covington HE, 3rd, Ebner K, Tsankova NM, Carle TL, Ulery P, Bhonsle A, Barrot M, Krishnan V, Singewald GM, Singewald N, Birnbaum S, Neve RL, Nestler EJ. Innleiðing ofFosB í gráu gráu (periaqueductal grey) með streitu stuðlar að virkum viðbragðsviðbrögðum. Neuron. 2007; 55: 289 – 300. doi: 10.1016 / j.neuron.2007.06.033. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bewernick BH, Hurlemann R, Matusch A, Kayser S, Grubert C, Hadrysiewicz B, Axacher N, Lemke M, Cooper-Mahkorn D, Cohen MX, Brockmann H, Lenartz D, Sturm V, Schlaepfer TE. Nucleus accumbens djúpt heilaörvun minnkar einkunnir um þunglyndi og kvíða í meðferðarþolnu þunglyndi. Líffræðileg geðlækningar. 2010; 67: 110 – 116. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.09.013. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bradwejn J, Koszycki D, Shriqui C. Auka næmi fyrir kólecystokinín tetrarapeptíði við panikaröskun: klínískar og atferlislegar niðurstöður. Arch Gen geðlækningar. 1991; 48: 603 – 610. doi: 10.1001 / archpsyc.1991.01810310021005. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bremner JD. Skemmir streita heilann? Líffræðileg geðlækningar. 1999; 45: 797 – 805. doi: 10.1016 / S0006-3223 (99) 00009-8. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bremner JD. Áfallastreitur: áhrif á heilann. Samræður Clin Neurosci. 2006; 8: 445 – 461. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  • Bremner JD. Taugamyndun við áfallastreituröskun og aðra streitu tengda kvilla. Neuroimaging Clin North North. 2007; 17: 523 – 538. doi: 10.1016 / j.nic.2007.07.003. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Britt JP, Benaliouad F, McDevitt RA, Stuber GD, Wise RA, Bonci A. Synaptic og atferlissnið margra glutamatergic inntak til kjarna accumbens. Neuron. 2012; 76: 790 – 803. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Burgos-Robles A, Bravo-Rivera H, Quirk GJ. Prelimbic og infralimbic taugafrumur gefa til kynna greinilega þætti matarlystinnar hegðunar. PLoS Einn. 2013; 8: e57575. doi: 10.1371 / journal.pone.0057575. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Chen Q, Nakajima A, Meacham C, Tang YP. Hækkaður gallblöðrubólgueyðandi tónur er mikilvægur sameinda / taugakerfi fyrir tjáningu kvíða í músinni. Proc Natl Acad Sci US A. 2006; 103: 3881 – 3886. doi: 10.1073 / pnas.0505407103. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Choi DC, Gourley SL, Ressler KJ. Prelimbic BDNF og TrkB merkjanir stjórna samþjöppun bæði matarlyndis og andstyggilegs tilfinningalegrar náms. Þýddu geðlækningar. 2012; 2: e205. doi: 10.1038 / tp.2012.128. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Christoffel DJ, Golden SA, Dumitriu D, Robison AJ, Janssen WG, Ahn HF, Krishnan V, Reyes CM, Han MH, Ables JL, Eisch AJ, Dietz DM, Ferguson D, Neve RL, Greengard P, Kim Y, Morrison JH , Russo SJ. IκB kínasi stjórnar félagslegum ósigri af völdum synaptísks og hegðunarplastgervis. J Neurosci. 2011; 31: 314 – 321. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4763-10.2011. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Kikusui T, Goodhue J, Nikulina EM, Hammer RP, Jr, Miczek KA. Stutt félagslegt ósigur streita: langvarandi áhrif á töku kókaíns meðan á binge stóð og zif268 mRNA tjáning í amygdala og prefrontal heilaberki. Neuropsychopharmology. 2005; 30: 310 – 321. doi: 10.1038 / sj.npp.1300587. [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Þunglyndislyf áhrif optogenetic örvun á miðtaugum forstilla barka. J Neurosci. 2010; 30: 16082 – 16090. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Maze I, Sun H, Bomze HM, DeMaio KD, Wu EY, Dietz DM, Lobo MK, Ghose S, Mouzon E, Neve RL, Tamminga CA, Nestler EJ. Hlutverk fyrir bælingu histónmetýleringu í viðkvæmni vegna kókaíns vegna streitu. Neuron. 2011; 71: 656 – 670. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.007. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • de Montigny C. Kólecystokinin tetrapeptíð veldur ofsóknarlíkum árásum hjá heilbrigðum sjálfboðaliðum: bráðabirgðaniðurstöður. Arch Gen geðlækningar. 1989; 46: 511 – 517. doi: 10.1001 / archpsyc.1989.01810060031006. [PubMed] [Cross Ref]
  • De Witte P, Heidbreder C, Roques B, Vanderhaeghen JJ. Andstæð áhrif kólecystokinín oktapeptíðs (CCK-8) og tetrapeptíðs (CCK-4) eftir inndælingu í varma hluta kjarnastærðanna eða í rostral hluta þess og í heila sleglum. Neurochem Int. 1987; 10: 473 – 479. doi: 10.1016 / 0197-0186 (87) 90074-X. [PubMed] [Cross Ref]
  • Diorio D, Viau V, Meaney MJ. Hlutverk miðlæga forstillta heilaberkisins (cingulate gyrus) við stjórnun svörunar við undirstúku-heiladinguls-nýrnahettum við streitu. J Neurosci. 1993; 13: 3839 – 3847. [PubMed]
  • Drevets WC. Taugakerfisrannsóknir og taugakvillarannsóknir á þunglyndi: áhrif á vitsmunalegan og tilfinningalegan eiginleika skapraskana. Curr Opin Neurobiol. 2001; 11: 240 – 249. doi: 10.1016 / S0959-4388 (00) 00203-8. [PubMed] [Cross Ref]
  • Fales CL, Barch DM, Rundle MM, Mintun MA, Snyder AZ, Cohen JD, Mathews J, Sheline YI. Breytt tilfinningatruflunarvinnsla í ástandi og vitsmunalegum stjórnunarheilum í heilaþunglyndi. Líffræðileg geðlækningar. 2008; 63: 377 – 384. doi: 10.1016 / j.biopsych.2007.06.012. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Fales CL, Barch DM, Rundle MM, Mintun MA, Mathews J, Snyder AZ, Sheline YI. Þunglyndislyfjameðferð jafnvægir ofvirkni í dorsolateral forrontale heilaberki við vinnslu á tilfinningalegum truflunum við meiriháttar þunglyndi. J Áhyggjuleysi. 2009; 112: 206 – 211. doi: 10.1016 / j.jad.2008.04.027. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Feder A, Nestler EJ, Charney DS. Sálfræði og sameinda erfðafræði seiglu. Nat séraungur. 2009; 10: 446 – 457. doi: 10.1038 / nrn2649. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Gallopin T, Geoffroy H, Rossier J, Lambolez B. Cortical uppsprettur CRF, NKB, og CCK og áhrif þeirra á pýramýda frumur í nýfrumulaga. Cereb Cortex. 2006; 16: 1440 – 1452. doi: 10.1093 / cercor / bhj081. [PubMed] [Cross Ref]
  • Grubert C, Hurlemann R, Bewernick BH, Kayser S, Hadrysiewicz B, Axacher N, Sturm V, Schlaepfer TE. Taugasálfræðilegt öryggi kjarna býr til djúpa heilaörvun vegna meiriháttar þunglyndis: áhrif 12 mánaða örvunar. Heimur J Biol geðlækningar. 2011; 12: 516 – 527. doi: 10.3109 / 15622975.2011.583940. [PubMed] [Cross Ref]
  • Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. Δ FosB mótar mismunandi aðgerðir kjarna accumbens beina og óbeina ferli. Proc Natl Acad Sci US A. 2013; 110: 1923 – 1928. doi: 10.1073 / pnas.1221742110. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Gygi SP, Rochon Y, Franza BR, Aebersold R. Fylgni milli próteins og mRNA gnægðar í geri. Mol Cell Biol. 1999; 19: 1720 – 1730. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  • Heidbreder CA, Groenewegen HJ. Miðlæga forstilltu heilaberki í rottum: vísbending um aðgreining á dorso-ventral byggð á virkni og líffærafræðilegum eiginleikum. Neurosci Biobehav séra 2003; 27: 555 – 579. doi: 10.1016 / j.neubiorev.2003.09.003. [PubMed] [Cross Ref]
  • Holson RR. Forstilla barkabólga í sermi og rakastig í rottum: I. Hvarfleysi við hvata áreiti. Physiol Behav. 1986; 37: 221 – 230. doi: 10.1016 / 0031-9384 (86) 90224-6. [PubMed] [Cross Ref]
  • Keedwell PA, Andrew C, Williams SC, Brammer MJ, Phillips ML. Taugatengsl svæfingar við alvarlegan þunglyndisröskun. Líffræðileg geðlækningar. 2005; 58: 843 – 853. doi: 10.1016 / j.biopsych.2005.05.019. [PubMed] [Cross Ref]
  • Kennedy SH, Giacobbe P. Meðferðarþolið þunglyndi: framfarir í líkamsmeðferð. Ann Clin geðlækningar. 2007; 19: 279 – 287. doi: 10.1080 / 10401230701675222. [PubMed] [Cross Ref]
  • Kennedy SH, Evans KR, Krüger S, Mayberg HS, Meyer JH, McCann S, Arifuzzman AI, Houle S, Vaccarino FJ. Breytingar á umbrotum glúkósa í heila mældar með jákvæðri geislamyndun posítrongeislunar eftir paroxetínmeðferð við meiriháttar þunglyndi. Am J geðlækningar. 2001; 158: 899 – 905. doi: 10.1176 / appi.ajp.158.6.899. [PubMed] [Cross Ref]
  • Krishnan V, Han MH, Graham DL, Berton O, Renthal W, Russo SJ, Laplant Q, Graham A, Lutter M, Lagace DC, Ghose S, Reister R, Tannous P, Green TA, Neve RL, Chakravarty S, Kumar A , Eisch AJ, Self DW, Lee FS, o.fl. Sameindaaðlögun sem liggur að baki næmi og ónæmi gegn félagslegum ósigri á umbunarsvæðum heila. Hólf. 2007; 131: 391 – 404. doi: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [PubMed] [Cross Ref]
  • Krishnan V, Nestler EJ. Sameinda taugalíffræði þunglyndis Náttúran. 2008; 455: 894 – 902. doi: 10.1038 / nature07455. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Lehmann ML, Herkenham M. Umhverfis auðgun veitir streituþol til félagslegrar ósigurs í gegnum ónæmisbólguháð taugafrumum. J Neurosci. 2011; 31: 6159 – 6173. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Leistedt SJ, Linkowski P. Brain, net, þunglyndi og fleira. Eur Neuropsychopharmacol. 2013; 23: 55 – 62. doi: 10.1016 / j.euroneuro.2012.10.011. [PubMed] [Cross Ref]
  • Mayberg HS, Lozano AM, Voon V, McNeely HE, Seminowicz D, Hamani C, Schwalb JM, Kennedy SH. Djúp heilaörvun fyrir þol gegn meðferð. Neuron. 2005; 45: 651 – 660. doi: 10.1016 / j.neuron.2005.02.014. [PubMed] [Cross Ref]
  • Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Nauðsynlegt hlutverk histónmetýltransferasa G9a í plasti af völdum kókaíns. Vísindi. 2010; 327: 213 – 216. doi: 10.1126 / vísindi.1179438. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • McClung CA, Nestler EJ. Reglugerð um genatjáningu og kókaínlaun hjá CREB og DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208 – 1215. doi: 10.1038 / nn1143. [PubMed] [Cross Ref]
  • Milad MR, Quirk GJ. Taugafrumur í miðlungs forstilltu heilaberki gefa merki um útrýmingu ótta. Náttúran. 2002; 420: 70 – 74. doi: 10.1038 / nature01138. [PubMed] [Cross Ref]
  • Nahas Z, Anderson BS, Borckardt J, Arana AB, George MS, Reeves ST, Takacs I. Tvíhliða utanþrýsting á forstilltu barksteri fyrir meðferðarþolið þunglyndi. Líffræðileg geðlækningar. 2010; 67: 101 – 109. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.08.021. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Nikulina EM, Arrillaga-Romany I, Miczek KA, Hammer RP., Jr Langvarandi breyting á byggingum mesocorticolimbic eftir endurtekið félagslegt ósigur streitu hjá rottum: tímaferli mRNA-viðtaka mRNA og FosB / DeltaFosB ónæmisvirkni. Eur J Neurosci. 2008; 27: 2272 – 2284. doi: 10.1111 / j.1460-9568.2008.06176.x. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Noble F, Roques BP. CCK-B viðtaki: efnafræði, sameindalíffræði, lífefnafræði og lyfjafræði. Prog Neurobiol. 1999; 58: 349 – 379. doi: 10.1016 / S0301-0082 (98) 00090-2. [PubMed] [Cross Ref]
  • Noble F, Wank SA, Crawley JN, Bradwejn J, Seroogy KB, Hamon M, Roques BP. Alþjóðasamband lyfjafræði: XXI. Uppbygging, dreifing og virkni kólecystokinín viðtaka. Pharmacol séra 1999; 51: 745 – 781. [PubMed]
  • Pérez de la Mora M, Hernandez-Gómez AM, Méndez-Franco J, Fuxe K. Cholecystokinin-8 hækkar K (+) - framkallað [3H] gamma-amínó smjörsýra losar í sneiðar frá ýmsum heila svæðum. Eur J Pharmacol. 1993; 250: 423 – 430. doi: 10.1016 / 0014-2999 (93) 90029-H. [PubMed] [Cross Ref]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Innleiðing δFosB í umbunartengdum heilauppbyggingum eftir langvarandi streitu. J Neurosci. 2004; 24: 10594 – 10602. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [Cross Ref]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Greinilegt mynstur DeltaFosB örvunar í heila með misnotkun lyfja. Synapse. 2008; 62: 358 – 369. doi: 10.1002 / syn.20500. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Radley JJ, Rocher AB, Miller M, Janssen WG, Liston C, Hof PR, McEwen BS, Morrison JH. Endurtekið álag hvetur til taps á hrygg í miðtaugum rauðkorna. Cereb Cortex. 2006; 16: 313 – 320. doi: 10.1093 / cercor / bhi104. [PubMed] [Cross Ref]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB miðlar ofnæmisaðgerðar á c-fos geninu eftir langvarandi útsetningu fyrir amfetamíni. J Neurosci. 2008; 28: 7344 – 7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Rezayat M, Roohbakhsh A, Zarrindast MR, Massoudi R, Djahanguiri B. Kólecystokinin og GABA samspil í hippocampus riddarans í rassi í hækkuðu plús-völundarhúsprófi kvíða. Physiol Behav. 2005; 84: 775 – 782. doi: 10.1016 / j.physbeh.2005.03.002. [PubMed] [Cross Ref]
  • Richard JM, Berridge KC. Framan á heilaberki mótar löngun og ótti sem myndast við truflun glutamats á kjarna accumbens. Líffræðileg geðlækningar. 2013; 73: 360 – 370. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.08.009. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Rotzinger S, Vaccarino FJ. Kólecystokinin viðtakategundir: hlutverk í mótun kvíðatengds og umbunartengds atferlis í dýralíkönum. J Geðlækningar Neurosci. 2003; 28: 171 – 181. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  • Schlaepfer TE, Cohen MX, Frick C, Kosel M, Brodesser D, Axacher N, Joe AY, Kreft M, Lenartz D, Sturm V. Djúp heilaörvun til að umbuna rafrásum léttir anhedonia í eldfastu þunglyndi. Neuropsychopharmology. 2008; 33: 368 – 377. doi: 10.1038 / sj.npp.1301408. [PubMed] [Cross Ref]
  • Sierra-Mercado D, Padilla-Coreano N, Quirk GJ. Órjúfanlegt hlutverk prelimbískra og innra limabarka, vöðva hippocampus og basolateral amygdala við tjáningu og útrýmingu skilyrta ótta. Neuropsychopharmology. 2011; 36: 529 – 538. doi: 10.1038 / npp.2010.184. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Silva MG, Boyle MA, Finger S, Numan B, Bouzrara AA, Almli CR. Hegðunaráhrif stórra sem smára meinsemda í miðhluta heilaberkis rottunnar. Exp Brain Res. 1986; 65: 176 – 181. [PubMed]
  • Somogyi P, Hodgson AJ, Smith AD, Nunzi MG, Gorio A, Wu JY. Mismunandi hópar GABAergic taugafrumna í sjónbarki og hippocampus köttar innihalda sómatostatín- eða kólecystokinin ónæmisaðgerðandi efni. J Neurosci. 1984; 4: 2590 – 2603. [PubMed]
  • Surget A, Tanti A, Leonardo ED, Laugeray A, Rainer Q, Touma C, Palme R, Griebel G, Ibarguen-Vargas Y, Hen R, Belzung C. Þunglyndislyf ráða nýjum taugafrumum til að bæta reglugerð um álagssvörun. Mol geðlækningar. 2011; 16: 1177 – 1188. doi: 10.1038 / mp.2011.48. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Taniguchi H, He M, Wu P, Kim S, Paik R, Sugino K, Kvitsiani D, Fu Y, Lu J, Lin Y, Miyoshi G, Shima Y, Fishell G, Nelson SB, Huang ZJ. Auðlind Cre reklalína fyrir erfðamiðun GABAergic taugafrumna í heilaberkinum. Neuron. 2011; 71: 995 – 1013. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.07.026. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Teyssier JR, Ragot S, Chauvet-Gélinier JC, Trojak B, Bonin B. Virkjun DeltaFOSB-háðs genatjáningarmynstra í dorsolateral forrontale heilaberki sjúklinga með alvarlega þunglyndisröskun. J Áhyggjuleysi. 2011; 133: 174 – 178. doi: 10.1016 / j.jad.2011.04.021. [PubMed] [Cross Ref]
  • Tsankova NM, Berton O, Renthal W, Kumar A, Neve RL, Nestler EJ. Viðvarandi hippocampal krómatín reglugerð í músamódeli fyrir þunglyndi og þunglyndislyf. Nat Neurosci. 2006; 9: 519 – 525. doi: 10.1038 / nn1659. [PubMed] [Cross Ref]
  • Tye KM, Prakash R, Kim SY, Fenno LE, Grosenick L, Zarabi H, Thompson KR, Gradinaru V, Ramakrishnan C, Deisseroth K. Amygdala brautir sem miðla til baka og tvíátta stjórn á kvíða. Náttúran. 2011; 471: 358 – 362. doi: 10.1038 / nature09820. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolaños CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA, o.fl. DeltaFosB í umbunarbrautum heila miðlar seiglu við streitu og svörun þunglyndislyfja. Nat Neurosci. 2010; 13: 745 – 752. doi: 10.1038 / nn.2551. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Vogt BA, Finch DM, Olson CR. Hagnýtur ólíkleiki í cingulate heilaberki: fremri framkvæmdasvið og matsvæði. Cereb Cortex. 1992; 2: 435 – 443. doi: 10.1093 / cercor / 2.6.435-a. [PubMed] [Cross Ref]
  • Wilkinson MB, Xiao G, Kumar A, LaPlant Q, Renthal W, Sikder D, Kodadek TJ, Nestler EJ. Meðferð á imipramíni og seiglu sýnir svipaða krómatín reglugerð í músarkjarnanum í þunglyndislíkönum. J Neurosci. 2009; 29: 7820 – 7832. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0932-09.2009. [PMC ókeypis grein] [PubMed] [Cross Ref]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB örvun í heilaberki utan sporbrautar miðlar umburðarlyndi gagnvart vitrænu starfi vegna kókaíns. J Neurosci. 2007; 27: 10497 – 10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [Cross Ref]
  • Yaksh TL, Furui T, Kanawati IS, Go VL. Losun kólsystokíníns frá heilabarki í rottum in vivo: hlutverk GABA og glútamatsviðtakakerfa. Brain Res. 1987; 406: 207 – 214. doi: 10.1016 / 0006-8993 (87) 90784-0. [PubMed] [Cross Ref]
  • Zanoveli JM, Netto CF, Guimarães FS, Zangrossi H., Jr Almennar og innri baksjávar grátt inndælingar af kolecystokininsúlfati oktapeptíði (CCK-8s) framkalla læti eins svörunar hjá rottum sem lagðar voru til hækkaðs T-völundarhúss. Peptíð. 2004; 25: 1935 – 1941. doi: 10.1016 / j.peptides.2004.06.016. [PubMed] [Cross Ref]