Orexin miðlar upphaf kynferðislegrar hegðunar hjá kynferðislega óvæntum karlkyns rottum, en er ekki mikilvægt fyrir kynferðislega afköst (2011)

Horm Behav. Handrit höfundar; fáanlegt í PMC 2011 ágúst 1.

Birt í lokaskýrdu eyðublaði sem:

PMCID: PMC2917508

Endanleg útgáfa útgáfunnar af þessari grein er aðgengileg kl Horm Behav

Sjá aðrar greinar í PMC sem vitnar birt grein.

Fara til:

Abstract

The undirstúku taugapeptíð orexin miðlar vakning, svefn og náttúrulega gefandi hegðun, þ.mt fæðuinntöku. Kynhegðun karlkyns er breytt af orexin viðtaka-1 örvum eða mótlyfjum, sem bendir til hlutverki orexin-A í þessari náttúrulega gefandi hegðun. Hins vegar er sérstakt hlutverk innræns orexin-A eða B í mismunandi þáttum kynferðislegrar hegðunar karlmanna eins og er. Þess vegna notuðu núverandi rannsóknir merki til að virkja tauga og orexin frumusértækar sár til að prófa tilgátuna um að orexin skipti sköpum fyrir kynferðislega hvatningu og frammistöðu hjá karlkyns rottum. Í fyrsta lagi var sýnt fram á cFos tjáningu í orexin taugafrumum eftir framsetningu á móttækilegri eða ómóttækri konu án frekari virkjunar með mismunandi þáttum í pörun. Næst var virk hlutverk orexins prófað með því að nota orexin-B samtengd saporín, sem leiddi til meinsemda orexin frumna í undirstúkunni. Meinsemdir voru gerðar á kynferðislegum naumum körlum og kynferðisleg hegðun í kjölfarið var skráð í fjórum mökunarprófum. Karlar á meinsemd sýndu stytt leynd til að aukast og skyggja á fyrstu, en ekki síðari pörunartilraunum, sem bentu til þess að meinsemdir auðvelduðu upphaf kynferðislegrar hegðunar hjá kynlífi en ekki reyndum körlum. Sömuleiðis höfðu sár ekki áhrif á kynferðislega hvatningu hjá reyndum körlum, ákvörðuð með flugbrautarprófum. Að lokum sýndu hækkuð plús völundarhúsarannsóknir minnkaða kvíða svipaða hegðun hjá illsköpuðum körlum, sem studdu hlutverk orexíns í kvíða sem tengdist fyrstu útsetningu kvenkyns hjá ungum dýrum. Á heildina litið sýna þessar niðurstöður að orexin er ekki mikilvægt fyrir kynferðislega frammistöðu eða hvatningu karla, en getur haft hlutverk í örvun og kvíða sem tengist kynferðislegri hegðun hjá barnlausum dýrum.

Leitarorð: orexin, hypocretin, kynhegðun, meðhöndlun, taugavirkjun, hvatning, undirstúku, nýjung, örvun, kvíði

Hvernig gengur lífið dag frá degi? Er það í jafnvægi og allt eins og það á að vera? Er jafnvægi hvort sem litið er á veraldlega stöðu eða andlega? Lífið er eins og það er. Það er ekki alltaf sólskyn. Það koma reglulega lægðir með rok og rigningu. Við vitum að í heildar samhenginu er lægð hluti af vistkerfi að leita að jafnvægi. Stundum erum við stödd í miðju lægðarinnar. Þar er logn og gott veður, sama hvað gengur á þar sem stormurinn er mestur. Sama lögmál gildir varðandi þitt eigið líf. Ef þú ert í þinn miðju, þínum sannleik þá heldur þú alltaf jafnvægi átakalaust. Sama hvað gustar mikið frá þér þegar þú lætur til þín taka. Huldufólk hefur gefið okkur hugleiðslu sem hjálpar okkur að finna þessa miðju, finna kjarna okkar og sannleikann sem í honum býr. Þegar þú veist hver þú ert og hvers vegna þú ert hér, mun líf þitt vera í flæðandi jafnvægi. Hugleiðslan virkjar þekkinguna sem er í vitund jarðar og færir hana með lífsorkunni inn í líkama okkar. Þar skoðar hún hugsana og hegðunar munstrið og athugar hvort það myndar átakalausu flæðandi jafnvægi. Hinn möguleikinn er falskt jafnvægi sem hafa þarf fyrir að viðhalda með tilheyrandi striti, áhyggjum og ótta. Síðan leiðbeinir þessi þekking okkur að því jafnvægi sem er okkur eðlilegt. Við blómstrum átakalaust, líkt og planta sem vex átakalaut frá fræi í fullþroska plöntu sem ber ávöxt.

Orexin, einnig þekkt sem hypocretin, er undirstúku taugapeptíð mikilvægt fyrir fóðrun, (de Lecea o.fl., 1998; Sakurai o.fl.; 1998, Sakurai, 2006; Benoit o.fl., 2008) vakning og svefn (Chemelli o.fl., 1999; Lin et al., 1999, Sakurai, 2007; Furlong og Carrive, 2007; Furlong o.fl., 2009; Carter et al., 2009). Orexin taugafrumur eru staðsettar á hlið undirstúku svæðisins (LHA) og Kaliforníu dorsomedial undirstúku (PFA-DMH) og framleiða tvö taugapeptíð, orexin-A og B (de Lecea o.fl., 1998; Sakurai o.fl., 1998). Sýnt hefur verið fram á að orexín taugafrumur varpa til heilavirkja sem taka þátt í miðlun örvunar, þar með talið locus coeruleus, berklaæxli og peduculopontine tegmental nucleus (Peyron et al., 1998; Hagan o.fl., 1999; Horvath o.fl., 1999; Baldo o.fl., 2003). Orexin hefur einnig verið falið í umbun og hvatningu, sérstaklega tengt mat og misnotkun lyfja (Aston-Jones o.fl., 2009a; Aston-Jones o.fl., 2009bSýnt hefur verið fram á að og orexin taugafrumur vinna að því að umbuna skyldum heilauppbyggingum í mesólimbíska kerfinu, þar með talið ventral tegmental area (VTA) og nucleus accumbens (NAc) (Peyron et al., 1998; Fadel og Deutch, 2002; Martin et al., 2002; Baldo o.fl., 2003). Orexin taugafrumur eru virkjaðar með skilyrðum samhengisræðum sem tengjast mat og lyfjagjöf (Harris et al., 2005; de Lecea o.fl., 2006; Choi o.fl., 2010) og hefur verið sýnt fram á að það gegnir hlutverki í umbunatengdri fóðrunarhegðun (Choi o.fl., 2010). Ennfremur, í legi í meltingarfærum (ICV) eða gjöf orexin viðtakans 1 (ORX1) mótlyf í kviðarholi leiðir til minni hvata fyrir bragðgóðan mat (Thorpe o.fl., 2005; Nair o.fl., 2008) en ICV orexin-A gjöf getur sett þessa hvatningu á ný (Boutrel o.fl., 2005).

Hlutverk orexins í annarri gefandi hegðun er sem stendur óljóst, þó að nokkrar rannsóknir hafi haft í för með sér hlutverk orexin við stjórnun kynferðislegrar hegðunar hjá karlkyns rottum. Það hefur áður verið sýnt fram á að orexin taugafrumur eru virkjaðar með copulation í karlrottum (Muschamp et al., 2007). Að auki leiddi gjöf orexin-A inn á medial preoptic svæðið (mPOA) til aukinnar kynferðislegrar frammistöðu, sem sést af minni seinkun til að festa og skjóta, og aukinni tíðni festinga og gangs (Gulia o.fl., 2003). Aftur á móti, ICV gjöf orexin-A veikluð kynferðisleg hvatning með því að draga úr val kvenna, þó aðeins hjá mjög kynferðislega áhugasömum körlum (Bai o.fl., 2009). Rannsóknir sem nota ORX1 mótlyf hafa einnig sýnt fram á misvísandi gögn þar sem kerfisbundin gjöf ORX1 mótlyfja skerti kynferðislega frammistöðu með því að auka leynd á skynleysi án þess að hafa áhrif á aðra þætti kynferðislegrar hegðunar (Muschamp et al., 2007), meðan gjöf ICV ORX1 mótlyfja hafði engin áhrif á kynferðislega hvatningu (Bai o.fl., 2009). Samanlagt benda þessar rannsóknir til þess að gjöf utanaðkomandi orexin-A hafi áhrif á kynferðislega frammistöðu og hvata; samt getur innræn orexín ekki gegnt mikilvægu hlutverki við að miðla kynhegðun (Bai o.fl., 2009). Þess vegna var markmið þessarar rannsóknar að ákvarða hvort innræn orexín er nauðsynleg fyrir kynferðislega hvatningu og frammistöðu karlkyns rottu.

Í fyrsta lagi var ákvarðað hvenær orexin taugafrumur eru gerðar virkar meðan á kynlífi stendur, prófun á tilgátu um að orexin taugafrumur séu virkjaðar við kynningu á gefandi áreiti. Þar að auki, eins og sýnt hefur verið fram á að kynferðisleg reynsla hefur áhrif á kynferðislega frammistöðu (Dewsbury, 1969) og gefandi eiginleikar kynferðislegrar hegðunar (Tenk et al., 2009), var ákvarðað hvort kynferðisleg reynsla hafi áhrif á virkjun orexín taugafrumna við mökun. Að lokum var prófað hvort orexin gegnir mikilvægu hlutverki í kynferðislegri hvatningu og frammistöðu með því að nota frumuskemmdir á mein af orexin taugafrumum.

Efni og aðferðir

Fullorðnir karlkyns Sprague Dawley rottur (200 – 250g) voru fengnar frá Harlan (Indianapolis, IN) eða Charles River rannsóknarstofum (Sherbrooke, Quebec, Kanada) og hýstar hver fyrir sig eða í pörum, allt eftir einstökum tilraun (sjá neðar) í Plexiglas búrum. Nýlenduherberginu var haldið við 12 / 12 snúið ljós-dökkri hringrás (ljósin slökkt klukkan 10 am) og matur og vatn voru fáanleg ad libitum nema við hegðunarpróf. Kvenkyns Sprague-Dawley rottur voru fengnar frá Harlan (Indianapolis, IN) eða Charles River Laboratories (Sherbrooke, Quebec, Kanada) voru tvíhliða eggjastokkar og ígrædd undir húð með 5% 17-ß-estradiol bensóat kísilhylki. Kynhneigð var framkölluð með inndælingu af prógesteróni undir húð (500 μg í 0.1ml af sesamolíu) um það bil 4 klst. Fyrir pörunartímabil. Allar aðferðir voru samþykktar af dýraverndarnefndum við háskólann í Cincinnati og háskólanum í Vestur-Ontario og í samræmi við viðmiðunarreglur sem settar voru fram af heilbrigðisstofnuninni og kanadíska ráðinu um dýraumönnun. Allar hegðunarprófanir voru gerðar á fyrri hluta dimma fasans undir dauðu rauðu ljósi nema annað sé tekið fram.

Tilraunaverkefni

cFos tjáningarrannsóknir

Karlrottur (n = 48) voru hýstar hver fyrir sig og helmingur dýranna öðlaðist kynferðislega reynslu í búrinu á 5 tvisvar í viku við mökunartímabil. Pörpunarpróf voru framkvæmd í búrinu til að koma í veg fyrir örvun og tjáningu á cFos af völdum váhrifa á öðrum pörunarvettvangi og útsetningu fyrir skilyrðum vísbendingum sem tengjast fyrri pörun (Balfour et al., 2004). Móttækileg kona var kynnt í búrinu og karlar máttu parast þar til einn sáðlát eða í 60 mínútur. Við hvert próf kom fram kynhegðun. Allur fjöldi festinga og aðlögunar, svo sem seinkun á fyrsta festingu og innrás (tíminn frá kynningu á móttækilegu kvenkyni til fyrsta fjallsins eða innrásina), og sáðlát (tíminn frá fyrsta atriðinu til sáðlát), var tekinn upp (Agmo, 1997). Hinn helmingur dýranna hélst kynferðislega naiv. Þessi dýr voru til húsa í sama herbergi og kynferðislegir karlar, voru meðhöndlaðir og útsettir fyrir lykt og hljóðum sem tengjast parun, en paraði sig þó ekki. Naiv og reyndum dýrum var hvert frekar skipt í 6 tilraunahópa (n = 4 í hverjum hópi). 6 barnalegir og reynslumiklir hópar voru meðal annars: Stýrð karlar án útsetningar fyrir kynhegðun (heimabúr); karlar sem verða fyrir móttækilegri konu í búrinu í 15 mínútur (Anestrous Female). Karlar gátu rannsakað og haft samskipti, en paruðu sig ekki saman vegna skorts á móttækni kvenna; karlar sem verða fyrir lykt af móttækilegri kvenkyni sem komið er fyrir í vírnetakassa ofan á búrinu heima í 15 mínútur (Estrous Female); karlar sem sýndu festingar, en ekki tilfærslur eða sáðlát með kvenkyns grímukenndum konum (fjall); karlmenn sem sýndu eingöngu festingar og innskot (Intromission); og karlar sem paraðir voru við eina sáðlát (sáðlát). Einni klukkustund eftir lok prófsins var körlum fórnað til að greina tjáningu cFos. Samkynhneigðir hópar voru bornir saman við þætti kynhegðunar og enginn marktækur munur var á milli hópa fyrir lokaprófið. Þar að auki var enginn marktækur munur á milli barnalegra og reyndra hópa í fjölda fjallagerða auk tilfinningar í lokaprófinu.

Innbrot: cFos tjáning

Allir karlmenn voru svæfðir djúpt með natríum pentóbarbítóli (270 mg / ml) og voru fullkomlega blandaðir með 4% paraformaldehýð (500 ml; PFA). Í kjölfar perfusion gáma voru fjarlægðir strax og festir eftir eina klukkustund í sama lagfærandi lyfinu og síðan fluttir yfir í 20% súkrósa lausn til að verja krot. Gáfur voru settar á frystingu smáfrumu (Microm, Walldorf, Þýskaland) í kransæðahlutum af 35 um og safnað í 4 samsíða köflum í krypavarnarlausn (30% súkrósi í 0.1 M PB sem innihélt 30% etýlen glýkól og 0.01% natríum azíð) og geymd við −20 ° C þar til frekari vinnsla.

Immunohistochemistry

Allar ræktanir voru framkvæmdar við stofuhita með vægum hræringum. Fríir fljótandi hlutar voru þvegnir mikið með 0.1M saltvatni buffuðu natríumfosfati (PBS). Hlutum var læst með 1% H2O2 (30% stofnlausn) í PBS í 10 mínútur og síðan skolað mikið aftur með PBS. Þáttum var ræktað með ræktunarlausn (PBS sem innihélt 0.1% nautgripalbúmín í sermi og 0.4% Triton X-100) í 1 klukkustund. Aðal ræktun mótefna var framkvæmd í ræktunarlausninni yfir nótt við stofuhita. Eftir litun voru hlutar skolaðir í PBS, festir á plús hlaðnar glerskyggnur og hulið með díbútýlþtalat xýleni (DPX).

cFos / Orexin

Ein röð kafla var ónæmisaðgerð fyrir cFos og orexin. Hlutar voru ræktaðir yfir nótt með kanínu vakti mótefni sem þekktu cFos (and-cFos kanína, sc-52; 1: 10 000, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) og síðan með 1 klukkustundar ræktun með biotinylated geit gegn kanínu (1: 500: , Vector Laboratories, Burlingame, CA) og avidin piparrót peroxidase flókið (1: 1000, ABC Kit, Vector Laboratories, Burlingame, CA). Þáttum var ræktað í 10 mínútur í 0.02% díamínóbensidíni (DAB) (Sigma, St. Louis, MO) í 0.1M fosfat jafnalausn (PB) sem innihélt 0.012% vetnisperoxíð og 0.08% nikkel súlfat, sem leiddi til blá-svörtu hvarfafurðar. Hlutar voru síðan ræktaðir yfir nótt með kanínu vakti mótefni sem þekkja orexin-A (kanína gegn orexin-A, H-003 – 30; 1: 20 000, Phoenix Pharmaceuticals, Burlingame, CA) fylgt eftir með 1 klukkustundar ræktun með biotinylated geit gegn -rabbit og ABC, eins og lýst er hér að ofan. Að lokum voru hlutarnir ræktaðir í 10 mínútur með 0.02% DAB í 0.1M PB sem innihélt 0.012% vetnisperoxíð, sem leiddi til rauðbrún viðbragðsafurð.

Öll mótefni hafa einkennst áður (Chen et al., 1999; Satoh o.fl., 2004; Solomon o.fl., 2007). Ónæmisfræðilegir samanburðaraðgerðir innihéldu sleppingu á aðal mótefnum, western blot greining sem sýndi stakar bönd í viðeigandi þyngd (cFos) og tap á ónæmisheilbrigðilegu orexin merki með orexin B-saporin meinsemdum (orexin).

Data Analysis

cFos / Orexin

Taugafrumur merktar fyrir orexin eða orexin og cFos voru taldar tvíhliða í þremur dæmigerðum hlutum á hvert dýr sem vitað er að innihaldi hámarks fjölda óxxín taugafrumunnar (Sakurai o.fl., 1998) sem spannar −2.3 mm til −3.6 mm frá bregma (Paxinos og Watson, 1998) (Mynd 1), með því að nota teiknistöng sem fest var við Leica smásjá (Leica Microsystems; Wetzlar Þýskaland), af einstaklingi sem var blindaður við tilraunahópa. PFA-DMH og LHA voru afmörkuð út frá staðsetningu fornixsins (Mynd 1a). Prósentur af orexin taugafrumum sem tjáðu cFos voru reiknaðir og voru að meðaltali á hvert jarðarhorn fyrir hvert dýr og hópaðferðir voru reiknaðir út. Tölfræðileg marktækni milli hópa var ákvörðuð með því að nota tvíhliða ANOVA með kynferðislegri reynslu og kynhegðun meðan á lokaprófi stóð sem þættir sem fylgdu af LSD prófum Fishers með 95% öryggisstig.

Mynd 1 

Staðsetning orexin taugafrumna í undirstúku. (A) Líffræðileg staðsetning orexin taugafrumna í undirstúku. (Paxinos og Watson, 1998), Mælikvarði: 200 um. (B) Einstaklingsmerktar orexin taugafrumur í PFA-DMH hjá ómönnuðu samanburðardýri. (C) Orexin ...

Rannsóknir á meinsemdum Orexin

Skurðaðgerðir

Karlar voru hýstir hver fyrir sig og fengu eina mökunartíma fyrir prófið með móttækilegri konu fyrir meinsemd og skurðaðgerð. Kynferðisleg hegðun var skráð eins og lýst er hér að ofan og hópar voru jafnir saman á grundvelli breytinga á hegðun hegðunar. Karlrottur voru svæfðir með ísófúrani (Abbot Laboratories, St. Laurent, Quebec, Kanada) með því að nota Surgivet Isotec4 gasbúnað (Smiths Medical Vet Division, Markham, Ontario, Kanada) og sett í stereótaxísk tæki (Kopf Instruments, Tujunga, CA) með gasgrímu sem nær yfir nefið og munninn til að viðhalda deyfingu. Skurður var gerður til að afhjúpa hauskúpuna og lambda og bregma fundust og ákvörðuð að vera jöfn. Borað var gat í höfuðkúpuna með dremelbori (Dremel, Racine, WI) og gler örþrepum (40μm þvermál, World Precision Instruments Inc, Sarasota, FL) fyllt með markvissu eiturefni orexin-B saporin (IT-20, Advanced Miðunarkerfi, San Diego, CA; 200ng / µL í PBS); eða ómengað eiturefni BLANK-saporin (IT-21, Advanced Targeting Systems, San Diego, CA; 200ng / µL í PBS; skamstýringar) voru lækkaðir í undirstúku. Sýnt hefur verið fram á að þetta markvissa eiturefni binst með mikilli sækni í frumur sem tjá orexínviðtaka 2 (ORX2) og með verulega minni sækni í frumur sem tjá ORX1 (Gerashchenko o.fl., 2001), og hefur verið sýnt fram á að það þéttist orexin taugafrumum sérstaklega í undirstúku (Frederick-Duus o.fl., 2007). Tvíhliða innrennsli 1 µL (2 á heilahveli) var sprautað við eftirfarandi hnit: AP = −2.8 og −3.2; ML = 0.7 og 0.8; DV = −9.0 (Paxinos og Watson, 1998). Eftir hvert innrennsli var nálin látin vera á sínum stað í 3 mínútur til að leyfa dreifingu. Hægt var að fjarlægja nálar og sárum var lokað með sárumklemmum. Tveimur vikum eftir skurðaðgerð voru allir karlar prófaðir á kynferðislegri reynslu í fjórum mökunarrannsóknum og voru síðan látnir fara á flugbraut og / eða hækkað auk völundarhúsprófs (sjá neðar). Skurðaðgerðir voru gerðar í þremur mismunandi árgöngum, aðskildar með nokkrum vikum, til að ná nægilegum fjölda dýra í hverjum hópi.

Kynferðislegt hegðun

Allir karlar voru prófaðir á kynhegðun á 4 mökunartímum sem haldnir voru annan hvern dag í búrinu. Meðan á hverri lotu stóð voru karlar paraðir með móttækilegri konu við eina sáðlát eða í 60 mínútur, hvort sem kom fyrst. Parunarhegðun var skráð eins og lýst er hér að ofan og hagkvæmni við meðhöndlun var einnig reiknuð út [fjöldi tilfærslna / (fjöldi festinga + fjöldi tilfærslna)]. Tölfræðilegur munur á breytum á kynferðislegri frammistöðu var borinn saman á milli meinsemda og skammarhópa fyrir hverja rannsókn með því að nota aðra leiðina ANOVA með meinsemdaraðgerð sem þáttur og Fisher LSD próf með 95% öryggisstigi, eða þegar við á, prófanir sem ekki voru gerðar voru framkvæmdar með því að nota Kruskal-Wallis einstefna ANOVA með skurðaðgerð sem þáttur og próf Dunn með 95% öryggisstig. Að auki voru gögn fyrir hvern hóp borin saman við gögn fyrir skurðaðgerð með því að nota parað t-próf.

Kynferðisleg hvatning: flugbrautarpróf

Eftir prófun á kynferðislegri hegðun var undirhópur karlmanna, sem nú eru kynferðislega reyndir, prófaðir með tilliti til kynferðislegrar hvata með beinni flugbrautartæki (MED Associates Inc., St. Albans, VT) (120 cm að lengd; Lopez et al., 1999). Karlar voru að venja við flugbrautartækið í tveimur 10 mínútu rannsóknum sem fram fóru sama dag. Næst voru gerðar tvær prófanir. Meðan á fyrstu rannsókninni stóð var hvati dýra (estrous kvenkyns, svæfandi kvenkyns eða karlkyns) sett í markbox með rifgatuðum skiljum við lok flugbrautarinnar. Aðdáandi var notaður til að blása lykt áreiti dýranna gagnvart karlinum. Tilraunakarlar voru settir í upphafsboxið, hurðin var opnuð til að leyfa aðgang að flugbrautinni og tími til að komast í markakassann var skráður. Þegar menn höfðu náð markkassanum voru karlar gefnir 30 sekúndur til að hafa samskipti við áreiti dýrið á bak við skjáinn. Samhliða annarri rannsókn fylgdi 1 klukkustund síðar. Tölfræðileg þýðing milli tímanna til að ná markkassanum milli prufa 1 og rannsókn 2 voru greind með paruðum t-prófum með 95% öryggisstig. Tölfræðileg marktækni milli hópa var ákvörðuð með því að nota aðra leið ANOVA við skurðaðgerð sem þáttur fylgt eftir með Fisher LSD prófum með 95% öryggisstig.

Kvíða-eins og hegðun: Elevated Plus Maze

Undirhópur karlmanna sem nú eru kynferðislega reyndur var með tilliti til kvíða eins og hegðun til að ákvarða hvort áhrif orexínskemmda á kynferðislega frammistöðu eða hvata væru vegna breytinga á kvíða eða örvun. Karlar voru útsettir fyrir upphækkuðu plús völundarhússtækinu (EPM; MED Associates Inc., St. Albans, VT) í björtu upplýstu herbergi í lok ljóssins. EPM samanstóð af 4 handleggjum hver 50 cm að lengd sem náði frá miðlæga mótum og var hækkaður 75 cm. Tveir handleggir völundarhússins voru opnir að utanverðu umhverfi og hinir tveir voru lokaðir með dökkum siding 40 cm á hæð. Dýr voru sett á EPM og fylgst með í fimm mínútur. Tímanum var eytt í opnum og lokuðum handleggjum, og heildarfjöldi færslna í hvern handlegg var skráður með ljósgeislalínum. Tölfræðileg marktækni milli hópa var ákvörðuð með því að nota einstefna ANOVA með meinsemd sem þáttur fylgt eftir með Fisher LSD prófum með 95% öryggisstig.

Innbrot og cFos vegna parunar

Eftir alla hegðunarpróf voru allir karlar svæfðir djúpt með natríum pentóbarbítóli (270mg / ml) og þeir voru blandaðir af hjartalínuriti með 500 ml af 4% PFA til að staðfesta sár eins og áður hefur verið lýst. Að auki, til að prófa áhrif orexinskemmda á cFos tjáningu sem paraðist, paruðu hópar af svindli og meinsemd þar til ein sáðlát. Einni klukkustund eftir sáðlát voru karlmenn blandaðir af hjartalínuriti með 4% PFA eins og lýst er hér að ofan. Helmingur karlanna í þessum hópi var ekki kynntur fyrir kvenkyni og var blandað út úr búrinu til að þjóna sem ómönnuð eftirlit.

Immunohistochemistry

Gáfur voru settar í snið með því að frysta míkrómóm í 4 samsíða röð af 35 um kransæðahlutum og geymdir eins og lýst er hér að ofan. Til að sannreyna meinsemd var ein röð hluta sem innihélt undirstúku úr öllum tilraunum með meinsemd einn merkt fyrir orexin með sömu kanínu and-orexin-A og DAB samskiptareglum sem lýst er hér að ofan. Ein röð af köflum úr dýrunum sem paruðust var litað fyrir cFos og orexin eins og lýst er hér að ofan.

Sannprófun

Hjá hverju dýri voru fjöldi orexin taugafrumna ónæmisaðgerð fyrir orexin taldir tvíhliða í PFA-DMH og LHA í 3 hlutum sem tjáðu hámarksfjölda orexinfrumna í stjórntækjum án skurðaðgerða, −2.3 mm til −3.6 mm frá bregma eins og lýst er hér að ofan. Frumur á heilahveli voru að meðaltali fyrir hvert dýr og hópaðferðir voru reiknaðar. Eftirlitsdýr utan skurðaðgerðar (úr cFos tilraunum) voru notuð til að ákvarða ósnortinn / grunngildi fjölda orexín taugafrumna og gögn eru gefin upp sem prósentur miðað við karlmenn sem ekki hafa verið með skurðaðgerð (Mynd 2). Karlar sem voru með færri en 20% orexinfrumur samanborið við samanburðardýr sem ekki voru skurðaðgerðir voru með í meinhópnum. Dýr með meira en 20%, en færri en 80% voru með í hluta skaðahóps. Eftirlit með svívirðingum hafði ekki marktækar breytingar á fjölda orexinfrumna. Tölfræðileg marktækni milli skammta, hluta og fullkomins sársdýrs var reiknuð með því að nota aðra leiðina ANOVA og Fisher LSD próf með 95% öryggisstigi.

Mynd 2 

Sannprófun. Fulltrúar myndir sem sýndu orexin (A) og MCH (B) frumur í dýrum með skemmdarverk sem sprautað var með BLANK-saporin. Fulltrúar myndir sem sýna tap á orexinfrumum (C), en ósnortnar MCH frumur (D) í meinsemdardýri sprautað með orexin ...

Sérstaða skaða

Til að sannreyna að meinsemdir væru takmarkaðar við orexin taugafrumur var ein röð hluta sem innihéldu undirstúku frá undirhópi af svindli og meinsemdardýrum (n = 20) ónæmisvinnandi fyrir melanósýt-einbeitingarhormón (MCH), undirstúku peptíð sem hefur skarast stað (en engin colocalization) með orexin taugafrumum (Broberger o.fl., 1998), með því að nota kanína vakt mótefni sem þekkja MCH (kanína gegn MCH, H-070-47; 1: 150 000, Phoenix Pharmaceuticals, Burlingame, CA) og DAB eins og áður hefur verið lýst. MCH taugafrumur tjá ORX1 (Bäckberg o.fl., 2002) en ekki ORX2 (Volgin o.fl., 2004), og eru ekki marktækt skertar eftir meðferð með orexin B-saporin (Frederick-Duus o.fl., 2007). MCH ónæmisviðbragðsfrumur voru taldar tvíhliða í tveimur hlutum á hvert dýr (skammar: n = 7; meinsemd n = 5), með því að nota aðra hluta til þeirra sem greindir voru fyrir orexín taugafrumum. Sár minnkuðu ekki marktækt fjölda MCH taugafrumna í hvorki PFA-DMH né LHA (Tafla 1; Mynd 2b, d; PFA-DMH: p = 0.47; LHA: p = 0.33). Ennfremur var cFos tjáning við parun talin tvíhliða í einum dæmigerða hluta á hvert dýr (skammar: n = 4; meinsemd n = 3), með því að nota aðra hluta til þeirra sem greindir voru fyrir orexín taugafrumum. Sár höfðu ekki áhrif á cFos tjáningu sem tengdist pörun í PFA-DMH eða LHA (Tafla 1; PFA-DMH: p = 0.53; LHA: p = 0.82). Að lokum voru dæmigerðir hlutar, sem notaðir voru við fjölda orexinfrumna (dýr: skammar: n = 6; meinsemd: n = 6), Nissl talið með kresýlfjólubláu (5 g kresýlfjólubláu asetati (C-5042, Sigma, St. Louis, MO), 0.5 g af natríumasetatþríhýdrati (S209, Thermo Fisher Scientific, Ottawa, Ontario, Kanada), 1L tvöfalt eimað vatn með ísedik (AX0073-6, EMD Chemicals, Mississauga, Ontario, Kanada) við pH: 3.14). Talningar af Nissl lituðum taugafrumum voru gerðar á stöðluðum greiningarsvæðum (250 um × 200 um) á almennum stað orexin taugafrumna. Fjöldi Nissl-lituðra taugafrumna var ekki munur á milli skammta og meinsemdahópa (Tafla 1; PFA-DMH: p = 0.23; LHA: p = 0.33).

Tafla 1 

Sannprófun á sértækum meinsemdum: Greining á fjölda taugafrumna litað fyrir Nissl, MCH eða mökun af völdum cFos sýndi fram á að ekki var marktækt tap á taugafrumum almennt, MCH frumur, eða mökun örvuð taugavirkjun í PFA-DMH eða ...

Þar sem sýnt hefur verið fram á að skortur á orexíni stuðlar að narcolepsy hjá músum (Chemelli o.fl., 1999), hundar (Lin et al., 1999) og menn (Siegel, 1999; Nishino et al., 2000; Peyron et al., 2000; Thannickal o.fl., 2000) dýr sáust til að tryggja fjarveru narcoleptic svipgerð. Dýr sáust meðan á öllum hegðunarprófum var greint frá í þessari rannsókn og sýndu engin einkenni narcolepsy.

Parun völdum cFos tjáningu hjá skemmdar dýrum

Fjöldi cFos-ónæmisaðgerðafrumna voru taldar tvíhliða í 3 hlutum á hvert dýr á stöðluðum greiningarsvæðum á ventral tegmental svæðinu (VTA; 900 × 900 um), mPOA (400 × 600 um); nucleus accumbens (NAc) kjarna og skel (400 × 600 µm) og prelimbic, infralimbic og fremri cingulate undirsvæði miðlæga forrétthyrndar heilaberkisins (mPFC) (600 × 800 µm á hverja undirsvæði) með því að vera blindaður til tilraunahópa . Talningar voru að meðaltali fyrir hvert dýr og hópaðferðir voru reiknaðir. Tölfræðileg marktækni var reiknuð út með því að nota tvíhliða ANOVA með kynferðislegri reynslu og meinsemd sem þáttum fylgt eftir með LSD próf Fishers með 95% öryggisstig.

Niðurstöður

Örexín örvun taugafrumna við kynhegðun

Veruleg aukning á tjáningu cFos í orexin taugafrumum sást í kjölfar kynhegðunar bæði í PFA-DMH (F(5,31) 63.4; p <0.001; Mynd 3a) og LHA (F(5,31) 10.4; p <0.001; Mynd 3b), án áhrifa af kynferðislegri reynslu. Sérstaklega, bæði hjá kynlífi og reyndum dýrum, sýndu allir tilraunahópar karla sem sýndu mismunandi þætti kynhegðunar (rannsókn á svæfandi kvenkyni, útsetning fyrir estrískri kvenlykt, sýning á uppbyggingu, hvítblæstri eða sáðlát) sýndi jafna framkalla cFos miðað við heima búrstýringar með hærra hlutfall af orexinfrumum virkjuðum í PFA-DMH (60 – 80%) á móti LHA (14 – 33%), án þess að munur væri á tilraunahópunum. Þessar niðurstöður benda til þess að orexin taugafrumur séu virkjaðar í kjölfar útsetningar fyrir kvenkyns áreiti án frekari örvunar meðan á kynlífi stendur. Ennfremur er örvunin ekki háð hvatningu í kvenkyns áreiti þar sem bæði konur sem ekki eru móttækilegar og móttækilegar örvuðu örvun hjá kynferðislegum körlum.

Mynd 3 

Orexin taugafrumur í PFA-DMH (A) og LHA (B) tjáðu cFos eftir öllum breytum á hegðunarhegðun hjá naívum og reyndum dýrum. Skammstafanir: HC, búr; AF: svæfandi kona; EF, glæsileg kona; M, fjall; IM, Intromission; E, sáðlát. ...

Áhrif orexínskemmda

Kynferðislegt hegðun

Orexínskemmdir urðu til þess að auðvelda kynferðislega hegðun (mount latency: F(2,47) 3.962; p = 0.034; tímabundið brot á innrás: H = 9.104; p = 0.011). Í fyrstu reynslunni á pörun sýndu karlar á skemmdum styttri biðtíma til að festa sig og fara í gegnum borið samanborið við dýr úr svindli (tengibreyting: p = 0.03; biðleysi: p = 0.01; Mynd 4a – b) og borið saman við dvalartímabil í samanburðarrannsókninni fyrir skurðaðgerð (mount latency: p = 0.02; intromission latency: p = 0.03; Gögn ekki sýnd). Hanskildir karlmenn voru ekki frábrugðnir marktækt frá karlkyns svindlum og hvorugur hópurinn var frábrugðinn mökunarrannsókninni fyrir skurðaðgerð. Áhrif sársauka á dvalartíðni og sveifluköstum dró úr kynferðislegri reynslu, þar sem enginn munur var á milli hópa, í neinum af síðari rannsóknum (rannsókn 4 sýnt í Mynd 4a – b). Tími til sáðláts (Mynd 4c), fjöldi festinga (Mynd 4d) og fyrirgjöf (Mynd 4e) sem og hagkvæmni við afritun (Mynd 4f) ekki marktækt munur á milli hópa í neinum af rannsóknunum eða innan hvers hóps milli fyrstu mökunarprófsins og fyrir skurðaðgerðarprófsins.

Mynd 4 

Orexínskemmdir styttu dvalartímabil til að aukast og innrennsli hjá kynferðislegum barnalegum körlum meðan á rannsókn 1 stóð. Orexínskemmdir höfðu ekki áhrif á pörun meðan á rannsókn 4 stóð eftir að karlar fengu kynferðislega reynslu. (A) Mount Latency. (B) Intromission Latency. (C) sáðlát ...
Flugbrautarpróf

Orexínskemmdir höfðu ekki áhrif á kynferðislega hvatningu sem metin var í beinu flugbrautarprófi hjá kynferðislegum körlum. Í tveimur prófunarrannsóknum runnu húðskemmdir marktækt hraðar í átt að estru kvenkyni í annarri rannsókninni samanborið við fyrstu rannsóknina (p = 0.03; Mynd 5). Slíkur aukningartími er til marks um kynferðislega hvatningu (Lopez et al., 1999). Hlutskemmdir og karlkyns svindlarar hlupu einnig hraðar í átt að estru kvenkyni meðan á rannsókn 2 stóð (p = 0.03), þó að þetta náði ekki marktækni hjá karlkyns svindlum (p = 0.052). Enginn hópanna sýndi aukinn hraða til að hlaupa í átt að svæfandi konu eða karli meðan á rannsókn 2 stóð. Ennfremur sást enginn marktækur munur á svindlum, hlutum og meinsemdum á hraða til að hlaupa í átt að hvati dýra á hvorki rannsókn 1 né rannsókn 2, sem sýndu fram á skort á mismun á almennri virkni á flugbrautinni.

Mynd 5 

Orexínskemmdir höfðu ekki áhrif á kynferðislega hvatningu hjá körlum sem höfðu kynferðislega reynslu. Sýnt er að tímar eru til að ná estrous kvenkyni í flugbrautarprófinu í báðum rannsóknum 1 og 2. * bendir til marktækrar minnkunar tíma til að ná konunni í rannsókn 2 samanborið við ...
Kvíða lík hegðun

Niðurstöður hingað til benda til þess að meinsemdir geti auðveldað upphaf kynhegðunar hjá nautum dýrum með hugsanlegum áhrifum á viðbrögð við nýjungar og / eða kvíða lík hegðun þegar karlarnir lenda í nýrri kvenkyni. Til stuðnings sýndu karlar á meinsemd minnkaða kvíða svipaða hegðun á EPM, litið á minnkað hlutfall tíma í lokuðum handleggjum, (p = 0.012; Mynd 6) og aukið hlutfall tíma á opnum örmum (p = 0.023; Mynd 6) miðað við karlkyns svindl. Húðskemmdir höfðu engin marktæk áhrif. Þessar upplýsingar styðja ennfremur að meinsemd minnkaði kvíða lík hegðun.

Mynd 6 

Orexínskemmdir minnkuðu kvíðaveik hegðun á hækkuðu plús völundarhúsi. Hlutfall tíma í lokuðum handleggjum (vinstri) var minnkað og hlutfall tíma í opnum örmum (til hægri) var aukið hjá meinsemdum körlum. * gefur til kynna verulegan mun ...
cFos tjáning

Til að meta hvort innræn orexín stuðlar að því að parast af völdum taugafrumumörvunar á hexasvæðum í orexin, var gerð greining á cFos tjáningu sem parað var í VTA, NAc kjarna og skel, mPOA og mPFC. Hjá bæði húðskemmdum og karlkyns karlmönnum jókst parun verulega cFos á öllum greindu heila svæðum samanborið við ómælda samanburði (Tafla 2). Sár höfðu ekki áhrif á taugavirkjun, þar sem dýr og skemmdir voru ekki frábrugðin cFos tjáningu í upphafi eða við parun.

Tafla 2 

Parun olli cFos í svívirðingum, hlutahópum og meinsemdahópum samanborið við stýringu sem ekki var parað við sömu sársstöðu.

Discussion

Þessar rannsóknir rannsökuðu hlutverk innræns orexins í kynferðislegri frammistöðu og hvatningu hjá karlkyns rottum. Í ljós kom að orexin er ekki nauðsynlegt fyrir kynferðislega hvatningu eða frammistöðu. Í staðinn eru orexin taugafrumur virkjaðar af kvenkyns áreiti, óháð hormónastöðu kvenkyns eða kynferðislegri reynslu karlmannsins. Ennfremur, með því að fjarlægja innræna orexin með orexin frumusértækum skemmdum, minnkaði kvíðahegðun og auðveldaði upphaf kynhegðunar á kynferðislega naíum körlum. Þannig styðja niðurstöður þessarar rannsóknar orexin hlutverki við að vekja upp (de Lecea o.fl., 2006; Harris og Aston-Jones, 2006; Sakurai, 2007; Boutrel o.fl., 2009; Furlong og Carrive, 2009; Furlong o.fl., 2009) og kvíði (Suzuki o.fl., 2005; Davis o.fl., 2009; Li et al., 2010), en styðja ekki mikilvægu hlutverki fyrir orexin í kynferðislegri hvatningu eða frammistöðu.

Niðurstöður þessara rannsókna skýra enn frekar hlutverk innræns orexins og augljós andstæður niðurstöður fyrri rannsókna þar sem skoðað var hlutverk orexins í kynferðislegri hegðun karla með lyfjafræðilegum verkfærum. Innrennsli-mPOA innrennsli af utanaðkomandi orexin-A leiddu til aukinnar kynferðislegrar örvunar og bættrar kynferðislegrar frammistöðu, sem bendir til þess að orexin gæti virkað í mPOA til að auka hvata og frammistöðu kynferðislegrar hegðunar (Gulia o.fl., 2003). Hins vegar skertu ICV innrennsli af orexin-A kynferðislegri hvatningu og örvun (Bai o.fl., 2009), meðan orexin viðtakablokki hafði engin áhrif á kynferðislega örvun (Bai o.fl., 2009), sem bendir til þess að innræn orexin gæti ekki gegnt hlutverki í kynferðislegri hvatningu. Að lokum var sýnt fram á að ORX1 hömlun með kerfisbundnum sprautum aðeins skerti afköst afbrigðiMuschamp et al., 2007). Af þessum misvísandi rannsóknum má draga nokkrar ályktanir. Í fyrsta lagi getur beiting á utanaðkomandi orexin-A haft áhrif á hegðun, en ORX1 hömlun er án meiriháttar áhrifa, sem bendir til þess að innræn orexin hafi lítið hlutverk í stjórnun á kynferðislegri hegðun karla (Bai o.fl., 2009). Núverandi niðurstöður styðja þennan möguleika. Núverandi rannsóknir á að fjarlægja orexin, með orexin frumusértækum skemmdum, benda til þess að innræn orexin sé ekki nauðsynleg fyrir kynferðislega hvatningu eða frammistöðu, í samræmi við athuganir með Bai o.fl. (2009). Það er þó mikilvægt að hafa í huga að skortur á áhrifum orexin meinsemda á kynferðislega hvatningu á flugbrautinni getur stafað af því að dýr höfðu öðlast kynferðislega reynslu fyrir kynferðislega hvatapróf, því skortur á áhrifum í flugbrautarprófinu kann að hafa verið vegna að kynferðislegri reynslu karlanna. Framtíðartilraunir geta tekið á þessu varnaðarleysi með því að prófa áhrif orexinskemmda á kynferðislega hvatningu hjá ófögru körlum.

Það er einnig mögulegt að orexin bindlarnir tveir og tvær undirtegundir orexin viðtaka (ORX1 og ORX2; Sakurai o.fl., 1998) geta stjórnað kynhegðun í gagnstæða átt. Með því að nota orexin frumuskemmdartækni var brotthvarf bindla fyrir báðar undirtegundir orexin viðtaka (orexin-A og B) í núverandi rannsókn. Tvær undirtegundir viðtakanna eru tjáðar á mismunandi heila svæðum (Trivedi o.fl., 1998; Marcus o.fl., 2001) og sýnt hefur verið fram á að þau stjórna minni á mismunandi hátt vegna kúkaínleitar sem leitast við kókaín (Smith et al., 2009). Fyrri rannsóknir á kynhegðun hafa fyrst og fremst beinst að hlutverki orexin-A og ORX1 (sjá umfjöllun hér að ofan). Orexin viðtakablokkurinn SB334867 sem notaður var í rannsóknunum miðar hingað til sérstaklega til ORX1 sem hefur mikla sækni í orexin-A og marktækt minni sækni í orexin-B (Sakurai o.fl., 1998). Sömuleiðis hefur orexin-A verið notað sem utanaðkomandi orexin í fyrri rannsóknum (Gulia o.fl., 2003; Bai o.fl., 2009). Framtíðarrannsóknir eru nauðsynlegar til að kanna hlutverk orexin-B og ORX2 við stjórnun á kynferðislegri hegðun karla.

Núverandi rannsókn prófaði áhrif langvarandi taps af orexíni. Muschamp o.fl. (2007) lagði til að langtímalækkun orexins í kjölfar bræðslu gæti gert grein fyrir tapi á kynferðislegri hvatningu og frammistöðu. Þessari tilgátu var andstætt núverandi niðurstöðum þar sem orexinfrumuskemmdir drógu ekki úr kynferðislegri hvatningu eða frammistöðu. Hugsanlegt er að langtíma tap á orexíni í núverandi rannsókn hafi leitt til bótunaraðgerða, þó að engar breytingar hafi orðið á virkjun tauga virkjunar í hringrás sem miðlaði kynferðislegri hegðun. Engu að síður er ljóst að skert eða skortur á orexíni kemur ekki í veg fyrir kynhegðun. Ennfremur styðja niðurstöður núverandi rannsóknar ekki stórt hlutverk fyrir orexin í örvun tjáningar á cFos vegna kynferðislegrar hegðunar. Það hefur verið skýrt staðfest að orexin stuðlar að virkjun taugafrumna í VTA (Korotkova et al., 2003; Borgland o.fl., 2006; Narita o.fl., 2006; Vittoz o.fl., 2008). Hins vegar hindruðu orexinfrumuskemmdir hvorki taugafræðilega örvun í taugakerfi í VTA né á neinum öðrum launatengdum heilasvæðum sem greind voru, þrátt fyrir tilvist órexín ónæmisaðgerðartrefja í námunda við virkjuðu taugafrumurnar hjá svindlum. Þannig virðist virkjun tauga örvunar á pörun á þessum heilasvæðum ekki vera háð orexínvirkni.

Nokkuð óvænt niðurstaða núverandi rannsóknar var áhrif orexin meinsemda á að auðvelda upphaf kynhegðunar hjá kynferðislegu barnalegu en ekki reyndum dýrum. Sýnt var að þetta var í samhengi við minnkun á kvíða lík hegðun. Þess vegna geta áhrif orexínskemmda á kynferðislega hvatningu og frammistöðu verið afleiðing af áhrifum þess á kvíða og örvun. Reyndar hafa fyrri rannsóknir bent til hlutverks fyrir orexin í kvíða þar sem innrennsli ICV með orexin-A minnkaði tíma á opnum örmum EPM í músum (Suzuki o.fl., 2005). Innrennsli orexin-A í paraventricular kjarna í thalamus karlrottna minnkaði tíma á miðju svæði í opnu sviði og minnkaði nýjar kannanir á hlutum, sem bendir til þess að orexin gæti verið þátttakandi í kynslóð kvíða-eins hegðunar (Li et al., 2010). Að auki hafa ráðandi karlrottur sem sýna aukna áhættutöku á EPM aukið magn ORX1 mRNA í mPFC (Davis o.fl., 2009). Sýnt hefur verið fram á að orexín hefur áhrif á viðbrögð við streitu (Ida o.fl., 1999; Ida o.fl., 2000), og örvun orexin viðtaka eykur losun barkstigsfrumvarpsþáttar (Al-Barazanji o.fl., 2001; Singareddy o.fl., 2006), barkstera (Ida o.fl., 2000; Kuru o.fl., 2000) og adrenocorticotropic hormón (Kuru o.fl., 2000). Orexin blokkar eru nú í klínískum rannsóknum til meðferðar á svefnleysi, truflun sem er oft samsett með kvíðaröskun (Sullivan og Neria, 2009), og það er tilgáta að hugsanlega væri hægt að nota orexin mótlyf til að meðhöndla kvíðasjúkdóma (Mathew o.fl., 2008). Í ljósi vaxandi líkams vísbendinga um hlutverk orexíns í kvíða og örvun virðast það að orexin meinsemdir geta auðveldað upphaf kynhegðunar hjá barnalegum körlum með því að draga úr kvíðalíkum svörum sem tengjast nýjum örvun, þ.e. kvenkyninu.

Veruleg virkjun orexin taugafrumna sást í kjölfar kynferðislegrar örvunar og kynferðislegrar hegðunar hjá bæði kynlífi og reyndum dýrum bæði í PFA-DMH og LHA, með 60 – 80% og 14 – 33% af orexin frumum sem tjáðu sig cFos. Til eru vísbendingar sem styðja tvískiptingu í taugafrumum úr orexin innan orexinfrumuþýðisins, þar sem PFA-DMH er gagnrýninn þáttur í því að vekja og LHA skiptir sköpum fyrir hegðunartengda hegðun (Harris et al., 2005; Harris og Aston-Jones, 2006, Aston-Jones, 2009a). Þess vegna styður virkjun PFA-DMH orexinfrumna af kvenkyns áreitni þeirri tilgátu að orexin sé virkjað af og sé mikilvægt fyrir vökvun, þar með talið kynferðisleg örvun hjá barnalegum og reyndum körlum og kvíða sem tengist skáldsögulegri hvati kvenna hjá barnalegum körlum. Samt sem áður voru PFA-DMH frumur virkjaðar að svipuðum stigum óháð reynslu karlanna og hormónaástandi kvenna, sem bendir til þess að PFA-DMH frumurnar voru virkjaðar við almenna vakningu og ekki sérstaklega með kynferðislegri örvun. Ennfremur styðja rannsóknir okkar ekki fullkomlega tilvist algerlega tvíkorn orexínfrumu þar sem umtalsverð virkjun var á LHA eftir útsetningu fyrir öllum þáttum kynferðislegs örvunar og frammistöðu, óháð því hvort hegðunin tengdist umbun. Þannig sýndu reyndir karlmenn sem voru útsettir fyrir svæfandi konu jafnt magn af virkjun orexínfrumna í LHA samanborið við reynda karla sem tóku sig til sáðlát. Hins vegar mun aðeins síðarnefndi hópurinn mynda skilyrtan staðinn fyrir pörun (Tenk o.fl., 2009); sem bendir til þess að fjölgun við sáðlát sé meira gefandi en aðrir þættir mökunar. Núverandi rannsókn prófaði ekki sérstaklega hlutverk orexins í kynferðislegri umbun; þess vegna þarf framtíðarrannsóknir til að takast á við þá spurningu.

Í stuttu máli sýna niðurstöður þessara rannsókna að orexin er ekki mikilvægt fyrir kynferðislega frammistöðu eða hvata. Þess í stað var sýnt fram á að orexinfrumur draga úr kvíða, sem bendir til þess að innræn orexin hafi þátt í að auka kvíða. Ennfremur leiddi fjarlæging orexíns til að auðvelda upphaf kynferðislegrar hegðunar hjá kynlífi karlmönnum, sem bentu til þess að innræn orexin gæti hindrað upphaf mökunar, hugsanlega með því að auka kvíða sem svar við nýjum áreiti, þ.e. kvenkyninu. Þessar niðurstöður skýra enn frekar taugakerfið sem er þátttakandi í kynferðislegri frammistöðu og kvíða og bæta við vaxandi fjölda bókmennta um hlutverk orexíns í miðlun örvunar og kvíða.

Þakkir

Þessi rannsókn var studd af styrkjum frá National Institute of Health (R01 DA014591), Canadian Institutes of Health Research (RN 014705), og National Sciences and Engineering Research Council of Canada (Discovery Grant (341710)) til LMC.

Neðanmálsgreinar

Fyrirvari útgefanda: Þetta er PDF skjal af óskráðri handriti sem hefur verið samþykkt til birtingar. Sem þjónustu við viðskiptavini okkar erum við að veita þessa snemma útgáfu handritsins. Handritið verður undirritað afrita, gerð og endurskoðun sönnunargagna áður en hún er gefin út í endanlegri bönnuð formi. Vinsamlegast athugaðu að á framleiðsluferlinu má finna villur sem gætu haft áhrif á efnið og öll lögboðin frávik sem gilda um dagbókina eiga við.

Meðmæli

  1. Agmo A. Male rottur kynferðisleg hegðun. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Al-Barazanji KA, Wilson S, Baker J, Jessop DS, Harbuz MS. Mið orexin-A virkjar undirstúku-heiladinguls-nýrnahettuás og örvar hypothalamic kortikótrópín losunarstuðul og arginín vasópressín taugafrumur í meðvitundum rottum. J Neuroendocrinol. 2001; 13: 421 – 424. [PubMed]
  3. Aston-Jones G, Smith RJ, Moorman DE, Richardson KA. Hlutverk hliðar undirstúku orexin taugafrumna við umbun vinnslu og fíkn. Neuropharmology. 2009a; 56 Suppl 1: 112 – 121. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  4. Aston-Jones G, Smith RJ, Sartor GC, Moorman DE, Massi L, Tahsili-Fahadan P, Richardson KA. Hliðar undirstúku orexín / hypocretin taugafrumur: Hlutverk í umbunaleit og fíkn. Brain Res. 2009b; 1314: 74 – 90. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  5. Bai YJ, Li YH, Zheng XG, Han J, Yang XY, Sui N. Orexin A dregur úr óskilyrtri kynferðislegri hvatningu hjá karlkyns rottum. Pharmacol Biochem Behav. 2009; 91: 581 – 589. [PubMed]
  6. Bäckberg M, Hervieu G, Wilson S, Meister B. Orexin viðtaki-1 (OX-R1) ónæmisvirkni í efnafræðilega greindum taugafrumum í undirstúku: einbeittu að orexin markmiðum sem taka þátt í stjórnun á fæðu og vatnsinntöku. Eur J. Neurosci. 2002; 15: 315 – 328. [PubMed]
  7. Baldo BA, Daniel RA, Berridge CW, Kelley AE. Skerandi dreifingar ónæmis- / hypókretín- og dópamín beta-hýdroxýlasa ónæmisviðkvæmra trefja í rottum heila svæðum sem miðla vökva, hvatningu og streitu. J Comp Neurol. 2003; 464: 220-237. [PubMed]
  8. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Kynferðisleg hegðun og kynlíf tengd umhverfismerki virkja mesólimbíska kerfið hjá karlkyns rottum. Neuropsychopharmacology. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  9. Benoit SC, Tracy AL, Davis JF, Choi D, Clegg DJ. Nýjar aðgerðir orexigenic undirstúku peptíð: frá genum til hegðunar. Næring. 2008; 24: 843 – 847. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  10. Borgland SL, Taha SASF, Fields HL, Bonci A. Orexin A í VTA er áríðandi fyrir framköllun á synaptískri plastleika og hegðun næmni fyrir kókaíni. Neuron. 2006; 49 (4): 589 – 601. [PubMed]
  11. Boutrel B, Cannella N, de Lecea L. Hlutverk hypocretins í akstri vöktunar og markmiðshegðunar. Brain Res. 2009 [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  12. Boutrel B, Kenny PJ, Specio SE, Martin-Fardon R, Markou A, Koob GF, de Lecea L. Hlutverk fyrir hypocretin við að miðla streitu af völdum endurupptöku kókaínleitar hegðunar. Proc Natl Acad Sci US A. 2005; 102: 19168 – 19173. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  13. Broberger C, De Lecea L, Sutcliffe JG, Hokfelt T. Hypocretin / orexin- og melanín-styrkjandi hormónatjáandi frumur mynda greinilega hópa í nagdýra undirstúku: tengsl við taugapeptíðið Y og agouti genatengd próteinkerfi. J Comp Neurol. 1998; 402: 460 – 474. [PubMed]
  14. Carter ME, Borg JS, de Lecea L. Heilinn hypocretins og viðtakar þeirra: milligöngum uppsveiflu. Curr Opin Pharmacol. 2009; 9: 39 – 45. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  15. Chemelli RM, Willie JT, Sinton CM, Elmquist JK, Scammell T, Lee C, Richardson JA, Williams SC, Xiong Y, Kisanuki Y, Fitch TE, Nakazato M, Hammer RE, Saper CB, Yanagisawa M. Narcolepsy í orexin knockout mýs : sameinda erfðafræði svefnreglugerðar. Hólf. 1999; 98: 437 – 451. [PubMed]
  16. Chen CT, Dun SL, Kwok EH, Dun NJ, Chang JK. Orexin A-svipað ónæmisviðnám í rottum heila. Neurosci Lett. 1999; 260: 161 – 164. [PubMed]
  17. Choi DL, Davis JF, Fitzgerald ME, Benoit SC. Hlutverk orexíns-A í matvælum, ávöxtun á fóðri og hvati sem veldur völdum taugafrumum hjá rottum. Neuroscience. 2010; 167: 11-20. [PubMed]
  18. Davis JF, Krause EG, Melhorn SJ, Sakai RR, Benoit SC. Ríkjandi rottur eru náttúrulegir áhættutakar og sýna aukna hvata fyrir matarlaun. Taugavísindi. 2009; 162: 23 – 30. [PubMed]
  19. de Lecea L, Jones BE, Boutrel B, Borgland SL, Nishino S, Bubser M, DiLeone R. Fíkn og örvun: valhlutverk undirstúku peptíða. J. Neurosci. 2006; 26 (41): 10372 – 10375. [PubMed]
  20. de Lecea L, Kilduff TS, Peyron C, Gao X, Foye PE, Danielson PE, Fukuhara C, Battenberg EL, Gautvik VT, Bartlett FS, 2nd, Frankel WN, van den Pol AN, Bloom FE, Gautvik KM, Sutcliffe JG. Hræsnin: undirstúku-sértæk peptíð með taugaboðandi virkni. Proc Natl Acad Sci US A. 1998; 95: 322 – 327. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  21. Dewsbury DA. Höfðunarhegðun rottna (Rattus norvegicus) sem þáttur í fyrri reynslunni á copulatory. Anim Behav. 1969; 17: 217 – 223. [PubMed]
  22. Fadel J, Deutch AY. Líffræðileg hvarfefni milliverkana við orexin-dópamín: hliðar á undirstúku á hliðum á miðju svæði. Taugavísindi. 2002; 111: 379 – 387. [PubMed]
  23. Frederick-Duus D, Guyton MF, Fadel J. Aukning á losun barkstýls asetýlkólíns, sem þarf til matar, þarfnast sendingar orexins. Taugavísindi. 2007; 149: 499 – 507. [PubMed]
  24. Furlong TM, Carrive P. Taugareitrunarsjúkdómar, sem eru miðaðir við undirstúku í Kaliforníu, afnema hjarta- og hegðunarviðbrögð skilyrðs ótta við samhengi en ekki aðhald. Brain Res. 2007; 1128: 107 – 119. [PubMed]
  25. Furlong TM, Vianna DM, Liu L, Carrive P. Hypocretin / orexin stuðlar að tjáningu sumra en ekki alls konar streitu og örvunar. Eur J Neurosci. 2009; 8: 1603 – 1614. [PubMed]
  26. Gerashchenko D, Kohls MD, Greco M, Waleh NS, Salin-Pascual R, Kilduff TS, Lappi DA, Shiromani PJ. Hypocretin-2-saporin sár í hliðar undirstúku framleiða narcoleptic lík svefnhegðun hjá rottum. J Neurosci. 2001; 21: 7273 – 7283. [PubMed]
  27. Gulia KK, Mallick HN, Kumar VM. Notkun Orexin A (hypocretin-1) á miðtaugum forstillta svæði eykur kynhegðun karla hjá rottum. Taugavísindi. 2003; 116: 921 – 923. [PubMed]
  28. Hagan JJ, Leslie RA, Patel S, Evans ML, Wattam TA, Holmes S, Benham CD, Taylor SG, Routledge C, Hemmati P, Munton RP, Ashmeade TE, Shah AS, Hatcher JP, Hatcher PD, Jones DN, Smith MI , Piper DC, Hunter AJ, Porter RA, Upton N. Orexin A virkjar locus coeruleus frumuhleypingu og eykur áreiti hjá rottum. Proc Natl Acad Sci US A. 1999; 96: 10911 – 10916. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  29. Harris GC, Aston-Jones G. Vekja og umbun: tvískiptingu í virkni orexin. Þróun Neurosci. 2006; 29: 571 – 577. [PubMed]
  30. Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Hlutverk fyrir hliðar undirstúku orexin taugafrumur í verðlaunaleit. Náttúran. 2005; 437 (7058): 556 – 559. [PubMed]
  31. Horvath TL, Peyron C, Diano S, Ivanov A, Aston-Jones G, Kilduff TS, van Den Pol AN. Hypocretin (orexin) virkjun og synaptic innerving locus coeruleus noradrenergic kerfisins. J Comp Neurol. 1999; 415: 145 – 159. [PubMed]
  32. Ida T, Nakahara K, Katayama T, Murakami N, Nakazato M. Áhrif á hliðar heilaæðar inndælingar á matarlystörvandi taugafeptíði, orexin og taugapeptíði Y, á ýmsa atferlisstarfsemi rottna. Brain Res. 1999; 821: 526 – 529. [PubMed]
  33. Ida T, Nakahara K, Murakami T, Hanada R, Nakazato M, Murakami N. Hugsanleg þátttaka orexíns í streituviðbrögðum hjá rottum. Biochem Biophys Res Commun. 2000; 270: 318 – 323. [PubMed]
  34. Korotkova TM, Sergeeva OA, Eriksson KS, Haas HL, Brown RE. Örvun dópamínvirkra og ónæmis-mótefnum taugafrumum í ventral tegmental svæði með orexínum / hypocretins. J Neurosci. 2003; 23 (1): 7 – 11. [PubMed]
  35. Kuru M, Ueta Y, Serino R, Nakazato M, Yamamoto Y, Shibuya I, Yamashita H. Miðlægur gjöf orexin / hypocretin virkjar HPA ás í rottum. Neuroreport. 2000; 11: 1977 – 1980. [PubMed]
  36. Li Y, Li S, Wei C, Wang H, Sui N, Kirouac GJ. Breytingar á tilfinningalegri hegðun framkölluð með orexin örsprautum í paraventricular kjarna thalamus. Pharmacol Biochem Behav. 2010; 95: 121 – 128. [PubMed]
  37. Lin L, Faraco J, Li R, Kadotani H, Rogers W, Lin X, Qiu X, de Jong PJ, Nishino S, Mignot E. Svefnröskun hundur narcolepsy stafar af stökkbreytingu í hypocretin (orexin) viðtakanum 2 geninu . Hólf. 1999; 98: 365 – 376. [PubMed]
  38. Lopez HH, Olster DH, Ettenberg A. Kynferðisleg hvatning hjá karlkyns rottum: hlutverk aðal hvata og reynsla á afbrigði. Horm Behav. 1999; 36: 176 – 185. [PubMed]
  39. Marcus JN, Aschkenasi CJ, Lee CE, Chemelli RM, Saper CB, Yanagisawa M, Elmquist JK. Mismunandi tjáning orexin viðtaka 1 og 2 í rottuheilanum. J Comp Neurol. 2001; 435: 6 – 25. [PubMed]
  40. Martin G, Fabre V, Siggins GR, de Lecea L. Milliverkanir hypocretins með taugaboðefnum í kjarnanum. Stjórna Pept. 2002; 104: 111-117. [PubMed]
  41. Mathew SJ, Price RB, Charney DS. Nýlegar framfarir í taugalíffræði kvíðasjúkdóma: afleiðingar fyrir nýjar lækningar. Am J Med Genet C Semin Med Genet. 2008; 148C: 89 – 98. [PubMed]
  42. Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. Hlutverk fyrir hypocretin (orexin) í kynferðislegri hegðun karla. J Neurosci. 2007; 27: 2837 – 2845. [PubMed]
  43. Nair SG, Golden SA, Shaham Y. Mismunandi áhrif hypocretin 1 viðtakablokkar SB 334867 á sjálfsstjórnun fituríkra matvæla og endurupptöku fæðuleitar hjá rottum. Br J Pharmacol. 2008; 154: 406 – 416. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  44. Narita M, Nagumo Y, Hashimoto S, Khotib J, Miyatake M, Sakurai T, Yanagisawa M, Nakamachi T, Shioda S, Suzuki T. Bein þátttaka orexinergic kerfa við að virkja mesólimbíska dópamínleiðina og skylda hegðun af völdum morfíns. J Neurosci. 2006; 26: 398 – 405. [PubMed]
  45. Nishino S, Ripley B, Overeem S, Lammers GJ, Mignot E. Hypocretin (orexin) skortur á narcolepsy mönnum. Lancet. 2000; 355: 39 – 40. [PubMed]
  46. Paxinos G, Watson C. Rottuheilinn í stereótaxískum hnitum. San Diego, CA: Academic Press; 1998.
  47. Peyron C, Faraco J, Rogers W, Ripley B, Overeem S, Charnay Y, Nevsimalova S, Aldrich M, Reynolds D, Albin R, Li R, Hungs M, Pedrazzoli M, Padigaru M, Kucherlapati M, Fan J, Maki R , Lammers GJ, Bouras C, Kucherlapati R, Nishino S, Mignot E. Stökkbreyting þegar um er að ræða snemma áreynslu á narkólsýki og almennri skorti á hypocretin peptíðum í mönnum narcoleptic heila. Nat Med. 2000; 6: 991 – 997. [PubMed]
  48. Peyron C, Tighe DK, van den Pol AN, de Lecea L, Heller HC, Sutcliffe JG, Kilduff TS. Neurons sem innihalda hypókretín (orexin) verkefni til margra taugakerfa. J Neurosci. 1998; 18: 9996-10015. [PubMed]
  49. Sakurai T. Hlutverk orexins og orexin viðtaka við miðlæga stjórnun fæðuhegðunar og orkunotstig. Neurol Disord eiturlyf markmið. 2006; 5: 313 – 325. [PubMed]
  50. Sakurai T. Taugakerfið orexin (hypocretin): viðhalda svefni og vakandi. Nat séraungur. 2007; 8: 171 – 181. [PubMed]
  51. Sakurai T, Amemiya A, Ishii M, Matsuzaki I, Chemelli RM, Tanaka H, ​​Williams SC, Richardson JA, Kozlowski GP, Wilson S, Arch JR, Buckingham RE, Haynes AC, Carr SA, Annan RS, McNulty DE, Liu WS , Terrett JA, Elshourbagy NA, Bergsma DJ, Yanagisawa M. Orexins og orexin viðtaka: fjölskylda af undirstúku taugapeptíðum og G próteinbundnum viðtaka sem stjórna hegðun fóðrunar. Hólf. 1998; 92: 573 – 585. [PubMed]
  52. Satoh S, Matsumura H, Fujioka A, Nakajima T, Kanbayashi T, Nishino S, Shigeyoshi Y, Yoneda H. FOS tjáningu í orexin taugafrumum í kjölfar flæðingar muscimols á foroptísk svæði. Neuroreport. 2004; 15: 1127 – 1131. [PubMed]
  53. Siegel JM. Narcolepsy: lykilhlutverk fyrir hypocretins (orexins) klefi. 1999; 98: 409 – 412. [PubMed]
  54. Singareddy R, Uhde T, Commissaris R. Mismunandi áhrif hypocretins á hávaða ein samanborið við aukin viðbragðssvörun. Physiol Behav. 2006; 89: 650 – 655. [PubMed]
  55. Smith RJ, sjá RE, Aston-Jones G. Orexin / hypocretin merkjasending við orexin 1 viðtakanum stjórnar kúka-leitandi kúka-leit. Eur J Neurosci. 2009; 30: 493 – 503. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  56. Solomon A, De Fanti BA, Martinez JA. Útlægur ghrelin hefur samskipti við orexin taugafrumur við stöðugleika merkjagjafa. Regul Pept. 2007; 144: 17 – 24. [PubMed]
  57. Sullivan GM, Neria Y. Lyfjameðferð við áfallastreituröskun: vísbendingar úr slembuðum samanburðarrannsóknum. Curr Opin Investig Drugs. 2009; 10: 35 – 45. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  58. Suzuki M, Beuckmann CT, Shikata K, Ogura H, Sawai T. Orexin-A (hypocretin-1) er mögulega þátttakandi í kynslóð kvíðalíkrar hegðunar. Brain Res. 2005; 1044: 116 – 121. [PubMed]
  59. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Kynferðisleg umbun hjá karlkyns rottum: áhrif kynferðislegrar reynslu á skilyrtar staðstillingar í tengslum við sáðlát og tilfinningar. Horm Behav. 2009; 55: 93 – 97. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  60. Thannickal TC, Moore RY, Nienhuis R, Ramanathan L, Gulyani S, Aldrich M, Cornford M, Siegel JM. Fækkað fjölda hypocretin taugafrumna við narcolepsy manna. Neuron. 2000; 27: 469 – 474. [PubMed]
  61. Thorpe AJ, Cleary JP, Levine AS, Kotz CM. Oxyxín A sem er gefið miðlæga eykur hvata fyrir sætar kögglar hjá rottum. Psychopharmaology (Berl) 2005; 182: 75 – 83. [PubMed]
  62. Trivedi P, Yu H, MacNeil DJ, Van der Ploeg LH, Guan XM. Dreifing orexin viðtaka mRNA í rottuheilanum. FEBS Lett. 1998; 438: 71 – 75. [PubMed]
  63. Vittoz NM, Schmeichel B, Berridge CW. Hypocretin / orexin virkjar ákjósanlega dópamín taugafrumur í miðtaugakerfinu. Eur J Neurosci. 2008; 28: 1629 – 1640. [PMC ókeypis grein] [PubMed]
  64. Volgin DV, Swan J, Kubin L. Einfrumun RT-PCR genatjáning sem sniðmát af bráðum. aðgreindir og ónæmisfrumufræðilega greindir miðtaugafrumur. J. Neurosci Aðferðir. 2004; 136: 229 – 236. [PubMed]