Neuroplasticitas sing ditindakake dening opioid endogen neuron dopaminergik ing area tegmental ventral ngasilake ganjaran alam lan opiate (2014)

KOMENTAR: The DeltaFosB studi kita asring kasebut kabeh fokus nukleus akrab (pusat hadiah), lan nemokake manawa jinis kelamin mekanisme otak padha karo meth & kokain. Saka panaliten tengara dening peneliti iki (Undhang-undhang Ganjaran Alam lan Narkoba ing Mekanisme Plastik Neural Umum kanthi ΔFosB minangka Mediator Tombol (2013)):

Dadi, ganjaran alami lan obat-obatan ora mung melu ing jalur saraf sing padha, nanging padha karo mediator molekul sing padha, lan bisa uga ing neuron sing padha ing Nucleus Accumbens, kanggo pengaruhe insiden insentif lan "pengin" kaloro jinis hadiah kasebut

Sing njupuk: meth, kokain, lan jinis kabeh padha karo dhasar sing padha ing sel syaraf sing padha ing pusat ganjaran (inti accumbens), apa wae sing bisa dilakoni ing panggon liya ing otak. Iki mbobot titik ngomong sing biasané supaya ganjaran alam lan obat-obatan béda karo mekanisme lan efek.

Panaliten anyar iki mriksa apa sing ditindakake seks marang VTA. VTA yaiku ing endi sel saraf sing ngasilake dopamin diwiwiti - lan cabang menyang inti accumbens, korteks frontal, lan amigdala. Sejatine VTA minangka sumber (sumber) sebagian besar dopamin kita. Deleng 2 gambar sirkuit hadiah iki: Pic1, Pic2

Peneliti nemokake yen jinis (climax) nyebabake awak sel ing VTA kanggo ngurangi sementara (ing lanang). Badan awak lan dendrit ngemot masalah abu-abu otak. Iki pancen minangka kecanduan heroin kanggo VTA (Ora nggunakake heroin siji wektu, nanging nggunakake heroin kronis). Elinga yen pangecutan padha karo badan sel VTA ana ing pecandu heroin manungsa.

Penyusutan sel sing dipengaruhi seks bakal tahan paling sethithik 7 dina. Owah-owahan sing dialami dening jinis wis bali menyang normal ing dina 30, nanging peneliti mung nganakake dina 1, 7, lan 30.

Penyusutan awak sel ing kecanduan heroin nyebabake dopamin ngisor ing inti accumbens - utawa sing diarani desensitization. Peneliti menehi morphine menyang tikus kanggo menilai respon (sawise jinis), nanging ora ana kedadeyan. Biasane tikus seneng banget karo morfin, nanging ing kene dheweke ora duwe desensine. Cekakipun, sirkuit tikus pasca ejakulasi ora responsif marang tingkat heroin sing sithik. Peneliti nganggep manawa dosis sing luwih dhuwur dibutuhake kanggo njaluk reaksi tikus "normal".

Kanggo nyimpulake - Seks (sementara) nindakake perkara sing padha ing VTA kaya kecanduan heroin: nyusut saka dopamin sing ngasilake awak sel saraf. Iki nyebabake dopamin ngisor ing pusat hadiah, lan kurang responsif marang narkotika - lan paling ora 7 dina otak otak bisa pulih.

 

J Neurosci. 2014 Jun 25;34(26):8825-36. aja: 10.1523 / JNEUROSCI.0133-14.2014.

Pitchers KK1, Coppens CM2, Beloate LN3, Fuller J2, Van S2, Frohmader KS2, Laviolette SR2, Lehman MN4, Coolen LM5.

Abstract

Ganjaran alami lan obat-obatan nyiksa nglumpukake ing jalur mesolimbi lan ngaktifake mekanisme umum neural plasticity ing accumbens nukleus. Liputan kronis kanggo opiates nyebabake kelenturan ing neuron dopaminergik saka wilayah tegegal ventral (VTA), sing ngatur toleransi gunggung morphine.

Ing ngisor iki, kita nyoba hipotesis yen release-opioid endogenous digawe ing babagan VTA nyebabake morfologis owahan saka sel dopamin VTA ing tikus lanang, kang ing-babagan ngatur regane jangka panjang saka pengalaman-induced pangangkatan saka prilaku seksual.

Pisanan, pengalaman seksual mudhun VTA dopamin soma ukuran 1 lan 7 dina, nanging ora 30 dina sawise kawin terakhir. Efek iki diblokir karo naloxone sadurunge saben sesi kawin; Mangkono, VLS dopamine gumantung marang tumindak opioid endogen.

Sabanjure, Vita plasticity kasebut digandhengake karo ganjaran simbol opiate, amarga lanang sing laku seksual ora mbentuk pilihan panggonan kahanan kanggo morphine 0.5 mg / kg.

Sabanjure, ditemtokake manawa tumindak opioid endogen bisa nangani ganjaran lan memori seksual ing tikus sing diobati karo naloxone sajrone pengalaman kawin, kanthi sistematis utawa intra-VTA. Naloxone ora nyegah fasilitasi prilaku seksual sing diwiwiti saka sesasi kawin maneh, utawa panggonan sing dikarepake kanggo kawin. Nanging, perawatan naloxone ngilangi ekspresi jangka panjang fasilitasi prilaku sing diprakirake pengalaman saka prilaku seksual lan aktivasi saraf ing wilayah mesolimbi sing diakibatake dening pertimbangan kawin.

Bebarengan, data kasebut nduduhake opioid endogen sajrone kawin kasebut nimbulaké kepekaan neural ing neuron dopamin VTA sing katon kritis kanggo ganjaran morfin lan memori jangka panjang kanggo tumindak ganjaran alami.

 

Pambuka

Perilaku ganjaran alami sing ditengahi dening sistem mesokortikolimbi (Meisel and Mullins, 2006; Hoebel et al., 2009; Frohmader et al., 2010a; Pitchers et al., 2010a; Young et al., 2011; Blum et al., 2012). Obat penyalahgunaan nimbulaké owah-owahan saraf ing sistem iki, sing uga nyumbang kanggo pangembangan lan ekspresi narkotika (Hyman et al., 2006; Nestler, 2012). Kita sadurunge nemtokake manawa pengalaman karo alam ganjaran alami, yaiku pengalaman seksual ing tikus lanang, uga nimbulake plastik neural ing inti accumbens (NAc), kalebu peningkatan dendritic spinesPitchers et al., 2010a) lan deltaFosB (Pitchers et al., 2013). Ing salajengipun, kelenturan seksual-indhustri iki kritis kanggo pangaruh saka pengalaman seks ing kawin sabanjur, minangka manifestasi fasilitasi prilaku lan kinerja prilaku seksual (Pitchers et al., 2010b, 2012, 2013). Menapa malih, pengalaman seks ngubah respon psikostimulant, kalebet pemekaran aktivitas lokomotif lan ganjaran ingkang langkung sae (Frohmader et al., 2010a; Pitchers et al., 2010a, 2013).

NAc minangka target hilir neuron dopaminergik ing area tegalal ventral (VTA). Neuron dopamine VTA diaktifake sajrone kawin lan nylidhihihe cahya marang isyarat kahanan prediktifake ganjaran seksual (Balfour et al., 2004; Frohmader et al., 2010a), liwat peptida opioid endogen (EOP) - ngiket ing reseptor μ-opioid (MORs; Matthews lan Jerman, 1984; Johnson lan Lor, 1992; Klitenick et al., 1992; Ikemoto et al., 1997; Balfour et al., 2004). Mulane, kahanan sing bakal dituduhake prilaku prediktif seksual nyebabake pelepasan aktivasi dopamine EOP lan VTA, sing ndadekake motivasi seksual (Mitchell lan Stewart, 1990; van Furth et al., 1995; van Furth lan van Ree, 1996) lan release dopamin ing NAc (Fiorino et al., 1997).

Daur ulang marang opiates exogenous nyebabake owahan morfologis ing VTA (Mazei-Robison et al., 2011; Mazei-Robison lan Nestler, 2012), ngurangi ukuran neuron dopamin VTA (Sklair-Tavron et al., 1996; Spiga et al., 2003; Chu et al., 2007; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011), ngurangi tingkat protein neurofilament (Beitner-Johnson et al., 1992), tambah gampang banget dopamin sel, lan ngurangi transportasi axoplasmic lan output dopamin menyang NAc (Beitner-Johnson et al., 1992; Mazei-Robison et al., 2011). Iki owah-owahan neuron dopamine VTA nyebabake toleransi gunggung morfin lan transient amarga padha nyusupake ing sasi abstinence tamba (Russo et al., 2007). Saiki ora cetha manawa plastisitas ing neuron dopamin VTA unik kanggo tumindak opiates utawa yen uga diprodhuksi dening release EOP sak alam rewarding prilaku.

Kene, kita nguji hipotesis yen pengalaman pahala alam nimbulake neuroplastis kaya sing disebabake dening opiates, lan kanthi mangkono, opiates nyedhaki mekanisme kepekaan sing kritis kanggo prilaku ganjaran alam lan ganjaran memori. Kita nguji manawa pengalaman seksual ing kucing lanang bisa nyuda ukuran neuron dopamin VTA liwat proses sing gumantung marang tindakan EOP ing VTA. Salajengipun, kita nyinaoni manawi perubahan EOP-induced ing neuron dopamin VTA kagayut kaliyan panguatan prilaku rewarding alam lan atribut insentif kangge nyengkuyung gadhah ganjaran ingkang gegayutan kaliyan ganjaran alam, salajengipun nyebabaken salabeting toleransi morfin ganjaran.

Bahan lan Metode

Animals

Tikus-tikus Sprague-Dawley diwasa (200-225 g) ditampa saka Kali Charles lan dipasang ing pasangan ing kamar sing dilahirake kanthi sinar 12 siklus cahya / peteng ing kabeh eksperimen (lampu mati ing 10: 00 AM kajaba eksperimen toleransi morfin , lampu mati ing 5: 00 PM). Pangan lan banyu kasedhiya ad libitum kajaba sak testing tingkah laku. Prion wanita rangsang dijenengake ovariectomized lan ditanem subcutaneously karo 5% 17-β-estradiol benzoate kapsul SILASTIC (1.98 diameter mm, Length 0.5 cm, Dow-Corning). Suntik progesteron (subcutaneous, 500 μg ing ml 0.1 saka minyak wijen) diterbitake 3-6 h sakwise pengujian kanggo ngarahake panraman seksual. Kabeh tata cara disetujoni dening Universitas Ontario Ontario lan Universitas Michigan Animal Care Komite, lan sesuai karo Canadian Council on Animal Care lan National Institutes of Health pedoman nglibatno vertebrate kéwan ing riset.

Wektu dawa VTA dopamine owah-owahan ukuran

Sesi kawin saben dina.

Kanggo sinau wektu owah-owahan neuron dopamine sing ukurane ing VTA, kéwan seksual lan naif sing dipatèni ing 1, 7, utawa 31 d (n = 5-8 saben grup) sawise dina pungkasan kawin (pengalaman) utawa penanganan (naif). Kelompok sing duwe pengalaman seksual ditemtokake kanggo laku seksual ing sesi kawin pungkasan, uga total nomer ejaculations liwat limang sesi (rata-rata 5 kanggo saben klompok), lan ora beda-beda sajroning parameter perilaku seksual.

Sesi kawin.

Wong lanang sing ora duwe hubungan seksual wis ditugasake kanggo rong kondisi eksperimen: naif utawa ngalami seksual. Kéwan sing dialami kanthi seksual padha diijini kaping lima ing dina sing padha karo wanita sing mlebu nalar ing kandang uji persegi panjang (60 × 45 × 50 cm) nganti tampilan ejaculation utawa nganti 1 h (whichever came first). Sangkar wis diresapi kanthi solusi etanol% 70 lan sprei seger ditambahake ing antarane kawin. Prilaku seksual ditindakake sak fase peteng (2-6 h sawise dadi peteng). Mung kewan sing ejakulasi ing paling ora sekawan papat saka limang kawin sing dianggep seksual lan kalebu ing eksperimen. Kabeh sesi kawin ditonton lan perilaku seksual dicathet. Jumlah pendanaan (M) intromisi (IMs), sing dilindhungi latency (ML, wektu saka introduksi wadon menyang gunung pisanan), latensi intromisi (IL; wektu saka introduksi wadon dadi intromisi pisanan), lan latensi ejakulasi (EL; wektu saka intromisi pisanan kanggo ejakulasi) dicathet (Agmo, 1997). Kéwan-kéwan langka wis diselehake ing kandhang uji sing resik kanggo 1 h bebarengan karo lanang sing laku seksual sing dituku ing kamar sing padha, saéngga wong-wong mau ana sing ngandhut bau wadon, lan tingkat gangguan lan lingkungan sing padha karo wong lanang sing wis pengalaman.

Labeling immunofluorescence.

Kéwan kasebut banget diawétifikasi nganggo sodium pentobarbital (270 mg / kg, ip) lan perfèstan karo ml 50 saka 0.9% saline, disusul ml 500% paraformaldehida ing 4 m sodium phosphate buffer (PB). Tumbukan wis dibusak lan postfixed kanggo 0.1 h ing suhu kamar (RT) ing fiksatif sing padha, lan banjur nyemprotake ing 1% sukrosa lan 20% sodium azide ing 0.01 m PB kanggo panyimpenan ing 0.1 ° C. Coronal bagean dipotong ing 4 μm ing mikrotome pembekuan (H35R, Microm) lan diklumpukake ing patang seri parallel ing solusi cryoprotectant (400% sucrose, 30% ethylene glikol ing 30 m PB) banjur disimpen ing 0.1 ° C. Kabeh inkubasi dilakoni ing RT kanthi agitasi lembut lan rinses kanthi 20 m PBS, pH 0.1, antarane inkubasi. Bagian-bagian sing ana ing 7.35% H2O2 kanggo 10 min numpes peroksidase endogen, banjur diblokir kanggo 1 h ing solusi inkubasi (PBS +: PBS ngemot 0.4% Triton X-100; Sigma-Aldrich) lan 0.1% sapi serum albumin (Jackson Immuno Research Laboratories). Sabanjure, bagean diinkubengi ing RT sajrone mouse tyrosine hydroxylase (TH) -antibody (1: 20 000; Millipore). Sawise inkubasi antibodi utama, bagean kasebut diinkubake ing antibodi anti kambing AlexaFluor 555-conjugated kambing (1: 100; Invitrogen, Eugene, OR) kanggo 30 min. Pungkasan, bagian kasebut dikumbah nganggo 0.1 m PB, dipasang ing kaca Superfrost Plus, dikumbah, lan ditandhani nganggo gelvatol ngemot agen anti-sirih 1,4-diazabicyclo (2,2) oktane (DABCO, 50 mg / ml, Sigma-Aldrich; Lennette, 1978).

Analisis data: ukuran neuron soma.

Gambar neuron TH-immunoreactive (IR) ing VTA dijupuk ing perbesaran 40 ing telung rostral nganti tingkat caudal (Balfour et al., 2004). Ora ana perbedaan sing dideteksi ing antarane sel ing tingkat sing beda. Ukuran soma TH-IR neuron dianalisis nggunakake ImageJ (Institut Kesehatan Nasional). Tegese area, perimeter, lan circularity diukur kaya sing diterangake dening Sklair-Tavron et al. (1996). Rata-rata sel 25 saben kewan (digabungake kabeh tingkat VTA 3) dianalisis lan mung sel kanthi inti sing jelas katon. Kanggo saben kewan, area tegese, perimeter, lan circularity diitung. Kanggo analisis statistik, ANOVA loro-lorone digunakake [faktor: pengalaman seksual (jinis seksual utawa jinis naif) lan wektu (1, 7, utawa 31 d)] sing diterusake post hoc bandingake nggunakake metode Holm-Sidak kanthi tingkat signifikansi 0.05.

Perubahan non-dopamine VTA

Sesi kawin saben minggu.

Kanggo nguji manawa pengalaman seksual nalika sesi kawin saben dibutuhake kanggo ngurangi neuron TH-IR sing ukurane, neuron dopamine VTA VTA sing dianakake nalika limang kawin wektu kawin. Sesi kawin padha diterangake ing ndhuwur, nanging liwat periode 2.5 minggu. Obah dikoleksi 7 d sawise kawin utawa penanganan pungkasan.

Labeling immunoperoxidase.

Kajaba iku, dites apakah nggunakake teknik peka sensitif kanthi immunoperoxidase lan deteksi chromogen, uga bakal nggambarake owahan TH-IR babagan ukuran. Perfusi lan pangolahan tisu ditindakake kaya sing kasebut ing ndhuwur. Dipuntedahaken perawatan kanthi 1% H2O2 lan PBS +, bagean kasebut diinkubengi ing RT sajrone mouse poliklonal tirosin hidroksilase (TH) -antibody (1: 20 000; Millipore). Sawise inkubasi antibodi utamane, klompok-klompok kasebut diinkubasi karo anti-rabbit kambing biotin-conjugated IgG (1 h, 1: 500 ing PBS +; Laboratorium Vektor), avidin-biotin-horseradish peroksidase (1 h, ABC elite; 1: 1 000) ; Vector Laboratories), lan 3,3'-diaminobenzidine tetrahidroklorida (10 min, 0.02%, DAB; Sigma-Aldrich) ditingkatake karo nikel sulfat ing (0.02% ing 0.1 m PB) kanthi hidrogen peroksida (0.015%). Bagian kasebut dikumbah sak tenane ing 0.1 m PB kanggo ngakhiri reaksi kasebut lan dipasang ing kode Superfrost ditambah slide kaca (Fisher) kanthi 0.3% gelatin ing ddH2O. Sawise dehidrasi, kabeh slides dibandhingake karo DPX mountant (dibutil phthalate xylene; Sigma-Aldrich).

Analisis data: ukuran neuron soma.

Sel-sel TH-IR dianalisa kanggo area, perimeter, lan sirkularitas kaya sing kasebut ing ndhuwur. Kajaba iku, sel TH-IR ing substantia nigra (SN), ing bagean sing padha digunakake kanggo nganalisa sel VTA TH-IR, dianalisa. Pungkasane, sawise analisa sel VTA lan SN TH-IR, bagean bisa dikandhakake nggunakake sel cresyl violet lan non-TH-IR dianalisa kanthi nggunakake cara sing padha kaya sing diterangake ing ndhuwur. Bedane antarane klompok naif lan berpengalaman dibandhingake nganggo Siswa rong buntut t tes karo tingkat pinunjul saka 0.05.

Efek naloxone ing dopamin pengaruhe akibat pengalaman

Kanggo nemtokake manawa MORs nduweni peran ing owah-owahan pengalaman-induksi jinis dopamine neuron soma ukuran, MOR diblokir nalika tindak-tanduk seksual. Setengah kéwan nduwèni pengalaman seksual, déné setengah liyane ditangani nanging tetep naif. Kéwan sing dialami sacara seksual diijini bakal dikawruhi ing dina 5. Wonten ing kelompok ingkang ngalami seksual lan naif, kéwan dipunanggep antawis antawis naloxon MOR (10 mg / kg, SC, Sigma-Aldrich, dipun bibaraken wonten ing 0.9% saline) utawi saline 30 min saderengipun ngenalaken wanita (ngalami) (naif); kanthi mangkono nggawe papat eksperimen: saline naif (naif Sal), naloxone naif (Naive NLX), saline seksual (Exp Sal), lan naloxone (Exp NLX; n = 5-8 saben kelompok). Pangobatan Naloxone ora nduweni pengaruh signifikan babagan parameter perilaku seksual, ing salah siji saka 5 d, lan naloxone- lan kelompok sing dianggep asin padha ing pengalaman seksual. Kabeh kewan padha mateni liwat perfakardial perfusi 7 d sawise sesi kawin pungkasan. Bagian, imunohistokimia, lan analisis data (faktor ANOVA rong cara: pengalaman seks lan perawatan obat-obatan) kanggo dopamin ukuran sing wis dilakoni ing ndhuwur.

Preferensi papan morfin kahanan

Desain eksperimental.

Sadurunge, Russo et al. (2007) nuduhake morfin kronis ngakibatake toleransi kanggo morfin ganjaran. Wiwit pengalaman seksual lan morphine kronis nyebabake padha karo ukuran neuron dopamin ing VTA, relevansi fungsional saka owah-owahan morfologis sing dialami seksual dites kanggo ganjaran morfin. Kéwan sing dialami lan dikonsumsi sacara lisan dibagi dadi enem kelompok eksperimen sing beda (n = 9-13 saben klompok) adhedhasar prilaku seksual (naif seksual utawa pengalaman) lan dosis morfin (0.5, 5.0, utawa 10.0 mg / kg, ip) lan dites kanggo preferensi panggonan sing diadaptasi karo morfin (CPP).

Morphine-CPP.

Kondisi njupuk 1 d sawise sesi kawin pungkasan lan kelompok padha dicocogake kanggo seksual kinerja ing sesi kawin pungkasan. Paradigma CPP sing digunakake yaiku pretest, conditioning days, lan post-test, lan apparatus based on Tenk et al. (2009). Sedhela, aparat CPP (MED Associates) kalebu telung kamar sing beda. Antarane saben sesi, aparatus kasebut di resiki kanthi larutan etanol 70% kanggo minimalake isyarat penciuman. Kanggo nemtokake pilihan individu, pretest ditindakake sajrone kewan diwenehi akses gratis menyang kabeh aparat sajrone 15 menit. Minangka klompok, kewan ora nuduhake pilihan sing signifikan kanggo ruangan tartamtu, nanging saben kewan duwe preferensi awal sing sithik. Tikus sing nuduhake preferensi substansial kanggo salah sawijining kamar (> prabédan 200 s antara wektu sing ditindakake ing saben kamar; <5% kewan) sajrone pretest ora dikatutake ing panelitian. Sajrone kahanan kondhisi, tamba dipasangake ing ruangan sing luwih disenengi utawa sing ora disenengi nggunakake paradigma sing ora bias (Tzschentke, 2007) lan kéwan ditahan ing kamar kanggo 30 min. Kéwan kasebut disuntikake karo saline (ip) ing wayah esuk (9: 00 AM kanggo 12: 00 PM) lan dibuwang ing kamar (saline-paired chamber). Wonten ing tengah wengi (1: 00-4: 00 PM), kewan kasebut disuntikaken kaliyan morfin (ip, 0.5 mg / kg, 5.0 mg / kg, 10.0 mg / kg, morfin sulfat dipun bibaraken ing 0.9% menyang kamar morphine-dipasangkan. Kéwan padha tundhuk marang rong dina. Dina sabanjure (3 d sawise dina pungkasan kawin), tes post-test, sing cocog karo pretest, ditindakake. Kanggo analisis statistik, wektu sing dileksanakake ing ruang morfin sing dipasake nalika tes pas wektu dibandhingake karo wektu sing dileksanakake ing ruang saline-dipasangkan nalika uji pasca-seksual kanggo nafsu seksual utawa lanang sing wis pengalaman ing saben dosis nggunakake pasangan t test. p <0.05 dianggep signifikan sacara statistik. Kelompok kontrol tambahan kewan sing naif lan duwe pengalaman seksual nampa uyah ing kamar pasangan lan pasangan sing bisa dadi kontrol negatif. Ora ana bedane wektu sing ditindakake ing antarane kamar kanggo klompok kasebut.

Efek naloxon sistemik babagan fasilitasi prilaku seksual sing didhukung

Desain eksperimental.

Pengalaman seksual nyebabake prilaku seksual sing dijaga paling sithik ing wulan 1 (Pitchers et al., 2012). Kanggo nganalisis efek saka pemblokiran MOR babagan fasilitasi seksual sing didhukung pengalaman, kéwan seksual sing ditampa diwasa naloxone utawa uyah sadurunge limang kawinn = Saben 12) kaya sing kasebut ing ndhuwur. Siji minggu sawise sesi kawin pungkasan, tes kawin pungkasan dianakaké nalika kabeh kewan diwenehi kawin nganti siji ejakulasi utawa nganti 1 h. Ora ana perawatan naloxone utawa saline ditindakake sadurunge kawin ing dina pungkasan. Parameter babakan dibandhingake kanggo nemtokake manawa naloxone kena pengaruh favilitation kawin (dina 1 dina dina 5) utawa pangopènan fasilitasi (uji 5 dina) nggunakake faktor ANOVA (pengobatan (saline versus naloxone ) lan dina (dina 1, dina 5, utawa test)] lan metode Holm-Sidak kanggo post hoc bandinge. Kanggo kabeh tes statistik, p <0.05 dianggep signifikan sacara statistik.

Eksperimen kontrol tambahan

Naloxone sistemik ing dina test.

Kanggo nuduhake prilaku seksual sing diowahi ing dina ujian pungkasan kawin ora amarga ora ana naloxone, kita diwenehi salah siji naloxone utawa saline ing dina pungkasan kawin ujian kanggo kewan sing ditampa kawin kawin karo naloxone nalika padha gained pengalaman seksual. Khusus, kabeh kewan sing ditampa injeksi naloxone (10 mg / kg, sc) 30 min sadurunge kawin menyang siji ejakulasi sak 5 dina berturut-turut. Ing dina test 7 dhewek mengko, kira-kira setengah kewan nampa injeksi naloxone (10 mg / kg, n = 7) utawa uyah (n = 6) 30 menit sadurunge introduksi wanita sing reseptif. Tingkah laku seksual diamati lan direkam. Parameter babakan dibandhingake kanggo nemtokake manawa naloxone kena pengaruh favilitation kawin (dina 1 dina dina 5) utawa pangopènan fasilitasi (uji 5 dina) nggunakake faktor ANOVA (pengobatan (saline versus naloxone ) lan dina (dina 1, dina 5, utawa test)] lan metode Holm-Sidak kanggo post hoc bandinge. Kanggo kabeh tes statistik, p <5% dianggep signifikan sacara statistik.

Efek naloxone ing ekspresi jangka pendek saka prilaku seksual sing difasilitasi.

Efek naloxone (10 mg / kg, sc) perawatan nalika kawin dites ing perilaku seksual sakteruse sajrone dina ujian kawin pungkasan, sing dilakoni mung 1 d sawise kawin terakhir (saline, n = 5; naloxone, n = 4).

Pretreatment naloxone sistemik.

Kanggo nemtokake manawa ngobati naloxone piyambak nyebabake gangguan perilaku seksual 7 d sawise perawatan pungkasan, kéwan naif seksual ditampa lima naloxone saben dina (10 mg / kg, sc) utawa suntikan salin ing dina berturut-turut sadurunge tes kawin 7 d sawise naloxone pungkasan utawa injeksi saline. Dina test pungkasan iki, kewan ora nampa injeksi apa wae. Tingkah laku seksual diamati lan kacathet kaya sing kasebut ing ndhuwur. Parameter kawin sing dibandhingake antarane klompok nggunakake pasangan sing ora duwe pasangan t tes. Kanggo kabeh tes statistik, p <5% dianggep signifikan sacara statistik.

Naloxone sistemik lan ganjaran jinis.

Siji kamungkinan efek naloxone ing tampilan perawatan saka prilaku seksual sing gampang yaiku yaiku naloxone ngalangi efek sing nyenengake ing tumindak seksual. Kanggo nguji kemungkinan iki, paradigma CPP ditindakake kanggo prilaku seksual kanthi langsung sawise injeksi naloxone utawa saline lanang sing durung pengalaman seksual. Prosedur CPP padha karo sing diterangake ing ndhuwur kanggo morphine-CPP, kalebu pria, dina udhara, lan tes pasca.

Prilaku seksual dipasangkan karo kamar pisanan sing ora diselehake. Ing proses counterbalanced, saben kewan nampa injeksi naloxone (n = 12) utawa uyah (n = 11) 30 menit sadurunge nampa akses menyang wanita sing reseptif. Durasi rata-rata sesi kawin ana ~ 13 min. Siji menit sawise ejaculation, kewan iki dilebokake ing ruang pasangan kanggo 30 min. Ing dina kahanan liyane, kéwan ditampa suntikan saka naloxone utawa saline (apa wae sing ditampa sadurunge kawin), lan diselehake ing ruang sing ora dipasarke kanggo 30 min. Sabanjure, test pasca ditindakake, cocog karo pretest. Kanggo nemtokake preferensi kamar, wektu sing dihabiskan ing kamar sing dipasangake sajrone pretest lan post-test dibandhingake. Kanggo analisis statistik, dipasangkan t tes digunakake kanggo mbandhingake pilihan lan skor prabédan, lan wektu ing pasangan ruangan sajrone pretest lan post-test kanggo nemtokake apa wujud CPP wujud kanggo perilaku seksual. p <0.05 dianggep signifikan.

Efek naloxone intra-VTA ing fasilitasi prilaku seksual

Desain eksperimental.

Kanggo nemtokake manawa tindakan EOP khusus ing VTA, tanggung jawab kanggo owah-owahan pengalaman seksual-induced owah-owahan ing prilaku seksual, kewan liwat infus lokal naloxone utawa uyah menyang VTA sadurunge limang sesi kawin saben dina. Paradigma tingkah laku mirip karo eksperimen naloxone sistemik. Kéwan sing dialami sacara seksual diijini dijupuk nalika dina 5 nganti siji ejakulasi utawa nganti 1 h. Limalas menit sadurunge ngenalake wanita reseptif, tikus lanang nampa infusions bilateral saka salah siji naloxone (10 μg / μl saben hemisphere; volume 0.5 μl, larut ing 0.9% saline) utawa uyah (0.5 μl per hemisphere). Bidhang microinjections bilateral diterbitake ing tingkat aliran 0.5 μl / min liwat interval min 1 lan diiringi tambahan 1 min karo cannula injeksi sing ditinggalake kanggo difusi. Ing cannula injeksi banjur diganti karo cannula dummy lan tutup bledug. Siji minggu sawise dina pungkasan kawin (dina test), kabeh kewan wis kawin maneh nganti ejakulasi tanpa infus naloxone utawa uyah. Tokoh 3A njelasake desain eksperimen. Analisis data dianakake sajrone dijelasake ing eksperimen naloxone sistemik.

Operasi Cannulation.

Kéwan tikus ana anesthetized karo injeksi intraperitoneal (0.1 ml / kg) saka ketamin (0.87 mg / ml) lan xylazine (0.13 mg / ml), lan diselehake menyang apparatus stereotaxic (Kopf Instruments). Pandhuan kanvas 21-gauge (Plastics One) diturunake liwat bolongan cilik ing tengkorak menyang otak menyang VTA ing -4.8 mm AP, ± 0.75 mm ML saka bregma lan -7.8 mm DV saka ndhuwur tengkorak miturut Paxinos and Watson (2013). Cannulas diduweni karo akrilik gigi sing adhedhasar telung sekrup sing dipasang ing tengkorak. Kewan diwenehi wektu pemulihan minggu 2, lan ditangani saben dina kanggo habituation kanggo nangani lan prosedur injeksi sing digunakake nalika tes perilaku.

Verifikasi panggrangan Cannula.

Panggonan saka cannulas kasebut diperiksa nggunakake TH-immunostaining kanggo ngonfirmasi VTA kasebut kanthi tepat ditarget. Kéwan sing mung ditemokaké mung klebu analisis (ukuran grup pungkasan: saline sing alami n = 8; naloxone pengalaman n = 6). Telung kéwan tambahan sing nampa injeksi naloxone intra-VTA sing diarahake ing njaba VTA diklompokaké bebarengan ing grup injeksi "ora kejawab". Klompok sing ora kejawab dianalisis kanthi kapisah kanggo ngawula minangka kontrol anatomi lan Mann-Whitney U test digunakake kanggo mbandhingake prilaku ing dina test pungkasan karo naloxone lan lanang experienced diolah.

Ekspresi pérangan cue-induced kontekstual

Desain eksperimental.

Paparan kandhang ing pasangan lanang sing ngalami pengalaman kawin wis ditampilake nyebabake aktifitas MOR ing VTA lan aktivitas saraf ing VTA lan NAc (Balfour et al., 2004). Mulane, lingkungan kawin minangka pidana prediktifake ganjaran seksual. Pengkajian sing saiki dites apa MOR aktivasi sajrone pengalaman seksual dibutuhake kanggo pengaktifan neural cue-induced. Naloxone utawa saline diterbitake miturut sistematis (ip) 30 min sadurunge placement ing arena kawin lan introduksi saka wanita receptive kanggo kawin (experienced), utawa sadurunge manipulasi kontrol sing kalebu ing panggonan ing kandhang jawab tanpa presentation saka wadon (Neutral lingkungan; naif). Mangkono, papat grup eksperimen digawe: Na Na, NA Na NLX, Exp Sal, lan Exp NLX. Siji minggu sawise sesi kawin pungkasan, setengah kéwan ing saben klompok dituduh ing kandhang kawin (Ekspéris: pandhuan seks sing ana hubungané karo kahanan) utawa nangani kandhang (ora aktif lanang: ora ana paranoid / ora resmi), déné setengah liya ora ana ing kahanan sembarang pitakon lan tinimbang tetep ing kandhang ngarep (kanggo nemtokake pERK babar dhasar). Paradigma eksperimental iki ngasilake kumpulan 8: Naomi No-No Cue, Naive Sal + Cue, Nai NLX-No Cue, Nai NLX + Cue, Exp Sal-No Cue, Exp Sal ​​+ Cue, Exp NLX-No Cue, Exp NLX + Cue (n = 4 saben kajaba Nai NLX-No Cue, n = 3). Kewan-kewan padha perfek 10-15 min sawise cahya cahya. Kéwan kontrol ditarik saka kandhang ngarep lan diresmikaké bebarengan.

Immunohistochemistry.

Bagian bagean lan imunohistokimia dilakokaké kaya sing kasebut ing ndhuwur. Kene, kita nggunakake antibodi poliklonal terwelu marang p42 lan p44 MAP Kinases ERK1 lan ERK2 (PERK; 1: 4 000; Cell Signaling Technology). Antibodi utama wis ditondoi sacara ekstensif ing literatur (Roux lan Blenis, 2004; Murphy lan Blenis, 2006; Frohmader et al., 2010b). Kajaba iku, penolakan antibodi utami nyegah kabeh immunoreactivity lan analisa cacat saka jaringan otak tikus ngungkapake rong band ing bobot molekul sing cocok.

Analisis data.

sel pérk-immunoreaktif (-IR) diitung ing sawetara wilayah otak sing nggunakake tabung gambar lucida kamera sing dipasang ing Leica Mikroskop DMRD: NAc [inti (C) lan cangkang (S); 400 × 600 μm; korteks prefrontal medial; mPFC; wilayah cingulate anterior (ACA); prelimbic cortex (PL); infralimbic cortex (IL); 600 × 800 μm saben], caudate-putamen (CP; 800 × 800 μm), lan amygdala basolateral (BLA; 900 × 1200 μm; Balfour et al., 2004; Frohmader et al., 2010b; Pitchers et al., 2010b). Rong bagean sing diitung saben wilayah otak lan nomer sel ing bidang analisa standar banjur diitung minangka nomer sel per mm2. Kalor loro kasebut rata-rata saben kewan kanggo pitungan sarana klompok. Rata-rata kelompok ing kelompok sing ngalami seksual utawa naif dibandhingake nggunakake ANOVA rong cara [faktor: tamba perawatan (NLX utawa Sal) lan isyarat (isyarat utawa ora ana)] post hoc bandingake nggunakake tes jumlah Holm-Sidak utawa Mann-Whitney sing cocok karo tingkat sing penting p <0.05. Ing cangkang NAc kewan sing duwe pengalaman seksual, ana tren sing kuat tumuju faktor-faktor kasebut, mula bandhingane pasangan kanggo mbandhingake klompok uyah (Sal-No Cue) lan isine saline (Sal + Cue).

Gambar.

Gambar digital ditangkap nganggo kamera CCD (Macrofire, Optronics) sing dipasang ing Leica mikroskop (DM5000B) karo setelan kamera tetep. Gambar kasebut diimpor menyang piranti lunak Adobe Photoshop 9.0. Gambar ora diganti ing sembarang cara kajaba kanggo nyetel padhange lan kontras.

results

Perubahan pengalaman seksual ing sèl dopamin VTA

Pengalaman seksual nyebabake nyuda dopamin ing ukuran VTA (Anjir. 1A-C). Pengalaman seksual dikurangi wilayah lan ambane saka sel VTA TH-IR (area: F(1,31) = 23.068, p <0.001; perimeter, F(1,31) = 18.225, p <0.001). Uga ana pengaruh pinunjul utama wektu (wilayah: F(2,31) = 6.377, p = 0.005; perimeter, F(2,31) = 4.389, p = 0.021) lan interaksi signifikan antara pengalaman lan wektu (area: F(2,31) = 5.284, p = 0.011; perimeter, F(2,31) = 4.347, p = 0.022). Perbandingan pasangan dijupuk yen wilayah lan perimeter saka sel TH-IR ngurangi 1 lan 7 d sawise dina pungkasan saka perilaku seksual ing kéwan seksual sing dibandhingake karo kontrol seks naif [Anjir. 1B, wilayah: p = 0.002 (1 d), p <0.001 (7 d); C, perimeter: p = 0.009 (1 d), p <0.001 (7 d)]. Efek prilaku seksual ilang nalika diterusake karo periode abstinensi imbalan amarga ukuran soma neuron TH-IR bali menyang garis dasar 31 d sawise sesi kawin pungkasan (Anjir. 1B, wilayah: p = 0.798; C, perimeter: p = 0.785). Perubahan pengalaman akibat seks ora dideteksi ing mata pelajaran ing sembarang titik wektu (Anjir. 1D). VTA dopamine soma ngurangi ukuran ora gumantung marang sesi kawin saben dina, amarga pengalaman kawin nalika limang kawin wektu kawin uga ngasilake dopamin VTA sing rada sithik (Anjir. 2A,B, E-H, wilayah: p = 0.004; perimeter: p <0.001). Bentenipun, pengalaman seks ora mengaruhi ukuran soma TH-IR ing substigia nigra (Anjir. 2C, Aku-J, wilayah: p = 0.13; perimeter: p = 0.16) utawa uga diowahi ukurane ing neurons VTA non-TH-IR toko (Anjir. 2D, E-H, wilayah: p = 0.46; perimeter: p = 0.45).

Tokoh 1. 

Opioid endogenous-nyebabake owah-owahan ukuran neuron dopamin VTA. A, Gambar perwakilan saka neuron VTA dopamin saka kéwan sing naif lan alami sing nuduhaké penurunan ing ukuran 7 d sawise sesi kawin pungkasan. Bar scale, 5 μm. Data kuantitatif nuduhake yen pengalaman seksual (Exp, bar hitam) nyebabake panyebab sing signifikan ing wilayah (B; ing μm2) lan perimeter (C; ing μm) sel dopamin VTA, 1 d (Naif, Exp; n = 6) lan 7 d (Naif, n = 5; Exp, n = 6), nanging ora 31 d (Naif, n = 6; Exp, n = 8) sawise kawin terakhir, dibandhingake karo kontrol naif (Naif, garis putih). Wilayah dikurangi dadi 84% ing lanang sing ngalami dibandhingake karo kontrol naif ing 1 utawa 7 d. Perimeter dikurangi dadi 91.6 lan 90% ing kelompok sing ngalami dibandhingake karo kontrol ing 1 lan 7 d resp. Ora ana efek ing circularity (D). Plastisitas sel dopamin ing wilayah kasebut (E) lan perimeter (F) dicegah dening naloxone (NLX, n = 8), nanging ora saline (Sal, n = 7) nalika kawin, 7 d sawise sesi kawin terakhir dibandhingake karo kontrol naif (Sal, n = 5; NLX, n = 6). Data sing nuduhake tegese ± SEM; * nuduhake prabédan signifikan dibandhingake karo kontrol naif sacara seksual ing dina sing padha (B, C) utawa dibandhingake karo kontrol seks naif sing diolah lan nu dianggep naloxone-dianggep lanangE, F).

Tokoh 2. 

Pengalaman seksual ora ngilangi ukuran ing neuron dopamine substantia utawa neuron VTA nondopamine. Panggonan neuron VTA TH-IR (A; ing μm2) lan perimeter (B; ing μm) kewan naif (putih) lan pengalaman (ireng) kewan sing entuk pengalaman kanthi kawin kaping loro saben minggu tinimbang ing dina sing padha. Substantia nigra TH-IR soma area (C) lan VTA non-IR soma area (D) ing kéwan naif (putih) lan alami (ireng) kewan. Data sing nuduhake tegese ± SEM; * nuduhake prabédan signifikan dibandhingake karo kontrol naif. Gambar wakil sing nuduhaké neuron TH-IR (coklat) ing VTA saka nafsu seksual (E), lan ngalami (F) lanang. G, H, Gambar magnifikasi sing luwih gedhé saka neuron sing dituduhake dening panah ing E lan F masing-masing. Nissl-stained neurons are shown in blue in these images. Gambar wakil sing nuduhaké neuron TH-IR ing SN sing naif (I) lan ngalamiJ) lanang. Bar scale: E-J, 20 μm.

Pengalaman seksual-nyebabake ngurangi ukuran saraf dati VTA dopamin gumantung marang aktifitas opioid reseptor

Pangurangan neuron dopamine VTA sing disebabake pengalaman seksual diblokir dening antagonis naloxone Monselive, sing ditrapake sadurunge saben sesi kawin. Pangobatan Naloxone sadurunge kawin duwe pengaruh sing signifikan ing wilayah (F(1,22) = 4.738, p = 0.041) lan gumantung marang efek sing signifikan ing perimeter (F(1,22) = 2.892, p = 0.052). Interaksi sing signifikan antara pengalaman lan perawatan naloxone ditemokake ing area (F(1,22) = 5.578, p = 0.027) lan perimeter (F(1,22) = 8.167, p = 0.009). Perbandhingan pasangan nuduhaké yèn pengalaman seksual ing kéwan sing dianggep saliné dikurangi sacara signifikan wilayah lan perimeter neuron dopamin VTA 7 d sawise sesi kawin pungkasan dibandhingake karo lanang sing dianggep asinAnjir. 1E, wilayah: p = 0.018; F, perimeter: p = 0.007). Sabanjure, kéwan sing dianggep naloxone sing seksual ora béda karo lanang sing dianggep naloxoneAnjir. 1E, wilayah: p = 0.483; F, perimeter: p = 0.330). Kajaba iku, ukuran soma kéwan saline sing alami wis ngalami penurunan nalika dibandhingake karo kéwan naloxoneAnjir. 1E, wilayah: p = 0.002; F, perimeter: p = 0.002). Efek naloxone iki spesifik kanggo pengalaman seksual, amarga perawatan naloxone mung ora mengaruhi sel TH-IR sing ukurane wong sing dianggep naloxone sing laku najis dibandhingake karo kontrol sing diobati (Anjir. 1E,F). Kajaba iku, efek naloxone iki ing pengalaman-induced soma ukuran abang ora amarga efek saka naloxone ing laku seksual, minangka prilaku kawin ora beda-beda beda antarane naloxone- lan lanang dianggep saline, kajaba wektu maneh kanggo ngetokake kawin sawise ejaculation (interval ejakulasi) ing pasangan sing dianggep naloxone sajrone sesi kawin pertama lan kalima (p = 0.03 lan p = 0.004, saben). Loro saline- lan lanang dianggep naloxone disalin kanggo ejaculation sajrone saben limang kawin kawin.

Pengalaman toleransi gunggung morfin akibat pengalaman seksual

Efek pengalaman seksual ing VTA dopamin ukuran kanthi tindakan EOP ing VTA padha karo sing dilapurake kanggo opiate eksogen (Sklair-Tavron et al., 1996; Russo et al., 2007). Mulane, iki diuji manawa plastisitas sel dopamin-induced VTA dopamin duweni manfaat kanggo pahala kanggo morphine opiate. Pancen, pengalaman seksual nyebabake toleransi gunggung morfin, padha karo efek opiates kronis (Russo et al., 2007). Wong lanang sing duwe pengalaman seksual gagal ngembangake CPP kanggo dosis morfin 0.5 / kg; dene jinis lanang sing ora aktif sacara seksual mbentuk CPP kanggo dosis iki, kaya sing dituduhake kanthi mbuwang wektu sing luwih akeh ing kamar sing dipasake morfin dibandhingake karo kamar saline-dipasake nalika pasca tesAnjir. 3; p = 0.039). Klompok loro sing ora aktif lan ngalami pengalaman ngentekake wektu sing luwih gedhe ing ruang morfin sing dipasake dibandhingake karo kamar sing diisi saline karo dosis morfin sing luwih dhuwur: 5.0 mg / kg (Anjir. 3; Ora ana: p = 0.029; Exp: p = 0.012) lan 10.0 mg / kg (Anjir. 3; Ora ana: p <0.001; Exp: p = 0.002).

Tokoh 3. 

Efek saka pengalaman seksual ing gunggung morfin. Wektu sing ditemokake ing saline- (Sal) utawa morphine- pasangan (Mor; 0.5, 5 utawa 10 mg / kg bodyweight) nalika test post ing naif (Naif, n = 10-13) utawa pengalaman (Exp, n = 9-13) lanang. Data sing diwatesi minangka ± SEM; * nuduhake prabédan signifikan dibandhingake karo kamar Sal-dipasangkan ing kéwan sing padha. NS, Ora penting.

Fleksibilitas pengalaman seksual saka prilaku kawin gumantung ing aktifitas opioid reseptor

Temuan kasebut adoh banget nduduhake yen EOP tumindak ing VTA sajrone sesi kawin singkat 5 saben dina nyebabake keluwesan neuron dopamin VTA sing meh padha karo efek morfin kronis utawa self-administration heroinRusso et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). We hypothesized sing VTA dopamine soma-ukuran abang iku kritis kanggo ganjaran learning lan khusus kanggo pengalaman favilitation-prakara jinis laku ing syarat-syarat motivasi lan kinerja. Hipotesis iki diuji kanthi mblokir MOR nggunakake naloxone nalika kawin lan mriksa efek ing fasilitasi prilaku seksual sing diakibatake dening pengalaman seksual nalika lima dina kawin saben dina. Data diwenehi ing Tokoh 4 kanggo sesi kawin kaping lima lan kaping pisanan, amarga iki minangka data sing paling apik nggambarake prilaku ngenani pengalaman prilaku. Kajaba iku, efek jangka panjang perawatan naloxone sajrone sesi kawin dites ing pangopènan prilaku ngenani pengalaman prilaku, sajrone test kawin pungkasan 1 minggu sabanjure. Tokoh 4A nuduhake desain eksperimen. Ana efek utama sing signifikan ing sesi kawin ing kabeh paramèter saka prilaku jinis (Gunung latency: F(2,55) = 11.286, p <0.001; latensi intromission: F(2,55) = 8.767, p <0.001; latensi ejakulasi: F(2,55) = 10.368, p <0.001) lan perawatan naloxone ing latency bisa dipasang (F(1,55) = 6.585, p = 0.013) lan intromisi (F(1,55) = 7.863, p = 0.007). Perbandhingan pasangan nuduhaké yèn perawatan naloxon kena pengaruh seksual nalika sesi kawin pertama amarga kéwan naloxone duwé latency sing luwih dawa kanggo mlebu pisananp = 0.002) lan intromisi (p = 0.002) dibandhingake karo kontrol uyah ing dina pisanan kawin. Efek naloxone iki ing prilaku seks dhisikan diwiwiti kanthi pengalaman seksual lan ora diamati sajrone sesi kawin sing sabanjure (Tabel 1). Apamaneh, administrasi naloxone sadurunge saben limang kawin kawin ora nyegah fasilitasi prilaku seksual kanthi pengalaman seksual. Konsisten karo efek penguat saka pengalaman seksual, lanang sing dianggep asin ditampilake penurunan latensi sing diluncurakeAnjir. 4B; p = 0.032) intromission (Anjir. 4C; p = 0.033) lan ejakulasi (Anjir. 4D; p <0.001) sajrone sesi kawin kaping lima dibandhingake karo sesi kawin kaping pisanan, sing nuduhake fasilitasi tumindak seksual. Kajaba iku, lanang sing diobati naloxone ditampilake latensi luwih cendhek (Anjir. 4B; p <0.001), intromission (Anjir. 4C; p <0.001), lan ejakulasi (Anjir. 4D; p = 0.017) ing kalima dibandhingake karo dina kapisan. Kajaba iku, lanang sing dianggep naloxone ora beda karo kontrol saline ing latensi sajrone sesi kawin kaping lima.

Tokoh 4. 

Opioid endogen nduweni peran kritis sajrone fasilitasi seksual sing dipengaruhi pengalaman. A, Desain eksperimental. B-D, Parameter tingkah laku seksual kanggo lanang ditangani karo saline (Sal, bar putih, n = 11) utawa naloxone (NLX; bar ireng, n = 12) kanthi administrasi sistemik. Data sing dituduhake yaiku latensi kanggo nempelake (B; detik), intromission (C; detik), lan ejaculation (D; detik) ing dina 1 lan 5 saka limang kawin saben dina. Kajaba iku, data ditampilake kanggo final kawin ujian, 7 d sawise sesi kawin kaping lima. Data ditampilake minangka tegese ± SEM; + nuduhake prabédan signifikan antara dina 1 lan 5 ing perawatan; * nuduhake prabédan signifikan antara dina lan dina test 5 ing perawatan; # nuduhake prabédan signifikan antara grup naloxone lan saline ing dina.

Tabel 1. 

Administrasi Naloxone sadurunge kawin karo latency tambah kanggo gunung lan intromisi mung ing dina pisanan kawin

Sabanjure, perawatan naloxone sajrone sesi seksual ora ngganggu pangopènan prilaku seksual sing didhukung pengalaman ing dina ujian pungkasan kawin. Ing dina test dianakaké 7 d sawise sesi kawin pungkasan tanpa anané injeksi naloxone. Wong lanang sing diobati saline nampilake fasilitasi prilaku seksual sing didhukung. Khusus, latencies kanggo mount, intromisi, lan ejaculation ora beda antarane sesi kawin kaping lima lan dina test final (Anjir. 4B-D). Dene, lanang sing dianggep naloxone nuduhake peningkatan sing signifikan ing latency kanggo Gunung (Anjir. 4B; p = 0.033), intromission (Anjir. 4C; p = 0.036) lan ejakulasi (Anjir. 4D; p = 0.049) ing dina test tinimbang sesi kawin kaping lima. Uga, ing dina test iwak naloxone ditemokake dadi luwih alon tinimbang lanang sing dianggep asin sing ditampilake dening latensi sing luwih dawa kanggo dipasang (Anjir. 4B; p = 0.017) lan intromisi (Anjir. 4C; p = 0.043). Mangkono, perawatan naloxone mbatesi pangopènan, nanging ora wiwitan, pangembangan fasilitasi prilaku sing diduwuhi pengalaman. Temuan kasebut nunjukake peran penting kanggo plastik neopon dopamin VOP dopamine ing ekspresi jangka panjang kanggo nguatake prilaku ganjaran alami.

Sawetara eksperimen kontrol tambahan ditindakake kanggo nemtokake yen efek saka reseptor opioid nalika ngatasi penguatan tegangan seksual jangka panjang sing dumadi saka sawijining kakurangan administrasi naloxone ing dina pungkasan test kawin (Anjir. 5A,B), sing spesifik kanggo mundhut jangka panjang, nanging ora tetep pangopènan fasilitasi kawin (Anjir. 5E,F), ora disebabake infeksi saben dina kanggo naloxone piyambak (Anjir. 5C,D), lan ora disebabake mundhut ganjaran seksual ing lanang sing dianggep naloxone (Anjir. 5G,H). Kaping pisanan, kanggo nuduhake tingkah laku seksual sing diowahi ing ujian kawin pungkasan ora amarga ora ana naloxone, salah siji naloxone utawa uyah ditanggung ing dina pungkasan ujian kawin kanggo kewan sing ditampa kawin dipasake karo naloxone nalika padha ngalami seksualAnjir. 5A). Ana efek sing penting banget kanggo dina kawin ing latensi kanggo mlayu (Anjir. 5B; F(2,27) = 30.031, p = 0.038) lan intromisi (Tabel 2; F(2,27) = 10.686, p = 0.048). Ora ana efek utama dina kawin ing latency kanggo ejaculation (Tabel 2; F(2,27) = 2.388, p = 0.109) Kaya sing diterangake ing ndhuwur, perawatan naloxone nalika kawin ora mengaruhi fleksibilitas perilaku seksual sajroning limang sesi seksual. Kelompok loro (kelompok sing diobati saline- lan naloxone sing ditemtokake dening perawatan sing ditampa nalika tes kawin pungkasan, loro sing ditampa naloxone nalika kawin) nampilake fleksibilitas tindak tanduk seksual ing dina 5 dibandhingake dina 1 lan nuduhake latensi sing luwih cendhak sing luwih cendhakAnjir. 5B; saline: p = 0.033; naloxone: p = 0.014) lan intromisi (Tabel 2; saline: p = 0.034; naloxone: p = 0.026). Kewan sing ditampa naloxone utawa saline ing dina test pungkasan kawin wis lekas luwih dawa kanggo dilebokake (Anjir. 5B; saline: p = 0.018; naloxone: p = 0.029) lan intromisi (Tabel 2; saline: p = 0.019; naloxone: p = 0.020) dibandhingake karo dina kalima pengalaman kawin. Mulane, administrasi naloxone utawa saline ing dina test sadurunge sadurunge kawin ora pengaruh efek perawatan naloxone sak sesi pengalaman seksual lan ngilangi fasilitasi jangka panjang seksual identik karo sing ditampilake ing kéwan sing ora nampa injeksi apa wae ing dina ujian pungkasan kawin (Anjir. 4).

Tokoh 5. 

Opioid endogenes penting ing ekspresi jangka panjang saka prilaku seksual sing dipengaruhi pengalaman. A, Desain eksperimen kanggo eksprimen kanggo efek perawatan NLX ing dina test. B, Gunung latency ing dina 1 lan 5 saka limang dina berturut-turut ujian wektu kawin lan final (Test) nyuntikake injeksi saline (abu-abu) utawa naloxone (ireng). Data sing nuduhake tegese ± SEM. * nuduhake prabédan signifikan antara dina 1 lan dina 5 ing perawatan. # nuduhake prabédan signifikan antara dina Test lan Day 5 ing perawatan. C, Desain eksperimen kanggo eksperimen kanggo nguji efek pre-treatment naloxone piyambak tanpa pengalaman seksual tumrap perilaku kawin. D, Gunung latency ing final test kawin, 7 dina sawise 5 dina salin utawa injeksi naloxone tanpa kawin. Data sing nuduhake tegese ± SEM. E, Desain eksperimental kanggo eksperimen kanggo nguji manawa perawatan naloxone kena pengaruh tampilan jangka pendek fungsi fasilitasi seksual ing kewan seksual. F, Gunung latency ing dina 1 lan dina 5 saka limang dina berturut-turut kawin lan final kawin test dina, 1 dina sawise dina 5 ing ngarsane injeksi salin (abu-abu) utawa naloxone (ireng). Data sing nuduhake tegese ± SEM. * nuduhake prabédan signifikan antara dina 1 lan dina 5 ing perawatan. G, Desain eksperimen kanggo eksperimen kanggo nguji manawa perawatan naloxone mblokir efek paring prilaku seksual. H, Wektu ngginakaken kamar kanthi pasangan (sajrone detik) nalika pretest (putih) lan post-test (ireng) kanggo kewan sing diwenehi naloxone utawa saline sadurunge kawin. Data sing nuduhake tegese ± SEM; * nuduhake prabédan signifikan dibandhingake pretest.

Tabel 2. 

Data sing ditampilake minangka latensi kanggo intromisi lan ejakulasi (detik) saka eksperimen kontrol sing dianakake kanggo nemtokake yen efek pemutusan MOR babagan rugi penguat jangka panjang perilaku seksual dumadi saka kakurangan administrasi naloxone ing dina pungkasan test kawin

Kanggo nemtokake manawa ana perawatan naloxone nalika dipasake karo pengalaman seksual lan ora diulang menyang naloxone saben se sing nyebabake gangguan perilaku seksual 7 d sawise perawatan pungkasan, kéwan sing ora aktif seksual ditampa suntikan lima suntikan naloxone utawa suntikan saline sadurungé ujian kawin pungkasan 7 d kapungkur (Anjir. 5C). Ora ana perbedaan sing signifikan sing dideteksi kanggo parameter kawin antarane saline lan kelompok prereel naloxone (Anjir. 5D; Gunung latency; latensi intromisi: saline 139.7 ± 40.3 vs naloxone 121.83 ± 42.55; kekendelan ejakulasi: saline 887.9 ± 70.0 vs naloxone 1050.8 ± 327.31). Hasil kasebut nunjukake yen naloxone piyambak ora cukup kanggo ngowahi prilaku seksual sing sabanjure, padha karo kekurangan efek saka naloxone piyambak ing plastik neuron dopamin dopamin.

Kita hypothesize yen perawatan naloxone sajrone ngolehake pengalaman seksual ngganggu ekspresi jangka panjang ngenani prilaku seksual-induced prilaku seksual. Kanggo nyoba maneh, efek saka perawatan naloxone nalika kawin ditesake ing perilaku seksual sakteruse sajrone tes kawin final, sing dianakake mung 1 d sawise kawin terakhir (desain eksperimental; Anjir. 5E). Ana efek utama sing penting kanggo dina kawin ing gunungAnjir. 5F; F(2,20) = 19.780, p <0.001) lan latensi intromission (Tabel 2; F(2,20) = 19.041, p <0.001). Ora ana pengaruh utama dina ing latensi ejakulasi (Tabel 2; F(2,20) = 3.042, p = 0.070). Kaya sing kasebut ing ndhuwur, kabeh lanang (senadyan pangobatan saline utawa naloxone) nuduhake fleksibilitas prilaku seksual sajrone lima sesi seksual sing dituduhake dening latency sing luwih cendhek kanggo gunung (Anjir. 5F; saline: p = 0.002; naloxone: p = 0.018) lan intromisi (Tabel 2; saline: p = 0.006; naloxone: p = 0.009) ing dina 5 dibandhingake dina 1. Kajaba iku, prilaku seksual sing dilakokaké ditrapake ing dina test dibandhingake karo dina 1 sing dituduhake dening latency sing luwih cendhek kanggo dipasang (Anjir. 5F; saline: p = 0.001; naloxone: p = 0.020) lan intromisi (Tabel 2; saline: p = 0.004; naloxone: p = 0.009). Luwih penting, perawatan naloxone nalika kawin ora ndadekake kanthi nyata fasilitasi seksual-induced prilaku jinis nalika dites 1 d sawise jinis pengalaman, gumantung saka perawatan naloxone ing dina ujian pungkasan kawin iki.

Pungkasane, kita nguji kemungkinan efek naloxone ing ekspresi jangka panjang prilaku seksual sing gampang yaiku amarga ngatasi naloxone ing sifat-sifat prilaku seksual sing maringi hadiah. Nanging, naloxone diterbitake langsung sadurunge kawin ora ngowahi formasi CPP kanggo kawin (Anjir. 5G), nerangake yen perawatan naloxone ora ngowahi ganjaran seksual. Loro saline- lan kelompok-kelompok naloxone dianggep CPP signifikan kanggo prilaku seksual minangka dituduhake kanthi wektu tambah akeh sing ngginakaken ing chamberAnjir. 5H; saline: p = 0.038; naloxone: p = 0.002) nalika pasinaon dibandhingake karo pretest. Mulane, naloxone ora menehi efek ngrugekake ing pangopènan prilaku seksual sing difasilitasi kanthi mblokir ganjaran sing gegayutan karo perilaku seksual.

Fasilitasi prilaku seksual gumantung marang EOP action ing VTA

Kanggo konfirmasi yen EOP tumindak khusus ing VTA kanggo ngindhuksi fasilitasi seksual jangka panjang, rancangan eksperimen kasebut ing Tokoh 3A iki bola-bali nganggo infusions intra-VTA naloxone tinimbang injeksi sistemik. Asil sing padha karo administrasi sistemik sing diterangake ing ndhuwur. Ana efek sing penting banget kanggo dina kawin ing kabeh paramèter saka prilaku seksual (Anjir. 6A, Gunung latency: F(2,33) = 4.494, p = 0.019; B, latensi intromisi: F(2,33) = 4.042, p = 0.027; C, latensi ejakulasi: F(2,33) = 5.309, p = 0.010) lan perawatan naloxone intra-VTA nalika latensi diluncurakeF(1,33) = 7.345, p = 0.011) lan intromisi (F(1,33) = 6.126, p = 0.019). Intra-VTA naloxone ora nyegah fasilitasi seksual sing diprakirake pengalaman prilaku sajrone pasangan kawin 5, minangka lanang sing dianggep naloxone nuduhake latency sing mudhun kanggo gunung (Anjir. 6A; p = 0.001), intromission (Anjir. 6B; p <0.001), lan ejakulasi (Anjir. 6C; p = 0.001) ing dina 5 dibandhingake dina 1. Wong sing dianggep Naloxone ora beda karo lanang sing dianggep asin ing dina kalima kawin ing sembarang latensi. Inti-VTA naloxone perawatan, kaya administrasi sistemik, nyebabake ningkatake gunung (Anjir. 6A; p <0.001) lan latensi intromission (Anjir. 6B; p <0.001) ing dina kawin kaping pisanan dibandhingake karo pria sing dianggep asin, sing ora diamati sajrone sesi kawin sabanjure (sajrone pria naloxone lan saline ora beda). Salah sawijining pengamatan sing ora dikarepake yaiku ing eksperimen iki, pria sing diobati saline ora nuduhake fasilitasi statistik utawa latensi intromission sing signifikan (kaya sing dituduhake ing kabeh eksperimen sing diandharake ing ndhuwur), lan mung latensi ejakulasi sing dikurangi ing dina kaping lima dibandhingake karo dina pisanan (uyah: p = 0.001).

Tokoh 6. 

Opioid endogen ing VTA mediasi pengalaman-prakara fleksibilitas prilaku seksual lan pangopènan long-term. Parameter prilaku seksual kanggo lanang ditangani karo saline (Sal, bar putih, n = 8) utawa NLX (bar ireng, n = 6) kanthi administrasi intra-VTA. Data sing dituduhake yaiku latensi kanggo nempelake (A), intromission (B), lan ejakulasi (C) ing dina 1 lan 5 saka kawin lima dina berturut-turut. Kajaba iku, data ditampilake kanggo dina pungkasan test kawin, 7 d kang dina sawise 5 tanpa anané saline utawa injeksi naloxone. Data sing nuduhake tegese ± SEM; + nuduhake prabédan signifikan antara dina 1 lan 5 ing perawatan; * nuduhake prabédan signifikan antara dina lan dina test 5 ing perawatan; # nuduhake prabédan signifikan antara grup naloxone lan Sal ing dina. Schematic drawings of coronal VTA sections (H, -4.60; I, -5.00; J, -5.25 from bregma) indicating sites injeksi intra-VTA for all animals in Experiment 5 (saline; naloxone, black; Missed, gray) nggunakake gambar cithakan saka Swanson Brain Maps (Swanson, 2004). Cannulas kalebu bilateral, nanging situs injeksi dituduh sacara unilaterally kanggo gampang presentasi. fr, Fasciculus retroflexus; ML, Medina lemniscus; SN, substantia nigra.

Pengobatan naxolone intra-VTA mbatesi pangopènan prilaku seksual sing difasilitasi ing wong lanang seksual, sing padha karo efek saka naloxon sistemik. Khusus, ing dina test pungkasan, lanang sing dianggep naloxone nduweni latency sing luwih suwe kanggo dipasang (Anjir. 6A; p = 0.011), intromission (Anjir. 6B; p = 0.010), lan ejakulasi (Anjir. 6C; p = 0.015) dibandhingake karo sesi kawin kaping lima lan dibandhingake karo lanang sing diolah saline ing dina test pungkasan (Anjir. 6A, p = 0.006; B, p = 0.008). Sabanjure, kéwan sing dianggep salin ora béda karo latensi kanggo mlebu lan intromisi antarané ujian pungkasan dina lan dina 5 kawin. Efek kasebut spesifik kanggo pangiriman saka naloxone menyang VTA, minangka lanang karo situs cannulation toko nanging ora nargetake VTA (Anjir. 6D; n = 3) ditampilake fasilitasi seksual jangka panjang sing padha karo kontrol saline-treated (ML, IL = 53 ± 6.245, EL = 389 ± 299.5 lan beda banget tinimbang karo kéwan naloxone intra-VTA ing dina pungkasan test kawin (ML, IL: p = 0.029; EL: p = 0.0395).

EOP tumindak dibutuhake kanggo aktivasi saraf sing diadaptasi karo saraf

Adhedhasar temuan kasebut adoh, kita dugaan yen aktivasi EOP ing VTA sajrone pengalaman kawin lan dopamin VTA ing ngendi sing ngilangi ukurane kritis kanggo atribusi panggungguhan insentif kanggo ngasilake rangsangan sing gegandhengan lan akibate, pangopènan difasilitasi prilaku seksual. Kanggo nguji hipotesis iki, efek saka pamblokiran reseptor opioid nalika pengalaman kawin ing kegiatan saraf sing dipengaruhi dening cahya sabanjure kanggo isyarat konteku kahanan prediktifake ganjaran seksual (pituduh kontekstual sing terkait seks) sing diteliti. Kewan-kewan sing ora duwe panjelasan uga kena pengaruh lingkungan, nanging ora ana hubungane karo pengalaman kawin sadurunge, mula ana isyarat netral. Pungkasan, level pérk awal ditemtokake ing kelompok kontrol seksual lan naif sing tetep ana ing kandhang ngarep lan ora ana sing ditandhani (-No Cue). Ngonfirmasi lan ngembangaken temuan sadurungeBalfour et al., 2004), pajanan kanggo isyarat kontekstual sing digandhengake karo ganjaran jinis sadurungé ningkatake ekspresi pérk ing lanang sing laku seksual ing NAc (Anjir. 7) lan mPFC (Anjir. 8A-C), nanging ora nyebabake aktivasi neuronal ing BLA (Anjir. 8D) utawa CPu (data ora ditampilake). Ana efek utama eksposur kiu ing NAc core (F(1,12) = 12.1941, p = 0.004), ACA (F(1,12) = 5.541, p = 0.038), lan PL (F(1,12) = 5.241, p = 0.041), lan perawatan naloxone ing inti NAC (F(1,12) = 6.511, p = 0.025), ACA (F(1,12) = 15.242, p = 0.002), lan PL (F(1,12) = 7.336, p = 0.019). Ana interaksi signifikan ing inti NAC (F(1,12) = 10.107, p = 0.008), ACA (F(1,12) = 16.060, p = 0.002), PL (F(1,12) = 8.235, p = 0.014), lan IL ((F(1,12) = 6.965, p = 0.022). Kawitan cahya sing luwih cedhak karo Cue nuduhake pERK ing kéwan sing dialami kanthi seksual saline-treat (Exp Sal ​​+ Cue) dibandhingake karo kontrol sing ora kena pengaruh lan ditarik saka kandhang (Exp Sal-No Cue) ing inti NAc (Anjir. 7A; p <0.001), lan mPFC subregion ACA (Anjir. 8A; p = 0.001), PL (Anjir. 8B; p = 0.003), lan IL (Anjir. 8C; p = 0.029). Ing kontras, ing kéwan-kéwan sing dianggep asor sacara seksual, cahya marang isyarat kontekstual, sing ora ana gegayutan karo ganjaran seksual, ora ngindhakaken pERK ing salah sawijining wilayah otak (Nave Sal + Cue dibandhingake karo Sal-No Cue naive; Panganan. 7, 8), nuduhake yen induksi pERK spesifik kanggo cahya saka isyarat sing nduweni pengalaman seksual. Kajaba iku, pengalaman seksual dhewe ora ngubah ekspresi pERK ing sembarang wilayah otak, amarga ora ana perbedaan antarane klompok sing dijupuk saka kandhang ngarep, manawa naif utawa pengalaman seksual, lan diobati karo saline utawa naloxone.

Tokoh 7. 

Tumindak opioid endogen dibutuhake kanggo aktivasi saraf ing NAc sing dipengaruhi dening pertondho kahanan sing terkait karo kelamin. Nomer sel-pERK-IR per mm2 ing inti accumbens inti (A) lan cangkang (B) ing kéwan sing ora aktif (putih) lan alami (Exp; ireng) sing disajèkaké karo NLX utawa saline sistemik (Sal) nalika kawin (Exp males) utawa penanganan sesi (Naomi). Klompok kasebut ana ing pertandhingan kontrovèrsial (Cue), sing ana hubungane karo isyarat ing Exp putra lan isyarat netral ing kéwan Naif, utawa dijupuk saka kandhang-kandhang (No Cue; dituduhake dening lack of Cue-label). Data ditampilake minangka tegese ± SEM; * nuduhake prabédan signifikan dibandhingake karo kontrol sing ora diprayogin ora ana kontrol cue-expose (Naif Sal-No Cue lan Exp Sal-No Cue); # nuduhake prabédan nyata dibandhingake klompok Exp Exp (Exp Sal ​​+ Cue) Sal-treated. Perwakilan gambar sel pERK-IR per mm2 ing inti NAc saka lanang ngalami seksual karo Sal (C, D) utawa NLX (E, F) sing dicantolake saka kandhang ngarep (Ora Cue, C, E), utawa dituduhake karo isyarat kontekstual kawin (Cue; D, F). N = 4 saben kelompok kejaba Nai NLX (Ora Ana Cue), n = 3. ac, komissure anterior. Bar scale, 100 μm.

Tokoh 8. 

Efek saka naloxone sing dikembangake kanthi ekspresi pERK ing wilayah target VTA liyane. Nomer sel-pERK-IR per mm2 ing jinis naif (putih) lan alami (Exp; ireng) sing diwenehi NSX utawa saline (Sal) sistematis nalika sesi kawin lan dituduhake karo isyarat kontekstual (Cue) utawa kandang sing ora ana ing ACAA), PL (B), IL (C), lan BLA (D). Data sing makili berarti ± SEM; * nuduhake prabédan signifikan dibandhingake karo kontrol sing ora diprayogin ora ana kontrol cue-expose (Naif Sal-No Cue lan Exp Sal-No Cue); # nuduhake prabédan signifikan dibandhingake karo kontrol naif sing ngandhut cue-exposed Sal-dianggep (Naive Sal + Cue).

Ing dhukungan saka hipotesis kita, perawatan naloxone sajrone ngobati seksual sacara signifikan ngilangi pERK induksi kanthi isyarat kahanan sing terkait seks. PERK ekspresi ing eksperimen sing ditangani naloxone sing dianggep naloxone (Exp NLX + Cue) ora beda karo ekspresi pERK ing salah sawijine kelompok kontrol naif utawa pengalaman sing dijupuk saka kandhang ing ngarep (Naif Sal-No Cue or Naive NLX- Ora Cue). Mangkene ekspresi PERK ing eksperimen sing ditandhangi naloxone sing ditandhani naloxone (Exp NLX + Cue) luwih murah dibandhingake karo kéwan-kéwan sing wis dialami cumi sing diobati (Exp Sal ​​+ Cue) ing NAc core (Anjir. 7A; p = 0.002) lan subkelompok mPFC (Anjir. 8A, ACA: p <0.001; B, PL: p = 0.002; C, IL: p = 0.015).

Ing cangkang NAc, analisis ANOVA loro-lorone ora ngasilake efek sing signifikan sacara statistik babagan faktor pendonya lan perawatan naloxone. Nanging, perbandingan sing jarake pasangan nuduhake yen cahya obah didadekake pERK ing grup sing ngalami seksual sing diobati (Exp SAL + Cue) dibandhingake karo klompok kontrol naif Saline ora ana sing cueAnjir. 7B; Nai SAL-No Cue: p = 0.0163).

Diskusi

Panaliten saiki nuduhake yen EOP tumindak ing VTA sajrone tingkah laku seksual, perilaku ganjaran alam, nyebabake abang sing kuat nanging tetep ing ukuran sel dopamin VTA. Pengurangan ukuran soma ora diamati ing neuron non-dopamine VTA, utawa neuron dopamine ing substantia nigra, sing nyatakake owah-owahan iki spesifik kanggo sel dopamin VTA. Plastisitas dopamin VTA iki katon mirip karo sing dipengaruhi dening paparan opiate kronis (Sklair-Tavron et al., 1996; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011) lan nyebabake toleransi sing padha marang opiate (morfin) ganjaran. Kita nemtokake pivotalitas dopamin VTA kritis kanggo jangka panjang (pangopènan) nanging ora cendhak (pembangunan), penguatan perilaku seksual lan aktivitas neural cue-induced cue-induced (pERK) ing target wilayah VTA: NAc lan mPFC. Temuan kasebut minangka indikator peran kanggo dopaminitas VTA dopamine ing ekspresi jangka panjang pratélan insentif ganjaran alami pitunjuk ramalan utawa ganjaran memori.

Wis nyathetake yen pengalaman seksual ngasilake fasilitasi prilaku seksual sakteruse, kalebu wiwitan luwih cepet kanggo wiwitan kawin lan tambah kinerja (Balfour et al., 2004; Pitchers et al., 2010a,b, 2012). Fleksibilitas utawa penguatan prilaku seksual iki dikarepake paling sethithik 28 d sawise kawin (Pitchers et al., 2012). Kajaba iku, wis ditampilake yen prilaku seks lan kahanan kahanan prediksi saka ganjaran jinis nyebabake internalisasi MOR ing VTA lan ngindhuksi aktivasi neuronal ing kabeh sistem mesolimbi, kalebu ing VTA (neuron dopamin lan nondopamine), NAc, PFC, lan BLABalfour et al., 2004, 2006). Punika mapanake neuron dopamin VTA sing nduweni peran kritis sajroning sinau lan atribusi panggungguhan insentif rangsangan sing digayutake ganjaran (Berridge lan Robinson, 1998; Berridge et al., 2009; Flagel et al., 2011) lan kritis kanggo prediksi pahala (Schultz, 2010). Temuan saiki nggedhekake kawruh kita saiki kanthi nuduhake neuroplasticitas VTA sing ditampa ganjaran kritis kanggo fungsi kasebut, lan gumantung marang aktifitas MOR dening EOP ing VTA. Saiki ora dingertèni kang EOP yaiku ligan MOR sing tumindak ing VTA sajrone laku seksual lanang. Sanajan loro β endorphin lan enkephalin wis disebabake ing motivasi insentif kanggo penguat pangan (Hayward et al., 2002), iki tetep ditetepake kanggo laku seksual lanang. Kita sadurunge nedahake yen neuron β-endorphin ora aktif nalika kawin, utawa ora ana mRNA POMC; saéngga, sing nyaranake endorfin β ora bisa dadi EOP kritis tumindak ing VTA nalika kawin (Davis et al., 2007). Plastisitas dopamine VTA iki penting kanggo aktivitas saraf ing mPFC, NAc, lan VTA sing nyakup gunggunge prediksi gratifikasi seksual. Menapa malih, plastik dopamine VTA dados kritis kangge ekspresi jangka panjang babagan peningkatan wiwitan lan kinerja perilaku seksual. Ing kontras, neuroplastisitas VTA sing disebabake pengalaman seksual ora dibutuhake kanggo nanggepi hedonic minangka ganjaran jinis (ditemtokake dening CPP) lan fasilitasi motivasi lan kinerja seksual (nalika ngalami jinis seksual utawa 1 dheweké mengko) tetep utamane nalika pamblokiran MOR nalika kawin (Mehrara lan Baum, 1990). Nanging, data nyaranake yen neuroplastisitas dopamine VTA nyadari istilah sing luwih suwe (7 d sawise pengalaman seks pungkasan; Pitchers et al., 2012) ekspresi "kepingin" ganjaran jinis lan respet motivasi dhuwur kanggo kawin isyarat (Miller lan Baum, 1987; Berridge lan Robinson, 1998).

Kéwan sing dialami sacara seksual nuduhaké toleransi silang kanggo morfin ganjaran, padha karo efek roda sing mlaku ing tikus, prilaku rewarding alam liyane, akibat ditahan kanthi perawatan naloxone (Lett et al., 2001, 2002) lan ditemtokake dadi gumantung marang plastisitas sel dopamin VTA (temuan saiki). Kaya ganjaran alam, kakehan morfin opiates utawa heroin bakal ngasilake abang VTA dopamin ing ukuran (Sklair-Tavron et al., 1996; Spiga et al., 2003; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). Menapa malih, paparan infeksi kanthi periode penundaan cendhak nyebabake toleransi nampi, minangka disebabake dening dosis sing luwih dhuwur saka tamba sing dibutuhake kanggo mbentuk hubungan ganjaranShippenberg et al., 1987; Russo et al., 2007), lan nimbulaké kéwan dhamparing dhéwé kanggo nambah asupan tamba (Ahmed et al., 2000; Walker et al., 2003). Mulane, EOP lan opiates tumindak ing sèl saraf umum kanggo nuntun toleransi ganjaran sak awal penarikan, sing bisa nggambarake mekanisme homeostatic sing kompensasi kanggo ngatasi stimulasi kanthi paparan berulang (Koob lan Le Moal, 2005). Contoné, nalika abstinence tamba opiate long-term, toleransi dipateni kanggo sensitivitas kanggo sifat-sifat ganjaran kanggo tamba (Harris lan Aston-Jones, 2003; Aston-Jones lan Harris, 2004; Harris lan Gewirtz, 2004). Apike, pengalaman seksual sing diiringi periode abstinensi seksual 7-28 d wis ditemokake kanggo nimbali pahala silang kanggo psikostimulant (Pitchers et al., 2010a), sing gumantung ing ekspresi deltaFosB lan reseptor dopamin ing aktivasi 1 ing NAc (Pitchers et al., 2013). Mulane, pengalaman pahala seksual nyebabake toleransi ganjaran apadene toleransi lan psychostimulant sensitization pahala, senadyan periode abstinence seksual maneh ing toleransi ganjaran morfin tetep bakal dites. Kita nyadari yen efek bebrayan kasebut ing ganjaran obat bisa dimediasi dening macem-macem bentuk plastik saraf ing wilayah sing beda ing sistem mesolimbi: Tindakan VTA EOP lan plastisitas dopamine mediate toleransi ganjaran rasa (studi saiki), dene ekspresi NA deltaFosB ngontrol sensitivitas psychostimulant (Pitchers et al., 2013). Loro-lorone acara kasebut bisa nyumbangake eskalasi njupuk obat (Ahmed lan Koob, 1998, 1999; Ahmed et al., 2000, 2002, 2003; Walker et al., 2003).

Mekanisme molekuler sing EOP nyebabake neuron dopamin VTA sajrone ganjaran ganjaran alam tetep ora dingerteni. Jalur IRS2-Akt-mTORC2 minangka mediator utama ukuran sing mudhun ing VTA sing disebabake morfin berulangJaworski et al., 2005; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). Pangowahan morfin sing diulangi owah-owahan ing ukuran neuron dopamin ing VTA bisa dicegah dening infusions intra-VTA saka faktor neurotrophik sing asalé saka otak (BDNF; Sklair-Tavron lan Nestler, 1995). BDNF ngaktifake jalur kasebut liwat pandhuan TrkB (Russo et al., 2007), kinase reseptor kanthi afinitas dhuwur kanggo BDNF lan bagéan saka jalur IRS2-Akt (Seroogi lan Gall, 1993; Numan lan Seroogy, 1999), lan ditulis ing neuron dopamin lan GABA ing VTA. Downregulation saka maneka komponen saka jalur IRS2-Akt nggunakake teknologi transfer vektor virus mimisake efek eksposur opiate kronis. Salajengipun, efek paparan opiate bisa diluwari kanthi mulihake jalur ikiRusso et al., 2007) lan overexpression saka komponèn saka mTORC2 ngalangi morfin-induced VTA dopamine soma reduction (Mazei-Robison et al., 2011). Mulane, karya sadurunge nyelidiki efek opiate kronis ing dopamine VTA ukuran nuduhake yen downregulation morfine-induced jalur IRS2-Akt-mTOR loro cukup lan perlu kanggo efek iki (Mazei-Robison lan Nestler, 2012). Mangkono, iku bisa nggodha yen efek saka pengalaman seksual ing neuroplastisitas dopamin VTA padha uga ditengahi dening BDNF lan jalur IRS2-Akt-mTORC2.

Ing kesimpulan, studi sing saiki nuduhake yen neuroplasticitas VTA disebabake pengalaman karo prilaku rewarding alami, utamane kanthi laku seksual lanang sing bola-bali. Khusus, EOP tumindak ing VTA kanggo ngurangi ukuran dopamin, sing dihipotesisake digandhengake karo keginaan saraf sing luwih dhuwur lan output dopamin kurang nyebabake sistem hipodopaminergik, lan ngowahi sistem mesolimbi kanggo nanggepi pitunjuk sing prediktifake ganjaran seksual. Salajengipun, neuroplasticitas VTA punika kritis kangge motivasi lan memori ganjaran, ananging boten kangge dampak hedonik tindak tanduk seksual. Pungkasane, neuroplastisitas VTA disebabake prilaku ganjaran alami sing diterusake kanthi wektu sing cendhak ganjaran pangaruh abstinence pangaruh opiate lan mulane bisa nimbulaké kerentanan kanggo ngembangake kecanduan narkoba.

Cathetan sikil

  • Ditampa Januari 12, 2014.
  • Revisi nampa Mei 17, 2014.
  • Ditampa Mei 20, 2014.

  • Panliten iki didhukung dening pamrentah saka Institut Riset Kesehatan Kanada kanggo LMC lan Ilmu Pengetahuan Alam lan Dewan Riset Teknik kanggo KKP

  • Para penulis ngandharake ora ana kapentingan finansial sing saingan.

  • Korespondensi kudu ditujokake kanggo Dr Lique M. Coolen, Pusat Kesehatan Universitas Mississippi, Departemen Fisiologi lan Biofisika, 2500 North State Street, Jackson, MS 39216-4505. [email dilindhungi]

Cathetan Suku

  1. ↵
    1. Agmo A

    (1997) Kandhang seksual lanang. Brain Res Brain Res Protoc 1: 203-209.

  2. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Koob GF

    (1998) Peralihan saka intake kanggo ngobati tamba gedhe banget: owah-owahan ing titik set hedonic. Ilmu 282: 298-300.

  3. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Koob GF

    (1999) Tambah ing titik sethithik kanggo administrasi awak kokain sawise escalasi ing tikus. Psychopharmacology 146: 303-312.

  4. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Walker JR,
    3. Koob GF

    (2000) Tambah terus-terusan ing motivasi kanggo njupuk heroin ing tikus kanthi sajarah obat tambah. Neuropsychopharmacology 22: 413-421.

  5. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Kenny PJ,
    3. Koob GF,
    4. Markou A

    (2002) bukti neurobiologis kanggo allostasis hedonik sing digandhengake karo nambahake migunakake kokain. Nat Neurosci 5: 625-626.

  6. ↵
    1. Ahmed SH,
    2. Lin D,
    3. Koob GF,
    4. Parsons LH

    (2003) Eskalasi kokain dhéwé-administrasi ora gumantung marang tingkat dopamin ing akumulasi kokain sing diakibatake kokain. J Neurochem 86: 102-113.

  7. ↵
    1. Aston-Jones G,
    2. Harris GC

    (2004) Substrat otak kanggo ningkatake obatan dadine sajrone mundur. Neuropharmacology 47: 167-179.

  8. ↵
    1. Balfour ME,
    2. Yu L,
    3. Coolen LM

    (2004) Perilaku seksual lan isyarat lingkungan sing digandhengake karo jinis ngaktifake sistem mesolimbi ing tikus. Neuropsychopharmacology 29: 718-730.

  9. ↵
    1. Balfour ME,
    2. Brown JL,
    3. Yu L,
    4. Coolen LM

    (2006) Potensi kontribusi saka efferents saka korteks prefrontal tengah kanggo aktivasi saraf tindak tanduk seksual ing tikus lanang. Neuroscience 137: 1259-1276.

  10. ↵
    1. Beitner-Johnson D,
    2. Guitart X,
    3. Nestler EJ

    (1992) Neurofilament protèin lan sistem dopamin mesolimbi: angger-angger umum déning morphine kronis lan kokain kronis ing wilayah kiwa ventral tikus. J Neurosci 12: 2165-2176.

  11. ↵
    1. Berry KC,
    2. Robinson TE

    (1998) Apa peran dopamin ing ganjaran: impact hedonic, ganjaran learning, utawa incentive salience? Brain Res Brain Res Rev 28: 309-369.

  12. ↵
    1. Berry KC,
    2. Robinson TE,
    3. Aldridge JW

    (2009) Dissecting komponen ganjaran: "dikarepake", "kepingin", lan sinau. Curr Opin Pharmacol 9: 65-73.

  13. ↵
    1. Blum K,
    2. Werner T,
    3. Carnes S,
    4. Carnes P,
    5. Bowirrat A,
    6. Giordano J,
    7. Oscar-Berman M,
    8. Gold M

    (2012) Jinis, obatan, lan rock 'n' roll: hipotesis aktif aktivasi mesolimbi minangka fungsi ganjaran polimorfisme gene. J Psychoactive Drugs 44: 38-55.

  14. ↵
    1. Chu NN,
    2. Zuo YF,
    3. Meng L,
    4. Lee DY,
    5. Han JS,
    6. Cui CL

    (2007) Piranti stimulasi listrik peripheral dibalekake ngurangi ukuran sel lan tambah tingkat BDNF ing wilayah Tegmental ventral ing tikus morfin sing diobati kronis. Brain Res 1182: 90-98.

  15. ↵
    1. Davis BA,
    2. Fitzgerald ME,
    3. Brown JL,
    4. Amstalden KA,
    5. Coolen LM

    (2007) Pengaktifan neuron POMC sajrone rangsangan umum nanging ora ana perilaku seksual ing tikus. Behav Neurosci 121: 1012-1022.

  16. ↵
    1. Fiorino DF,
    2. Coury A,
    3. Phillips AG

    (1997) Owah-owahan dinamis ing inti ngakibatake efflux dopamin nalika efek Coolidge ing tikus lanang. J Neurosci 17: 4849-4855.

  17. ↵
    1. Flagel SB,
    2. Clark JJ,
    3. Robinson TE,
    4. Mayo L,
    5. Czuj A,
    6. Willuhn I,
    7. Akers CA,
    8. Clinton SM,
    9. Phillips PE,
    10. Akil H

    (2011): A peran sing selektif kanggo dopamin ing rangsangan-ganjaran learning. Nature 469: 53-57.

  18. ↵
    1. Frohmader KS,
    2. Pitchers KK,
    3. Balfour ME,
    4. Coolen LM

    (2010a) Nyampur pleasures: review efek saka obatan ing laku jinis ing manungsa lan kewan model. Horm Behav 58: 149-162.

  19. ↵
    1. Frohmader KS,
    2. Wiskerke J,
    3. Wicaksana RA,
    4. Lehman MN,
    5. Coolen LM

    (2010b) Methamphetamine tumindak ing subpopulations neurons ngatur perilaku seksual ing lanang. Neuroscience 166: 771-784.

  20. ↵
    1. Harris AC,
    2. Gewirtz JC

    (2004) Muncul munggah nalika mundur saka morphine akut: modhèl penundaan lan rasa kuatir. Psychopharmacology 171: 140-147.

  21. ↵
    1. Harris GC,
    2. Aston-Jones G

    (2003) Motivasi lan pamindhahan ditindakake kanthi narik opiate: bukti kanggo dysregulation ing proses ganjaran. Neuropsychopharmacology 28: 865-871.

  22. ↵
    1. Hayward MD,
    2. Pintar JE,
    3. Kurang MJ

    (2002) Defisit selektif kanggo tikus sing ora ana beta-endorphin lan enkephalin. J Neurosci 22: 8251-8258.

  23. ↵
    1. Hoebel BG,
    2. Avena NM,
    3. Bocarsly ME,
    4. Rada P

    (2009) Kecanduan alami: model perilaku lan sirkuit adhedhasar kecanduan gula ing tikus. J Addict Med 3: 33-41.

  24. ↵
    1. Hyman SE,
    2. Malenka RC,
    3. Nestler EJ

    (2006) Mekanisme neural kecanduan: peran pembelajaran lan memori sing ana ganjaran. Annu Rev Neurosci 29: 565-598.

  25. ↵
    1. Ikemoto S,
    2. Kohl RR,
    3. McBride WJ

    (1997) Blabangan reseptor GABA (A) ing wilayah tegal ventral anterior mundhakaken tingkat dopamin ekstraselular ing akut-akut tikus nukleus. J Neurochem 69: 137-143.

  26. ↵
    1. Jaworski J,
    2. Spangler S,
    3. Seeburg DP,
    4. Hoogenraad CC,
    5. Sheng M

    (2005) Kontrol arborisasi dendritik dening target phosphoinositide-3'-kinase-Akt-mamalia saka jalur rapamycin. J Neurosci 25: 11300-11312.

  27. ↵
    1. Johnson SW,
    2. RA Utara

    (1992) Opioid ngupaya neuron dopamin dening nglebokaké internèt lokal. J Neurosci 12: 483-488.

  28. ↵
    1. Klitenick MA,
    2. DeWitte P,
    3. Kalivas PW

    (1992) Regulasi saka release dopamin somatodendrit ing wilayah tegmental ventral dening opioids lan GABA: sinau microdialysis ing vivo. J Neurosci 12: 2623-2632.

  29. ↵
    1. Koob GF,
    2. Le Moal M

    (2005) Plastik saka ganjaran neurocircuitry lan "sisih peteng" kecanduan narkoba. Nat Neurosci 8: 1442-1444.

  30. ↵
    1. Lennette DA

    (1978): Media sing luwih apik kanggo microscopy immunofluorescence. Am J Clin Pathol 69: 647-648.

  31. ↵
    1. Lett BT,
    2. Grant VL,
    3. Koh MT

    (2001) Naloxone ngresiki panggonan sing dikondisi kanthi kahanan sing dipimpin dening roda sing mlaku ing tikus. Physiol Behav 72: 355-358.

  32. ↵
    1. Lett BT,
    2. Grant VL,
    3. Koh MT,
    4. Flynn G

    (2002) Sadurunge pengalaman karo roda mlaku mrodhuksi salib-toleransi kanggo efek sing maringi hadiah morfin. Pharmacol Biochem Behav 72: 101-105.

  33. ↵
    1. Matthews RT,
    2. Jerman DC

    (1984) Bukti elektrophysiologis kanggo ngujitake tikus ventral tegmental dopamin neuron dhaerah kanthi morfin. Neuroscience 11: 617-625.

  34. ↵
    1. Mazei-Robison MS,
    2. Koo JW,
    3. Friedman AK,
    4. Lansink CS,
    5. Robison AJ,
    6. Vinish M,
    7. Krishnan V,
    8. Kim S,
    9. Siuta MA,
    10. Galli A,
    11. Niswender KD,
    12. Appasani R,
    13. Horvath MC,
    14. Neve RL,
    15. Worley PF,
    16. Snyder SH,
    17. Hurd YL,
    18. Suka JF,
    19. Han MH,
    20. Russo SJ,
    21. et al.

    (2011) Peran kanggo mTOR podo karo lan neuronal kegiatan ing morfine-induced adaptasi ing ventral tegmental area dopamin neurons. Neuron 72: 977-990.

  35. ↵
    1. Mazei-Robison MS,
    2. Nestler EJ

    (2012) Plasmisium molekuler lan selular saka ventral tegmental lan locus coeruleus neuron katekolamin. Cold Spring Harb Perspect Med 2: a012070.

  36. ↵
    1. Mehrara BJ,
    2. Baum MJ

    (1990) Naloxone ngganggu ekspresi kasebut nanging ora disaranake dening tikus lanang saka respon preferensi panggonan kahanan kanggo wanita wadon sing oestrous. Psychopharmacology 101: 118-125.

  37. ↵
    1. Meisel RL,
    2. Mullins AJ

    (2006) Pengalaman seksual ing rodentia wadon: mekanisme seluler lan konsekwensi fungsi. Brain Res 1126: 56-65.

  38. ↵
    1. Miller RL,
    2. Baum MJ

    (1987) Naloxone nyegah preferensi panggonan kawin lan kahanan kanggo wanita estrous ing tikus jaba sasampunipun castration. Pharmacol Biochem Behav 26: 781-789.

  39. ↵
    1. Mitchell JB,
    2. Stewart J

    (1990) Fungsinitas seksual ing tikus jebol lanang digandhengake karo injeksi intra-VTA saka opiates. Pharmacol Biochem Behav 35: 643-650.

  40. ↵
    1. Murphy LO,
    2. Blenis J

    (2006) MAPK spesifik sinyal: panggonan sing tepat ing wektu sing tepat. Tren Biochem Sci 31: 268-275.

  41. ↵
    1. Nestler EJ

    (2012) Transkrip mekanisme kecanduan narkoba. Clin Psychopharmacol Neurosci 10: 136-143.

  42. ↵
  • ↵
    1. Paxinos G,
    2. Watson C

    (2013) Otak tikus ing koordinat stereotaxic (Akademik, Boston), Ed 7.

  • ↵
    1. Pitchers KK,
    2. Balfour ME,
    3. Lehman MN,
    4. Richtand NM,
    5. Yu L,
    6. Coolen LM

    (2010a): Neuroplasticitas ing sistem mesolimbi sing diakibatake dening ganjaran alam lan abstinence pensiun sakteruse. Biol Psychiatry 67: 872-879.

  • ↵
    1. Pitchers KK,
    2. Frohmader KS,
    3. Vialou V,
    4. Mouzon E,
    5. Nestler EJ,
    6. Lehman MN,
    7. Coolen LM

    (2010b) DeltaFosB ing accumbens inti arupa kritis kanggo nguatake efek ganjaran seksual. Gen Brain Behav 9: 831-840.

  • ↵
    1. Pitchers KK,
    2. Schmid S,
    3. Di Sebastiano AR,
    4. Wang X,
    5. Laviolette SR,
    6. Lehman MN,
    7. Coolen LM

    (2012) Pengalaman ganjaran alami ngowahi distribusi reseptor AMPA lan NMDA lan berfungsi ing accumbens nukleus. PLOS One 7: e34700.

  • ↵
    1. Pitchers KK,
    2. Vialou V,
    3. Nestler EJ,
    4. Laviolette SR,
    5. Lehman MN,
    6. Coolen LM

    (2013) Ganjaran alami lan obat tumindak ing mekanisme plastik neural umum karo DeltaFosB minangka mediator tombol. J Neurosci 33: 3434-3442.

  • ↵
    1. Roux PP,
    2. Blenis J

    (2004) ERK lan p38 MAPK-protein kinase sing diaktifake: kulawarga protein kinase karo fungsi biologi sing beda-beda. Microbiol Mol Biol Rev. 68: 320-344.

  • ↵
    1. Russo SJ,
    2. Bolanos CA,
    3. Theobald DE,
    4. DeCarolis NA,
    5. Renthal W,
    6. Kumar A,
    7. Winstanley CA,
    8. Renthal NE,
    9. Wiley MD,
    10. DW dhewe,
    11. Russell DS,
    12. Neve RL,
    13. Eisch AJ,
    14. Nestler EJ

    (2007) IRS2-Akt pathway ing midbrain neurons dopamin ngatur respon perilaku lan seluler kanggo opiates. Nat Neurosci 10: 93-99.

  • ↵
    1. Schultz W

    (2010): Fungsi sawetara neuron dopamin. F1000 Biol Rep 2: 2.

  • ↵
    1. Seroogy KB,
    2. Gall CM

    (1993) Expression of neurotrophins dening midbrain dopaminergic neurons. Exp Neurol 124: 119-128.

  • ↵
    1. Shippenberg TS,
    2. Bals-Kubik R,
    3. Herz A

    (1987) Sifat motivasi saka opioid: bukti yen aktifitas delta-reseptor nengahi pangolahan tetulang. Brain Res 436: 234-239.

  • ↵
    1. Sklair-Tavron L,
    2. Nestler EJ

    (1995) Nuduhake efek morphine lan neurotrophins, NT-3, NT-4, lan BDNF, ing lokus neuron ing vitro. Brain Res 702: 117-125.

  • ↵
    1. Sklair-Tavron L,
    2. Shi WX,
    3. Lane SB,
    4. Harris HW,
    5. Bunney BS,
    6. Nestler EJ

    (1996) Morfin morfologis ngakibatake owah-owahan sing katon ing morfologi neuron dopamin mesolimbi. Proc Natl Acad Sci USA 93: 11202-11207.

  • ↵
    1. Spiga S,
    2. GP Serra,
    3. Puddu MC,
    4. Foddai M,
    5. Diana M

    (2003) Morfine mundur-indhuksi ora normal ing VTA: microscopy scanning laser confocal. Eur J Neurosci 17: 605-612.

  • ↵
    1. Swanson LW

    (2004) Peta otak: struktur otak tikus (Akademik, San Diego), Ed 3.

  • ↵
    1. Tenk CM,
    2. Wilson H,
    3. Zhang Q,
    4. Pitchers KK,
    5. Coolen LM

    (2009) Ganjaran seksual ing tikus lanang: efek saka pengalaman seksual ing pilihan panggonan kahanan sing digandhengake karo ejaculation lan intromisi. Horm Behav 55: 93-97.

  • ↵
    1. Tzschentke TM

    (2007) Ngukur ganjaran kanthi Paradigma preferensi kahanan panggonan (ACP): nganyari dekade pungkasan. Addict Biol 12: 227-462.

  • ↵
    1. van Furth WR,
    2. van Ree JM

    (1996) Motivasi seksual: keterlibatan opioid endogen ing tlatah tegegalal ventral. Brain Res 729: 20-28.

  • ↵
    1. van Furth WR,
    2. Wolterink G,
    3. van Ree JM

    (1995) Regulasi prilaku seksual lanang: keterlibatan opioid otak lan dopamin. Brain Res Brain Res Rev 21: 162-184.

  • ↵
    1. Walker JR,
    2. Chen SA,
    3. Moffitt H,
    4. Inturrisi CE,
    5. Koob GF

    (2003) Panyebab opioid kronis ngasilake ningkatake heroin ing tikus. Pharmacol Biochem Behav 75: 349-354.

  • ↵
    1. Young KA,
    2. Gobrogge KL,
    3. Liu Y,
    4. Wang Z

    (2011): Neurobiologi saka pasangan ikatan: pemahaman saka rodent socially monogamous. Ngarep Neuroendocrinol 32: 53-69.

    •