Bandorkirina ΔFosB overexpression li ser vîdyoya opioid û renabinoid receptor-mediated in nucleus acculens (2011)

Neuropharmacology. 2011 Dec;61(8):1470-6. doi: 10.1016/j.neuropharm.2011.08.046.

Sim-Selley LJ, Parîsê Cassidy, Sparta A, Zachariou V, Nestler EJ, Selley DE.

Kanî

Department of Pharmacology and Toxicology and Institute for Drug and Alkolol, University of Medical Medicine University of Commonwealth University, Richmond, VA 23298, USA.

Abstract

Faktora veguheztinê ya domdar ΔFosB di nav nucleus accumbens (NAc) de ji hêla vegirtina kronîk ve ji gelek narkotîkên tacîzê tê qewirandin, û vegotina transgenîk ya ΔFosB di striatum de taybetmendiyên xelatdar ên morfîn û kokainê zêde dike.e Lêbelê, bingeha mekanîkî ya ji bo van dîtinan bi tevahî têgihîştin. Me modela mîzê ya bitransgenîk bi vegotina inducible ΔFosB in dopamine D (1) receptor / dynorphin-ku nehranên striatal-ê heye ku ji bo destnîşankirina bandora îfadeya ΔFosB li ser nîşana receptorên opioid û cannabinoid di NAC de diyar bikin. Encaman destnîşan kir ku çalakiya G-proteîn-mu opioid-navgîn û sekinandina adenylyl cyclase di NAC-ê de mîkrokên ku ΔFosB îfade dike hate zêdekirin. Bi vî rengî, ragirtina opioid a kappa ya adenylyl cyclase di zêdebûna mîzîkan ΔFosB de hate zêdekirin. Berevajî vê yekê, nîşana navgîniya receptor-cannabinoid di navbera mîkrojenêda ΔFosB û mîkroyên kontrolê de cûdahî tune. TLêgerînên hese ev pêşniyar dikin ku nîşana receptorên opioid û cannabinoid ji hêla cûrbecûr ve ji hêla expressionfosB ve têne modul kirin, û destnîşan dikin ku îfadeya ΔFosB dibe ku hin bandorên xwe bi navgîniya mû û kappa-avekirina receptorên opioid-ê di NAC-ê de çêtir hilberîne.

Keywords: G-proteîn, adenylyl cyclase, striatum

1. Pêşkêş

Receptorên opioid û cannabinoid CB₁ receptorên (CB₁R) armancên neurobiolojî ji bo du polên dermanê yên ku bi kar tînin tê de hene ku morphine, heroin û opioîdên dermanê, û marijuana (Δ⁹-tetrahydrocannabinol (THC), bi rêzdarî. Bandorên zirav ên opioîd û cannabinoids ji hêla receptorên G-proteîn ve têne girêdanîn ku di serî de G çalak dikin_{i / o} proteînan û bersivên bandorker ên jêrzemînî yên wek nahêlin adenylyl cyclase (ûZarok, 1991, Childers, et al., 1992, Howlett, et al., 2002). Motor, bandorên bîranînê û bandorên psîkolojîk του Δ⁹-THC ji hêla CB ve têne hilberandin₁R (Huestis, et al., 2001, Zimmer, et al., 1999), ku di mejî de bi berfirehî têne belav kirin, di nav ganglaya bingehîn, hippocampus û cerebellum de di asta bilind de hene (Herkenham, et al., 1991). Bandora analgesic û xelatgirtina piraniya dermanên opioid ên klînîkî yên têkildar û destdirêjker bi giranî ji hêla receptorên mu opioid (MOR) ve têne navgîn kirin (Matthes, et al., 1996), yên ku di pergala limbic û mêjûya mêjî de têne dewlemend kirin (Mansour, et al., 1994). Pergala mesolimbîk, ku ji projeksiyonên dopaminergîk ve ji qada parzemînî ya ventral (VTA) heta nucleus accumbens (NAc) pêk tê, di bandorên xelatdar ên opioîd û cannabinoids de rolek girîng dileyize (Bozarth û Wise, 1984, Vaccarino, et al., 1985, Zangen, et al., 2006), her weha dermanên din ên destavêtinê (Koob û Volkow, 2010). Digel vê yekê, pergalên opioid û cannabinoid ên endogir di bandorên xelatdarbûnê yên çînên pirjimar ên dermanên psîkolojîk de cîh digirin (Maldonado, et al., 2006, Trigo, et al., 2010). Ji ber vê yekê, girîng e ku meriv mekanîzmayên ku ji hêla opioid û CB ve têne eşkere kirin girîng bikin₁Nîşana R di NAC de têne rêve kirin.

Pirsek bingehîn di warê narkotîkên tiryakê de naskirina proteînan e ku bi navgîniyê re derbasbûna ji bandorên ziravî yên dirêj-dirêj ên dermanên psîkoaktîf in. Faktora veguhastinê ya AP-1 ΔFosB bi taybetî balkêş e ji ber ku ew hilberek cûrbecûr ya parçebûyî ya parçebûyî ya domdar e fosb genê ku li ser pêgirtina dubare dermanên tacîzê an xelatên xwezayî li hev diciveMcClung, et al., 2004, Nestler, 2008, Nestler, et al., 1999). Me dît ku ΔFosB di mêjiyê hanê de piştî rûbirûbûna dubare ji morfînê, Δ⁹-THC, kokainê an etanol, li gel her dermanê rêgezek herêmî ya bêhempa a îfadeya ΔFosB hilberîne (Perrotti, et al., 2008). Dîtinek domdar di nav dermanan de ev bû ku ΔFosB di striatumê de pir hate zeft kirin, li ku derê her çar dermanên ΔFosB-ê di nav NAc-ê de û hemî ji bilî Δ⁹-THC di derheqê NAc û caudate-putamen de îfade berbiçav kişand.

Lêkolînên pharmacolojîk destnîşan kir ku hevserokatiya dopamîn D₁ receptor (D₁R) antagonîst SCH 23390 li nav NAc û caudate-putamen li dû rêveberiya kokainê an morfînê ya navborî astengkirina FfosB di NAC û caudate-putamen de asteng kir, giringiya potansiyela D nîşan dide₁Neuronên R-derbirîn (Muller û Unterwald, 2005, Nye, et al., 1995). Bandora induction ΔFosB li ser tevgerên narkotîk-navîn-lêkolîner bi karanîna mîsên bitransgenic ên ku ΔFosB di nav gelên neuralî yên taybetî yên NAc û striatum dorsal de diyar dike vekolîn kir (Chen, et al., 1998). Mice ku ΔFosB di dynorphin / D de diyar dike₁Neonên R erênî li NAc û striatum dorsal (xeta 11A) bersivên guhartî li hember narkotîkên tacîzê nîşan didin, bi taybetî jî hişmendiya bihêztir a ji bandorên xelatdar ên kokainê an morfînê (Colby, et al., 2003, Kelz, et al., 1999, Zachariou, et al., 2006). Van guhartinan di tunebûna asta MOR an dezgehên cuda yên proteîn G-ê de çêbûn. Lêbelê, asta mRNA ya dynorphin di mîkrokên NAC yên ΔFosB de bi NAcS kêm bûn (Zachariou, et al., 2006), ku pêşniyar dike ku yek hedefê ΔFosB genek ku kodek peptidek opioid a endogjen e. Indêkirina ΔFosB jî dibe ku ji hêla rêvekirina nîşana receptor a li NAc ve guherînên behrê pêk bîne, lê ev gengaz nehatiye lêkolîn kirin. Ji ber vê yekê, lêkolînên heyî modela mîzê ya bitransgenîk bikar anîn da ku hûn diyar bikin ka gelo overexpression του ΔFosB li dynorphin / D₁R di nav neuronên striatal de guherîna çalakiya G-proteîn-MOR-navber û çalakiya MOR- û KOR-navberkirî adenylyl cyclase di NAc de diguhere. Bandora ΔFosB-ê li ser CB-ê₁Activityalakiya G-proteîn a R-navînî jî ji ber ku Δ hat nirxandin⁹-Rêveberiya THC di NACê de ΔFosB (Perrotti, et al., 2008) û pergala endocannabinoid tête navgînkirin ku qewlên xelatên mêjî yên birêkûpêker dike (Gardner, 2005, Maldonado, et al., 2006), lê bandora ΔFosB li ser pergala endocannabinoid nehatiye lêkolîn kirin.

2. Materyal û Methodan

2.1. Reagents

[³⁵S] GTPγS (1250 Ci / mmol), [α-³²P] ATP (800 Ci / mmol) û [³H] cAMP (26.4 Ci / mmol) ji PerkinElmer (lelton, CT) hate bikirin. ATP, GTP, GDP, cAMP, album serumê bovî, kremînê phosphokinase, papaverine, imidazole û WIN-55212-2, ji Sigma Aldrich (St. Louis, MO) hate bikirin. GTPγS ji pargîdaniya Roche Diagnostic (Chicago, IL) hate bikirin. DAMGO ji hêla Bernameya plyandiniyê ya Drug-ê ya Enstîtuya Neteweyî ya li ser Abuse Drug (Rockville, MD) ve hate peyda kirin. Fluiduçeya darizandina econo-1 ji Fisher Science (Norcross, GA) hate wergirtin. Fluiduçeya darizandina ecolite ji ICN (Costa Mesa, CA) hate wergirtin. Hemî kîmyewî yên din ji Sigma Aldrich an Fisher Scientific hatine wergirtin.

2.2. Masî

Mişkên bitransgenîkî yên mêr ên ku ji NSE-tTA (xeta A) × TetOp-ΔFosB (xeta 11) ve hatî derxistin, wek ku di Kelz û aliyan de hatine vegotin, hatine afirandin. (Kelz, et al., 1999). Mîkrên Bitransgenîk li ser doxycycline (xNUMX μg di ava vexwarinê de) hate tepisandin û mezin kirin da ku ji bo vegotina transgene tepeser bike. Di temenên hefteyên 100-ê de, doxycycline ji nîvê mîkrok ji avê ve hat avêtin da ku destûr bide îfadeya transgene, di heman demê de mişkên mayî li ser doxycyclîn hate domandin da ku transgene bişopîne. Zirav paşê hefteyan 8 hatin berhev kirin, wextê ku bandorên transcriptal ên ΔFosB pirtirîn in (McClung û Nestler, 2003). Rêzikek mûzîkî ya transgenîk duyemîn hate bikar anîn ku di Δc-Jun, deverek negatîf a negatîf a c-Jun, di D de tê gotin₁R / dynorphin û D₂Hucreyên R / enkephalin ê striatum, hippocampus û kortieta parietal (Peakman, et al., 2003). C-Jun û proteînên malbata Jun ên têkildar in bi proteînên malbata Fos re dimînin û ji bo rêzgirtina transkriptasyonê ve girêdayî malpera AP-1 ji genên hedef in. Lêbelê, kurtkirina N-termînalê ya c-Jun (Δc-Jun) veguherînek tevlihev a neçalak dide û dibe asteng ku girêdana DNA ya kompleksên çalak ên AP-1 çalak e. Mişkên bitransgenîkî yên nêr ji NSE-tTA (xeta A) × TetOp-FLAG-Δc-Jun (xeta E) têne derxistin, wekî ku li Peakman et al. (Peakman, et al., 2003). Mîkrên Bitransgenîk li ser doxycycline (xNUMX μg di ava vexwarinê de) hate tepisandin û mezin kirin da ku ji bo vegotina transgene tepeser bike. Pup di hefteyên 100 de hate qewirandin, bi genotip kirin, û bi nav koman ve hatin veqetandin, bi nîv mayî li ser av-doxycycline-parastin û nîv li ser ava vexwarinê ya birêkûpêk da ku ji bo îfade FLAG-Δc-Jun. Zirav piştî hefteyan 3 hatin berhev kirin, wextê ku asta herî zêde FLAG-Δc-Jun tê pîvan kirin (Peakman, et al., 2003). Hemî prosedurên heywanan li gorî Rêbernameya Tenduristî ya Enstîtuya Neteweyî ya ji bo Lênêrîn û karanîna heywanên kedkariyê hatin pêkanîn.

2.3. Amadekariyên mîkrobaneyê

Brains heta roja asîmbûnê li −80 ° C hatin hilanîn. Berî ku ceribandin, her mêjî hate tewandin, û NAc li ber berfê hate belav kirin. Her nimûn di xNUMX mM Tris-HCl, 50 mM MgCl de homojen bû.₂, 1 mM EGTA, pH 7.4 (şilek mîkrobê) bi lêdanên 20 ji homojenîzatorê fîşek li 4 ° C. Homogenate li 48,000 cent hate navend kirin g li 4 ° C ji bo 10 min, di mûzeya mûzîkê de ji nû ve hate pejirandin, li 48,000 again dîsa li ser centrifuged. g li 4 ° C ji bo 10 min û di xNUMX mM Tris-HCl, 50 mM MgCl de ji nû ve hate rawestandin₂, 0.2 mM EGTA, 100 mM NaCl, pH 7.4 (buffer assay). Asta proteînan bi rêbazê Bradford ve hate destnîşankirin (Bradford, 1976) Bikaranîna album serum a βοîner (BSA) wekî standard.

2.4. Agonist-Stimulated [³⁵S] GTPγS Binding

Membran ji bo demjimêrên 10-ê di 30 ° C de digel adenosine deaminase (3 mU / ml) di nav buffer-a-ceribandinê de hate pêşîn kirin. Membran (proteîna 5-10 μg) hingê ji bo hr 2 ° C li 30 ° C di nav refikê assay de ya ku jê re 0.1% (w / v) BSA, 0.1 nM hat vegirtin [³⁵S] GTPγS, 30 μM GDP û adenosine deaminase (3 mU / ml) bi û bêyî lihevhatinên guncan ên DAMGO an WIN55,212-2. Girêdana nepecific bi 20 μM GTPγS hate pîvandin. Incubation bi filtrasyonê ve bi riya parzûnên gûzê yên GF / B ve hate bidawî kirin, li dû şuştina 3 bi xNUMX ml ice-sar xNUMX mM Tris-HCl, pH 3. Radyoaktîvîbûna dorîner bi spektrofotometriya tîrêjê ya liquidê piştî derzîkirina şevê ya filtêran di navbêna lêhûrbûna Econo-50 de hate destnîşankirin.

2.5. Asseny Adenylyl Cyclase

Membran (proteîna 5-25 μg) bi adenosine deaminase ku li jor hatiye şirove kirin, piştre ji bo 15 min li 30 ° C li hebûna an nebûna 1μM forskolin, bi an bêyî DAMGO, U50,488H an WIN55,212-2 vegirtin, bi nav û deng kirin. 50 μM ATP, [α-³²P] ATP (1.5 μCi), 0.2 mM DTT, 0.1% (w / v) BSA, 50 μM cyclic AMP, 50 μM GTP, 0.2 mM papaverine, 5 mM phosphocreatine, 20 mM phosphocreatine, 3 yekîn / ml creatine phosphokinase û adînîn fosfînase / ml) di mezgek dawîn a 100 ml. Di bin van şertan de, tam [α-³²P] cAMP hat bidest xistin bi gelemperî ji xNUMX% ji mîqdara giştî ya zêdekirî kêmtir bû [α-³²P] ATP di her nimûneyê de. Nerazîbûn ji bo ku ji bo min xNUMX min û şûnda bi şûnda bi dawî bû û [³²P] Cyclic AMP bi rêbaziya dûkulê (Dowex û alumina) ya Salomon ve hate mêtingeh kirin (Salomon, 1979). [³H] cAMP (xNUMX dpm) li pêşiya her tubê ji kromografografiya kolonê wekî standardek navxweyî hat zêdekirin. Radyasyona çalakiyê ji hêla spektrofotometriya scintillation derewîn hate destnîşankirin (ji bo karanîna% 10,000% ³H) piştî xNUMX ml ya elixîneyê di nav xNUMX ml ya mûzeya mûzayî ya ekolît de hate hilweşandin.

2.6. Analyziya daneyên

Heya ku ji hêla din ve nehatiye destnîşan kirin, daneyên wekî nirxên navîn têne ragihandin ± SE ya 4-8 ceribandinên cuda, yên ku her yek bi sêpêçê ve hate kirin. Nerm-stimulated [³⁵S] GTPγS binding wekî birêkûpêk-agonist-tixûbîn têkildarî minus basal ya bingehîn tê hesibandin. Activityalakiya adenylyl cîklase ya çalak a forkolîn-hişkkirî wekî çalakiya forkolîn-hişkkirî tête navnîş kirin - çalakiya bingehîn (pmol / mg / min). Astengkirina çalakiya adenylyl cyclase-stimulated forskolin-tête destnîşankirin wekî (nebûna çalakiya forkolîn-netîce-stimulîn di nebûna agonistê de - çalakiya stimulasyonê ya forskolîn-net di hebûna agonist / netîceya forskolîn-tîrêjê ya ku di nebûna agonistê de) × 100. Hemî analîzên curve û statîstîk bi karanîna Prism 4.0c (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA) hate pêkanîn. Bûyera berhevkirinê-bandorker ji hêla regresasyona ne-linear a iterative ve hate analîz kirin da ku EC bistînin₅₀ û E_max nirxên. Girîngiya statîstîkî ya danûstendina bandorkeriyê ji hêla analîzkirina du-waye ya cûrbecûr (ANOVA) ve hat destnîşankirin, bi karanîna doza agonist û induksiyonê ya giyannasî (li ser an jî off) wekî faktorên sereke. Girîngiya statîstîkî ya nirxên fit-fit (E_max an EC₅₀) ji hêla t-testa Xwendekarê du-dûvî ya ne-cotkirî ve, bi karanîna verastkirina Welch an veguherîna koka çargoşe ya daneyê ku pêwîst e ku ji bo cûdahiyên newekhev rast bike (ji hêla F-test ve hatî tespît kirin) li EC₅₀ nirxên.

3. Encam

3.1. Bandora vegotina ΔFosB li ser aktîvkirina G-proteîn-navînî ya receptor-opioid û cannabinoid-ê

Ji bo diyarkirina ka MOR- an CB₁Activalakbûna G-proteîn a R-navberkirî ji hêla vegotina transgenîk inducible του ΔFosB di NAc de hate guhastin,³⁵S] Girêdana GTPγS di nav cokên mestiran ên ku ji vê deverê hatine çêkirin de mirîşkên bitransgenic ku bi şertê vegotinê (FFosB li ser) an ne eşkerekirina (ΔFosB vekirî) an transgene ΔFosB ve hate amadekirin. MOR-selektîf enkephalin analog DAMGO ji bo çalakkirina MOR hate bikar anîn û cannabinoid aminoalkylindole WIN55,212-2 ji bo çalakkirina CB hate bikar anîn₁R. Van lîgangan berê di MOR û CB de agonîstên tevahî têne xuya kirin₁R, bi rêzdarî (Breivogel, et al., 1998, Selley, et al., 1997). Ev ne gengaz bû ku meriv çalakiya proteîn G-navînî ya KOR-ê vekolîne ji ber ku nîşaneya di mêjiyê rodent de pir kêm e (Childers, et al., 1998). Encam, çalakiya G-proteîn a girêdayî-girînbûnê ya ji hêla DAMGO û WIN55,122-2 ve li NAc ji ΔFosB dûr û ΔFosB-ê li ser mişkan (û1). Ji bo çalakiya stimuluar DAMGO (1A), ANOVA-ya du-alî ya daneya bandorker-bandorê bandorên girîng ên girîng ên statuya ΔFosB (p <0.0001, F = 22.12, df = 1) û kombûna DAMGO (p <0.0001, F = 29.65, df = 5) bi no danûstendina girîng (p = 0.857, F = 0.387, df = 5). Analîzasyona vegerandina ne-xêzik a kurmên bandorker-bandor bandorek girîngtir DAMGO E derxist holê_max nirx di ΔFosB li ser mêşan (E_max = Stendina 73 5.2%) têkelê bi mişkên ΔFosB (E_max = 56 ± 4.1% teşwîq; p <0.05 ji ΔFosB-ê li ser mişkan bi testa t-ya Xwendekar cuda ye). DAMGO EC₅₀ Nirxên di navbera ΔFosB li ser û FFosB off mûsan de ne cuda bûn (302 ± 72 nM li hember 212 56 nM, bi rêzê, p = 0.346).

Bandora vegotina ΔFosB li ser hişk-agonîst [³⁵S] GTPγS girêdide di NAC de. Membrûnên ji ΔFosB-eşkerekirina (ΔFosB li ser) an kontrola (ΔFosB dûr) mişk bûn wekî ku di Metodan de têne bikar anîn bi karanîna jêzên cûrbecûr hatine ceribandin ...

Berevajî encamên ku bi agonîstê MOR DAMGO re hatine wergirtin, di çalakiya G-proteîn de têkildarî rewşa ΔFosB-ê di çalakiya G-proteîn de ne hate dîtin bi agonîstê cannabinoid WIN55,212-2 (1B) ANOVA-ya du-alî ya daneya bandora bandor-bandorê ya WIN55,212-2, bandorek girîng a girîng a giraniya WIN55,212-2 (p <0.0001, F = 112.4, df = 7) diyar kir, lê ne ya rewşa ΔFosB (p = 0.172) , F = 1.90, df = 1) û têkiliyek tune bû (p = 0.930, F = 0.346, df = 7). Bi heman rengî, li WIN55,212-2 E tu bandora rewşa ΔFosB tune_max nirxên (103 6% versus 108 8% stimulasyonê li FfosB li ser û mişkan, bi rêzdarî, p = 0.813 ji hêla t-testa Xwendekaran ve) an EC₅₀ nirxên (103 20 nM versus 170 23 nM di ΔFosB li ser masê li ser û vekirî, bi rêzdarî, p = 0.123).

Li ser bingeha şekl û rastiya ku lêkolînên me yên berê diyariyên biphazîk WIN55,212-2-ê li mejiyê bandora mêjiyê nîşan dane (Breivogel, et al., 1999, Breivogel, et al., 1998), curên WIN55,212-2 jî bi karanîna modela du-malperî hatin vexwendin. Analîzkirina daneya navînî li gorî başbûna fit bi karanîna modela du-malperî (R) başbûnek piçûktir dît² = 0.933 û 0.914, mîqdara mêjû = 3644 û 5463 li ΔFosB li mişkên li ser û derveyî, bi rêzdarî) li gorî modela yek-malperê (R² = 0.891 û 0.879, berhevkara mîvan = 6561 û 6628 li ΔFosB li mişkên li ser û derveyî, bi rêzdarî). Lêbelê, di nav E-ê de cûdahiyên girîng di navbera FFosB û mîkrojên ΔFosB de nehat dîtin_max an EC₅₀ nirxên malperên potansiyela bilind an nizm (Pêdivî ya 1), her çend di EC-ê de jidilek hebû₅₀ nirxa li cîhê potansiyela bilind di mîkrên bi ΔFosB li ser (EC)₅₀bilind = 28.0 10.6 nM) li gorî yên bi ΔFosB vekişandin (EC)₅₀bilind = 71.5 20.2 nM; p = 0.094). Ji bilî vê yekê, ti bandora rewşa ΔFosB li ser bingehîn tunebû [³⁵S] GTPγS binding di meqesên NAc de (253 14 versus 226 14 fmol / mg di ΔFosB de li ser maseyên li ser û off, bi rêzdarî, p = 0.188). Van daneyan destnîşan dikin ku îfadeya transgenic inducible ya ΔFosB di NAC-ê de di morgan de çalakiya G-proteîn-MOR-navînî zêde kir bêyî ku bandor li CB-ê bike₁Galakiya G-proteîn a R-navîn an bingehîn.

3.2. Bandora ΔFosB li ser astengkirina opiyodî û cannabinoid-navberkirî ya adenylyl cyclase

Ji bo nirxandina bandora îfadeya transgenic inducible ya ΔFosB li modulasyona çalakiya bandora downstream ji hêla MOR û CB ve₁R, sekinandina çalakiya adenylyl cyclase-xenû-xNUMX μM forskolin-stimulated di navbêna NAc de hate ceribandin. Digel MOR- û CB₁Astengdarkirina R-ya çalakiya adenylyl cyclase, bandorên çalakiya KOR jî bi karanîna agorîstê tevahî KOR-selektîf U50,488 ve hate vekolîn (Zhu, et al., 1997), ji ber ku encamên berê nîşan da ku dynorphin mRNA di modela bitransgenic de armancên ΔFosB bû (Zachariou, et al., 2006). Encam nîşan da ku DAMGO, U50,488 û WIN55,212-2 her hilberîna adenylyl cyclase-girêdayî çalakiya sekinandinê ya ku di her du ΔFosB off û ΔFosB de li ser mîzan hilberandin (2). ANOVA du-daneya danûstendina bandorkeriyê ya DAMGO (2A) bandorên girîng ên girîng ên statuya ΔFosB (p = 0.0012, F = 11.34, df = 1) û kombûna DAMGO (p <0.0001, F = 29.61, df = 6), lê têkiliyek girîng tune (p = 0.441, F = 0.986 , df = 6). Analîzasyona veguherîna ne-xêzik a şoxikên bandorkirin-bandora DAMGO-yê DAMGO EC-ya berbiçav kêmtir eşkere kir₅₀ nirxê li ΔFosB li ser mişkan (101 ± 11 nM) li gorî ΔFosB mişk (510 ± 182 nM, p <0.05 bi t-testa xwendekar). Lêbelê, di DAMGO E de cûdahiyek girîng tune_max nirxên (20.9 1.26% versus 19.8 1.27% astengkirina li ΔFosB li ser mîk û li derveyî, bi rêzdarî, p = 0.534).

Bandora vegotina ΔFosB li ser sekinandina çalakiya adenylyl cyclase li NAc. Membrûnên ji ΔFosB-eşkerekirina (ΔFosB li ser) an jî kontrola (ΔFosB dûr) mişk hatin ceribandin wekî di Metodan de bi hebûna 1 μM tête diyar kirin ...

KOR-navberkirî adenylyl cyclase jî wekî fonksiyonek ji îfadeya transgenic inducible ya ΔFosB-ê cûda dibe (2B) ANOVA-ya du-rê ya daneyên bandora bandor-bandora U50,488 bandorên girîng ên girîng ên rewşa ΔFosB (p = 0.0006, F = 14.53, df = 1) û komkirina U50,488 (p <0.0001, F = 26.48, df = 3) , bêyî têkiliyek girîng (p = 0.833, F = 0.289, df = 3). Analîzasyona vegerandina ne-xêzikî ya curbicurên bandorker-bandorker U50,488 E mezintir nîşan da_max nirxê li ΔFosB li ser mişkan (18.3 ± 1.14% astengkirin) li gorî ΔFosB off mişk (12.5 ± 2.03% asteng; p <0.05 ji ΔFosB li ser ceribandina t-testa Xwendekar cuda ye), di U50,488 EC de cûdahî tune.₅₀ nirxên (310 172 nM versus 225 48 nM di ΔFosB li ser masê li ser û vekirî, bi rêzdarî, p = 0.324).

Berevajî bandorên ku bi MOR û KOR re hatine dîtin, tu bandorek ji îfadeya transîtîk ΔFosB inducible li ser sekinandina adenylyl cyclase ji hêla agonistê cannabinoid WIN55212-2 (2C) ANOVA-ya du-alî ya daneya bandora bandor-bandor ya WIN55,212-2 bandorek girîng a tansiyona narkotîkê (p <0.0001, F = 23.6, df = 2), lê ne ya rewşa ΔFosB (p = 0.735, F = 0.118, df = 1) û ne jî têkiliyek girîng hebû (p = 0.714, F = 0.343, df = 2). Wekî din, li tunebûna çu agonîstek li ser çalakiya adenylyl-çîklala bingehîn an forskolîn-teşwîqkirî bandora rewşa ΔFosB tune. Çalakiya bingehîn a adenylyl cyclase di ΔFosB de li ser mişkan 491 ± 35 pmol / mg / min bû li gorî 546 ± 44 di ΔFosB mişkên dûr de (p = 0.346 bi t-testa Xwendekar). Di heman demê de, çalakiya adenylyl cyclase di hebûna 1 μM forskolin de 2244 ± 163 pmol / mg / min li ΔFosB li ser mişkan beramberî 2372 ± 138 pmol / mg / min di ΔFosB dûr mişkan de bû (p = 0.555).

3.3. Bandora ΔcJun li ser sekinandina adenylyl cyclase ya mûmyayê ya opioid û cannabinoid-navînî

Ji ber ku îfadeya transgenic inducible του ΔFosB veguherîna nîşana nermîner a bihêzkirî ji MOR û KOR ji adenylyl cyclase di NAC de çêkir, ev balkêş bû ku were destnîşankirin ka gengaziyek negatîf a serdest a ΔFosB-navberkirî dê nîşana receptorên opioid bi rengek berevajî modul bike. Ji bo çareserkirina vê pirsê, sekinandina çalakiya adenylyl cîklase-forkolîn-stimulated ji hêla DAMGO û U50,488 ve di nav membranên ku ji NAC-ê ya mîkrên bitransgenic-ê ku bi şertê eşkerekirina ΔcJun têne amadekirin de hate ceribandin. Encam tu bandorek nede îfade ΔcJun li ser sekinandina çalakiya adenylyl cyclase by MOR an KOR (3) ANOVA-ya du-alî ya curves-bandora bandora DAMGO bandorek girîng a sereke ya DAMGO (p <0.0001, F = 20.26, df = 6) nîşan da, lê ne ji rewşa ΔcJun (p = 0.840, F = 0.041, df = 1) û têkiliyek girîng tune (p = 0.982, F = 0.176, df = 6). Bi heman rengî, di E de cûdahiyek girîng tune_max an EC₅₀ nirxên di navbera mişkan bi ΔcJun li ser (E_max = 23.6 2.6%; EC₅₀ = 304 43 nM) an ΔcJun dûr (E_max = 26.1 2.5%, p = 0.508; EC₅₀ = 611 ± 176 nM, p = 0.129). Encamên wekhev ên bi U50,488 re hatin dîtin, wusa ku ANOVA-ya du-rêgez curves-bandora bandorê bandorek girîng a tîrêjê nîşan da (p <0.0001, F = 11.94, df = 6), lê ne ji rewşa ΔcJun (p = 0.127 , F = 2.391, df = 1) û têkiliyek girîng tune (p = 0.978, F = 0.190, df = 6). Bi heman awayî, di E de cûdahiyên girîng çênebûn_max an EC₅₀ nirxên di navbera mişkan bi ΔcJun li ser (E_max = 14.8 2.9%; EC₅₀ = 211 81 nM) an jî off (E_max = 16.7 1.8%, p = 0.597; EC₅₀ = 360 151 nM, p = 0.411).

Bandora vegotina ΔcJun li ser sekinandina çalakiya adenylyl cyclase li NAc. Membrûnên ji ΔcJun-eşkerekirina (ΔcJun li ser) an kontrolê (ΔcJun off) mişkên di nav hebûna DAMGO (A), U50,488H (B) an WIN55,212-2 de hatin qewirandin ...

Vegotina ΔcJun di heman demê de ji hêla agonîstê kanabînoîd ve li ser astengkirina adenylyl cyclase ya di NAc de girîng bandor nekir. ANOVA-ya du-alî ya ziravên bandora bandora WIN55,212-2 bandorek girîng a girîng a giraniya WIN55,212-2 (p <0.0001, F = 15.53, df = 6) nîşan da, lê ne ya genotype (p = 0.066, F = 3.472, df = 1) û têkiliyek girîng tune (p = 0.973, F = 0.208, df = 6). Bi heman rengî, di WIN55,212-2 E de cûdahiyên girîng tune_max nirxên (13.0 2.3% û 13.6 ± 0.9% di mêjûya ccJun de li dijî mişkên dûr, bi rêzdarî, p = 0.821) û an EC₅₀ nirxên (208 120 nM û 417 ± 130 nM di ΔcJun li ser mûyên dûr, bi rêzdarî, p = 0.270). Bi vî rengî, her çend hebkî berbi potansiyela kêmbûna WIN55,212-2 di mîkrokên ku ΔcJun îfade dikin de, hêj transgene girîng nahêle cannabinoid a adenylyl cyclase guhertin. Wekî din, bandora rewşa ΔcJun li ser çalakiya adenylyl cyclase basal an forskolin-stimulated tune. Activityalakiya adenylyl cîklasê ya bingehîn bi xNUMX ± 1095 pmol / mg / min û 71 1007 pmol / mg / min (p = 77) di mîzên bi ΔcJun de li gorî an jî, bi rêzdarî bû. Activityalakiya adenylyl cyclase ya ku ji hêla 0.403 μM forskolin ve tête hişyar kirin bi xNUMX ± 1 pmol / mg / min versus 4185 ± 293 pmol / mg / min (p = 4032) bi rêzê ve li mûyên bi ΔcJun li hev an.

3.4. Nîqaş

Encamên vê lêkolînê eşkere bûna çalakiya G-proteîn a MOR-navberkirî û astengkirina adenylyl cyclase li NAC-ê ya mûşan bi îfadeya transgenîk inducible ya ΔFosB di dynorphin / D₁R bi neuronan vedihewîne. KOR-navberkirina çalakiya adenylyl cyclase di heman demê de di NAC-ê ya danasîna FFosB-ê de NAc-ê de jî hate zêdekirin, pêşniyar kir ku ΔFosB pergala opioîdê ya endogjenî di NAc de bicîh bike. DAMGO E_max nirx ji bo MOR-stimulated mezintir bû [³⁵S] GTPγS binding, û EC ya wê₅₀ nirx ji bo mûçeyên adenylyl cyclase kêmtir bû, di FFSB-ê de zêdebûna mûçikên berbiçavkirina mûçikan di nav deqên kontrolê de. Van lêgerînan ji bo modulasyona efektor lê ne çalakbûna proteîna G-yê di bin şertên testê de lêkolîn kirin şansê rezerva receptor nîşan bikin. Dîtina ku mêtîngeriya pirtirîn a adenylyl cyclase ji hêla agonistê KOR ve bandor bû ji hêla îfade ΔFosB ve tête pêşniyar kirin ku ji bo bersiva KOR-navber, rezerva receptor ya nizm, lihevhatî bi astên nizm ên malperên girêdana KOR-ê di mêjiyê mûzê de (Unterwald, et al., 1991). Berevajî vê, CB₁Activityalakiya G-proteîn a R-navber û sekinandina adenylyl cyclase ji hêla DFosB ve nehatiye bandor kirin, pêşniyar dike ku pergalên opioid û cannabinoid di bersiva wan de ΔFosB-ê di van neuronên NAc de cûda bibin.

Bandora ΔFosB li ser nîşana navgîniya receptor-opioid bi raporta me ya berê re hevpişe ye ku îfade ΔFosB di striatum de bandorên zeravî û kronîk ên morfînê guherand (Zachariou, et al., 2006). Yek ji dîtina wê lêkolînê ev bû ku mîzên ku bi derbirîna veguhastinê ΔFosB di dynorphin / D₁Neonên striatal R li ser şêwaza şirovekirinê li cîhê şêwazê ji morfînê re hestiyar zêdetir bûn. Zêdetir, ev bandor bi vegotina navmalîkî ya ΔFosB-ê ji hêla malperê-taybetî ve di nav NAC de hate qewirandin. Vê çavdêriyên bi encamên heyî yên ku nîşan didin nîşana MOR-ê ya zêdekirî di NAC-ê de hevgirtî ye.

Me berê kodkirina genê nas kir dynorphin wekî armanc ΔFosB, û pêşniyar kir ku dynorphin kêm bibe dê bi taybetmendiyên xelatdar ên zêdekirina morfînê di mS bitransgenic ΔFosB de hevgirtî be (Zachariou, et al., 2006). Encamên heyî destnîşan dikin ku di moşekên derbirandina ΔFosB-ê de zêdebûna adorlyl cyclase-NA-KOR-alîgirkirî tête zêdekirin, ku dibe ku li gorî dynorfîn kêmbûyî kansera zêdebûna berbiçav. Lêkolînên berê diyar dikin ku KOR li hin herêmên mêjî yên mişkên nokotek prodynorphin, di nav de NAc (ûClarke, et al., 2003).

Berevajî ΔFosB, îfadeya transgenic inducible του ΔcJun, mutantê negatîf yê negatîf ê serdest yê ΔFosB-ê hevalbendê girêdana ΔJosos cJun, nehişta adenylyl cyclase ji alîyê agirbestên MOR an KOR ve nehat guhertin. Van encaman pêşniyar dikin ku astên basal ên îfadeya ΔFosB, ku bi hûrgulî ne kêm in, di parastina nîşana receptora opioid a li ser vê astê ya veguherîna îşaretê di NAC de rolek girîng bilîzin. Rastiya ku bandorkirina bandorkirina morfînê ya bi şertê di lêkolîna meya berê de ji hêla vegotina ΔcJun ve kêm bû (Zachariou, et al., 2006) Pêşniyar dike ku anarbûna morfînê ya ΔFosB di dema prosedilkirinê de di rêziknameya bersivên tevgerê de ji derman re girîng e an ku bandorên transkriptasyonê yên ΔFosB ji bilî yên ku bandor li ser nîşana proximal a ku ji hêla receptorên opioid ve bandor dike dibe ku bandorê li xelata opioid bike. Di her warî de, encamên lêkolîna heyî eşkere diyar dikin ku, dema ku ragihandina ΔFosB li dynorphin striatal / D bilindtir e ji astên basal₁Rûniştina nehranên R-yê, li hevalbendiya MOR û KOR heye ku bihêzkirina adenylyl cyclase di NAC-ê de zêdebûna xurt heye.

Mekanîzmayên ku bi navgîniya MOR- û KOR-navgîniyê ve ji hêla overexpression ΔFosB ve têne geş kirin ne diyar in, lê me berê berê destnîşan kir ku astên MOR, ji hêla [³H] girêdana naloxone, di NAC-ê ΔFosB-ê de li ser mûyên ji dûr ve ne cûda ne (Zachariou, et al., 2006). Di heman lêkolînê de dît ku Gα_iAsta proteîna 1 û 2 li vê herêmê ji hêla derbirîna ΔFosB ve nehat bandor kirin. Lêbelê, analîzên rêgezên îfadeya genê yên berê nîşan da ku Gα_o mRNA di NAc de ΔFosB-ê li ser mûşan hate nûkirin (McClung û Nestler, 2003). Ew ê di lêkolînên pêşerojê de balkêş bin ku bandorek li ser îfadeya transgenic ΔFosB li ser vegotina subunit G-proteîn li asta proteîn û her weha li ser derbirîna pir proteînên modulasyona G-proteîn.

Balkêş e ku xebera ΔFosB CB zêde nekir₁Di NAC de nîşana R-navîn. Gengaz e ku di CB de guhertin çêbibin₁Rêzkirina nîşana R di nav nifûsa cewherî ya nehûnan de ku di tevahiya amadekariya NAC de hatî xuyang kirin pêk tê. Mînak, rêveberiya Δ⁹- THC girîng NAF di NA de (lê ne shell) ΔFosB ()Perrotti, et al., 2008). ezdi rastiyê de, ew tête xuyang kirin ku bi challenge⁹-THC piştî rêveberiya dubare ya Δ⁹-THC di binika NAc de serbestberdana dopamîn zêde kir, lê di gulikê de serbestberdanê kêm kir (Cadoni, et al., 2008). Di heman demê de girîng e ku bala we bikin ku xeta xNUMXA ya masikên bitransgenîk ΔFosB tenê di dynorphin / D de diyar dike₁R neuronên stîratumê yên navîn ên spî yên navîn ên erênî, lê CB₁R di her du dynorphin / D de tê gotin₁R û enkephalin / D₂Neonên striatal ên erênî R (Hohmann û Herkenham, 2000), herweha li ser termînalên têkberê cortical (Robbe, et al., 2001). Axaftina regulatorê neyînî ya serdest a transkriptin ΔFosB-navbirî, ΔcJun, di heman demê de bandorek girîng li ser nîşana receptor a cannabinoid nebû, her çend ΔcJun bi navgîniyê di nav herdû D de tê gotin₁ û D₂-contenskirina nifûsa navonan a spî ya navîn li van mêşan (Peakman, et al., 2003). Lêbelê, gengaz e ku îfadeya ΔFosB-ê ya bingehîn bi qasî kêm e ku ΔcJun dê li ser nîşana receptor bandor neke, wekî ku bi encamên bi MOR û KOR re tê pêşniyar kirin. Her weha mimkin e ku CB₁Rêzkirina nîşana R bi zor ji hêla derbirîna ΔFosB-ê ya bingehîn ve tête zêdekirin, bi vî rengî ku îfadeya ΔFosB zêde bike an kiryarên wê bi ccJun re asteng bike tenê bandorên hindik hebû ku negihîştine asta girîngiya statîstîkî. Piştgiriya nerasterê ya ji bo vê vegotinê bi berhevkirina WIN55,212-2 EC dikare were dîtin₅₀ nirxên di navbera mîkan de ku ΔcJun li hember ΔFosB îfade dike. Rêjeya EC WIN55,212-2₅₀ nirx ji bo mêjîkirina adenylyl cyclase di mûşan de bi îfadeya indc ΔcJun re ji EC re₅₀ nirx ji bo aktîvkirina proteîna G-ê di mîkan de bi îfadegirtina ΔFosB 4.0 bû, di heman demê de heman mêjî di mûzeyan de bêyî ku induction ya yek transgene jî 1.2 bû.

Wekî din, kanabinoids dibe ku îfade ΔFosB-ê bêyî bandorek rasterast li ser CB-ê bandor bikin₁Nîşana R. Di vê senaryoyê de, cannabinoids dikarin bersiva bersivên li ser bandorên psîkoaktîf ên dermanên din re bi rêgezên transcriptional ΔFosB-navber ve bidin hev. ezn di rastiyê de, rêveberiya Δ⁹-THC hestyariya cross-ê li ser opioids û amfhetamine hilberîne (Cadoni, et al., 2001, Lamarque, et al., 2001), bi vê hîpotezê re hevaheng. Digel vê yekê, rêveberiya dubare ya agonîstê cannabinoid CP55,940 hate ragihandin ku di NAC de çalak-G-proteîn çalak-GOR zêde bikin, bi heman awayî mûyên ku di lêkolîna heyî de DFosB îfade dikin (Vigano, et al., 2005). Bandora vegotina ΔFosB li ser Δ⁹-Pêweyên behremendiyê -THC nehatine nirxandin, lê encamên heyî rê nade têkiliyek. Encamên vê û lêkolîna meya berê (Zachariou, et al., 2006) Di MOR û KOR / dynorphin di striatum de guhastinên ji-ΔFosB-ê nîşan bide. Bandorên xelata Δ⁹-THC, wekî ku ji hêla bijartinê ve tête pîvandin, di mûlekên null MOR de têne qewirandin, di heman demê de betalkirina KOR kêmtir e Δ⁹-THC cîhê nerazîbûnê û Δ eşkere kir⁹-THC ciha pêşgotinê (Ghozland, et al., 2002). Bi vî rengî, cîhê şertê ji bo vers⁹-THC di knockoutê pro-dynorphin de neçar e ku bi mûçikên tîpa cûreyî (Zimmer, et al., 2001). Van daneyan pêşniyar dikin ku Δ⁹-THC dibe ku piştî hilgirtina ΔFosB û di encamê de îhtîmalekirina nîşana MOR bi daxistinên dynorphin re xelatdar be.

Bi kurtahîy, encamên vê lêkolînê diyar kir ku xebera ΔFosB li D₁R / dynorphin neynikên striatal erênî bi xurtkirina nîşana MOR- û KOR-ê di asta G-proteîn de bi navgîniya çalakiya adenylyl cyclase di NAC-ê de xurt kirin. Ev vedîtin bi lêkolînên ku di xelatkirinê de rolek ji bo pergala opioid ya endogjenî nîşan dane heye (Trigo, et al., 2010), û mekanîzmayek potansiyel ji bo bandorên ΔFosB-navîn ên li ser xelatkirinê peyda bikin. Berevajî vê, CB₁Di nav NAC de nîşana R-navberî ji hêla îfadeya ΔFosB striatal ve di bin mercên ku hatine vegirtin de ne girîng bû, her çend lêkolînên din jî were xwestin ji bo destnîşankirina bandora induction ΔFosB li ser pergala endocannabinoid.

Nîşanên Lêkolînan

Nîşana MOR di nucleus accumbens yên mîkan ên ku ΔFosB îfade dike de tê zêdekirin
KOR astengkirina adenylyl cyclase di heman demê de di moşikên ku ΔFosB îfade dikin de jî zêde dibe
Daxuyaniya ΔFosB CB-ê neguhare₁Rêzkirina nîşana R di nucleus de guncan dibe

Pêdivî ye

01

Li vir bibînin li vir bibînin.^{(45K, pdf)}

li hev kirin

Nivîskar Hengjun He, Jordan Cox û Aaron Tomarchio spas dikin ji bo alîkariya teknîkî bi [³⁵S] Testên girêdana GTPγS. Vê lêkolînê ji hêla Grûpên Grûpên USPHS DA014277 (LJS), DA10770 (DES) û P01 DA08227 (EJN) ve hate piştgirî kirin.

Footnotes

Daxuyaniya Weşanger: Ev pelê pelê ya yekbûyî ya unîtûjî ye ku ji bo weşana pejirandin. Wekî xizmetê ji bo mişterên me em vê guhertoya pirtûka pirtûka pêşîn pêşkêş dike. Peyva nivîskî dê kopîkirin, şertkirin û lêkolînek ji ber ku ev beriya ku ev di forma maqûl ya xwe ya dawîn de weşandiye belav dibe. Ji kerema xwe bîr bisekin ku di dema çewtiyên hilberînê de tê dîtin ku dibe ku materyalê bandor bikin, û hemî danserên qanûnî yên ku li ser rojnamegerê tercîh bikin.

Çavkanî

Bozarth MA, Wise RA. Zeviyên receptorên opiyateyê yên bi rengek cuda anatomîkî xelata navîn û girêdana laşî ya navîn dike. Zanist. 1984;224: 516-517. [PubMed]
Bradford MM. Rêbazek zû û hesas a ji bo destnîşankirina hejmarên mîkrograma proteîn bi karanîna prensîbê proteîn-dye girêdanê bikar tîne. Anal. Biochem. 1976;72: 248-254. [PubMed]
Breivogel CS, Childers SR, Deadwyler SA, Hampson RE, Vogt LJ, Sim-Selley LJ. Delta kronîk⁹-tetrahydrocannabinol dermankirinê li ser mêjiyê têkçûna windabûyî ya G-proteînan-çalak-receptor cannabinoid-a ku di mêjiyê mêj de girêdayî ye hilberîne. J. Neurochem. 1999;73: 2447-2459. [PubMed]
Breivogel CS, Selley DE, Childers SR. Efficacy agonist de receptor Cannabinoid ji bo stimulasyona [³⁵S] GTPγS têkildar e ku merivên mizgefta cerebellar têkildarî bi kêmbûna agonist-ê re têkildarî têkildariya GDP. J. Biol. Chem. 1998;273: 16865-16873. [PubMed]
Cadoni C, Pisanu A, Solinas M, Acquas E, Di Chiara G. sensibilkirina behrevaniyê piştî eşkerebûna dubare li Delta 9-tetrahydrocannabinol û sensibilkirina cross-bi bi morfînê. Psychopharmacology (Berl) 2001;158: 259-266. [PubMed]
Cadoni C, Valentini V, Di Chiara G. Sensibarbûna behrê ji delta 9-tetrahydrocannabinol û sensibilkirina cross-bi bi morfînê re: Guherandinên ciyawaz di guleya akumbal û veguhastina dopamine ya bingehîn. J. Neurochem. 2008;106: 1586-1593. [PubMed]
Chen J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, Picciotto MR, Duman RS, Nestler EJ. Heywanên transgenic ên bi nîşaneya genê inducible, armanckirî di mêjiyê. Mol. Pharmacol. 1998;54: 495-503. [PubMed]
Childers SR. Peyamberên duyem ên peywira opioid-ê. Life Sci. 1991;48: 1991-2003. [PubMed]
Childers SR, Fleming L, Konkoy C, Marckel D, Pacheco M, Sexton T, Ward S. Opioid and cannabinoid receptor a adenylyl cyclase li mêjî. Ann. NY Acad. Sci. 1992;654: 33-51. [PubMed]
Childers SR, Xiao R, Vogt LJ, Sim-Selley LJ. Kappa bîhnfirehiya receptorê opioid a [³⁵S] GTPγS binding di mêjiyê gûzê: Nebûna delîlê ji bo kappa₂-çalakkirina selektîf ên proteînên G. Biochem. Pharmacol. 1998;56: 113-120. [PubMed]
Clarke S, Zimmer A, Zimmer AM, Hill RG, Kitchen I. Region up-rregullasyona hilbijêrên mîkro-, delta- û kappa-opioid, lê ne wekî receptorên opioid-ê yên 1-ê di mêjiyên enkephalin û dynorphin knockout de. Neuroscience. 2003;122: 479-489. [PubMed]
Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Hucreyeke tecrûbeya taybet a taybetmendiya devta ya DeltaFosB ji bo kocaine zexm dike. J. Neurosci 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
Gardner EL. Pergala nîşankirina endocannabinoid û xelata mejî: hebûna hanê li dopamîn. Pharmacol. Biochem Behav 2005;81: 263-284. [PubMed]
Ghozland S, Matthes HW, Simonin F, Filliol D, Kieffer BL, Maldonado R. Bandorên motîvasyona cannabinoids ji hêla receptorên mu-opioid û kappa-opioid ve têne navber kirin. J. Neurosci 2002;22: 1146-1154. [PubMed]
Herkenham M, Lynn AB, Johnson MR, Melvin LS, de Costa BR, Rice KC. Karakterîzekirin û herêmîbûna receptorên cannabinoid di mêjiyê mêjî de: lêkolînek autoradiografîk a vitro-a quantity. J. Neurosci 1991;11: 563-583. [PubMed]
Hohmann AG, Herkenham M. Bihêzkirina mRNA ya receptor cannabinoid CB (1) di subpopulations neuronal a striatum rat: Bîra duçelek di lêkolîna hybridization de. Synapse. 2000;37: 71-80. [PubMed]
Howlett AC, Barth F, Bonner TI, Cabral G, Casellas P, Devane WA, Felder CC, Herkenham M, Mackie K, Martin BR, Mechoulam R, Pertwee RG. Yekîtiya Dermanxaneya Navneteweyî. XXVII. Ragihandina receptorên cannabinoid. Nirxandina Pharmacolojîk. 2002;54: 161-202.
Huestis MA, Gorelick DA, Heishman SJ, Preston KL, Nelson RA, Moolchan ET, Frank RA. Bandorkirina bandora mihuana şekir ji hêla CB1-antagonistê receptorê cannabinoid-bijartî SR141716 ve tê hilbijartin. Taqa. Gen. Psîkolojî. 2001;58: 322-328. [PubMed]
Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Daxuyaniya faktorê veguhastina deltaFosB di mêjî hestiyariya kocaine kontrol dike. Awa. 1999;401: 272-276. [PubMed]
Koob GF, Volkow ND. Neurocircuitry of addiction. Neuropsychopharmacology. 2010;35: 217-238. [Gotara PMC ya azad] [PubMed]
Lamarque S, Taghzouti K, Simon H. Dermanê kronîk bi Delta (9) -tetrahydrocannabinol re bersivê locomotor a amphetamine û heroinê re dike. Bandorên ji bo xetereya narkotîkê. Neuropharmacology. 2001;41: 118-129. [PubMed]
Maldonado R, Valverde O, Berrendero F. Tevlêbûna pergala endocannabinoid di nav narkotîkê de. Neurosci Trends. 2006;29: 225-232. [PubMed]
Mansour A, Fox CA, Thompson RC, Akil H, Watson SJ. mu-Opioid receptor mRNA di mêjiyê CNS-ê de: lihevhatina bi mu-receptorê binding. Brain Res. 1994;643: 245-265. [PubMed]
Matthes HWD, Maldonado R, Simonin F, Valverde O, Slowe S, Kitchen I, Befort K, Dierich A, LeMeur M, Dolle P, Tzavara E, Hanoune J, Roques BP, Kieffer BL. Heya windakirina analgesia-morfînê, bandora xelat û nîşanên vekişînê di mîzan de kêmbûna genê receptor μ-opioid. Awa. 1996;383: 819-823. [PubMed]
McClung CA, Nestler EJ. Qanûna danûstandina gene û xelata kocaine ji CREB û DeltaFosB. Nat. Neurosci 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: guhertina molekular ji bo adaptasyona dirêj ya dirêj di mêjî de. Brain Res. Mol. Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
Muller DL, Unterwald EM. Receptorên D1 dopamine bi rêveberiya morfînê intermittent modûl dike deltaFosB. J. Pharmacol. Exp. Wê 2005;314: 148-154. [PubMed]
Nestler EJ. Axaftin. Mekanîzmayên lîsansê yên tedawiyê: rola DeltaFosB. Filos Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. 2008;363: 3245-3255. [Gotara PMC ya azad] [PubMed]
Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: navbeynek molecular ya pîvanê nehr û hestyarî ya dirêj dirêj. Brain Res. 1999;835: 10-17. [PubMed]
Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Lêkolînên Pharmacolojîk ên biryara dermankirina fos-related antigen ji aliyê cocaine ve di striatum û nucleus de nebaş. J. Pharmacol. Exp. Wê 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekmealla P, Carle T, Çayê J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Inducible, expression-specific expression of a negative mutant of c-Jun-in-a-trice-tra transgenic-brain sensitivity to cocaine. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Nîşaneyên jîngehê yên DeltaFosB tevlêbûna mêjî di bin destê dermankirinê de. Synapse. 2008;62: 358-369. [Gotara PMC ya azad] [PubMed]
Robbe D, Alonso G, Duchamp F, Bockaert J, Manzoni OJ. Herêmkirin û mekanîzmayên çalakiyê yên receptorên cannabinoid li synapsên glutamatergic ên nukleera mêzikê de qul dikin. J. Neurosci 2001;21: 109-116. [PubMed]
Salomon Y. Adenylate cyclase assay. Pêş. Cuclic Nucleotide Res. 1979;10: 35-55. [PubMed]
Selley DE, Sim LJ, Xiao R, Liu Q, Childers SR. Mu-receptorên mûzîkê yên Mu opioid [³⁵S] GTPγS binding di talamus û hucreyên hucreyê çandî de rat: Mîkanîzmayên veguherîna nîşana ku di bin bandora efsanetiya agonîst de ye. Mol. Pharmacol. 1997;51: 87-96. [PubMed]
Trigo JM, Martin-Garcia E, Berrendero F, Robledo P, Maldonado R. Sîstema opioîdê ya endogjen: substratek hevbeş di nav narkotîkê de. Alcohol Alcohol Depend. 2010;108: 183-194. [PubMed]
Unterwald EM, Knapp C, Zukin RS. Herêmîbûna Neuroanatomîkî ya receptorên opioid κ1 û κ2 di mêjî û mêjiyê gînê de. Brain Res. 1991;562: 57-65. [PubMed]
Vaccarino FJ, Bloom FE, Koob GF. Bloka nukleus zerarê dide receptorên opiyateyê di mîr de xelata heroinê intravenus kêm dike. Psychopharmacology (Berl) 1985;86: 37-42. [PubMed]
Vigano D, Rubino T, Vaccani A, Bianchessi S, Marmorato P, Castiglioni C, Parolaro D. Mekanîzmayên mîkrojîkî yên di navbêna cannabinoid û pergalên opioid de tevlihev dikin asymmetric in. Psychopharmacology (Berl) 2005;182: 527-536. [PubMed]
Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cîgirê Cassidy, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Roja sereke ji bo DeltaFosB ji bo çalakiya morfînan di nav nucleus de nexşîn. Nat. Neurosci 2006;9: 205-211. [PubMed]
Zangen A, Solinas M, Ikemoto S, Goldberg SR, Wise RA. Du malperên mêjî ji bo xelata cannabinoid. J. Neurosci 2006;26: 4901-4907. [PubMed]
Zhu J, Luo LY, Li JG, Chen C, Liu-Chen LY. Activalakbûna receptora opioid a kappa mirovî ya klonkirî ya ji hêla agonîstan ve zêde dike [35S] GTPγS girêdana bi melamînan: diyarkirina potansiyel û bandora lîgên. J. Pharmacol. Exp. Wê 1997;282: 676-684. [PubMed]
Zimmer A, Valjent E, Konig M, Zimmer AM, Robledo P, Hahn H, Valverde O, Maldonado R. Nebûna delta -9-tetrahydrocannabinol bandorên dysphorîk li mîkrokeyên kêm-dînorfîn. J. Neurosci 2001;21: 9499-9505. [PubMed]
Zimmer A, Zimmer AM, Hohmann AG, Herkenham M, Bonner TI. Mirinên mirinê, hypoactivity û hypoalgesia di mîkrokên cannabinoid CB1 receptorên cannabinoid de zêde kirin. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1999;96: 5780-5785. [Gotara PMC ya azad] [PubMed]